口腔用組成物
【課題】口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で有効性を示し、かつ使用時の刺激が少ない口腔用組成物を提供すること。
【解決手段】本発明の口腔用組成物は、アルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）とを含有し、前記Ａ成分と前記Ｂ成分との質量比［（Ａ）／（Ｂ）]が０．５〜２０であることを特徴とする。
【解決手段】本発明の口腔用組成物は、アルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）とを含有し、前記Ａ成分と前記Ｂ成分との質量比［（Ａ）／（Ｂ）]が０．５〜２０であることを特徴とする。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、刺激が少なく、かつ口腔疾患の原因である口腔バイオフィルム量減少効果に優れた口腔用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、デンタルプラークはバイオフィルムとして捉えられ（例えば、非特許文献１参照）、バイオフィルム中の細菌は、浮遊性細菌と比較すると細菌のタンパク質発現パターン（例えば、非特許文献２、３参照）や薬剤耐性（例えば、非特許文献４、５参照）が大きく異なることが分かってきた。バイオフィルムの概念が導入される以前の技術では、フェノール性殺菌剤（例えば、特許文献１参照）やヒドロキシ−２−ピリドン誘導体（例えば、特許文献２参照）等に例を挙げられるように、バイオフィルムの形成を抑制することができる技術は開発されていたが、一度形成してしまったバイオフィルムに対しては、高い効果を期待できないのが現状である。したがって、これまでに提案された薬剤やその組合せが、一度形成されたバイオフィルムに対して有効ではないことが明らかとなりつつある現在、バイオフィルムの形成及び成熟をより効果的に抑制することが可能なバイオフィルム抑制組成物の開発が強く望まれている。
【０００３】
上記背景の中、これまで幾つかのバイオフィルム抑制技術が開発されてきたが、有効性と使用感を両立させることが困難であるという問題がある。使用感については、近年、香味嗜好性や苦味・異味抑制を満足させ、かつ、バイオフィルム抑制効果を示す技術が開発されたが（例えば、特許文献３〜５参照）、有効性については、薬剤の滞留量や期間が充分でないためバイオフィルムの再成熟を長時間抑制するのが困難であり、１日に１回等繰返し作用させる必要がある点に課題がある。
また、アルキルジアミノエチルグリシン、ピロクトンオラミン、シクロピロクスオラミンを選択可能な成分として用いる抗菌剤組成物が提案されているが（例えば、特許文献６参照）、適切な配合の態様は示されておらず、口腔バイオフィルムに対しては十分な効果が得られない、という問題がある。
したがって、刺激が少なく、かつ口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で有効性を示す口腔用組成物の開発が強く求められているというのが現状である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎ，Ｊ．Ｗ．，Ｓｔｅｗａｒｔ，Ｐ．Ｓ． ａｎｄ Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ，Ｅ．Ｐ．：Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｂｉｏｆｉｌｍｓ：ａ ｃｏｍｍｏｎ ｃａｕｓｅ ｏｆ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８４：１３１８−１３２２，１９９９．
【非特許文献２】Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎ，Ｊ．Ｗ．，Ｌｅｗａｎｄｏｗｓｋｉ，Ｚ．，Ｃａｌｄｗｅｌｌ，Ｄ．Ｅ．，Ｋｏｒｂｅｒ，Ｄ．Ｒ． ａｎｄ Ｌａｐｐｉｎ−Ｓｃｏｔｔ，Ｈ．Ｍ．：Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｂｉｏｆｉｌｍｓ．Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．４９：７１１−７４５，１９９５．
【非特許文献３】Ｈｕｄｓｏｎ，Ｍ．Ｃ．ａｎｄ Ｃｕｒｔｉｓｓ，Ｒ．ＩＩＩ：Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ ｇｅｎｅｓ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔｏ ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．５８：４６４−４７０，１９９０．
【非特許文献４】Ｓｔｅｗａｒｔ，Ｐ．Ｓ．：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｂｉｏｆｉｌｍｓ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２９２：１０７−１１３，２００２．
【非特許文献５】Ｐｈｉｌｉｐ Ｍａｒｓｈ ａｎｄ Ｍｉｃｈａｅｌ Ｖ．Ｍａｒｔｉｎ著「Ｏｒａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ」、Ｗｒｉｇｈｔ出版、２０００年、ｐ．５８−８１（Ｄｅｎｔａｌ ｐｌａｑｕｅ）
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平２−１１５１１号公報
【特許文献２】特開平７−８２１２６号公報
【特許文献３】特開２００７−１１９４２０号公報
【特許文献４】特開２００７−１６９１９９号公報
【特許文献５】特開２００８−１５６３０８号公報
【特許文献６】特開２００１−０１０９４１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で有効性を示し、かつ使用時の刺激が少ない口腔用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、上記目的を達成するため鋭意研究を重ねた結果、アルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）とを配合し、かつ前記Ａ成分と前記Ｂ成分のの質量比［（Ａ）／（Ｂ）］が０．５〜２０であることにより、後述する実施例の実験結果から明らかなように、口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で極めて高い有効性を示し、かつ刺激が少ないことを知見し、本発明をなすに至った。
【０００８】
なお、アルキルジアミノエチルグリシン、ピロクトンオラミン、シクロピロクスオラミンは、例えば、前記特許文献６に選択可能な成分として記載されているが、前記（Ａ）／（Ｂ）を特定の割合で併用すると、前記Ａ成分と前記Ｂ成分との相乗的作用により、少ない作用頻度でバイオフィルム量減少効果が発揮され、かつ刺激性が低い口腔用組成物が得られることは、本発明者らの新知見である。
【０００９】
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては以下の通りである。即ち、
＜１＞ アルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）とを含有し、前記Ａ成分と前記Ｂ成分との質量比［（Ａ）／（Ｂ）]が０．５〜２０であることを特徴とする口腔用組成物である。
前記＜１＞の手段によると、メカニズムの詳細は不明であるが、前記質量比において、前記Ａ成分と、前記Ｂ成分との複合分子が形成され、前記Ａ成分及び前記Ｂ成分それぞれの作用が相乗的に高まるために、前記の優れた効果が得られると考えられる。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、前記の従来における諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、本発明は、口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で有効性を示し、かつ使用時の刺激が少ない口腔用組成物を提供することができる。該口腔用組成物は、う蝕、歯周病、口臭等の口腔疾患の予防又は治療に有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の口腔用組成物は、アルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）とを含有し、必要に応じて、その他の成分を含んでなる。
【００１２】
−Ａ成分−
前記Ａ成分としてのアルキルジアミノエチルグリシン又はアルキルポリアミノエチルグリシンは、両性界面活性剤の一種であり、タンパク質共存下においても浮遊菌に対する殺菌力が著しく減弱しないものである。
前記アルキルジアミノエチルグリシンと、前記アルキルポリアミノエチルグリシンとは、１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
また、前記Ａ成分は、塩酸塩やナトリウム塩等として用いることができる。
【００１３】
前記アルキルジアミノエチルグリシンと、前記アルキルポリアミノエチルグリシンとを単独比較すると、バイオフィルム量減少効果の点から前記アルキルジアミノエチルグリシンの方が好ましい。
前記アルキルジアミノエチルグリシンとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、アルキル基の炭素数が１２〜１４であるものが好ましく、例えば、ラウリルジアミノエチルグリシン、ミリスチルジアミノエチルグリシン、及びこれらを主成分とするヤシ油アルキルジアミノエチルグリシンが好ましい。
このようなアルキル（Ｃ１２Ｈ２５〜Ｃ１４Ｈ２９）ジアミノエチルグリシンとしては、市販品を使用でき、具体的には４０％塩酸アルキルジアミノエチルグリシン水溶液（和光純薬工業社製又は三洋化成工業株式会社製）、３０％ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム水溶液（三洋化成工業株式会社製）を挙げることができる。
【００１４】
前記アルキルポリアミノエチルグリシンとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、下記構造式（１）に示される化合物構造のものが好ましい。
【００１５】
【化１】
ただし、上記構造式（１）において、Ｒ１は、Ｒ[ＮＨＣ２Ｈ４]ｎ（ｎ＝１〜２）を示し、Ｒ２は、ＲＮＨＣ２Ｈ４又はＨのいずれかを示し、前記Ｒ１及びＲ２におけるＲは、炭素数６〜１０のアルキル基を示す。
【００１６】
前記構造式（１）の化合物としては、特に制限はなく、市販品を用いることができ、具体的には５０％塩酸アルキルポリアミノエチルグリシン水溶液（三洋化成工業株式会社製「レボン ５０」）を挙げることができる。
【００１７】
前記Ａ成分の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．０１質量％〜０．２質量％が好ましく、０．０２質量％〜０．１５質量％がより好ましく、０．０２質量％〜０．１質量％が特に好ましい。
０．０１質量％未満であると充分な口腔バイオフィルム量減少効果が得られない場合があり、０．２質量％を超えると使用時に強い刺激が生じる場合がある。
【００１８】
−Ｂ成分−
前記Ｂ成分としてのシクロピロクスオラミン又はピロクトンオラミンは、それぞれ抗真菌作用及び頭皮のフケや痒み防止作用を有することが知られている。
前記シクロピロクスオラミン又は前記ピロクトンオラミンは、１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
前記シクロピロクスオラミンとピロクトンオラミンとを単独比較すると、バイオフィルム量減少効果の点から前記シクロピロクスオラミンの方が好ましい。
【００１９】
前記シクロピロクスオラミンとしては、特に制限はなく、市販品を使用でき、具体的にはシグマ アルドリッチ社、ＬＫＴ Ｌａｂｓ, Ｉｎｃ、ＭＰ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ, Ｉｎｃ等から入手できる。
前記ピロクトンオラミンとしては、特に制限はなく、前記シクロピロクスオラミンと同様に、市販品を使用でき、具体的には、Ｋｕｍａｒ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ社、Ｃｌａｒｉａｎｔ社等から入手できる。
【００２０】
前記Ｂ成分の口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．００１質量％〜０．５質量％が好ましく、０．００５質量％〜０．１５質量％がより好ましく、０．００５質量％〜０．０５質量％が特に好ましい。
０．００１質量％未満であると充分なバイオフィルム量減少効果が得られない場合があり、０．５質量％を超えると使用時に強い刺激が生じる場合がある。
【００２１】
−Ａ成分及びＢ成分−
前記Ａ成分の配合量と、前記Ｂ成分の配合量とを合計した総配合量としては、前記口腔用組成物全体に対して、０．０１質量％〜０．７質量％が好ましく、０．０３質量％〜０．３質量％がより好ましく、０．０６質量％〜０．１５質量％が特に好ましい。
０．０１質量％未満であると充分なバイオフィルム量減少効果が得られない場合があり、０．７質量％を超えると使用時に強い刺激が生じる場合がある。
【００２２】
本発明の前記口腔用組成物としては、前記Ａ成分と、前記Ｂ成分とを併用し、特定の質量比で配合することが必須である。
前記質量比としては、バイオフィルム量減少効果や刺激の強さ等の面から、前記Ａ成分の質量を（Ａ）とし、前記Ｂ成分の質量を（Ｂ）としたとき、（Ａ）／（Ｂ）が０．５〜２０であり、０.７５〜１５が好ましく、１〜１０がより好ましい。
前記（Ａ）／（Ｂ）が０．５〜２０の範囲から外れると、充分なバイオフィルム量減少効果が得られず、また使用時に強い刺激を生じる。
【００２３】
−その他の成分−
本発明の前記口腔用組成物としては、特に制限はなく、固体、固形物、液体、液状、ゲル体、ペースト状、ガム状等の形態に調製でき、練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、潤製歯磨等の歯磨類、洗口剤、ガム、口中清涼剤、歯間ケア剤等の剤型、好ましくは練歯磨として常法により調製することができる。
前記その他の成分は、前記口腔用組成物の形態や剤型に応じ、また、目的や組成物の種類等に応じた適宜な成分として配合することができる。
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、研磨剤、界面活性剤、粘結剤、粘稠剤、アルコール、香料、その他の有効成分を挙げることができる。
【００２４】
前記研磨剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、第２リン酸カルシウム・２水和物及び無水物、第１リン酸カルシウム、第３リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ピロリン酸カルシウム、水酸化アルミニウム、アルミナ、無水ケイ酸、ケイ酸アルミニウム、不溶性メタリン酸ナトリウム、第３リン酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、硫酸カルシウム、ポリメタクリル酸メチル、ベントナイト、ケイ酸ジルコニウム等が挙げられる。これらは１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
前記研磨剤の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、例えば、５質量％〜９０質量％であるが、前記口腔用組成物を練歯磨として用いる場合には、１０質量〜６０質量％が好ましい。
【００２５】
前記界面活性剤としては、特に制限はなく、本発明のＡ成分であるアルキルジアミノエチルグリシン、アルキルポリアミノエチルグリシン、又はそれら塩に加えて、他の界面活性剤として、陰イオン界面活性剤、非イオン界面活性剤及び両性イオン界面活性剤から選ばれる１種以上を配合し得る。
【００２６】
前記陰イオン界面活性剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸ナトリウム、水素添加ココナッツ脂肪酸モノグリセリドモノ硫酸ナトリウム、ラウリルスルホ酢酸ナトリウム、Ｎ−パルミトイルグルタミン酸ナトリウム等のＮ−アシルグルタミン酸塩、Ｎ−メチル−Ｎ−アシルタウリンナトリウム、Ｎ−メチル−Ｎ−アシルアラニンナトリウム、α−オレフィンスルホン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００２７】
前記非イオン界面活性剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ショ糖脂肪酸エステル、マルトース脂肪酸エステル、ラクトース脂肪酸エステル等の糖脂肪酸エステル、マルチトール脂肪酸エステル、ラクチトール脂肪酸エステル等の糖アルコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート等のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等のポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ラウリン酸モノ又はジエタノールアミド、ミリスチン酸モノ又はジエタノールアミド等の脂肪酸ジエタノールアミド、ソルビタン脂肪酸エステル、脂肪酸モノグリセライド、ポリオキシエチレン高級アルコールエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン共重合体、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン脂肪酸エステル等が挙げられる。
【００２８】
前記両性イオン界面活性剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、Ｎ−アルキル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニウムベタイン、２−アルキル−１−ヒドロキシエチルイミダゾリンベタインナトリウム等が挙げられる。
【００２９】
前記他の界面活性剤の前記口腔組成物全体に対する配合量としては、特に制限はないが、０．１質量％〜３．０質量％が好ましい。
【００３０】
前記粘結剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、カラギーナン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロースナトリウム等のセルロース誘導体、アルギン酸塩、アルギン酸プロピレングリコールエステル、キサンタンガム、トラガカントガム、カラヤガム、アラビヤガム等のガム類、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルピロリドン等の合成粘結剤等の有機粘結剤、シリカゲル、アルミニウムシリカゲル、ビーガム、ラポナイト等の無機粘結剤等が挙げられる。これらは、１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
前記粘結剤の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、通常、０．３質量％〜１０質量％である。
【００３１】
前記粘稠剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ソルビット、グリセリン、キシリトール、マルチトール、ラクチトール等が挙げられる。これらは１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
前記粘稠剤の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、通常、１０質量％〜７０質量％である。
【００３２】
前記アルコールとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、一価のアルコール、多価のアルコールのいずれも用いることができる。
前記一価アルコールとしては、特に制限はなく、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、プロパノール等が挙げられる。
前記多価アルコールとしては、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ヘキシレングリコール、ブチレングリコール、ペンタンジオール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（分子量；２００〜２０，０００）、ポリプロピレングリコール（分子量；３００〜４，０００）等を挙げることができる。
これらは１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
前記アルコールの前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、純分換算して、通常、０．１質量％〜２０質量％である。
【００３３】
前記香料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ペパーミント油、スペアミント油、アニス油、ユーカリ油、ウィンターグリーン油、カシア油、クローブ油、タイム油、セージ油、レモン油、オレンジ油、ハッカ油、カルダモン油、コリアンダー油、マンダリン油、ライム油、ラベンダー油、ローズマリー油、ローレル油、カモミル油、キャラウェイ油、マジョラム油、ベイ油、レモングラス油、オリガナム油、パインニードル油、ネロリ油、ローズ油、ジャスミン油、イリスコンクリート、アブソリュートペパーミント、アブソリュートローズ、オレンジフラワー等の天然香料、及び、これら天然香料の加工処理（前溜部カット、後溜部カット、分留、液液抽出、エッセンス化、粉末香料化等）した香料、メントール、カルボン、アネトール、シネオール、サリチル酸メチル、シンナミックアルデヒド、オイゲノール、３−ｌ−メントキシプロパン−１，２−ジオール、チモール、リナロール、リナリールアセテート、リモネン、メントン、メンチルアセテート、Ｎ−置換−パラメンタン−３−カルボキサミド、ピネン、オクチルアルデヒド、シトラール、プレゴン、カルビールアセテート、アニスアルデヒド、エチルアセテート、エチルブチレート、アリルシクロヘキサンプロピオネート、メチルアンスラニレート、エチルメチルフェニルグリシデート、バニリン、ウンデカラクトン、ヘキサナール、イソアミルアルコール、ヘキセノール、ジメチルサルファイド、シクロテン、フルフラール、トリメチルピラジン、エチルラクテート、エチルチオアセテート等の単品香料、更に、ストロベリーフレーバー、アップルフレーバー、バナナフレーバー、パイナップルフレーバー、グレープフレーバー、マンゴーフレーバー、バターフレーバー、ミルクフレーバー、フルーツミックスフレーバー、トロピカルフルーツフレーバー等の調合香料等、及び、口腔用組成物に用いられる公知の香料素材を使用することができ、実施例の香料に限定されない。
前記香料の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はないが、前記香料のうち前記香料素材は、０．０００００１質量％〜１質量％使用するのが好ましい。
また、前記香料素材を併用した賦香用香料の前記配合量としては、０．１質量％〜２．０質量％が好ましい。
【００３４】
前記その他の有効成分としては、特に制限はなく、クロルヘキシジン、デカリニウムクロライド等の陽イオン性殺菌剤、トリクロサン、ヒノキチオール等のフェノール性化合物、デキストラナーゼ、ムタナーゼ、リゾチーム、アミラーゼ、プロテアーゼ、溶菌酵素、スーパーオキサイド等の酵素、モノフルオロリン酸ナトリウム、モノフルオロリン酸カリウム等のアルカリ金属モノフルオロホスフェート、フッ化ナトリウム、フッ化第１錫等のフッ化物、トラネキサム酸、イプシロンアミノカプロン酸、アルミニウムクロルヒドロキシルアラントイン、ジヒドロコレスタノール、グリチルリチン酸類、グリチルレチン酸、ビサボロール、グリセロホスフェート、クロロフィル、塩化ナトリウム、水溶性無機リン酸化合物等が挙げられる。これらは、１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
なお、これらその他の有効成分の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、本発明の効果を妨げない範囲の有効量で配合することができる。
【実施例】
【００３５】
以下、実験例、実施例及び比較例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は下記実施例に制限されるものではない。なお、以下の例において配合量はいずれも質量％である。
【００３６】
〔実験例１：実施例１〜１９及び比較例１〜７〕
下記表１及び表２に示す組成に基づき、実施例１〜１９及び比較例１〜７の口腔用組成物を、以下の方法により調製した。なお、下記表１及び表２において、成分Ａ及び成分Ｂの添加量（質量％）は、口腔用組成物全体に対する添加量を示す。
【００３７】
−口腔用組成物の調製法−
１００ｍＬの三角フラスコ（ハリオグラス社製）にアルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）、エタノール（アルコール添加群のみ）を加え充分に混和した後、必要に応じて、その他の成分を添加し、蒸留水を添加することで全量が５０ｇになるように調製した。
その後、容器ごと超音波洗浄機（２８ｋＨｚの周波数で３０分間）中で分散・溶解させ、実施例１〜１９及び比較例１〜７の口腔用組成物を調製した。
これらの口腔用組成物を実験例１の試験組成物として、直ちに実験に用いた。
【００３８】
次に、実施例１〜１９及び比較例１〜７の口腔用組成物に対して、以下に示すバイオフィルム量減少効果の測定方法により、バイオフィルム量減少効果の評価を行った。結果を下記表１及び表２に示す。
【００３９】
−バイオフィルム量減少効果の測定方法−
ライオン株式会社オーラルケア研究所において継代保存（凍結保存）してあったストレプトコッカス ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ） ＡＴＣＣ ２５１７５株，アクチノマイセス ナイスランディー（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｎａｅｓｌｕｎｄｉｉ） ＡＴＣＣ ５１６５５株，フゾバクテリウム ニュークレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ） ＡＴＣＣ １０９５３株，ポルフィロモーナス ジンジバリス（Ｐｏｒｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ） ＡＴＣＣ ３３２７７株，ストレプトコッカス サングイニス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｎｇｕｉｎｉｓ） ＡＴＣＣ １０５５６株の各菌液４０μＬをそれぞれ、１２１℃で１５分間オートクレーブした５ｍｇ／Ｌ ヘミン（シグマ アルドリッチ社製）及び１ｍｇ／Ｌ ビタミンＫ（和光純薬工業社製）を含むトッドへーウィットブロース（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）培養液（ＴＨＢＨＭ*1）４ｍＬに添加し、３７℃で一晩嫌気培養（８０ｖｏｌ％窒素、１０ｖｏｌ％二酸化炭素、１０ｖｏｌ％水素）した。
【００４０】
同様に保存してあったベイヨネラ パービューラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ ｐａｒｖｕｌａ） ＡＴＣＣ １７７４５株菌液８０μＬを、１２１℃で１５分間オートクレーブした１．２６％乳酸ナトリウム（シグマ アルドリッチ社製）を含むトッドへーウィットブロース（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）培養液（ＴＨＢＬ*2）４ｍＬに添加し、同様に培養した。培養後、ベイヨネラ パービューラを除く５菌種の菌液から各３００μＬを採取し、それぞれ３０ｍＬのＴＨＢＨＭに添加し、さらに一晩培養した。ベイヨネラ パービューラの菌液から同様に３００μＬを採取し、３０ｍＬのＴＨＢＬに添加し、一晩培養した。
【００４１】
再培養後、各菌液を遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、１０ｍｉｎ）し、上清を廃棄した。各沈渣（細菌）に対して１２１℃で１５分間オートクレーブしたベイサルメディウムムチン培養液（ＢＭＭ＊３）を添加し、再懸濁した後、予めＢＭＭ １，０００ｍＬを入れた培養槽（直径１４０ｍｍ×高さ２００ｍｍ）に、上記各菌数がそれぞれ１×１０７個／ｍＬになるように接種し、スターラーで攪拌（約１００ｒｐｍで回転）しながら、３７℃、嫌気条件下（９５ｖｏｌ％窒素、５ｖｏｌ％二酸化炭素）で一晩培養した。
【００４２】
その後、ＢＭＭを１００ｍＬ／ｈの速度で供給するとともに、同速度で培養液を排出した。上記培養槽から排出された培養液は、液量が３００ｍＬに保たれる別の培養槽（直径９０ｍｍ×高さ１９０ｍｍ、３７℃でインキュベート）に連続的に供給した。この培養槽内の回転盤（約８０ｒｐｍで回転）には、付着担体であるハイドロキシアパタイトディスク（直径７ｍｍ×高さ３．５ｍｍ）を装着し、その表面にバイオフィルムを形成させた。また、直径９０ｍｍ×高さ１９０ｍｍの培養槽には２４時間間隔で、培養液全量の排出、１％スクロース（和光純薬工業社製）を含むＴＨＢＨＭを３００ｍＬ添加、３０分間のインキュベート、培養液全量の排出、ＢＭＭを３００ｍＬ添加の順の操作を繰り返した。
【００４３】
なお、上記培養法は、文献（Ｍｏｎｏｉ， Ｎ．，Ｏｈｔａ， Ｈ．，Ｍｏｒｉｓｈｉｍａ， Ｓ． ａｎｄ Ｏｃｈｉａｉ， Ｙ．：Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ Ｂｉｏｆｉｌｍ Ｍｏｄｅｌ： Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｆｏｏｄ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｉｎ Ｃｈｅｍｏｓｔａｔ−ｔｙｐｅ Ｓｙｓｔｅｍ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｒａｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ． ４６：２７−３６, ２００４．）記載の方法を改変して実施したものである。
【００４４】
上記バイオフィルム量減少効果の測定方法による培養は１４日間行い、薬剤処置頻度の少ない条件でのバイオフィルム量減少効果を解析するため、６日目、８日目、１０日目、１２日目に次に示す薬剤処置を行った。
即ち、バイオフィルムが付着したハイドロキシアパタイトディスクを培養槽から取り出し、シャーレ（直径３５ｍｍ×高さ１４ｍｍ）に移し、試験組成物５ｇ（実施例及び比較例）に３０秒間浸漬させた。その後、生理食塩水（大塚製薬社製）５ｇで３回洗浄後、再び培養槽内に戻した。
【００４５】
培養終了時に、試験組成物のバイオフィルム量減少効果を評価するため、ハイドロキシアパタイトディスクごとバイオフィルムを培養槽から取り出し、生理食塩水５ｇで３回洗浄した後、４ｍＬの生理食塩水を添加した試験管（直径１３ｍｍ×１００ｍｍ）に移した。直ちに超音波破砕（２００μＡの出力で１０秒間）を行い、試験管からハイドロキシアパタイトディスクを取り出した。氷冷下で試験管内の内容物をさらに１５分間超音波破砕（２００μＡの出力）した後、バイオフィルム破砕液１ｍＬを採取し、新しい空の試験菅に添加した。バイオフィルム破砕液を生理食塩水にて５倍、５０倍希釈した液も調製し、同様に新しい試験管に１ｍＬ加えた。各試験管に、５％フェノール水溶液＊４１ｍＬを加えよく混合した後、濃硫酸（和光純薬工業社製）５ｍＬを直接液面に加えて、よく混和した。室温にて３０分間放置したのち、４９０ｎｍの吸光度（島津製作所社製）を測定した。吸光度の測定値は、０．１〜１．０の範囲のものを用い、希釈液の場合は希釈倍率を吸光度測定値に乗じた。
なお、実験は４度繰り返し、各実験ごとに、バイオフィルム量減少効果を下記算出式で求めた。下記算出式は、Ａ成分と、Ｂ成分とを併用しないで実施した比較例１を対照として、試験組成物のバイオフィルム量減少効果（％）を算出するものである。
【００４６】
【数１】
【００４７】
なお、前記バイオフィルム量減少効果の測定方法において記載の＊１〜＊４の注釈事項は、以下の事柄を示す。
【００４８】
＊１ＴＨＢＨＭの組成：１リットル中の質量で表す。
トッドへーウィットブロース
（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）： ３０ｇ／Ｌ
ヘミン（シグマ アルドリッチ社製）： ５ｍｇ／Ｌ
ビタミンＫ（和光純薬工業社製）： １ｍｇ／Ｌ
蒸留水： 残
（全量が１Ｌになるようにメスアップした。）
【００４９】
＊２ＴＨＢＬの組成：１リットル中の質量で表す。
トッドへーウィットブロース
（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）： ３０ｇ／Ｌ
６０％乳酸ナトリウム水溶液（シグマ アルドリッチ社製）： ２１ｇ／Ｌ
蒸留水： 残
（全量が１Ｌになるようにメスアップした。）
【００５０】
＊３ＢＭＭの組成：１リットル中の質量で表す。
プロテオースペプトン
（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）： ２ｇ／Ｌ
トリプトン（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）：１ｇ／Ｌ
イーストエキストラクト
（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）： １ｇ／Ｌ
ムチン（シグマ アルドリッチ社製）： ２．５ｇ／Ｌ
ヘミン（シグマ アルドリッチ社製）： １ｍｇ／Ｌ
ビタミンＫ（和光純薬工業社製）： ０．２ｍｇ／Ｌ
ＫＣｌ（和光純薬工業社製）： ０．５ｇ／Ｌ
システイン（和光純薬工業社製）： ０．１ｇ／Ｌ
蒸留水： 残
（全量が１Ｌになるようにメスアップした。）
【００５１】
＊４５％フェノール水溶液の調製：
フェノール（和光純薬工業社製）５ｇを秤取し、全量が１００ｍＬになるようにメスアップした。
【００５２】
−バイオフィルム量減少効果の評価−
前記算出式により算出されたバイオフィルム量減少効果（％）を、下記評価基準に基づき、評点付けを行い評価を行った。実施例１〜１９及び比較例２〜７における口腔用組成物（試験組成物）に対する評点の平均（４度の実験の平均値）を下記表１及び表２に示す。
【００５３】
評価基準：
１点：比較例１を対照とした試験組成物の効果が、０％未満
２点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、０％以上１０％未満
３点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、１０％以上２０％未満
４点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、２０％以上３０％未満
５点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、３０％以上４０％未満
６点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、４０％以上５０％未満
７点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、５０％以上６０％未満
８点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、６０％以上７０％未満
９点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、７０％以上８０％未満
１０点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、９０％以上１００％以下
【００５４】
【表１】
【表２】
【００５５】
なお、上記表１及び表２における１）〜９）の注釈事項は、以下の事柄を示す。
１）塩酸アルキルジアミノエチルグリシンとして純分換算した質量％を示す。４０％塩酸アルキルジアミノエチルグリシン水溶液（三洋化成工業社製）を使用。
２）塩酸アルキルポリアミノエチルグリシンとして純分換算した質量％を示す。５０％塩酸アルキルポリアミノエチルグリシン水溶液（三洋化成工業社製）を使用。
３）シグマ アルドリッチ社製
４）Ｃｌａｒｉａｎｔ社製
５）和光純薬工業社製
６）酸化エチレン平均付加モル数が６０のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油を示す。日光ケミカルズ社製
７）高砂香料社製
８）ＣＡＥはＮ−ヤシ油脂肪酸アシル−Ｌ−アルギニンエチル・ＤＬ−ピロリドンカルボン酸塩を示す。味の素社製。
９）日本甜菜製糖社製
【００５６】
上記表１及び表２に示す結果より、薬剤処置頻度が少ない本試験において、Ａ成分と、Ｂ成分の質量比が０．５未満や２０を超える場合（比較例２及び３）、Ａ成分（アルキルジアミノエチルグリシン）単独の場合（比較例４）、Ｂ成分（シクロピロクスオラミン）単独の場合（比較例５）、及び従来技術であるＡ成分（アルキルジアミノエチルグリシン）と、その他の成分とを組み合わせた場合（比較例７）、及びＢ成分（シクロピロクスオラミン又はピロクトンオラミン）と、その他の成分とを組み合わせた場合（比較例１及び６）は、いずれもバイオフィルム量減少評点が４点未満であった。これに対して、Ａ成分とＢ成分の質量比、（Ａ）／（Ｂ）が、０．５〜２０の場合（実施例１〜１９）は、相乗的な効果が発現し、評点が４.５点以上となり、本発明の有効性が認められた。
本発明のメカニズムの詳細は不明であるが、上記の質量比において複合分子が形成されバイオフィルムへの吸着量の増大が起こるため、薬剤処置頻度の少ない条件（１回／２日間）においても高い有効性が認められたと考えられる。
【００５７】
〔実験例２：実施例２０〜２８及び比較例８、９〕
−口腔用組成物の調製−
次に、本発明のポイントのひとつは実験例１で示したバイオフィルム量減少効果にあるが、同時に、実使用における刺激の強さを低減することができることを確認するため、刺激性についての実験を行った。
下記表３の組成に基づき、実験例１と同様に調製を行った実施例２０〜２８及び比較例８、９における口腔用組成物を試験組成物とした。
【００５８】
−刺激性の評価−
実施例２０〜２８及び比較例８、９における口腔用組成物に対して、次のように評価を行った。
即ち、評価被験者１０名に対して、試験組成物１０ｇを３０秒間含嗽させ、試験液を吐出させた後、３分間ブラッシングさせた。同操作を１日２回、１週間継続させた。最後の使用時に、次に示す評価基準に従い官能評価を行い、刺激の強さを計測した。
評価は、評価被験者１０名による評点の平均値とし、その結果を下記表３に示す。
評点：
１点：刺激が強い
２点：刺激がある
３点：刺激がややある
４点：刺激がほとんどない
５点：刺激がない
【００５９】
【表３】
【００６０】
なお、上記表３における１）〜５）の注釈事項は、以下の事柄を示す。
１）塩酸アルキルジアミノエチルグリシンとして純分換算した質量％を示す。４０％塩酸アルキルジアミノエチルグリシン水溶液（和光純薬工業社製）を使用。
２）シグマ アルドリッチ社製
３）Ｃｌａｒｉａｎｔ社製
４）和光純薬工業社製
５）酸化エチレン平均付加モル数が１００のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油を示す。日光ケミカルズ社製。
【００６１】
上記表３に示す結果より、Ａ成分としてアルキルジアミノエチルグリシン、又は、Ｂ成分としてシクロピロクスオラミンのそれぞれを併用せず、単独高濃度で用いた場合（比較例８及び９）は、３点未満となったが、Ａ成分と、Ｂ成分の質量比、（Ａ）／（Ｂ）が、０．５〜２０の場合（実施例２０〜２８）は、３．５点以上となり刺激の点においても、本発明の優位性が認められた。
なお、Ａ成分と、Ｂ成分に、酸化エチレン平均付加モル数が１００のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油を０．１〜０．５％添加することで、更に刺激緩和作用が認められた（実施例２６〜２８）。
【００６２】
〔実験例３〕
次に、下記組成に基づき、実施例２９〜３２の口腔用組成物を常法により調製し、実験例１及び２と同様に評価したところ、いずれも高いバイオフィルム量減少効果を示し、また刺激も低いものであった。
【００６３】
（実施例２９：液体歯磨）
塩酸アルキルジアミノエチルグリシン＊ ０．２０％
ポリオキシエチレン(８０)硬化ヒマシ油 １．０％
グリセリン １５．０％
エタノール １５．０％
サッカリンナトリウム ０．０１％
安息香酸ナトリウム ０．３％
香料Ａ １．０％
リン酸２ナトリウム ０．０５％
硝酸カリウム １．０％
イノシン酸ナトリウム １．０％
シクロピロクスオラミン（シグマ アルドリッチ社製） ０．１％
精製水 残
計 １００．０％
（Ａ成分とＢ成分との質量比、（Ａ）／（Ｂ）＝２．０）
＊４０％塩酸アルキルジアミノエチルグリシン水溶液（和光純薬工業社製）を０．５％配合した。
【００６４】
（実施例３０：液体歯磨）
ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム＊ ０．１０％
ポリオキシエチレン(１００)硬化ヒマシ油 1．５％
シクロピロクスオラミン（Kumar Organic Products Limited社） ０．０２％
グリセリン ３５．０％
プロピレングリコール ５．０％
ポリアクリル酸ナトリウム ０．５％
無水ケイ酸 １５．０％
サッカリンナトリウム ０．３％
安息香酸ナトリウム ０．３％
トリクロサン ０．１％
β−グリチルレチン酸 ０．０５％
香料Ｂ ０．５％
硝酸カリウム ３．０％
トラネキサム酸 ０．１％
トリプトファン ０．５％
精製水 残
計 １００．０％
（Ａ成分とＢ成分との質量比、（Ａ）／（Ｂ）＝５．０）
＊３０％ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム（三洋化成工業社製）を０．３３３％配合した。
【００６５】
（実施例３１：液状歯磨）
塩酸アルキルジアミノエチルグリシン＊ ０．０５％
ポリオキシエチレン(１００)硬化ヒマシ油 ２．０％
ピロクトンオラミン(Kumar Organic Products Limited社) ０.０２５
無水ケイ酸 １８．０％
キサンタンガム ０．２％
ポリアクリル酸ナトリウム ０．１％
７０％ソルビット液 ３５.０％
グリセリン １７．０％
プロピレングリコール ５．０％
サッカリンナトリウム ０．３％
香料Ａ ０．８％
精製水 残
計 １００．０％
（Ａ成分とＢ成分との質量比、（Ａ）／（Ｂ）＝２．０）
＊４０％塩酸アルキルジアミノエチルグリシン水溶液（和光純薬工業社製）を０．１２５％配合した。
【００６６】
（実施例３２：練歯磨）
ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム＊ ０．０５％
ポリオキシエチレン(８０)硬化ヒマシ油 １．５％
カルボキシメチルセルロース ２．０％
ポリアクリル酸ナトリウム ０．３％
７０％ソルビット液 ２０.０％
プロピレングリコール ４．０％
ポリエチレングリコール４０００ ０．５％
リン酸水素カルシウム・２水塩 ３５．０％
無水ケイ酸 ５．０％
サッカリンナトリウム ０．１５％
ピロクトンオラミン（Kumar Organic Products Limited社） ０．０５％
香料Ｂ １．１％
精製水 残
計 １００．０％
（Ａ成分とＢ成分との質量比、（Ａ）／（Ｂ）＝１．０）
＊３０％ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム（三洋化成工業社製）を０．１６７％配合した。
【００６７】
なお、実施例２９〜３２で用いた香料Ａ、Ｂの組成は、下記表４の通りである。
【００６８】
【表４】
【００６９】
上記表４において、＊フルーツミックスフレーバーＦＭ３０００の組成は、下記表５の通りである。
【表５】
【産業上の利用可能性】
【００７０】
本発明の口腔用組成物は、口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で有効性を示し、かつ使用時の刺激が少ないものであるため、練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、潤製歯磨等の歯磨類、洗口剤、ガム、口中清涼剤、歯間ケア剤等に好適に利用することができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、刺激が少なく、かつ口腔疾患の原因である口腔バイオフィルム量減少効果に優れた口腔用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、デンタルプラークはバイオフィルムとして捉えられ（例えば、非特許文献１参照）、バイオフィルム中の細菌は、浮遊性細菌と比較すると細菌のタンパク質発現パターン（例えば、非特許文献２、３参照）や薬剤耐性（例えば、非特許文献４、５参照）が大きく異なることが分かってきた。バイオフィルムの概念が導入される以前の技術では、フェノール性殺菌剤（例えば、特許文献１参照）やヒドロキシ−２−ピリドン誘導体（例えば、特許文献２参照）等に例を挙げられるように、バイオフィルムの形成を抑制することができる技術は開発されていたが、一度形成してしまったバイオフィルムに対しては、高い効果を期待できないのが現状である。したがって、これまでに提案された薬剤やその組合せが、一度形成されたバイオフィルムに対して有効ではないことが明らかとなりつつある現在、バイオフィルムの形成及び成熟をより効果的に抑制することが可能なバイオフィルム抑制組成物の開発が強く望まれている。
【０００３】
上記背景の中、これまで幾つかのバイオフィルム抑制技術が開発されてきたが、有効性と使用感を両立させることが困難であるという問題がある。使用感については、近年、香味嗜好性や苦味・異味抑制を満足させ、かつ、バイオフィルム抑制効果を示す技術が開発されたが（例えば、特許文献３〜５参照）、有効性については、薬剤の滞留量や期間が充分でないためバイオフィルムの再成熟を長時間抑制するのが困難であり、１日に１回等繰返し作用させる必要がある点に課題がある。
また、アルキルジアミノエチルグリシン、ピロクトンオラミン、シクロピロクスオラミンを選択可能な成分として用いる抗菌剤組成物が提案されているが（例えば、特許文献６参照）、適切な配合の態様は示されておらず、口腔バイオフィルムに対しては十分な効果が得られない、という問題がある。
したがって、刺激が少なく、かつ口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で有効性を示す口腔用組成物の開発が強く求められているというのが現状である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎ，Ｊ．Ｗ．，Ｓｔｅｗａｒｔ，Ｐ．Ｓ． ａｎｄ Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ，Ｅ．Ｐ．：Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｂｉｏｆｉｌｍｓ：ａ ｃｏｍｍｏｎ ｃａｕｓｅ ｏｆ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８４：１３１８−１３２２，１９９９．
【非特許文献２】Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎ，Ｊ．Ｗ．，Ｌｅｗａｎｄｏｗｓｋｉ，Ｚ．，Ｃａｌｄｗｅｌｌ，Ｄ．Ｅ．，Ｋｏｒｂｅｒ，Ｄ．Ｒ． ａｎｄ Ｌａｐｐｉｎ−Ｓｃｏｔｔ，Ｈ．Ｍ．：Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｂｉｏｆｉｌｍｓ．Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．４９：７１１−７４５，１９９５．
【非特許文献３】Ｈｕｄｓｏｎ，Ｍ．Ｃ．ａｎｄ Ｃｕｒｔｉｓｓ，Ｒ．ＩＩＩ：Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ ｇｅｎｅｓ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔｏ ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．５８：４６４−４７０，１９９０．
【非特許文献４】Ｓｔｅｗａｒｔ，Ｐ．Ｓ．：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｂｉｏｆｉｌｍｓ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２９２：１０７−１１３，２００２．
【非特許文献５】Ｐｈｉｌｉｐ Ｍａｒｓｈ ａｎｄ Ｍｉｃｈａｅｌ Ｖ．Ｍａｒｔｉｎ著「Ｏｒａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ」、Ｗｒｉｇｈｔ出版、２０００年、ｐ．５８−８１（Ｄｅｎｔａｌ ｐｌａｑｕｅ）
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平２−１１５１１号公報
【特許文献２】特開平７−８２１２６号公報
【特許文献３】特開２００７−１１９４２０号公報
【特許文献４】特開２００７−１６９１９９号公報
【特許文献５】特開２００８−１５６３０８号公報
【特許文献６】特開２００１−０１０９４１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で有効性を示し、かつ使用時の刺激が少ない口腔用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、上記目的を達成するため鋭意研究を重ねた結果、アルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）とを配合し、かつ前記Ａ成分と前記Ｂ成分のの質量比［（Ａ）／（Ｂ）］が０．５〜２０であることにより、後述する実施例の実験結果から明らかなように、口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で極めて高い有効性を示し、かつ刺激が少ないことを知見し、本発明をなすに至った。
【０００８】
なお、アルキルジアミノエチルグリシン、ピロクトンオラミン、シクロピロクスオラミンは、例えば、前記特許文献６に選択可能な成分として記載されているが、前記（Ａ）／（Ｂ）を特定の割合で併用すると、前記Ａ成分と前記Ｂ成分との相乗的作用により、少ない作用頻度でバイオフィルム量減少効果が発揮され、かつ刺激性が低い口腔用組成物が得られることは、本発明者らの新知見である。
【０００９】
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては以下の通りである。即ち、
＜１＞ アルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）とを含有し、前記Ａ成分と前記Ｂ成分との質量比［（Ａ）／（Ｂ）]が０．５〜２０であることを特徴とする口腔用組成物である。
前記＜１＞の手段によると、メカニズムの詳細は不明であるが、前記質量比において、前記Ａ成分と、前記Ｂ成分との複合分子が形成され、前記Ａ成分及び前記Ｂ成分それぞれの作用が相乗的に高まるために、前記の優れた効果が得られると考えられる。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、前記の従来における諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、本発明は、口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で有効性を示し、かつ使用時の刺激が少ない口腔用組成物を提供することができる。該口腔用組成物は、う蝕、歯周病、口臭等の口腔疾患の予防又は治療に有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の口腔用組成物は、アルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）とを含有し、必要に応じて、その他の成分を含んでなる。
【００１２】
−Ａ成分−
前記Ａ成分としてのアルキルジアミノエチルグリシン又はアルキルポリアミノエチルグリシンは、両性界面活性剤の一種であり、タンパク質共存下においても浮遊菌に対する殺菌力が著しく減弱しないものである。
前記アルキルジアミノエチルグリシンと、前記アルキルポリアミノエチルグリシンとは、１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
また、前記Ａ成分は、塩酸塩やナトリウム塩等として用いることができる。
【００１３】
前記アルキルジアミノエチルグリシンと、前記アルキルポリアミノエチルグリシンとを単独比較すると、バイオフィルム量減少効果の点から前記アルキルジアミノエチルグリシンの方が好ましい。
前記アルキルジアミノエチルグリシンとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、アルキル基の炭素数が１２〜１４であるものが好ましく、例えば、ラウリルジアミノエチルグリシン、ミリスチルジアミノエチルグリシン、及びこれらを主成分とするヤシ油アルキルジアミノエチルグリシンが好ましい。
このようなアルキル（Ｃ１２Ｈ２５〜Ｃ１４Ｈ２９）ジアミノエチルグリシンとしては、市販品を使用でき、具体的には４０％塩酸アルキルジアミノエチルグリシン水溶液（和光純薬工業社製又は三洋化成工業株式会社製）、３０％ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム水溶液（三洋化成工業株式会社製）を挙げることができる。
【００１４】
前記アルキルポリアミノエチルグリシンとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、下記構造式（１）に示される化合物構造のものが好ましい。
【００１５】
【化１】
ただし、上記構造式（１）において、Ｒ１は、Ｒ[ＮＨＣ２Ｈ４]ｎ（ｎ＝１〜２）を示し、Ｒ２は、ＲＮＨＣ２Ｈ４又はＨのいずれかを示し、前記Ｒ１及びＲ２におけるＲは、炭素数６〜１０のアルキル基を示す。
【００１６】
前記構造式（１）の化合物としては、特に制限はなく、市販品を用いることができ、具体的には５０％塩酸アルキルポリアミノエチルグリシン水溶液（三洋化成工業株式会社製「レボン ５０」）を挙げることができる。
【００１７】
前記Ａ成分の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．０１質量％〜０．２質量％が好ましく、０．０２質量％〜０．１５質量％がより好ましく、０．０２質量％〜０．１質量％が特に好ましい。
０．０１質量％未満であると充分な口腔バイオフィルム量減少効果が得られない場合があり、０．２質量％を超えると使用時に強い刺激が生じる場合がある。
【００１８】
−Ｂ成分−
前記Ｂ成分としてのシクロピロクスオラミン又はピロクトンオラミンは、それぞれ抗真菌作用及び頭皮のフケや痒み防止作用を有することが知られている。
前記シクロピロクスオラミン又は前記ピロクトンオラミンは、１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
前記シクロピロクスオラミンとピロクトンオラミンとを単独比較すると、バイオフィルム量減少効果の点から前記シクロピロクスオラミンの方が好ましい。
【００１９】
前記シクロピロクスオラミンとしては、特に制限はなく、市販品を使用でき、具体的にはシグマ アルドリッチ社、ＬＫＴ Ｌａｂｓ, Ｉｎｃ、ＭＰ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ, Ｉｎｃ等から入手できる。
前記ピロクトンオラミンとしては、特に制限はなく、前記シクロピロクスオラミンと同様に、市販品を使用でき、具体的には、Ｋｕｍａｒ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ社、Ｃｌａｒｉａｎｔ社等から入手できる。
【００２０】
前記Ｂ成分の口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．００１質量％〜０．５質量％が好ましく、０．００５質量％〜０．１５質量％がより好ましく、０．００５質量％〜０．０５質量％が特に好ましい。
０．００１質量％未満であると充分なバイオフィルム量減少効果が得られない場合があり、０．５質量％を超えると使用時に強い刺激が生じる場合がある。
【００２１】
−Ａ成分及びＢ成分−
前記Ａ成分の配合量と、前記Ｂ成分の配合量とを合計した総配合量としては、前記口腔用組成物全体に対して、０．０１質量％〜０．７質量％が好ましく、０．０３質量％〜０．３質量％がより好ましく、０．０６質量％〜０．１５質量％が特に好ましい。
０．０１質量％未満であると充分なバイオフィルム量減少効果が得られない場合があり、０．７質量％を超えると使用時に強い刺激が生じる場合がある。
【００２２】
本発明の前記口腔用組成物としては、前記Ａ成分と、前記Ｂ成分とを併用し、特定の質量比で配合することが必須である。
前記質量比としては、バイオフィルム量減少効果や刺激の強さ等の面から、前記Ａ成分の質量を（Ａ）とし、前記Ｂ成分の質量を（Ｂ）としたとき、（Ａ）／（Ｂ）が０．５〜２０であり、０.７５〜１５が好ましく、１〜１０がより好ましい。
前記（Ａ）／（Ｂ）が０．５〜２０の範囲から外れると、充分なバイオフィルム量減少効果が得られず、また使用時に強い刺激を生じる。
【００２３】
−その他の成分−
本発明の前記口腔用組成物としては、特に制限はなく、固体、固形物、液体、液状、ゲル体、ペースト状、ガム状等の形態に調製でき、練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、潤製歯磨等の歯磨類、洗口剤、ガム、口中清涼剤、歯間ケア剤等の剤型、好ましくは練歯磨として常法により調製することができる。
前記その他の成分は、前記口腔用組成物の形態や剤型に応じ、また、目的や組成物の種類等に応じた適宜な成分として配合することができる。
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、研磨剤、界面活性剤、粘結剤、粘稠剤、アルコール、香料、その他の有効成分を挙げることができる。
【００２４】
前記研磨剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、第２リン酸カルシウム・２水和物及び無水物、第１リン酸カルシウム、第３リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ピロリン酸カルシウム、水酸化アルミニウム、アルミナ、無水ケイ酸、ケイ酸アルミニウム、不溶性メタリン酸ナトリウム、第３リン酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、硫酸カルシウム、ポリメタクリル酸メチル、ベントナイト、ケイ酸ジルコニウム等が挙げられる。これらは１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
前記研磨剤の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、例えば、５質量％〜９０質量％であるが、前記口腔用組成物を練歯磨として用いる場合には、１０質量〜６０質量％が好ましい。
【００２５】
前記界面活性剤としては、特に制限はなく、本発明のＡ成分であるアルキルジアミノエチルグリシン、アルキルポリアミノエチルグリシン、又はそれら塩に加えて、他の界面活性剤として、陰イオン界面活性剤、非イオン界面活性剤及び両性イオン界面活性剤から選ばれる１種以上を配合し得る。
【００２６】
前記陰イオン界面活性剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸ナトリウム、水素添加ココナッツ脂肪酸モノグリセリドモノ硫酸ナトリウム、ラウリルスルホ酢酸ナトリウム、Ｎ−パルミトイルグルタミン酸ナトリウム等のＮ−アシルグルタミン酸塩、Ｎ−メチル−Ｎ−アシルタウリンナトリウム、Ｎ−メチル−Ｎ−アシルアラニンナトリウム、α−オレフィンスルホン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００２７】
前記非イオン界面活性剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ショ糖脂肪酸エステル、マルトース脂肪酸エステル、ラクトース脂肪酸エステル等の糖脂肪酸エステル、マルチトール脂肪酸エステル、ラクチトール脂肪酸エステル等の糖アルコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート等のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等のポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ラウリン酸モノ又はジエタノールアミド、ミリスチン酸モノ又はジエタノールアミド等の脂肪酸ジエタノールアミド、ソルビタン脂肪酸エステル、脂肪酸モノグリセライド、ポリオキシエチレン高級アルコールエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン共重合体、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン脂肪酸エステル等が挙げられる。
【００２８】
前記両性イオン界面活性剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、Ｎ−アルキル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニウムベタイン、２−アルキル−１−ヒドロキシエチルイミダゾリンベタインナトリウム等が挙げられる。
【００２９】
前記他の界面活性剤の前記口腔組成物全体に対する配合量としては、特に制限はないが、０．１質量％〜３．０質量％が好ましい。
【００３０】
前記粘結剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、カラギーナン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロースナトリウム等のセルロース誘導体、アルギン酸塩、アルギン酸プロピレングリコールエステル、キサンタンガム、トラガカントガム、カラヤガム、アラビヤガム等のガム類、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルピロリドン等の合成粘結剤等の有機粘結剤、シリカゲル、アルミニウムシリカゲル、ビーガム、ラポナイト等の無機粘結剤等が挙げられる。これらは、１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
前記粘結剤の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、通常、０．３質量％〜１０質量％である。
【００３１】
前記粘稠剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ソルビット、グリセリン、キシリトール、マルチトール、ラクチトール等が挙げられる。これらは１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
前記粘稠剤の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、通常、１０質量％〜７０質量％である。
【００３２】
前記アルコールとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、一価のアルコール、多価のアルコールのいずれも用いることができる。
前記一価アルコールとしては、特に制限はなく、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、プロパノール等が挙げられる。
前記多価アルコールとしては、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ヘキシレングリコール、ブチレングリコール、ペンタンジオール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（分子量；２００〜２０，０００）、ポリプロピレングリコール（分子量；３００〜４，０００）等を挙げることができる。
これらは１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
前記アルコールの前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、純分換算して、通常、０．１質量％〜２０質量％である。
【００３３】
前記香料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ペパーミント油、スペアミント油、アニス油、ユーカリ油、ウィンターグリーン油、カシア油、クローブ油、タイム油、セージ油、レモン油、オレンジ油、ハッカ油、カルダモン油、コリアンダー油、マンダリン油、ライム油、ラベンダー油、ローズマリー油、ローレル油、カモミル油、キャラウェイ油、マジョラム油、ベイ油、レモングラス油、オリガナム油、パインニードル油、ネロリ油、ローズ油、ジャスミン油、イリスコンクリート、アブソリュートペパーミント、アブソリュートローズ、オレンジフラワー等の天然香料、及び、これら天然香料の加工処理（前溜部カット、後溜部カット、分留、液液抽出、エッセンス化、粉末香料化等）した香料、メントール、カルボン、アネトール、シネオール、サリチル酸メチル、シンナミックアルデヒド、オイゲノール、３−ｌ−メントキシプロパン−１，２−ジオール、チモール、リナロール、リナリールアセテート、リモネン、メントン、メンチルアセテート、Ｎ−置換−パラメンタン−３−カルボキサミド、ピネン、オクチルアルデヒド、シトラール、プレゴン、カルビールアセテート、アニスアルデヒド、エチルアセテート、エチルブチレート、アリルシクロヘキサンプロピオネート、メチルアンスラニレート、エチルメチルフェニルグリシデート、バニリン、ウンデカラクトン、ヘキサナール、イソアミルアルコール、ヘキセノール、ジメチルサルファイド、シクロテン、フルフラール、トリメチルピラジン、エチルラクテート、エチルチオアセテート等の単品香料、更に、ストロベリーフレーバー、アップルフレーバー、バナナフレーバー、パイナップルフレーバー、グレープフレーバー、マンゴーフレーバー、バターフレーバー、ミルクフレーバー、フルーツミックスフレーバー、トロピカルフルーツフレーバー等の調合香料等、及び、口腔用組成物に用いられる公知の香料素材を使用することができ、実施例の香料に限定されない。
前記香料の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はないが、前記香料のうち前記香料素材は、０．０００００１質量％〜１質量％使用するのが好ましい。
また、前記香料素材を併用した賦香用香料の前記配合量としては、０．１質量％〜２．０質量％が好ましい。
【００３４】
前記その他の有効成分としては、特に制限はなく、クロルヘキシジン、デカリニウムクロライド等の陽イオン性殺菌剤、トリクロサン、ヒノキチオール等のフェノール性化合物、デキストラナーゼ、ムタナーゼ、リゾチーム、アミラーゼ、プロテアーゼ、溶菌酵素、スーパーオキサイド等の酵素、モノフルオロリン酸ナトリウム、モノフルオロリン酸カリウム等のアルカリ金属モノフルオロホスフェート、フッ化ナトリウム、フッ化第１錫等のフッ化物、トラネキサム酸、イプシロンアミノカプロン酸、アルミニウムクロルヒドロキシルアラントイン、ジヒドロコレスタノール、グリチルリチン酸類、グリチルレチン酸、ビサボロール、グリセロホスフェート、クロロフィル、塩化ナトリウム、水溶性無機リン酸化合物等が挙げられる。これらは、１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
なお、これらその他の有効成分の前記口腔用組成物全体に対する配合量としては、特に制限はなく、本発明の効果を妨げない範囲の有効量で配合することができる。
【実施例】
【００３５】
以下、実験例、実施例及び比較例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は下記実施例に制限されるものではない。なお、以下の例において配合量はいずれも質量％である。
【００３６】
〔実験例１：実施例１〜１９及び比較例１〜７〕
下記表１及び表２に示す組成に基づき、実施例１〜１９及び比較例１〜７の口腔用組成物を、以下の方法により調製した。なお、下記表１及び表２において、成分Ａ及び成分Ｂの添加量（質量％）は、口腔用組成物全体に対する添加量を示す。
【００３７】
−口腔用組成物の調製法−
１００ｍＬの三角フラスコ（ハリオグラス社製）にアルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）、エタノール（アルコール添加群のみ）を加え充分に混和した後、必要に応じて、その他の成分を添加し、蒸留水を添加することで全量が５０ｇになるように調製した。
その後、容器ごと超音波洗浄機（２８ｋＨｚの周波数で３０分間）中で分散・溶解させ、実施例１〜１９及び比較例１〜７の口腔用組成物を調製した。
これらの口腔用組成物を実験例１の試験組成物として、直ちに実験に用いた。
【００３８】
次に、実施例１〜１９及び比較例１〜７の口腔用組成物に対して、以下に示すバイオフィルム量減少効果の測定方法により、バイオフィルム量減少効果の評価を行った。結果を下記表１及び表２に示す。
【００３９】
−バイオフィルム量減少効果の測定方法−
ライオン株式会社オーラルケア研究所において継代保存（凍結保存）してあったストレプトコッカス ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ） ＡＴＣＣ ２５１７５株，アクチノマイセス ナイスランディー（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｎａｅｓｌｕｎｄｉｉ） ＡＴＣＣ ５１６５５株，フゾバクテリウム ニュークレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ） ＡＴＣＣ １０９５３株，ポルフィロモーナス ジンジバリス（Ｐｏｒｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ） ＡＴＣＣ ３３２７７株，ストレプトコッカス サングイニス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｎｇｕｉｎｉｓ） ＡＴＣＣ １０５５６株の各菌液４０μＬをそれぞれ、１２１℃で１５分間オートクレーブした５ｍｇ／Ｌ ヘミン（シグマ アルドリッチ社製）及び１ｍｇ／Ｌ ビタミンＫ（和光純薬工業社製）を含むトッドへーウィットブロース（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）培養液（ＴＨＢＨＭ*1）４ｍＬに添加し、３７℃で一晩嫌気培養（８０ｖｏｌ％窒素、１０ｖｏｌ％二酸化炭素、１０ｖｏｌ％水素）した。
【００４０】
同様に保存してあったベイヨネラ パービューラ（Ｖｅｉｌｌｏｎｅｌｌａ ｐａｒｖｕｌａ） ＡＴＣＣ １７７４５株菌液８０μＬを、１２１℃で１５分間オートクレーブした１．２６％乳酸ナトリウム（シグマ アルドリッチ社製）を含むトッドへーウィットブロース（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）培養液（ＴＨＢＬ*2）４ｍＬに添加し、同様に培養した。培養後、ベイヨネラ パービューラを除く５菌種の菌液から各３００μＬを採取し、それぞれ３０ｍＬのＴＨＢＨＭに添加し、さらに一晩培養した。ベイヨネラ パービューラの菌液から同様に３００μＬを採取し、３０ｍＬのＴＨＢＬに添加し、一晩培養した。
【００４１】
再培養後、各菌液を遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、１０ｍｉｎ）し、上清を廃棄した。各沈渣（細菌）に対して１２１℃で１５分間オートクレーブしたベイサルメディウムムチン培養液（ＢＭＭ＊３）を添加し、再懸濁した後、予めＢＭＭ １，０００ｍＬを入れた培養槽（直径１４０ｍｍ×高さ２００ｍｍ）に、上記各菌数がそれぞれ１×１０７個／ｍＬになるように接種し、スターラーで攪拌（約１００ｒｐｍで回転）しながら、３７℃、嫌気条件下（９５ｖｏｌ％窒素、５ｖｏｌ％二酸化炭素）で一晩培養した。
【００４２】
その後、ＢＭＭを１００ｍＬ／ｈの速度で供給するとともに、同速度で培養液を排出した。上記培養槽から排出された培養液は、液量が３００ｍＬに保たれる別の培養槽（直径９０ｍｍ×高さ１９０ｍｍ、３７℃でインキュベート）に連続的に供給した。この培養槽内の回転盤（約８０ｒｐｍで回転）には、付着担体であるハイドロキシアパタイトディスク（直径７ｍｍ×高さ３．５ｍｍ）を装着し、その表面にバイオフィルムを形成させた。また、直径９０ｍｍ×高さ１９０ｍｍの培養槽には２４時間間隔で、培養液全量の排出、１％スクロース（和光純薬工業社製）を含むＴＨＢＨＭを３００ｍＬ添加、３０分間のインキュベート、培養液全量の排出、ＢＭＭを３００ｍＬ添加の順の操作を繰り返した。
【００４３】
なお、上記培養法は、文献（Ｍｏｎｏｉ， Ｎ．，Ｏｈｔａ， Ｈ．，Ｍｏｒｉｓｈｉｍａ， Ｓ． ａｎｄ Ｏｃｈｉａｉ， Ｙ．：Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ Ｂｉｏｆｉｌｍ Ｍｏｄｅｌ： Ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ Ｆｏｏｄ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｉｎ Ｃｈｅｍｏｓｔａｔ−ｔｙｐｅ Ｓｙｓｔｅｍ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｒａｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ． ４６：２７−３６, ２００４．）記載の方法を改変して実施したものである。
【００４４】
上記バイオフィルム量減少効果の測定方法による培養は１４日間行い、薬剤処置頻度の少ない条件でのバイオフィルム量減少効果を解析するため、６日目、８日目、１０日目、１２日目に次に示す薬剤処置を行った。
即ち、バイオフィルムが付着したハイドロキシアパタイトディスクを培養槽から取り出し、シャーレ（直径３５ｍｍ×高さ１４ｍｍ）に移し、試験組成物５ｇ（実施例及び比較例）に３０秒間浸漬させた。その後、生理食塩水（大塚製薬社製）５ｇで３回洗浄後、再び培養槽内に戻した。
【００４５】
培養終了時に、試験組成物のバイオフィルム量減少効果を評価するため、ハイドロキシアパタイトディスクごとバイオフィルムを培養槽から取り出し、生理食塩水５ｇで３回洗浄した後、４ｍＬの生理食塩水を添加した試験管（直径１３ｍｍ×１００ｍｍ）に移した。直ちに超音波破砕（２００μＡの出力で１０秒間）を行い、試験管からハイドロキシアパタイトディスクを取り出した。氷冷下で試験管内の内容物をさらに１５分間超音波破砕（２００μＡの出力）した後、バイオフィルム破砕液１ｍＬを採取し、新しい空の試験菅に添加した。バイオフィルム破砕液を生理食塩水にて５倍、５０倍希釈した液も調製し、同様に新しい試験管に１ｍＬ加えた。各試験管に、５％フェノール水溶液＊４１ｍＬを加えよく混合した後、濃硫酸（和光純薬工業社製）５ｍＬを直接液面に加えて、よく混和した。室温にて３０分間放置したのち、４９０ｎｍの吸光度（島津製作所社製）を測定した。吸光度の測定値は、０．１〜１．０の範囲のものを用い、希釈液の場合は希釈倍率を吸光度測定値に乗じた。
なお、実験は４度繰り返し、各実験ごとに、バイオフィルム量減少効果を下記算出式で求めた。下記算出式は、Ａ成分と、Ｂ成分とを併用しないで実施した比較例１を対照として、試験組成物のバイオフィルム量減少効果（％）を算出するものである。
【００４６】
【数１】
【００４７】
なお、前記バイオフィルム量減少効果の測定方法において記載の＊１〜＊４の注釈事項は、以下の事柄を示す。
【００４８】
＊１ＴＨＢＨＭの組成：１リットル中の質量で表す。
トッドへーウィットブロース
（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）： ３０ｇ／Ｌ
ヘミン（シグマ アルドリッチ社製）： ５ｍｇ／Ｌ
ビタミンＫ（和光純薬工業社製）： １ｍｇ／Ｌ
蒸留水： 残
（全量が１Ｌになるようにメスアップした。）
【００４９】
＊２ＴＨＢＬの組成：１リットル中の質量で表す。
トッドへーウィットブロース
（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）： ３０ｇ／Ｌ
６０％乳酸ナトリウム水溶液（シグマ アルドリッチ社製）： ２１ｇ／Ｌ
蒸留水： 残
（全量が１Ｌになるようにメスアップした。）
【００５０】
＊３ＢＭＭの組成：１リットル中の質量で表す。
プロテオースペプトン
（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）： ２ｇ／Ｌ
トリプトン（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）：１ｇ／Ｌ
イーストエキストラクト
（Ｂｅｃｔｏｎ ａｎｄ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）： １ｇ／Ｌ
ムチン（シグマ アルドリッチ社製）： ２．５ｇ／Ｌ
ヘミン（シグマ アルドリッチ社製）： １ｍｇ／Ｌ
ビタミンＫ（和光純薬工業社製）： ０．２ｍｇ／Ｌ
ＫＣｌ（和光純薬工業社製）： ０．５ｇ／Ｌ
システイン（和光純薬工業社製）： ０．１ｇ／Ｌ
蒸留水： 残
（全量が１Ｌになるようにメスアップした。）
【００５１】
＊４５％フェノール水溶液の調製：
フェノール（和光純薬工業社製）５ｇを秤取し、全量が１００ｍＬになるようにメスアップした。
【００５２】
−バイオフィルム量減少効果の評価−
前記算出式により算出されたバイオフィルム量減少効果（％）を、下記評価基準に基づき、評点付けを行い評価を行った。実施例１〜１９及び比較例２〜７における口腔用組成物（試験組成物）に対する評点の平均（４度の実験の平均値）を下記表１及び表２に示す。
【００５３】
評価基準：
１点：比較例１を対照とした試験組成物の効果が、０％未満
２点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、０％以上１０％未満
３点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、１０％以上２０％未満
４点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、２０％以上３０％未満
５点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、３０％以上４０％未満
６点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、４０％以上５０％未満
７点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、５０％以上６０％未満
８点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、６０％以上７０％未満
９点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、７０％以上８０％未満
１０点:比較例１を対照とした試験組成物の効果が、９０％以上１００％以下
【００５４】
【表１】
【表２】
【００５５】
なお、上記表１及び表２における１）〜９）の注釈事項は、以下の事柄を示す。
１）塩酸アルキルジアミノエチルグリシンとして純分換算した質量％を示す。４０％塩酸アルキルジアミノエチルグリシン水溶液（三洋化成工業社製）を使用。
２）塩酸アルキルポリアミノエチルグリシンとして純分換算した質量％を示す。５０％塩酸アルキルポリアミノエチルグリシン水溶液（三洋化成工業社製）を使用。
３）シグマ アルドリッチ社製
４）Ｃｌａｒｉａｎｔ社製
５）和光純薬工業社製
６）酸化エチレン平均付加モル数が６０のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油を示す。日光ケミカルズ社製
７）高砂香料社製
８）ＣＡＥはＮ−ヤシ油脂肪酸アシル−Ｌ−アルギニンエチル・ＤＬ−ピロリドンカルボン酸塩を示す。味の素社製。
９）日本甜菜製糖社製
【００５６】
上記表１及び表２に示す結果より、薬剤処置頻度が少ない本試験において、Ａ成分と、Ｂ成分の質量比が０．５未満や２０を超える場合（比較例２及び３）、Ａ成分（アルキルジアミノエチルグリシン）単独の場合（比較例４）、Ｂ成分（シクロピロクスオラミン）単独の場合（比較例５）、及び従来技術であるＡ成分（アルキルジアミノエチルグリシン）と、その他の成分とを組み合わせた場合（比較例７）、及びＢ成分（シクロピロクスオラミン又はピロクトンオラミン）と、その他の成分とを組み合わせた場合（比較例１及び６）は、いずれもバイオフィルム量減少評点が４点未満であった。これに対して、Ａ成分とＢ成分の質量比、（Ａ）／（Ｂ）が、０．５〜２０の場合（実施例１〜１９）は、相乗的な効果が発現し、評点が４.５点以上となり、本発明の有効性が認められた。
本発明のメカニズムの詳細は不明であるが、上記の質量比において複合分子が形成されバイオフィルムへの吸着量の増大が起こるため、薬剤処置頻度の少ない条件（１回／２日間）においても高い有効性が認められたと考えられる。
【００５７】
〔実験例２：実施例２０〜２８及び比較例８、９〕
−口腔用組成物の調製−
次に、本発明のポイントのひとつは実験例１で示したバイオフィルム量減少効果にあるが、同時に、実使用における刺激の強さを低減することができることを確認するため、刺激性についての実験を行った。
下記表３の組成に基づき、実験例１と同様に調製を行った実施例２０〜２８及び比較例８、９における口腔用組成物を試験組成物とした。
【００５８】
−刺激性の評価−
実施例２０〜２８及び比較例８、９における口腔用組成物に対して、次のように評価を行った。
即ち、評価被験者１０名に対して、試験組成物１０ｇを３０秒間含嗽させ、試験液を吐出させた後、３分間ブラッシングさせた。同操作を１日２回、１週間継続させた。最後の使用時に、次に示す評価基準に従い官能評価を行い、刺激の強さを計測した。
評価は、評価被験者１０名による評点の平均値とし、その結果を下記表３に示す。
評点：
１点：刺激が強い
２点：刺激がある
３点：刺激がややある
４点：刺激がほとんどない
５点：刺激がない
【００５９】
【表３】
【００６０】
なお、上記表３における１）〜５）の注釈事項は、以下の事柄を示す。
１）塩酸アルキルジアミノエチルグリシンとして純分換算した質量％を示す。４０％塩酸アルキルジアミノエチルグリシン水溶液（和光純薬工業社製）を使用。
２）シグマ アルドリッチ社製
３）Ｃｌａｒｉａｎｔ社製
４）和光純薬工業社製
５）酸化エチレン平均付加モル数が１００のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油を示す。日光ケミカルズ社製。
【００６１】
上記表３に示す結果より、Ａ成分としてアルキルジアミノエチルグリシン、又は、Ｂ成分としてシクロピロクスオラミンのそれぞれを併用せず、単独高濃度で用いた場合（比較例８及び９）は、３点未満となったが、Ａ成分と、Ｂ成分の質量比、（Ａ）／（Ｂ）が、０．５〜２０の場合（実施例２０〜２８）は、３．５点以上となり刺激の点においても、本発明の優位性が認められた。
なお、Ａ成分と、Ｂ成分に、酸化エチレン平均付加モル数が１００のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油を０．１〜０．５％添加することで、更に刺激緩和作用が認められた（実施例２６〜２８）。
【００６２】
〔実験例３〕
次に、下記組成に基づき、実施例２９〜３２の口腔用組成物を常法により調製し、実験例１及び２と同様に評価したところ、いずれも高いバイオフィルム量減少効果を示し、また刺激も低いものであった。
【００６３】
（実施例２９：液体歯磨）
塩酸アルキルジアミノエチルグリシン＊ ０．２０％
ポリオキシエチレン(８０)硬化ヒマシ油 １．０％
グリセリン １５．０％
エタノール １５．０％
サッカリンナトリウム ０．０１％
安息香酸ナトリウム ０．３％
香料Ａ １．０％
リン酸２ナトリウム ０．０５％
硝酸カリウム １．０％
イノシン酸ナトリウム １．０％
シクロピロクスオラミン（シグマ アルドリッチ社製） ０．１％
精製水 残
計 １００．０％
（Ａ成分とＢ成分との質量比、（Ａ）／（Ｂ）＝２．０）
＊４０％塩酸アルキルジアミノエチルグリシン水溶液（和光純薬工業社製）を０．５％配合した。
【００６４】
（実施例３０：液体歯磨）
ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム＊ ０．１０％
ポリオキシエチレン(１００)硬化ヒマシ油 1．５％
シクロピロクスオラミン（Kumar Organic Products Limited社） ０．０２％
グリセリン ３５．０％
プロピレングリコール ５．０％
ポリアクリル酸ナトリウム ０．５％
無水ケイ酸 １５．０％
サッカリンナトリウム ０．３％
安息香酸ナトリウム ０．３％
トリクロサン ０．１％
β−グリチルレチン酸 ０．０５％
香料Ｂ ０．５％
硝酸カリウム ３．０％
トラネキサム酸 ０．１％
トリプトファン ０．５％
精製水 残
計 １００．０％
（Ａ成分とＢ成分との質量比、（Ａ）／（Ｂ）＝５．０）
＊３０％ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム（三洋化成工業社製）を０．３３３％配合した。
【００６５】
（実施例３１：液状歯磨）
塩酸アルキルジアミノエチルグリシン＊ ０．０５％
ポリオキシエチレン(１００)硬化ヒマシ油 ２．０％
ピロクトンオラミン(Kumar Organic Products Limited社) ０.０２５
無水ケイ酸 １８．０％
キサンタンガム ０．２％
ポリアクリル酸ナトリウム ０．１％
７０％ソルビット液 ３５.０％
グリセリン １７．０％
プロピレングリコール ５．０％
サッカリンナトリウム ０．３％
香料Ａ ０．８％
精製水 残
計 １００．０％
（Ａ成分とＢ成分との質量比、（Ａ）／（Ｂ）＝２．０）
＊４０％塩酸アルキルジアミノエチルグリシン水溶液（和光純薬工業社製）を０．１２５％配合した。
【００６６】
（実施例３２：練歯磨）
ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム＊ ０．０５％
ポリオキシエチレン(８０)硬化ヒマシ油 １．５％
カルボキシメチルセルロース ２．０％
ポリアクリル酸ナトリウム ０．３％
７０％ソルビット液 ２０.０％
プロピレングリコール ４．０％
ポリエチレングリコール４０００ ０．５％
リン酸水素カルシウム・２水塩 ３５．０％
無水ケイ酸 ５．０％
サッカリンナトリウム ０．１５％
ピロクトンオラミン（Kumar Organic Products Limited社） ０．０５％
香料Ｂ １．１％
精製水 残
計 １００．０％
（Ａ成分とＢ成分との質量比、（Ａ）／（Ｂ）＝１．０）
＊３０％ラウリルジアミノエチルグリシンナトリウム（三洋化成工業社製）を０．１６７％配合した。
【００６７】
なお、実施例２９〜３２で用いた香料Ａ、Ｂの組成は、下記表４の通りである。
【００６８】
【表４】
【００６９】
上記表４において、＊フルーツミックスフレーバーＦＭ３０００の組成は、下記表５の通りである。
【表５】
【産業上の利用可能性】
【００７０】
本発明の口腔用組成物は、口腔疾患の原因である口腔バイオフィルムに対して少ない作用頻度で有効性を示し、かつ使用時の刺激が少ないものであるため、練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、潤製歯磨等の歯磨類、洗口剤、ガム、口中清涼剤、歯間ケア剤等に好適に利用することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）とを含有し、
前記Ａ成分と前記Ｂ成分との質量比［（Ａ）／（Ｂ）]が０．５〜２０であることを特徴とする口腔用組成物。
【請求項１】
アルキルジアミノエチルグリシン及び／又はアルキルポリアミノエチルグリシン（Ａ成分）と、シクロピロクスオラミン及び／又はピロクトンオラミン（Ｂ成分）とを含有し、
前記Ａ成分と前記Ｂ成分との質量比［（Ａ）／（Ｂ）]が０．５〜２０であることを特徴とする口腔用組成物。
【公開番号】特開２０１０−２４１６９３（Ｐ２０１０−２４１６９３Ａ）
【公開日】平成２２年１０月２８日（２０１０．１０．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−８８６５３（Ｐ２００９−８８６５３）
【出願日】平成２１年４月１日（２００９．４．１）
【出願人】（０００００６７６９）ライオン株式会社 (1,816)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１０月２８日（２０１０．１０．２８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年４月１日（２００９．４．１）
【出願人】（０００００６７６９）ライオン株式会社 (1,816)
【Ｆターム（参考）】
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