抗ガン剤として治療への応用に有効な、エピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体の調製方法
本発明は、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、保護基を有するアミン反応物とをペプチド結合する過程を含むことを特徴とする、エピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体および該誘導体の塩を調製する新規方法を対象とする。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体および該誘導体の薬学的に許容可能な塩の新規調製方法を対象とする。
【０００２】
【化１】
【０００３】
該化学式において、Ｒは水素原子または−（ＣＨ2）c−ＮＨ2基を表し、２≦ａ，ｂ，ｃ≦５である。
【０００４】
これらの化合物は、エピポドフィロトキシンタイプのリグナン部分と、アセトアミド・モチーフを有する、エピポドフィロトキシンの４位にグラフトされたポリアミン部分とによって構成されている。ポリアミン鎖が存在することで、分子には、特に塩酸塩による水溶特性、ならびに、ガン治療において特に利点のある薬学的特性が付与される。
【背景技術】
【０００５】
これらの化合物は国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されており、充実性腫瘍、または、メラノーマのような非充実性腫瘍、結腸直腸ガン、肺ガン、前立腺ガン、膀胱ガン、乳ガン、子宮ガン、胃ガン、膵臓ガン、肝臓ガン、卵巣ガンの治療、ならびに、白血病、リンパ腫および骨髄腫、耳鼻咽喉領域のガンおよび脳腫瘍の治療において特に有効な抗腫瘍性化合物である。
【０００６】
化学式１の化合物を調製するための国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されている合成方法では、化学式２のポドフィロトキシンが出発物質として用いられる。
【０００７】
【化２】
【０００８】
また、該方法では化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンが用いられる。
【０００９】
【化３】
【００１０】
該４’−デメチルエピポドフィロトキシンに対して、酸性媒体でクロロアセトニトリルを反応させることで、合成中間体である化学式４の４−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンを得る。
【００１１】
【化４】
【００１２】
次に、この化合物を化学式５の第一級アミン反応物と縮合する。
【００１３】
【化５】
【００１４】
該化学式５において、Ｒ’は水素または−（ＣＨ2）C−ＮＨＰ鎖を表し、ａ、ｂ、ｃは先述のものと同じ意味を有し、Ｐはアミン官能基を保護する基を表す。適切な保護基は、ベンジル基、ベンジルオキシカルボニル基またはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基とすることができる。この縮合は、ルイス塩基（トリエチルアミン）の存在下で非プロトン性極性溶媒（アセトニトリル、ＤＭＦ）を含む溶媒混合物の中で行われる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
しかし、この方法には、過程の数が多く、したがって全体の収率がかなり低いということの他に、二つの不都合がある。
【００１６】
一方では、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットで用いられている条件は化学式１のエピポドフィロトキシン誘導体の２位にある炭素のエピマー化を引き起こしやすく、化学式７の「ピクロ」と名付けられたシス−ラクトン形状へとつながる。
【００１７】
【化６】
【００１８】
したがって、求められるトランスラクトン生成物の精製は難しく、手間もコストもかかるクロマトグラフィー操作が必要となる。
【００１９】
他方では、上述した方法では、保護された形で形成されている化学式１の生成物の第二級アミンに対する４−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンのもう一つの分子の反応によって、ビスアルキル化タイプの副生成物ももたらされる。したがって、二次生成物の取得を最小限に抑えて出発物質のできるだけ完全な変換を得るためには、化学式５の第一級アミン反応物を過剰に使用することが必要となり、このことは、余剰アミンを回収するという難しい過程を必要とし、この方法を不経済にする。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
予期しなかったことに、本出願人は、化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに対して、ペプチド結合によって、Ｒ’が水素または−（ＣＮ2）C−ＮＨＰ鎖であり、ａ、ｂ、ｃが前述のものと同じ値を有し、Ｐがアミン官能基を保護する基を表す化学式６のポリアミノ酢酸を縮合することによって、いかなる反応物も過剰に使用することなく非常に優れた純度で結合による化合物が得られることを確認した。反応は、優れた収率で行われ、窒素原子が担持する保護基を脱保護した後、化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド化合物がもたらされるのだが、該化合物の水に可溶性の塩酸塩は抗ガン剤としての応用に有効である。
【００２１】
【化７】
【００２２】
【化８】
【００２３】
したがって、本発明は、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の置換された酢酸とのペプチド結合の過程を含む、化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンから、化学式１の化合物と該化合物の薬学的に許容可能な塩を合成する新規方法に関するものである。
【００２４】
好ましくは、本方法は塩酸塩の形状での化学式１の化合物の調製に適用される。
【００２５】
さらに好ましくは、化学式６の化合物で用いられる保護基はベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である。
【００２６】
化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンは、国際公開第２００７／０１０００７号パンフレットに記載されている合成方法によって調製することのできる既知の中間体である（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４，４７，２３６５−２３７４、およびＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９１，３４，３３４６−３３５０）。
【００２７】
したがって、化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに縮合されることになる化合物６を得るために、化合物５のポリアミン部分に酢酸モチーフを導入するのは、特に利点のある方略である。
【００２８】
化学式６の化合物において、酢酸モチーフは化学式５の（ポリ）アミノアルキルアミノ誘導体の第一級アミン部分とハロ酢酸アルキルとの反応によってもたらされる。好ましくは、ブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルまたはヨード酢酸エチルが用いられる。たとえばグリオキシル酸誘導体による還元アミノ化のような、その他の酢酸モチーフの導入方法も用いることができる。エステル官能基の酸への加水分解は希釈された水酸化ナトリウムのような塩基性媒体で行うことができる。
【００２９】
化学式５の化合物は文献、Ｔｅｔ．Ｌｅｔｔ．１９９８，３９，４３９に記載されている仕方で得られる。この合成を用いた特徴的な実施例は国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットの実施例２７に示されている。
【００３０】
この酢酸中間体６と化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとのペプチド結合によって、中性媒体、したがってエピマー化しない媒体で操作することと同時に、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されているような方略には不可欠なクロマトグラフィー作業を必要としない、より純粋な生成物をもたらすことが可能となる。
【００３１】
先行研究、たとえば、雑誌Ｔｅｔ．２００５，６１，１０８２７に記載されているペプチド結合方法の多種多様性は、最も効果的で、最も純粋な化合物をもたらす適用すべき方法（ＤＣＣ、混合無水物、ＣＤＩ、ＢＯＰおよびその誘導体、ＴＢＴＵを用いる方法など）の選択肢を当業者に与えている。たとえば、ＴＢＴＵ（Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム・テトラフルオロボラート）による活性化を用いる方法（Ｊ．Ｏ．Ｃ．１９９６，６１，２３２２）は、中性媒体において常温で行われ、時間がかからないという利点を有すると同時に、純粋であり、反応物に由来する二次生成物が抽出中に水に可溶性である化合物をもたらす。従来の単純なクロマトグラフィーによって、最終段階直前には完全な質（純度＞９９％）の化合物をもたらす。
【００３２】
以下では、実施の容易さ、抽出処理およびクロマトグラフィー処理によって得られる純度という点でこの方法の利点を示す実施例をいくつか説明することにする。
【００３３】
より特徴的には、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝−（ＣＨ2）3−ＮＨ2である化学式１の化合物、すなわち、２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製するための方法に関するものであり、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、化学式６の化合物、つまり｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸または｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴とし、これは、ａ＝３、ｂ＝４、かつＲ’＝−（ＣＨ2）3−ＮＨＰ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の化合物に対応している。
【００３４】
また、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを塩酸塩の形状で調製する方法にも関するものであり、該方法は、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、化学式６の化合物、つまり（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸、または、ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛３−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴としており、これはａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の化合物に対応している。
【００３５】
また、本発明は、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４である化学式１の化合物、すなわち２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する方法にも関するものであり、該方法は、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の化合物、つまり｛ベンジルオキシカルボニル−［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸または｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［４−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴とし、これは、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の化合物に対応している。
【００３６】
また、本発明は、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する方法にも関するものであり、該方法は、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、化学式６の化合物、つまり、（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸または（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴としており、これは、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の化合物に対応している。
【００３７】
本発明のもう一つの態様は一般化学式１の化合物の新規合成方法に関するものであり、該方法は以下の過程を含むことを特徴としている。
【００３８】
ａ）ハロ酢酸アルキルによって酢酸モチーフを化学式５の第一級アミン反応物にグラフトする過程。
【００３９】
【化９】
【００４０】
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを保護基Ｐによって保護する過程。
【００４１】
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化することで、化学式６のポリアミノ酢酸を得る過程。
【００４２】
ｄ）過程ｃ）で得られたポリアミノ酢酸を化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程。
【００４３】
ｅ）先行過程で得られた化合物から保護基Ｐを除去することで、一般化学式１の化合物に到達する過程。
【００４４】
好ましくは、化学式５の化合物と過程ｂ）で用いられる保護基は、ベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である。また好ましくは、過程ａ）ではブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルまたはヨード酢酸エチルから選択されるハロ酢酸アルキルが用いられることになる。
【００４５】
新規合成方法は以下の反応スキームによって示される。
【００４６】
【化１０】
【００４７】
該反応スキームのさまざまな過程は以下で全般的に説明する。
【００４８】
第一級アミン５の調製方法。
反応してはならない窒素原子上における保護基Ｐ（たとえばベンジルオキシカルボニル（Ｚ））で保護されている化学式５の第一級アミンの合成は、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されている。ベンジルオキシカルボニル基は特徴的な選択ではあるが、該選択は限定的ではない。その他の保護基も本発明の範囲で用いることができる。開裂がより簡単である置換されたベンジルオキシカルボニル基以外では、酸性媒体での開裂が化学式１の最終的な化合物の安定性と両立し得るブチルオキシカルボニル基も用いることができる。実際、合成終了時の開裂は、最終的な分子にあるさまざまな官能基と適合するものでなければならない。特に、塩基性媒体は上述したように２位にある炭素原子のエピマー化を引き起こすために適合しないのだが、逆に、揮発性もしくは容易に分離または除去できる副生成物をもたらす酸性媒体は使うことができる。
【００４９】
過程１。
この過程の間、ハロ酢酸アルキル、たとえばブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルまたはヨード酢酸エチルによる化合物５の第一級アミンのアルキル化が行われるのだが、２つの反応物は化学量論的な量である。
【００５０】
過程２。
先行過程で得られた第二級アミンは、化学式５の化合物を合成する際に最初に用いたものと同一の保護基Ｐによって保護されており、このタイプのアミン官能基を保護するために用いられてきた従来技術を利用している。好ましくは、保護基としてはベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基が用いられる。こうしてすべての同一保護基は同じ過程で開裂されることになる。
【００５１】
過程３。
先行過程で得られたエステルを塩基性媒体、たとえばエタノールの水酸化ナトリウム溶液によって鹸化することによって、化学式６の化合物を得る。
【００５２】
化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成。
化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンは合成方法の説明されている既知の化合物である（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４，４７，２３６５−２３７４およびＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９１，３４，３３４６−３３５０）。より危険性が少なく、より経済的で、より純粋な誘導体をもたらすこの誘導体の新規合成方法は、国際公開第２００７／０１０００７号パンフレットの対象となっている。
【００５３】
過程４。
この過程の間に、先に合成されている化学式６のポリアミノ酢酸と化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとのペプチド結合が行われる。この結合は中性媒体において室温で行われる。
【００５４】
過程５。
従来の脱保護技術にしたがって、先行過程で得られた化合物から保護基Ｐを除去することで、化学式１の化合物に到達する。
【００５５】
本発明は、より特徴的には、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝−（ＣＨ2）3−ＮＨ2である化学式１の化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを塩酸塩の形状で調製する方法に関するものであり、該方法は、
ａ）［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルまたは３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピルアミノ］−酢酸のエチルエステルを得るために、ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを｛４−［（３−アミノプロピル）−ベンジルオキシカルボニルアミノ］ブチル｝−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−カルバミン酸のベンジルエステルまたはトリＢＯＣスペルミンにグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを、ベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である保護基によって保護する過程と、
ｃ）｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸あるいは｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸を得るために、過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化合物と４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとをペプチド結合する過程と、
ｅ）過程ｄ）で得られた化合物からベンジルオキシカルボニル保護基またはｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去する過程、
を含むことを特徴としている。
【００５６】
また本発明は、より特徴的には、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する方法にも関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の化合物にグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを、過程ａ）で用いたものと同一の保護基を用いて保護する過程と、
ｃ）ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝Ｈ、Ｐが過程ａ）および過程ｂ）と同じ意味を有している化学式６の化合物を得るために、過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化合物を４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程と、
ｅ）先行過程で得られた化合物からベンジルオキシカルボニル保護基またはｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去する過程、
を含むことを特徴としている。
【００５７】
本発明は、より特徴的には、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４である化学式１の化合物、すなわち２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを塩酸塩の形状で調製する方法に関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の化合物にグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを、過程ａ）で用いたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４、Ｐが過程ａ）および過程ｂ）と同じ意味を有する化学式６の化合物を得るために、過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化合物を４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程と、
ｅ）先行過程で得られた化合物からベンジルオキシカルボニル保護基またはｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去する過程、
を含むことを特徴としている。
【００５８】
より特徴的には、本発明は、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する方法に関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の化合物にグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを、過程ａ）で用いたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ’＝Ｈ、Ｐが過程ａ）および過程ｂ）と同じ意味を有する化学式６の化合物を得るために、過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化合物を４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程と、
ｅ）先行過程で得られた化合物からベンジルオキシカルボニル保護基またはｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去する過程、
を含むことを特徴としている。
【００５９】
また、本発明は化学式６の中間体を調製する方法にも関するものである。
【００６０】
【化１１】
【００６１】
該方法は以下の過程を含むことを特徴としている。
【００６２】
ａ）ハロ酢酸アルキルを用いて酢酸モチーフを化学式５の第一級アミンにグラフトする過程。
【００６３】
【化１２】
【００６４】
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを保護基Ｐで保護する過程。
【００６５】
ｃ）化学式６のポリアミノ酢酸を得るために、過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程。
【００６６】
好ましくは、過程ｂ）で用いられるハロ酢酸アルキルはブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルあるいはヨード酢酸エチルから選択される。
【００６７】
また好ましくは、化学式５の化合物の保護基と過程ｂ）で用いられる保護基は、ベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である。
【００６８】
またより特徴的には、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝−（ＣＨ2）3−ＮＨＰ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の中間体、すなわち、｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸あるいは｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸を調製する方法に関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを化学式５の第一級アミン反応物、すなわち｛４−［（３−アミノプロピル）−ベンジルオキシカルボニルアミノ］ブチル｝−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−カルバミン酸のベンジルエステルあるいはトリＢＯＣスペルミン（これはａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝−（ＣＨ2）3−ＮＨＰ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化合物５に対応する）にグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを先行過程で選択されたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程、
を含むことを特徴としている。
【００６９】
また、より特徴的には、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の中間体を調製する方法に関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の第一級アミン反応物にグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを先行過程で選択されたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程、
を含んでいることを特徴としている。
【００７０】
また、本発明は、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の中間体を調製する方法にも関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の第一級アミン反応物に酢酸モチーフをグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを先行過程で選択されたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程、
を含んでいることを特徴としている。
【００７１】
また、より特徴的には、本発明は、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の中間体を調製する方法にも関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の第一級アミン反応物に酢酸モチーフをグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを先行過程で選択されたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程、
を含んでいることを特徴としている。
【００７２】
また、本発明は一般化学式１の化合物を調製するための、一般化学式６の化合物の使用にも関するものである。
【００７３】
本発明はさらに、新規生成物としての以下の化合物にも関するものである。
【００７４】
・以下の化学式の（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノ−ブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸。
【００７５】
【化１３】
【００７６】
・以下の化学式の（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−プロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸。
【００７７】
【化１４】
【００７８】
・以下の化学式の（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−｛３−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸。
【００７９】
【化１５】
【００８０】
・以下の化学式の（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−｛４−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸。
【００８１】
【化１６】
【発明を実施するための形態】
【００８２】
以下に述べる実施例は本発明の方法を例示するものであるが、本発明の範囲を限定しない。
【００８３】
Ａ）ベンジルオキシカルボニル基を用いる方法。
【実施例１】
【００８４】
塩酸塩の形状での２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製（ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈ）。
【００８５】
【化１７】
【００８６】
過程１。｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピルアミノ｝−酢酸のエチルエステルの調製。
【００８７】
【化１８】
【００８８】
２００ｍＬのアセトニトリルおよび２．６ｍＬ（１．８６ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン中にある６．３５ｇ（１５．４ｍｍｏｌ）の（３−アミノプロピル）−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−カルバミン酸のベンジルエステル溶液（Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．２００５，３５，１０８５）に、攪拌下で１．７０ｍＬ（２．５６ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）のブロモ酢酸エチルを室温で加えた。攪拌は４時間維持した。反応混合液を水に注ぎ、酢酸エチルによって抽出した。有機相をデカンテーションし、次に硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過、蒸発させた。次の過程で直接用いられるオイルが７．７ｇ得られた。
【００８９】
過程２。（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸のエチルエステルの調製。
【００９０】
【化１９】
【００９１】
２００ｍＬの水／アセトン（１／１）混合物および１．６８ｇ（２０ｍｍｏｌ）のＮａＨＣＯ3中にある、先に得られた７．７ｇ（１５．４ｍｍｏｌ）の｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピルアミノ｝−酢酸のエチルエステル溶液に、攪拌下において、２．４２ｍＬ（１７ｍｍｏｌ）のクロロギ酸ベンジルを滴加した。攪拌は２時間維持した。アセトンは減圧下で蒸発させ、次に混合液を１ＮのＨＣｌによって酸性化した。次に混合液を酢酸エチルによって抽出し、有機相を分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過、蒸発させた。純粋ヘプタンからヘプタン／ＡｃＯＥｔ混合物（６０／４０）への溶出勾配を用いて、残留物をシリカカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーにかけた。対象となる画分の蒸発は６ｇの無色のオイルに相当した。収率＝６１％。ＴＬＣ ＳｉＯ2，ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９０／１０／１）Ｒｆ＝０．９。
【００９２】
過程３。（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸の調製。
【００９３】
【化２０】
【００９４】
１００ｍＬのエタノールおよび１３．８ｍＬ（１３．７ｍｍｏｌ）の１Ｎ水酸化ナトリウム溶液中にある、先行過程で得られた５．８ｇ（９．２ｍｍｏｌ）の（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸のエチルエステル溶液を、１時間にわたって還流にかけた。冷却後、２０ｍＬの１Ｎ塩酸溶液を加え、この酸性溶液を塩化メチレンによって抽出した。有機相を分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過、蒸発させた。残留物は、純粋ヘプタンから塩化メチレン／ＭｅＯＨ（９５／５）への溶出勾配によってシリカ上でフラッシュクロマトグラフィーにかけた。それから、蒸発後に、収率８５％で、透明なオイルを４．７ｇ単離した。ＴＬＣ；ＳｉＯ2；ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９０／１０）；Ｒｆ＝０．３５。
【００９５】
過程４。（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛［（５Ｓ，５ａＳ，８ａＲ，９Ｒ）−９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］−１，３−ジオキソル−５−イルカルバモイル］−メチル｝−アミノ）−プロピル］−カルバミン酸のベンジルエステルの調製。
【００９６】
【化２１】
【００９７】
１００ｍＬのアセトニトリル中にある、先行過程で得られた３．３４ｇ（５．５ｍｍｏｌ）の（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸と、２．４ｇ（５．５ｍｍｏｌ）の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシン塩酸塩の懸濁液に、１．６３ｍＬ（１１．６ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを加え、混合液を攪拌下で溶解させた。この段階で、１．７７ｇ（５．５ｍｍｏｌ）のＴＢＴＵを加えた。反応混合液を１時間にわたって室温で攪拌した。水を添加した後、酢酸エチルによって混合液を抽出し、有機相を分離し、ＮａＨＣＯ3溶液、次いでＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を再び分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、蒸発させることで、白色フォームを５ｇ得た。純粋ヘプタンからヘプタン／ＡｃＯＥｔ（４０／６０）への勾配によって溶出されたシリカ上での急速なフラッシュクロマトグラフィーによって、９７％の純度を有する４．６ｇの生成物と、そして７３％の純度の０．４１ｇのもう一つの画分を得ることができた。これらの画分を集め、逆相での分取ＨＰＬＣによって精製した。カラムＣ １８、Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（６０／４０）溶出、次いでＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（４０／６０）溶出。この段階で純度が９９．８％の４．６ｇの化合物（収率＝８４．６％）が得られた。
ＴＬＣ：ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９０／１０）；Ｒｆ＝０．７５。
【００９８】
過程５。２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩の調製。
【００９９】
先行過程で得られた（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛［（５Ｓ，５ａＳ，８ａＲ，９Ｒ）−９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］−１，３−ジオキソル−５−イルカルバモイル］−メチル｝−アミノ）−プロピル］−カルバミン酸のベンジルエステル中間体（４．６ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を攪拌下かつ水素雰囲気下で、３時間にわたって１０％でパラジウム処理した４６０ｍｇの炭素を含んだ２００ｍＬのメタノールに入れた。この段階でＨＣｌ／イソプロパノールを３当量加えた。溶媒の濾過および蒸発後、残留物を無水エタノールにとり、次いで濾過し、エチルエーテルで洗浄した。３．１ｇの塩酸塩が単離された（収率６０％）。ＭＳ−ＥＳＩ ｍ／ｚ ５８５．２（ＭＨ＋）。
【実施例２】
【０１００】
塩酸塩の形状での２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製（ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３）。
【０１０１】
【化２２】
【０１０２】
過程１。｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルの調製。
【０１０３】
【化２３】
【０１０４】
実施例１の過程１で指示した操作方法を再び用いるが、今回は｛４−［（３−アミノプロピル）−ベンジルオキシカルボニルアミノ］−ブチル｝−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−カルバミン酸のベンジルエステルを用いて、オイル状の［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピルアミノ］−酢酸のエチルエステルを得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９０／９／１）Ｒｆ＝０．４５。
【０１０５】
過程２。
この中間体は直接次の変換に適用した。この変換はあらゆる点で実施例１の過程２で説明した変換と類似しているが、対応する反応物を用いる。こうして７ｇ（収率＝９６．８％）の無色オイルが得られた。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ヘプタン／ＡｃＯＥｔ（５０／５０）Ｒｆ＝０．３。
【０１０６】
過程３。｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸の調製。
【０１０７】
【化２４】
【０１０８】
実施例１の過程３で説明したものと同一の操作手法にしたがうが、先行過程で得られた化合物を用いて、純粋ＣＨ2Ｃｌ2からＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９５／５）への溶出勾配によるフラッシュクロマトグラフィーの後、３．６ｇの対応する酸（収率＝５３％）が得られた。
ＴＬＣ ＳｉＯ2，ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９５／５）Ｒｆ＝０．２４。
【０１０９】
過程４および過程５。塩酸塩の形状での２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製。
【０１１０】
【化２５】
【０１１１】
過程４。
実施例１と同様に、しかし先行過程３で調製した中間体を用いて、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとの結合によって、５３％の収率で白色フォーム状のアミド化合物が得られた。次に、ヘプタンからＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９０／９／１）混合物への溶出勾配を用いたシリカ上での急速フラッシュクロマトグラフィーを行い、次いで、Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（６０／４０）溶出、そしてＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（３５／６５）溶出によるＣ１８逆相での分取ＨＰＬＣを行い、最後にアセトニトリルの蒸発と酢酸エチルによる抽出を行った。
ＴＬＣ：ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９５／０５）；Ｒｆ＝０．３５。
【０１１２】
過程５。
この中間体を実施例１の過程５の操作手法にしたがって脱ベンジル化した。そうして、９２％の収率で２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル−アセトアミドの塩酸塩が得られた。
Ｆ＝２６７℃；ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（７２／２５／３）Ｒｆ＝０．３１；ＳＭ−ＥＳＩ ｍ／ｚ＝６４２．２（ＭＨ＋）。
【実施例３】
【０１１３】
塩酸塩の形状での２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製（ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４）。
【０１１４】
【化２６】
【０１１５】
過程１および過程２。｛ベンジルオキシカルボニル−［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルの調製。
【０１１６】
過程１。
実施例１の過程１で説明した操作手法を用いて、しかし（４−アミノブチル）−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−カルバミン酸のベンジルエステルを用いて、オイル状の［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチルアミノ］−酢酸のエチルエステルを得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９０／９／１）Ｒｆ＝０．４８。
【０１１７】
過程２。
この中間体は、あらゆる点で実施例１の過程２で説明したものと類似した方法で行われる次の過程に直接適用した。こうして対応する反応物を用いることで、７５％の収率で無色オイル状の｛ベンジルオキシカルボニル−［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルを得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９５／４．５／０．５）Ｒｆ＝０．３５。
【０１１８】
過程３。｛ベンジルオキシカルボニル−［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸の調製。
【０１１９】
【化２７】
【０１２０】
実施例１の過程３で説明した操作手法にしたがい、しかし先に得られた化合物を用いることで、純粋ＣＨ2Ｃｌ2からＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９０／１０）への溶出勾配によるフラッシュクロマトグラフィーの後、８８％の収率で対応する酸を得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2， ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９０／１０）Ｒｆ＝０．５３。
【０１２１】
過程４および過程５。塩酸塩の形状での２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製。
【０１２２】
過程４。
実施例１の過程４と同様に、しかし先行過程で調製した中間体を用い、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと該中間体の結合によって、６２％の収率で白色フォーム状のアミド化合物が得られた。ＣＨ2Ｃｌ2からＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９５／５）混合物への勾配を用いたシリカ上での急速フラッシュクロマトグラフィーの後、Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（６０／４０）溶出、次いでＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（３０／７０）溶出によるＣ１８逆相での分取ＨＰＬＣに続いて、アセトニトリルの蒸発および酢酸エチルによる抽出を行うことで、以下の過程で直接用いることになる中間体を得た。ＴＬＣ：ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９５／４．５／０．５）；Ｒｆ＝０．２４。
【０１２３】
過程５。
この中間体を実施例１の過程５の操作手法にしたがって脱ベンジル化した。こうして、７８％の収率で、２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を得た。
Ｆ＝２６３℃；ＳＭ−ＤＣＩ／ＣＨ４ ｍ／ｚ＝６７０．５（ＭＨ＋）。
【実施例４】
【０１２４】
塩酸塩の形状での２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製（ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈ）。
【０１２５】
【化２８】
【０１２６】
過程１および過程２。ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸のエチルエステルの調製。
【０１２７】
【化２９】
【０１２８】
過程１。
実施例１の過程１で指示した操作手法を用いて、しかし｛３−［（４−アミノブチル）−ベンジルオキシカルボニルアミノ］−プロピル｝−カルバミン酸のベンジルエステルを用いることで、オイル状の｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチルアミノ｝−酢酸のエチルエステルを得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９５／４．５／０．５）Ｒｆ＝０．２８，ＳＭ−ＥＳＩ ｍ／ｚ＝５００．３（ＭＨ＋）。
【０１２９】
過程２。
先に得られた中間体は、あらゆる点で実施例１の過程２で説明したものと類似した次の変換に直接適用した。こうして無色オイル状のベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸のエチルエステルを得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９５／４．５／０．５）Ｒｆ＝０．３９．ＳＭ−ＡＰＣＩ ｍ／ｚ＝６３４．３（ＭＨ＋）
【０１３０】
過程３。（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸の調製。
【０１３１】
【化３０】
【０１３２】
実施例１の過程３で説明したものと同一の操作手法にしたがって、しかし先行過程で得られた化合物を用いて、酸抽出によって収率８６％で対応する酸が得られた。
ＴＬＣ ＳｉＯ2，ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９０／１０）Ｒｆ＝０．４８。
【０１３３】
過程４および過程５。塩酸塩の形状での２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製。
【０１３４】
【化３１】
【０１３５】
過程４。
実施例１の過程４と同様に、しかし先行過程で調製された中間体を用いて、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと該中間体の結合によって、４８％の収率で白色フォーム状のアミド化合物が得られた。ヘプタンからＡｃＯＥｔへの勾配を用いたシリカ上での急速フラッシュクロマトグラフィーの後、Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（６０／４０）溶出、次いでＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（３５／６５）溶出によるＣ１８逆相での分取ＨＰＬＣを行い、そして最後にアセトニトリルの蒸発と酢酸エチルによる抽出を行った。ＴＬＣ：ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９５／４．５／０．５）；Ｒｆ＝０．３０。
【０１３６】
過程５。
得られた中間体を実施例１の過程５の操作手法にしたがって脱ベンジル化した。７９％の収率で、２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を得た。
Ｆ＝１９７℃；ＳＭ−ＥＳＩ ｍ／ｚ＝５８５．３（ＭＨ＋）。
【０１３７】
Ｂ）ｔ−ブチルオキシカルボニル基を用いる方法。
【実施例５】
【０１３８】
塩酸塩の形状での２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製（ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３）。
【０１３９】
過程１。３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピルアミノ］−酢酸のエチルエステルの調製。
【０１４０】
【化３２】
【０１４１】
１２０ｍＬのアセトニトリル中にある５．１１ｇのトリＢＯＣスペルミン溶液（Ｔｅｔ．Ｌｅｔ．１９９８，３９，４３９）（１０ｍｍｏｌ、１当量）に１．７ｍＬのトリエチルアミン（１２ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。そして、この溶液に１．１３ｍＬのブロモ酢酸エチル（１０ｍｍｏｌ、１当量）を攪拌下で急速に加えた。常温での１時間にわたる攪拌の後、ＮａＣｌで飽和した水（３００ｍＬ）に反応混合液を入れ、酢酸エチル（２×２００ｍＬ）によって抽出を行った。有機相の乾燥、濾過、蒸発の後、得られた残留物をＳｉＯ2上でのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した（純粋ヘプタンから純粋ＣＨ2Ｃｌ2への勾配、次にＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ−９０／１０の勾配による溶出）。３．３５ｇの無色オイル（収率＝５６％）を得た。ＴＬＣ Ｒｆ＝０．５７（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ−９０／１０）。
【０１４２】
過程２。｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルの調製。
【０１４３】
【化３３】
【０１４４】
６０ｍＬのＴＨＦ中にある３．３５ｇの先行過程１で得られた中間体（５．７ｍｍｏｌ、１当量）の室温溶液に、１ｍＬのトリエチルアミン（６．８ｍｍｏｌ、１．２当量）を加え、次に攪拌下で１．３６ｇのＢＯＣ2Ｏ（６．２ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液を加え、２時間にわたって攪拌を続けた。次に、反応混合液を水（３００ｍＬ）に入れ、酢酸エチル（３×２００ｍＬ）によって抽出した。硫酸ナトリウム上でいったん乾燥させ、濾過した有機相を蒸発させ、ＳｉＯ2上でのフラッシュクロマトグラフィー（純粋ヘプタンから純粋酢酸エチルへの勾配による溶出）を行うことで、２．５２ｇの無色オイルを得た。収率＝６４％、ＴＬＣ Ｒｆ＝０．４３（ＳｉＯ2 ヘプタン／ＡｃＯＥｔ−５０／５０）。
【０１４５】
過程３。｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸の調製。
【０１４６】
【化３４】
【０１４７】
過程２で得られたエステル中間体（２．５２ｇ、３．６ｍｍｏｌ、１当量）を５０ｍＬのＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ混合物と５．５ｍＬの１Ｎ水酸化ナトリウム溶液における攪拌下での還流によって３時間加熱した。冷たい水（３００ｍＬ）に入れ、１ＮのＨＣｌ（５．６ｍＬ）によって酸性化した。ＣＨ2Ｃｌ2による抽出、Ｎａ2ＳＯ4上での乾燥、濾過、蒸発の後、ＳｉＯ2上でのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した（純粋ヘプタンから純粋ＣＨ2Ｃｌ2へ、次いでＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ−９０／１０への溶出勾配）。こうして無色オイル状の２．２７ｇのテトラＢＯＣスペルミン酢酸が得られた。収率＝９４％。
ＴＬＣ Ｒｆ０．４（ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ−９０／１０）。（文献Ｔｅｔ．Ｌｅｔ．１９９７，３８，３２１９）。
【０１４８】
過程４および過程５。塩酸塩の形状での２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製。
【０１４９】
過程４。
１００ｍＬのアセトニトリル中にある、６７０ｍｇの４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（１．５４ｍｍｏｌ、１当量）および１．０２ｇの過程３で得られた中間体（１．５４ｍｍｏｌ、１当量）の攪拌されている溶液に、室温で、０．４５ｍＬのトリエチルアミン（３．２８ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。完全な溶解が観察された。そこで０．５ｇのＴＢＴＵ（１．５４ｍｍｏｌ、１当量）を加え、２時間攪拌した。次に３００ｍＬの水に反応混合液を入れ、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）によって抽出した。Ｎａ2ＳＯ4上での有機相の乾燥、濾過、蒸発の後、残留物をＳｉＯ2上でフラッシュクロマトグラフィーにかけた（純粋ヘプタンからＡｃＯＥｔへの勾配による溶出）。９２％の純度で得られた化合物を分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、Ｓｕｎｆｉｒｅ ＯＢＤ、１０μ）によって再びクロマトグラフィーにかけ、ＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ−５０／５０対ＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ−６５／３５によって溶出した。得られた水相を酢酸エチルによって再抽出し、乾燥、蒸発させることで、次の過程に直接適用する８００ｍｇの無色オイルが得られた。収率＝５０％。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 Ｒｆ０．４（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ−９０／９／１）。
【０１５０】
過程５。
２０ｍＬのＥｔＯＨ中にある、８００ｍｇの先に得られた化合物の溶液（０．７７ｍｍｏｌ、１当量）に、ＨＣｌで飽和した２０ｍＬのイソプロパノール溶液を攪拌下で加えた。攪拌は５時間にわたって維持した。混合液は真空下で蒸発させ、１０ｍＬの無水ＥｔＯＨにとって攪拌した。沈殿物が得られ、該沈殿物を濾過し、真空下で乾燥させた（５００ｍｇ）。１．５４ｇ／ＬのＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ／ＡｃＯＮＨ4と２ｍＬ／ＬのＡｃＯＨによって溶出させた分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、Ｓｕｎｆｉｒｅ、ＯＢＤ、１０μ）による精製によって純粋な化合物を得ることができ、該化合物の溶液を凍結乾燥した。その凍結乾燥物を１０ｍＬのＭｅＯＨにとり、ＨＣｌイソプロパノール溶液でｐＨ３まで酸性化させた。得られた塩酸塩溶液を蒸発させ、無水ＥｔＯＨにとった。塩酸塩の形状で、１９０ｍｇ（収率＝３２％）の２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドが得られた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０１５１】
【特許文献１】国際公開第２００５／１００３６３号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００７／０１０００７号パンフレット
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体および該誘導体の薬学的に許容可能な塩の新規調製方法を対象とする。
【０００２】
【化１】
【０００３】
該化学式において、Ｒは水素原子または−（ＣＨ2）c−ＮＨ2基を表し、２≦ａ，ｂ，ｃ≦５である。
【０００４】
これらの化合物は、エピポドフィロトキシンタイプのリグナン部分と、アセトアミド・モチーフを有する、エピポドフィロトキシンの４位にグラフトされたポリアミン部分とによって構成されている。ポリアミン鎖が存在することで、分子には、特に塩酸塩による水溶特性、ならびに、ガン治療において特に利点のある薬学的特性が付与される。
【背景技術】
【０００５】
これらの化合物は国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されており、充実性腫瘍、または、メラノーマのような非充実性腫瘍、結腸直腸ガン、肺ガン、前立腺ガン、膀胱ガン、乳ガン、子宮ガン、胃ガン、膵臓ガン、肝臓ガン、卵巣ガンの治療、ならびに、白血病、リンパ腫および骨髄腫、耳鼻咽喉領域のガンおよび脳腫瘍の治療において特に有効な抗腫瘍性化合物である。
【０００６】
化学式１の化合物を調製するための国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されている合成方法では、化学式２のポドフィロトキシンが出発物質として用いられる。
【０００７】
【化２】
【０００８】
また、該方法では化学式３の４’−デメチルエピポドフィロトキシンが用いられる。
【０００９】
【化３】
【００１０】
該４’−デメチルエピポドフィロトキシンに対して、酸性媒体でクロロアセトニトリルを反応させることで、合成中間体である化学式４の４−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンを得る。
【００１１】
【化４】
【００１２】
次に、この化合物を化学式５の第一級アミン反応物と縮合する。
【００１３】
【化５】
【００１４】
該化学式５において、Ｒ’は水素または−（ＣＨ2）C−ＮＨＰ鎖を表し、ａ、ｂ、ｃは先述のものと同じ意味を有し、Ｐはアミン官能基を保護する基を表す。適切な保護基は、ベンジル基、ベンジルオキシカルボニル基またはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基とすることができる。この縮合は、ルイス塩基（トリエチルアミン）の存在下で非プロトン性極性溶媒（アセトニトリル、ＤＭＦ）を含む溶媒混合物の中で行われる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
しかし、この方法には、過程の数が多く、したがって全体の収率がかなり低いということの他に、二つの不都合がある。
【００１６】
一方では、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットで用いられている条件は化学式１のエピポドフィロトキシン誘導体の２位にある炭素のエピマー化を引き起こしやすく、化学式７の「ピクロ」と名付けられたシス−ラクトン形状へとつながる。
【００１７】
【化６】
【００１８】
したがって、求められるトランスラクトン生成物の精製は難しく、手間もコストもかかるクロマトグラフィー操作が必要となる。
【００１９】
他方では、上述した方法では、保護された形で形成されている化学式１の生成物の第二級アミンに対する４−クロロアセトアミド−４’−デメチルエピポドフィロトキシンのもう一つの分子の反応によって、ビスアルキル化タイプの副生成物ももたらされる。したがって、二次生成物の取得を最小限に抑えて出発物質のできるだけ完全な変換を得るためには、化学式５の第一級アミン反応物を過剰に使用することが必要となり、このことは、余剰アミンを回収するという難しい過程を必要とし、この方法を不経済にする。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
予期しなかったことに、本出願人は、化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに対して、ペプチド結合によって、Ｒ’が水素または−（ＣＮ2）C−ＮＨＰ鎖であり、ａ、ｂ、ｃが前述のものと同じ値を有し、Ｐがアミン官能基を保護する基を表す化学式６のポリアミノ酢酸を縮合することによって、いかなる反応物も過剰に使用することなく非常に優れた純度で結合による化合物が得られることを確認した。反応は、優れた収率で行われ、窒素原子が担持する保護基を脱保護した後、化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド化合物がもたらされるのだが、該化合物の水に可溶性の塩酸塩は抗ガン剤としての応用に有効である。
【００２１】
【化７】
【００２２】
【化８】
【００２３】
したがって、本発明は、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の置換された酢酸とのペプチド結合の過程を含む、化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンから、化学式１の化合物と該化合物の薬学的に許容可能な塩を合成する新規方法に関するものである。
【００２４】
好ましくは、本方法は塩酸塩の形状での化学式１の化合物の調製に適用される。
【００２５】
さらに好ましくは、化学式６の化合物で用いられる保護基はベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である。
【００２６】
化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンは、国際公開第２００７／０１０００７号パンフレットに記載されている合成方法によって調製することのできる既知の中間体である（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４，４７，２３６５−２３７４、およびＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９１，３４，３３４６−３３５０）。
【００２７】
したがって、化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンに縮合されることになる化合物６を得るために、化合物５のポリアミン部分に酢酸モチーフを導入するのは、特に利点のある方略である。
【００２８】
化学式６の化合物において、酢酸モチーフは化学式５の（ポリ）アミノアルキルアミノ誘導体の第一級アミン部分とハロ酢酸アルキルとの反応によってもたらされる。好ましくは、ブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルまたはヨード酢酸エチルが用いられる。たとえばグリオキシル酸誘導体による還元アミノ化のような、その他の酢酸モチーフの導入方法も用いることができる。エステル官能基の酸への加水分解は希釈された水酸化ナトリウムのような塩基性媒体で行うことができる。
【００２９】
化学式５の化合物は文献、Ｔｅｔ．Ｌｅｔｔ．１９９８，３９，４３９に記載されている仕方で得られる。この合成を用いた特徴的な実施例は国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットの実施例２７に示されている。
【００３０】
この酢酸中間体６と化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとのペプチド結合によって、中性媒体、したがってエピマー化しない媒体で操作することと同時に、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されているような方略には不可欠なクロマトグラフィー作業を必要としない、より純粋な生成物をもたらすことが可能となる。
【００３１】
先行研究、たとえば、雑誌Ｔｅｔ．２００５，６１，１０８２７に記載されているペプチド結合方法の多種多様性は、最も効果的で、最も純粋な化合物をもたらす適用すべき方法（ＤＣＣ、混合無水物、ＣＤＩ、ＢＯＰおよびその誘導体、ＴＢＴＵを用いる方法など）の選択肢を当業者に与えている。たとえば、ＴＢＴＵ（Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム・テトラフルオロボラート）による活性化を用いる方法（Ｊ．Ｏ．Ｃ．１９９６，６１，２３２２）は、中性媒体において常温で行われ、時間がかからないという利点を有すると同時に、純粋であり、反応物に由来する二次生成物が抽出中に水に可溶性である化合物をもたらす。従来の単純なクロマトグラフィーによって、最終段階直前には完全な質（純度＞９９％）の化合物をもたらす。
【００３２】
以下では、実施の容易さ、抽出処理およびクロマトグラフィー処理によって得られる純度という点でこの方法の利点を示す実施例をいくつか説明することにする。
【００３３】
より特徴的には、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝−（ＣＨ2）3−ＮＨ2である化学式１の化合物、すなわち、２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製するための方法に関するものであり、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、化学式６の化合物、つまり｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸または｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴とし、これは、ａ＝３、ｂ＝４、かつＲ’＝−（ＣＨ2）3−ＮＨＰ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の化合物に対応している。
【００３４】
また、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを塩酸塩の形状で調製する方法にも関するものであり、該方法は、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、化学式６の化合物、つまり（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸、または、ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛３−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴としており、これはａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の化合物に対応している。
【００３５】
また、本発明は、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４である化学式１の化合物、すなわち２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する方法にも関するものであり、該方法は、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと化学式６の化合物、つまり｛ベンジルオキシカルボニル−［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸または｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［４−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴とし、これは、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の化合物に対応している。
【００３６】
また、本発明は、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する方法にも関するものであり、該方法は、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、化学式６の化合物、つまり、（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸または（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴としており、これは、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の化合物に対応している。
【００３７】
本発明のもう一つの態様は一般化学式１の化合物の新規合成方法に関するものであり、該方法は以下の過程を含むことを特徴としている。
【００３８】
ａ）ハロ酢酸アルキルによって酢酸モチーフを化学式５の第一級アミン反応物にグラフトする過程。
【００３９】
【化９】
【００４０】
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを保護基Ｐによって保護する過程。
【００４１】
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化することで、化学式６のポリアミノ酢酸を得る過程。
【００４２】
ｄ）過程ｃ）で得られたポリアミノ酢酸を化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程。
【００４３】
ｅ）先行過程で得られた化合物から保護基Ｐを除去することで、一般化学式１の化合物に到達する過程。
【００４４】
好ましくは、化学式５の化合物と過程ｂ）で用いられる保護基は、ベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である。また好ましくは、過程ａ）ではブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルまたはヨード酢酸エチルから選択されるハロ酢酸アルキルが用いられることになる。
【００４５】
新規合成方法は以下の反応スキームによって示される。
【００４６】
【化１０】
【００４７】
該反応スキームのさまざまな過程は以下で全般的に説明する。
【００４８】
第一級アミン５の調製方法。
反応してはならない窒素原子上における保護基Ｐ（たとえばベンジルオキシカルボニル（Ｚ））で保護されている化学式５の第一級アミンの合成は、国際公開第２００５／１００３６３号パンフレットに記載されている。ベンジルオキシカルボニル基は特徴的な選択ではあるが、該選択は限定的ではない。その他の保護基も本発明の範囲で用いることができる。開裂がより簡単である置換されたベンジルオキシカルボニル基以外では、酸性媒体での開裂が化学式１の最終的な化合物の安定性と両立し得るブチルオキシカルボニル基も用いることができる。実際、合成終了時の開裂は、最終的な分子にあるさまざまな官能基と適合するものでなければならない。特に、塩基性媒体は上述したように２位にある炭素原子のエピマー化を引き起こすために適合しないのだが、逆に、揮発性もしくは容易に分離または除去できる副生成物をもたらす酸性媒体は使うことができる。
【００４９】
過程１。
この過程の間、ハロ酢酸アルキル、たとえばブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルまたはヨード酢酸エチルによる化合物５の第一級アミンのアルキル化が行われるのだが、２つの反応物は化学量論的な量である。
【００５０】
過程２。
先行過程で得られた第二級アミンは、化学式５の化合物を合成する際に最初に用いたものと同一の保護基Ｐによって保護されており、このタイプのアミン官能基を保護するために用いられてきた従来技術を利用している。好ましくは、保護基としてはベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基が用いられる。こうしてすべての同一保護基は同じ過程で開裂されることになる。
【００５１】
過程３。
先行過程で得られたエステルを塩基性媒体、たとえばエタノールの水酸化ナトリウム溶液によって鹸化することによって、化学式６の化合物を得る。
【００５２】
化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成。
化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンは合成方法の説明されている既知の化合物である（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４，４７，２３６５−２３７４およびＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９１，３４，３３４６−３３５０）。より危険性が少なく、より経済的で、より純粋な誘導体をもたらすこの誘導体の新規合成方法は、国際公開第２００７／０１０００７号パンフレットの対象となっている。
【００５３】
過程４。
この過程の間に、先に合成されている化学式６のポリアミノ酢酸と化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとのペプチド結合が行われる。この結合は中性媒体において室温で行われる。
【００５４】
過程５。
従来の脱保護技術にしたがって、先行過程で得られた化合物から保護基Ｐを除去することで、化学式１の化合物に到達する。
【００５５】
本発明は、より特徴的には、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝−（ＣＨ2）3−ＮＨ2である化学式１の化合物、すなわち２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを塩酸塩の形状で調製する方法に関するものであり、該方法は、
ａ）［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルまたは３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピルアミノ］−酢酸のエチルエステルを得るために、ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを｛４−［（３−アミノプロピル）−ベンジルオキシカルボニルアミノ］ブチル｝−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−カルバミン酸のベンジルエステルまたはトリＢＯＣスペルミンにグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを、ベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である保護基によって保護する過程と、
ｃ）｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸あるいは｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸を得るために、過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化合物と４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとをペプチド結合する過程と、
ｅ）過程ｄ）で得られた化合物からベンジルオキシカルボニル保護基またはｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去する過程、
を含むことを特徴としている。
【００５６】
また本発明は、より特徴的には、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する方法にも関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の化合物にグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを、過程ａ）で用いたものと同一の保護基を用いて保護する過程と、
ｃ）ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝Ｈ、Ｐが過程ａ）および過程ｂ）と同じ意味を有している化学式６の化合物を得るために、過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化合物を４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程と、
ｅ）先行過程で得られた化合物からベンジルオキシカルボニル保護基またはｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去する過程、
を含むことを特徴としている。
【００５７】
本発明は、より特徴的には、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４である化学式１の化合物、すなわち２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを塩酸塩の形状で調製する方法に関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の化合物にグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを、過程ａ）で用いたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４、Ｐが過程ａ）および過程ｂ）と同じ意味を有する化学式６の化合物を得るために、過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化合物を４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程と、
ｅ）先行過程で得られた化合物からベンジルオキシカルボニル保護基またはｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去する過程、
を含むことを特徴としている。
【００５８】
より特徴的には、本発明は、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈである化学式１の化合物、すなわち２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する方法に関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の化合物にグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを、過程ａ）で用いたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ’＝Ｈ、Ｐが過程ａ）および過程ｂ）と同じ意味を有する化学式６の化合物を得るために、過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化合物を４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程と、
ｅ）先行過程で得られた化合物からベンジルオキシカルボニル保護基またはｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去する過程、
を含むことを特徴としている。
【００５９】
また、本発明は化学式６の中間体を調製する方法にも関するものである。
【００６０】
【化１１】
【００６１】
該方法は以下の過程を含むことを特徴としている。
【００６２】
ａ）ハロ酢酸アルキルを用いて酢酸モチーフを化学式５の第一級アミンにグラフトする過程。
【００６３】
【化１２】
【００６４】
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを保護基Ｐで保護する過程。
【００６５】
ｃ）化学式６のポリアミノ酢酸を得るために、過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程。
【００６６】
好ましくは、過程ｂ）で用いられるハロ酢酸アルキルはブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルあるいはヨード酢酸エチルから選択される。
【００６７】
また好ましくは、化学式５の化合物の保護基と過程ｂ）で用いられる保護基は、ベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である。
【００６８】
またより特徴的には、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝−（ＣＨ2）3−ＮＨＰ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の中間体、すなわち、｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸あるいは｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸を調製する方法に関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを化学式５の第一級アミン反応物、すなわち｛４−［（３−アミノプロピル）−ベンジルオキシカルボニルアミノ］ブチル｝−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−カルバミン酸のベンジルエステルあるいはトリＢＯＣスペルミン（これはａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝−（ＣＨ2）3−ＮＨＰ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化合物５に対応する）にグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを先行過程で選択されたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程、
を含むことを特徴としている。
【００６９】
また、より特徴的には、本発明は、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の中間体を調製する方法に関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、酢酸モチーフを、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の第一級アミン反応物にグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを先行過程で選択されたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程、
を含んでいることを特徴としている。
【００７０】
また、本発明は、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の中間体を調製する方法にも関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の第一級アミン反応物に酢酸モチーフをグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを先行過程で選択されたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程、
を含んでいることを特徴としている。
【００７１】
また、より特徴的には、本発明は、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式６の中間体を調製する方法にも関するものであり、該方法は、
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ’＝Ｈ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の第一級アミン反応物に酢酸モチーフをグラフトする過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを先行過程で選択されたものと同一の保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化する過程、
を含んでいることを特徴としている。
【００７２】
また、本発明は一般化学式１の化合物を調製するための、一般化学式６の化合物の使用にも関するものである。
【００７３】
本発明はさらに、新規生成物としての以下の化合物にも関するものである。
【００７４】
・以下の化学式の（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノ−ブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸。
【００７５】
【化１３】
【００７６】
・以下の化学式の（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−プロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸。
【００７７】
【化１４】
【００７８】
・以下の化学式の（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−｛３−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸。
【００７９】
【化１５】
【００８０】
・以下の化学式の（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−｛４−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸。
【００８１】
【化１６】
【発明を実施するための形態】
【００８２】
以下に述べる実施例は本発明の方法を例示するものであるが、本発明の範囲を限定しない。
【００８３】
Ａ）ベンジルオキシカルボニル基を用いる方法。
【実施例１】
【００８４】
塩酸塩の形状での２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製（ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ＝Ｈ）。
【００８５】
【化１７】
【００８６】
過程１。｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピルアミノ｝−酢酸のエチルエステルの調製。
【００８７】
【化１８】
【００８８】
２００ｍＬのアセトニトリルおよび２．６ｍＬ（１．８６ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン中にある６．３５ｇ（１５．４ｍｍｏｌ）の（３−アミノプロピル）−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−カルバミン酸のベンジルエステル溶液（Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．２００５，３５，１０８５）に、攪拌下で１．７０ｍＬ（２．５６ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）のブロモ酢酸エチルを室温で加えた。攪拌は４時間維持した。反応混合液を水に注ぎ、酢酸エチルによって抽出した。有機相をデカンテーションし、次に硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過、蒸発させた。次の過程で直接用いられるオイルが７．７ｇ得られた。
【００８９】
過程２。（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸のエチルエステルの調製。
【００９０】
【化１９】
【００９１】
２００ｍＬの水／アセトン（１／１）混合物および１．６８ｇ（２０ｍｍｏｌ）のＮａＨＣＯ3中にある、先に得られた７．７ｇ（１５．４ｍｍｏｌ）の｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピルアミノ｝−酢酸のエチルエステル溶液に、攪拌下において、２．４２ｍＬ（１７ｍｍｏｌ）のクロロギ酸ベンジルを滴加した。攪拌は２時間維持した。アセトンは減圧下で蒸発させ、次に混合液を１ＮのＨＣｌによって酸性化した。次に混合液を酢酸エチルによって抽出し、有機相を分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過、蒸発させた。純粋ヘプタンからヘプタン／ＡｃＯＥｔ混合物（６０／４０）への溶出勾配を用いて、残留物をシリカカラム上でのフラッシュクロマトグラフィーにかけた。対象となる画分の蒸発は６ｇの無色のオイルに相当した。収率＝６１％。ＴＬＣ ＳｉＯ2，ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９０／１０／１）Ｒｆ＝０．９。
【００９２】
過程３。（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸の調製。
【００９３】
【化２０】
【００９４】
１００ｍＬのエタノールおよび１３．８ｍＬ（１３．７ｍｍｏｌ）の１Ｎ水酸化ナトリウム溶液中にある、先行過程で得られた５．８ｇ（９．２ｍｍｏｌ）の（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸のエチルエステル溶液を、１時間にわたって還流にかけた。冷却後、２０ｍＬの１Ｎ塩酸溶液を加え、この酸性溶液を塩化メチレンによって抽出した。有機相を分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過、蒸発させた。残留物は、純粋ヘプタンから塩化メチレン／ＭｅＯＨ（９５／５）への溶出勾配によってシリカ上でフラッシュクロマトグラフィーにかけた。それから、蒸発後に、収率８５％で、透明なオイルを４．７ｇ単離した。ＴＬＣ；ＳｉＯ2；ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９０／１０）；Ｒｆ＝０．３５。
【００９５】
過程４。（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛［（５Ｓ，５ａＳ，８ａＲ，９Ｒ）−９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］−１，３−ジオキソル−５−イルカルバモイル］−メチル｝−アミノ）−プロピル］−カルバミン酸のベンジルエステルの調製。
【００９６】
【化２１】
【００９７】
１００ｍＬのアセトニトリル中にある、先行過程で得られた３．３４ｇ（５．５ｍｍｏｌ）の（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸と、２．４ｇ（５．５ｍｍｏｌ）の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシン塩酸塩の懸濁液に、１．６３ｍＬ（１１．６ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを加え、混合液を攪拌下で溶解させた。この段階で、１．７７ｇ（５．５ｍｍｏｌ）のＴＢＴＵを加えた。反応混合液を１時間にわたって室温で攪拌した。水を添加した後、酢酸エチルによって混合液を抽出し、有機相を分離し、ＮａＨＣＯ3溶液、次いでＮａＣｌ溶液で洗浄した。有機相を再び分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、蒸発させることで、白色フォームを５ｇ得た。純粋ヘプタンからヘプタン／ＡｃＯＥｔ（４０／６０）への勾配によって溶出されたシリカ上での急速なフラッシュクロマトグラフィーによって、９７％の純度を有する４．６ｇの生成物と、そして７３％の純度の０．４１ｇのもう一つの画分を得ることができた。これらの画分を集め、逆相での分取ＨＰＬＣによって精製した。カラムＣ １８、Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（６０／４０）溶出、次いでＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（４０／６０）溶出。この段階で純度が９９．８％の４．６ｇの化合物（収率＝８４．６％）が得られた。
ＴＬＣ：ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９０／１０）；Ｒｆ＝０．７５。
【００９８】
過程５。２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩の調製。
【００９９】
先行過程で得られた（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛［（５Ｓ，５ａＳ，８ａＲ，９Ｒ）−９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］−１，３−ジオキソル−５−イルカルバモイル］−メチル｝−アミノ）−プロピル］−カルバミン酸のベンジルエステル中間体（４．６ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を攪拌下かつ水素雰囲気下で、３時間にわたって１０％でパラジウム処理した４６０ｍｇの炭素を含んだ２００ｍＬのメタノールに入れた。この段階でＨＣｌ／イソプロパノールを３当量加えた。溶媒の濾過および蒸発後、残留物を無水エタノールにとり、次いで濾過し、エチルエーテルで洗浄した。３．１ｇの塩酸塩が単離された（収率６０％）。ＭＳ−ＥＳＩ ｍ／ｚ ５８５．２（ＭＨ＋）。
【実施例２】
【０１００】
塩酸塩の形状での２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製（ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３）。
【０１０１】
【化２２】
【０１０２】
過程１。｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルの調製。
【０１０３】
【化２３】
【０１０４】
実施例１の過程１で指示した操作方法を再び用いるが、今回は｛４−［（３−アミノプロピル）−ベンジルオキシカルボニルアミノ］−ブチル｝−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−カルバミン酸のベンジルエステルを用いて、オイル状の［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピルアミノ］−酢酸のエチルエステルを得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９０／９／１）Ｒｆ＝０．４５。
【０１０５】
過程２。
この中間体は直接次の変換に適用した。この変換はあらゆる点で実施例１の過程２で説明した変換と類似しているが、対応する反応物を用いる。こうして７ｇ（収率＝９６．８％）の無色オイルが得られた。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ヘプタン／ＡｃＯＥｔ（５０／５０）Ｒｆ＝０．３。
【０１０６】
過程３。｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸の調製。
【０１０７】
【化２４】
【０１０８】
実施例１の過程３で説明したものと同一の操作手法にしたがうが、先行過程で得られた化合物を用いて、純粋ＣＨ2Ｃｌ2からＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９５／５）への溶出勾配によるフラッシュクロマトグラフィーの後、３．６ｇの対応する酸（収率＝５３％）が得られた。
ＴＬＣ ＳｉＯ2，ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９５／５）Ｒｆ＝０．２４。
【０１０９】
過程４および過程５。塩酸塩の形状での２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製。
【０１１０】
【化２５】
【０１１１】
過程４。
実施例１と同様に、しかし先行過程３で調製した中間体を用いて、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとの結合によって、５３％の収率で白色フォーム状のアミド化合物が得られた。次に、ヘプタンからＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９０／９／１）混合物への溶出勾配を用いたシリカ上での急速フラッシュクロマトグラフィーを行い、次いで、Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（６０／４０）溶出、そしてＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（３５／６５）溶出によるＣ１８逆相での分取ＨＰＬＣを行い、最後にアセトニトリルの蒸発と酢酸エチルによる抽出を行った。
ＴＬＣ：ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９５／０５）；Ｒｆ＝０．３５。
【０１１２】
過程５。
この中間体を実施例１の過程５の操作手法にしたがって脱ベンジル化した。そうして、９２％の収率で２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル−アセトアミドの塩酸塩が得られた。
Ｆ＝２６７℃；ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（７２／２５／３）Ｒｆ＝０．３１；ＳＭ−ＥＳＩ ｍ／ｚ＝６４２．２（ＭＨ＋）。
【実施例３】
【０１１３】
塩酸塩の形状での２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製（ａ＝４、ｂ＝４、ｃ＝４）。
【０１１４】
【化２６】
【０１１５】
過程１および過程２。｛ベンジルオキシカルボニル−［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルの調製。
【０１１６】
過程１。
実施例１の過程１で説明した操作手法を用いて、しかし（４−アミノブチル）−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−カルバミン酸のベンジルエステルを用いて、オイル状の［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチルアミノ］−酢酸のエチルエステルを得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９０／９／１）Ｒｆ＝０．４８。
【０１１７】
過程２。
この中間体は、あらゆる点で実施例１の過程２で説明したものと類似した方法で行われる次の過程に直接適用した。こうして対応する反応物を用いることで、７５％の収率で無色オイル状の｛ベンジルオキシカルボニル−［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルを得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９５／４．５／０．５）Ｒｆ＝０．３５。
【０１１８】
過程３。｛ベンジルオキシカルボニル−［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸の調製。
【０１１９】
【化２７】
【０１２０】
実施例１の過程３で説明した操作手法にしたがい、しかし先に得られた化合物を用いることで、純粋ＣＨ2Ｃｌ2からＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９０／１０）への溶出勾配によるフラッシュクロマトグラフィーの後、８８％の収率で対応する酸を得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2， ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９０／１０）Ｒｆ＝０．５３。
【０１２１】
過程４および過程５。塩酸塩の形状での２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製。
【０１２２】
過程４。
実施例１の過程４と同様に、しかし先行過程で調製した中間体を用い、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと該中間体の結合によって、６２％の収率で白色フォーム状のアミド化合物が得られた。ＣＨ2Ｃｌ2からＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９５／５）混合物への勾配を用いたシリカ上での急速フラッシュクロマトグラフィーの後、Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（６０／４０）溶出、次いでＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（３０／７０）溶出によるＣ１８逆相での分取ＨＰＬＣに続いて、アセトニトリルの蒸発および酢酸エチルによる抽出を行うことで、以下の過程で直接用いることになる中間体を得た。ＴＬＣ：ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９５／４．５／０．５）；Ｒｆ＝０．２４。
【０１２３】
過程５。
この中間体を実施例１の過程５の操作手法にしたがって脱ベンジル化した。こうして、７８％の収率で、２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を得た。
Ｆ＝２６３℃；ＳＭ−ＤＣＩ／ＣＨ４ ｍ／ｚ＝６７０．５（ＭＨ＋）。
【実施例４】
【０１２４】
塩酸塩の形状での２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製（ａ＝４、ｂ＝３、Ｒ＝Ｈ）。
【０１２５】
【化２８】
【０１２６】
過程１および過程２。ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸のエチルエステルの調製。
【０１２７】
【化２９】
【０１２８】
過程１。
実施例１の過程１で指示した操作手法を用いて、しかし｛３−［（４−アミノブチル）−ベンジルオキシカルボニルアミノ］−プロピル｝−カルバミン酸のベンジルエステルを用いることで、オイル状の｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチルアミノ｝−酢酸のエチルエステルを得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９５／４．５／０．５）Ｒｆ＝０．２８，ＳＭ−ＥＳＩ ｍ／ｚ＝５００．３（ＭＨ＋）。
【０１２９】
過程２。
先に得られた中間体は、あらゆる点で実施例１の過程２で説明したものと類似した次の変換に直接適用した。こうして無色オイル状のベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸のエチルエステルを得た。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９５／４．５／０．５）Ｒｆ＝０．３９．ＳＭ−ＡＰＣＩ ｍ／ｚ＝６３４．３（ＭＨ＋）
【０１３０】
過程３。（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸の調製。
【０１３１】
【化３０】
【０１３２】
実施例１の過程３で説明したものと同一の操作手法にしたがって、しかし先行過程で得られた化合物を用いて、酸抽出によって収率８６％で対応する酸が得られた。
ＴＬＣ ＳｉＯ2，ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９０／１０）Ｒｆ＝０．４８。
【０１３３】
過程４および過程５。塩酸塩の形状での２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製。
【０１３４】
【化３１】
【０１３５】
過程４。
実施例１の過程４と同様に、しかし先行過程で調製された中間体を用いて、４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと該中間体の結合によって、４８％の収率で白色フォーム状のアミド化合物が得られた。ヘプタンからＡｃＯＥｔへの勾配を用いたシリカ上での急速フラッシュクロマトグラフィーの後、Ｈ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（６０／４０）溶出、次いでＨ2Ｏ／ＣＨ3ＣＮ（３５／６５）溶出によるＣ１８逆相での分取ＨＰＬＣを行い、そして最後にアセトニトリルの蒸発と酢酸エチルによる抽出を行った。ＴＬＣ：ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ（９５／４．５／０．５）；Ｒｆ＝０．３０。
【０１３６】
過程５。
得られた中間体を実施例１の過程５の操作手法にしたがって脱ベンジル化した。７９％の収率で、２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を得た。
Ｆ＝１９７℃；ＳＭ−ＥＳＩ ｍ／ｚ＝５８５．３（ＭＨ＋）。
【０１３７】
Ｂ）ｔ−ブチルオキシカルボニル基を用いる方法。
【実施例５】
【０１３８】
塩酸塩の形状での２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製（ａ＝３、ｂ＝４、ｃ＝３）。
【０１３９】
過程１。３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピルアミノ］−酢酸のエチルエステルの調製。
【０１４０】
【化３２】
【０１４１】
１２０ｍＬのアセトニトリル中にある５．１１ｇのトリＢＯＣスペルミン溶液（Ｔｅｔ．Ｌｅｔ．１９９８，３９，４３９）（１０ｍｍｏｌ、１当量）に１．７ｍＬのトリエチルアミン（１２ｍｍｏｌ、１．２当量）を加えた。そして、この溶液に１．１３ｍＬのブロモ酢酸エチル（１０ｍｍｏｌ、１当量）を攪拌下で急速に加えた。常温での１時間にわたる攪拌の後、ＮａＣｌで飽和した水（３００ｍＬ）に反応混合液を入れ、酢酸エチル（２×２００ｍＬ）によって抽出を行った。有機相の乾燥、濾過、蒸発の後、得られた残留物をＳｉＯ2上でのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した（純粋ヘプタンから純粋ＣＨ2Ｃｌ2への勾配、次にＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ−９０／１０の勾配による溶出）。３．３５ｇの無色オイル（収率＝５６％）を得た。ＴＬＣ Ｒｆ＝０．５７（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ−９０／１０）。
【０１４２】
過程２。｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルの調製。
【０１４３】
【化３３】
【０１４４】
６０ｍＬのＴＨＦ中にある３．３５ｇの先行過程１で得られた中間体（５．７ｍｍｏｌ、１当量）の室温溶液に、１ｍＬのトリエチルアミン（６．８ｍｍｏｌ、１．２当量）を加え、次に攪拌下で１．３６ｇのＢＯＣ2Ｏ（６．２ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液を加え、２時間にわたって攪拌を続けた。次に、反応混合液を水（３００ｍＬ）に入れ、酢酸エチル（３×２００ｍＬ）によって抽出した。硫酸ナトリウム上でいったん乾燥させ、濾過した有機相を蒸発させ、ＳｉＯ2上でのフラッシュクロマトグラフィー（純粋ヘプタンから純粋酢酸エチルへの勾配による溶出）を行うことで、２．５２ｇの無色オイルを得た。収率＝６４％、ＴＬＣ Ｒｆ＝０．４３（ＳｉＯ2 ヘプタン／ＡｃＯＥｔ−５０／５０）。
【０１４５】
過程３。｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸の調製。
【０１４６】
【化３４】
【０１４７】
過程２で得られたエステル中間体（２．５２ｇ、３．６ｍｍｏｌ、１当量）を５０ｍＬのＥｔＯＨ／Ｈ2Ｏ混合物と５．５ｍＬの１Ｎ水酸化ナトリウム溶液における攪拌下での還流によって３時間加熱した。冷たい水（３００ｍＬ）に入れ、１ＮのＨＣｌ（５．６ｍＬ）によって酸性化した。ＣＨ2Ｃｌ2による抽出、Ｎａ2ＳＯ4上での乾燥、濾過、蒸発の後、ＳｉＯ2上でのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した（純粋ヘプタンから純粋ＣＨ2Ｃｌ2へ、次いでＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ−９０／１０への溶出勾配）。こうして無色オイル状の２．２７ｇのテトラＢＯＣスペルミン酢酸が得られた。収率＝９４％。
ＴＬＣ Ｒｆ０．４（ＳｉＯ2 ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ−９０／１０）。（文献Ｔｅｔ．Ｌｅｔ．１９９７，３８，３２１９）。
【０１４８】
過程４および過程５。塩酸塩の形状での２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの調製。
【０１４９】
過程４。
１００ｍＬのアセトニトリル中にある、６７０ｍｇの４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（１．５４ｍｍｏｌ、１当量）および１．０２ｇの過程３で得られた中間体（１．５４ｍｍｏｌ、１当量）の攪拌されている溶液に、室温で、０．４５ｍＬのトリエチルアミン（３．２８ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。完全な溶解が観察された。そこで０．５ｇのＴＢＴＵ（１．５４ｍｍｏｌ、１当量）を加え、２時間攪拌した。次に３００ｍＬの水に反応混合液を入れ、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）によって抽出した。Ｎａ2ＳＯ4上での有機相の乾燥、濾過、蒸発の後、残留物をＳｉＯ2上でフラッシュクロマトグラフィーにかけた（純粋ヘプタンからＡｃＯＥｔへの勾配による溶出）。９２％の純度で得られた化合物を分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、Ｓｕｎｆｉｒｅ ＯＢＤ、１０μ）によって再びクロマトグラフィーにかけ、ＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ−５０／５０対ＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ−６５／３５によって溶出した。得られた水相を酢酸エチルによって再抽出し、乾燥、蒸発させることで、次の過程に直接適用する８００ｍｇの無色オイルが得られた。収率＝５０％。
ＴＬＣ ＳｉＯ2 Ｒｆ０．４（ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ／ＮＨ4ＯＨ−９０／９／１）。
【０１５０】
過程５。
２０ｍＬのＥｔＯＨ中にある、８００ｍｇの先に得られた化合物の溶液（０．７７ｍｍｏｌ、１当量）に、ＨＣｌで飽和した２０ｍＬのイソプロパノール溶液を攪拌下で加えた。攪拌は５時間にわたって維持した。混合液は真空下で蒸発させ、１０ｍＬの無水ＥｔＯＨにとって攪拌した。沈殿物が得られ、該沈殿物を濾過し、真空下で乾燥させた（５００ｍｇ）。１．５４ｇ／ＬのＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ／ＡｃＯＮＨ4と２ｍＬ／ＬのＡｃＯＨによって溶出させた分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８、Ｓｕｎｆｉｒｅ、ＯＢＤ、１０μ）による精製によって純粋な化合物を得ることができ、該化合物の溶液を凍結乾燥した。その凍結乾燥物を１０ｍＬのＭｅＯＨにとり、ＨＣｌイソプロパノール溶液でｐＨ３まで酸性化させた。得られた塩酸塩溶液を蒸発させ、無水ＥｔＯＨにとった。塩酸塩の形状で、１９０ｍｇ（収率＝３２％）の２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドが得られた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０１５１】
【特許文献１】国際公開第２００５／１００３６３号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００７／０１０００７号パンフレット
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｒが水素原子または−（ＣＨ2）c−ＮＨ2基を表し、２≦ａ，ｂ，ｃ≦５である一般化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体および該誘導体の薬学的に許容可能な塩の調製方法であり、
【化１】
化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンを、
【化２】
Ｐがアミン官能基の保護基を表し、Ｒ’がＨまたは２≦ｃ≦５である−（ＣＨ2）c−ＮＨＰ鎖を表す化学式６の化合物、
【化３】
とペプチド結合する過程を含んでいることを特徴とする方法。
【請求項２】
アミン官能基の保護基がベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基であることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
化学式１の化合物が塩酸塩の形状であることを特徴とする、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸または３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピルアミノ］−酢酸とをペプチド結合させる過程を含むことを特徴とする、塩酸塩の形状で２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項５】
４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸または（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛３−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴とする、２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項６】
４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、｛ベンジルオキシカルボニル−［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸または｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［４−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸とをペプチド結合させる過程を含むことを特徴とする、２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの四塩酸塩を調製する、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項７】
４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸または（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴とする、２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項８】
ａ）ハロ酢酸アルキルを用いて、化学式５の第一級アミン反応物に酢酸モチーフをグラフトする過程と、
【化４】
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを保護基Ｐで保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化することで、化学式６のポリアミノ酢酸を得る過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化学式６のポリアミノ酢酸を４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程と、
ｅ）先行過程で得られた化合物から保護基Ｐを除去することで、一般化学式１の化合物に到達する過程、
を含むことを特徴とする、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の一般化学式１の誘導体を調製する方法。
【請求項９】
用いられる保護基Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基であることを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
過程ａ）で用いられるハロ酢酸アルキルが、ブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルまたはヨード酢酸エチルであることを特徴とする、請求項８または請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて酢酸モチーフを｛４−［（３−アミノプロピル）−ベンジルオキシカルボニルアミノ］ブチル｝−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−カルバミン酸のベンジルエステルまたはトリＢＯＣスペルミンにグラフトすることで、［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルまたは３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピルアミノ］−酢酸のエチルエステルを得る過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを、ベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化することで、｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸あるいは｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸を得る過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化合物を４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程と、
ｅ）先行過程で得られた化合物からベンジルオキシカルボニル保護基またはｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去する過程、
を含むことを特徴とする、請求項８〜請求項１０のいずれか一つに記載の、塩酸塩の形状で２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する方法。
【請求項１２】
過程ａ）および過程ｃ）で用いられる化学式５および化学式６の化合物がａ＝３、ｂ＝４かつＲ’＝Ｈである化合物であることを特徴とする、請求項８〜請求項１０のいずれか一つに記載の、塩酸塩の形状で２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する方法。
【請求項１３】
過程ａ）および過程ｃ）で用いられる化学式５および化学式６の化合物がａ＝４、ｂ＝４かつｃ＝４である化合物であることを特徴とする、請求項８〜請求項１０のいずれか一つに記載の、塩酸塩の形状で２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する方法。
【請求項１４】
過程ａ）および過程ｃ）で用いられる化学式５および化学式６の化合物がａ＝４、ｂ＝３かつＲ’＝Ｈである化合物であることを特徴とする、請求項８〜請求項１０のいずれか一つに記載の、塩酸塩の形状で２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する方法。
【請求項１５】
ａ）ハロ酢酸アルキルを用いて、化学式５の第一級アミン反応物に酢酸モチーフをグラフトする過程と、
【化５】
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを保護基Ｐによって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化することで、化学式６のポリアミノ酢酸を得る過程、
を含むことを特徴とする、
【化６】
化学式６の化合物の調製方法。
【請求項１６】
保護基Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基であることを特徴とする、請求項１５に記載の化学式６の化合物の調製方法。
【請求項１７】
過程ａ）で用いられるハロ酢酸アルキルが、ブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルまたはヨード酢酸エチルであることを特徴とする、請求項１５または請求項１６に記載の、一般化学式６の化合物の調製方法。
【請求項１８】
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝−（ＣＨ2）3−ＮＨＰ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の第一級アミン反応物に酢酸モチーフをグラフトする過程と、
ｂ）過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを過程ａ）で選択された保護基と同じ保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を鹸化する過程、
を含むことを特徴とする、請求項１５〜請求項１７のいずれか一つに記載の、一般化学式６の化合物、つまり、｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸または｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸を調製する方法。
【請求項１９】
過程ａ）で用いられる化学式５の化合物がａ＝３、ｂ＝４かつＲ’＝Ｈの化合物であることを特徴とする、請求項１５〜請求項１７のいずれか一つに記載のａ＝３、ｂ＝４かつＲ’＝Ｈである化学式６の化合物の調製方法。
【請求項２０】
過程ａ）で用いられる化学式５の化合物がａ＝４、ｂ＝４かつｃ＝４の化合物であることを特徴とする、請求項１５〜請求項１７のいずれか一つに記載の、ａ＝４、ｂ＝４かつｃ＝４である化学式６の化合物の調製方法。
【請求項２１】
過程ａ）で用いられる化学式５の化合物がａ＝４、ｂ＝３かつＲ’＝Ｈの化合物であることを特徴とする、請求項１５〜請求項１７のいずれか一つに記載の、ａ＝４、ｂ＝３かつＲ’＝Ｈである化学式６の化合物の調製方法。
【請求項２２】
請求項１に記載の一般化学式１の化合物を調製するための、請求項１５〜請求項２１にしたがって調製される一般化学式６の化合物の使用。
【請求項２３】
以下の化学式の（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノ−ブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸。
【化７】
【請求項２４】
以下の化学式の（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−プロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸。
【化８】
【請求項２５】
以下の化学式の（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−｛３−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸。
【化９】
【請求項２６】
以下の化学式の（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−｛４−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸。
【化１０】
【請求項１】
Ｒが水素原子または−（ＣＨ2）c−ＮＨ2基を表し、２≦ａ，ｂ，ｃ≦５である一般化学式１のエピポドフィロトキシンの（ポリ）アミノアルキルアミノアセトアミド誘導体および該誘導体の薬学的に許容可能な塩の調製方法であり、
【化１】
化学式４−２の４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンを、
【化２】
Ｐがアミン官能基の保護基を表し、Ｒ’がＨまたは２≦ｃ≦５である−（ＣＨ2）c−ＮＨＰ鎖を表す化学式６の化合物、
【化３】
とペプチド結合する過程を含んでいることを特徴とする方法。
【請求項２】
アミン官能基の保護基がベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基であることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
化学式１の化合物が塩酸塩の形状であることを特徴とする、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸または３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピルアミノ］−酢酸とをペプチド結合させる過程を含むことを特徴とする、塩酸塩の形状で２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項５】
４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸または（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛３−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴とする、２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項６】
４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、｛ベンジルオキシカルボニル−［４−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸または｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［４−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノブチル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−ブチル］−アミノ｝−酢酸とをペプチド結合させる過程を含むことを特徴とする、２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの四塩酸塩を調製する、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項７】
４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンと、（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸または（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸とをペプチド結合する過程を含むことを特徴とする、２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドの塩酸塩を調製する、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項８】
ａ）ハロ酢酸アルキルを用いて、化学式５の第一級アミン反応物に酢酸モチーフをグラフトする過程と、
【化４】
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを保護基Ｐで保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化することで、化学式６のポリアミノ酢酸を得る過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化学式６のポリアミノ酢酸を４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程と、
ｅ）先行過程で得られた化合物から保護基Ｐを除去することで、一般化学式１の化合物に到達する過程、
を含むことを特徴とする、請求項１〜請求項３のいずれか一つに記載の一般化学式１の誘導体を調製する方法。
【請求項９】
用いられる保護基Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基であることを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
過程ａ）で用いられるハロ酢酸アルキルが、ブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルまたはヨード酢酸エチルであることを特徴とする、請求項８または請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて酢酸モチーフを｛４−［（３−アミノプロピル）−ベンジルオキシカルボニルアミノ］ブチル｝−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−カルバミン酸のベンジルエステルまたはトリＢＯＣスペルミンにグラフトすることで、［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸のエチルエステルまたは３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピルアミノ］−酢酸のエチルエステルを得る過程と、
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを、ベンジルオキシカルボニル基あるいはｔ−ブチルオキシカルボニル基である保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化することで、｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸あるいは｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸を得る過程と、
ｄ）過程ｃ）で得られた化合物を４−アミノ−４’−デメチルエピポドフィロトキシンとペプチド結合する過程と、
ｅ）先行過程で得られた化合物からベンジルオキシカルボニル保護基またはｔ−ブチルオキシカルボニル保護基を除去する過程、
を含むことを特徴とする、請求項８〜請求項１０のいずれか一つに記載の、塩酸塩の形状で２−｛３−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−プロピルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する方法。
【請求項１２】
過程ａ）および過程ｃ）で用いられる化学式５および化学式６の化合物がａ＝３、ｂ＝４かつＲ’＝Ｈである化合物であることを特徴とする、請求項８〜請求項１０のいずれか一つに記載の、塩酸塩の形状で２−［３−（４−アミノブチルアミノ）−プロピルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する方法。
【請求項１３】
過程ａ）および過程ｃ）で用いられる化学式５および化学式６の化合物がａ＝４、ｂ＝４かつｃ＝４である化合物であることを特徴とする、請求項８〜請求項１０のいずれか一つに記載の、塩酸塩の形状で２−｛４−［４−（４−アミノブチルアミノ）−ブチルアミノ］−ブチルアミノ｝−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する方法。
【請求項１４】
過程ａ）および過程ｃ）で用いられる化学式５および化学式６の化合物がａ＝４、ｂ＝３かつＲ’＝Ｈである化合物であることを特徴とする、請求項８〜請求項１０のいずれか一つに記載の、塩酸塩の形状で２−［４−（３−アミノプロピルアミノ）−ブチルアミノ］−Ｎ−［９−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−８−オキソ−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキサヒドロフロ［３’，４’：６，７］ナフト［２，３−ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル］−アセトアミドを調製する方法。
【請求項１５】
ａ）ハロ酢酸アルキルを用いて、化学式５の第一級アミン反応物に酢酸モチーフをグラフトする過程と、
【化５】
ｂ）先行過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを保護基Ｐによって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を塩基性媒体で鹸化することで、化学式６のポリアミノ酢酸を得る過程、
を含むことを特徴とする、
【化６】
化学式６の化合物の調製方法。
【請求項１６】
保護基Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基であることを特徴とする、請求項１５に記載の化学式６の化合物の調製方法。
【請求項１７】
過程ａ）で用いられるハロ酢酸アルキルが、ブロモ酢酸エチル、クロロ酢酸エチルまたはヨード酢酸エチルであることを特徴とする、請求項１５または請求項１６に記載の、一般化学式６の化合物の調製方法。
【請求項１８】
ａ）ブロモ酢酸エチルを用いて、ａ＝３、ｂ＝４、Ｒ’＝−（ＣＨ2）3−ＮＨＰ、Ｐがベンジルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニル基である化学式５の第一級アミン反応物に酢酸モチーフをグラフトする過程と、
ｂ）過程ａ）で得られた化合物の第二級アミンを過程ａ）で選択された保護基と同じ保護基によって保護する過程と、
ｃ）過程ｂ）で得られた化合物を鹸化する過程、
を含むことを特徴とする、請求項１５〜請求項１７のいずれか一つに記載の、一般化学式６の化合物、つまり、｛ベンジルオキシカルボニル−［３−（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸または｛ｔ−ブチルオキシカルボニル−［３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル−｛４−［ｔ−ブチルオキシカルボニル−（３−ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノプロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−プロピル］−アミノ｝−酢酸を調製する方法。
【請求項１９】
過程ａ）で用いられる化学式５の化合物がａ＝３、ｂ＝４かつＲ’＝Ｈの化合物であることを特徴とする、請求項１５〜請求項１７のいずれか一つに記載のａ＝３、ｂ＝４かつＲ’＝Ｈである化学式６の化合物の調製方法。
【請求項２０】
過程ａ）で用いられる化学式５の化合物がａ＝４、ｂ＝４かつｃ＝４の化合物であることを特徴とする、請求項１５〜請求項１７のいずれか一つに記載の、ａ＝４、ｂ＝４かつｃ＝４である化学式６の化合物の調製方法。
【請求項２１】
過程ａ）で用いられる化学式５の化合物がａ＝４、ｂ＝３かつＲ’＝Ｈの化合物であることを特徴とする、請求項１５〜請求項１７のいずれか一つに記載の、ａ＝４、ｂ＝３かつＲ’＝Ｈである化学式６の化合物の調製方法。
【請求項２２】
請求項１に記載の一般化学式１の化合物を調製するための、請求項１５〜請求項２１にしたがって調製される一般化学式６の化合物の使用。
【請求項２３】
以下の化学式の（ベンジルオキシカルボニル−｛３−［ベンジルオキシカルボニル−（４−ベンジルオキシカルボニルアミノ−ブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）−酢酸。
【化７】
【請求項２４】
以下の化学式の（ベンジルオキシカルボニル−｛４−［ベンジルオキシカルボニル−（３−ベンジルオキシカルボニルアミノ−プロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸。
【化８】
【請求項２５】
以下の化学式の（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−｛３−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ブチル）−アミノ］−プロピル｝−アミノ）酢酸。
【化９】
【請求項２６】
以下の化学式の（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−｛４−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−（３−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピル）−アミノ］−ブチル｝−アミノ）−酢酸。
【化１０】
【公表番号】特表２０１０−５４０５０６（Ｐ２０１０−５４０５０６Ａ）
【公表日】平成２２年１２月２４日（２０１０．１２．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５２６３４２（Ｐ２０１０−５２６３４２）
【出願日】平成２０年９月２３日（２００８．９．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００８／０５１７００
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０５０３６５
【国際公開日】平成２１年４月２３日（２００９．４．２３）
【出願人】（５０４２４９１４５）
【氏名又は名称原語表記】ＰＩＥＲＲＥ ＦＡＢＲＥ ＭＥＤＩＣＡＭＥＮＴ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年１２月２４日（２０１０．１２．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年９月２３日（２００８．９．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００８／０５１７００
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０５０３６５
【国際公開日】平成２１年４月２３日（２００９．４．２３）
【出願人】（５０４２４９１４５）
【氏名又は名称原語表記】ＰＩＥＲＲＥ ＦＡＢＲＥ ＭＥＤＩＣＡＭＥＮＴ
【Ｆターム（参考）】
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