抗体−エンドスタチン融合タンパク質及びそのバリアント
キメラ分子が、腫瘍治療で使用するためのエンドスタチンと、腫瘍抗原特異的結合分子の全部又は一部分とを含む。前記キメラ分子は、エンドスタチン、エンドスタチン変異体及びバリアントと、所望の腫瘍抗原に特異的な抗体又はアプタマーとを含む。癌の治療方法は前記キメラ融合分子を投与することを含む。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ抗体結合ドメインと、エンドスタチンポリペプチド、野生型エンドスタチンポリペプチドと比較してアミノ酸置換を少なくとも１個を含むエンドスタチンポリペプチド、これらのペプチド、変異体、バリアント又は断片とを含むキメラ融合分子組成物を動物被験体に治療上の有効な投与量で投与するステップと、前記動物被験体の前記腫瘍を治療するステップとを含むことを特徴とする、動物患者の腫瘍を治療する方法。
【請求項２】
前記結合ドメインは、単離された抗体、この断片又はアプタマーを含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記エンドスタチンポリペプチドは、６−４９、５０−９２、９３−１３３及び１３４−１７８番目のアミノ酸部位に１個又は２個以上の突然変異を含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記エンドスタチンポリペプチドは、９３−１３３番目のアミノ酸部位に１個又は２個以上の突然変異を含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記エンドスタチンポリペプチドは、ヒトエンドスタチンの１２５番目の部位及び／又はインテグリンモチーフにアミノ酸置換を含むヒトエンドスタチンポリペプチドであることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
１２５番目の部位の前記アミノ酸置換は、プロリンからアラニンへの置換（Ｐ１２５Ａ）であることを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記抗原結合ドメインは、単離された抗体、この断片又はアプタマーを含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記抗原結合ドメインは、１個又は２個以上の腫瘍抗原に特異的に結合することを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記腫瘍抗原は、ＨＥＲ２、ホスファターゼ及びテンシン類似体（ＰＴＥＮ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）キナーゼ、Ｅｐｈ受容体、ＨＥＲ２／ｎｅｕ腫瘍抗原、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン及びトル様受容体と、これらの断片、バリアント、アレル及び類似体とを含むことを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記エンドスタチンポリペプチド及びこのＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドは、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記エンドスタチン及びＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドのアミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記エンドスタチン及びＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチン、Ｐ１２５Ａエンドスタチン及びこれらの組み合わせの多量体を含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチン又はＰ１２５Ａエンドスタチンと、これらの組み合わせとの２量体を含むことを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗体又はこの断片は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＥ又はＩｇＤであることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記キメラ融合タンパク質は、シトキマブと、スニチニブと、ソラフェニブと、セレブレックスと、ＭＴＯＲ阻害剤と、ＡＫＴ阻害剤と、ＰＩ３Ｋ阻害剤と、ベバシズマブ（アバスチン）と、シグナル伝達阻害剤と、タモキシフェンと、トレミフェンと、ラロキシフェンと、ドロロキシフェンと、ヨードキシフェンと、酢酸メゲストロールと、アナストロゾールと、レトラゾールと、ボラゾールと、エキセメスタンと、フルタミドと、ニルタミドと、ビカルタミドと、酢酸シプロテロンと、酢酸ゴセレリンと、リュープロリドと、フィナステリドと、ハーセプチンと、メトトレキサートと、５−フルオロウラシルと、シトシンアラビノシドと、ドキソルビシンと、ダウノマイシンと、エピルビシンと、イダルビシンと、マイトマイシンＣと、ダクチノマイシンと、ミトラマイシンと、シスプラチンと、カルボプラチンと、メルファランと、クロランブシルと、ブスルファンと、シクロホスファミドと、イホスファミドと、ニトロソウレアと、チオテファンと、ビンクリスチンと、タキソールと、タキソテールと、エトポシドと、テニポシドと、アムサクリンと、イリノテカンと、トポテカンと、エポチロンと、チロシンキナーゼ阻害剤と、イレッサ又はＯＳＩ−７７４と、血管新生阻害剤と、ＥＧＦ阻害剤と、ＶＥＧＦ阻害剤と、ＣＤＫ阻害剤と、Ｈｅｒ１／２阻害剤と、増殖因子受容体に対して定められるモノクローナル抗体とのうち１種類又は２種類以上を用いて、同時に、及び／又は、別の治療で患者に投与されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記キメラ融合タンパク質は、シトキマブ、スニチニブ、ソラフェニブ、セレブレックス、ＭＴＯＲ阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ベバシズマブ（アバスチン）、シグナル伝達阻害剤及び抗ｈｅｒ２抗体を含む１種類又は２種類以上の抗体を、組み合わせて及び／又は別の治療で投与されることを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記キメラ融合タンパク質は、スニチニブ、ソラフェニブ及びアンジオスタチンを含む抗血管新生因子の１種類又は２種類以上を、組み合わせて及び／又は別の治療で投与されることを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記キメラ融合タンパク質はメトロノーム投与計画下で投与されることを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
キメラ融合分子は、抗腫瘍抗原結合ドメインと、ヒトエンドスタチンタンパク質、このペプチド、変異体、バリアント又は断片の少なくとも１個とを含むことを特徴とする、医薬品組成物。
【請求項２１】
前記エンドスタチン変異体は、ヒトエンドスタチンの１２５番目の部位に、天然又は非天然のアミノ酸及び／又はインテグリンモチーフのいずれかでのアミノ酸置換を含むことを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項２２】
１２５番目の部位の前記置換は、プロリンからアラニンへの置換（Ｐ１２５Ａ）であることを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項２３】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチン、Ｐ１２５Ａエンドスタチン及びこれらの組み合わせの多量体を含むことを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項２４】
前記抗原結合ドメインは、単離された抗体又はこの断片か、アプタマーかを含むことを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項２５】
前記抗原結合ドメインは、ＨＥＲ２／ｎｅｕ腫瘍抗原と、ホスファターゼ及びテンシン類似体（ＰＴＥＮ）と、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）キナーゼと、受容体／リガンド複合体と、受容体と、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ受容体、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、Ｅｐｈ、これらのアレル、変異体及びバリアントを含む腫瘍抗原とに結合することを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項２６】
前記受容体は、血管新生に関係する受容体、チロシンキナーゼ受容体−タンパク質、過剰増殖に関係する受容体又はシグナル伝達受容体を含むことを特徴とする、請求項２５に記載の医薬品組成物。
【請求項２７】
前記受容体は、Ｅｐｈ受容体、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン、トル様受容体、これらの変異体、バリアント、アレル及び断片を含むことを特徴とする、請求項２６に記載の医薬品組成物。
【請求項２８】
前記抗体又はこの断片は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４であることを特徴とする、請求項２３に記載の医薬品組成物。
【請求項２９】
前記抗体又はこの断片は、１本鎖、２本鎖、ダイアボディ、ミニボディ、二重特異性、多重鎖のポリクローナル、モノクローナル、キメラ及びヘテロ免疫グロブリンのタンパク質及び糖タンパク質を含むことを特徴とする、請求項２４に記載の医薬品組成物。
【請求項３０】
前記抗体又は断片は、ヒト抗体又はヒト化抗体であることを特徴とする、請求項２４に記載の医薬品組成物。
【請求項３１】
前記抗体の可変領域は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖの断片のうち１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項２４に記載の医薬品組成物。
【請求項３２】
前記エンドスタチンタンパク質、Ｐ１２５Ａエンドスタチンタンパク質、これらのペプチド、変異体、アレル、バリアント又は断片は、抗ＨＥＲ２抗原結合ドメインの３’末端に融合されることを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項３３】
前記ヒトエンドスタチンポリペプチド及びこのＰ１２５Ａヒトエンドスタチンポリペプチドは、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項２１に記載の医薬品組成物。
【請求項３４】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記エンドスタチン及びＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドのアミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項３３に記載の医薬品組成物。
【請求項３５】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記エンドスタチン及びＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項３３に記載の医薬品組成物。
【請求項３６】
抗原特異的結合ドメインと、エンドスタチンか、少なくとも１個のアミノ酸置換を含むエンドスタチンポリペプチドかとを含むキメラ分子をエンコードすることを特徴とする、核酸。
【請求項３７】
前記抗原結合ドメインは、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、Ｅｐｈ、これらのアレル、変異体及びバリアントを含む腫瘍抗原に特異的に結合することを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項３８】
前記受容体は、Ｅｐｈ受容体、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン及びトル様受容体を含むことを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項３９】
前記エンドスタチンポリペプチドは、１２５番目のアミノ酸部位のアミノ酸置換を含むヒトポリペプチド配列であることを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項４０】
１２５番目の部位の前記アミノ酸置換は、ヒトエンドスタチンポリペプチド配列（Ｐ１２５Ａエンドスタチン）のプロリンからアラニンへの置換であることを特徴とする、請求項３９に記載の核酸。
【請求項４１】
前記キメラ分子は、エンドスタチン、Ｐ１２５Ａエンドスタチン及びこれらの組み合わせの多量体を含むことを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項４２】
前記エンドスタチン分子及びこの変異体は、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項４３】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドのアミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項４４】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項３９に記載の核酸。
【請求項４５】
抗腫瘍抗原結合ドメインと、エンドスタチンタンパク質、少なくとも１個のアミノ酸置換を含むエンドスタチンタンパク質、これらのペプチド、変異体、バリアント又は断片か、複数の前記エンドスタチン分子かとを含むことを特徴とする、キメラ融合タンパク質。
【請求項４６】
前記抗原結合ドメインは、ＨＥＲ２／ｎｅｕ腫瘍抗原、腫瘍特異的抗原、受容体／リガンド複合体又は受容体に結合することを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項４７】
前記エンドスタチン変異体は、ヒトエンドスタチンの１２５番目の部位のアミノ酸置換を含むことを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項４８】
１２５番目の前記置換は、プロリンからアラニンへの置換（Ｐ１２５Ａ）及び／又はインテグリンモチーフへの置換であることを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項４９】
前記キメラタンパク質は、エンドスタチン、Ｐ１２５Ａエンドスタチン及びこれらの組み合わせの多量体を含むことを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５０】
前記受容体は、血管新生に関係する受容体、チロシンキナーゼ受容体−タンパク質、過剰増殖に関係する受容体、シグナル伝達受容体、これらのアレル、変異体、断片及びバリアントを含むことを特徴とする、請求項４６に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５１】
前記受容体は、Ｅｐｈ受容体、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン及びトル様受容体を含むことを特徴とする、請求項５０に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５２】
前記抗原結合ドメインは、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、Ｅｐｈ、これらのアレル、変異体及びバリアントを含む腫瘍抗原に特異的に結合することを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５３】
前記ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドは、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項４８に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５４】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、アミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項５３に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５５】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項５３に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５６】
前記抗原結合ドメインは、単離された抗体、この断片又はアプタマーを含むことを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５７】
前記抗体又はこの断片は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含むことを特徴とする、請求項５６に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５８】
前記抗体又は断片は、ヒト抗体又はヒト化抗体であることを特徴とする、請求項５７に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５９】
抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ特異的結合ドメインと、ヒトエンドスタチン分子及び／又は１２５番目の部位にプロリンから置換されたアラニンを有するヒトエンドスタチン分子（Ｐ１２５Ａエンドスタチン）とを含むキメラ融合分子の治療上有効量を患者に投与するステップと、前記患者を治療するステップとを含むことを特徴とする、Ｈｅｒ２の低レベルないし検出不可能レベルを示している腫瘍患者の治療方法。
【請求項６０】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチンと、１２５番目の部位にプロリンから置換されたアラニンを有するエンドスタチンを含むエンドスタチン変異体と、これらの組み合わせとの多量体を含むことを特徴とする、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
エンドスタチンドメインと、抗原特異的ドメインとを含むキメラ分子を含む組成物を動物被験体に投与するステップを含むことを特徴とする、動物被験体の腫瘍細胞をエンドスタチンの標的にする方法。
【請求項６２】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチンと、エンドスタチンの１２５番目の部位にプロリンから置換されたアラニンを含むエンドスタチン変異体と、これらの組み合わせとの多量体を含むことを特徴とする、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記抗原結合ドメインは、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、Ｅｐｈ、これらのアレル、変異体及びバリアントを含む腫瘍抗原に特異的に結合することを特徴とする、請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】
前記受容体は、Ｅｐｈ受容体、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン及びトル様受容体を含むことを特徴とする、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ抗原結合ドメインと、エンドスタチンタンパク質と、１２５番目のアミノ酸部位にプロリンから置換されたアラニンを有するエンドスタチン、これらのペプチド、変異体、バリアント又は断片とを含むキメラ融合分子を含むことを特徴とする、キット。
【請求項６６】
抗腫瘍抗原結合ドメインと、エンドスタチンタンパク質と、１２５番目のアミノ酸部位にプロリンから置換されたアラニンを有するエンドスタチン、これらのペプチド、変異体、バリアント又は断片とを含むキメラ分子をエンコードするポリヌクレオチドを含むことを特徴とする、核酸。
【請求項６７】
前記抗原結合ドメインは、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、Ｅｐｈ、これらのアレル、変異体及びバリアントを含む腫瘍抗原に特異的に結合することを特徴とする、請求項６６に記載の核酸。
【請求項６８】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチンと、１２５番目の部位にプロリンから置換されたアラニンを含むエンドスタチン変異体（Ｐ１２５Ａエンドスタチン）と、これらの組み合わせとの多量体を含むことを特徴とする、請求項６６に記載の核酸。
【請求項６９】
前記エンドスタチン及びＰ１２５エンドスタチンポリペプチドは、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項６８に記載の核酸。
【請求項７０】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドのアミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項６８に記載の核酸。
【請求項７１】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項６９に記載の核酸。
【請求項７２】
抗腫瘍抗原結合ドメインか、エンドスタチンタンパク質と、少なくとも１個のアミノ酸置換を有するエンドスタチンとか、これらのペプチド、変異体、バリアント又は断片か、複数のエンドスタチン分子かとを含むキメラ分子をエンコードするベクター又はポリヌクレオチドを含むことを特徴とする、単離された細胞。
【請求項７３】
前記抗原結合ドメインは、ＨＥＲ２／ｎｅｕ腫瘍抗原、腫瘍特異的抗原、受容体／リガンド複合体又は受容体に結合することを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項７４】
前記エンドスタチン変異体は、ヒトエンドスタチンの１２５番目の部位及び／又はインテグリンモチーフのアミノ酸置換を含むことを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項７５】
１２５番目の部位の前記置換はプロリンからアラニンへの置換（Ｐ１２５Ａエンドスタチン）であることを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項７６】
前記エンドスタチン分子及びこのＰ１２５Ａエンドスタチンは、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項７７】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドのアミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項７６に記載の単離された細胞。
【請求項７８】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項７６に記載の単離された細胞。
【請求項７９】
前記受容体は、血管新生に関係する受容体、チロシンキナーゼ受容体−タンパク質、過剰増殖に関係する受容体、シグナル伝達受容体、これらのアレル、変異体、断片及びバリアントを含むことを特徴とする、請求項７３に記載の単離された細胞。
【請求項８０】
前記抗原結合ドメインは、単離された抗体、この断片又はアプタマーを含むことを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項８１】
前記抗体又はこの断片は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含むことを特徴とする、請求項８０に記載の単離された細胞。
【請求項８２】
前記抗原結合ドメインは、ヒト抗体又はヒト化抗体であることを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項８３】
前記キメラ融合分子は、１２５番目の部位でのプロリンからアラニンへの置換と／か、ＮＧＲ及び／又はＲＧＤのモチーフの挿入と／かを含むエンドスタチン変異体と、エンドスタチンと、これらの組み合わせとの多量体を含むことを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項８４】
前記抗原結合ドメインは、Ｅｐｈ受容体、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン、トル様受容体、これらのアレル、バリアント、変異体及び断片を含む受容体に結合することを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項１】
抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ抗体結合ドメインと、エンドスタチンポリペプチド、野生型エンドスタチンポリペプチドと比較してアミノ酸置換を少なくとも１個を含むエンドスタチンポリペプチド、これらのペプチド、変異体、バリアント又は断片とを含むキメラ融合分子組成物を動物被験体に治療上の有効な投与量で投与するステップと、前記動物被験体の前記腫瘍を治療するステップとを含むことを特徴とする、動物患者の腫瘍を治療する方法。
【請求項２】
前記結合ドメインは、単離された抗体、この断片又はアプタマーを含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記エンドスタチンポリペプチドは、６−４９、５０−９２、９３−１３３及び１３４−１７８番目のアミノ酸部位に１個又は２個以上の突然変異を含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記エンドスタチンポリペプチドは、９３−１３３番目のアミノ酸部位に１個又は２個以上の突然変異を含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記エンドスタチンポリペプチドは、ヒトエンドスタチンの１２５番目の部位及び／又はインテグリンモチーフにアミノ酸置換を含むヒトエンドスタチンポリペプチドであることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
１２５番目の部位の前記アミノ酸置換は、プロリンからアラニンへの置換（Ｐ１２５Ａ）であることを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記抗原結合ドメインは、単離された抗体、この断片又はアプタマーを含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記抗原結合ドメインは、１個又は２個以上の腫瘍抗原に特異的に結合することを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記腫瘍抗原は、ＨＥＲ２、ホスファターゼ及びテンシン類似体（ＰＴＥＮ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）キナーゼ、Ｅｐｈ受容体、ＨＥＲ２／ｎｅｕ腫瘍抗原、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン及びトル様受容体と、これらの断片、バリアント、アレル及び類似体とを含むことを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記エンドスタチンポリペプチド及びこのＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドは、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項５に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記エンドスタチン及びＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドのアミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記エンドスタチン及びＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチン、Ｐ１２５Ａエンドスタチン及びこれらの組み合わせの多量体を含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチン又はＰ１２５Ａエンドスタチンと、これらの組み合わせとの２量体を含むことを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗体又はこの断片は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＥ又はＩｇＤであることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記キメラ融合タンパク質は、シトキマブと、スニチニブと、ソラフェニブと、セレブレックスと、ＭＴＯＲ阻害剤と、ＡＫＴ阻害剤と、ＰＩ３Ｋ阻害剤と、ベバシズマブ（アバスチン）と、シグナル伝達阻害剤と、タモキシフェンと、トレミフェンと、ラロキシフェンと、ドロロキシフェンと、ヨードキシフェンと、酢酸メゲストロールと、アナストロゾールと、レトラゾールと、ボラゾールと、エキセメスタンと、フルタミドと、ニルタミドと、ビカルタミドと、酢酸シプロテロンと、酢酸ゴセレリンと、リュープロリドと、フィナステリドと、ハーセプチンと、メトトレキサートと、５−フルオロウラシルと、シトシンアラビノシドと、ドキソルビシンと、ダウノマイシンと、エピルビシンと、イダルビシンと、マイトマイシンＣと、ダクチノマイシンと、ミトラマイシンと、シスプラチンと、カルボプラチンと、メルファランと、クロランブシルと、ブスルファンと、シクロホスファミドと、イホスファミドと、ニトロソウレアと、チオテファンと、ビンクリスチンと、タキソールと、タキソテールと、エトポシドと、テニポシドと、アムサクリンと、イリノテカンと、トポテカンと、エポチロンと、チロシンキナーゼ阻害剤と、イレッサ又はＯＳＩ−７７４と、血管新生阻害剤と、ＥＧＦ阻害剤と、ＶＥＧＦ阻害剤と、ＣＤＫ阻害剤と、Ｈｅｒ１／２阻害剤と、増殖因子受容体に対して定められるモノクローナル抗体とのうち１種類又は２種類以上を用いて、同時に、及び／又は、別の治療で患者に投与されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記キメラ融合タンパク質は、シトキマブ、スニチニブ、ソラフェニブ、セレブレックス、ＭＴＯＲ阻害剤、ＡＫＴ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ベバシズマブ（アバスチン）、シグナル伝達阻害剤及び抗ｈｅｒ２抗体を含む１種類又は２種類以上の抗体を、組み合わせて及び／又は別の治療で投与されることを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記キメラ融合タンパク質は、スニチニブ、ソラフェニブ及びアンジオスタチンを含む抗血管新生因子の１種類又は２種類以上を、組み合わせて及び／又は別の治療で投与されることを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記キメラ融合タンパク質はメトロノーム投与計画下で投与されることを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
キメラ融合分子は、抗腫瘍抗原結合ドメインと、ヒトエンドスタチンタンパク質、このペプチド、変異体、バリアント又は断片の少なくとも１個とを含むことを特徴とする、医薬品組成物。
【請求項２１】
前記エンドスタチン変異体は、ヒトエンドスタチンの１２５番目の部位に、天然又は非天然のアミノ酸及び／又はインテグリンモチーフのいずれかでのアミノ酸置換を含むことを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項２２】
１２５番目の部位の前記置換は、プロリンからアラニンへの置換（Ｐ１２５Ａ）であることを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項２３】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチン、Ｐ１２５Ａエンドスタチン及びこれらの組み合わせの多量体を含むことを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項２４】
前記抗原結合ドメインは、単離された抗体又はこの断片か、アプタマーかを含むことを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項２５】
前記抗原結合ドメインは、ＨＥＲ２／ｎｅｕ腫瘍抗原と、ホスファターゼ及びテンシン類似体（ＰＴＥＮ）と、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）キナーゼと、受容体／リガンド複合体と、受容体と、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ受容体、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、Ｅｐｈ、これらのアレル、変異体及びバリアントを含む腫瘍抗原とに結合することを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項２６】
前記受容体は、血管新生に関係する受容体、チロシンキナーゼ受容体−タンパク質、過剰増殖に関係する受容体又はシグナル伝達受容体を含むことを特徴とする、請求項２５に記載の医薬品組成物。
【請求項２７】
前記受容体は、Ｅｐｈ受容体、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン、トル様受容体、これらの変異体、バリアント、アレル及び断片を含むことを特徴とする、請求項２６に記載の医薬品組成物。
【請求項２８】
前記抗体又はこの断片は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４であることを特徴とする、請求項２３に記載の医薬品組成物。
【請求項２９】
前記抗体又はこの断片は、１本鎖、２本鎖、ダイアボディ、ミニボディ、二重特異性、多重鎖のポリクローナル、モノクローナル、キメラ及びヘテロ免疫グロブリンのタンパク質及び糖タンパク質を含むことを特徴とする、請求項２４に記載の医薬品組成物。
【請求項３０】
前記抗体又は断片は、ヒト抗体又はヒト化抗体であることを特徴とする、請求項２４に記載の医薬品組成物。
【請求項３１】
前記抗体の可変領域は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖの断片のうち１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項２４に記載の医薬品組成物。
【請求項３２】
前記エンドスタチンタンパク質、Ｐ１２５Ａエンドスタチンタンパク質、これらのペプチド、変異体、アレル、バリアント又は断片は、抗ＨＥＲ２抗原結合ドメインの３’末端に融合されることを特徴とする、請求項２０に記載の医薬品組成物。
【請求項３３】
前記ヒトエンドスタチンポリペプチド及びこのＰ１２５Ａヒトエンドスタチンポリペプチドは、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項２１に記載の医薬品組成物。
【請求項３４】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記エンドスタチン及びＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドのアミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項３３に記載の医薬品組成物。
【請求項３５】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記エンドスタチン及びＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項３３に記載の医薬品組成物。
【請求項３６】
抗原特異的結合ドメインと、エンドスタチンか、少なくとも１個のアミノ酸置換を含むエンドスタチンポリペプチドかとを含むキメラ分子をエンコードすることを特徴とする、核酸。
【請求項３７】
前記抗原結合ドメインは、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、Ｅｐｈ、これらのアレル、変異体及びバリアントを含む腫瘍抗原に特異的に結合することを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項３８】
前記受容体は、Ｅｐｈ受容体、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン及びトル様受容体を含むことを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項３９】
前記エンドスタチンポリペプチドは、１２５番目のアミノ酸部位のアミノ酸置換を含むヒトポリペプチド配列であることを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項４０】
１２５番目の部位の前記アミノ酸置換は、ヒトエンドスタチンポリペプチド配列（Ｐ１２５Ａエンドスタチン）のプロリンからアラニンへの置換であることを特徴とする、請求項３９に記載の核酸。
【請求項４１】
前記キメラ分子は、エンドスタチン、Ｐ１２５Ａエンドスタチン及びこれらの組み合わせの多量体を含むことを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項４２】
前記エンドスタチン分子及びこの変異体は、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項４３】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドのアミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項３６に記載の核酸。
【請求項４４】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、前記ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項３９に記載の核酸。
【請求項４５】
抗腫瘍抗原結合ドメインと、エンドスタチンタンパク質、少なくとも１個のアミノ酸置換を含むエンドスタチンタンパク質、これらのペプチド、変異体、バリアント又は断片か、複数の前記エンドスタチン分子かとを含むことを特徴とする、キメラ融合タンパク質。
【請求項４６】
前記抗原結合ドメインは、ＨＥＲ２／ｎｅｕ腫瘍抗原、腫瘍特異的抗原、受容体／リガンド複合体又は受容体に結合することを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項４７】
前記エンドスタチン変異体は、ヒトエンドスタチンの１２５番目の部位のアミノ酸置換を含むことを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項４８】
１２５番目の前記置換は、プロリンからアラニンへの置換（Ｐ１２５Ａ）及び／又はインテグリンモチーフへの置換であることを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項４９】
前記キメラタンパク質は、エンドスタチン、Ｐ１２５Ａエンドスタチン及びこれらの組み合わせの多量体を含むことを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５０】
前記受容体は、血管新生に関係する受容体、チロシンキナーゼ受容体−タンパク質、過剰増殖に関係する受容体、シグナル伝達受容体、これらのアレル、変異体、断片及びバリアントを含むことを特徴とする、請求項４６に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５１】
前記受容体は、Ｅｐｈ受容体、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン及びトル様受容体を含むことを特徴とする、請求項５０に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５２】
前記抗原結合ドメインは、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、Ｅｐｈ、これらのアレル、変異体及びバリアントを含む腫瘍抗原に特異的に結合することを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５３】
前記ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドは、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項４８に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５４】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、アミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項５３に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５５】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項５３に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５６】
前記抗原結合ドメインは、単離された抗体、この断片又はアプタマーを含むことを特徴とする、請求項４５に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５７】
前記抗体又はこの断片は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含むことを特徴とする、請求項５６に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５８】
前記抗体又は断片は、ヒト抗体又はヒト化抗体であることを特徴とする、請求項５７に記載のキメラ融合タンパク質。
【請求項５９】
抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ特異的結合ドメインと、ヒトエンドスタチン分子及び／又は１２５番目の部位にプロリンから置換されたアラニンを有するヒトエンドスタチン分子（Ｐ１２５Ａエンドスタチン）とを含むキメラ融合分子の治療上有効量を患者に投与するステップと、前記患者を治療するステップとを含むことを特徴とする、Ｈｅｒ２の低レベルないし検出不可能レベルを示している腫瘍患者の治療方法。
【請求項６０】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチンと、１２５番目の部位にプロリンから置換されたアラニンを有するエンドスタチンを含むエンドスタチン変異体と、これらの組み合わせとの多量体を含むことを特徴とする、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
エンドスタチンドメインと、抗原特異的ドメインとを含むキメラ分子を含む組成物を動物被験体に投与するステップを含むことを特徴とする、動物被験体の腫瘍細胞をエンドスタチンの標的にする方法。
【請求項６２】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチンと、エンドスタチンの１２５番目の部位にプロリンから置換されたアラニンを含むエンドスタチン変異体と、これらの組み合わせとの多量体を含むことを特徴とする、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記抗原結合ドメインは、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、Ｅｐｈ、これらのアレル、変異体及びバリアントを含む腫瘍抗原に特異的に結合することを特徴とする、請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】
前記受容体は、Ｅｐｈ受容体、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン及びトル様受容体を含むことを特徴とする、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
抗ＨＥＲ２／ｎｅｕ抗原結合ドメインと、エンドスタチンタンパク質と、１２５番目のアミノ酸部位にプロリンから置換されたアラニンを有するエンドスタチン、これらのペプチド、変異体、バリアント又は断片とを含むキメラ融合分子を含むことを特徴とする、キット。
【請求項６６】
抗腫瘍抗原結合ドメインと、エンドスタチンタンパク質と、１２５番目のアミノ酸部位にプロリンから置換されたアラニンを有するエンドスタチン、これらのペプチド、変異体、バリアント又は断片とを含むキメラ分子をエンコードするポリヌクレオチドを含むことを特徴とする、核酸。
【請求項６７】
前記抗原結合ドメインは、Ｈｅｒ２、Ｈｅｒ３、ＶＥＧＦ受容体、ＰＩキナーゼ受容体、ＰＴＥＮ、ＥＧＦ受容体、Ｍｕｃ−１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２０、Ｃｄ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＴＡＡ、ＰＳＭＡ、ｗｔ−１、Ｅｐｈ、これらのアレル、変異体及びバリアントを含む腫瘍抗原に特異的に結合することを特徴とする、請求項６６に記載の核酸。
【請求項６８】
前記キメラ融合分子は、エンドスタチンと、１２５番目の部位にプロリンから置換されたアラニンを含むエンドスタチン変異体（Ｐ１２５Ａエンドスタチン）と、これらの組み合わせとの多量体を含むことを特徴とする、請求項６６に記載の核酸。
【請求項６９】
前記エンドスタチン及びＰ１２５エンドスタチンポリペプチドは、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項６８に記載の核酸。
【請求項７０】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドのアミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項６８に記載の核酸。
【請求項７１】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項６９に記載の核酸。
【請求項７２】
抗腫瘍抗原結合ドメインか、エンドスタチンタンパク質と、少なくとも１個のアミノ酸置換を有するエンドスタチンとか、これらのペプチド、変異体、バリアント又は断片か、複数のエンドスタチン分子かとを含むキメラ分子をエンコードするベクター又はポリヌクレオチドを含むことを特徴とする、単離された細胞。
【請求項７３】
前記抗原結合ドメインは、ＨＥＲ２／ｎｅｕ腫瘍抗原、腫瘍特異的抗原、受容体／リガンド複合体又は受容体に結合することを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項７４】
前記エンドスタチン変異体は、ヒトエンドスタチンの１２５番目の部位及び／又はインテグリンモチーフのアミノ酸置換を含むことを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項７５】
１２５番目の部位の前記置換はプロリンからアラニンへの置換（Ｐ１２５Ａエンドスタチン）であることを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項７６】
前記エンドスタチン分子及びこのＰ１２５Ａエンドスタチンは、ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及び／又はＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上を含むことを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項７７】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドのアミノ（ＮＨ２−）末端及び／又はカルボキシ（ＣＯＯＨ−）末端及び／又は９３−１３３番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項７６に記載の単離された細胞。
【請求項７８】
前記ＮＧＲモチーフ（Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ）及びＲＧＤモチーフ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）の１個又は２個以上は、ヒトエンドスタチン及びヒトＰ１２５Ａエンドスタチンポリペプチドの１２５番目の部位のプロリン又はアラニンの後の１２６−１２８番目のアミノ酸部位に配置されることを特徴とする、請求項７６に記載の単離された細胞。
【請求項７９】
前記受容体は、血管新生に関係する受容体、チロシンキナーゼ受容体−タンパク質、過剰増殖に関係する受容体、シグナル伝達受容体、これらのアレル、変異体、断片及びバリアントを含むことを特徴とする、請求項７３に記載の単離された細胞。
【請求項８０】
前記抗原結合ドメインは、単離された抗体、この断片又はアプタマーを含むことを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項８１】
前記抗体又はこの断片は、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＤ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含むことを特徴とする、請求項８０に記載の単離された細胞。
【請求項８２】
前記抗原結合ドメインは、ヒト抗体又はヒト化抗体であることを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項８３】
前記キメラ融合分子は、１２５番目の部位でのプロリンからアラニンへの置換と／か、ＮＧＲ及び／又はＲＧＤのモチーフの挿入と／かを含むエンドスタチン変異体と、エンドスタチンと、これらの組み合わせとの多量体を含むことを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【請求項８４】
前記抗原結合ドメインは、Ｅｐｈ受容体、顆粒球コロニー刺激因子受容体（Ｇ−ＣＳＦ−Ｒ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦ−Ｒ）、脳由来増殖因子受容体、トランスフォーミング増殖因子受容体（ＴＧＦ−Ｒ）、線維芽細胞増殖因子受容体（ｂＦＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経成長因子受容体（ＮＧＦ−Ｆ）、コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１−Ｒ）、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ１−Ｒ）、エリスロポエチン受容体（ＥＰＯ−Ｒ）、Ｇタンパク質共役受容体、ケモカイン受容体、受容体型チロシンキナーゼ、増殖因子受容体、インテグリン、トル様受容体、これらのアレル、バリアント、変異体及び断片を含む受容体に結合することを特徴とする、請求項７２に記載の単離された細胞。
【図３Ｂ】
【図４】
【図５】
【図７】
【図１】
【図２】
【図３Ａ】
【図６】
【図４】
【図５】
【図７】
【図１】
【図２】
【図３Ａ】
【図６】
【公表番号】特表２０１０−５３１６６６（Ｐ２０１０−５３１６６６Ａ）
【公表日】平成２２年９月３０日（２０１０．９．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５１５１５８（Ｐ２０１０−５１５１５８）
【出願日】平成２０年６月２６日（２００８．６．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６８４３４
【国際公開番号】ＷＯ２００９／００３１４５
【国際公開日】平成２０年１２月３１日（２００８．１２．３１）
【出願人】（３０６０３６６６８）ユニバーシティ オブ マイアミ (10)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年９月３０日（２０１０．９．３０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年６月２６日（２００８．６．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６８４３４
【国際公開番号】ＷＯ２００９／００３１４５
【国際公開日】平成２０年１２月３１日（２００８．１２．３１）
【出願人】（３０６０３６６６８）ユニバーシティ オブ マイアミ (10)
【Ｆターム（参考）】
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