本発明は、1以上のエピトープ結合性ドメインに連結されたタンパク質足場を含む抗原結合性構築物に関し、該抗原結合性構築物は、そのうちの少なくとも1つがエピトープ結合性ドメインに由来し、そのうちの少なくとも1つが対になったVH/VLドメインに由来する少なくとも2つの抗原結合部位を有する。本発明はまた、そのような構築物の製造方法およびその使用にも関する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
1以上のエピトープ結合性ドメインに連結されたタンパク質足場を含む抗原結合性構築物であって、そのうちの少なくとも1つがエピトープ結合性ドメインに由来し、そのうちの少なくとも1つが対になったVH/VLドメインに由来する少なくとも2つの抗原結合部位を有する、上記抗原結合性構築物。
【請求項２】
式I：
【化１】

[式中、
Xは定常重鎖ドメイン2および定常重鎖ドメイン3を含む定常抗体領域を表し、
R¹、R⁴、R⁷およびR⁸は、独立に、エピトープ結合性ドメインから選択されるドメインを表し、
R²は、定常重鎖1、およびエピトープ結合性ドメインからなる群より選択されるドメインを表し、
R³は、対になったVHおよびエピトープ結合性ドメインからなる群より選択されるドメインを表し、
R⁵は、定常軽鎖、およびエピトープ結合性ドメインからなる群より選択されるドメインを表し、
R⁶は、対になったVLおよびエピトープ結合性ドメインからなる群より選択されるドメインを表し、
nは、独立に、0、1、2、3および4より選択される整数を表し、
mは、独立に、0および1より選択される整数を表し、
定常重鎖1ドメインと定常軽鎖ドメインとが結合しており、
少なくとも1つのエピトープ結合性ドメインが存在し、
R³が対になったVHドメインを表す場合、R⁶は対になったVLドメインを表し、それにより該2つのドメインは一緒に抗原に結合することが可能である]
の2つ以上の構造を含む少なくとも1つのホモ二量体を含む、抗原結合性構築物。
【請求項３】
R⁶が対になったVLを表し、R³が対になったVHを表す、請求項２に記載の抗原結合性構築物。
【請求項４】
R⁷およびR⁸のいずれか一方または両方がエピトープ結合性ドメインを表す、請求項３に記載の抗原結合性構築物。
【請求項５】
R¹およびR⁴のいずれか一方または両方がエピトープ結合性ドメインを表す、請求項２〜４のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項６】
R⁴が存在する、請求項２〜４のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項７】
R¹、R⁷およびR⁸がエピトープ結合性ドメインを表す、請求項２〜６のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項８】
R¹、R⁷およびR⁸、ならびにR⁴がエピトープ結合性ドメインを表す、請求項２〜６のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項９】
少なくとも1つのエピトープ結合性ドメインがdAbである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項１０】
dAbがヒトdAbである、請求項９に記載の抗原結合性構築物。
【請求項１１】
dAbがラクダdAbである、請求項９に記載の抗原結合性構築物。
【請求項１２】
dAbがサメdAb(NARV)である、請求項９に記載の抗原結合性構築物。
【請求項１３】
少なくとも1つのエピトープ結合性ドメインが、CTLA-4(Evibody)；リポカリン；プロテインA由来分子、例えばプロテインAのZドメイン(Affibody、SpA)、Aドメイン(Avimer/Maxibody)；熱ショックタンパク質、例えばGroEIおよびGroES、トランスフェリン(trans-body)；アンキリンリピートタンパク質(DARPin)；ペプチドアプタマー；C型レクチンドメイン(Tetranectin)；ヒトγクリスタリンおよびヒトユビキチン(affilins)；PDZドメイン；ヒトプロテアーゼインヒビターのスコーピオントキシンクニッツ(scorpion toxinkunitz)型ドメイン；およびフィブロネクチン(アドネクチン)より選択される足場に由来する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項１４】
エピトープ結合性ドメインが、Affibody、アンキリンリピートタンパク質(DARPin)およびアドネクチンより選択される足場に由来する、請求項１３に記載の抗原結合性構築物。
【請求項１５】
エピトープ結合性ドメインが、dAb、Affibody、アンキリンリピートタンパク質(DARPin)およびアドネクチンより選択される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項１６】
2以上の抗原に対する特異性を有する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項１７】
第1の結合部位が抗原上の第1のエピトープに対する特異性を有し、第2の結合部位が同じ抗原上の第2のエピトープに対する特異性を有する、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項１８】
IL-13に結合することが可能である、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項１９】
IL-13、IL-5、およびIL-4より選択される2以上の抗原に結合することが可能である、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項２０】
IL-13およびIL-4に同時に結合することが可能である、請求項１９に記載の抗原結合性構築物。
【請求項２１】
VEGF、IGF-1RおよびEGFRより選択される2以上の抗原に結合することが可能である、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項２２】
TNFに結合することが可能である、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項２３】
TNFおよびIL1-Rに結合することが可能である、請求項２２に記載の抗原結合性構築物。
【請求項２４】
タンパク質足場がIg足場である、請求項１または請求項９〜２３のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項２５】
Ig足場がIgG足場である、請求項２４に記載の抗原結合性構築物。
【請求項２６】
IgG足場が、IgG1、IgG2、IgG3およびIgG4より選択される、請求項２５に記載の抗原結合性構築物。
【請求項２７】
タンパク質足場が一価抗体を含む、請求項１または請求項９〜２６のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項２８】
IgG足場が抗体のすべてのドメインを含む、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項２９】
4つのドメイン抗体を含む、請求項９〜１２または１５〜２８のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項３０】
ドメイン抗体のうち2つが同じ抗原に対する特異性を有する、請求項２９に記載の抗原結合性構築物。
【請求項３１】
ドメイン抗体のすべてが同じ抗原に対する特異性を有する、請求項２９に記載の抗原結合性構築物。
【請求項３２】
単鎖可変ドメインのうち少なくとも1つが、1〜150アミノ酸を含むリンカーを用いてIg足場に直接的に連結されている、請求項１〜３１のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項３３】
単鎖可変ドメインのうち少なくとも1つが、1〜20アミノ酸を含むリンカーを用いてIg足場に直接的に連結されている、請求項３２に記載の抗原結合性構築物。
【請求項３４】
エピトープ結合性ドメインのうち少なくとも1つが、配列番号６〜１１のいずれか1つのリンカーもしくは「GS」、またはそれらのいずれかの組み合わせより選択されるリンカーを用いてIg足場に直接的に連結されている、請求項３３に記載の抗原結合性構築物。
【請求項３５】
エピトープ結合性ドメインのうち少なくとも1つがヒト血清アルブミンに結合する、請求項１〜３４のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項３６】
軽鎖のN末端でIg足場と連結したエピトープ結合性ドメインを含む、請求項２１〜３３のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項３７】
重鎖のN末端でIg足場と連結したエピトープ結合性ドメインを含む、請求項２１〜３３のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項３８】
軽鎖のC末端でIg足場と連結したエピトープ結合性ドメインを含む、請求項２１〜３３のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項３９】
重鎖のC末端でIg足場と連結したエピトープ結合性ドメインを含む、請求項２１〜３３のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項４０】
4つの抗原結合部位を有し、4つの抗原に同時に結合することが可能である、請求項１または２に記載の抗原結合性構築物。
【請求項４１】
医療での使用のための、請求項１〜４０のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項４２】
癌または喘息、関節リウマチもしくは変形性関節炎などの炎症性疾患の治療のための医薬の製造における使用のための、請求項１〜４１のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項４３】
治療的な量の請求項１〜４２のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物を投与するステップを含む、癌または喘息、関節リウマチもしくは変形性関節炎などの炎症性疾患に罹患した患者の治療方法。
【請求項４４】
癌または喘息、関節リウマチもしくは変形性関節炎などの炎症性疾患の治療のための、請求項１〜４２のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物。
【請求項４５】
請求項１〜４０のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物の重鎖をコードする、ポリヌクレオチド配列。
【請求項４６】
請求項１〜４０のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物の軽鎖をコードする、ポリヌクレオチド。
【請求項４７】
請求項１〜４２および４４のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物の重鎖および軽鎖をコードする1以上のポリヌクレオチド配列を含む、形質転換またはトランスフェクトされた組み換え宿主細胞。
【請求項４８】
請求項４７に記載の宿主細胞を培養するステップ、および抗原結合性構築物を単離するステップを含む、請求項１〜４０のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物の製造方法。
【請求項４９】
請求項１〜３８のいずれか１項に記載の抗原結合性構築物および製薬上許容される担体を含む医薬組成物。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０Ａ】

【図２０Ｂ】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【図４４】

【図４５】

【図４６】

【図４７】

【図４８】

【図４９】

【図５０】

【図５１】

【図５２】

【図５３】

【図５４】

【図５５】

【図５６】

【図５７】

【図５８】

【図５９】

【図６０】

【図６１】

【図６２】

【図６３】

【図６４】

【図６５】

【図６６】

【図６７】

【図６８】

【図６９】

【図７０】

【図７１】

【図７２】

【図７３】

【図７４】

【図７５】

【図７６】

【図７７】

【図７８】

【図７９】

【図８０】

【図８１】

【図８２】

【図８３】

【図８４】

【図８５】

【図８６】

【図８７】

【図８８ａ】

【図８８ｂ】

【図８９ａ】

【図８９ｂ】

【図９０】

【図９１】

【図９２】

【図９３】

【図９４】

【図９５】

【図９６】

【図９７】

【図９８】

【図９９】

【図１００】

【図１０１】

【図１０２】

【図１０３】

【図１０４】

【図１０５】

【図１０６】

【図１０７】

【図１０８】

【図１０９】

【図１１０】

【図１１１】

【図１１２】

【図１１３】

【図１１４−１】

【図１１４−２】

【図１１５】

【図１１６】

【図１１７】

【図１１８】

【図１１９】

【図１２０】

【図１２１】

【図１２２】

【図１２３】

【図１２４】

【図１２５】

【図１２６】

【図１２７】

【図１２８】

【図１２９】

【図１３０】

【図１３１】

【図１３２】

【図１３３】

【図１３４】

【図１３５】

【図１３６】

【図１３７】

【図１３８】

【図１３９】

【図１４０】

【図１４１】

【図１４２】

【図１４３】

【図１４４】

【図１４５】

【図１４６】

【図１４７】

【図１４８】

【図１４９】

【図１５０】

【図１５１】

【図１５２】

【図１５３】

【図１５４】

【図１５５】

【図１５６】

【図１５７】

【図１５８】

【図１５９】

【図１６０】

【図１６１】

【図１６２】

【図１６３】

【図１６４】

【図１６５】

【図１６６】

【図１６７】

【図１６８】

【図１６９】

【図１７０】

【図１７１】

【図１７２】

【図１７３】

【図１７４】

【図１７５】

【図１７６】

【図１７７】

【公表番号】特表２０１１−５０４７４２（Ｐ２０１１−５０４７４２Ａ）
【公表日】平成２３年２月１７日（２０１１．２．１７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３５３９６（Ｐ２０１０−５３５３９６）
【出願日】平成２０年１１月２８日（２００８．１１．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０６６４３８
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０６８６４９
【国際公開日】平成２１年６月４日（２００９．６．４）
【出願人】（３９７００９９３４）グラクソ　グループ　リミテッド (832)
【氏名又は名称原語表記】ＧＬＡＸＯ　ＧＲＯＵＰ　ＬＩＭＩＴＥＤ
【住所又は居所原語表記】Ｇｌａｘｏ　Ｗｅｌｌｃｏｍｅ　Ｈｏｕｓｅ，Ｂｅｒｋｅｌｅｙ　Ａｖｅｎｕｅ　Ｇｒｅｅｎｆｏｒｄ，Ｍｉｄｄｌｅｓｅｘ　ＵＢ６　０ＮＮ，Ｇｒｅａｔ　Ｂｒｉｔａｉｎ
【Ｆターム（参考）】