本発明は、癌及び癌障害を抑制する際での使用のためのポリペプチドに関する。処置では、非細胞傷害性プロテアーゼの使用を採用し、それは癌細胞に対して標的化され、そのように送達された場合、プロテアーゼは内在化され、癌細胞からの分泌を阻害する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌細胞からの分泌に関与するＳＮＡＲＥタンパク質を発現する癌細胞の抑制に使用するためのポリペプチドであって、ここでポリペプチドは以下：
（ｉ）該癌細胞において発現される該ＳＮＡＲＥタンパク質を切断することが可能である、非細胞傷害性プロテアーゼ；
（ｉｉ）癌細胞上の結合部位に結合することが可能である標的成分（ＴＭ）（その結合部位がエンドサイトーシスを受けて、癌細胞内のエンドソーム中に取り込まれることが可能である）；及び
（ｉｉｉ）エンドソーム内からのプロテアーゼを、エンドソーム膜を通過して、癌細胞の細胞質中にトランスロケーションさせることが可能であるトランスロケーションドメインを含み；
ただし、癌細胞が神経内分泌腫瘍細胞ではなく；
そしてポリペプチドがクロストリジウム神経毒素（ホロ毒素）ではない、ポリペプチド。
【請求項２】
請求項１記載の使用のためのポリペプチドであって、癌が以下：肺癌、腎臓癌、脳癌、乳癌、膵臓癌、結腸直腸癌、副腎癌、食道癌、リンパ腫（例、Ｂ細胞；マンテル細胞）、白血病（例、多発性ミエローマ）、急性白血病、膀胱癌、骨癌、腸癌、子宮頸癌、慢性リンパ性白血病、ホジキンリンパ腫、肝臓癌、皮膚癌、中咽頭癌、ミエローマ、前立腺（例、前立腺軟組織肉腫）、胃癌、睾丸癌、子宮癌、又はカポジ肉腫からなる群より選択される、ポリペプチド。
【請求項３】
請求項１又は２記載の使用のためのポリペプチドであって、癌細胞が以下：肺癌細胞、腎臓癌細胞、脳癌細胞、乳癌細胞、膵臓癌細胞、結腸直腸癌細胞、副腎癌細胞、食道癌細胞、リンパ腫（例、Ｂ細胞；マンテル細胞）癌細胞、白血病（例、多発性ミエローマ）癌細胞、急性白血病癌細胞、膀胱癌細胞、骨癌細胞、腸癌細胞、子宮頸癌細胞、慢性リンパ性白血病細胞、ホジキンリンパ腫細胞、肝臓癌細胞、メラノーマ皮膚癌細胞、中咽頭癌細胞、ミエローマ細胞、前立腺癌細胞。軟組織肉腫細胞、胃癌細胞、睾丸癌細胞、子宮癌細胞、又はカポジ肉腫癌細胞からなる群より選択される、ポリペプチド。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項記載の使用のためのポリペプチドであって、ＴＭが以下：ＥｒｂＢ受容体、例えばＥＧＦ受容体など；成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）受容体；インスリン様増殖因子受容体（ＩＧＦＲ）；ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）受容体；ボンベシンペプチド（ＢＢ）受容体；成長ホルモン（ＧＨ）受容体；血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）受容体；アセチルコリン（ＡＣＨ）受容体；ソマトスタチン（ＳＳＴ）受容体；コルチスタチン（ＣＳＴ）受容体；ケモカイン（Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフ）受容体、例えばＣＸＣＲ４など；ニューロピリン受容体；ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）受容体；ＶＩＰ−グルカゴン−ＧＲＦ−セクレチンスーパーファミリー受容体、例えばＰＡＣ受容体又はＶＰＡＣ受容体など；ＦＬＴ受容体；ＣＨＲＮ受容体；ＥＰＨ受容体、例えばＥＰＨＡ受容体など；ＥＦＮ受容体；ＤＬＫ１受容体、ＤＬＬ３受容体、ＦＧＦ受容体；ＪＡＧ受容体；ＬＩＦ受容体；ＮＭＢ受容体；ＮＯＴＣＨ受容体；ＰＤＧＦ受容体；ｃ−ｋｉｔ受容体；ＴＧＦ受容体；エンドセリン受容体；ケモカイン受容体；又はアンギオポエチン受容体を含む群より選択される受容体に結合する、ポリペプチド。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項記載の使用のためのポリペプチドであって、ＴＭが以下：ＥｒｂＢペプチド、例えばＥＧＦペプチドなど、アドレノメデュリン（ＡＤＭ）ペプチド、ＡＭペプチド、ＡＭＦペプチド、アンフィレグリンペプチド、ＡＰＲＩＬペプチド、アルテミンペプチド、ベータセルリンペプチド、ボンベシンペプチド、ＣＴＲペプチド、エンドセリンペプチド、エリスロポエチンペプチド、ＦＧＦペプチド、ＦＳＨペプチド、ガストリンペプチド、ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）、ＧＤＮＦペプチド、グレリンペプチド、ＧＨＲＨペプチド、Ｇ−ＣＳＦペプチド、成長ホルモンペプチド、ＨＢ−ＥＧＦペプチド、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）ペプチド、ＩＬペプチド、ケラチノサイト増殖因子ペプチド、レプチンペプチド、ＬＩＦペプチド、アルファ−メラノトロピンペプチド、ＭＧＳＡ／ＧＲＯペプチド、ＮＲＧペプチド、オキシトシンペプチド、オステオポンチン（ＯＰＮ）ペプチド、ニューレグリン−１ペプチド、ＶＩＰ又はＰＡＣＡＰペプチド、ＰＤＧＦペプチド、プロラクチンペプチド、ＳＣＦペプチド、ソマトスタチン（ＳＳＴ）ペプチド、コルチスタチン（ＣＳＴ）ペプチド、ＴＮＦペプチド、ＴＧＦペプチド、ＶＥＧＦペプチド、バソプレッシンペプチド、アンギオポエチンペプチド、Ｂ−ＣＬＬペプチド、ＢＣＧＦ−１２ＫＤペプチド、ＢＡＦＦペプチド、ガラニンペプチド、ＧＤＮＦペプチド、ＧｎＲＨペプチド、ＩＧＦ−ＩＩペプチド、ＬＨペプチド、ニューロトロフィンペプチド、サブスタンスＰペプチド、ＴＧＦ−アルファペプチド；ＩＧＦペプチド、アンギオポエチンペプチド、ＣＸＣペプチド、ＣＣＬペプチド、又は請求項４において定義する受容体に結合する抗体もしくは抗体フラグメントを含む群より選択される、ポリペプチド。
【請求項６】
非細胞傷害性プロテアーゼがクロストリジウム神経毒素Ｌ鎖又はＩｇＡプロテアーゼを含む、請求項１〜５のいずれか一項記載の使用のためのポリペプチド。
【請求項７】
トランスロケーションドメインがクロストリジウム神経毒素トランスロケーションドメインを含む、請求項１〜６のいずれか一項記載の使用のためのポリペプチド。
【請求項８】
以下：
（ｉ）癌細胞中で発現されるＳＮＡＲＥタンパク質を切断することが可能であり、該ＳＮＡＲＥタンパク質が癌細胞からの分泌に関与する、非細胞傷害性プロテアーゼ；
（ｉｉ）癌細胞上の結合部位に結合することが可能である標的成分（ＴＭ）（その結合部位がエンドサイトーシスを受けて、癌細胞内のエンドソーム中に取り込まれることが可能である）；及び
（ｉｉｉ）エンドソーム内からのプロテアーゼを、エンドソーム膜を通過して、癌細胞の細胞質中にトランスロケーションさせることが可能であるトランスロケーションドメインを含み；
ただし、癌細胞が神経内分泌腫瘍細胞ではなく；
そしてポリペプチドがクロストリジウム神経毒素（ホロ毒素）ではない、ポリペプチド。
【請求項９】
請求項８記載のポリペプチドであって、ＴＭが以下：ＥｒｂＢ受容体、例えばＥＧＦ受容体など；成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）受容体；インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）受容体；ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）受容体；ボンベシンペプチド（ＢＢ）受容体；成長ホルモン（ＧＨ）受容体；血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）受容体；アセチルコリン（ＡＣＨ）受容体；ソマトスタチン（ＳＳＴ）受容体；コルチスタチン（ＣＳＴ）受容体；ケモカイン（Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフ）受容体、例えばＣＸＣＲ４など；ニューロピリン受容体；ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）受容体；ＶＩＰ−グルカゴン−ＧＲＦ−セクレチンスーパーファミリー受容体、例えばＰＡＣ受容体又はＶＰＡＣ受容体など；ＦＬＴ受容体；ＣＨＲＮ受容体；ＥＰＨ受容体、例えばＥＰＨＡ受容体など；ＥＦＮ受容体；ＤＬＫ１受容体、ＤＬＬ３受容体、ＦＧＦ受容体；ＪＡＧ受容体；ＬＩＦ受容体；ＮＭＢ受容体；ＮＯＴＣＨ受容体；ＰＤＧＦ受容体；ｃ−ｋｉｔ受容体；ＴＧＦ受容体；エンドセリン受容体；ケモカイン受容体；又はアンギオポエチン受容体を含む群より選択される受容体に結合する、ポリペプチド。
【請求項１０】
請求項８又は請求項９記載のポリペプチドであって、ＴＭが以下：ＥｒｂＢペプチド、例えばＥＧＦペプチドなど、アドレノメデュリン（ＡＤＭ）ペプチド、ＡＭペプチド、オートクライン可動性因子（ＡＭＦ）ペプチド、アンフィレグリンペプチド、ＡＰＲＩＬペプチド、アルテミンペプチド、オートクライン可動性因子（ＡＭＦ）ペプチド、ベータセルリンペプチド、ボンベシンペプチド、ＣＴＲペプチド、エンドセリンペプチド、エリスロポエチンペプチド、ＦＧＦペプチド、ＦＳＨペプチド、ガストリンペプチド、ガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）、ＧＤＮＦペプチド、グレリンペプチド、ＧＨＲＨペプチド、Ｇ−ＣＳＦペプチド、成長ホルモンペプチド、ＨＢ−ＥＧＦペプチド、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）ペプチド、ＩＬペプチド、ケラチノサイト増殖因子ペプチド、レプチンペプチド、ＬＩＦペプチド、アルファ−メラノトロピンペプチド、ＭＧＳＡ／ＧＲＯペプチド、ＮＲＧペプチド、オキシトシンペプチド、オステオポンチン（ＯＰＮ）ペプチド、ニューレグリン−１ペプチド、ＶＩＰ又はＰＡＣＡＰペプチド、ＰＤＧＦペプチド、プロラクチンペプチド、ＳＣＦペプチド、ソマトスタチン（ＳＳＴ）ペプチド、コルチスタチン（ＣＳＴ）ペプチド、ＴＮＦペプチド、ＴＧＦペプチド、ＶＥＧＦペプチド、バソプレッシンペプチド、アンギオポエチンペプチド、Ｂ−ＣＬＬペプチド、ＢＣＧＦ−１２ＫＤペプチド、ＢＡＦＦペプチド、ガラニンペプチド、ＧＤＮＦペプチド、ＧｎＲＨペプチド、ＩＧＦ−ＩＩペプチド、ＬＨペプチド、ＮＴペプチド、サブスタンスＰペプチド、ＴＧＦ−アルファペプチド；ＩＧＦペプチド、アンギオポエチンペプチド、ＣＸＣペプチド、ＣＣＬペプチド、又は請求項９において定義する受容体に結合する抗体もしくは抗体フラグメントを含む群より選択される、ポリペプチド。
【請求項１１】
非細胞傷害性プロテアーゼがクロストリジウム神経毒素プロテアーゼ又はＩｇＡプロテアーゼを含む、請求項８〜１０のいずれか一項記載のポリペプチド。
【請求項１２】
トランスロケーションドメインがクロストリジウム神経毒素トランスロケーションドメインを含む、請求項８〜１１のいずれか一項記載のポリペプチド。
【請求項１３】
配列番号７、１０、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、又は４４のいずれか１つと少なくとも９０〜９２%、又は少なくとも９５〜９７%、又は少なくとも９８〜９９%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項８記載のポリペプチド。
【請求項１４】
請求項８〜１３のいずれか一項記載のポリペプチドをコードする核酸。
【請求項１５】
配列番号６、又は９のいずれか１つと少なくとも９０〜９４%、又は少なくとも９５〜９７%、又は少なくとも９８〜９９%の配列同一性を有する核酸配列を含む、請求項８記載のポリペプチドをコードする核酸。
【請求項１６】
患者に有効量の請求項８〜１３のいずれか一項記載のポリペプチド又は請求項１４又は１５記載の核酸を投与することを含む、患者において癌を抑制する方法。
【請求項１７】
肺癌、腎臓癌、脳癌、乳癌、膵臓癌、結腸直腸（例、結腸又は直腸）癌、副腎癌、食道癌、リンパ腫（例、Ｂ細胞；マンテル細胞）、白血病（例、多発性ミエローマ）、急性白血病、膀胱癌、骨癌、腸癌、子宮頸癌、慢性リンパ性白血病、ホジキンリンパ腫、肝臓癌、皮膚癌、中咽頭癌、ミエローマ、前立腺癌（例、前立腺軟組織肉腫）、胃癌、睾丸癌、子宮癌、又はカポジ肉腫からなる群より選択される癌を抑制するための、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
肺癌細胞、腎臓癌細胞、脳癌細胞、乳癌細胞、膵臓癌細胞、結腸直腸癌細胞、副腎癌細胞、食道癌細胞、リンパ腫（例、Ｂ細胞；マンテル細胞）癌細胞、白血病（例、多発性ミエローマ）癌細胞、急性白血病癌細胞、膀胱癌細胞、骨癌細胞、腸癌細胞、子宮頸癌細胞、慢性リンパ性白血病細胞、ホジキンリンパ腫細胞、肝臓癌細胞、皮膚癌細胞、中咽頭癌細胞、ミエローマ細胞、前立腺癌細胞、軟組織肉腫細胞、胃癌細胞、睾丸癌細胞、子宮癌細胞、又はカポジ肉腫細胞からなる群より選択される癌細胞からの分泌を抑制するための、請求項１６又は１７記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【図４４】

【図４５】

【図４６】

【図４７】

【図４８】

【図４９】

【図５０】

【図５１】

【図５２】

【図５３】

【図５４】

【公表番号】特表２０１２−５０８５８９（Ｐ２０１２−５０８５８９Ａ）
【公表日】平成２４年４月１２日（２０１２．４．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５４３８２２（Ｐ２０１１−５４３８２２）
【出願日】平成２１年１１月１７日（２００９．１１．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００９／０５１５５９
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０５５３５８
【国際公開日】平成２２年５月２０日（２０１０．５．２０）
【出願人】（５０９０３９０４６）シンタキシン　リミテッド (7)
【Ｆターム（参考）】