聴力損傷および目まいの治療用のβ−カルボリン
本発明は、β−カルボリン、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−ＢＣ）、β−カルボリン、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−ＢＣ）の製造ならびに、聴力損傷、目まい、および前庭障害の予防および治療におけるβ−カルボリン、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−ＢＣ）の使用、およびβ−カルボリンの誘導体、好適な９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−ＢＣ）の誘導体を含む医薬組成物に関する。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［技術分野］
本発明は、β−カルボリン、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−β−ＢＣ）、β−カルボリン、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−β−ＢＣ）の製造ならびに、聴力損傷、目まい、および前庭障害の予防および治療におけるβ−カルボリン、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−β−ＢＣ）の使用、及びβ−カルボリンの誘導体、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−β−ＢＣ）の誘導体を含む医薬組成物に関する。
［背景技術］
本発明に係る化合物は、急性および慢性耳疾患および聴力損傷、目まいおよび前庭障害、詳細には急性聴力損失、急性音響外傷、爆傷、慢性的騒音曝露に起因する迷路性難聴、老年性難聴、人工内耳の移植中の外傷（挿入外傷）、内耳疾患に起因する目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての前庭障害、耳鳴りおよび抗生物質および細胞増殖抑制剤に起因する聴力損傷の治療に役立つ。
【０００２】
世界保健機関（ＷＨＯ）の調査結果によると、世界中でおおよそ２億５千万人の人が軽度または重度の聴力損傷を患っている。米国では、３千万〜４千万人の人が聴力損傷および聴力損失に罹患している。治療のコストは、米国だけでも年間およそ５００億米ドルとなっている。ドイツ聴覚障害者協会は２００７年度について、１４才超のドイツ人口のおよそ１９パーセントが聴覚障害を患っていると報告した。
【０００３】
聴覚障害者の割合は、年令が上がるにつれて増大する。６５才超の人の聴力障害は、骨および関節の疾患、高血圧および心臓疾患に続いて慢性的な身体障害の第４位になる。全人口中６０才〜６９才の人の３７パーセントそして７０才代以上の人の５４パーセントが聴力障害に罹患している。
【０００４】
ドイツ連邦共和国では、おおよそ１２００万〜１５００万人の患者が、迷路性難聴を患い、およそ２９００万人の患者が耳鳴りを患っている。
「耳鳴り（Ｔｉｎｎｉｔｕｓ ａｕｒｉｕｍ：「耳の鳴り響くこと」を意味するラテン語）、短縮してｔｉｎｎｉｔｕｓ」という用語は、耳鳴りを患う人に、他の人が知覚できる外部源のない雑音を知覚させる症候または症候群を表わしている。これとは対照的に、「客観的耳鳴り」は、外部から知覚可能なまたは少なくとも測定可能な内因性の音源に基づいている。しかしながら、客観的耳鳴りは、主観的耳鳴りに比べて極めて稀である。
【０００５】
耳鳴りは、耳に作用する音とは無関係に患者が感知する音響知覚である。音響知覚は、内耳の迷路の聴覚機能障害に基づいている。したがって、耳鳴りの聴覚的印象は、患者の環境内にある音とは無関係である。患者が知覚する見かけの雑音のタイプは極めて多面的である。なかでも以下のような音響的印象が「耳鳴り」という用語で集約されている：
−ブーブーという音またはヒューヒュー鳴る音、
−歯擦音
−不規則雑音
−割れるようなまたは叩くような音。
【０００６】
雑音は、その強度が不変であることができる。しかしながらそれは、律動的な拍動性を有することができる。耳鳴りと同じ音響的印象の原因である実際の雑音がつねにあるわけではない。耳鳴りと音響的幻覚は明確に区別すべきである。
【０００７】
人口のおよそ１０〜２０パーセントが常時耳鳴りを患っている。一生涯で少なくとも一回だけこのような耳鳴りを感じる人は４０パーセント未満である。高齢者全体のおおよそ３分の１がつねに耳鳴りに気付くと申告している。発病は通常４０〜５０才であり、男女の罹患割合は同等である。耳鳴りを患う患者の数は、特に西欧先進国において増大しつづけてきた。
【０００８】
本発明は、聴力損傷、老人性難聴、目まいおよび前庭障害の予防および治療に適した薬物ならびに医薬組成物を提供するという課題に基づく。
独立クレームの技術的教示は、この課題を解決する。本発明のさらなる有利な実施形態、態様および詳細は、従属クレーム、説明および実施例に起因する。
［説明］
本発明は、一般式（１）の化合物の使用に関して、
【０００９】
【化１】
式中、
Ｒ1は、次の部分：−Ｒ12，−ＣＲ4Ｒ5Ｒ6，−ＮＲ12Ｒ13，−ＣＯ−ＮＨ−Ｒ12，−ＣＯ−Ｏ−Ｒ12の一つを表わし、
Ｒ2〜Ｒ6は互いに独立して、次の部分：−Ｒ7，−Ｒ8，−Ｒ9，−Ｒ10，−Ｒ11，−Ｈ，−ＯＨ，−ＯＲ7，−ＯＣＨ3，−ＯＣ2Ｈ5，−ＯＣ3Ｈ7，−Ｏ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＯＣ（ＣＨ3）3，−ＯＣ4Ｈ9，−ＯＰｈ，−ＯＣＨ2−Ｐｈ，−ＯＣＰｈ3，−ＳＨ，−ＳＣＨ3，−ＳＣ2Ｈ5，−ＳＣ3Ｈ7，−Ｓ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＳＣＨ（ＣＨ3）2，−ＳＣ（ＣＨ3）3，−ＮＯ2，−Ｆ，−Ｃｌ，−Ｂｒ，−Ｉ，−Ｎ3，−ＣＮ，−ＯＣＮ，−ＮＣＯ，−ＳＣＮ，−ＮＣＳ，−ＣＨＯ，−ＣＯＣＨ3，−ＣＯＣ2Ｈ5，−ＣＯＣ3Ｈ7，−ＣＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＣＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＯＣ（ＣＨ3）3，−ＣＯＯＨ，−ＣＯＣＮ，−ＣＯＯＣＨ3，−ＣＯＯＣ2Ｈ5，−ＣＯＯＣ3Ｈ7，−ＣＯＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＣＯＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＯＯＣ（ＣＨ3）3，−ＯＯＣ−ＣＨ3，−ＯＯＣ−Ｃ2Ｈ5，−ＯＯＣ−Ｃ3Ｈ7，−ＯＯＣ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＯＯＣ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＯＯＣ−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＯＮＨ2，−ＣＯＮＨＣＨ3，−ＣＯＮＨＣ2Ｈ5，−ＣＯＮＨＣ3Ｈ7，−ＣＯＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＣＯＮＨ［ＣＨ（ＣＨ3）2］，−ＣＯＮＨ［Ｃ（ＣＨ3）3］，−ＣＯＮ（ＣＨ3）2，−ＣＯＮ（Ｃ2Ｈ5）2，−ＣＯＮ（Ｃ3Ｈ7）2，−ＣＯＮ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−ＣＯＮ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−ＣＯＮ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−ＮＨＣＯＣＨ3，−ＮＨＣＯＣ2Ｈ5，−ＮＨＣＯＣ3Ｈ7，−ＮＨＣＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨＣＯ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＮＨＣＯ−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＮＨＣＯ−ＯＣＨ3，−ＮＨＣＯ−ＯＣ2Ｈ5，−ＮＨＣＯ−ＯＣ3Ｈ7，−ＮＨＣＯ−Ｏ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨＣＯ−ＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＮＨＣＯ−ＯＣ（ＣＨ3）3，−ＮＨ2，−ＮＨＣＨ3，−ＮＨＣ2Ｈ5，−ＮＨＣ3Ｈ7，−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨＣＨ（ＣＨ3）2，−ＮＨＣ（ＣＨ3）3，−Ｎ（ＣＨ3）2，−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2，−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−ＳＯＣＨ3，−ＳＯＣ2Ｈ5，−ＳＯＣ3Ｈ7，−ＳＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＳＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＳＯＣ（ＣＨ3）3，−ＳＯ2ＣＨ3，−ＳＯ2Ｃ2Ｈ5，−ＳＯ2Ｃ3Ｈ7，−ＳＯ2−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＳＯ2ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＳＯ2Ｃ（ＣＨ3）3，−ＳＯ3Ｈ，−ＳＯ3ＣＨ3，−ＳＯ3Ｃ2Ｈ5，−ＳＯ3Ｃ3Ｈ7，−ＳＯ3−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＳＯ3ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＳＯ3Ｃ（ＣＨ3）3，−ＯＣＦ3，−ＯＣ2Ｆ5，−Ｏ−ＣＯＯＣＨ3，−Ｏ−ＣＯＯＣ2Ｈ5，−Ｏ−ＣＯＯＣ3Ｈ7，−Ｏ−ＣＯＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−Ｏ−ＣＯＯＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｏ−ＣＯＯＣ（ＣＨ3）3，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ2，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨＣＨ3，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨＣ2Ｈ5，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨＣ3Ｈ7，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ［ＣＨ（ＣＨ3）2］，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ［Ｃ（ＣＨ3）3］，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ（ＣＨ3）2，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ2，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨＣＨ3，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨＣ2Ｈ5，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨＣ3Ｈ7，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ［ＣＨ（ＣＨ3）2］，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ［Ｃ（ＣＨ3）3］，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ（ＣＨ3）2，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨＣＨ3，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨＣ2Ｈ5，
−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨＣ3Ｈ7，−ＯＣ6Ｈ4−ＯＣＨ3，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ［ＣＨ（ＣＨ3）2］，−ＣＦ2Ｃｌ，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ［Ｃ（ＣＨ3）3］，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（ＣＨ3）2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−ＯＣ6Ｈ4−ＣＨ3，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ2，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨＣＨ3，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨＣ2Ｈ5，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨＣ3Ｈ7，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ［ＣＨ（ＣＨ3）2］，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ［Ｃ（ＣＨ3）3］，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（ＣＨ3）2，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−Ｏ−ＣＯ−ＯＣＨ3，−Ｏ−ＣＯ−ＯＣ2Ｈ5，−Ｏ−ＣＯ−ＯＣ3Ｈ7，−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−Ｏ−ＣＯ−ＯＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｏ−ＣＯ−ＯＣ（ＣＨ3）3，−ＣＨ2−ＣＯＯＨ，−ＣＨ2−ＣＯＯＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＯＯＣ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＯＣ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−ＣＯＣ（ＣＨ3）3．を表わし、
Ｒ7〜Ｒ13は互いに独立して次の部分：−ＣＨ2Ｆ，−ＣＨＦ2，−ＣＦ3，−ＣＨ2Ｃｌ，−ＣＨ2Ｂｒ，−ＣＨ2Ｉ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｆ，−ＣＨ2−ＣＨＦ2，−ＣＨ2−ＣＦ3，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｃｌ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｂｒ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｉ，シクロ−Ｃ3Ｈ5，シクロ−Ｃ4Ｈ7，シクロ−Ｃ5Ｈ9，シクロ−Ｃ6Ｈ11，シクロ−Ｃ7Ｈ13，シクロ−Ｃ8Ｈ15，−Ｐｈ，−ＣＨ2−Ｐｈ，−ＣＰｈ3，−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ4Ｈ9，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ5Ｈ11，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ6Ｈ13，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ（ＣＨ3）2，
−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ4Ｈ9，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ7Ｈ15，−Ｃ8Ｈ17，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，
−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ4Ｈ8−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ4Ｈ9，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2ＳＨ，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2ＳＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＳＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（Ｃ3Ｈ7）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ（Ｃ4Ｈ9）＝ＣＨ2，−Ｃ（Ｃ3Ｈ7）＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ［Ｃ（ＣＨ3）3］＝ＣＨ2，−Ｃ［ＣＨ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）］＝ＣＨ2，−Ｃ［ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2］＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ6Ｈ4−ＯＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ6Ｈ4−ＯＨ，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ4−ＯＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ4−ＯＨ，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ4Ｈ8−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ4Ｈ9，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（Ｃ3Ｈ7）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（Ｃ≡ＣＨ）2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（Ｃ≡ＣＨ）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ（Ｃ≡ＣＨ）2−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ（Ｃ≡ＣＨ）2，−ＣＨ（Ｃ≡ＣＨ）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ14Ｈ29，−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ（ＣＨ3）2；を表わし、
ならびに、上述の化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、錯体化合物、エナンチオマー、ジアステレオマーの混合物、プロドラッグ、互変異性体、ならびにラセミ化合物の、聴力損傷、目まいおよび前庭障害の予防および治療のための使用に関する。
【００１０】
本明細書で使用される「プロドラッグ」という用語は、不活性形態または比較的有効性の低い形態で投与される薬理学的物質として定義される。投与後、プロドラッグは体内で活性、有効な形態へと代謝される。
【００１１】
本明細書中で使用される「互変異性体」という用語は、１つの化学反応すなわち互変によって該平衡異性体に相互転換できる有機物質として定義される。好ましくは、塩基、酸または他の適切な物質が互変の触媒することができる。
［９−アルキル−β−カルボリンの一般的合成］
出発化合物であるノルハルマンは、例えば実施例１に記述されている通り、文献中で公知のプロトコルによって生産可能である。
【００１２】
確立したアルキル化反応によると、９位のＮ−アルキル化は、以下の反応スキームにしたがってヨウ化アルキル、臭化アルキル、塩化アルキル、メシル酸アルキル、トシル酸アルキルまたは他のアルキル化試薬から結果としてもたらされる。
【００１３】
【化２】
ＬＧは離脱基を表わす。アルキル化反応は好ましくは塩基を触媒とする。
アルキル化のための一般的反応プロトコル：
不活性ガス雰囲気下でＤＭＦ、ＴＨＦ、塩化メチレンなどの乾燥溶媒中に１モル当量のノルハルマンを溶解する。余剰の強塩基、好ましくは水素化ナトリウム（およそ２モル当量）を加えた結果として、低温（−７８℃〜０℃）で脱プロトン化が起こる。乾燥溶媒中に溶解することのできるアルキル化試薬１．０〜１．２モル当量も同様に０℃未満の温度で添加される。一晩混合物を撹拌し、これにより反応溶液の温度は室温まで上昇することができる。当業者にとって公知の要領で処理が行なわれる。未変換ノルハルマンを、イオン交換クロマトグラフィまたはイオン対抽出により除去することができる。通常は、収量は、理論的収量の３０〜７５パーセントの範囲内である。
【００１４】
以下の化合物が、上述のアルキル化にしたがって合成された。
【００１５】
【化３】
［１，６−二置換β−カルボリンの一般的合成］
【００１６】
【化４】
インドール誘導体を、対応するアルデヒドと反応させて上述の反応スキームにしたがって１，６−二置換β−カルボリンを得た。
【００１７】
これに関して、０．１モルのインドール誘導体をＤＭＦ中に溶解し、０．１２モルのアルデヒドを撹拌と共に添加した。１６時間室温で反応混合物を撹拌した。溶媒の除去後、結果として得た固体をトルエン中で２回、再結晶させ、乾燥させた。さらなる合成ステップでは、トルエン中で再結晶させ乾燥させた固体０．０７モルを６００ｍｌのクメン中に溶解し、９０分間、窒素雰囲気中で２．６グラムのＰｄ／Ｃ（１０％）と共に還流加熱した。１００ｍｌのエタノール添加後、高温溶液を濾過し、石炭（ｃｏａｌ）を３０ｍｌの高温エタノールにより３回抽出した。組合せた液体画分を真空下で溶媒から解放し、残渣をトルエン中で結晶化させてノルハルマンの１，３−二置換誘導体を得た。
【００１８】
Ｒ3が水素原子である場合には、対応する１−置換β−カルボリンが得られる。
閉環反応後、９位のＮ−アルキル化が、塩基、好ましくは水素化物、そして後続するアルキル化試薬例えばヨウ化アルキルの添加によって実施される。詳細なプロトコルは、実験の項に含まれる。このプロトコルにしたがって、以下の化合物が合成された。
【００１９】
一般構造式（ＩＩ）−（Ｖ）および（ＸＸＩ）の以下の化合物が好適である：
【００２０】
【化５】
本発明に係る９−アルキル−β−カルボリンは、意外にも、聴力損傷、目まいおよび前庭障害ならびに他の耳疾患に対する薬理学的効果を示し、したがって、本発明によれば聴力損傷、目まい、および前庭障害の予防及び治療のために使用される。聴力損傷、目まい、および前庭障害という適応症には、特に、迷路性難聴、老人性難聴、急性聴力損失、聴力喪失、人工内耳の移植中の外傷（挿入外傷）、慢性的騒音曝露に起因する迷路性難聴、急性音響外傷、回転性目まい発作、聴力損傷に起因する吐き気および嘔吐、内耳疾患に起因する目まい、メニエール病に関連したおよび／またはその一症候としての目まい、メニエール病に関連したおよび／またはその一症候としての前庭障害、耳鳴りおよび抗生物質、例えば、例えばペニシリンＶ、プロピシリン、アジドシリンのようなペニシリン類；例えばアンピシリン、アモキシシリンのようなアミノペニシリン類、；例えばセファクロール、セフラジンのようなセファロスポリン類、；例えばリンコマイシン、クリダマイシンのようなリンコマイシン類、；例えばドキシサイクリン、テトラサイクリンのようなテトラサイクリン類、；例えばメトロニダゾールのようなニトロイミダゾール、；例えばエリスロマイシンのようなマクロリド類、；例えばゲンタマイシン、ストレプトマイシンのようなアミノグリコシド、および細胞増殖抑制剤、例えばアクチノマイシンＤ、アミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、プリンのアンタゴニスト類およびピリミジン塩基類、アントラサイクリン類、アロマターゼ阻害剤、アスパラギナーゼ、抗エストロゲン剤、ベキサロテン、ブレオマイシン、ブセレリン、ブスルファン、カンプトテシン誘導体類、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、シクロホスファミド、シタラビン、サイトシナラビノシド、アルキル化細胞増殖抑制剤、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エピルビシン、エストラムスチン、エトポシド、エキセメスタン、フルダラビン、フルオロウラシル、葉酸アンタゴニスト類、ホルメスタン、ゲムシタビン、グルココルチコイド類、ゴセレリン、ホルモン類およびホルモンアンタゴニスト類、ハイカムチン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イフォスファミド、イマチニブ、イリノテカン、レトロゾール、ロイプロレリン、ロムスチン、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキセート、ミルテフォシン、マイトマイシン、有糸分裂阻害物質、ミトキサントロン、ニムスチン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペントスタチン、プロカルバジン、タモキシフェン、テモゾロミド、テニポシド、テストラクトン、チオテパ、チオグアニン、トポイソメラーゼ阻害物質、トポテカン、トレオスルファン、トレチノイン、トリプトレリン、トロフォスファミド、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、細胞増殖抑制性抗生物質に起因する聴力損傷も含まれる。
【００２１】
適応症つまり聴力損傷および聴力損失は騒音により誘発される可能性もあり、並びに／または急性音響外傷および／もしくは爆傷と関連する。例えば急性音響外傷のような音響外傷または爆傷の最も頻繁に挙げられる要因は、職場および余暇時間中の騒音公害である。
【００２２】
耳鳴りおよび聴力損傷は、同様に、血管虚血、自己免疫障害、感染病、耳硬化症および頭蓋外傷に基づくものである可能性もある。したがって本発明は同様に、急性音響外傷、爆傷、騒音公害、血管虚血、自己免疫障害、感染病および頭蓋外傷を原因とする聴力損傷および聴力損失にも関する。
【００２３】
メニエール病に関連する目まいは、この形の目まいに内耳が参与していることから、本発明にしたがって対応可能な適応症である。前庭器官として迷路は内耳の一部であることから、メニエール病に関連する目まいは平衡機能不全にもあてはまる。メニエール病又はモルブス（Ｍｏｒｂｕｓ）メニエールは、突然発生する回転性目まい発作、吐き気、嘔吐、耳の中のブンブン音（耳鳴り）および片側聴力損失の形で現われる。昼夜問わずいつでも認識可能な原因無く発生することができるメニエール病又はモルブス（Ｍｏｒｂｕｓ）メニエールの疾病の特徴は、嘔吐に至る吐き気を伴う突発性回転性目まい発作である。これらは、数分乃至数時間持続し、異なる長さの間隔をおいて反復する。目まいは非常に強いため、患者はもはや自立状態にあり続けることができない。さらに、罹患した耳の中のブンブン音（耳鳴り）および圧力感に関連する変動性（一時的に発生する）聴力損失が存在する。
【００２４】
β−カロチンの環系の９位（Ｒ1）および６位（Ｒ3）における置換基が好ましい。Ｒ1の置換パターンは好ましくは、アルキル置換基を含み、特に好適であるのはメチル置換基である。Ｒ2およびＲ3部分は、特に好適なアルキル置換基、ハロゲン化物およびアルコキシ置換基を含む。Ｒ3は好ましくはアルコキン部分、例えば−ＯＣＦ3，−ＯＣＨ2−ＣＨ2Ｆ，−ＯＣＨ2−ＣＦ3，−ＯＣＨ2−ＣＨ2Ｃｌ，シクロ−ＯＣ3Ｈ5，シクロ−ＯＣ5Ｈ9，シクロ−ＯＣ6Ｈ11，−ＯＰｈ，−ＯＣＨ2−Ｐｈ，−ＯＣＨ3，−ＯＣ2Ｈ5，−ＯＣ3Ｈ7，−ＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＯＣ4Ｈ9，−ＯＣ5Ｈ11，−ＯＣＨ（Ｃ2Ｈ5）2，−ＯＣ6Ｈ13，−ＯＣＨ＝ＣＨ2，−ＯＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＯＣ7Ｈ15，−ＯＣ8Ｈ17，−ＯＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＯＣＨ2ＯＨ，−ＯＣＨ2−ＣＨ2ＮＨ2，−ＯＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＯＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＯＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＯＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＯＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ．である。
【００２５】
Ｒ1は好ましくは、最高６個の炭素原子、さらに好ましくは最高４個の炭素原子を有するアルキル部分である。
物質９−メチル−β−カルボリンおよび９−フルオルエチル−β−カルボリンが特に好ましい。
【００２６】
好ましい化合物は次の通りである。
【化６】
本発明の化合物及び特に好適な一般構成式（ＩＩ）−（ＸＸ）の化合物を、急性および慢性耳疾患および聴力損傷、目まいおよび前庭障害、詳細には急性聴力損失、急性音響外傷、慢性的騒音曝露に起因する迷路性難聴、老年性難聴、人工内耳の移植中の外傷（挿入外傷）、内耳疾患に起因する目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての前庭障害、耳鳴りおよび抗生物質および細胞増殖抑制剤に起因する聴力損傷の治療および／または予防用の医薬調合物の製造のために使用することができる。
【００２７】
本発明に係る化合物を、ニートでまたは薬理効果のある塩の形で投与することができる。本発明の化合物は、アルカリ性を有することができることから、本発明の化合物の塩を、確立された方法によって生成することができる。
【００２８】
本発明の化合物と酸付加塩を形成する酸としては、以下の酸を列挙することができる：硫酸、スルホン酸、リン酸、硝酸、亜硝酸、過塩素酸、臭化水素酸、塩酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、シュウ酸、グルコン酸（グリコン、デキストロン酸）、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、ジヒドロキシ酒石酸（ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシプロパン酸）、フマル酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、マロン酸、ヒドロキシマレイン酸、ピルビン酸、フェニル酢酸、（ｏ−、ｍ−、ｐ−）トルイル酸、安息香酸、ｐ−アミノ安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、エチレンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフチルスルホン酸、ナフチルアミノ−スルホン酸、スルファニル酸、カンファースルホン酸、キナ酸（キニーネ酸）、ｏ−メチル−マンデル酸、水素ベンゼンスルホン酸（ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｐｈｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、ピクリン酸（２，４，６−トリニトロフェノール）、アジピン酸、ｄ−ｏ−トリル−酒石酸、例えばメチオニン、トリプトファン、アルギニンおよび、詳細には、例えばグルタミンン酸またはアスパラギン酸などのような酸性アミノ酸類などのようなアミノ酸類。
【００２９】
化合物のタイプに応じて、ベタイン形態が可能である。
本発明はさらに、本発明に係る少なくとも１つの化合物または本発明に係る少なくとも１つの化合物の塩を使用することによって製造された医薬組成物にも関する。
【００３０】
本発明の少なくとも１つの化合物の他に、医薬組成物は、薬理学的に許容できる担体、賦形剤、および／または溶媒を含む。
このような製剤は、吸入または静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、皮膚粘膜、経口、直腸、経皮、局所、口腔、皮内（ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌ）、胃内、皮内（ｉｎｔｒａｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、鼻腔内、口腔内、経皮、または舌下投与に適している。中耳内への投与または注入ならびに鼓膜に対する局所的投与が特に好ましい。
【００３１】
医薬組成物は、経皮投与系（バンドエイド、フィルム）、点滴剤、丸薬、錠剤、フィルム錠剤、層錠剤、ジェル、軟こう、シロップ、顆粒、座薬、エマルジョン、分散、マイクロカプセル、カプセル、粉末または注射液の形で製造され投与可能である。リポリーム、ジェルおよびエマルジョンの形での医薬製剤が好ましい。
【００３２】
耳は、次のようにできている。音響道が耳介から内耳まで通じる。音響道は、鼓膜で終わる。耳の音響道の部分は外耳と呼ばれる。エウスタキー管に連結される空間であるいわゆる中耳は、外耳の背後にある。中耳は片側では鼓膜によって、そして隣接する側で楕円形および円形の窓により分離される。内耳と呼ばれる空間が両方の窓の後ろに続く。内耳は、耳のいくつかの器官、なかでもいわゆる蝸牛を収容する。蝸牛は、蝸牛自体、コルチ器を含む。蝸牛ならびにコルチ器は、正円窓の隣に位置する。さらに、蝸牛は聴神経に連結される。
【００３３】
こうして、正円窓の膜は、内耳空間に対する生物学的障壁であり、聴力損傷の局所的療法にとって最大の障害物となる。投与された薬物は、内耳空間内に入るために正円窓の膜を通過しなければならない。操作により正円窓の膜が損傷を受けることになるため、正円窓の膜を通して機械的−機構的に薬物を適用することはできない。しかしながら、外科的例えば鼓膜を通した注入により、正円窓の膜まで薬物を局所的に送達することはでき、このとき薬物は正円窓の膜に浸透することができる。聴覚器官の感覚細胞（内部および外部有毛細胞）は、蝸牛の内側に局在化されており、聴覚器官の感覚細胞（内部および外部有毛細胞）の全数がコルチ器と呼ばれる。有毛細胞は、あらゆる原因（年令、例えば抗生物質および細胞増殖抑制剤などの薬物）の迷路性難聴および耳鳴りにおいて最初に損傷を受ける。正円窓は、蝸牛内の区画である鼓室階および前庭階で終わる。鼓室階および前庭階には外リンパ液と内リンパ液が満たされ、そして有毛細胞は外リンパ液に直接接触している。したがって正円窓から入る物質は、外リンパ液中に分散され、このようにして有毛細胞に到達するだろう。さらに外リンパ系は迷路と接触した状態にある。こうして薬物は蝸牛の外リンパ液を介して、迷路すなわち平衡器官の外リンパ液にも同様に到達する。
【００３４】
したがって、正円窓の膜において局所的に薬物を適用するのに適した全ての医薬製剤が好適である。医薬製剤が正円窓の膜を通るβ−カルボリンの通過を支援する膜浸透増強剤を含むなら、さらに好ましい。したがって、液体またはジェル様の製剤が特に好ましい。当然のことながら、薬物を経口投与することも可能である。
【００３５】
液体製剤は、溶液、懸濁液、スプレーおよびエマルジョン、例えば非経口注射のための水ベース、または水−プロピレングリコールベースの注射液を含む。
好ましくは低融点ろう、脂肪酸エステルおよびグリセリドが、座薬の調製に利用される。
【００３６】
あらゆる種類の投与について、医薬組成物は、治療的効果を達成するのに充分な濃度のβ−カルボリン、そして必要ならば無機または有機、液体または固体の薬学的に許容できる賦形剤を含む。中耳内での局所投与に適した医薬組成物は、ニートでまたは賦形剤と共にβ−カルボリンを含む凍結乾燥製剤などの、中耳内投与前に調製することができる水溶液または懸濁液を含む。医薬組成物にはさらに、生分解性または非生分解性の水性または非水性またはミクロスフェアに基づいたゲルを含む。生分解性または非生分解性の水性または非水性またはミクロスフェアに基づいたゲルの例としては、ポロキサマー、ヒアルロン酸塩、キシログルカン、キトサン、ポリエステル、ポリラクチド、ポリグリコリドまたはそれらのコポリマー類ＰＬＧＡ、酢酸スクロースイソブチレート、グリセロールモノオレエートを含む。腸内または非経口投与に適した医薬組成物には、上記で記述した通りの錠剤またはゼラチンカプセルまたは水溶液または懸濁液を含む。
【００３７】
医薬組成物は、減菌することが可能であり、並びに／またはアジュバント、例えば保存料、安定剤、保湿剤および／もしくは乳化剤、浸透圧調節用塩および／もしくは緩衝液を含むことができる。本発明の医薬組成物は、所望される場合、さらなる活性物質を含むことができる。医薬組成物を、先行技術から公知の任意の一般的方法、例えば配合、顆粒化、調合（ｃｏｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎｇ）、溶解および凍結乾燥によって製造することができ、およそ０．０１〜１００パーセント、好ましくは０．１〜５０パーセントそして凍結乾燥物として最高１００パーセントのβ−カルボリンを含むことができる。
【００３８】
好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物は、局所医薬品として製剤化される。耳性医薬品用の適切な賦形剤は、薬学的に許容でき、β−カルボリンおよび／または任意の他の活性物質、例えば塩化ナトリウム、アルコール、植物油、ベンジルアルコール、アルキルグリコール、ポリエチレングリコール、三酢酸グリセリン、ゼラチン、例えばラクトースまたはテンプンのような炭水化物、炭酸マグネシウム（マグネシア、チョーク）、ステアリン酸塩（ワックス）、タルクおよびペトロラタム（ワセリン）と反応しない有機または無機物質である。記述された組成物は、減菌することが可能であり並びに／または例えば潤滑剤のようなアジュバント、例えばチオマーサルのような保存料（例えば５０重量パーセント）、安定剤および／もしくは保湿剤、乳化剤、浸透圧調節用塩、緩衝物質、着色剤および／もしくは着香剤を含むことができる。これらの組成物は同様に、該当する場合には１つまたは複数のさまざまな活性物質を含むこともできる。本発明に係る耳性組成物は、例えば、抗生物質、例えばステロイド、コルチゾン、鎮痛剤、アンチピリン、ベンゾカイン、プロカインなどの抗炎症性活性物質、などの他の生物学的活性物質を含む、さまざまな物質を含むことができる。
【００３９】
本発明に係る局所医薬品用の組成物は、他の薬学的に許容できる物質を含むことができる。本発明の好ましい実施形態においては、耳、耳の中、または耳管の内部に適用された場合に、血液循環系または中枢神経系へのβ−カルボリンの放出および場合によっては任意の他の１つまたは複数の活性物質の放出を増強することのない局所用賦形剤が使用される。通常は、例えば、局所用賦形剤が、全身的循環系内の粘膜全体にわたる経皮的移送を増強するだろう有意な排除特性を全く示さないことが好ましい。このような賦形剤は、炭化水素酸、無水吸収剤例えば親水性ペトロラタム（ヴァセリン（Ｖａｓｅｌｉｎｅ））および無水ラノリン（例えばアクアフォー（Ａｑｕａｐｈｏｒ））そして例えばラノリンおよびコールドクリーム（Ｃｏｌｄ Ｃｒｅａｍ）のような水−油エマルジョンをベースとする物質を含む。さらに好ましいのは、通常水溶性である全ての賦形剤ならびに水中油形エマルジョン（クリームまたは親水性軟こう）をベースとする物質、および例えばポリエチレングリコール系賦形剤のような水溶性ベースの物質およびメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースなどのさまざまな物質でゲル化された水溶液を含む、実質的に非排除性の賦形剤である。
【００４０】
錠剤またはカプセルの形での経口投与のためには、本発明のβ−カルボリンを、結合剤、例えばコーンスターチ、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース；例えばラクトース、サッカロース、グルコース、マンニトール、ソルビトールおよび他の還元および非還元糖類、微結晶性セルロース、硫酸カルシウムまたはリン酸水素カルシウムなどの充填剤；例えばステアリン酸マグネシウム、タルク粉またはシリカ、ステアリン酸、硫酸ステアリルナトリウム、ベハン酸グリセリル、ステアリン酸カルシウムおよび類似物などの潤滑剤；例えばジャガイモテンプンまたはグリコール酸ナトリウム−テンプンなどの崩壊剤；例えばドデシル硫酸ナトリウムなどの保湿剤；着色剤；着香剤；ゼラチン；甘味料；例えばアラビアゴムなどの天然および合成ゴム、トラガカントまたはアルギン酸塩；緩衝塩；カルボキシメチルセルロース；ポリエチレングリコール；ワックスなどを含むリストから選択された任意の薬学的に許容できる非毒性アジュバントと組合わせ得る。
【００４１】
錠剤を例えば、アラビアゴム、ゼラチン、タルク粉、二酸化チタンなどを含む濃縮糖溶液でコーティングすることができる。別の実施形態において、錠剤を、軽量揮発性有機溶媒または有機溶媒の混合物中に可溶であるポリマーでコーティングすることができる。好ましい実施形態において、本発明のβ−カルボリンは、即時放出用錠剤としてまたは徐放用錠剤として製剤化される。即時放出用の剤形は、６０分以下の比較的短い時間内にβ−カルボリン総量の大部分の放出を許し、β−カルボリンの急速な吸収を可能にする。経口剤形のための徐放性製剤は、より長時間にわたる遅延放出を可能にし、より長時間にわたる遅延放出を可能することによってβ−カルボリンの治療的に有効な血漿レベルに到達し及び／またはこの治療的に有効な血漿レベルをより長時間にわたり安定した状態に保ち及び／またはβ−カルボリンの他の薬物動態特性を修正する。
【００４２】
本発明のβ−カルボリンを、例えば植物油またはポリエチレングリコールと混合することによって、軟質ゼラチンカプセルとして製剤化することができる。硬質ゼラチンカプセルは、例えばラクトース、サッカロース、マンニトール、例えばジャガイモテンプン、コーンスターチのようなテンプンまたはアミロペクチン、セルロース誘導体またはゼラチンのうちのような錠剤用上述のアジュバントのいずれか１つを使用することにより、顆粒形態のβ−カルボリンを含むことができる。本発明のβ−カルボリンの液体および、半液体形態を硬質ゼラチンカプセル内に充填することもできる。
【００４３】
本発明のβ−カルボリンを、例えばポリグリコール酸／乳酸（ＰＧＬＡ）で作られたマイクロカプセルまたはマイクロビーズ内に導入することもできる。医薬組成物からの本発明のβ−カルボリンの制御放出を、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸のコポリマーとポリグリコール酸のコポリマー、ポリ−ε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオエトエステル、ポリアセタール、ポリヒドロプラン、ポリシアノアクリレートおよびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーを含むリストから選択された生体適合性ポリマーを使用することによって達成することができる。
【００４４】
本発明の別の実施形態において、β−カルボリンは経口液体製剤として提供される。経口投与のための液体製剤を、溶液、シロップ、エマルジョンまたは懸濁液の形で提供可能である。代替的には、使用前に水または別の適切な賦形剤を用いて乾燥経口製剤の再構成する経口液体製剤を調製することができる。経口投与のための製剤は、本発明のβ−カルボリンそして場合によっては他の活性物質の制御または遅延放出が達成されるように、適切に製剤化されることができる。
【００４５】
液体形態での経口投与が意図されている場合、本発明のβ−カルボリンは、例えばエタノール、グリセリン、水；、例えばソルビトールシロップ、セルロース誘導体類または食用水素化脂質などの懸濁剤；例えばレシチンまたはアラビアゴムなどの乳化剤；例えばアーモンド油、油性エステル、エタノールまたは分画された植物油などの非水性賦形剤；例えばメチル−またはプロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾエートまたはソルビン酸などの保存料などのような非毒性で薬理学的に許容できる不活性賦形剤と混合可能である。例えばブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルオール、没食子酸プロピル、アスコルビン酸ナトリウム、クエン酸などの酸化防止剤などの安定剤は、剤形を安定化するために使用されることができる。例えば、溶液は、およそ０．２重量パーセントから最高およそ２０重量パーセントのβ−カルボリンを含むことができ、ここで平滑化化合物（ｌｅｖｅｌｉｎｇ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）は糖およびエタノール、水、グリセリンおよびプロピレングリコールの混合物である。任意には、このような液体製剤は、着色剤、着香剤、サッカリン、および増粘剤としてのカルボキシルセルロースおよび／または他のアジュバントを含むことができる。
【００４６】
別の実施形態においては、本発明のβ−カルボリンが治療上有効な用量は溶液の形で経口投与され、ここでこの溶液には、保存料、甘味料、可溶化剤および溶媒を含む。経口投与のための溶液は、１つ以上の緩衝液、着香剤またはさらなる賦形剤を含むことができる。さらに別の実施形態においては、ペパーミントまたは他の着香剤が、経口投与のための本発明のβ−カルボリンの溶液に添加される。
【００４７】
吸入による投与のためには、本発明のβ−カルボリンを、例えばジクロロフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または別の適切なガスなどの適切な噴霧剤を伴う噴霧器または加圧容器内のエアゾルスプレーといった医薬的形態で適切な要領で投与することができる。加圧エアゾルが使用される場合、用量は、測定された量を投与するためのバルブを具備することによって決定されることができる。吸入器またはインサフレーターで使用するためのゼラチンなどで作られたカプセルおよびカートリッジは、カプセルおよびカートリッジが本発明のβ−カルボリンと、場合によっては１つ以上の活性物質そしてラクトースやテンプンなどの適切な粉末ベースとの粉末混合物を含むように製剤化されることができる。
【００４８】
注射による非経口投与のための溶液を、およそ０．５重量パーセントから最高およそ１０重量パーセントの濃度で、本発明のβ−カルボリンの薬学的に許容できる水溶性塩の水溶液の形で調製することができる。注射による非経口投与のための溶液はさらに、安定剤および／または緩衝物質を含むことができ、異なる用量単位のアンプルに入って適切な形で提供されることができる。
【００４９】
したがって、ここで提示される全ての化合物は、急性および慢性耳疾患および聴力損傷、目まいおよび前庭障害、詳細には急性聴力損失、急性音響外傷、慢性的騒音曝露に起因する迷路性難聴、老年性難聴、人工内耳の移植中の外傷（挿入外傷）、内耳疾患に起因する目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての前庭障害、耳鳴りおよび抗生物質および細胞増殖抑制剤に起因する聴力損傷の予防および／または防止のための医薬製剤の製造に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
【図１】４８時間９０μＭの９−メチル−β−カルボリン（９−Ｍｅ−ＢＣ）に、または溶媒（１００％）にそれぞれ曝露した後のラットの内耳細胞（蝸牛のコルチ器）の定量的ＲＴ−ＰＣＲ（実時間ＰＣＲ）のグラフを示す図である。１００％を超える値は、９−Ｍｅ−ＢＣが、インキュベーション中に対応する遺伝子の転写を活性化したことを意味しており、１００％未満の値については、９−Ｍｅ−ＢＣが、インキュベーション中に対応する遺伝子の転写を活性化したことの反対のことが妥当である。
【００５１】
図１に使用されている略号は、次の意味を有する：
Ａｒｍｅｔｌ１：保存ドーパミン神経栄養因子
ＢＮＤＦ：脳由来神経栄養因子
ＢＭＰ２：骨形成タンパク質２
Ｃｂｌｎ１：セレベリン１前躯体タンパク質
ＤＡＴ：ドーパミン輸送体
ＤＥＸＡ：デキサメタゾン
ＤＲＤ１：ドーパミン受容体亜型１
ＤＲＤ２ｌ：ドーパミン受容体亜型２のロング変異体
ＧＤＮＦ：グリア細胞株由来神経栄養因子
ＮＧＦ：神経成長因子
ＮＰＹ：神経ペプチドＹ
Ｎｕｒｒ１：核内受容体調節１タンパク質
ＰＴＸ：対合様ホメオドメイン転写因子
Ｒｅｔ：トランスフェクション中に再配置された受容体
ＲＫＩＰ：ｒａｆ−１キナーゼ阻害タンパク質
Ｓｉｒｔ：サイレント情報調節因子
Ｔｈ：チロシンヒドロキシラーゼ
ＴＮＦ：腫瘍壊死因子
【図２】４８時間培養の後の内耳のらせん神経節の細胞の生存に対する、グリア細胞株由来神経栄養因子（ＧＤＮＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）およびデキサメタゾン（ＤＥＸＡ）の異なる濃度および組合せの効果をグラフで示す図である。棒の高さは、平均標準誤差を反映し、３回または４回の異なる実験の２４〜３２の観察を表わす。対照グループに対する異なる比較の意義が、棒の上に示され、一方他の比較はカッコにより別個に描かれる（Ｐ＜０．０５*；Ｐ＜０．０１**；Ｐ＜０．００１***）。出典：Ｊａｈｒｅｓｂｅｒｉｃｈｔ Ｍｅｄｉｚｉｎｉｓｃｈｅ Ｈｏｃｈｓｃｈｕｌｅ Ｈａｎｎｏｖｅｒ ２００５，Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｅａｒ，Ｎｏｓｅ ａｎｄ Ｔｈｒｏａｔ Ｄｉｓｅａｓｅｓ （ｄｉｒｅｃｔｏｒ：Ｔｈ．Ｌｅｎａｒｚ）
【図３Ａ】上述の通り、培養中で１４日間、ハルマン（Ｈａｒｍａｎ）を用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す図である。対照グループと１１０μＭのハルマン（Ｈａｒｍａｎ）で処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、Ｈａｒｍａｎでの処置は、軸索長の増大につながった。
【図３Ｂ】上述の通り、１４日間、９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す図である。対照グループと７０、９０または１１０μＭの９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【図３Ｃ】上述の通り、６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す図である。対照グループと５０μＭの６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【図３Ｄ】上述の通り、９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す図である。対照グループと３０、５０または７０μＭの９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【図４Ａ】ヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞でのＢＤＮＦ（脳由来神経栄養因子）の相対的遺伝子発現を示す図である。２日後のＢＮＤＦの転写は、最高濃度（１１０μＭ）のＬＥ−０２（９−メチル−β−カルボリン）でのみ刺激され、一方１４日間の曝露後では、３０〜５０μＭというより低い濃度で刺激が誘発された。このようなシフトは、９−フルオロエチル−β−カルボリンについても見られた（図４ＡのＮｏ．５５９の物質；２日後、７０μＭおよび９０μＭによって刺激され、１４日後では３０μＭおよび５０μＭで刺激された）。対照的に６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン（図４Ａ、Ｎｏ．５１３の物質）は、ＢＤＮＦ転写の莫大な用量依存性増加につながった。
【図４Ｂ】セレベリン−１前駆体タンパク質（ＣＢＬＮ）の相対的遺伝子発現を示す図である。セレベリン−１前駆体タンパク質は、９−フルオロエチル−β−カルボリンに２日間曝露した後にのみ増大した。１４日間の曝露後、全ての試験されたβ−カルボリンのＣＢＬＮ発現が増加した。調査された全ての濃度においてほぼ同じ刺激を示している９−フルオロエチル−β−カルボリンは例外として、被験物質の濃度が低くなると、濃度がより高い場合より強い効果を有した。
【図４Ｃ】ＧＤＮＦ（グリア細胞株由来神経栄養因子）の相対的遺伝子発現を示す図である。個別の濃度において、１４日間の曝露は、最高３倍の刺激につながった。
【図４Ｄ】ＮＧＦ（神経成長因子）の相対的遺伝子発現を示す図である。１４日間の曝露後、遺伝子発現は、２０〜５０倍だけ増大した。再び、濃度が低くなればなるほど、ＮＧＦの増大に関してはるかに効果が高くなった。
【図４Ｅ】ＮＰＹ（神経ペプチドＹ）の相対的遺伝子発現を示す図である。１４日間の曝露後、遺伝子発現は１．３〜４倍増大した。９−メチル−β−カルボリンおよび９−フルオロエチル−β−カルボリンの場合、濃度が低くなればなるほど、より高い濃度より効果は高くなった。
【図５】対照細胞ＳＨ−ＳＹ５Ｙにおける最高１０倍のレベルまでの、転写因子ＣＲＥＢの形成に対する９−メチル−β−カルボリン、９−フルオロエチル−β−カルボリンおよび６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンの用量依存活性化効果を示す（３回の独立した実験、４８時間のインキュベーション）図である。
【図６Ａ−６Ｂ】実施例２９の実験によって得られた外リンパ液のクロマトグラムを示す図であって、図６Ａおよび６Ｂによるとクロマトグラムは、３時間モルモットの内耳領域内に９−Ｍｅ−ＢＣを３時間（図６Ａ）または１０時間注射（図６Ｂ）した後に得られた外リンパ液について記録されたものである。
【図６Ｃ−６Ｄ】実施例２９の実験によって得られた外リンパ液のクロマトグラムを示す図であって、図６Ｃおよび６Ｄによるとクロマトグラムは、モルモットの蝸牛内に９−Ｍｅ−ＢＣを３時間または２０時間直接注射した後に得られた外リンパ液について記録されたものである。
【図６Ｅ】実施例２９の実験によって得られた外リンパ液のクロマトグラムを示す図であって、図６Ｅによるとクロマトグラムは、９−Ｍｅ−ＢＣでの処置に全く曝露されなかった外リンパ液について記録されたものである。
【図６Ｆ】実施例２９の実験によって得られた外リンパ液のクロマトグラムを示す図であって、図６Ｆによるとクロマトグラムは、直線の較正線を描いており、ここで９−Ｍｅ−ＢＣの濃度は、得られたクロマトグラフィの最大値の下の面積として定められた。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
［実施例］
実施例１：９−メチル−β−カルボリンの合成
９−メチル−β−カルボリンのための合成スキーム
【００５３】
【化７】
Ｈｏ−Ｗａｌｋｅｒ（１９８８年）により記述されているトリプタミン塩酸塩とグリオキシル酸によって製造された１３ｇ（０．０７５６ｍｏｌ）の１，２，３，４−テトラヒドロ−β−カルボリンと、２．６ｇのＰｄ／Ｃ（１０％）と、の６００ｍｌのクメン中の、撹拌溶液を９０分間窒素雰囲気内で還流した。１００ｍｌのエタノールを添加した後、高温溶液を濾過し、高温エタノール３０ｍｌにより石炭（ｃｏａｌ）を３回抽出した。組合わせた液体画分を濃縮し、残渣をトルエル中で結晶化させて、１０．５ｇ（８２％）のノルハルマンを得た。文献（Ｈｏ ＢＴ，ＭｃＩｓａａｃ ＷＭ，Ｗａｌｋｅｒ ＫＥ，Ｅｓｔｅｖｅｚ Ｖ，Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ５７：２６９，１９６８）中に記載されている通りに、再処理をさらに改善して、９位でのメチル化を実施した。１グラム（５．９５ｍｍｏｌ）のノルハルマンを窒素雰囲気内で乾燥ＤＭＦ１０ｍｌ中に溶解した。その後、０．３６ｇ（１４．９ｍｍｏｌ）の水素化ナトリウムを０℃でパラフィン中の６０％分散の形で添加した。反応混合物を室温まで冷却した後、これを−１０℃まで冷却し、０．８４ｇ（５．９６ｍｍｏｌ）のヨードメタンを添加した。さらに１２時間撹拌した後、混合物をもう一度室温まで冷却した。減圧下で全ての揮発性成分を除去した。その後、１００ｍｌの水を添加し、混合物を３×５０ｍｌのＣＨＣｌ3で抽出した。組合わせた有機画分を５×２０ｍｌの水で洗浄し、蒸発乾燥した。残渣を２Ｎの塩酸１００ｍｌに懸濁した。所望のメチル化生成物から抽出物を分離するために、２日間液／液抽出装置によりＣＨＣｌ3でＨＣｌ塩のイオン対交換抽出を実施した。溶媒の除去後、９−メチル−β−カルボリニウムヒドロクロリドの黄色結晶０．７ｇ（６４％）を得た。
【００５４】
融点：２９５℃；遊離塩基のＧＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ＝１８２（１００％），１６７（５％），１４０（１０％），１２７（１０％），１１３（５％），９１（１０％）．1Ｈ−ＮＭＲ（ＨＣｌｓａｌｔ）：δ（ｐｐｍ）メタノール ｄ４，２５０ ＭＨｚ：４．０６，ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ3；７．２８−７．３５，ｄｔ，Ｊ＝１．２； ６．８，１Ｈ，Ｈ６；７．５８−７．７０，ｍ，２Ｈ，Ｈ７，Ｈ８；８．１３−８．１６，ｄ，Ｊ＝５．４，１Ｈ，Ｈ４；８．１８−８．２１,ｄ，Ｊ＝７．９，１Ｈ Ｈ５；８．３１−８．３３，ｄ，Ｊ＝５．４，１Ｈ，Ｈ３；８．８９，ｓ，１Ｈ，Ｈ１．
実施例２−１３：化合物Ａ〜Ｌの生成
対応するヨウ化アルキル、臭化アルキルまたはトシル化アルキルを使用して、実施例１にしたがって、化合物Ａ〜Ｌの合成を行なう。収量は、理論的収量の３０〜７５％であった。
実施例１４：ラットの内耳細胞（蝸牛）の研究
本発明に係るβ−カルボリンの有効性を証明するために実験を行なって、本発明に係るβ−カルボリンの部類の化合物が耳疾患、聴力損傷および目まいにもたらすであろう効果を判定した。９−メチル−β−カルボリン（９−Ｍｅ−ＢＣ、ＶＩ）を化合物例として選択した。他の被験物質の有効性を、９−メチル−β−カルボリン（９−Ｍｅ−ＢＣ、ＶＩ）の有効性と関連づけするだろう。
【００５５】
最初に、ラットの蝸牛のコルチ器の器官培養物を調製し、これを次のステップで９−メチル−β−カルボリンと接触させた。異なるニューロトロフィンの発現を、コルチ器に対する９−メチル−β−カルボリンの効果のマーカーとして測定した。このために、コルチの組織からＲＮＡを単離し、ｃＤＮＡに転写し、ニューロトロフィンのｃＤＮＡの濃度をリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ方法を用いて決定した。
【００５６】
４０匹のラットの蝸牛のコルチ器を、出産後４日目に数回のセッションで調製した。その後、器官培養物を９０μＭの濃度で４８時間９−Ｍｅ−ＢＣに曝露するか、または対応する量の溶媒（対照条件）に曝露した。その後、器官培養物をＰＢＳ−ＥＤＴＡ（ＰＢＳで１：２７希釈したバイオ ケム（Ｂｉｏ Ｃｈｅｍ）のＰＢＳ−ＥＤＴＡ）で洗浄した。次に−８０℃で試料を凍結した。キアゲン（Ｑｉａｇｅｎ）、ヒルデン（Ｈｉｌｄｅｎ）のＲＮイージー脂質組織ミニキット（ＲＮＥａｓｙ Ｌｉｐｉｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ）を用いて、全ＲＮＡを単離した。単離したＲＮＡの試料を用いてＤＮＡｓｅ消化を実施し、ひき続きこのキットのメーカーの指示にしたがって数回洗浄ステップを行なった。ＲＮａｓｅフリーの水によりＲＮＡを溶出した。ＲＮＡの量および質を測光により判定した。各試料のＲＮＡ１ミリグラムを、ロシュ アプライド サイエンス（Ｒｏｃｈｅ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ），マンハイム（Ｍａｎｎｈｅｉｍ）のキットを用いて相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）に転写した。蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）方法を用いて ロシュ アプライド サイエンス（Ｒｏｃｈｅ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ），マンハイム（Ｍａｎｎｈｅｉｍ）のライトサイクラー システム（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ Ｓｙｓｔｅｍ）によりリアルタイム逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ）を実施した。このために、同じ会社のライトサイクラーファストスタートＤＮＡマスターハイブリダイゼーションブローブキット（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ ＦａｓｔＳｔａｒｔ ＤＮＡ Ｍａｓｔｅｒ Ｈｙｂｒｉｄｉｓａｔｉｏｎ Ｐｒｏｂｅｓ Ｋｉｔ）を使用した。相対的定量化のためのいわゆるハウスキーピング遺伝子として、ヒドロキシメチルビランシンターゼ（ＨＭＢＳ）のための遺伝子を選択した。ＴＩＢＭｏｌｂｉｏｌ，Ｂｅｒｌｉｎにより、適切なプライマとプローブは設計し合成された。２５マイクログラムのｃＤＮＡを各反応に添加した。サイクル条件は次の通りであった：５分間９４℃での変性、変性条件で７秒間の５５サイクル、適温で１０秒間のプライマおよびプローブの結合および１０秒間７２℃での伸長。その後、融点曲線分析を実施した。各サイクルの測定された蛍光を、ライトサイクラーソフトウェア（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）によって分析した。各試料の目標相対量は、同じ試料のハウスキーピング遺伝子の量との比較の結果得られた。Ｌｉｖａｋ及びＳｃｈｍｉｔｔｇｅｎの２−ΔΔC(t)方法（Ｌｉｖａｋ ＫＪ及びＳｃｈｍｉｔｔｇｅｎ ＴＤ．「Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄａｔａ ｕｓｉｎｇ ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ ａｎｄ ｔｈｅ ２（−Ｄｅｌｔａ Ｄｅｌｔａ Ｃ（Ｔ））」、Ｍｅｔｈｏｄｓ２００１；２５：４０２−８）により定量化を行なった。
【００５７】
一回毎に得たＲＮＡの量は、脳領域から典型的に得られるＲＮＡの量に比べて非常に少なかった。したがって、科学的所見の状態に基づいて注意深く目標を選択しなくてはならなかった。その結果、第１に、内耳の諸疾患の差異について単一の原因を排除することが可能であることを理由として、薬剤は、内耳の全ての内耳疾患において実際に損傷を受けている神経細胞全般の変性を停止または逆行さえすべきである。技術的現状によると、ニューロトロフィン（神経細胞の成長因子）のみが考慮される。ニューロトロフィンは、神経細胞の発生、分化および生存能力において重要な役割を果たす内因性ペプチドである。ニューロトロフィンは、神経細胞の発生、分化および生存能力において重要な役割を果たす内因性ペプチドであるため、個々のタイプの神経細胞は、特定のニューロトロフィンの存在に特に依存している。第２の科学的所見は以下のようである：すなわち、難聴は、特にドーパミン作動神経タイプの神経細胞の障害に基づく。したがって、薬剤は好ましくはドーパミン作動性機序を活性化すべきである。
【００５８】
図１に示されているように、複数のニューロトロフィンの生成が活性化されており、それらが神経保護特性全般を有することがわかっている。それらは、Ａｒｍｅｔｌ１：ＢＤＮＦ、Ｃｂｌｎ１、ＮＧＦおよびＷＰＹ（略語の説明については、図１の凡例を参照のこと）である。その上、神経細胞内でドーパミンを合成するドーパミン受容体亜型１およびチロシンヒドロキシラーゼなどのドーパミン作動性タンパク質がさらに活性化された。ドーパミン受容体１は、大部分が圧倒的に内耳内に見い出される型である亜型であることがわかっている。複数の独立した実験が実施され、複数の独立した実験の結果はほぼ同一であった（標準偏差＜１０％）。したがって、結果の再現性はきわめて高かった。
【００５９】
これらの結果は、９−Ｍｅ−ＢＣがドーパミン作動性神経細胞の特徴的タンパク質を特異的に活性化することを証明している。これまでこのような一連の効果を有する物質について説明されたことは全くない。現行の知識によると迷路性難聴において顕著な役割を果たしている過程を一連の効果が詳細に精確に妨げるかぎりにおいて、９−Ｍｅ−ＢＣがドーパミン作動性神経細胞の特徴的タンパク質を特異的に活性化することは格別に有利である。こうして、９−Ｍｅ−ＢＣは、神経細胞、特にドーパミン作動神経タイプの細胞の変性過程を停止さらには逆行させるために特に適している独特の有効性モードを有する化合物である。
【００６０】
世界最大の蝸牛移植センターを運営するハノーバー医科大学（Ｍｅｄｉｚｉｎｉｓｃｈｅ Ｈｏｃｈｓｃｈｕｌｅ Ｈａｎｎｏｖｅｒ）のＴｈ．Ｌｅｎａｒｚと彼の共働者は、２００５年に図２に提示されている調査を行なった。彼らは、らせん神経節、すなわち聴神経の一部分を４８時間異なる物質に曝露し、そのうちのいずれが神経保護特性を有するかを試験した。図２に示されている通り、神経保護特性を有するのは特にＢＤＮＦとＧＤＮＦである。この研究の結論は、ＢＤＮＦとＧＤＮＦを活性化する物質が内耳の損傷に対する将来性のある療法であるということだった。その時点、すなわち２００５年の時点で、ＢＤＮＦとＧＤＮＦを活性化するような物質は未知であった。したがって、世界的に認知されている異なるグループのこれらの結果は、９−メチル−ＢＣの治療的潜在性を描く。大ペプチドとしてＢＤＮＦもＧＤＮＦもそれ自体局所的な適用には適していないという点に留意すべきである。対照的に、９−メチル−ＢＣは、脂溶性で化学的安定性があり、全くないというわけではないが緩慢にしか代謝しない（実施例２９参照）比較的小さい物質（ＭＷ：１８３）である。
【００６１】
実施例１５−２８：ヒト神経芽腫細胞（ＳＨ−ＳＹ５Ｙ）の分化モデル
先の実施例は、ラットおよびモルモットを用いる動物モデルにおいて実施され、したがって、β−カルボリンが成長因子の誘発を通してプロ分化するヒトの組織内でも作用するか否かを証明することが、以下の実施例の本質的な側面であった。したがって、ヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞を用いて、複数の実験を行なった。
【００６２】
９−ＭＥ−ＢＣの有効性スペクトルについての信頼性の高い再現性ある情報を得るためには、４０匹超のラットのコルチ器を準備し分析しなければならなかった。これには多大な労力投入と動物数が必要である。したがって、以下で記述するように、分化モデルにおいて、化合物ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＶＩＩＩ、ＸＩＸならびにＣ〜Ｌを分析した。中耳の有毛細胞についての細胞系または分化モデルは全く存在しないことから、中耳の有毛細胞と類似の分化特性を示す神経芽腫細胞系などの他の細胞系を使用しなければならなかった。
【００６３】
ヒト神経芽腫細胞がこのモデルのために使用された。ヒト神経芽腫細胞は、培養中に未分化タイプとして存在する永久細胞である。ヒト神経芽腫細胞は、培地に対し特異的物質、例えばレチノイン酸、脳由来神経成長因子（ＢＤＮＦ）または酵素の活性化剤、タンパク質キナーゼＣの活性化剤を添加することによって、分化、すなわち神経細胞へ形質転換、するように活性化されることができる。我々は、ベーターカルボリンが未分化細胞をニューロンタイプに形質転換できるか否かを分析するためにヒト神経芽腫細胞の細胞系を使用した。基準は：増殖低下（一視野あたりの細胞数の減少）；細胞体の縮小（未分化タイプからニューロンタイプへの形質転換）；隣接する細胞または隣接する細胞のクラスタに対する連結を提供する細胞樹状突起（ｃｙｔｏｄｅｎｔｒｉｔｅ）（神経炎）であった。結果は以下の通りであった：
【００６４】
【表１】
表１によって示されている通り、我々が分析したベーターカルボリンは、実際に、さまざまな程度で分化を促進することができる。
【００６５】
図３〜５は、表１に示されている通りのデータを補足し、説明する。
プロ分化効果についての指標としての軸索長の測定：
溶媒（Ｋｏ）または被験物質と共に１４日間培養中でヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞をインキュベートした。被験物質についての右側へのグラフのシフトは、対照物質についてのグラフと比較した場合の軸索長の増加を示した。処置グループ間の統計的差異を、テューキーの多重比較検定（Ｔｕｋｅｙ’ｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ−ｔｅｓｔ）で計算した。
【００６６】
図３Ａは、上述の通り、Ｈａｒｍａｎを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す。対照グループと１１０μＭのハルマン（Ｈａｒｍａｎ）で処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、ハルマン（Ｈａｒｍａｎ）での処置は、軸索長の増大につながった。
【００６７】
図３Ｂは、上述の通り、９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す。対照グループと７０、９０または１１０μＭの９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【００６８】
図３Ｃは、上述の通り、６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す。対照グループと５０μＭの６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【００６９】
図３Ｄは、上述の通り、９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す。対照グループと３０、５０または７０μＭの９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【００７０】
培養中で１４日間のヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞のインキュベーションは、軸索長の増大につながった。示されたのは、３回の独立した実験で少なくとも２０の無作為に選択された視野（各々６４０．０００μｍ2）内で決定された軸索長の累積度数分布である。急激な上昇が、短かい（ｓｈｏｒｔ）神経炎の優勢を示しており、ここで例えば対照細胞においては、より低い急激な上昇は、より長い軸索のより大きな数を意味した。水平方向の最大値は、それぞれの処置グループの最大軸索長を表わしていた。結果は、本発明のβ−カルボリンが、軸索の芽生えを促進することを示す。効果は、用量および物質依存性のものである：すなわち、１−メチル−β−カルボリン＜６−メトキシ−９−メチル−β−カルボリン＜９−メチル−β−カルボリン＜９−フルオルエチル−β−カルボリン）である。したがって、β−カルボリンは、プロ分化効果を有する。
【００７１】
軸索長に対する他の本発明のβ−カルボリン（化合物Ａ−ＬおよびＶＩ−ＸＸ）の効果を、上述の通り、１４日後のヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞で決定した。結果は表１にまとめられている。
【００７２】
成長因子形成に対する誘発
次に、物質がヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞内で神経成長因子の形成を誘発できるか否かを調査した。２日および１４日後に、細胞を収穫し、標的遺伝子およびハウスキーピング遺伝子の発現を逆転写酵素−ＰＣＲによって決定した。図５は、損傷有毛細胞に対する再生効果が公知である神経成長因子についての３回の独立した実験の平均値を示す。
【００７３】
図４Ａは、ヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞内でのＢＤＮＦ（脳由来神経栄養因子）の相対的遺伝子発現を示す。２日後のＢＮＤＦの転写は、最高濃度（１１０μＭ）のＬＥ−０２（９−メチル−β−カルボリン）でのみ刺激され、一方１４日間の曝露後では、３０及び５０μＭというより低い濃度で刺激が誘発された。このようなシフトは、９−フルオロエチル−β−カルボリンについても見られた（Ｎｏ．５５９の物質；２日後、７０μＭおよび９０μＭによって刺激され、１４日後では３０μＭおよび５０μＭで刺激された）。対照的に６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン（図４ＡＰ、Ｎｏ．５１３の物質）は、ＢＤＮＦ転写の莫大な用量依存性増加につながった。
【００７４】
図４Ｂは、セレベリン−１前駆体タンパク質（ＣＢＬＮ）の相対的遺伝子発現を示す。セレベリン−１前駆体タンパク質は、９−フルオロエチル−β−カルボリンに２日間曝露した後にのみ増大した。１４日間の曝露後、試験対象の全てのβ−カルボリンはＣＢＬＮ発現が増加した。被験物質の濃度が低くなると、調査された全ての濃度においてほぼ同じ刺激を示している９−フルオロエチル−β−カルボリンを除いて、濃度がより高い場合より効果は強くなった。セレベリン−１９−フルオロエチル−β−カルボリンは、ＣＢＬＮ発現ならびに軸索長に対して類似の効果を示した（図３Ｄ参照）。
【００７５】
図４Ｃは、ＧＤＮＦ（グリア細胞株由来神経栄養因子）の相対的遺伝子発現を示す。個別の濃度において、１４日間の曝露は、最高３倍の刺激につながった。
ＮＧＦ（神経成長因子）およびＮＰＹ（神経ペプチドＹ）は、一般に神経細胞の存続に必要な成長因子である。ＮＧＦ（神経成長因子）およびＮＰＹ（神経ペプチドＹの生合成が無くなると、神経細胞は死滅につながる。これらは、新しい暗騒音、新しいメロディなどの新たな状況への適応にとって不可欠である、例えばシナプス形成などの分化を可能にする。ＮＧＦ（神経成長因子）およびＮＰＹ（神経ペプチドＹのような成長因子は同様に、損傷を受けた神経細胞の延長部の新たな成長を可能にし、これを調節し、ひいては新たに成長した細胞延長部が現在ある神経路および回路への再組込みを可能にする。これらは、急性および慢性聴覚傷害に対する自然の修復機序の重要な部分である。
【００７６】
図４Ｄは、ＮＧＦ（神経成長因子）の相対的遺伝子発現を示す。１４日間の曝露後、遺伝子発現は、２０〜５０倍だけ増大した。再度、濃度が低くなればなるほど、ＮＧＦの増大に関してはるかに効果が高くなった。
【００７７】
図４Ｅは、ＮＰＹ（神経ペプチドＹ）の相対的遺伝子発現を示す。１４日間の曝露後、遺伝子発現は１．３〜４倍増大した。９−メチル−β−カルボリンおよび９−フルオロエチル−β−カルボリンの場合、濃度が低くなればなるほど、より高い濃度より効果は高くなった。
【００７８】
ＢＤＮＦ、ＧＤＮＦ、ＮＧＦおよびＮＰＹの遺伝子発現に対する他の本発明のβ−カルボリン（化合物Ａ−ＬおよびＶＩ−ＸＸ）の効果を、２日後および１４日後にヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞で上述の通りに決定した。結果は表２にまとめられている。
【００７９】
【表２】
遺伝子転写による分化を実質的に刺激する転写因子の解明のための細胞内カスケードの活性化についての調査：
複数の細胞内カスケードに対する複数のβ−カルボリンの効果を調査した。複数のβ−カルボリンのうち、それぞれの細胞内カスケードの末端において複数の転写因子が細胞核で形成され、複数の転写因子はそれ自体さらなる遺伝子群の転写を活性化させることが公知である。２重ルシフェラーゼ方法を使用した。第１のルシフェラーゼはトランスフェクション対照として役立ち、一方第２のルシフェラーゼは、ＤＮＡの適切な特異的結合配列に連結される。
【００８０】
図５は、対照細胞ＳＨ−ＳＹ５Ｙにおいて最高１０倍までレベルの、転写因子ＣＲＥＢの形成に対する９−メチル−β−カルボリン、９−フルオロエチル−β−カルボリンおよび６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンの用量依存活性化効果を示す（３回の独立した実験、４８時間のインキュベーション）。
【００８１】
これらの所見は明らかに、試験された本発明の、β−カルボリンがプロ分化効果を有することを示す。複数の成長因子が神経保護的にそしていくつかの傷害モデルにおいてはまた神経再生的に作用することができるということを明らかにする複数の成長因子の発現誘発は、活性物質の治療的効果を証明する。プロ分化効果は、転写因子を活性化させる細胞内カスケードの活性によって媒介される。このような転写因子は、特に成長因子についてコードする遺伝子群を転写する。
実施例２９
動物モデルにおける薬物動態実験
この実施例では、９−メチル−β−カルボリンが、正円窓の膜の前の陥凹に対し局所的に送出される。β−カルボリンは、陥凹から内耳（蝸牛）の外リンパ液（感覚細胞を保護する液体）までおよび平衡感覚をつかさどる器官の三半規管まで正円窓を通って拡散できる。
【００８２】
局所適用は、一方では比較的高い用量が求められることそして他方では難聴そして場合によっては目まいの場合に必要とされるような慢性的適用については経験的に望ましくない効果の危険性が高くなることを理由として全身的適用の場合に予期すべき望ましくない効果を回避する。したがって、物質の使用のための前提条件は、物質が正円窓の膜を通って主として拡散するということである。
【００８３】
これをテストするために、９−メチル−β−カルボリン−ＨＣｌ（９−Ｍｅ−ＢＣ）を、減菌したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中に溶解し、次に、０．５μＬ／時の流速で最長１０時間、浸透圧ミニポンプによりモルモットの正円窓の膜に連続的に輸液した。こうして、中耳内ひいては内耳の蝸牛の外側に輸液を行ない、そのため、鼓膜は損傷を受けなかった。３時間後、蝸牛の先端である尖、すなわち正円窓の膜から最も離隔した蝸牛の部分から、先に移植したカニューレにより５μｌのリンパ液を得た。試料を希釈し、さらなる処理無く高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）により直ちに分離し、β−カルボリンの自然の蛍光を蛍光検出器により決定した。第２のモルモットを用いて同一の条件で、実験を反復したが、試料は１０時間の輸液の後に得たものであった。９−Ｍｅ−ＢＣでの前処置されていない第３のモルモットから外リンパ液を得た（空試験値対照）。
【００８４】
第２系列では、２０μｇの９−Ｍｅ−ＢＣを、正円窓の膜すなわち蝸牛内を通って直接外リンパ液内にアプライした。３時間後、そして別の動物の場合には２０時間後に、外リンパ液を得て、上述の通りに分析した。結果は、校正系列と共に図６に表わされている。校正系列は上述の通りの分析方法により１０ｐｇの９−Ｍｅ−ＢＣを高い信頼度で検出できるということを示す。９−Ｍｅ−ＢＣを表わす単一の最大値を、図６の上部クロマトグラム内で７分後に見ることができる。明らかに、さらなる最大値が見られることはなく、したがって９−Ｍｅ−ＢＣは分解されていない。さらに、クロマトグラムは、９−Ｍｅ−ＢＣが正円窓の膜に浸透することを明確に示す。
【００８５】
中央の横列のクロマトグラムは両方共、外リンパ液に対する直接的適用の場合には２０時間後に９−Ｍｅ−ＢＣがなおも存在することを示す。外リンパ液に対する直接的適用の場合には２０時間後に９−Ｍｅ−ＢＣがなおも存在することは、治療的使用にとってきわめて有意である。さらに、これらのクロマトグラムは、９−Ｍｅ−ＢＣがこの長い期間中分解も崩壊もしないことを示す。そういうわけで、９−Ｍｅ−ＢＣは、化学的及び代謝的に不活性である（注：上部横列および中間横列内のナノグラムによりナノグラム数が検出されている；したがっていわゆる注入ピークは中間および下部横列の左側のクロマトグラムおよび基線の雑音に見られる。）
未処置の動物の外リンパ液には９−Ｍｅ−ＢＣが全く存在しないことを示すクロマトグラムは、下部横列の左側に描かれる（空試験値対照）。未処置の動物は、他のモルモットの場合と同様に、外科的ステップのみが実施され９−Ｍｅ−ＢＣは全く適用されなかった動物である。結果は、療法の観点から見て、他の物質デキサメタゾン、ゲンタマイシン、２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸［チアリン］に比べて非常に有利である。
【００８６】
１つの系の疾病の治療に使用される薬剤は、聴覚器官の感覚細胞すなわち有毛細胞は平衡感覚をつかさどる器官の感覚細胞と非常に類似した挙動を示すことから、他の系の疾病についても有効である。
実施例３０
動物モデルにおける聴力損傷の予防
β−カルボリンを含む溶液を３日間、浸透圧ミニポンプによりモルモットの正円窓の膜の前の陥凹内に連続的に輸液した。この実験では、次のβ−カルボリンを個別にテストした：９−メチル−β−カルボリン、化合物ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＶＩＩＩ、ＸＩＸならびに化合物Ｃ〜Ｌ。
【００８７】
次に、ゲンタマイシンおよびエタクリル酸の標準用量をモルモットに静脈注射した。ゲンタマイシンおよびエタクリル酸が内耳を損傷する。典型的に、ゲンタマイシンおよびエタクリル酸は動物モデルにおける聴力損傷の予防のような研究において難聴を誘発するための毒素として使用される。輸液をさらに２日間続行した。その後、２、４、８、および２ＯＨｚで耳に音響放射した後、内耳のインパルスを伝達する脳幹の神経細胞の電気生理学的活性を推定した。β−カルボリンで処置されていない耳は個体内対照として役立った（Ｐｒｉｅｓｋｏｒｎ ＤＭ，Ｍｉｌｌｅｒ ＪＭ．「Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ ｒｅｐｏｒｔ：ｃｈｒｏｎｉｃ ａｎｄ ａｃｕｔｅ ｉｎｔｒａｃｏｃｈｌｅａｒ ｉｎｆｕｓｉｏｎ ｉｎ ｒｏｄｅｎｔｓ」、Ｈｅａｒ Ｒｅｓ，２０００；１４０（１−２）：２１２−２１５）。その上動物には、さらなる対照としてゲンタマイシンではなく９−Ｍｅ−ＢＣのみを輸液した。
【００８８】
聴神経の神経細胞の測定された電気生理学的活性（聴覚閾値）は、内耳に対する使用されたβ−カルボリンの治療的効果の度合の尺度として役立った。表３から分かることができるように、使用されたβ−カルボリンは聴神経の神経細胞の電気生理学的活性の増加を示す。このことから、β−カルボリンは聴力損傷、目まいおよび前庭障害の治療にとって有用であると結論を出すことができる。
【００８９】
【表３】
実施例３１
局所適用のための９−メチル−β−カルボリン製剤
局所適用のための５０μＭの９−メチル−β−カルボリンを用いてのゲル製剤は、５０μＭの９−メチル−β−カルボリンという濃度で、ジェンザイム コーポ（Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｃｏｒｐ）製のヒルメド ステアリル（Ｈｙｌｕｍｅｄ Ｓｔｅｒｉｌｅ）などのリン酸緩衝生理食塩水溶液中の０．７重量パーセントのヒアルロン酸を含む。
実施例３２
局所適用のための９−メチル−β−カルボリン製剤
点耳薬の形での９−メチル−β−カルボリンの局所適用のために、次のアジュバント：塩化ベンザルコニウム、酢酸ナトリウム×３Ｈ2Ｏ、酢酸、マンニトール（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）、エデト酸ナトリウム（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）および塩酸／水酸化ナトリウム（ｐＨ調整用）の１つを使用して、精製水中で３ｍｇ／ｍｌの９−メチル−β−カルボリン溶液を調製する。
実施例３３
局所適用のための９−メチル−β−カルボリン製剤
９３９．９ｍｇのグリセロールに０．１ｍｇのブチルヒドロキシアニソール（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）の溶液に、１００ｍｇの９−メチル−β−カルボリンを添加する。結果として得られた溶液を耳の中に局所適用することができる。任意には、ＤＭＳＯなどの浸透増強剤を添加することができる。
実施例３４
経口適用のための９−メチル−β−カルボリン製剤
この実施例は、１２．５ｍｇの９−メチル−β−カルボリンを用いてのフィルムコート錠のための製剤に関する。錠剤コアは以下のものを含む。
９−メチル−β−カルボリン １２．５０ｍｇ
セルロース、微結晶性 １０３．２５ｍｇ
クロスカルメロース−Ｎａ ６．２４ｍｇ
二酸化ケイ素、コロイド性 １．２５ｍｇ
タルク粉 １．２５ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．５０ｍｇ
合計重量 １２５．０ｍｇ
錠剤コアを５ｍｇのヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、例えばオパドライ（Ｏｐａｄｒｙ）またはセピフィルム（Ｓｅｐｉｆｉｌｍ）で被覆する。結果として得られたフィルム錠は、総重量が１３０ｍｇであり、言及したアジュバントの他に、１２．５ｍｇの９−メチル−β−カルボリンを含む。
実施例３５
経口適用のための９−メチル−β−カルボリン製剤
この実施例は、５０．０ｍｇの９−メチル−β−カルボリンを用いての御フィルムコート錠のための製剤に関する。錠剤コアは以下のものを含む。
９−メチル−β−カルボリン ５０．０ｍｇ
セルロース、微結晶性 ４１３．０ｍｇ
クロスカルメロース−Ｎａ ２５．０ｍｇ
二酸化ケイ素、コロイド性 ５．０ｍｇ
タルク粉 ５．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ２．０ｍｇ
合計重量 ５００．０ｍｇ
錠剤コアを２０ｍｇのＨＰＭＣ、例えばオパドライ（Ｏｐａｄｒｙ）またはセピフィルム（Ｓｅｐｉｆｉｌｍ）で被覆する。結果として得られたフィルム錠は、総重量が５２０ｍｇであり、言及したアジュバントの他に、５０ｍｇの９−メチル−β−カルボリンを含む。
実施例３６
経口適用のための６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン製剤
この実施例は、５０．０ｍｇの６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを用いてのフィルムコート錠のための製剤に関する。錠剤コアは以下のものを含む。
６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン ５０．０ｍｇ
セルロース、微結晶性 ４１３．０ｍｇ
クロスカルメロース−Ｎａ ２５．０ｍｇ
二酸化ケイ素、コロイド性 ５．０ｍｇ
タルク粉 ５．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ２．０ｍｇ
合計重量 ５００．０ｍｇ
錠剤コアを２０ｍｇのＨＰＭＣ、例えばオパドライ（Ｏｐａｄｒｙ）またはセピフィルム（Ｓｅｐｉｆｉｌｍ）で被覆する。結果として得られたフィルム錠は、総重量が５２０ｍｇであり、言及したアジュバントの他に、５０ｍｇの６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを含む。
【００９０】
実施例３７
経口適用のための９−フルオロエチル−β−カルボリン製剤
この実施例は、３７．５ｍｇの９−フルオロエチル−β−カルボリンを用いてのフィルムコート錠向けの製剤に関する。錠剤コアは以下のものを含む。
９−フルオルエチル−β−カルボリン ３７．５０ｍｇ
セルロース、微結晶性 ３０９．７５ｍｇ
クロスカルメロース−Ｎａ １８．７５ｍｇ
二酸化ケイ素、コロイド性 ３．７５ｍｇ
タルク粉 ３．７５ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム １．５ｍｇ
合計重量 ３７５．００ｍｇ
錠剤コアを１５ｍｇのＨＰＭＣ、例えばオパドライ（Ｏｐａｄｒｙ）またはセピフィルム（Ｓｅｐｉｆｉｌｍ）で被覆する。結果として得られたフィルム錠は、総重量が３９０ｍｇであり、言及したアジュバントの他に、３７．５ｍｇの９−フルオロエチル−β−カルボリンを含む。
実施例３８
局所適用のための９−フルオロエチル−β−カルボリン製剤
２５０ｍｇの９−フルオロエチル−β−カルボリン、保存料としての１ｍｇのＰ−ヒドロキシ安息香酸メチルエステル、セチルステアリルアルコール、モノラウリン酸ソルビタン、ポリソルベートおよび精製水を用いて、局所適用のための２５０ｍｇの９−フルオロエチル−β−カルボリンの懸濁液１ミリリットルを調製する。結果として得た懸濁液は局所適用可能である。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［技術分野］
本発明は、β−カルボリン、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−β−ＢＣ）、β−カルボリン、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−β−ＢＣ）の製造ならびに、聴力損傷、目まい、および前庭障害の予防および治療におけるβ−カルボリン、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−β−ＢＣ）の使用、及びβ−カルボリンの誘導体、好ましくは９−アルキル−β−カルボリン（９−アルキル−β−ＢＣ）の誘導体を含む医薬組成物に関する。
［背景技術］
本発明に係る化合物は、急性および慢性耳疾患および聴力損傷、目まいおよび前庭障害、詳細には急性聴力損失、急性音響外傷、爆傷、慢性的騒音曝露に起因する迷路性難聴、老年性難聴、人工内耳の移植中の外傷（挿入外傷）、内耳疾患に起因する目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての前庭障害、耳鳴りおよび抗生物質および細胞増殖抑制剤に起因する聴力損傷の治療に役立つ。
【０００２】
世界保健機関（ＷＨＯ）の調査結果によると、世界中でおおよそ２億５千万人の人が軽度または重度の聴力損傷を患っている。米国では、３千万〜４千万人の人が聴力損傷および聴力損失に罹患している。治療のコストは、米国だけでも年間およそ５００億米ドルとなっている。ドイツ聴覚障害者協会は２００７年度について、１４才超のドイツ人口のおよそ１９パーセントが聴覚障害を患っていると報告した。
【０００３】
聴覚障害者の割合は、年令が上がるにつれて増大する。６５才超の人の聴力障害は、骨および関節の疾患、高血圧および心臓疾患に続いて慢性的な身体障害の第４位になる。全人口中６０才〜６９才の人の３７パーセントそして７０才代以上の人の５４パーセントが聴力障害に罹患している。
【０００４】
ドイツ連邦共和国では、おおよそ１２００万〜１５００万人の患者が、迷路性難聴を患い、およそ２９００万人の患者が耳鳴りを患っている。
「耳鳴り（Ｔｉｎｎｉｔｕｓ ａｕｒｉｕｍ：「耳の鳴り響くこと」を意味するラテン語）、短縮してｔｉｎｎｉｔｕｓ」という用語は、耳鳴りを患う人に、他の人が知覚できる外部源のない雑音を知覚させる症候または症候群を表わしている。これとは対照的に、「客観的耳鳴り」は、外部から知覚可能なまたは少なくとも測定可能な内因性の音源に基づいている。しかしながら、客観的耳鳴りは、主観的耳鳴りに比べて極めて稀である。
【０００５】
耳鳴りは、耳に作用する音とは無関係に患者が感知する音響知覚である。音響知覚は、内耳の迷路の聴覚機能障害に基づいている。したがって、耳鳴りの聴覚的印象は、患者の環境内にある音とは無関係である。患者が知覚する見かけの雑音のタイプは極めて多面的である。なかでも以下のような音響的印象が「耳鳴り」という用語で集約されている：
−ブーブーという音またはヒューヒュー鳴る音、
−歯擦音
−不規則雑音
−割れるようなまたは叩くような音。
【０００６】
雑音は、その強度が不変であることができる。しかしながらそれは、律動的な拍動性を有することができる。耳鳴りと同じ音響的印象の原因である実際の雑音がつねにあるわけではない。耳鳴りと音響的幻覚は明確に区別すべきである。
【０００７】
人口のおよそ１０〜２０パーセントが常時耳鳴りを患っている。一生涯で少なくとも一回だけこのような耳鳴りを感じる人は４０パーセント未満である。高齢者全体のおおよそ３分の１がつねに耳鳴りに気付くと申告している。発病は通常４０〜５０才であり、男女の罹患割合は同等である。耳鳴りを患う患者の数は、特に西欧先進国において増大しつづけてきた。
【０００８】
本発明は、聴力損傷、老人性難聴、目まいおよび前庭障害の予防および治療に適した薬物ならびに医薬組成物を提供するという課題に基づく。
独立クレームの技術的教示は、この課題を解決する。本発明のさらなる有利な実施形態、態様および詳細は、従属クレーム、説明および実施例に起因する。
［説明］
本発明は、一般式（１）の化合物の使用に関して、
【０００９】
【化１】
式中、
Ｒ1は、次の部分：−Ｒ12，−ＣＲ4Ｒ5Ｒ6，−ＮＲ12Ｒ13，−ＣＯ−ＮＨ−Ｒ12，−ＣＯ−Ｏ−Ｒ12の一つを表わし、
Ｒ2〜Ｒ6は互いに独立して、次の部分：−Ｒ7，−Ｒ8，−Ｒ9，−Ｒ10，−Ｒ11，−Ｈ，−ＯＨ，−ＯＲ7，−ＯＣＨ3，−ＯＣ2Ｈ5，−ＯＣ3Ｈ7，−Ｏ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＯＣ（ＣＨ3）3，−ＯＣ4Ｈ9，−ＯＰｈ，−ＯＣＨ2−Ｐｈ，−ＯＣＰｈ3，−ＳＨ，−ＳＣＨ3，−ＳＣ2Ｈ5，−ＳＣ3Ｈ7，−Ｓ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＳＣＨ（ＣＨ3）2，−ＳＣ（ＣＨ3）3，−ＮＯ2，−Ｆ，−Ｃｌ，−Ｂｒ，−Ｉ，−Ｎ3，−ＣＮ，−ＯＣＮ，−ＮＣＯ，−ＳＣＮ，−ＮＣＳ，−ＣＨＯ，−ＣＯＣＨ3，−ＣＯＣ2Ｈ5，−ＣＯＣ3Ｈ7，−ＣＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＣＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＯＣ（ＣＨ3）3，−ＣＯＯＨ，−ＣＯＣＮ，−ＣＯＯＣＨ3，−ＣＯＯＣ2Ｈ5，−ＣＯＯＣ3Ｈ7，−ＣＯＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＣＯＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＯＯＣ（ＣＨ3）3，−ＯＯＣ−ＣＨ3，−ＯＯＣ−Ｃ2Ｈ5，−ＯＯＣ−Ｃ3Ｈ7，−ＯＯＣ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＯＯＣ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＯＯＣ−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＯＮＨ2，−ＣＯＮＨＣＨ3，−ＣＯＮＨＣ2Ｈ5，−ＣＯＮＨＣ3Ｈ7，−ＣＯＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＣＯＮＨ［ＣＨ（ＣＨ3）2］，−ＣＯＮＨ［Ｃ（ＣＨ3）3］，−ＣＯＮ（ＣＨ3）2，−ＣＯＮ（Ｃ2Ｈ5）2，−ＣＯＮ（Ｃ3Ｈ7）2，−ＣＯＮ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−ＣＯＮ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−ＣＯＮ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−ＮＨＣＯＣＨ3，−ＮＨＣＯＣ2Ｈ5，−ＮＨＣＯＣ3Ｈ7，−ＮＨＣＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨＣＯ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＮＨＣＯ−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＮＨＣＯ−ＯＣＨ3，−ＮＨＣＯ−ＯＣ2Ｈ5，−ＮＨＣＯ−ＯＣ3Ｈ7，−ＮＨＣＯ−Ｏ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨＣＯ−ＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＮＨＣＯ−ＯＣ（ＣＨ3）3，−ＮＨ2，−ＮＨＣＨ3，−ＮＨＣ2Ｈ5，−ＮＨＣ3Ｈ7，−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨＣＨ（ＣＨ3）2，−ＮＨＣ（ＣＨ3）3，−Ｎ（ＣＨ3）2，−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2，−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−ＳＯＣＨ3，−ＳＯＣ2Ｈ5，−ＳＯＣ3Ｈ7，−ＳＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＳＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＳＯＣ（ＣＨ3）3，−ＳＯ2ＣＨ3，−ＳＯ2Ｃ2Ｈ5，−ＳＯ2Ｃ3Ｈ7，−ＳＯ2−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＳＯ2ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＳＯ2Ｃ（ＣＨ3）3，−ＳＯ3Ｈ，−ＳＯ3ＣＨ3，−ＳＯ3Ｃ2Ｈ5，−ＳＯ3Ｃ3Ｈ7，−ＳＯ3−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＳＯ3ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＳＯ3Ｃ（ＣＨ3）3，−ＯＣＦ3，−ＯＣ2Ｆ5，−Ｏ−ＣＯＯＣＨ3，−Ｏ−ＣＯＯＣ2Ｈ5，−Ｏ−ＣＯＯＣ3Ｈ7，−Ｏ−ＣＯＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−Ｏ−ＣＯＯＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｏ−ＣＯＯＣ（ＣＨ3）3，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ2，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨＣＨ3，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨＣ2Ｈ5，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨＣ3Ｈ7，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ［ＣＨ（ＣＨ3）2］，−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ［Ｃ（ＣＨ3）3］，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ（ＣＨ3）2，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−ＮＨ−ＣＯ−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ2，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨＣＨ3，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨＣ2Ｈ5，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨＣ3Ｈ7，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ［ＣＨ（ＣＨ3）2］，−ＮＨ−ＣＳ−ＮＨ［Ｃ（ＣＨ3）3］，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ（ＣＨ3）2，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−ＮＨ−ＣＳ−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨＣＨ3，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨＣ2Ｈ5，
−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨＣ3Ｈ7，−ＯＣ6Ｈ4−ＯＣＨ3，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ［ＣＨ（ＣＨ3）2］，−ＣＦ2Ｃｌ，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ［Ｃ（ＣＨ3）3］，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（ＣＨ3）2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−ＯＣ6Ｈ4−ＣＨ3，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ2，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨＣＨ3，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨＣ2Ｈ5，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨＣ3Ｈ7，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ［ＣＨ（ＣＨ3）2］，−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ［Ｃ（ＣＨ3）3］，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（ＣＨ3）2，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−Ｏ−ＣＯ−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−Ｏ−ＣＯ−ＯＣＨ3，−Ｏ−ＣＯ−ＯＣ2Ｈ5，−Ｏ−ＣＯ−ＯＣ3Ｈ7，−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−Ｏ−ＣＯ−ＯＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｏ−ＣＯ−ＯＣ（ＣＨ3）3，−ＣＨ2−ＣＯＯＨ，−ＣＨ2−ＣＯＯＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＯＯＣ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＯＣ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＯ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−ＣＯＣ（ＣＨ3）3．を表わし、
Ｒ7〜Ｒ13は互いに独立して次の部分：−ＣＨ2Ｆ，−ＣＨＦ2，−ＣＦ3，−ＣＨ2Ｃｌ，−ＣＨ2Ｂｒ，−ＣＨ2Ｉ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｆ，−ＣＨ2−ＣＨＦ2，−ＣＨ2−ＣＦ3，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｃｌ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｂｒ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｉ，シクロ−Ｃ3Ｈ5，シクロ−Ｃ4Ｈ7，シクロ−Ｃ5Ｈ9，シクロ−Ｃ6Ｈ11，シクロ−Ｃ7Ｈ13，シクロ−Ｃ8Ｈ15，−Ｐｈ，−ＣＨ2−Ｐｈ，−ＣＰｈ3，−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ4Ｈ9，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ5Ｈ11，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ6Ｈ13，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ（ＣＨ3）2，
−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ4Ｈ9，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ7Ｈ15，−Ｃ8Ｈ17，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，
−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ4Ｈ8−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ4Ｈ9，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2ＳＨ，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2ＳＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＳＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（Ｃ3Ｈ7）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ（Ｃ4Ｈ9）＝ＣＨ2，−Ｃ（Ｃ3Ｈ7）＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ［Ｃ（ＣＨ3）3］＝ＣＨ2，−Ｃ［ＣＨ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）］＝ＣＨ2，−Ｃ［ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2］＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ6Ｈ4−ＯＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ6Ｈ4−ＯＨ，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ4−ＯＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ4−ＯＨ，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ4Ｈ8−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ4Ｈ9，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（Ｃ3Ｈ7）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（Ｃ≡ＣＨ）2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（Ｃ≡ＣＨ）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ（Ｃ≡ＣＨ）2−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ（Ｃ≡ＣＨ）2，−ＣＨ（Ｃ≡ＣＨ）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ14Ｈ29，−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ（ＣＨ3）2；を表わし、
ならびに、上述の化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、錯体化合物、エナンチオマー、ジアステレオマーの混合物、プロドラッグ、互変異性体、ならびにラセミ化合物の、聴力損傷、目まいおよび前庭障害の予防および治療のための使用に関する。
【００１０】
本明細書で使用される「プロドラッグ」という用語は、不活性形態または比較的有効性の低い形態で投与される薬理学的物質として定義される。投与後、プロドラッグは体内で活性、有効な形態へと代謝される。
【００１１】
本明細書中で使用される「互変異性体」という用語は、１つの化学反応すなわち互変によって該平衡異性体に相互転換できる有機物質として定義される。好ましくは、塩基、酸または他の適切な物質が互変の触媒することができる。
［９−アルキル−β−カルボリンの一般的合成］
出発化合物であるノルハルマンは、例えば実施例１に記述されている通り、文献中で公知のプロトコルによって生産可能である。
【００１２】
確立したアルキル化反応によると、９位のＮ−アルキル化は、以下の反応スキームにしたがってヨウ化アルキル、臭化アルキル、塩化アルキル、メシル酸アルキル、トシル酸アルキルまたは他のアルキル化試薬から結果としてもたらされる。
【００１３】
【化２】
ＬＧは離脱基を表わす。アルキル化反応は好ましくは塩基を触媒とする。
アルキル化のための一般的反応プロトコル：
不活性ガス雰囲気下でＤＭＦ、ＴＨＦ、塩化メチレンなどの乾燥溶媒中に１モル当量のノルハルマンを溶解する。余剰の強塩基、好ましくは水素化ナトリウム（およそ２モル当量）を加えた結果として、低温（−７８℃〜０℃）で脱プロトン化が起こる。乾燥溶媒中に溶解することのできるアルキル化試薬１．０〜１．２モル当量も同様に０℃未満の温度で添加される。一晩混合物を撹拌し、これにより反応溶液の温度は室温まで上昇することができる。当業者にとって公知の要領で処理が行なわれる。未変換ノルハルマンを、イオン交換クロマトグラフィまたはイオン対抽出により除去することができる。通常は、収量は、理論的収量の３０〜７５パーセントの範囲内である。
【００１４】
以下の化合物が、上述のアルキル化にしたがって合成された。
【００１５】
【化３】
［１，６−二置換β−カルボリンの一般的合成］
【００１６】
【化４】
インドール誘導体を、対応するアルデヒドと反応させて上述の反応スキームにしたがって１，６−二置換β−カルボリンを得た。
【００１７】
これに関して、０．１モルのインドール誘導体をＤＭＦ中に溶解し、０．１２モルのアルデヒドを撹拌と共に添加した。１６時間室温で反応混合物を撹拌した。溶媒の除去後、結果として得た固体をトルエン中で２回、再結晶させ、乾燥させた。さらなる合成ステップでは、トルエン中で再結晶させ乾燥させた固体０．０７モルを６００ｍｌのクメン中に溶解し、９０分間、窒素雰囲気中で２．６グラムのＰｄ／Ｃ（１０％）と共に還流加熱した。１００ｍｌのエタノール添加後、高温溶液を濾過し、石炭（ｃｏａｌ）を３０ｍｌの高温エタノールにより３回抽出した。組合せた液体画分を真空下で溶媒から解放し、残渣をトルエン中で結晶化させてノルハルマンの１，３−二置換誘導体を得た。
【００１８】
Ｒ3が水素原子である場合には、対応する１−置換β−カルボリンが得られる。
閉環反応後、９位のＮ−アルキル化が、塩基、好ましくは水素化物、そして後続するアルキル化試薬例えばヨウ化アルキルの添加によって実施される。詳細なプロトコルは、実験の項に含まれる。このプロトコルにしたがって、以下の化合物が合成された。
【００１９】
一般構造式（ＩＩ）−（Ｖ）および（ＸＸＩ）の以下の化合物が好適である：
【００２０】
【化５】
本発明に係る９−アルキル−β−カルボリンは、意外にも、聴力損傷、目まいおよび前庭障害ならびに他の耳疾患に対する薬理学的効果を示し、したがって、本発明によれば聴力損傷、目まい、および前庭障害の予防及び治療のために使用される。聴力損傷、目まい、および前庭障害という適応症には、特に、迷路性難聴、老人性難聴、急性聴力損失、聴力喪失、人工内耳の移植中の外傷（挿入外傷）、慢性的騒音曝露に起因する迷路性難聴、急性音響外傷、回転性目まい発作、聴力損傷に起因する吐き気および嘔吐、内耳疾患に起因する目まい、メニエール病に関連したおよび／またはその一症候としての目まい、メニエール病に関連したおよび／またはその一症候としての前庭障害、耳鳴りおよび抗生物質、例えば、例えばペニシリンＶ、プロピシリン、アジドシリンのようなペニシリン類；例えばアンピシリン、アモキシシリンのようなアミノペニシリン類、；例えばセファクロール、セフラジンのようなセファロスポリン類、；例えばリンコマイシン、クリダマイシンのようなリンコマイシン類、；例えばドキシサイクリン、テトラサイクリンのようなテトラサイクリン類、；例えばメトロニダゾールのようなニトロイミダゾール、；例えばエリスロマイシンのようなマクロリド類、；例えばゲンタマイシン、ストレプトマイシンのようなアミノグリコシド、および細胞増殖抑制剤、例えばアクチノマイシンＤ、アミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、プリンのアンタゴニスト類およびピリミジン塩基類、アントラサイクリン類、アロマターゼ阻害剤、アスパラギナーゼ、抗エストロゲン剤、ベキサロテン、ブレオマイシン、ブセレリン、ブスルファン、カンプトテシン誘導体類、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、シクロホスファミド、シタラビン、サイトシナラビノシド、アルキル化細胞増殖抑制剤、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドセタキセル、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エピルビシン、エストラムスチン、エトポシド、エキセメスタン、フルダラビン、フルオロウラシル、葉酸アンタゴニスト類、ホルメスタン、ゲムシタビン、グルココルチコイド類、ゴセレリン、ホルモン類およびホルモンアンタゴニスト類、ハイカムチン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イフォスファミド、イマチニブ、イリノテカン、レトロゾール、ロイプロレリン、ロムスチン、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキセート、ミルテフォシン、マイトマイシン、有糸分裂阻害物質、ミトキサントロン、ニムスチン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペントスタチン、プロカルバジン、タモキシフェン、テモゾロミド、テニポシド、テストラクトン、チオテパ、チオグアニン、トポイソメラーゼ阻害物質、トポテカン、トレオスルファン、トレチノイン、トリプトレリン、トロフォスファミド、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、細胞増殖抑制性抗生物質に起因する聴力損傷も含まれる。
【００２１】
適応症つまり聴力損傷および聴力損失は騒音により誘発される可能性もあり、並びに／または急性音響外傷および／もしくは爆傷と関連する。例えば急性音響外傷のような音響外傷または爆傷の最も頻繁に挙げられる要因は、職場および余暇時間中の騒音公害である。
【００２２】
耳鳴りおよび聴力損傷は、同様に、血管虚血、自己免疫障害、感染病、耳硬化症および頭蓋外傷に基づくものである可能性もある。したがって本発明は同様に、急性音響外傷、爆傷、騒音公害、血管虚血、自己免疫障害、感染病および頭蓋外傷を原因とする聴力損傷および聴力損失にも関する。
【００２３】
メニエール病に関連する目まいは、この形の目まいに内耳が参与していることから、本発明にしたがって対応可能な適応症である。前庭器官として迷路は内耳の一部であることから、メニエール病に関連する目まいは平衡機能不全にもあてはまる。メニエール病又はモルブス（Ｍｏｒｂｕｓ）メニエールは、突然発生する回転性目まい発作、吐き気、嘔吐、耳の中のブンブン音（耳鳴り）および片側聴力損失の形で現われる。昼夜問わずいつでも認識可能な原因無く発生することができるメニエール病又はモルブス（Ｍｏｒｂｕｓ）メニエールの疾病の特徴は、嘔吐に至る吐き気を伴う突発性回転性目まい発作である。これらは、数分乃至数時間持続し、異なる長さの間隔をおいて反復する。目まいは非常に強いため、患者はもはや自立状態にあり続けることができない。さらに、罹患した耳の中のブンブン音（耳鳴り）および圧力感に関連する変動性（一時的に発生する）聴力損失が存在する。
【００２４】
β−カロチンの環系の９位（Ｒ1）および６位（Ｒ3）における置換基が好ましい。Ｒ1の置換パターンは好ましくは、アルキル置換基を含み、特に好適であるのはメチル置換基である。Ｒ2およびＲ3部分は、特に好適なアルキル置換基、ハロゲン化物およびアルコキシ置換基を含む。Ｒ3は好ましくはアルコキン部分、例えば−ＯＣＦ3，−ＯＣＨ2−ＣＨ2Ｆ，−ＯＣＨ2−ＣＦ3，−ＯＣＨ2−ＣＨ2Ｃｌ，シクロ−ＯＣ3Ｈ5，シクロ−ＯＣ5Ｈ9，シクロ−ＯＣ6Ｈ11，−ＯＰｈ，−ＯＣＨ2−Ｐｈ，−ＯＣＨ3，−ＯＣ2Ｈ5，−ＯＣ3Ｈ7，−ＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＯＣ4Ｈ9，−ＯＣ5Ｈ11，−ＯＣＨ（Ｃ2Ｈ5）2，−ＯＣ6Ｈ13，−ＯＣＨ＝ＣＨ2，−ＯＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＯＣ7Ｈ15，−ＯＣ8Ｈ17，−ＯＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＯＣＨ2ＯＨ，−ＯＣＨ2−ＣＨ2ＮＨ2，−ＯＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＯＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＯＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＯＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＯＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ．である。
【００２５】
Ｒ1は好ましくは、最高６個の炭素原子、さらに好ましくは最高４個の炭素原子を有するアルキル部分である。
物質９−メチル−β−カルボリンおよび９−フルオルエチル−β−カルボリンが特に好ましい。
【００２６】
好ましい化合物は次の通りである。
【化６】
本発明の化合物及び特に好適な一般構成式（ＩＩ）−（ＸＸ）の化合物を、急性および慢性耳疾患および聴力損傷、目まいおよび前庭障害、詳細には急性聴力損失、急性音響外傷、慢性的騒音曝露に起因する迷路性難聴、老年性難聴、人工内耳の移植中の外傷（挿入外傷）、内耳疾患に起因する目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての前庭障害、耳鳴りおよび抗生物質および細胞増殖抑制剤に起因する聴力損傷の治療および／または予防用の医薬調合物の製造のために使用することができる。
【００２７】
本発明に係る化合物を、ニートでまたは薬理効果のある塩の形で投与することができる。本発明の化合物は、アルカリ性を有することができることから、本発明の化合物の塩を、確立された方法によって生成することができる。
【００２８】
本発明の化合物と酸付加塩を形成する酸としては、以下の酸を列挙することができる：硫酸、スルホン酸、リン酸、硝酸、亜硝酸、過塩素酸、臭化水素酸、塩酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、シュウ酸、グルコン酸（グリコン、デキストロン酸）、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、ジヒドロキシ酒石酸（ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシプロパン酸）、フマル酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、マロン酸、ヒドロキシマレイン酸、ピルビン酸、フェニル酢酸、（ｏ−、ｍ−、ｐ−）トルイル酸、安息香酸、ｐ−アミノ安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、エチレンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフチルスルホン酸、ナフチルアミノ−スルホン酸、スルファニル酸、カンファースルホン酸、キナ酸（キニーネ酸）、ｏ−メチル−マンデル酸、水素ベンゼンスルホン酸（ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｐｈｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、ピクリン酸（２，４，６−トリニトロフェノール）、アジピン酸、ｄ−ｏ−トリル−酒石酸、例えばメチオニン、トリプトファン、アルギニンおよび、詳細には、例えばグルタミンン酸またはアスパラギン酸などのような酸性アミノ酸類などのようなアミノ酸類。
【００２９】
化合物のタイプに応じて、ベタイン形態が可能である。
本発明はさらに、本発明に係る少なくとも１つの化合物または本発明に係る少なくとも１つの化合物の塩を使用することによって製造された医薬組成物にも関する。
【００３０】
本発明の少なくとも１つの化合物の他に、医薬組成物は、薬理学的に許容できる担体、賦形剤、および／または溶媒を含む。
このような製剤は、吸入または静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、皮膚粘膜、経口、直腸、経皮、局所、口腔、皮内（ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌ）、胃内、皮内（ｉｎｔｒａｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、鼻腔内、口腔内、経皮、または舌下投与に適している。中耳内への投与または注入ならびに鼓膜に対する局所的投与が特に好ましい。
【００３１】
医薬組成物は、経皮投与系（バンドエイド、フィルム）、点滴剤、丸薬、錠剤、フィルム錠剤、層錠剤、ジェル、軟こう、シロップ、顆粒、座薬、エマルジョン、分散、マイクロカプセル、カプセル、粉末または注射液の形で製造され投与可能である。リポリーム、ジェルおよびエマルジョンの形での医薬製剤が好ましい。
【００３２】
耳は、次のようにできている。音響道が耳介から内耳まで通じる。音響道は、鼓膜で終わる。耳の音響道の部分は外耳と呼ばれる。エウスタキー管に連結される空間であるいわゆる中耳は、外耳の背後にある。中耳は片側では鼓膜によって、そして隣接する側で楕円形および円形の窓により分離される。内耳と呼ばれる空間が両方の窓の後ろに続く。内耳は、耳のいくつかの器官、なかでもいわゆる蝸牛を収容する。蝸牛は、蝸牛自体、コルチ器を含む。蝸牛ならびにコルチ器は、正円窓の隣に位置する。さらに、蝸牛は聴神経に連結される。
【００３３】
こうして、正円窓の膜は、内耳空間に対する生物学的障壁であり、聴力損傷の局所的療法にとって最大の障害物となる。投与された薬物は、内耳空間内に入るために正円窓の膜を通過しなければならない。操作により正円窓の膜が損傷を受けることになるため、正円窓の膜を通して機械的−機構的に薬物を適用することはできない。しかしながら、外科的例えば鼓膜を通した注入により、正円窓の膜まで薬物を局所的に送達することはでき、このとき薬物は正円窓の膜に浸透することができる。聴覚器官の感覚細胞（内部および外部有毛細胞）は、蝸牛の内側に局在化されており、聴覚器官の感覚細胞（内部および外部有毛細胞）の全数がコルチ器と呼ばれる。有毛細胞は、あらゆる原因（年令、例えば抗生物質および細胞増殖抑制剤などの薬物）の迷路性難聴および耳鳴りにおいて最初に損傷を受ける。正円窓は、蝸牛内の区画である鼓室階および前庭階で終わる。鼓室階および前庭階には外リンパ液と内リンパ液が満たされ、そして有毛細胞は外リンパ液に直接接触している。したがって正円窓から入る物質は、外リンパ液中に分散され、このようにして有毛細胞に到達するだろう。さらに外リンパ系は迷路と接触した状態にある。こうして薬物は蝸牛の外リンパ液を介して、迷路すなわち平衡器官の外リンパ液にも同様に到達する。
【００３４】
したがって、正円窓の膜において局所的に薬物を適用するのに適した全ての医薬製剤が好適である。医薬製剤が正円窓の膜を通るβ−カルボリンの通過を支援する膜浸透増強剤を含むなら、さらに好ましい。したがって、液体またはジェル様の製剤が特に好ましい。当然のことながら、薬物を経口投与することも可能である。
【００３５】
液体製剤は、溶液、懸濁液、スプレーおよびエマルジョン、例えば非経口注射のための水ベース、または水−プロピレングリコールベースの注射液を含む。
好ましくは低融点ろう、脂肪酸エステルおよびグリセリドが、座薬の調製に利用される。
【００３６】
あらゆる種類の投与について、医薬組成物は、治療的効果を達成するのに充分な濃度のβ−カルボリン、そして必要ならば無機または有機、液体または固体の薬学的に許容できる賦形剤を含む。中耳内での局所投与に適した医薬組成物は、ニートでまたは賦形剤と共にβ−カルボリンを含む凍結乾燥製剤などの、中耳内投与前に調製することができる水溶液または懸濁液を含む。医薬組成物にはさらに、生分解性または非生分解性の水性または非水性またはミクロスフェアに基づいたゲルを含む。生分解性または非生分解性の水性または非水性またはミクロスフェアに基づいたゲルの例としては、ポロキサマー、ヒアルロン酸塩、キシログルカン、キトサン、ポリエステル、ポリラクチド、ポリグリコリドまたはそれらのコポリマー類ＰＬＧＡ、酢酸スクロースイソブチレート、グリセロールモノオレエートを含む。腸内または非経口投与に適した医薬組成物には、上記で記述した通りの錠剤またはゼラチンカプセルまたは水溶液または懸濁液を含む。
【００３７】
医薬組成物は、減菌することが可能であり、並びに／またはアジュバント、例えば保存料、安定剤、保湿剤および／もしくは乳化剤、浸透圧調節用塩および／もしくは緩衝液を含むことができる。本発明の医薬組成物は、所望される場合、さらなる活性物質を含むことができる。医薬組成物を、先行技術から公知の任意の一般的方法、例えば配合、顆粒化、調合（ｃｏｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎｇ）、溶解および凍結乾燥によって製造することができ、およそ０．０１〜１００パーセント、好ましくは０．１〜５０パーセントそして凍結乾燥物として最高１００パーセントのβ−カルボリンを含むことができる。
【００３８】
好ましい実施形態において、本発明の医薬組成物は、局所医薬品として製剤化される。耳性医薬品用の適切な賦形剤は、薬学的に許容でき、β−カルボリンおよび／または任意の他の活性物質、例えば塩化ナトリウム、アルコール、植物油、ベンジルアルコール、アルキルグリコール、ポリエチレングリコール、三酢酸グリセリン、ゼラチン、例えばラクトースまたはテンプンのような炭水化物、炭酸マグネシウム（マグネシア、チョーク）、ステアリン酸塩（ワックス）、タルクおよびペトロラタム（ワセリン）と反応しない有機または無機物質である。記述された組成物は、減菌することが可能であり並びに／または例えば潤滑剤のようなアジュバント、例えばチオマーサルのような保存料（例えば５０重量パーセント）、安定剤および／もしくは保湿剤、乳化剤、浸透圧調節用塩、緩衝物質、着色剤および／もしくは着香剤を含むことができる。これらの組成物は同様に、該当する場合には１つまたは複数のさまざまな活性物質を含むこともできる。本発明に係る耳性組成物は、例えば、抗生物質、例えばステロイド、コルチゾン、鎮痛剤、アンチピリン、ベンゾカイン、プロカインなどの抗炎症性活性物質、などの他の生物学的活性物質を含む、さまざまな物質を含むことができる。
【００３９】
本発明に係る局所医薬品用の組成物は、他の薬学的に許容できる物質を含むことができる。本発明の好ましい実施形態においては、耳、耳の中、または耳管の内部に適用された場合に、血液循環系または中枢神経系へのβ−カルボリンの放出および場合によっては任意の他の１つまたは複数の活性物質の放出を増強することのない局所用賦形剤が使用される。通常は、例えば、局所用賦形剤が、全身的循環系内の粘膜全体にわたる経皮的移送を増強するだろう有意な排除特性を全く示さないことが好ましい。このような賦形剤は、炭化水素酸、無水吸収剤例えば親水性ペトロラタム（ヴァセリン（Ｖａｓｅｌｉｎｅ））および無水ラノリン（例えばアクアフォー（Ａｑｕａｐｈｏｒ））そして例えばラノリンおよびコールドクリーム（Ｃｏｌｄ Ｃｒｅａｍ）のような水−油エマルジョンをベースとする物質を含む。さらに好ましいのは、通常水溶性である全ての賦形剤ならびに水中油形エマルジョン（クリームまたは親水性軟こう）をベースとする物質、および例えばポリエチレングリコール系賦形剤のような水溶性ベースの物質およびメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースおよびヒドロキシプロピルメチルセルロースなどのさまざまな物質でゲル化された水溶液を含む、実質的に非排除性の賦形剤である。
【００４０】
錠剤またはカプセルの形での経口投与のためには、本発明のβ−カルボリンを、結合剤、例えばコーンスターチ、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース；例えばラクトース、サッカロース、グルコース、マンニトール、ソルビトールおよび他の還元および非還元糖類、微結晶性セルロース、硫酸カルシウムまたはリン酸水素カルシウムなどの充填剤；例えばステアリン酸マグネシウム、タルク粉またはシリカ、ステアリン酸、硫酸ステアリルナトリウム、ベハン酸グリセリル、ステアリン酸カルシウムおよび類似物などの潤滑剤；例えばジャガイモテンプンまたはグリコール酸ナトリウム−テンプンなどの崩壊剤；例えばドデシル硫酸ナトリウムなどの保湿剤；着色剤；着香剤；ゼラチン；甘味料；例えばアラビアゴムなどの天然および合成ゴム、トラガカントまたはアルギン酸塩；緩衝塩；カルボキシメチルセルロース；ポリエチレングリコール；ワックスなどを含むリストから選択された任意の薬学的に許容できる非毒性アジュバントと組合わせ得る。
【００４１】
錠剤を例えば、アラビアゴム、ゼラチン、タルク粉、二酸化チタンなどを含む濃縮糖溶液でコーティングすることができる。別の実施形態において、錠剤を、軽量揮発性有機溶媒または有機溶媒の混合物中に可溶であるポリマーでコーティングすることができる。好ましい実施形態において、本発明のβ−カルボリンは、即時放出用錠剤としてまたは徐放用錠剤として製剤化される。即時放出用の剤形は、６０分以下の比較的短い時間内にβ−カルボリン総量の大部分の放出を許し、β−カルボリンの急速な吸収を可能にする。経口剤形のための徐放性製剤は、より長時間にわたる遅延放出を可能にし、より長時間にわたる遅延放出を可能することによってβ−カルボリンの治療的に有効な血漿レベルに到達し及び／またはこの治療的に有効な血漿レベルをより長時間にわたり安定した状態に保ち及び／またはβ−カルボリンの他の薬物動態特性を修正する。
【００４２】
本発明のβ−カルボリンを、例えば植物油またはポリエチレングリコールと混合することによって、軟質ゼラチンカプセルとして製剤化することができる。硬質ゼラチンカプセルは、例えばラクトース、サッカロース、マンニトール、例えばジャガイモテンプン、コーンスターチのようなテンプンまたはアミロペクチン、セルロース誘導体またはゼラチンのうちのような錠剤用上述のアジュバントのいずれか１つを使用することにより、顆粒形態のβ−カルボリンを含むことができる。本発明のβ−カルボリンの液体および、半液体形態を硬質ゼラチンカプセル内に充填することもできる。
【００４３】
本発明のβ−カルボリンを、例えばポリグリコール酸／乳酸（ＰＧＬＡ）で作られたマイクロカプセルまたはマイクロビーズ内に導入することもできる。医薬組成物からの本発明のβ−カルボリンの制御放出を、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸のコポリマーとポリグリコール酸のコポリマー、ポリ−ε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオエトエステル、ポリアセタール、ポリヒドロプラン、ポリシアノアクリレートおよびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーを含むリストから選択された生体適合性ポリマーを使用することによって達成することができる。
【００４４】
本発明の別の実施形態において、β−カルボリンは経口液体製剤として提供される。経口投与のための液体製剤を、溶液、シロップ、エマルジョンまたは懸濁液の形で提供可能である。代替的には、使用前に水または別の適切な賦形剤を用いて乾燥経口製剤の再構成する経口液体製剤を調製することができる。経口投与のための製剤は、本発明のβ−カルボリンそして場合によっては他の活性物質の制御または遅延放出が達成されるように、適切に製剤化されることができる。
【００４５】
液体形態での経口投与が意図されている場合、本発明のβ−カルボリンは、例えばエタノール、グリセリン、水；、例えばソルビトールシロップ、セルロース誘導体類または食用水素化脂質などの懸濁剤；例えばレシチンまたはアラビアゴムなどの乳化剤；例えばアーモンド油、油性エステル、エタノールまたは分画された植物油などの非水性賦形剤；例えばメチル−またはプロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾエートまたはソルビン酸などの保存料などのような非毒性で薬理学的に許容できる不活性賦形剤と混合可能である。例えばブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルオール、没食子酸プロピル、アスコルビン酸ナトリウム、クエン酸などの酸化防止剤などの安定剤は、剤形を安定化するために使用されることができる。例えば、溶液は、およそ０．２重量パーセントから最高およそ２０重量パーセントのβ−カルボリンを含むことができ、ここで平滑化化合物（ｌｅｖｅｌｉｎｇ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）は糖およびエタノール、水、グリセリンおよびプロピレングリコールの混合物である。任意には、このような液体製剤は、着色剤、着香剤、サッカリン、および増粘剤としてのカルボキシルセルロースおよび／または他のアジュバントを含むことができる。
【００４６】
別の実施形態においては、本発明のβ−カルボリンが治療上有効な用量は溶液の形で経口投与され、ここでこの溶液には、保存料、甘味料、可溶化剤および溶媒を含む。経口投与のための溶液は、１つ以上の緩衝液、着香剤またはさらなる賦形剤を含むことができる。さらに別の実施形態においては、ペパーミントまたは他の着香剤が、経口投与のための本発明のβ−カルボリンの溶液に添加される。
【００４７】
吸入による投与のためには、本発明のβ−カルボリンを、例えばジクロロフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または別の適切なガスなどの適切な噴霧剤を伴う噴霧器または加圧容器内のエアゾルスプレーといった医薬的形態で適切な要領で投与することができる。加圧エアゾルが使用される場合、用量は、測定された量を投与するためのバルブを具備することによって決定されることができる。吸入器またはインサフレーターで使用するためのゼラチンなどで作られたカプセルおよびカートリッジは、カプセルおよびカートリッジが本発明のβ−カルボリンと、場合によっては１つ以上の活性物質そしてラクトースやテンプンなどの適切な粉末ベースとの粉末混合物を含むように製剤化されることができる。
【００４８】
注射による非経口投与のための溶液を、およそ０．５重量パーセントから最高およそ１０重量パーセントの濃度で、本発明のβ−カルボリンの薬学的に許容できる水溶性塩の水溶液の形で調製することができる。注射による非経口投与のための溶液はさらに、安定剤および／または緩衝物質を含むことができ、異なる用量単位のアンプルに入って適切な形で提供されることができる。
【００４９】
したがって、ここで提示される全ての化合物は、急性および慢性耳疾患および聴力損傷、目まいおよび前庭障害、詳細には急性聴力損失、急性音響外傷、慢性的騒音曝露に起因する迷路性難聴、老年性難聴、人工内耳の移植中の外傷（挿入外傷）、内耳疾患に起因する目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての前庭障害、耳鳴りおよび抗生物質および細胞増殖抑制剤に起因する聴力損傷の予防および／または防止のための医薬製剤の製造に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
【図１】４８時間９０μＭの９−メチル−β−カルボリン（９−Ｍｅ−ＢＣ）に、または溶媒（１００％）にそれぞれ曝露した後のラットの内耳細胞（蝸牛のコルチ器）の定量的ＲＴ−ＰＣＲ（実時間ＰＣＲ）のグラフを示す図である。１００％を超える値は、９−Ｍｅ−ＢＣが、インキュベーション中に対応する遺伝子の転写を活性化したことを意味しており、１００％未満の値については、９−Ｍｅ−ＢＣが、インキュベーション中に対応する遺伝子の転写を活性化したことの反対のことが妥当である。
【００５１】
図１に使用されている略号は、次の意味を有する：
Ａｒｍｅｔｌ１：保存ドーパミン神経栄養因子
ＢＮＤＦ：脳由来神経栄養因子
ＢＭＰ２：骨形成タンパク質２
Ｃｂｌｎ１：セレベリン１前躯体タンパク質
ＤＡＴ：ドーパミン輸送体
ＤＥＸＡ：デキサメタゾン
ＤＲＤ１：ドーパミン受容体亜型１
ＤＲＤ２ｌ：ドーパミン受容体亜型２のロング変異体
ＧＤＮＦ：グリア細胞株由来神経栄養因子
ＮＧＦ：神経成長因子
ＮＰＹ：神経ペプチドＹ
Ｎｕｒｒ１：核内受容体調節１タンパク質
ＰＴＸ：対合様ホメオドメイン転写因子
Ｒｅｔ：トランスフェクション中に再配置された受容体
ＲＫＩＰ：ｒａｆ−１キナーゼ阻害タンパク質
Ｓｉｒｔ：サイレント情報調節因子
Ｔｈ：チロシンヒドロキシラーゼ
ＴＮＦ：腫瘍壊死因子
【図２】４８時間培養の後の内耳のらせん神経節の細胞の生存に対する、グリア細胞株由来神経栄養因子（ＧＤＮＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）およびデキサメタゾン（ＤＥＸＡ）の異なる濃度および組合せの効果をグラフで示す図である。棒の高さは、平均標準誤差を反映し、３回または４回の異なる実験の２４〜３２の観察を表わす。対照グループに対する異なる比較の意義が、棒の上に示され、一方他の比較はカッコにより別個に描かれる（Ｐ＜０．０５*；Ｐ＜０．０１**；Ｐ＜０．００１***）。出典：Ｊａｈｒｅｓｂｅｒｉｃｈｔ Ｍｅｄｉｚｉｎｉｓｃｈｅ Ｈｏｃｈｓｃｈｕｌｅ Ｈａｎｎｏｖｅｒ ２００５，Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｅａｒ，Ｎｏｓｅ ａｎｄ Ｔｈｒｏａｔ Ｄｉｓｅａｓｅｓ （ｄｉｒｅｃｔｏｒ：Ｔｈ．Ｌｅｎａｒｚ）
【図３Ａ】上述の通り、培養中で１４日間、ハルマン（Ｈａｒｍａｎ）を用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す図である。対照グループと１１０μＭのハルマン（Ｈａｒｍａｎ）で処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、Ｈａｒｍａｎでの処置は、軸索長の増大につながった。
【図３Ｂ】上述の通り、１４日間、９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す図である。対照グループと７０、９０または１１０μＭの９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【図３Ｃ】上述の通り、６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す図である。対照グループと５０μＭの６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【図３Ｄ】上述の通り、９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す図である。対照グループと３０、５０または７０μＭの９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【図４Ａ】ヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞でのＢＤＮＦ（脳由来神経栄養因子）の相対的遺伝子発現を示す図である。２日後のＢＮＤＦの転写は、最高濃度（１１０μＭ）のＬＥ−０２（９−メチル−β−カルボリン）でのみ刺激され、一方１４日間の曝露後では、３０〜５０μＭというより低い濃度で刺激が誘発された。このようなシフトは、９−フルオロエチル−β−カルボリンについても見られた（図４ＡのＮｏ．５５９の物質；２日後、７０μＭおよび９０μＭによって刺激され、１４日後では３０μＭおよび５０μＭで刺激された）。対照的に６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン（図４Ａ、Ｎｏ．５１３の物質）は、ＢＤＮＦ転写の莫大な用量依存性増加につながった。
【図４Ｂ】セレベリン−１前駆体タンパク質（ＣＢＬＮ）の相対的遺伝子発現を示す図である。セレベリン−１前駆体タンパク質は、９−フルオロエチル−β−カルボリンに２日間曝露した後にのみ増大した。１４日間の曝露後、全ての試験されたβ−カルボリンのＣＢＬＮ発現が増加した。調査された全ての濃度においてほぼ同じ刺激を示している９−フルオロエチル−β−カルボリンは例外として、被験物質の濃度が低くなると、濃度がより高い場合より強い効果を有した。
【図４Ｃ】ＧＤＮＦ（グリア細胞株由来神経栄養因子）の相対的遺伝子発現を示す図である。個別の濃度において、１４日間の曝露は、最高３倍の刺激につながった。
【図４Ｄ】ＮＧＦ（神経成長因子）の相対的遺伝子発現を示す図である。１４日間の曝露後、遺伝子発現は、２０〜５０倍だけ増大した。再び、濃度が低くなればなるほど、ＮＧＦの増大に関してはるかに効果が高くなった。
【図４Ｅ】ＮＰＹ（神経ペプチドＹ）の相対的遺伝子発現を示す図である。１４日間の曝露後、遺伝子発現は１．３〜４倍増大した。９−メチル−β−カルボリンおよび９−フルオロエチル−β−カルボリンの場合、濃度が低くなればなるほど、より高い濃度より効果は高くなった。
【図５】対照細胞ＳＨ−ＳＹ５Ｙにおける最高１０倍のレベルまでの、転写因子ＣＲＥＢの形成に対する９−メチル−β−カルボリン、９−フルオロエチル−β−カルボリンおよび６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンの用量依存活性化効果を示す（３回の独立した実験、４８時間のインキュベーション）図である。
【図６Ａ−６Ｂ】実施例２９の実験によって得られた外リンパ液のクロマトグラムを示す図であって、図６Ａおよび６Ｂによるとクロマトグラムは、３時間モルモットの内耳領域内に９−Ｍｅ−ＢＣを３時間（図６Ａ）または１０時間注射（図６Ｂ）した後に得られた外リンパ液について記録されたものである。
【図６Ｃ−６Ｄ】実施例２９の実験によって得られた外リンパ液のクロマトグラムを示す図であって、図６Ｃおよび６Ｄによるとクロマトグラムは、モルモットの蝸牛内に９−Ｍｅ−ＢＣを３時間または２０時間直接注射した後に得られた外リンパ液について記録されたものである。
【図６Ｅ】実施例２９の実験によって得られた外リンパ液のクロマトグラムを示す図であって、図６Ｅによるとクロマトグラムは、９−Ｍｅ−ＢＣでの処置に全く曝露されなかった外リンパ液について記録されたものである。
【図６Ｆ】実施例２９の実験によって得られた外リンパ液のクロマトグラムを示す図であって、図６Ｆによるとクロマトグラムは、直線の較正線を描いており、ここで９−Ｍｅ−ＢＣの濃度は、得られたクロマトグラフィの最大値の下の面積として定められた。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
［実施例］
実施例１：９−メチル−β−カルボリンの合成
９−メチル−β−カルボリンのための合成スキーム
【００５３】
【化７】
Ｈｏ−Ｗａｌｋｅｒ（１９８８年）により記述されているトリプタミン塩酸塩とグリオキシル酸によって製造された１３ｇ（０．０７５６ｍｏｌ）の１，２，３，４−テトラヒドロ−β−カルボリンと、２．６ｇのＰｄ／Ｃ（１０％）と、の６００ｍｌのクメン中の、撹拌溶液を９０分間窒素雰囲気内で還流した。１００ｍｌのエタノールを添加した後、高温溶液を濾過し、高温エタノール３０ｍｌにより石炭（ｃｏａｌ）を３回抽出した。組合わせた液体画分を濃縮し、残渣をトルエル中で結晶化させて、１０．５ｇ（８２％）のノルハルマンを得た。文献（Ｈｏ ＢＴ，ＭｃＩｓａａｃ ＷＭ，Ｗａｌｋｅｒ ＫＥ，Ｅｓｔｅｖｅｚ Ｖ，Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ５７：２６９，１９６８）中に記載されている通りに、再処理をさらに改善して、９位でのメチル化を実施した。１グラム（５．９５ｍｍｏｌ）のノルハルマンを窒素雰囲気内で乾燥ＤＭＦ１０ｍｌ中に溶解した。その後、０．３６ｇ（１４．９ｍｍｏｌ）の水素化ナトリウムを０℃でパラフィン中の６０％分散の形で添加した。反応混合物を室温まで冷却した後、これを−１０℃まで冷却し、０．８４ｇ（５．９６ｍｍｏｌ）のヨードメタンを添加した。さらに１２時間撹拌した後、混合物をもう一度室温まで冷却した。減圧下で全ての揮発性成分を除去した。その後、１００ｍｌの水を添加し、混合物を３×５０ｍｌのＣＨＣｌ3で抽出した。組合わせた有機画分を５×２０ｍｌの水で洗浄し、蒸発乾燥した。残渣を２Ｎの塩酸１００ｍｌに懸濁した。所望のメチル化生成物から抽出物を分離するために、２日間液／液抽出装置によりＣＨＣｌ3でＨＣｌ塩のイオン対交換抽出を実施した。溶媒の除去後、９−メチル−β−カルボリニウムヒドロクロリドの黄色結晶０．７ｇ（６４％）を得た。
【００５４】
融点：２９５℃；遊離塩基のＧＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ＝１８２（１００％），１６７（５％），１４０（１０％），１２７（１０％），１１３（５％），９１（１０％）．1Ｈ−ＮＭＲ（ＨＣｌｓａｌｔ）：δ（ｐｐｍ）メタノール ｄ４，２５０ ＭＨｚ：４．０６，ｓ，３Ｈ，Ｎ−ＣＨ3；７．２８−７．３５，ｄｔ，Ｊ＝１．２； ６．８，１Ｈ，Ｈ６；７．５８−７．７０，ｍ，２Ｈ，Ｈ７，Ｈ８；８．１３−８．１６，ｄ，Ｊ＝５．４，１Ｈ，Ｈ４；８．１８−８．２１,ｄ，Ｊ＝７．９，１Ｈ Ｈ５；８．３１−８．３３，ｄ，Ｊ＝５．４，１Ｈ，Ｈ３；８．８９，ｓ，１Ｈ，Ｈ１．
実施例２−１３：化合物Ａ〜Ｌの生成
対応するヨウ化アルキル、臭化アルキルまたはトシル化アルキルを使用して、実施例１にしたがって、化合物Ａ〜Ｌの合成を行なう。収量は、理論的収量の３０〜７５％であった。
実施例１４：ラットの内耳細胞（蝸牛）の研究
本発明に係るβ−カルボリンの有効性を証明するために実験を行なって、本発明に係るβ−カルボリンの部類の化合物が耳疾患、聴力損傷および目まいにもたらすであろう効果を判定した。９−メチル−β−カルボリン（９−Ｍｅ−ＢＣ、ＶＩ）を化合物例として選択した。他の被験物質の有効性を、９−メチル−β−カルボリン（９−Ｍｅ−ＢＣ、ＶＩ）の有効性と関連づけするだろう。
【００５５】
最初に、ラットの蝸牛のコルチ器の器官培養物を調製し、これを次のステップで９−メチル−β−カルボリンと接触させた。異なるニューロトロフィンの発現を、コルチ器に対する９−メチル−β−カルボリンの効果のマーカーとして測定した。このために、コルチの組織からＲＮＡを単離し、ｃＤＮＡに転写し、ニューロトロフィンのｃＤＮＡの濃度をリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ方法を用いて決定した。
【００５６】
４０匹のラットの蝸牛のコルチ器を、出産後４日目に数回のセッションで調製した。その後、器官培養物を９０μＭの濃度で４８時間９−Ｍｅ−ＢＣに曝露するか、または対応する量の溶媒（対照条件）に曝露した。その後、器官培養物をＰＢＳ−ＥＤＴＡ（ＰＢＳで１：２７希釈したバイオ ケム（Ｂｉｏ Ｃｈｅｍ）のＰＢＳ−ＥＤＴＡ）で洗浄した。次に−８０℃で試料を凍結した。キアゲン（Ｑｉａｇｅｎ）、ヒルデン（Ｈｉｌｄｅｎ）のＲＮイージー脂質組織ミニキット（ＲＮＥａｓｙ Ｌｉｐｉｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ）を用いて、全ＲＮＡを単離した。単離したＲＮＡの試料を用いてＤＮＡｓｅ消化を実施し、ひき続きこのキットのメーカーの指示にしたがって数回洗浄ステップを行なった。ＲＮａｓｅフリーの水によりＲＮＡを溶出した。ＲＮＡの量および質を測光により判定した。各試料のＲＮＡ１ミリグラムを、ロシュ アプライド サイエンス（Ｒｏｃｈｅ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ），マンハイム（Ｍａｎｎｈｅｉｍ）のキットを用いて相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）に転写した。蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）方法を用いて ロシュ アプライド サイエンス（Ｒｏｃｈｅ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ），マンハイム（Ｍａｎｎｈｅｉｍ）のライトサイクラー システム（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ Ｓｙｓｔｅｍ）によりリアルタイム逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ）を実施した。このために、同じ会社のライトサイクラーファストスタートＤＮＡマスターハイブリダイゼーションブローブキット（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ ＦａｓｔＳｔａｒｔ ＤＮＡ Ｍａｓｔｅｒ Ｈｙｂｒｉｄｉｓａｔｉｏｎ Ｐｒｏｂｅｓ Ｋｉｔ）を使用した。相対的定量化のためのいわゆるハウスキーピング遺伝子として、ヒドロキシメチルビランシンターゼ（ＨＭＢＳ）のための遺伝子を選択した。ＴＩＢＭｏｌｂｉｏｌ，Ｂｅｒｌｉｎにより、適切なプライマとプローブは設計し合成された。２５マイクログラムのｃＤＮＡを各反応に添加した。サイクル条件は次の通りであった：５分間９４℃での変性、変性条件で７秒間の５５サイクル、適温で１０秒間のプライマおよびプローブの結合および１０秒間７２℃での伸長。その後、融点曲線分析を実施した。各サイクルの測定された蛍光を、ライトサイクラーソフトウェア（ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）によって分析した。各試料の目標相対量は、同じ試料のハウスキーピング遺伝子の量との比較の結果得られた。Ｌｉｖａｋ及びＳｃｈｍｉｔｔｇｅｎの２−ΔΔC(t)方法（Ｌｉｖａｋ ＫＪ及びＳｃｈｍｉｔｔｇｅｎ ＴＤ．「Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄａｔａ ｕｓｉｎｇ ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ ａｎｄ ｔｈｅ ２（−Ｄｅｌｔａ Ｄｅｌｔａ Ｃ（Ｔ））」、Ｍｅｔｈｏｄｓ２００１；２５：４０２−８）により定量化を行なった。
【００５７】
一回毎に得たＲＮＡの量は、脳領域から典型的に得られるＲＮＡの量に比べて非常に少なかった。したがって、科学的所見の状態に基づいて注意深く目標を選択しなくてはならなかった。その結果、第１に、内耳の諸疾患の差異について単一の原因を排除することが可能であることを理由として、薬剤は、内耳の全ての内耳疾患において実際に損傷を受けている神経細胞全般の変性を停止または逆行さえすべきである。技術的現状によると、ニューロトロフィン（神経細胞の成長因子）のみが考慮される。ニューロトロフィンは、神経細胞の発生、分化および生存能力において重要な役割を果たす内因性ペプチドである。ニューロトロフィンは、神経細胞の発生、分化および生存能力において重要な役割を果たす内因性ペプチドであるため、個々のタイプの神経細胞は、特定のニューロトロフィンの存在に特に依存している。第２の科学的所見は以下のようである：すなわち、難聴は、特にドーパミン作動神経タイプの神経細胞の障害に基づく。したがって、薬剤は好ましくはドーパミン作動性機序を活性化すべきである。
【００５８】
図１に示されているように、複数のニューロトロフィンの生成が活性化されており、それらが神経保護特性全般を有することがわかっている。それらは、Ａｒｍｅｔｌ１：ＢＤＮＦ、Ｃｂｌｎ１、ＮＧＦおよびＷＰＹ（略語の説明については、図１の凡例を参照のこと）である。その上、神経細胞内でドーパミンを合成するドーパミン受容体亜型１およびチロシンヒドロキシラーゼなどのドーパミン作動性タンパク質がさらに活性化された。ドーパミン受容体１は、大部分が圧倒的に内耳内に見い出される型である亜型であることがわかっている。複数の独立した実験が実施され、複数の独立した実験の結果はほぼ同一であった（標準偏差＜１０％）。したがって、結果の再現性はきわめて高かった。
【００５９】
これらの結果は、９−Ｍｅ−ＢＣがドーパミン作動性神経細胞の特徴的タンパク質を特異的に活性化することを証明している。これまでこのような一連の効果を有する物質について説明されたことは全くない。現行の知識によると迷路性難聴において顕著な役割を果たしている過程を一連の効果が詳細に精確に妨げるかぎりにおいて、９−Ｍｅ−ＢＣがドーパミン作動性神経細胞の特徴的タンパク質を特異的に活性化することは格別に有利である。こうして、９−Ｍｅ−ＢＣは、神経細胞、特にドーパミン作動神経タイプの細胞の変性過程を停止さらには逆行させるために特に適している独特の有効性モードを有する化合物である。
【００６０】
世界最大の蝸牛移植センターを運営するハノーバー医科大学（Ｍｅｄｉｚｉｎｉｓｃｈｅ Ｈｏｃｈｓｃｈｕｌｅ Ｈａｎｎｏｖｅｒ）のＴｈ．Ｌｅｎａｒｚと彼の共働者は、２００５年に図２に提示されている調査を行なった。彼らは、らせん神経節、すなわち聴神経の一部分を４８時間異なる物質に曝露し、そのうちのいずれが神経保護特性を有するかを試験した。図２に示されている通り、神経保護特性を有するのは特にＢＤＮＦとＧＤＮＦである。この研究の結論は、ＢＤＮＦとＧＤＮＦを活性化する物質が内耳の損傷に対する将来性のある療法であるということだった。その時点、すなわち２００５年の時点で、ＢＤＮＦとＧＤＮＦを活性化するような物質は未知であった。したがって、世界的に認知されている異なるグループのこれらの結果は、９−メチル−ＢＣの治療的潜在性を描く。大ペプチドとしてＢＤＮＦもＧＤＮＦもそれ自体局所的な適用には適していないという点に留意すべきである。対照的に、９−メチル−ＢＣは、脂溶性で化学的安定性があり、全くないというわけではないが緩慢にしか代謝しない（実施例２９参照）比較的小さい物質（ＭＷ：１８３）である。
【００６１】
実施例１５−２８：ヒト神経芽腫細胞（ＳＨ−ＳＹ５Ｙ）の分化モデル
先の実施例は、ラットおよびモルモットを用いる動物モデルにおいて実施され、したがって、β−カルボリンが成長因子の誘発を通してプロ分化するヒトの組織内でも作用するか否かを証明することが、以下の実施例の本質的な側面であった。したがって、ヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞を用いて、複数の実験を行なった。
【００６２】
９−ＭＥ−ＢＣの有効性スペクトルについての信頼性の高い再現性ある情報を得るためには、４０匹超のラットのコルチ器を準備し分析しなければならなかった。これには多大な労力投入と動物数が必要である。したがって、以下で記述するように、分化モデルにおいて、化合物ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＶＩＩＩ、ＸＩＸならびにＣ〜Ｌを分析した。中耳の有毛細胞についての細胞系または分化モデルは全く存在しないことから、中耳の有毛細胞と類似の分化特性を示す神経芽腫細胞系などの他の細胞系を使用しなければならなかった。
【００６３】
ヒト神経芽腫細胞がこのモデルのために使用された。ヒト神経芽腫細胞は、培養中に未分化タイプとして存在する永久細胞である。ヒト神経芽腫細胞は、培地に対し特異的物質、例えばレチノイン酸、脳由来神経成長因子（ＢＤＮＦ）または酵素の活性化剤、タンパク質キナーゼＣの活性化剤を添加することによって、分化、すなわち神経細胞へ形質転換、するように活性化されることができる。我々は、ベーターカルボリンが未分化細胞をニューロンタイプに形質転換できるか否かを分析するためにヒト神経芽腫細胞の細胞系を使用した。基準は：増殖低下（一視野あたりの細胞数の減少）；細胞体の縮小（未分化タイプからニューロンタイプへの形質転換）；隣接する細胞または隣接する細胞のクラスタに対する連結を提供する細胞樹状突起（ｃｙｔｏｄｅｎｔｒｉｔｅ）（神経炎）であった。結果は以下の通りであった：
【００６４】
【表１】
表１によって示されている通り、我々が分析したベーターカルボリンは、実際に、さまざまな程度で分化を促進することができる。
【００６５】
図３〜５は、表１に示されている通りのデータを補足し、説明する。
プロ分化効果についての指標としての軸索長の測定：
溶媒（Ｋｏ）または被験物質と共に１４日間培養中でヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞をインキュベートした。被験物質についての右側へのグラフのシフトは、対照物質についてのグラフと比較した場合の軸索長の増加を示した。処置グループ間の統計的差異を、テューキーの多重比較検定（Ｔｕｋｅｙ’ｓ ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ−ｔｅｓｔ）で計算した。
【００６６】
図３Ａは、上述の通り、Ｈａｒｍａｎを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す。対照グループと１１０μＭのハルマン（Ｈａｒｍａｎ）で処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、ハルマン（Ｈａｒｍａｎ）での処置は、軸索長の増大につながった。
【００６７】
図３Ｂは、上述の通り、９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す。対照グループと７０、９０または１１０μＭの９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【００６８】
図３Ｃは、上述の通り、６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す。対照グループと５０μＭの６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【００６９】
図３Ｄは、上述の通り、９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンを用いて処置したヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞の軸索長を示す。対照グループと３０、５０または７０μＭの９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンで処置したグループとの差異は有意であった（Ｐ＜０．００１）。したがって、９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンでの処置は、軸索長の増大につながった。
【００７０】
培養中で１４日間のヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞のインキュベーションは、軸索長の増大につながった。示されたのは、３回の独立した実験で少なくとも２０の無作為に選択された視野（各々６４０．０００μｍ2）内で決定された軸索長の累積度数分布である。急激な上昇が、短かい（ｓｈｏｒｔ）神経炎の優勢を示しており、ここで例えば対照細胞においては、より低い急激な上昇は、より長い軸索のより大きな数を意味した。水平方向の最大値は、それぞれの処置グループの最大軸索長を表わしていた。結果は、本発明のβ−カルボリンが、軸索の芽生えを促進することを示す。効果は、用量および物質依存性のものである：すなわち、１−メチル−β−カルボリン＜６−メトキシ−９−メチル−β−カルボリン＜９−メチル−β−カルボリン＜９−フルオルエチル−β−カルボリン）である。したがって、β−カルボリンは、プロ分化効果を有する。
【００７１】
軸索長に対する他の本発明のβ−カルボリン（化合物Ａ−ＬおよびＶＩ−ＸＸ）の効果を、上述の通り、１４日後のヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞で決定した。結果は表１にまとめられている。
【００７２】
成長因子形成に対する誘発
次に、物質がヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞内で神経成長因子の形成を誘発できるか否かを調査した。２日および１４日後に、細胞を収穫し、標的遺伝子およびハウスキーピング遺伝子の発現を逆転写酵素−ＰＣＲによって決定した。図５は、損傷有毛細胞に対する再生効果が公知である神経成長因子についての３回の独立した実験の平均値を示す。
【００７３】
図４Ａは、ヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞内でのＢＤＮＦ（脳由来神経栄養因子）の相対的遺伝子発現を示す。２日後のＢＮＤＦの転写は、最高濃度（１１０μＭ）のＬＥ−０２（９−メチル−β−カルボリン）でのみ刺激され、一方１４日間の曝露後では、３０及び５０μＭというより低い濃度で刺激が誘発された。このようなシフトは、９−フルオロエチル−β−カルボリンについても見られた（Ｎｏ．５５９の物質；２日後、７０μＭおよび９０μＭによって刺激され、１４日後では３０μＭおよび５０μＭで刺激された）。対照的に６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン（図４ＡＰ、Ｎｏ．５１３の物質）は、ＢＤＮＦ転写の莫大な用量依存性増加につながった。
【００７４】
図４Ｂは、セレベリン−１前駆体タンパク質（ＣＢＬＮ）の相対的遺伝子発現を示す。セレベリン−１前駆体タンパク質は、９−フルオロエチル−β−カルボリンに２日間曝露した後にのみ増大した。１４日間の曝露後、試験対象の全てのβ−カルボリンはＣＢＬＮ発現が増加した。被験物質の濃度が低くなると、調査された全ての濃度においてほぼ同じ刺激を示している９−フルオロエチル−β−カルボリンを除いて、濃度がより高い場合より効果は強くなった。セレベリン−１９−フルオロエチル−β−カルボリンは、ＣＢＬＮ発現ならびに軸索長に対して類似の効果を示した（図３Ｄ参照）。
【００７５】
図４Ｃは、ＧＤＮＦ（グリア細胞株由来神経栄養因子）の相対的遺伝子発現を示す。個別の濃度において、１４日間の曝露は、最高３倍の刺激につながった。
ＮＧＦ（神経成長因子）およびＮＰＹ（神経ペプチドＹ）は、一般に神経細胞の存続に必要な成長因子である。ＮＧＦ（神経成長因子）およびＮＰＹ（神経ペプチドＹの生合成が無くなると、神経細胞は死滅につながる。これらは、新しい暗騒音、新しいメロディなどの新たな状況への適応にとって不可欠である、例えばシナプス形成などの分化を可能にする。ＮＧＦ（神経成長因子）およびＮＰＹ（神経ペプチドＹのような成長因子は同様に、損傷を受けた神経細胞の延長部の新たな成長を可能にし、これを調節し、ひいては新たに成長した細胞延長部が現在ある神経路および回路への再組込みを可能にする。これらは、急性および慢性聴覚傷害に対する自然の修復機序の重要な部分である。
【００７６】
図４Ｄは、ＮＧＦ（神経成長因子）の相対的遺伝子発現を示す。１４日間の曝露後、遺伝子発現は、２０〜５０倍だけ増大した。再度、濃度が低くなればなるほど、ＮＧＦの増大に関してはるかに効果が高くなった。
【００７７】
図４Ｅは、ＮＰＹ（神経ペプチドＹ）の相対的遺伝子発現を示す。１４日間の曝露後、遺伝子発現は１．３〜４倍増大した。９−メチル−β−カルボリンおよび９−フルオロエチル−β−カルボリンの場合、濃度が低くなればなるほど、より高い濃度より効果は高くなった。
【００７８】
ＢＤＮＦ、ＧＤＮＦ、ＮＧＦおよびＮＰＹの遺伝子発現に対する他の本発明のβ−カルボリン（化合物Ａ−ＬおよびＶＩ−ＸＸ）の効果を、２日後および１４日後にヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞で上述の通りに決定した。結果は表２にまとめられている。
【００７９】
【表２】
遺伝子転写による分化を実質的に刺激する転写因子の解明のための細胞内カスケードの活性化についての調査：
複数の細胞内カスケードに対する複数のβ−カルボリンの効果を調査した。複数のβ−カルボリンのうち、それぞれの細胞内カスケードの末端において複数の転写因子が細胞核で形成され、複数の転写因子はそれ自体さらなる遺伝子群の転写を活性化させることが公知である。２重ルシフェラーゼ方法を使用した。第１のルシフェラーゼはトランスフェクション対照として役立ち、一方第２のルシフェラーゼは、ＤＮＡの適切な特異的結合配列に連結される。
【００８０】
図５は、対照細胞ＳＨ−ＳＹ５Ｙにおいて最高１０倍までレベルの、転写因子ＣＲＥＢの形成に対する９−メチル−β−カルボリン、９−フルオロエチル−β−カルボリンおよび６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンの用量依存活性化効果を示す（３回の独立した実験、４８時間のインキュベーション）。
【００８１】
これらの所見は明らかに、試験された本発明の、β−カルボリンがプロ分化効果を有することを示す。複数の成長因子が神経保護的にそしていくつかの傷害モデルにおいてはまた神経再生的に作用することができるということを明らかにする複数の成長因子の発現誘発は、活性物質の治療的効果を証明する。プロ分化効果は、転写因子を活性化させる細胞内カスケードの活性によって媒介される。このような転写因子は、特に成長因子についてコードする遺伝子群を転写する。
実施例２９
動物モデルにおける薬物動態実験
この実施例では、９−メチル−β−カルボリンが、正円窓の膜の前の陥凹に対し局所的に送出される。β−カルボリンは、陥凹から内耳（蝸牛）の外リンパ液（感覚細胞を保護する液体）までおよび平衡感覚をつかさどる器官の三半規管まで正円窓を通って拡散できる。
【００８２】
局所適用は、一方では比較的高い用量が求められることそして他方では難聴そして場合によっては目まいの場合に必要とされるような慢性的適用については経験的に望ましくない効果の危険性が高くなることを理由として全身的適用の場合に予期すべき望ましくない効果を回避する。したがって、物質の使用のための前提条件は、物質が正円窓の膜を通って主として拡散するということである。
【００８３】
これをテストするために、９−メチル−β−カルボリン−ＨＣｌ（９−Ｍｅ−ＢＣ）を、減菌したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中に溶解し、次に、０．５μＬ／時の流速で最長１０時間、浸透圧ミニポンプによりモルモットの正円窓の膜に連続的に輸液した。こうして、中耳内ひいては内耳の蝸牛の外側に輸液を行ない、そのため、鼓膜は損傷を受けなかった。３時間後、蝸牛の先端である尖、すなわち正円窓の膜から最も離隔した蝸牛の部分から、先に移植したカニューレにより５μｌのリンパ液を得た。試料を希釈し、さらなる処理無く高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）により直ちに分離し、β−カルボリンの自然の蛍光を蛍光検出器により決定した。第２のモルモットを用いて同一の条件で、実験を反復したが、試料は１０時間の輸液の後に得たものであった。９−Ｍｅ−ＢＣでの前処置されていない第３のモルモットから外リンパ液を得た（空試験値対照）。
【００８４】
第２系列では、２０μｇの９−Ｍｅ−ＢＣを、正円窓の膜すなわち蝸牛内を通って直接外リンパ液内にアプライした。３時間後、そして別の動物の場合には２０時間後に、外リンパ液を得て、上述の通りに分析した。結果は、校正系列と共に図６に表わされている。校正系列は上述の通りの分析方法により１０ｐｇの９−Ｍｅ−ＢＣを高い信頼度で検出できるということを示す。９−Ｍｅ−ＢＣを表わす単一の最大値を、図６の上部クロマトグラム内で７分後に見ることができる。明らかに、さらなる最大値が見られることはなく、したがって９−Ｍｅ−ＢＣは分解されていない。さらに、クロマトグラムは、９−Ｍｅ−ＢＣが正円窓の膜に浸透することを明確に示す。
【００８５】
中央の横列のクロマトグラムは両方共、外リンパ液に対する直接的適用の場合には２０時間後に９−Ｍｅ−ＢＣがなおも存在することを示す。外リンパ液に対する直接的適用の場合には２０時間後に９−Ｍｅ−ＢＣがなおも存在することは、治療的使用にとってきわめて有意である。さらに、これらのクロマトグラムは、９−Ｍｅ−ＢＣがこの長い期間中分解も崩壊もしないことを示す。そういうわけで、９−Ｍｅ−ＢＣは、化学的及び代謝的に不活性である（注：上部横列および中間横列内のナノグラムによりナノグラム数が検出されている；したがっていわゆる注入ピークは中間および下部横列の左側のクロマトグラムおよび基線の雑音に見られる。）
未処置の動物の外リンパ液には９−Ｍｅ−ＢＣが全く存在しないことを示すクロマトグラムは、下部横列の左側に描かれる（空試験値対照）。未処置の動物は、他のモルモットの場合と同様に、外科的ステップのみが実施され９−Ｍｅ−ＢＣは全く適用されなかった動物である。結果は、療法の観点から見て、他の物質デキサメタゾン、ゲンタマイシン、２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸［チアリン］に比べて非常に有利である。
【００８６】
１つの系の疾病の治療に使用される薬剤は、聴覚器官の感覚細胞すなわち有毛細胞は平衡感覚をつかさどる器官の感覚細胞と非常に類似した挙動を示すことから、他の系の疾病についても有効である。
実施例３０
動物モデルにおける聴力損傷の予防
β−カルボリンを含む溶液を３日間、浸透圧ミニポンプによりモルモットの正円窓の膜の前の陥凹内に連続的に輸液した。この実験では、次のβ−カルボリンを個別にテストした：９−メチル−β−カルボリン、化合物ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＶＩＩＩ、ＸＩＸならびに化合物Ｃ〜Ｌ。
【００８７】
次に、ゲンタマイシンおよびエタクリル酸の標準用量をモルモットに静脈注射した。ゲンタマイシンおよびエタクリル酸が内耳を損傷する。典型的に、ゲンタマイシンおよびエタクリル酸は動物モデルにおける聴力損傷の予防のような研究において難聴を誘発するための毒素として使用される。輸液をさらに２日間続行した。その後、２、４、８、および２ＯＨｚで耳に音響放射した後、内耳のインパルスを伝達する脳幹の神経細胞の電気生理学的活性を推定した。β−カルボリンで処置されていない耳は個体内対照として役立った（Ｐｒｉｅｓｋｏｒｎ ＤＭ，Ｍｉｌｌｅｒ ＪＭ．「Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ ｒｅｐｏｒｔ：ｃｈｒｏｎｉｃ ａｎｄ ａｃｕｔｅ ｉｎｔｒａｃｏｃｈｌｅａｒ ｉｎｆｕｓｉｏｎ ｉｎ ｒｏｄｅｎｔｓ」、Ｈｅａｒ Ｒｅｓ，２０００；１４０（１−２）：２１２−２１５）。その上動物には、さらなる対照としてゲンタマイシンではなく９−Ｍｅ−ＢＣのみを輸液した。
【００８８】
聴神経の神経細胞の測定された電気生理学的活性（聴覚閾値）は、内耳に対する使用されたβ−カルボリンの治療的効果の度合の尺度として役立った。表３から分かることができるように、使用されたβ−カルボリンは聴神経の神経細胞の電気生理学的活性の増加を示す。このことから、β−カルボリンは聴力損傷、目まいおよび前庭障害の治療にとって有用であると結論を出すことができる。
【００８９】
【表３】
実施例３１
局所適用のための９−メチル−β−カルボリン製剤
局所適用のための５０μＭの９−メチル−β−カルボリンを用いてのゲル製剤は、５０μＭの９−メチル−β−カルボリンという濃度で、ジェンザイム コーポ（Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｃｏｒｐ）製のヒルメド ステアリル（Ｈｙｌｕｍｅｄ Ｓｔｅｒｉｌｅ）などのリン酸緩衝生理食塩水溶液中の０．７重量パーセントのヒアルロン酸を含む。
実施例３２
局所適用のための９−メチル−β−カルボリン製剤
点耳薬の形での９−メチル−β−カルボリンの局所適用のために、次のアジュバント：塩化ベンザルコニウム、酢酸ナトリウム×３Ｈ2Ｏ、酢酸、マンニトール（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）、エデト酸ナトリウム（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）および塩酸／水酸化ナトリウム（ｐＨ調整用）の１つを使用して、精製水中で３ｍｇ／ｍｌの９−メチル−β−カルボリン溶液を調製する。
実施例３３
局所適用のための９−メチル−β−カルボリン製剤
９３９．９ｍｇのグリセロールに０．１ｍｇのブチルヒドロキシアニソール（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）の溶液に、１００ｍｇの９−メチル−β−カルボリンを添加する。結果として得られた溶液を耳の中に局所適用することができる。任意には、ＤＭＳＯなどの浸透増強剤を添加することができる。
実施例３４
経口適用のための９−メチル−β−カルボリン製剤
この実施例は、１２．５ｍｇの９−メチル−β−カルボリンを用いてのフィルムコート錠のための製剤に関する。錠剤コアは以下のものを含む。
９−メチル−β−カルボリン １２．５０ｍｇ
セルロース、微結晶性 １０３．２５ｍｇ
クロスカルメロース−Ｎａ ６．２４ｍｇ
二酸化ケイ素、コロイド性 １．２５ｍｇ
タルク粉 １．２５ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．５０ｍｇ
合計重量 １２５．０ｍｇ
錠剤コアを５ｍｇのヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、例えばオパドライ（Ｏｐａｄｒｙ）またはセピフィルム（Ｓｅｐｉｆｉｌｍ）で被覆する。結果として得られたフィルム錠は、総重量が１３０ｍｇであり、言及したアジュバントの他に、１２．５ｍｇの９−メチル−β−カルボリンを含む。
実施例３５
経口適用のための９−メチル−β−カルボリン製剤
この実施例は、５０．０ｍｇの９−メチル−β−カルボリンを用いての御フィルムコート錠のための製剤に関する。錠剤コアは以下のものを含む。
９−メチル−β−カルボリン ５０．０ｍｇ
セルロース、微結晶性 ４１３．０ｍｇ
クロスカルメロース−Ｎａ ２５．０ｍｇ
二酸化ケイ素、コロイド性 ５．０ｍｇ
タルク粉 ５．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ２．０ｍｇ
合計重量 ５００．０ｍｇ
錠剤コアを２０ｍｇのＨＰＭＣ、例えばオパドライ（Ｏｐａｄｒｙ）またはセピフィルム（Ｓｅｐｉｆｉｌｍ）で被覆する。結果として得られたフィルム錠は、総重量が５２０ｍｇであり、言及したアジュバントの他に、５０ｍｇの９−メチル−β−カルボリンを含む。
実施例３６
経口適用のための６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン製剤
この実施例は、５０．０ｍｇの６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを用いてのフィルムコート錠のための製剤に関する。錠剤コアは以下のものを含む。
６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン ５０．０ｍｇ
セルロース、微結晶性 ４１３．０ｍｇ
クロスカルメロース−Ｎａ ２５．０ｍｇ
二酸化ケイ素、コロイド性 ５．０ｍｇ
タルク粉 ５．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ２．０ｍｇ
合計重量 ５００．０ｍｇ
錠剤コアを２０ｍｇのＨＰＭＣ、例えばオパドライ（Ｏｐａｄｒｙ）またはセピフィルム（Ｓｅｐｉｆｉｌｍ）で被覆する。結果として得られたフィルム錠は、総重量が５２０ｍｇであり、言及したアジュバントの他に、５０ｍｇの６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリンを含む。
【００９０】
実施例３７
経口適用のための９−フルオロエチル−β−カルボリン製剤
この実施例は、３７．５ｍｇの９−フルオロエチル−β−カルボリンを用いてのフィルムコート錠向けの製剤に関する。錠剤コアは以下のものを含む。
９−フルオルエチル−β−カルボリン ３７．５０ｍｇ
セルロース、微結晶性 ３０９．７５ｍｇ
クロスカルメロース−Ｎａ １８．７５ｍｇ
二酸化ケイ素、コロイド性 ３．７５ｍｇ
タルク粉 ３．７５ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム １．５ｍｇ
合計重量 ３７５．００ｍｇ
錠剤コアを１５ｍｇのＨＰＭＣ、例えばオパドライ（Ｏｐａｄｒｙ）またはセピフィルム（Ｓｅｐｉｆｉｌｍ）で被覆する。結果として得られたフィルム錠は、総重量が３９０ｍｇであり、言及したアジュバントの他に、３７．５ｍｇの９−フルオロエチル−β−カルボリンを含む。
実施例３８
局所適用のための９−フルオロエチル−β−カルボリン製剤
２５０ｍｇの９−フルオロエチル−β−カルボリン、保存料としての１ｍｇのＰ−ヒドロキシ安息香酸メチルエステル、セチルステアリルアルコール、モノラウリン酸ソルビタン、ポリソルベートおよび精製水を用いて、局所適用のための２５０ｍｇの９−フルオロエチル−β−カルボリンの懸濁液１ミリリットルを調製する。結果として得た懸濁液は局所適用可能である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）の化合物の使用であって、
【化１】
式中、
Ｒ1は−Ｒ12を表わし、
Ｒ2およびＲ3は互いに独立して、次の部分：−Ｒ7，−Ｒ8，−Ｈ，−ＯＨ，−ＯＲ7，−ＯＣＨ3，−ＯＣ2Ｈ5，−ＯＣ3Ｈ7，−Ｏ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＯＣ（ＣＨ3）3，−ＯＣ4Ｈ9，−ＯＰｈ，−ＯＣＨ2−Ｐｈ，−ＯＣＰｈ3，−Ｆ，−Ｃｌ，−Ｂｒ，−Ｉ，−ＮＨ2,−ＮＨＣＨ3，−ＮＨＣ2Ｈ5，−ＮＨＣ3Ｈ7，−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨＣＨ（ＣＨ3）2，−ＮＨＣ（ＣＨ3）3，−Ｎ（ＣＨ3）2，−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−ＯＣＦ3，−ＯＣ2Ｆ5，を表し、
Ｒ7、Ｒ8およびＲ12は互いに独立して、次の部分：−ＣＨ2Ｆ，−ＣＨＦ2，−ＣＦ3，−ＣＨ2Ｃｌ，−ＣＨ2Ｂｒ，−ＣＨ2Ｉ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｆ，−ＣＨ2−ＣＨＦ2，−ＣＨ2−ＣＦ3，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｃｌ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｂｒ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｉ，シクロ−Ｃ3Ｈ5，シクロ−Ｃ4Ｈ7，シクロ−Ｃ5Ｈ9，シクロ−Ｃ6Ｈ11，シクロ−Ｃ7Ｈ13，シクロ−Ｃ8Ｈ15，−Ｐｈ，−ＣＨ2−Ｐｈ，−ＣＰｈ3，−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ4Ｈ9，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ5Ｈ11，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ6Ｈ13，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ4Ｈ9，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ7Ｈ15，−Ｃ8Ｈ17，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，
−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ4Ｈ8−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，
−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ4Ｈ9，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，
−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（Ｃ3Ｈ7）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ（Ｃ4Ｈ9）＝ＣＨ2，−Ｃ（Ｃ3Ｈ7）＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ［Ｃ（ＣＨ3）3］＝ＣＨ2，−Ｃ［ＣＨ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）］＝ＣＨ2，−Ｃ［ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2］＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ≡ＣＨ,−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3−Ｃ4Ｈ8−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ4Ｈ9，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，
−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（Ｃ3Ｈ7）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ14Ｈ29，−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ（ＣＨ3）2；を表わし、
ならびに、上述の化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、エナンチオマー、ジアステレオマーならびにラセミ化合物の、聴力損傷、目まいおよび前庭障害の予防および治療用の医薬組成物の製造のための使用。
【請求項２】
一般構造式（Ｖ）の化合物、
【化２】
式中、Ｒ12およびＲ3部分は請求項１に記載の意味を有する、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン、６−メトキシ−９−イソ−プロピル−９Ｈ−β−カルボリン、９−［（１Ｚ）−１−メチルプロプ（ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐ）−１−エニル］−９Ｈ−β−カルボリン、１−クロロ−９−［（１Ｚ，３Ｅ）−２−メチルペンタ−１，３−ジエニル］−９Ｈ−β−カルボリン、９−メチル−６−プロポキシ−９Ｈ−β−カルボリン、９−シクロプロピル−６−メトキシ−９Ｈ−β−カルボリン、６−トリフルオルメトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン、６−ジメチルアミノ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン、１−メトキシ−６−クロロ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン、１，９−ジメチル−９Ｈ−β−カルボリン、１−イソプロピル−６，９−ジメチル−９Ｈ−β−カルボリン、６，９−ジメチル−９Ｈ−β−カルボリン、６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン、９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンおよび９−アリル−９Ｈ−β−カルボリンからなる群から選択された化合物の、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
急性および慢性耳疾患および聴力損傷、目まいおよび前庭障害が、詳細には急性聴力損失、急性音響外傷、爆傷、慢性的騒音曝露に起因する迷路性難聴、老年性難聴、人工内耳の移植中の外傷（挿入外傷）、内耳疾患に起因する目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての前庭障害、耳鳴りおよび抗生物質および細胞増殖抑制剤に起因する聴力損傷である、請求項１〜３のいずれかに記載の使用。
【請求項５】
耳疾患および聴力損傷の治療のための点滴剤、軟こう、スプレー、リポソーム、ジェル、エマルジョンまたは注射液の形態での、請求項１〜３のいずれかに記載の少なくとも１つの化合物を含む医薬組成物。
【請求項１】
一般式（１）の化合物の使用であって、
【化１】
式中、
Ｒ1は−Ｒ12を表わし、
Ｒ2およびＲ3は互いに独立して、次の部分：−Ｒ7，−Ｒ8，−Ｈ，−ＯＨ，−ＯＲ7，−ＯＣＨ3，−ＯＣ2Ｈ5，−ＯＣ3Ｈ7，−Ｏ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＯＣＨ（ＣＨ3）2，−ＯＣ（ＣＨ3）3，−ＯＣ4Ｈ9，−ＯＰｈ，−ＯＣＨ2−Ｐｈ，−ＯＣＰｈ3，−Ｆ，−Ｃｌ，−Ｂｒ，−Ｉ，−ＮＨ2,−ＮＨＣＨ3，−ＮＨＣ2Ｈ5，−ＮＨＣ3Ｈ7，−ＮＨ−シクロ−Ｃ3Ｈ5，−ＮＨＣＨ（ＣＨ3）2，−ＮＨＣ（ＣＨ3）3，−Ｎ（ＣＨ3）2，−Ｎ（Ｃ2Ｈ5）2−Ｎ（Ｃ3Ｈ7）2，−Ｎ（シクロ−Ｃ3Ｈ5）2，−Ｎ［ＣＨ（ＣＨ3）2］2，−Ｎ［Ｃ（ＣＨ3）3］2，−ＯＣＦ3，−ＯＣ2Ｆ5，を表し、
Ｒ7、Ｒ8およびＲ12は互いに独立して、次の部分：−ＣＨ2Ｆ，−ＣＨＦ2，−ＣＦ3，−ＣＨ2Ｃｌ，−ＣＨ2Ｂｒ，−ＣＨ2Ｉ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｆ，−ＣＨ2−ＣＨＦ2，−ＣＨ2−ＣＦ3，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｃｌ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｂｒ，−ＣＨ2−ＣＨ2Ｉ，シクロ−Ｃ3Ｈ5，シクロ−Ｃ4Ｈ7，シクロ−Ｃ5Ｈ9，シクロ−Ｃ6Ｈ11，シクロ−Ｃ7Ｈ13，シクロ−Ｃ8Ｈ15，−Ｐｈ，−ＣＨ2−Ｐｈ，−ＣＰｈ3，−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ4Ｈ9，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ5Ｈ11，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ6Ｈ13，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ4Ｈ9，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）3，−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ7Ｈ15，−Ｃ8Ｈ17，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，
−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ4Ｈ8−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ3Ｈ6−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，
−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ4Ｈ9，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，
−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ2ＮＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（Ｃ3Ｈ7）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ（Ｃ4Ｈ9）＝ＣＨ2，−Ｃ（Ｃ3Ｈ7）＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ（Ｃ2Ｈ5）＝Ｃ（ＣＨ3）2，−Ｃ［Ｃ（ＣＨ3）3］＝ＣＨ2，−Ｃ［ＣＨ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）］＝ＣＨ2，−Ｃ［ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2］＝ＣＨ2，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ2−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ，−ＣＨ2−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ2−ＯＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ2−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）2，−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ3，−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3）−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ3）＝ＣＨ2，−Ｃ（ＣＨ3）＝Ｃ（ＣＨ3）−ＣＨ＝ＣＨ2，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ2，−Ｃ≡ＣＨ,−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ3Ｈ7，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3−Ｃ4Ｈ8−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ3Ｈ6−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−Ｃ3Ｈ7，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ4Ｈ9，−Ｃ≡Ｃ−Ｃ（ＣＨ3）3，−Ｃ2Ｈ4−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ4−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡Ｃ−Ｃ2Ｈ5，
−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ2Ｈ5，−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2−ＣＨ（ＣＨ3）2，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ3，−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−ＣＨ（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ（ＣＨ3）2−ＣＨ2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ2−Ｃ（ＣＨ3）2−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｃ≡ＣＨ，−ＣＨ（Ｃ3Ｈ7）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ（ＣＨ3）（Ｃ2Ｈ5）−Ｃ≡ＣＨ，−Ｃ14Ｈ29，−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｎ（ＣＨ3）2；を表わし、
ならびに、上述の化合物の薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物、エナンチオマー、ジアステレオマーならびにラセミ化合物の、聴力損傷、目まいおよび前庭障害の予防および治療用の医薬組成物の製造のための使用。
【請求項２】
一般構造式（Ｖ）の化合物、
【化２】
式中、Ｒ12およびＲ3部分は請求項１に記載の意味を有する、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン、６−メトキシ−９−イソ−プロピル−９Ｈ−β−カルボリン、９−［（１Ｚ）−１−メチルプロプ（ｍｅｔｈｙｌｐｒｏｐ）−１−エニル］−９Ｈ−β−カルボリン、１−クロロ−９−［（１Ｚ，３Ｅ）−２−メチルペンタ−１，３−ジエニル］−９Ｈ−β−カルボリン、９−メチル−６−プロポキシ−９Ｈ−β−カルボリン、９−シクロプロピル−６−メトキシ−９Ｈ−β−カルボリン、６−トリフルオルメトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン、６−ジメチルアミノ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン、１−メトキシ−６−クロロ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン、１，９−ジメチル−９Ｈ−β−カルボリン、１−イソプロピル−６，９−ジメチル−９Ｈ−β−カルボリン、６，９−ジメチル−９Ｈ−β−カルボリン、６−メトキシ−９−メチル−９Ｈ−β−カルボリン、９−（２−フルオロエチル）−９Ｈ−β−カルボリンおよび９−アリル−９Ｈ−β−カルボリンからなる群から選択された化合物の、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
急性および慢性耳疾患および聴力損傷、目まいおよび前庭障害が、詳細には急性聴力損失、急性音響外傷、爆傷、慢性的騒音曝露に起因する迷路性難聴、老年性難聴、人工内耳の移植中の外傷（挿入外傷）、内耳疾患に起因する目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての目まい、メニエール病に関連したおよび／またはメニエール病の一症候としての前庭障害、耳鳴りおよび抗生物質および細胞増殖抑制剤に起因する聴力損傷である、請求項１〜３のいずれかに記載の使用。
【請求項５】
耳疾患および聴力損傷の治療のための点滴剤、軟こう、スプレー、リポソーム、ジェル、エマルジョンまたは注射液の形態での、請求項１〜３のいずれかに記載の少なくとも１つの化合物を含む医薬組成物。
【図１】
【図２】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図３Ｃ】
【図３Ｄ】
【図５】
【図６Ａ−６Ｂ】
【図６Ｃ−６Ｄ】
【図６Ｅ】
【図６Ｆ】
【図４Ａ】
【図４Ｂ】
【図４Ｃ】
【図４Ｄ】
【図４Ｅ】
【図２】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図３Ｃ】
【図３Ｄ】
【図５】
【図６Ａ−６Ｂ】
【図６Ｃ−６Ｄ】
【図６Ｅ】
【図６Ｆ】
【図４Ａ】
【図４Ｂ】
【図４Ｃ】
【図４Ｄ】
【図４Ｅ】
【公表番号】特表２０１３−５１５７５２（Ｐ２０１３−５１５７５２Ａ）
【公表日】平成２５年５月９日（２０１３．５．９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５４６３６１（Ｐ２０１２−５４６３６１）
【出願日】平成２２年１２月２８日（２０１０．１２．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＤＥ２０１０／００１５３０
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０７９８４１
【国際公開日】平成２３年７月７日（２０１１．７．７）
【出願人】（５１２１６９９７０）アウディオキュア ファーマ ゲーエムベーハー (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年５月９日（２０１３．５．９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１２月２８日（２０１０．１２．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＤＥ２０１０／００１５３０
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０７９８４１
【国際公開日】平成２３年７月７日（２０１１．７．７）
【出願人】（５１２１６９９７０）アウディオキュア ファーマ ゲーエムベーハー (1)
【Ｆターム（参考）】
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