補体成分Ｃ５に対する抗体を使用する喘息の処置の方法
【課題】１種類以上の補体成分に結合するか、あるいは１種類以上の補体成分の生成および／または活性を阻止する、例えば、補体阻害抗体等の化合物を用いて喘息を処置する方法を提供すること。
【解決手段】１種類以上の補体成分に結合するか、あるいはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／または活性を阻止する、例えば、補体阻害抗体等の化合物で喘息を処置する方法。該化合物を、既知の喘息個体での喘息発作を予防するために予防的に投与するか、または喘息発作の間の治療措置として投与することができる。補体阻害抗体を既知の喘息個体（気道炎症を有する個体または既往の喘息症状を経験した被験体等の）に予防的に投与して、喘息発作を予防するか、または予防するのを助けることができる。静脈内、エアロゾル、皮下、または筋肉内経路を介して、この予防的療法を投与することができる。
【解決手段】１種類以上の補体成分に結合するか、あるいはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／または活性を阻止する、例えば、補体阻害抗体等の化合物で喘息を処置する方法。該化合物を、既知の喘息個体での喘息発作を予防するために予防的に投与するか、または喘息発作の間の治療措置として投与することができる。補体阻害抗体を既知の喘息個体（気道炎症を有する個体または既往の喘息症状を経験した被験体等の）に予防的に投与して、喘息発作を予防するか、または予防するのを助けることができる。静脈内、エアロゾル、皮下、または筋肉内経路を介して、この予防的療法を投与することができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（背景）
（技術分野）
この開示は、１種類以上の補体成分に結合するか、あるいはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／または活性を阻止する、例えば、補体阻害抗体等の化合物を用いて喘息を処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（関連技術の説明）
喘息、気管支炎、および肺気腫は、慢性閉塞性肺疾患と総称されている。これらの疾患は、慢性的な気管支炎、喘息、および肺気腫の様々な程度の症状に関連する一般化された（ｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ）気道閉塞（特に、末梢気道の）として特徴付けられる。これらの疾患は、しばしば、個体に共存することがあり、気道閉塞の主因を決定することが難しい場合がある。気道閉塞は、努力呼気の間の気流への抵抗の増加として定義される。太い気道の閉塞もこれらの疾患、特に喘息で生じうる。
【０００３】
喘息は、特異的および／または非特異的な刺激に対する気道応答性亢進によって引き起こされる可逆的な閉塞性肺疾患である。喘息性の気道閉塞は、通常、気管支痙攣に起因する。喘息は、アレルギー反応、感染への２次応答、産業または職業曝露、特定の化学物質または薬物の摂取、運動、および脈管炎等の種々の原因によって誘発されうる。喘息の病状の多くは、マスト細胞の脱顆粒に起因しうる。マスト細胞は、例えば、古典的ＩｇＥ抗原刺激等の様々な状態に反応して脱顆粒する。喘息ヒトまたは動物がアレルギー物質を吸い込むと、感作ＩｇＥ抗体は、肺間質中でマスト細胞脱顆粒を誘発すると考えられている。マスト細胞脱顆粒によって、ヒスタミン、ブラジキニン、ならびにロイコトリエン（Ｃ、Ｄ、およびＥ）、プロスタグランジン（ＰＧＦ２、ＰＧＦ２α、およびＰＧＤ２を含む）、およびトロンボキサンＡ２を含むアナフィラキシーの遅反応性物質（ＳＲＳ−Ａ）が遊離する。その後、ヒスタミンは、より大きい気管支中の受容体部位に結合し、過敏、炎症、および浮腫を引き起こす。ＳＲＳ−Ａは、より小さい気管支中の受容体部位に結合し、浮腫を引き起こし、肺中のヒスタミン作用を増強させるプロスタグランジンを誘引する。プロスタグランジンと組み合わさったヒスタミンは、過剰な粘液分泌を促し、気管支内腔をさらに狭めることもする。喘息個体が吸息すると、狭められた気管支内腔は、それでもわずかに拡張し、空気を肺胞に到達させる。しかし、呼息労作事に、増加した胸部圧力は、気管支内腔を完全に塞ぐ。そのため、空気は、肺に入ることができるが、喘息発作の間は出ていくことが可能ではない。その後、肺胞中の換気は、肺底部中に集まる粘液によって阻害される。低下した肺胞の換気を埋め合わせようとして、血液が他の肺胞に流される。医療行為がなされないと、低酸素症、および極端な場合は呼吸性アシドーシスが生じうる。多くの場合、アレルギー性喘息発作へ２つの段階、すなわち、早期と、気管支刺激後の４〜６時間後に起こる後期とがある。早期は、即時の炎症反応を含み、該炎症反応は、マスト細胞からの細胞メディエーター（すなわち、ヒスタミン）の遊離によって引き起こされる反応を含む。後期反応は、ある期間にわたって生じ、多形核白血球の早期流入およびフィブリン沈着、その後に生じる好酸球の湿潤によって組織学的に特徴付けられる。血漿およびＢＡＬで好酸球由来炎症メディエーター（好酸球カチオン性タンパク質および主要な塩基性タンパク質を含む）の濃度増加が後期反応中に観察された。アレルゲン・チャレンジ後に生じるＴＨ２型サイトカイン（ＩＬ４、ＩＬ５、およびＩＬ１３）の上方制御が後期中に観察された。したがって、気管支粘膜中の遊離した炎症誘発メディエーター（例えば、ｍｍｐ９）および局所的に産生されたサイトカインと組み合わさった細胞炎症反応は、後期アレルギー炎症および気管支収縮で中心的な役割を果たす。後期反応は、気道反応性を増加させ、複数の被験体では数時間から数日、さらには数ヶ月まで続く可能性がある長期の喘息増悪に至る。喘息反応の後遺症作用は、非特異的な刺激への気道のこの応答性亢進である。
【０００４】
現在、喘息に対する処置は、必ずしも十分とは限らず、多くが深刻な副作用を持つ。喘息に対する薬物療法の一般的な目的は、気管支痙攣の予防と、気道炎症の表示である気道の反応性亢進または応答性亢進の制御とである。喘息発作を誘発するアレルゲン全てへの曝露を除去または予防することは非常に難しい。これらの発作を予防するために、大部分の喘息患者は、種々の薬剤で処置され、その多くが副作用を持つ。
【０００５】
Ｌｕｋａｃｓ他（Ｌｕｋａｃｓ ｅｔ ａｌ， Ａｍ． Ｊ． Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｌｕｎｇ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ． ２００１）に報告された研究では、抗Ｃ５ａ抗体は、免疫複合体媒介肺炎症の誘導の間に、抗ＢＳＡ抗体とともに気管内投与された。具体的には、Ｌｕｋａｃｓの研究は、メタコリンの静脈内チャレンジへの短期のＡＨＲを持つ、皮膚の逆受身アルサス反応に類似する急性免疫複合体媒介組織肺炎症のモデルを用いる。動物は、本発明で実証されるように、アレルゲンへの曝露後に、好酸球増加症が特徴となる慢性気道炎症を生じず、既往の重篤度の喘息発作も経験しなかった。Ｌｕｋａｃｓの研究の鍵となる特徴は、抗ＢＳＡ抗体を動物に気管内注入した後に、補体カスケードを活性化し、終末補体成分の量を有意に生成した、気道に沿った局所的なＢＳＡおよび抗ＢＳＡの免疫複合体の形成であった。メタコリンへのＡＨＲのその後の発生は、ＢＳＡ−抗ＢＳＡが肺炎症を誘導した急性期の間４時間まで続き、これは、喘息に罹患している患者で見られる重篤度かつ長期に続くＡＨＲとは有意に対照的である。Ｌｕｋａｃｓの研究にもとづいて、抗Ｃ５ａは、気道で局所的に産生されるＣ５ａを中和するため、Ｃ５ａによって媒介される有害な下流事象（例えば、メディエーターの遊離および血管漏出症候群を促す炎症細胞の漸増および活性化）の発生を予防すると考えることが妥当である。動物がＩＶメタコリンでチャレンジされた際、炎症細胞のＣ５ａ媒介漸増、ヒスタミン等のメディエーターの遊離、および気道の浮腫の発生を阻止する組み合わせ効果は、気道抵抗の低減およびＡＨＲの発生の予防に至る。この研究は、免疫複合体媒介肺炎症のＡＨＲの発生でのＣ５ａの重要性を示唆するだろう。しかし、この研究は、持続中の喘息発作またはアレルゲンに対する後期気道応答の間のＣ５阻害剤による気管支拡張の任意の直接的かつ即時の効果があるかを予測するための根拠を提供しない。また、この研究は、気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体の処置も含まない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（要旨）
本開示は、１種類以上の補体成分に結合するか、またはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／もしくは活性を阻止するか、あるいは、例えば、Ｃ５ａ受容体等の補体成分受容体の結合を阻止する化合物を用いた喘息に対する処置に関する。処置療法は、少なくとも１種類の補体成分の生成および／または活性を阻害する化合物の投与を含む。適当な化合物としては、例えば、１種類以上の補体成分に結合するか、あるいはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／または活性を阻止する、例えば、補体成分Ｃ５に特異的な抗体等の抗体が挙げられる。
【０００７】
補体阻害抗体を既知の喘息個体（気道炎症を有する個体または既往の喘息症状を経験した被験体等の）に予防的に投与して、喘息発作を予防するか、または予防するのを助けることができる。静脈内、エアロゾル、皮下、または筋肉内経路を介して、この予防的療法を投与することができる。
【０００８】
補体阻害化合物を、喘息発作を経験する個体に治療措置として投与することができる。静脈内、エアロゾル、皮下、または筋肉内経路を介して、該措置を投与することができる。
【０００９】
例えば、ステロイド、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−５抗体、β２受容体アゴニスト、ロイコトリエン阻害剤、５リポキシゲナーゼ阻害剤、ｂ２アドレナリン受容体アゴニスト、ＰＤＥ阻害剤、ＩＬ５アンタゴニスト、ＣＤ２３アンタゴニスト、ＩＬ１３アンタゴニスト、サイトカイン遊離阻害剤、ヒスタミンＨ１受容体アンタゴニスト、抗ヒスタミン、およびヒスタミン遊離阻害剤等の既知の喘息療法の措置と組み合わせて補体阻害化合物を含む多剤併用療法も用いることが可能である。上記に列挙した各クラスの適当な化合物と、他の喘息処置とについては、Ａｓｔｈｍａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ： Ｎｅｗ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｏｐｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｔａｓｒｇｅｒｔｓ， Ｂａｒｎｅｓ， Ａｐｒｉｌ ２００３， Ｌｅａｄ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ， ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｌｅａｄｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．ｃｏ．ｕｋ／ｔａｒｇｅｔ−ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ／ａｂｓｔｒａｃｔｓ／ｄｏｓｓｉｅｒ−ａｓｔｈｍａ．ｈｔｍｌに列挙される。
【００１０】
別の態様では、喘息患者の肺中の炎症を低減する方法を本明細書で開示する。該方法は、喘息に罹患しているか、または罹患しやすい被験体に、該被験体の気道中の炎症メディエーター（例えば、マトリックス・メタロプロテアーゼ９（ｍｍｐ９、９２ｋＤａＩＶ型コラゲナーゼ／ゼラチナーゼまたはゼラチナーゼＢとしても知られる）、ＴＧＦβ、好酸性顆粒等の）の遊離または生成を低減する化合物を投与する工程を含む。該化合物は、細胞レベルで作用して、炎症メディエーターの生成または遊離を低減することができるか、炎症メディエーターの活性に干渉する（例えば、８３ｋＤａ活性形態へのプロｍｍｐ−９の変換を予防することによって）ような様式で炎症メディエーターと相互作用するか、あるいは炎症メディエーターの活性形態と相互作用して、該炎症メディエーターに関連する炎症効果を予防することができる。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
被験体において喘息を処置する方法であって、喘息に罹患しやすいか、または罹患している被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目２）
喘息発作を予防する方法であって、気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体に、抗Ｃ５抗体を予防的に投与することを包含する、方法。
（項目３）
喘息発作の重篤度を低減する方法であって、喘息発作を有する被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目４）
被験体において気道閉塞を低減する方法であって、該被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目５）
被験体において気流を増加する方法であって、該被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目６）
被験体において気管支痙攣を低減する方法であって、該被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目７）
被験体において慢性閉塞性肺疾患を処置する方法であって、慢性閉塞性肺疾患に罹患している前記被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目８）
被験体において炎症を低減する方法であって、気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体に、抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目９）
気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体を処置する方法であって、効果的な気管支拡張量の抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目１０）
前記投与する工程が、喘息発作の間に前記抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目８または９記載の方法。
（項目１１）
前記被験体がヒトである、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１２）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、Ｃ５ａおよびＣ５ｂへの補体成分Ｃ５の変換を阻害する抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１３）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、ヒト補体成分Ｃ５ａに結合する抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１４）
ヒト補体成分Ｃ５ｂ９に対する抗Ｃ５抗体を投与する工程を包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１５）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、ｈ５Ｇ１．１、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ、およびｈ５Ｇ１．１の機能的フラグメントからなる群から選択される抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１６）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、ヒト補体成分Ｃ５のα鎖への特異的な結合を示し、かつ少なくとも１つの抗体抗原結合部位を含む抗体である抗Ｃ５抗体を投与することを含み、該抗体が、１）ヒト体液中の補体活性化を阻害し、かつ２）Ｃ５コンベルターゼへの精製ヒト補体成分Ｃ５の結合を阻害する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１７）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、エアロゾルとして抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１８）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、注射による静脈内注入および皮下注射からなる群から選択される方法を介して、抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１９）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、ステロイド、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−５抗体、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ロイコトリエン阻害剤、５リポキシゲナーゼ阻害剤、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ＰＤＥ阻害剤、ＣＤ２３アンタゴニスト、ＩＬ１３アンタゴニスト、サイトカイン遊離阻害剤、ヒスタミンＨ１受容体アンタゴニスト、抗ヒスタミン、およびヒスタミン遊離阻害剤からなる群から選択されるメンバーと組み合わせて、抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目２０）
喘息を罹患しているか、または罹患しやすい被験体を処置するための方法であって、抗Ｃ５抗体と組み合わせて、ステロイド、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−５抗体、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ロイコトリエン阻害剤、５リポキシゲナーゼ阻害剤、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ＰＤＥ阻害剤、ＣＤ２３アンタゴニスト、ＩＬ１３アンタゴニスト、サイトカイン遊離阻害剤、ヒスタミンＨ１受容体アンタゴニスト、抗ヒスタミン、およびヒスタミン遊離阻害剤からなる群から選択される少なくとも１種類のメンバーを投与することを包含する、方法。
（項目２１）
喘息を処置する方法であって、被験体の肺に、該被験体において全身的補体活性を実質的に低減することなしに抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目２２）
被験体において喘息を処置する方法であって、１種類以上の補体成分と結合する化合物、１種類以上の補体成分の生成を阻止する化合物、１種類以上の補体成分の活性を阻止する化合物、および補体成分受容体の結合を阻止する化合物からなる群から選択される化合物を該被験体に投与することを包含する、方法。
（項目２３）
前記投与する工程が、抗Ｃ５ａ受容体抗体を投与することを包含する、項目２２記載の方法。
（項目２４）
被験体において炎症を低減する方法であって、１種類以上の補体成分と結合する化合物、１種類以上の補体成分の生成を阻止する化合物、１種類以上の補体成分の活性を阻止する化合物、および補体成分受容体の結合を阻止する化合物からなる群から選択される化合物を該被験体に投与することを包含する、方法。
（項目２５）
前記投与する工程が、喘息発作の間に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目２４記載の方法。
（項目２６）
前記投与する工程が、抗Ｃ５ａ受容体抗体を投与することを包含する、項目２４記載の方法。
（項目２７）
気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体を処置する方法であって、１種類以上の補体成分と結合する化合物、１種類以上の補体成分の生成を阻止する化合物、１種類以上の補体成分の活性を阻止する化合物、および補体成分受容体の結合を阻止する化合物からなる群から選択される化合物を該被験体に投与することを包含する、方法。
（項目２８）
前記投与する工程が、喘息発作の間に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目２７記載の方法。
（項目２９）
前記投与する工程が、抗Ｃ５ａ受容体抗体を投与することを包含する、項目２７記載の方法。
（項目３０）
前記化合物を投与する工程が、補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、第Ｄ因子、第Ｂ因子、第Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１、およびＭＡＳＰ−２からなる群から選択される化合物に向けられる１種類以上の抗体を投与することを包含する、項目２２、２４、または２７のいずれかに記載の方法。
（項目３１）
前記化合物を投与する工程が、可溶性ＣＲ１、可溶性ＬＥＸ−ＣＲ１、可溶性ＭＣＰ、可溶性ＤＡＦ、可溶性ＣＤ５９、第Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプリスタチン（ｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ）、およびＫ７６ ＣＯＯＨからなる群から選択される１種類以上の化合物を投与することを包含する、項目２２、２４、または２７のいずれかに記載の方法。
（項目３２）
喘息発作を予防する方法であって、１種類以上の補体成分と結合する化合物、１種類以上の補体成分の生成を阻止する化合物、１種類以上の補体成分の活性を阻止する化合物、および補体成分受容体の結合を阻止する化合物からなる群から選択される化合物を、気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体に予防的に投与することを包含する、方法。
（項目３３）
前記投与する工程が、抗Ｃ５ａ受容体抗体を投与することを包含する、項目３２記載の方法。
（項目３４）
喘息発作の重篤度を低減する方法であって、１種類以上の補体成分と結合する化合物、１種類以上の補体成分の生成を阻止する化合物、１種類以上の補体成分の活性を阻止する化合物、および補体成分受容体の結合を阻止する化合物からなる群から選択される化合物を、喘息発作に罹患している被験体に投与することを包含する、方法。
（項目３５）
前記投与する工程が、抗Ｃ５ａ受容体抗体を投与することを包含する、項目３４記載の方法。
（項目３６）
喘息患者の肺において炎症を低減する方法であって、可溶性ＣＲ１、可溶性ＬＥＸ−ＣＲ１、可溶性ＭＣＰ、可溶性ＤＡＦ、可溶性ＣＤ５９、第Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプリスタチン（ｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ）、およびＫ７６ ＣＯＯＨからなる群から選択される１種類以上の化合物と、補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、第Ｄ因子、第Ｂ因子、第Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１、およびＭＡＳＰ−２からなる群から選択される化合物に向けられる抗体とを、喘息に罹患しているか、または罹患しやすい被験体に投与する工程を包含する、方法。
（項目３７）
投与される前記化合物が、前記被験体の気道中の１種類以上の炎症メディエーターの遊離または生成を低減する、項目３６記載の方法。
（項目３８）
前記投与する工程が、細胞レベルで作用して炎症メディエーターの生成または遊離を低減する化合物を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目３９）
前記投与する工程が、前記炎症メディエーターの活性形態と相互作用して該炎症メディエーターに関連する炎症効果を予防することができる化合物を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目４０）
前記化合物を投与する工程が、補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、第Ｄ因子、第Ｂ因子、第Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１、およびＭＡＳＰ−２からなる群から選択される化合物に向けられる１種類以上の抗体を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目４１）
前記化合物を投与する工程が、ＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、第Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプリスタチン（ｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ）、およびＫ７６ ＣＯＯＨからなる群から選択される１種類以上の化合物を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目４２）
前記化合物を投与する工程が、ステロイド、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−５抗体、β２受容体アゴニスト、ロイコトリエン阻害剤、５リポキシゲナーゼ阻害剤、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ＰＤＥ阻害剤、ＣＤ２３アンタゴニスト、ＩＬ１３アンタゴニスト、サイトカイン遊離阻害剤、ヒスタミンＨ１受容体アンタゴニスト、抗ヒスタミン、およびヒスタミン遊離阻害剤からなる群から選択されるメンバーと組み合わせて、前記化合物を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目４３）
前記化合物を投与する工程が、抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目４４）
前記投与する工程が、抗Ｃ５受容体抗体を投与することを包含する、項目３４記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、正常ＢＡＬＢ／ｃマウス中のＯＶＡ誘導喘息反応をグラフで示す。
【図２ａ】図２ａは、正常ＢＡＬＢ／ｃマウス中の抗原チャレンジおよび予防的処置のスケジュールおよび性質を示す。
【図２ｂ】図２ｂは、正常ＢＡＬＢ／ｃマウス中の抗原チャレンジおよび予防的処置のスケジュールを示す。
【図３】図３は、図２ａおよび２ｂに示される処置の効果をグラフで概説する。
【図４ａ】図４ａは、喘息発作の間の正常ＢＡＬＢ／ｃマウス中の抗原チャレンジおよびＩＶまたはエアロゾル処置のスケジュールおよび性質を示す。
【図４ｂ】図４ｂは、ＢＡＬＢ／ｃマウス中の喘息発作の誘導のプロトコールおよび結果を示す。
【図５ａ】図５ａは、図４ａに示されるエアロゾル処置の効果をグラフで概説する。
【図５ｂ】図５ｂは、図４ａに示されるエアロゾル処置の効果をグラフで概説する。
【図６ａ】図６ａは、図４ａに示される静脈内処置の効果をグラフで概説する。
【図６ｂ】図６ｂは、図４ａに示される静脈内処置の効果をグラフで概説する。
【図７】図７は、図４ａに示される処置に対するＣ５活性への種々の処置の全身的効果をグラフで示す。
【図８】図８は、ＢＡＬでの全ＷＢＣ数への種々の静脈内処置の効果をグラフで示す。
【図９】図９および１０は、好酸球がＢＡＬでの最も多数を占める炎症細胞であると判明したことを示す。
【図１０】図９および１０は、好酸球がＢＡＬでの最も多数を占める炎症細胞であると判明したことを示す。
【図１１】図１１は、ＢＡＬでのヒスタミンへの種々の静脈内処置の効果をグラフで示す。
【図１２】図１２は、ＢＡＬでのＭＭＰ−９濃度への種々の静脈内処置の効果をグラフで示す。
【図１３】図１３は、ＢＡＬでのＴＧＦβの濃度への種々の静脈内処置の効果をグラフで示す。
【図１４】図１４は、喘息発作の間の正常ＢＡＬＢ／ｃマウスの抗原チャレンジならびにカニューレ挿入およびエアロゾル処置のスケジュールおよび性質を示す。
【図１５】図１５は、抗Ｃ５、β２受容体アゴニスト、またはその組合せで喘息発作の間に処置された喘息マウスでの肺抵抗を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
（詳細な説明）
本開示は、ほ乳類の喘息を処置する方法に向けられる。具体的には、本明細書に記載される喘息を処置する方法は、１種類以上の補体成分に結合するか、あるいはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／または活性を阻止する化合物を用いることを含む。補体成分の生成の阻害または阻止は、喘息での気管支収縮応答に関与する複数の因子を阻害する。特に有用なそのような化合物の特定のクラスは、ヒト補体成分に特異的な抗体、特に抗Ｃ５抗体である。
補体系は、身体の免疫系と協調して作用し、細胞病原体およびウイルス病原体の侵入から防御する。少なくとも２５種類の補体タンパク質があり、血漿タンパク質および膜補因子の複合集団として見出される。血漿タンパク質は、脊椎動物血清中のグロブリンの約１０％を占める。補体成分は、一連の複雑であるが正確な酵素切断および膜結合事象で相互作用することによってそれらの免疫防御機能を達成する。その結果生じる補体カスケードは、オプソニン機能、免疫調節機能、および溶解機能を有する産物の生成に至る。補体活性化に関連する生物学的活性の簡潔な概要については、例えば、Ｔｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｍａｎｕａｌ， １６ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎに提供される。
【００１３】
補体カスケードは、通常、古典的経路または代替経路を介して進行する。これらの経路は、多くの成分を共有しており、それらの初期の段階で異なる一方で、該経路は、相似しており、標的細胞の活性化および破壊を担う同じ「終末補体（ｔｅｒｍｉｎａｌ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ）」成分（Ｃ５からＣ９まで全て）を共有する。
【００１４】
古典的補体経路は、標的細胞上の抗原部位の抗体認識および抗体結合によって開始される。代替経路は、通常、抗体は関与せず、病原体表面上の特定の分子によって開始されうる。さらに、レクチン経路は、通常、高マンノース基質へのマンノース結合レクチン（ＭＢＬ）の結合で開始される。これらの経路は、補体成分Ｃ３が活性プロテアーゼ（各経路で異なる）によって切断されて、Ｃ３ａおよびＣ３ｂを産生する点で相似する。その後に、補体攻撃を活性化する他の経路は、補体機能の様々な態様に至る一連の事象で作用することができる。
【００１５】
Ｃ３ａは、アナフィラトキシンである。Ｃ３ｂは、細菌細胞および他の細胞に結合するとともに、特定のウイルスおよび免疫複合体に結合し、循環からの除去のためにそれらを捕まえる（この役割でのＣ３ｂはオプソニンとして知られる）。Ｃ３ｂのオプソニン機能は、一般に、補体系の最も重要な抗感染作用であると考えられている。Ｃ３ｂ機能を阻止する遺伝的病変を有する患者は、幅広い種類の病原生物による感染を被りやすく、一方で、補体カスケード順序の後期に病変を有する患者、すなわち、Ｃ５機能を阻止する病変を有する患者は、ナイセリア属（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）感染をより被りやすくなるに過ぎず、より後期では、若干より被りやすくなるに過ぎないことが判明している。
【００１６】
Ｃ３ｂは、各経路に固有の他の成分との複合体も形成し、Ｃ５をＣ５ａおよびＣ５ｂに切断する古典的または代替Ｃ５コンベルターゼを形成する。したがって、Ｃ３は、代替経路および古典的経路両方に不可欠であるので、補体反応順序で中心的なタンパク質とみなされる。Ｃ３ｂのこの特性は、血清プロテアーゼ第Ｉ因子によって調節されており、該血清プロテアーゼ第Ｉ因子は、Ｃ３ｂに作用して、ｉＣ３ｂを生成する。オプソニンとして依然として機能できる一方で、ｉＣ３ｂは、活性Ｃ５コンベルターゼを形成できない。
【００１７】
Ｃ５は、約７５μｇ／ｍｌ（０．４μＭ）での正常血清で見出される１９０ｋＤａβ・グロブリンである。Ｃ５は、グリコシル化されており、その質量の約１．５〜３％が糖質に属する。成熟Ｃ５は、６５６アミノ酸７５ｋＤａβ鎖にジスルフィド結合する９９９アミノ酸１１５ｋＤａα鎖のヘテロダイマーである。Ｃ５は、単一コピー遺伝子の一本鎖前駆体タンパク質産物として合成される（Ｈａｖｉｌａｎｄ ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９１，１４６：３６２−３６８）。この遺伝子の転写物のｃＤＮＡ配列は、１８アミノ酸リーダー配列を伴った１６５９個のアミノ酸の分泌プロＣ５前駆体を予測する（米国特許第６，３５５，２４５号を参照せよ）。
【００１８】
プロＣ５前駆体は、アミノ酸６５５および６５９の後で切断され、アミノ末端フラグメント（上記配列のアミノ酸残基＋１〜６５５）としてβ鎖を、かつカルボキシル末端フラグメント（上記配列のアミノ酸残基６６０〜１６５８）としてα鎖を産生し、この２つ鎖間で４個のアミノ酸（上記配列のアミノ酸残基６５６〜６５９）が欠失されている。
【００１９】
Ｃ５ａは、代替または古典的Ｃ５コンベルターゼによって、α鎖の最初の７４個のアミノ酸を含むアミノ末端フラグメント（すなわち、上記配列のアミノ酸残基６６０〜７３３）としてＣ５のα鎖から切断される。Ｃ５ａの１１ｋＤａ質量の約２０％は、糖質に属する。コンベルターゼ作用に対する切断部位は、上記配列のアミノ酸残基７３３にあるか、または該アミノ酸残基７３３のすぐ側に隣接する。この切断部位で結合するか、またはこの切断部位に隣接する化合物は、該切断部位へのＣ５コンベルターゼ酵素のアクセスを阻止することによって、補体阻害剤として作用する潜在能力を有する。
【００２０】
Ｃ５は、Ｃ５コンベルターゼ活性以外の手段によっても活性化されうる。限定トリプシン消化（Ｍｉｎｔａ ａｎｄ Ｍａｎ， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９７７， １１９：１５９７−１６０２； Ｗｅｔｓｅｌ ａｎｄ Ｋｏｌｂ， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９８２，１２８：２２０９−２２１６）および酸処理（Ｙａｍｍａｍｏｔｏ ａｎｄ Ｇｅｗｕｒｚ， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９７８， １２０：２００８； Ｄａｍｅｒａｕ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９８９， ２６：１１３３−１１４２）もＣ５を切断し、活性Ｃ５ｂを生成することができる。
【００２１】
Ｃ５の切断は、強力なアナフィラトキシンおよび走化因子であるＣ５ａを遊離し、溶解性終末補体複合体、すなわち、Ｃ５ｂ−９の形成に至る。Ｃ５ａおよびＣ５ｂ−９も、加水分解酵素、反応性酸素種アラキドン酸代謝産物、および種々のサイトカイン等の下流炎症因子の遊離を増幅することによって、多面発現性細胞活性化特性を有する。
【００２２】
Ｃ５ｂは、Ｃ６、Ｃ７、およびＣ８と組み合わさって、標的細胞の表面でＣ５ｂ−８複合体を形成する。複数のＣ９分子が結合すると、膜攻撃複合体（ＭＡＣ、Ｃ５ｂ−９、終末補体複合体ＴＣＣ）が形成される。十分な数のＭＡＣが標的細胞膜中に挿入すると、該ＭＡＣが形成する開口部（ＭＡＣ孔）は、標的細胞の急速な浸透溶解を媒介する。ＭＡＣのより低い非溶解性濃度は、他の効果を生じることができる。具体的には、内皮細胞および血小板への少数のＣ５ｂ−９複合体の膜挿入は、有害な細胞活性化を引き起こすことができる。いくつかの場合で、活性化は細胞溶解より前に起こることがある。
【００２３】
上述のように、Ｃ３ａおよびＣ５ａは、アナフィラトキシンである。これらの活性化された補体成分は、マスト細胞脱顆粒を誘発することができ、それによって、好塩基球およびマスト細胞からヒスタミンが遊離され、炎症の他のメディエーターが遊離され、平滑筋収縮、血管透過性の増加、白血球活性化、および他の炎症現象（細胞過形成を生じる細胞増殖を含む）が生じる。Ｃ５ａは、補体活性化部位へ炎症誘発顆粒球を誘引するために作用する走化性ペプチドとしても機能する。
【００２４】
Ｃ５ａ受容体は、気管支および肺胞上皮細胞ならびに気管支平滑筋細胞の表面上に見出される。Ｃ５ａ受容体は、好酸球、マスト細胞、単球、好中球、および活性化された白血球上でも見出された。したがって、補体成分の受容体の結合を阻止する化合物は、本明細書で有用である。
【００２５】
任意のヒト補体成分に結合するか、あるいはさもなければ該ヒト補体成分の生成および／または活性を阻止する、例えば、ヒト補体成分に特異的な抗体等の任意の化合物が本明細書で有用である。いくつかの化合物は、補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、第Ｄ因子、第Ｂ因子、第Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１、およびＭＡＳＰ−２に向けられる抗体を含むので、Ｃ５ａに関連するアナフィラトキシン活性の生成を予防し、Ｃ５ｂに関連する膜攻撃複合体の集合を予防する。ＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、第Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、ｙ結合タンパク質、コンプリスタチン（ｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ）、およびＫ７６ ＣＯＯＨ等の補体阻害化合物の天然発生形態または可溶性形態も本方法で有用である。
【００２６】
本明細書での使用に特に有用な化合物は、補体成分Ｃ５ａおよびＣ５ｂへの補体成分Ｃ５の変換を直接的または間接的に低減する抗体である。有用な抗体の一クラスは、少なくとも１つの抗体抗原結合部位を有し、かつヒト補体成分Ｃ５への特異的結合を示すものであり、この際、該特異的結合は、ヒト補体成分Ｃ５のα鎖を標的にする。より詳細には、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）を用いることが可能である。そのような抗体は、１）ヒト体液中の補体活性化を阻害し、２）ヒト補体成分Ｃ３またはヒト補体成分Ｃ４への精製ヒト補体成分Ｃ５の結合を阻害し、かつ３）Ｃ５ａに対するヒト補体活性化産物へ特異的に結合しない。特に有用な補体阻害剤は、Ｃ５ａおよび／またはＣ５ｂ−９の生成を約３０％を越えて低減する化合物である。Ｃ５ａの生成を阻止する望ましい能力を有する抗Ｃ５抗体は、遅くとも１９８２年以来、当該技術分野で公知である（Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉ ｅｔ ａｌ． Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ． １９８２， １６２：３９７； Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉ ｅｔ ａｌ． Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ． １９８３， １６５：３２３）。Ｃ５またはＣ５フラグメントに対して免疫反応性であることが当該技術分野で公知の抗体としては、Ｃ５β鎖に対する抗体（Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉ ｅｔ ａｌ． Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ． １９８２， １６２：３９７； Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉ ｅｔ ａｌ． Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ． １９８３，１６５：３２３； Ｗｕｒｚｎｅｒ ｅｔ ａｌ． １９９１（上掲）； Ｍｏｌｌｎｅｓ ｅｔ ａｌ， Ｓｃａｎｄ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９８８， ２８：３０７−３１２）、Ｃ５ａに対する抗体（例えば、Ａｍｅｓ ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９４， １５２：４５７２−４５８１、米国特許第４，６８６，１００号、および欧州特許公開第０ ４１１ ３０６号を参照せよ）、および非ヒトＣ５に対する抗体（例えば、Ｇｉｃｌａｓ ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈ． １９８７， １０５：２０１−２０９を参照せよ）が挙げられる。特に有用な抗Ｃ５抗体は、ｈ５Ｇ１．１、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ、およびｈ５Ｇ１．１の機能的フラグメントである。ｈ５Ｇ１．１、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ、およびｈ５Ｇ１．１の機能的フラグメントの調製方法については、米国特許第６，３５５，２４５号および“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ａｎｔｉ−Ｃ５ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ａｎｄ Ｓｉｎｇｌｅ Ｃｈａｉｎ ＦＶ”， Ｔｈｏｍａｓ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， Ｖｏｌ． ３３， Ｎｏ． １７／１８， ｐａｇｅｓ １３８９−１４０１，１９９６（それらの開示全体を本明細書に援用する）に記載されている。
【００２７】
機能的には、適当な抗体は、Ｃ５の切断を阻害し、それによって、強力な炎症誘発分子Ｃ５ａおよびＣ５ｂ−９（終末補体複合体）の生成を阻止する。好ましくは、該抗体は、オプソニン作用および免疫複合体クリアランスの重要な免疫防御機能を助成するＣ３ｂの形成を予防しない。
【００２８】
これらの炎症誘発終末補体成分の生成を予防する一方で、Ｃ５での補体カスケードの抗体媒介阻害は、多くの病原微生物のオプソニン作用と、免疫複合体可溶化およびクリアランスとに重要なＣ３ｂを生成する能力を保存する。Ｃ３ｂを生成する能力を保有することは、感染への感受性の増加および免疫複合体のクリアランスの減衰が疾患過程の既存の臨床的特徴である炎症疾患に対する補体阻害での治療的因子として特に重要であると思われる。
【００２９】
抗ヒトＣ５抗体は、好ましくは、モノクローナル抗体であるが、所望であれば、従来の技術によって生成およびスクリーニングされるポリクローナル抗体も用いることができる。
【００３０】
本開示にしたがって喘息を処置するために用いられる好ましい抗Ｃ５抗体は、Ｃ５またはそのフラグメント、例えば、Ｃ５ａまたはＣ５ｂに結合する。好ましくは、抗Ｃ５抗体は、精製ヒト補体成分Ｃ５のα鎖上のエピトープに対して免疫反応性であり、Ｃ５コンベルターゼによるＣ５ａおよびＣ５ｂへのＣ５の変換を阻止することが可能である。Ｗｕｒｚｎｅｒ， ｅｔ ａｌ． Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｉｎｆｌａｍｍ ８：３２８−３４０， １９９１に記載されている技術を用いて、この能力を測定することができる。
【００３１】
特に有用な実施形態では、抗Ｃ５抗体は、精製ヒト補体成分Ｃ５のβ鎖上のエピトープに対して免疫反応性ではないが、逆に該精製ヒト補体成分Ｃ５のα鎖内のエピトープに対しては免疫反応性である。この実施形態では、該抗体は、Ｃ５コンベルターゼによるＣ５ａおよびＣ５ｂへのＣ５の変換を阻止することも可能である。α鎖内では、最も好ましい抗体は、アミノ末端領域に結合するが、該抗体は、遊離Ｃ５ａには結合しない。
【００３２】
Ｓｉｍｓ他、米国特許第５，１３５，９１６号の教示にしたがって、補体成分Ｃ５に反応性があるモノクローナル抗体を生成するハイブリドーマを得ることができる。既知の方法にしたがって、免疫原として補体膜攻撃複合体の精製成分を用いて、抗体を調製する。この開示にしたがって、補体成分Ｃ５またはＣ５ｂを免疫原として好適に用いる。特に好ましい有用な実施形態にしたがって、免疫原は、Ｃ５のα鎖である。
【００３３】
特に有用な抗体は、前述のパラグラフに論じられる必要な機能的特性を共有し、以下の特性を有する。すなわち、
（１）該抗体は、Ｃ５の部分、すなわちＣ５α鎖への結合に競合することと、
（２）該抗体は、Ｃ５α鎖に特異的に結合することと（表面プラズモン共鳴法（Ｊｏｈｎｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈ． １９９３， １６０：１９１−１９８）を含む当該技術分野で公知の様々な方法によって、そのような特異的結合および結合への競合を測定することができる）と、
（３）該抗体は、Ｃ３またはＣ４（Ｃ５コンベルターゼの補体）へのＣ５の結合を阻止することとである。
【００３４】
別の態様では、喘息患者の肺中の炎症を低減する方法を提供する。該方法は、喘息に罹患しているか、または罹患しやすい被験体に、該被験体の気道中の炎症メディエーターの生成または遊離を低減する化合物を投与する工程を含む。この開示にしたがって低減されうる炎症メディエーターの非限定的な例としては、ＴＧＦβ、好酸性顆粒タンパク質、およびマトリックス・メタロプロテアーゼ９（ｍｍｐ９、９２ｋＤａＩＶ型コラゲナーゼ／ゼラチナーゼまたはゼラチナーゼＢとしても知られる）が挙げられる。該化合物は、任意の種々の機構によって炎症を低減することができる。例えば、炎症メディエーターがＭＭＰ９である場合、該化合物は、細胞レベルで作用して、プロｍｍｐ−９の生成または遊離を低減することができるか、８３ｋＤａ活性形態へのプロｍｍｐ−９の変換を予防するような様式でプロｍｍｐ−９と相互作用することができるか、またはｍｍｐ９の活性形態と相互作用して、該酵素に関連する炎症効果（例えば、ＴＧＦ−βの生成等の）を予防することができる。適当な化合物としては、限定はされないが、１種類以上の補体成分に結合するか、またはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／もしくは遊離および／または活性を阻止するか、あるいは補体成分の受容体の結合を阻止する上述の化合物が挙げられる。
【００３５】
当技術で認識される種々の手順にしたがって、ＭＭＰ−９活性を検出することができる。例えば、定量的ザイモグラフィー法は、この酵素の活性の比較的に改良された評価を提供する。この方法は、ＭＭＰ−９に対する天然の基質である変性コラーゲン、すなわちゼラチンを加水分解する酵素の能力にもとづいて、ＭＭＰ−９活性の検出を可能にする。ゼラチンは、ポリアクリルアミド等のゲルに組み込まれる。Ｈｉｂｂｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ， ２６０：２４９３−２５００ （１９８５）およびＭｏｌｌ ｅｔ ａｌ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ５０：６１６２−７０ （１９９０）を参照せよ。試験試料と平行して分析される精製ＭＭＰ−９調製物を用いて、該アッセイを標準化することが可能である。当該技術分野で公知の方法によって、精製ＭＭＰ−９を調製することができる。例えば、Ｏｋａｄａ ｅｔ ａｌ．（上掲）およびＭｏｒｏｄｏｍｉ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ． ２８５：６０３：１１ （１９９２）を参照せよ。ゼラチンの加水分解の程度は、試料中のＭＭＰ−９の活性に直接関連し、活性ＭＭＰ−９形態を、それらの特徴的な分子量によって同定することができる。ゼラチン・ザイモグラフィーでは、電気泳動およびその後インキュベーションの間に生じる触媒作用活性化のためにプロＭＭＰ−９種を検出することができる。しかし、作業着手の前に存在するＭＭＰ−９形態は、この種の活性化を受けることができない、すなわち、該ＭＭＰ−９形態は、潜伏性である。
【００３６】
標準的な免疫学的技術、例えば、ＥＬＩＳＡ、免疫蛍光アッセイ、またはラジオイムノアッセイを用いて、ＭＭＰ−９活性を検出することもできる。好ましい実施形態では、ＭＭＰ−９に特異的な抗体の使用を必要とするＥＬＩＳＡを用いて、ＭＭＰ−９活性を検出する。Ｄａｖｉｄ他、米国特許第４，３７６，１１０号（およびその明細書に引用される参考文献）を参照せよ。ＭＭＰ−９に特異的なモノクローナル抗体は、部分的に精製された酵素調製物を用いて調製されている。例えば、Ｍｏｌｌ ｅｔ ａｌ．（上掲）； Ｒａｍｏｓ−ＤｅＳｉｍｏｎｅ ｅｔ ａｌ．， ＨＹＢＲＩＤＯＭＡ １２（４）：３４９−６３ （１９９３）、およびＧｏｌｄｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．を参照せよ。標準的な手順にしたがって、ＭＭＰ−９に特異的なポリクローナル抗体を調製することもできる。好ましい実施形態では、巨大分子担体と結合させた非保存ペプチドを用いて、ポリクローナル抗体を調製する。ＭＭＰのメンバー間での金属結合ドメイン等の特異的な非保存ペプチドの選択は、当該技術分野の通常の技術レベル内にあると考えられる。ＷｏｅｓｓｎｅｒおよびＧｏｌｄｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．（上掲）を参照せよ。ピコグラムまたはナノグラム量でＭＭＰ−９を検出することができる酵素アッセイについても、Ｍａｎｉｃｏｕｒｔ ｅｔ ａｌ．， Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． ２１５（２）：１７１−９ （１９９３）に開示されている。
【００３７】
さらに、ウエスタン・ブロット分析によって、ＭＭＰ−９活性を試料中で検出することができ、該ウエスタン・ブロット分析は、ゲル中の試験材料の電気泳動分離後に、ニトロセルロース膜への分離タンパク質の転写と、特異的な抗体および抗原固定抗体に反応する試薬を用いたＭＭＰ−９抗原の検出とを必要とする。Ｔｏｗｂｉｎ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ７６（９）：４３５０−４３５４ （１９７９）を参照せよ。
【００３８】
ｍｍｐ９の検出のための適当なアッセイは、様々なソース、例えば、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｈｅｉｍ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｍａｎｈｅｉｍ， Ｇｅｒｍａｎｙ）およびＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ， ＭＮ）等のソースから市販されている。
【００３９】
少なくとも１種類の補体成分の生成および／または活性を阻害する化合物を、種々の単位投与量形式で投与することができる。投与量は、使用する特定の化合物に応じて変わるだろう。例えば、異なる抗体は、異なる質量および／または親和性を有することが可能であるの、異なる投与量レベルを必要とする。Ｆａｂ′フラグメントとして調製される抗体も、インタクトな免疫グロブリンよりかなり小さい質量であるため患者中の血液で同じモル濃度レベルに達するまでにより少ない投与量を必要するので、該抗体は、等価なインタクトな免疫グロブリンと比べて異なる投与量を必要とするだろう。
【００４０】
投与量は、投与様式、処置されている患者の特定の症状、患者の全体的な健康、状態、寸法、および年齢、ならびに処方する医師の判断に応じても変わるだろう。
【００４１】
少なくとも１種類の補体成分の生成および／または活性を阻害する化合物の投与は、一般に、注射による静脈内注入または皮下注射を介した適当な医薬担体とのエアロゾル形態であるだろう。所望であれば、他の投与経路を用いることが可能である。エアロゾル投与は、補体阻害化合物の全身的効果を避け、一方で、この開示にしたがって達成されるべき所望の喘息処置効果を提供するので、該エアロゾル投与が好ましい。
【００４２】
注射に適する配合物は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ， Ｐａ．， １７ｔｈ ｅｄ． （１９８５）に見出される。そのような配合物は、無菌かつ非発熱性でなければならず、一般に、食塩水、緩衝（例えば、リン酸緩衝）食塩水、ハンクス溶液、リンガー溶液、デキストロース／食塩水、グルコース溶液等の医薬的に効果的な担体を含むだろう。配合物は、必要に応じて、張性調整剤、湿潤剤、殺菌剤、防腐剤、安定剤等の医薬的に許容される補助物質を含有することが可能である。
【実施例】
【００４３】
（実施例１ 喘息を処置するためのＣ５阻害に対する予防法としての抗Ｃ５抗体の使用）
図４ｂに示される投与量およびスケジュールにしたがって、正常ＢＡＬＢ／ｃマウスを卵白アルブミン抗原（「ＯＶＡ」）およびミョウバンに曝露することによって、該正常ＢＡＬＢ／ｃマウス中で喘息を誘導した。これらの曝露は、発作の間の標準的な喘息応答を誘導した。曝露されたマウスは、早期反応および後期反応両方を示した。図１に見られるように、早期反応は、曝露後１５分以内の特異的な気道抵抗であった。特異的な気道抵抗のより重篤度の後期反応は、曝露後約５時間目に生じた。呼吸気流計を装着した二重チャンバ・プレチスモグラフ（Ｂｕｘｏ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから市販）によって、特異的な気道抵抗を測定した。
【００４４】
補体成分阻害化合物の予防的利点を実証するために、図２ａおよび２ｂに示される投与量のスケジュールにしたがって、マウスの群に３種類の異なる処置のうちの１種類を施した。４０ｍｇ／ｋｇの投与量での対照抗体（ハイブリドーマ１３５．８）で陽性対照群を処置した。４０ｍｇ／ｋｇの投与量での抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１でマウスの第２の群を処置した。デキサメタゾン（「ＤＥＸ」）でマウスの第３の群を処置した。図２ａのスケジュールに示されるように、陰性対照群を最初にＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）およびミョウバンに曝露し、後にＰＢＳを施した。この対照群は、ベースライン空気抵抗測定値を提供した。
【００４５】
公知の方法にしたがって、ＢＢ５．１抗体を作製した（Ｆｒｅｉ，Ｙ．， Ｌａｍｂｒｉｓ，Ｊ．Ｄ．， Ｓｔｏｃｋｉｎｇｅｒ， Ｂ． Ｍｏｌ． Ｃｅｌｌ． Ｐｒｏｂｅｓ． １： １４１−１４９（１９８７）を参照せよ）。ＢＢ５．１抗体およびアイソタイプ適合対照１３５．８ハイブリドーマ抗体両方を無胸腺マウス中で腹水として増殖させ、プロテインＡアフィニティー・クロマトグラフィー後に、ＩｍｍｕｎｏＰｕｒｅ ＩｇＧ溶出緩衝液（Ｐｉｅｒｃｅ）を用いた溶出およびＰＢＳ緩衝食塩水に対する透析をおこなうことによって、該抗体を腹水から精製した（Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ． １９９６）。
【００４６】
図３に示すように、抗Ｃ５抗体で予防的に皮下処置した群は、ステロイド処置のチャレンジされたマウスおよび陰性対照と同様に応答することが判明した。抗Ｃ５処置は、カスケード中の補体成分Ｃ５の生成を阻害し、マウスが経験した気道収縮は、Ｃ５精製の阻害によって、有意に少なかった。対照抗体で処置された陽性対照は、喘息発作によって引き起こされる特異的な気道抵抗の増加を示した。
【００４７】
（実施例２ 喘息を処置するための治療法としての静脈内投与を介した抗Ｃ５抗体の使用）
喘息発作の間にＣ５補体成分阻害剤を静脈内投与することの治療的利点を実証するために、図４ａに示される投与量のスケジュールにしたがって、マウスの群に３種類の異なる処置のうちの１種類を施した。陽性対照群にＯＶＡでチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、静脈内投与する対照抗体（１３５．８ハイブリドーマ）で処置した。マウスの第２の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目目に、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１で静脈内処置した。マウスの第３の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、ＤＥＸで静脈内処置した。偽手術されたマウスは、図４ａに示されるスケジュールにしたがって、マウスの一群にリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）およびミョウバンを投与してＰＢＳのエアロゾル投与量を投与することによって提供されるベースライン空気抵抗測定値を提供した。
【００４８】
このチャレンジの結果（図６ａおよび６ｂに示される）によって、抗Ｃ５で治療的に静脈内処置されたマウスの群は、非常に少ない特異的な気道収縮を示し、これらのマウスは、ステロイド（ＤＥＸ）で処置された群と同様に処置に応答したことが判明した。図６ａに示されるように、対照抗体で処置された陽性対照群は、特異的な気道抵抗の有意な増加を示した。抗Ｃ５抗体は、補体成分の炎症反応を阻害し、マウスでの喘息発作の間により大きな空気の通路を可能にした。
【００４９】
（実施例３ 喘息を処置するための治療法としてのエアロゾル投与を介した抗Ｃ５抗体の使用）
喘息発作の間にＣ５補体成分阻害剤をエアロゾルを介して投与することの治療的利点を実証するために、図４ａに示される投与量のスケジュールにしたがって、マウスの群に３種類の異なる処置のうちの１種類を施した。陽性対照群にＯＶＡでチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、エアロゾルによって投与する対照抗体（１３５．８ハイブリドーマ）で処置した。マウスの第２の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目目に、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１のエアロゾル投与を介して処置した。マウスの第３の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、ＤＥＸでエアロゾルによって処置した。図４ａに示されるスケジュールにしたがって、マウスの一群にリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）およびミョウバンを投与して、ＰＢＳのエアロゾル投与量を投与することによって、ベースライン空気抵抗測定値を提供した。
【００５０】
喘息発作の間の抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１でのマウスの治療的エアロゾル処置は、特異的な気道抵抗を有意に低下させ、これらのマウスは、ステロイド処置マウスと同様に、かつより迅速に応答したことが判明した。エアロゾル処置の結果を図５ａおよび５ｂに示す。図５ｂに示されるように、対照抗体で処置された陽性対照群は、抗Ｃ５抗体で処置されたマウスよりも何倍も多く特異的な気道抵抗を経験した。
【００５１】
抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１を、効果的な投与法であることが判明している噴霧を介しても試験動物に投与した。噴霧後の血清試験の結果は、ＢＢ５．１がＣ５部位に結合していたために、噴霧を介した送達の間もインタクトなままであったことを示す。
【００５２】
溶血活性に対するＷｕｒｚｎｅｒ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｉｎｆｌａｍｍ ８：３２８−３４０， １９９１に記載される技術を用いて、実施例２および３で施した各処置の全身的効果を測定した。これらの試験の結果を図７に示す。図中で見られるように、対照抗体およびステロイドは、投与法に関係なく、全身的Ｃ５活性を実質的に低減しなかった。しかし、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１を用いた投与法は、全身的Ｃ５活性に直接的に影響を及ぼした。具体的には、エアロゾル投与および静脈内投与両方が、喘息発作の重篤度を低減する上で効果的であったが、エアロゾル投与は、全身的Ｃ５活性を実質的に低減することなしに、喘息発作の重篤度を低減した。図７に見られるように、抗Ｃ５抗体の静脈内投与は、全身的Ｃ５活性をほぼ８０％低減した。
【００５３】
（実施例４ 炎症メディエーターの存在を低減するための抗Ｃ５抗体の使用）
喘息発作の間に炎症メディエーターの存在を低減する上で、Ｃ５補体成分阻害剤を投与することの治療的利点を実証するために、図４ａに示される投与量のスケジュールにしたがって、マウスの群に３種類の異なる処置のうちの１種類を施した。陽性対照群にＯＶＡでチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、静脈内投与する対照抗体（１３５．８ハイブリドーマ）で処置した。マウスの第２の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目目に、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１で静脈内処置した。マウスの第３の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、ＤＥＸで静脈内処置した。偽手術されたマウスは、図４ａに示されるスケジュールにしたがって、マウスの一群にリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）およびミョウバンを投与してＰＢＳのエアロゾル投与量を投与することによって提供されるベースライン空気抵抗測定値を提供した。５時間後に、従来の技術を用いて、マウスを安楽死させ、肺を洗浄した。概して、ＰＢＩ食塩水１ｃｃを肺に導入して、回収した。このプロセスを３回繰り返した。該液体を回収して、遠心した。結果として生じるペレットに含有される細胞を検査した。ヒスタミン、ＩＬ−５、ＩＬ−４、ＩＬ−１３、好酸性顆粒タンパク質、ＴＧＦβ、および／またはｍｍｐ−９の存在に関して上清を試験した。市販の試験キットを用いて、アッセイ全てをおこなった。結果を図８〜１３に示す。これらの気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）の結果は、肺組織自体中のそのような成分の存在よりもむしろ、肺構造細胞または炎症細胞によって生成または遊離されるタンパク質の存在または不在を示す。
【００５４】
抗Ｃ５抗体でのマウスの処置およびＤＥＸでのマウスの処置両方は、全ＷＢＣ数を低減することが判明した（図８を参照せよ）。好酸球は、ＢＡＬでの最も多数を占める炎症細胞であることが判明した（図９Ａ〜９Ｄおよび図１０を参照せよ）。
【００５５】
図１１は、抗Ｃ５抗体がヒスタミン濃度にほとんど効果を及ぼさないこと、すなわち、ステロイドＤＥＸを用いて得られた結果と同様の結果を示す。しかし、図１２に示されるように、抗Ｃ５抗体は、ステロイドでの処置と比べて、ＢＡＬで検出されるｍｍｐ−９の濃度を有意に低減した。したがって、抗Ｃ５抗体およびＤＥＸ両方がより低い検出可能な量のＴＧＦ−βを生じた（図１３を参照せよ）一方で、抗Ｃ５抗体のみが、ｍｍｐ−９の生成または遊離の低減を含む機構を介して、より低い検出可能な量のＴＧＦ−βを生じた。
【００５６】
（実施例５ 気管支拡張薬としての抗Ｃ５抗体の使用）
喘息発作の間にＣ５補体成分阻害剤を投与すること（単独で、またはβ２アドレナリン受容体アゴニストと組み合わせて）の直接的かつ即時の気管支拡張効果を実証するために、図１４および１５に示される投与量のスケジュールにしたがって、マウスの群に抗原でチャレンジして、４種類の異なる処置のうちの１種類を施した。陽性対照群にＯＶＡでチャレンジし、第２の喘息発作を誘発した後に、カニューレ挿入し、エアロゾルを介して投与する対照抗体（マウスＩｇＧ１）で処置した。マウスの第２の群に同様にチャレンジし、第２の喘息発作を誘発した後に、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１で処置した。マウスの第３の群に同様にチャレンジし、第２の喘息発作を誘発した後に、サルブタモール（Ｓｉｇｍａから市販されるβ２アドレナリン受容体アゴニスト）で処置した。マウスの第４の群に同様にチャレンジし、第２の喘息発作を誘発した後に、抗Ｃ５抗体とサルブタモールとの組合せで処置した。偽手術されたマウスは、図１４および１５に示されるスケジュールにしたがって、マウスの一群にリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）およびミョウバンを投与してＰＢＳのエアロゾル投与量を投与することによって提供されるベースライン空気抵抗測定値を提供した。
【００５７】
その後、侵襲的方法によって、気道応答性を気道機能の変化として評価し、この際、Ｂｕｘｃｏ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍソフトウェアおよび全身プレチスモグラフを用いることによって、肺抵抗の変化を測定した。マウスに、ｉ．ｐ．注射によってアベルチン（１６０ｍｇ／ｋｇ）で麻酔をかけ、Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｉｎｓｐｉｒａ換気装置によって換気した。気管カニューレ後に、パンクロニウム（０．３ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内注入して、麻痺を誘導し、自発呼吸を阻害した。マウスは、体重のプログラムによって一回呼吸気量および呼吸数に設定した換気装置によって呼吸し続けた。５％ＯＶＡ誘発後５時間目に、特異的な抗原に対するＲＬの測定をおこなった。図１５に報告される結果は、抗Ｃ５抗体での処置が４匹のマウスのうち３匹で有意な気管支拡張効果を及ぼしたことと、β２アドレナリン受容体アゴニストと組み合わせた抗Ｃ５抗体の処置から相乗効果が観察されることとを示す。
【００５８】
本発明の好ましい実施形態および他の実施形態を本明細書に記載してきたが、更なる実施形態は、本発明の範囲から逸脱せずに、当業者によって認識されうる。
【技術分野】
【０００１】
（背景）
（技術分野）
この開示は、１種類以上の補体成分に結合するか、あるいはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／または活性を阻止する、例えば、補体阻害抗体等の化合物を用いて喘息を処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（関連技術の説明）
喘息、気管支炎、および肺気腫は、慢性閉塞性肺疾患と総称されている。これらの疾患は、慢性的な気管支炎、喘息、および肺気腫の様々な程度の症状に関連する一般化された（ｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ）気道閉塞（特に、末梢気道の）として特徴付けられる。これらの疾患は、しばしば、個体に共存することがあり、気道閉塞の主因を決定することが難しい場合がある。気道閉塞は、努力呼気の間の気流への抵抗の増加として定義される。太い気道の閉塞もこれらの疾患、特に喘息で生じうる。
【０００３】
喘息は、特異的および／または非特異的な刺激に対する気道応答性亢進によって引き起こされる可逆的な閉塞性肺疾患である。喘息性の気道閉塞は、通常、気管支痙攣に起因する。喘息は、アレルギー反応、感染への２次応答、産業または職業曝露、特定の化学物質または薬物の摂取、運動、および脈管炎等の種々の原因によって誘発されうる。喘息の病状の多くは、マスト細胞の脱顆粒に起因しうる。マスト細胞は、例えば、古典的ＩｇＥ抗原刺激等の様々な状態に反応して脱顆粒する。喘息ヒトまたは動物がアレルギー物質を吸い込むと、感作ＩｇＥ抗体は、肺間質中でマスト細胞脱顆粒を誘発すると考えられている。マスト細胞脱顆粒によって、ヒスタミン、ブラジキニン、ならびにロイコトリエン（Ｃ、Ｄ、およびＥ）、プロスタグランジン（ＰＧＦ２、ＰＧＦ２α、およびＰＧＤ２を含む）、およびトロンボキサンＡ２を含むアナフィラキシーの遅反応性物質（ＳＲＳ−Ａ）が遊離する。その後、ヒスタミンは、より大きい気管支中の受容体部位に結合し、過敏、炎症、および浮腫を引き起こす。ＳＲＳ−Ａは、より小さい気管支中の受容体部位に結合し、浮腫を引き起こし、肺中のヒスタミン作用を増強させるプロスタグランジンを誘引する。プロスタグランジンと組み合わさったヒスタミンは、過剰な粘液分泌を促し、気管支内腔をさらに狭めることもする。喘息個体が吸息すると、狭められた気管支内腔は、それでもわずかに拡張し、空気を肺胞に到達させる。しかし、呼息労作事に、増加した胸部圧力は、気管支内腔を完全に塞ぐ。そのため、空気は、肺に入ることができるが、喘息発作の間は出ていくことが可能ではない。その後、肺胞中の換気は、肺底部中に集まる粘液によって阻害される。低下した肺胞の換気を埋め合わせようとして、血液が他の肺胞に流される。医療行為がなされないと、低酸素症、および極端な場合は呼吸性アシドーシスが生じうる。多くの場合、アレルギー性喘息発作へ２つの段階、すなわち、早期と、気管支刺激後の４〜６時間後に起こる後期とがある。早期は、即時の炎症反応を含み、該炎症反応は、マスト細胞からの細胞メディエーター（すなわち、ヒスタミン）の遊離によって引き起こされる反応を含む。後期反応は、ある期間にわたって生じ、多形核白血球の早期流入およびフィブリン沈着、その後に生じる好酸球の湿潤によって組織学的に特徴付けられる。血漿およびＢＡＬで好酸球由来炎症メディエーター（好酸球カチオン性タンパク質および主要な塩基性タンパク質を含む）の濃度増加が後期反応中に観察された。アレルゲン・チャレンジ後に生じるＴＨ２型サイトカイン（ＩＬ４、ＩＬ５、およびＩＬ１３）の上方制御が後期中に観察された。したがって、気管支粘膜中の遊離した炎症誘発メディエーター（例えば、ｍｍｐ９）および局所的に産生されたサイトカインと組み合わさった細胞炎症反応は、後期アレルギー炎症および気管支収縮で中心的な役割を果たす。後期反応は、気道反応性を増加させ、複数の被験体では数時間から数日、さらには数ヶ月まで続く可能性がある長期の喘息増悪に至る。喘息反応の後遺症作用は、非特異的な刺激への気道のこの応答性亢進である。
【０００４】
現在、喘息に対する処置は、必ずしも十分とは限らず、多くが深刻な副作用を持つ。喘息に対する薬物療法の一般的な目的は、気管支痙攣の予防と、気道炎症の表示である気道の反応性亢進または応答性亢進の制御とである。喘息発作を誘発するアレルゲン全てへの曝露を除去または予防することは非常に難しい。これらの発作を予防するために、大部分の喘息患者は、種々の薬剤で処置され、その多くが副作用を持つ。
【０００５】
Ｌｕｋａｃｓ他（Ｌｕｋａｃｓ ｅｔ ａｌ， Ａｍ． Ｊ． Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｌｕｎｇ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ． ２００１）に報告された研究では、抗Ｃ５ａ抗体は、免疫複合体媒介肺炎症の誘導の間に、抗ＢＳＡ抗体とともに気管内投与された。具体的には、Ｌｕｋａｃｓの研究は、メタコリンの静脈内チャレンジへの短期のＡＨＲを持つ、皮膚の逆受身アルサス反応に類似する急性免疫複合体媒介組織肺炎症のモデルを用いる。動物は、本発明で実証されるように、アレルゲンへの曝露後に、好酸球増加症が特徴となる慢性気道炎症を生じず、既往の重篤度の喘息発作も経験しなかった。Ｌｕｋａｃｓの研究の鍵となる特徴は、抗ＢＳＡ抗体を動物に気管内注入した後に、補体カスケードを活性化し、終末補体成分の量を有意に生成した、気道に沿った局所的なＢＳＡおよび抗ＢＳＡの免疫複合体の形成であった。メタコリンへのＡＨＲのその後の発生は、ＢＳＡ−抗ＢＳＡが肺炎症を誘導した急性期の間４時間まで続き、これは、喘息に罹患している患者で見られる重篤度かつ長期に続くＡＨＲとは有意に対照的である。Ｌｕｋａｃｓの研究にもとづいて、抗Ｃ５ａは、気道で局所的に産生されるＣ５ａを中和するため、Ｃ５ａによって媒介される有害な下流事象（例えば、メディエーターの遊離および血管漏出症候群を促す炎症細胞の漸増および活性化）の発生を予防すると考えることが妥当である。動物がＩＶメタコリンでチャレンジされた際、炎症細胞のＣ５ａ媒介漸増、ヒスタミン等のメディエーターの遊離、および気道の浮腫の発生を阻止する組み合わせ効果は、気道抵抗の低減およびＡＨＲの発生の予防に至る。この研究は、免疫複合体媒介肺炎症のＡＨＲの発生でのＣ５ａの重要性を示唆するだろう。しかし、この研究は、持続中の喘息発作またはアレルゲンに対する後期気道応答の間のＣ５阻害剤による気管支拡張の任意の直接的かつ即時の効果があるかを予測するための根拠を提供しない。また、この研究は、気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体の処置も含まない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（要旨）
本開示は、１種類以上の補体成分に結合するか、またはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／もしくは活性を阻止するか、あるいは、例えば、Ｃ５ａ受容体等の補体成分受容体の結合を阻止する化合物を用いた喘息に対する処置に関する。処置療法は、少なくとも１種類の補体成分の生成および／または活性を阻害する化合物の投与を含む。適当な化合物としては、例えば、１種類以上の補体成分に結合するか、あるいはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／または活性を阻止する、例えば、補体成分Ｃ５に特異的な抗体等の抗体が挙げられる。
【０００７】
補体阻害抗体を既知の喘息個体（気道炎症を有する個体または既往の喘息症状を経験した被験体等の）に予防的に投与して、喘息発作を予防するか、または予防するのを助けることができる。静脈内、エアロゾル、皮下、または筋肉内経路を介して、この予防的療法を投与することができる。
【０００８】
補体阻害化合物を、喘息発作を経験する個体に治療措置として投与することができる。静脈内、エアロゾル、皮下、または筋肉内経路を介して、該措置を投与することができる。
【０００９】
例えば、ステロイド、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−５抗体、β２受容体アゴニスト、ロイコトリエン阻害剤、５リポキシゲナーゼ阻害剤、ｂ２アドレナリン受容体アゴニスト、ＰＤＥ阻害剤、ＩＬ５アンタゴニスト、ＣＤ２３アンタゴニスト、ＩＬ１３アンタゴニスト、サイトカイン遊離阻害剤、ヒスタミンＨ１受容体アンタゴニスト、抗ヒスタミン、およびヒスタミン遊離阻害剤等の既知の喘息療法の措置と組み合わせて補体阻害化合物を含む多剤併用療法も用いることが可能である。上記に列挙した各クラスの適当な化合物と、他の喘息処置とについては、Ａｓｔｈｍａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ： Ｎｅｗ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｏｐｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｔａｓｒｇｅｒｔｓ， Ｂａｒｎｅｓ， Ａｐｒｉｌ ２００３， Ｌｅａｄ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ， ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｌｅａｄｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．ｃｏ．ｕｋ／ｔａｒｇｅｔ−ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ／ａｂｓｔｒａｃｔｓ／ｄｏｓｓｉｅｒ−ａｓｔｈｍａ．ｈｔｍｌに列挙される。
【００１０】
別の態様では、喘息患者の肺中の炎症を低減する方法を本明細書で開示する。該方法は、喘息に罹患しているか、または罹患しやすい被験体に、該被験体の気道中の炎症メディエーター（例えば、マトリックス・メタロプロテアーゼ９（ｍｍｐ９、９２ｋＤａＩＶ型コラゲナーゼ／ゼラチナーゼまたはゼラチナーゼＢとしても知られる）、ＴＧＦβ、好酸性顆粒等の）の遊離または生成を低減する化合物を投与する工程を含む。該化合物は、細胞レベルで作用して、炎症メディエーターの生成または遊離を低減することができるか、炎症メディエーターの活性に干渉する（例えば、８３ｋＤａ活性形態へのプロｍｍｐ−９の変換を予防することによって）ような様式で炎症メディエーターと相互作用するか、あるいは炎症メディエーターの活性形態と相互作用して、該炎症メディエーターに関連する炎症効果を予防することができる。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
被験体において喘息を処置する方法であって、喘息に罹患しやすいか、または罹患している被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目２）
喘息発作を予防する方法であって、気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体に、抗Ｃ５抗体を予防的に投与することを包含する、方法。
（項目３）
喘息発作の重篤度を低減する方法であって、喘息発作を有する被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目４）
被験体において気道閉塞を低減する方法であって、該被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目５）
被験体において気流を増加する方法であって、該被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目６）
被験体において気管支痙攣を低減する方法であって、該被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目７）
被験体において慢性閉塞性肺疾患を処置する方法であって、慢性閉塞性肺疾患に罹患している前記被験体に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目８）
被験体において炎症を低減する方法であって、気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体に、抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目９）
気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体を処置する方法であって、効果的な気管支拡張量の抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目１０）
前記投与する工程が、喘息発作の間に前記抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目８または９記載の方法。
（項目１１）
前記被験体がヒトである、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１２）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、Ｃ５ａおよびＣ５ｂへの補体成分Ｃ５の変換を阻害する抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１３）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、ヒト補体成分Ｃ５ａに結合する抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１４）
ヒト補体成分Ｃ５ｂ９に対する抗Ｃ５抗体を投与する工程を包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１５）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、ｈ５Ｇ１．１、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ、およびｈ５Ｇ１．１の機能的フラグメントからなる群から選択される抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１６）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、ヒト補体成分Ｃ５のα鎖への特異的な結合を示し、かつ少なくとも１つの抗体抗原結合部位を含む抗体である抗Ｃ５抗体を投与することを含み、該抗体が、１）ヒト体液中の補体活性化を阻害し、かつ２）Ｃ５コンベルターゼへの精製ヒト補体成分Ｃ５の結合を阻害する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１７）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、エアロゾルとして抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１８）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、注射による静脈内注入および皮下注射からなる群から選択される方法を介して、抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１９）
前記抗Ｃ５抗体を投与する工程が、ステロイド、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−５抗体、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ロイコトリエン阻害剤、５リポキシゲナーゼ阻害剤、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ＰＤＥ阻害剤、ＣＤ２３アンタゴニスト、ＩＬ１３アンタゴニスト、サイトカイン遊離阻害剤、ヒスタミンＨ１受容体アンタゴニスト、抗ヒスタミン、およびヒスタミン遊離阻害剤からなる群から選択されるメンバーと組み合わせて、抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目２０）
喘息を罹患しているか、または罹患しやすい被験体を処置するための方法であって、抗Ｃ５抗体と組み合わせて、ステロイド、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−５抗体、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ロイコトリエン阻害剤、５リポキシゲナーゼ阻害剤、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ＰＤＥ阻害剤、ＣＤ２３アンタゴニスト、ＩＬ１３アンタゴニスト、サイトカイン遊離阻害剤、ヒスタミンＨ１受容体アンタゴニスト、抗ヒスタミン、およびヒスタミン遊離阻害剤からなる群から選択される少なくとも１種類のメンバーを投与することを包含する、方法。
（項目２１）
喘息を処置する方法であって、被験体の肺に、該被験体において全身的補体活性を実質的に低減することなしに抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、方法。
（項目２２）
被験体において喘息を処置する方法であって、１種類以上の補体成分と結合する化合物、１種類以上の補体成分の生成を阻止する化合物、１種類以上の補体成分の活性を阻止する化合物、および補体成分受容体の結合を阻止する化合物からなる群から選択される化合物を該被験体に投与することを包含する、方法。
（項目２３）
前記投与する工程が、抗Ｃ５ａ受容体抗体を投与することを包含する、項目２２記載の方法。
（項目２４）
被験体において炎症を低減する方法であって、１種類以上の補体成分と結合する化合物、１種類以上の補体成分の生成を阻止する化合物、１種類以上の補体成分の活性を阻止する化合物、および補体成分受容体の結合を阻止する化合物からなる群から選択される化合物を該被験体に投与することを包含する、方法。
（項目２５）
前記投与する工程が、喘息発作の間に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目２４記載の方法。
（項目２６）
前記投与する工程が、抗Ｃ５ａ受容体抗体を投与することを包含する、項目２４記載の方法。
（項目２７）
気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体を処置する方法であって、１種類以上の補体成分と結合する化合物、１種類以上の補体成分の生成を阻止する化合物、１種類以上の補体成分の活性を阻止する化合物、および補体成分受容体の結合を阻止する化合物からなる群から選択される化合物を該被験体に投与することを包含する、方法。
（項目２８）
前記投与する工程が、喘息発作の間に抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目２７記載の方法。
（項目２９）
前記投与する工程が、抗Ｃ５ａ受容体抗体を投与することを包含する、項目２７記載の方法。
（項目３０）
前記化合物を投与する工程が、補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、第Ｄ因子、第Ｂ因子、第Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１、およびＭＡＳＰ−２からなる群から選択される化合物に向けられる１種類以上の抗体を投与することを包含する、項目２２、２４、または２７のいずれかに記載の方法。
（項目３１）
前記化合物を投与する工程が、可溶性ＣＲ１、可溶性ＬＥＸ−ＣＲ１、可溶性ＭＣＰ、可溶性ＤＡＦ、可溶性ＣＤ５９、第Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプリスタチン（ｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ）、およびＫ７６ ＣＯＯＨからなる群から選択される１種類以上の化合物を投与することを包含する、項目２２、２４、または２７のいずれかに記載の方法。
（項目３２）
喘息発作を予防する方法であって、１種類以上の補体成分と結合する化合物、１種類以上の補体成分の生成を阻止する化合物、１種類以上の補体成分の活性を阻止する化合物、および補体成分受容体の結合を阻止する化合物からなる群から選択される化合物を、気道炎症を樹立した被験体または既往の喘息症状を経験した被験体に予防的に投与することを包含する、方法。
（項目３３）
前記投与する工程が、抗Ｃ５ａ受容体抗体を投与することを包含する、項目３２記載の方法。
（項目３４）
喘息発作の重篤度を低減する方法であって、１種類以上の補体成分と結合する化合物、１種類以上の補体成分の生成を阻止する化合物、１種類以上の補体成分の活性を阻止する化合物、および補体成分受容体の結合を阻止する化合物からなる群から選択される化合物を、喘息発作に罹患している被験体に投与することを包含する、方法。
（項目３５）
前記投与する工程が、抗Ｃ５ａ受容体抗体を投与することを包含する、項目３４記載の方法。
（項目３６）
喘息患者の肺において炎症を低減する方法であって、可溶性ＣＲ１、可溶性ＬＥＸ−ＣＲ１、可溶性ＭＣＰ、可溶性ＤＡＦ、可溶性ＣＤ５９、第Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプリスタチン（ｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ）、およびＫ７６ ＣＯＯＨからなる群から選択される１種類以上の化合物と、補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、第Ｄ因子、第Ｂ因子、第Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１、およびＭＡＳＰ−２からなる群から選択される化合物に向けられる抗体とを、喘息に罹患しているか、または罹患しやすい被験体に投与する工程を包含する、方法。
（項目３７）
投与される前記化合物が、前記被験体の気道中の１種類以上の炎症メディエーターの遊離または生成を低減する、項目３６記載の方法。
（項目３８）
前記投与する工程が、細胞レベルで作用して炎症メディエーターの生成または遊離を低減する化合物を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目３９）
前記投与する工程が、前記炎症メディエーターの活性形態と相互作用して該炎症メディエーターに関連する炎症効果を予防することができる化合物を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目４０）
前記化合物を投与する工程が、補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、第Ｄ因子、第Ｂ因子、第Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１、およびＭＡＳＰ−２からなる群から選択される化合物に向けられる１種類以上の抗体を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目４１）
前記化合物を投与する工程が、ＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、第Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、コンプリスタチン（ｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ）、およびＫ７６ ＣＯＯＨからなる群から選択される１種類以上の化合物を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目４２）
前記化合物を投与する工程が、ステロイド、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−５抗体、β２受容体アゴニスト、ロイコトリエン阻害剤、５リポキシゲナーゼ阻害剤、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ＰＤＥ阻害剤、ＣＤ２３アンタゴニスト、ＩＬ１３アンタゴニスト、サイトカイン遊離阻害剤、ヒスタミンＨ１受容体アンタゴニスト、抗ヒスタミン、およびヒスタミン遊離阻害剤からなる群から選択されるメンバーと組み合わせて、前記化合物を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目４３）
前記化合物を投与する工程が、抗Ｃ５抗体を投与することを包含する、項目３６記載の方法。
（項目４４）
前記投与する工程が、抗Ｃ５受容体抗体を投与することを包含する、項目３４記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、正常ＢＡＬＢ／ｃマウス中のＯＶＡ誘導喘息反応をグラフで示す。
【図２ａ】図２ａは、正常ＢＡＬＢ／ｃマウス中の抗原チャレンジおよび予防的処置のスケジュールおよび性質を示す。
【図２ｂ】図２ｂは、正常ＢＡＬＢ／ｃマウス中の抗原チャレンジおよび予防的処置のスケジュールを示す。
【図３】図３は、図２ａおよび２ｂに示される処置の効果をグラフで概説する。
【図４ａ】図４ａは、喘息発作の間の正常ＢＡＬＢ／ｃマウス中の抗原チャレンジおよびＩＶまたはエアロゾル処置のスケジュールおよび性質を示す。
【図４ｂ】図４ｂは、ＢＡＬＢ／ｃマウス中の喘息発作の誘導のプロトコールおよび結果を示す。
【図５ａ】図５ａは、図４ａに示されるエアロゾル処置の効果をグラフで概説する。
【図５ｂ】図５ｂは、図４ａに示されるエアロゾル処置の効果をグラフで概説する。
【図６ａ】図６ａは、図４ａに示される静脈内処置の効果をグラフで概説する。
【図６ｂ】図６ｂは、図４ａに示される静脈内処置の効果をグラフで概説する。
【図７】図７は、図４ａに示される処置に対するＣ５活性への種々の処置の全身的効果をグラフで示す。
【図８】図８は、ＢＡＬでの全ＷＢＣ数への種々の静脈内処置の効果をグラフで示す。
【図９】図９および１０は、好酸球がＢＡＬでの最も多数を占める炎症細胞であると判明したことを示す。
【図１０】図９および１０は、好酸球がＢＡＬでの最も多数を占める炎症細胞であると判明したことを示す。
【図１１】図１１は、ＢＡＬでのヒスタミンへの種々の静脈内処置の効果をグラフで示す。
【図１２】図１２は、ＢＡＬでのＭＭＰ−９濃度への種々の静脈内処置の効果をグラフで示す。
【図１３】図１３は、ＢＡＬでのＴＧＦβの濃度への種々の静脈内処置の効果をグラフで示す。
【図１４】図１４は、喘息発作の間の正常ＢＡＬＢ／ｃマウスの抗原チャレンジならびにカニューレ挿入およびエアロゾル処置のスケジュールおよび性質を示す。
【図１５】図１５は、抗Ｃ５、β２受容体アゴニスト、またはその組合せで喘息発作の間に処置された喘息マウスでの肺抵抗を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
（詳細な説明）
本開示は、ほ乳類の喘息を処置する方法に向けられる。具体的には、本明細書に記載される喘息を処置する方法は、１種類以上の補体成分に結合するか、あるいはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／または活性を阻止する化合物を用いることを含む。補体成分の生成の阻害または阻止は、喘息での気管支収縮応答に関与する複数の因子を阻害する。特に有用なそのような化合物の特定のクラスは、ヒト補体成分に特異的な抗体、特に抗Ｃ５抗体である。
補体系は、身体の免疫系と協調して作用し、細胞病原体およびウイルス病原体の侵入から防御する。少なくとも２５種類の補体タンパク質があり、血漿タンパク質および膜補因子の複合集団として見出される。血漿タンパク質は、脊椎動物血清中のグロブリンの約１０％を占める。補体成分は、一連の複雑であるが正確な酵素切断および膜結合事象で相互作用することによってそれらの免疫防御機能を達成する。その結果生じる補体カスケードは、オプソニン機能、免疫調節機能、および溶解機能を有する産物の生成に至る。補体活性化に関連する生物学的活性の簡潔な概要については、例えば、Ｔｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｍａｎｕａｌ， １６ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎに提供される。
【００１３】
補体カスケードは、通常、古典的経路または代替経路を介して進行する。これらの経路は、多くの成分を共有しており、それらの初期の段階で異なる一方で、該経路は、相似しており、標的細胞の活性化および破壊を担う同じ「終末補体（ｔｅｒｍｉｎａｌ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ）」成分（Ｃ５からＣ９まで全て）を共有する。
【００１４】
古典的補体経路は、標的細胞上の抗原部位の抗体認識および抗体結合によって開始される。代替経路は、通常、抗体は関与せず、病原体表面上の特定の分子によって開始されうる。さらに、レクチン経路は、通常、高マンノース基質へのマンノース結合レクチン（ＭＢＬ）の結合で開始される。これらの経路は、補体成分Ｃ３が活性プロテアーゼ（各経路で異なる）によって切断されて、Ｃ３ａおよびＣ３ｂを産生する点で相似する。その後に、補体攻撃を活性化する他の経路は、補体機能の様々な態様に至る一連の事象で作用することができる。
【００１５】
Ｃ３ａは、アナフィラトキシンである。Ｃ３ｂは、細菌細胞および他の細胞に結合するとともに、特定のウイルスおよび免疫複合体に結合し、循環からの除去のためにそれらを捕まえる（この役割でのＣ３ｂはオプソニンとして知られる）。Ｃ３ｂのオプソニン機能は、一般に、補体系の最も重要な抗感染作用であると考えられている。Ｃ３ｂ機能を阻止する遺伝的病変を有する患者は、幅広い種類の病原生物による感染を被りやすく、一方で、補体カスケード順序の後期に病変を有する患者、すなわち、Ｃ５機能を阻止する病変を有する患者は、ナイセリア属（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）感染をより被りやすくなるに過ぎず、より後期では、若干より被りやすくなるに過ぎないことが判明している。
【００１６】
Ｃ３ｂは、各経路に固有の他の成分との複合体も形成し、Ｃ５をＣ５ａおよびＣ５ｂに切断する古典的または代替Ｃ５コンベルターゼを形成する。したがって、Ｃ３は、代替経路および古典的経路両方に不可欠であるので、補体反応順序で中心的なタンパク質とみなされる。Ｃ３ｂのこの特性は、血清プロテアーゼ第Ｉ因子によって調節されており、該血清プロテアーゼ第Ｉ因子は、Ｃ３ｂに作用して、ｉＣ３ｂを生成する。オプソニンとして依然として機能できる一方で、ｉＣ３ｂは、活性Ｃ５コンベルターゼを形成できない。
【００１７】
Ｃ５は、約７５μｇ／ｍｌ（０．４μＭ）での正常血清で見出される１９０ｋＤａβ・グロブリンである。Ｃ５は、グリコシル化されており、その質量の約１．５〜３％が糖質に属する。成熟Ｃ５は、６５６アミノ酸７５ｋＤａβ鎖にジスルフィド結合する９９９アミノ酸１１５ｋＤａα鎖のヘテロダイマーである。Ｃ５は、単一コピー遺伝子の一本鎖前駆体タンパク質産物として合成される（Ｈａｖｉｌａｎｄ ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９１，１４６：３６２−３６８）。この遺伝子の転写物のｃＤＮＡ配列は、１８アミノ酸リーダー配列を伴った１６５９個のアミノ酸の分泌プロＣ５前駆体を予測する（米国特許第６，３５５，２４５号を参照せよ）。
【００１８】
プロＣ５前駆体は、アミノ酸６５５および６５９の後で切断され、アミノ末端フラグメント（上記配列のアミノ酸残基＋１〜６５５）としてβ鎖を、かつカルボキシル末端フラグメント（上記配列のアミノ酸残基６６０〜１６５８）としてα鎖を産生し、この２つ鎖間で４個のアミノ酸（上記配列のアミノ酸残基６５６〜６５９）が欠失されている。
【００１９】
Ｃ５ａは、代替または古典的Ｃ５コンベルターゼによって、α鎖の最初の７４個のアミノ酸を含むアミノ末端フラグメント（すなわち、上記配列のアミノ酸残基６６０〜７３３）としてＣ５のα鎖から切断される。Ｃ５ａの１１ｋＤａ質量の約２０％は、糖質に属する。コンベルターゼ作用に対する切断部位は、上記配列のアミノ酸残基７３３にあるか、または該アミノ酸残基７３３のすぐ側に隣接する。この切断部位で結合するか、またはこの切断部位に隣接する化合物は、該切断部位へのＣ５コンベルターゼ酵素のアクセスを阻止することによって、補体阻害剤として作用する潜在能力を有する。
【００２０】
Ｃ５は、Ｃ５コンベルターゼ活性以外の手段によっても活性化されうる。限定トリプシン消化（Ｍｉｎｔａ ａｎｄ Ｍａｎ， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９７７， １１９：１５９７−１６０２； Ｗｅｔｓｅｌ ａｎｄ Ｋｏｌｂ， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９８２，１２８：２２０９−２２１６）および酸処理（Ｙａｍｍａｍｏｔｏ ａｎｄ Ｇｅｗｕｒｚ， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９７８， １２０：２００８； Ｄａｍｅｒａｕ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９８９， ２６：１１３３−１１４２）もＣ５を切断し、活性Ｃ５ｂを生成することができる。
【００２１】
Ｃ５の切断は、強力なアナフィラトキシンおよび走化因子であるＣ５ａを遊離し、溶解性終末補体複合体、すなわち、Ｃ５ｂ−９の形成に至る。Ｃ５ａおよびＣ５ｂ−９も、加水分解酵素、反応性酸素種アラキドン酸代謝産物、および種々のサイトカイン等の下流炎症因子の遊離を増幅することによって、多面発現性細胞活性化特性を有する。
【００２２】
Ｃ５ｂは、Ｃ６、Ｃ７、およびＣ８と組み合わさって、標的細胞の表面でＣ５ｂ−８複合体を形成する。複数のＣ９分子が結合すると、膜攻撃複合体（ＭＡＣ、Ｃ５ｂ−９、終末補体複合体ＴＣＣ）が形成される。十分な数のＭＡＣが標的細胞膜中に挿入すると、該ＭＡＣが形成する開口部（ＭＡＣ孔）は、標的細胞の急速な浸透溶解を媒介する。ＭＡＣのより低い非溶解性濃度は、他の効果を生じることができる。具体的には、内皮細胞および血小板への少数のＣ５ｂ−９複合体の膜挿入は、有害な細胞活性化を引き起こすことができる。いくつかの場合で、活性化は細胞溶解より前に起こることがある。
【００２３】
上述のように、Ｃ３ａおよびＣ５ａは、アナフィラトキシンである。これらの活性化された補体成分は、マスト細胞脱顆粒を誘発することができ、それによって、好塩基球およびマスト細胞からヒスタミンが遊離され、炎症の他のメディエーターが遊離され、平滑筋収縮、血管透過性の増加、白血球活性化、および他の炎症現象（細胞過形成を生じる細胞増殖を含む）が生じる。Ｃ５ａは、補体活性化部位へ炎症誘発顆粒球を誘引するために作用する走化性ペプチドとしても機能する。
【００２４】
Ｃ５ａ受容体は、気管支および肺胞上皮細胞ならびに気管支平滑筋細胞の表面上に見出される。Ｃ５ａ受容体は、好酸球、マスト細胞、単球、好中球、および活性化された白血球上でも見出された。したがって、補体成分の受容体の結合を阻止する化合物は、本明細書で有用である。
【００２５】
任意のヒト補体成分に結合するか、あるいはさもなければ該ヒト補体成分の生成および／または活性を阻止する、例えば、ヒト補体成分に特異的な抗体等の任意の化合物が本明細書で有用である。いくつかの化合物は、補体成分Ｃ−１、Ｃ−２、Ｃ−３、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−９、第Ｄ因子、第Ｂ因子、第Ｐ因子、ＭＢＬ、ＭＡＳＰ−１、およびＭＡＳＰ−２に向けられる抗体を含むので、Ｃ５ａに関連するアナフィラトキシン活性の生成を予防し、Ｃ５ｂに関連する膜攻撃複合体の集合を予防する。ＣＲ１、ＬＥＸ−ＣＲ１、ＭＣＰ、ＤＡＦ、ＣＤ５９、第Ｈ因子、コブラ毒因子、ＦＵＴ−１７５、ｙ結合タンパク質、コンプリスタチン（ｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ）、およびＫ７６ ＣＯＯＨ等の補体阻害化合物の天然発生形態または可溶性形態も本方法で有用である。
【００２６】
本明細書での使用に特に有用な化合物は、補体成分Ｃ５ａおよびＣ５ｂへの補体成分Ｃ５の変換を直接的または間接的に低減する抗体である。有用な抗体の一クラスは、少なくとも１つの抗体抗原結合部位を有し、かつヒト補体成分Ｃ５への特異的結合を示すものであり、この際、該特異的結合は、ヒト補体成分Ｃ５のα鎖を標的にする。より詳細には、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）を用いることが可能である。そのような抗体は、１）ヒト体液中の補体活性化を阻害し、２）ヒト補体成分Ｃ３またはヒト補体成分Ｃ４への精製ヒト補体成分Ｃ５の結合を阻害し、かつ３）Ｃ５ａに対するヒト補体活性化産物へ特異的に結合しない。特に有用な補体阻害剤は、Ｃ５ａおよび／またはＣ５ｂ−９の生成を約３０％を越えて低減する化合物である。Ｃ５ａの生成を阻止する望ましい能力を有する抗Ｃ５抗体は、遅くとも１９８２年以来、当該技術分野で公知である（Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉ ｅｔ ａｌ． Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ． １９８２， １６２：３９７； Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉ ｅｔ ａｌ． Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ． １９８３， １６５：３２３）。Ｃ５またはＣ５フラグメントに対して免疫反応性であることが当該技術分野で公知の抗体としては、Ｃ５β鎖に対する抗体（Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉ ｅｔ ａｌ． Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ． １９８２， １６２：３９７； Ｍｏｏｎｇｋａｒｎｄｉ ｅｔ ａｌ． Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌ． １９８３，１６５：３２３； Ｗｕｒｚｎｅｒ ｅｔ ａｌ． １９９１（上掲）； Ｍｏｌｌｎｅｓ ｅｔ ａｌ， Ｓｃａｎｄ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９８８， ２８：３０７−３１２）、Ｃ５ａに対する抗体（例えば、Ａｍｅｓ ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９４， １５２：４５７２−４５８１、米国特許第４，６８６，１００号、および欧州特許公開第０ ４１１ ３０６号を参照せよ）、および非ヒトＣ５に対する抗体（例えば、Ｇｉｃｌａｓ ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈ． １９８７， １０５：２０１−２０９を参照せよ）が挙げられる。特に有用な抗Ｃ５抗体は、ｈ５Ｇ１．１、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ、およびｈ５Ｇ１．１の機能的フラグメントである。ｈ５Ｇ１．１、ｈ５Ｇ１．１−ｓｃＦｖ、およびｈ５Ｇ１．１の機能的フラグメントの調製方法については、米国特許第６，３５５，２４５号および“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ａｎｔｉ−Ｃ５ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ａｎｄ Ｓｉｎｇｌｅ Ｃｈａｉｎ ＦＶ”， Ｔｈｏｍａｓ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ， Ｖｏｌ． ３３， Ｎｏ． １７／１８， ｐａｇｅｓ １３８９−１４０１，１９９６（それらの開示全体を本明細書に援用する）に記載されている。
【００２７】
機能的には、適当な抗体は、Ｃ５の切断を阻害し、それによって、強力な炎症誘発分子Ｃ５ａおよびＣ５ｂ−９（終末補体複合体）の生成を阻止する。好ましくは、該抗体は、オプソニン作用および免疫複合体クリアランスの重要な免疫防御機能を助成するＣ３ｂの形成を予防しない。
【００２８】
これらの炎症誘発終末補体成分の生成を予防する一方で、Ｃ５での補体カスケードの抗体媒介阻害は、多くの病原微生物のオプソニン作用と、免疫複合体可溶化およびクリアランスとに重要なＣ３ｂを生成する能力を保存する。Ｃ３ｂを生成する能力を保有することは、感染への感受性の増加および免疫複合体のクリアランスの減衰が疾患過程の既存の臨床的特徴である炎症疾患に対する補体阻害での治療的因子として特に重要であると思われる。
【００２９】
抗ヒトＣ５抗体は、好ましくは、モノクローナル抗体であるが、所望であれば、従来の技術によって生成およびスクリーニングされるポリクローナル抗体も用いることができる。
【００３０】
本開示にしたがって喘息を処置するために用いられる好ましい抗Ｃ５抗体は、Ｃ５またはそのフラグメント、例えば、Ｃ５ａまたはＣ５ｂに結合する。好ましくは、抗Ｃ５抗体は、精製ヒト補体成分Ｃ５のα鎖上のエピトープに対して免疫反応性であり、Ｃ５コンベルターゼによるＣ５ａおよびＣ５ｂへのＣ５の変換を阻止することが可能である。Ｗｕｒｚｎｅｒ， ｅｔ ａｌ． Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｉｎｆｌａｍｍ ８：３２８−３４０， １９９１に記載されている技術を用いて、この能力を測定することができる。
【００３１】
特に有用な実施形態では、抗Ｃ５抗体は、精製ヒト補体成分Ｃ５のβ鎖上のエピトープに対して免疫反応性ではないが、逆に該精製ヒト補体成分Ｃ５のα鎖内のエピトープに対しては免疫反応性である。この実施形態では、該抗体は、Ｃ５コンベルターゼによるＣ５ａおよびＣ５ｂへのＣ５の変換を阻止することも可能である。α鎖内では、最も好ましい抗体は、アミノ末端領域に結合するが、該抗体は、遊離Ｃ５ａには結合しない。
【００３２】
Ｓｉｍｓ他、米国特許第５，１３５，９１６号の教示にしたがって、補体成分Ｃ５に反応性があるモノクローナル抗体を生成するハイブリドーマを得ることができる。既知の方法にしたがって、免疫原として補体膜攻撃複合体の精製成分を用いて、抗体を調製する。この開示にしたがって、補体成分Ｃ５またはＣ５ｂを免疫原として好適に用いる。特に好ましい有用な実施形態にしたがって、免疫原は、Ｃ５のα鎖である。
【００３３】
特に有用な抗体は、前述のパラグラフに論じられる必要な機能的特性を共有し、以下の特性を有する。すなわち、
（１）該抗体は、Ｃ５の部分、すなわちＣ５α鎖への結合に競合することと、
（２）該抗体は、Ｃ５α鎖に特異的に結合することと（表面プラズモン共鳴法（Ｊｏｈｎｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈ． １９９３， １６０：１９１−１９８）を含む当該技術分野で公知の様々な方法によって、そのような特異的結合および結合への競合を測定することができる）と、
（３）該抗体は、Ｃ３またはＣ４（Ｃ５コンベルターゼの補体）へのＣ５の結合を阻止することとである。
【００３４】
別の態様では、喘息患者の肺中の炎症を低減する方法を提供する。該方法は、喘息に罹患しているか、または罹患しやすい被験体に、該被験体の気道中の炎症メディエーターの生成または遊離を低減する化合物を投与する工程を含む。この開示にしたがって低減されうる炎症メディエーターの非限定的な例としては、ＴＧＦβ、好酸性顆粒タンパク質、およびマトリックス・メタロプロテアーゼ９（ｍｍｐ９、９２ｋＤａＩＶ型コラゲナーゼ／ゼラチナーゼまたはゼラチナーゼＢとしても知られる）が挙げられる。該化合物は、任意の種々の機構によって炎症を低減することができる。例えば、炎症メディエーターがＭＭＰ９である場合、該化合物は、細胞レベルで作用して、プロｍｍｐ−９の生成または遊離を低減することができるか、８３ｋＤａ活性形態へのプロｍｍｐ−９の変換を予防するような様式でプロｍｍｐ−９と相互作用することができるか、またはｍｍｐ９の活性形態と相互作用して、該酵素に関連する炎症効果（例えば、ＴＧＦ−βの生成等の）を予防することができる。適当な化合物としては、限定はされないが、１種類以上の補体成分に結合するか、またはさもなければ該１種類以上の補体成分の生成および／もしくは遊離および／または活性を阻止するか、あるいは補体成分の受容体の結合を阻止する上述の化合物が挙げられる。
【００３５】
当技術で認識される種々の手順にしたがって、ＭＭＰ−９活性を検出することができる。例えば、定量的ザイモグラフィー法は、この酵素の活性の比較的に改良された評価を提供する。この方法は、ＭＭＰ−９に対する天然の基質である変性コラーゲン、すなわちゼラチンを加水分解する酵素の能力にもとづいて、ＭＭＰ−９活性の検出を可能にする。ゼラチンは、ポリアクリルアミド等のゲルに組み込まれる。Ｈｉｂｂｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ， ２６０：２４９３−２５００ （１９８５）およびＭｏｌｌ ｅｔ ａｌ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ５０：６１６２−７０ （１９９０）を参照せよ。試験試料と平行して分析される精製ＭＭＰ−９調製物を用いて、該アッセイを標準化することが可能である。当該技術分野で公知の方法によって、精製ＭＭＰ−９を調製することができる。例えば、Ｏｋａｄａ ｅｔ ａｌ．（上掲）およびＭｏｒｏｄｏｍｉ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ． ２８５：６０３：１１ （１９９２）を参照せよ。ゼラチンの加水分解の程度は、試料中のＭＭＰ−９の活性に直接関連し、活性ＭＭＰ−９形態を、それらの特徴的な分子量によって同定することができる。ゼラチン・ザイモグラフィーでは、電気泳動およびその後インキュベーションの間に生じる触媒作用活性化のためにプロＭＭＰ−９種を検出することができる。しかし、作業着手の前に存在するＭＭＰ−９形態は、この種の活性化を受けることができない、すなわち、該ＭＭＰ−９形態は、潜伏性である。
【００３６】
標準的な免疫学的技術、例えば、ＥＬＩＳＡ、免疫蛍光アッセイ、またはラジオイムノアッセイを用いて、ＭＭＰ−９活性を検出することもできる。好ましい実施形態では、ＭＭＰ−９に特異的な抗体の使用を必要とするＥＬＩＳＡを用いて、ＭＭＰ−９活性を検出する。Ｄａｖｉｄ他、米国特許第４，３７６，１１０号（およびその明細書に引用される参考文献）を参照せよ。ＭＭＰ−９に特異的なモノクローナル抗体は、部分的に精製された酵素調製物を用いて調製されている。例えば、Ｍｏｌｌ ｅｔ ａｌ．（上掲）； Ｒａｍｏｓ−ＤｅＳｉｍｏｎｅ ｅｔ ａｌ．， ＨＹＢＲＩＤＯＭＡ １２（４）：３４９−６３ （１９９３）、およびＧｏｌｄｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．を参照せよ。標準的な手順にしたがって、ＭＭＰ−９に特異的なポリクローナル抗体を調製することもできる。好ましい実施形態では、巨大分子担体と結合させた非保存ペプチドを用いて、ポリクローナル抗体を調製する。ＭＭＰのメンバー間での金属結合ドメイン等の特異的な非保存ペプチドの選択は、当該技術分野の通常の技術レベル内にあると考えられる。ＷｏｅｓｓｎｅｒおよびＧｏｌｄｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．（上掲）を参照せよ。ピコグラムまたはナノグラム量でＭＭＰ−９を検出することができる酵素アッセイについても、Ｍａｎｉｃｏｕｒｔ ｅｔ ａｌ．， Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． ２１５（２）：１７１−９ （１９９３）に開示されている。
【００３７】
さらに、ウエスタン・ブロット分析によって、ＭＭＰ−９活性を試料中で検出することができ、該ウエスタン・ブロット分析は、ゲル中の試験材料の電気泳動分離後に、ニトロセルロース膜への分離タンパク質の転写と、特異的な抗体および抗原固定抗体に反応する試薬を用いたＭＭＰ−９抗原の検出とを必要とする。Ｔｏｗｂｉｎ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ７６（９）：４３５０−４３５４ （１９７９）を参照せよ。
【００３８】
ｍｍｐ９の検出のための適当なアッセイは、様々なソース、例えば、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｈｅｉｍ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｍａｎｈｅｉｍ， Ｇｅｒｍａｎｙ）およびＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ， ＭＮ）等のソースから市販されている。
【００３９】
少なくとも１種類の補体成分の生成および／または活性を阻害する化合物を、種々の単位投与量形式で投与することができる。投与量は、使用する特定の化合物に応じて変わるだろう。例えば、異なる抗体は、異なる質量および／または親和性を有することが可能であるの、異なる投与量レベルを必要とする。Ｆａｂ′フラグメントとして調製される抗体も、インタクトな免疫グロブリンよりかなり小さい質量であるため患者中の血液で同じモル濃度レベルに達するまでにより少ない投与量を必要するので、該抗体は、等価なインタクトな免疫グロブリンと比べて異なる投与量を必要とするだろう。
【００４０】
投与量は、投与様式、処置されている患者の特定の症状、患者の全体的な健康、状態、寸法、および年齢、ならびに処方する医師の判断に応じても変わるだろう。
【００４１】
少なくとも１種類の補体成分の生成および／または活性を阻害する化合物の投与は、一般に、注射による静脈内注入または皮下注射を介した適当な医薬担体とのエアロゾル形態であるだろう。所望であれば、他の投与経路を用いることが可能である。エアロゾル投与は、補体阻害化合物の全身的効果を避け、一方で、この開示にしたがって達成されるべき所望の喘息処置効果を提供するので、該エアロゾル投与が好ましい。
【００４２】
注射に適する配合物は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ， Ｐａ．， １７ｔｈ ｅｄ． （１９８５）に見出される。そのような配合物は、無菌かつ非発熱性でなければならず、一般に、食塩水、緩衝（例えば、リン酸緩衝）食塩水、ハンクス溶液、リンガー溶液、デキストロース／食塩水、グルコース溶液等の医薬的に効果的な担体を含むだろう。配合物は、必要に応じて、張性調整剤、湿潤剤、殺菌剤、防腐剤、安定剤等の医薬的に許容される補助物質を含有することが可能である。
【実施例】
【００４３】
（実施例１ 喘息を処置するためのＣ５阻害に対する予防法としての抗Ｃ５抗体の使用）
図４ｂに示される投与量およびスケジュールにしたがって、正常ＢＡＬＢ／ｃマウスを卵白アルブミン抗原（「ＯＶＡ」）およびミョウバンに曝露することによって、該正常ＢＡＬＢ／ｃマウス中で喘息を誘導した。これらの曝露は、発作の間の標準的な喘息応答を誘導した。曝露されたマウスは、早期反応および後期反応両方を示した。図１に見られるように、早期反応は、曝露後１５分以内の特異的な気道抵抗であった。特異的な気道抵抗のより重篤度の後期反応は、曝露後約５時間目に生じた。呼吸気流計を装着した二重チャンバ・プレチスモグラフ（Ｂｕｘｏ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから市販）によって、特異的な気道抵抗を測定した。
【００４４】
補体成分阻害化合物の予防的利点を実証するために、図２ａおよび２ｂに示される投与量のスケジュールにしたがって、マウスの群に３種類の異なる処置のうちの１種類を施した。４０ｍｇ／ｋｇの投与量での対照抗体（ハイブリドーマ１３５．８）で陽性対照群を処置した。４０ｍｇ／ｋｇの投与量での抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１でマウスの第２の群を処置した。デキサメタゾン（「ＤＥＸ」）でマウスの第３の群を処置した。図２ａのスケジュールに示されるように、陰性対照群を最初にＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）およびミョウバンに曝露し、後にＰＢＳを施した。この対照群は、ベースライン空気抵抗測定値を提供した。
【００４５】
公知の方法にしたがって、ＢＢ５．１抗体を作製した（Ｆｒｅｉ，Ｙ．， Ｌａｍｂｒｉｓ，Ｊ．Ｄ．， Ｓｔｏｃｋｉｎｇｅｒ， Ｂ． Ｍｏｌ． Ｃｅｌｌ． Ｐｒｏｂｅｓ． １： １４１−１４９（１９８７）を参照せよ）。ＢＢ５．１抗体およびアイソタイプ適合対照１３５．８ハイブリドーマ抗体両方を無胸腺マウス中で腹水として増殖させ、プロテインＡアフィニティー・クロマトグラフィー後に、ＩｍｍｕｎｏＰｕｒｅ ＩｇＧ溶出緩衝液（Ｐｉｅｒｃｅ）を用いた溶出およびＰＢＳ緩衝食塩水に対する透析をおこなうことによって、該抗体を腹水から精製した（Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ． １９９６）。
【００４６】
図３に示すように、抗Ｃ５抗体で予防的に皮下処置した群は、ステロイド処置のチャレンジされたマウスおよび陰性対照と同様に応答することが判明した。抗Ｃ５処置は、カスケード中の補体成分Ｃ５の生成を阻害し、マウスが経験した気道収縮は、Ｃ５精製の阻害によって、有意に少なかった。対照抗体で処置された陽性対照は、喘息発作によって引き起こされる特異的な気道抵抗の増加を示した。
【００４７】
（実施例２ 喘息を処置するための治療法としての静脈内投与を介した抗Ｃ５抗体の使用）
喘息発作の間にＣ５補体成分阻害剤を静脈内投与することの治療的利点を実証するために、図４ａに示される投与量のスケジュールにしたがって、マウスの群に３種類の異なる処置のうちの１種類を施した。陽性対照群にＯＶＡでチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、静脈内投与する対照抗体（１３５．８ハイブリドーマ）で処置した。マウスの第２の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目目に、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１で静脈内処置した。マウスの第３の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、ＤＥＸで静脈内処置した。偽手術されたマウスは、図４ａに示されるスケジュールにしたがって、マウスの一群にリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）およびミョウバンを投与してＰＢＳのエアロゾル投与量を投与することによって提供されるベースライン空気抵抗測定値を提供した。
【００４８】
このチャレンジの結果（図６ａおよび６ｂに示される）によって、抗Ｃ５で治療的に静脈内処置されたマウスの群は、非常に少ない特異的な気道収縮を示し、これらのマウスは、ステロイド（ＤＥＸ）で処置された群と同様に処置に応答したことが判明した。図６ａに示されるように、対照抗体で処置された陽性対照群は、特異的な気道抵抗の有意な増加を示した。抗Ｃ５抗体は、補体成分の炎症反応を阻害し、マウスでの喘息発作の間により大きな空気の通路を可能にした。
【００４９】
（実施例３ 喘息を処置するための治療法としてのエアロゾル投与を介した抗Ｃ５抗体の使用）
喘息発作の間にＣ５補体成分阻害剤をエアロゾルを介して投与することの治療的利点を実証するために、図４ａに示される投与量のスケジュールにしたがって、マウスの群に３種類の異なる処置のうちの１種類を施した。陽性対照群にＯＶＡでチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、エアロゾルによって投与する対照抗体（１３５．８ハイブリドーマ）で処置した。マウスの第２の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目目に、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１のエアロゾル投与を介して処置した。マウスの第３の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、ＤＥＸでエアロゾルによって処置した。図４ａに示されるスケジュールにしたがって、マウスの一群にリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）およびミョウバンを投与して、ＰＢＳのエアロゾル投与量を投与することによって、ベースライン空気抵抗測定値を提供した。
【００５０】
喘息発作の間の抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１でのマウスの治療的エアロゾル処置は、特異的な気道抵抗を有意に低下させ、これらのマウスは、ステロイド処置マウスと同様に、かつより迅速に応答したことが判明した。エアロゾル処置の結果を図５ａおよび５ｂに示す。図５ｂに示されるように、対照抗体で処置された陽性対照群は、抗Ｃ５抗体で処置されたマウスよりも何倍も多く特異的な気道抵抗を経験した。
【００５１】
抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１を、効果的な投与法であることが判明している噴霧を介しても試験動物に投与した。噴霧後の血清試験の結果は、ＢＢ５．１がＣ５部位に結合していたために、噴霧を介した送達の間もインタクトなままであったことを示す。
【００５２】
溶血活性に対するＷｕｒｚｎｅｒ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｉｎｆｌａｍｍ ８：３２８−３４０， １９９１に記載される技術を用いて、実施例２および３で施した各処置の全身的効果を測定した。これらの試験の結果を図７に示す。図中で見られるように、対照抗体およびステロイドは、投与法に関係なく、全身的Ｃ５活性を実質的に低減しなかった。しかし、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１を用いた投与法は、全身的Ｃ５活性に直接的に影響を及ぼした。具体的には、エアロゾル投与および静脈内投与両方が、喘息発作の重篤度を低減する上で効果的であったが、エアロゾル投与は、全身的Ｃ５活性を実質的に低減することなしに、喘息発作の重篤度を低減した。図７に見られるように、抗Ｃ５抗体の静脈内投与は、全身的Ｃ５活性をほぼ８０％低減した。
【００５３】
（実施例４ 炎症メディエーターの存在を低減するための抗Ｃ５抗体の使用）
喘息発作の間に炎症メディエーターの存在を低減する上で、Ｃ５補体成分阻害剤を投与することの治療的利点を実証するために、図４ａに示される投与量のスケジュールにしたがって、マウスの群に３種類の異なる処置のうちの１種類を施した。陽性対照群にＯＶＡでチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、静脈内投与する対照抗体（１３５．８ハイブリドーマ）で処置した。マウスの第２の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目目に、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１で静脈内処置した。マウスの第３の群に同様にチャレンジし、初期喘息発作を誘発した後１５分目に、ＤＥＸで静脈内処置した。偽手術されたマウスは、図４ａに示されるスケジュールにしたがって、マウスの一群にリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）およびミョウバンを投与してＰＢＳのエアロゾル投与量を投与することによって提供されるベースライン空気抵抗測定値を提供した。５時間後に、従来の技術を用いて、マウスを安楽死させ、肺を洗浄した。概して、ＰＢＩ食塩水１ｃｃを肺に導入して、回収した。このプロセスを３回繰り返した。該液体を回収して、遠心した。結果として生じるペレットに含有される細胞を検査した。ヒスタミン、ＩＬ−５、ＩＬ−４、ＩＬ−１３、好酸性顆粒タンパク質、ＴＧＦβ、および／またはｍｍｐ−９の存在に関して上清を試験した。市販の試験キットを用いて、アッセイ全てをおこなった。結果を図８〜１３に示す。これらの気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）の結果は、肺組織自体中のそのような成分の存在よりもむしろ、肺構造細胞または炎症細胞によって生成または遊離されるタンパク質の存在または不在を示す。
【００５４】
抗Ｃ５抗体でのマウスの処置およびＤＥＸでのマウスの処置両方は、全ＷＢＣ数を低減することが判明した（図８を参照せよ）。好酸球は、ＢＡＬでの最も多数を占める炎症細胞であることが判明した（図９Ａ〜９Ｄおよび図１０を参照せよ）。
【００５５】
図１１は、抗Ｃ５抗体がヒスタミン濃度にほとんど効果を及ぼさないこと、すなわち、ステロイドＤＥＸを用いて得られた結果と同様の結果を示す。しかし、図１２に示されるように、抗Ｃ５抗体は、ステロイドでの処置と比べて、ＢＡＬで検出されるｍｍｐ−９の濃度を有意に低減した。したがって、抗Ｃ５抗体およびＤＥＸ両方がより低い検出可能な量のＴＧＦ−βを生じた（図１３を参照せよ）一方で、抗Ｃ５抗体のみが、ｍｍｐ−９の生成または遊離の低減を含む機構を介して、より低い検出可能な量のＴＧＦ−βを生じた。
【００５６】
（実施例５ 気管支拡張薬としての抗Ｃ５抗体の使用）
喘息発作の間にＣ５補体成分阻害剤を投与すること（単独で、またはβ２アドレナリン受容体アゴニストと組み合わせて）の直接的かつ即時の気管支拡張効果を実証するために、図１４および１５に示される投与量のスケジュールにしたがって、マウスの群に抗原でチャレンジして、４種類の異なる処置のうちの１種類を施した。陽性対照群にＯＶＡでチャレンジし、第２の喘息発作を誘発した後に、カニューレ挿入し、エアロゾルを介して投与する対照抗体（マウスＩｇＧ１）で処置した。マウスの第２の群に同様にチャレンジし、第２の喘息発作を誘発した後に、抗Ｃ５抗体ＢＢ５．１で処置した。マウスの第３の群に同様にチャレンジし、第２の喘息発作を誘発した後に、サルブタモール（Ｓｉｇｍａから市販されるβ２アドレナリン受容体アゴニスト）で処置した。マウスの第４の群に同様にチャレンジし、第２の喘息発作を誘発した後に、抗Ｃ５抗体とサルブタモールとの組合せで処置した。偽手術されたマウスは、図１４および１５に示されるスケジュールにしたがって、マウスの一群にリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）およびミョウバンを投与してＰＢＳのエアロゾル投与量を投与することによって提供されるベースライン空気抵抗測定値を提供した。
【００５７】
その後、侵襲的方法によって、気道応答性を気道機能の変化として評価し、この際、Ｂｕｘｃｏ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍソフトウェアおよび全身プレチスモグラフを用いることによって、肺抵抗の変化を測定した。マウスに、ｉ．ｐ．注射によってアベルチン（１６０ｍｇ／ｋｇ）で麻酔をかけ、Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｉｎｓｐｉｒａ換気装置によって換気した。気管カニューレ後に、パンクロニウム（０．３ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内注入して、麻痺を誘導し、自発呼吸を阻害した。マウスは、体重のプログラムによって一回呼吸気量および呼吸数に設定した換気装置によって呼吸し続けた。５％ＯＶＡ誘発後５時間目に、特異的な抗原に対するＲＬの測定をおこなった。図１５に報告される結果は、抗Ｃ５抗体での処置が４匹のマウスのうち３匹で有意な気管支拡張効果を及ぼしたことと、β２アドレナリン受容体アゴニストと組み合わせた抗Ｃ５抗体の処置から相乗効果が観察されることとを示す。
【００５８】
本発明の好ましい実施形態および他の実施形態を本明細書に記載してきたが、更なる実施形態は、本発明の範囲から逸脱せずに、当業者によって認識されうる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書中に記載の発明。
【請求項１】
明細書中に記載の発明。
【図１】
【図２ａ】
【図２ｂ】
【図３】
【図４ａ】
【図４ｂ】
【図５ａ】
【図５ｂ】
【図６ａ】
【図６ｂ】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図２ａ】
【図２ｂ】
【図３】
【図４ａ】
【図４ｂ】
【図５ａ】
【図５ｂ】
【図６ａ】
【図６ｂ】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【公開番号】特開２０１０−２１５６７４（Ｐ２０１０−２１５６７４Ａ）
【公開日】平成２２年９月３０日（２０１０．９．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−１５７２０３（Ｐ２０１０−１５７２０３）
【出願日】平成２２年７月９日（２０１０．７．９）
【分割の表示】特願２００４−５３４６１６（Ｐ２００４−５３４６１６）の分割
【原出願日】平成１５年９月５日（２００３．９．５）
【出願人】（５０３１０２６７４）アレクシオン ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド (51)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年９月３０日（２０１０．９．３０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年７月９日（２０１０．７．９）
【分割の表示】特願２００４−５３４６１６（Ｐ２００４−５３４６１６）の分割
【原出願日】平成１５年９月５日（２００３．９．５）
【出願人】（５０３１０２６７４）アレクシオン ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド (51)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]