ＭＣＩおよびアルツハイマー病の処置
本発明は、特に、治療上有効量のニフェジピン、酸化またはニトロソニフェジピン誘導体、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せに基づいて、とりわけ、軽度認知障害（ＭＣＩ）またはアルツハイマー病（ＡＤ）を効果的に治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防することができる治療用組成物および方法を提供する。一実施形態において、ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防するのに適する医薬組成物が提供され、この組成物は、ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される治療上有効量の薬剤、並びに薬学的に許容される担体を含む。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への参照
この出願は、２００９年３月１５日に出願された米国仮特許出願第６１／２１６，４５２号および２００９年８月１７日に出願された米国仮特許出願第６１／２３４，５５１号（これらの両方は、それらの全体が参考として本明細書に援用される）の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、老齢人口における従来よりも多数の人を冒す、周知であるが、完全には理解されていない進行性神経変性疾患である。現在、アルツハイマー病は、４００万人のアメリカ人を冒している。米国国立老化研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｎ Ａｇｉｎｇ）による統計で、予防戦略が策定されない限り、２０４０年までに１４００万人のアルツハイマー病を有するアメリカ人が存在する可能性があることが推定されている。
【０００３】
アルツハイマー病の最も初期の臨床徴候は、軽度認知障害（Ｍｉｌｄ Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ Ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ）（ＭＣＩ）と呼ばれる症候群として記述される。ＭＣＩの検出により、必要な生活様式の変更を計画し、実行することが可能であり得るが、ＭＣＩのアルツハイマー病への進行を未然に防ぐまたはアルツハイマー病を治療する療法は、現在のところ利用可能ではない。
【０００４】
２００７年の米国上院の証人喚問において、ＦＤＡ長官Ｄｒ．Ａｎｄｒｅｗ Ｃ．ｖｏｎ Ｅｓｃｈｅｎｂａｃｈは「今日のアルツハイマー病の推定される４５０万例が２０５０年までに約１６００万例に上昇すると予測することができる」と述べた。Ｄｒ．Ｅｓｃｈｅｎｂａｃｈは、ＡＤ治療用に５つの薬物、すなわち、タクリン、リバスチグミン、ガランタミン、ドネペジルおよびメマンチンが承認されたことを説明した。その最初の４つは、脳内のアセチルコリンレベルを上昇させることにより作用し、その最後のものは、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体の拮抗薬である。このようにして、Ｄｒ．Ｅｓｃｈｅｎｂａｃｈは、５つの承認薬のいずれも［ＡＤ］患者における基礎をなす神経変性を予防することも、その進行を遅らせることもないことが示されたことを指摘した。彼は、「我々は、この潜行性疾患並びに他の神経疾患の基礎をなす原因をいつの日か治療することができる可能性がある新薬を世界の他の国々と共に待望している・・・」と続けた。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、ニフェジピンおよびその酸化またはニトロソ誘導体がＡβ１−４０の発生を効果的に阻害し、Ａβ処理酵素を減少させ、関連する生化学的経路をｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで不活性化するという発見を包含する。したがって、本発明は、とりわけ、軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を効果的に治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防すること、並びにＭＣＩからＡＤへの進行を遅延させることができる新規な治療方法および組成物を提供する。
【０００６】
一態様において、本発明は、治療上有効量の１つまたは複数の治療薬および薬学的に許容される担体を含む、ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防するのに適する医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態において、治療薬は、本明細書で定義し、述べる式（Ｉａ）の治療薬である。いくつかの実施形態において、治療薬は、本明細書で定義し、述べる式（Ｉｂ）の治療薬である。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、カルシウムチャネル遮断薬である。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、カルシウムチャネル遮断薬ではない。
【０００７】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、酸化ニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニトロソニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンの混合物を含む。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、５５％のニトロソニフェジピン、１１％の酸化ニフェジピンおよび３４％のニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本明細書で述べる種々の治療薬は、サイロキシン（Ｔ４）および／またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）をさらに含む。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）および／またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）を含む。
【０００８】
いくつかの実施形態において、本発明による医薬組成物は、１用量当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ（例えば、約０．０１〜約２００ｍｇ、約０．０１〜約１００ｍｇ、約０．１〜約５０ｍｇ、約０．０１〜約１０ｍｇ、約０．０１〜約５ｍｇ、約０．０１〜約２．５ｍｇ、約０．０１〜約２．０ｍｇ、約０．０１〜約１．５ｍｇ、約０．０１〜約１．０ｍｇ、約０．０１〜約０．５ｍｇ、約０．０１〜約０．１ｍｇ）の治療上有効量の治療薬を含む。いくつかの実施形態において、本発明による医薬組成物は、１用量当たり約１０ｍｇ〜２．５ｇ（例えば、約１０ｍｇ〜２．０ｇ、約１０ｍｇ〜１．５ｇ、約１０〜約１０００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約５００ｍｇ）の治療上有効量のニトロソニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本発明による医薬組成物は、経口、皮下、静脈内、経皮、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻または直腸投与用に製剤化されている。特定の実施形態において、本発明による医薬組成物は、経口投与用に製剤化されている。いくつかの実施形態において、本発明による医薬組成物は、即時または延長放出用に製剤化されている。
【０００９】
別の態様において、本発明は、ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防する方法であって、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に関連する少なくとも１つの症状または特徴が存在度、強さ、重症度若しくは頻度において低下するか、またはその発現が遅延するように、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、または罹患しやすい被験体に治療上有効量の１つまたは複数の治療薬を投与するステップを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、症状または特徴は、認知機能低下、脳内のアミロイドβタンパク質の産生、β−セクレターゼ活性、γ−セクレターゼ活性、対らせん状細線維（ｐａｉｒｅｄ ｈｅｌｉｃａｌ ｆｉｌａｍｅｎｔ）、リン酸化タウタンパク質、および／または中枢神経系における免疫若しくは炎症状態である。いくつかの実施形態において、γ−セクレターゼ活性は、プレセニリン１（ＰＳ−１）、ニカストリン、ＡＰＨ−１および／またはＰＥＮ−２活性を阻害することにより低下する。いくつかの実施形態において、γ−セクレターゼ活性は、オーファンＧ共役受容体３（ＧＰＣＲ−３）活性を阻害することにより低下する。いくつかの実施形態において、免疫または炎症状態は、中枢神経系における１つまたは複数のサイトカイン（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α）のレベルを低下させることにより低減する。
【００１０】
いくつかの実施形態において、本発明による方法に用いる治療薬は、本明細書で定義し、述べる式（Ｉａ）の治療薬である。いくつかの実施形態において、本発明による方法に用いる治療薬は、本明細書で定義し、述べる式（Ｉｂ）の治療薬である。いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、カルシウムチャネル遮断薬である。いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、カルシウムチャネル遮断薬ではない。
【００１１】
いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、ニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、酸化ニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、ニトロソニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本発明による方法に用いる適切な治療薬は、ニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンの混合物を含む。いくつかの実施形態において、本発明による方法に用いる適切な治療薬は、５５％のニトロソニフェジピン、１１％の酸化ニフェジピンおよび３４％のニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本明細書で述べる適切な薬剤は、Ｔ３／Ｔ４をさらに含む。いくつかの実施形態において、ニフェジピン、酸化ニフェジピンおよび／またはニトロソニフェジピンを含む本発明の方法に用いる適切な治療薬は、サイロキシン（Ｔ４）および／またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）をさらに含む。
【００１２】
いくつかの実施形態において、本発明による方法は、治療を必要とする被験体に１用量当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ（例えば、約０．０１〜約２００ｍｇ、約０．０１〜約１００ｍｇ、約０．１〜約５０ｍｇ、約０．０１〜約１０ｍｇ、約０．０１〜約５ｍｇ、約０．０１〜約２．５ｍｇ、約０．０１〜約２．０ｍｇ、約０．０１〜約１．５ｍｇ、約０．０１〜約１．０ｍｇ、約０．０１〜約０．５ｍｇ、約０．０１〜約０．１ｍｇ）の治療上有効量の治療薬を投与する。いくつかの実施形態において、本発明による方法は、治療を必要とする被験体に１用量当たり約１０ｍｇ〜約２．５ｇ（例えば、約１０ｍｇ〜約２．０ｇ、約１０ｍｇ〜約１．５ｇ、約１０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、または約１０ｍｇ〜約５００ｍｇ）の治療上有効量のニトロソニフェジピンを含む治療薬を投与する。いくつかの実施形態において、本発明による方法に用いる薬剤は、経口、皮下、静脈内、経皮、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻または直腸投与により投与する。特定の実施形態において、本発明による方法に用いる薬剤は、経口投与する。
【００１３】
いくつかの実施形態において、本発明の方法により、薬剤を月１回、隔週に１回または週１回投与する。いくつかの実施形態において、本発明の方法により、薬剤を毎日投与する。いくつかの実施形態において、本発明の方法により、薬剤を１日２回、１日３回または１日４回投与する。
【００１４】
いくつかの実施形態において、本発明の方法により治療した被験体は、対照と比較してバイオマーカー（例えば、タンパク質バイオマーカー複合体）のレベルの低下または上昇を示す。いくつかの実施形態において、適切なバイオマーカーは、トランスサイレチンタンパク質および／またはプロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼタンパク質の少なくとも１つ、並びにトランスサイレチン、プロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼ、β−２−ミクログロブリン、シスタチンＣ、スーパーオキシドジスムターゼ［Ｃｕ−Ｚｎ］、血漿レチノール結合タンパク質、ホスファチジルエタノールアミン結合タンパク質、カルボニックアンヒドラーゼ２および／またはセロトランスフェリンタンパク質から選択される少なくとも１つの第２の異なるタンパク質を含む、タンパク質バイオマーカー複合体である。いくつかの実施形態において、適切なタンパク質バイオマーカー複合体は、プロスタグランジンＤ２シンターゼおよびトランスサイレチン（ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体）を含む。いくつかの実施形態において、適切なバイオマーカーは、（ｉ）βアミロイド４０（Ａβ４０）、（ｉｉ）βアミロイド４２（Ａβ４２）、（ｉｉｉ）Ａβ４０とＡβ４２との比、および（ｉｖ）リン酸化タウと総タウとの比の１つまたは複数を含む。いくつかの実施形態において、バイオマーカーは、被験体から得られる流体試料（例えば、ＣＳＦ、血清、全血、血漿、尿、腹水、唾液、組織滲出液、洗浄液およびそれらの組合せ）中で測定される。いくつかの実施形態において、適切な対照は、健常個体、所定の病期を有するアルツハイマー病に罹患した患者、治療前の被験体およびそれらの組合せからなる群から選択される被験体におけるバイオマーカーのレベルを示す。
【００１５】
いくつかの実施形態において、治療すべき被験体は、認知障害を示す試験スコアを有する。いくつかの実施形態において、認知障害を示す試験スコアは、ＭＭＳＥスコア（例えば、２７より低い、例えば、２１〜２６）である。いくつかの実施形態において、認知障害を示す試験スコアは、ＣＤＲスコア（例えば、０を上回る、例えば、０．５、例えば、１）である。
【００１６】
いくつかの実施形態において、本発明による方法は、バイオマーカーのレベルおよび／または認知試験スコアに基づいて治療薬の治療上有効量を最初に決定するステップをさらに含む。
【００１７】
さらに別の態様において、本発明は、ニトロソニフェジピンおよびニフェジピンを含む固形経口剤形を提供するものであり、ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約１：１（例えば、少なくとも約２：１、少なくとも約４：１、少なくとも約８：１、少なくとも約１６：１、少なくとも約３２：１、少なくとも約６４：１、少なくとも約１００：１、少なくとも約２００：１、少なくとも約５００：１または少なくとも約１０００：１）である。いくつかの実施形態において、本発明による固形経口剤形は、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤（例えば、結合剤、緩衝剤、希釈剤、分散剤、皮膚軟化剤、被膜形成剤（ｆｉｌｍ−ｆｏｒｍｉｎｇ ａｇｅｎｔ）、滑剤、光遮断剤、保存剤、溶媒、安定化剤、界面活性剤、懸濁化剤および／または等張化剤（ｔｏｎｉｃｉｔｙ ａｇｅｎｔ））をさらに含む。いくつかの実施形態において、固形剤形は、制御または延長放出用である。いくつかの実施形態において、固形剤形は、即時放出用である。
【００１８】
本願において、特に明記しない限り、「または」の使用は、「および／または」を意味する。本願で用いる場合、「含む」という用語並びに「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」などの当用語の変形形態は、他の添加物、成分、整数またはステップを除外することを意図しない。本願で用いる場合、「約」および「おおよそ」という用語は、同等のものとして用いる。約／おおよそを付けてまたは付けないで本願で用いるあらゆる数表示は、関連技術分野の当業者により理解されているあらゆる通常の変動を有効範囲に包含することを意味する。
【００１９】
図面は、例示の目的のみのためであって、制限のためのものではない。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】図１は、対照上皮細胞、アクロレインで処理した対照上皮細胞および後期ＡＤ上皮細胞により細胞培養培地中で発現したＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の例示的なウエスタンブロット分析を示す図である。
【図２】図２は、対照上皮細胞またはＡＤ上皮細胞の培地で処理した皮質ニューロンの具体例としての生存データを示す図である。
【図３】図３は、ＰＨＦ１免疫陽性が、ＰＤＳ／ＴＴＲタンパク質複合体への曝露に起因してＳＹ５Ｙ細胞において検出されたことを示す具体例としての結果を示す図である。
【図４】図４は、アクロレイン、アクロレイン＋Ｔ３／Ｔ４、アクロレイン＋ニフェジピン混合物（ニトロソニフェジピン５５％、酸化ニフェジピン１１％およびニフェジピン３４％）並びにアクロレイン＋ニフェジピン混合物およびＴ３／Ｔ４で処理した対照上皮細胞により発現したＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の減少を示す具体例としてのウエスタンブロットデータを示す図である。
【図５】図５は、アクロレイン、アクロレイン＋Ｔ３／Ｔ４、アクロレイン＋ニフェジピン混合物（ニトロソニフェジピン５５％、酸化ニフェジピン１１％およびニフェジピン３４％）並びにアクロレイン＋ニフェジピン混合物およびＴ３／Ｔ４で処理した培養における免疫染色により測定したＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞数を要約した図である。
【図６】図６は、共焦点顕微鏡法およびカルシウム蛍光色素により測定したとき、ニフェジピン混合物が新鮮ニフェジピンと比較してカルシウムチャネル遮断薬として機能しないことを示す図である。
【図７】図７は、炎症性サイトカインの産生がニフェジピン混合物により阻害されることを示す具体例としての結果を示す図である。
【図８】図８は、アクロレイン並びにニフェジピン、類似体、混合物およびＴ３／Ｔ４の組合せで処理した上皮細胞の培地で処理したＳＹ５Ｙ培養のＰＨＦ−１免疫染色の定量化を示す図である。
【図９】図９は、Ａβ１−４２の発生がニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピンおよびＴ３／Ｔ４により阻害されることを示す具体例としての結果を示す図である。
【図１０】図１０は、Ｈ４細胞からのＡβ１−４２の産生に対するＴ３／Ｔ４の存在下および非存在下でのニフェジピン、ニフェジピン類似体およびニフェジピン混合物の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１１】図１１は、Ｈ４神経膠腫培養におけるＡβ１−４２の発生に対するアミロドピン（Ａｍｉｌｏｄｐｉｎｅ）、ジリチアゼム（Ｄｉｌｉｔｉａｚｅｍ）、フェロジピン（Ｆｅｌｏｄｉｐｉｎｅ）、イスラジピン（Ｉｓｒａｄｉｐｉｎｅ）、ニカルジピン（Ｎｉｃａｒｄｉｐｉｎｅ）およびニモジピン（Ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ）などの公知のカルシウムチャネル遮断薬の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１２】図１２は、ニトロソニフェジピンがＢＡＣＥ活性を有意に阻害することを示す具体例としての結果を示す図である。
【図１３】図１３は、Ｔ３／Ｔ４の存在下および非存在下でのＰＳ−１、ＰＥＮ−２、ＢＡＣＥ−１およびニカストリンに対するニフェジピン混合物の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１４】図１４は、マウスモデルにおけるＡβ１−４０の発生および特定のＡβ１−４０処理酵素に対するニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１５】図１５は、ニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４が薬物を急性投与したＨ４培養またはマウスにおけるＧＰＣＲ−３のレベルを低下させたことを示す具体例としての結果を示す図である。ＧＰＣＲ−３のレベルは、ウエスタンブロット分析を用いて測定した。
【図１５Ａ】図１５ａは、Ｔ３／Ｔ４の存在下および非存在下でのＨ４培養におけるＧＰＣＲ−３のレベルに対する他のクラスの血圧薬の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１６】図１６は、対応する化合物で処理したマウス脳において測定したタウリン酸化に関与する酵素のレベルに対するニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１７】図１７は、ヒト関連試験に基づくＭＭＳＥ対年齢のＮＬＭＩＸＥＤモデルにより適合させた具体例としての軌線を示す図である。
【図１８】図１８は、剖検に至った神経心理試験スコア関連試験の被験体の前頭葉検体におけるＰＳ−１、Ｎｉｃａｓ、ＢＡＣＥ、ＡＰＨ−１およびＰＥＮ−２などのＡβ１−４２およびＡβ処理酵素のレベルを示す具体例としての結果を示す図である。４例の被験体は、ニフェジピンを含むカルシウムチャネル遮断薬の投与を受け、４例の被験体は、カルシウムチャネル遮断薬の投与を受けなかった。Ａβレベルは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＥＬＩＳＡを用いて測定した。タンパク質レベルは、ウエスタンブロット分析および各タンパク質に特異的な抗体を用いて測定した。
【図１９】図１９は、図１８に示した同じ被験体からの前頭葉検体におけるタウリン酸化に関与した酵素のレベルを示す具体例としての結果を示す図である。
【図２０】図２０は、ニトロソニフェジピンの光化学的合成の具体例としての結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
定義
別に定義しない限り、本明細書で用いる科学および技術用語並びに命名は、本発明が関連する当業者によって一般的に理解されているのと同じ意味を有する。一般的に、細胞培養の手順、感染、分子生物学の方法などは、当技術分野で用いられている一般的な方法である。そのような標準的な技術は、例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、２００１年、およびＳａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第３版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｎ．Ｙ．、２００１年などの参照マニュアルに見いだすことができる。
【００２２】
本発明がより容易に理解されるために、特定の用語を最初に定義する。以下の用語および他の用語のさらなる定義は、本明細書を通して示す。
【００２３】
アルツハイマー患者：本明細書で用いる場合、「アルツハイマー患者」、「ＡＤ患者」および「ＡＤと診断された個体」という用語はすべて、ＡＤと診断されたまたはアルツハイマー病（ＡＤ）の確度の高い診断を下された個体を指す。
【００２４】
動物：本明細書で用いる場合、「動物」という用語は、動物界の任意の構成員を意味する。いくつかの実施形態において、「動物」は、発育の任意の段階のヒトを意味する。いくつかの実施形態において、「動物」は、発育の任意の段階のヒト以外の動物を意味する。特定の実施形態において、ヒト以外の動物は、哺乳動物（例えば、げっ歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類の動物および／またはブタ）である。いくつかの実施形態において、動物は、哺乳動物、鳥、爬虫類の動物、両生類の動物、魚、昆虫および／または虫を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、動物は、トランスジェニック動物、遺伝子操作された動物および／またはクローンであってよい。
【００２５】
おおよそ：本明細書で用いる場合、目的の１つまたは複数の値に適用される「おおよそ」または「約」という用語は、表示参照値と同様である値を意味する。特定の実施形態において、「おおよそ」または「約」という用語は、特に明記しない限りまたは文脈から他の状態が明らかでない限り（そのような数が可能な値の１００％を超える場合を除く）、表示参照値のいずれの方向でも（それより大きいまたは小さい）２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％またはより小さい範囲内に入る値の範囲を意味する。
【００２６】
生物学的流体試料：本明細書で用いる場合、「生物学的流体試料」という用語は、個体から得られ、診断またはモニタリングアッセイに用いることができる様々な種類の流体試料を包含する。当用語は、全血、血清または血漿、脳脊髄液（ＣＳＦ）、尿および生物学的起源の他の液体試料を包含する。当用語は、それらの調達後に試薬による処理、可溶化、またはタンパク質若しくはポリヌクレオチドなどの特定の成分の濃縮によるなどの何らかの方法で操作された試料も含む。
【００２７】
併用療法：「併用療法」という用語は、本明細書で用いる場合、２つまたはそれ以上の異なる医薬品が重複したレジメンで投与され、そのため、被験体が両医薬品に同時に曝露される状況を意味する。
【００２８】
対照：本明細書で用いる場合、「対照」という用語は、結果が比較される基準であるというその技術分野で理解されている意味を有する。一般的に、対照は、変数に関する結論を下すためにそのような変数を分離することにより実験の完全性を増大させるのに用いる。いくつかの実施形態において、対照は、コンパレータとするために試験反応またはアッセイと同時に実施される反応またはアッセイである。１つの実験において、「試験」（すなわち、試験される変数）を適用する。第２の実験において、「対照」、試験される変数は適用されない。いくつかの実施形態において、対照は、歴史的対照（すなわち、以前に実施された試験若しくはアッセイの、または以前に公知である量若しくは結果）である。いくつかの実施形態において、対照は、印刷または別の方法で保存された記録であるまたは含む。対照は、陽性対照または陰性対照であり得る。
【００２９】
投与レジメン：「投与レジメン」は、当用語を本明細書で用いる場合、期間により分離されて個別に投与される一連の単位用量（少なくとも１つ、しばしば２つ以上）を意味する。特定の治療薬に関する推奨される一連の用量（すなわち、投与の量、時期、経路等）は、その投与レジメンを構成する。
【００３０】
機能的：本明細書で用いる場合、「機能的」生体分子は、それを特徴づける特性および／または活性を示す形態の生体分子である。
【００３１】
阻害：本明細書で用いる場合、「阻害（ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）」、「阻害する（ｉｎｈｉｂｉｔ）」および「阻害すること（ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ）」は、目的のタンパク質または遺伝子の活性および／または発現を減少または低下させる過程または方法を意味する。一般的に、タンパク質または遺伝子を阻害することは、タンパク質または遺伝子の発現または当該活性を少なくとも１０％またはそれ以上、例えば、２０％、３０％、４０％、若しくは５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上低下させること、或いは本明細書で述べるまたは当技術分野で認められている１つ若しくは複数の方法により測定したとき１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、５０倍、１００倍またはそれ以上を超える発現または当該活性の減少を意味する。
【００３２】
ｉｎ ｖｉｔｒｏ：本明細書で用いる場合、「ｉｎ ｖｉｔｒｏ」という用語は、多細胞生物体内ではなく、人工的環境、例えば、試験管若しくは反応容器内、細胞培養等において起こる事象を意味する。
【００３３】
ｉｎ ｖｉｖｏ：本明細書で用いる場合、「ｉｎ ｖｉｖｏ」という用語は、ヒト以外の動物などの多細胞生物体内で起こる事象を意味する。
【００３４】
分離された：本明細書で用いる場合、「分離された」という用語は、（１）最初に生成したときに（天然および／または実験的環境にあるかを問わず）結合していた成分の少なくとも一部から分離された、且つ／または（２）人の手により生産され、調製され、且つ／または製造された物質および／または構成要素を意味する。分離された物質および／または構成要素は、最初に結合していた他の成分の少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％、約９８％、約９９％、実質的に１００％または１００％から分離することができる。いくつかの実施形態において、分離された薬剤は、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％以上、実質的に１００％または１００％純粋である。本明細書で用いる場合、物質が他の成分を実質的に含まない場合、物質は「純粋」である。本明細書で用いる場合、「分離された細胞」という用語は、多細胞生物体に含まれていない細胞を意味する。
【００３５】
ＭＣＩを有する個体：本明細書で用いる場合、「ＭＣＩ（軽度認知障害）を有する個体」は、一般的に健忘型ＭＣＩの次の基準（Ｐｅｔｅｒｓｅｎら、Ａｒｃｈ Ｎｅｕｒｏｌ、５６巻、３０３〜３０８頁（１９９９年）を満たす個体である：１）情報提供者によって確証される記憶に関する愁訴、２）年齢および教育と比較した客観的記憶障害、３）正常な一般的認知機能、４）日常生活の完全な活動、並びに５）被験体は認知症の基準を満たしていない。
【００３６】
ＥＡＤを有する個体：本明細書で用いる場合、「ＥＡＤ（初期または中等度アルツハイマー病）を有する個体」は、次の基準を示す個体である：１）以前のより高いレベルの認知機能の低下、２）記憶に加えて認知の１つまたは複数の領域の減退、３）０．５〜１の臨床的認知症尺度スコア、および４）認知症の他の原因を除外した臨床的検査。
【００３７】
ＬＡＤを有する個体：本明細書で用いる場合、「ＬＡＤ（重度または後期アルツハイマー病）を有する個体」は、高可能性ＡＤの標準的臨床診断基準（ＭｃＫｈａｎｎら、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ、３４巻、９３９〜４８頁（１９８４年））を満たす個体である。
【００３８】
参照値：本明細書で用いる場合、「参照値」は、絶対値；相対値；上および／または下限を有する値；値の範囲；平均値（ａｖｅｒａｇｅ ｖａｌｕｅ）；中央値；平均値（ｍｅａｎ ｖａｌｕｅ）；または特定の対照若しくはベースライン値と比較した値であり得る。参照値は、例えば、ＡＤ、ＭＣＩまたは認知障害を有するが初期の時点の個体からの試料から得られた値、或いは試験される個体以外のＡＤ患者または「正常」個体、すなわちＡＤと診断されなかった個体からの試料から得られた値などの個体試料の値に基づく値であってよい。参照値は、ＡＤ患者または正常個体などからの多数の試料に、或いは試験される試料を含むまたは除外した試料のプールに基づく値であってよい。
【００３９】
神経疾患：本明細書で用いる場合、「神経疾患」という語句は、中枢神経系の疾患または障害を意味する。神経疾患は、多発性硬化症、神経障害、並びにＡＤ、パーキンソン病、筋委縮側索硬化症（ＡＬＳ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）および前頭側頭型認知症などの神経変性障害を含む。
【００４０】
正常個体：本明細書で用いる場合、「正常」個体または「健常」個体は、ＡＤまたはＭＣＩを有さないと医師により評価され、または評価されると思われ、２５〜３０の範囲内のミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）（Ｆｏｌｓｔｅｉｎら、Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｒｅｓ、１９７５年、１２巻、１２８９〜１９８頁に言及されている）スコアを有する、またはＭＭＳＥスコアを達成すると思われる個体を意味する。「正常」個体は、評価される個体と同年齢である個体を含むが、それに限定されない、５〜１０歳の範囲内で一般的に同年齢である。
【００４１】
タンパク質：本明細書で用いる場合、「タンパク質」という用語は、ポリペプチド（すなわち、ペプチド結合により互いに連結された少なくとも２つのアミノ酸の連なり）を意味する。タンパク質は、アミノ酸以外の部分を含んでいてよく（例えば、糖タンパク質、ムコ多糖タンパク質等であってよく）、且つ／または別の状態に処理若しくは修飾されていてよい。当業者は、「タンパク質」が細胞により産生された完全なポリペプチド鎖（シグナル配列を含むまたは含まない）であり得る、或いはその特徴的部分であり得ることを理解するであろう。当業者は、タンパク質が例えば、１つ若しくは複数のジスルフィド結合により連結されたまたは他の手段により結合した複数のポリペプチド鎖を時として含み得ることを理解するであろう。ポリペプチドは、Ｌ−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸または両方を含んでいてよく、当技術分野で公知の様々なアミノ酸修飾または類似体のいずれかを含んでいてよい。有用な修飾は、例えば、末端アセチル化、アミド化等を含む。いくつかの実施形態において、タンパク質は、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、合成アミノ酸およびそれらの組合せを含んでいてよい。「ペプチド」という用語は、約１００アミノ酸未満の長さを有するポリペプチドを指すのに一般的に用いられる。
【００４２】
被験体：本明細書で用いる場合、「被験体」または「患者」という用語は、例えば、実験、診断、予防および／または治療の目的のために本発明による組成物を投与することができる任意の生物体を意味する。一般的な被験体は、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒト以外の霊長類の動物およびヒトなどの哺乳動物；昆虫；虫等）を含む。
【００４３】
実質的に：本明細書で用いる場合、「実質的に」という用語は、完全またはほぼ完全な程度または度合の目的の特徴または特性を示す定性的な状態を意味する。生物学分野の当業者は、生物学的および化学的現象が完結するまで進み、且つ／または完全に向かいまたは絶対的結果を達成若しくは回避することはあるにしても極めてまれであることを理解するであろう。したがって、「実質的に」という用語は、多くの生物学的および化学的現象に固有の完全の欠如の可能性をとらえるために本明細書で用いる。
【００４４】
に罹患した：疾患、障害および／または状態「に罹患して」いる個体は、疾患、障害および／または状態を有すると診断された、或いは疾患、障害および／または状態の１つまたは複数の症状を示す。
【００４５】
に罹りやすい：疾患、障害および／または状態「に罹りやすい」個体は、疾患、障害および／または状態を有すると診断されなかった。いくつかの実施形態において、疾患、障害および／または状態に罹りやすい個体は、疾患、障害および／または状態の症状を示さないことがある。いくつかの実施形態において、疾患、障害および／または状態に罹りやすい個体は、疾患、障害および／または状態を発現する。いくつかの実施形態において、疾患、障害および／または状態に罹りやすい個体は、疾患、障害および／または状態を発現しない。
【００４６】
治療上有効量：本明細書で用いる場合、治療薬の「治療上有効量」という用語は、疾患、障害および／または状態を治療し、診断し、予防し、且つ／またはその症状（単数または複数）の発現を遅延させるために疾患、障害および／または状態に罹患したまたは罹りやすい被験体に投与する場合に十分である量を意味する。
【００４７】
治療薬：本明細書で用いる場合、「治療薬」という語句は、被験体に投与した場合に治療効果を有し、且つ／または所望の生物学的および／または薬理学的効果を引き出す薬剤を意味する。本明細書で用いる場合、「治療薬」および「薬剤」という用語は、同義で用いる。
【００４８】
治療すること：本明細書で用いる場合、「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語は、特定の疾患、障害および／または状態の１つ若しくは複数の症状または特徴を部分的若しくは完全に緩和し、改善し、軽減し、阻害し、予防し、その発現を遅延させ、その重症度を低下させ、且つ／または発生率を低下させるために用いられる任意の方法を意味する。治療は、疾患に関連する病状を発現するリスクを低減する目的のために疾患の徴候を示さず、且つ／または疾患の初期の徴候のみを示す被験体に施すことができる。
【００４９】
特定の官能基および化学用語の定義は、下により詳細に述べる。本発明の目的のために、化学元素は、Ｐｅｒｉｏｄｉｃ Ｔａｂｌｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ、ＣＡＳ ｖｅｒｓｉｏｎ、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｃｓ、７５版、内表紙に従って同定し、特定の官能基は、その中に記載されているように一般的に定義する。さらに、有機化学の一般的原則、並びに特定の官能基部分および反応性は、Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｔｈｏｍａｓ Ｓｏｒｒｅｌｌ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｂｏｏｋｓ、Ｓａｕｓａｌｉｔｏ、１９９９年；Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｍａｒｃｈ、Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、５版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、２００１年；Ｌａｒｏｃｋ、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ， Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８９年；Ｃａｒｒｕｔｈｅｒｓ、Ｓｏｍｅ Ｍｏｄｅｒｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、３版、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、１９８７年に記載されている。
【００５０】
本発明の化合物は、特定の幾何学的形または立体異性体で存在し得る。本発明は、本発明の範囲内に入る、シスおよびトランス異性体、ＲおよびＳ鏡像異性体、ジアステレオマー、（Ｄ）異性体、（Ｌ）異性体、それのラセミ混合物、並びにそれの他の混合物を含むそのようなすべての化合物を企図する。
【００５１】
脂肪族：「脂肪族」または「脂肪族基」という用語は、本明細書で用いる場合、直鎖（すなわち、非分枝）、分枝、または脂環式（縮合、架橋およびスピロ縮合多環式を含む）であってよく、完全に飽和されていてよく、或いは不飽和の１つまたは複数の単位を含有してもよいが、芳香族ではない炭化水素部分を示す。特に明記しない限り、脂肪族基は、１〜６個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、脂肪族基は、１〜４個の炭素原子を含有する、さらに他の実施形態において、脂肪族基は、１〜３個の炭素原子を含有する。適切な脂肪族基は、直鎖または分枝アルキル、アルケニルおよびアルケニル基、並びに（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルケニル）アルキルまたは（シクロアルキル）アルケニルなどのそれらのハイブリッドを含むが、これらに限定されない。
【００５２】
アルケニル：「アルケニル」という用語は、本明細書で用いる場合、１個の水素原子の除去による少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する直鎖または分枝鎖脂肪族部分に由来する一価基を示す。特定の実施形態において、アルケニルは、２〜６個の炭素原子を含有する。特定の実施形態において、アルケニルは、２〜５個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルケニルは、２〜４個の炭素原子を含有する。他の実施形態において、アルケニルは、２〜３個の炭素原子を含有する。アルケニル基は、例えば、エテニル（「ビニル」）、プロペニル（「アリル」）、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イルなどを含む。
【００５３】
アルキル：「アルキル」という用語は、本明細書で用いる場合、１個の水素原子の除去による１個から６個までの炭素原子を含有する脂肪族部分に由来する一価飽和直鎖または分枝鎖炭化水素遊離基を意味する。いくつかの実施形態において、アルキルは、１〜５個の炭素原子を含有する。別の実施形態において、アルキルは、１〜４個の炭素原子を含有する。さらに他の実施形態において、アルキルは、１〜３個の炭素原子を含有する。さらに別の実施形態において、アルキルは、１〜２個の炭素を含有する。アルキル遊離基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−デシル、ｎ−ウンデシル、ドデシルなどを含むが、これらに限定されない。
【００５４】
アルキニル：「アルキニル」という用語は、本明細書で用いる場合、１個の水素原子の除去による少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する直鎖または分枝鎖脂肪族部分に由来する一価基を意味する。特定の実施形態において、アルキニルは、２〜６個の炭素原子を含有する。特定の実施形態において、アルキニルは、２〜５個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルキニルは、２〜４個の炭素原子を含有する。別の実施形態において、アルキニルは、２〜３個の炭素原子を含有する。代表的なアルキニル基は、エチニル、２−プロピニル（「プロパギル」）、１−プロピニルなどを含むが、これらに限定されない。
【００５５】
アミノ：「アミノ」という用語は、本明細書で用いる場合、式（−ＮＨ２）の基を意味する。
【００５６】
アルコキシ：「アルコキシ」という用語は、式（−ＯＲｉ）の「置換ヒドロキシル」を指し、式中Ｒｉは、本明細書で定義したアルキル基であり、酸素部分が親分子に直接結合している。
【００５７】
アルキルアミノ：「アルキルアミノ」という用語は、式（−ＮＲｈ２）の「置換アミノ」を指し、式中Ｒｈは、独立に水素または本明細書で定義したアルキル基であり、窒素部分が親分子に直接結合している。
【００５８】
脂環式：「脂環式」、「炭素環」、「カルボシクリル」、「カルボシクロ」または「炭素環式」という用語は、単独で、またはそれより大きい部分の一部として用いて、３〜１０構成員を有する、本明細書で述べる飽和または部分不飽和環状脂肪族単環式または二環式環系を指し、該脂肪族環系は、上で定義し、本明細書で述べるように場合によって置換されている。脂環式基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロヘプテニル、シクロオクチル、シクロオクテニルおよびシクロオクタジエニルを制限なしに含む。いくつかの実施形態において、シクロアルキルは、３〜６個の炭素を有する。「脂環式」、「炭素環」、「カルボシクリル」、「カルボシクロ」または「炭素環式」という用語は、遊離基または結合点が脂肪族環上にある、デカヒドロナフチル、テトラヒドロナフチル、デカリンまたはビシクロ［２．２．２］オクタンなどの１つまたは複数の芳香族または非芳香族環に縮合した脂肪族環も含む。
【００５９】
シアノ：「シアノ」という用語は、本明細書で用いる場合、式（−ＣＮ）の基を意味する。
【００６０】
ハロゲン：「ハロ」および「ハロゲン」という用語は、本明細書で用いる場合、フッ素（フルオロ、−Ｆ）、塩素（クロロ、−Ｃｌ）、臭素（ブロモ、−Ｂｒ）およびヨウ素（ヨード、−Ｉ）から選択される原子を意味する。
【００６１】
ニトロ：「ニトロ」という用語は、本明細書で用いる場合、式（−ＮＯ２）の基を意味する。
【００６２】
ニトロソ：「ニトロソ」という用語は、本明細書で用いる場合、式（−ＮＯ）の基を意味する。
【００６３】
部分不飽和：本明細書で用いる場合、「部分不飽和」という用語は、環原子間に少なくとも１つの二重または三重結合を含むが、芳香族ではない環部分を意味する。「部分不飽和」という用語は、不飽和の複数の部位を有する環を包含することを意図するが、本明細書で定義するアリールまたはヘテロアリール部分を含むことを意図しない。
【００６４】
不飽和の：「不飽和の」という用語は、本明細書で用いる場合、ある部分が不飽和の１つまたは複数の単位を有することを意味する。
【００６５】
詳細な説明
本発明は、とりわけ、軽度認知障害（ＭＣＩ）またはアルツハイマー病（ＡＤ）を効果的に治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防することができる治療用組成物および方法を提供する。
【００６６】
実施例の項で述べるように、本発明は、一部は、次の予期しない発見に基づいている：（１）ＭＣＩまたはアルツハイマー病の早期診断のためのバイオマーカーとして公知のタンパク質複合体ＰＤＳ／ＴＴＲが神経毒であり、細胞培養においてアルツハイマー病の特徴的な症状および特徴を誘発する；（２）ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬（ニフィジピンのような）、それらの酸化、ニトロソ誘導体および混合物（カルシウムチャネル遮断薬としてもはや機能しない）、および／またはＴ３／Ｔ４が、細胞培養におけるＡＤ様症状並びに基礎をなす酵素および生化学的経路を誘導するＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の能力を効果的に低下または消失させ、動物モデルにおけるＡβ１−４０ペプチドの内在性レベルを低下させる；並びに（３）ヒト関連試験で、ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬の使用が認知機能低下の発現を著しく遅延させることが示され、それにより、これらの化合物をアルツハイマー病を効果的に治療するのに用いることができることが分かった。さらに驚くべきことに、発明者らは、酸化、ニトロソニフィジピン誘導体および混合物がカルシウムチャネル遮断薬としてもはや機能しないことを見いだした。いかなる理論にも拘束されることを望むものではないが、ＭＣＩまたはアルツハイマー病を治療するこれらの化合物の能力は、カルシウムチャネルを遮断するそれらの能力と無関係である可能性があると考えられる。
【００６７】
したがって、本発明は、治療上有効量のニフェジピン、酸化またはニトロソニフェジピン誘導体、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せに基づくアルツハイマー病を効果的に治療することができる方法および組成物を企図するものである。いくつかの実施形態において、本発明は、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に関連する少なくとも１つの症状または特徴が存在度、強さ、重症度若しくは頻度において低下するか、またはその発現が遅延するように、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、または罹患しやすい被験体にニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される治療上有効量の薬剤を投与するステップを含む、ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防する方法を提供する。いくつかの実施形態において、本発明に適する薬剤は、カルシウムチャネル遮断薬として機能しない。
【００６８】
本発明による発明の方法は、治療のためおよび治療の有効性をモニターするために、疾患の初期におけるものを含む、患者を同定するための感度の高いバイオマーカーおよび／または認知試験スコアと組み合わせることができることがさらに企図される。したがって、本発明は、早期患者、特に、軽度認知障害（ＭＣＩ）と記述される症状を有する患者を治療し、且つ／またはＭＣＩのアルツハイマー病への進行を予防するのに特に有用である。
【００６９】
本発明の様々な態様は、以下の項で詳細に述べる。各項の使用は、本発明を限定することを意味しない。各項は、本発明のあらゆる態様に適用し得る。本願において、特に明記しない限り、「または」の使用は、「および／または」を意味する。
【００７０】
治療薬
本発明に適する治療薬は、カルシウムチャネル遮断薬（例えば、ニフェジピンなどのジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬）および非カルシウムチャネル遮断薬（例えば、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、ニフェジピンおよびその誘導体の混合物、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３））の両方を含む。
【００７１】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、以下の式（Ｉａ）若しくは（Ｉｂ）
【００７２】
【化１】
の治療薬
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ｒ１およびＲ２は、独立にＣ１−６脂肪族またはシアノであり、
Ｒ３およびＲ４は、独立にＣ１−６脂肪族であり、
Ｒ５は、ハロゲン、Ｃ１−６脂肪族、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、シアノ、ニトロまたはニトロソであり、
ｎは、０、１、２または３である。
【００７３】
いくつかの実施形態において、式（Ｉａ）の化合物は、「還元型」または「ジヒドロピリジン」と呼ばれる。いくつかの実施形態において、式（Ｉｂ）の化合物は、「酸化型」または「デヒドロ」と呼ばれる。
【００７４】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、独立にＣ１−３アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、独立にＣ１−４アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、メチルである。いくつかの実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、メチルである。
【００７５】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニフェジピン、酸化ニフェジピンまたはニトロソニフェジピンである。本明細書で用いる場合、「ニトロソニフェジピン」は、下に示すようにニフェジピンの酸化類似体である。
【００７６】
【化２】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、アムロジピン、アラニジピン、アゼルニジピン、バルニジピン、ベニジピン、シルニジピン、クレビジピン、エホニジピン、フェロジピン、イスラジピン、ラシジピン、マニジピン、レルカニジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニルバジピン、ニモジピン、ニソルジピン、ニトレンジピンおよびプラニジピンなどのジヒドロピリジン（ｄｉｈｙｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅ）化合物を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、酸化アムロジピン、酸化アラニジピン、酸化アゼルニジピン、酸化バルニジピン、酸化ベニジピン、酸化シルニジピン、酸化クレビジピン、酸化エホニジピン、酸化フェロジピン、酸化イスラジピン、酸化ラシジピン、酸化マニジピン、酸化レルカニジピン、酸化ニカルジピン、酸化ニフェジピン、酸化ニルバジピン、酸化ニモジピン、酸化ニソルジピン、酸化ニトレンジピンおよび酸化プラニジピンを含むが、これらに限定されない。「酸化」ジヒドロピリジン化合物（例えば、酸化アムロジピン、酸化ニモジピン、酸化ニバルジピン）は前記化合物のピリジン形であることは、当業者により理解されるであろう。
【００７７】
【化３】
さらなる例示的な治療薬は、以下のものを含む。
【００７８】
【化４】
【００７９】
【化５】
【００８０】
【化６】
式中、Ｚは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、
【００８１】
【化７】
式中、Ｚは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。
【００８２】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、以下の式（ＩＩ）
【００８３】
【化８】
の治療薬
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ｘは、−ＣＨ２−、−Ｏ−または−ＮＨ−であり、
Ｙは、−Ｈまたは−Ｉである。
【００８４】
いくつかの実施形態において、Ｘは、−ＣＨ２−である。いくつかの実施形態において、Ｘは、−Ｏ−である。いくつかの実施形態において、Ｘは、−ＮＨ−である。
【００８５】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、以下のサイロキシン（Ｔ４）またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）である。
【００８６】
【化９】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、本明細書で述べる様々な化合物の混合物である。例えば、式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の２つまたはそれ以上の化合物を組み合わせて治療薬を形成することができる。いくつかの実施形態において、ニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニトロソニフェジピンの２つまたはそれ以上のものを組み合わせる。いくつかの実施形態において、Ｔ３および／またはＴ４をニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニトロソニフェジピンの１つまたは複数のものと組み合わせる。特定の実施形態において、ニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニトロソニフェジピンを組み合わせて、ニフェジピンミックスまたは混合物を形成する。
【００８７】
化合物は、様々な質量またはモル比で混合することができる。例えば、本発明による治療薬は、所定の質量またはモル比のニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）およびトリヨードサイロニン（Ｔ３）の２つまたはそれ以上のものの混合物であり得る。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの混合物を含有する。いくつかの実施形態において、ニトロソニフェジピンとニフェジピンは、約１０００：１、約５００：１、約２００：１、約１００：１、約６４：１、約３２：１、約１６：１、約１０：１、約８：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：８、約１：１０、約１：１６、約１：３２、約１：６４、約１：１００、約１：２００、約１：５００または約１：１０００の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、ニトロソニフェジピンとニフェジピンは、約１：１０００〜約１０００：１の範囲内（例えば、約１：５００〜約５００：１、約１：２００〜約２００：１、約１：１００〜約１００：１、約１：１０〜約１０：１、約１：１６〜約１６：１、約１：３２〜約３２：１、約１：６４〜約６４：１、約１：１〜約３２：１、約１：１〜約１０：１、約１００：１〜約１０００：１、約１０：１〜約１００：１、約１：１０００〜１：１、約１：１〜約１０００：１または約１：１００〜約１：１０）の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、酸化ニフェジピンとニフェジピンとの混合物を含有する。いくつかの実施形態において、酸化ニフェジピンとニフェジピンは、約１０００：１、約５００：１、約２００：１、約１００：１、約６４：１、約３２：１、約１６：１、約１０：１、約８：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：８、約１：１０、約１：１６、約１：３２、約１：６４、約１：１００、約１：２００、約１：５００または約１：１０００の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、酸化ニフェジピンとニフェジピンは、約１：１０００〜約１０００：１の範囲内（例えば、約１：５００〜約５００：１、約１：２００〜約２００：１、約１：１００〜約１００：１、約１：１０〜約１０：１、約１：１６〜約１６：１、約１：３２〜約３２：１、約１：６４〜約６４：１、約１：１〜約３２：１、約１：１〜約１０：１、約１００：１〜約１０００：１、約１０：１〜約１００：１、約１：１０００〜１：１、約１：１〜約１０００：１または約１：１００〜約１：１０）の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニトロソニフェジピンと酸化ニフェジピンとの混合物を含有する。いくつかの実施形態において、ニトロソニフェジピンと酸化ニフェジピンは、約１０００：１、約５００：１、約２００：１、約１００：１、約６４：１、約３２：１、約１６：１、約１０：１、約８：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：８、約１：１０、約１：１６、約１：３２、約１：６４、約１：１００、約１：２００、約１：５００または約１：１０００の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、ニトロソニフェジピンと酸化ニフェジピンは、約１：１０００〜約１０００：１の範囲内（例えば、約１：５００〜約５００：１、約１：２００〜約２００：１、約１：１００〜約１００：１、約１：１０〜約１０：１、約１：１６〜約１６：１、約１：３２〜約３２：１、約１：６４〜約６４：１、約１：１〜約３２：１、約１：１〜約１０：１、約１００：１〜約１０００：１、約１０：１〜約１００：１、約１：１０００〜１：１、約１：１〜約１０００：１または約１：１００〜約１：１０）の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンの混合物を含有する。いくつかの実施形態において、ニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンを約５：１：３、５：２：２、６：３：１、１０：４：１、３：１：５、２：５：５または１：１：１の質量またはモル比で混合する。いくつかの実施形態において、治療薬は、Ｔ３とＴ４との混合物を含有する。いくつかの実施形態において、Ｔ３とＴ４は、約１０００：１、約５００：１、約２００：１、約１００：１、約６４：１、約３２：１、約１６：１、約１０：１、約８：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：８、約１：１０、約１：１６、約１：３２、約１：６４、約１：１００、約１：２００、約１：５００または約１：１０００の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、Ｔ３とＴ４は、約１：１０００〜約１０００：１の範囲内（例えば、約１：５００〜約５００：１、約１：２００〜約２００：１、約１：１００〜約１００：１、約１：１０〜約１０：１、約１：１６〜約１６：１、約１：３２〜約３２：１、約１：６４〜約６４：１、約１：１〜約３２：１、約１：１〜約１０：１、約１００：１〜約１０００：１、約１０：１〜約１００：１、約１：１０００〜１：１、約１：１〜約１０００：１または約１：１００〜約１：１０）の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、本明細書で述べた様々な化合物および混合物をさらに組み合わせて、本発明のための望ましい治療薬を得ることができる。例えば、Ｔ３／Ｔ４混合物をニフェジピン、ニフェジピン誘導体（例えば、酸化またはニトロソニフェジピン）のいずれかまたは本明細書で述べたニフェジピン混合物と組み合わせることができる。
【００８８】
患者の同定または治療のモニタリングのためのバイオマーカー
ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、それに罹患しやすいまたはそのリスクがある被験体または患者を同定するために様々なバイオマーカーを用いることができる。本明細書で用いる場合、バイオマーカーは、１つの表現型状態（例えば、疾患を有する）の被験体から採取した試料中に別の表現型状態（例えば、疾患を有さない）と比較して異なった形で存在する特徴的な生体分子である。異なる群におけるバイオマーカーの発現レベルの平均値または中央値が統計的に有意であると計算される場合、バイオマーカーは、異なる表現型状態の間で異なった形で存在する。バイオマーカーは、単独または組合せで、被験体が１つの表現型状態または別のものに属することの相対的リスクの尺度となる。したがって、それらは、疾患（診断）、薬物の治療有効性（セラノスティクス）および薬物の毒性のマーカーとして有用である。
【００８９】
例えば、発明者らは、参照により本明細書に組み込まれている米国特許出願公開第２００８／００２６４０５号に詳述されているようにプロスタグランジン−Ｄ２−シンターゼおよびトランスサイレチン（ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体）を含有する約５５ｋＤａタンパク質性複合体のレベルがＭＣＩおよびＡＤの感度が高く、特異的な診断バイオマーカーとしての役割を果たす可能性があることを最近示した。
【００９０】
一般的に、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体は、脳脊髄液に存在し、疾患の感度が高く、特異的なバイオマーカーであると思われる。ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の形成は、側脳室に隣接して位置する上皮細胞の集合である脈絡叢に局在化していた。脈絡叢は、血液ＣＳＦ関門として機能する。脈絡叢は、水、塩および選択される小分子を血液からＣＳＦに通過させるが、血液タンパク質がＣＳＦに入ることを効果的に妨げる。ＣＳＦに必要なタンパク質は、脈絡叢によって合成される。したがって、脈絡叢は、ＣＳＦの源としても機能する。後期ＡＤ患者の簡易死後剖検から新たに得られた脈絡叢から分離した上皮細胞を培養中で成長させ、拡大した。ＡＤ上皮細胞から得られた細胞培養培地の検査は、対照細胞と比較してＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルの上昇を示した。したがって、正常対照比較してＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルの上昇は、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、それに罹患しやすいまたはそれを発現するリスクがある被験体または患者を同定するために用いることができる。
【００９１】
いくつかの実施形態において、本発明に適するバイオマーカーは、トランスサイレチンおよび／またはプロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼの少なくとも１つ、並びにトランチレチン、プロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼ、β−２−ミクログロブリン、シスタチンＣ、スーパーオキシドジスムターゼ［Ｃｕ−Ｚｎ］、血漿レチノール結合タンパク質、ホスファチジルエタノールアミン結合タンパク質、カルボニックアンヒドラーゼ２および／またはセロトランスフェリンから選択される少なくとも１つの第２のタンパク質を含む。軽度認知障害またはアルツハイマー病状態は、得られる測定値を標準と相関させることによって判断される。
【００９２】
いくつかの実施形態において、ニューロンスレッドタンパク質、タウ（総；Ｔ−タウおよび種々のリン酸化形；Ｐ−タウ）、および／またはＡβ４０およびＡβ４２を含むアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の誘導体は、本発明の組成物および方法による治療にふさわしい患者集団を同定するためのバイオマーカーとして用いることができる。いくつかの実施形態において、治療を必要とする被験体は、対照と比較して異常なレベルのタンパク質バイオマーカー複合体を有し、タンパク質バイオマーカー複合体は、（ｉ）βアミロイド４０（Ａβ４０）、（ｉｉ）βアミロイド４２（Ａβ４２）、（ｉｉｉ）Ａβ４０とＡβ４２との比、および（ｉｖ）リン酸化タウと総タウとの比の１つまたは複数のものを含む。
【００９３】
それぞれが参照により本明細書に組み込まれる、Ｆａｈｎｅｓｔｏｃｋら、Ｊ．Ｎｅｕｒａｌ．Ｔｒａｎｓｍ．Ｓｕｐｐｌ．、２００２巻（６２号）、２４１〜５２頁（２００２年）；Ｍａｓｌｉａｈら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ、１６巻（４号）、５４９〜５６頁（１９９５年）；Ｐｏｗｅｒら、Ｄｅｍｅｎｔ．Ｇｅｒｉａｔｒ．Ｃｏｎｇ．Ｄｉｓｏｒｄ．、１２巻（２号）、１６７〜１７０頁（２００１年）；Ｂｕｒｂａｃｈら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．、２４巻（１０号）、２４２１〜３０頁（２００４年）；Ｌｉら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ、１１３巻（３号）、６０７〜１５頁（２００２年）およびＳａｎｎａら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、１１１巻（２号）、２４１〜５０頁（２００３年）に記載されているものを含むが、それらに限定されない、さらなるバイオマーカーが文献に報告されており、本発明による治療にふさわしい患者を同定するのに用いることができる。
【００９４】
いくつかの実施形態において、バイオマーカーは、被験体から得られる流体試料中で測定する。いくつかの実施形態において、流体試料は、ＣＳＦ、血清、全血、血漿、尿、腹水、唾液、組織滲出液、洗浄液およびそれらの組合せからなる群から選択される。
【００９５】
様々な方法を用いてバイオマーカーを定性的および定量的に測定することができる。例えば、タンパク質複合体（ＰＤＳ／ＴＴＲなど）を検出するために、複合体の第１の成分（例えば、ＰＤＳ）を捕捉し、第２の成分（例えば、ＴＴＲ）を探査するサンドイッチ酵素結合免疫検定（ＥＬＩＳＡ）を用いることができる。さらなる具体例としての方法は、参照により本明細書に組み込まれている米国特許出願公開第２００８／００２６４０５号に記載されている。他の方法は、当技術分野で周知であり、本発明を実施するのに用いることができる。
【００９６】
一般的に、バイオマーカーの測定レベルを１つまたは複数の対照または参照レベルと比較する。ＡＤバイオマーカーの測定レベルとの比較に用いる適切な参照レベルは、当業者により理解されるように、実施される本発明の態様によって異なってよい。ＡＤまたはＭＣＩに罹患しているまたは罹患しやすい被験体を同定するために、適切な「参照レベル」は、一般的に健常個体、特に同年齢健常個体を示すレベルである。参照レベルは、患者試料と並行して測定することができる。参照レベルはまた、予め定められたレベルまたは既往データに基づくものであり得る。例えば、適切な参照レベルは、ＡＤまたはＭＣＩに罹患していない集団から得られるレベルの平均値であり得る。一般的に、適切な参照レベルは、同年齢集団から得られるレベルから導き出される（例えば、その平均値または中央値である）。
【００９７】
一般的に、治療を必要とする被験体は、対照または健常個体若しくは集団を示す参照レベルと比較して、より大きいまたは高いレベルの本明細書で述べたバイオマーカーを有する。
【００９８】
治療のモニタリングの目的のために、適切な参照レベルは、一般的に、健常個体またはアルツハイマー病に罹患している個体（例えば、ＭＣＩ、ＥＡＤ若しくはＬＡＤなどの予め定められた段階を有する）を示すレベルである。参照レベルは、患者試料と並行して測定することができる。参照レベルはまた、予め定められたレベルまたは既往データに基づくものであり得る。例えば、適切な参照レベルは、ＡＤまたはＭＣＩに罹患していない集団、或いはＭＣＩまたはＡＤ（例えば、ＥＡＤ若しくはＬＡＤ）と診断された集団から得られるレベルの平均値であり得る。或いは、適切な参照レベルは、特定の患者の歴史的参照レベル、例えば、同じ個体からであるが、以前の時点（例えば、治療前または治療中の以前の時点）に得られた試料から導き出されたレベルであってよい。一般的に、適切な参照レベルは、同年齢集団から得られるレベルから導き出される（例えば、その平均値または中央値である）。
【００９９】
ＡＤ患者の層別化（すなわち、ＡＤ患者を軽度、中等度および高度の段階のＡＤに層別化する方法）のために、適切な参照レベルは、特定の段階のＡＤ（例えば、ＥＡＤ若しくはＬＡＤ）またはＭＣＩと診断された集団から得られるレベルから通常導き出される（例えば、その平均値または中央値である）。
【０１００】
いくつかの実施形態において、適切なバイオマーカー（約５５ｋＤａ ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体など）のレベルを用いて治療の有効性をモニターすることができる。一般的に、療法の目標は、理想的には、被験体から採取した流体試料が検出可能な複合体を含有しないように、被験体におけるＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルを減少、低下または低減することであろう。療法のより保守的で、副次的な目標は、約５５ｋＤａ ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルの任意の増加を未然に防ぐことであろう。したがって、医学的治療技術分野の当業者は、適切なバイオマーカーのレベルに基づいて、所定の治療体制が選択された療法の目標を達成しているかどうかを判断することができるであろう。このようにして、医学的治療技術分野の当業者は、適切な対照または参照レベルと比較した適切なバイオマーカーの測定レベルに基づいて、本明細書で述べた治療薬の有効量を決定することもできるであろう。
【０１０１】
一般的に、同年齢集団を用いて様々な参照レベルを導き出すことができる。同年齢集団は、理想的には試験される個体と同じ年齢であるが、近似的同年齢集団も許容できる。近似的同年齢集団は、試験される個体の年齢の１、２、３、４または５歳の範囲内であってよく、或いは試験される個体の年齢を包含する異なる年齢の群であってよい。近似的同年齢集団は、２、３、４、５、６、７、８、９または１０歳きざみ内にあってよい（例えば、６２歳の個体の参照値の源としての役割を果たす「５歳きざみ」群は、５８〜６２歳の個体、５９〜６３歳の個体、６０〜６４歳の個体、６１〜６５歳の個体、または６２〜６６歳の個体を含み得る）。
【０１０２】
測定値と参照値を比較する過程は、問題のＡＤバイオマーカーの測定値および参照値の種類に適する好都合な方法で実施することができる。例えば、「測定すること（ｍｅａｓｕｒｉｎｇ）」は、定量的または定性的測定技術を用いて実施することができ、測定値と参照値の比較方法は、用いる測定技術によって異なり得る。例えば、本発明の方法に用いる測定値は、最も一般的には定量的値（例えば、試料１ミリリットル当たりのＡＤバイオマーカーのナノグラムなどの濃度の定量的測定値、または絶対値）である。定性的測定と同様に、比較は、数値データを調べることにより、データの表示を調べる（例えば、棒または線グラフなどのグラフ表示を調べる）ことにより行うことができる。非限定的な例として、測定値が参照値の少なくとも約９５％の値である場合、測定値は、参照値と実質的に等しいか、またはそれより大きいと一般的に見なされる（例えば、１．７１の測定値は、１．８０の参照値と実質的に等しいと見なすことができる）。測定値が参照値の９５％未満である場合、測定値は、参照値より小さいまたは低いと見なされる（例えば、１．７の測定値は、１．８０の参照値より小さいと見なされ得る）。
【０１０３】
認知機能の試験
ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、それに罹患しやすいまたはそのリスクがある被験体または患者を同定するために、種々の認知試験を用いることもできる。２つの具体例としての認知試験は、ミニメンタルステータス検査（ＭＭＳＥ）および臨床的認知症尺度（ＣＤＲ）である。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、ＭＭＳＥスコアを用いて本明細書で述べた組成物および方法による治療を必要とする被験体を同定する。ＭＭＳＥスコアは、認知機能の複数の試験を表す複合スコアである。最大可能総ＭＭＳＥスコアは、３０点である。ＭＭＳＥは、認知症または他の病状を有する患者における認知障害の重症度を分類するのに用いることができる。表１にＭＭＳＥスコアが認知機能の程度を一般的にどのように表すかを示す。
【０１０５】
【表１】
いくつかの実施形態において、治療を必要とする被験体は、２１〜２６（軽度認知障害）、１１〜２０（中等度認知障害）または０〜１０（高度認知障害）のＭＭＳＥスコアを有する。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、ＣＤＲスコアを用いて本明細書で述べた組成物および方法による治療を必要とする被験体を同定する。ＣＤＲスコアは、個別に採点される次の６つのドメインから構成されている：記憶、見当識、判断力および問題解決能力、社会適応、家庭状況および趣味、並びに個体的介護状況。表２にＣＤＲスコアが認知機能の程度を一般的にどのように表すかを示す。
【０１０７】
【表２】
いくつかの実施形態において、０を超えるＣＤＲスコアは、被験体がＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、それに罹患しやすいまたはそのリスクがある可能性があることを示す。いくつかの実施形態において、治療を必要とする被験体は、０．５（非常に軽度の認知症）、１（軽度認知症）、２（中等度認知症）または３（高度認知症）のＣＤＲスコアを有する可能性がある。
【０１０８】
いくつかの実施形態において、認知試験スコア（ＭＭＳＥスコアまたはＣＤＲスコアなど）を用いて治療の有効性をモニターすることができる。一般的に、有効な療法は、認知試験スコアを改善するはずである。したがって、治療の前後のまたは治療計画の異なる時点の認知試験スコアを比較することにより、医学的治療技術分野の当業者は、所定の治療体制が有効であるかどうかを判断することができる。例えば、医学的治療技術分野の当業者は、治療前または治療計画の異なる時点に測定された相対的認知試験スコアに基づくことによって本明細書で述べた治療薬の有効量を決定または調節することができるであろう。
【０１０９】
医薬組成物および投与
本発明は、本明細書で開示したものなどの治療薬を含む医薬組成物を包含する。いくつかの実施形態において、本発明の医薬組成物は、治療上有効量の治療薬および薬学的に許容される担体を含有する。
【０１１０】
本明細書で用いる場合、「薬学的に許容される担体」という用語は、非毒性の不活性固体、半固体液体充填剤、希釈剤、封入材料、あらゆるタイプの製剤補助剤、または生理食塩水などの単に滅菌水性媒体を意味する。薬学的に許容される担体としての役割を果たし得る物質のいくつかの例は、ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖、トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンなどのデンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体；粉末状トラガント；麦芽、ゼラチン、タルク；ココアバターおよび坐剤ワックスなどの賦形剤；落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油などの油；プロピレングリコールなどのグリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール；オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル、寒天；水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；アルギン酸；発熱物質不含有水；等張性生理食塩水、リンゲル液；エチルアルコールおよびリン酸緩衝液、並びに医薬製剤に用いられる他の非毒性適合性物質である。
【０１１１】
ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの湿潤剤、乳化剤および滑沢剤、並びに着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味料、着香および芳香剤、保存剤並びに抗酸化剤も処方者の判断に従って組成物中に存在し得る。薬学的に許容される抗酸化剤の例は、アスコルビン酸、塩酸システイン、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤；パルミチン酸アスコルビル、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤；並びにクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート化剤を含むが、これらに限定されない。
【０１１２】
治療薬の「治療上有効量」または単に「有効量」という用語は、本明細書で用いる場合、ＭＣＩ若しくはアルツハイマー病に関連する少なくとも１つの症状若しくは特徴を軽減し、改善し、安定化させ、且つ／またはその発現を遅延させるために、さらにＭＣＩ若しくはアルツハイマー病の１つまたは複数の症状の進行を遅延させる（例えば、存在度、強さ、重症度若しくは頻度に関する進行を遅延させる）ために、適切な計画に従う治療を必要とする被験体に投与したとき、十分である治療薬の量を意味する。しかし、本発明の治療薬および組成物の総１日使用量は、担当医により妥当な医学的判断の範囲内で決定されることは理解されよう。任意の個々の患者における固有の治療上有効な用量レベルは、治療する障害および障害の重症度；用いる特定の化合物の活性；用いる特定の組成物；患者の年齢、体重、一般健康状態、性および食事；投与時間、投与経路および用いる特定の化合物の排泄の速度；治療の期間；用いる特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用する薬物；並びに医療技術分野で周知の同様な因子を含む様々な因子に依存する。
【０１１３】
いくつかの実施形態において、本発明の治療薬の治療上有効用量は、例えば、０．０１〜２５ｍｇ／ｋｇ体重またはそれ以上、通常、０．１〜１５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲に及び得る。いくつかの実施形態において、治療薬の治療上有効量は、１用量当たり約０．０１ｍｇ〜約２．５ｇ（例えば、１用量当たり約０．０１ｍｇ〜約２．０ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１．５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１．０ｇ）の範囲にわたる。いくつかの実施形態において、治療薬の治療上有効量は、１用量当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ（例えば、約０．０１〜約５００ｍｇ、約０．０１〜約２５０ｍｇ、約０．０１〜約２００ｍｇ、約０．０１〜約１５０ｍｇ、約０．０１〜約１００ｍｇ、約０．０１〜約５０ｍｇ、約０．０１〜約１０ｍｇ、約０．０１〜約５ｍｇ、約０．０１〜約２．５ｍｇ、約０．０１〜約２．０ｍｇ、約０．０１〜約１．５ｍｇ、約０．０１〜約１．０ｍｇ、約０．０１〜約０．５ｍｇ、約０．０１〜約０．１ｍｇ）の範囲にわたる。いくつかの実施形態において、治療薬（特に、ニトロソニフェジピン）の治療上有効量は、１用量当たり約１００ｍｇ〜約５ｇ（例えば、約１００ｍｇ〜約３ｇ、約１００ｍｇ〜約２．５ｇ、約１００ｍｇ〜約２ｇ、約１００ｍｇ〜約１．５ｇ、約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２５０ｍｇ）の範囲に及ぶ。いくつかの実施形態において、治療薬の治療上有効量は、１用量当たり約０．０１ｍｇ、約０．０５ｍｇ、約０．１ｍｇ、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約５００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１．５ｇ、約２ｇ、約２．５ｇ、約３ｇまたは約５ｇであり得る。一般的に、本明細書で述べた量は、組成物中のすべての活性化合物の総量である。例えば、組成物がニフェジピン、ニトロソニフェジピンおよび酸化ニフェジピンの混合物を含有する場合、治療上有効量は、ニフェジピン、ニトロソニフェジピンおよび酸化ニフェジピンの総計量である。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、本明細書で述べた治療薬は、１日１回投与する。いくつかの実施形態において、本明細書で述べた治療薬は、１日当たり複数回、例えば、１日２回、３回または４回投与する。いくつかの実施形態において、治療薬の総１日投与量は、反復投与でまたは単回投与で１日当たり約０．０１ｍｇ〜約５ｇ（例えば、反復投与でまたは単回投与で１日当たり約０．０１ｍｇ〜約４．０ｇ、約０．０１ｍｇ〜約３．０ｇ、約０．０１ｍｇ〜約２．５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約２．０ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１．５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１．０ｇ）の範囲にわたる。いくつかの実施形態において、治療薬の総１日投与量は、単回投与でまたは反復投与で１日当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ（例えば、約０．０１〜約５００ｍｇ、約０．０１〜約２５０ｍｇ、約０．０１〜約２００ｍｇ、約０．０１〜約１５０ｍｇ、約０．０１〜約１００ｍｇ、約０．０１〜約５０ｍｇ、約０．０１〜約１０ｍｇ、約０．０１〜約５ｍｇ、約０．０１〜約２．５ｍｇ、約０．０１〜約２．０ｍｇ、約０．０１〜約１．５ｍｇ、約０．０１〜約１．０ｍｇ、約０．０１〜約０．５ｍｇ、約０．０１〜約０．１ｍｇ）の範囲にわたる。いくつかの実施形態において、治療薬（特に、ニトロソニフェジピン）の総１日投与量は、単回投与でまたは反復投与で１日当たり約５０ｍｇ〜約５ｇ（例えば、約５０ｍｇ〜約４ｇ、約１００ｍｇ〜約３ｇ、約１００ｍｇ〜約２．５ｇ、約１００ｍｇ〜約２ｇ、約１００ｍｇ〜約１．５ｇ、約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２５０ｍｇ）の範囲にわたる。いくつかの実施形態において、治療薬の総１日投与量は、約０．０１ｍｇ、約０．０５ｍｇ、約０．１ｍｇ、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約５００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１．５ｇ、約２ｇ、約２．５ｇ、約３ｇ、約３．５ｇ、約４ｇ、約４．５ｇまたは約５ｇであり得る。一般的に、本明細書で述べた量は、組成物中のすべての活性化合物の総量である。例えば、組成物がニフェジピン、ニトロソニフェジピンおよび酸化ニフェジピンの混合物を含有する場合、治療上有効量は、ニフェジピン、ニトロソニフェジピンおよび酸化ニフェジピンの総計量である。
【０１１５】
いくつかの実施形態において、本明細書で述べた治療薬は、月１回、隔週に１回、週１回、週２回または週３回投与する。これらの例において、上述の１日投与量は、平均１日投与量を反映する。
【０１１６】
特定の状況において、特に治療の初期に患者の血流中の活性薬のかなり高い用量を維持することが重要である可能性がある。したがって、少なくとも最初は、所定の期間、例えば、少なくとも約６時間またはそれ以上の時間、例えば、少なくとも約１２時間またはそれ以上の時間、例えば、少なくとも約２４時間またはそれ以上の時間にわたり用量を比較的高く、且つ／または実質的に一定のレベルに維持することが重要である可能性がある。
【０１１７】
本発明の化合物は、単独で、または中枢または末梢神経系、特に脳の選択される領域に影響を及ぼす他の薬剤と併用して、若しくはそれとの併用療法で投与することができる。
【０１１８】
本発明による医薬組成物は、経口、皮下、静脈内、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻、直腸、耳介、結膜、眼、電気浸透、頸管内、静脈洞内（ｅｎｄｏｓｉｎｕｓｉａｌ）、気管内、経腸、硬膜外、羊膜外、体外、血液透析、浸潤、腸管、腹内、羊膜内、動脈内、関節内、胆管内、気管支内、嚢内、心臓内、軟骨内、腔内、脳内、クモ膜下槽内、角膜内、歯冠内、冠動脈内、海綿体内、皮内、椎間板内、腺管内、十二指腸内、硬膜内、表皮内、食道内、胃内、歯肉内、回腸内、病巣内、リンパ管内、骨髄内、髄膜内、筋肉内、眼内、卵巣内、心膜内、胸膜内、前立腺内、肺内、洞内、滑膜内、腱内、精巣内、髄腔内、咽喉内、管内、腫瘍内、鼓膜内、子宮内、血管内、静脈内ボーラス、静脈内点滴、心室内、膀胱内、硝子体内、イオントフォレシス、潅注、咽頭、経鼻胃、閉鎖包帯法、眼、口腔咽頭、非経口、経皮、硬膜上、神経周囲、歯周、呼吸器、眼球後、軟組織、クモ膜下、結膜下、舌下、粘膜下、局所、経皮、経粘膜、経胎盤、経気管、経鼓膜、尿管、尿道および膣を含むいずれかの経路により投与することができる。特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、経口、皮下、静脈内、経皮、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻および直腸から選択される経路により投与する。特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、経口投与する。
【０１１９】
経口投与用の液体剤形は、水、等張性溶液または生理食塩水などの当技術分野で一般的に用いられる不活性希釈剤を含有する、薬学的に許容される乳剤、微細乳剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤を含んでいてよい。そのような組成物は、湿潤剤；乳化および懸濁化剤；甘味、着香および芳香剤などのアジュバントも含んでいてよい。
【０１２０】
注射用製剤、例えば、滅菌注射用水性または油脂性懸濁剤は、適切な分散または湿潤剤および懸濁化剤を用いて公知の技術により調合することができる。滅菌注射用製剤は、非経口で許容される非毒性の希釈剤または溶媒中滅菌注射用溶液、懸濁液または乳濁液、例えば、１，３−ブタンジオール中溶液としてであってもよい。用いることができる許容される媒体および溶媒の主なものは、水、リンゲル液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．および等張性塩化ナトリウム溶液である。さらに、滅菌固定油は、通常、溶媒または懸濁化媒体として用いられる。この目的のために、合成モノまたはジグリセリドを含めたあらゆる無刺激性の固定油を用いることができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製に用いられる。
【０１２１】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターによるろ過により、または使用直前に滅菌水若しくは他の滅菌注射用媒体に溶解若しくは分散させることができる滅菌固体組成物の形の滅菌剤を混入することにより滅菌することができる。
【０１２２】
薬物の作用を長引かせるために、皮下または筋肉内注射による薬物の吸収を遅らせることがしばしば望ましい。これを達成する最も一般的な方法は、難水溶性の結晶質または非晶質物質の懸濁剤を注射することである。薬物の吸収の速度は、薬物の溶解の速度に依存する状態になり、これは、ひいては薬物の物理的状態、例えば、結晶サイズおよび結晶の形態に依存する。薬物の吸収を遅らせる別のアプローチは、薬物を油中溶液または懸濁液として投与することである。薬物およびポリラクチド−ポリグリコシドなどの生分解性ポリマーのマイクロカプセルマトリックスを形成することにより、注射用デポ剤形も調製することができる。薬物とポリマーとの比およびポリマーの組成によって、薬物の放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例は、ポリオルトエステルおよびポリ酸無水物を含む。デポ注射剤は、薬物を、体組織と適合性があるリポソームまたはマイクロエマルジョンに閉じ込めることによっても調製することができる。
【０１２３】
薬物の直腸投与用の坐剤は、常温で固体であるが、直腸温では液体であり、したがって、直腸内で融解し、薬物を放出するココアバターおよびポリエチレングリコールなどの適切な非刺激性賦形剤と薬物を混合することによって調製することができる。
【０１２４】
経口投与用の固形剤形は、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、ゲルキャップス剤および顆粒剤を含むが、これらに限定されない。そのような固形剤形において、治療薬は、スクロース、ラクトースまたはデンプンなどの少なくとも１つの不活性希釈剤と混合することができる。そのような剤形は、不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムおよび微結晶セルロースなどの錠剤化滑沢剤および他の錠剤化助剤も含んでいてよい。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、剤形は、緩衝剤も含んでいてよい。錠剤および丸剤はさらに、腸溶性コーティングおよび他の放出制御コーティングを用いて調製することができる。
【０１２５】
同様な種類の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖並びに高分子量ポリエチレングリコールなどのような賦形剤を用いた軟および硬充填ゼラチンカプセル剤における充填剤としても用いることができる。
【０１２６】
活性化合物は、上述のような１つまたは複数の賦形剤を用いたマイクロカプセルに封入された形でもあり得る。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤および顆粒剤などの固形剤形は、腸溶性コーティングおよび医薬品調合技術分野で周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。それらは、乳白剤を場合によって含有することもでき、それらが有効成分（単数または複数）のみを、または好ましくは腸管の特定の部分で場合によって遅延した様態で放出する組成を有することもできる。用いることができる埋め込み組成物の例は、ポリマー物質およびワックスを含む。
【０１２７】
本発明の化合物の局所または経皮投与用の剤形は、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、散剤、液剤、噴霧剤、吸入剤または貼付剤をさらに含む。活性成分は、無菌的条件下で薬学的に許容される担体および必要に応じて任意の必要な保存剤または緩衝剤と混合する。眼用製剤、点耳剤、眼軟膏、散剤および液剤も本発明の範囲内であると企図される。
【０１２８】
軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤およびゲル剤は、本発明の活性化合物に加えて、動物および植物脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛またはそれらの混合物などの賦形剤を含有することもできる。
【０１２９】
散剤および噴霧剤は、本発明の活性化合物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末またはこれらの物質の混合物などの賦形剤を含有することもできる。噴霧剤は、クロロフルオロ炭化水素などの通常の噴射剤をさらに含有することもできる。
【０１３０】
経皮貼付剤は、活性化合物の身体への制御送達をもたらし得る。そのような剤形は、化合物を適切な媒体に溶解または分散させることによって作製することができる。皮膚を越える化合物の流入量を増加させるために、吸収促進剤も用いることができる。その速度は、速度制御膜を備えることにより、または化合物をポリマーマトリックスまたはゲル中に分散させることにより、制御することができる。
【０１３１】
本明細書で述べる医薬組成物は、即時放出または制御放出（徐放、持続または延長放出とも呼ばれる）用に製剤化することができる。様々な徐放または延長放出製剤または用具が当業者に周知である。例は、それぞれが参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，６７４，５３３号、同第５，０５９，５９５号、同第５，１２０，５４８号、同第５，０７３，５４３号、同第５，６３９，４７６号、同第５，３５４，５５６号および同第５，７３３，５６６号に記載されているものを含むが、これらに限定されない。そのような剤形は、様々な割合の所望の放出プロファイルを得るための例えば、ヒドロプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、ゲル、透過性膜、浸透圧システム、多層コーティング、微小粒子、リポソーム、マイクロスフェアまたはそれらの組合せを用いて１つまたは複数の有効成分の徐放または制御放出を可能にするために用いることができる。当業者に公知の適切な放出制御製剤は、容易に選択し、本発明の治療薬との使用に適応することができる。例えば、本発明は、制御放出（すなわち、徐放、延長放出または持続放出）用に製剤化されている例えば、錠剤、カプセル剤、ゲルキャップス剤およびカプレット剤などであるが、これらに限定されない固形経口剤形を包含する。
【０１３２】
放出制御製剤の利点は、薬物の長時間にわたる活性、投与頻度の減少および患者服薬遵守の向上などである。例えば、放出制御または放出延長製剤は、血液脳関門を越える送達を増大させるための患者体内で絶え間なく利用可能な十分な用量レベルを維持することができる。
【０１３３】
大部分の放出制御製剤は、最初に所望の治療効果を直ちにもたらす量の治療薬（有効成分）を放出し、このレベルの治療または予防効果を長期間にわたって維持するために他の量のサグ（ｔｈｕｇ）をゆっくり且つ持続的に放出するように設計されている。体内の薬物のこの一定のレベルを維持するために、薬物は、代謝され、身体から排泄される薬物の量を補充する速度で剤形から放出されなければならない。有効成分の制御放出は、ｐＨ、温度、酵素、水または他の生理的条件若しくは化合物を含むが、これらに限定されない様々な条件により刺激することができる。
【０１３４】
いくつかの実施形態において、２つまたはそれ以上の治療薬を併用して投与することができる。２つまたはそれ以上の治療薬は、多回投与レジメンの一部として互いに独立して投与することができる。或いは、それらの薬剤は、単一組成物中で本発明の化合物と混合されている単一剤形の一部であってよい。多回投与レジメンの一部として投与する場合、２つの治療薬は、同時に、連続して、または通常互いから５時間以内の互いの時間内に施すことができる。
【０１３５】
本明細書で用いる場合、「併用（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）」、「併用される（ｃｏｍｂｉｎｅｄ）」という用語および関連用語は、本発明による治療薬の同時または連続投与を意味する。例えば、本発明の化合物は、別の薬剤と共に別個の単位剤形で同時にまたは連続して、或いは単一単位剤形で一緒に投与することができる。したがって、本発明は、提供される化合物、追加の治療薬および薬学的に許容される担体、アジュバントまたは媒体を含む単一単位剤形を提供する。
【０１３６】
本発明は、多くの実施形態で提供され、とりわけ、様々な実施例で明確に理解することができる。以下の実施例は、本発明の広さおよび適用性の実例となるものであるが、非限定的な記述を提供するものである。
【実施例】
【０１３７】
（実施例１）
ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の神経毒性作用
アルツハイマー病患者由来の上皮細胞から得られた細胞培養培地の検討により、対照細胞と比較してＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルの上昇が示され、これにより、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体をアルツハイマー病の早期診断のための有効なバイオマーカーとして用いることができることが分かることが示された。開示が参照により本明細書に組み込まれている、米国出願公開第２００８００２６４０５号を参照のこと。この実施例では、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体が、疾患のバイオマーカーであることに加えて、神経毒でもあることを示す。
【０１３８】
まず第一に、アクロレイン（脂質過酸化のアルファ、ベータ不飽和３炭素アルデヒド副生成物）は、正常対照上皮細胞にアルツハイマー病患者に由来する上皮細胞と同等のレベルでＰＤＳ／ＴＴＲ複合体を培養培地中に発現させることが分かった。これらの実験のために、脈絡叢上皮細胞の初代培養を確立された方法を用いて死後短期間剖検により確立した。ＡＤおよび正常対照培養を、２％ウシ胎児血清および１％上皮増殖因子（ＥＧＦ）を含有するＭＥＭ増殖培地中で密集状態になるまで増殖させた。正常対照培養をＮ２補足物を含有するＯｐｔｉ−ＭＥＭに切替え、媒体（対照）または５μＭアクロレインで７２時間処理した。ＡＤ被験体からの培養は、Ｎ２補足培地に切替え、７２時間保持した。処理後、培地を各フラスコから収集し、ＰＤ−１０カラムを用いて脱塩処理した。次いで、溶出したタンパク質を凍結乾燥し、２５μｌの水に再懸濁し、ウエスタンブロット分析並びにＰＤＳおよびＴＴＲに対して特異的な抗体を用いて分析した。対照上皮細胞、アクロレインで処理した対照上皮細胞および後期アルツハイマー病患者に由来する上皮細胞により細胞培養培地中で発現されたＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のウエスタンブロット分析を示す具体例としての結果を図１に示す。図１に示すように、アクロレインは、対照上皮細胞におけるＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の発現を後期ＡＤ（ＬＡＤ）上皮細胞におけるものと同等のレベルに増大させた。
【０１３９】
次にＰＤＳ／ＴＴＲ複合体を含有するＬＡＤ上皮細胞の培地を用いて皮質ニューロンを処理した。ＬＡＤ脈絡叢上皮培養または媒体若しくは５μＭアクロレインで処理した正常対照培養により産生されたＰＤＳ／ＴＴＲ複合体が初代皮質ニューロンに負の影響を与えるかどうかを判断するために、正常対照上皮培養をＮ２補足培地に切替え、媒体のみ（対照）または５μＭアクロレインで１６時間処理した。ＬＡＤ培養は、Ｎ２培地に１６時間切替えた。処理後、培地を各培養型（ＬＡＤ；媒体のみで処理した正常対照または５μＭアクロレインで処理した正常対照）から収集し、初代ラットニューロン培養に加えた（培養中７日）。処理した初代培養をならし培地に１６時間曝露し、ＭＴＴ還元アッセイを用いて細胞生存率を測定した。具体例としての結果を図２に示した。図２に示すように、ＬＡＤ上皮培地で処理した皮質ニューロンの生存率は、対照と比較して有意に低い（図２）。この実験により、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体はそれ自体が神経毒であることが分かる。
【０１４０】
ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の神経毒性作用をさらに検討するために、ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞をＬＡＤまたは正常対照上皮細胞からのならし培地に１６時間曝露した。ならし培地への曝露後に、細胞を７０％メタノール／３０％アセトンで固定し、抗ＰＨＦ−１抗体を用いた免疫組織化学検査に供した。ＰＨＦ−１は、ＡＤ ＮＦＴに認められるような異常にリン酸化されたタウ（神経細線維のもつれ）を認識する。図３に示すように、ＬＡＤ上皮細胞培地で処理したＳＹ５Ｙ細胞の２５％近くのものがＰＨＦ−１陽性であったのに対して、対照培地で処理したＳＹ５Ｙ細胞の約３％が陽性であった。対らせん状細線維は、神経細線維のもつれの前兆である。したがって、ＰＨＦ−１免疫陽性は、一般的にアルツハイマー病における後期神経細線維のもつれの形成のインジケーターである。したがって、この実験から、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体がＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞における対らせん状細線維の形成を促進することが示されており、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体がＨ４神経膠腫細胞によるアミロイドベータペプチド（Ａβ）の産生を促進し得ることが分かる。
【０１４１】
上皮培養により産生された複合体が炎症性サイトカイン経路に影響を及ぼすかどうかを判断するために、ヒト星状細胞腫の培養を２．５Ｘ１０５細胞／ウエルの密度で平板培養し、ならし培地に２４時間曝露した。曝露後、各ウエルから培地を収集し、炎症性サイトカイン（ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＴＧＦ−βおよびＩＬ−６）のレベルを市販のＥＬＩＳＡを用いて測定した。アッセイの結果により、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体が星状細胞腫培養における２つの炎症性サイトカイン経路（すなわち、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α）を活性化したことが示され（データは示さず）、神経炎症におけるＰＤＳ／ＴＴＲの役割が示された。
【０１４２】
要約すると、この実施例で述べた実験により、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体が、アルツハイマー病の特質に直接的に影響を及ぼし得る様々な生化学的変化を引き起こすことが立証された。
【０１４３】
（実施例２）
ニフェジピン、ニフェジピン類似体混合物および／またはＴ３／Ｔ４はＰＤＳ／ＴＴＲの発現を阻害する
実施例１で述べたアッセイは、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体からニューロン細胞を防護することができる可能な治療薬を同定するためのツールとなる。発明者らは、高血圧に対して処方されるカルシウムチャネル遮断薬である、ニフェジピン（１，４−ジヒドロ−２，６−ジメチル−４−（２−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸（ｐｙｒｉｄｉｎｙｄｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）ジメチルエステル、ＣＡＳ番号２１８２９−２５−４（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ））；またはニフェジピンの酸化誘導体（（２，６−ジメチル−４−（２−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸ジメチルエステル、ＣＡＳ番号６７０３５−２２−７（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ））若しくはニフェジピンのニトロソ誘導体（２，６−ジメチル−４−（２−ニトロソフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸ジメチルエステル、ＣＡＳ番号５０４２８−１４−３（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ））などのニフェジピン類似体などの化合物が個別にまたは共同して細胞培養におけるＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の発現を効果的に阻害し得ることを観測した。さらに、Ｔ３およびＴ４も評価したところ、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の発現を阻害するのに有効であることが分かった。
【０１４４】
具体的には、上皮細胞を実施例１で述べたように、５μＭアクロレイン、５μＭアクロレイン＋０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４、５μＭアクロレイン＋１μＭニフェジピン混合物（ニトロソニフェジピン５５％、酸化ニフェジピン１１％およびニフェジピン３４％）、または５μＭアクロレイン＋１μＭニフェジピン混合物および０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４で処理した。各培養により培養培地中に分泌されたＰＤＳ／ＴＴＲの量は、上述のようにウエスタンブロット分析により測定した。具体例としてのデータを図４に示した。分かるように、アクロレイン＋Ｔ３／Ｔ４、アクロレイン＋ニフェジピン混合物、またはアクロレイン＋ニフェジピン混合物およびＴ３／Ｔ４で処理した細胞により発現した量は、アクロレインでのみ処理した細胞により発現した量より有意に少なかった。
【０１４５】
さらに、免疫染色を用いてＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞を判定し、処理および非処理細胞培養のＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞の数を数え、比較した。具体例としての結果を図５に要約する。図５から分かるように、アクロレイン単独処理試料中のＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞の数は、非処理対照におけるＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞の数の約６００％である。それに反して、アクロレイン（ａｃｒｏｌｉｎｅ）＋アクロレイン＋Ｔ３／Ｔ４、アクロレイン＋ニフェジピン混合物、またはアクロレイン＋ニフェジピン混合物およびＴ３／Ｔ４で処理した試料中のＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞の数は、非処理対照と比較して有意に低下した。
【０１４６】
ニフェジピン混合物がカルシウムチャネルを遮断することによって機能するかどうかを判断するために、我々はカルシウムチャネルに対するニフェジピン混合物の影響を評価した。ＳＹ５Ｙ神経芽腫培養を新鮮なニフェジピンまたはニフェジピン混合物で１６時間前処理し、次いで、カルシウム不含有培地に切替え、５μＭ Ｆｕｒａ−２蛍光色素を負荷した。次に、培養をカルシウム不含有培地で洗浄し、カルシウム含有培地に曝露し、Ｆｕｒａ−２へのＣａの結合に起因する蛍光を共焦点顕微鏡法および３４０ｎｍでの励起を用いて測定した。３枚の別個の皿について１枚の皿当たり５０〜１００個の細胞を撮像した。具体例としての結果を図６に示す。興味深いことに、図６に示すように、ニフェジピン混合物は、新鮮なニフェジピンと比較してカルシウムチャネル遮断薬としての最小限（約３０％）の活性を有し、これらの化合物は別の新規なメカニズムにより作用する可能性があることが示唆される。
【０１４７】
したがって、この実施例で述べた実験から、ニフェジピン類似体混合物およびＴ３／Ｔ４は、単独で、または共同して、上皮細胞におけるＰＤＳ／ＴＴＲの発現を効果的に阻害することができ、この作用は、カルシウムチャネルと無関係である可能性があることが示唆される。さらに、Ｔ３／Ｔ４は、ニフェジピン類似体の有効性を改善した。
【０１４８】
（実施例３）
ニフェジピン類似体は炎症性サイトカインの産生を阻害する
炎症性応答エレメント（サイトカイン）がアルツハイマー病患者において上昇していることが報告された。発明者らは、星状細胞腫培養においてニフェジピン混合物および個々の類似体を試験した。ヒト星状細胞腫細胞を６ウエル培養プレートで２．５Ｘ１０５細胞／ウエルで平板培養し、２４時間増殖させた。次に培養を血清不含有Ｏｐｔｉ−ＭＥＭに切替え、ニフェジピン混合物および個々の類似体で２４時間処理した。３枚の６ウエルプレートを各処理に供した。処理後、培地を各ウエルから収集し、市販のＥＬＩＳＡを用いてＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦ−αおよびＴＧＦ−βのレベルを測定した。具体例としての結果を図７に示す。図７から分かるように、培地中に分泌されたＩＬ−１、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αは、ニフェジピン混合物または酸化ニフェジピンの投与により有意に減少し、これらの化合物が神経炎症に対して直接的な正の効果を有することが示された。
【０１４９】
（実施例４）
ニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４はＰＨＦ−１レベルを低下させる
実施例１で述べたように、有意により高いレベルのＰＤＳ／ＴＴＲ複合体を含有していたＬＡＤ上皮細胞の培地に曝露したＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞は、非処理対照培養の培地に曝露したものと比較して有意に高いＰＨＦ−１免疫染色を示した。この実験では、実施例１で述べた手順を用いて、ＳＹ５Ｙ細胞を、アクロレインおよびニフェジピンの配合物、ニフェジピン類似体、ニフェジピン類似体の混合物およびＴ３／Ｔ４で処理した上皮細胞の培地に曝露した。図８に示すように、ニフェジピン混合物およびニフェジピン／ニフェジピン類似体＋Ｔ３／Ｔ４は、ＰＨＦ−１レベルを有意に低下させた。
【０１５０】
（実施例５）
Ｈ４神経膠芽腫細胞によるＡβ１−４２の産生の阻害
この実施例では、発明者らは、ニフェジピン、ニフェジピン類似体（例えば、酸化ニフェジピンまたはニトロソニフェジピン）および／またはＴ３／Ｔ４がＡβ１−４２の産生を阻害し得るかをさらに検討するために、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）を過剰発現するように安定にトランスフェクトしたＨ４神経膠芽腫細胞を用いた。アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）を過剰発現する構築物を安定にトランスフェクトしたＨ４神経膠芽腫細胞は、Ａβ１−４２を培養培地中に分泌する。これらのＨ４細胞を１μＭ新鮮ニフェジピン、１μＭ酸化ニフェジピン、１μＭニトロソニフェジピンまたは０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４で１６時間処理した。培養培地中のＡβレベルをＥＬＩＳＡ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて測定した。図９に示すように、新鮮ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピンまたはＴ３／Ｔ４の投与により、Ａβ１−４２の産生の有意な低下がもたらされる。
【０１５１】
さらに、Ｈ４細胞によるＡβ１−４２の産生に対するニフェジピン、ニフェジピン類似体およびニフェジピン混合物の作用をＴ３／Ｔ４の存在下および非存在下でさらに試験した。具体例としての結果を図１０に要約する。分かるように、Ｔ３／Ｔ４は、Ａβ１−４２の産生に対するニフェジピン、ニフェジピン類似体およびニフェジピン混合物の阻害作用を改善する。
【０１５２】
我々は次に、他のカルシウムチャネル遮断薬がＨ４神経膠腫培養におけるＡβ１−４２の産生を阻害することができるかどうかを試験した。アミロドピン、ジリチアゼム、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピンおよびニモジピンなどの公知のカルシウムチャネル遮断薬をこの実験に用いた。具体的には、ｏｐｔｉ−ＭＥＭ（血清不含有）中でＴ３／Ｔ４の存在下および非存在下でＨ４細胞を１μＭの各薬物で１６時間処理し、培地中に分泌されたＡβ１−４２をＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＥＬＩＳＡｓを用いて測定した。具体例としての結果を図１１に示す。図１１に示すように、ニカルジピンは、Ａβの分泌の有意な減少の傾向（ｐ＜０．１０）を示し、ニモジピンは、Ａβの生成の有意な減少（ｐ＜０．０５）をもたらした。他の薬物は、Ａβの生成のレベルを有意に変化させなかった。Ｔ３／Ｔ４をアムロジピンおよびジリチアゼムと併用した場合、代替カルシウムチャネル遮断薬とＴ３／Ｔ４との併用で、Ａβの生成の有意な減少が示された。Ｔ３／Ｔ４と他の薬物との併用では、Ａβの生成の有意な減少は示されなかった。
【０１５３】
（実施例６）
ベータセクレターゼ（ＢＡＣＥ）およびガンマセクレターゼ活性の阻害
ニフェジピン、ニフェジピン類似体およびニフェジピン混合物がＡβ１−４２ペプチドの産生を効果的に阻害することができるというこの驚くべき所見は、Ａβ１−４２ペプチドの減少の可能なメカニズムをさらに検討する促しとなった。Ａβ１−４２の産生が、アミロイド前駆体タンパク質をベータセクレターゼ切断部位で切断する酵素であるベータセクレターゼ（ＢＡＣＥ）並びにガンマセクレターゼ切断部位で切断するプレセニリン−１（ＰＳ−１）、ニカストリン、ＡＰＨ−１およびＰＥＮ−２からなるガンマセクレターゼ複合体の活性に依存すると企図された。発明者らは、我々の培養モデル系におけるＡβ１−４２の産生の阻害がＢＡＣＥおよび／またはガンマセクレターゼ活性の阻害に起因するかどうかを試験した。
【０１５４】
ＢＡＣＥ活性は、蛍光基質およびＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎからの市販のキットの一部としての生成組換えＢＡＣＥを用いて測定した。図１２に示すように、ニフェジピン単独またはサイロキシンとの併用でＢＡＣＥ活性がわずかに阻害された。しかし、ニトロソニフェジピン単独またはサイロキシンとの併用ではＢＡＣＥ活性が有意に阻害された（図１２）。
【０１５５】
ニフェジピン混合物のみまたはＴ３／Ｔ４との併用で処理したＨ４培養におけるＢＡＣＥおよびガンマセクレターゼ複合体の個々の成分のタンパク質レベルの検討により、ニフェジピン混合物単独でＰＳ−１およびＰＥＮ−２のレベルが有意に低下したことが明らかになった。ＢＡＣＥ−１のレベルは、低下したが、有意でなかった。しかし、ニフェジピン混合物＋Ｔ３／Ｔ４では、ＰＳ−１、ＰＥＮ−２、ＢＡＣＥ−１およびニカストリンが有意に低下した。ＡＰＨ−１は、いずれの処理の影響も受けなかった。具体例としての結果を図１３に示した。タンパク質レベルは、免疫組織化学および共焦点顕微鏡法を用いて個々の細胞（５０〜１００細胞／皿；３皿／実験）において測定し、ウエスタンブロット分析を用いて全細胞ホモジネートにおいて確認した。各タンパク質に対して特異的抗体は、販売業者から購入した。
【０１５６】
この実施例で述べた実験で、ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４がＡβの産生に関与する酵素に直接的に作用することが示された。
【０１５７】
（実施例７）
Ａβ１−４０の産生のｉｎ ｖｉｖｏでの阻害
上述のｉｎ ｖｉｔｒｏデータに基づいて、発明者らは、３ヵ月齢のＣ５７−Ｂｌａｃｋ−６（Ｃ５７ＢＬ／６）マウスにおける急性曝露試験を開始した。この試験では、６匹のＣ５７ＢＬ／６マウスの６群を３日間連日、媒体（２％ＤＭＳＯ／９８％ポリエチレングリコール−３０００（ＰＥＧ−３０００））、２５ｍｇ／ｋｇニフェジピンまたはニフェジピン混合物、Ｔ３／Ｔ４（１０ｍｇ／ｋｇ Ｔ３および１０ｍｇ／ｋｇ Ｔ４）、ニフェジピン混合物＋Ｔ３／Ｔ４並びにニフェジピン＋Ｔ３／Ｔ４の腹腔内（ＩＰ）注射に供した。動物は、３回目の注射の１時間後に安楽死させた。脳および終末血清を除去し、直ちに液体窒素で凍結し、分析に用いるまで−８０℃で保存した。
【０１５８】
脳の１半球をＡβ１−４０の測定（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＥＬＩＳＡ）のためにホモジナイズし、他をタンパク質レベル用にホモジナイズした。さらに、ＰＳ−１、ＢＡＣＥ、ＰＳ−１の必須基質である切断Ｎｏｔｃｈ、Ｎｉｃａｓｔ、ＡＰＨ−１のレベルをウエスタンブロット分析を用いて測定した。図１４に示すように、Ｔ３／Ｔ４およびニフェジピン混合物＋Ｔ３／Ｔ４を投与したマウスは、媒体投与した動物と比較してＡβ１−４０レベルの小幅（２５％）であるが、有意な低下を示した。ＰＳ−１、ＮｉｃａｓｔおよびＡＰＨ−１のレベルは、ニフェジピン、ニフェジピン混合物＋Ｔ３／Ｔ４を投与したマウスで有意に低下した。ＢＡＣＥタンパク質レベルは、ニフェジピン、ニフェジピン＋Ｔ３／Ｔ４およびＴ３／Ｔ４単独を投与したマウスで有意に低下した。これに反して、いずれの処理によっても切断Ｎｏｔｃｈのレベルの有意な差はなかった（図１４）。
【０１５９】
さらに、脳を抽出し、ニフェジピンおよびその類似体のレベルについてＧＣ／ＭＳにより分析した。酸化ニフェジピンが分析したすべての試料に認められ、混合物の成分が血液脳関門を通過し、それにより、ニューロン保護に利用可能であることが示唆される。この実験で、これらの誘導体がアルツハイマー病の治療に望まれる脳透過性を有することが示された。
【０１６０】
この実施例における実験により、ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４がｉｎ ｖｉｖｏでＡβ１−４０ペプチドの内因性レベルを低下させることが示された。
【０１６１】
（実施例８）
オーファンＧ共役受容体タンパク質３（ＧＰＣＲ−３）のｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏでの阻害
この実施例は、ニフェジピン、ニフェジピン混合物、および／またはＴ３／Ｔ４が、ガンマセクレターゼ複合体（上述のように、Ａβを生成するためのＡＰＰの切断に重要である）の安定性の維持に役割を果たすことが示唆されている酵素であるオーファンＧ共役受容体タンパク質３（ＧＰＣＲ−３）を阻害することができるかどうかを試験するために実施した。
【０１６２】
Ｈ４神経膠芽腫細胞を１μＭ混合ニフェジピン、１μＭ混合ニフェジピン＋０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４、０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４、１μＭ新鮮ニフェジピン、１μＭ新鮮ニフェジピン＋０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４で１６時間処理した。ＧＰＣＲ−３のレベルは、ＧＰＣＲ−３特異抗体を用いたウエスタンブロット分析を用いて測定した。図１５に示すように、ニフェジピン混合物、新鮮ニフェジピン、および／またはＴ３／Ｔ４は、Ｈ４細胞におけるＧＰＣＲ−３の発現レベルを有意に減少させた。
【０１６３】
さらに、実施例７で上述したＣ５７ＢＬ／６マウスにおけるＧＰＣＲ−３のレベルをウエスタンブロット分析を用いて測定した。具体例としての結果を図１５にも示す。ニフェジピン混合物およびＴ３／Ｔ４、新鮮ニフェジピン、およびＴ３／Ｔ４は、マウスにおけるＧＰＣＲ−３の発現レベルも低下させた。
【０１６４】
したがって、この実施例で、ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４がｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏでＧＰＣＲ−３のレベルを低下させることが示された。
【０１６５】
ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４によるＧＰＣＲ−３レベルの低下が血圧の制御に関与する経路によるかどうかを判断するために、我々は、Ｈ４細胞におけるアテノロール、カプトプリルおよびエナントプリル（ｅｎａｎｔｏｐｉｒｌ）などの公知の血圧薬を試験した。具体的には、Ｈ４細胞をＯｐｔｉ−ＭＥＭ（血清不含有）培地中でＴ３／Ｔ４の存在下および非存在下で１μＭの各薬物で１６時間処理し、ＧＰＣＲ−３のレベルを共焦点顕微鏡法および特異的抗ＧＰＣＲ−３抗体を用いて測定した。具体例としての結果を図１５ａに示す。図１５ａに示すように、カプトプリル＋Ｔ３／Ｔ４のみがＧＰＣＲ−３のレベルの有意な変化（低下）をもたらした。この実験により、ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４によるＧＰＣＲ−３の低下は、血圧経路と無関係であることが分かる。
【０１６６】
（実施例９）
タウリン酸化の阻害
この実施例では、我々は、ニフェジピン、ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４がリン酸化タウタンパク質を減少させることができるかどうかを試験した。リン酸化タウタンパク質は、アルツハイマー病の病因に関与している、対らせん状細線維および直線状細線維のもつれの自己集合をもたらし得る。
【０１６７】
タウリン酸化に関与する複数のキナーゼが存在するが、グリコーゲンシンターゼキナーゼ３β（ＧＳＫ−３β）は、ＡＤにおけるタウ過剰リン酸化に対する主要な寄与因子として著しい注目を集めている。ＧＳＫ−３βは、特異的ホスホタウ抗体を用いて同定された約９５％の対らせん状細線維に存在する。構成的に活性なキナーゼであるＧＳＫ−３βは、プロテインキナーゼＢ（Ａｋｔ）によるＳｅｒ９のリン酸化により不活性化される。セリン／トレオニンキナーゼであるＡｋｔは、ホスファチジルイノシトールキナーゼ（Ｐ１３Ｋ）媒介シグナリングにより制御され、ホスファチジルイノシトール依存性キナーゼ１（ＰＤＫ１）による調節トレオニン残基（Ｔｈｒ−３０８）のリン酸化により、またＰＤＫα／ＴＯＲＣ２キナーゼによるＳｅｒ４７３のリン酸化により活性化される。さらに、Ａｋｔ／ＧＳＫ−３β経路の活性化は、Ｇα１２／１３ヘテロ三量体Ｇタンパク質にカップリングしたＧＣＰＲにより媒介される可能性がある。Ｇα１２の活性化は、ＲｈｏＡおよびそのエフェクターＲｈｏキナーゼ（ＲＯＣＫ）を刺激することが示された。Ｓｅｒ１６０においてリン酸化されたＲＯＣＫは、Ａｋｔ／ＧＳＫ−３βのリン酸化／活性化をもたらすＰＩ３Ｋシグナリング経路を活性化する受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）をさらにトランス活性化する（Ｎｅｗら、「Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｉｎｄｕｃｅｄ Ａｋｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ」、ＦＥＢＳ Ｊ、２００７年、２７４巻、６０２５〜３６頁によりレビューされた）。リン酸化Ａｋｔは、ＧＳＫ−３βのリン酸化および不活性化を増大させ、したがって、タウリン酸化を減少させる。
【０１６８】
我々は、実施例７で述べたようにニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４で処理したマウス脳における上述のタウリン酸化経路に関与するタンパク質のレベルおよびリン酸化の状態を検討した。図１６に示すように、リン酸化ＲＯＣＫ（ｐ−ＲＯＣＫ）およびＧＳＫ−３β（ｐ−ＧＳＫ−３β）のレベルは、ニフェジピンまたはニフェジピン混合物＋Ｔ３／Ｔ４で処理したマウスにおいて有意に増加した。Ｔ３／Ｔ４単独もｐ−ＧＳＫ−３βのレベルを有意に増加させた。ＲＯＣＫの総タンパク質レベルは、いずれの処理による影響も受けなかった。ｐ−２５のレベルは、処理マウスにおいてわずかに低下した。これらの結果は、ニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４の処理がｉｎ ｖｉｖｏでのタウリン酸化の減少をもたらし得ることを示すものである。
【０１６９】
（実施例１０）
ヒト関連試験
ヒト関連試験は、ヒト患者におけるカルシウムチャネル遮断薬の影響を決定するために実施した。最初の試験において、被験体を対照、ＡＰＯＥ４（アルツハイマー病の発生率の増加に関連する遺伝子）を有する対照、ジヒドロピリジンベースのカルシウムチャネル遮断薬の投与を受けている被験体およびジヒドロピリジンベースのカルシウムチャネル遮断薬の投与を受けており、ＡＰＯＥ４を有する被験体に分けた。ＭＭＳＥ（ミニメンタルステータス検査）試験を用いて各被験体の認知機能を測定した。適合モデル対年齢の軌線を決定することができる。図１７にＭＭＳＥのＮＬＭＩＸＥＤモデルの具体例としての結果を示す。このモデルは、カルシウムチャネル遮断薬の投与を受けている被験体がカルシウムチャネル遮断薬の投与を受けていない被験体と比べて認知機能低下の４年の遅延を示すことを示している。
【０１７０】
このヒト関連試験で、ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬の使用が認知機能低下の発症を遅延させると思われることが示され、ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬を用いてアルツハイマー病などの神経変性疾患を治療することができることが示唆される。
【０１７１】
第２の試験において、我々は、神経心理学的関連試験からの合計８例の被験体について剖検を行った。４例の被験体は、ニフェジピンを含むカルシウムチャネル遮断薬の投与を受け、４例の被験体は、カルシウムチャネル遮断薬の投与を受けていなかった。被験体の前頭葉検体中のＡβ１−４２並びにＰＳ−１、Ｎｉｃａｓ、ＢＡＣＥ、ＡＰＨ−１およびＰＥＮ−２などのＡβ処理酵素のレベルを標準的方法を用いて測定した。具体的には、Ａβ１−４２のレベルは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＥＬＩＳＡｓを用いて測定し、タンパク質レベルは、ウエスタンブロット分析および各タンパク質に特異的な抗体を用いて測定した。図１８に示すように、Ａβ１−４２レベルは、薬物の投与を受けなかった被験体と比較して薬物の投与を受けた被験体において有意に低下した。ＰＳ−１、Ｎｉｃａｓを含むいくつかのＡβ処理酵素は、薬物の投与を受けなかった被験体と比較して薬物の投与を受けた被験体において有意に低下した。興味深いことに、ＢＡＣＥ、ＡＰＨ−１およびＰＥＮ−２のレベルは、薬物の投与を受けなかった被験体と比較して薬物の投与を受けた被験体において増加した。
【０１７２】
さらに、タウリン酸化に関与する酵素レベルについても被験体の前頭葉検体において検討した。図１９に示すように、リン酸化ｐ−Ａｋｔ、ｐ−ＧＳＫ−３βおよびｐ−ＲＯＣＫのレベルはすべて、薬物の投与を受けなかった被験体と比較して薬物の投与を受けた被験体において増加した。Ａｋｔ、ＧＳＫ−３βおよびＲＯＣＫの総タンパク質レベルは、薬物の投与を受けた被験体と受けなかった被験体とで同等であった。上述のように、活性化ｐ−Ａｋｔは、ＧＳＫ−３βをリン酸化し、それが次に不活性化され、タウリン酸化を減少させる。これらの結果は、カルシウムチャネル遮断薬の使用によってタウリン酸化を減少させることができ、これがアルツハイマー病の治療に有用であるという結論と一致している。
【０１７３】
このヒト関連試験で、カルシウムチャネル遮断薬の使用によりヒト患者におけるＡβ１−４２レベルおよび特定のＡβ１−４２処理酵素が減少し、タウリン酸化に関与する酵素が不活性化されると思われることが示され、カルシウムチャネル遮断薬がアルツハイマー病の治療に有効である可能性があることが分かる。
【０１７４】
（実施例１１）
ニトロソニフェジピンの合成
この実施例においてはニトロソニフェジピンを合成するために光化学的合成を用いた。具体的には、ニフェジピン（２０ｍｇ）をパイレックス（登録商標）製培養チューブ中で１０ｍＬのアセトニトリルに溶解し、蓋をし、２５０Ｗハロゲンランプ（３Ｍ ＥＶＷ）で３０分間光分解した。ロータリーエバポレーターで溶媒を除去することにより生成物を分離して、青緑色油（１８．１ｍｇ、収率９４％）を得た。ＧＣ／ＭＳ分析により、ニトロソニフェジピンへの９８．５％を超える変換が示された。具体例としての結果を図２０に示す。
【０１７５】
（実施例１２）
ヒト患者の治療
ＭＭＳＥスコアに基づいてＭＣＩを有すると判定されたヒト患者にニトロソニフェジピンを１日当たり１０００ｍｇの用量で投与する。ニトロソニフェジピンを１日３回患者による経口投与用の錠剤として与える。
【０１７６】
ＣＤＲスコアに基づいて早期アルツハイマー病（ＥＡＤ）を有すると判定された別のヒト患者にニトロソニフェジピンを１日当たり８００ｍｇの用量で投与する。ニトロソニフェジピンを１日３回患者による経口投与用の錠剤として与える。
【０１７７】
患者から得られる流体試料中のＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルに基づいてＭＣＩを有すると判定されたヒト患者にニトロソニフェジピンを１日当たり１０００ｍｇの用量で投与する。ニトロソニフェジピンを１日４回患者による経口投与用の錠剤として与える。
【０１７８】
同等のもの
前述のものは、本発明の特定の非限定的実施形態の記述であった。当業者は、本明細書で述べた本発明の特定の実施形態と多くの同等のものを認識する、または常用の実験のみを用いて確認することができるであろう。当業者は、以下の特許請求の範囲に定義するような本発明の精神または範囲から逸脱することなく、この記述の様々な変更および修正を行うことができることを理解するであろう。
【０１７９】
特許請求の範囲において、「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」などの冠詞は、特に示さない限り、または特に文脈から明らかでない限り、１つまたは複数を意味することがある。群の１つまたは複数のメンバーの間に「または（ｏｒ）」を含む請求項または記述は、特に示さない限り、または特に文脈から明らかでない限り、群メンバーの１つ、複数またはすべてが所定の生成物若しくはプロセスに存在し、用いられている、または他の状態で関連する場合、満足されていると見なされる。本発明は、群の厳密に１つのメンバーが所定の生成物若しくはプロセスに存在し、用いられている、または他の状態で関連する実施形態を含む。本発明はまた、群メンバーの複数またはすべてが所定の生成物若しくは方法に存在し、用いられている、または他の状態で関連する実施形態を含む。さらに、本発明は、１つ若しくは複数の請求項からのまたは記述の関連部分からの１つまたは複数の制限、要素、語句、記述用語等が別の請求項に導入されている、すべての変化、組合せおよび並べ替えを包含することを理解すべきである。例えば、別の請求項に従属する任意の請求項は、同じ基本請求項に従属する別の任意の請求項に見いだされる１つまたは複数の制限を含むように修正することができる。さらに、請求項が組成物を列挙している場合、特に示さない限り、または矛盾若しくは不一致が生ずることが当業者に明らかでない限り、本明細書で開示した目的のいずれかのために組成物を使用する方法が含まれ、本明細書で開示した調製する方法のいずれかまたは当技術分野で公知の他の方法に従って組成物を作製する方法が含まれることを理解すべきである。さらに、本発明は、本明細書で開示した組成物を調製する方法のいずれかに従って調製された組成物を包含する。
【０１８０】
要素が例えば、マーカッシュ群記載形式でリストとして表されている場合、要素の各サブグループも開示され、いずれかの要素（単数または複数）を群から除去することができることを理解すべきである。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、開かれていることを意図し、追加の要素またはステップを含めることを許容することも指摘される。一般的に、本発明または本発明の態様が特定の要素、特徴、ステップ等を含むと見なされる場合、本発明の特定の実施形態または本発明の態様は、そのような要素、特徴、ステップ等からなるまたはから本質的になることを理解すべきである。簡単の目的のために、それらの実施形態は、本明細書にこれらの語で具体的に示さなかった。したがって、１つまたは複数の要素、特徴、ステップ等を含む本発明の各実施形態について、本発明は、それらの要素、特徴、ステップ等からなるまたはから本質的になる実施形態も提供する。
【０１８１】
範囲を示す場合、端点が含まれる。さらに、特に示さない限り、或いは文脈および／または当業者の理解から特に明らかでない限り、範囲として表されている値は、文脈上別の状態であることが明確に示されない限り、範囲の下限の単位の１０分の１までの、本発明の異なる実施形態における表示された範囲内の特定の値をとり得ることを理解すべきである。特に示さない限り、或いは文脈および／または当業者の理解から特に明らかでない限り、範囲として表されている値は、所定の範囲内の任意の部分範囲をとり得、部分範囲の端点は、範囲の下限の単位の１０分の１と同じ程度の精度で表されることも理解すべきである。
【０１８２】
さらに、本発明の特定の実施形態はいずれも、いずれか１つまたは複数の請求項から明示的に除外することができることを理解すべきである。本発明の組成物および／または方法の実施形態、要素、特徴、適用または態様はいずれも、いずれか１つまたは複数の請求項から明示的に除外することができる。簡潔の目的のために、１つまたは複数の要素、特徴、目的または態様が除外されている実施形態のすべては、本明細書に明示的に示さない。
【０１８３】
参考文献の組込み
本願で引用したすべての刊行物および特許文書は、あたかもそれぞれ個々の刊行物または特許文書の内容が本願に組み込まれたかのようなものと同じ程度にそれらの全体として参照により組み込まれている。
【技術分野】
【０００１】
関連出願への参照
この出願は、２００９年３月１５日に出願された米国仮特許出願第６１／２１６，４５２号および２００９年８月１７日に出願された米国仮特許出願第６１／２３４，５５１号（これらの両方は、それらの全体が参考として本明細書に援用される）の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、老齢人口における従来よりも多数の人を冒す、周知であるが、完全には理解されていない進行性神経変性疾患である。現在、アルツハイマー病は、４００万人のアメリカ人を冒している。米国国立老化研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｎ Ａｇｉｎｇ）による統計で、予防戦略が策定されない限り、２０４０年までに１４００万人のアルツハイマー病を有するアメリカ人が存在する可能性があることが推定されている。
【０００３】
アルツハイマー病の最も初期の臨床徴候は、軽度認知障害（Ｍｉｌｄ Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ Ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ）（ＭＣＩ）と呼ばれる症候群として記述される。ＭＣＩの検出により、必要な生活様式の変更を計画し、実行することが可能であり得るが、ＭＣＩのアルツハイマー病への進行を未然に防ぐまたはアルツハイマー病を治療する療法は、現在のところ利用可能ではない。
【０００４】
２００７年の米国上院の証人喚問において、ＦＤＡ長官Ｄｒ．Ａｎｄｒｅｗ Ｃ．ｖｏｎ Ｅｓｃｈｅｎｂａｃｈは「今日のアルツハイマー病の推定される４５０万例が２０５０年までに約１６００万例に上昇すると予測することができる」と述べた。Ｄｒ．Ｅｓｃｈｅｎｂａｃｈは、ＡＤ治療用に５つの薬物、すなわち、タクリン、リバスチグミン、ガランタミン、ドネペジルおよびメマンチンが承認されたことを説明した。その最初の４つは、脳内のアセチルコリンレベルを上昇させることにより作用し、その最後のものは、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体の拮抗薬である。このようにして、Ｄｒ．Ｅｓｃｈｅｎｂａｃｈは、５つの承認薬のいずれも［ＡＤ］患者における基礎をなす神経変性を予防することも、その進行を遅らせることもないことが示されたことを指摘した。彼は、「我々は、この潜行性疾患並びに他の神経疾患の基礎をなす原因をいつの日か治療することができる可能性がある新薬を世界の他の国々と共に待望している・・・」と続けた。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、ニフェジピンおよびその酸化またはニトロソ誘導体がＡβ１−４０の発生を効果的に阻害し、Ａβ処理酵素を減少させ、関連する生化学的経路をｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで不活性化するという発見を包含する。したがって、本発明は、とりわけ、軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を効果的に治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防すること、並びにＭＣＩからＡＤへの進行を遅延させることができる新規な治療方法および組成物を提供する。
【０００６】
一態様において、本発明は、治療上有効量の１つまたは複数の治療薬および薬学的に許容される担体を含む、ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防するのに適する医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態において、治療薬は、本明細書で定義し、述べる式（Ｉａ）の治療薬である。いくつかの実施形態において、治療薬は、本明細書で定義し、述べる式（Ｉｂ）の治療薬である。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、カルシウムチャネル遮断薬である。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、カルシウムチャネル遮断薬ではない。
【０００７】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、酸化ニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニトロソニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンの混合物を含む。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、５５％のニトロソニフェジピン、１１％の酸化ニフェジピンおよび３４％のニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本明細書で述べる種々の治療薬は、サイロキシン（Ｔ４）および／またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）をさらに含む。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）および／またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）を含む。
【０００８】
いくつかの実施形態において、本発明による医薬組成物は、１用量当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ（例えば、約０．０１〜約２００ｍｇ、約０．０１〜約１００ｍｇ、約０．１〜約５０ｍｇ、約０．０１〜約１０ｍｇ、約０．０１〜約５ｍｇ、約０．０１〜約２．５ｍｇ、約０．０１〜約２．０ｍｇ、約０．０１〜約１．５ｍｇ、約０．０１〜約１．０ｍｇ、約０．０１〜約０．５ｍｇ、約０．０１〜約０．１ｍｇ）の治療上有効量の治療薬を含む。いくつかの実施形態において、本発明による医薬組成物は、１用量当たり約１０ｍｇ〜２．５ｇ（例えば、約１０ｍｇ〜２．０ｇ、約１０ｍｇ〜１．５ｇ、約１０〜約１０００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約５００ｍｇ）の治療上有効量のニトロソニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本発明による医薬組成物は、経口、皮下、静脈内、経皮、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻または直腸投与用に製剤化されている。特定の実施形態において、本発明による医薬組成物は、経口投与用に製剤化されている。いくつかの実施形態において、本発明による医薬組成物は、即時または延長放出用に製剤化されている。
【０００９】
別の態様において、本発明は、ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防する方法であって、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に関連する少なくとも１つの症状または特徴が存在度、強さ、重症度若しくは頻度において低下するか、またはその発現が遅延するように、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、または罹患しやすい被験体に治療上有効量の１つまたは複数の治療薬を投与するステップを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、症状または特徴は、認知機能低下、脳内のアミロイドβタンパク質の産生、β−セクレターゼ活性、γ−セクレターゼ活性、対らせん状細線維（ｐａｉｒｅｄ ｈｅｌｉｃａｌ ｆｉｌａｍｅｎｔ）、リン酸化タウタンパク質、および／または中枢神経系における免疫若しくは炎症状態である。いくつかの実施形態において、γ−セクレターゼ活性は、プレセニリン１（ＰＳ−１）、ニカストリン、ＡＰＨ−１および／またはＰＥＮ−２活性を阻害することにより低下する。いくつかの実施形態において、γ−セクレターゼ活性は、オーファンＧ共役受容体３（ＧＰＣＲ−３）活性を阻害することにより低下する。いくつかの実施形態において、免疫または炎症状態は、中枢神経系における１つまたは複数のサイトカイン（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α）のレベルを低下させることにより低減する。
【００１０】
いくつかの実施形態において、本発明による方法に用いる治療薬は、本明細書で定義し、述べる式（Ｉａ）の治療薬である。いくつかの実施形態において、本発明による方法に用いる治療薬は、本明細書で定義し、述べる式（Ｉｂ）の治療薬である。いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、カルシウムチャネル遮断薬である。いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、カルシウムチャネル遮断薬ではない。
【００１１】
いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、ニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、酸化ニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、適切な治療薬は、ニトロソニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本発明による方法に用いる適切な治療薬は、ニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンの混合物を含む。いくつかの実施形態において、本発明による方法に用いる適切な治療薬は、５５％のニトロソニフェジピン、１１％の酸化ニフェジピンおよび３４％のニフェジピンを含む。いくつかの実施形態において、本明細書で述べる適切な薬剤は、Ｔ３／Ｔ４をさらに含む。いくつかの実施形態において、ニフェジピン、酸化ニフェジピンおよび／またはニトロソニフェジピンを含む本発明の方法に用いる適切な治療薬は、サイロキシン（Ｔ４）および／またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）をさらに含む。
【００１２】
いくつかの実施形態において、本発明による方法は、治療を必要とする被験体に１用量当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ（例えば、約０．０１〜約２００ｍｇ、約０．０１〜約１００ｍｇ、約０．１〜約５０ｍｇ、約０．０１〜約１０ｍｇ、約０．０１〜約５ｍｇ、約０．０１〜約２．５ｍｇ、約０．０１〜約２．０ｍｇ、約０．０１〜約１．５ｍｇ、約０．０１〜約１．０ｍｇ、約０．０１〜約０．５ｍｇ、約０．０１〜約０．１ｍｇ）の治療上有効量の治療薬を投与する。いくつかの実施形態において、本発明による方法は、治療を必要とする被験体に１用量当たり約１０ｍｇ〜約２．５ｇ（例えば、約１０ｍｇ〜約２．０ｇ、約１０ｍｇ〜約１．５ｇ、約１０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、または約１０ｍｇ〜約５００ｍｇ）の治療上有効量のニトロソニフェジピンを含む治療薬を投与する。いくつかの実施形態において、本発明による方法に用いる薬剤は、経口、皮下、静脈内、経皮、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻または直腸投与により投与する。特定の実施形態において、本発明による方法に用いる薬剤は、経口投与する。
【００１３】
いくつかの実施形態において、本発明の方法により、薬剤を月１回、隔週に１回または週１回投与する。いくつかの実施形態において、本発明の方法により、薬剤を毎日投与する。いくつかの実施形態において、本発明の方法により、薬剤を１日２回、１日３回または１日４回投与する。
【００１４】
いくつかの実施形態において、本発明の方法により治療した被験体は、対照と比較してバイオマーカー（例えば、タンパク質バイオマーカー複合体）のレベルの低下または上昇を示す。いくつかの実施形態において、適切なバイオマーカーは、トランスサイレチンタンパク質および／またはプロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼタンパク質の少なくとも１つ、並びにトランスサイレチン、プロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼ、β−２−ミクログロブリン、シスタチンＣ、スーパーオキシドジスムターゼ［Ｃｕ−Ｚｎ］、血漿レチノール結合タンパク質、ホスファチジルエタノールアミン結合タンパク質、カルボニックアンヒドラーゼ２および／またはセロトランスフェリンタンパク質から選択される少なくとも１つの第２の異なるタンパク質を含む、タンパク質バイオマーカー複合体である。いくつかの実施形態において、適切なタンパク質バイオマーカー複合体は、プロスタグランジンＤ２シンターゼおよびトランスサイレチン（ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体）を含む。いくつかの実施形態において、適切なバイオマーカーは、（ｉ）βアミロイド４０（Ａβ４０）、（ｉｉ）βアミロイド４２（Ａβ４２）、（ｉｉｉ）Ａβ４０とＡβ４２との比、および（ｉｖ）リン酸化タウと総タウとの比の１つまたは複数を含む。いくつかの実施形態において、バイオマーカーは、被験体から得られる流体試料（例えば、ＣＳＦ、血清、全血、血漿、尿、腹水、唾液、組織滲出液、洗浄液およびそれらの組合せ）中で測定される。いくつかの実施形態において、適切な対照は、健常個体、所定の病期を有するアルツハイマー病に罹患した患者、治療前の被験体およびそれらの組合せからなる群から選択される被験体におけるバイオマーカーのレベルを示す。
【００１５】
いくつかの実施形態において、治療すべき被験体は、認知障害を示す試験スコアを有する。いくつかの実施形態において、認知障害を示す試験スコアは、ＭＭＳＥスコア（例えば、２７より低い、例えば、２１〜２６）である。いくつかの実施形態において、認知障害を示す試験スコアは、ＣＤＲスコア（例えば、０を上回る、例えば、０．５、例えば、１）である。
【００１６】
いくつかの実施形態において、本発明による方法は、バイオマーカーのレベルおよび／または認知試験スコアに基づいて治療薬の治療上有効量を最初に決定するステップをさらに含む。
【００１７】
さらに別の態様において、本発明は、ニトロソニフェジピンおよびニフェジピンを含む固形経口剤形を提供するものであり、ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約１：１（例えば、少なくとも約２：１、少なくとも約４：１、少なくとも約８：１、少なくとも約１６：１、少なくとも約３２：１、少なくとも約６４：１、少なくとも約１００：１、少なくとも約２００：１、少なくとも約５００：１または少なくとも約１０００：１）である。いくつかの実施形態において、本発明による固形経口剤形は、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤（例えば、結合剤、緩衝剤、希釈剤、分散剤、皮膚軟化剤、被膜形成剤（ｆｉｌｍ−ｆｏｒｍｉｎｇ ａｇｅｎｔ）、滑剤、光遮断剤、保存剤、溶媒、安定化剤、界面活性剤、懸濁化剤および／または等張化剤（ｔｏｎｉｃｉｔｙ ａｇｅｎｔ））をさらに含む。いくつかの実施形態において、固形剤形は、制御または延長放出用である。いくつかの実施形態において、固形剤形は、即時放出用である。
【００１８】
本願において、特に明記しない限り、「または」の使用は、「および／または」を意味する。本願で用いる場合、「含む」という用語並びに「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」などの当用語の変形形態は、他の添加物、成分、整数またはステップを除外することを意図しない。本願で用いる場合、「約」および「おおよそ」という用語は、同等のものとして用いる。約／おおよそを付けてまたは付けないで本願で用いるあらゆる数表示は、関連技術分野の当業者により理解されているあらゆる通常の変動を有効範囲に包含することを意味する。
【００１９】
図面は、例示の目的のみのためであって、制限のためのものではない。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】図１は、対照上皮細胞、アクロレインで処理した対照上皮細胞および後期ＡＤ上皮細胞により細胞培養培地中で発現したＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の例示的なウエスタンブロット分析を示す図である。
【図２】図２は、対照上皮細胞またはＡＤ上皮細胞の培地で処理した皮質ニューロンの具体例としての生存データを示す図である。
【図３】図３は、ＰＨＦ１免疫陽性が、ＰＤＳ／ＴＴＲタンパク質複合体への曝露に起因してＳＹ５Ｙ細胞において検出されたことを示す具体例としての結果を示す図である。
【図４】図４は、アクロレイン、アクロレイン＋Ｔ３／Ｔ４、アクロレイン＋ニフェジピン混合物（ニトロソニフェジピン５５％、酸化ニフェジピン１１％およびニフェジピン３４％）並びにアクロレイン＋ニフェジピン混合物およびＴ３／Ｔ４で処理した対照上皮細胞により発現したＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の減少を示す具体例としてのウエスタンブロットデータを示す図である。
【図５】図５は、アクロレイン、アクロレイン＋Ｔ３／Ｔ４、アクロレイン＋ニフェジピン混合物（ニトロソニフェジピン５５％、酸化ニフェジピン１１％およびニフェジピン３４％）並びにアクロレイン＋ニフェジピン混合物およびＴ３／Ｔ４で処理した培養における免疫染色により測定したＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞数を要約した図である。
【図６】図６は、共焦点顕微鏡法およびカルシウム蛍光色素により測定したとき、ニフェジピン混合物が新鮮ニフェジピンと比較してカルシウムチャネル遮断薬として機能しないことを示す図である。
【図７】図７は、炎症性サイトカインの産生がニフェジピン混合物により阻害されることを示す具体例としての結果を示す図である。
【図８】図８は、アクロレイン並びにニフェジピン、類似体、混合物およびＴ３／Ｔ４の組合せで処理した上皮細胞の培地で処理したＳＹ５Ｙ培養のＰＨＦ−１免疫染色の定量化を示す図である。
【図９】図９は、Ａβ１−４２の発生がニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピンおよびＴ３／Ｔ４により阻害されることを示す具体例としての結果を示す図である。
【図１０】図１０は、Ｈ４細胞からのＡβ１−４２の産生に対するＴ３／Ｔ４の存在下および非存在下でのニフェジピン、ニフェジピン類似体およびニフェジピン混合物の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１１】図１１は、Ｈ４神経膠腫培養におけるＡβ１−４２の発生に対するアミロドピン（Ａｍｉｌｏｄｐｉｎｅ）、ジリチアゼム（Ｄｉｌｉｔｉａｚｅｍ）、フェロジピン（Ｆｅｌｏｄｉｐｉｎｅ）、イスラジピン（Ｉｓｒａｄｉｐｉｎｅ）、ニカルジピン（Ｎｉｃａｒｄｉｐｉｎｅ）およびニモジピン（Ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ）などの公知のカルシウムチャネル遮断薬の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１２】図１２は、ニトロソニフェジピンがＢＡＣＥ活性を有意に阻害することを示す具体例としての結果を示す図である。
【図１３】図１３は、Ｔ３／Ｔ４の存在下および非存在下でのＰＳ−１、ＰＥＮ−２、ＢＡＣＥ−１およびニカストリンに対するニフェジピン混合物の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１４】図１４は、マウスモデルにおけるＡβ１−４０の発生および特定のＡβ１−４０処理酵素に対するニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１５】図１５は、ニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４が薬物を急性投与したＨ４培養またはマウスにおけるＧＰＣＲ−３のレベルを低下させたことを示す具体例としての結果を示す図である。ＧＰＣＲ−３のレベルは、ウエスタンブロット分析を用いて測定した。
【図１５Ａ】図１５ａは、Ｔ３／Ｔ４の存在下および非存在下でのＨ４培養におけるＧＰＣＲ−３のレベルに対する他のクラスの血圧薬の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１６】図１６は、対応する化合物で処理したマウス脳において測定したタウリン酸化に関与する酵素のレベルに対するニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４の効果を示す具体例としての結果を示す図である。
【図１７】図１７は、ヒト関連試験に基づくＭＭＳＥ対年齢のＮＬＭＩＸＥＤモデルにより適合させた具体例としての軌線を示す図である。
【図１８】図１８は、剖検に至った神経心理試験スコア関連試験の被験体の前頭葉検体におけるＰＳ−１、Ｎｉｃａｓ、ＢＡＣＥ、ＡＰＨ−１およびＰＥＮ−２などのＡβ１−４２およびＡβ処理酵素のレベルを示す具体例としての結果を示す図である。４例の被験体は、ニフェジピンを含むカルシウムチャネル遮断薬の投与を受け、４例の被験体は、カルシウムチャネル遮断薬の投与を受けなかった。Ａβレベルは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＥＬＩＳＡを用いて測定した。タンパク質レベルは、ウエスタンブロット分析および各タンパク質に特異的な抗体を用いて測定した。
【図１９】図１９は、図１８に示した同じ被験体からの前頭葉検体におけるタウリン酸化に関与した酵素のレベルを示す具体例としての結果を示す図である。
【図２０】図２０は、ニトロソニフェジピンの光化学的合成の具体例としての結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
定義
別に定義しない限り、本明細書で用いる科学および技術用語並びに命名は、本発明が関連する当業者によって一般的に理解されているのと同じ意味を有する。一般的に、細胞培養の手順、感染、分子生物学の方法などは、当技術分野で用いられている一般的な方法である。そのような標準的な技術は、例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、２００１年、およびＳａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第３版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｎ．Ｙ．、２００１年などの参照マニュアルに見いだすことができる。
【００２２】
本発明がより容易に理解されるために、特定の用語を最初に定義する。以下の用語および他の用語のさらなる定義は、本明細書を通して示す。
【００２３】
アルツハイマー患者：本明細書で用いる場合、「アルツハイマー患者」、「ＡＤ患者」および「ＡＤと診断された個体」という用語はすべて、ＡＤと診断されたまたはアルツハイマー病（ＡＤ）の確度の高い診断を下された個体を指す。
【００２４】
動物：本明細書で用いる場合、「動物」という用語は、動物界の任意の構成員を意味する。いくつかの実施形態において、「動物」は、発育の任意の段階のヒトを意味する。いくつかの実施形態において、「動物」は、発育の任意の段階のヒト以外の動物を意味する。特定の実施形態において、ヒト以外の動物は、哺乳動物（例えば、げっ歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類の動物および／またはブタ）である。いくつかの実施形態において、動物は、哺乳動物、鳥、爬虫類の動物、両生類の動物、魚、昆虫および／または虫を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、動物は、トランスジェニック動物、遺伝子操作された動物および／またはクローンであってよい。
【００２５】
おおよそ：本明細書で用いる場合、目的の１つまたは複数の値に適用される「おおよそ」または「約」という用語は、表示参照値と同様である値を意味する。特定の実施形態において、「おおよそ」または「約」という用語は、特に明記しない限りまたは文脈から他の状態が明らかでない限り（そのような数が可能な値の１００％を超える場合を除く）、表示参照値のいずれの方向でも（それより大きいまたは小さい）２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％またはより小さい範囲内に入る値の範囲を意味する。
【００２６】
生物学的流体試料：本明細書で用いる場合、「生物学的流体試料」という用語は、個体から得られ、診断またはモニタリングアッセイに用いることができる様々な種類の流体試料を包含する。当用語は、全血、血清または血漿、脳脊髄液（ＣＳＦ）、尿および生物学的起源の他の液体試料を包含する。当用語は、それらの調達後に試薬による処理、可溶化、またはタンパク質若しくはポリヌクレオチドなどの特定の成分の濃縮によるなどの何らかの方法で操作された試料も含む。
【００２７】
併用療法：「併用療法」という用語は、本明細書で用いる場合、２つまたはそれ以上の異なる医薬品が重複したレジメンで投与され、そのため、被験体が両医薬品に同時に曝露される状況を意味する。
【００２８】
対照：本明細書で用いる場合、「対照」という用語は、結果が比較される基準であるというその技術分野で理解されている意味を有する。一般的に、対照は、変数に関する結論を下すためにそのような変数を分離することにより実験の完全性を増大させるのに用いる。いくつかの実施形態において、対照は、コンパレータとするために試験反応またはアッセイと同時に実施される反応またはアッセイである。１つの実験において、「試験」（すなわち、試験される変数）を適用する。第２の実験において、「対照」、試験される変数は適用されない。いくつかの実施形態において、対照は、歴史的対照（すなわち、以前に実施された試験若しくはアッセイの、または以前に公知である量若しくは結果）である。いくつかの実施形態において、対照は、印刷または別の方法で保存された記録であるまたは含む。対照は、陽性対照または陰性対照であり得る。
【００２９】
投与レジメン：「投与レジメン」は、当用語を本明細書で用いる場合、期間により分離されて個別に投与される一連の単位用量（少なくとも１つ、しばしば２つ以上）を意味する。特定の治療薬に関する推奨される一連の用量（すなわち、投与の量、時期、経路等）は、その投与レジメンを構成する。
【００３０】
機能的：本明細書で用いる場合、「機能的」生体分子は、それを特徴づける特性および／または活性を示す形態の生体分子である。
【００３１】
阻害：本明細書で用いる場合、「阻害（ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）」、「阻害する（ｉｎｈｉｂｉｔ）」および「阻害すること（ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ）」は、目的のタンパク質または遺伝子の活性および／または発現を減少または低下させる過程または方法を意味する。一般的に、タンパク質または遺伝子を阻害することは、タンパク質または遺伝子の発現または当該活性を少なくとも１０％またはそれ以上、例えば、２０％、３０％、４０％、若しくは５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上低下させること、或いは本明細書で述べるまたは当技術分野で認められている１つ若しくは複数の方法により測定したとき１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、５０倍、１００倍またはそれ以上を超える発現または当該活性の減少を意味する。
【００３２】
ｉｎ ｖｉｔｒｏ：本明細書で用いる場合、「ｉｎ ｖｉｔｒｏ」という用語は、多細胞生物体内ではなく、人工的環境、例えば、試験管若しくは反応容器内、細胞培養等において起こる事象を意味する。
【００３３】
ｉｎ ｖｉｖｏ：本明細書で用いる場合、「ｉｎ ｖｉｖｏ」という用語は、ヒト以外の動物などの多細胞生物体内で起こる事象を意味する。
【００３４】
分離された：本明細書で用いる場合、「分離された」という用語は、（１）最初に生成したときに（天然および／または実験的環境にあるかを問わず）結合していた成分の少なくとも一部から分離された、且つ／または（２）人の手により生産され、調製され、且つ／または製造された物質および／または構成要素を意味する。分離された物質および／または構成要素は、最初に結合していた他の成分の少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％、約９８％、約９９％、実質的に１００％または１００％から分離することができる。いくつかの実施形態において、分離された薬剤は、約８０％、約８５％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％以上、実質的に１００％または１００％純粋である。本明細書で用いる場合、物質が他の成分を実質的に含まない場合、物質は「純粋」である。本明細書で用いる場合、「分離された細胞」という用語は、多細胞生物体に含まれていない細胞を意味する。
【００３５】
ＭＣＩを有する個体：本明細書で用いる場合、「ＭＣＩ（軽度認知障害）を有する個体」は、一般的に健忘型ＭＣＩの次の基準（Ｐｅｔｅｒｓｅｎら、Ａｒｃｈ Ｎｅｕｒｏｌ、５６巻、３０３〜３０８頁（１９９９年）を満たす個体である：１）情報提供者によって確証される記憶に関する愁訴、２）年齢および教育と比較した客観的記憶障害、３）正常な一般的認知機能、４）日常生活の完全な活動、並びに５）被験体は認知症の基準を満たしていない。
【００３６】
ＥＡＤを有する個体：本明細書で用いる場合、「ＥＡＤ（初期または中等度アルツハイマー病）を有する個体」は、次の基準を示す個体である：１）以前のより高いレベルの認知機能の低下、２）記憶に加えて認知の１つまたは複数の領域の減退、３）０．５〜１の臨床的認知症尺度スコア、および４）認知症の他の原因を除外した臨床的検査。
【００３７】
ＬＡＤを有する個体：本明細書で用いる場合、「ＬＡＤ（重度または後期アルツハイマー病）を有する個体」は、高可能性ＡＤの標準的臨床診断基準（ＭｃＫｈａｎｎら、Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ、３４巻、９３９〜４８頁（１９８４年））を満たす個体である。
【００３８】
参照値：本明細書で用いる場合、「参照値」は、絶対値；相対値；上および／または下限を有する値；値の範囲；平均値（ａｖｅｒａｇｅ ｖａｌｕｅ）；中央値；平均値（ｍｅａｎ ｖａｌｕｅ）；または特定の対照若しくはベースライン値と比較した値であり得る。参照値は、例えば、ＡＤ、ＭＣＩまたは認知障害を有するが初期の時点の個体からの試料から得られた値、或いは試験される個体以外のＡＤ患者または「正常」個体、すなわちＡＤと診断されなかった個体からの試料から得られた値などの個体試料の値に基づく値であってよい。参照値は、ＡＤ患者または正常個体などからの多数の試料に、或いは試験される試料を含むまたは除外した試料のプールに基づく値であってよい。
【００３９】
神経疾患：本明細書で用いる場合、「神経疾患」という語句は、中枢神経系の疾患または障害を意味する。神経疾患は、多発性硬化症、神経障害、並びにＡＤ、パーキンソン病、筋委縮側索硬化症（ＡＬＳ）、軽度認知障害（ＭＣＩ）および前頭側頭型認知症などの神経変性障害を含む。
【００４０】
正常個体：本明細書で用いる場合、「正常」個体または「健常」個体は、ＡＤまたはＭＣＩを有さないと医師により評価され、または評価されると思われ、２５〜３０の範囲内のミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）（Ｆｏｌｓｔｅｉｎら、Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｒｅｓ、１９７５年、１２巻、１２８９〜１９８頁に言及されている）スコアを有する、またはＭＭＳＥスコアを達成すると思われる個体を意味する。「正常」個体は、評価される個体と同年齢である個体を含むが、それに限定されない、５〜１０歳の範囲内で一般的に同年齢である。
【００４１】
タンパク質：本明細書で用いる場合、「タンパク質」という用語は、ポリペプチド（すなわち、ペプチド結合により互いに連結された少なくとも２つのアミノ酸の連なり）を意味する。タンパク質は、アミノ酸以外の部分を含んでいてよく（例えば、糖タンパク質、ムコ多糖タンパク質等であってよく）、且つ／または別の状態に処理若しくは修飾されていてよい。当業者は、「タンパク質」が細胞により産生された完全なポリペプチド鎖（シグナル配列を含むまたは含まない）であり得る、或いはその特徴的部分であり得ることを理解するであろう。当業者は、タンパク質が例えば、１つ若しくは複数のジスルフィド結合により連結されたまたは他の手段により結合した複数のポリペプチド鎖を時として含み得ることを理解するであろう。ポリペプチドは、Ｌ−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸または両方を含んでいてよく、当技術分野で公知の様々なアミノ酸修飾または類似体のいずれかを含んでいてよい。有用な修飾は、例えば、末端アセチル化、アミド化等を含む。いくつかの実施形態において、タンパク質は、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、合成アミノ酸およびそれらの組合せを含んでいてよい。「ペプチド」という用語は、約１００アミノ酸未満の長さを有するポリペプチドを指すのに一般的に用いられる。
【００４２】
被験体：本明細書で用いる場合、「被験体」または「患者」という用語は、例えば、実験、診断、予防および／または治療の目的のために本発明による組成物を投与することができる任意の生物体を意味する。一般的な被験体は、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒト以外の霊長類の動物およびヒトなどの哺乳動物；昆虫；虫等）を含む。
【００４３】
実質的に：本明細書で用いる場合、「実質的に」という用語は、完全またはほぼ完全な程度または度合の目的の特徴または特性を示す定性的な状態を意味する。生物学分野の当業者は、生物学的および化学的現象が完結するまで進み、且つ／または完全に向かいまたは絶対的結果を達成若しくは回避することはあるにしても極めてまれであることを理解するであろう。したがって、「実質的に」という用語は、多くの生物学的および化学的現象に固有の完全の欠如の可能性をとらえるために本明細書で用いる。
【００４４】
に罹患した：疾患、障害および／または状態「に罹患して」いる個体は、疾患、障害および／または状態を有すると診断された、或いは疾患、障害および／または状態の１つまたは複数の症状を示す。
【００４５】
に罹りやすい：疾患、障害および／または状態「に罹りやすい」個体は、疾患、障害および／または状態を有すると診断されなかった。いくつかの実施形態において、疾患、障害および／または状態に罹りやすい個体は、疾患、障害および／または状態の症状を示さないことがある。いくつかの実施形態において、疾患、障害および／または状態に罹りやすい個体は、疾患、障害および／または状態を発現する。いくつかの実施形態において、疾患、障害および／または状態に罹りやすい個体は、疾患、障害および／または状態を発現しない。
【００４６】
治療上有効量：本明細書で用いる場合、治療薬の「治療上有効量」という用語は、疾患、障害および／または状態を治療し、診断し、予防し、且つ／またはその症状（単数または複数）の発現を遅延させるために疾患、障害および／または状態に罹患したまたは罹りやすい被験体に投与する場合に十分である量を意味する。
【００４７】
治療薬：本明細書で用いる場合、「治療薬」という語句は、被験体に投与した場合に治療効果を有し、且つ／または所望の生物学的および／または薬理学的効果を引き出す薬剤を意味する。本明細書で用いる場合、「治療薬」および「薬剤」という用語は、同義で用いる。
【００４８】
治療すること：本明細書で用いる場合、「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語は、特定の疾患、障害および／または状態の１つ若しくは複数の症状または特徴を部分的若しくは完全に緩和し、改善し、軽減し、阻害し、予防し、その発現を遅延させ、その重症度を低下させ、且つ／または発生率を低下させるために用いられる任意の方法を意味する。治療は、疾患に関連する病状を発現するリスクを低減する目的のために疾患の徴候を示さず、且つ／または疾患の初期の徴候のみを示す被験体に施すことができる。
【００４９】
特定の官能基および化学用語の定義は、下により詳細に述べる。本発明の目的のために、化学元素は、Ｐｅｒｉｏｄｉｃ Ｔａｂｌｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｌｅｍｅｎｔｓ、ＣＡＳ ｖｅｒｓｉｏｎ、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｃｓ、７５版、内表紙に従って同定し、特定の官能基は、その中に記載されているように一般的に定義する。さらに、有機化学の一般的原則、並びに特定の官能基部分および反応性は、Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｔｈｏｍａｓ Ｓｏｒｒｅｌｌ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｂｏｏｋｓ、Ｓａｕｓａｌｉｔｏ、１９９９年；Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｍａｒｃｈ、Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、５版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、２００１年；Ｌａｒｏｃｋ、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ， Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８９年；Ｃａｒｒｕｔｈｅｒｓ、Ｓｏｍｅ Ｍｏｄｅｒｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、３版、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、１９８７年に記載されている。
【００５０】
本発明の化合物は、特定の幾何学的形または立体異性体で存在し得る。本発明は、本発明の範囲内に入る、シスおよびトランス異性体、ＲおよびＳ鏡像異性体、ジアステレオマー、（Ｄ）異性体、（Ｌ）異性体、それのラセミ混合物、並びにそれの他の混合物を含むそのようなすべての化合物を企図する。
【００５１】
脂肪族：「脂肪族」または「脂肪族基」という用語は、本明細書で用いる場合、直鎖（すなわち、非分枝）、分枝、または脂環式（縮合、架橋およびスピロ縮合多環式を含む）であってよく、完全に飽和されていてよく、或いは不飽和の１つまたは複数の単位を含有してもよいが、芳香族ではない炭化水素部分を示す。特に明記しない限り、脂肪族基は、１〜６個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、脂肪族基は、１〜４個の炭素原子を含有する、さらに他の実施形態において、脂肪族基は、１〜３個の炭素原子を含有する。適切な脂肪族基は、直鎖または分枝アルキル、アルケニルおよびアルケニル基、並びに（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルケニル）アルキルまたは（シクロアルキル）アルケニルなどのそれらのハイブリッドを含むが、これらに限定されない。
【００５２】
アルケニル：「アルケニル」という用語は、本明細書で用いる場合、１個の水素原子の除去による少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する直鎖または分枝鎖脂肪族部分に由来する一価基を示す。特定の実施形態において、アルケニルは、２〜６個の炭素原子を含有する。特定の実施形態において、アルケニルは、２〜５個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルケニルは、２〜４個の炭素原子を含有する。他の実施形態において、アルケニルは、２〜３個の炭素原子を含有する。アルケニル基は、例えば、エテニル（「ビニル」）、プロペニル（「アリル」）、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イルなどを含む。
【００５３】
アルキル：「アルキル」という用語は、本明細書で用いる場合、１個の水素原子の除去による１個から６個までの炭素原子を含有する脂肪族部分に由来する一価飽和直鎖または分枝鎖炭化水素遊離基を意味する。いくつかの実施形態において、アルキルは、１〜５個の炭素原子を含有する。別の実施形態において、アルキルは、１〜４個の炭素原子を含有する。さらに他の実施形態において、アルキルは、１〜３個の炭素原子を含有する。さらに別の実施形態において、アルキルは、１〜２個の炭素を含有する。アルキル遊離基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−デシル、ｎ−ウンデシル、ドデシルなどを含むが、これらに限定されない。
【００５４】
アルキニル：「アルキニル」という用語は、本明細書で用いる場合、１個の水素原子の除去による少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する直鎖または分枝鎖脂肪族部分に由来する一価基を意味する。特定の実施形態において、アルキニルは、２〜６個の炭素原子を含有する。特定の実施形態において、アルキニルは、２〜５個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルキニルは、２〜４個の炭素原子を含有する。別の実施形態において、アルキニルは、２〜３個の炭素原子を含有する。代表的なアルキニル基は、エチニル、２−プロピニル（「プロパギル」）、１−プロピニルなどを含むが、これらに限定されない。
【００５５】
アミノ：「アミノ」という用語は、本明細書で用いる場合、式（−ＮＨ２）の基を意味する。
【００５６】
アルコキシ：「アルコキシ」という用語は、式（−ＯＲｉ）の「置換ヒドロキシル」を指し、式中Ｒｉは、本明細書で定義したアルキル基であり、酸素部分が親分子に直接結合している。
【００５７】
アルキルアミノ：「アルキルアミノ」という用語は、式（−ＮＲｈ２）の「置換アミノ」を指し、式中Ｒｈは、独立に水素または本明細書で定義したアルキル基であり、窒素部分が親分子に直接結合している。
【００５８】
脂環式：「脂環式」、「炭素環」、「カルボシクリル」、「カルボシクロ」または「炭素環式」という用語は、単独で、またはそれより大きい部分の一部として用いて、３〜１０構成員を有する、本明細書で述べる飽和または部分不飽和環状脂肪族単環式または二環式環系を指し、該脂肪族環系は、上で定義し、本明細書で述べるように場合によって置換されている。脂環式基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロヘプテニル、シクロオクチル、シクロオクテニルおよびシクロオクタジエニルを制限なしに含む。いくつかの実施形態において、シクロアルキルは、３〜６個の炭素を有する。「脂環式」、「炭素環」、「カルボシクリル」、「カルボシクロ」または「炭素環式」という用語は、遊離基または結合点が脂肪族環上にある、デカヒドロナフチル、テトラヒドロナフチル、デカリンまたはビシクロ［２．２．２］オクタンなどの１つまたは複数の芳香族または非芳香族環に縮合した脂肪族環も含む。
【００５９】
シアノ：「シアノ」という用語は、本明細書で用いる場合、式（−ＣＮ）の基を意味する。
【００６０】
ハロゲン：「ハロ」および「ハロゲン」という用語は、本明細書で用いる場合、フッ素（フルオロ、−Ｆ）、塩素（クロロ、−Ｃｌ）、臭素（ブロモ、−Ｂｒ）およびヨウ素（ヨード、−Ｉ）から選択される原子を意味する。
【００６１】
ニトロ：「ニトロ」という用語は、本明細書で用いる場合、式（−ＮＯ２）の基を意味する。
【００６２】
ニトロソ：「ニトロソ」という用語は、本明細書で用いる場合、式（−ＮＯ）の基を意味する。
【００６３】
部分不飽和：本明細書で用いる場合、「部分不飽和」という用語は、環原子間に少なくとも１つの二重または三重結合を含むが、芳香族ではない環部分を意味する。「部分不飽和」という用語は、不飽和の複数の部位を有する環を包含することを意図するが、本明細書で定義するアリールまたはヘテロアリール部分を含むことを意図しない。
【００６４】
不飽和の：「不飽和の」という用語は、本明細書で用いる場合、ある部分が不飽和の１つまたは複数の単位を有することを意味する。
【００６５】
詳細な説明
本発明は、とりわけ、軽度認知障害（ＭＣＩ）またはアルツハイマー病（ＡＤ）を効果的に治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防することができる治療用組成物および方法を提供する。
【００６６】
実施例の項で述べるように、本発明は、一部は、次の予期しない発見に基づいている：（１）ＭＣＩまたはアルツハイマー病の早期診断のためのバイオマーカーとして公知のタンパク質複合体ＰＤＳ／ＴＴＲが神経毒であり、細胞培養においてアルツハイマー病の特徴的な症状および特徴を誘発する；（２）ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬（ニフィジピンのような）、それらの酸化、ニトロソ誘導体および混合物（カルシウムチャネル遮断薬としてもはや機能しない）、および／またはＴ３／Ｔ４が、細胞培養におけるＡＤ様症状並びに基礎をなす酵素および生化学的経路を誘導するＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の能力を効果的に低下または消失させ、動物モデルにおけるＡβ１−４０ペプチドの内在性レベルを低下させる；並びに（３）ヒト関連試験で、ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬の使用が認知機能低下の発現を著しく遅延させることが示され、それにより、これらの化合物をアルツハイマー病を効果的に治療するのに用いることができることが分かった。さらに驚くべきことに、発明者らは、酸化、ニトロソニフィジピン誘導体および混合物がカルシウムチャネル遮断薬としてもはや機能しないことを見いだした。いかなる理論にも拘束されることを望むものではないが、ＭＣＩまたはアルツハイマー病を治療するこれらの化合物の能力は、カルシウムチャネルを遮断するそれらの能力と無関係である可能性があると考えられる。
【００６７】
したがって、本発明は、治療上有効量のニフェジピン、酸化またはニトロソニフェジピン誘導体、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せに基づくアルツハイマー病を効果的に治療することができる方法および組成物を企図するものである。いくつかの実施形態において、本発明は、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に関連する少なくとも１つの症状または特徴が存在度、強さ、重症度若しくは頻度において低下するか、またはその発現が遅延するように、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、または罹患しやすい被験体にニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される治療上有効量の薬剤を投与するステップを含む、ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防する方法を提供する。いくつかの実施形態において、本発明に適する薬剤は、カルシウムチャネル遮断薬として機能しない。
【００６８】
本発明による発明の方法は、治療のためおよび治療の有効性をモニターするために、疾患の初期におけるものを含む、患者を同定するための感度の高いバイオマーカーおよび／または認知試験スコアと組み合わせることができることがさらに企図される。したがって、本発明は、早期患者、特に、軽度認知障害（ＭＣＩ）と記述される症状を有する患者を治療し、且つ／またはＭＣＩのアルツハイマー病への進行を予防するのに特に有用である。
【００６９】
本発明の様々な態様は、以下の項で詳細に述べる。各項の使用は、本発明を限定することを意味しない。各項は、本発明のあらゆる態様に適用し得る。本願において、特に明記しない限り、「または」の使用は、「および／または」を意味する。
【００７０】
治療薬
本発明に適する治療薬は、カルシウムチャネル遮断薬（例えば、ニフェジピンなどのジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬）および非カルシウムチャネル遮断薬（例えば、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、ニフェジピンおよびその誘導体の混合物、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３））の両方を含む。
【００７１】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、以下の式（Ｉａ）若しくは（Ｉｂ）
【００７２】
【化１】
の治療薬
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ｒ１およびＲ２は、独立にＣ１−６脂肪族またはシアノであり、
Ｒ３およびＲ４は、独立にＣ１−６脂肪族であり、
Ｒ５は、ハロゲン、Ｃ１−６脂肪族、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、シアノ、ニトロまたはニトロソであり、
ｎは、０、１、２または３である。
【００７３】
いくつかの実施形態において、式（Ｉａ）の化合物は、「還元型」または「ジヒドロピリジン」と呼ばれる。いくつかの実施形態において、式（Ｉｂ）の化合物は、「酸化型」または「デヒドロ」と呼ばれる。
【００７４】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、独立にＣ１−３アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、独立にＣ１−４アルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ２は、メチルである。いくつかの実施形態において、Ｒ３およびＲ４は、メチルである。
【００７５】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニフェジピン、酸化ニフェジピンまたはニトロソニフェジピンである。本明細書で用いる場合、「ニトロソニフェジピン」は、下に示すようにニフェジピンの酸化類似体である。
【００７６】
【化２】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、アムロジピン、アラニジピン、アゼルニジピン、バルニジピン、ベニジピン、シルニジピン、クレビジピン、エホニジピン、フェロジピン、イスラジピン、ラシジピン、マニジピン、レルカニジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニルバジピン、ニモジピン、ニソルジピン、ニトレンジピンおよびプラニジピンなどのジヒドロピリジン（ｄｉｈｙｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅ）化合物を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、酸化アムロジピン、酸化アラニジピン、酸化アゼルニジピン、酸化バルニジピン、酸化ベニジピン、酸化シルニジピン、酸化クレビジピン、酸化エホニジピン、酸化フェロジピン、酸化イスラジピン、酸化ラシジピン、酸化マニジピン、酸化レルカニジピン、酸化ニカルジピン、酸化ニフェジピン、酸化ニルバジピン、酸化ニモジピン、酸化ニソルジピン、酸化ニトレンジピンおよび酸化プラニジピンを含むが、これらに限定されない。「酸化」ジヒドロピリジン化合物（例えば、酸化アムロジピン、酸化ニモジピン、酸化ニバルジピン）は前記化合物のピリジン形であることは、当業者により理解されるであろう。
【００７７】
【化３】
さらなる例示的な治療薬は、以下のものを含む。
【００７８】
【化４】
【００７９】
【化５】
【００８０】
【化６】
式中、Ｚは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、
【００８１】
【化７】
式中、Ｚは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。
【００８２】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、以下の式（ＩＩ）
【００８３】
【化８】
の治療薬
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、
Ｘは、−ＣＨ２−、−Ｏ−または−ＮＨ−であり、
Ｙは、−Ｈまたは−Ｉである。
【００８４】
いくつかの実施形態において、Ｘは、−ＣＨ２−である。いくつかの実施形態において、Ｘは、−Ｏ−である。いくつかの実施形態において、Ｘは、−ＮＨ−である。
【００８５】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、以下のサイロキシン（Ｔ４）またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）である。
【００８６】
【化９】
いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、本明細書で述べる様々な化合物の混合物である。例えば、式（Ｉａ）または（Ｉｂ）の２つまたはそれ以上の化合物を組み合わせて治療薬を形成することができる。いくつかの実施形態において、ニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニトロソニフェジピンの２つまたはそれ以上のものを組み合わせる。いくつかの実施形態において、Ｔ３および／またはＴ４をニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニトロソニフェジピンの１つまたは複数のものと組み合わせる。特定の実施形態において、ニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニトロソニフェジピンを組み合わせて、ニフェジピンミックスまたは混合物を形成する。
【００８７】
化合物は、様々な質量またはモル比で混合することができる。例えば、本発明による治療薬は、所定の質量またはモル比のニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）およびトリヨードサイロニン（Ｔ３）の２つまたはそれ以上のものの混合物であり得る。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの混合物を含有する。いくつかの実施形態において、ニトロソニフェジピンとニフェジピンは、約１０００：１、約５００：１、約２００：１、約１００：１、約６４：１、約３２：１、約１６：１、約１０：１、約８：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：８、約１：１０、約１：１６、約１：３２、約１：６４、約１：１００、約１：２００、約１：５００または約１：１０００の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、ニトロソニフェジピンとニフェジピンは、約１：１０００〜約１０００：１の範囲内（例えば、約１：５００〜約５００：１、約１：２００〜約２００：１、約１：１００〜約１００：１、約１：１０〜約１０：１、約１：１６〜約１６：１、約１：３２〜約３２：１、約１：６４〜約６４：１、約１：１〜約３２：１、約１：１〜約１０：１、約１００：１〜約１０００：１、約１０：１〜約１００：１、約１：１０００〜１：１、約１：１〜約１０００：１または約１：１００〜約１：１０）の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、酸化ニフェジピンとニフェジピンとの混合物を含有する。いくつかの実施形態において、酸化ニフェジピンとニフェジピンは、約１０００：１、約５００：１、約２００：１、約１００：１、約６４：１、約３２：１、約１６：１、約１０：１、約８：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：８、約１：１０、約１：１６、約１：３２、約１：６４、約１：１００、約１：２００、約１：５００または約１：１０００の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、酸化ニフェジピンとニフェジピンは、約１：１０００〜約１０００：１の範囲内（例えば、約１：５００〜約５００：１、約１：２００〜約２００：１、約１：１００〜約１００：１、約１：１０〜約１０：１、約１：１６〜約１６：１、約１：３２〜約３２：１、約１：６４〜約６４：１、約１：１〜約３２：１、約１：１〜約１０：１、約１００：１〜約１０００：１、約１０：１〜約１００：１、約１：１０００〜１：１、約１：１〜約１０００：１または約１：１００〜約１：１０）の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニトロソニフェジピンと酸化ニフェジピンとの混合物を含有する。いくつかの実施形態において、ニトロソニフェジピンと酸化ニフェジピンは、約１０００：１、約５００：１、約２００：１、約１００：１、約６４：１、約３２：１、約１６：１、約１０：１、約８：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：８、約１：１０、約１：１６、約１：３２、約１：６４、約１：１００、約１：２００、約１：５００または約１：１０００の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、ニトロソニフェジピンと酸化ニフェジピンは、約１：１０００〜約１０００：１の範囲内（例えば、約１：５００〜約５００：１、約１：２００〜約２００：１、約１：１００〜約１００：１、約１：１０〜約１０：１、約１：１６〜約１６：１、約１：３２〜約３２：１、約１：６４〜約６４：１、約１：１〜約３２：１、約１：１〜約１０：１、約１００：１〜約１０００：１、約１０：１〜約１００：１、約１：１０００〜１：１、約１：１〜約１０００：１または約１：１００〜約１：１０）の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、本発明に適する治療薬は、ニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンの混合物を含有する。いくつかの実施形態において、ニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンを約５：１：３、５：２：２、６：３：１、１０：４：１、３：１：５、２：５：５または１：１：１の質量またはモル比で混合する。いくつかの実施形態において、治療薬は、Ｔ３とＴ４との混合物を含有する。いくつかの実施形態において、Ｔ３とＴ４は、約１０００：１、約５００：１、約２００：１、約１００：１、約６４：１、約３２：１、約１６：１、約１０：１、約８：１、約５：１、約４：１、約３：１、約２：１、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：８、約１：１０、約１：１６、約１：３２、約１：６４、約１：１００、約１：２００、約１：５００または約１：１０００の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、Ｔ３とＴ４は、約１：１０００〜約１０００：１の範囲内（例えば、約１：５００〜約５００：１、約１：２００〜約２００：１、約１：１００〜約１００：１、約１：１０〜約１０：１、約１：１６〜約１６：１、約１：３２〜約３２：１、約１：６４〜約６４：１、約１：１〜約３２：１、約１：１〜約１０：１、約１００：１〜約１０００：１、約１０：１〜約１００：１、約１：１０００〜１：１、約１：１〜約１０００：１または約１：１００〜約１：１０）の質量またはモル比で混合することができる。いくつかの実施形態において、本明細書で述べた様々な化合物および混合物をさらに組み合わせて、本発明のための望ましい治療薬を得ることができる。例えば、Ｔ３／Ｔ４混合物をニフェジピン、ニフェジピン誘導体（例えば、酸化またはニトロソニフェジピン）のいずれかまたは本明細書で述べたニフェジピン混合物と組み合わせることができる。
【００８８】
患者の同定または治療のモニタリングのためのバイオマーカー
ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、それに罹患しやすいまたはそのリスクがある被験体または患者を同定するために様々なバイオマーカーを用いることができる。本明細書で用いる場合、バイオマーカーは、１つの表現型状態（例えば、疾患を有する）の被験体から採取した試料中に別の表現型状態（例えば、疾患を有さない）と比較して異なった形で存在する特徴的な生体分子である。異なる群におけるバイオマーカーの発現レベルの平均値または中央値が統計的に有意であると計算される場合、バイオマーカーは、異なる表現型状態の間で異なった形で存在する。バイオマーカーは、単独または組合せで、被験体が１つの表現型状態または別のものに属することの相対的リスクの尺度となる。したがって、それらは、疾患（診断）、薬物の治療有効性（セラノスティクス）および薬物の毒性のマーカーとして有用である。
【００８９】
例えば、発明者らは、参照により本明細書に組み込まれている米国特許出願公開第２００８／００２６４０５号に詳述されているようにプロスタグランジン−Ｄ２−シンターゼおよびトランスサイレチン（ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体）を含有する約５５ｋＤａタンパク質性複合体のレベルがＭＣＩおよびＡＤの感度が高く、特異的な診断バイオマーカーとしての役割を果たす可能性があることを最近示した。
【００９０】
一般的に、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体は、脳脊髄液に存在し、疾患の感度が高く、特異的なバイオマーカーであると思われる。ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の形成は、側脳室に隣接して位置する上皮細胞の集合である脈絡叢に局在化していた。脈絡叢は、血液ＣＳＦ関門として機能する。脈絡叢は、水、塩および選択される小分子を血液からＣＳＦに通過させるが、血液タンパク質がＣＳＦに入ることを効果的に妨げる。ＣＳＦに必要なタンパク質は、脈絡叢によって合成される。したがって、脈絡叢は、ＣＳＦの源としても機能する。後期ＡＤ患者の簡易死後剖検から新たに得られた脈絡叢から分離した上皮細胞を培養中で成長させ、拡大した。ＡＤ上皮細胞から得られた細胞培養培地の検査は、対照細胞と比較してＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルの上昇を示した。したがって、正常対照比較してＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルの上昇は、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、それに罹患しやすいまたはそれを発現するリスクがある被験体または患者を同定するために用いることができる。
【００９１】
いくつかの実施形態において、本発明に適するバイオマーカーは、トランスサイレチンおよび／またはプロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼの少なくとも１つ、並びにトランチレチン、プロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼ、β−２−ミクログロブリン、シスタチンＣ、スーパーオキシドジスムターゼ［Ｃｕ−Ｚｎ］、血漿レチノール結合タンパク質、ホスファチジルエタノールアミン結合タンパク質、カルボニックアンヒドラーゼ２および／またはセロトランスフェリンから選択される少なくとも１つの第２のタンパク質を含む。軽度認知障害またはアルツハイマー病状態は、得られる測定値を標準と相関させることによって判断される。
【００９２】
いくつかの実施形態において、ニューロンスレッドタンパク質、タウ（総；Ｔ−タウおよび種々のリン酸化形；Ｐ−タウ）、および／またはＡβ４０およびＡβ４２を含むアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の誘導体は、本発明の組成物および方法による治療にふさわしい患者集団を同定するためのバイオマーカーとして用いることができる。いくつかの実施形態において、治療を必要とする被験体は、対照と比較して異常なレベルのタンパク質バイオマーカー複合体を有し、タンパク質バイオマーカー複合体は、（ｉ）βアミロイド４０（Ａβ４０）、（ｉｉ）βアミロイド４２（Ａβ４２）、（ｉｉｉ）Ａβ４０とＡβ４２との比、および（ｉｖ）リン酸化タウと総タウとの比の１つまたは複数のものを含む。
【００９３】
それぞれが参照により本明細書に組み込まれる、Ｆａｈｎｅｓｔｏｃｋら、Ｊ．Ｎｅｕｒａｌ．Ｔｒａｎｓｍ．Ｓｕｐｐｌ．、２００２巻（６２号）、２４１〜５２頁（２００２年）；Ｍａｓｌｉａｈら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ａｇｉｎｇ、１６巻（４号）、５４９〜５６頁（１９９５年）；Ｐｏｗｅｒら、Ｄｅｍｅｎｔ．Ｇｅｒｉａｔｒ．Ｃｏｎｇ．Ｄｉｓｏｒｄ．、１２巻（２号）、１６７〜１７０頁（２００１年）；Ｂｕｒｂａｃｈら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．、２４巻（１０号）、２４２１〜３０頁（２００４年）；Ｌｉら、Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ、１１３巻（３号）、６０７〜１５頁（２００２年）およびＳａｎｎａら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、１１１巻（２号）、２４１〜５０頁（２００３年）に記載されているものを含むが、それらに限定されない、さらなるバイオマーカーが文献に報告されており、本発明による治療にふさわしい患者を同定するのに用いることができる。
【００９４】
いくつかの実施形態において、バイオマーカーは、被験体から得られる流体試料中で測定する。いくつかの実施形態において、流体試料は、ＣＳＦ、血清、全血、血漿、尿、腹水、唾液、組織滲出液、洗浄液およびそれらの組合せからなる群から選択される。
【００９５】
様々な方法を用いてバイオマーカーを定性的および定量的に測定することができる。例えば、タンパク質複合体（ＰＤＳ／ＴＴＲなど）を検出するために、複合体の第１の成分（例えば、ＰＤＳ）を捕捉し、第２の成分（例えば、ＴＴＲ）を探査するサンドイッチ酵素結合免疫検定（ＥＬＩＳＡ）を用いることができる。さらなる具体例としての方法は、参照により本明細書に組み込まれている米国特許出願公開第２００８／００２６４０５号に記載されている。他の方法は、当技術分野で周知であり、本発明を実施するのに用いることができる。
【００９６】
一般的に、バイオマーカーの測定レベルを１つまたは複数の対照または参照レベルと比較する。ＡＤバイオマーカーの測定レベルとの比較に用いる適切な参照レベルは、当業者により理解されるように、実施される本発明の態様によって異なってよい。ＡＤまたはＭＣＩに罹患しているまたは罹患しやすい被験体を同定するために、適切な「参照レベル」は、一般的に健常個体、特に同年齢健常個体を示すレベルである。参照レベルは、患者試料と並行して測定することができる。参照レベルはまた、予め定められたレベルまたは既往データに基づくものであり得る。例えば、適切な参照レベルは、ＡＤまたはＭＣＩに罹患していない集団から得られるレベルの平均値であり得る。一般的に、適切な参照レベルは、同年齢集団から得られるレベルから導き出される（例えば、その平均値または中央値である）。
【００９７】
一般的に、治療を必要とする被験体は、対照または健常個体若しくは集団を示す参照レベルと比較して、より大きいまたは高いレベルの本明細書で述べたバイオマーカーを有する。
【００９８】
治療のモニタリングの目的のために、適切な参照レベルは、一般的に、健常個体またはアルツハイマー病に罹患している個体（例えば、ＭＣＩ、ＥＡＤ若しくはＬＡＤなどの予め定められた段階を有する）を示すレベルである。参照レベルは、患者試料と並行して測定することができる。参照レベルはまた、予め定められたレベルまたは既往データに基づくものであり得る。例えば、適切な参照レベルは、ＡＤまたはＭＣＩに罹患していない集団、或いはＭＣＩまたはＡＤ（例えば、ＥＡＤ若しくはＬＡＤ）と診断された集団から得られるレベルの平均値であり得る。或いは、適切な参照レベルは、特定の患者の歴史的参照レベル、例えば、同じ個体からであるが、以前の時点（例えば、治療前または治療中の以前の時点）に得られた試料から導き出されたレベルであってよい。一般的に、適切な参照レベルは、同年齢集団から得られるレベルから導き出される（例えば、その平均値または中央値である）。
【００９９】
ＡＤ患者の層別化（すなわち、ＡＤ患者を軽度、中等度および高度の段階のＡＤに層別化する方法）のために、適切な参照レベルは、特定の段階のＡＤ（例えば、ＥＡＤ若しくはＬＡＤ）またはＭＣＩと診断された集団から得られるレベルから通常導き出される（例えば、その平均値または中央値である）。
【０１００】
いくつかの実施形態において、適切なバイオマーカー（約５５ｋＤａ ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体など）のレベルを用いて治療の有効性をモニターすることができる。一般的に、療法の目標は、理想的には、被験体から採取した流体試料が検出可能な複合体を含有しないように、被験体におけるＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルを減少、低下または低減することであろう。療法のより保守的で、副次的な目標は、約５５ｋＤａ ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルの任意の増加を未然に防ぐことであろう。したがって、医学的治療技術分野の当業者は、適切なバイオマーカーのレベルに基づいて、所定の治療体制が選択された療法の目標を達成しているかどうかを判断することができるであろう。このようにして、医学的治療技術分野の当業者は、適切な対照または参照レベルと比較した適切なバイオマーカーの測定レベルに基づいて、本明細書で述べた治療薬の有効量を決定することもできるであろう。
【０１０１】
一般的に、同年齢集団を用いて様々な参照レベルを導き出すことができる。同年齢集団は、理想的には試験される個体と同じ年齢であるが、近似的同年齢集団も許容できる。近似的同年齢集団は、試験される個体の年齢の１、２、３、４または５歳の範囲内であってよく、或いは試験される個体の年齢を包含する異なる年齢の群であってよい。近似的同年齢集団は、２、３、４、５、６、７、８、９または１０歳きざみ内にあってよい（例えば、６２歳の個体の参照値の源としての役割を果たす「５歳きざみ」群は、５８〜６２歳の個体、５９〜６３歳の個体、６０〜６４歳の個体、６１〜６５歳の個体、または６２〜６６歳の個体を含み得る）。
【０１０２】
測定値と参照値を比較する過程は、問題のＡＤバイオマーカーの測定値および参照値の種類に適する好都合な方法で実施することができる。例えば、「測定すること（ｍｅａｓｕｒｉｎｇ）」は、定量的または定性的測定技術を用いて実施することができ、測定値と参照値の比較方法は、用いる測定技術によって異なり得る。例えば、本発明の方法に用いる測定値は、最も一般的には定量的値（例えば、試料１ミリリットル当たりのＡＤバイオマーカーのナノグラムなどの濃度の定量的測定値、または絶対値）である。定性的測定と同様に、比較は、数値データを調べることにより、データの表示を調べる（例えば、棒または線グラフなどのグラフ表示を調べる）ことにより行うことができる。非限定的な例として、測定値が参照値の少なくとも約９５％の値である場合、測定値は、参照値と実質的に等しいか、またはそれより大きいと一般的に見なされる（例えば、１．７１の測定値は、１．８０の参照値と実質的に等しいと見なすことができる）。測定値が参照値の９５％未満である場合、測定値は、参照値より小さいまたは低いと見なされる（例えば、１．７の測定値は、１．８０の参照値より小さいと見なされ得る）。
【０１０３】
認知機能の試験
ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、それに罹患しやすいまたはそのリスクがある被験体または患者を同定するために、種々の認知試験を用いることもできる。２つの具体例としての認知試験は、ミニメンタルステータス検査（ＭＭＳＥ）および臨床的認知症尺度（ＣＤＲ）である。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、ＭＭＳＥスコアを用いて本明細書で述べた組成物および方法による治療を必要とする被験体を同定する。ＭＭＳＥスコアは、認知機能の複数の試験を表す複合スコアである。最大可能総ＭＭＳＥスコアは、３０点である。ＭＭＳＥは、認知症または他の病状を有する患者における認知障害の重症度を分類するのに用いることができる。表１にＭＭＳＥスコアが認知機能の程度を一般的にどのように表すかを示す。
【０１０５】
【表１】
いくつかの実施形態において、治療を必要とする被験体は、２１〜２６（軽度認知障害）、１１〜２０（中等度認知障害）または０〜１０（高度認知障害）のＭＭＳＥスコアを有する。
【０１０６】
いくつかの実施形態において、ＣＤＲスコアを用いて本明細書で述べた組成物および方法による治療を必要とする被験体を同定する。ＣＤＲスコアは、個別に採点される次の６つのドメインから構成されている：記憶、見当識、判断力および問題解決能力、社会適応、家庭状況および趣味、並びに個体的介護状況。表２にＣＤＲスコアが認知機能の程度を一般的にどのように表すかを示す。
【０１０７】
【表２】
いくつかの実施形態において、０を超えるＣＤＲスコアは、被験体がＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、それに罹患しやすいまたはそのリスクがある可能性があることを示す。いくつかの実施形態において、治療を必要とする被験体は、０．５（非常に軽度の認知症）、１（軽度認知症）、２（中等度認知症）または３（高度認知症）のＣＤＲスコアを有する可能性がある。
【０１０８】
いくつかの実施形態において、認知試験スコア（ＭＭＳＥスコアまたはＣＤＲスコアなど）を用いて治療の有効性をモニターすることができる。一般的に、有効な療法は、認知試験スコアを改善するはずである。したがって、治療の前後のまたは治療計画の異なる時点の認知試験スコアを比較することにより、医学的治療技術分野の当業者は、所定の治療体制が有効であるかどうかを判断することができる。例えば、医学的治療技術分野の当業者は、治療前または治療計画の異なる時点に測定された相対的認知試験スコアに基づくことによって本明細書で述べた治療薬の有効量を決定または調節することができるであろう。
【０１０９】
医薬組成物および投与
本発明は、本明細書で開示したものなどの治療薬を含む医薬組成物を包含する。いくつかの実施形態において、本発明の医薬組成物は、治療上有効量の治療薬および薬学的に許容される担体を含有する。
【０１１０】
本明細書で用いる場合、「薬学的に許容される担体」という用語は、非毒性の不活性固体、半固体液体充填剤、希釈剤、封入材料、あらゆるタイプの製剤補助剤、または生理食塩水などの単に滅菌水性媒体を意味する。薬学的に許容される担体としての役割を果たし得る物質のいくつかの例は、ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖、トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンなどのデンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体；粉末状トラガント；麦芽、ゼラチン、タルク；ココアバターおよび坐剤ワックスなどの賦形剤；落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油などの油；プロピレングリコールなどのグリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール；オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル、寒天；水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；アルギン酸；発熱物質不含有水；等張性生理食塩水、リンゲル液；エチルアルコールおよびリン酸緩衝液、並びに医薬製剤に用いられる他の非毒性適合性物質である。
【０１１１】
ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの湿潤剤、乳化剤および滑沢剤、並びに着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味料、着香および芳香剤、保存剤並びに抗酸化剤も処方者の判断に従って組成物中に存在し得る。薬学的に許容される抗酸化剤の例は、アスコルビン酸、塩酸システイン、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤；パルミチン酸アスコルビル、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤；並びにクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート化剤を含むが、これらに限定されない。
【０１１２】
治療薬の「治療上有効量」または単に「有効量」という用語は、本明細書で用いる場合、ＭＣＩ若しくはアルツハイマー病に関連する少なくとも１つの症状若しくは特徴を軽減し、改善し、安定化させ、且つ／またはその発現を遅延させるために、さらにＭＣＩ若しくはアルツハイマー病の１つまたは複数の症状の進行を遅延させる（例えば、存在度、強さ、重症度若しくは頻度に関する進行を遅延させる）ために、適切な計画に従う治療を必要とする被験体に投与したとき、十分である治療薬の量を意味する。しかし、本発明の治療薬および組成物の総１日使用量は、担当医により妥当な医学的判断の範囲内で決定されることは理解されよう。任意の個々の患者における固有の治療上有効な用量レベルは、治療する障害および障害の重症度；用いる特定の化合物の活性；用いる特定の組成物；患者の年齢、体重、一般健康状態、性および食事；投与時間、投与経路および用いる特定の化合物の排泄の速度；治療の期間；用いる特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用する薬物；並びに医療技術分野で周知の同様な因子を含む様々な因子に依存する。
【０１１３】
いくつかの実施形態において、本発明の治療薬の治療上有効用量は、例えば、０．０１〜２５ｍｇ／ｋｇ体重またはそれ以上、通常、０．１〜１５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲に及び得る。いくつかの実施形態において、治療薬の治療上有効量は、１用量当たり約０．０１ｍｇ〜約２．５ｇ（例えば、１用量当たり約０．０１ｍｇ〜約２．０ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１．５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１．０ｇ）の範囲にわたる。いくつかの実施形態において、治療薬の治療上有効量は、１用量当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ（例えば、約０．０１〜約５００ｍｇ、約０．０１〜約２５０ｍｇ、約０．０１〜約２００ｍｇ、約０．０１〜約１５０ｍｇ、約０．０１〜約１００ｍｇ、約０．０１〜約５０ｍｇ、約０．０１〜約１０ｍｇ、約０．０１〜約５ｍｇ、約０．０１〜約２．５ｍｇ、約０．０１〜約２．０ｍｇ、約０．０１〜約１．５ｍｇ、約０．０１〜約１．０ｍｇ、約０．０１〜約０．５ｍｇ、約０．０１〜約０．１ｍｇ）の範囲にわたる。いくつかの実施形態において、治療薬（特に、ニトロソニフェジピン）の治療上有効量は、１用量当たり約１００ｍｇ〜約５ｇ（例えば、約１００ｍｇ〜約３ｇ、約１００ｍｇ〜約２．５ｇ、約１００ｍｇ〜約２ｇ、約１００ｍｇ〜約１．５ｇ、約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２５０ｍｇ）の範囲に及ぶ。いくつかの実施形態において、治療薬の治療上有効量は、１用量当たり約０．０１ｍｇ、約０．０５ｍｇ、約０．１ｍｇ、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約５００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１．５ｇ、約２ｇ、約２．５ｇ、約３ｇまたは約５ｇであり得る。一般的に、本明細書で述べた量は、組成物中のすべての活性化合物の総量である。例えば、組成物がニフェジピン、ニトロソニフェジピンおよび酸化ニフェジピンの混合物を含有する場合、治療上有効量は、ニフェジピン、ニトロソニフェジピンおよび酸化ニフェジピンの総計量である。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、本明細書で述べた治療薬は、１日１回投与する。いくつかの実施形態において、本明細書で述べた治療薬は、１日当たり複数回、例えば、１日２回、３回または４回投与する。いくつかの実施形態において、治療薬の総１日投与量は、反復投与でまたは単回投与で１日当たり約０．０１ｍｇ〜約５ｇ（例えば、反復投与でまたは単回投与で１日当たり約０．０１ｍｇ〜約４．０ｇ、約０．０１ｍｇ〜約３．０ｇ、約０．０１ｍｇ〜約２．５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約２．０ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１．５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１．０ｇ）の範囲にわたる。いくつかの実施形態において、治療薬の総１日投与量は、単回投与でまたは反復投与で１日当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ（例えば、約０．０１〜約５００ｍｇ、約０．０１〜約２５０ｍｇ、約０．０１〜約２００ｍｇ、約０．０１〜約１５０ｍｇ、約０．０１〜約１００ｍｇ、約０．０１〜約５０ｍｇ、約０．０１〜約１０ｍｇ、約０．０１〜約５ｍｇ、約０．０１〜約２．５ｍｇ、約０．０１〜約２．０ｍｇ、約０．０１〜約１．５ｍｇ、約０．０１〜約１．０ｍｇ、約０．０１〜約０．５ｍｇ、約０．０１〜約０．１ｍｇ）の範囲にわたる。いくつかの実施形態において、治療薬（特に、ニトロソニフェジピン）の総１日投与量は、単回投与でまたは反復投与で１日当たり約５０ｍｇ〜約５ｇ（例えば、約５０ｍｇ〜約４ｇ、約１００ｍｇ〜約３ｇ、約１００ｍｇ〜約２．５ｇ、約１００ｍｇ〜約２ｇ、約１００ｍｇ〜約１．５ｇ、約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２５０ｍｇ）の範囲にわたる。いくつかの実施形態において、治療薬の総１日投与量は、約０．０１ｍｇ、約０．０５ｍｇ、約０．１ｍｇ、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約５００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１．５ｇ、約２ｇ、約２．５ｇ、約３ｇ、約３．５ｇ、約４ｇ、約４．５ｇまたは約５ｇであり得る。一般的に、本明細書で述べた量は、組成物中のすべての活性化合物の総量である。例えば、組成物がニフェジピン、ニトロソニフェジピンおよび酸化ニフェジピンの混合物を含有する場合、治療上有効量は、ニフェジピン、ニトロソニフェジピンおよび酸化ニフェジピンの総計量である。
【０１１５】
いくつかの実施形態において、本明細書で述べた治療薬は、月１回、隔週に１回、週１回、週２回または週３回投与する。これらの例において、上述の１日投与量は、平均１日投与量を反映する。
【０１１６】
特定の状況において、特に治療の初期に患者の血流中の活性薬のかなり高い用量を維持することが重要である可能性がある。したがって、少なくとも最初は、所定の期間、例えば、少なくとも約６時間またはそれ以上の時間、例えば、少なくとも約１２時間またはそれ以上の時間、例えば、少なくとも約２４時間またはそれ以上の時間にわたり用量を比較的高く、且つ／または実質的に一定のレベルに維持することが重要である可能性がある。
【０１１７】
本発明の化合物は、単独で、または中枢または末梢神経系、特に脳の選択される領域に影響を及ぼす他の薬剤と併用して、若しくはそれとの併用療法で投与することができる。
【０１１８】
本発明による医薬組成物は、経口、皮下、静脈内、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻、直腸、耳介、結膜、眼、電気浸透、頸管内、静脈洞内（ｅｎｄｏｓｉｎｕｓｉａｌ）、気管内、経腸、硬膜外、羊膜外、体外、血液透析、浸潤、腸管、腹内、羊膜内、動脈内、関節内、胆管内、気管支内、嚢内、心臓内、軟骨内、腔内、脳内、クモ膜下槽内、角膜内、歯冠内、冠動脈内、海綿体内、皮内、椎間板内、腺管内、十二指腸内、硬膜内、表皮内、食道内、胃内、歯肉内、回腸内、病巣内、リンパ管内、骨髄内、髄膜内、筋肉内、眼内、卵巣内、心膜内、胸膜内、前立腺内、肺内、洞内、滑膜内、腱内、精巣内、髄腔内、咽喉内、管内、腫瘍内、鼓膜内、子宮内、血管内、静脈内ボーラス、静脈内点滴、心室内、膀胱内、硝子体内、イオントフォレシス、潅注、咽頭、経鼻胃、閉鎖包帯法、眼、口腔咽頭、非経口、経皮、硬膜上、神経周囲、歯周、呼吸器、眼球後、軟組織、クモ膜下、結膜下、舌下、粘膜下、局所、経皮、経粘膜、経胎盤、経気管、経鼓膜、尿管、尿道および膣を含むいずれかの経路により投与することができる。特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、経口、皮下、静脈内、経皮、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻および直腸から選択される経路により投与する。特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、経口投与する。
【０１１９】
経口投与用の液体剤形は、水、等張性溶液または生理食塩水などの当技術分野で一般的に用いられる不活性希釈剤を含有する、薬学的に許容される乳剤、微細乳剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤を含んでいてよい。そのような組成物は、湿潤剤；乳化および懸濁化剤；甘味、着香および芳香剤などのアジュバントも含んでいてよい。
【０１２０】
注射用製剤、例えば、滅菌注射用水性または油脂性懸濁剤は、適切な分散または湿潤剤および懸濁化剤を用いて公知の技術により調合することができる。滅菌注射用製剤は、非経口で許容される非毒性の希釈剤または溶媒中滅菌注射用溶液、懸濁液または乳濁液、例えば、１，３−ブタンジオール中溶液としてであってもよい。用いることができる許容される媒体および溶媒の主なものは、水、リンゲル液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．および等張性塩化ナトリウム溶液である。さらに、滅菌固定油は、通常、溶媒または懸濁化媒体として用いられる。この目的のために、合成モノまたはジグリセリドを含めたあらゆる無刺激性の固定油を用いることができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製に用いられる。
【０１２１】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターによるろ過により、または使用直前に滅菌水若しくは他の滅菌注射用媒体に溶解若しくは分散させることができる滅菌固体組成物の形の滅菌剤を混入することにより滅菌することができる。
【０１２２】
薬物の作用を長引かせるために、皮下または筋肉内注射による薬物の吸収を遅らせることがしばしば望ましい。これを達成する最も一般的な方法は、難水溶性の結晶質または非晶質物質の懸濁剤を注射することである。薬物の吸収の速度は、薬物の溶解の速度に依存する状態になり、これは、ひいては薬物の物理的状態、例えば、結晶サイズおよび結晶の形態に依存する。薬物の吸収を遅らせる別のアプローチは、薬物を油中溶液または懸濁液として投与することである。薬物およびポリラクチド−ポリグリコシドなどの生分解性ポリマーのマイクロカプセルマトリックスを形成することにより、注射用デポ剤形も調製することができる。薬物とポリマーとの比およびポリマーの組成によって、薬物の放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例は、ポリオルトエステルおよびポリ酸無水物を含む。デポ注射剤は、薬物を、体組織と適合性があるリポソームまたはマイクロエマルジョンに閉じ込めることによっても調製することができる。
【０１２３】
薬物の直腸投与用の坐剤は、常温で固体であるが、直腸温では液体であり、したがって、直腸内で融解し、薬物を放出するココアバターおよびポリエチレングリコールなどの適切な非刺激性賦形剤と薬物を混合することによって調製することができる。
【０１２４】
経口投与用の固形剤形は、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、ゲルキャップス剤および顆粒剤を含むが、これらに限定されない。そのような固形剤形において、治療薬は、スクロース、ラクトースまたはデンプンなどの少なくとも１つの不活性希釈剤と混合することができる。そのような剤形は、不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムおよび微結晶セルロースなどの錠剤化滑沢剤および他の錠剤化助剤も含んでいてよい。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、剤形は、緩衝剤も含んでいてよい。錠剤および丸剤はさらに、腸溶性コーティングおよび他の放出制御コーティングを用いて調製することができる。
【０１２５】
同様な種類の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖並びに高分子量ポリエチレングリコールなどのような賦形剤を用いた軟および硬充填ゼラチンカプセル剤における充填剤としても用いることができる。
【０１２６】
活性化合物は、上述のような１つまたは複数の賦形剤を用いたマイクロカプセルに封入された形でもあり得る。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤および顆粒剤などの固形剤形は、腸溶性コーティングおよび医薬品調合技術分野で周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。それらは、乳白剤を場合によって含有することもでき、それらが有効成分（単数または複数）のみを、または好ましくは腸管の特定の部分で場合によって遅延した様態で放出する組成を有することもできる。用いることができる埋め込み組成物の例は、ポリマー物質およびワックスを含む。
【０１２７】
本発明の化合物の局所または経皮投与用の剤形は、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、散剤、液剤、噴霧剤、吸入剤または貼付剤をさらに含む。活性成分は、無菌的条件下で薬学的に許容される担体および必要に応じて任意の必要な保存剤または緩衝剤と混合する。眼用製剤、点耳剤、眼軟膏、散剤および液剤も本発明の範囲内であると企図される。
【０１２８】
軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤およびゲル剤は、本発明の活性化合物に加えて、動物および植物脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛またはそれらの混合物などの賦形剤を含有することもできる。
【０１２９】
散剤および噴霧剤は、本発明の活性化合物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末またはこれらの物質の混合物などの賦形剤を含有することもできる。噴霧剤は、クロロフルオロ炭化水素などの通常の噴射剤をさらに含有することもできる。
【０１３０】
経皮貼付剤は、活性化合物の身体への制御送達をもたらし得る。そのような剤形は、化合物を適切な媒体に溶解または分散させることによって作製することができる。皮膚を越える化合物の流入量を増加させるために、吸収促進剤も用いることができる。その速度は、速度制御膜を備えることにより、または化合物をポリマーマトリックスまたはゲル中に分散させることにより、制御することができる。
【０１３１】
本明細書で述べる医薬組成物は、即時放出または制御放出（徐放、持続または延長放出とも呼ばれる）用に製剤化することができる。様々な徐放または延長放出製剤または用具が当業者に周知である。例は、それぞれが参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，６７４，５３３号、同第５，０５９，５９５号、同第５，１２０，５４８号、同第５，０７３，５４３号、同第５，６３９，４７６号、同第５，３５４，５５６号および同第５，７３３，５６６号に記載されているものを含むが、これらに限定されない。そのような剤形は、様々な割合の所望の放出プロファイルを得るための例えば、ヒドロプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリックス、ゲル、透過性膜、浸透圧システム、多層コーティング、微小粒子、リポソーム、マイクロスフェアまたはそれらの組合せを用いて１つまたは複数の有効成分の徐放または制御放出を可能にするために用いることができる。当業者に公知の適切な放出制御製剤は、容易に選択し、本発明の治療薬との使用に適応することができる。例えば、本発明は、制御放出（すなわち、徐放、延長放出または持続放出）用に製剤化されている例えば、錠剤、カプセル剤、ゲルキャップス剤およびカプレット剤などであるが、これらに限定されない固形経口剤形を包含する。
【０１３２】
放出制御製剤の利点は、薬物の長時間にわたる活性、投与頻度の減少および患者服薬遵守の向上などである。例えば、放出制御または放出延長製剤は、血液脳関門を越える送達を増大させるための患者体内で絶え間なく利用可能な十分な用量レベルを維持することができる。
【０１３３】
大部分の放出制御製剤は、最初に所望の治療効果を直ちにもたらす量の治療薬（有効成分）を放出し、このレベルの治療または予防効果を長期間にわたって維持するために他の量のサグ（ｔｈｕｇ）をゆっくり且つ持続的に放出するように設計されている。体内の薬物のこの一定のレベルを維持するために、薬物は、代謝され、身体から排泄される薬物の量を補充する速度で剤形から放出されなければならない。有効成分の制御放出は、ｐＨ、温度、酵素、水または他の生理的条件若しくは化合物を含むが、これらに限定されない様々な条件により刺激することができる。
【０１３４】
いくつかの実施形態において、２つまたはそれ以上の治療薬を併用して投与することができる。２つまたはそれ以上の治療薬は、多回投与レジメンの一部として互いに独立して投与することができる。或いは、それらの薬剤は、単一組成物中で本発明の化合物と混合されている単一剤形の一部であってよい。多回投与レジメンの一部として投与する場合、２つの治療薬は、同時に、連続して、または通常互いから５時間以内の互いの時間内に施すことができる。
【０１３５】
本明細書で用いる場合、「併用（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）」、「併用される（ｃｏｍｂｉｎｅｄ）」という用語および関連用語は、本発明による治療薬の同時または連続投与を意味する。例えば、本発明の化合物は、別の薬剤と共に別個の単位剤形で同時にまたは連続して、或いは単一単位剤形で一緒に投与することができる。したがって、本発明は、提供される化合物、追加の治療薬および薬学的に許容される担体、アジュバントまたは媒体を含む単一単位剤形を提供する。
【０１３６】
本発明は、多くの実施形態で提供され、とりわけ、様々な実施例で明確に理解することができる。以下の実施例は、本発明の広さおよび適用性の実例となるものであるが、非限定的な記述を提供するものである。
【実施例】
【０１３７】
（実施例１）
ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の神経毒性作用
アルツハイマー病患者由来の上皮細胞から得られた細胞培養培地の検討により、対照細胞と比較してＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルの上昇が示され、これにより、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体をアルツハイマー病の早期診断のための有効なバイオマーカーとして用いることができることが分かることが示された。開示が参照により本明細書に組み込まれている、米国出願公開第２００８００２６４０５号を参照のこと。この実施例では、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体が、疾患のバイオマーカーであることに加えて、神経毒でもあることを示す。
【０１３８】
まず第一に、アクロレイン（脂質過酸化のアルファ、ベータ不飽和３炭素アルデヒド副生成物）は、正常対照上皮細胞にアルツハイマー病患者に由来する上皮細胞と同等のレベルでＰＤＳ／ＴＴＲ複合体を培養培地中に発現させることが分かった。これらの実験のために、脈絡叢上皮細胞の初代培養を確立された方法を用いて死後短期間剖検により確立した。ＡＤおよび正常対照培養を、２％ウシ胎児血清および１％上皮増殖因子（ＥＧＦ）を含有するＭＥＭ増殖培地中で密集状態になるまで増殖させた。正常対照培養をＮ２補足物を含有するＯｐｔｉ−ＭＥＭに切替え、媒体（対照）または５μＭアクロレインで７２時間処理した。ＡＤ被験体からの培養は、Ｎ２補足培地に切替え、７２時間保持した。処理後、培地を各フラスコから収集し、ＰＤ−１０カラムを用いて脱塩処理した。次いで、溶出したタンパク質を凍結乾燥し、２５μｌの水に再懸濁し、ウエスタンブロット分析並びにＰＤＳおよびＴＴＲに対して特異的な抗体を用いて分析した。対照上皮細胞、アクロレインで処理した対照上皮細胞および後期アルツハイマー病患者に由来する上皮細胞により細胞培養培地中で発現されたＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のウエスタンブロット分析を示す具体例としての結果を図１に示す。図１に示すように、アクロレインは、対照上皮細胞におけるＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の発現を後期ＡＤ（ＬＡＤ）上皮細胞におけるものと同等のレベルに増大させた。
【０１３９】
次にＰＤＳ／ＴＴＲ複合体を含有するＬＡＤ上皮細胞の培地を用いて皮質ニューロンを処理した。ＬＡＤ脈絡叢上皮培養または媒体若しくは５μＭアクロレインで処理した正常対照培養により産生されたＰＤＳ／ＴＴＲ複合体が初代皮質ニューロンに負の影響を与えるかどうかを判断するために、正常対照上皮培養をＮ２補足培地に切替え、媒体のみ（対照）または５μＭアクロレインで１６時間処理した。ＬＡＤ培養は、Ｎ２培地に１６時間切替えた。処理後、培地を各培養型（ＬＡＤ；媒体のみで処理した正常対照または５μＭアクロレインで処理した正常対照）から収集し、初代ラットニューロン培養に加えた（培養中７日）。処理した初代培養をならし培地に１６時間曝露し、ＭＴＴ還元アッセイを用いて細胞生存率を測定した。具体例としての結果を図２に示した。図２に示すように、ＬＡＤ上皮培地で処理した皮質ニューロンの生存率は、対照と比較して有意に低い（図２）。この実験により、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体はそれ自体が神経毒であることが分かる。
【０１４０】
ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の神経毒性作用をさらに検討するために、ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞をＬＡＤまたは正常対照上皮細胞からのならし培地に１６時間曝露した。ならし培地への曝露後に、細胞を７０％メタノール／３０％アセトンで固定し、抗ＰＨＦ−１抗体を用いた免疫組織化学検査に供した。ＰＨＦ−１は、ＡＤ ＮＦＴに認められるような異常にリン酸化されたタウ（神経細線維のもつれ）を認識する。図３に示すように、ＬＡＤ上皮細胞培地で処理したＳＹ５Ｙ細胞の２５％近くのものがＰＨＦ−１陽性であったのに対して、対照培地で処理したＳＹ５Ｙ細胞の約３％が陽性であった。対らせん状細線維は、神経細線維のもつれの前兆である。したがって、ＰＨＦ−１免疫陽性は、一般的にアルツハイマー病における後期神経細線維のもつれの形成のインジケーターである。したがって、この実験から、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体がＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞における対らせん状細線維の形成を促進することが示されており、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体がＨ４神経膠腫細胞によるアミロイドベータペプチド（Ａβ）の産生を促進し得ることが分かる。
【０１４１】
上皮培養により産生された複合体が炎症性サイトカイン経路に影響を及ぼすかどうかを判断するために、ヒト星状細胞腫の培養を２．５Ｘ１０５細胞／ウエルの密度で平板培養し、ならし培地に２４時間曝露した。曝露後、各ウエルから培地を収集し、炎症性サイトカイン（ＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＴＧＦ−βおよびＩＬ−６）のレベルを市販のＥＬＩＳＡを用いて測定した。アッセイの結果により、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体が星状細胞腫培養における２つの炎症性サイトカイン経路（すなわち、ＩＬ−６、ＴＮＦ−α）を活性化したことが示され（データは示さず）、神経炎症におけるＰＤＳ／ＴＴＲの役割が示された。
【０１４２】
要約すると、この実施例で述べた実験により、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体が、アルツハイマー病の特質に直接的に影響を及ぼし得る様々な生化学的変化を引き起こすことが立証された。
【０１４３】
（実施例２）
ニフェジピン、ニフェジピン類似体混合物および／またはＴ３／Ｔ４はＰＤＳ／ＴＴＲの発現を阻害する
実施例１で述べたアッセイは、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体からニューロン細胞を防護することができる可能な治療薬を同定するためのツールとなる。発明者らは、高血圧に対して処方されるカルシウムチャネル遮断薬である、ニフェジピン（１，４−ジヒドロ−２，６−ジメチル−４−（２−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸（ｐｙｒｉｄｉｎｙｄｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）ジメチルエステル、ＣＡＳ番号２１８２９−２５−４（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ））；またはニフェジピンの酸化誘導体（（２，６−ジメチル−４−（２−ニトロフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸ジメチルエステル、ＣＡＳ番号６７０３５−２２−７（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ））若しくはニフェジピンのニトロソ誘導体（２，６−ジメチル−４−（２−ニトロソフェニル）−３，５−ピリジンジカルボン酸ジメチルエステル、ＣＡＳ番号５０４２８−１４−３（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ））などのニフェジピン類似体などの化合物が個別にまたは共同して細胞培養におけるＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の発現を効果的に阻害し得ることを観測した。さらに、Ｔ３およびＴ４も評価したところ、ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体の発現を阻害するのに有効であることが分かった。
【０１４４】
具体的には、上皮細胞を実施例１で述べたように、５μＭアクロレイン、５μＭアクロレイン＋０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４、５μＭアクロレイン＋１μＭニフェジピン混合物（ニトロソニフェジピン５５％、酸化ニフェジピン１１％およびニフェジピン３４％）、または５μＭアクロレイン＋１μＭニフェジピン混合物および０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４で処理した。各培養により培養培地中に分泌されたＰＤＳ／ＴＴＲの量は、上述のようにウエスタンブロット分析により測定した。具体例としてのデータを図４に示した。分かるように、アクロレイン＋Ｔ３／Ｔ４、アクロレイン＋ニフェジピン混合物、またはアクロレイン＋ニフェジピン混合物およびＴ３／Ｔ４で処理した細胞により発現した量は、アクロレインでのみ処理した細胞により発現した量より有意に少なかった。
【０１４５】
さらに、免疫染色を用いてＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞を判定し、処理および非処理細胞培養のＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞の数を数え、比較した。具体例としての結果を図５に要約する。図５から分かるように、アクロレイン単独処理試料中のＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞の数は、非処理対照におけるＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞の数の約６００％である。それに反して、アクロレイン（ａｃｒｏｌｉｎｅ）＋アクロレイン＋Ｔ３／Ｔ４、アクロレイン＋ニフェジピン混合物、またはアクロレイン＋ニフェジピン混合物およびＴ３／Ｔ４で処理した試料中のＰＤＳ／ＴＴＲ陽性細胞の数は、非処理対照と比較して有意に低下した。
【０１４６】
ニフェジピン混合物がカルシウムチャネルを遮断することによって機能するかどうかを判断するために、我々はカルシウムチャネルに対するニフェジピン混合物の影響を評価した。ＳＹ５Ｙ神経芽腫培養を新鮮なニフェジピンまたはニフェジピン混合物で１６時間前処理し、次いで、カルシウム不含有培地に切替え、５μＭ Ｆｕｒａ−２蛍光色素を負荷した。次に、培養をカルシウム不含有培地で洗浄し、カルシウム含有培地に曝露し、Ｆｕｒａ−２へのＣａの結合に起因する蛍光を共焦点顕微鏡法および３４０ｎｍでの励起を用いて測定した。３枚の別個の皿について１枚の皿当たり５０〜１００個の細胞を撮像した。具体例としての結果を図６に示す。興味深いことに、図６に示すように、ニフェジピン混合物は、新鮮なニフェジピンと比較してカルシウムチャネル遮断薬としての最小限（約３０％）の活性を有し、これらの化合物は別の新規なメカニズムにより作用する可能性があることが示唆される。
【０１４７】
したがって、この実施例で述べた実験から、ニフェジピン類似体混合物およびＴ３／Ｔ４は、単独で、または共同して、上皮細胞におけるＰＤＳ／ＴＴＲの発現を効果的に阻害することができ、この作用は、カルシウムチャネルと無関係である可能性があることが示唆される。さらに、Ｔ３／Ｔ４は、ニフェジピン類似体の有効性を改善した。
【０１４８】
（実施例３）
ニフェジピン類似体は炎症性サイトカインの産生を阻害する
炎症性応答エレメント（サイトカイン）がアルツハイマー病患者において上昇していることが報告された。発明者らは、星状細胞腫培養においてニフェジピン混合物および個々の類似体を試験した。ヒト星状細胞腫細胞を６ウエル培養プレートで２．５Ｘ１０５細胞／ウエルで平板培養し、２４時間増殖させた。次に培養を血清不含有Ｏｐｔｉ−ＭＥＭに切替え、ニフェジピン混合物および個々の類似体で２４時間処理した。３枚の６ウエルプレートを各処理に供した。処理後、培地を各ウエルから収集し、市販のＥＬＩＳＡを用いてＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＴＮＦ−αおよびＴＧＦ−βのレベルを測定した。具体例としての結果を図７に示す。図７から分かるように、培地中に分泌されたＩＬ−１、ＩＬ−６およびＴＮＦ−αは、ニフェジピン混合物または酸化ニフェジピンの投与により有意に減少し、これらの化合物が神経炎症に対して直接的な正の効果を有することが示された。
【０１４９】
（実施例４）
ニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４はＰＨＦ−１レベルを低下させる
実施例１で述べたように、有意により高いレベルのＰＤＳ／ＴＴＲ複合体を含有していたＬＡＤ上皮細胞の培地に曝露したＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞は、非処理対照培養の培地に曝露したものと比較して有意に高いＰＨＦ−１免疫染色を示した。この実験では、実施例１で述べた手順を用いて、ＳＹ５Ｙ細胞を、アクロレインおよびニフェジピンの配合物、ニフェジピン類似体、ニフェジピン類似体の混合物およびＴ３／Ｔ４で処理した上皮細胞の培地に曝露した。図８に示すように、ニフェジピン混合物およびニフェジピン／ニフェジピン類似体＋Ｔ３／Ｔ４は、ＰＨＦ−１レベルを有意に低下させた。
【０１５０】
（実施例５）
Ｈ４神経膠芽腫細胞によるＡβ１−４２の産生の阻害
この実施例では、発明者らは、ニフェジピン、ニフェジピン類似体（例えば、酸化ニフェジピンまたはニトロソニフェジピン）および／またはＴ３／Ｔ４がＡβ１−４２の産生を阻害し得るかをさらに検討するために、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）を過剰発現するように安定にトランスフェクトしたＨ４神経膠芽腫細胞を用いた。アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）を過剰発現する構築物を安定にトランスフェクトしたＨ４神経膠芽腫細胞は、Ａβ１−４２を培養培地中に分泌する。これらのＨ４細胞を１μＭ新鮮ニフェジピン、１μＭ酸化ニフェジピン、１μＭニトロソニフェジピンまたは０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４で１６時間処理した。培養培地中のＡβレベルをＥＬＩＳＡ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて測定した。図９に示すように、新鮮ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピンまたはＴ３／Ｔ４の投与により、Ａβ１−４２の産生の有意な低下がもたらされる。
【０１５１】
さらに、Ｈ４細胞によるＡβ１−４２の産生に対するニフェジピン、ニフェジピン類似体およびニフェジピン混合物の作用をＴ３／Ｔ４の存在下および非存在下でさらに試験した。具体例としての結果を図１０に要約する。分かるように、Ｔ３／Ｔ４は、Ａβ１−４２の産生に対するニフェジピン、ニフェジピン類似体およびニフェジピン混合物の阻害作用を改善する。
【０１５２】
我々は次に、他のカルシウムチャネル遮断薬がＨ４神経膠腫培養におけるＡβ１−４２の産生を阻害することができるかどうかを試験した。アミロドピン、ジリチアゼム、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピンおよびニモジピンなどの公知のカルシウムチャネル遮断薬をこの実験に用いた。具体的には、ｏｐｔｉ−ＭＥＭ（血清不含有）中でＴ３／Ｔ４の存在下および非存在下でＨ４細胞を１μＭの各薬物で１６時間処理し、培地中に分泌されたＡβ１−４２をＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＥＬＩＳＡｓを用いて測定した。具体例としての結果を図１１に示す。図１１に示すように、ニカルジピンは、Ａβの分泌の有意な減少の傾向（ｐ＜０．１０）を示し、ニモジピンは、Ａβの生成の有意な減少（ｐ＜０．０５）をもたらした。他の薬物は、Ａβの生成のレベルを有意に変化させなかった。Ｔ３／Ｔ４をアムロジピンおよびジリチアゼムと併用した場合、代替カルシウムチャネル遮断薬とＴ３／Ｔ４との併用で、Ａβの生成の有意な減少が示された。Ｔ３／Ｔ４と他の薬物との併用では、Ａβの生成の有意な減少は示されなかった。
【０１５３】
（実施例６）
ベータセクレターゼ（ＢＡＣＥ）およびガンマセクレターゼ活性の阻害
ニフェジピン、ニフェジピン類似体およびニフェジピン混合物がＡβ１−４２ペプチドの産生を効果的に阻害することができるというこの驚くべき所見は、Ａβ１−４２ペプチドの減少の可能なメカニズムをさらに検討する促しとなった。Ａβ１−４２の産生が、アミロイド前駆体タンパク質をベータセクレターゼ切断部位で切断する酵素であるベータセクレターゼ（ＢＡＣＥ）並びにガンマセクレターゼ切断部位で切断するプレセニリン−１（ＰＳ−１）、ニカストリン、ＡＰＨ−１およびＰＥＮ−２からなるガンマセクレターゼ複合体の活性に依存すると企図された。発明者らは、我々の培養モデル系におけるＡβ１−４２の産生の阻害がＢＡＣＥおよび／またはガンマセクレターゼ活性の阻害に起因するかどうかを試験した。
【０１５４】
ＢＡＣＥ活性は、蛍光基質およびＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎからの市販のキットの一部としての生成組換えＢＡＣＥを用いて測定した。図１２に示すように、ニフェジピン単独またはサイロキシンとの併用でＢＡＣＥ活性がわずかに阻害された。しかし、ニトロソニフェジピン単独またはサイロキシンとの併用ではＢＡＣＥ活性が有意に阻害された（図１２）。
【０１５５】
ニフェジピン混合物のみまたはＴ３／Ｔ４との併用で処理したＨ４培養におけるＢＡＣＥおよびガンマセクレターゼ複合体の個々の成分のタンパク質レベルの検討により、ニフェジピン混合物単独でＰＳ−１およびＰＥＮ−２のレベルが有意に低下したことが明らかになった。ＢＡＣＥ−１のレベルは、低下したが、有意でなかった。しかし、ニフェジピン混合物＋Ｔ３／Ｔ４では、ＰＳ−１、ＰＥＮ−２、ＢＡＣＥ−１およびニカストリンが有意に低下した。ＡＰＨ−１は、いずれの処理の影響も受けなかった。具体例としての結果を図１３に示した。タンパク質レベルは、免疫組織化学および共焦点顕微鏡法を用いて個々の細胞（５０〜１００細胞／皿；３皿／実験）において測定し、ウエスタンブロット分析を用いて全細胞ホモジネートにおいて確認した。各タンパク質に対して特異的抗体は、販売業者から購入した。
【０１５６】
この実施例で述べた実験で、ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４がＡβの産生に関与する酵素に直接的に作用することが示された。
【０１５７】
（実施例７）
Ａβ１−４０の産生のｉｎ ｖｉｖｏでの阻害
上述のｉｎ ｖｉｔｒｏデータに基づいて、発明者らは、３ヵ月齢のＣ５７−Ｂｌａｃｋ−６（Ｃ５７ＢＬ／６）マウスにおける急性曝露試験を開始した。この試験では、６匹のＣ５７ＢＬ／６マウスの６群を３日間連日、媒体（２％ＤＭＳＯ／９８％ポリエチレングリコール−３０００（ＰＥＧ−３０００））、２５ｍｇ／ｋｇニフェジピンまたはニフェジピン混合物、Ｔ３／Ｔ４（１０ｍｇ／ｋｇ Ｔ３および１０ｍｇ／ｋｇ Ｔ４）、ニフェジピン混合物＋Ｔ３／Ｔ４並びにニフェジピン＋Ｔ３／Ｔ４の腹腔内（ＩＰ）注射に供した。動物は、３回目の注射の１時間後に安楽死させた。脳および終末血清を除去し、直ちに液体窒素で凍結し、分析に用いるまで−８０℃で保存した。
【０１５８】
脳の１半球をＡβ１−４０の測定（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＥＬＩＳＡ）のためにホモジナイズし、他をタンパク質レベル用にホモジナイズした。さらに、ＰＳ−１、ＢＡＣＥ、ＰＳ−１の必須基質である切断Ｎｏｔｃｈ、Ｎｉｃａｓｔ、ＡＰＨ−１のレベルをウエスタンブロット分析を用いて測定した。図１４に示すように、Ｔ３／Ｔ４およびニフェジピン混合物＋Ｔ３／Ｔ４を投与したマウスは、媒体投与した動物と比較してＡβ１−４０レベルの小幅（２５％）であるが、有意な低下を示した。ＰＳ−１、ＮｉｃａｓｔおよびＡＰＨ−１のレベルは、ニフェジピン、ニフェジピン混合物＋Ｔ３／Ｔ４を投与したマウスで有意に低下した。ＢＡＣＥタンパク質レベルは、ニフェジピン、ニフェジピン＋Ｔ３／Ｔ４およびＴ３／Ｔ４単独を投与したマウスで有意に低下した。これに反して、いずれの処理によっても切断Ｎｏｔｃｈのレベルの有意な差はなかった（図１４）。
【０１５９】
さらに、脳を抽出し、ニフェジピンおよびその類似体のレベルについてＧＣ／ＭＳにより分析した。酸化ニフェジピンが分析したすべての試料に認められ、混合物の成分が血液脳関門を通過し、それにより、ニューロン保護に利用可能であることが示唆される。この実験で、これらの誘導体がアルツハイマー病の治療に望まれる脳透過性を有することが示された。
【０１６０】
この実施例における実験により、ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４がｉｎ ｖｉｖｏでＡβ１−４０ペプチドの内因性レベルを低下させることが示された。
【０１６１】
（実施例８）
オーファンＧ共役受容体タンパク質３（ＧＰＣＲ−３）のｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏでの阻害
この実施例は、ニフェジピン、ニフェジピン混合物、および／またはＴ３／Ｔ４が、ガンマセクレターゼ複合体（上述のように、Ａβを生成するためのＡＰＰの切断に重要である）の安定性の維持に役割を果たすことが示唆されている酵素であるオーファンＧ共役受容体タンパク質３（ＧＰＣＲ−３）を阻害することができるかどうかを試験するために実施した。
【０１６２】
Ｈ４神経膠芽腫細胞を１μＭ混合ニフェジピン、１μＭ混合ニフェジピン＋０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４、０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４、１μＭ新鮮ニフェジピン、１μＭ新鮮ニフェジピン＋０．５μＭ Ｔ３／０．５μＭ Ｔ４で１６時間処理した。ＧＰＣＲ−３のレベルは、ＧＰＣＲ−３特異抗体を用いたウエスタンブロット分析を用いて測定した。図１５に示すように、ニフェジピン混合物、新鮮ニフェジピン、および／またはＴ３／Ｔ４は、Ｈ４細胞におけるＧＰＣＲ−３の発現レベルを有意に減少させた。
【０１６３】
さらに、実施例７で上述したＣ５７ＢＬ／６マウスにおけるＧＰＣＲ−３のレベルをウエスタンブロット分析を用いて測定した。具体例としての結果を図１５にも示す。ニフェジピン混合物およびＴ３／Ｔ４、新鮮ニフェジピン、およびＴ３／Ｔ４は、マウスにおけるＧＰＣＲ−３の発現レベルも低下させた。
【０１６４】
したがって、この実施例で、ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４がｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏでＧＰＣＲ−３のレベルを低下させることが示された。
【０１６５】
ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４によるＧＰＣＲ−３レベルの低下が血圧の制御に関与する経路によるかどうかを判断するために、我々は、Ｈ４細胞におけるアテノロール、カプトプリルおよびエナントプリル（ｅｎａｎｔｏｐｉｒｌ）などの公知の血圧薬を試験した。具体的には、Ｈ４細胞をＯｐｔｉ−ＭＥＭ（血清不含有）培地中でＴ３／Ｔ４の存在下および非存在下で１μＭの各薬物で１６時間処理し、ＧＰＣＲ−３のレベルを共焦点顕微鏡法および特異的抗ＧＰＣＲ−３抗体を用いて測定した。具体例としての結果を図１５ａに示す。図１５ａに示すように、カプトプリル＋Ｔ３／Ｔ４のみがＧＰＣＲ−３のレベルの有意な変化（低下）をもたらした。この実験により、ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４によるＧＰＣＲ−３の低下は、血圧経路と無関係であることが分かる。
【０１６６】
（実施例９）
タウリン酸化の阻害
この実施例では、我々は、ニフェジピン、ニフェジピン混合物、それらの酸化およびニトロソ誘導体、および／またはＴ３／Ｔ４がリン酸化タウタンパク質を減少させることができるかどうかを試験した。リン酸化タウタンパク質は、アルツハイマー病の病因に関与している、対らせん状細線維および直線状細線維のもつれの自己集合をもたらし得る。
【０１６７】
タウリン酸化に関与する複数のキナーゼが存在するが、グリコーゲンシンターゼキナーゼ３β（ＧＳＫ−３β）は、ＡＤにおけるタウ過剰リン酸化に対する主要な寄与因子として著しい注目を集めている。ＧＳＫ−３βは、特異的ホスホタウ抗体を用いて同定された約９５％の対らせん状細線維に存在する。構成的に活性なキナーゼであるＧＳＫ−３βは、プロテインキナーゼＢ（Ａｋｔ）によるＳｅｒ９のリン酸化により不活性化される。セリン／トレオニンキナーゼであるＡｋｔは、ホスファチジルイノシトールキナーゼ（Ｐ１３Ｋ）媒介シグナリングにより制御され、ホスファチジルイノシトール依存性キナーゼ１（ＰＤＫ１）による調節トレオニン残基（Ｔｈｒ−３０８）のリン酸化により、またＰＤＫα／ＴＯＲＣ２キナーゼによるＳｅｒ４７３のリン酸化により活性化される。さらに、Ａｋｔ／ＧＳＫ−３β経路の活性化は、Ｇα１２／１３ヘテロ三量体Ｇタンパク質にカップリングしたＧＣＰＲにより媒介される可能性がある。Ｇα１２の活性化は、ＲｈｏＡおよびそのエフェクターＲｈｏキナーゼ（ＲＯＣＫ）を刺激することが示された。Ｓｅｒ１６０においてリン酸化されたＲＯＣＫは、Ａｋｔ／ＧＳＫ−３βのリン酸化／活性化をもたらすＰＩ３Ｋシグナリング経路を活性化する受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）をさらにトランス活性化する（Ｎｅｗら、「Ｇ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｉｎｄｕｃｅｄ Ａｋｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ」、ＦＥＢＳ Ｊ、２００７年、２７４巻、６０２５〜３６頁によりレビューされた）。リン酸化Ａｋｔは、ＧＳＫ−３βのリン酸化および不活性化を増大させ、したがって、タウリン酸化を減少させる。
【０１６８】
我々は、実施例７で述べたようにニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４で処理したマウス脳における上述のタウリン酸化経路に関与するタンパク質のレベルおよびリン酸化の状態を検討した。図１６に示すように、リン酸化ＲＯＣＫ（ｐ−ＲＯＣＫ）およびＧＳＫ−３β（ｐ−ＧＳＫ−３β）のレベルは、ニフェジピンまたはニフェジピン混合物＋Ｔ３／Ｔ４で処理したマウスにおいて有意に増加した。Ｔ３／Ｔ４単独もｐ−ＧＳＫ−３βのレベルを有意に増加させた。ＲＯＣＫの総タンパク質レベルは、いずれの処理による影響も受けなかった。ｐ−２５のレベルは、処理マウスにおいてわずかに低下した。これらの結果は、ニフェジピン、ニフェジピン混合物および／またはＴ３／Ｔ４の処理がｉｎ ｖｉｖｏでのタウリン酸化の減少をもたらし得ることを示すものである。
【０１６９】
（実施例１０）
ヒト関連試験
ヒト関連試験は、ヒト患者におけるカルシウムチャネル遮断薬の影響を決定するために実施した。最初の試験において、被験体を対照、ＡＰＯＥ４（アルツハイマー病の発生率の増加に関連する遺伝子）を有する対照、ジヒドロピリジンベースのカルシウムチャネル遮断薬の投与を受けている被験体およびジヒドロピリジンベースのカルシウムチャネル遮断薬の投与を受けており、ＡＰＯＥ４を有する被験体に分けた。ＭＭＳＥ（ミニメンタルステータス検査）試験を用いて各被験体の認知機能を測定した。適合モデル対年齢の軌線を決定することができる。図１７にＭＭＳＥのＮＬＭＩＸＥＤモデルの具体例としての結果を示す。このモデルは、カルシウムチャネル遮断薬の投与を受けている被験体がカルシウムチャネル遮断薬の投与を受けていない被験体と比べて認知機能低下の４年の遅延を示すことを示している。
【０１７０】
このヒト関連試験で、ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬の使用が認知機能低下の発症を遅延させると思われることが示され、ジヒドロピリジンカルシウムチャネル遮断薬を用いてアルツハイマー病などの神経変性疾患を治療することができることが示唆される。
【０１７１】
第２の試験において、我々は、神経心理学的関連試験からの合計８例の被験体について剖検を行った。４例の被験体は、ニフェジピンを含むカルシウムチャネル遮断薬の投与を受け、４例の被験体は、カルシウムチャネル遮断薬の投与を受けていなかった。被験体の前頭葉検体中のＡβ１−４２並びにＰＳ−１、Ｎｉｃａｓ、ＢＡＣＥ、ＡＰＨ−１およびＰＥＮ−２などのＡβ処理酵素のレベルを標準的方法を用いて測定した。具体的には、Ａβ１−４２のレベルは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＥＬＩＳＡｓを用いて測定し、タンパク質レベルは、ウエスタンブロット分析および各タンパク質に特異的な抗体を用いて測定した。図１８に示すように、Ａβ１−４２レベルは、薬物の投与を受けなかった被験体と比較して薬物の投与を受けた被験体において有意に低下した。ＰＳ−１、Ｎｉｃａｓを含むいくつかのＡβ処理酵素は、薬物の投与を受けなかった被験体と比較して薬物の投与を受けた被験体において有意に低下した。興味深いことに、ＢＡＣＥ、ＡＰＨ−１およびＰＥＮ−２のレベルは、薬物の投与を受けなかった被験体と比較して薬物の投与を受けた被験体において増加した。
【０１７２】
さらに、タウリン酸化に関与する酵素レベルについても被験体の前頭葉検体において検討した。図１９に示すように、リン酸化ｐ−Ａｋｔ、ｐ−ＧＳＫ−３βおよびｐ−ＲＯＣＫのレベルはすべて、薬物の投与を受けなかった被験体と比較して薬物の投与を受けた被験体において増加した。Ａｋｔ、ＧＳＫ−３βおよびＲＯＣＫの総タンパク質レベルは、薬物の投与を受けた被験体と受けなかった被験体とで同等であった。上述のように、活性化ｐ−Ａｋｔは、ＧＳＫ−３βをリン酸化し、それが次に不活性化され、タウリン酸化を減少させる。これらの結果は、カルシウムチャネル遮断薬の使用によってタウリン酸化を減少させることができ、これがアルツハイマー病の治療に有用であるという結論と一致している。
【０１７３】
このヒト関連試験で、カルシウムチャネル遮断薬の使用によりヒト患者におけるＡβ１−４２レベルおよび特定のＡβ１−４２処理酵素が減少し、タウリン酸化に関与する酵素が不活性化されると思われることが示され、カルシウムチャネル遮断薬がアルツハイマー病の治療に有効である可能性があることが分かる。
【０１７４】
（実施例１１）
ニトロソニフェジピンの合成
この実施例においてはニトロソニフェジピンを合成するために光化学的合成を用いた。具体的には、ニフェジピン（２０ｍｇ）をパイレックス（登録商標）製培養チューブ中で１０ｍＬのアセトニトリルに溶解し、蓋をし、２５０Ｗハロゲンランプ（３Ｍ ＥＶＷ）で３０分間光分解した。ロータリーエバポレーターで溶媒を除去することにより生成物を分離して、青緑色油（１８．１ｍｇ、収率９４％）を得た。ＧＣ／ＭＳ分析により、ニトロソニフェジピンへの９８．５％を超える変換が示された。具体例としての結果を図２０に示す。
【０１７５】
（実施例１２）
ヒト患者の治療
ＭＭＳＥスコアに基づいてＭＣＩを有すると判定されたヒト患者にニトロソニフェジピンを１日当たり１０００ｍｇの用量で投与する。ニトロソニフェジピンを１日３回患者による経口投与用の錠剤として与える。
【０１７６】
ＣＤＲスコアに基づいて早期アルツハイマー病（ＥＡＤ）を有すると判定された別のヒト患者にニトロソニフェジピンを１日当たり８００ｍｇの用量で投与する。ニトロソニフェジピンを１日３回患者による経口投与用の錠剤として与える。
【０１７７】
患者から得られる流体試料中のＰＤＳ／ＴＴＲ複合体のレベルに基づいてＭＣＩを有すると判定されたヒト患者にニトロソニフェジピンを１日当たり１０００ｍｇの用量で投与する。ニトロソニフェジピンを１日４回患者による経口投与用の錠剤として与える。
【０１７８】
同等のもの
前述のものは、本発明の特定の非限定的実施形態の記述であった。当業者は、本明細書で述べた本発明の特定の実施形態と多くの同等のものを認識する、または常用の実験のみを用いて確認することができるであろう。当業者は、以下の特許請求の範囲に定義するような本発明の精神または範囲から逸脱することなく、この記述の様々な変更および修正を行うことができることを理解するであろう。
【０１７９】
特許請求の範囲において、「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」などの冠詞は、特に示さない限り、または特に文脈から明らかでない限り、１つまたは複数を意味することがある。群の１つまたは複数のメンバーの間に「または（ｏｒ）」を含む請求項または記述は、特に示さない限り、または特に文脈から明らかでない限り、群メンバーの１つ、複数またはすべてが所定の生成物若しくはプロセスに存在し、用いられている、または他の状態で関連する場合、満足されていると見なされる。本発明は、群の厳密に１つのメンバーが所定の生成物若しくはプロセスに存在し、用いられている、または他の状態で関連する実施形態を含む。本発明はまた、群メンバーの複数またはすべてが所定の生成物若しくは方法に存在し、用いられている、または他の状態で関連する実施形態を含む。さらに、本発明は、１つ若しくは複数の請求項からのまたは記述の関連部分からの１つまたは複数の制限、要素、語句、記述用語等が別の請求項に導入されている、すべての変化、組合せおよび並べ替えを包含することを理解すべきである。例えば、別の請求項に従属する任意の請求項は、同じ基本請求項に従属する別の任意の請求項に見いだされる１つまたは複数の制限を含むように修正することができる。さらに、請求項が組成物を列挙している場合、特に示さない限り、または矛盾若しくは不一致が生ずることが当業者に明らかでない限り、本明細書で開示した目的のいずれかのために組成物を使用する方法が含まれ、本明細書で開示した調製する方法のいずれかまたは当技術分野で公知の他の方法に従って組成物を作製する方法が含まれることを理解すべきである。さらに、本発明は、本明細書で開示した組成物を調製する方法のいずれかに従って調製された組成物を包含する。
【０１８０】
要素が例えば、マーカッシュ群記載形式でリストとして表されている場合、要素の各サブグループも開示され、いずれかの要素（単数または複数）を群から除去することができることを理解すべきである。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、開かれていることを意図し、追加の要素またはステップを含めることを許容することも指摘される。一般的に、本発明または本発明の態様が特定の要素、特徴、ステップ等を含むと見なされる場合、本発明の特定の実施形態または本発明の態様は、そのような要素、特徴、ステップ等からなるまたはから本質的になることを理解すべきである。簡単の目的のために、それらの実施形態は、本明細書にこれらの語で具体的に示さなかった。したがって、１つまたは複数の要素、特徴、ステップ等を含む本発明の各実施形態について、本発明は、それらの要素、特徴、ステップ等からなるまたはから本質的になる実施形態も提供する。
【０１８１】
範囲を示す場合、端点が含まれる。さらに、特に示さない限り、或いは文脈および／または当業者の理解から特に明らかでない限り、範囲として表されている値は、文脈上別の状態であることが明確に示されない限り、範囲の下限の単位の１０分の１までの、本発明の異なる実施形態における表示された範囲内の特定の値をとり得ることを理解すべきである。特に示さない限り、或いは文脈および／または当業者の理解から特に明らかでない限り、範囲として表されている値は、所定の範囲内の任意の部分範囲をとり得、部分範囲の端点は、範囲の下限の単位の１０分の１と同じ程度の精度で表されることも理解すべきである。
【０１８２】
さらに、本発明の特定の実施形態はいずれも、いずれか１つまたは複数の請求項から明示的に除外することができることを理解すべきである。本発明の組成物および／または方法の実施形態、要素、特徴、適用または態様はいずれも、いずれか１つまたは複数の請求項から明示的に除外することができる。簡潔の目的のために、１つまたは複数の要素、特徴、目的または態様が除外されている実施形態のすべては、本明細書に明示的に示さない。
【０１８３】
参考文献の組込み
本願で引用したすべての刊行物および特許文書は、あたかもそれぞれ個々の刊行物または特許文書の内容が本願に組み込まれたかのようなものと同じ程度にそれらの全体として参照により組み込まれている。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される治療上有効量の薬剤、並びに薬学的に許容される担体を含む、ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防するのに適する医薬組成物。
【請求項２】
前記薬剤がカルシウムチャネル遮断薬ではない、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記薬剤がニフェジピンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記薬剤が酸化ニフェジピンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記薬剤がニトロソニフェジピンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記薬剤がニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンの混合物を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記混合物が５５％のニトロソニフェジピン、１１％の酸化ニフェジピンおよび３４％のニフェジピンを含む、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記薬剤がサイロキシン（Ｔ４）および／またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）をさらに含む、前記請求項のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１０００ｍｇの範囲にわたる、前記請求項のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２００ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１００ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約５０ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１０ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約５ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２．５ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２．０ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１．５ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１．０ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約０．５ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約０．１ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記薬剤がニトロソニフェジピンであり、前記治療上有効量が１用量当たり約１０ｍｇ〜約２．５ｇの範囲にわたる、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
経口、皮下、静脈内、経皮、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻および直腸投与からなる群から選択される経路による投与用に製剤化されている、前記請求項のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
経口投与用に製剤化されている、前記請求項のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
即時放出用に製剤化されている、前記請求項のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
延長放出用に製剤化されている、請求項１から２３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防するための方法であって、
ＭＣＩまたはアルツハイマー病に関連する少なくとも１つの症状または特徴が存在度、強さ、重症度若しくは頻度において低下するか、またはその発現が遅延するように、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、または罹患しやすい被験体にニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される治療上有効量の薬剤を投与するステップを含む方法。
【請求項２７】
前記薬剤がカルシウムチャネル遮断薬ではない、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記少なくとも１つの症状または特徴が認知機能低下である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記少なくとも１つの症状または特徴がアミロイドβタンパク質の産生である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記少なくとも１つの症状または特徴がβ−セクレターゼ活性である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３１】
前記少なくとも１つの症状または特徴がγ−セクレターゼ活性である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３２】
前記γ−セクレターゼ活性が、プレセニリン−１（ＰＳ−１）、ニカストリン、ＡＰＨ−１および／またはＰＥＮ−２活性を阻害することにより低下する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記γ−セクレターゼ活性が、オーファンＧ共役受容体３（ＧＰＣＲ−３）活性を阻害することにより低下する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記少なくとも１つの症状または特徴が対らせん状細線維の形成である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３５】
前記少なくとも１つの症状または特徴が脳内のリン酸化タウタンパク質である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記少なくとも１つの症状または特徴が中枢神経系における免疫または炎症状態である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３７】
前記免疫または炎症状態が、中枢神経系における１つまたは複数のサイトカインのレベルを低下させることにより低減する、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記１つまたは複数のサイトカインがＩＬ−１を含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記１つまたは複数のサイトカインがＩＬ−６を含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記１つまたは複数のサイトカインがＴＮＦ−αを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項４１】
前記薬剤がニフェジピンを含む、請求項２６から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記薬剤が酸化ニフェジピンを含む、請求項２６から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記薬剤がニトロソニフェジピンを含む、請求項２６から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
前記薬剤がニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンの混合物を含む、請求項２６から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
前記混合物が５５％のニトロソニフェジピン、１１％の酸化ニフェジピンおよび３４％のニフェジピンを含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記薬剤がサイロキシン（Ｔ４）および／またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）をさらに含む、請求項４１から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１０００ｍｇの範囲にわたる、請求項２６から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２００ｍｇの範囲にわたる、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１００ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約５０ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５１】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１０ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５２】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約５ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５３】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２．５ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５４】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２．０ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５５】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１．５ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５６】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１．０ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５７】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約０．５ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５８】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約０．１ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５９】
前記薬剤がニトロソニフェジピンであり、前記治療上有効量が１用量当たり約１０ｍｇ〜約２．５ｇの範囲にわたる、請求項２６に記載の方法。
【請求項６０】
前記薬剤を、経口、皮下、静脈内、経皮、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻および直腸投与からなる群から選択される経路により投与する、請求項２６から５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
前記薬剤を経口投与によって投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６２】
前記薬剤を月１回投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
前記薬剤を隔週に投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
前記薬剤を週１回投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６５】
前記薬剤を毎日投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
前記薬剤を１日２回投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
前記薬剤を１日３回投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
前記薬剤を１日４回投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６９】
前記被験体が、対照と比較して異常なレベルのバイオマーカーを有し、前記バイオマーカーが、
トランスサイレチンタンパク質および／またはプロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼタンパク質の少なくとも１つ、並びに
トランスサイレチン、プロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼ、β−２−ミクログロブリン、シスタチンＣ、スーパーオキシドジスムターゼ［Ｃｕ−Ｚｎ］、血漿レチノール結合タンパク質、ホスファチジルエタノールアミン結合タンパク質、カルボニックアンヒドラーゼ２および／またはセロトランスフェリンタンパク質から選択される少なくとも１つの第２の異なるタンパク質
を含む、請求項２６から６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７０】
前記バイオマーカーがプロスタグランジンＤ２シンターゼおよびトランスサイレチン（ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体）を含む、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
前記被験体が、対照と比較して異常なレベルのバイオマーカーを有し、前記バイオマーカーが（ｉ）βアミロイド４０（Ａβ４０）、（ｉｉ）βアミロイド４２（Ａβ４２）、（ｉｉｉ）Ａβ４０とＡβ４２との比、および（ｉｖ）リン酸化タウと総タウとの比の１つまたは複数を含む、請求項２６から６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７２】
前記バイオマーカーが、前記被験体から得られる流体試料中で測定される、請求項６９から７１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７３】
前記流体試料がＣＳＦ、血清、全血、血漿、尿、腹水、唾液、組織滲出液、洗浄液およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記対照が、健常個体、所定の病期を有するアルツハイマー病に罹患した患者、治療前の被験体およびそれらの組合せからなる群から選択される被験体におけるバイオマーカーのレベルを示す、請求項６９から７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７５】
前記被験体が前記対照と比較して低いレベルのバイオマーカーを有する、請求項６９から７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７６】
前記被験体が前記対照と比較して高いレベルのバイオマーカーを有する、請求項６９から７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７７】
異常なレベルの前記バイオマーカーに基づいて薬剤の治療上有効量を最初に決定するステップをさらに含む、請求項６９から７６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７８】
前記被験体が認知障害を示す試験スコアを有する、請求項２６から７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
前記試験スコアがＭＭＳＥ（ミニメンタルステータス検査）スコアである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記ＭＭＳＥスコアが２７より低い、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記ＭＭＳＥスコアが２１〜２６の範囲にわたる、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
前記試験スコアが臨床的認知症尺度（ＣＤＲ）スコアである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８３】
前記ＣＤＲスコアが０を超える、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
前記ＣＤＲスコアが０．５または１である、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
ニトロソニフェジピンおよびニフェジピンを含み、ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約１：１である、固形経口剤形。
【請求項８６】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約２：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項８７】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約４：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項８８】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約８：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項８９】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約１６：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９０】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約３２：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９１】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約６４：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９２】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約１００：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９３】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約２００：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９４】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約５００：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９５】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約１０００：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９６】
１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、請求項８５から９５のいずれかに記載の固形経口剤形。
【請求項９７】
前記１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、結合剤、緩衝剤、希釈剤、分散剤、皮膚軟化剤、被膜形成剤、滑剤、光遮断剤、保存剤、溶媒、安定化剤、界面活性剤、懸濁化剤および／または等張化剤の少なくも１つを含む、請求項９６に記載の固形経口剤形。
【請求項９８】
延長放出用に製剤化されている、請求項８５から９７のいずれか一項に記載の固形経口剤形。
【請求項９９】
即時放出用に製剤化されている、請求項８５から９７のいずれか一項に記載の固形経口剤形。
【請求項１】
ニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される治療上有効量の薬剤、並びに薬学的に許容される担体を含む、ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防するのに適する医薬組成物。
【請求項２】
前記薬剤がカルシウムチャネル遮断薬ではない、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記薬剤がニフェジピンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記薬剤が酸化ニフェジピンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記薬剤がニトロソニフェジピンを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記薬剤がニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンの混合物を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記混合物が５５％のニトロソニフェジピン、１１％の酸化ニフェジピンおよび３４％のニフェジピンを含む、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記薬剤がサイロキシン（Ｔ４）および／またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）をさらに含む、前記請求項のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１０００ｍｇの範囲にわたる、前記請求項のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２００ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１００ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約５０ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１０ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約５ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２．５ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２．０ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１．５ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１．０ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約０．５ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約０．１ｍｇの範囲にわたる、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記薬剤がニトロソニフェジピンであり、前記治療上有効量が１用量当たり約１０ｍｇ〜約２．５ｇの範囲にわたる、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
経口、皮下、静脈内、経皮、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻および直腸投与からなる群から選択される経路による投与用に製剤化されている、前記請求項のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
経口投与用に製剤化されている、前記請求項のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
即時放出用に製剤化されている、前記請求項のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
延長放出用に製剤化されている、請求項１から２３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
ヒト被験体における軽度認知障害（ＭＣＩ）および／またはアルツハイマー病を治療するか、それを遅延させるか、またはそれを予防するための方法であって、
ＭＣＩまたはアルツハイマー病に関連する少なくとも１つの症状または特徴が存在度、強さ、重症度若しくは頻度において低下するか、またはその発現が遅延するように、ＭＣＩまたはアルツハイマー病に罹患している、または罹患しやすい被験体にニフェジピン、酸化ニフェジピン、ニトロソニフェジピン、サイロキシン（Ｔ４）、トリヨードサイロニン（Ｔ３）およびそれらの組合せからなる群から選択される治療上有効量の薬剤を投与するステップを含む方法。
【請求項２７】
前記薬剤がカルシウムチャネル遮断薬ではない、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記少なくとも１つの症状または特徴が認知機能低下である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記少なくとも１つの症状または特徴がアミロイドβタンパク質の産生である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記少なくとも１つの症状または特徴がβ−セクレターゼ活性である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３１】
前記少なくとも１つの症状または特徴がγ−セクレターゼ活性である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３２】
前記γ−セクレターゼ活性が、プレセニリン−１（ＰＳ−１）、ニカストリン、ＡＰＨ−１および／またはＰＥＮ−２活性を阻害することにより低下する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記γ−セクレターゼ活性が、オーファンＧ共役受容体３（ＧＰＣＲ−３）活性を阻害することにより低下する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記少なくとも１つの症状または特徴が対らせん状細線維の形成である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３５】
前記少なくとも１つの症状または特徴が脳内のリン酸化タウタンパク質である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記少なくとも１つの症状または特徴が中枢神経系における免疫または炎症状態である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３７】
前記免疫または炎症状態が、中枢神経系における１つまたは複数のサイトカインのレベルを低下させることにより低減する、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記１つまたは複数のサイトカインがＩＬ−１を含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記１つまたは複数のサイトカインがＩＬ−６を含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記１つまたは複数のサイトカインがＴＮＦ−αを含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項４１】
前記薬剤がニフェジピンを含む、請求項２６から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記薬剤が酸化ニフェジピンを含む、請求項２６から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記薬剤がニトロソニフェジピンを含む、請求項２６から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
前記薬剤がニトロソニフェジピン、酸化ニフェジピンおよびニフェジピンの混合物を含む、請求項２６から４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
前記混合物が５５％のニトロソニフェジピン、１１％の酸化ニフェジピンおよび３４％のニフェジピンを含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記薬剤がサイロキシン（Ｔ４）および／またはトリヨードサイロニン（Ｔ３）をさらに含む、請求項４１から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１０００ｍｇの範囲にわたる、請求項２６から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２００ｍｇの範囲にわたる、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１００ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約５０ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５１】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１０ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５２】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約５ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５３】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２．５ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５４】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約２．０ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５５】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１．５ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５６】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約１．０ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５７】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約０．５ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５８】
前記治療上有効量が１用量当たり約０．０１〜約０．１ｍｇの範囲にわたる、請求項４８に記載の方法。
【請求項５９】
前記薬剤がニトロソニフェジピンであり、前記治療上有効量が１用量当たり約１０ｍｇ〜約２．５ｇの範囲にわたる、請求項２６に記載の方法。
【請求項６０】
前記薬剤を、経口、皮下、静脈内、経皮、腹腔内、筋肉内、脳室内、実質内、髄腔内、頭蓋内、口腔内、粘膜、鼻および直腸投与からなる群から選択される経路により投与する、請求項２６から５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
前記薬剤を経口投与によって投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６２】
前記薬剤を月１回投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
前記薬剤を隔週に投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
前記薬剤を週１回投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６５】
前記薬剤を毎日投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６６】
前記薬剤を１日２回投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
前記薬剤を１日３回投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
前記薬剤を１日４回投与する、請求項２６から６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６９】
前記被験体が、対照と比較して異常なレベルのバイオマーカーを有し、前記バイオマーカーが、
トランスサイレチンタンパク質および／またはプロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼタンパク質の少なくとも１つ、並びに
トランスサイレチン、プロスタグランジン−Ｈ２ Ｄイソメラーゼ、β−２−ミクログロブリン、シスタチンＣ、スーパーオキシドジスムターゼ［Ｃｕ−Ｚｎ］、血漿レチノール結合タンパク質、ホスファチジルエタノールアミン結合タンパク質、カルボニックアンヒドラーゼ２および／またはセロトランスフェリンタンパク質から選択される少なくとも１つの第２の異なるタンパク質
を含む、請求項２６から６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７０】
前記バイオマーカーがプロスタグランジンＤ２シンターゼおよびトランスサイレチン（ＰＤＳ／ＴＴＲ複合体）を含む、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
前記被験体が、対照と比較して異常なレベルのバイオマーカーを有し、前記バイオマーカーが（ｉ）βアミロイド４０（Ａβ４０）、（ｉｉ）βアミロイド４２（Ａβ４２）、（ｉｉｉ）Ａβ４０とＡβ４２との比、および（ｉｖ）リン酸化タウと総タウとの比の１つまたは複数を含む、請求項２６から６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７２】
前記バイオマーカーが、前記被験体から得られる流体試料中で測定される、請求項６９から７１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７３】
前記流体試料がＣＳＦ、血清、全血、血漿、尿、腹水、唾液、組織滲出液、洗浄液およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記対照が、健常個体、所定の病期を有するアルツハイマー病に罹患した患者、治療前の被験体およびそれらの組合せからなる群から選択される被験体におけるバイオマーカーのレベルを示す、請求項６９から７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７５】
前記被験体が前記対照と比較して低いレベルのバイオマーカーを有する、請求項６９から７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７６】
前記被験体が前記対照と比較して高いレベルのバイオマーカーを有する、請求項６９から７４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７７】
異常なレベルの前記バイオマーカーに基づいて薬剤の治療上有効量を最初に決定するステップをさらに含む、請求項６９から７６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７８】
前記被験体が認知障害を示す試験スコアを有する、請求項２６から７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７９】
前記試験スコアがＭＭＳＥ（ミニメンタルステータス検査）スコアである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記ＭＭＳＥスコアが２７より低い、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記ＭＭＳＥスコアが２１〜２６の範囲にわたる、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
前記試験スコアが臨床的認知症尺度（ＣＤＲ）スコアである、請求項７８に記載の方法。
【請求項８３】
前記ＣＤＲスコアが０を超える、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
前記ＣＤＲスコアが０．５または１である、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
ニトロソニフェジピンおよびニフェジピンを含み、ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約１：１である、固形経口剤形。
【請求項８６】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約２：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項８７】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約４：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項８８】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約８：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項８９】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約１６：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９０】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約３２：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９１】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約６４：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９２】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約１００：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９３】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約２００：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９４】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約５００：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９５】
ニトロソニフェジピンとニフェジピンとの質量比が少なくとも約１０００：１である、請求項８５に記載の固形経口剤形。
【請求項９６】
１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、請求項８５から９５のいずれかに記載の固形経口剤形。
【請求項９７】
前記１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、結合剤、緩衝剤、希釈剤、分散剤、皮膚軟化剤、被膜形成剤、滑剤、光遮断剤、保存剤、溶媒、安定化剤、界面活性剤、懸濁化剤および／または等張化剤の少なくも１つを含む、請求項９６に記載の固形経口剤形。
【請求項９８】
延長放出用に製剤化されている、請求項８５から９７のいずれか一項に記載の固形経口剤形。
【請求項９９】
即時放出用に製剤化されている、請求項８５から９７のいずれか一項に記載の固形経口剤形。
【図３】
【図６】
【図１２】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図１】
【図２】
【図４】
【図５】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１５Ａ】
【図１６】
【図２０】
【図６】
【図１２】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図１】
【図２】
【図４】
【図５】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１５Ａ】
【図１６】
【図２０】
【公表番号】特表２０１２−５２６８４４（Ｐ２０１２−５２６８４４Ａ）
【公表日】平成２４年１１月１日（２０１２．１１．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５１１０１３（Ｐ２０１２−５１１０１３）
【出願日】平成２２年５月１３日（２０１０．５．１３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３４７２１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１３２６７１
【国際公開日】平成２２年１１月１８日（２０１０．１１．１８）
【出願人】（５１１２７４３７４）ザ ユニバーシティ オブ ケンタッキー リサーチ ファウンデーション (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年１１月１日（２０１２．１１．１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年５月１３日（２０１０．５．１３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３４７２１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１３２６７１
【国際公開日】平成２２年１１月１８日（２０１０．１１．１８）
【出願人】（５１１２７４３７４）ザ ユニバーシティ オブ ケンタッキー リサーチ ファウンデーション (1)
【Ｆターム（参考）】
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