【課題】ヒトNotch およびDelta 遺伝子のヌクレオチド配列、およびそれらのコード化タンパク質のアミノ酸配列、並びに抗原決定基を含むか機能的に活性であるそのフラグメントの提供。
【解決手段】遺伝子工学的手法により得られる、以下の遺伝子、およびそれにコードされるタンパク質。（１）ヒトNotch およびDelta タンパク質。（２）トポリズミックタンパク質へのホモタイピックまたはヘテロタイピック結合を媒介するトポリスミック遺伝子によりコードされる“トポリズミックタンパク質 (toporythmic proteins) ”の“接着フラグメント”。（３）ヒトNotch および接着フラグメントに対する抗体。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
図13（配列番号6）に示されるアミノ酸番号1−230に最大の相同性を有するDeltaタンパク質の一部分であり、第1細胞の表面上に発現されるとき、第2細胞の表面上に発現されたNotchタンパク質とin vitroで結合できることにより特徴づけられ、該Notchタンパク質が、(i)ATCCに寄託されかつ受託番号68609で特定されるプラスミドhN3kに含まれるヒトNotch DNA配列によってコードされるか、又はATCCに寄託されかつ受託番号68611で特定されるプラスミドhN5kに含まれるヒトNotch DNA配列によってコードされるNotchアミノ酸配列を含む、Deltaタンパク質の精製されたフラグメント。
【請求項２】
図13（配列番号6）に示されるアミノ酸1−230からなる請求項1に記載のフラグメント。
【請求項３】
図13（配列番号6）に示されるアミノ酸番号32−230に最大の相同性を有するDeltaタンパク質の一部分であり、第1細胞の表面上に発現されるとき、第2細胞の表面上に発現された第2のDeltaタンパク質とin vitroで結合できることにより特徴づけられる、Deltaタンパク質の精製されたフラグメント。
【請求項４】
図13（配列番号6）に示されるアミノ酸32−230からなる請求項3に記載のフラグメント。
【請求項５】
異種タンパク質配列に結合した請求項1〜4のいずれか1項に記載のフラグメントを含むキメラタンパク質。
【請求項６】
前記フラグメントの配列内の1以上のアミノ酸残基が、該アミノ酸が属するクラスのサイレント変化を生じさせる他のアミノ酸で置換されている請求項1〜4のいずれか1項に記載のフラグメントの精製された誘導体であって、該クラスとして、アラニン、ロイシン、イソロイシン、バリン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン及びメチオニンを含む非極性（疎水性）アミノ酸；グリシン、セリン、スレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン及びグルタミンを含む極性で中性のアミノ酸；アルギニン、リシン及びヒスチジンを含む陽性荷電（塩基性）アミノ酸；並びにアスパラギン酸及びグルタミン酸を含む陰性荷電（酸性）アミノ酸を含み、第1細胞の表面上に発現されるとき、第2細胞の表面上に発現されたNotchタンパク質とin vitroで結合でき、該Notchタンパク質が、(i)ATCCに寄託されかつ受託番号68609で特定されるプラスミドhN3kに含まれるヒトNotch DNA配列によってコードされるか、又はATCCに寄託されかつ受託番号68611で特定されるプラスミドhN5kに含まれるヒトNotch DNA配列によってコードされるNotchアミノ酸配列を含む、上記誘導体。
【請求項７】
異種タンパク質配列に結合した、請求項6記載の誘導体を含むキメラタンパク質。
【請求項８】
Deltaタンパク質のアミノ酸配列（配列番号6）を有し、配列番号6のアミノ酸残基197と198の間にアミノ酸配列Arg-Lys-Ile-Phe（配列番号30）が挿入されている、Deltaタンパク質の精製された誘導体であって、該誘導体は第2のDeltaタンパク質（配列番号6）に結合できるがNotchタンパク質には結合できず、該Notchタンパク質が、(i)ATCCに寄託されかつ受託番号68609で特定されるプラスミドhN3kに含まれるヒトNotch DNA配列によってコードされるか、又はATCCに寄託されかつ受託番号68611で特定されるプラスミドhN5kに含まれるヒトNotch DNA配列によってコードされるNotchアミノ酸配列を含む、上記誘導体。
【請求項９】
請求項1〜4のいずれか1項に記載のフラグメントをコードする精製された核酸。
【請求項１０】
請求項6に記載の誘導体をコードする精製された核酸。
【請求項１１】
請求項5または請求項7に記載のキメラタンパク質をコードする核酸。
【請求項１２】
請求項9〜11のいずれか1項に記載の核酸を含む精製された核酸ベクター。
【請求項１３】
請求項12に記載の核酸ベクターで形質転換された細胞。
【請求項１４】
請求項1〜4のいずれか1項に記載のフラグメントに結合する抗体。
【請求項１５】
抗体が精製されている、請求項14に記載の抗体。
【請求項１６】
Deltaタンパク質のフラグメントが、Deltaタンパク質の細胞内ドメインを欠失している、請求項1〜4のいずれか1項に記載のフラグメント。
【請求項１７】
Deltaタンパク質のフラグメントが、Deltaタンパク質の上皮成長因子様領域及び膜貫通領域をさらに欠失している、請求項16に記載のフラグメント。
【請求項１８】
Deltaタンパク質のフラグメントが、Deltaタンパク質の細胞内ドメインを欠失している、請求項5または7に記載のキメラタンパク質。
【請求項１９】
Deltaタンパク質のフラグメントが、Deltaタンパク質の上皮成長因子様領域及び膜貫通領域をさらに欠失している、請求項18に記載のキメラタンパク質。
【請求項２０】
Deltaタンパク質のフラグメントが、Deltaタンパク質の細胞内ドメインを欠失している、請求項6に記載の誘導体。
【請求項２１】
Deltaタンパク質のフラグメントが、Deltaタンパク質の上皮成長因子様領域及び膜貫通領域をさらに欠失している、請求項20に記載の誘導体。
【請求項２２】
Deltaタンパク質のフラグメントもしくはその誘導体、またはDeltaタンパク質のフラグメントもしくはその誘導体を含むキメラタンパク質を製造する方法であって、該フラグメントもしくはその誘導体、またはキメラタンパク質が細胞で発現されるように請求項13に記載の細胞を生育すること、および発現されたフラグメントもしくはその誘導体、またはキメラタンパク質を単離することを含む上記方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６ａ】

【図６ｂ】

【図７】

【図８】

【図９ａ】

【図９ｂ】

【図９ｃ】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３ａ】

【図１３ｂ】

【図１３ｃ】

【図１３ｄ】

【図１３ｅ】

【図１３ｆ】

【図１４】

【図１５ａ】

【図１５ｂ】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３ａ】

【図２３ｂ】

【図２３ｃ】

【図２３ｄ】

【図２３ｅ】

【図２３ｆ】

【図２３ｇ】

【図２３ｈ】

【図２３ｉ】

【図２３ｊ】

【図２３ｋ】

【図２３ｌ】

【図２３ｍ】

【図２３ｎ】

【図２３ｏ】

【図２３ｐ】

【図２３ｑ】

【図２４ａ】

【図２４ｂ】

【図２４ｃ】

【図２４ｄ】

【図２４ｅ】

【図２４ｆ】

【図２４ｇ】

【図２５ａ】

【図２５ｂ】

【図２５ｃ】

【公開番号】特開２００７−３３０２５９（Ｐ２００７−３３０２５９Ａ）
【公開日】平成１９年１２月２７日（２００７．１２．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−１８２６８８（Ｐ２００７−１８２６８８）
【出願日】平成１９年７月１１日（２００７．７．１１）
【分割の表示】特願２００３−１４８３２２（Ｐ２００３−１４８３２２）の分割
【原出願日】平成４年５月１日（１９９２．５．１）
【出願人】（５０３１８８８２９）エール　ユニバーシティー (6)
【出願人】（５９３０８０６８５）インディアナ　ユニバーシティ　ファンデーション (5)
【Ｆターム（参考）】