本発明は、ＲＳＶがｉＲＮＡ剤の鼻内投与によりならびにこのような作用物質の非経口投与により抑制され得る、というin vitroおよびin vivoにおける実証、そしてＲＳＶのＡおよびＢサブタイプの両方でＲＮＡレベルを低減し得るＲＳＶのＰ、ＮおよびＬ遺伝子からの強力なｉＲＮＡ剤の同定に基づいている。これらの知見に基づいて、本発明は、被験者、例えば哺乳類、例えばヒトにおけるＲＳＶｍＲＮＡレベル、ＲＳＶタンパク質レベルおよびＲＳＶウイルス力価を低減するのに有用である特定の組成物および方法を提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療的有効量のＡＬＮ−ＲＳＶ０１を含むｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項２】
前記組成物が凍結乾燥粉末を含む請求項１記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項３】
前記組成物が、−２０℃で保存される場合、少なくとも２４ヶ月間安定である請求項２記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項４】
前記組成物が溶液を含む請求項１記載のｓｉＲＮＡ。
【請求項５】
前記組成物が、２℃〜８℃で保存される場合、少なくとも２４ヶ月間安定である請求項４記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項６】
前記溶液の重量オスモル濃度が２００〜４００ｍＯｓｍ／ｋｇである請求項４記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項７】
前記溶液が緩衝剤を含む請求項４記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項８】
前記緩衝剤がリン酸ナトリウム緩衝剤である請求項７記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項９】
前記リン酸ナトリウム緩衝剤の濃度が５０ｍＭである請求項８記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項１０】
前記緩衝溶液のｐＨが５〜８である請求項８記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項１１】
前記緩衝溶液のｐＨが５．６〜７．６である請求項１０記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項１２】
前記緩衝溶液のｐＨが６．６である請求項１１記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項１３】
前記ＡＬＮ−ＲＳＶ０１の濃度が１５０ｍｇ／ｍｌの無水オリゴヌクレオチドである請求項８記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項１４】
前記ＡＬＮ−ＲＳＶ０１の濃度が７５ｍｇ／ｍｌの無水オリゴヌクレオチドである請求項８記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項１５】
前記溶液の容積が１．０ｍｌである請求項７記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項１６】
前記容積が２つの容器の間で等しく分けられる請求項１５記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項１７】
前記組成物が液体懸濁液を含む請求項１記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項１８】
前記組成物が乾燥粉末を含む請求項１記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項１９】
前記治療的有効量が１５０ｍｇ以下の無水オリゴヌクレオチドである請求項１記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項２０】
前記治療的有効量が１５０ｍｇの無水オリゴヌクレオチドである請求項１９記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項２１】
前記治療的有効量が７５ｍｇの無水オリゴヌクレオチドである請求項１９記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項２２】
ヒト被験者への前記治療的有効量の投与は前記被験者において白血球数の有意の増大を生じさせない請求項１記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項２３】
ヒト被験者への前記治療的有効量の投与は前記被験者においてＣＲＰ濃度、Ｇ−ＣＳＦ濃度、ＩＬ１−ＲＡ濃度またはＴＮＦ濃度の有意の増大を生じさせない請求項１記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項２４】
前記組成物がエキソヌクレアーゼからの保護のための修飾をさらに含む請求項１記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項２５】
前記分子がホスホロチオエートおよびヒドロキシピロリジン（ｈｐ）リンカーからなる群から選択される請求項２４記載のｓｉＲＮＡ組成物。
【請求項２６】
ヒト被験者におけるＲＳＶ感染の予防または治療のための請求項１記載の組成物の使用。
【請求項２７】
ヒトにおける呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）感染を予防するかまたは治療する方法であって、治療的有効量のＡＬＮ−ＲＳＶ０１を含む組成物を前記ヒトに投与することを包含する方法。
【請求項２８】
前記組成物が局所投与される請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
前記局所投与が鼻内または肺内である請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
前記局所投与が鼻内である請求項２９記載の方法。
【請求項３１】
前記局所投与が肺内である請求項２９記載の方法。
【請求項３２】
前記肺内投与が前記組成物の吸入によるものである請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
前記組成物がエーロゾル化液として投与される請求項２９記載の方法。
【請求項３４】
前記エーロゾル化液が鼻噴霧剤である請求項３３記載の方法。
【請求項３５】
前記鼻噴霧剤がBecton-Dickinson Ａｃｃｕｓｐｒａｙ（商標）鼻噴霧系により作られる請求項３４記載の方法。
【請求項３６】
前記エーロゾル化液がネブライザーにより作られる請求項３３記載の方法。
【請求項３７】
請求項４〜１６のいずれかの組成物を投与することを包含する請求項３３記載の方法。
【請求項３８】
前記投与が、０．５ｍｌの前記エーロゾル化液を各鼻孔に投与することを包含する請求項３７記載の方法。
【請求項３９】
前記組成物の複数用量を投与することを包含する請求項２８記載の方法。
【請求項４０】
前記複数用量のうちの１つが毎日投与される請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
前記複数用量が２、３、４または５用量である請求項４０記載の方法。
【請求項４２】
前記複数用量が５用量である請求項４１記載の方法。
【請求項４３】
前記複数用量の初回が、前記ヒトがＲＳＶに感染する前に投与される請求項３９記載の方法。
【請求項４４】
前記複数用量の前記投与が、前記ヒトの気道の細胞中のＲＳＶタンパク質、ｍＲＮＡまたは力価を、前記複数用量により提供される用量と等しい単一用量の投与と少なくとも同一レベルに低減する請求項３９記載の方法。
【請求項４５】
前記複数用量の前記投与が吸入によるものであり、総用量０．１〜０．６ｍｇ／ｋｇの無水オリゴヌクレオチドを前記ヒトに送達する請求項３９記載の方法。
【請求項４６】
肺移植を受けたヒト患者における呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）感染を予防するかまたは治療する方法であって、治療的有効量のＡＬＮ−ＲＳＶ０１を含む組成物を前記肺移植を受けたヒト患者に投与することを包含する方法。
【請求項４７】
前記組成物が局所投与される請求項４６記載の方法。
【請求項４８】
前記局所投与が鼻内または肺内である請求項４７記載の方法。
【請求項４９】
前記局所投与が鼻内である請求項４８記載の方法。
【請求項５０】
前記局所投与が肺内である請求項４８記載の方法。
【請求項５１】
前記肺内投与が前記組成物の吸入によるものである請求項５０記載の方法。
【請求項５２】
前記組成物がエーロゾルとして投与される請求項４８記載の方法。
【請求項５３】
前記エーロゾルが鼻噴霧剤である請求項５２記載の方法。
【請求項５４】
前記エーロゾルがネブライザーにより作られる請求項５２記載の方法。
【請求項５５】
前記ネブライザーがＰＡＲＩ ｅＦｌｏｗ（登録商標）３０Ｌネブライザーである請求項５４記載の方法。
【請求項５６】
複数用量の前記組成物を投与することを包含する請求項４６記載の方法。
【請求項５７】
前記複数用量のうちの１つが毎日投与される請求項５６記載の方法。
【請求項５８】
前記複数用量が２または３用量である請求項５７記載の方法。
【請求項５９】
前記複数用量が３用量である請求項５８記載の方法。
【請求項６０】
前記肺移植を受けたヒト患者が目下ＲＳＶに感染している請求項４６記載の方法。
【請求項６１】
前記複数用量の初回が投与される時点で、前記肺移植を受けたヒト患者が目下ＲＳＶに感染している請求項５６記載の方法。
【請求項６２】
前記投与が、前記肺移植を受けたヒト患者の気道の細胞中のＲＳＶタンパク質、ＲＳＶ ｍＲＮＡ、ＲＳＶピークウイルス負荷、ピークＲＳＶウイルス負荷までの時間、ＲＳＶウイルス脱粒の継続時間、ＲＳＶウイルスＡＵＣ、またはＲＳＶ力価を低減する請求項４６記載の方法。
【請求項６３】
前記複数用量の前記投与が、前記肺移植を受けたヒト患者の気道の細胞中のＲＳＶタンパク質、ＲＳＶ ｍＲＮＡ、ＲＳＶピークウイルス負荷、ピークＲＳＶウイルス負荷までの時間、ＲＳＶウイルス脱粒の継続時間、ＲＳＶウイルスＡＵＣ、またはＲＳＶ力価を、前記複数用量により提供される用量と等しい単一用量の投与と少なくとも同レベルに低減する請求項４６記載の方法。
【請求項６４】
前記複数用量の前記投与が吸入によるものであり、総用量０．１〜０．６ｍｇ／ｋｇの無水オリゴヌクレオチドを前記肺移植を受けたヒト患者に送達する請求項５６記載の方法。
【請求項６５】
ＲＳＶ感染の特性を確定することをさらに包含する請求項４６記載の方法。
【請求項６６】
ＲＳＶ感染の前記特性が前記肺移植を受けたヒト患者からの鼻スワブ試料および／または痰試料の定量的ＲＴ−ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）分析により確定される請求項６５記載の方法。
【請求項６７】
前記ｑＲＴ−ＰＣＲが、ＲＳＶ ｍＲＮＡ、ＲＳＶピークウイルス負荷、ピークＲＳＶウイルス負荷までの時間、ＲＳＶウイルス脱粒の継続時間、ＲＳＶウイルスＡＵＣ、またはＲＳＶ力価を確定するために用いられる請求項６６記載の方法。
【請求項６８】
前記肺移植を受けたヒト患者が気管支拡張薬療法を受けている請求項４６記載の方法。
【請求項６９】
前記肺移植を受けたヒト患者が気管支拡張薬療法施療の１時間以内に前記組成物を投与される請求項６８記載の方法。
【請求項７０】
前記肺移植を受けたヒト患者が標準ケア処置を受けている請求項４６記載の方法。
【請求項７１】
前記標準ケア処置がリバビリンの投与を包含する請求項７０記載の方法。
【請求項７２】
前記肺移植を受けたヒト患者が、リバビリンの投与の１〜２時間前に前記組成物を投与される請求項７１記載の方法。
【請求項７３】
前記肺移植を受けたヒト患者への前記組成物の前記投与がＲＳＶ感染の徴候および／または症候の開始後７日以内に開始される請求項６０記載の方法。
【請求項７４】
前記徴候および／または症候がＦＥＶ_１の低減、発熱、新規発症の鼻漏、咽喉の痛み、鼻閉、咳、喘鳴、頭痛、筋肉痛、悪寒または息切れを包含する請求項７３記載の方法。
【請求項７５】
治療的有効量のＡＬＮ−ＲＳＶ０１を含む組成物を前記肺移植を受けたヒト患者に投与することにより肺移植を受けたヒト患者における呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）感染を予防するかまたは治療することを包含する肺移植を受けたヒト患者における医学的病状の危険を低減するための方法であって、前記医学的病状が、移植肺の急性拒絶、閉塞性細気管支炎症候群、挿管の発生、ウイルス、細菌または真菌呼吸器感染の発生、ならびに肺機能の不可逆的低下からなる群から選択される方法。
【請求項７６】
０．６ｍｇ／ｋｇの濃度でのエーロゾル化ＡＬＮ−ＲＳＶ０１が、ＰＡＲＩ ｅＦｌｏｗ（登録商標）３０Ｌネブライザーを用いて３日間１日１回、エーロゾル化ＡＬＮ−ＲＳＶ０１の吸入により肺移植を受けたヒト患者に投与される請求項７５記載の方法。
【請求項７７】
前記組成物が局所的に投与される請求項７５記載の方法。
【請求項７８】
前記局所投与が鼻内または肺内である請求項７７記載の方法。
【請求項７９】
前記局所投与が鼻内である請求項７８記載の方法。
【請求項８０】
前記局所投与が肺内である請求項７８記載の方法。
【請求項８１】
前記肺内投与が前記組成物の吸入によるものである請求項８０記載の方法。
【請求項８２】
前記組成物がエーロゾルとして投与される請求項７８記載の方法。
【請求項８３】
前記エーロゾルが鼻噴霧剤である請求項８２記載の方法。
【請求項８４】
前記鼻噴霧剤がBecton-Dickinson Ａｃｃｕｓｐｒａｙ（登録商標）により投与される請求項８３記載の方法。
【請求項８５】
前記組成物の複数用量を投与することを包含する請求項７５機差の方法。
【請求項８６】
前記複数用量のうちの１つが毎日投与される請求項８５記載の方法。
【請求項８７】
前記複数用量が５用量である請求項８５記載の方法。
【請求項８８】
前記移植を受けたヒト患者が目下ＲＳＶに感染している請求項２７記載の方法。
【請求項８９】
前記移植を受けたヒト患者が、前記複数用量の初回が投与される時に、目下ＲＳＶに感染している請求項３９記載の方法。
【請求項９０】
前記投与が、前記移植を受けたヒト患者の気道の細胞中のＲＳＶタンパク質、ＲＳＶ ｍＲＮＡ、ＲＳＶピークウイルス負荷、ピークＲＳＶウイルス負荷までの時間、ＲＳＶウイルス脱粒の継続時間、ＲＳＶウイルスＡＵＣ、またはＲＳＶ力価を低減する請求項７５記載の方法。
【請求項９１】
前記複数用量の前記投与が、前記移植を受けたヒト患者の気道の細胞中のＲＳＶタンパク質、ＲＳＶ ｍＲＮＡ、ＲＳＶピークウイルス負荷、ピークＲＳＶウイルス負荷までの時間、ＲＳＶウイルス脱粒の継続時間、ＲＳＶウイルスＡＵＣ、またはＲＳＶ力価を、前記複数用量により提供される用量と等しい単一用量の投与と少なくとも同レベルに低減する請求項３９記載の方法。
【請求項９２】
前記複数用量の前記投与が吸入によるものであり、総用量７５ｍｇまたは１５０ｍｇの無水オリゴヌクレオチドを前記移植を受けたヒト患者に送達する請求項３９記載の方法。
【請求項９３】
ＡＬＮ−ＲＳＶ０１の抗ウイルス作用を確定することをさらに包含する請求項２７記載の方法。
【請求項９４】
前記抗ウイルス作用が定量的ＲＴ−ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）分析、定量的培養または回転増強培養により確定される請求項９３記載の方法。
【請求項９５】
移植を受けたヒト患者のウイルス負荷を確定することをさらに包含する請求項９４記載の方法。
【請求項９６】
前記ウイルス負荷が定量的ＲＴ−ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）分析、定量的培養またはウイルスＡＵＣにより確定される請求項９５記載の方法。
【請求項９７】
移植を受けたヒト患者のＲＳＶ疾患測定値を確定することをさらに包含する請求項２７記載の方法。
【請求項９８】
前記ＲＳＶ疾患測定値が症候、身体検査または粘液重量により測定される請求項９７記載の方法。
【請求項９９】
７５ｍｇまたは１５０ｍｇの用量での０．５ｍｌ／鼻孔のエーロゾル化ＡＬＮ−ＲＳＶ０１が、エーロゾル化ＡＬＮ−ＲＳＶ０１の吸入により移植を受けたヒト患者に投与される請求項２７記載の方法。
【請求項１００】
７５ｍｇまたは１５０ｍｇの用量での０．５ｍｌ／鼻孔のエーロゾル化ＡＬＮ−ＲＳＶ０１が、Becton-Dickinson Ａｃｃｕｓｐｒａｙ（登録商標）を用いて産生されるエーロゾル化ＡＬＮ−ＲＳＶ０１の吸入により移植を受けたヒト患者に投与される請求項２７記載の方法。
【請求項１０１】
少なくとも２日間持続する再発性咳に罹患していると前記ヒトを診断するステップをさらに包含する請求項２７記載の方法であって、前記診断が前記組成物の投与前になされる方法。
【請求項１０２】
前記ヒトが少なくとも２日持続した再発性咳を有する請求項２７記載の方法。
【請求項１０３】
前記ヒトが少なくとも１８歳未満である請求項１０１記載の方法。
【請求項１０４】
前記ヒトが弱化した免疫系を有する請求項１０１記載の方法。
【請求項１０５】
前記ヒトが入院している請求項１０１記載の方法。
【請求項１０６】
前記ヒトが２歳未満である請求項１０３記載の方法。
【請求項１０７】
前記ヒトが生後６ヶ月未満である請求項１０６記載の方法。
【請求項１０８】
前記ヒトが生後３ヶ月未満である請求項１０６記載の方法。
【請求項１０９】
前記ヒトが脱水状態になるかまたは脱水状態になる危険がある請求項２７および１０１〜１０６のいずれかに記載の方法。
【請求項１１０】
前記ヒトが前記組成物の投与後６週間以内にシナギス（商標）の一用量を投与される請求項２７記載の方法。
【請求項１１１】
前記ヒトにおけるＲＳＶ Ｎ遺伝子ｍＲＮＡのＡＬＮ−ＲＳＶ０１定方向切断を測定することをさらに包含する請求項１記載の方法。
【請求項１１２】
前記ＡＬＮ−ＲＳＶ０１定方向切断がＰＣＲにより検出される請求項１１１記載の方法。
【請求項１１３】
前記ＲＳＶ Ｎ遺伝子ｍＲＮＡ切断産物が前記ヒトの鼻試料中で検出される請求項１１１記載の方法。
【請求項１１４】
前記ＲＮＡｉ媒介性切断が一用量の前記組成物の投与後５日未満に測定される請求項１１１記載の方法。
【請求項１１５】
前記ＲＮＡｉ媒介性切断が一用量の前記組成物の投与後３日未満に測定される請求項１１４記載の方法。
【請求項１１６】
前記ヒトにおけるＲＳＶの力価を測定することをさらに包含する請求項１１１記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３Ａ】

【図１３Ｂ】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２２Ｃ】

【図２３Ａ】

【図２３Ｂ】

【図２４Ａ】

【図２４Ｂ】

【図２４Ｃ】

【図２５】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５Ａ】

【図３５Ｂ】

【図３５Ｃ】

【図３５Ｄ】

【図３５Ｅ】

【図３５Ｆ】

【図３５Ｇ】

【図３５Ｈ】

【図３５Ｉ】

【図３６】

【図３７Ａ】

【図３７Ｂ】

【公表番号】特表２０１１−５０６４８４（Ｐ２０１１−５０６４８４Ａ）
【公表日】平成２３年３月３日（２０１１．３．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３８２３２（Ｐ２０１０−５３８２３２）
【出願日】平成２０年１２月１５日（２００８．１２．１５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０８６８８９
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７６６７９
【国際公開日】平成２１年６月１８日（２００９．６．１８）
【出願人】（５０８２９０９１０）アルニラム　ファーマシューティカルズ，　インコーポレイテッド (8)
【Ｆターム（参考）】