スター活性が低く、特定緩衝液中の忠実度指数（ＦＩ）が同一緩衝液中の非変異酵素のＦＩよりも高い変異体酵素を作製するための方法及び組成物を提供する。
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非特異的ヌクレアーゼとＴ７エンドＩ突然変異体とを１：２００未満の単位比で含む酵素調製物を記載する。この酵素調製物は、ＤＮＡ配列決定に適したサイズの二本鎖ＤＮＡ断片を製造するために使用されうる。該断片の末端は、必要に応じて、該二本鎖ＤＮＡ断片の一方の鎖にアダプターまたは個々のヌクレオチドを連結するために容易に修飾されうる。 （もっと読む）

修飾ＤＮＡの切断に関連する組成物、方法および関連する使用が提供される。例えば、大型ＤＮＡの酵素による切断によって得ることができる、少なくとも５０％が類似のサイズであり、中心に位置する修飾ヌクレオチドを有するＤＮＡ断片セットが記載されている。さらに、ＤＮＡ中で修飾ヌクレオチドを認識し、修飾ヌクレオチドから非ランダムな距離である部位でＤＮＡを切断する１種以上の酵素を含む酵素調製物が提供される。１種以上の酵素は、ＷＸＤ（Ｘ）_１０ＹＸＧＤとの９０％を超えるアミノ酸配列相同性を有するＮ末端保存ドメインをさらに特徴とする。関連する使用には、メチロームの創出、修飾ヌクレオチドを含むＤＮＡ断片を精製するための方法および診断適用が含まれる。
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突然変異導入のための系統的アプローチ及び所望のタンパク質の選択を可能とするスクリーニングアッセイを含む、変化した特性を有する酵素に対する組成物及び方法が提供される。この方法の実施形態は、スター活性などの制限エンドヌクレアーゼの特異的特性を修飾するために特に適している。組成物は、全体的精度指数改善係数によって定義される低下したスター活性を有する制限エンドヌクレアーゼを含む。 （もっと読む）

【課題】新規なグリコシダーゼ類及びそれらの使用方法の提供。
【解決手段】選択されたグリコシド結合を開裂し得る実質的に純粋なグリコシダーゼとして、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓから単離されたグリコシダーゼ及び組換えグリコシダーゼが開示されている。単離された酵素の基質特異性は、ＧｌｃＮａｃβ１−Ｘ、Ｇａｌα１−３Ｒ、Ｇａｌα１−６Ｒ、Ｇａｌβ１−３Ｒ、Ｆｕｃα１−２Ｒ、Ｆｕｃα１−３Ｒ、Ｆｕｃα１−４Ｒ、Ｍａｎα１−２Ｒ、Ｍａｎα１−３Ｒ、Ｍａｎα１−６Ｒ、Ｍａｎβ１−４Ｒ、Ｘｙｌβ１−２Ｒ及びＧｌｃβ１−４Ｒから同定され、糖質基質中のグリコシド結合を選択的に開裂する能力及び修飾された糖質を形成する能力の改良が得られる。 （もっと読む）

【課題】新規なグリコシダーゼ類及びそれらの使用方法の提供。
【解決手段】選択されたグリコシド結合を開裂し得る実質的に純粋なグリコシダーゼとして、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓから単離されたグリコシダーゼ及び組換えグリコシダーゼが開示されている。単離された酵素の基質特異性は、ＧｌｃＮａｃβ１−Ｘ、Ｇａｌα１−３Ｒ、Ｇａｌα１−６Ｒ、Ｇａｌβ１−３Ｒ、Ｆｕｃα１−２Ｒ、Ｆｕｃα１−３Ｒ、Ｆｕｃα１−４Ｒ、Ｍａｎα１−２Ｒ、Ｍａｎα１−３Ｒ、Ｍａｎα１−６Ｒ、Ｍａｎβ１−４Ｒ、Ｘｙｌβ１−２Ｒ及びＧｌｃβ１−４Ｒから同定され、糖質基質中のグリコシド結合を選択的に開裂する能力及び修飾された糖質を形成する能力の改良が得られる。 （もっと読む）

ゲノムから又は遺伝的配列のランダム突然変異誘発により形成されうるようなポリヌクレオチド配列のライブラリーからの標的遺伝子の選択および富化のための組成物および方法を提供する。該選択および富化は、該ライブラリーからの個々のポリヌクレオチドまたは該ライブラリー由来でないポリヌクレオチドを含みうる複数のポリヌクレオチドならびに転写および翻訳試薬ならびに場合によっては追加的な化学的および酵素試薬を区画化する、エマルション中で形成された水性液滴において生じる。該選択および富化方法は、該ポリヌクレオチド断片に連結されるとアダプター特異的プライマーの存在下で増幅が生じるのを可能にするポリヌクレオチドアダプターを利用する。
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【課題】明確な基質特異性を有しており再現的な開裂活性をもつ形態の精製酵素調製物を与える試薬として適当な、実質的に純粋な新規なグリコシダーゼの提供。
【解決手段】選択されたグリコシド結合を開裂し得る実質的に純粋なグリコシダーゼとして、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓから単離されたグリコシダーゼ及び組換えグリコシダーゼが開示されている。単離された酵素の基質特異性は、ＧｌｃＮａｃβ１−Ｘ、Ｇａｌα１−３Ｒ、Ｇａｌα１−６Ｒ、Ｇａｌβ１−３Ｒ、Ｆｕｃα１−２Ｒ、Ｆｕｃα１−３Ｒ、Ｆｕｃα１−４Ｒ、Ｍａｎα１−２Ｒ、Ｍａｎα１−３Ｒ、Ｍａｎα１−６Ｒ、Ｍａｎβ１−４Ｒ、Ｘｙｌβ１−２Ｒ及びＧｌｃβ１−４Ｒから同定され、糖質基質中のグリコシド結合を選択的に開裂する能力及び修飾された糖質を形成する能力の改良が得られる。 （もっと読む）

（ａ）ｒＢＳＡを直鎖ＤＮＡとともに一晩温置し、ゲル電気泳動法によって測定された場合に、デオキシリボヌクレアーゼ活性を実質的に欠如し；（ｂ）動物由来の細胞増殖補助剤と結合した動物ウイルスを欠如し；及び（ｃ）ＤＮＡタンパク質を安定化できる、組換えＢＳＡ（ｒＢＳＡ）が提供される。ｒＢＳＡを作製し、これを使用して酵素を安定化するための方法も提供される。
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（ｉ）マルトデキストリン基質に対する標的タンパク質の結合親和性及び／又は（ｉｉ）標的タンパク質の溶解度の少なくとも１つを増加させるための方法及び組成物が提供される。本方法及び組成物は、修飾されたマルトース結合タンパク質に関する。
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