アミジン誘導体およびそれを構成成分とする薬物担体
【課題】新規アミジン誘導体およびその塩、その用途を提供する。
【解決手段】下記一般式（１）で示されるアミジン誘導体およびその塩、およびそれを構成成分とするリポソーム、リピッドマイクロスフェアなどの標的細胞に効率よく薬物をデリバリーする際に有用な薬物担体。
【化１】
（式（１）中、Ａは芳香環であり、Ｒ1 およびＲ2 は互いに独立に炭素数１０−２０のアルキル基またはアルニケル基であり、ＸはＯまたはＮであり、ｎは０または１〜６の自然数である。）
【解決手段】下記一般式（１）で示されるアミジン誘導体およびその塩、およびそれを構成成分とするリポソーム、リピッドマイクロスフェアなどの標的細胞に効率よく薬物をデリバリーする際に有用な薬物担体。
【化１】
（式（１）中、Ａは芳香環であり、Ｒ1 およびＲ2 は互いに独立に炭素数１０−２０のアルキル基またはアルニケル基であり、ＸはＯまたはＮであり、ｎは０または１〜６の自然数である。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なアミジン誘導体およびその塩、並びにそれを構成成分の一つとして含有する薬物担体に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
リポソーム、リピッドマイクロスフェアなどの閉鎖小胞を薬物担体としてドラッグデリバリーシステム（以下、ＤＤＳと称す）に応用しようとする研究が盛んに行われている。これら閉鎖小胞は一般的にリン脂質またはその誘導体、ステロールあるいはリン脂質以外の脂質等を基本膜の構成成分として調製される。しかしながら、これら基本構成成分のみでは実際にＤＤＳに応用していく上で、閉鎖小胞同士の凝集、体内における滞留性の低下などの様々な困難があった。さらに、基本構成成分のみでは実際にＤＤＳ製剤として標的とする部位に薬物を到達させることは難しかった。
【０００３】
近年、標的細胞に効率よく薬物をデリバリーすることの重要性が指摘されており、リポソーム表面に抗体、糖鎖などのリガンドを結合したリポソームが研究されている（非特許文献１〜２参照）。一方、標的細胞への薬物担体の接着性の向上を目的として、ステアリルアミン等のカチオン化脂質を配合することにより、閉鎖小胞の表面を生理的ｐＨ範囲でカチオン化する試みが行われている。
【０００４】
特にＤＮＡを担持するカチオン性のリポソームはＤＮＡの細胞中への取りこみ、すなわち、トランスフェクションを促進することが知られているが、さらに導入効率、発現率、安全性のよいものが切望されている。しかし、カチオン化脂質として選択できる脂質は限られており、安全性が高く、高機能を発現する薬物担体用カチオン化脂質の開発が望まれている。現在のところ、そのようなカチオン化脂質としては、特許文献１〜５に記載のものが報告されている。
しかし、市販されているリポフェクチンのようなエーテル誘導体（特許文献１）は、生体内で代謝を受けにくく体に蓄積することが予想されるなど、カチオン化脂質の分子構造を構築するにあたり、標的細胞への薬物担体の接着性の向上以外にも安全性にも十分考慮すべきであるが、現在までにこれらの条件を十分に満たしたカチオン化脂質は提供されていない。
【０００５】
【非特許文献１】Cancer Lett.118(2),153,1997
【非特許文献２】Br.J.Cancer.76(1),83,1997
【特許文献１】米国特許第４８９７３５５号
【特許文献２】米国特許第５３３４７６１号
【特許文献３】特開平２−２９２２４６号公報
【特許文献４】特開平４−１０８３９１号公報
【特許文献５】国際公開ＷＯ９７−０４２１６６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、薬物担体（ＤＤＳ製剤）の膜構成成分として有用な新規なアミジン誘導体およびその塩、さらにその用途、詳細には、安全性が高く、病巣部位を確実にターゲッティングし、該標的細胞に薬物を効率良く送達することができる薬物担体を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、下記（１）〜（５）で示される新規なアミジン誘導体およびその塩、（６）〜（１２）で示される薬物担体を提供する。
（１）下記一般式（１）で示されるアミジン誘導体およびその塩。
【０００８】
【化１】
【０００９】
（式（１）中、Ａは芳香環であり、Ｒ1 およびＲ2 は互いに独立に炭素数１０−２０のアルキル基またはアルニケル基であり、ＸはＯまたはＮであり、ｎは０または１〜６の自然数である。）
【００１０】
（２）上記式（１）中、Ｒ1 およびＲ2 が、互いに独立に炭素数１２−１６のアルキル基またはアルケニル基である上記（１）に記載のアミジン誘導体およびその塩。
（３）上記式（１）中、Ｘ が、Ｎである上記（１）ないし上記（２）のいずれかに記載のアミジン誘導体およびその塩。
（４）上記式（１）中、ｎが０である上記（１）ないし上記（３）のいずれかに記載のアミジン誘導体およびその塩。
（５）上記（１）ないし（４）のいずれかに記載のアミジン誘導体および／またはその塩を少なくとも膜構成成分として含有する薬物担体。
【００１１】
（６）脂質、その誘導体および表面修飾剤からなる群から選ばれる少なくとも一つの膜構成成分をさらに含有する上記（５）に記載の薬物担体。脂質は、リン脂質であっても、リン脂質以外の脂質であってもよく、それらの誘導体であってもよい。
【００１２】
（７）疾患の診断および／または治療のための薬物が担持された上記（５）または（６）に記載の薬物担体。
（８）上記薬物が、前膜構成成分で形成される内部空間に内包された形態の上記（７）に記載の薬物担体。
【００１３】
（９）上記薬物担体が、リポソーム、リピッドマイクロスフェア、高分子マイクロスフェアからなる群より選ばれる少なくとも１種の形態を含む上記（５）ないし（８）のいずれかに記載の薬物担体。
【００１４】
（１０）上記薬物として、核酸、ポリヌクレオチド、遺伝子およびその類縁体、抗癌剤、抗生物質、酵素剤、酵素阻害剤、抗酸化剤、脂質取り込み阻害剤、ホルモン剤、抗炎症剤、ステロイド剤、血管拡張剤、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体拮抗剤、平滑筋細胞の増殖・遊走阻害剤、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤、ケミカルメデイエーターの遊離抑制剤、血管内皮細胞の増殖または抑制剤、アルドース還元酵素阻害剤、メサンギウム細胞増殖阻害剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、免疫抑制剤、免疫賦活剤、抗ウイルス剤、メイラード反応抑制剤、アミロイドーシス阻害剤、ＮＯＳ阻害剤、ＡＧＥｓ阻害剤、ラジカルスカベンチャー、グリコサミノグリカンおよびその誘導体、オリゴ糖および多糖およびそれらの誘導体、タンパク質およびペプチドからなる群より選ばれる少なくとも１つを含む上記（５）ないし（９）のいずれかに記載の薬物担体。
（１１）上記薬物として、Ｘ線造影剤、放射性同位元素標識核医学診断薬、核磁気共鳴診断用診断薬からなる群から選ばれる少なくとも一つの体内診断薬を含む上記（５）ないし（９）のいずれかに記載の薬物担体。
【００１５】
（１２）安定化剤および酸化防止剤からなる群から選ばれる少なくとも一つをさらに含有する上記（５）ないし（１１）のいずれかに記載の薬物担体。
【００１６】
さらに下記（１３）〜（１８）の発明も提供される。
（１３）（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を含む医薬組成物。
（１４）（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を宿主に投与することからなる、担体に担持された薬物の標的部位への送達および／または輸送方法。
（１５）予防および／または治療有効量の薬物を含む（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を宿主に投与することからなる、疾患の予防および／または治療方法。
（１６）有効量の薬物を含む（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を宿主に投与することからなる、疾患の診断方法。
（１７）有効量の薬物を含む（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を宿主に投与することからなる、薬物担体を標的部位へ接着させる方法。
（１８）有効量の薬物を含む（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を含有してなる薬物担体を標的部位へ接着させるための組成物。
【発明の効果】
【００１７】
上述した通り、本発明で提供される新規アミジン誘導体およびその塩を膜構成成分の一つとして含有する薬物担体は、薬物の細胞への送達性が良好であることが明らかとなった。このため本発明の薬物担体は、疾患の治療および／または診断のための薬物を含むＤＤＳ製剤として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
以下に本発明をより具体的に説明する。
本発明では、下記一般式（１）で示されるアミジン誘導体およびその塩を提供する。
【００１９】
【化２】
【００２０】
式（１）中、Ａは芳香環であり、好ましくはベンゼン環である。
Ｒ1 およびＲ2 は、互いに独立に炭素数１０−２０のアルキル基またはアルニケル基であり、好ましくは炭素数１２−１６のアルキル基またはアルケニル基である。
ＸはＯまたはＮであり、好ましくはＸはＮである。
ｎは０または１〜６の自然数である。
【００２１】
上記アミジン誘導体として、ｎ=０、Ｘ=Ｎの具体例として、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミド、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミド、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカンアミド、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカンアミド、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカンアミド、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカンアミドなどを、ｎ=1、Ｘ=Ｎの具体例として、 N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミド、N-(3-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミド、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカンアミド、N-(3-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカンアミド、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカンアミド、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカンアミドなど、ｎ=０、Ｘ=Ｏの具体例として、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカノエート、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカノエート、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカノエート、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカノエート、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカノエート、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカノエートなどを、ｎ=1、Ｘ=Ｏの具体例として、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカノエート、N-(3-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカノエート、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカノエート、N-(3-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカノエート、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカノエート、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカノエートなどを例示することができる。
【００２２】
上記一般式（１）で示されるアミジン誘導体のうちでも、Ａがベンゼン環であり、Ｒ1 およびＲ2 が炭素数１６のアルキル基であり、ＸがＮであり、ｎが０である下記に示すN-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミドおよびその塩を本発明の好適例として例示することができる。
【００２３】
【化３】
【００２４】
本発明に係るアミジン誘導体は、リポソーム等の薬物担体に修飾して投与した際に他の薬物担体形成物質に比して遅滞なく代謝されるよう、アミド結合やエステル結合により分子を構築している。すなわち、生体内のアミダーゼによって加水分解されるためのアミド構造、または生体内のエステラーゼによって加水分解されるためのエステル構造を化合物内に導入したものである。上述したリポフェクチンのようなエーテル誘導体は、生体内で代謝を受けにくく体に蓄積することが予想される。本発明の薬物担体は、該アミジン誘導体によって標的細胞への高い接着性を付与するとともに、目的とする接着機能を発揮後に適切なタイミングで該アミジン誘導体が代謝されるものであり、生体への負担を小さくでき、安全性の高いものである。
【００２５】
本発明に係るアミジン誘導体およびその塩は、たとえば第5版実験化学講座 16「有機化合物の合成IV カルボンIII・アミノ酸・ペプチド」（日本化学会編、丸善(2005)）1.2.2および1.7.1 に記載される合成方法に準拠して製造することができる。具体的には、式（１）中のＸ=Ｎの誘導体は、目的のアミジン誘導体に対応する骨格を有する下記構造式（２）で示されるアミン誘導体と、 カルボン酸誘導体（３) とから製造することができる。
【００２６】
【化４】
【００２７】
（式（２）中、Ａは芳香環であり、ｎは０または１〜６の自然数である。式（３）Ｒ1 およびＲ2 は互いに独立に炭素数１０−２０のアルキル基またはアルニケル基である。）
【００２８】
また、式（１）中のＸ=Ｏの誘導体は、目的のアミジン誘導体に対応する骨格を有する下記構造式（４）で示されるアルコール誘導体と、 カルボン酸誘導体（３) とから製造することができる。
【００２９】
【化５】
【００３０】
（式（４）中、Ａは芳香環であり、ｎは０または１〜６の自然数である。）
【００３１】
上記式（２）で示されるアミン、上記式（３）で示されるカルボン酸、上記式（４）で示されるアルコール誘導体は、試薬として購入あるいは、一般的な合成方法により合成することができる。
【００３２】
上記で合成されたアミジン誘導体は、クロマトグラフィー、再結晶などの通常の精製手段により単離採取することができる。なおアミジン誘導体の製造方法および精製方法は、上記に限定されるものではない。
【００３３】
本発明の薬物担体は、上記一般式（１）で示されるアミジン誘導体および／またはその塩（以下これらをアミジン誘導体と総称することもある。）を膜構成成分の一つとして含有する。
【００３４】
本発明の薬物担体は、上記アミジン誘導体および薬物を含むこと以外に特にその構成成分は制限されないが、後述するような膜基本構成材料としての脂質またはその誘導体および表面修飾剤、さらには安定化剤、酸化防止剤などの他の成分を含むことができる。
【００３５】
本発明の薬物担体は、薬物を担持することのできる構造を有していればその形態は特に限定されず、様々な形態をとることができる。具体的には、その内部に薬物を高濃度封入することのできる潜在的機能を有する、リポソーム、リピッドマイクロスフェアおよび高分子マイクロスフェアのうちより選ばれる少なくとも一種からなることが望ましい。
【００３６】
これらのうちでも好ましい形態例は、脂質分子の疎水性基と親水性基の極性に基づいて生ずる膜により外界から隔てられた空間を形成する構造を有する閉鎖小胞であり、具体的にリポソームが挙げられる。
リポソームは、リン脂質を基本とする脂質二重層からなる閉鎖小胞である。リピッドマイクロスフェアとは水と油の一方を他方中に乳化させてなる閉鎖小胞である。高分子マイクロスフェアは高分子を乳化させた後、変性、化学的架橋、放射線重合、液中乾燥等の操作によって固化させることよりなる閉鎖小胞である。
本発明では、薬物担体の特に好ましい形態例としてリポソームが挙げられる。
【００３７】
本発明の薬物担体の大きさは特に限定されないが、球状またはそれに近い形態をとる場合には、粒子外径の直径が、０. ０２〜２５０μｍ、好ましくは０. ０３〜０. ４μｍ、より好ましくは０. ０５〜０．２μｍが好ましい。
【００３８】
上記アミジン誘導体とともに薬物担体を構成する他の成分としては、上記の形態を安定的に形成できるものであれば特に限定されないが、その安全性、生体内における安定性などを考慮すると、薬物担体は、膜構成成分として、脂質、その誘導体および表面修飾剤から選ばれる少なくとも１つを含むことが望ましい。特に膜の基本構成材料として、通常、脂質を含むことが好ましい。脂質は、リン脂質であってもリン脂質以外の脂質であってもよく、それらの誘導体であってもよい。
【００３９】
リン脂質としては、フォスファチジルコリン（＝レシチン）、フォスファジルグリセロール、フォスファチジン酸、フォスファチジルコリン、フォスファチジルエタノールアミン、フォスファチジルセリン、フォスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、カルジオリビン等の天然あるいは合成のリン脂質、またはこれらの常法にしたがって水素添加したもの等を挙げることができる。
【００４０】
リン脂質以外の脂質としては、リン酸を含まない脂質が挙げられ、特に限定されないがグリセロ糖脂質、スフィンゴ糖脂質等を挙げることができる。
【００４１】
表面修飾剤としては、特に限定されないが、親水性高分子あるいはグルクロン酸、シアル酸、デキストランなどの水溶性多糖類の誘導体が挙げられる。具体的には、たとえばポリエチレングリコール、デキストラン、プルラン、フィコール、ポリビニルアルコール、スチレン−無水マレイン酸交互共重合体、ジビニルエーテル−無水マレイン酸交互共重合体、合成ポリアミノ酸、アミロース、アミロペクチン、キトサン、マンナン、シクロデキストリン、ペクチン、カラギーナンなどが挙げられる。これらの中でも、ポリエチレングリコールは血中滞留性を向上させる効果がある。また上記親水性高分子は、長鎖脂肪族アルコール、ステロール、ポリオキシプロピレンアルキル、またはグリセリン脂肪酸エステル等の疎水性化合物と結合させた誘導体として用いることができ、これら疎水性化合物部位が、薬物担体（たとえばリポソーム）の膜中へ安定に挿入することができることにより、薬物担体表面に親水性高分子を存在させることができる。親水性高分子誘導体としてはポリエチレングリコール−ジステアロイルフォスファチジルエタノールアミン等を好ましく使用することができる。
【００４２】
ここで、本発明において、「担持」とは、担体の閉鎖空間内に薬物が封入された状態、担体の膜を構成する脂質層内に一部または全ての部分が含まれている状態、または担体の外表面に薬物が付着した状態であることを意味する。
薬物担体に担持させる薬物の性質は特に限定されないが、担体の膜表面が陽電荷を持つことから、電気的に中性あるいはアニオン性である薬物について好ましい担持率を期待することができる。なお、「担持率」とは担体の膜材料と薬物とを混入し、薬物担体を形成する際に、混入した薬物と担持された薬物との割合をいう。
【００４３】
薬物担体に担持させる治療のための薬物としては、具体的には、核酸、ポリヌクレオチド、遺伝子およびその類縁体、抗癌剤、抗生物質、酵素剤、抗酸化剤、脂質取り込み阻害剤、ホルモン剤、抗炎症剤、ステロイド剤、血管拡張剤、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体拮抗剤、平滑筋細胞の増殖・遊走阻害剤、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤、ケミカルメデイエーターの遊離阻害剤、血管内皮細胞の増殖促進または抑制剤、アルドース還元酵素阻害剤、メサンギウム細胞増殖阻害剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、免疫抑制剤、免疫賦活剤、抗ウイルス剤、メイラード反応抑制剤、アミロイドーシス阻害剤、一酸化窒素合成阻害剤、ＡＧＥｓ（Advanced glycation endproducts）阻害剤、ラジカルスカベンチャー、タンパク質、ペプチド、グリコサミノグリカンおよびその誘導体、オリゴ糖および多糖およびそれらの誘導体等が挙げられる。
【００４４】
抗癌剤としては、特に限定されないがネダプラチン、ドセタキセル、塩酸ゲムシタビン、シクロホスファミド、イホスファミド、塩酸ナイトロジェンマスタード-N- オキシド、チオテパ、ブルスファン、カルボコン、塩酸ニムスチン、ラニムスチン、メルファラン、トシル酸インプロスルファン、ダカルバジン、塩酸プロカルバジン、シタラビン、シタラビンオクスファート、エノシタビン、メルカプトプリン、チオイノシン、フルオロウラシル、ドキシフルリジン、テガフール、メトトレキサート、カルモフール、ヒドロキシカルバミド、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンデシン、エトポシド、クロモマイシンＡ3 、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸アラクルビシン、ピラルビシン、塩酸エピルビシン、ダクチノマイシン、塩酸ミトキサントロン、塩酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシン、マイトマイシンＣ、ネオカルチノスタチン、Ｌ−アスパラギナーゼ、アセグラトンミトプロニトール、デキストラン硫酸ナトリウム、酢酸オクトレオチド、シスプラチン、カルボプラチン、クエン酸タモキシフェン、酢酸メドロキシプロゲステロン、リン酸エストラムスチンナトリウム、酢酸ゴセレリン、酢酸リュープロレリン、塩酸イリノテカン、パクリタキセルなどが挙げられる。これらの抗癌剤のうちでも、特に好ましいのはパクリタキセル、ドセタキセル、塩酸イリノテカン、塩酸ゲムシタビン、シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチンなどである。
【００４５】
抗生物質としては、特に限定されないがベンジルペニシリンカリウム、ベンジルペニシリンベンザチン、フェノキシメチルペニシリンカリウム、フェネチシリンカリウム、クロキサシリンナトリウム、フルクロキサシリンナトリウム、アンピシリン、トシル酸スルタミシリン、塩酸バカンピシリン、塩酸タランピシリン、レナンピシリン、ヘタシリンカリウム、シクラシリン、アモキシシリン、塩酸ピブメシリナム、アスポキシシリン、カルベニシリンナトリウム、カリンダシリンナトリウム、スルベニシリンナトリウム、チカルシリンナトリウム、ピペラシリンナトリウム、セファロリジン、セファロチンナトリウム、セファゾリンナトリウム、セファピリンナトリウム、セフラジン、セファレキシン、セファトリジンプロピレングリコール、セフロキサジン、セファクロル、セファドロキシル、塩酸セフォチアム、塩酸セフォチアムヘキセチル、セフロキシムナトリウム、セフロキシムアキセチル、セファマンドールナトリウム、セフジニル、塩酸セフェタメトピポキシル、セフチプテン、セフメタゾールナトリウム、セフォキシチンナトリウム、セフォテタンナトリウム、セフミノクスナトリウム、セフプペラゾンナトリウム、セフピラミドナトリウム、セフスロジンナトリウム、セフォタキシムナトリウム、セフォペラゾンナトリウム、セフチゾキシムナトリウム、塩酸セフメノキシム、セフトリアキソンナトリウム、セフタジジム、セフピミゾールナトリウム、セフィキシム、セフテラムピポキシル、セフゾナムナトリウム、セフポドキシプロキセチル、セフォジジム、硫酸セフピロム、ラタモキセフナトリウム、フロモキセフナトリウム、イミペネム、シラスタチンナトリウム、アズトレオナム、カルモナムナトリウム、硫酸ストレプトマイシン、硫酸カナマイシン、硫酸フラジオマイシン、硫酸アミカシン、硫酸ゲンタマイシン、硫酸パロモマイシン、硫酸ペカナマイシン、硫酸リポスタマイシン、硫酸ジベカシン、トブラマイシン、硫酸シソマイシン、硫酸ミスロノマイシン、硫酸アストロマイシン、硫酸ネチルマイシン、硫酸イセパマイシン、硫酸アルベカシン、エリスロマイシン、キタサマイシン、アセチルキタサマイシン、リン酸オレアンドマイシン、ジョサマイシン、アセチルスピラマイシン、ミデカマイシン、酢酸ミデカマイシン、ロキタマイシン、ロキシスロマイシン、クラリスロマイシン、塩酸テトラサイクリン、塩酸オキシテトラサイクリン、メタリン酸テトラサイクリン、塩酸デメチルクロルテトラサイクリン、ロリテトラサイクリン、塩酸ドキシサイクリン、塩酸ミノサイクリン、クロラムフェニコール、コハク酸クロラムフェニコールナトリウム、パルミチン酸クロラムフェニコール、チアンフェニコール、塩酸アミノ酢酸チアンフェニコール、硫酸コリスチン、コリスチンメタンスルホン酸ナトリウム、硫酸ポリミキシンＢ、バシトラシン、塩酸バンコマイシン、塩酸リンコマイシン、クリンダマイシン、塩酸スペクチノマイシン、ホスホマイシンナトリウム、ホスホマイシンカルシウムなどが挙げられる。
【００４６】
酵素剤としては、特に限定されないがキモトリプシン、結晶トリプシン、ストレプトキナーゼ・ストレプトドルナーゼ、ヒアルロニダーゼ、ウロキナーゼ、ナサルプラーゼ、アルテプラーゼ、塩化リゾチーム、セミアルカリプロティナーゼ、セラペプターゼ、チソキナーゼ、デュテプラーゼ、バトロキソビン、プロナーゼ、プロメラインなどが挙げられる。
【００４７】
抗酸化剤としては、特に限定されないがトコフェロール、アスコルビン酸、尿酸などが挙げられる。
【００４８】
抗炎症剤としては、特に限定されないがサリチル酸コリン、サザピリン、サリチル酸ナトリウム、アスピリン、ジフルニサル、フルフェナム酸、メフェナム酸、フロクタフェニン、トルフェナム酸、ジクロフェナクナトリム、トルメチンナトリウム、スリンダク、フェンブフェン、フェルビナクエチル、インドメタシン、インドメタシンファルネシル、アセメタシン、マレイン酸プログルメタシン、アンフェナクナトリウム、ナブメトン、イブプロフェン、フルルビプロフェン、フルルビプロフェンアキセチル、ケトプロフェン、ナプロキセン、プロチジン酸、プラノプロフェン、フェノプロフェンカルシウム、チアプロフェン酸、オキサプロジン、ロキソプロフェンナトリウム、アルミノプロフェン、ザルトプロフェン、フェニルブタゾン、クロフェゾン、ケトフェニルブタゾン、ピロキシカム、テノキシカム、アンピロキシカム、塩酸チアラミド、塩酸チノリジン、塩酸ベンジダミン、エピリゾール、エルモファゾンなどが挙げられる。
【００４９】
ステロイド剤としては、特に限定されないが酢酸コルチゾン、ヒドロコルチゾン（リン酸エステル、酢酸塩）、酪酸ヒドロコルチゾン、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、プレドニゾロン（アセテート、サクシネート、第三級ブチル酢酸エステル、リン酸エステル）、メチルプレドニゾロン（アセテート）、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド（酢酸トリアムシノロン）、デキサメタゾン（リン酸エステル、酢酸塩、リン酸ナトリウム塩、硫酸エステル）、パルミチン酸デキサメタゾン、ベタメタゾン（リン酸塩、２ナトリウム塩）、酢酸パラメタゾン、酢酸フルドロコルチゾン、酢酸ハロプレドン、プロピオン酸クロベタゾール、ハルシノニド、プロピオン酸ベクロメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、酢酸ベタメタゾン、酢酸コルチゾンなどが挙げられる。
【００５０】
血管拡張剤としては、特に限定されないがテオフィリン、ジプロフィリン、プロキシフィリン、アミノフィリン、コリンテオフィリン、プロスタグランジン、プロスタグランジン誘導体、アルプロスタジルアルファデクス、アルプロスタジル、リマプロストアルファデクス、パパベリン、シクランデラート、シンナリジン、フマル酸ベンシクラン、マレイン酸シネパジド、塩酸ジラゼプ、トラピジル、塩酸ジフェニドール、ニコチン酸、イノシトールヘキサニコチネート、クエン酸ニカメタート、酒石酸ニコチニックアルコール、ニコチン酸トコフェロール、ヘプロニカート、塩酸イソクスプリン、硫酸バメタン、塩酸トラリゾン、メシル酸ジヒドロエルゴトキシン、酒石酸イフェンプロジル、塩酸モキシシリト、ニセルゴリン、塩酸ニカルジピン、ニルバジピン、ニフェジピン、塩酸ベニジピン、塩酸ジルチアゼム、ニソルジピン、ニトレンジピン、塩酸マニジピン、塩酸バルニジピン、塩酸エホニジピン、塩酸ベラパミル、塩酸トリメタジジン、カプトプリル、マレイン酸エナラプリル、アラセプリル、塩酸デラプリル、シラザプリル、リシノプリル、塩酸ベナゼプリル、塩酸ヒドララジン、塩酸トドララジン、ブドララジン、カドララジン、インダパミド、塩酸カルボクロメン、エフロキサート、塩酸エタフェノン塩酸オキシフェドリン、ニコランジル、亜硝酸アミル、硝酸イソソルビドなどが挙げられる。
【００５１】
アンジオテンシン変換酵素阻害剤としては、特に限定されないがアラセプリル、塩酸イミダプリル、塩酸テモカプリル、塩酸デラプリル、塩酸ベナゼプリル、カプトプリル、シラザプリル、マレイン酸エナラプリル、リシノプリルなどが挙げられる。アンジオテンシン受容体拮抗剤としては、特に限定されないがロサルタンなどが挙げられる。
【００５２】
平滑筋細胞遊走および／または増殖抑制剤としては、特に限定されないがヘパリンナトリウム、ダルテパリンナトリウム（低分子ヘパリン）、ヘパリンカルシウム、デキストラン硫酸などが挙げられる。
【００５３】
血小板凝集阻害剤としては、特に限定されないが塩酸チクロピジン、シロスタゾール、イコサペント酸エチル、ベラプロストナトリウム、塩酸サルプグレラート、バトロキソビン、ジピリダモールなどが挙げられる。
【００５４】
抗凝固剤としては、特に限定されないがヘパリンナトリウム、ダルテパリンナトリウム（低分子ヘパリン）、ヘパリンカルシウム、デキストラン硫酸、ワルファリンカリウム、アルガトロバンなどが挙げられる。
【００５５】
ケミカルメディエーター遊離抑制剤としては、特に限定されないがトラニラスト、フマル酸ケトフェチン、塩酸アゼラスチン、オキサトミド、アンレキサノクス、レピリナストなどが挙げられる。
【００５６】
免疫抑制剤としては、特に限定されないがシクロスポリン、ラパマイシンなどが挙げられる。
【００５７】
抗ウイルス剤としては、特に限定されないがアシクロビル、ガンシクロビル、ジダノシン、ジドブジン、ソリブジン、ビダラビンなどが挙げられる。
【００５８】
また診断のための薬物の種類としては、薬物担体の形成を損ねない限り特に限定されるものではない。具体的には、Ｘ線造影剤、放射性同位元素標識核医学診断薬、核磁気共鳴診断用診断薬などの体内診断薬が挙げられる。Ｘ線造影剤としては、たとえばアミドトリゾ酸メグルミン、イオタラム酸ナトリウム、イオタラム酸メグルミン、ガストログラフィン、ヨーダミドメグルミン、リピオドールウルトラフルイド、アジピオドンメグルミン、イオキサグル酸、イオトロクス酸メグルミン、イオトロラン、イオパノ酸、イオパミドール、イオヘキソール、イオベルソール、イオポダートナトリウム、イオメプロール、イソペーク、ヨードキサム酸などが挙げられる。
【００５９】
本発明の薬物担体は、投与経路次第で医薬的に許容される安定化剤および／または酸化防止剤をさらに含むものであってもよい。安定化剤としては、特に限定されないが膜流動性を低下させるコレステロールなどのステロール、あるいはグリセロール、シュクロースなどの糖類が挙げられる。酸化防止剤としては、特に限定されないがアスコルビン酸、尿酸あるいはトコフェロール同族体、たとえばビタミンＥなどが挙げられる。トコフェロールには、α、β、γ、δの４個の異性体が存在するが本発明においてはいずれも使用できる。
【００６０】
本発明の薬物担体は、投与経路次第で医薬的に許容される添加物をさらに含むものであってもよい。このような添加物の例として、水、生理食塩水、医薬的に許容される有機溶媒、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、ゼラチン、寒天、ジグリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、ＰＢＳ、生体内分解性ポリマー、無血清培地、医薬添加物として許容される界面活性剤あるいは生体内で許容し得る生理的ｐＨの緩衝液などが挙げられる。
【００６１】
添加物は、剤型に応じて上記の中から適宜選択され、あるいはそれらを組合せて使用されるが、これらに限定されるものではない。
本発明では、これら添加物を含む態様の薬物担体を、医薬組成物として供することができる。本発明の医薬組成物は、通常の方法、たとえば０〜８℃での冷蔵あるいは１５〜２５℃の室温で保存することができる。
【００６２】
本発明の薬物担体は常法によって得ることができる。薬物担体の一例としてリポソームの製造方法を以下に示すが、これに限定されない。
フラスコ内で、本発明のアミジン誘導体およびリン脂質等の他の膜構成成分を、クロロホルム等の有機溶媒により混合し、有機溶媒を留去後に真空乾燥することによりフラスコ内壁に薄膜を形成させる。次に、当該フラスコ内に薬物を加え、激しく撹拌することにより、リポソーム分散液を得る。得られたリポソーム分散液を遠心分離し、上清をデカンテーションし封入されなかった薬物を除去することにより、薬物担体を分散液として得ることができる。
またリポソームは、上記方法以外にも、上記の各構成成分を混合し、高圧吐出型乳化機により高圧吐出させることにより得ることもできる。この方法は、「ライフサイエンスにおけるリポソーム」（寺田、吉村ら；シュプリンガー・フェアラーク東京（1992））に具体的に記載されており、この記載を引用して本明細書の記載されているものとする。
薬物を担体に担持させるためにｐＨ勾配法を用いることができる。この方法は、Ｇ．Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ編「Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ」２nd ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．Ｉ−III、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓに記載されており、この記載を引用して本明細書に記載されているものとする。
本発明のリポソームを所望のサイズにサイジングするために、いくつかの技術が利用可能である（G.Gregoriadis編「Liposome Technology Liposome Preparation and Related Techniques」2nd edition,Vol.Ｉ-III、CRC Press）。この記載を引用して本明細書の記載されているものとする。
【００６３】
本発明の薬物担体は、薬物を担持した状態で標的部位まで到達し、その結果担持する薬物を標的部位まで送達する。薬物の標的部位への送達は、担体に担持された薬物を標的部位へ取り込ませることであってもよいし、標的部位に取り込まれずとも薬物の影響を標的部位またはその近傍へ及ぼすことであってもよい。
ここで本明細書において、薬物担体の「標的部位」とは、担持する薬物を送達する特定の部位であり、部位ごとに特定された細胞、組織、器官または臓器およびそれらの内部を意味する。
本発明のアミジン誘導体を含有する薬物担体は、標的部位への接着性を有し、その結果、担持する薬物を標的部位まで送達することができる。細胞、組織、器官または臓器およびそれらの内部などの標的部位は治療および／または診断の対象となる部位であり、特に限定されないが腫瘍、炎症部位などが挙げられる。したがって、標的部位は、腫瘍や炎症部位の細胞、組織、器官または臓器およびそれらの内部などである。
【００６４】
本発明の薬物担体は薬物を所望の標的部位に送達するために使用される。したがって、本発明の薬物担体は、担体に封入した薬物を標的部位に送達および／または輸送するため、疾患の予防および／または治療のため、疾患の診断のため、あるいは薬物担体を標的部位へ接着させるために、宿主（患者）に非経口的に全身あるいは局所的に投与することができる。投与対象の宿主としては、哺乳動物、好ましくはヒト、サル、ネズミ、家畜等が挙げられる。
【００６５】
非経口的投与の経路としては、たとえば点滴などの静脈内注射（静注）、筋肉内注射、腹腔内注射、皮下注射を選択することができ、患者の年齢、症状により適宜投与方法を選択することができる。本発明の薬物担体は、病気に既に悩まされる患者に、疾患の症状を治癒するか、あるいは少なくとも部分的に阻止するために十分な量で投与される。たとえば薬物担体に封入される薬物の有効投与量は、一日につき体重１ｋｇあたり０．０１ｍｇから１００ｍｇの範囲で選ばれる。しかしながら、本発明の薬物担体はこれらの投与量に制限されるものではない。投与時期は、疾患が生じてから投与してもよいし、あるいは疾患の発症が予測される時に発症時の症状緩和のために予防的に投与してもよい。また、投与期間は、患者の年齢、症状により適宜選択することができる。
【００６６】
具体的な投与方法としては、医薬組成物をシリンジや点滴によって投与することができる。また、カテーテルを患者または宿主の体内、たとえば管腔内、たとえば血管内に挿入して、その先端を標的部位付近に導き、当該カテーテルを通して、所望の標的部位またはその近傍あるいは標的部位への血流が期待される部位から投与することも可能である。
【００６７】
実施例に示すように、本発明の薬物担体を含有する医薬組成物を、標的細胞に添加すると、細胞への薬物担体の接着が認められた。薬物担体の接着性を確認するには、たとえば標的となる細胞に薬物担体を添加し薬物が標的となる細胞へ及ぼす影響をＩＣ５０として測定することにより行うことができる。また、薬物担体の標的部位を有する動物モデルに薬物担体を投与し、薬物が標的部位へ及ぼす影響を調べることにより行うことができる。
【実施例】
【００６８】
次に実施例、試験例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例、試験例に限定されるべきものではない。
(実施例1)
＜N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミドの合成＞
4-アミノベンズアミジン・２塩酸塩（Aldrich）２２９ｍｇ、2-n-ヘキサデシル ステアリン酸（東京化成） ５０９ｍｇ、BOP試薬（渡辺化学）４８７ｍｇ、トリエチルアミン（和光純薬）３５４ｍｇのN,N-ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（関東化学）１５ｍｌ-塩化メチレン（関東化学）１５ｍｌ混合溶液を室温で一夜攪拌した。得られた反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出した酢酸エチル層は、飽和塩化アンモニウム、水、飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウム（和光純薬）で乾燥し、減圧下に濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（富士シリシア）にかし、１％メタノール（国産化学）−クロロホルム（国産化学）溶出画分より、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミド０．３７ｇを得た。1Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより構造を確認した。
【００６９】
【化６】
【００７０】
1Ｈ−ＮＭＲ (ＣＤＣｌ3 ）δ（ppm ）: ７．７３（２H, ｄ, J=８．０Hz），６．６８（２H，J=８．８Hz），２．４３（１H，ｂｓ），１．７０（２H，ｂｓ），１．４８（２H，ｂｓ），１．３８−１．００（５６H，ｍ），０．８８（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）
【００７１】
（実施例２）
実施例１で合成したアミジン誘導体を、膜構成成分の一つとして含むリポソーム（Rhodamin−ＤＨＰＥ標識）を下記のようにして調製した。
水素化大豆フォスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）０．２９ｍｍｏｌ、コレステロール０．２４ｍｍｏｌ、上記グアニジン誘導体０．０５ｍｍｏｌをナスフラスコに秤量し、Rhodamin−ＤＨＰＥ（rhodamine B 1,2-dihezadecanoyl-sn-glycero3-phosphoethanolamine、triethylammonium salt ；Lissamine TM，Molecular Probes社）／ＣＨＣｌ3 溶液（０．１ｍｇ／ｍｌ）を１６ｍｌ加えて溶解し、エバポレーションにより溶媒を除去した。
得られた薄膜に、６５℃に加温した生理食塩水を５ｍｌ加え、６５℃でエクストルーダーに取り付けた孔径０．２μｍ, ０．１μｍのフィルターを各々５回、１０回ずつ順次通過させ、リポソームを調製した。
【００７２】
上記で調製されたリポソームに、表面修飾剤としてのポリエチレングリコール−フォスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＰＥ）溶液（36.74ｍｇ/ｍL）を総脂質量の０．７２ｍLを加え、６０℃で３０分加温し、アミジン誘導体リポソームを得た。
【００７３】
（参考例１）
＜TMAGリポソームの調製＞
実施例１において、アミジン誘導体０．０５ｍｍｏｌに代えて、同量のカチオン化脂質であるTMAG（N-（α-trimethylammonioacetyl）-didodecyl-D-glutamate chloride ）を使用した以外は、実施例２と同様にして、TMAGリポソームを得た。
【００７４】
（試験例１）
（１）細胞の調製と細胞親和性
HeLa S3(ATCC、CCL-2.2)を1×104cells/mlの濃度に調製し、１２ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅへ１ｍｌ／ｗｅｌｌ播いた。翌日、脂質濃度１０ｍＭの実施例２のリポソームを、細胞培地を含むＰｌａｔｅへ２０μl／ｗｅｌｌ添加した。２４時間後培地を取り除き、ＰＢＳで２回洗浄した。ＲＩＰＡ ｂｕｆｆｅｒ（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ，１５０ｍＭ ＮａＣｌ，０．５％ Ｓｏｄｉｕｍ Ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ，１％ＩＧＥＰＡＬ ＣＡ−６３０，０．１％Ｓｏｄｉｕｍ Ｌａｕｒｙｌ Ｓｕｌｆａｔｅ）を０．３ｍｌ／ｗｅｌｌ加えて、細胞を溶解した。細胞溶解液は蛍光測定用９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅに０．２ｍｌ／ｗｅｌｌ移した。ローダミンラベル化リポソームをＲＩＰＡ ｂｕｆｆｅｒで希釈した溶液で検量線を作成した。細胞溶解液のローダミンの蛍光強度（Ｅｘ．５６０ｎｍ，Ｅｍ．５９０ｎｍ）を蛍光強度測定マイクロプレートリーダー（ＧＥＭＩＮＩ ＥＭ、Ｍｏｌｅｃｕｒａｌ Ｐｒｏｂｅ）で測定し、検量線から溶解液の脂質濃度を求めた。蛍光強度測定後、細胞溶解液のタンパク定量をＭｉｃｒｏ ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（ＰＩＥＲＣＥ）を用いて行った。溶解液１００μｌを吸光度測定用９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅに移し、発色液を１００μｌ／ｗｅｌｌ添加し、３７℃で１２０分間発色させた後、吸光度測定マイクロプレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａ Ｍａｘ Ｐｌｕｓ ３８４、Ｍｏｌｅｃｕｒａｌ Ｐｒｏｂｅ ）で吸光度（５４０ｎｍ）を測定した。検量線はＢＳＡで作成した。脂質濃度とタンパク量の比をとってリポソームの細胞への結合量（脂質量／タンパク量）を算出した。
実施例１および参考例１で調製したリポソームのＨｅＬａ Ｓ３細胞に対しての結合量（ｎｍｏｌ ｌｉｐｉｄｓ／ｍｇ ｐｒｏｔｅｉｎ）は以下の通りであった。
実施例１のリポソーム 17.69
参考例１のリポソーム 8.40
すなわち、本発明のアミジン 誘導体を膜構成成分として含有するリポソームは、従来のリポソーム（参考例１）より腫瘍細胞への親和性高いことが示された。
【００７５】
（２）急性毒性
ＩＣＲ系雄性マウス（５週齢）を用いて、本発明のアミジン誘導体を経口投与し、急性毒性試験を行った。その結果、本発明のアミジン誘導体のＬＤ５０はいずれも３２０ｍｇ／ｋｇ以上であり、本発明のアミジン誘導体を含有する薬物担体の安全性が確認された。
【図面の簡単な説明】
【００７６】
【図１】実施例および参考例で調製したリポソームを用いたときのHela細胞に対する結合性を示す図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なアミジン誘導体およびその塩、並びにそれを構成成分の一つとして含有する薬物担体に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
リポソーム、リピッドマイクロスフェアなどの閉鎖小胞を薬物担体としてドラッグデリバリーシステム（以下、ＤＤＳと称す）に応用しようとする研究が盛んに行われている。これら閉鎖小胞は一般的にリン脂質またはその誘導体、ステロールあるいはリン脂質以外の脂質等を基本膜の構成成分として調製される。しかしながら、これら基本構成成分のみでは実際にＤＤＳに応用していく上で、閉鎖小胞同士の凝集、体内における滞留性の低下などの様々な困難があった。さらに、基本構成成分のみでは実際にＤＤＳ製剤として標的とする部位に薬物を到達させることは難しかった。
【０００３】
近年、標的細胞に効率よく薬物をデリバリーすることの重要性が指摘されており、リポソーム表面に抗体、糖鎖などのリガンドを結合したリポソームが研究されている（非特許文献１〜２参照）。一方、標的細胞への薬物担体の接着性の向上を目的として、ステアリルアミン等のカチオン化脂質を配合することにより、閉鎖小胞の表面を生理的ｐＨ範囲でカチオン化する試みが行われている。
【０００４】
特にＤＮＡを担持するカチオン性のリポソームはＤＮＡの細胞中への取りこみ、すなわち、トランスフェクションを促進することが知られているが、さらに導入効率、発現率、安全性のよいものが切望されている。しかし、カチオン化脂質として選択できる脂質は限られており、安全性が高く、高機能を発現する薬物担体用カチオン化脂質の開発が望まれている。現在のところ、そのようなカチオン化脂質としては、特許文献１〜５に記載のものが報告されている。
しかし、市販されているリポフェクチンのようなエーテル誘導体（特許文献１）は、生体内で代謝を受けにくく体に蓄積することが予想されるなど、カチオン化脂質の分子構造を構築するにあたり、標的細胞への薬物担体の接着性の向上以外にも安全性にも十分考慮すべきであるが、現在までにこれらの条件を十分に満たしたカチオン化脂質は提供されていない。
【０００５】
【非特許文献１】Cancer Lett.118(2),153,1997
【非特許文献２】Br.J.Cancer.76(1),83,1997
【特許文献１】米国特許第４８９７３５５号
【特許文献２】米国特許第５３３４７６１号
【特許文献３】特開平２−２９２２４６号公報
【特許文献４】特開平４−１０８３９１号公報
【特許文献５】国際公開ＷＯ９７−０４２１６６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、薬物担体（ＤＤＳ製剤）の膜構成成分として有用な新規なアミジン誘導体およびその塩、さらにその用途、詳細には、安全性が高く、病巣部位を確実にターゲッティングし、該標的細胞に薬物を効率良く送達することができる薬物担体を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、下記（１）〜（５）で示される新規なアミジン誘導体およびその塩、（６）〜（１２）で示される薬物担体を提供する。
（１）下記一般式（１）で示されるアミジン誘導体およびその塩。
【０００８】
【化１】
【０００９】
（式（１）中、Ａは芳香環であり、Ｒ1 およびＲ2 は互いに独立に炭素数１０−２０のアルキル基またはアルニケル基であり、ＸはＯまたはＮであり、ｎは０または１〜６の自然数である。）
【００１０】
（２）上記式（１）中、Ｒ1 およびＲ2 が、互いに独立に炭素数１２−１６のアルキル基またはアルケニル基である上記（１）に記載のアミジン誘導体およびその塩。
（３）上記式（１）中、Ｘ が、Ｎである上記（１）ないし上記（２）のいずれかに記載のアミジン誘導体およびその塩。
（４）上記式（１）中、ｎが０である上記（１）ないし上記（３）のいずれかに記載のアミジン誘導体およびその塩。
（５）上記（１）ないし（４）のいずれかに記載のアミジン誘導体および／またはその塩を少なくとも膜構成成分として含有する薬物担体。
【００１１】
（６）脂質、その誘導体および表面修飾剤からなる群から選ばれる少なくとも一つの膜構成成分をさらに含有する上記（５）に記載の薬物担体。脂質は、リン脂質であっても、リン脂質以外の脂質であってもよく、それらの誘導体であってもよい。
【００１２】
（７）疾患の診断および／または治療のための薬物が担持された上記（５）または（６）に記載の薬物担体。
（８）上記薬物が、前膜構成成分で形成される内部空間に内包された形態の上記（７）に記載の薬物担体。
【００１３】
（９）上記薬物担体が、リポソーム、リピッドマイクロスフェア、高分子マイクロスフェアからなる群より選ばれる少なくとも１種の形態を含む上記（５）ないし（８）のいずれかに記載の薬物担体。
【００１４】
（１０）上記薬物として、核酸、ポリヌクレオチド、遺伝子およびその類縁体、抗癌剤、抗生物質、酵素剤、酵素阻害剤、抗酸化剤、脂質取り込み阻害剤、ホルモン剤、抗炎症剤、ステロイド剤、血管拡張剤、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体拮抗剤、平滑筋細胞の増殖・遊走阻害剤、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤、ケミカルメデイエーターの遊離抑制剤、血管内皮細胞の増殖または抑制剤、アルドース還元酵素阻害剤、メサンギウム細胞増殖阻害剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、免疫抑制剤、免疫賦活剤、抗ウイルス剤、メイラード反応抑制剤、アミロイドーシス阻害剤、ＮＯＳ阻害剤、ＡＧＥｓ阻害剤、ラジカルスカベンチャー、グリコサミノグリカンおよびその誘導体、オリゴ糖および多糖およびそれらの誘導体、タンパク質およびペプチドからなる群より選ばれる少なくとも１つを含む上記（５）ないし（９）のいずれかに記載の薬物担体。
（１１）上記薬物として、Ｘ線造影剤、放射性同位元素標識核医学診断薬、核磁気共鳴診断用診断薬からなる群から選ばれる少なくとも一つの体内診断薬を含む上記（５）ないし（９）のいずれかに記載の薬物担体。
【００１５】
（１２）安定化剤および酸化防止剤からなる群から選ばれる少なくとも一つをさらに含有する上記（５）ないし（１１）のいずれかに記載の薬物担体。
【００１６】
さらに下記（１３）〜（１８）の発明も提供される。
（１３）（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を含む医薬組成物。
（１４）（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を宿主に投与することからなる、担体に担持された薬物の標的部位への送達および／または輸送方法。
（１５）予防および／または治療有効量の薬物を含む（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を宿主に投与することからなる、疾患の予防および／または治療方法。
（１６）有効量の薬物を含む（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を宿主に投与することからなる、疾患の診断方法。
（１７）有効量の薬物を含む（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を宿主に投与することからなる、薬物担体を標的部位へ接着させる方法。
（１８）有効量の薬物を含む（５）〜（１２）のいずれかの薬物担体を含有してなる薬物担体を標的部位へ接着させるための組成物。
【発明の効果】
【００１７】
上述した通り、本発明で提供される新規アミジン誘導体およびその塩を膜構成成分の一つとして含有する薬物担体は、薬物の細胞への送達性が良好であることが明らかとなった。このため本発明の薬物担体は、疾患の治療および／または診断のための薬物を含むＤＤＳ製剤として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
以下に本発明をより具体的に説明する。
本発明では、下記一般式（１）で示されるアミジン誘導体およびその塩を提供する。
【００１９】
【化２】
【００２０】
式（１）中、Ａは芳香環であり、好ましくはベンゼン環である。
Ｒ1 およびＲ2 は、互いに独立に炭素数１０−２０のアルキル基またはアルニケル基であり、好ましくは炭素数１２−１６のアルキル基またはアルケニル基である。
ＸはＯまたはＮであり、好ましくはＸはＮである。
ｎは０または１〜６の自然数である。
【００２１】
上記アミジン誘導体として、ｎ=０、Ｘ=Ｎの具体例として、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミド、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミド、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカンアミド、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカンアミド、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカンアミド、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカンアミドなどを、ｎ=1、Ｘ=Ｎの具体例として、 N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミド、N-(3-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミド、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカンアミド、N-(3-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカンアミド、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカンアミド、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカンアミドなど、ｎ=０、Ｘ=Ｏの具体例として、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカノエート、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカノエート、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカノエート、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカノエート、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカノエート、N-(3-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカノエートなどを、ｎ=1、Ｘ=Ｏの具体例として、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカノエート、N-(3-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカノエート、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカノエート、N-(3-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-テトラデシルヘキサデカノエート、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカノエート、N-(4-(アミノ（イミノ）エチル)フェニル)-2-ドデシルテトラデカノエートなどを例示することができる。
【００２２】
上記一般式（１）で示されるアミジン誘導体のうちでも、Ａがベンゼン環であり、Ｒ1 およびＲ2 が炭素数１６のアルキル基であり、ＸがＮであり、ｎが０である下記に示すN-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミドおよびその塩を本発明の好適例として例示することができる。
【００２３】
【化３】
【００２４】
本発明に係るアミジン誘導体は、リポソーム等の薬物担体に修飾して投与した際に他の薬物担体形成物質に比して遅滞なく代謝されるよう、アミド結合やエステル結合により分子を構築している。すなわち、生体内のアミダーゼによって加水分解されるためのアミド構造、または生体内のエステラーゼによって加水分解されるためのエステル構造を化合物内に導入したものである。上述したリポフェクチンのようなエーテル誘導体は、生体内で代謝を受けにくく体に蓄積することが予想される。本発明の薬物担体は、該アミジン誘導体によって標的細胞への高い接着性を付与するとともに、目的とする接着機能を発揮後に適切なタイミングで該アミジン誘導体が代謝されるものであり、生体への負担を小さくでき、安全性の高いものである。
【００２５】
本発明に係るアミジン誘導体およびその塩は、たとえば第5版実験化学講座 16「有機化合物の合成IV カルボンIII・アミノ酸・ペプチド」（日本化学会編、丸善(2005)）1.2.2および1.7.1 に記載される合成方法に準拠して製造することができる。具体的には、式（１）中のＸ=Ｎの誘導体は、目的のアミジン誘導体に対応する骨格を有する下記構造式（２）で示されるアミン誘導体と、 カルボン酸誘導体（３) とから製造することができる。
【００２６】
【化４】
【００２７】
（式（２）中、Ａは芳香環であり、ｎは０または１〜６の自然数である。式（３）Ｒ1 およびＲ2 は互いに独立に炭素数１０−２０のアルキル基またはアルニケル基である。）
【００２８】
また、式（１）中のＸ=Ｏの誘導体は、目的のアミジン誘導体に対応する骨格を有する下記構造式（４）で示されるアルコール誘導体と、 カルボン酸誘導体（３) とから製造することができる。
【００２９】
【化５】
【００３０】
（式（４）中、Ａは芳香環であり、ｎは０または１〜６の自然数である。）
【００３１】
上記式（２）で示されるアミン、上記式（３）で示されるカルボン酸、上記式（４）で示されるアルコール誘導体は、試薬として購入あるいは、一般的な合成方法により合成することができる。
【００３２】
上記で合成されたアミジン誘導体は、クロマトグラフィー、再結晶などの通常の精製手段により単離採取することができる。なおアミジン誘導体の製造方法および精製方法は、上記に限定されるものではない。
【００３３】
本発明の薬物担体は、上記一般式（１）で示されるアミジン誘導体および／またはその塩（以下これらをアミジン誘導体と総称することもある。）を膜構成成分の一つとして含有する。
【００３４】
本発明の薬物担体は、上記アミジン誘導体および薬物を含むこと以外に特にその構成成分は制限されないが、後述するような膜基本構成材料としての脂質またはその誘導体および表面修飾剤、さらには安定化剤、酸化防止剤などの他の成分を含むことができる。
【００３５】
本発明の薬物担体は、薬物を担持することのできる構造を有していればその形態は特に限定されず、様々な形態をとることができる。具体的には、その内部に薬物を高濃度封入することのできる潜在的機能を有する、リポソーム、リピッドマイクロスフェアおよび高分子マイクロスフェアのうちより選ばれる少なくとも一種からなることが望ましい。
【００３６】
これらのうちでも好ましい形態例は、脂質分子の疎水性基と親水性基の極性に基づいて生ずる膜により外界から隔てられた空間を形成する構造を有する閉鎖小胞であり、具体的にリポソームが挙げられる。
リポソームは、リン脂質を基本とする脂質二重層からなる閉鎖小胞である。リピッドマイクロスフェアとは水と油の一方を他方中に乳化させてなる閉鎖小胞である。高分子マイクロスフェアは高分子を乳化させた後、変性、化学的架橋、放射線重合、液中乾燥等の操作によって固化させることよりなる閉鎖小胞である。
本発明では、薬物担体の特に好ましい形態例としてリポソームが挙げられる。
【００３７】
本発明の薬物担体の大きさは特に限定されないが、球状またはそれに近い形態をとる場合には、粒子外径の直径が、０. ０２〜２５０μｍ、好ましくは０. ０３〜０. ４μｍ、より好ましくは０. ０５〜０．２μｍが好ましい。
【００３８】
上記アミジン誘導体とともに薬物担体を構成する他の成分としては、上記の形態を安定的に形成できるものであれば特に限定されないが、その安全性、生体内における安定性などを考慮すると、薬物担体は、膜構成成分として、脂質、その誘導体および表面修飾剤から選ばれる少なくとも１つを含むことが望ましい。特に膜の基本構成材料として、通常、脂質を含むことが好ましい。脂質は、リン脂質であってもリン脂質以外の脂質であってもよく、それらの誘導体であってもよい。
【００３９】
リン脂質としては、フォスファチジルコリン（＝レシチン）、フォスファジルグリセロール、フォスファチジン酸、フォスファチジルコリン、フォスファチジルエタノールアミン、フォスファチジルセリン、フォスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、カルジオリビン等の天然あるいは合成のリン脂質、またはこれらの常法にしたがって水素添加したもの等を挙げることができる。
【００４０】
リン脂質以外の脂質としては、リン酸を含まない脂質が挙げられ、特に限定されないがグリセロ糖脂質、スフィンゴ糖脂質等を挙げることができる。
【００４１】
表面修飾剤としては、特に限定されないが、親水性高分子あるいはグルクロン酸、シアル酸、デキストランなどの水溶性多糖類の誘導体が挙げられる。具体的には、たとえばポリエチレングリコール、デキストラン、プルラン、フィコール、ポリビニルアルコール、スチレン−無水マレイン酸交互共重合体、ジビニルエーテル−無水マレイン酸交互共重合体、合成ポリアミノ酸、アミロース、アミロペクチン、キトサン、マンナン、シクロデキストリン、ペクチン、カラギーナンなどが挙げられる。これらの中でも、ポリエチレングリコールは血中滞留性を向上させる効果がある。また上記親水性高分子は、長鎖脂肪族アルコール、ステロール、ポリオキシプロピレンアルキル、またはグリセリン脂肪酸エステル等の疎水性化合物と結合させた誘導体として用いることができ、これら疎水性化合物部位が、薬物担体（たとえばリポソーム）の膜中へ安定に挿入することができることにより、薬物担体表面に親水性高分子を存在させることができる。親水性高分子誘導体としてはポリエチレングリコール−ジステアロイルフォスファチジルエタノールアミン等を好ましく使用することができる。
【００４２】
ここで、本発明において、「担持」とは、担体の閉鎖空間内に薬物が封入された状態、担体の膜を構成する脂質層内に一部または全ての部分が含まれている状態、または担体の外表面に薬物が付着した状態であることを意味する。
薬物担体に担持させる薬物の性質は特に限定されないが、担体の膜表面が陽電荷を持つことから、電気的に中性あるいはアニオン性である薬物について好ましい担持率を期待することができる。なお、「担持率」とは担体の膜材料と薬物とを混入し、薬物担体を形成する際に、混入した薬物と担持された薬物との割合をいう。
【００４３】
薬物担体に担持させる治療のための薬物としては、具体的には、核酸、ポリヌクレオチド、遺伝子およびその類縁体、抗癌剤、抗生物質、酵素剤、抗酸化剤、脂質取り込み阻害剤、ホルモン剤、抗炎症剤、ステロイド剤、血管拡張剤、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体拮抗剤、平滑筋細胞の増殖・遊走阻害剤、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤、ケミカルメデイエーターの遊離阻害剤、血管内皮細胞の増殖促進または抑制剤、アルドース還元酵素阻害剤、メサンギウム細胞増殖阻害剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、免疫抑制剤、免疫賦活剤、抗ウイルス剤、メイラード反応抑制剤、アミロイドーシス阻害剤、一酸化窒素合成阻害剤、ＡＧＥｓ（Advanced glycation endproducts）阻害剤、ラジカルスカベンチャー、タンパク質、ペプチド、グリコサミノグリカンおよびその誘導体、オリゴ糖および多糖およびそれらの誘導体等が挙げられる。
【００４４】
抗癌剤としては、特に限定されないがネダプラチン、ドセタキセル、塩酸ゲムシタビン、シクロホスファミド、イホスファミド、塩酸ナイトロジェンマスタード-N- オキシド、チオテパ、ブルスファン、カルボコン、塩酸ニムスチン、ラニムスチン、メルファラン、トシル酸インプロスルファン、ダカルバジン、塩酸プロカルバジン、シタラビン、シタラビンオクスファート、エノシタビン、メルカプトプリン、チオイノシン、フルオロウラシル、ドキシフルリジン、テガフール、メトトレキサート、カルモフール、ヒドロキシカルバミド、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンデシン、エトポシド、クロモマイシンＡ3 、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸アラクルビシン、ピラルビシン、塩酸エピルビシン、ダクチノマイシン、塩酸ミトキサントロン、塩酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシン、マイトマイシンＣ、ネオカルチノスタチン、Ｌ−アスパラギナーゼ、アセグラトンミトプロニトール、デキストラン硫酸ナトリウム、酢酸オクトレオチド、シスプラチン、カルボプラチン、クエン酸タモキシフェン、酢酸メドロキシプロゲステロン、リン酸エストラムスチンナトリウム、酢酸ゴセレリン、酢酸リュープロレリン、塩酸イリノテカン、パクリタキセルなどが挙げられる。これらの抗癌剤のうちでも、特に好ましいのはパクリタキセル、ドセタキセル、塩酸イリノテカン、塩酸ゲムシタビン、シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチンなどである。
【００４５】
抗生物質としては、特に限定されないがベンジルペニシリンカリウム、ベンジルペニシリンベンザチン、フェノキシメチルペニシリンカリウム、フェネチシリンカリウム、クロキサシリンナトリウム、フルクロキサシリンナトリウム、アンピシリン、トシル酸スルタミシリン、塩酸バカンピシリン、塩酸タランピシリン、レナンピシリン、ヘタシリンカリウム、シクラシリン、アモキシシリン、塩酸ピブメシリナム、アスポキシシリン、カルベニシリンナトリウム、カリンダシリンナトリウム、スルベニシリンナトリウム、チカルシリンナトリウム、ピペラシリンナトリウム、セファロリジン、セファロチンナトリウム、セファゾリンナトリウム、セファピリンナトリウム、セフラジン、セファレキシン、セファトリジンプロピレングリコール、セフロキサジン、セファクロル、セファドロキシル、塩酸セフォチアム、塩酸セフォチアムヘキセチル、セフロキシムナトリウム、セフロキシムアキセチル、セファマンドールナトリウム、セフジニル、塩酸セフェタメトピポキシル、セフチプテン、セフメタゾールナトリウム、セフォキシチンナトリウム、セフォテタンナトリウム、セフミノクスナトリウム、セフプペラゾンナトリウム、セフピラミドナトリウム、セフスロジンナトリウム、セフォタキシムナトリウム、セフォペラゾンナトリウム、セフチゾキシムナトリウム、塩酸セフメノキシム、セフトリアキソンナトリウム、セフタジジム、セフピミゾールナトリウム、セフィキシム、セフテラムピポキシル、セフゾナムナトリウム、セフポドキシプロキセチル、セフォジジム、硫酸セフピロム、ラタモキセフナトリウム、フロモキセフナトリウム、イミペネム、シラスタチンナトリウム、アズトレオナム、カルモナムナトリウム、硫酸ストレプトマイシン、硫酸カナマイシン、硫酸フラジオマイシン、硫酸アミカシン、硫酸ゲンタマイシン、硫酸パロモマイシン、硫酸ペカナマイシン、硫酸リポスタマイシン、硫酸ジベカシン、トブラマイシン、硫酸シソマイシン、硫酸ミスロノマイシン、硫酸アストロマイシン、硫酸ネチルマイシン、硫酸イセパマイシン、硫酸アルベカシン、エリスロマイシン、キタサマイシン、アセチルキタサマイシン、リン酸オレアンドマイシン、ジョサマイシン、アセチルスピラマイシン、ミデカマイシン、酢酸ミデカマイシン、ロキタマイシン、ロキシスロマイシン、クラリスロマイシン、塩酸テトラサイクリン、塩酸オキシテトラサイクリン、メタリン酸テトラサイクリン、塩酸デメチルクロルテトラサイクリン、ロリテトラサイクリン、塩酸ドキシサイクリン、塩酸ミノサイクリン、クロラムフェニコール、コハク酸クロラムフェニコールナトリウム、パルミチン酸クロラムフェニコール、チアンフェニコール、塩酸アミノ酢酸チアンフェニコール、硫酸コリスチン、コリスチンメタンスルホン酸ナトリウム、硫酸ポリミキシンＢ、バシトラシン、塩酸バンコマイシン、塩酸リンコマイシン、クリンダマイシン、塩酸スペクチノマイシン、ホスホマイシンナトリウム、ホスホマイシンカルシウムなどが挙げられる。
【００４６】
酵素剤としては、特に限定されないがキモトリプシン、結晶トリプシン、ストレプトキナーゼ・ストレプトドルナーゼ、ヒアルロニダーゼ、ウロキナーゼ、ナサルプラーゼ、アルテプラーゼ、塩化リゾチーム、セミアルカリプロティナーゼ、セラペプターゼ、チソキナーゼ、デュテプラーゼ、バトロキソビン、プロナーゼ、プロメラインなどが挙げられる。
【００４７】
抗酸化剤としては、特に限定されないがトコフェロール、アスコルビン酸、尿酸などが挙げられる。
【００４８】
抗炎症剤としては、特に限定されないがサリチル酸コリン、サザピリン、サリチル酸ナトリウム、アスピリン、ジフルニサル、フルフェナム酸、メフェナム酸、フロクタフェニン、トルフェナム酸、ジクロフェナクナトリム、トルメチンナトリウム、スリンダク、フェンブフェン、フェルビナクエチル、インドメタシン、インドメタシンファルネシル、アセメタシン、マレイン酸プログルメタシン、アンフェナクナトリウム、ナブメトン、イブプロフェン、フルルビプロフェン、フルルビプロフェンアキセチル、ケトプロフェン、ナプロキセン、プロチジン酸、プラノプロフェン、フェノプロフェンカルシウム、チアプロフェン酸、オキサプロジン、ロキソプロフェンナトリウム、アルミノプロフェン、ザルトプロフェン、フェニルブタゾン、クロフェゾン、ケトフェニルブタゾン、ピロキシカム、テノキシカム、アンピロキシカム、塩酸チアラミド、塩酸チノリジン、塩酸ベンジダミン、エピリゾール、エルモファゾンなどが挙げられる。
【００４９】
ステロイド剤としては、特に限定されないが酢酸コルチゾン、ヒドロコルチゾン（リン酸エステル、酢酸塩）、酪酸ヒドロコルチゾン、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、プレドニゾロン（アセテート、サクシネート、第三級ブチル酢酸エステル、リン酸エステル）、メチルプレドニゾロン（アセテート）、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド（酢酸トリアムシノロン）、デキサメタゾン（リン酸エステル、酢酸塩、リン酸ナトリウム塩、硫酸エステル）、パルミチン酸デキサメタゾン、ベタメタゾン（リン酸塩、２ナトリウム塩）、酢酸パラメタゾン、酢酸フルドロコルチゾン、酢酸ハロプレドン、プロピオン酸クロベタゾール、ハルシノニド、プロピオン酸ベクロメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、酢酸ベタメタゾン、酢酸コルチゾンなどが挙げられる。
【００５０】
血管拡張剤としては、特に限定されないがテオフィリン、ジプロフィリン、プロキシフィリン、アミノフィリン、コリンテオフィリン、プロスタグランジン、プロスタグランジン誘導体、アルプロスタジルアルファデクス、アルプロスタジル、リマプロストアルファデクス、パパベリン、シクランデラート、シンナリジン、フマル酸ベンシクラン、マレイン酸シネパジド、塩酸ジラゼプ、トラピジル、塩酸ジフェニドール、ニコチン酸、イノシトールヘキサニコチネート、クエン酸ニカメタート、酒石酸ニコチニックアルコール、ニコチン酸トコフェロール、ヘプロニカート、塩酸イソクスプリン、硫酸バメタン、塩酸トラリゾン、メシル酸ジヒドロエルゴトキシン、酒石酸イフェンプロジル、塩酸モキシシリト、ニセルゴリン、塩酸ニカルジピン、ニルバジピン、ニフェジピン、塩酸ベニジピン、塩酸ジルチアゼム、ニソルジピン、ニトレンジピン、塩酸マニジピン、塩酸バルニジピン、塩酸エホニジピン、塩酸ベラパミル、塩酸トリメタジジン、カプトプリル、マレイン酸エナラプリル、アラセプリル、塩酸デラプリル、シラザプリル、リシノプリル、塩酸ベナゼプリル、塩酸ヒドララジン、塩酸トドララジン、ブドララジン、カドララジン、インダパミド、塩酸カルボクロメン、エフロキサート、塩酸エタフェノン塩酸オキシフェドリン、ニコランジル、亜硝酸アミル、硝酸イソソルビドなどが挙げられる。
【００５１】
アンジオテンシン変換酵素阻害剤としては、特に限定されないがアラセプリル、塩酸イミダプリル、塩酸テモカプリル、塩酸デラプリル、塩酸ベナゼプリル、カプトプリル、シラザプリル、マレイン酸エナラプリル、リシノプリルなどが挙げられる。アンジオテンシン受容体拮抗剤としては、特に限定されないがロサルタンなどが挙げられる。
【００５２】
平滑筋細胞遊走および／または増殖抑制剤としては、特に限定されないがヘパリンナトリウム、ダルテパリンナトリウム（低分子ヘパリン）、ヘパリンカルシウム、デキストラン硫酸などが挙げられる。
【００５３】
血小板凝集阻害剤としては、特に限定されないが塩酸チクロピジン、シロスタゾール、イコサペント酸エチル、ベラプロストナトリウム、塩酸サルプグレラート、バトロキソビン、ジピリダモールなどが挙げられる。
【００５４】
抗凝固剤としては、特に限定されないがヘパリンナトリウム、ダルテパリンナトリウム（低分子ヘパリン）、ヘパリンカルシウム、デキストラン硫酸、ワルファリンカリウム、アルガトロバンなどが挙げられる。
【００５５】
ケミカルメディエーター遊離抑制剤としては、特に限定されないがトラニラスト、フマル酸ケトフェチン、塩酸アゼラスチン、オキサトミド、アンレキサノクス、レピリナストなどが挙げられる。
【００５６】
免疫抑制剤としては、特に限定されないがシクロスポリン、ラパマイシンなどが挙げられる。
【００５７】
抗ウイルス剤としては、特に限定されないがアシクロビル、ガンシクロビル、ジダノシン、ジドブジン、ソリブジン、ビダラビンなどが挙げられる。
【００５８】
また診断のための薬物の種類としては、薬物担体の形成を損ねない限り特に限定されるものではない。具体的には、Ｘ線造影剤、放射性同位元素標識核医学診断薬、核磁気共鳴診断用診断薬などの体内診断薬が挙げられる。Ｘ線造影剤としては、たとえばアミドトリゾ酸メグルミン、イオタラム酸ナトリウム、イオタラム酸メグルミン、ガストログラフィン、ヨーダミドメグルミン、リピオドールウルトラフルイド、アジピオドンメグルミン、イオキサグル酸、イオトロクス酸メグルミン、イオトロラン、イオパノ酸、イオパミドール、イオヘキソール、イオベルソール、イオポダートナトリウム、イオメプロール、イソペーク、ヨードキサム酸などが挙げられる。
【００５９】
本発明の薬物担体は、投与経路次第で医薬的に許容される安定化剤および／または酸化防止剤をさらに含むものであってもよい。安定化剤としては、特に限定されないが膜流動性を低下させるコレステロールなどのステロール、あるいはグリセロール、シュクロースなどの糖類が挙げられる。酸化防止剤としては、特に限定されないがアスコルビン酸、尿酸あるいはトコフェロール同族体、たとえばビタミンＥなどが挙げられる。トコフェロールには、α、β、γ、δの４個の異性体が存在するが本発明においてはいずれも使用できる。
【００６０】
本発明の薬物担体は、投与経路次第で医薬的に許容される添加物をさらに含むものであってもよい。このような添加物の例として、水、生理食塩水、医薬的に許容される有機溶媒、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、ゼラチン、寒天、ジグリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、ＰＢＳ、生体内分解性ポリマー、無血清培地、医薬添加物として許容される界面活性剤あるいは生体内で許容し得る生理的ｐＨの緩衝液などが挙げられる。
【００６１】
添加物は、剤型に応じて上記の中から適宜選択され、あるいはそれらを組合せて使用されるが、これらに限定されるものではない。
本発明では、これら添加物を含む態様の薬物担体を、医薬組成物として供することができる。本発明の医薬組成物は、通常の方法、たとえば０〜８℃での冷蔵あるいは１５〜２５℃の室温で保存することができる。
【００６２】
本発明の薬物担体は常法によって得ることができる。薬物担体の一例としてリポソームの製造方法を以下に示すが、これに限定されない。
フラスコ内で、本発明のアミジン誘導体およびリン脂質等の他の膜構成成分を、クロロホルム等の有機溶媒により混合し、有機溶媒を留去後に真空乾燥することによりフラスコ内壁に薄膜を形成させる。次に、当該フラスコ内に薬物を加え、激しく撹拌することにより、リポソーム分散液を得る。得られたリポソーム分散液を遠心分離し、上清をデカンテーションし封入されなかった薬物を除去することにより、薬物担体を分散液として得ることができる。
またリポソームは、上記方法以外にも、上記の各構成成分を混合し、高圧吐出型乳化機により高圧吐出させることにより得ることもできる。この方法は、「ライフサイエンスにおけるリポソーム」（寺田、吉村ら；シュプリンガー・フェアラーク東京（1992））に具体的に記載されており、この記載を引用して本明細書の記載されているものとする。
薬物を担体に担持させるためにｐＨ勾配法を用いることができる。この方法は、Ｇ．Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ編「Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ」２nd ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．Ｉ−III、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓに記載されており、この記載を引用して本明細書に記載されているものとする。
本発明のリポソームを所望のサイズにサイジングするために、いくつかの技術が利用可能である（G.Gregoriadis編「Liposome Technology Liposome Preparation and Related Techniques」2nd edition,Vol.Ｉ-III、CRC Press）。この記載を引用して本明細書の記載されているものとする。
【００６３】
本発明の薬物担体は、薬物を担持した状態で標的部位まで到達し、その結果担持する薬物を標的部位まで送達する。薬物の標的部位への送達は、担体に担持された薬物を標的部位へ取り込ませることであってもよいし、標的部位に取り込まれずとも薬物の影響を標的部位またはその近傍へ及ぼすことであってもよい。
ここで本明細書において、薬物担体の「標的部位」とは、担持する薬物を送達する特定の部位であり、部位ごとに特定された細胞、組織、器官または臓器およびそれらの内部を意味する。
本発明のアミジン誘導体を含有する薬物担体は、標的部位への接着性を有し、その結果、担持する薬物を標的部位まで送達することができる。細胞、組織、器官または臓器およびそれらの内部などの標的部位は治療および／または診断の対象となる部位であり、特に限定されないが腫瘍、炎症部位などが挙げられる。したがって、標的部位は、腫瘍や炎症部位の細胞、組織、器官または臓器およびそれらの内部などである。
【００６４】
本発明の薬物担体は薬物を所望の標的部位に送達するために使用される。したがって、本発明の薬物担体は、担体に封入した薬物を標的部位に送達および／または輸送するため、疾患の予防および／または治療のため、疾患の診断のため、あるいは薬物担体を標的部位へ接着させるために、宿主（患者）に非経口的に全身あるいは局所的に投与することができる。投与対象の宿主としては、哺乳動物、好ましくはヒト、サル、ネズミ、家畜等が挙げられる。
【００６５】
非経口的投与の経路としては、たとえば点滴などの静脈内注射（静注）、筋肉内注射、腹腔内注射、皮下注射を選択することができ、患者の年齢、症状により適宜投与方法を選択することができる。本発明の薬物担体は、病気に既に悩まされる患者に、疾患の症状を治癒するか、あるいは少なくとも部分的に阻止するために十分な量で投与される。たとえば薬物担体に封入される薬物の有効投与量は、一日につき体重１ｋｇあたり０．０１ｍｇから１００ｍｇの範囲で選ばれる。しかしながら、本発明の薬物担体はこれらの投与量に制限されるものではない。投与時期は、疾患が生じてから投与してもよいし、あるいは疾患の発症が予測される時に発症時の症状緩和のために予防的に投与してもよい。また、投与期間は、患者の年齢、症状により適宜選択することができる。
【００６６】
具体的な投与方法としては、医薬組成物をシリンジや点滴によって投与することができる。また、カテーテルを患者または宿主の体内、たとえば管腔内、たとえば血管内に挿入して、その先端を標的部位付近に導き、当該カテーテルを通して、所望の標的部位またはその近傍あるいは標的部位への血流が期待される部位から投与することも可能である。
【００６７】
実施例に示すように、本発明の薬物担体を含有する医薬組成物を、標的細胞に添加すると、細胞への薬物担体の接着が認められた。薬物担体の接着性を確認するには、たとえば標的となる細胞に薬物担体を添加し薬物が標的となる細胞へ及ぼす影響をＩＣ５０として測定することにより行うことができる。また、薬物担体の標的部位を有する動物モデルに薬物担体を投与し、薬物が標的部位へ及ぼす影響を調べることにより行うことができる。
【実施例】
【００６８】
次に実施例、試験例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例、試験例に限定されるべきものではない。
(実施例1)
＜N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミドの合成＞
4-アミノベンズアミジン・２塩酸塩（Aldrich）２２９ｍｇ、2-n-ヘキサデシル ステアリン酸（東京化成） ５０９ｍｇ、BOP試薬（渡辺化学）４８７ｍｇ、トリエチルアミン（和光純薬）３５４ｍｇのN,N-ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（関東化学）１５ｍｌ-塩化メチレン（関東化学）１５ｍｌ混合溶液を室温で一夜攪拌した。得られた反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出した酢酸エチル層は、飽和塩化アンモニウム、水、飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウム（和光純薬）で乾燥し、減圧下に濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（富士シリシア）にかし、１％メタノール（国産化学）−クロロホルム（国産化学）溶出画分より、N-(4-(アミノ（イミノ）メチル)フェニル)-2-ヘキサデシルオクタデカンアミド０．３７ｇを得た。1Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより構造を確認した。
【００６９】
【化６】
【００７０】
1Ｈ−ＮＭＲ (ＣＤＣｌ3 ）δ（ppm ）: ７．７３（２H, ｄ, J=８．０Hz），６．６８（２H，J=８．８Hz），２．４３（１H，ｂｓ），１．７０（２H，ｂｓ），１．４８（２H，ｂｓ），１．３８−１．００（５６H，ｍ），０．８８（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）
【００７１】
（実施例２）
実施例１で合成したアミジン誘導体を、膜構成成分の一つとして含むリポソーム（Rhodamin−ＤＨＰＥ標識）を下記のようにして調製した。
水素化大豆フォスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）０．２９ｍｍｏｌ、コレステロール０．２４ｍｍｏｌ、上記グアニジン誘導体０．０５ｍｍｏｌをナスフラスコに秤量し、Rhodamin−ＤＨＰＥ（rhodamine B 1,2-dihezadecanoyl-sn-glycero3-phosphoethanolamine、triethylammonium salt ；Lissamine TM，Molecular Probes社）／ＣＨＣｌ3 溶液（０．１ｍｇ／ｍｌ）を１６ｍｌ加えて溶解し、エバポレーションにより溶媒を除去した。
得られた薄膜に、６５℃に加温した生理食塩水を５ｍｌ加え、６５℃でエクストルーダーに取り付けた孔径０．２μｍ, ０．１μｍのフィルターを各々５回、１０回ずつ順次通過させ、リポソームを調製した。
【００７２】
上記で調製されたリポソームに、表面修飾剤としてのポリエチレングリコール−フォスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＰＥ）溶液（36.74ｍｇ/ｍL）を総脂質量の０．７２ｍLを加え、６０℃で３０分加温し、アミジン誘導体リポソームを得た。
【００７３】
（参考例１）
＜TMAGリポソームの調製＞
実施例１において、アミジン誘導体０．０５ｍｍｏｌに代えて、同量のカチオン化脂質であるTMAG（N-（α-trimethylammonioacetyl）-didodecyl-D-glutamate chloride ）を使用した以外は、実施例２と同様にして、TMAGリポソームを得た。
【００７４】
（試験例１）
（１）細胞の調製と細胞親和性
HeLa S3(ATCC、CCL-2.2)を1×104cells/mlの濃度に調製し、１２ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅへ１ｍｌ／ｗｅｌｌ播いた。翌日、脂質濃度１０ｍＭの実施例２のリポソームを、細胞培地を含むＰｌａｔｅへ２０μl／ｗｅｌｌ添加した。２４時間後培地を取り除き、ＰＢＳで２回洗浄した。ＲＩＰＡ ｂｕｆｆｅｒ（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ，１５０ｍＭ ＮａＣｌ，０．５％ Ｓｏｄｉｕｍ Ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ，１％ＩＧＥＰＡＬ ＣＡ−６３０，０．１％Ｓｏｄｉｕｍ Ｌａｕｒｙｌ Ｓｕｌｆａｔｅ）を０．３ｍｌ／ｗｅｌｌ加えて、細胞を溶解した。細胞溶解液は蛍光測定用９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅに０．２ｍｌ／ｗｅｌｌ移した。ローダミンラベル化リポソームをＲＩＰＡ ｂｕｆｆｅｒで希釈した溶液で検量線を作成した。細胞溶解液のローダミンの蛍光強度（Ｅｘ．５６０ｎｍ，Ｅｍ．５９０ｎｍ）を蛍光強度測定マイクロプレートリーダー（ＧＥＭＩＮＩ ＥＭ、Ｍｏｌｅｃｕｒａｌ Ｐｒｏｂｅ）で測定し、検量線から溶解液の脂質濃度を求めた。蛍光強度測定後、細胞溶解液のタンパク定量をＭｉｃｒｏ ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（ＰＩＥＲＣＥ）を用いて行った。溶解液１００μｌを吸光度測定用９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅに移し、発色液を１００μｌ／ｗｅｌｌ添加し、３７℃で１２０分間発色させた後、吸光度測定マイクロプレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａ Ｍａｘ Ｐｌｕｓ ３８４、Ｍｏｌｅｃｕｒａｌ Ｐｒｏｂｅ ）で吸光度（５４０ｎｍ）を測定した。検量線はＢＳＡで作成した。脂質濃度とタンパク量の比をとってリポソームの細胞への結合量（脂質量／タンパク量）を算出した。
実施例１および参考例１で調製したリポソームのＨｅＬａ Ｓ３細胞に対しての結合量（ｎｍｏｌ ｌｉｐｉｄｓ／ｍｇ ｐｒｏｔｅｉｎ）は以下の通りであった。
実施例１のリポソーム 17.69
参考例１のリポソーム 8.40
すなわち、本発明のアミジン 誘導体を膜構成成分として含有するリポソームは、従来のリポソーム（参考例１）より腫瘍細胞への親和性高いことが示された。
【００７５】
（２）急性毒性
ＩＣＲ系雄性マウス（５週齢）を用いて、本発明のアミジン誘導体を経口投与し、急性毒性試験を行った。その結果、本発明のアミジン誘導体のＬＤ５０はいずれも３２０ｍｇ／ｋｇ以上であり、本発明のアミジン誘導体を含有する薬物担体の安全性が確認された。
【図面の簡単な説明】
【００７６】
【図１】実施例および参考例で調製したリポソームを用いたときのHela細胞に対する結合性を示す図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で示されるアミジン誘導体およびその塩。
【化１】
（式（１）中、Ａは芳香環であり、Ｒ1 およびＲ2 は互いに独立に炭素数１０−２０のアルキル基またはアルニケル基であり、ＸはＯまたはＮであり、ｎは０または１〜６の自然数である。）
【請求項２】
前記式（１）中、Ｒ1 およびＲ2 が、互いに独立に炭素数１２−１６のアルキル基またはアルケニル基である請求項１に記載のアミジン誘導体およびその塩。
【請求項３】
前記式（１）中、Ｘ が、Ｎである請求項１ないし２のいずれかに記載のアミジン誘導体およびその塩。
【請求項４】
前記式（１）中、ｎが０である請求項１ないし３のいずれかに記載のアミジン誘導体およびその塩。
【請求項５】
請求項１ないし４のいずれかに記載のアミジン誘導体および／またはその塩を少なくとも膜構成成分として含有する薬物担体。
【請求項６】
脂質、その誘導体および表面修飾剤からなる群から選ばれる少なくとも一つの膜構成成分をさらに含有する請求項５に記載の薬物担体。
【請求項７】
疾患の診断および／または治療のための薬物が担持された請求項５または６に記載の薬物担体。
【請求項８】
前記薬物が、前膜構成成分で形成される内部空間に内包されてなる請求項７に記載の薬物担体。
【請求項９】
前記薬物担体が、リポソーム、リピッドマイクロスフェア、高分子マイクロスフェアからなる群より選ばれる少なくとも１種の形態を含む請求項５ないし８のいずれかに記載の薬物担体。
【請求項１０】
前記薬物として、核酸、ポリヌクレオチド、遺伝子およびその類縁体、抗癌剤、抗生物質、酵素剤、酵素阻害剤、抗酸化剤、脂質取り込み阻害剤、ホルモン剤、抗炎症剤、ステロイド剤、血管拡張剤、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体拮抗剤、平滑筋細胞の増殖・遊走阻害剤、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤、ケミカルメデイエーターの遊離抑制剤、血管内皮細胞の増殖または抑制剤、アルドース還元酵素阻害剤、メサンギウム細胞増殖阻害剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、免疫抑制剤、免疫賦活剤、抗ウイルス剤、メイラード反応抑制剤、アミロイドーシス阻害剤、ＮＯＳ阻害剤、ＡＧＥｓ阻害剤、ラジカルスカベンチャー、グリコサミノグリカンおよびその誘導体、オリゴ糖および多糖およびそれらの誘導体、タンパク質およびペプチドからなる群より選ばれる少なくとも１つを含む請求項５ないし９のいずれかに記載の薬物担体。
【請求項１１】
前記薬物として、Ｘ線造影剤、放射性同位元素標識核医学診断薬、核磁気共鳴診断用診断薬からなる群から選ばれる少なくとも一つの体内診断薬を含む請求項５ないし９のいずれかに記載の薬物担体。
【請求項１２】
安定化剤および酸化防止剤からなる群から選ばれる少なくとも一つをさらに含有する請求項５ないし１１のいずれかに記載の薬物担体。
【請求項１】
下記一般式（１）で示されるアミジン誘導体およびその塩。
【化１】
（式（１）中、Ａは芳香環であり、Ｒ1 およびＲ2 は互いに独立に炭素数１０−２０のアルキル基またはアルニケル基であり、ＸはＯまたはＮであり、ｎは０または１〜６の自然数である。）
【請求項２】
前記式（１）中、Ｒ1 およびＲ2 が、互いに独立に炭素数１２−１６のアルキル基またはアルケニル基である請求項１に記載のアミジン誘導体およびその塩。
【請求項３】
前記式（１）中、Ｘ が、Ｎである請求項１ないし２のいずれかに記載のアミジン誘導体およびその塩。
【請求項４】
前記式（１）中、ｎが０である請求項１ないし３のいずれかに記載のアミジン誘導体およびその塩。
【請求項５】
請求項１ないし４のいずれかに記載のアミジン誘導体および／またはその塩を少なくとも膜構成成分として含有する薬物担体。
【請求項６】
脂質、その誘導体および表面修飾剤からなる群から選ばれる少なくとも一つの膜構成成分をさらに含有する請求項５に記載の薬物担体。
【請求項７】
疾患の診断および／または治療のための薬物が担持された請求項５または６に記載の薬物担体。
【請求項８】
前記薬物が、前膜構成成分で形成される内部空間に内包されてなる請求項７に記載の薬物担体。
【請求項９】
前記薬物担体が、リポソーム、リピッドマイクロスフェア、高分子マイクロスフェアからなる群より選ばれる少なくとも１種の形態を含む請求項５ないし８のいずれかに記載の薬物担体。
【請求項１０】
前記薬物として、核酸、ポリヌクレオチド、遺伝子およびその類縁体、抗癌剤、抗生物質、酵素剤、酵素阻害剤、抗酸化剤、脂質取り込み阻害剤、ホルモン剤、抗炎症剤、ステロイド剤、血管拡張剤、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体拮抗剤、平滑筋細胞の増殖・遊走阻害剤、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤、ケミカルメデイエーターの遊離抑制剤、血管内皮細胞の増殖または抑制剤、アルドース還元酵素阻害剤、メサンギウム細胞増殖阻害剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、免疫抑制剤、免疫賦活剤、抗ウイルス剤、メイラード反応抑制剤、アミロイドーシス阻害剤、ＮＯＳ阻害剤、ＡＧＥｓ阻害剤、ラジカルスカベンチャー、グリコサミノグリカンおよびその誘導体、オリゴ糖および多糖およびそれらの誘導体、タンパク質およびペプチドからなる群より選ばれる少なくとも１つを含む請求項５ないし９のいずれかに記載の薬物担体。
【請求項１１】
前記薬物として、Ｘ線造影剤、放射性同位元素標識核医学診断薬、核磁気共鳴診断用診断薬からなる群から選ばれる少なくとも一つの体内診断薬を含む請求項５ないし９のいずれかに記載の薬物担体。
【請求項１２】
安定化剤および酸化防止剤からなる群から選ばれる少なくとも一つをさらに含有する請求項５ないし１１のいずれかに記載の薬物担体。
【図１】
【公開番号】特開２００７−９１６５７（Ｐ２００７−９１６５７Ａ）
【公開日】平成１９年４月１２日（２００７．４．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−２８４６１５（Ｐ２００５−２８４６１５）
【出願日】平成１７年９月２９日（２００５．９．２９）
【出願人】（０００１０９５４３）テルモ株式会社 (2,232)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年４月１２日（２００７．４．１２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年９月２９日（２００５．９．２９）
【出願人】（０００１０９５４３）テルモ株式会社 (2,232)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]