イチョウのエキスを製造する新規な方法
本発明は、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウのエキスの製造方法に関するものである。本発明は又、本願の方法により得ることのできる除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウのエキス、及び特に、治療分野におけるその利用にも関係する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウのエキスを製造する方法に関するものである。本発明は又、本願の方法を使用することにより得ることができる除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウのエキスにも関係し、それは又、特に治療分野におけるそれらの利用にも関係する。
【背景技術】
【０００２】
イチョウのエキスの定評ある血管拡張剤、抗酸化剤及び神経防護活性の故に、これらは、数年にわたって、治療目的のために、特に、末梢循環障害又は脳循環障害、痴呆又は痴呆症候群の治療のために用いられてきた。
【０００３】
ある望ましくない成分例えばギンコール酸の存在は、ある抽出法においてかなり低減される。しかしながら、イチョウの葉の起源が何であっても、除去困難な有機汚染物質(ＰＯＰ)の存在は、如何に少なくても、妨げることができない。ＰＯＰは自然の生物分解に抵抗する(環境中に残留する)有機化合物であるので、それらは又、ヒトの健康及び環境に有害な影響及び生きている生物体の組織に蓄積する能力(食物連鎖における生物蓄積)を生じさせるリスクをも与える。それらの残留性及び生物蓄積性によって、ＰＯＰは、それらが放出され、海又は気流により運ばれる長い道のりにおいて見出されうる。それらの特性の故に及び任意のリスクを防止するために、ＰＯＰのレベルは可能な限り低いのが望ましい。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明によれば、除去困難な有機汚染物質(ＰＯＰ)とは、多環式芳香族炭化水素(ＰＡＨ)、ポリ塩化ビフェニル(ＰＣＢ)、ポリ塩化ジベンゾジオキシン(ＰＣＤＤ)及びポリ塩化ジベンゾフラン(ＰＣＤＦ)を意味する。ＰＡＨの内では、特に、次の芳香族化合物を挙げることができる：ベンゾ(ａ)アントラセン、クリセン、トリフェニレン[ａ]、ベンゾ(ｂ)フルオランテン、ベンゾ(ｋ／ｊ)フルオランテン、ベンゾ(ａ)ピレン、インデノ(１，２，３−ｃｄ)ピレン、ジベンズ(ａｈ)アントラセン、ベンゾ(ｇｈｉ)ペリレン、ジベンゾ(ａｌ)ピレン、ジベンゾ(ａｉ)ピレン、ジベンゾ(ａｈ)ピレン、ジベンゾ(ａｅ)ピレン、シクロペンタ(ｃｄ)ピレン及び５−メチルクリセン。ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦの内で、特に、次の化合物を挙げることができる：２，３，７，８−テトラＣＤＦ(「ＣＤＦ」＝クロロジベンゾフラン)、１，２，３，７，８−ペンタＣＤＦ、２，３，４，７，８−ペンタＣＤＦ、１，２，３，４，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，６，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，７，８，９−ヘキサＣＤＦ、２，３，４，６，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，４，６，７，８−ヘプタＣＤＦ、１，２，３，４，７，８，９−ヘプタＣＤＦ、オクタＣＤＦ、ＣＤＦ及び２，３，７，８−テトラＣＤＤ(「ＣＤＤ」＝クロロジベンゾジオキシン)、１，２，３，７，８−ペンタＣＤＤ、１，２，３，４，７，８−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，６，７，８−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，７，８，９−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，４，６，７，８−ヘプタＣＤＤ及びオクタＣＤＤ。最後に、ＰＣＢの内で、特に、ＰＣＢ７７、ＰＣＢ８８、ＰＣＢ１０５、ＰＣＢ１１４、ＰＣＢ１１８、ＰＣＢ１２３、ＰＣＢ１２６、ＰＣＢ１５６、ＰＣＢ１５７、ＰＣＢ１６７、ＰＣＢ１６９及びＰＣＢ１８９を挙げることができる。
【０００５】
特許ＥＰ４３１５３５は、イチョウを抽出するための方法を記載しており、その本質的目的は、低レベルのギンコール酸(１０ｐｐｍ未満、好ましくは、１ｐｐｍ未満のレベル)を有するエキスを得ることである。
【０００６】
出願ＷＯ２００６／１１７１７０は、特許ＥＰ４３１５３５の製造方法を、この方法で得られた最終的エキスが尚更に低レベルの多環式芳香族炭化水素(ＰＡＨ)を有するような仕方で改良することを提案している。
【０００７】
出願人は、特許ＥＰ４３１５３５及び出願ＷＯ２００６／１１７１７０に記載された方法は、この方法で得られる最終的エキスが上で規定したＰＯＰ(ＰＡＨを含む)を実質的に含まないような仕方で更に改良することができることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
それ故、本発明の主題は、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウの葉のエキスを得るための方法であって、該方法は、下記の工程：
(ａ)イチョウの葉(好ましくは、新鮮な緑色の又は乾燥したもの)を、約４０〜１００℃の温度で、水性アセトン、１〜３の炭素原子を含む水性アルコール又は無水メタノールを用いて抽出し；
(ｂ)有機溶媒の大部分を、エキスから分離して、最後の蒸留段階で水を添加可能な方法で、最大含量１０重量％とし、
(ｃ)残りの濃縮された水溶液を、水で希釈して、固体物質含量５〜２５重量％として、攪拌しながら放置して、２５℃未満の温度まで冷却し、沈澱が形成されるまで静止状態で放置し、この生成した水に難溶性の親油性成分からなる沈澱を分離し、
(ｄ)残っている水溶液に硫酸アンモニウムを加え、形成された溶液を、メチルエチルケトン又はメチルエチルケトンとアセトンの混合物で抽出し、
(ｅ)得られたエキスを、固体物質含量が５０〜７０％となるまで濃縮し、得られた濃縮液を、１０重量％の固体物質含量を有する５０重量％の水及び５０重量％のエタノールを含む溶液を得るために、水及びエタノールで希釈し、
(ｆ)この方法で得られた溶液に鉛塩の水溶液を、色が褐色から琥珀色に変わるまで加えて、形成された沈澱を分離し、又は鉛塩の代わりにポリアミドを使用し、
(ｇ)残りの水性アルコール溶液を、アルキルフェノール化合物の更なる分離のために６０〜１００℃の沸点を有する脂肪族又は脂環式溶媒で抽出し、
(ｈ)残りの水性アルコール溶液を、減圧下で、約５％の最大エタノール含量まで濃縮して、硫酸アンモニウムを、最大で２０重量％の含量まで加え、
(ｉ)得られた溶液を、メチルエチルケトンとエタノールの８／２〜５／５の比の、好ましくは６／４の比の混合物で抽出し、
(ｊ)その結果生成した有機相を、５０〜７０重量％の固体物質含量まで濃縮し、
(ｋ)この方法で得られた濃縮物にエタノールを、少なくとも８０％のエタノール含量が得られるまで加え、次いで、この混合物を、最大温度１２℃まで少なくとも２時間冷却し、最終的に、不溶物を濾過により除去して濾液を回収し；
(ｌ)この濾液を濃縮して、減圧下で、６０〜８０℃の温度で、水分含量５％未満の乾燥エキスが得られるまで乾燥することを含み、
該方法が、工程ｄ、ｉ又はｋの一つにおいて得られた有機相の一つを、１０００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する活性炭より構成される吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含むことを特徴とする当該方法である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明によれば、本願で規定した吸着剤の使用は、望ましくない化合物例えばＰＯＰを、活性化合物例えばフラボン及びテルペントリラクトン(ギンコライド及びビロバライド)のレベルを維持しつつ除去することを可能にする。
【００１０】
ＰＯＰの毒性は、それらが、ＰＡＨであるかＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ及びＰＣＢであるかによって変化する。これは、ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ及びＰＣＢ型化合物について、如何に「毒素当量(ＴＥＱ)」のシステムが確立されたかであり：この荷重係数は、２，３，７，８−ＴＣＤＤ(２，３，７，８−テトラクロロジベンゾ−ｐ−ジオキシン)に対する毒性の程度を示している(Van den Berg等、(1998), Environmental Health Perspectives 106 (12), 775)。
【００１１】
表現「除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウのエキス」は、非常に低レベルの除去困難な有機汚染物質、好ましくは下記を含むイチョウの任意のエキスを意味する：
− 各ＰＡＨのレベルは、５μｇ／ｋｇ未満、好ましくは、１μｇ／ｋｇ未満であり、好ましくは、０．５μｇ／ｋｇ未満であり、非常に好ましくは、定量化の限界(ＬＯＱ)未満であり、且つ／又は
− ＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)は、１０ｐｇ／ｇ未満であり、好ましくは、１．５ｐｇ／ｋｇ未満であり、非常に好ましくは、１．０ｐｇ／ｋｇ未満である。
【００１２】
好ましくは、上記の方法は、下記の点で特徴付けられる
工程(ｂ)において、有機溶媒は、最大含量５重量％まで分離され、
工程(ｃ)において、水溶液は、水で希釈されて、１５〜２０重量％の固体物質含量とされ、約１０〜１２℃の温度まで冷却され、
工程(ｄ)において、硫酸アンモニウムを、３０重量％の含量を生じるように溶液に加えて、形成された溶液を、９／１〜４／６の、好ましくは６／４の比の溶媒で抽出し、そして
工程(ｆ)において、酢酸鉛、次酢酸鉛若しくは硝酸鉛又は水酸化鉛の水溶液を用いる。
【００１３】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ａ)において、
イチョウの葉(好ましくは、乾燥したもの)を、約５０〜６５℃の温度で、水性アセトン(アセトン／水重量比は、５０／５０〜６５／３５であり、固体／溶媒比は１／６〜１／２０)又は水性エタノールを抽出用溶媒として用いて抽出し、
そして、好ましくは
用いる抽出用溶媒は、アセトン／水重量比が約６０／４０である水性アセトンであるという点において特徴付けられる。
【００１４】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｂ)において、
このエキスの有機溶媒は、減圧下での蒸発により、５％未満の最大残留溶媒レベル及び１５〜３０％のオーダーの固体含量が得られるまで除去されるという点において特徴付けられる。
【００１５】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｃ)において、
残っている濃縮された水相を水で、固体含量が１０〜２０重量％のオーダーになり、５％未満の最大残留溶媒レベルが得られるまで希釈し、その後、少なくとも１時間にわたって攪拌しながら４〜１２℃のオーダーの温度まで冷却する。
【００１６】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｄ)において、
残っている水溶液を、水溶液の体積に対して３０〜４０％、好ましくは３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で、重量比約６／４のメチルエチルケトン／アセトン混合物で抽出してから、相分離後に、有機相を除去する。
【００１７】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｆ)において、
前の工程(ｅ)においてこの方法で得られた溶液に、１５〜２０％のオーダーの濃度の次酢酸鉛(ＣＨ3ＣＯ2)2Ｐｂ.２Ｐｂ(ＯＨ)2[ＣＡＳ＃１３３５−３２−６]の水溶液を、(Ｐｂ量／固体含量)比０．１５〜０．３０で、非常に好ましくは、０．１８〜０．２５で加える。
【００１８】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｇ)において、残りの水性アルコール溶液を、ヘプタンで抽出する点で特徴付けられる。
【００１９】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｄで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる。
【００２０】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｉで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる。
【００２１】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｋで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる。
【００２２】
本発明の他の主題は、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウの葉のエキスを得るための方法であって、該方法は、下記を含む：
(ａａ)乾燥したイチョウの葉を、約４０〜１００℃の温度で、水性アセトン又は３炭素未満を有する低級アルコールから選択される抽出用溶媒を用いて抽出し；
(ｂａ)有機溶媒を、このエキスから、１０％未満の最大残留溶媒レベルまで除去し；
(ｃａ)残りの濃縮された水溶液を、水で、固体含量５〜２５重量％のオーダー及び５％未満の最大残留溶媒レベルが得られるまで希釈してから、２５℃未満の温度まで攪拌しながら冷却し、この方法で形成された親油性成分よりなる沈澱を除去する。
(ｄａ)残っている水溶液を、硫酸アンモニウムの存在下で、メチルエチルケトン／アセトン混合物で抽出してから、相分離後に、有機相を固体含量４０〜６０重量％まで濃縮し、
(ｅａ)得られた濃縮物を、水性エタノール及び水で、最終的溶液が約５０重量％の水及び５０重量％のエタノール及び１０〜１２％のオーダーの固体含量を含むように希釈し；
(ｆａ)工程(ｅ)においてこの方法で得られた溶液に、鉛塩の水溶液を、(Ｐｂ量／固体含量)比０．１５〜０．３で加え、この方法で形成された鉛沈澱を除去し；
(ｇａ)残っている水性エタノール溶液を、アルキルフェノール型化合物を除去するためにヘプタンで抽出し、残っている水性アルコール溶液を、減圧下で、５重量％未満のエタノール含量まで濃縮し；
(ｈａ)得られた溶液を、メチルエチルケトンとエタノールの混合物で、硫酸アンモニウムの存在下で抽出し；
(ｉａ)硫酸アンモニウムを、前工程で得られた有機相に攪拌しながら加えてから、デカンテーション後に、有機相を回収し、次いで、それを５０〜７０重量％の固体含量まで濃縮し；
(ｊａ)この方法で得られた濃縮物に、エタノールと水を、１０〜１２％の固体含量及び約７５〜９０％のエタノール含量(残りは水)が得られるまで加えてから、この混合物を、約８〜１２℃まで少なくとも１時間冷却して、最後に、不溶物を濾過により除去して、濾液を回収し；
(ｋａ)この方法で得られた濾液を、減圧下で、５０〜７０重量％の固体含量が得られるまで濃縮し、真空下で、オーブン中で、６０℃を超えない温度で乾燥し；
そして、前工程ｄａ、ｉａ又はｊａの一つで得られた有機相の一つを、１０００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する活性炭により構成される吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程。
【００２３】
好ましくは、上記の方法は、工程(ａａ)において、下記の点で特徴付けられる、
乾燥したイチョウの葉の抽出は、約５０〜６５℃の温度で、アセトン／水重量比５０／５０〜６５／３５の水性アセトンを用いて、(乾燥葉／溶媒)比１／６〜１／２０で、又は水性エタノールを抽出用溶媒として用いて催され、
そして、非常に好ましくは
用いられる抽出用溶媒は、約６０／４０のアセトン／水重量比を有する水性アセトンである。
【００２４】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｂａ)において、下記の点で特徴付けられる、
エキスからの有機溶媒の除去は、５％未満の最大残留溶媒レベル及び１５〜３０％のオーダーの固体含量が得られるまで、減圧下での蒸発により催される。
【００２５】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｃａ)において、下記の点で特徴付けられる、
残りの濃縮された水溶液を、水で、１０〜２０重量％のオーダーの固体含量が得られるまで希釈し、次いで、攪拌しながら、４〜１２℃の温度まで冷却する。
【００２６】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｄａ)において、下記の点で特徴付けられる、
残りの水溶液を、重量比５／５〜７／３、好ましくは約６／４のメチルエチルケトン／アセトン混合物で、この水溶液の体積に対して３０〜４０％の好ましくは３５重量％のレベルの硫酸アンモニウムの存在下で抽出する。
【００２７】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｆａ)において、下記の点で特徴つけられる、
鉛塩は、酢酸鉛、水酸化鉛及び次酢酸鉛から選択される。
【００２８】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｆａ)において、下記の点で特徴付けられる、
(Ｐｂ／固体含量)比は、０．１８〜０．２５である。
【００２９】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｆａ)において、下記の点で特徴付けられる、
工程(ｅａ)で得られた溶液に、１５〜２０％のオーダーの濃度の次酢酸鉛(ＣＨ3ＣＯ2)2Ｐｂ.２Ｐｂ(ＯＨ)2[ＣＡＳ＃１３３５−３２−６]の水溶液を、０．１８〜０．２５の(Ｐｂ量／固体含量)比で加える。
【００３０】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｈａ)において、下記の点で特徴付けられる、
得られた溶液を、６／４のオーダーの重量比のメチルエチルケトンとエタノールの混合物を用いて、この水溶液の体積に対して３０〜４０％、好ましくは３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で抽出する。
【００３１】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｊａ)において、下記の点で特徴付けられる、
エタノールと水を、約７８〜９０％の、好ましくは７８〜８０％の含量が得られるまで加える。
【００３２】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｄａで得られた有機相を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる。
【００３３】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｉａで得られた有機相を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる。
【００３４】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｊａで得られた有機相を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる。
【００３５】
好ましくは、上記の方法は、吸着剤が下記の特性の少なくとも一つを含む点で特徴付けられる：
− 官能基を含まない；
− 球形状(又はビーズ形状)で与えられる；
− １１００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する。
【００３６】
非常に好ましくは、上記の方法は、吸着剤が下記の特性の少なくとも２つを含む点で特徴付けられる：
− 官能基を含まない；
− 球形状(又はビーズ形状)で与えられる；
− １１００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する。
【００３７】
やはり非常に好ましくは、上記の方法は、吸着剤が活性炭であって、官能基を有さず、球形状(又はビーズ形状)であり、１１００ｍ2／ｇ以上の最小比表面積を有する点で特徴付けられる。
【００３８】
やはり非常に好ましくは、上記の方法は、吸着剤が、０．２〜１ｍｍの、好ましくは、０．３〜０．９ｍｍの粒径を有する点で特徴付けられる。
【００３９】
やはり非常に好ましくは、上記の方法は、吸着剤が、官能基を有さず、直径０．４〜０．８ｍｍの球形状(又は、ビーズ形状)で、約８ｎｍの細孔直径及び約０．１５ｃｍ3／ｇの細孔体積の１２００ｍ2／ｋｇ以上の最小比表面積を有する活性炭である点で特徴付けられる。
【００４０】
本発明によれば、吸着剤は、球形状(又は、ビーズ形状)であってよく；それ故、規則的な形状を有する。当業者にとって、この球(又は「ビーズ」)形状は、不規則な表面及び／又は形状を有する顆粒型吸着剤、又は押出しにより得られる円柱(「ペレット」又は「棒」)形状で存在する吸着剤と異なるものである。
【００４１】
本発明の吸着剤は、活性炭である。この活性炭は、それを調製するために用いる出発物の性質によって、天然のものであるか又は合成物である。天然起源の活性炭は、炭素に富む任意の天然有機物例えば木材、樹皮、ヤシ殻、オリーブ核又は油残渣から生成することができる。合成物起源の活性炭は、炭素に富む任意の合成有機物例えはスチレンから生成することができ、該有機物は、制御された条件下で、好ましくは不活性大気例えば窒素中で、高温で熱分解にかけられる。
【００４２】
球形状の活性炭は、出発製品の予備成形したビーズから調製することができる。従って、球形状の合成活性炭は、出発製品の予備成形したビーズから調製することができる。
好ましくは、本発明により用いられる活性炭は、合成活性炭である。
【００４３】
本発明の他の主題は、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まず、上記の方法の一つによって得ることのできるイチョウのエキスである。
【００４４】
好ましくは、上で規定した、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないエキスは、下記を含む
− ２０〜３０重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ(総量)、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １０ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニン前駆物質；
そして非常に好ましくは
− ２２〜２６重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニン前駆物質；
【００４５】
やはり好ましくは、上で規定した、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないエキスは、下記を含む
− ２０〜３０重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ及びＣ、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １０ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニン前駆物質；
【００４６】
非常に好ましくは、上で規定したエキスは、下記となるようなレベルの除去困難な有機汚染物質を含み
− 各ＰＡＨのレベルが５μｇ／ｋｇ未満、好ましくは１μｇ／ｋｇ未満、非常に好ましくは０．５μｇ／ｋｇ未満であり、且つ／又は
− ＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ／ＰＣＢ)が１０ｐｇ／ｇ未満、好ましくは１．５ｐｇ／ｇ未満である；
そして、非常に好ましくは、下記となるようなレベルの除去困難な有機汚染物質を含む
− 各ＰＡＨのレベルが定量化の限界(ＬＯＱ)未満であり、且つ／又は
− ＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)が１．０ｐｇ／ｇ未満である；
【００４７】
本発明によるイチョウのエキスは、治療用組成物の活性成分として、又は食品添加物として用いることができる。かかるエキスをベースとするこれらの組成物は、粉末、顆粒、錠剤又はゼラチンカプセルの形状であってよい。
【００４８】
本発明の他の主題は、上で規定したエキスの、末梢又は脳の循環障害、痴呆又は痴呆症候群を治療するための医薬を製造するための利用である。
【００４９】
本発明の他の主題は、上で規定したエキスを活性成分として、治療上許容しうる賦形剤と共に含む治療用組成物である。
【００５０】
別途特定しない限り、本願で言及される比及びパーセンテージは、重量／重量比であり、重量パーセントである。当然、この方法の種々の工程の作業温度は、使用する有機溶媒の沸点より低く、好ましくは、当該沸点より少なくとも５℃低い。
【実施例】
【００５１】
実験部
実施例１：イチョウのエキスの製造
乾燥したイチョウの葉２ｋｇを、約６０℃の温度で、アセトン／水(重量で６０／４０)で、毎回、１０倍の溶媒(重量／重量)を用いて、２回抽出する。
【００５２】
有機溶媒は、約３５％の固体物質含量が得られるまで、蒸発により除去する。
【００５３】
残っている濃縮された水溶液を、半分だけ、１７重量％のオーダーの固体含量が得られるまで水で蒸留してから、攪拌しながら、１０〜１２℃の温度まで少なくとも１時間冷却し、そしてこの方法で形成された沈澱を除去する。
【００５４】
残っている水溶液を、メチルエチルケトン／アセトン混合物(重量で６／４)で、３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で、抽出してから、相分離後に、メチルエチルケトン／アセトン混合物(重量で６／４)で再び抽出し、その後、固体物質含量５０〜６０重量％まで濃縮する。
【００５５】
得られた濃縮物を、水及びエタノールで希釈して、(１０／４５／４５)の(固体／エタノール／水)重量比にする。次いで、(１６／１００)の(鉛溶液／エタノール溶液)体積比を有する次酢酸鉛(ＣＨ3ＣＯ2)2Ｐｂ.２Ｐｂ(ＯＨ)2[ＣＡＳＥ＃１３３５−３２−６]の１６％水溶液を、この方法で得られた溶液に加え；そうして形成された鉛沈澱を遠心分離により除去する。
【００５６】
回収された水性エタノール上清を、アルキルフェノール型の化合物を除去するために、ヘプタンで、３回抽出し(毎回、全体積の１／３を使用)、残っている水性アルコール溶液を、減圧下で、濃縮して、５重量％未満のエタノール含量とする。
【００５７】
残っている水溶液をメチルエチルケトン／エタノール混合物(重量で、６／４)で、３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で抽出してから、相分離後に、メチルエチルケトン／アセトン混合物(重量で、６／４)で再び抽出し；有機溶媒を合わせて、レバチットＡＦ５活性炭カラム(１０ｇ)上を通過させる。
【００５８】
２０重量％の硫酸アンモニウムを、前工程で得られた有機相に攪拌しながら再び加え、次いで、デカンテーション後に、有機相を濃縮して、５０〜７０重量％のオーダーの固体物質含量とする。
【００５９】
次いで、９０％を超えるエタノールと水を、この方法で得られた濃縮物に(固体物質含量／エタノール／水)重量比(１２／７８／１０)で加えてから、約８〜１２℃まで少なくとも３時間冷却する。次いで、不溶物を濾別し、濾液を減圧下で濃縮してから、オーブン中で、真空中で乾燥して、９８重量％を超える固体物質含量を得る。
【００６０】
実施例２：吸着剤上を通過させることによるＰＯＰのレベルの低減
ＰＯＰで故意に汚染させたイチョウのエキスの種々の有機溶液を、次いで、吸着剤上を通過させる。
【００６１】
ｉ）イチョウのエキスの溶液の調製
イチョウの標準化されたエキス(ＥＧｂ７６１(商標))の溶液を、３種類の異なる溶媒中に調製して、ＰＯＰで故意に汚染させる。
溶液Ｎｏ．１：１４４０ｍｌのメチルエチルケトン／エタノール混合物(重量で、６／４)(２２重量％の水を含む)中の１２０ｇの乾燥エキス；この方法で得られた溶液は、２等分される。
溶液Ｎｏ．２：７２０ｍｌのメチルエチルケトン／アセトン混合物(重量で、６／４)(２０重量％の水を含む)中の６０ｇの乾燥エキス；
溶液Ｎｏ．３：７２０ｍｌの水性エタノール中の６０ｇの乾燥エキス(８８重量％)。
【００６２】
如何なる溶液でも、所望の濃度レベル並びに定量化の限界は、下記の通りである：
【００６３】
【表１】
【００６４】
ＰＡＨについては、用いた汚染物質は、次の通りである：ベンゾ(ａ)アントラセン、クリセン、トリフェニレン[ａ]、ベンゾ(ｂ)フルオランテン、ベンゾ(ｋ／ｊ)フルオランテン、ベンゾ(ａ)ピレン、インデノ(１，２，３−ｃｄ)ピレン、ジベンズ(ａｈ)アントラセン、ベンゾ(ｇｈｉ)ペリレン、ジベンゾ(ａｌ)−ピレン、ジベンゾ−(ａｉ)−ピレン、ジベンゾ−(ａｈ)−ピレン、ジベンゾ−(ａｅ)−ピレン、シクロペンタ(ｃｄ)ピレン及び５−メチルクリセン。これらの結果は、下記の表１に与えてある。
【００６５】
ＰＣＤＤ／Ｆについては、用いた汚染物質は、次の通りである：２，３，７，８−テトラＣＤＦ、１，２，３，７，８−ペンタＣＤＦ、２，３，４，７，８−ペンタＣＤＦ、１，２，３，４，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，６，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，７，８，９−ヘキサＣＤＦ、２，３，４，６，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，４，６，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，４，７，８，９−ヘキサＣＤＦ、オクタＣＤＦ、２，３，７，８−テトラＣＤＤ、１，２，３，７，８−ペンタＣＤＤ、１，２，３，４，７，８−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，６，７，８−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，７，８，９−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，４，６，７，８−ヘプタＣＤＤ及びオクタＣＤＤ。これらの結果は、下記の表２に与えてある。
【００６６】
ＰＣＢについては、用いた汚染物質は、次の通りである：ＰＣＢ７７、ＰＣＢ８１、ＰＣＢ１０５、ＰＣＢ１１４、ＰＣＢ１１８、ＰＣＢ１２３、ＰＣＢ１２６、ＰＣＢ１５６、ＰＣＢ１５７、ＰＣＢ１６７、ＰＣＢ１６９及びＰＣＢ１８９。これらの結果は、表３に与えてある。
【００６７】
ｉｉ）汚染された溶液の吸着剤上の通過
これらの汚染された溶液を、吸着剤レバチットＡＦ５(商標)(官能基を有さず、球形状で、１２００ｍ2／ｇの最小表面積を有し、粒子の少なくとも９０％は０．４〜０．８ｍｍを有する合成活性炭で、以後、「ＡＦ５」と呼ぶ)上を通過させる。これらの溶液を、１０ｇのＡＦ５を含むカラム(内径１ｃｍ、ベッド高さ２０ｃｍ)を３回通過させる。
乾燥エキスの、用いた吸着剤に対する重量比は、約６対１である。
【００６８】
ｉｉｉ）結果
得られた結果は、下記の表１、２及び３に示してある(それらの値は、小数点第３位までに丸めてある)。
【００６９】
用いた記号は、下記の通りである：
＜０．５：示された定量化の限界(ＬＯＱ)が０．５であり、見出された濃度がこの限界より低いことを意味する。
ＮＤ：対応する同種物(congener)の何れもがＬＯＱより低いため、測定されなかったことを意味する。
ＴＥＱ excl.ＬＯＱ[ａ]＝定量化された同種物のみを含む計算されたＴＥＱの値。
ＴＥＱ incl.ＬＯＱ[ｂ]＝ＬＯＱの値を使用した定量化された同種物を含む計算されたＴＥＱの値。
これらの結果は、吸着剤上を通過させることが、定量化の限界より低レベルのＰＯＰのレベルを低下させることを示している。
【００７０】
実施例３：参考用実施例
下記の実施例３ａ及び３ｂは、前の実施例で用いられたものと異なる吸着剤及び／又は溶媒の使用を示している。乾燥エキスの用いた吸着剤に対する重量比は、約６対１である。
【００７１】
実施例３ａ：合成樹脂の使用
合成樹脂を、上記の実施例２で規定した溶液Ｎｏ．２と共に用いる。
【００７２】
この樹脂の特性は、次の通りである：官能基を有さず、架橋されたポリスチレンベースであり、球形状で、０．４５〜０．５５ｍｍ粒径の、１３００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有するレバチット(商標)ＶＰ ＯＣ １１６３樹脂。
【００７３】
実験プロトコール(汚染、溶液の吸着剤上の通過)は、実施例２に記載したものと同じである。
【００７４】
得られた結果は、下記の表４に示してある(それらの値は、小数点第３位までに丸めてある)。
【００７５】
これらの結果は、この樹脂上を通過後において、吸着剤レバチットＡＦ５(商標)上を通過させるとＰＯＰレベルを定量化の限界より低レベルまで低減させる(実施例１)のに、加えられたＰＡＨの約２５〜７０％がエキス中に残っていることを示している。
【００７６】
実施例３ｂ：
用いた活性炭は、溶液Ｎｏ．４を用いた実施例２のもの(レバチットＡＦ５(商標))と同じである。
【００７７】
溶液４：１４４０ｍｌのｎ−ブタノール(２０重量％の水を含む)中の１２０ｇの乾燥エキス；この方法で得られた溶液は濾過され、ＰＯＰは、その濾液に加えられ、全体積を２等分して、その一方を対照として用い、他方を吸着剤レバチットＡＦ５(商標)上を通過させる。
【００７８】
この実験プロトコール(汚染、溶液の吸着剤上の通過)は、実施例２に記載されたものと同じである。
【００７９】
得られた結果は、下記の表５に示してある(それらの値は、小数点第３位までに丸めてある)。
【００８０】
かかる吸着剤を用いれば、それらの結果は、その上を通過後に、加えたＰＡＨの約３〜９％、加えたＰＣＤＤ／ＰＣＤＦの１〜１２％及び加えたＰＣＢの２７〜４６％がエキス中に残っており、他方、吸着剤レバチットＡＦ５(商標)上を通過させればＰＯＰレベルは定量化の限界より低レベルまで低減される(実施例２)ことを示す。
【００８１】
こうして得られた結果は、この活性炭上をｎ−ブタノールを溶媒として通過させた後には、加えたＰＣＤＤ／ＰＣＤＦの約１０〜３０％及び加えたＰＣＢの２０〜３０％は、エキス中に残っており、他方、同じ吸着剤上を実施例２において用いたような溶媒を用いて通過させれば(実施例２)、ＰＯＰレベルは、定量化の限界より低レベルまで低減されることを示している。
【００８２】
実施例２で用いた溶媒即ちメチルエチルケトン、エタノール、アセトン、水又は後者の混合物は、５〜６の極性インデックス(ＰＩ)(Modern Methods of Pharmaceutical Analysis by Roger E. Schimer, 第II巻、305頁参照、水の極性インデックスとして９の基準値を用いている)を有している。ｎ−ブタノールは、極性インデックス４．８(即ち、５〜６の範囲外)を有しており、一層低極性である。
【００８３】
彼の仕事において、Schimerは、溶媒混合物に対してある溶媒の極性が、組成物において直線的に依存していなくても、線形近似は、混合物の極性インデックスの評価のために用いることを可能にするだけ十分に正確であることを特定している。こうして、混合物の極性インデックスを、混合物を構成する各溶媒の体積による部分と極性インデックスの積の合計として計算することができる。
【００８４】
溶媒ＡとＢの混合物に関して、この混合に関する体積による部分は、ＶA及びＶBであり、極性インデックスは、それぞれ、ＩA及びＩBであるので、この混合物の極性インデックスは、ＶAＩA＋ＶBＩBである。
【００８５】
【表２】
【００８６】
【表３】
【００８７】
【表４】
【００８８】
【表５】
【００８９】
【表６】
【００９０】
【表７】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウのエキスを製造する方法に関するものである。本発明は又、本願の方法を使用することにより得ることができる除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウのエキスにも関係し、それは又、特に治療分野におけるそれらの利用にも関係する。
【背景技術】
【０００２】
イチョウのエキスの定評ある血管拡張剤、抗酸化剤及び神経防護活性の故に、これらは、数年にわたって、治療目的のために、特に、末梢循環障害又は脳循環障害、痴呆又は痴呆症候群の治療のために用いられてきた。
【０００３】
ある望ましくない成分例えばギンコール酸の存在は、ある抽出法においてかなり低減される。しかしながら、イチョウの葉の起源が何であっても、除去困難な有機汚染物質(ＰＯＰ)の存在は、如何に少なくても、妨げることができない。ＰＯＰは自然の生物分解に抵抗する(環境中に残留する)有機化合物であるので、それらは又、ヒトの健康及び環境に有害な影響及び生きている生物体の組織に蓄積する能力(食物連鎖における生物蓄積)を生じさせるリスクをも与える。それらの残留性及び生物蓄積性によって、ＰＯＰは、それらが放出され、海又は気流により運ばれる長い道のりにおいて見出されうる。それらの特性の故に及び任意のリスクを防止するために、ＰＯＰのレベルは可能な限り低いのが望ましい。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明によれば、除去困難な有機汚染物質(ＰＯＰ)とは、多環式芳香族炭化水素(ＰＡＨ)、ポリ塩化ビフェニル(ＰＣＢ)、ポリ塩化ジベンゾジオキシン(ＰＣＤＤ)及びポリ塩化ジベンゾフラン(ＰＣＤＦ)を意味する。ＰＡＨの内では、特に、次の芳香族化合物を挙げることができる：ベンゾ(ａ)アントラセン、クリセン、トリフェニレン[ａ]、ベンゾ(ｂ)フルオランテン、ベンゾ(ｋ／ｊ)フルオランテン、ベンゾ(ａ)ピレン、インデノ(１，２，３−ｃｄ)ピレン、ジベンズ(ａｈ)アントラセン、ベンゾ(ｇｈｉ)ペリレン、ジベンゾ(ａｌ)ピレン、ジベンゾ(ａｉ)ピレン、ジベンゾ(ａｈ)ピレン、ジベンゾ(ａｅ)ピレン、シクロペンタ(ｃｄ)ピレン及び５−メチルクリセン。ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦの内で、特に、次の化合物を挙げることができる：２，３，７，８−テトラＣＤＦ(「ＣＤＦ」＝クロロジベンゾフラン)、１，２，３，７，８−ペンタＣＤＦ、２，３，４，７，８−ペンタＣＤＦ、１，２，３，４，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，６，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，７，８，９−ヘキサＣＤＦ、２，３，４，６，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，４，６，７，８−ヘプタＣＤＦ、１，２，３，４，７，８，９−ヘプタＣＤＦ、オクタＣＤＦ、ＣＤＦ及び２，３，７，８−テトラＣＤＤ(「ＣＤＤ」＝クロロジベンゾジオキシン)、１，２，３，７，８−ペンタＣＤＤ、１，２，３，４，７，８−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，６，７，８−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，７，８，９−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，４，６，７，８−ヘプタＣＤＤ及びオクタＣＤＤ。最後に、ＰＣＢの内で、特に、ＰＣＢ７７、ＰＣＢ８８、ＰＣＢ１０５、ＰＣＢ１１４、ＰＣＢ１１８、ＰＣＢ１２３、ＰＣＢ１２６、ＰＣＢ１５６、ＰＣＢ１５７、ＰＣＢ１６７、ＰＣＢ１６９及びＰＣＢ１８９を挙げることができる。
【０００５】
特許ＥＰ４３１５３５は、イチョウを抽出するための方法を記載しており、その本質的目的は、低レベルのギンコール酸(１０ｐｐｍ未満、好ましくは、１ｐｐｍ未満のレベル)を有するエキスを得ることである。
【０００６】
出願ＷＯ２００６／１１７１７０は、特許ＥＰ４３１５３５の製造方法を、この方法で得られた最終的エキスが尚更に低レベルの多環式芳香族炭化水素(ＰＡＨ)を有するような仕方で改良することを提案している。
【０００７】
出願人は、特許ＥＰ４３１５３５及び出願ＷＯ２００６／１１７１７０に記載された方法は、この方法で得られる最終的エキスが上で規定したＰＯＰ(ＰＡＨを含む)を実質的に含まないような仕方で更に改良することができることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
それ故、本発明の主題は、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウの葉のエキスを得るための方法であって、該方法は、下記の工程：
(ａ)イチョウの葉(好ましくは、新鮮な緑色の又は乾燥したもの)を、約４０〜１００℃の温度で、水性アセトン、１〜３の炭素原子を含む水性アルコール又は無水メタノールを用いて抽出し；
(ｂ)有機溶媒の大部分を、エキスから分離して、最後の蒸留段階で水を添加可能な方法で、最大含量１０重量％とし、
(ｃ)残りの濃縮された水溶液を、水で希釈して、固体物質含量５〜２５重量％として、攪拌しながら放置して、２５℃未満の温度まで冷却し、沈澱が形成されるまで静止状態で放置し、この生成した水に難溶性の親油性成分からなる沈澱を分離し、
(ｄ)残っている水溶液に硫酸アンモニウムを加え、形成された溶液を、メチルエチルケトン又はメチルエチルケトンとアセトンの混合物で抽出し、
(ｅ)得られたエキスを、固体物質含量が５０〜７０％となるまで濃縮し、得られた濃縮液を、１０重量％の固体物質含量を有する５０重量％の水及び５０重量％のエタノールを含む溶液を得るために、水及びエタノールで希釈し、
(ｆ)この方法で得られた溶液に鉛塩の水溶液を、色が褐色から琥珀色に変わるまで加えて、形成された沈澱を分離し、又は鉛塩の代わりにポリアミドを使用し、
(ｇ)残りの水性アルコール溶液を、アルキルフェノール化合物の更なる分離のために６０〜１００℃の沸点を有する脂肪族又は脂環式溶媒で抽出し、
(ｈ)残りの水性アルコール溶液を、減圧下で、約５％の最大エタノール含量まで濃縮して、硫酸アンモニウムを、最大で２０重量％の含量まで加え、
(ｉ)得られた溶液を、メチルエチルケトンとエタノールの８／２〜５／５の比の、好ましくは６／４の比の混合物で抽出し、
(ｊ)その結果生成した有機相を、５０〜７０重量％の固体物質含量まで濃縮し、
(ｋ)この方法で得られた濃縮物にエタノールを、少なくとも８０％のエタノール含量が得られるまで加え、次いで、この混合物を、最大温度１２℃まで少なくとも２時間冷却し、最終的に、不溶物を濾過により除去して濾液を回収し；
(ｌ)この濾液を濃縮して、減圧下で、６０〜８０℃の温度で、水分含量５％未満の乾燥エキスが得られるまで乾燥することを含み、
該方法が、工程ｄ、ｉ又はｋの一つにおいて得られた有機相の一つを、１０００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する活性炭より構成される吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含むことを特徴とする当該方法である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明によれば、本願で規定した吸着剤の使用は、望ましくない化合物例えばＰＯＰを、活性化合物例えばフラボン及びテルペントリラクトン(ギンコライド及びビロバライド)のレベルを維持しつつ除去することを可能にする。
【００１０】
ＰＯＰの毒性は、それらが、ＰＡＨであるかＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ及びＰＣＢであるかによって変化する。これは、ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ及びＰＣＢ型化合物について、如何に「毒素当量(ＴＥＱ)」のシステムが確立されたかであり：この荷重係数は、２，３，７，８−ＴＣＤＤ(２，３，７，８−テトラクロロジベンゾ−ｐ−ジオキシン)に対する毒性の程度を示している(Van den Berg等、(1998), Environmental Health Perspectives 106 (12), 775)。
【００１１】
表現「除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウのエキス」は、非常に低レベルの除去困難な有機汚染物質、好ましくは下記を含むイチョウの任意のエキスを意味する：
− 各ＰＡＨのレベルは、５μｇ／ｋｇ未満、好ましくは、１μｇ／ｋｇ未満であり、好ましくは、０．５μｇ／ｋｇ未満であり、非常に好ましくは、定量化の限界(ＬＯＱ)未満であり、且つ／又は
− ＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)は、１０ｐｇ／ｇ未満であり、好ましくは、１．５ｐｇ／ｋｇ未満であり、非常に好ましくは、１．０ｐｇ／ｋｇ未満である。
【００１２】
好ましくは、上記の方法は、下記の点で特徴付けられる
工程(ｂ)において、有機溶媒は、最大含量５重量％まで分離され、
工程(ｃ)において、水溶液は、水で希釈されて、１５〜２０重量％の固体物質含量とされ、約１０〜１２℃の温度まで冷却され、
工程(ｄ)において、硫酸アンモニウムを、３０重量％の含量を生じるように溶液に加えて、形成された溶液を、９／１〜４／６の、好ましくは６／４の比の溶媒で抽出し、そして
工程(ｆ)において、酢酸鉛、次酢酸鉛若しくは硝酸鉛又は水酸化鉛の水溶液を用いる。
【００１３】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ａ)において、
イチョウの葉(好ましくは、乾燥したもの)を、約５０〜６５℃の温度で、水性アセトン(アセトン／水重量比は、５０／５０〜６５／３５であり、固体／溶媒比は１／６〜１／２０)又は水性エタノールを抽出用溶媒として用いて抽出し、
そして、好ましくは
用いる抽出用溶媒は、アセトン／水重量比が約６０／４０である水性アセトンであるという点において特徴付けられる。
【００１４】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｂ)において、
このエキスの有機溶媒は、減圧下での蒸発により、５％未満の最大残留溶媒レベル及び１５〜３０％のオーダーの固体含量が得られるまで除去されるという点において特徴付けられる。
【００１５】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｃ)において、
残っている濃縮された水相を水で、固体含量が１０〜２０重量％のオーダーになり、５％未満の最大残留溶媒レベルが得られるまで希釈し、その後、少なくとも１時間にわたって攪拌しながら４〜１２℃のオーダーの温度まで冷却する。
【００１６】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｄ)において、
残っている水溶液を、水溶液の体積に対して３０〜４０％、好ましくは３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で、重量比約６／４のメチルエチルケトン／アセトン混合物で抽出してから、相分離後に、有機相を除去する。
【００１７】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｆ)において、
前の工程(ｅ)においてこの方法で得られた溶液に、１５〜２０％のオーダーの濃度の次酢酸鉛(ＣＨ3ＣＯ2)2Ｐｂ.２Ｐｂ(ＯＨ)2[ＣＡＳ＃１３３５−３２−６]の水溶液を、(Ｐｂ量／固体含量)比０．１５〜０．３０で、非常に好ましくは、０．１８〜０．２５で加える。
【００１８】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｇ)において、残りの水性アルコール溶液を、ヘプタンで抽出する点で特徴付けられる。
【００１９】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｄで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる。
【００２０】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｉで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる。
【００２１】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｋで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる。
【００２２】
本発明の他の主題は、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウの葉のエキスを得るための方法であって、該方法は、下記を含む：
(ａａ)乾燥したイチョウの葉を、約４０〜１００℃の温度で、水性アセトン又は３炭素未満を有する低級アルコールから選択される抽出用溶媒を用いて抽出し；
(ｂａ)有機溶媒を、このエキスから、１０％未満の最大残留溶媒レベルまで除去し；
(ｃａ)残りの濃縮された水溶液を、水で、固体含量５〜２５重量％のオーダー及び５％未満の最大残留溶媒レベルが得られるまで希釈してから、２５℃未満の温度まで攪拌しながら冷却し、この方法で形成された親油性成分よりなる沈澱を除去する。
(ｄａ)残っている水溶液を、硫酸アンモニウムの存在下で、メチルエチルケトン／アセトン混合物で抽出してから、相分離後に、有機相を固体含量４０〜６０重量％まで濃縮し、
(ｅａ)得られた濃縮物を、水性エタノール及び水で、最終的溶液が約５０重量％の水及び５０重量％のエタノール及び１０〜１２％のオーダーの固体含量を含むように希釈し；
(ｆａ)工程(ｅ)においてこの方法で得られた溶液に、鉛塩の水溶液を、(Ｐｂ量／固体含量)比０．１５〜０．３で加え、この方法で形成された鉛沈澱を除去し；
(ｇａ)残っている水性エタノール溶液を、アルキルフェノール型化合物を除去するためにヘプタンで抽出し、残っている水性アルコール溶液を、減圧下で、５重量％未満のエタノール含量まで濃縮し；
(ｈａ)得られた溶液を、メチルエチルケトンとエタノールの混合物で、硫酸アンモニウムの存在下で抽出し；
(ｉａ)硫酸アンモニウムを、前工程で得られた有機相に攪拌しながら加えてから、デカンテーション後に、有機相を回収し、次いで、それを５０〜７０重量％の固体含量まで濃縮し；
(ｊａ)この方法で得られた濃縮物に、エタノールと水を、１０〜１２％の固体含量及び約７５〜９０％のエタノール含量(残りは水)が得られるまで加えてから、この混合物を、約８〜１２℃まで少なくとも１時間冷却して、最後に、不溶物を濾過により除去して、濾液を回収し；
(ｋａ)この方法で得られた濾液を、減圧下で、５０〜７０重量％の固体含量が得られるまで濃縮し、真空下で、オーブン中で、６０℃を超えない温度で乾燥し；
そして、前工程ｄａ、ｉａ又はｊａの一つで得られた有機相の一つを、１０００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する活性炭により構成される吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程。
【００２３】
好ましくは、上記の方法は、工程(ａａ)において、下記の点で特徴付けられる、
乾燥したイチョウの葉の抽出は、約５０〜６５℃の温度で、アセトン／水重量比５０／５０〜６５／３５の水性アセトンを用いて、(乾燥葉／溶媒)比１／６〜１／２０で、又は水性エタノールを抽出用溶媒として用いて催され、
そして、非常に好ましくは
用いられる抽出用溶媒は、約６０／４０のアセトン／水重量比を有する水性アセトンである。
【００２４】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｂａ)において、下記の点で特徴付けられる、
エキスからの有機溶媒の除去は、５％未満の最大残留溶媒レベル及び１５〜３０％のオーダーの固体含量が得られるまで、減圧下での蒸発により催される。
【００２５】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｃａ)において、下記の点で特徴付けられる、
残りの濃縮された水溶液を、水で、１０〜２０重量％のオーダーの固体含量が得られるまで希釈し、次いで、攪拌しながら、４〜１２℃の温度まで冷却する。
【００２６】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｄａ)において、下記の点で特徴付けられる、
残りの水溶液を、重量比５／５〜７／３、好ましくは約６／４のメチルエチルケトン／アセトン混合物で、この水溶液の体積に対して３０〜４０％の好ましくは３５重量％のレベルの硫酸アンモニウムの存在下で抽出する。
【００２７】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｆａ)において、下記の点で特徴つけられる、
鉛塩は、酢酸鉛、水酸化鉛及び次酢酸鉛から選択される。
【００２８】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｆａ)において、下記の点で特徴付けられる、
(Ｐｂ／固体含量)比は、０．１８〜０．２５である。
【００２９】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｆａ)において、下記の点で特徴付けられる、
工程(ｅａ)で得られた溶液に、１５〜２０％のオーダーの濃度の次酢酸鉛(ＣＨ3ＣＯ2)2Ｐｂ.２Ｐｂ(ＯＨ)2[ＣＡＳ＃１３３５−３２−６]の水溶液を、０．１８〜０．２５の(Ｐｂ量／固体含量)比で加える。
【００３０】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｈａ)において、下記の点で特徴付けられる、
得られた溶液を、６／４のオーダーの重量比のメチルエチルケトンとエタノールの混合物を用いて、この水溶液の体積に対して３０〜４０％、好ましくは３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で抽出する。
【００３１】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程(ｊａ)において、下記の点で特徴付けられる、
エタノールと水を、約７８〜９０％の、好ましくは７８〜８０％の含量が得られるまで加える。
【００３２】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｄａで得られた有機相を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる。
【００３３】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｉａで得られた有機相を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる。
【００３４】
やはり好ましくは、上記の方法は、工程ｊａで得られた有機相を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる。
【００３５】
好ましくは、上記の方法は、吸着剤が下記の特性の少なくとも一つを含む点で特徴付けられる：
− 官能基を含まない；
− 球形状(又はビーズ形状)で与えられる；
− １１００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する。
【００３６】
非常に好ましくは、上記の方法は、吸着剤が下記の特性の少なくとも２つを含む点で特徴付けられる：
− 官能基を含まない；
− 球形状(又はビーズ形状)で与えられる；
− １１００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する。
【００３７】
やはり非常に好ましくは、上記の方法は、吸着剤が活性炭であって、官能基を有さず、球形状(又はビーズ形状)であり、１１００ｍ2／ｇ以上の最小比表面積を有する点で特徴付けられる。
【００３８】
やはり非常に好ましくは、上記の方法は、吸着剤が、０．２〜１ｍｍの、好ましくは、０．３〜０．９ｍｍの粒径を有する点で特徴付けられる。
【００３９】
やはり非常に好ましくは、上記の方法は、吸着剤が、官能基を有さず、直径０．４〜０．８ｍｍの球形状(又は、ビーズ形状)で、約８ｎｍの細孔直径及び約０．１５ｃｍ3／ｇの細孔体積の１２００ｍ2／ｋｇ以上の最小比表面積を有する活性炭である点で特徴付けられる。
【００４０】
本発明によれば、吸着剤は、球形状(又は、ビーズ形状)であってよく；それ故、規則的な形状を有する。当業者にとって、この球(又は「ビーズ」)形状は、不規則な表面及び／又は形状を有する顆粒型吸着剤、又は押出しにより得られる円柱(「ペレット」又は「棒」)形状で存在する吸着剤と異なるものである。
【００４１】
本発明の吸着剤は、活性炭である。この活性炭は、それを調製するために用いる出発物の性質によって、天然のものであるか又は合成物である。天然起源の活性炭は、炭素に富む任意の天然有機物例えば木材、樹皮、ヤシ殻、オリーブ核又は油残渣から生成することができる。合成物起源の活性炭は、炭素に富む任意の合成有機物例えはスチレンから生成することができ、該有機物は、制御された条件下で、好ましくは不活性大気例えば窒素中で、高温で熱分解にかけられる。
【００４２】
球形状の活性炭は、出発製品の予備成形したビーズから調製することができる。従って、球形状の合成活性炭は、出発製品の予備成形したビーズから調製することができる。
好ましくは、本発明により用いられる活性炭は、合成活性炭である。
【００４３】
本発明の他の主題は、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まず、上記の方法の一つによって得ることのできるイチョウのエキスである。
【００４４】
好ましくは、上で規定した、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないエキスは、下記を含む
− ２０〜３０重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ(総量)、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １０ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニン前駆物質；
そして非常に好ましくは
− ２２〜２６重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニン前駆物質；
【００４５】
やはり好ましくは、上で規定した、除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないエキスは、下記を含む
− ２０〜３０重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ及びＣ、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １０ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニン前駆物質；
【００４６】
非常に好ましくは、上で規定したエキスは、下記となるようなレベルの除去困難な有機汚染物質を含み
− 各ＰＡＨのレベルが５μｇ／ｋｇ未満、好ましくは１μｇ／ｋｇ未満、非常に好ましくは０．５μｇ／ｋｇ未満であり、且つ／又は
− ＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ／ＰＣＢ)が１０ｐｇ／ｇ未満、好ましくは１．５ｐｇ／ｇ未満である；
そして、非常に好ましくは、下記となるようなレベルの除去困難な有機汚染物質を含む
− 各ＰＡＨのレベルが定量化の限界(ＬＯＱ)未満であり、且つ／又は
− ＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)が１．０ｐｇ／ｇ未満である；
【００４７】
本発明によるイチョウのエキスは、治療用組成物の活性成分として、又は食品添加物として用いることができる。かかるエキスをベースとするこれらの組成物は、粉末、顆粒、錠剤又はゼラチンカプセルの形状であってよい。
【００４８】
本発明の他の主題は、上で規定したエキスの、末梢又は脳の循環障害、痴呆又は痴呆症候群を治療するための医薬を製造するための利用である。
【００４９】
本発明の他の主題は、上で規定したエキスを活性成分として、治療上許容しうる賦形剤と共に含む治療用組成物である。
【００５０】
別途特定しない限り、本願で言及される比及びパーセンテージは、重量／重量比であり、重量パーセントである。当然、この方法の種々の工程の作業温度は、使用する有機溶媒の沸点より低く、好ましくは、当該沸点より少なくとも５℃低い。
【実施例】
【００５１】
実験部
実施例１：イチョウのエキスの製造
乾燥したイチョウの葉２ｋｇを、約６０℃の温度で、アセトン／水(重量で６０／４０)で、毎回、１０倍の溶媒(重量／重量)を用いて、２回抽出する。
【００５２】
有機溶媒は、約３５％の固体物質含量が得られるまで、蒸発により除去する。
【００５３】
残っている濃縮された水溶液を、半分だけ、１７重量％のオーダーの固体含量が得られるまで水で蒸留してから、攪拌しながら、１０〜１２℃の温度まで少なくとも１時間冷却し、そしてこの方法で形成された沈澱を除去する。
【００５４】
残っている水溶液を、メチルエチルケトン／アセトン混合物(重量で６／４)で、３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で、抽出してから、相分離後に、メチルエチルケトン／アセトン混合物(重量で６／４)で再び抽出し、その後、固体物質含量５０〜６０重量％まで濃縮する。
【００５５】
得られた濃縮物を、水及びエタノールで希釈して、(１０／４５／４５)の(固体／エタノール／水)重量比にする。次いで、(１６／１００)の(鉛溶液／エタノール溶液)体積比を有する次酢酸鉛(ＣＨ3ＣＯ2)2Ｐｂ.２Ｐｂ(ＯＨ)2[ＣＡＳＥ＃１３３５−３２−６]の１６％水溶液を、この方法で得られた溶液に加え；そうして形成された鉛沈澱を遠心分離により除去する。
【００５６】
回収された水性エタノール上清を、アルキルフェノール型の化合物を除去するために、ヘプタンで、３回抽出し(毎回、全体積の１／３を使用)、残っている水性アルコール溶液を、減圧下で、濃縮して、５重量％未満のエタノール含量とする。
【００５７】
残っている水溶液をメチルエチルケトン／エタノール混合物(重量で、６／４)で、３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で抽出してから、相分離後に、メチルエチルケトン／アセトン混合物(重量で、６／４)で再び抽出し；有機溶媒を合わせて、レバチットＡＦ５活性炭カラム(１０ｇ)上を通過させる。
【００５８】
２０重量％の硫酸アンモニウムを、前工程で得られた有機相に攪拌しながら再び加え、次いで、デカンテーション後に、有機相を濃縮して、５０〜７０重量％のオーダーの固体物質含量とする。
【００５９】
次いで、９０％を超えるエタノールと水を、この方法で得られた濃縮物に(固体物質含量／エタノール／水)重量比(１２／７８／１０)で加えてから、約８〜１２℃まで少なくとも３時間冷却する。次いで、不溶物を濾別し、濾液を減圧下で濃縮してから、オーブン中で、真空中で乾燥して、９８重量％を超える固体物質含量を得る。
【００６０】
実施例２：吸着剤上を通過させることによるＰＯＰのレベルの低減
ＰＯＰで故意に汚染させたイチョウのエキスの種々の有機溶液を、次いで、吸着剤上を通過させる。
【００６１】
ｉ）イチョウのエキスの溶液の調製
イチョウの標準化されたエキス(ＥＧｂ７６１(商標))の溶液を、３種類の異なる溶媒中に調製して、ＰＯＰで故意に汚染させる。
溶液Ｎｏ．１：１４４０ｍｌのメチルエチルケトン／エタノール混合物(重量で、６／４)(２２重量％の水を含む)中の１２０ｇの乾燥エキス；この方法で得られた溶液は、２等分される。
溶液Ｎｏ．２：７２０ｍｌのメチルエチルケトン／アセトン混合物(重量で、６／４)(２０重量％の水を含む)中の６０ｇの乾燥エキス；
溶液Ｎｏ．３：７２０ｍｌの水性エタノール中の６０ｇの乾燥エキス(８８重量％)。
【００６２】
如何なる溶液でも、所望の濃度レベル並びに定量化の限界は、下記の通りである：
【００６３】
【表１】
【００６４】
ＰＡＨについては、用いた汚染物質は、次の通りである：ベンゾ(ａ)アントラセン、クリセン、トリフェニレン[ａ]、ベンゾ(ｂ)フルオランテン、ベンゾ(ｋ／ｊ)フルオランテン、ベンゾ(ａ)ピレン、インデノ(１，２，３−ｃｄ)ピレン、ジベンズ(ａｈ)アントラセン、ベンゾ(ｇｈｉ)ペリレン、ジベンゾ(ａｌ)−ピレン、ジベンゾ−(ａｉ)−ピレン、ジベンゾ−(ａｈ)−ピレン、ジベンゾ−(ａｅ)−ピレン、シクロペンタ(ｃｄ)ピレン及び５−メチルクリセン。これらの結果は、下記の表１に与えてある。
【００６５】
ＰＣＤＤ／Ｆについては、用いた汚染物質は、次の通りである：２，３，７，８−テトラＣＤＦ、１，２，３，７，８−ペンタＣＤＦ、２，３，４，７，８−ペンタＣＤＦ、１，２，３，４，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，６，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，７，８，９−ヘキサＣＤＦ、２，３，４，６，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，４，６，７，８−ヘキサＣＤＦ、１，２，３，４，７，８，９−ヘキサＣＤＦ、オクタＣＤＦ、２，３，７，８−テトラＣＤＤ、１，２，３，７，８−ペンタＣＤＤ、１，２，３，４，７，８−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，６，７，８−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，７，８，９−ヘキサＣＤＤ、１，２，３，４，６，７，８−ヘプタＣＤＤ及びオクタＣＤＤ。これらの結果は、下記の表２に与えてある。
【００６６】
ＰＣＢについては、用いた汚染物質は、次の通りである：ＰＣＢ７７、ＰＣＢ８１、ＰＣＢ１０５、ＰＣＢ１１４、ＰＣＢ１１８、ＰＣＢ１２３、ＰＣＢ１２６、ＰＣＢ１５６、ＰＣＢ１５７、ＰＣＢ１６７、ＰＣＢ１６９及びＰＣＢ１８９。これらの結果は、表３に与えてある。
【００６７】
ｉｉ）汚染された溶液の吸着剤上の通過
これらの汚染された溶液を、吸着剤レバチットＡＦ５(商標)(官能基を有さず、球形状で、１２００ｍ2／ｇの最小表面積を有し、粒子の少なくとも９０％は０．４〜０．８ｍｍを有する合成活性炭で、以後、「ＡＦ５」と呼ぶ)上を通過させる。これらの溶液を、１０ｇのＡＦ５を含むカラム(内径１ｃｍ、ベッド高さ２０ｃｍ)を３回通過させる。
乾燥エキスの、用いた吸着剤に対する重量比は、約６対１である。
【００６８】
ｉｉｉ）結果
得られた結果は、下記の表１、２及び３に示してある(それらの値は、小数点第３位までに丸めてある)。
【００６９】
用いた記号は、下記の通りである：
＜０．５：示された定量化の限界(ＬＯＱ)が０．５であり、見出された濃度がこの限界より低いことを意味する。
ＮＤ：対応する同種物(congener)の何れもがＬＯＱより低いため、測定されなかったことを意味する。
ＴＥＱ excl.ＬＯＱ[ａ]＝定量化された同種物のみを含む計算されたＴＥＱの値。
ＴＥＱ incl.ＬＯＱ[ｂ]＝ＬＯＱの値を使用した定量化された同種物を含む計算されたＴＥＱの値。
これらの結果は、吸着剤上を通過させることが、定量化の限界より低レベルのＰＯＰのレベルを低下させることを示している。
【００７０】
実施例３：参考用実施例
下記の実施例３ａ及び３ｂは、前の実施例で用いられたものと異なる吸着剤及び／又は溶媒の使用を示している。乾燥エキスの用いた吸着剤に対する重量比は、約６対１である。
【００７１】
実施例３ａ：合成樹脂の使用
合成樹脂を、上記の実施例２で規定した溶液Ｎｏ．２と共に用いる。
【００７２】
この樹脂の特性は、次の通りである：官能基を有さず、架橋されたポリスチレンベースであり、球形状で、０．４５〜０．５５ｍｍ粒径の、１３００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有するレバチット(商標)ＶＰ ＯＣ １１６３樹脂。
【００７３】
実験プロトコール(汚染、溶液の吸着剤上の通過)は、実施例２に記載したものと同じである。
【００７４】
得られた結果は、下記の表４に示してある(それらの値は、小数点第３位までに丸めてある)。
【００７５】
これらの結果は、この樹脂上を通過後において、吸着剤レバチットＡＦ５(商標)上を通過させるとＰＯＰレベルを定量化の限界より低レベルまで低減させる(実施例１)のに、加えられたＰＡＨの約２５〜７０％がエキス中に残っていることを示している。
【００７６】
実施例３ｂ：
用いた活性炭は、溶液Ｎｏ．４を用いた実施例２のもの(レバチットＡＦ５(商標))と同じである。
【００７７】
溶液４：１４４０ｍｌのｎ−ブタノール(２０重量％の水を含む)中の１２０ｇの乾燥エキス；この方法で得られた溶液は濾過され、ＰＯＰは、その濾液に加えられ、全体積を２等分して、その一方を対照として用い、他方を吸着剤レバチットＡＦ５(商標)上を通過させる。
【００７８】
この実験プロトコール(汚染、溶液の吸着剤上の通過)は、実施例２に記載されたものと同じである。
【００７９】
得られた結果は、下記の表５に示してある(それらの値は、小数点第３位までに丸めてある)。
【００８０】
かかる吸着剤を用いれば、それらの結果は、その上を通過後に、加えたＰＡＨの約３〜９％、加えたＰＣＤＤ／ＰＣＤＦの１〜１２％及び加えたＰＣＢの２７〜４６％がエキス中に残っており、他方、吸着剤レバチットＡＦ５(商標)上を通過させればＰＯＰレベルは定量化の限界より低レベルまで低減される(実施例２)ことを示す。
【００８１】
こうして得られた結果は、この活性炭上をｎ−ブタノールを溶媒として通過させた後には、加えたＰＣＤＤ／ＰＣＤＦの約１０〜３０％及び加えたＰＣＢの２０〜３０％は、エキス中に残っており、他方、同じ吸着剤上を実施例２において用いたような溶媒を用いて通過させれば(実施例２)、ＰＯＰレベルは、定量化の限界より低レベルまで低減されることを示している。
【００８２】
実施例２で用いた溶媒即ちメチルエチルケトン、エタノール、アセトン、水又は後者の混合物は、５〜６の極性インデックス(ＰＩ)(Modern Methods of Pharmaceutical Analysis by Roger E. Schimer, 第II巻、305頁参照、水の極性インデックスとして９の基準値を用いている)を有している。ｎ−ブタノールは、極性インデックス４．８(即ち、５〜６の範囲外)を有しており、一層低極性である。
【００８３】
彼の仕事において、Schimerは、溶媒混合物に対してある溶媒の極性が、組成物において直線的に依存していなくても、線形近似は、混合物の極性インデックスの評価のために用いることを可能にするだけ十分に正確であることを特定している。こうして、混合物の極性インデックスを、混合物を構成する各溶媒の体積による部分と極性インデックスの積の合計として計算することができる。
【００８４】
溶媒ＡとＢの混合物に関して、この混合に関する体積による部分は、ＶA及びＶBであり、極性インデックスは、それぞれ、ＩA及びＩBであるので、この混合物の極性インデックスは、ＶAＩA＋ＶBＩBである。
【００８５】
【表２】
【００８６】
【表３】
【００８７】
【表４】
【００８８】
【表５】
【００８９】
【表６】
【００９０】
【表７】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウの葉のエキスを得るための方法であって、該方法は、下記の工程：
(ａ)イチョウの葉を、約４０〜１００℃の温度で、水性アセトン、１〜３の炭素原子を有する水性アルコール又は無水メタノールを用いて抽出し；
(ｂ)有機溶媒の大部分を、エキスから分離して、最後の蒸留段階で水を添加可能な方法で、最大含量１０重量％とし、
(ｃ)残りの濃縮された水溶液を、水で希釈して、固体物質含量５〜２５重量％として、攪拌しながら放置して、２５℃未満の温度まで冷却し、沈澱が形成されるまで静止状態で放置し、この生成した水によく難溶性の親油性成分からなる沈澱を分離し、
(ｄ)残っている水溶液に硫酸アンモニウムを加え、形成された溶液を、メチルエチルケトン又はメチルエチルケトンとアセトンの混合物で抽出し、
(ｅ)得られたエキスを、固体物質含量が５０〜７０％となるまで濃縮し、得られた濃縮液を、１０重量％の固体物質含量を有する５０重量％の水及び５０重量％のエタノールを含む溶液を得るために、水及びエタノールで希釈し、
(ｆ)この方法で得られた溶液に鉛塩の水溶液を、色が褐色から琥珀色に変わるまで加えて、形成された沈澱を分離し、又は鉛塩の代わりにポリアミドを使用し、
(ｇ)残りの水性アルコール溶液を、アルキルフェノール化合物の更なる分離のために６０〜１００℃の沸点を有する脂肪族又は脂環式溶媒で抽出し、
(ｈ)残りの水性アルコール溶液を、減圧下で、約５％の最大エタノール含量まで濃縮して、硫酸アンモニウムを、最大で２０重量％の含量まで加え、
(ｉ)得られた溶液を、メチルエチルケトンとエタノールの８／２〜５／５の比の、好ましくは６／４の比の混合物で抽出し、
(ｊ)その結果生成した有機相を、５０〜７０重量％の固体物質含量まで濃縮し、
(ｋ)この方法で得られた濃縮物にエタノールを、少なくとも８０％のエタノール含量が得られるまで加え、次いで、この混合物を、最大温度１２℃まで少なくとも２時間冷却し、最終的に、不溶物を濾過により除去して濾液を回収し；
(ｌ)この濾液を濃縮して、減圧下で、６０〜８０℃の温度で、水分含量５％未満の乾燥エキスが得られるまで乾燥することを含み、
該方法が、工程ｄ、ｉ又はｋの一つにおいて得られた有機相の一つを、１０００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する活性炭より構成される吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含むことを特徴とする当該方法。
【請求項２】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ｂ)において、有機溶媒は、最大含量５重量％まで分離され、
工程(ｃ)において、水溶液は、水で希釈されて、１５〜２０重量％の固体物質含量とされ、約１０〜１２℃の温度まで冷却され、
工程(ｄ)において、硫酸アンモニウムを、３０重量％の含量を生じるように溶液に加えて、形成された溶液を、９／１〜４／６の、好ましくは６／４の比の溶媒で抽出し、そして
工程(ｆ)において、酢酸鉛、次酢酸鉛若しくは硝酸鉛又は水酸化鉛の水溶液を用いる。
【請求項３】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ａ)において、イチョウの葉を、約５０〜６５℃の温度で、水性アセトン(アセトン／水重量比は、５０／５０〜６５／３５であり、固体／溶媒比は１／６〜１／２０)又は水性エタノールを抽出用溶媒として用いて抽出する。
【請求項４】
下記の点で特徴付けられる、請求項３に記載の方法、
工程(ａ)において、用いる抽出用溶媒は、アセトン／水重量比が約６０／４０である水性アセトンである。
【請求項５】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ｂ)において、このエキスの有機溶媒は、減圧下での蒸発により、５％未満の最大残留溶媒レベル及び１５〜３０％のオーダーの固体含量が得られるまで除去される。
【請求項６】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ｃ)において、残っている濃縮された水相を水で、固体含量が１０〜２０重量％のオーダーになり、５％未満の最大残留溶媒レベルが得られるまで希釈し、その後、少なくとも１時間にわたって攪拌しながら４〜１２℃のオーダーの温度まで冷却する。
【請求項７】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ｄ)において、残っている水溶液を、水溶液の体積に対して３０〜４０％の、好ましくは３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で、重量比約６／４のメチルエチルケトン／アセトン混合物で抽出してから、相分離後に、有機相を除去する。
【請求項８】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ｆ)において、前の工程(ｅ)においてこの方法で得られた溶液に、１５〜２０％のオーダーの濃度の次酢酸鉛(ＣＨ3ＣＯ2)2Ｐｂ.２Ｐｂ(ＯＨ)2の水溶液を、(Ｐｂ量／固体含量)比０．１５〜０．３０で加える。
【請求項９】
(Ｐｂ量／固体含量)比が、０．１８〜０．２５である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
工程(ｇ)において、残りの水性アルコール溶液を、ヘプタンで抽出する点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
工程ｄで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる、請求項１〜１０のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１２】
工程ｉで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる、請求項１〜１０のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１３】
工程ｋで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる、請求項１〜１２のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１４】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウの葉のエキスを得るための方法であって、下記を含む当該方法：
(ａａ)乾燥したイチョウの葉を、約４０〜１００℃の温度で、水性アセトン又は３炭素未満を有する低級アルコールから選択される抽出用溶媒を用いて抽出し；
(ｂａ)有機溶媒を、このエキスから、１０％未満の最大残留溶媒レベルまで除去し；
(ｃａ)残りの濃縮された水溶液を、水で、固体含量５〜２５重量％のオーダー及び５％未満の最大残留溶媒レベルが得られるまで希釈してから、２５℃未満の温度まで攪拌しながら冷却し、この方法で形成された親油性成分よりなる沈澱を除去する；
(ｄａ)残っている水溶液を、硫酸アンモニウムの存在下で、メチルエチルケトン／アセトン混合物で抽出してから、相分離後に、有機相を固体含量４０〜６０重量％まで濃縮し、
(ｅａ)得られた濃縮物を、水性エタノール及び水で、最終的溶液が約５０重量％の水及び５０重量％のエタノール及び１０〜１２％のオーダーの固体含量を含むように希釈し；
(ｆａ)工程(ｅ)においてこの方法で得られた溶液に、鉛塩の水溶液を、(Ｐｂ量／固体含量)比０．１５〜０．３で加え、この方法で形成された鉛沈澱を除去し；
(ｇａ)残っている水性エタノール溶液を、アルキルフェノール型化合物を除去するためにヘプタンで抽出し、残っている水性アルコール溶液を、減圧下で、５重量％未満のエタノール含量まで濃縮し；
(ｈａ)得られた溶液を、メチルエチルケトンとエタノールの混合物で、硫酸アンモニウムの存在下で抽出し；
(ｉａ)硫酸アンモニウムを、前工程で得られた有機相に攪拌しながら加えてから、デカンテーション後に、有機相を回収し、次いで、それを５０〜７０重量％の固体含量まで濃縮し；
(ｊａ)この方法で得られた濃縮物に、エタノールと水を、１０〜１２％の固体含量及び約７５〜９０％のエタノール含量(残りは水)が得られるまで加えてから、この混合物を、約８〜１２℃まで少なくとも１時間冷却して、最後に、不溶物を濾過により除去して、濾液を回収し；
(ｋａ)この方法で得られた濾液を、減圧下で、５０〜７０重量％の固体含量が得られるまで濃縮し、真空下で、オーブン中で、６０℃を超えない温度で乾燥すること；
及び、前工程ｄａ、ｉａ又はｊａの一つで得られた有機相の一つを、１０００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する活性炭により構成される吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程。
【請求項１５】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ａａ)において、乾燥したイチョウの葉の抽出は、約５０〜６５℃の温度で、アセトン／水重量比５０／５０〜６５／３５の水性アセトンを用いて、(乾燥葉／溶媒)比１／６〜１／２０で、又は水性エタノールを抽出用溶媒として用いて行なわれる。
【請求項１６】
下記の点で特徴付けられる、請求項１５に記載の方法、
工程(ａａ)において、用いられる抽出用溶媒は、約６０／４０のアセトン／水重量比を有する水性アセトンである。
【請求項１７】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｂａ)において、エキスからの有機溶媒の除去は、５％未満の最大残留溶媒レベル及び１５〜３０％のオーダーの固体含量が得られるまで、減圧下での蒸発により行なわれる。
【請求項１８】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｃａ)において、残りの濃縮された水溶液を、水で、１０〜２０重量％のオーダーの固体含量が得られるまで希釈し、次いで、攪拌しながら、４〜１２℃の温度まで冷却する。
【請求項１９】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｄａ)において、残りの水溶液を、重量比５／５〜７／３、好ましくは約６／４のメチルエチルケトン／アセトン混合物で、この水溶液の体積に対して３０〜４０％の好ましくは３５重量％のレベルの硫酸アンモニウムの存在下で抽出する。
【請求項２０】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｆａ)において、鉛塩は、酢酸鉛、水酸化鉛及び次酢酸鉛から選択される。
【請求項２１】
(Ｐｂ／固体含量)比が、０．１８〜０．２５である点で特徴付けられる、請求項１４又は２０に記載の方法。
【請求項２２】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４又は２０に記載の方法、
工程(ｆａ)において、工程(ｅａ)で得られた溶液に、１５〜２０％のオーダーの濃度の次酢酸鉛(ＣＨ3ＣＯ2)2Ｐｂ.２Ｐｂ(ＯＨ)2の水溶液を、０．１８〜０．２５の(Ｐｂ量／固体含量)比で加える。
【請求項２３】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｈａ)において、得られた溶液を、６／４のオーダーの重量比のメチルエチルケトンとエタノールの混合物を用いて、この水溶液の体積に対して３０〜４０％、好ましくは３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で抽出する。
【請求項２４】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｊａ)において、エタノールと水を、約７８〜９０％のエタノール含量が得られるまで加える。
【請求項２５】
工程ｄａで得られた有機相を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる、請求項１４〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項２６】
工程ｉａで得られた有機相を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる、請求項１４〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項２７】
工程ｊａで得られた有機相(濾液)を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる、請求項１４〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項２８】
吸着剤が下記の特性の少なくとも一つを含む点で特徴付けられる、請求項１〜２７のいずれか一つに記載の方法：
− 官能基を含まない；
− 球形状で与えられる；
− １１００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する。
【請求項２９】
吸着剤が下記の特性の少なくとも二つを含む点で特徴付けられる、請求項１〜２８のいずれか一つに記載の方法：
− 官能基を含まない；
− 球形状で与えられる；
− １１００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する。
【請求項３０】
吸着剤が活性炭であって、官能基を有さず、球形状であり、１１００ｍ2／ｇ以上の最小比表面積を有する点で特徴付けられる、請求項１〜２９のいずれか一つに記載の方法。
【請求項３１】
吸着剤が、０．２〜１ｍｍの粒径を有する点で特徴付けられる、請求項１〜３０のいずれか一つに記載の方法。
【請求項３２】
吸着剤が、０．３〜０．９ｍｍの粒径を有する点で特徴付けられる、請求項１〜３１のいずれか一つに記載の方法。
【請求項３３】
請求項１〜３２のいずれか一つに記載の方法であって、吸着剤が活性炭であって、官能基を有さず、直径０．４〜０．８ｍｍの球形状であり、細孔直径約８ｎｍ及び細孔体積約０．１５ｃｍ3／ｇの１２００ｍ2／ｇ以上の最小比表面積を有する点で特徴付けられる当該方法。
【請求項３４】
吸着剤が合成の活性炭である点で特徴付けられる、請求項１〜３３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項３５】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まず、請求項１〜３４のいずれか一つに記載の方法によって得ることのできるイチョウのエキス。
【請求項３６】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まず且つ下記を含む、請求項３５に記載のイチョウのエキス、
− ２０〜３０重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ(総量)、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １０ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニジン前駆物質。
【請求項３７】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まず且つ下記を含む、請求項３６に記載のイチョウのエキス、
− ２２〜２６重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニジン前駆物質。
【請求項３８】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まず且つ下記を含む、請求項３５に記載のイチョウのエキス、
− ２０〜３０重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ及びＣ、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １０ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニジン前駆物質。
【請求項３９】
請求項３５〜３８のいずれか一つに記載のイチョウのエキスであって、ＰＡＨを５μｇ／ｋｇ未満のレベルで及びＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)を１０ｐｇ／ｇ未満のレベルで含む当該エキス。
【請求項４０】
請求項３５〜３９のいずれか一つに記載のイチョウのエキスであって、ＰＡＨを１μｇ／ｋｇ未満のレベルで及びＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)を１．５ｐｇ／ｇ未満のレベルで含む当該エキス。
【請求項４１】
請求項３５〜４０のいずれか一つに記載のイチョウのエキスであって、ＰＡＨを０．５μｇ／ｋｇ未満のレベルで及びＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)を１．５ｐｇ／ｇ未満のレベルで含む当該エキス。
【請求項４２】
請求項３５〜４１のいずれか一つに記載のイチョウのエキスであって、定量化の限界(ＬＯＱ)未満のＰＡＨ及び１．０ｐｇ／ｇ未満のレベルのＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)を含む当該エキス。
【請求項４３】
請求項３５〜４２のいずれか一つで規定されたエキスの、末梢又は脳の循環障害、痴呆又は痴呆症候群の治療のための医薬の製造のための利用。
【請求項４４】
請求項３５〜４２のいずれか一つに規定されたエキスを活性成分として、治療上許容しうる賦形剤と共に含む治療用組成物。
【請求項１】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウの葉のエキスを得るための方法であって、該方法は、下記の工程：
(ａ)イチョウの葉を、約４０〜１００℃の温度で、水性アセトン、１〜３の炭素原子を有する水性アルコール又は無水メタノールを用いて抽出し；
(ｂ)有機溶媒の大部分を、エキスから分離して、最後の蒸留段階で水を添加可能な方法で、最大含量１０重量％とし、
(ｃ)残りの濃縮された水溶液を、水で希釈して、固体物質含量５〜２５重量％として、攪拌しながら放置して、２５℃未満の温度まで冷却し、沈澱が形成されるまで静止状態で放置し、この生成した水によく難溶性の親油性成分からなる沈澱を分離し、
(ｄ)残っている水溶液に硫酸アンモニウムを加え、形成された溶液を、メチルエチルケトン又はメチルエチルケトンとアセトンの混合物で抽出し、
(ｅ)得られたエキスを、固体物質含量が５０〜７０％となるまで濃縮し、得られた濃縮液を、１０重量％の固体物質含量を有する５０重量％の水及び５０重量％のエタノールを含む溶液を得るために、水及びエタノールで希釈し、
(ｆ)この方法で得られた溶液に鉛塩の水溶液を、色が褐色から琥珀色に変わるまで加えて、形成された沈澱を分離し、又は鉛塩の代わりにポリアミドを使用し、
(ｇ)残りの水性アルコール溶液を、アルキルフェノール化合物の更なる分離のために６０〜１００℃の沸点を有する脂肪族又は脂環式溶媒で抽出し、
(ｈ)残りの水性アルコール溶液を、減圧下で、約５％の最大エタノール含量まで濃縮して、硫酸アンモニウムを、最大で２０重量％の含量まで加え、
(ｉ)得られた溶液を、メチルエチルケトンとエタノールの８／２〜５／５の比の、好ましくは６／４の比の混合物で抽出し、
(ｊ)その結果生成した有機相を、５０〜７０重量％の固体物質含量まで濃縮し、
(ｋ)この方法で得られた濃縮物にエタノールを、少なくとも８０％のエタノール含量が得られるまで加え、次いで、この混合物を、最大温度１２℃まで少なくとも２時間冷却し、最終的に、不溶物を濾過により除去して濾液を回収し；
(ｌ)この濾液を濃縮して、減圧下で、６０〜８０℃の温度で、水分含量５％未満の乾燥エキスが得られるまで乾燥することを含み、
該方法が、工程ｄ、ｉ又はｋの一つにおいて得られた有機相の一つを、１０００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する活性炭より構成される吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含むことを特徴とする当該方法。
【請求項２】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ｂ)において、有機溶媒は、最大含量５重量％まで分離され、
工程(ｃ)において、水溶液は、水で希釈されて、１５〜２０重量％の固体物質含量とされ、約１０〜１２℃の温度まで冷却され、
工程(ｄ)において、硫酸アンモニウムを、３０重量％の含量を生じるように溶液に加えて、形成された溶液を、９／１〜４／６の、好ましくは６／４の比の溶媒で抽出し、そして
工程(ｆ)において、酢酸鉛、次酢酸鉛若しくは硝酸鉛又は水酸化鉛の水溶液を用いる。
【請求項３】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ａ)において、イチョウの葉を、約５０〜６５℃の温度で、水性アセトン(アセトン／水重量比は、５０／５０〜６５／３５であり、固体／溶媒比は１／６〜１／２０)又は水性エタノールを抽出用溶媒として用いて抽出する。
【請求項４】
下記の点で特徴付けられる、請求項３に記載の方法、
工程(ａ)において、用いる抽出用溶媒は、アセトン／水重量比が約６０／４０である水性アセトンである。
【請求項５】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ｂ)において、このエキスの有機溶媒は、減圧下での蒸発により、５％未満の最大残留溶媒レベル及び１５〜３０％のオーダーの固体含量が得られるまで除去される。
【請求項６】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ｃ)において、残っている濃縮された水相を水で、固体含量が１０〜２０重量％のオーダーになり、５％未満の最大残留溶媒レベルが得られるまで希釈し、その後、少なくとも１時間にわたって攪拌しながら４〜１２℃のオーダーの温度まで冷却する。
【請求項７】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ｄ)において、残っている水溶液を、水溶液の体積に対して３０〜４０％の、好ましくは３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で、重量比約６／４のメチルエチルケトン／アセトン混合物で抽出してから、相分離後に、有機相を除去する。
【請求項８】
下記の点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法、
工程(ｆ)において、前の工程(ｅ)においてこの方法で得られた溶液に、１５〜２０％のオーダーの濃度の次酢酸鉛(ＣＨ3ＣＯ2)2Ｐｂ.２Ｐｂ(ＯＨ)2の水溶液を、(Ｐｂ量／固体含量)比０．１５〜０．３０で加える。
【請求項９】
(Ｐｂ量／固体含量)比が、０．１８〜０．２５である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
工程(ｇ)において、残りの水性アルコール溶液を、ヘプタンで抽出する点で特徴付けられる、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
工程ｄで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる、請求項１〜１０のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１２】
工程ｉで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる、請求項１〜１０のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１３】
工程ｋで得られた有機相を、吸着剤上を通過させることよりなる更なる工程を含む点で特徴付けられる、請求項１〜１２のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１４】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まないイチョウの葉のエキスを得るための方法であって、下記を含む当該方法：
(ａａ)乾燥したイチョウの葉を、約４０〜１００℃の温度で、水性アセトン又は３炭素未満を有する低級アルコールから選択される抽出用溶媒を用いて抽出し；
(ｂａ)有機溶媒を、このエキスから、１０％未満の最大残留溶媒レベルまで除去し；
(ｃａ)残りの濃縮された水溶液を、水で、固体含量５〜２５重量％のオーダー及び５％未満の最大残留溶媒レベルが得られるまで希釈してから、２５℃未満の温度まで攪拌しながら冷却し、この方法で形成された親油性成分よりなる沈澱を除去する；
(ｄａ)残っている水溶液を、硫酸アンモニウムの存在下で、メチルエチルケトン／アセトン混合物で抽出してから、相分離後に、有機相を固体含量４０〜６０重量％まで濃縮し、
(ｅａ)得られた濃縮物を、水性エタノール及び水で、最終的溶液が約５０重量％の水及び５０重量％のエタノール及び１０〜１２％のオーダーの固体含量を含むように希釈し；
(ｆａ)工程(ｅ)においてこの方法で得られた溶液に、鉛塩の水溶液を、(Ｐｂ量／固体含量)比０．１５〜０．３で加え、この方法で形成された鉛沈澱を除去し；
(ｇａ)残っている水性エタノール溶液を、アルキルフェノール型化合物を除去するためにヘプタンで抽出し、残っている水性アルコール溶液を、減圧下で、５重量％未満のエタノール含量まで濃縮し；
(ｈａ)得られた溶液を、メチルエチルケトンとエタノールの混合物で、硫酸アンモニウムの存在下で抽出し；
(ｉａ)硫酸アンモニウムを、前工程で得られた有機相に攪拌しながら加えてから、デカンテーション後に、有機相を回収し、次いで、それを５０〜７０重量％の固体含量まで濃縮し；
(ｊａ)この方法で得られた濃縮物に、エタノールと水を、１０〜１２％の固体含量及び約７５〜９０％のエタノール含量(残りは水)が得られるまで加えてから、この混合物を、約８〜１２℃まで少なくとも１時間冷却して、最後に、不溶物を濾過により除去して、濾液を回収し；
(ｋａ)この方法で得られた濾液を、減圧下で、５０〜７０重量％の固体含量が得られるまで濃縮し、真空下で、オーブン中で、６０℃を超えない温度で乾燥すること；
及び、前工程ｄａ、ｉａ又はｊａの一つで得られた有機相の一つを、１０００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する活性炭により構成される吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程。
【請求項１５】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ａａ)において、乾燥したイチョウの葉の抽出は、約５０〜６５℃の温度で、アセトン／水重量比５０／５０〜６５／３５の水性アセトンを用いて、(乾燥葉／溶媒)比１／６〜１／２０で、又は水性エタノールを抽出用溶媒として用いて行なわれる。
【請求項１６】
下記の点で特徴付けられる、請求項１５に記載の方法、
工程(ａａ)において、用いられる抽出用溶媒は、約６０／４０のアセトン／水重量比を有する水性アセトンである。
【請求項１７】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｂａ)において、エキスからの有機溶媒の除去は、５％未満の最大残留溶媒レベル及び１５〜３０％のオーダーの固体含量が得られるまで、減圧下での蒸発により行なわれる。
【請求項１８】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｃａ)において、残りの濃縮された水溶液を、水で、１０〜２０重量％のオーダーの固体含量が得られるまで希釈し、次いで、攪拌しながら、４〜１２℃の温度まで冷却する。
【請求項１９】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｄａ)において、残りの水溶液を、重量比５／５〜７／３、好ましくは約６／４のメチルエチルケトン／アセトン混合物で、この水溶液の体積に対して３０〜４０％の好ましくは３５重量％のレベルの硫酸アンモニウムの存在下で抽出する。
【請求項２０】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｆａ)において、鉛塩は、酢酸鉛、水酸化鉛及び次酢酸鉛から選択される。
【請求項２１】
(Ｐｂ／固体含量)比が、０．１８〜０．２５である点で特徴付けられる、請求項１４又は２０に記載の方法。
【請求項２２】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４又は２０に記載の方法、
工程(ｆａ)において、工程(ｅａ)で得られた溶液に、１５〜２０％のオーダーの濃度の次酢酸鉛(ＣＨ3ＣＯ2)2Ｐｂ.２Ｐｂ(ＯＨ)2の水溶液を、０．１８〜０．２５の(Ｐｂ量／固体含量)比で加える。
【請求項２３】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｈａ)において、得られた溶液を、６／４のオーダーの重量比のメチルエチルケトンとエタノールの混合物を用いて、この水溶液の体積に対して３０〜４０％、好ましくは３５重量％の硫酸アンモニウムの存在下で抽出する。
【請求項２４】
下記の点で特徴付けられる、請求項１４に記載の方法、
工程(ｊａ)において、エタノールと水を、約７８〜９０％のエタノール含量が得られるまで加える。
【請求項２５】
工程ｄａで得られた有機相を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる、請求項１４〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項２６】
工程ｉａで得られた有機相を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる、請求項１４〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項２７】
工程ｊａで得られた有機相(濾液)を吸着剤上を通過させることよりなる追加の工程を含む点で特徴付けられる、請求項１４〜２４のいずれか一つに記載の方法。
【請求項２８】
吸着剤が下記の特性の少なくとも一つを含む点で特徴付けられる、請求項１〜２７のいずれか一つに記載の方法：
− 官能基を含まない；
− 球形状で与えられる；
− １１００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する。
【請求項２９】
吸着剤が下記の特性の少なくとも二つを含む点で特徴付けられる、請求項１〜２８のいずれか一つに記載の方法：
− 官能基を含まない；
− 球形状で与えられる；
− １１００ｍ2／ｇ以上の比表面積を有する。
【請求項３０】
吸着剤が活性炭であって、官能基を有さず、球形状であり、１１００ｍ2／ｇ以上の最小比表面積を有する点で特徴付けられる、請求項１〜２９のいずれか一つに記載の方法。
【請求項３１】
吸着剤が、０．２〜１ｍｍの粒径を有する点で特徴付けられる、請求項１〜３０のいずれか一つに記載の方法。
【請求項３２】
吸着剤が、０．３〜０．９ｍｍの粒径を有する点で特徴付けられる、請求項１〜３１のいずれか一つに記載の方法。
【請求項３３】
請求項１〜３２のいずれか一つに記載の方法であって、吸着剤が活性炭であって、官能基を有さず、直径０．４〜０．８ｍｍの球形状であり、細孔直径約８ｎｍ及び細孔体積約０．１５ｃｍ3／ｇの１２００ｍ2／ｇ以上の最小比表面積を有する点で特徴付けられる当該方法。
【請求項３４】
吸着剤が合成の活性炭である点で特徴付けられる、請求項１〜３３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項３５】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まず、請求項１〜３４のいずれか一つに記載の方法によって得ることのできるイチョウのエキス。
【請求項３６】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まず且つ下記を含む、請求項３５に記載のイチョウのエキス、
− ２０〜３０重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ(総量)、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １０ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニジン前駆物質。
【請求項３７】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まず且つ下記を含む、請求項３６に記載のイチョウのエキス、
− ２２〜２６重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ、Ｃ及びＪ、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニジン前駆物質。
【請求項３８】
除去困難な有機汚染物質を実質的に含まず且つ下記を含む、請求項３５に記載のイチョウのエキス、
− ２０〜３０重量％のフラボングリコシド、
− ２．５〜４．５総重量％のギンコライドＡ、Ｂ及びＣ、
− ２．０〜４．０重量％のビロバライド、
− １０ｐｐｍ未満のアルキルフェノール及び１０重量％未満のアントシアニジン前駆物質。
【請求項３９】
請求項３５〜３８のいずれか一つに記載のイチョウのエキスであって、ＰＡＨを５μｇ／ｋｇ未満のレベルで及びＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)を１０ｐｇ／ｇ未満のレベルで含む当該エキス。
【請求項４０】
請求項３５〜３９のいずれか一つに記載のイチョウのエキスであって、ＰＡＨを１μｇ／ｋｇ未満のレベルで及びＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)を１．５ｐｇ／ｇ未満のレベルで含む当該エキス。
【請求項４１】
請求項３５〜４０のいずれか一つに記載のイチョウのエキスであって、ＰＡＨを０．５μｇ／ｋｇ未満のレベルで及びＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)を１．５ｐｇ／ｇ未満のレベルで含む当該エキス。
【請求項４２】
請求項３５〜４１のいずれか一つに記載のイチョウのエキスであって、定量化の限界(ＬＯＱ)未満のＰＡＨ及び１．０ｐｇ／ｇ未満のレベルのＴＥＱ(ＰＣＤＤ／ＰＣＤＦ−ＰＣＢ)を含む当該エキス。
【請求項４３】
請求項３５〜４２のいずれか一つで規定されたエキスの、末梢又は脳の循環障害、痴呆又は痴呆症候群の治療のための医薬の製造のための利用。
【請求項４４】
請求項３５〜４２のいずれか一つに規定されたエキスを活性成分として、治療上許容しうる賦形剤と共に含む治療用組成物。
【公表番号】特表２０１１−５１１０４７（Ｐ２０１１−５１１０４７Ａ）
【公表日】平成２３年４月７日（２０１１．４．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５４５５２６（Ｐ２０１０−５４５５２６）
【出願日】平成２１年２月６日（２００９．２．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００９／０００１３７
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１１２７０９
【国際公開日】平成２１年９月１７日（２００９．９．１７）
【出願人】（５０９１２０４６９）イプセン ファルマ ソシエテ パール アクシオン サンプリフィエ (51)
【氏名又は名称原語表記】ＩＰＳＥＮ ＰＨＡＲＭＡ Ｓ．Ａ．Ｓ．
【住所又は居所原語表記】６５ Ｑｕａｉ Ｇｅｏｒｇｅｓ Ｇｏｒｓｅ，Ｆ−９２１００ Ｂｏｕｌｏｇｎｅ Ｂｉｌｌａｎｃｏｕｒｔ ＦＲＡＮＣＥ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年４月７日（２０１１．４．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年２月６日（２００９．２．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００９／０００１３７
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１１２７０９
【国際公開日】平成２１年９月１７日（２００９．９．１７）
【出願人】（５０９１２０４６９）イプセン ファルマ ソシエテ パール アクシオン サンプリフィエ (51)
【氏名又は名称原語表記】ＩＰＳＥＮ ＰＨＡＲＭＡ Ｓ．Ａ．Ｓ．
【住所又は居所原語表記】６５ Ｑｕａｉ Ｇｅｏｒｇｅｓ Ｇｏｒｓｅ，Ｆ−９２１００ Ｂｏｕｌｏｇｎｅ Ｂｉｌｌａｎｃｏｕｒｔ ＦＲＡＮＣＥ
【Ｆターム（参考）】
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