【課題】 より効果的なＧ−ＣＳＦ因子の提供
【解決手段】 Ｇ−ＣＳＦ因子にグリコシル基を有する修飾基を共有結合させる方法および該方法により得られる結合体

【特許請求の範囲】
【請求項１】
顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）ペプチドと修飾基との間に結合物を形成する方法であって、該修飾基が完全なグリコシル連結基を介して該Ｇ−ＣＳＦペプチドに共有結合し、該Ｇ−ＣＳＦペプチドが式：
【化１】

式中、
ａ、ｂ、ｃおよびｅは、０および１から独立して選択される員であり；
ｄは０であり；そして
Ｒは修飾基である、
で示されるグリコシル残基を含んでなり、かつ、
（ａ）該Ｇ−ＣＳＦペプチドを、グリコシルトランスフェラーゼおよび該修飾基に共有結合した該グリコシルトランスフェラーゼの基質であるグリコシル部分を含んでなる修飾されたグリコシル供与体と、該完全なグリコシル連結基の形成に適する条件下で接触させることを含んでなる上記方法。
【請求項２】
工程（ａ）の前に、（ｂ）上記Ｇ−ＣＳＦペプチドをN−アセチルガラクサミントランスフェラーゼおよびＧａｌＮＡｃ供与体と、該ＧａｌＮＡｃを該ペプチドへ転移させるために適する条件下で接触させる工程をさらに含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＧａｌＮＡｃ供与体がＵＤＰ−Ｎ−アセチルガラクトサミンである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
Ｎ−アセチルガラクトサミントランスフェラーゼがＧａｌＮＡｃトランスフェラーゼ２である、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
工程（ｂ）の前には、ａ、ｂ、ｃ、ｄおよびｅが０であり、工程（ａ）の前には、ａ、ｂ、ｃ、ｄおよびｅが１である、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
グリコシルトランスフェラーゼがシアリルトランスフェラーゼ、好ましくはＳＴ６ＧａｌＮＡｃＩである、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
グリコシル部分がシアル酸を含む、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
修飾基がぺプチド、糖類、ポリ（エーテル）、ポリ（アミン）およびポリ（カルボン酸）よりなる群から選択され水溶性ポリマーである、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
水溶性ポリマーがＰＥＧである、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
修飾されたグリコシル供与体がＰＥＧ化ＣＭＰシアル酸である、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
工程（ａ）の前に、（ｃ）適当な宿主においてＧ−ＣＳＦペプチドを発現させル工程を
さらに含んでなる、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
宿主が細菌細胞、好ましくは大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれかに記載の方法であって、前記ペプチドの結合体（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）を製薬学的製剤に配合する工程をさらに含んでなる、上記方法。
【請求項１４】
修飾基を含むＧ−ＣＳＦペプチド結合体であって、修飾基が前記ペプチドのアミノ酸に完全なグリコシル連結基を介して共有結合している、上記結合体。
【請求項１５】
Ｇ−ＣＳＦペプチドがスレオニン残基においてグリコシル化されている、請求項１４に記載結合体。
【請求項１６】
式
【化２】

式中、
ａ、ｂ、ｃおよびｅは、０および１から独立して選択される員であり；
ｄは０であり；そして
Ｒは修飾基である、
で示されるグリコシル基を含んでなる、請求項１４または１５に記載の結合体。
【請求項１７】
ｃ、ｄおよびｅが１であり、ａおよびｂが０である、請求項１６記載の結合体。
【請求項１８】
修飾基がぺプチド、糖類、ポリ（エーテル）、ポリ（アミン）およびポリ（カルボン酸）よりなる群から選択され水溶性ポリマーである、請求項１４〜１７のいずれかに記載の結合体。
【請求項１９】
水溶性ポリマーがＰＥＧを含む、請求項１８に記載の結合体。
【請求項２０】
請求項１４〜１９のいずれかに記載の結合体の、哺乳類での炎症性白血球生成の刺激用医薬の製造における使用。
【請求項２１】
請求項１４〜１９のいずれかに記載の結合体と製薬学的に許容されるキャリアーを含んでなる製薬学的製剤。

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３Ａ】

【図１３Ｂ】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７Ａ】

【図１７Ｂ】

【図１８Ａ】

【図１８Ｂ】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２２Ｃ】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７Ａ】

【図２７Ｂ】

【図２７Ｃ】

【図２７Ｄ】

【図２７Ｅ】

【図２７Ｆ】

【図２７Ｇ】

【図２８Ａ】

【図２８Ｂ】

【図２８Ｃ】

【図２８Ｄ】

【図２８Ｅ】

【図２８Ｆ】

【図２８Ｇ】

【図２８Ｈ】

【図２８Ｉ】

【図２８Ｊ】

【図２８Ｋ】

【図２８Ｌ】

【図２８Ｍ】

【図２８Ｎ】

【図２８Ｏ】

【図２８Ｐ】

【図２８Ｑ】

【図２８Ｒ】

【図２８Ｓ】

【図２８Ｔ】

【図２８Ｕ】

【図２８Ｖ】

【図２８Ｗ】

【図２８Ｘ】

【図２８Ｙ】

【図２８Ｚ】

【図２８ＡＡ】

【図２８ＢＢ】

【図２８ＣＣ】

【図２８ＤＤ】

【図２８ＥＥ】

【図２９Ａ】

【図２９Ｂ】

【図２９Ｃ】

【図２９Ｄ】

【図２９Ｅ】

【図２９Ｆ】

【図２９Ｇ】

【図２９Ｈ】

【図２９Ｉ】

【図２９Ｊ】

【図２９Ｋ】

【図２９Ｌ】

【図２９Ｍ】

【図２９Ｎ】

【図２９Ｏ】

【図２９Ｐ】

【図２９Ｑ】

【図２９Ｒ】

【図２９Ｓ】

【図３０Ａ】

【図３０Ｂ】

【図３０Ｃ】

【図３０Ｄ】

【図３１Ａ】

【図３１Ｂ】

【図３１Ｃ】

【図３１Ｄ】

【図３１Ｅ】

【図３１Ｆ】

【図３１Ｇ】

【図３２Ａ】

【図３２Ｂ】

【図３２Ｃ】

【図３２Ｄ】

【図３２Ｅ】

【図３２Ｆ】

【図３２Ｇ】

【図３２Ｈ】

【図３２Ｉ】

【図３２Ｊ】

【図３３Ａ】

【図３３Ｂ】

【図３３Ｃ】

【図３３Ｄ】

【図３３Ｅ】

【図３３Ｆ】

【図３３Ｇ】

【図３３Ｈ】

【図３３Ｉ】

【図３３Ｊ】

【図３４Ａ】

【図３４Ｂ】

【図３４Ｃ】

【図３４Ｄ】

【図３４Ｅ】

【図３４Ｆ】

【図３４Ｇ】

【図３４Ｈ】

【図３４Ｉ】

【図３４Ｊ】

【図３４Ｋ】

【図３５Ａ】

【図３５Ｂ】

【図３５Ｃ】

【図３５Ｄ】

【図３５Ｅ】

【図３５Ｆ】

【図３５Ｇ】

【図３５Ｈ】

【図３５Ｉ】

【図３５Ｊ】

【図３５Ｋ】

【図３５Ｌ】

【図３５Ｍ】

【図３５Ｎ】

【図３６Ａ】

【図３６Ｂ】

【図３６Ｃ】

【図３６Ｄ】

【図３６Ｅ】

【図３６Ｆ】

【図３６Ｇ】

【図３６Ｈ】

【図３６Ｉ】

【図３６Ｊ】

【図３６Ｋ】

【図３６Ｌ】

【図３６Ｍ】

【図３６Ｎ】

【図３６Ｏ】

【図３７Ａ】

【図３７Ｂ】

【図３７Ｃ】

【図３７Ｄ】

【図３７Ｅ】

【図３７Ｆ】

【図３７Ｇ】

【図３７Ｈ】

【図３７Ｉ】

【図３７Ｊ】

【図３７Ｋ】

【図３８Ａ】

【図３８Ｂ】

【図３８Ｃ】

【図３８Ｄ】

【図３８Ｅ】

【図３８Ｆ】

【図３８Ｇ】

【図３８Ｈ】

【図３８Ｉ】

【図３８Ｊ】

【図３８Ｋ】

【図３８Ｌ】

【図３８Ｍ】

【図３８Ｎ】

【図３８Ｏ】

【図３８Ｐ】

【図３８Ｑ】

【図３８Ｒ】

【図３８Ｓ】

【図３８Ｔ】

【図３８Ｕ】

【図３８Ｖ】

【図３８Ｗ】

【図３９Ａ】

【図３９Ｂ】

【図３９Ｃ】

【図３９Ｄ】

【図３９Ｅ】

【図３９Ｆ】

【図３９Ｇ】

【図４０Ａ】

【図４０Ｂ】

【図４０Ｃ】

【図４０Ｄ】

【図４０Ｅ】

【図４０Ｆ】

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【図４０Ｈ】

【図４０Ｉ】

【図４０Ｊ】

【図４０Ｋ】

【図４０Ｌ】

【図４０Ｍ】

【図４１Ａ】

【図４１Ｂ】

【図４１Ｃ】

【図４１Ｄ】

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【図４１Ｈ】

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【図４１Ｋ】

【図４１Ｌ】

【図４１Ｍ】

【図４２Ａ】

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【図４２Ｃ】

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【図４２Ｆ】

【図４２Ｇ】

【図４２Ｈ】

【図４２Ｉ】

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【図４３Ａ】

【図４３Ｂ】

【図４３Ｃ】

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【図４３Ｅ】

【図４３Ｆ】

【図４３Ｇ】

【図４３Ｈ】

【図４３Ｉ】

【図４３Ｊ】

【図４３Ｋ】

【図４３Ｌ】

【図４４Ａ】

【図４４Ｂ】

【図４４Ｃ】

【図４４Ｄ】

【図４４Ｅ】

【図４４Ｆ】

【図４４Ｇ】

【図４４Ｈ】

【図４４Ｉ】

【図４４Ｊ】

【図４４Ｋ】

【図４５Ａ】

【図４５Ｂ】

【図４５Ｃ】

【図４５Ｄ】

【図４５Ｅ】

【図４５Ｆ】

【図４５Ｇ】

【図４５Ｈ】

【図４５Ｉ】

【図４５Ｊ】

【図４５Ｋ】

【図４６Ａ】

【図４６Ｂ】

【図４６Ｃ】

【図４６Ｄ】

【図４６Ｅ】

【図４６Ｆ】

【図４６Ｇ】

【図４７Ａ】

【図４７Ｂ】

【図４７Ｃ】

【図４７Ｄ】

【図４８Ａ】

【図４８Ｂ】

【図４８Ｃ】

【図４８Ｄ】

【図４９Ａ】

【図４９Ｂ】

【図４９Ｃ】

【図４９Ｄ】

【図５０Ａ】

【図５０Ｂ】

【図５０Ｃ】

【図５０Ｄ】

【図５０Ｅ】

【図５０Ｆ】

【図５０Ｇ】

【図５０Ｈ】

【図５０Ｉ】

【図５０Ｊ】

【図５０Ｋ】

【図５０Ｌ】

【図５１Ａ】

【図５１Ｂ】

【図５１Ｃ】

【図５１Ｄ】

【図５１Ｅ】

【図５１Ｆ】

【図５１Ｇ】

【図５２Ａ】

【図５２Ｂ】

【図５３Ａ】

【図５３Ｂ】

【図５４Ａ】

【図５４Ｂ】

【図５５Ａ】

【図５５Ｂ】

【図５６Ａ】

【図５６Ｂ】

【図５７Ａ】

【図５７Ｂ】

【図５７Ｃ】

【図５７Ｄ】

【図５８Ａ】

【図５８Ｂ】

【図５９Ａ】

【図５９Ｂ】

【図６０Ａ】

【図６０Ｂ】

【図６１Ａ】

【図６１Ｂ】

【図６２Ａ−１】

【図６２Ａ−２】

【図６２Ｂ】

【図６３Ａ】

【図６３Ｂ】

【図６４Ａ】

【図６４Ｂ】

【図６５Ａ−１】

【図６５Ａ−２】

【図６５Ａ−３】

【図６５Ａ−４】

【図６５Ｂ−１】

【図６５Ｂ−２】

【図６５Ｂ−３】

【図６５Ｂ−４】

【図６６Ａ】

【図６６Ｂ】

【図６７Ａ】

【図６７Ｂ】

【図６８Ａ】

【図６８Ｂ】

【図６９Ａ】

【図６９Ｂ】

【図７０Ａ】

【図７０Ｂ】

【図７１Ａ】

【図７１Ｂ】

【図７２Ａ】

【図７２Ｂ】

【図７３Ａ】

【図７３Ｂ】

【図７４Ａ】

【図７４Ｂ】

【図７５Ａ】

【図７５Ｂ】

【図７６】

【図７７】

【図７８】

【図７９】

【図８０】

【図８１】

【図８２Ａ】

【図８２Ｂ】

【図８３Ａ】

【図８３Ｂ】

【図８４Ａ】

【図８４Ｂ】

【図８４Ｃ】

【図８４Ｄ】

【図８４Ｅ】

【図８５Ａ】

【図８５Ｂ】

【図８５Ｃ】

【図８５Ｄ】

【図８５Ｅ】

【図８６】

【図８７】

【図８８】

【図８９】

【図９０】

【図９１】

【図９２Ａ】

【図９２Ｂ】

【図９３】

【図９４Ａ】

【図９４Ｂ】

【図９５】

【図９６】

【図９７】

【図９８】

【図９９Ａ】

【図９９Ｂ】

【図１００】

【図１０１】

【図１０２Ａ】

【図１０２Ｂ】

【図１０３】

【図１０４】

【図１０５】

【図１０６】

【図１０７】

【図１０８】

【図１０９】

【図１１０】

【図１１１】

【図１１２】

【図１１３】

【図１１４】

【図１１５】

【図１１６】

【図１１７】

【図１１８】

【図１１９】

【図１２０】

【図１２１】

【図１２２】

【図１２３】

【図１２４】

【図１２５】

【図１２６】

【公開番号】特開２００９−１０８０８７（Ｐ２００９−１０８０８７Ａ）
【公開日】平成２１年５月２１日（２００９．５．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−２９７２０９（Ｐ２００８−２９７２０９）
【出願日】平成２０年１１月２０日（２００８．１１．２０）
【分割の表示】特願２００３−５３４４４６（Ｐ２００３−５３４４４６）の分割
【原出願日】平成１４年１０月９日（２００２．１０．９）
【出願人】（５０４１４２４８８）ネオス・テクノロジーズ・インコーポレーテツド (1)
【Ｆターム（参考）】