ポリヌクレオチドアプタマー系架橋物質体およびその使用
一態様において、本開示により、標的分子に結合する多価ポリヌクレオチドアプタマー；およびコンジュゲート枠組構造に結合された２つ以上の個別の親和性リガンドを含むコンジュゲートを含む架橋物質体であって、該２つ以上の親和性リガンドは、該アプタマーとの結合に関して該標的分子と競合し、異なるコンジュゲート上の親和性リガンドと該アプタマー間の非共有結合性相互作用の結果、該物質体内で該コンジュゲートが架橋される、架橋物質体を提供する。このような物質体は、所望の濃度の標的分子に応答した量のコンジュゲートを放出するように設計される。また、最終適用用途に応じて、種々の実施形態において、該コンジュゲートは、薬物および／または検出可能な標識を含むものであってもよい。薬物、検出可能な標識および親和性リガンドは、コンジュゲート枠組構造に、共有結合されていても、非共有結合で結合されていてもよい。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的分子に結合する多価ポリヌクレオチドアプタマー；および
コンジュゲート枠組構造に結合された２つ以上の個別の親和性リガンドを含むコンジュゲートを含む架橋物質体であって、
該２つ以上の親和性リガンドは、該アプタマーとの結合に関して該標的分子と競合し、異なるコンジュゲート上の親和性リガンドと該アプタマー間の非共有結合性相互作用の結果、該物質体内で該コンジュゲートが架橋される、
架橋物質体。
【請求項２】
該コンジュゲートが、さらに、その枠組構造に結合された薬物を含む、請求項１に記載の物質体。
【請求項３】
該コンジュゲートが、さらに、その枠組構造に結合された検出可能な標識を含む、請求項１に記載の物質体。
【請求項４】
標的分子がグルコースである、請求項１に記載の物質体。
【請求項５】
該コンジュゲートの親和性リガンドが糖質を含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項６】
該コンジュゲートの親和性リガンドが、グルコース、マンノース、グルコサミン、マンノサミン、メチルグルコース、メチルマンノース、エチルグルコース、およびエチルマンノースから選択される糖質を含む、請求項５に記載の物質体。
【請求項７】
該コンジュゲートの親和性リガンドがビマンノース（ｂｉｍｍａｎｏｓｅ）またはトリマンノースを含む、請求項５に記載の物質体。
【請求項８】
該コンジュゲートの親和性リガンドが、アミノエチルグルコース（ＡＥＧ）、アミノエチルマンノース（ＡＥＭ）、アミノエチルビマンノース（ＡＥＢＭ）またはアミノエチルトリマンノース（ＡＥＴＭ）を含む、請求項５に記載の物質体。
【請求項９】
該コンジュゲートの親和性リガンドが糖質とリンカーを含み、該糖が該リンカーにアノマー炭素を介して共有結合されている、請求項５に記載の物質体。
【請求項１０】
アノマー炭素がαアノマーである、請求項９に記載の物質体。
【請求項１１】
１５０ｍＭのＮａＣｌを含み、標的分子を含まない３７ＣでｐＨ７の２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液に入れたとき不溶性である、請求項１に記載の物質体。
【請求項１２】
該コンジュゲートが該物質体から、標的分子の濃度に依存性の速度で、または標的分子の濃度に依存性の程度まで放出される、請求項１１に記載の物質体。
【請求項１３】
標的分子がグルコースである、請求項１２に記載の物質体。
【請求項１４】
５０ｒｐｍでＵＳＰ溶出試験法ＩＩを使用し、３７Ｃで１５０ｍＭのＮａＣｌおよび１００ｍｇ／ｄＬのグルコースを含むｐＨ７の２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液に６時間入れたとき、実質的に不溶性のままである、請求項１３に記載の物質体。
【請求項１５】
５０ｒｐｍでＵＳＰ溶出試験法ＩＩを使用し、３７Ｃで１５０ｍＭのＮａＣｌおよび１００ｍｇ／ｄＬのグルコースを含むｐＨ７の２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液に６時間入れたとき、１０％未満の物質体が溶解する、請求項１３に記載の物質体。
【請求項１６】
５０ｒｐｍでＵＳＰ溶出試験法ＩＩを使用し、３７Ｃで１５０ｍＭのＮａＣｌおよび４００ｍｇ／ｄＬのグルコースを含むｐＨ７の２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液に６時間入れたとき、少なくとも５０％の物質体が溶解する、請求項１３に記載の物質体。
【請求項１７】
５０ｒｐｍでＵＳＰ溶出試験法ＩＩを使用し、３７Ｃで１５０ｍＭのＮａＣｌおよび４００ｍｇ／ｄＬのグルコースを含むｐＨ７の２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液に６時間入れたとき、１００％の物質体が溶解する、請求項１３に記載の物質体。
【請求項１８】
該コンジュゲートが、さらに、その枠組構造に結合された薬物を含む、請求項１３に記載の物質体。
【請求項１９】
薬物が抗糖尿病薬である、請求項１８に記載の物質体。
【請求項２０】
薬物がインスリン分子である、請求項１８に記載の物質体。
【請求項２１】
薬物がインスリン感受性改善薬である、請求項１８に記載の物質体。
【請求項２２】
薬物がインスリン分泌促進薬（ｓｅｃｒｅｔａｔｏｇｕｅ）である、請求項１８に記載の物質体。
【請求項２３】
コンジュゲート枠組構造がポリマー系である、請求項１に記載の物質体。
【請求項２４】
コンジュゲート枠組構造がポリマー系でない、請求項１に記載の物質体。
【請求項２５】
コンジュゲート枠組構造が分岐型または超分岐型である、請求項１に記載の物質体。
【請求項２６】
コンジュゲートの枠組構造が多糖を含む、請求項１に記載の物質体。
【請求項２７】
該コンジュゲートが、式：
【化１】
（式中、
Ｒｘは、水素または任意選択で置換されているＣ１〜６アルキルであり；
Ｚ１は、任意選択で置換されている二価のＣ１〜１０炭化水素鎖であり、ここで、Ｚ１の１、２、３、４または５個のメチレン単位は、任意選択で独立して、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＲａ−、−（Ｃ＝ＮＲａ）−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｓ＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−（ＣＲｂ＝ＣＲｂ）−、−（Ｎ＝Ｎ）−、任意選択で置換されているアリーレン部分または任意選択で置換されているヘテロアリーレン部分から選択される１つ以上の基で置き換えられており、式中、Ｒａは、水素、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているヘテロアリール、または適当なアミノ保護基であり、Ｒｂは、水素、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、または任意選択で置換されているヘテロアリールであり；
存在するＸ１は各々、独立して、−ＯＲＣまたは−Ｎ（Ｒｄ）２であり、式中、Ｒｃは、水素、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているヘテロアリール、適当なヒドロキシル保護基、カチオン基、または親和性リガンドであり、各Ｒｄは、独立して、水素、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているヘテロアリール、適当なアミノ保護基、または親和性リガンドであるが、存在するＸ１の少なくとも２つは親和性リガンドを含むものとし；
Ｙ１は、水素、ハロゲン、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているヘテロアリール、−ＯＲｅまたは−ＳＲｅであり、式中、Ｒｅは、水素、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、または任意選択で置換されているヘテロアリールであり；
ｒは、５〜２５（両端を含む）の整数であり；
Ｗ１は、薬物または検出可能な標識であり；
【化２】
は、共有結合性の単結合または二重結合に相当する）
の構造を含む、請求項１に記載の物質体。
【請求項２８】
該コンジュゲートが、式：
【化３】
（式中：
存在する[(Ａ−Ｔ)]は各々、該コンジュゲート内の存在し得る分岐部を表し；
存在する(Ａ−Ｔ)は各々、該コンジュゲートの分岐内の存在し得る反復部を表し；
存在するＡ−Ｔ
は各々、独立して、共有結合、炭素原子、ヘテロ原子、またはアシル、脂肪族、ヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリールおよび複素環式からなる群より選択される任意選択で置換されている基であり；
存在するＴは各々、独立して、共有結合であるか、または二価の直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の任意選択で置換されているＣ１〜３０炭化水素鎖であり、ここで、Ｔの１つ以上のメチレン単位は、任意選択で独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、複素環式基、アリール基またはヘテロアリール基で置き換えられており；
存在するＲは各々、独立して、水素、適当な保護基、またはアシル部分、アリールアルキル部分、脂肪族部分、アリール部分、ヘテロアリール部分もしくはヘテロ脂肪族部分であり；
−Ｂは、−Ｔ−ＬＢ−Ｘであり；
存在するＸは各々、独立して、親和性リガンドであり；
存在するＬＢは各々、独立して、共有結合であるか、またはＴとＸとの共有結合性コンジュゲーションに由来する基であり；
−Ｄは、−Ｔ−ＬＤ−Ｗであり；
存在するＷは各々、独立して、薬物または検出可能な標識であり；
存在するＬＤは各々、独立して、共有結合であるか、またはＴとＷとの共有結合性コンジュゲーションに由来する基であり；
ｋは、２〜１１（両端を含む）の整数であり、該コンジュゲート内にｋ−分岐部が少なくとも２つあることを規定し；
ｑは、１〜４（両端を含む）の整数であり；
ｋ＋ｑは、３〜１２（両端を含む）の整数であり；
存在するｐは各々、独立して、１〜５（両端を含む）の整数であり；
存在するｎは各々、独立して、０〜５（両端を含む）の整数であり；
存在するｍは各々、独立して、１〜５（両端を含む）の整数であり；
存在するｖは各々、独立して、０〜５（両端を含む）の整数であるが、各ｋ−分岐部において、存在する少なくとも１つのｎは≧１であり、存在する少なくとも１つのｖは≧１であるものとする）
の構造を含む、請求項１に記載の物質体。
【請求項２９】
ＸおよびＷがそれぞれ存在しない該コンジュゲートの分子量が１０，０００Ｄａ未満である、請求項２７または２８に記載の物質体。
【請求項３０】
ＸおよびＷがそれぞれ存在しない該コンジュゲートの分子量が約３００〜約５，０００Ｄａの範囲である、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３１】
ＸおよびＷがそれぞれ存在しない該コンジュゲートの分子量が約３００〜約８００Ｄａの範囲である、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３２】
存在するＸの少なくとも２つが糖質を含む親和性リガンドを含む、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３３】
存在するＸの少なくとも２つが、グルコース、マンノース、グルコサミン、マンノサミン、メチルグルコース、メチルマンノース、エチルグルコース、およびエチルマンノースからなる群より選択される糖質を含む親和性リガンドを含む、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３４】
存在するＸの少なくとも２つが、ビマンノース（ｂｉｍｍａｎｏｓｅ）またはトリマンノースを含む親和性リガンドを含む、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３５】
存在するＸの少なくとも２つが、アミノエチルグルコース（ＡＥＧ）、アミノエチルマンノース（ＡＥＭ）、アミノエチルビマンノース（ＡＥＢＭ）およびアミノエチルトリマンノース（ＡＥＴＭ）から選択される親和性リガンドを含む、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３６】
存在するＸの少なくとも２つが、糖質とリンカーを含む親和性リガンドを含み、該糖が該リンカーにアノマー炭素を介して共有結合されている、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３７】
アノマー炭素がαアノマーである、請求項３６に記載の物質体。
【請求項３８】
多価アプタマーが、配列番号１、２、３、４、５、６または７の少なくとも４０個の連続するヌクレオチドを含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項３９】
多価アプタマーが、配列番号１、２、３、４、５、６または７の少なくとも４０個の連続するヌクレオチドと少なくとも７０％の相同性を有する１つ以上の領域を含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項４０】
多価アプタマーが、配列番号８、９または１０のヌクレオチド配列を含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項４１】
多価アプタマーが、配列番号８、９または１０の少なくとも３０個の連続するヌクレオチドと少なくとも７０％の相同性を有する１つ以上の領域を含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項４２】
多価アプタマーが、配列番号８、９または１０と少なくとも７０％の相同性を有する１つ以上の領域を含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項４３】
請求項１〜４２のいずれか一項に記載の物質体を患者に投与することを含む方法。
【請求項４４】
該物質体が皮下注射によって投与される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
該コンジュゲートが、該枠組構造に結合されたインスリン分子を含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
患者が糖尿病である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
該物質体が、インスリン分子の平均日用量が１０〜２００Ｕの範囲となるように投与される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
該物質体が毎日投与される、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
該物質体が毎月投与される、請求項４７に記載の方法。
【請求項５０】
該物質体が毎月投与される、請求項４７に記載の方法。
【請求項５１】
患者がインスリン感受性改善薬も受けている、請求項４７に記載の方法。
【請求項５２】
患者がインスリン分泌促進薬も受けている、請求項４７に記載の方法。
【請求項５３】
（Ｉ）（ａ）グルコースに対する結合部位を少なくとも２つ有する多価ポリヌクレオチドアプタマーであって、第１の標識を含む多価ポリヌクレオチドアプタマーと、
（ｂ）親和性リガンドおよび第２の標識を含むコンジュゲートと、
を混合する工程
ここで、第１の標識は、第２の標識に近接していると、測定可能な応答をもたらす；
（ＩＩ）試料を、該多価ポリヌクレオチドアプタマーと該コンジュゲートの混合物に曝露する工程、ここで、
（ａ）グルコースが試料中に存在しない場合、該コンジュゲートは該ポリヌクレオチドアプタマーと、該ポリヌクレオチドアプタマーに対する親和性結合によって架橋物質体を形成し、測定可能な応答をもたらし、
（ｂ）グルコースが試料中に存在する場合、試料由来のグルコースが該コンジュゲートと、該ポリヌクレオチドアプタマー上の結合部位に関して競合する結果、該架橋物質体の形成が抑止されるため応答が低減される；ならびに
（ＩＩＩ）試料中のグルコースの存在および任意選択で量を測定するセンサーにより該応答を検出し、任意選択で該応答を測定する工程
を含む方法。
【請求項５４】
（Ｉ）（ａ）グルコースに対する結合部位を少なくとも２つ有する多価ポリヌクレオチドアプタマーと、
（ｂ）親和性リガンドおよび第１の標識を含む第１の分子群と、
（ｃ）親和性リガンドおよび第２の標識を含む第２の分子群と、
を混合する工程、
ここで、第１の標識は、第２の標識に近接していると測定可能な応答をもたらす、
（ＩＩ）試料を、該多価ポリヌクレオチドアプタマーと第１の分子群および第２の分子群との混合物に曝露する工程、ここで、
（ａ）グルコースが試料中に存在しない場合、第１の分子群および第２の分子群の構成員は、該多価ポリヌクレオチドアプタマーに対する親和性結合によって近接し、結合複合体および測定可能な応答をもたらし、
（ｂ）グルコースが試料中に存在する場合、試料由来のグルコースが、第１および第２の分子と、該多価ポリヌクレオチドアプタマー上の結合部位に関して競合する結果、前記結合複合体の形成が少なくなるため応答が低減される；ならびに
（ＩＩＩ）試料中のグルコースの存在および任意選択で量を測定するセンサーにより該応答を検出し、任意選択で該応答を測定する工程
を含む方法。
【請求項５５】
（Ｉ）（ａ）複数の親和性リガンドを含むコンジュゲートと、
（ｂ）グルコースに対する結合部位を少なくとも２つ有する多価ポリヌクレオチドアプタマー
を準備する工程；
（ＩＩ）該コンジュゲートと該ポリヌクレオチドアプタマーを混合する工程、
ここで、得られた混合物の粘性は、該コンジュゲートと該ポリヌクレオチドアプタマー間の結合によるものである；
（ＩＩＩ）該混合物を、グルコースを含む試料と接触させる工程、
これにより、該コンジュゲートが該ポリヌクレオチドアプタマーから外れ、濃度依存性の粘性の低下が引き起こされる；ならびに
（ＩＶ）生じた粘性の変化を検出し、任意選択で該変化を測定し、試料中のグルコースの存在および任意選択で量を測定する工程
を含む方法。
【請求項１】
標的分子に結合する多価ポリヌクレオチドアプタマー；および
コンジュゲート枠組構造に結合された２つ以上の個別の親和性リガンドを含むコンジュゲートを含む架橋物質体であって、
該２つ以上の親和性リガンドは、該アプタマーとの結合に関して該標的分子と競合し、異なるコンジュゲート上の親和性リガンドと該アプタマー間の非共有結合性相互作用の結果、該物質体内で該コンジュゲートが架橋される、
架橋物質体。
【請求項２】
該コンジュゲートが、さらに、その枠組構造に結合された薬物を含む、請求項１に記載の物質体。
【請求項３】
該コンジュゲートが、さらに、その枠組構造に結合された検出可能な標識を含む、請求項１に記載の物質体。
【請求項４】
標的分子がグルコースである、請求項１に記載の物質体。
【請求項５】
該コンジュゲートの親和性リガンドが糖質を含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項６】
該コンジュゲートの親和性リガンドが、グルコース、マンノース、グルコサミン、マンノサミン、メチルグルコース、メチルマンノース、エチルグルコース、およびエチルマンノースから選択される糖質を含む、請求項５に記載の物質体。
【請求項７】
該コンジュゲートの親和性リガンドがビマンノース（ｂｉｍｍａｎｏｓｅ）またはトリマンノースを含む、請求項５に記載の物質体。
【請求項８】
該コンジュゲートの親和性リガンドが、アミノエチルグルコース（ＡＥＧ）、アミノエチルマンノース（ＡＥＭ）、アミノエチルビマンノース（ＡＥＢＭ）またはアミノエチルトリマンノース（ＡＥＴＭ）を含む、請求項５に記載の物質体。
【請求項９】
該コンジュゲートの親和性リガンドが糖質とリンカーを含み、該糖が該リンカーにアノマー炭素を介して共有結合されている、請求項５に記載の物質体。
【請求項１０】
アノマー炭素がαアノマーである、請求項９に記載の物質体。
【請求項１１】
１５０ｍＭのＮａＣｌを含み、標的分子を含まない３７ＣでｐＨ７の２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液に入れたとき不溶性である、請求項１に記載の物質体。
【請求項１２】
該コンジュゲートが該物質体から、標的分子の濃度に依存性の速度で、または標的分子の濃度に依存性の程度まで放出される、請求項１１に記載の物質体。
【請求項１３】
標的分子がグルコースである、請求項１２に記載の物質体。
【請求項１４】
５０ｒｐｍでＵＳＰ溶出試験法ＩＩを使用し、３７Ｃで１５０ｍＭのＮａＣｌおよび１００ｍｇ／ｄＬのグルコースを含むｐＨ７の２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液に６時間入れたとき、実質的に不溶性のままである、請求項１３に記載の物質体。
【請求項１５】
５０ｒｐｍでＵＳＰ溶出試験法ＩＩを使用し、３７Ｃで１５０ｍＭのＮａＣｌおよび１００ｍｇ／ｄＬのグルコースを含むｐＨ７の２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液に６時間入れたとき、１０％未満の物質体が溶解する、請求項１３に記載の物質体。
【請求項１６】
５０ｒｐｍでＵＳＰ溶出試験法ＩＩを使用し、３７Ｃで１５０ｍＭのＮａＣｌおよび４００ｍｇ／ｄＬのグルコースを含むｐＨ７の２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液に６時間入れたとき、少なくとも５０％の物質体が溶解する、請求項１３に記載の物質体。
【請求項１７】
５０ｒｐｍでＵＳＰ溶出試験法ＩＩを使用し、３７Ｃで１５０ｍＭのＮａＣｌおよび４００ｍｇ／ｄＬのグルコースを含むｐＨ７の２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液に６時間入れたとき、１００％の物質体が溶解する、請求項１３に記載の物質体。
【請求項１８】
該コンジュゲートが、さらに、その枠組構造に結合された薬物を含む、請求項１３に記載の物質体。
【請求項１９】
薬物が抗糖尿病薬である、請求項１８に記載の物質体。
【請求項２０】
薬物がインスリン分子である、請求項１８に記載の物質体。
【請求項２１】
薬物がインスリン感受性改善薬である、請求項１８に記載の物質体。
【請求項２２】
薬物がインスリン分泌促進薬（ｓｅｃｒｅｔａｔｏｇｕｅ）である、請求項１８に記載の物質体。
【請求項２３】
コンジュゲート枠組構造がポリマー系である、請求項１に記載の物質体。
【請求項２４】
コンジュゲート枠組構造がポリマー系でない、請求項１に記載の物質体。
【請求項２５】
コンジュゲート枠組構造が分岐型または超分岐型である、請求項１に記載の物質体。
【請求項２６】
コンジュゲートの枠組構造が多糖を含む、請求項１に記載の物質体。
【請求項２７】
該コンジュゲートが、式：
【化１】
（式中、
Ｒｘは、水素または任意選択で置換されているＣ１〜６アルキルであり；
Ｚ１は、任意選択で置換されている二価のＣ１〜１０炭化水素鎖であり、ここで、Ｚ１の１、２、３、４または５個のメチレン単位は、任意選択で独立して、−Ｓ−、−Ｏ−、−ＮＲａ−、−（Ｃ＝ＮＲａ）−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｓ＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−（ＣＲｂ＝ＣＲｂ）−、−（Ｎ＝Ｎ）−、任意選択で置換されているアリーレン部分または任意選択で置換されているヘテロアリーレン部分から選択される１つ以上の基で置き換えられており、式中、Ｒａは、水素、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているヘテロアリール、または適当なアミノ保護基であり、Ｒｂは、水素、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、または任意選択で置換されているヘテロアリールであり；
存在するＸ１は各々、独立して、−ＯＲＣまたは−Ｎ（Ｒｄ）２であり、式中、Ｒｃは、水素、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているヘテロアリール、適当なヒドロキシル保護基、カチオン基、または親和性リガンドであり、各Ｒｄは、独立して、水素、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているヘテロアリール、適当なアミノ保護基、または親和性リガンドであるが、存在するＸ１の少なくとも２つは親和性リガンドを含むものとし；
Ｙ１は、水素、ハロゲン、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、任意選択で置換されているヘテロアリール、−ＯＲｅまたは−ＳＲｅであり、式中、Ｒｅは、水素、任意選択で置換されている脂肪族、任意選択で置換されているヘテロ脂肪族、任意選択で置換されているアリール、または任意選択で置換されているヘテロアリールであり；
ｒは、５〜２５（両端を含む）の整数であり；
Ｗ１は、薬物または検出可能な標識であり；
【化２】
は、共有結合性の単結合または二重結合に相当する）
の構造を含む、請求項１に記載の物質体。
【請求項２８】
該コンジュゲートが、式：
【化３】
（式中：
存在する[(Ａ−Ｔ)]は各々、該コンジュゲート内の存在し得る分岐部を表し；
存在する(Ａ−Ｔ)は各々、該コンジュゲートの分岐内の存在し得る反復部を表し；
存在するＡ−Ｔ
は各々、独立して、共有結合、炭素原子、ヘテロ原子、またはアシル、脂肪族、ヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリールおよび複素環式からなる群より選択される任意選択で置換されている基であり；
存在するＴは各々、独立して、共有結合であるか、または二価の直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の任意選択で置換されているＣ１〜３０炭化水素鎖であり、ここで、Ｔの１つ以上のメチレン単位は、任意選択で独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、複素環式基、アリール基またはヘテロアリール基で置き換えられており；
存在するＲは各々、独立して、水素、適当な保護基、またはアシル部分、アリールアルキル部分、脂肪族部分、アリール部分、ヘテロアリール部分もしくはヘテロ脂肪族部分であり；
−Ｂは、−Ｔ−ＬＢ−Ｘであり；
存在するＸは各々、独立して、親和性リガンドであり；
存在するＬＢは各々、独立して、共有結合であるか、またはＴとＸとの共有結合性コンジュゲーションに由来する基であり；
−Ｄは、−Ｔ−ＬＤ−Ｗであり；
存在するＷは各々、独立して、薬物または検出可能な標識であり；
存在するＬＤは各々、独立して、共有結合であるか、またはＴとＷとの共有結合性コンジュゲーションに由来する基であり；
ｋは、２〜１１（両端を含む）の整数であり、該コンジュゲート内にｋ−分岐部が少なくとも２つあることを規定し；
ｑは、１〜４（両端を含む）の整数であり；
ｋ＋ｑは、３〜１２（両端を含む）の整数であり；
存在するｐは各々、独立して、１〜５（両端を含む）の整数であり；
存在するｎは各々、独立して、０〜５（両端を含む）の整数であり；
存在するｍは各々、独立して、１〜５（両端を含む）の整数であり；
存在するｖは各々、独立して、０〜５（両端を含む）の整数であるが、各ｋ−分岐部において、存在する少なくとも１つのｎは≧１であり、存在する少なくとも１つのｖは≧１であるものとする）
の構造を含む、請求項１に記載の物質体。
【請求項２９】
ＸおよびＷがそれぞれ存在しない該コンジュゲートの分子量が１０，０００Ｄａ未満である、請求項２７または２８に記載の物質体。
【請求項３０】
ＸおよびＷがそれぞれ存在しない該コンジュゲートの分子量が約３００〜約５，０００Ｄａの範囲である、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３１】
ＸおよびＷがそれぞれ存在しない該コンジュゲートの分子量が約３００〜約８００Ｄａの範囲である、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３２】
存在するＸの少なくとも２つが糖質を含む親和性リガンドを含む、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３３】
存在するＸの少なくとも２つが、グルコース、マンノース、グルコサミン、マンノサミン、メチルグルコース、メチルマンノース、エチルグルコース、およびエチルマンノースからなる群より選択される糖質を含む親和性リガンドを含む、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３４】
存在するＸの少なくとも２つが、ビマンノース（ｂｉｍｍａｎｏｓｅ）またはトリマンノースを含む親和性リガンドを含む、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３５】
存在するＸの少なくとも２つが、アミノエチルグルコース（ＡＥＧ）、アミノエチルマンノース（ＡＥＭ）、アミノエチルビマンノース（ＡＥＢＭ）およびアミノエチルトリマンノース（ＡＥＴＭ）から選択される親和性リガンドを含む、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３６】
存在するＸの少なくとも２つが、糖質とリンカーを含む親和性リガンドを含み、該糖が該リンカーにアノマー炭素を介して共有結合されている、請求項２９に記載の物質体。
【請求項３７】
アノマー炭素がαアノマーである、請求項３６に記載の物質体。
【請求項３８】
多価アプタマーが、配列番号１、２、３、４、５、６または７の少なくとも４０個の連続するヌクレオチドを含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項３９】
多価アプタマーが、配列番号１、２、３、４、５、６または７の少なくとも４０個の連続するヌクレオチドと少なくとも７０％の相同性を有する１つ以上の領域を含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項４０】
多価アプタマーが、配列番号８、９または１０のヌクレオチド配列を含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項４１】
多価アプタマーが、配列番号８、９または１０の少なくとも３０個の連続するヌクレオチドと少なくとも７０％の相同性を有する１つ以上の領域を含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項４２】
多価アプタマーが、配列番号８、９または１０と少なくとも７０％の相同性を有する１つ以上の領域を含む、請求項４に記載の物質体。
【請求項４３】
請求項１〜４２のいずれか一項に記載の物質体を患者に投与することを含む方法。
【請求項４４】
該物質体が皮下注射によって投与される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
該コンジュゲートが、該枠組構造に結合されたインスリン分子を含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
患者が糖尿病である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
該物質体が、インスリン分子の平均日用量が１０〜２００Ｕの範囲となるように投与される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
該物質体が毎日投与される、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
該物質体が毎月投与される、請求項４７に記載の方法。
【請求項５０】
該物質体が毎月投与される、請求項４７に記載の方法。
【請求項５１】
患者がインスリン感受性改善薬も受けている、請求項４７に記載の方法。
【請求項５２】
患者がインスリン分泌促進薬も受けている、請求項４７に記載の方法。
【請求項５３】
（Ｉ）（ａ）グルコースに対する結合部位を少なくとも２つ有する多価ポリヌクレオチドアプタマーであって、第１の標識を含む多価ポリヌクレオチドアプタマーと、
（ｂ）親和性リガンドおよび第２の標識を含むコンジュゲートと、
を混合する工程
ここで、第１の標識は、第２の標識に近接していると、測定可能な応答をもたらす；
（ＩＩ）試料を、該多価ポリヌクレオチドアプタマーと該コンジュゲートの混合物に曝露する工程、ここで、
（ａ）グルコースが試料中に存在しない場合、該コンジュゲートは該ポリヌクレオチドアプタマーと、該ポリヌクレオチドアプタマーに対する親和性結合によって架橋物質体を形成し、測定可能な応答をもたらし、
（ｂ）グルコースが試料中に存在する場合、試料由来のグルコースが該コンジュゲートと、該ポリヌクレオチドアプタマー上の結合部位に関して競合する結果、該架橋物質体の形成が抑止されるため応答が低減される；ならびに
（ＩＩＩ）試料中のグルコースの存在および任意選択で量を測定するセンサーにより該応答を検出し、任意選択で該応答を測定する工程
を含む方法。
【請求項５４】
（Ｉ）（ａ）グルコースに対する結合部位を少なくとも２つ有する多価ポリヌクレオチドアプタマーと、
（ｂ）親和性リガンドおよび第１の標識を含む第１の分子群と、
（ｃ）親和性リガンドおよび第２の標識を含む第２の分子群と、
を混合する工程、
ここで、第１の標識は、第２の標識に近接していると測定可能な応答をもたらす、
（ＩＩ）試料を、該多価ポリヌクレオチドアプタマーと第１の分子群および第２の分子群との混合物に曝露する工程、ここで、
（ａ）グルコースが試料中に存在しない場合、第１の分子群および第２の分子群の構成員は、該多価ポリヌクレオチドアプタマーに対する親和性結合によって近接し、結合複合体および測定可能な応答をもたらし、
（ｂ）グルコースが試料中に存在する場合、試料由来のグルコースが、第１および第２の分子と、該多価ポリヌクレオチドアプタマー上の結合部位に関して競合する結果、前記結合複合体の形成が少なくなるため応答が低減される；ならびに
（ＩＩＩ）試料中のグルコースの存在および任意選択で量を測定するセンサーにより該応答を検出し、任意選択で該応答を測定する工程
を含む方法。
【請求項５５】
（Ｉ）（ａ）複数の親和性リガンドを含むコンジュゲートと、
（ｂ）グルコースに対する結合部位を少なくとも２つ有する多価ポリヌクレオチドアプタマー
を準備する工程；
（ＩＩ）該コンジュゲートと該ポリヌクレオチドアプタマーを混合する工程、
ここで、得られた混合物の粘性は、該コンジュゲートと該ポリヌクレオチドアプタマー間の結合によるものである；
（ＩＩＩ）該混合物を、グルコースを含む試料と接触させる工程、
これにより、該コンジュゲートが該ポリヌクレオチドアプタマーから外れ、濃度依存性の粘性の低下が引き起こされる；ならびに
（ＩＶ）生じた粘性の変化を検出し、任意選択で該変化を測定し、試料中のグルコースの存在および任意選択で量を測定する工程
を含む方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公表番号】特表２０１２−５１６１５６（Ｐ２０１２−５１６１５６Ａ）
【公表日】平成２４年７月１９日（２０１２．７．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５４８２５３（Ｐ２０１１−５４８２５３）
【出願日】平成２２年１月２７日（２０１０．１．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２２２３７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０８８２７６
【国際公開日】平成２２年８月５日（２０１０．８．５）
【出願人】（５１１１８１２８９）スマートセルズ・インコーポレイテツド (7)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年７月１９日（２０１２．７．１９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１月２７日（２０１０．１．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２２２３７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０８８２７６
【国際公開日】平成２２年８月５日（２０１０．８．５）
【出願人】（５１１１８１２８９）スマートセルズ・インコーポレイテツド (7)
【Ｆターム（参考）】
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