変異体タンパク質とその製造方法
安定性が増大したＧタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）を選択するための方法であって、（ａ）親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供する工程、（ｂ）親ＧＰＣＲが特定の立体構造を備えている際に前記ＧＰＣＲに結合するリガンドを選択する工程、（ｃ）前記選択したリガンドの結合に関する前記親ＧＰＣＲの安定性と比較して、前記ＧＰＣＲ変異体又はその各々が前記リガンド結合に関して増大した安定性を有するか否かを測定する工程、及び（ｄ）前記選択したリガンドの結合に関して親ＧＰＣＲと比較して増大した安定性を有する変異体を選択する工程を含む、方法を開示する。β−アドレナリン受容体、アデノシン受容体、及びニューロテンシン受容体の変異体も開示する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを生産するための方法であって、
（ａ）第一の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体のアミノ酸配列において、一又は複数の変異体が前記第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の位置を同定すること、及び
（ｂ）対応する一又は複数の位置で、第二のＧＰＣＲを規定するアミノ酸配列において一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲと比較して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項２】
親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを生産するための方法であって、
（ａ）第一の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体のアミノ酸配列において、一又は複数の変異体が第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の位置を同定すること、及び
（ｂ）ｉが対応する位置であるｉプラス又はマイナス５残基のウィンドウ内において第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項３】
親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを生産するための方法であって、
（ａ）第一の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体のアミノ酸配列中に、第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも一個の異なったアミノ酸残基を一又は複数の変異体が有する一又は複数の位置を同定すること、
（ｂ）ｉが対応する位置であるアミノ酸残基ｉのＣα原子から１２Åの距離内、又はその任意の原子から８Åの距離内に第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項４】
親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを製造するための方法であって、
ａ）第一の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること、
ｂ）一又は複数の変異体が第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の構造モチーフを構造膜タンパク質モデル中で同定すること、及び
ｃ）第二の親ＧＰＣＲにおける一又は複数の対応する構造モチーフを定めるアミノ酸配列における一又は複数の変異を作製し、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異を提供すること
を含む方法。
【請求項５】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、
（ｉ）第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること、
（ｉｉ）親ＧＰＣＲが特定の立体構造を備えている際に該親ＧＰＣＲに結合するものであるリガンドを選択すること、
（ｉｉｉ）リガンドの結合に関して特定の立体構造にあるときの前記又は各変異体ＧＰＣＲが、そのリガンドの結合に関して同じ特定の立体構造にあるときの親ＧＰＣＲの安定性と比較して増大した安定性を有するか否かを決定すること、及び
（ｉｖ）選択したリガンドの結合に関して、第一の親ＧＰＣＲと比較して増大した安定性を有する変異体を選択すること
を含む請求項１から４の何れか一項に記載の方法。
【請求項６】
工程（ｉｉｉ）におけるＧＰＣＲがとる特定の立体構造が、工程（ｉｉ）において選択されるリガンドのクラスに対応する請求項５に記載の方法。
【請求項７】
選択されるリガンドが、リガンドのアゴニストクラスからのものであり、特定の立体構造がアゴニスト立体構造であるか、又は選択されるリガンドがリガンドのアンタゴニストクラスからのものであり、特定の立体構造がアンタゴニスト立体構造である請求項６に記載の方法。
【請求項８】
選択されるリガンドが、リガンドのアゴニストクラスからのものであり、工程（ｉｉｉ）においてＧＰＣＲがとる特定の立体構造がアゴニスト立体構造である請求項７に記載の方法。
【請求項９】
第一のＧＰＣＲの一又は複数の変異体の結合親和性が、選択されるリガンドに対する親の結合親和性と実質的に同じかそれより大きい請求項５から８の何れか一項に記載の方法。
【請求項１０】
工程（ｉ）−（ｉｖ）が一又は複数回繰り返され、工程（ｉｖ）における増大した安定性を有する第一のＧＰＣＲの選択された変異体が方法の次の回における親ＧＰＣＲを表す請求項５から９の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１】
リガンドがフルアゴニスト、パーシャルアゴニスト、インバースアゴニスト、アンタゴニストの何れか一である請求項５から１０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１２】
リガンドが、ＧＰＣＲに結合するポリペプチドである請求項５から１１の何れか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ポリペプチドが、抗体、アンキリン、Ｇタンパク質、ＲＧＳタンパク質、アレスチン、ＧＰＣＲキナーゼ、レセプターチロシンキナーゼ、ＲＡＭＰ、ＮＳＦ、ＧＰＣＲ、ＮＭＤＡレセプターサブユニットＮＲ１又はＮＲ２ａ、又はカルシオン（calcyon）、又はＧＰＣＲに結合するその断片又は誘導体の何れかである請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
工程（ｉｉ）において、二以上のリガンドが選択され、それぞれの存在がＧＰＣＲを同じ特定の立体構造になるようにさせる請求項５から１３の何れか一項に記載の方法。
【請求項１５】
工程（ｉｖ）において、その親と比較して、工程（ｉｉ）で選択したリガンドと異なるクラスのリガンドに結合する能力が低減した変異体ＧＰＣＲを選択する請求項５から１４の何れか一項に記載の方法。
【請求項１６】
工程（ｉｖ）において選択された変異体ＧＰＣＲがＧタンパク質に共役できるかが決定される請求項５から１５の何れか一項に記載の方法。
【請求項１７】
工程（ｉｖ）において選択された変異体ＧＰＣＲが、親ＧＰＣＲに匹敵する伝播及び／又は親和性の順番で選択リガンドと同じクラスの複数のリガンドに結合できるかが決定される請求項５から１６の何れか一項に記載の方法。
【請求項１８】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、
（ｉ）請求項５から１７の何れか一項に記載の工程（ｉ）から（ｉｖ）に従って親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する一又は複数の変異体を選択すること、
（ｉｉ）増大した安定性について選択された一又は複数の変異体ＧＰＣＲ中の一又は複数の変異したアミノ酸残基の一又は複数の位置を同定すること、及び
（ｉｉｉ）同定した位置の一又は複数にアミノ酸置換を含む一又は複数の変異体ＧＰＣＲを合成すること
を含む方法によって得ることができる請求項１から４の何れか一項に記載の方法。
【請求項１９】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、第一の親ＧＰＣＲと比較して複数の変異を含んでいる請求項１から１８の何れか一項に記載の方法。
【請求項２０】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、熱、界面活性剤、カオトロピック剤及び極端なｐＨの何れか一又は複数に対して増大した安定性を有している請求項１から１９の何れか一項に記載の方法。
【請求項２１】
一又は複数の変異体が増大した熱安定性を有している請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
第一の親ＧＰＣＲが、βアドレナリン受容体、アデノシン受容体及びニューロテンシン受容体の何れか一である請求項１から２１の何れか一項に記載の方法。
【請求項２３】
第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲが、その対応する親受容体と比較して、図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした次の位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体βアドレナリン受容体である請求項１から２２の何れか一項に記載の方法。
【請求項２４】
変異体βアドレナリン受容体が、配列を図９に記載したシチメンチョウβアドレナリン受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有する請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲが、その対応する親受容体と比較して、図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした次の位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体アデノシン受容体である請求項１から２２の何れか一項に記載の方法。
【請求項２６】
変異体アデノシン受容体が、配列を図１０に記載したヒトアデノシンＡ２ａ受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有する請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲが、その対応する親受容体と比較して、図１１に記載のラットニューロテンシン受容体の番号付けした次の位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体ニューロテンシン受容体である請求項１から２２の何れか一項に記載の方法。
【請求項２８】
変異体ニューロテンシン受容体が、配列を図１１に記載したラットニューロテンシン受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有する請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲが、対応する野生型のムスカリン受容体と比較して、図１７に記載のヒトムスカリン受容体の番号付けした次の位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３及びＭｅｔ３８４の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体ムスカリン受容体である請求項１から２２の何れか一項に記載の方法。
【請求項３０】
変異体ムスカリン受容体が、配列を図１７に記載したラットニューロテンシン受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有する請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
構造膜タンパク質モデルが完全な膜タンパク質のモデルである請求項４から３０の何れか一項に記載の方法。
【請求項３２】
完全な膜タンパク質が、変異体が第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも一つの異なるアミノ酸を有するタンパク質ドメインにわたって、工程（ａ）の第一の親ＧＰＣＲの変異体と少なくとも２０％の配列同一性を有する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
完全な膜タンパク質がＧＰＣＲである請求項３１又は３２に記載の方法。
【請求項３４】
ＧＰＣＲが、第一の親ＧＰＣＲと同じＧＰＣＲのクラス又はファミリーのモデルである請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
構造膜タンパク質モデルが、ヒトβ２アドレナリン受容体又はウシロドプシンのモデルである請求項３１から３４の何れか一項に記載の方法。
【請求項３６】
構造モチーフが、ヘリックス界面、ヘリックスのねじれ、ヘリックスのねじれの反対側のヘリックス、脂質二重層に向いたヘリックス表面、疎水性−親水性境界層の脂質二重層を向いたヘリックス表面、ループ領域、又はタンパク質結合ポケットの何れかである請求項４から３５の何れか一項に記載の方法。
【請求項３７】
第二の親ＧＰＣＲが第一の親ＧＰＣＲである請求項１から３６の何れか一項に記載の方法。
【請求項３８】
第二の親ＧＰＣＲが第一のＧＰＣＲではない請求項１から３６の何れか一項に記載の方法。
【請求項３９】
第二の親ＧＰＣＲが、第一の親ＧＰＣＲと少なくとも２０％の配列同一性を有するＧＰＣＲである請求項１から３８の何れか一項に記載の方法。
【請求項４０】
第二のＧＰＣＲが、第一の親ＧＰＣＲと同じＧＰＣＲのクラス又はファミリーのものである請求項１から３８の何れか一項に記載の方法。
【請求項４１】
その親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを製造するための方法であって、
（ａ）親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有するＧＰＣＲの一又は複数の変異体の一の三次元モデルを提供するか一を越える三次元モデルを整列させること、
（ｂ）一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を一又は複数の変異体が有する一又は複数の位置を一又は複数の変異体のアミノ酸配列中に同定すること、
（ｃ）一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して異なったアミノ酸残基を有する一又は複数の位置におけるアミノ酸残基のＣα原子又は任意の原子から設定距離ｄÅ内に、一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する任意の整列されたモデルからの他の位置の数を決定すること、
（ｄ）他の位置の数が統計的に有意なクラスターを表すかどうかを決定し、もしそうなら、一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の位置のアミノ酸残基のＣα原子又は任意の原子からｄÅの距離内に第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列中に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項４２】
その親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを製造するための方法であって、
（ａ）親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有するＧＰＣＲの一又は複数の変異体の一の三次元モデルを提供するか一を越える三次元モデルを整列させること、
（ｂ）一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を一又は複数の変異体が有する一又は複数の位置を一又は複数の変異体のアミノ酸配列中に同定すること、
（ｃ）一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して異なったアミノ酸残基を有する一又は複数の位置におけるアミノ酸残基のＣα原子又は任意の原子から設定距離ｄÅ内に、一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する任意の整列されたモデルからの他の位置の数を決定すること、
（ｄ）他の位置の数が統計的に有意なクラスターを表すかどうかを決定すること、
（ｅ）（ｄ）で同定された二以上の統計的に有意なクラスターの中心を決定すること、及び
（ｆ）二以上の統計的に有意なクラスターの中心に対応する位置からｘÅの距離内に第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列中に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項４３】
一又は複数の三次元モデルが請求項５８から７０の何れかに記載の変異体ＧＰＣＲの何れか一又は複数のモデルである請求項４１又は４２に記載の方法。
【請求項４４】
少なくとも２、３、４、５又は１０のモデルがアラインされる請求項４１から４３の何れか一項に記載の方法。
【請求項４５】
ＣＩ原子からの設定距離ｄÅが１２Å以下である請求項４１から４４の何れか一項に記載の方法。
【請求項４６】
任意の原子からの設定距離ｄÅが１２Å以下である請求項４１から４４の何れか一項に記載の方法。
【請求項４７】
統計的に有意なクラスターが、９５％レベルで有意である（ρ＜０．０５）ものである請求項４１から４６の何れか一項に記載の方法。
【請求項４８】
（Ｉ）第二の親ＧＰＣＲが特定の立体構造を備える際に、前記ＧＰＣＲに結合するリガンドを選択すること、
（ＩＩ）そのリガンドの結合について特定の立体構造を備えている際の第二の親ＧＰＣＲの安定性と比較して、第二の親ＧＰＣＲの変異体が、特定の立体構造を備える際に選択したリガンドの結合について増大した安定性を有するか否かを決定すること、及び
（ＩＩＩ）選択したリガンドの結合に関して、第二の親ＧＰＣＲと比較して増大した安定性を有する変異体を選択すること
をさらに含む請求項１から４７の何れか一項に記載の方法。
【請求項４９】
工程（ＩＩ）においてＧＰＣＲが備える特定の立体構造が、工程（Ｉ）で選択したリガンドのクラスに対応する請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
選択したリガンドがリガンドのアゴニストクラスに由来し、特定の立体構造がアゴニスト立体構造であるか、又は選択したリガンドがリガンドのアンタゴニストクラスに由来し、特定の立体構造がアンタゴニスト立体構造である請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
リガンドが請求項１１から１３の何れか一項に記載のものである請求項４８から５０の何れか一項に記載の方法。
【請求項５２】
第二のＧＰＣＲの一又は複数の変異体の結合親和性が、選択したリガンドについての第二の親ＧＰＣＲの結合親和性と実質的に同一であるか又はそれ以上である請求項４８から５１の何れか一項に記載の方法。
【請求項５３】
請求項１から５２の何れか一項に記載の方法によって生産されるその親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５４】
変異体が、熱、界面活性剤、カオトロピック剤及び極端なｐＨの何れか一に対して増大した安定性を有している請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５５】
変異体が増大した熱安定性を有している請求項５４に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５６】
変異体ＧＰＣＲが、リガンドの存在下においてその親と比較して増大した熱安定性を有している請求項５４に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５７】
変異体ＧＰＣＲがその親より少なくとも１℃より安定している請求項５５又は５６に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５８】
ＧＰＣＲ変異体が、その親受容体と比較して、以下の（ｉ）図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８、（ｉｉ）図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５、（ｉｉｉ）図１１に記載のラットニューロテンシンの番号付けした位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９、並びに（ｉｖ）図１７に記載のムスカリン受容体の番号付けした位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３、及びＭｅｔ３８４のいずれか一又は複数と対応する位置に少なくとも１つの異なるアミノ酸を有する請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５９】
変異体ＧＰＣＲが変異体β−アドレナリン受容体である請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６０】
変異体β−アドレナリン受容体が、対応する野生型アドレナリン受容体と比較したとき、図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした次の位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸残基を有する請求項５９に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６１】
変異体β−アドレナリン受容体が、図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした次の位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８の何れかに対応する位置で、変異体受容体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有する請求項５９に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６２】
変異体ＧＰＣＲが変異体アデノシン受容体である請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６３】
変異体アデノシン受容体が、対応する野生型アデノシン受容体と比較した場合、図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした以下の位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５のいずれかに対応する位置で異なったアミノ酸を有している請求項６２に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６４】
変異体アデノシン受容体が、図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした以下の位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５のいずれかに対応する位置で、前記変異体受容体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有する請求項６２に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６５】
変異体ＧＰＣＲが変異体ニューロテンシン受容体である請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６６】
ニューロテンシン受容体が、対応する野生型ニューロテンシン受容体と比較した場合、図１１に記載のラットニューロテンシン受容体の番号付けした以下の位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９のいずれかに対応する位置で異なったアミノ酸を有している請求項６５に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６７】
変異体ニューロテンシン受容体が、図１１に記載のラットニューロテンシン受容体の番号付けした以下の位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９のいずれかに対応する位置で、前記変異体受容体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有する請求項６５に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６８】
変異体ＧＰＣＲが変異体ムスカリン受容体である請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６９】
ムスカリン受容体が、図１７に記載のヒトムスカリン受容体の番号付けした以下の位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３、及びＭｅｔ３８４のいずれかに対応する位置で、対応する野生型ムスカリン受容体と比較して異なるアミノ酸を有する請求項６８に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項７０】
変異体ムスカリン受容体が、図１７に記載のヒトムスカリン受容体の番号付けした以下の位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３、及びＭｅｔ３８４のいずれかに対応する位置で、前記受容体変異体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有する、請求項６８に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項７１】
請求項５３から７０の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲをコードするポリヌクレオチド。
【請求項７２】
請求項７１に記載のポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
【請求項７３】
可溶化形態にある請求項５３から７０の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項７４】
他のタンパク質を実質的に含まない、請求項５３から７０の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項７５】
固体担体に固定化された請求項５３から７０、７３又は７４の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項７６】
請求項５３から７０、７３又は７４の何れか一項に記載の一又は複数の変異体ＧＰＣＲを固定化した固体担体。
【請求項７７】
請求項５３から７０、７３又は７４の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲの結晶化のための使用。
【請求項７８】
請求項５３から７０、７３又は７４の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲの創薬における使用。
【請求項７９】
変異体ＧＰＣＲがリガンド結合スクリーニング又はアッセイ開発に使用される請求項７８に記載の使用。
【請求項８０】
請求項５３から７０、７３又は７４の何れか一項に記載の変異体受容体等の変異体ＧＰＣＲのバイオセンサーとしての使用。
【請求項１】
親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを生産するための方法であって、
（ａ）第一の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体のアミノ酸配列において、一又は複数の変異体が前記第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の位置を同定すること、及び
（ｂ）対応する一又は複数の位置で、第二のＧＰＣＲを規定するアミノ酸配列において一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲと比較して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項２】
親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを生産するための方法であって、
（ａ）第一の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体のアミノ酸配列において、一又は複数の変異体が第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の位置を同定すること、及び
（ｂ）ｉが対応する位置であるｉプラス又はマイナス５残基のウィンドウ内において第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項３】
親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを生産するための方法であって、
（ａ）第一の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体のアミノ酸配列中に、第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも一個の異なったアミノ酸残基を一又は複数の変異体が有する一又は複数の位置を同定すること、
（ｂ）ｉが対応する位置であるアミノ酸残基ｉのＣα原子から１２Åの距離内、又はその任意の原子から８Åの距離内に第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項４】
親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを製造するための方法であって、
ａ）第一の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること、
ｂ）一又は複数の変異体が第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の構造モチーフを構造膜タンパク質モデル中で同定すること、及び
ｃ）第二の親ＧＰＣＲにおける一又は複数の対応する構造モチーフを定めるアミノ酸配列における一又は複数の変異を作製し、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異を提供すること
を含む方法。
【請求項５】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、
（ｉ）第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること、
（ｉｉ）親ＧＰＣＲが特定の立体構造を備えている際に該親ＧＰＣＲに結合するものであるリガンドを選択すること、
（ｉｉｉ）リガンドの結合に関して特定の立体構造にあるときの前記又は各変異体ＧＰＣＲが、そのリガンドの結合に関して同じ特定の立体構造にあるときの親ＧＰＣＲの安定性と比較して増大した安定性を有するか否かを決定すること、及び
（ｉｖ）選択したリガンドの結合に関して、第一の親ＧＰＣＲと比較して増大した安定性を有する変異体を選択すること
を含む請求項１から４の何れか一項に記載の方法。
【請求項６】
工程（ｉｉｉ）におけるＧＰＣＲがとる特定の立体構造が、工程（ｉｉ）において選択されるリガンドのクラスに対応する請求項５に記載の方法。
【請求項７】
選択されるリガンドが、リガンドのアゴニストクラスからのものであり、特定の立体構造がアゴニスト立体構造であるか、又は選択されるリガンドがリガンドのアンタゴニストクラスからのものであり、特定の立体構造がアンタゴニスト立体構造である請求項６に記載の方法。
【請求項８】
選択されるリガンドが、リガンドのアゴニストクラスからのものであり、工程（ｉｉｉ）においてＧＰＣＲがとる特定の立体構造がアゴニスト立体構造である請求項７に記載の方法。
【請求項９】
第一のＧＰＣＲの一又は複数の変異体の結合親和性が、選択されるリガンドに対する親の結合親和性と実質的に同じかそれより大きい請求項５から８の何れか一項に記載の方法。
【請求項１０】
工程（ｉ）−（ｉｖ）が一又は複数回繰り返され、工程（ｉｖ）における増大した安定性を有する第一のＧＰＣＲの選択された変異体が方法の次の回における親ＧＰＣＲを表す請求項５から９の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１】
リガンドがフルアゴニスト、パーシャルアゴニスト、インバースアゴニスト、アンタゴニストの何れか一である請求項５から１０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１２】
リガンドが、ＧＰＣＲに結合するポリペプチドである請求項５から１１の何れか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ポリペプチドが、抗体、アンキリン、Ｇタンパク質、ＲＧＳタンパク質、アレスチン、ＧＰＣＲキナーゼ、レセプターチロシンキナーゼ、ＲＡＭＰ、ＮＳＦ、ＧＰＣＲ、ＮＭＤＡレセプターサブユニットＮＲ１又はＮＲ２ａ、又はカルシオン（calcyon）、又はＧＰＣＲに結合するその断片又は誘導体の何れかである請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
工程（ｉｉ）において、二以上のリガンドが選択され、それぞれの存在がＧＰＣＲを同じ特定の立体構造になるようにさせる請求項５から１３の何れか一項に記載の方法。
【請求項１５】
工程（ｉｖ）において、その親と比較して、工程（ｉｉ）で選択したリガンドと異なるクラスのリガンドに結合する能力が低減した変異体ＧＰＣＲを選択する請求項５から１４の何れか一項に記載の方法。
【請求項１６】
工程（ｉｖ）において選択された変異体ＧＰＣＲがＧタンパク質に共役できるかが決定される請求項５から１５の何れか一項に記載の方法。
【請求項１７】
工程（ｉｖ）において選択された変異体ＧＰＣＲが、親ＧＰＣＲに匹敵する伝播及び／又は親和性の順番で選択リガンドと同じクラスの複数のリガンドに結合できるかが決定される請求項５から１６の何れか一項に記載の方法。
【請求項１８】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、
（ｉ）請求項５から１７の何れか一項に記載の工程（ｉ）から（ｉｖ）に従って親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する一又は複数の変異体を選択すること、
（ｉｉ）増大した安定性について選択された一又は複数の変異体ＧＰＣＲ中の一又は複数の変異したアミノ酸残基の一又は複数の位置を同定すること、及び
（ｉｉｉ）同定した位置の一又は複数にアミノ酸置換を含む一又は複数の変異体ＧＰＣＲを合成すること
を含む方法によって得ることができる請求項１から４の何れか一項に記載の方法。
【請求項１９】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、第一の親ＧＰＣＲと比較して複数の変異を含んでいる請求項１から１８の何れか一項に記載の方法。
【請求項２０】
工程（ａ）における第一の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体が、熱、界面活性剤、カオトロピック剤及び極端なｐＨの何れか一又は複数に対して増大した安定性を有している請求項１から１９の何れか一項に記載の方法。
【請求項２１】
一又は複数の変異体が増大した熱安定性を有している請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
第一の親ＧＰＣＲが、βアドレナリン受容体、アデノシン受容体及びニューロテンシン受容体の何れか一である請求項１から２１の何れか一項に記載の方法。
【請求項２３】
第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲが、その対応する親受容体と比較して、図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした次の位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体βアドレナリン受容体である請求項１から２２の何れか一項に記載の方法。
【請求項２４】
変異体βアドレナリン受容体が、配列を図９に記載したシチメンチョウβアドレナリン受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有する請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲが、その対応する親受容体と比較して、図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした次の位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体アデノシン受容体である請求項１から２２の何れか一項に記載の方法。
【請求項２６】
変異体アデノシン受容体が、配列を図１０に記載したヒトアデノシンＡ２ａ受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有する請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲが、その対応する親受容体と比較して、図１１に記載のラットニューロテンシン受容体の番号付けした次の位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体ニューロテンシン受容体である請求項１から２２の何れか一項に記載の方法。
【請求項２８】
変異体ニューロテンシン受容体が、配列を図１１に記載したラットニューロテンシン受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有する請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
第一の親ＧＰＣＲの変異体ＧＰＣＲが、対応する野生型のムスカリン受容体と比較して、図１７に記載のヒトムスカリン受容体の番号付けした次の位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３及びＭｅｔ３８４の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸を有している変異体ムスカリン受容体である請求項１から２２の何れか一項に記載の方法。
【請求項３０】
変異体ムスカリン受容体が、配列を図１７に記載したラットニューロテンシン受容体のものと少なくとも２０％同一であるアミノ酸配列を有する請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
構造膜タンパク質モデルが完全な膜タンパク質のモデルである請求項４から３０の何れか一項に記載の方法。
【請求項３２】
完全な膜タンパク質が、変異体が第一の親ＧＰＣＲと比較して少なくとも一つの異なるアミノ酸を有するタンパク質ドメインにわたって、工程（ａ）の第一の親ＧＰＣＲの変異体と少なくとも２０％の配列同一性を有する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
完全な膜タンパク質がＧＰＣＲである請求項３１又は３２に記載の方法。
【請求項３４】
ＧＰＣＲが、第一の親ＧＰＣＲと同じＧＰＣＲのクラス又はファミリーのモデルである請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
構造膜タンパク質モデルが、ヒトβ２アドレナリン受容体又はウシロドプシンのモデルである請求項３１から３４の何れか一項に記載の方法。
【請求項３６】
構造モチーフが、ヘリックス界面、ヘリックスのねじれ、ヘリックスのねじれの反対側のヘリックス、脂質二重層に向いたヘリックス表面、疎水性−親水性境界層の脂質二重層を向いたヘリックス表面、ループ領域、又はタンパク質結合ポケットの何れかである請求項４から３５の何れか一項に記載の方法。
【請求項３７】
第二の親ＧＰＣＲが第一の親ＧＰＣＲである請求項１から３６の何れか一項に記載の方法。
【請求項３８】
第二の親ＧＰＣＲが第一のＧＰＣＲではない請求項１から３６の何れか一項に記載の方法。
【請求項３９】
第二の親ＧＰＣＲが、第一の親ＧＰＣＲと少なくとも２０％の配列同一性を有するＧＰＣＲである請求項１から３８の何れか一項に記載の方法。
【請求項４０】
第二のＧＰＣＲが、第一の親ＧＰＣＲと同じＧＰＣＲのクラス又はファミリーのものである請求項１から３８の何れか一項に記載の方法。
【請求項４１】
その親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを製造するための方法であって、
（ａ）親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有するＧＰＣＲの一又は複数の変異体の一の三次元モデルを提供するか一を越える三次元モデルを整列させること、
（ｂ）一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を一又は複数の変異体が有する一又は複数の位置を一又は複数の変異体のアミノ酸配列中に同定すること、
（ｃ）一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して異なったアミノ酸残基を有する一又は複数の位置におけるアミノ酸残基のＣα原子又は任意の原子から設定距離ｄÅ内に、一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する任意の整列されたモデルからの他の位置の数を決定すること、
（ｄ）他の位置の数が統計的に有意なクラスターを表すかどうかを決定し、もしそうなら、一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する一又は複数の位置のアミノ酸残基のＣα原子又は任意の原子からｄÅの距離内に第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列中に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項４２】
その親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲを製造するための方法であって、
（ａ）親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有するＧＰＣＲの一又は複数の変異体の一の三次元モデルを提供するか一を越える三次元モデルを整列させること、
（ｂ）一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を一又は複数の変異体が有する一又は複数の位置を一又は複数の変異体のアミノ酸配列中に同定すること、
（ｃ）一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して異なったアミノ酸残基を有する一又は複数の位置におけるアミノ酸残基のＣα原子又は任意の原子から設定距離ｄÅ内に、一又は複数の変異体が親ＧＰＣＲと比較して少なくとも１個の異なるアミノ酸残基を有する任意の整列されたモデルからの他の位置の数を決定すること、
（ｄ）他の位置の数が統計的に有意なクラスターを表すかどうかを決定すること、
（ｅ）（ｄ）で同定された二以上の統計的に有意なクラスターの中心を決定すること、及び
（ｆ）二以上の統計的に有意なクラスターの中心に対応する位置からｘÅの距離内に第二のＧＰＣＲを定めるアミノ酸配列中に一又は複数の変異を作製して、第二の親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する第二の親ＧＰＣＲの一又は複数の変異体を提供すること
を含む方法。
【請求項４３】
一又は複数の三次元モデルが請求項５８から７０の何れかに記載の変異体ＧＰＣＲの何れか一又は複数のモデルである請求項４１又は４２に記載の方法。
【請求項４４】
少なくとも２、３、４、５又は１０のモデルがアラインされる請求項４１から４３の何れか一項に記載の方法。
【請求項４５】
ＣＩ原子からの設定距離ｄÅが１２Å以下である請求項４１から４４の何れか一項に記載の方法。
【請求項４６】
任意の原子からの設定距離ｄÅが１２Å以下である請求項４１から４４の何れか一項に記載の方法。
【請求項４７】
統計的に有意なクラスターが、９５％レベルで有意である（ρ＜０．０５）ものである請求項４１から４６の何れか一項に記載の方法。
【請求項４８】
（Ｉ）第二の親ＧＰＣＲが特定の立体構造を備える際に、前記ＧＰＣＲに結合するリガンドを選択すること、
（ＩＩ）そのリガンドの結合について特定の立体構造を備えている際の第二の親ＧＰＣＲの安定性と比較して、第二の親ＧＰＣＲの変異体が、特定の立体構造を備える際に選択したリガンドの結合について増大した安定性を有するか否かを決定すること、及び
（ＩＩＩ）選択したリガンドの結合に関して、第二の親ＧＰＣＲと比較して増大した安定性を有する変異体を選択すること
をさらに含む請求項１から４７の何れか一項に記載の方法。
【請求項４９】
工程（ＩＩ）においてＧＰＣＲが備える特定の立体構造が、工程（Ｉ）で選択したリガンドのクラスに対応する請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
選択したリガンドがリガンドのアゴニストクラスに由来し、特定の立体構造がアゴニスト立体構造であるか、又は選択したリガンドがリガンドのアンタゴニストクラスに由来し、特定の立体構造がアンタゴニスト立体構造である請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
リガンドが請求項１１から１３の何れか一項に記載のものである請求項４８から５０の何れか一項に記載の方法。
【請求項５２】
第二のＧＰＣＲの一又は複数の変異体の結合親和性が、選択したリガンドについての第二の親ＧＰＣＲの結合親和性と実質的に同一であるか又はそれ以上である請求項４８から５１の何れか一項に記載の方法。
【請求項５３】
請求項１から５２の何れか一項に記載の方法によって生産されるその親ＧＰＣＲに対して増大した安定性を有する変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５４】
変異体が、熱、界面活性剤、カオトロピック剤及び極端なｐＨの何れか一に対して増大した安定性を有している請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５５】
変異体が増大した熱安定性を有している請求項５４に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５６】
変異体ＧＰＣＲが、リガンドの存在下においてその親と比較して増大した熱安定性を有している請求項５４に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５７】
変異体ＧＰＣＲがその親より少なくとも１℃より安定している請求項５５又は５６に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５８】
ＧＰＣＲ変異体が、その親受容体と比較して、以下の（ｉ）図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８、（ｉｉ）図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５、（ｉｉｉ）図１１に記載のラットニューロテンシンの番号付けした位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９、並びに（ｉｖ）図１７に記載のムスカリン受容体の番号付けした位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３、及びＭｅｔ３８４のいずれか一又は複数と対応する位置に少なくとも１つの異なるアミノ酸を有する請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項５９】
変異体ＧＰＣＲが変異体β−アドレナリン受容体である請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６０】
変異体β−アドレナリン受容体が、対応する野生型アドレナリン受容体と比較したとき、図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした次の位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８の何れか一又は複数に対応する位置に異なるアミノ酸残基を有する請求項５９に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６１】
変異体β−アドレナリン受容体が、図９に記載のシチメンチョウβ−アドレナリン受容体の番号付けした次の位置：Ｉｌｅ５５、Ｇｌｙ６７、Ａｒｇ６８、Ｖａｌ８９、Ｍｅｔ９０、Ｇｌｙ９８、Ｉｌｅ１２９、Ｓｅｒ１５１、Ｖａｌ１６０、Ｇｌｎ１９４、Ｇｌｙ１９７、Ｌｅｕ２２１、Ｔｙｒ２２７、Ａｒｇ２２９、Ｖａｌ２３０、Ａｌａ２３４、Ａｌａ２８２、Ａｓｐ３２２、Ｐｈｅ３２７、Ａｌａ３３４、及びＰｈｅ３３８の何れかに対応する位置で、変異体受容体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有する請求項５９に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６２】
変異体ＧＰＣＲが変異体アデノシン受容体である請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６３】
変異体アデノシン受容体が、対応する野生型アデノシン受容体と比較した場合、図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした以下の位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５のいずれかに対応する位置で異なったアミノ酸を有している請求項６２に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６４】
変異体アデノシン受容体が、図１０に記載のヒトアデノシンＡ２ａ受容体の番号付けした以下の位置：Ｇｌｙ１１４、Ｇｌｙ１１８、Ｌｅｕ１６７、Ａｌａ１８４、Ａｒｇ１９９、Ａｌａ２０３、Ｌｅｕ２０８、Ｇｌｎ２１０、Ｓｅｒ２１３、Ｇｌｕ２１９、Ａｒｇ２２０、Ｓｅｒ２２３、Ｔｈｒ２２４、Ｇｌｎ２２６、Ｌｙｓ２２７、Ｈｉｓ２３０、Ｌｅｕ２４１、Ｐｒｏ２６０、Ｓｅｒ２６３、Ｌｅｕ２６７、Ｌｅｕ２７２、Ｔｈｒ２７９、Ａｓｎ２８４、Ｇｌｎ３１１、Ｐｒｏ３１３、及びＬｙｓ３１５のいずれかに対応する位置で、前記変異体受容体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有する請求項６２に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６５】
変異体ＧＰＣＲが変異体ニューロテンシン受容体である請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６６】
ニューロテンシン受容体が、対応する野生型ニューロテンシン受容体と比較した場合、図１１に記載のラットニューロテンシン受容体の番号付けした以下の位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９のいずれかに対応する位置で異なったアミノ酸を有している請求項６５に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６７】
変異体ニューロテンシン受容体が、図１１に記載のラットニューロテンシン受容体の番号付けした以下の位置：Ａｌａ６９、Ｌｅｕ７２、Ａｌａ７３、Ａｌａ８６、Ａｌａ９０、Ｓｅｒ１００、Ｈｉｓ１０３、Ｓｅｒ１０８、Ｌｅｕ１０９、Ｌｅｕ１１１、Ａｓｐ１１３、Ｉｌｅ１１６、Ａｌａ１２０、Ａｓｐ１３９、Ｐｈｅ１４７、Ａｌａ１５５、Ｖａｌ１６５、Ｇｌｕ１６６、Ｌｙｓ１７６、Ａｌａ１７７、Ｔｈｒ１７９、Ｍｅｔ１８１、Ｓｅｒ１８２、Ａｒｇ１８３、Ｐｈｅ１８９、Ｌｅｕ２０５、Ｔｈｒ２０７、Ｇｌｙ２０９、Ｇｌｙ２１５、Ｖａｌ２２９、Ｍｅｔ２５０、Ｉｌｅ２５３、Ｌｅｕ２５６、Ｉｌｅ２６０、Ａｓｎ２６２、Ｖａｌ２６８、Ａｓｎ２７０、Ｔｈｒ２７９、Ｍｅｔ２９３、Ｔｈｒ２９４、Ｇｌｙ３０６、Ｌｅｕ３０８、Ｖａｌ３０９、Ｌｅｕ３１０、Ｖａｌ３１３、Ｐｈｅ３４２、Ａｓｐ３４５、Ｔｙｒ３４９、Ｔｙｒ３５１、Ａｌａ３５６、Ｐｈｅ３５８、Ｖａｌ３６０、Ｓｅｒ３６２、Ａｓｎ３７０、Ｓｅｒ３７３、Ｐｈｅ３８０、Ａｌａ３８５、Ｃｙｓ３８６、Ｐｒｏ３８９、Ｇｌｙ３９０、Ｔｒｐ３９１、Ａｒｇ３９２、Ｈｉｓ３９３、Ａｒｇ３９５、Ｌｙｓ３９７、及びＰｒｏ３９９のいずれかに対応する位置で、前記変異体受容体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有する請求項６５に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６８】
変異体ＧＰＣＲが変異体ムスカリン受容体である請求項５３に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項６９】
ムスカリン受容体が、図１７に記載のヒトムスカリン受容体の番号付けした以下の位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３、及びＭｅｔ３８４のいずれかに対応する位置で、対応する野生型ムスカリン受容体と比較して異なるアミノ酸を有する請求項６８に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項７０】
変異体ムスカリン受容体が、図１７に記載のヒトムスカリン受容体の番号付けした以下の位置：Ｌｅｕ６５、Ｍｅｔ１４５、Ｌｅｕ３９９、Ｉｌｅ３８３、及びＭｅｔ３８４のいずれかに対応する位置で、前記受容体変異体がその親受容体と比較して異なるアミノ酸を有する構造モチーフに少なくとも１つの異なるアミノ酸残基を有する、請求項６８に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項７１】
請求項５３から７０の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲをコードするポリヌクレオチド。
【請求項７２】
請求項７１に記載のポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
【請求項７３】
可溶化形態にある請求項５３から７０の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項７４】
他のタンパク質を実質的に含まない、請求項５３から７０の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項７５】
固体担体に固定化された請求項５３から７０、７３又は７４の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲ。
【請求項７６】
請求項５３から７０、７３又は７４の何れか一項に記載の一又は複数の変異体ＧＰＣＲを固定化した固体担体。
【請求項７７】
請求項５３から７０、７３又は７４の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲの結晶化のための使用。
【請求項７８】
請求項５３から７０、７３又は７４の何れか一項に記載の変異体ＧＰＣＲの創薬における使用。
【請求項７９】
変異体ＧＰＣＲがリガンド結合スクリーニング又はアッセイ開発に使用される請求項７８に記載の使用。
【請求項８０】
請求項５３から７０、７３又は７４の何れか一項に記載の変異体受容体等の変異体ＧＰＣＲのバイオセンサーとしての使用。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９Ａ】
【図９Ｂ】
【図１０Ａ】
【図１０Ｂ】
【図１１Ａ】
【図１１Ｂ】
【図１２】
【図１３Ａ】
【図１３Ｂ】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７Ａ】
【図１７Ｂ】
【図１７Ｃ】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８Ａ】
【図２８Ｂ】
【図２９】
【図３０Ａ】
【図３０Ｂ】
【図３０Ｃ】
【図３０Ｄ】
【図３０Ｅ】
【図３０Ｆ】
【図３０Ｇ】
【図３１】
【図３２Ａ】
【図３２Ｂ】
【図３３】
【図３４Ａ】
【図３４Ｂ】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８】
【図３９Ａ】
【図３９Ｂ】
【図３９Ｃ】
【図３９Ｄ】
【図３９Ｅ】
【図３９Ｆ】
【図３９Ｇ】
【図３９Ｈ】
【図３９Ｉ】
【図３９Ｊ】
【図３９Ｋ】
【図３９Ｌ】
【図３９Ｍ】
【図４０】
【図４１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９Ａ】
【図９Ｂ】
【図１０Ａ】
【図１０Ｂ】
【図１１Ａ】
【図１１Ｂ】
【図１２】
【図１３Ａ】
【図１３Ｂ】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７Ａ】
【図１７Ｂ】
【図１７Ｃ】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８Ａ】
【図２８Ｂ】
【図２９】
【図３０Ａ】
【図３０Ｂ】
【図３０Ｃ】
【図３０Ｄ】
【図３０Ｅ】
【図３０Ｆ】
【図３０Ｇ】
【図３１】
【図３２Ａ】
【図３２Ｂ】
【図３３】
【図３４Ａ】
【図３４Ｂ】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８】
【図３９Ａ】
【図３９Ｂ】
【図３９Ｃ】
【図３９Ｄ】
【図３９Ｅ】
【図３９Ｆ】
【図３９Ｇ】
【図３９Ｈ】
【図３９Ｉ】
【図３９Ｊ】
【図３９Ｋ】
【図３９Ｌ】
【図３９Ｍ】
【図４０】
【図４１】
【公表番号】特表２０１１−５０５８００（Ｐ２０１１−５０５８００Ａ）
【公表日】平成２３年３月３日（２０１１．３．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３６５３１（Ｐ２０１０−５３６５３１）
【出願日】平成２０年１２月８日（２００８．１２．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００８／００４０３２
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７１９１４
【国際公開日】平成２１年６月１１日（２００９．６．１１）
【出願人】（５１０１５９７６８）ヘプタレス セラピューティックス リミテッド (3)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年３月３日（２０１１．３．３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１２月８日（２００８．１２．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００８／００４０３２
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７１９１４
【国際公開日】平成２１年６月１１日（２００９．６．１１）
【出願人】（５１０１５９７６８）ヘプタレス セラピューティックス リミテッド (3)
【Ｆターム（参考）】
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