少なくとも免疫グロブリン重鎖の一部および少なくとも免疫グロブリン軽鎖の一部を有する免疫グロブリン複合体と会合した毒素受容体を持つキメラ毒素受容体タンパク質を記載するものである。かかるキメラ毒素受容体タンパク質は、該軽鎖を欠失している該キメラ毒素受容体タンパク質と比較して安定性が改良されている。高い安定性をもった炭疽菌およびボツリヌス菌のキメラ毒素受容体タンパク質を記載する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫グロブリン軽鎖の一部と会合して免疫グロブリン重鎖の一部を含む免疫グロブリン複合体；および
該免疫グロブリン複合体と会合している第一の毒素受容体タンパク質、
を含む、キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項２】
該免疫グロブリン複合体と該第一の毒素受容体タンパク質との該会合が、該免疫グロブリン重鎖の一部と該第一の毒素受容体タンパク質との共有結合である、請求項１記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項３】
該免疫グロブリン複合体と該第一の毒素受容体タンパク質との該会合が、免疫グロブリン軽鎖の一部と該第一の毒素受容体タンパク質との共有結合である、請求項１記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４】
該免疫グロブリン軽鎖と該第一の毒素受容体との間の該共有結合がリンカーを含む、請求項３記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５】
該リンカーが(Ｇｌｙ３Ｓｅｒ)_３アミノ酸配列を含む、請求項４記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６】
該免疫グロブリン重鎖の一部と第二の毒素受容体タンパク質との共有結合をさらに含んでいる、請求項３記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項７】
該第二の毒素受容体タンパク質が、該第一の毒素受容体タンパク質と同じアミノ酸配列を有する、請求項６記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項８】
該免疫グロブリン重鎖が、ＩｇＡ、ＩｇＡ₁、ＩｇＡ₂、ＩｇＧ₁、ＩｇＧ₂、ＩｇＧ₃、ＩｇＧ₄、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭおよびキメラ免疫グロブリン重鎖からなる群から選択されている、請求項１記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項９】
該免疫グロブリン重鎖がＩｇＡ、ＩｇＤまたはＩｇＧ重鎖である、請求項８記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項１０】
免疫グロブリン重鎖の該一部が重鎖定常領域２および３を含む、請求項９記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項１１】
該免疫グロブリン重鎖がＩｇＭまたはＩｇＥ重鎖である、請求項８記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項１２】
該免疫グロブリン重鎖が、重鎖定常領域２、３および４を含む、請求項１１記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項１３】
免疫グロブリン軽鎖の該一部が軽鎖定常ドメインを含む、請求項１記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項１４】
該免疫グロブリン軽鎖がκ鎖またはλ鎖である、請求項１記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項１５】
該キメラ毒素受容体タンパク質がトランスジェニック植物で発現される、請求項１記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項１６】
該トランスジェニック植物が単子葉植物である、請求項１５記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項１７】
該トランスジェニック植物が双子葉植物である、請求項１５記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項１８】
該双子葉植物がタバコ植物である、請求項１７記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項１９】
該免疫グロブリン重鎖、免疫グロブリン軽鎖および第一の毒素受容体タンパク質がヒトタンパク質である、請求項１記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項２０】
該キメラ毒素受容体タンパク質が、植物、脊椎動物または無脊椎動物から得た異種細胞中で発現されている、請求項１のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項２１】
該異種細胞が哺乳動物細胞である、請求項２０記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項２２】
該異種細胞が毛根細胞である、請求項２０記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項２３】
該異種細胞が植物組織培養細胞である、請求項２０記載のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項２４】
請求項１記載の少なくとも２つのキメラ毒素受容体タンパク質を含む、イムノアドヘシン。
【請求項２５】
請求項１記載のキメラ毒素受容体タンパク質およびJ鎖を含む、イムノアドヘシン。
【請求項２６】
請求項１のキメラ毒素受容体タンパク質、J鎖および分泌成分を含む、イムノアドヘシン。
【請求項２７】
該キメラ毒素受容体タンパク質が植物特異的グリコシル化を有する、請求項１のキメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項２８】
請求項１のキメラ毒素受容体タンパク質および植物材料を含む、組成物。
【請求項２９】
病原体抗原の宿主細胞への結合を低下させる方法であって、該抗原を請求項１のキメラ毒素受容体タンパク質と接触させること、ここで該キメラ毒素受容体タンパク質が該抗原に結合して、該病原体抗原の該宿主細胞への該結合を低下させること、
を含む方法。
【請求項３０】
死亡率および病原体の罹患率を低下させるための方法であって、該病原体の抗原と請求項１のキメラ毒素受容体タンパク質とを接触させること、ここで該キメラ毒素受容体タンパク質が該抗原に結合し、該病原体抗原の該宿主細胞への該結合を低下させ、これにより該死亡率および病原体の罹患率を低下させること、を含む方法。
【請求項３１】
ヒト対象において毒素を理由とする死亡率および罹患率を低下するための方法であって、有効量の請求項１のキメラ毒素受容体タンパク質を該対象に投与すること、ここで該キメラ毒素受容体タンパク質が該毒素に結合し、これにより毒性活性を低下させる、を含む方法。
【請求項３２】
請求項１のキメラ毒素受容体タンパク質および医薬的に許容し得る担体を含む、医薬組成物。
【請求項３３】
（ａ）免疫グロブリン重鎖の一部をコードしている第一のヌクレオチド配列；
（ｂ）免疫グロブリン軽鎖の一部をコードしている第二のヌクレオチド配列；および
（ｃ）第一の毒素受容体タンパク質をコードしている第三のヌクレオチド配列、
ここで、細胞性宿主における発現に際して、該免疫グロブリン重鎖、該免疫グロブリン軽鎖および該第一の毒素受容体タンパク質がキメラ毒素受容体タンパク質を形成する、
を含む、発現ベクター系。
【請求項３４】
キメラ毒素受容体タンパク質の産生方法であって、
（ａ）一緒になると、免疫グロブリン軽鎖の一部と会合した免疫グロブリン重鎖の一部を含む免疫グロブリン複合体；および該免疫グロブリン複合体と会合している第一の毒素受容体タンパク質を発現する、１以上の発現ベクターを提供すること、
（ｂ）１以上の該発現ベクターを細胞宿主に導入すること;そして
（ｃ）該免疫グロブリン複合体および該第一の毒素受容体タンパク質を発現して、キメラ毒素受容体タンパク質を形成すること、
を含む、方法。
【請求項３５】
少なくとも免疫グロブリン重鎖の一部を含む免疫グロブリン複合体；および、該免疫グロブリン複合体と会合している第一の炭疽菌毒素受容体タンパク質を含む、キメラ炭疽菌毒素受容体タンパク質。
【請求項３６】
免疫グロブリン複合体と該第一の毒素受容体タンパク質との該会合が、該免疫グロブリン重鎖の一部と該第一の毒素受容体タンパク質との共有結合である、請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項３７】
該第一炭疽菌毒素受容体タンパク質が、フォンビルブランド因子タイプＡ/インテグリン挿入(ＶＷ／Ｉ)ドメインを含む、請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項３８】
該第一の炭疽菌毒素受容体タンパク質が受容体の細胞外ドメインを含む、請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項３９】
該第一の炭疽菌毒素受容体が、腫瘍内皮マーカー８(ＴＥＭ８）および毛細血管形態形成タンパク質２(ＣＭＧ２)からなる群から選択される、請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４０】
該第一の炭疽菌毒素受容体がＴＥＭ８である、請求項３９記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４１】
該第一の炭疽菌毒素受容体がＣＭＧ２である、請求項３９記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４２】
該第一の炭疽菌毒素受容体タンパク質がプロテアーゼ感受性アミノ酸配列を欠失している、請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４３】
該第一の炭疽菌毒素受容体タンパク質がＣＭＧ２であり、アミノ酸残基ＴＥＩＬＥＬＱＰＳＳＶＣＶＧを欠失している、請求項４２記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４４】
該免疫グロブリン重鎖が、ＩｇＡ、ＩｇＡ₁、ＩｇＡ₂、ＩｇＧ₁、ＩｇＧ₂、ＩｇＧ₃、ＩｇＧ₄、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭおよびキメラ免疫グロブリン重鎖からなる群から選択される、請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４５】
該免疫グロブリン重鎖がＩｇＡ、ＩｇＤまたはＩｇＧ重鎖である、請求項４４記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４６】
該免疫グロブリン重鎖の該一部が重鎖定常領域２および３を含む、請求項４５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４７】
該免疫グロブリン重鎖の該一部が、重鎖定常領域１、２および３を含む、請求項４５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４８】
該免疫グロブリン重鎖ポリペプチドがＩｇＭまたはＩｇＥ重鎖である、請求項４４記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項４９】
該第一の炭疽菌毒素受容体タンパク質と少なくとも免疫グロブリン重鎖の一部との間の該共有結合が免疫グロブリンのヒンジを含む、請求項３６記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５０】
該第一の炭疽菌毒素受容体タンパク質と少なくとも免疫グロブリン重鎖の一部との間の該共有結合がリンカーを含む、請求項３６記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５１】
該リンカーが(Ｇｌｙ３Ｓｅｒ)_３アミノ酸配列を含む、請求項５０記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５２】
該第一の炭疽菌毒素受容体タンパク質がＣＭＧ２のＶＷＡ／Ｉドメインを含んでおり、免疫グロブリン重鎖の該一部が重鎖定常領域１、２および３を含んでおり、該共有結合がリンカーを含んでいる、請求項３６記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５３】
該炭疽菌毒素受容体タンパク質がＣＭＧ２のＶＷＡ／Ｉドメインを含んでおり、該免疫グロブリン重鎖の該一部が重鎖定常領域２および３を含んでおり、該共有結合がリンカーおよび免疫グロブリンヒンジを含んでいる、請求項３６記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５４】
該炭疽菌毒素受容体タンパク質がＣＭＧ２のＶＷＡ／Ｉドメインを含んでおり、該免疫グロブリン重鎖の該一部が重鎖定常領域２および３を含んでおり、該共有結合が免疫グロブリンヒンジを含んでいる、請求項３６の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５５】
該炭疽菌毒素受容体タンパク質がＣＭＧ２のＶＷＡ／Ｉドメインを含んでおり、該免疫グロブリン重鎖の該一部が重鎖定常領域１、２および３を含んでおり、該共有結合がリンカーを含んでいる、請求項３６記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５６】
該炭疽菌毒素受容体タンパク質がＣＭＧ２のＶＷＡ／Ｉドメインを含んでおり、該免疫グロブリン重鎖の該一部が重鎖定常領域２および３を含んでおり、該共有結合が免疫グロブリンヒンジおよびリンカーを含んでいる、請求項３６記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５７】
キメラ炭疽菌毒素受容体タンパク質が該炭疽菌毒素受容体タンパク質の細胞外ドメインのいずれか一部を含んでおり；そして該免疫グロブリン重鎖が少なくともＩｇＡ₂重鎖の一部を含んでいる、請求項３６の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５８】
免疫グロブリン複合体が免疫グロブリン軽鎖をさらに含んでおり、ここで該免疫グロブリン軽鎖が該免疫グロブリン重鎖と会合している、請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項５９】
該免疫グロブリン複合体と該第一の毒素受容体タンパク質との間の該会合が免疫グロブリン軽鎖の一部と該第一の毒素受容体タンパク質との共有結合である、請求項５８記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６０】
該免疫グロブリン軽鎖と該第一の毒素受容体との間の該共有結合がリンカーを含む、請求項５９記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６１】
該リンカーが、(Ｇｌｙ３Ｓｅｒ)_３アミノ酸配列を含む、請求項６０記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６２】
該免疫グロブリン重鎖の一部と第二の毒素受容体タンパク質との共有結合をさらに含んでいる、請求項５８記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６３】
該第二の毒素受容体タンパク質が、第一の毒素受容体タンパク質と同じアミノ酸配列を有する、請求項６２記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６４】
該炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質が、トランスジェニック植物内で発現される、請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６５】
該トランスジェニック植物が単子葉植物である、請求項６４記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６６】
該トランスジェニック植物が双子葉植物である、請求項６４記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６７】
該双子葉植物がタバコ植物である、請求項６６記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６８】
該免疫グロブリン重鎖および第一の炭疽菌毒素受容体タンパク質がヒトタンパク質である、請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項６９】
該炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質が、植物、脊椎動物または無脊椎動物から得た異種細胞で発現される、請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項７０】
該異種細胞が哺乳動物細胞である、請求項６９記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項７１】
該異種細胞が毛根細胞である、請求項６９記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項７２】
該異種細胞が植物組織培養細胞である、請求項６９記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項７３】
請求項３５記載の少なくとも２つの炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質を含む、イムノアドヘシン。
【請求項７４】
請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質およびJ鎖を含む、イムノアドヘシン。
【請求項７５】
請求項３５記載の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質、J鎖および分泌成分を含む、イムノアドヘシン。
【請求項７６】
該炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質が、植物特異的グリコシル化を有する、請求項３５の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質。
【請求項７７】
請求項３５の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質および植物材料を含む組成物。
【請求項７８】
宿主細胞へのバシラス・アンスラシスの保護抗原(ＰＡ)の結合を低下させる方法であって、ＰＡと請求項３５の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質とを接触すること、ここで該炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質がＰＡと結合して、ＰＡの該宿主細胞への該結合を低下させる、を含む方法。
【請求項７９】
炭疽菌感染を理由とする死亡率および罹患率を低下するための方法であって、保護抗原と請求項３５の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質とを接触させること、ここで該炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質がＰＡと結合し、該宿主細胞へのＰＡの結合を低下させ、これによって炭疽菌の死亡率および罹患率を低下させる、を含む方法。
【請求項８０】
ヒト対象において炭疽菌毒を理由とする死亡率および罹患率を低下するための方法であって、該対象に有効量の請求項３５の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質を投与すること、ここで該炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質が保護抗原に結合して、これにより毒性活性を低下させる、を含む方法。
【請求項８１】
請求項３５の炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質および医薬的に許容し得る担体を含む、医薬組成物。
【請求項８２】
（ａ）免疫グロブリン重鎖の一部をコードしている第一のヌクレオチド配列；および
（ｂ）第一の炭疽菌毒素受容体タンパク質をコードしている第二のヌクレオチド配列、
ここで、細胞性宿主中での発現に際し、免疫グロブリン重鎖の該一部および該第一炭疽菌毒素受容体タンパク質が炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質を形成する、
を含む発現ベクター系。
【請求項８３】
炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質を生成するための方法であって、
（ａ）一緒になると、免疫グロブリン重鎖の一部を含んでいる免疫グロブリン複合体、および該免疫グロブリン複合体と会合している第一の炭疽菌毒素受容体タンパク質を発現する、１以上の発現ベクターを提供すること；
（ｂ）１以上の該発現ベクターを細胞性宿主に導入すること；および
（ｃ）該免疫グロブリン複合体および該第一炭疽菌毒素受容体タンパク質を発現して、炭疽菌キメラ毒素受容体タンパク質を形成すること、を含む方法。
【請求項８４】
少なくとも免疫グロブリン重鎖の一部を含む免疫グロブリン複合体；および
該免疫グロブリン複合体と会合している該第一ボツリヌス菌毒素受容体タンパク質；を含む、キメラボツリヌス菌毒素受容体タンパク質。

【図１】

【図２−１】

【図２−２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７−１】

【図７−２】

【図７−３】

【図７−４】

【図７−５】

【図７−６】

【図７−７】

【図７−８】

【図７−９】

【図７−１０】

【図７−１１】

【図７−１２】

【図７−１３】

【図７−１４】

【図７−１５】

【図７−１６】

【図７−１７】

【図７−１８】

【図７−１９】

【図７−２０】

【図７−２１】

【図７−２２】

【図７−２３】

【図７−２４】

【図７−２５】

【図７−２６】

【図７−２７】

【図７−２８】

【図７−２９】

【図７−３０】

【図７−３１】

【図７−３２】

【図７−３３】

【図７−３４】

【図７−３５】

【図７−３６】

【図７−３７】

【図７−３８】

【図８−１】

【図８−２】

【図８−３】

【図８−４】

【図８−５】

【図８−６】

【図８−７】

【図８−８】

【図８−９】

【図８−１０】

【図８−１１】

【図８−１２】

【図８−１３】

【図８−１４】

【図８−１５】

【図８−１６】

【図８−１７】

【図９−１】

【図９−２】

【図９−３】

【図９−４】

【図９−５】

【図９−６】

【図９−７】

【図９−８】

【図１０−１】

【図１０−２】

【図１０−３】

【図１０−４】

【図１１−１】

【図１１−２】

【図１１−３】

【図１１−４】

【図１１−５】

【図１１−６】

【図１１−７】

【図１１−８】

【図１２−１】

【図１２−２】

【図１２−３】

【図１２−４】

【図１２−５】

【図１２−６】

【図１２−７】

【図１２−８】

【図１２−９】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【公表番号】特表２００９−５０２２０５（Ｐ２００９−５０２２０５Ａ）
【公表日】平成２１年１月２９日（２００９．１．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５２５１９３（Ｐ２００８−５２５１９３）
【出願日】平成１８年８月２日（２００６．８．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０３０３２５
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０４４１１５
【国際公開日】平成１９年４月１９日（２００７．４．１９）
【出願人】（５０２３８７９１３）プラネット・バイオテクノロジー・インコーポレイテッド (2)
【氏名又は名称原語表記】ＰＬＡＮＥＴ　ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ，　ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】