特異的ウイルス標的用化合物
本発明は、式（Ｉ）：Ｂ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍを有する化合物に関し、ここで、Ｂは、標的を認識し、及び結合するための結合要素であり；Ｒ１は、当該標的と共有結合を形成するように当該標的の官能基と反応するための原子の第１基であり；Ｒ２は原子の第２基であり；Ｒ１及びＲ２は、Ｒ２−Ｍを遊離とするように、Ｒ１と当該標的との間の共有結合の形成がＲ１とＲ２との間の結合の開裂を生じさせるためのものであり；そしてＭは、水素原子、及び医薬として許容される成分からなる群より選択される。あるいは、Ｒ１とＲ２は、式（ＩＩ）：Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍを形成するために反転させられ得、そしてＲ１と標的との間の共有結合の形成は、Ｒ１とＲ２との間の結合の開裂を生じさせ、Ｒ２−Ｂを遊離させる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本出願は、特異的なウイルス標的のための化合物、及びそれらの関連組成物及び方法に関し、そしてより特異的に、ウイルス侵入阻害剤及び抗融合化合物（ａｎｔｉ−ｆｕｓｉｏｇｅｎｉｃ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
多くの治療分野において、治療戦略は、それらの特異的なウイルス標的に可逆的に結合する阻害剤又はリガンドに基づく。これらの阻害剤及びリガンドは、特異的標的と結合する形式とそれらの遊離型の形式との間で交互に入れ替わる。遊離型のとき、それらは、治療効果の損失を引き起こす酵素分解及び／又は素早い腎臓排出に供され得る。それらの治療効果を持続するために、それらの特異的ウイルス標的に共有結合する及び不可逆的に結合する阻害剤又はリガンドの必要性がある。
【発明の開示】
【０００３】
本発明の概要
本発明に関して、以下の式（Ｉ）：
Ｂ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍ （Ｉ）
｛式中：
−Ｂは、標的を認識し、かつ、結合するための結合要素であり;
−Ｒ１は、当該標的と共有結合を形成するように当該標的の官能基と反応するための原子の第１基であり；
−Ｒ２は原子の第２基であり；ここで、Ｒ１及びＲ２は、Ｒ１と当該標的との間の共有結合の形成がＲ１とＲ２との間の結合の開裂を生じさせて、Ｒ２−Ｍを遊離させる；そして
−Ｍは、水素原子及び医薬として許容される成分からなる群より選択される。｝を有する化合物を提供する。
【０００４】
本発明出願に関して、以下の式（ＩＩ）：
Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍ （ＩＩ）
｛式中、
−Ｂは、標的を認識し、かつ、結合するための結合要素であり;
−Ｒ１は、当該標的と共有結合を形成するように、当該標的の官能基と反応するための原子の第１基であり；
−Ｒ２は原子の第２基であり；ここで、Ｒ１及びＲ２は、Ｒ１と当該標的との間の共有結合の形成がＲ１とＲ２との間の結合の開裂を生じさせて、Ｂ−Ｒ２を遊離させる、；そして
−Ｍは、医薬として許容される成分である。｝
を有する化合物も提供する。
【０００５】
この化合物の成分は、増量剤を含み、好ましくは、薬物又は治療薬、蛋白質、分子、粒子、ポリマー、リポソーム、及び細胞、より好ましくは、血清蛋白質（内因性の、組み換え型又はゲノムの）からなる群より選択され、及びさらにより好ましくは、当該かさ高は血清アルブミンである。
【０００６】
本発明の好ましい態様において、当該Ｒ１は、以下の式（ＩＩＩ）：
Ｘ−Ｃ（Ｙ） （ＩＩＩ）
｛式中、
Ｘは存在しないか、又はアルキル基、及び置換又は非置換フェニル基からなる群より選択され、；そして
Ｙは、硫黄、酸素、リン、及び窒素からなる群より、好ましくは硫黄、及び酸素からなる群より選択される。｝におけるものである。
【０００７】
例として、Ｙが酸素のとき、Ｃ（Ｙ）はカルボニルである。
【０００８】
本発明において、置換フェニル基は、好ましくは、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３の如き少なくとも１つの置換基を担持するフェニル基である。
【０００９】
本発明の好ましい態様において、Ｒ２は、酸素、アセタール、ヘミアセタール、ホスホアセタール、硫黄、アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアミノ誘導体、置換又は非置換のいずれかのフェノキシ、チオフェノキシ、及びアミノフェノキシ誘導体からなる群より選択される。本発明において、置換フェノキシ、チオフェノキシ、又はアミノフェノキシは、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３の如き少なくとも１つの置換基を有するフェニル基を含む。
【００１０】
本発明の他の態様において、Ｒ１Ｒ２は、アルキルエステル、アリールエステル、アルキルチオエステル、アリールチオエステル、ホスホエステル、オルトエステル、イミデート、混合無水物、ジスルフィド、アミド、及びチオアミンからなる群より選択される反応性官能基を含む。当該反応基は、上記のような置換又は非置換フェニル基の如き芳香族部分をも非制限的に含み得る。好ましくは、Ｒ１Ｒ２により形成される当該反応性官能基は、水性環境において安定である。
【００１１】
本発明のある態様において、当該結合要素は、有機化合物、アミノ酸配列、ペプチド、蛋白質、核酸配列、小分子、それらの模倣剤、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される。
【００１２】
本発明のある態様において、当該ウイルス標的は、ウイルス、ウイルス抗原、感染細胞上の受容体、ウイルス性ペプチド、感染細胞、感染細胞の表面に発現されたウイルス蛋白質、それらの断片又はそれらの特異的領域からなる群より選択される。
【００１３】
本発明の好ましい態様において、当該ウイルスは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−１及び２）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エボラウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、エプスタインバーウイルス、肝炎ウイルス、ＨＴＬＶ−１及び２、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）、はしかウイルス（ＭｅＶ）、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、及びダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルスからなる群より選択される。この態様において、当該結合要素は、非制限的に、当該ウイルスのｇｐ４１糖蛋白質の領域又はそれらの類似部分及び相当部分に対する結合親和力を有する結合要素となり得る。
【００１４】
本発明のさらに好ましい態様において、当該結合要素は、配列番号１〜１９からなる群より選択されるアミノ酸配列を有し、当該ウイルスはＨＩＶである。
【００１５】
本発明の他の態様において、当該成分は、治療薬を含む。この治療薬は、薬物蛋白質分解酵素阻害剤、抗増殖剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド、抗ウイルス剤、ウイルス侵入阻害剤、及び抗融合剤（ａｎｔｉ−ｆｕｓｉｏｇｅｎｉｃ ａｇｅｎｔ）からなる群より選択され得る。
【００１６】
本発明に関して、当該化合物がＢ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍの構造であるとき、ＢとＲ１との間にリンカーＬ１をさらに含む本発明の化合物をも提供する。さらに又はあるいは、リンカーＬ２は、Ｒ２とＭとの間に存在し得る。
【００１７】
本発明に関して、当該化合物がＢ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍの構造であるとき、ＢとＲ２との間にリンカーＬ２をさらに含む本発明の化合物をも提供する。さらに又はあるいは、リンカーＬ１は、Ｒ１とＭとの間に存在し得る。通常は、当該リンカーは約１〜２０原子の長さであって、当該原子は炭素、窒素、酸素、硫黄、及びリンなどとなり得る。当該リンカーは、一般的に約２〜１６炭素原子、より一般的には約１〜２５炭素原子のアルキレン基；当該アルキレン基が２〜３原子のものであり、約１〜８ユニット、及び好ましくは約１〜６ユニットを有するだろうポリアルキレン基；アルファ及びオメガアミノ酸を含むアミノ酸、又は約１〜８アミノ酸、及び好ましくは約１〜６アミノ酸を有するオリゴヌクレオチドであって、ここで当該アミノ酸が、極性又は非極性、荷電又は非荷電、脂肪族、脂環式、芳香族又は複素環式芳香族、天然素材又は合成、右旋性（Ｄ）又は左旋性（Ｌ）となり得る。本発明において、好ましいことには、当該リンカーは、−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−の式を有し、ここでｎは１〜２５範囲の整数であり、より好ましくは当該リンカーは、−ＮＨ−（ＣＨ２）５−Ｃ（Ｏ）−と−ＮＨ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−から選択される。
【００１８】
本発明に関して、対象に本発明の化合物を、単独で又は医薬として許容される担体と共に投与することを含む、当該対象におけるウイルス標的の活性を調節するための方法であって；当該結合要素が、ウイルス標的の活性に関する当該ウイルス標的の領域に対する結合親和力を有し、それによって、当該標的の領域への化合物の結合は、当該標的の活性の妨害又は低下をもたらす前記方法を提供する。
【００１９】
本発明に関して、医薬として許容される担体とともに本発明の化合物を含む、対象におけるウイルス標的の活性を調節するための抗ウイルス性組成物であって；当該結合要素が、ウイルスの細胞感染の細胞膜融合過程の活性に関する当該ウイルス標的の領域に対する結合親和力を有し、それによって、当該標的の領域への化合物の結合は、当該標的の活性の妨害又は低下をもたらす当該抗ウイルス性組成物をも提供する。
【００２０】
本明細書中の当該活性の調整は、好ましくは、非制限的に、当該活性の妨害又は低下である。
【００２１】
本明細書中のある態様において、当該活性は、ウイルスの細胞感染の膜融合過程の活性である。
【００２２】
本明細書に関して、対象の抗ウイルス治療において使用される薬物の製造のための化合物の使用をさらに提供する。さらに特に、抗ウイルス薬治療を必要とする対象は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−１及び２）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エボラウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、エプスタインバーウイルス、肝炎ウイルス、ＨＴＬＶ−１及び２、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）、はしかウイルス（ＭｅＶ）、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、及びダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルスからなる群より選択されるウイルスにより感染している。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
本発明の詳細な説明
本発明の完全な理解を確実にするために、当該記載において使用される用語の定義を最初に提供する。
【００２４】
結合要素：当該結合要素は、ウイルス標的上の相補的領域に対する特異的結合親和力を有する領域を含み、そして有機化合物、アミノ酸配列、ペプチド、蛋白質、ホルモン、抗体、抗原、核酸配列、上記の模倣薬又は組合せとして具体化され得る。
【００２５】
ウイルス標的：ウイルス標的は、当該活性を調節することが望ましい実体又は調節することが望ましい活性を提供するために他の実体と相互作用する実体である。当該ウイルス標的は、非制限的に、ウイルス、感染細胞の表面上に発現されたウイルス抗原、ウイルス又は感染細胞上の表面受容体のウイルス性抗原に特異的なリガンド、感染細胞表面受容体、ペプチド、感染細胞又はそれらの細胞膜、ｇｐ４１の如き、感染細胞の表面に発現されたウイルス蛋白質、それらの断片又はそれらの特異的領域（すなわち、Ｎ−７反復又はＣ−７反復）となり得る。
【００２６】
官能基：官能基は、当該ウイルス標的の潜在的な反応部位を表す原子の基である。官能基は、非制限的に、カルボキシ、アミノ、チオール、及びヒドロキシル基を含む。アミノ基が好まれ、そして、リジン、アルギニン、アスパラギン又はグルタミン残基、あるいはペプチド又は蛋白質の遊離のＮ末端により提供され得る。
【００２７】
リンカー：リンカーは、場合により、当該結合要素と当該反応基との間、及び／又は当該反応基と当該成分との間に使用される。当該リンカーの長さは、親和力を有することにより当該結合要素が当該ウイルス標的の領域に結合するのを可能とするために、及び当該反応基が当該ウイルス標的の官能基と反応し、そして共有結合を形成するのを同時に可能とするために変化し得る。活性分析、及び結合競合分析法は、当該リンカーの適切な長さを決定するために有用である。
【００２８】
医薬として許容される成分：医薬として許容される成分とは、生体内への投与について対象への使用が許容されるだろう成分を意図する。そのような成分は、水素原子となり得、又は治療薬、プロドラッグ及び／又は増量剤を含み得る。当該増量剤は、天然素材（内因性）あるいは合成、ゲノム又は組み換え源のものであり、例えば血清蛋白質、より好ましくは、血清アルブミンとなり得る。当該成分は、当該増量剤と共有結合する結合基をも含み得る。当該結合基は、もし立体障害を避けるように望まれるならば、当該反応基、及び当該結合要素から当該増量剤の距離を置くための連結基も含み得る。本発明に好適な治療薬の例は、ペプチド、小分子、薬物、アンチセンスオリゴヌクレオチド、抗ウイルス剤、ウイルス侵入阻害剤、及び抗融合体剤から非制限的に選択される。
【００２９】
結合（Ｂｉｎｄ）について：結合が、２つの分子間、２つのアミノ酸配列間、２つの核酸配列間などの電子引力、疎水性引力、静電気引力又はファンデルワールス引力に関することは、本発明の目的として意図される。そのような引力の強さは、通常、結合親和力と呼ばれる。結合は、結合状態と非結合状態との間の可逆的相互作用である。本発明に関して、そのような結合は、当該結合要素と当該ウイルス標的との間に生じる。
【００３０】
結合（Ｂｏｎｄ）について：結合が、２分子間の共有結合を形成するために化学反応及び転位に関することは、本発明の目的として意図される。結合は、不可逆的相互作用である。本発明に関して、そのような結合は、当該反応基（Ｒ１）と当該ウイルス標的との間に生じる。
【００３１】
当該ウイルス標的の活性：当該ウイルス標的の活性は、当該ウイルス標的の固有活性の内の１つを含む。例えば、それは、ウイルス又はウイルス感染細胞の細胞感染の間に関する過程（すなわち、膜融合過程）となり得る。
【００３２】
医薬として許容される担体：医薬として許容される担体は、錠剤、ゲルカプセル、水溶液などの形式をとり得、当該対象により許容され得る純度、及び／又は浸透圧を有する。
【００３３】
対象：対象は、哺乳類又は人間である。
【００３４】
ｇｐ４１糖蛋白質、及びｇｐ４１糖蛋白質類似体：ｇｐ４１糖蛋白質は、ＨＩＶ、ＳＩＶ、ＲＳＶ、ＨＰＶ（ＨＰＩＶ）及びＭｅＶの如きウイルスの侵入過程又は細胞感染過程の膜融合過程に関する蛋白質である。開示され、請求されるようなｇｐ４１糖蛋白質は、それらの切断体、欠失体、及び／又は挿入体を含む。欠失体は、当該ｇｐ４１糖蛋白質からの１又は複数のアミノ酸残基の除去からなり、及びアミノ酸配列の単一連続部分又は複数部分の除去に関し得る。挿入体は、単一アミノ酸残基又は多くの残基を含み、そして当該配列のカルボキシ又はアミノ末端で、又は当該配列内の位置で作られ得る。
【００３５】
ｇｐ４１糖蛋白質類似体は、当該ｇｐ４１糖蛋白質領域に相当するＨＩＶ以外のウイルスのペプチド領域を含む蛋白質であり、並びに、それらの切断体、欠失体、及び／又は挿入体も同様である。
【００３６】
本発明に関して標的とされたｇｐ４１のより特異的な領域は、当該Ｎ−７反復又はＣ−７反復である。
【００３７】
断片：断片はペプチド、ＤＮＡ又は分子の全長配列の一部であって、本発明を達成するための役割を果たすために、完全ペプチド、ＤＮＡ又は分子の特徴のいくつかを保持する。それ故、開示される当該断片は当該ウイルス標的に結合可能であることを意図する。
【００３８】
プロドラッグ：プロドラッグは、酵素的に又は化学的に、生体内の化学的、及び／又は構造的修飾を被る化合物であって、抗ウイルス活性の如き、当初化合物の活性と異なる、分子に対する活性を授与するような化合物である。
【００３９】
本発明の詳細な説明及び好ましい態様
本発明は、式（Ｉ）：Ｂ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍ、又は式（ＩＩ）Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍを有する化合物に関する。
【００４０】
Ｂは、前記のようなウイルス標的についての結合親和力を有する結合要素である。本発明に関して、当該結合要素は、所望のウイルス標的に認識し、そして結合することが可能である。そのような結合要素、及びウイルス標的は、本分野において既に知られたものとなり得る。あるいは、既知の特異的ウイルス標的に対する結合要素が、国際特許公開第ＷＯ９９／２４０７５号に開示されたスクリーニング方法により決定され得、その内容全体を本明細書中に援用する。
【００４１】
Ｒ１は、前記のようなウイルス標的と共有結合を形成するように当該ウイルス標的の官能基と反応可能とする第１反応基である。本発明の好ましい態様において、Ｒ１は、以下の式（ＩＩＩ）：
Ｘ−Ｃ（Ｙ） （ＩＩＩ）
｛式中、
Ｘは存在しないか、又は脂肪族アルキル基、及び環状アルキル基からなる群より選択され、
Ｙは、硫黄原子、酸素原子、リン、及び窒素原子からなる群より、好ましくは、硫黄原子、及び酸素原子からなる群より選択される。｝を有するものである。
【００４２】
Ｒ２は、酸素、アセタール、ヘミアセタール、ホスホアセタール、硫黄、アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアミノ誘導体、前記のような置換又は非置換フェノキシのいずれか、チオフェノキシ、アミノフェノキシ誘導体、及び置換又は非置換のフェニル基からなる群より好ましくは選択される。本発明において、置換されたフェニル基は、好ましくは、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３の如き置換基を有するフェニル基である。本発明において、置換フェニル基は、好ましくは、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３の如き置換基を有するフェニル基である。
【００４３】
本発明の他の態様において、Ｒ１Ｒ２は、アルキルエステル、アリールエステル、アルキルチオエステル、アリールチオエステル、ホスホエステル、オルトエステル、イミデート、混合無水物、ジスルフィド、アミド、及びチオアミンから選択される反応官能基を含む。当該反応基は、非制限的に、上記のような置換又は非置換フェニル基の如き芳香族部分をも含む。好ましくは、Ｒ１Ｒ２により形成される当該反応官能基は、水性環境において安定である。
【００４４】
しかしながら、他の反応基、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ１Ｒ２の組み合わせが本発明の目的に適していることを当業者は容易に認識するであろうことが理解される。
【００４５】
Ｍは、水素原子、及び上記のような医薬として許容される成分からなる群より選択される。
【００４６】
あるいは、本発明の化合物は、ＢとＲ１との間のリンカーＬ１、及び／又はＲ２とＭとの間のリンカーＬ２を含み得る。当該リンカーの目的は、当該結合要素が当該ウイルス標的に既に結合されるとき、当該ウイルス標的と共有結合を形成するように、当該反応基が当該ウイルス標的の適合官能基と結合することを可能とするために、当該化合物の因子と一定の間隔をあけるためのものである。さらに、式Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍの化合物において、当該成分が増量剤を含むとき、ＭとＲ１との間のリンカーは、ウイルス標的への反応基の共有結合及び／又は結合要素とウイルス標的との間の結合相互作用を伴って立体障害を妨害する。
【００４７】
「適合官能基」を用いて、当該反応基と反応し、そしてそれと共有結合を形成し得る官能基が意図される。多くのリンカーは商業的に入手可能又は合成可能であり、そして本発明のリンカーは、特定のものに制限されない。使用に適したリンカーを決定するために、様々な長さ及びフレキシビリティを有する異なるリンカーを分析した。
【００４８】
当該結合要素「Ｂ」は、以下の：５−へリックス、ＮＣＣＧ−ｇｐ４１、Ｎ３６ Ｍｕｔ（例えば）、ＤＰ−１０７、Ｔ−２１、Ｎ３６、エンフュービルタイド（ｅｎｆｕｖｉｒｔｉｄｅ）、Ｔ−２０、Ｆｕｓｅｏｎ、ＤＰ−１７８、ペンタフシド、Ｔ−１２４９、ＡＤＳ−Ｊ１、ＳＣ３４ＥＫ、ＩＱＮ１７、Ｄ１０−ＰＸ−２Ｋ、ＩＱＮ２３、Ｃ１４ｌｉｎｋｍｉｄ、Ｃ３４コイル、（Ｃｙｓ）Ｃ３４−ＧＣＮ４（Ｃｙｓ）ＧＣＮ４、Ｔ−６４９、Ｃ１４、ＳＪ−２１７６、ｓｃＣ３４、ｓＣ３４、Ｃ３４、ｐ３８、ｐ２６、シアマイシン（ｓｉａｍｙｃｉｎ）Ｉ及びＩＩ、ＡＤＳ−Ｊ２、ＡＤＳ−Ｊ１、Ｎ−３６−Ｅ、Ｓ−２９−Ｉ、ＳＰＣ−３、ＣＬＩＶ、ＡＭＤ−０７０、ＫＲＨ−１６３６、ＫＲＨ−１１２０、ＣＸＣＲ４阻害剤又はアンタゴニスト、Ｔ−１３４、Ｔ−１４０、ＡＭＤ−８６６４、ＨＩＶ−１、Ｔａｔ類似体、ＡＬＸ４０−４Ｃ、ＡＭＤ−３１００、Ｔ−２２、５，１２−Ｔｙｒ ７−Ｌｙｓポリフェムシン（ｐｏｌｙｐｈｅｍｕｓｉｎ）ＩＩ、ＴＪＮ−１５１、バイカリン、ＡＭ−１４０１、ＮＳＣ−６５１、コノカルボン（Ｃｏｎｏｃｕｒｖｏｎｅ）、ＤＡＰＴＡ、Ｄ−Ａｌａ１ ペプチド Ｔ−アミン、ＳＣＨ−Ｃ、ＳＣＨ−Ｄ、ＴＡＫ−２２０、ＳＣＨ−３５０、ＣＣＲ５アンタゴニスト、ペプチドＴ、ＵＣＢ−３５、ＥＧＣＧ、エピガロカテキンガレート、Ｃａｒｒａｇｕａｒｄ、ラムダ−カラギーナン、硫酸カードラン、ＯＫＵ−４０、ＯＫＵ−４１、Ｚｉｎｔｅｖｉｒ、コサレイン（ｃｏｓａｌａｎｅ）類似体、デキストリン−２−スルフェイト、Ｓｃｙｌｌａｔｏｘｉｎ類似体、ＣＤＲ２様ループ、ＨＩＶ ｐ７阻害剤、マイケルアミン（ｍｉｃｈｅｌｌａｍｉｎｅ）Ａ，Ｂ及びＦを非制限的に含む。
【００４９】
本発明の第１の好ましい態様の記載
第１の好ましい態様において、当該反応基は、Ｒ１−Ｒ２であって、そして以下の式：Ｂ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍ（Ｉ）のような化合物の式において配向される。この場合、当該ＭはＲ２と共に放出され、そして当該結合要素ＢはＲ１の結合を介してウイルス標的に共有結合したままとなる。当該結合要素の本質は、ウイルス標的の少なくとも１つの特異的活性を調節するためのものである。この態様の例を以下に提供する。
【００５０】
第１の好ましい態様の適用は、ウイルス感染を遮断、低下又は妨害するために見出される。そのような場合に、当該ウイルス標的はウイルスであり、そして当該結合要素は、そのウイルスに対する、例えば、ｇｐ４１に対する結合親和性領域を有する。ｇｐ４１関連ウイルスのための結合要素及びそれらの類似体の例は、下記の表１に示される。そのような領域を結合すること、及び化合物の反応基を用いてそのような領域と共有結合したままでいることにより、ウイルス侵入過程及び膜融合過程は妨害され、そしてＨＩＶ感染は恒久的に阻害される。これは、固有の解離定数（Ｋｄ）に従ってそれらの結合領域から分離する非共有結合要素と異なる。それらは、酵素的分解、及び腎臓を介する血しょうクリアランスに供される。それらの抗ウイルス活性は、変化するウイルス活性によるウイルス抵抗性の発生、並びに化合物に生体内濃縮の変動に少なくとも部分的に起因して時間とともに衰える。これらの結合要素は、侵入、さらに具体的に言うと、非感染細胞へのＨＩＶの浸透に関与する、細胞膜融合過程に関するｇｐ４１糖蛋白質の領域に結合するために選択的であることが見出される。当該化合物のこの作用機構は、他のウイルスの細胞感染過程を阻害することに適用され得、当該他のウイルスとは、例えば、非制限的に、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エボラウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、エプスタインバーウイルス、肝炎ウイルス、ＨＴＬＶ−１及び２、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）、はしかウイルス（ＭｅＶ）である。
【００５１】
異なるファミリーからの多くのウイルスは、非常に類似する構造的特徴を伴った融合蛋白質を有することが現在知られている、当該構造的特徴の例は、細胞膜に対して垂直な配向（「スパイク」のような）、アミノ末端の又はアミノ隣接の融合ペプチドの存在、及びアルファへリックスの３本鎖コイルドコイルを構築する特有の融合後ヘアピン構造の形成である。そのような蛋白質は、オルトミクソウイルス、パラミクソウイルス、レトロウイルス、及びフィロウイルス中に存在し、クラスＩウイルス融合蛋白質に特定される。例えば、ｇｐ４１の融合活性状態の中心は、インフルエンザ（Ｂｕｌｌｏｕｇｈ，Ｐ．Ａ． ｅｔ ａｌ．，（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ，３７１，３７−４３）、モロニーマウス白血病ウイルス（Ｆａｓｓ，Ｄ．，ａｎｄ Ｋｉｍ，Ｐ．Ｓ．（１９９５）Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．，５，１３７７−１３８３；Ｆａｓｓ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｎａｔ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，３，４６５−４６９）、サル・パラインフルエンザ・ウイルス５（Ｂａｋｅｒ，Ｋ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，（１９９９）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．，３，３０９−３１９）、エボラウイルス（Ｍａｌａｓｈｋｅｖｉｃｈ，Ｖ．Ｎ．ｅｔ ａｌ．，（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，９６，２６６２−２６６７）、及びサル免疫欠損ウイルス（Ｃａｆｆｒｅｙ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，（１９９８）ＥＭＢＯ Ｊ．，１７，４５７２−４５８４；Ｙａｎｇ，Ｚ．ｅｔ ａｌ．，（１９９９）Ｊ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．１２６，１３１−１４４；Ｍａｌｅｓｈｋｅｖｉｃｈ，Ｖ．Ｎ．ｅｔ ａｌ．，（１９９８）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，９５，９１３４−９１３９）由来のエンベロープ融合蛋白質の提案された融合遺伝子構造との類似性を示す。
【００５２】
フラビウイルス属、及びアルファウイルス属の融合機構は、完全に異なる構造特徴を有し、それ故、対応する蛋白質は、クラスＩＩウイルス融合蛋白質に特定されるが、提案された融合機構は、クラスＩ融合蛋白質と類似する（Ｂｒｅｓｓａｎｅｌｌｉ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，（２００４）ＥＭＢＯ Ｊ．２３，７２８−７３８；Ｍｏｄｉｓ Ｙ．ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｎａｔｕｒｅ ４２７，３１３−３１９）。フラビウイルス属は、ペスチウイルス属、及びヘパシウイルス（ヒトＣ型肝炎ウイルス）属をも含むフラビウイルス科における属を構築する、小さく、２０面体のエンベロープを持ったウイルスである。いくつかのフラビウイルス属は、重大な、蚊が媒介する又はダニが媒介するヒト病原菌であり、例えば、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイル熱、及びダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルスである。成熟したウイルス粒子は、３つの蛋白質であって、特定されたＣ（キャップシド）、Ｅ（エンベロープ）、及びＭ（膜）蛋白質を含む。当該Ｅ蛋白質は、当該ウイルス粒子表面の主要な構成要素であり、細胞受容体に結合すること、及びエンドソームにおける低ｐＨ誘発膜融合を媒介することの２重機能を有する。ウイルス集合は、小胞体において生じ、そして第１に、Ｅ蛋白質がＭの前駆体（ｐｒＭ）とヘテロ二量体複合体を形成する融合機能不全の、非成熟ウイルス粒子の産生を導く。未成熟ウイルス粒子は、細胞のエンドサイトーシス経路を通り輸送され、そして、それらの放出のすぐ前に、ｐｒＭは、フリン又はトランスゴルジ網における関連プロテアーゼにより開裂され、融合機能を有する成熟感染ウイルス粒子を産生する。
【００５３】
【表１】
【００５４】
ＨＩＶ−１ウイルスに対する抗ウイルス薬の使用の場合、Ｔ−２０（配列番号１）と呼ばれる既知のウイルス融合阻害剤が使用され得る。当該ウイルス標的は、Ｔ２０（配列番号１）に対する高い結合親和力を有することが知られているＨＩＶ−１ウイルスのエンベロープ蛋白質ｇｐ４１、又は感染細胞表面上に発現されるｇｐ４１である。当該ウイルス標的上の反応官能基は、Ｔ−２０／ｇｐ４１結合部位の近傍に位置するリジン残基のイプシロンアミンであって、例えば、ｇｐ４１膜透過ドメイン又はその周辺におけるＣ７反復でのｇｐ４１におけるＮ７反復対応Ｔ−２０配列である。ウイルス性エンベロープ蛋白質を有するＴ−２０の結合に関して、及びもし当該分子距離が適当であれば、当該反応基は、官能反応基と反応し、当該結合要素を標的分子に結合する共有ペプチド結合を産生する。その標的結合部位に対するＴ−２０（配列番号１）の共有結合は、当該分子の融合事象を永続的に生ずるように妨害し、それ故、当該ウイルスが当該非感染細胞を感染することを妨害する。
【００５５】
天然Ｃ３４（配列番号５）のペプチド類似体も、本発明に関して含まれる。かかる類似体は、Ｘとして下記の式（ＩＶ）において特定された位置に天然ペプチドの１又は複数のアミノ酸変異を含み、それは、６へリックス束構造の間に、これらの残基が、暴露されそしてＮ３６との結合に関与しない溶媒であることに基づく。（Ａｋｉｒａ Ｏｔａｋａ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｇｒｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００２，４１，Ｎｏ．１６，２９３７−２９４０）。従って、いくつかのアミノ酸は、Ｎ３６と当該類似体ペプチドの結合親和力に影響を与えることなしに、これらの位置の１又は複数で置換され得る。好ましい類似体は、１つのリジンのみを含み、そして、かかるリジン残基は、以下の式（ＩＶ）における１、４、５、８、１１、１２、１５、１８、１９、２２、２５、２６、２９、３２、及び３３の位置番号でいくつかのアミノ酸残基を置換し、Ｒ１−Ｒ２−Ｍで化学的に修飾されることを可能とする１つの反応群（すなわち、置換されたフェニル）を創造する。かかるリジン残基の好ましい位置は、１、５、及び８の位置であり、最も好ましくは５の位置である。さらに好ましくは、Ｃ３４の天然配列中の位置２８でのリジン残基は、アルギニンの如きより低い反応性アミノ酸により置換される。
【００５６】
【化１】
【００５７】
好ましくは、ペプチド類似体は、１つのアセチルを有するそれらのＮ末端で、又は少なくとも１つのシステイン酸（１、２又はそれ以上）で修飾され、それらの溶解性を増大する。
【００５８】
表２は、結合要素が配列番号１である本発明の化合物を示す。
【００５９】
【表２】
【００６０】
【表３】
【００６１】
【表４】
【００６２】
【表５】
【００６３】
【表６】
【００６４】
【表７】
【００６５】
【表８】
【００６６】
【表９】
【００６７】
【表１０】
【００６８】
【表１１】
【００６９】
先に述べたように、リンカーは、当該化合物の構造に依存してＢとＲ１との間又はＭとＲ１との間に追加され得、当該化合物と当該標的分子との間の反応を促進する。通常、リンカーは、長さ約１〜２０原子のものであって、当該原子は、炭素、窒素、酸素、硫黄、リンなどとなり得る。
【００７０】
当該リンカーは、一般的には、約２〜１６炭素原子、より一般的には約１〜２５炭素原子のアルキレン基；アルキレン基が２〜３原子のものであって約１〜８構成単位、好ましくは１〜６構成単位を有するポリアルキレン基；アルファ及びオメガアミノ酸、又は約１〜８アミノ酸、好ましくは１〜６アミノ酸を有するオリゴヌクレオチオドを含むアミノ酸となり得、ここで当該アミノ酸は、極性又は非極性、荷電又は非荷電、脂肪族、脂環式、芳香族又は複素環式、天然に生じた又は合成の、右旋性（Ｄ）又は左旋性（Ｌ）となり得る。本発明において、好ましくは、当該リンカーは、式−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（０）−を有し、ここでｎは１〜２５の整数であり、さらに好ましくは、当該リンカーは、−ＮＨ−（ＣＨ２）５−Ｃ（０）−、及び−ＮＨ−ＣＨ２−Ｃ（０）−から選択される。
【００７１】
この目的に好適なリンカーの例が表３に示されるが、それは例証目的のためだけであり、本出願において企図されるリンカーの範囲を限定するように理解すべきではない。
【００７２】
【表１２】
【００７３】
設計目的として、当該化合物の設計のために既存のカルボキシル基を使用しないように選択され得る。この場合、かかる変異が当該結合要素の結合能を低減／変化しない位置で、新たな残基の削除／追加を実施することが適し得る。配列番号２を使用する、かかる変換の例を以下に示す。似たような変換は、当業者が理解するように、当該ペプチド上のどこでも実施され得る。
【００７４】
【化２】
【００７５】
表４は、本発明の化合物を示し、ここで、当該結合要素は、ウイルス融合の他の阻害剤である配列番号３及び配列番号４から選択される配列を有する。
【表１３】
【００７６】
場合により、Ｍは、治療薬を含む成分である。それ故、当該治療薬の効果は、当該結合要素の不活性作用に加えて作用する。好ましくは、当該治療薬は、抗ウイルス治療に有用であり、さらに好ましくは、抗ＨＩＶ治療に有用であり、そして、非制限的に、薬物、プロテアーゼ阻害剤、抗増殖剤、アンチセンス・オリゴヌクレオチド、抗ウイルス剤、ウイルス侵入阻害剤又は抗融合化剤となり得る。
【００７７】
本発明の２番目に好ましい態様の記載
２番目に好ましい態様について、当該反応基は、Ｒ１−Ｒ２であり、そして、Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍのような化合物の式中に配置される。この場合、当該結合要素Ｂは、Ｒ２と共に放出され、そしてＭはＲ１の結合を介して当該標的と共有結合したままである。Ｍは成分であり、当該成分の本質は、当該標的の少なくとも１つの特異的活性を調節するようなものである。当該成分は、好ましくは、蛋白質（内因性の、ゲノムの又は組み換え型の蛋白質）（すなわち、組み換え血清蛋白質）、分子、粒子、ポリマー、リポソーム、及び細胞からなる群より選択される増量剤を含む。例えば、当該成分は、アルブミンとなり得る。
【００７８】
第２の好ましい態様の出願は、ウイルス感染を遮断、低減、及び防止するために有用であることがわかっている。本出願において、当該標的は、ウイルスであり、そして当該化合物は、当該ウイルスのｇｐ４１糖蛋白質又はｇｐ４１糖蛋白質類似体の領域に対する結合親和力を有する結合要素を含む。当該ウイルスがＨＩＶであるとき、かかる結合要素は好ましくは表１に示されるものである。例えば、非制限的に、ＳＩＶ、ＲＳＶ、ＨＰＶ（ＨＰＩＶ）、ＭｅＶである他のウイルスのウイルス感染活性は、本発明の第２の好ましい態様における化合物により止められ、防止され得ることが理解されるべきである。この場合、Ｍは、好ましくは、細胞膜融合過程に干渉することにより、ウイルスの細胞感染活性を遮断、又は低減するような性質を有する成分である。好ましくは、当該成分の大きさは、ｇｐ４１糖蛋白質又はその類似体のフォールディングに物理的に干渉し、細胞膜融合過程を阻害する。
【実施例】
【００７９】
実施例１
ｃａｐ化合物の一般的製造手順
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のペプチド（２０ｍｇ）を、４−メチルモルホリン（２０μＬ）の存在下、室温で４時間、活性化ペンタフルオロフェニル（ｐＦＰ）エステルと反応させた。当該反応を、ＡｃＯＨの添加により急冷し、次いで、２０ｍＬまで水で希釈した。当該水溶液を、半分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ，ＲＰ−１８，１０μ フェニル−ヘキシル ２５０×２１．２ｍｍカラム、９．５ｍＬフラクションの回収で流速９．５ｍＬ／分。１２０分超に渡り、水（０．１％ＴＦＡ）中において３０から６０％へのアセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）の勾配を使用した。）に投入し、対応するｃａｐペプチドを得た。当該精製画分を合わせ、そして凍結乾燥し、白色粉を得た。
【００８０】
リンカー合成
当該置換フェノールを、ジクロロメタン中Ｅｔ３Ｎ（２当量）の存在下、グルタル酸無水物（１．５当量）と反応させた。当該対応する酸を、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより単離し、当該グルタル酸のフェノールエステルを得た。
【００８１】
当該酸を、ジクロロメタン中、１６時間、ペンタフルオロフェニル（２．２当量）及びＥＤＣ（２．２当量）の反応により活性化した。当該活性化ペンタフェニルエステルをフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、固形物又は油を得た。
【００８２】
【化３】
【００８３】
当該長リンカー型を、ＮＭＭの存在下、上記製造された活性化エステルとＤＭＦ中の８−アミノオクタン酸のカップリングにより生成した。当該酸を、ペンタフルオロフェニル及びＥＤＣと反応させ、フラッシュクロマトグラフィー後、対応するｐＦＰエステルを得た。
【００８４】
実施例２
ＨＩＶ−１株ＩＩＩＢを使用した抗ウイルス薬の活性を分析するためのＩＣ−５０の測定
試薬
当該試験は、１薬物あたり６つの濃度以上、１薬物濃度あたり２穴で、１穴あたり５００，０００個のＰＨＡ刺激されたＣＢＭＣ（さい帯血単球）を有する９６穴プレートにおいて実施される。使用した培地は、１０％ＦＢＳ、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、グルタミン（２ｍＭ）、ヒドロコルチゾン（５μｇ／ｍｌ）、及びＩＬ−２（２０Ｕ／ｍｌ）を伴ったＲＰＭＩ １６４０である。
【００８５】
薬物生成
対照薬物ストックは、天然化合物又は反応化合物に２ｍｌの緩衝液を添加することにより生成される。当該ストックは、−２０セ氏温度で保存される。当該薬物濃度を、ＣｏｎｊｕＣｈｅｍ Ｉｎｃ．により決定した。
【００８６】
【化４】
【００８７】
細胞感染に先立つ当該化合物の添加
標的細胞は、３７セ氏温度で３０〜６０分間、異なる化合物濃度で培養され、その後、ウイルス（感染の多重度（ＭＯＩ）＝０．１〜１．０）が添加される。プレーティング後、標的細胞は、計７日間の間、異なる濃度の阻害剤の存在下に置かれる。
３〜４日の培養後、各化合物が補充される。
逆転写酵素アッセイを使用して、ＩＣ５０を測定する。
ＣＣ５０（細胞毒性濃度）も全化合物に対して評価される。
３ＴＣは、対照阻害剤として使用される。
【００８８】
ＲＴ結果（ｃｐｍ）（７日）
【表１４】
【００８９】
配列番号９３のＣ３４（Ａｓｐ５の位置）のペプチド配列内への（リンカー−Ｒ１−Ｒ２−Ｍ）の化学的挿入後、Ｃ３４天然（非共有）型（配列番号３２）と比較すると抗ＨＩＶ活性における低下は本質的に観察されない。それ故、配列番号３２内に見出される結合要素（Ｂ）は、当該ウイルス標的と直接接触することが知られるアミノ酸残基（すなわち、ＨＩＶ−１のｇｐ４１のＮ−７反復）上の化学的挿入にもかかわらず、天然Ｃ３４（配列番号９３）とウイルス標的に結合することに同程度の有用性である。
【００９０】
ＨＰＬＣ
【化５】
【００９１】
リン酸緩衝液中の反応
・２ｍＭの各Ｃ３４は、５０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）中に作成した。
・１０ｍＭの天然Ｎ３６は９５％ＥＴＯＨ中に作成した→５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ１０．７）＋１９％のＥＴＯＨ中において２ｍＭに希釈した。
・３７℃で、０．２ｍＭのＤＡＣ：Ｃ３４＋５０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）中の０．２ｍＭのＮ３６＋１．９％のＥＴＯＨ。
・ＨＰＬＣ又はＬＣ／ＭＳにペプチド溶液の１０μｌを注入。
【００９２】
５０／５０リン酸緩衝液＋ＥｔＯＨ中の反応
・２ｍＭの各Ｃ３４は、５０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）中に作成した。
・天然Ｎ３６は９５％ＥＴＯＨ中に２ｍＭで作成した。
・３７℃で、０．２ｍＭのＣ３４＋５０％ＥＴＯＨ／５０％リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）中、０．２ｍＭのＮ３６。
・ＨＰＬＣ又はＬＣ／ＭＳにペプチド溶液の１０μｌを注入。
【００９３】
結果は、図１〜４に示す。結合親和力を摂動しないことに加えて、Ｃ３４の位置５（すなわち、位置５でのアスパラギン酸）で反応成分の挿入は、Ｎ３６ペプチドの単独リジン残基特異的共有結合を形成する。
【００９４】
ＰＡＧＥ
室温で１時間培養後、少なくとも２０マイクログラムの総Ｎ３６／Ｃ３４ペプチド混合物を各穴に充填し、ネイティブポリアクリルアミドゲル電気泳動（１７．５％アクリルアミド）を使用して分離し、クマシーブリリアントブルーを使用して染色した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥとは違って、ネイティブ−ＰＡＧＥは、３つのＣ３４ペプチドにより囲まれた３つの中心Ｎ３６ペプチドからなる約２８ｋＤａの６へリックス束の構造を視覚化することが可能である。この構造及び他のウイルス間のその類似体の形成は、その後の膜融合事象に極めて重要である。
【００９５】
結果を図５に示す。
【００９６】
標準生体外試験を使用したとき天然Ｃ３４（ＣＪＣ−１６４６、配列番号９３）と同程度有効なＨＩＶ−１の逆転写酵素（ＲＴ）活性を阻害する酵素配列番号３２（ＣＪＣ−１６５５）の能力に加えて、ネイティブＰＡＧＥは、Ｃ３４の天然（未反応性）型（ＣＪＣ−１５６０、配列番号５、及びＣＪＣ−１６４６、配列番号９３）と比較して、Ｃ３４の構造中の多様な位置｛すなわち、Ｎ末端（ＣＪＣ−１５０５及びＣＪＣ−１６４８、配列番号５５）；Ｄ５（ＣＪＣ−１６５５、配列番号３２）；Ｉ８（ＣＪＣ−１６５６、配列番号５９）；Ｎ９（ＣＪＣ−１１７９、Ｎ９ Ｌｙｓ（ＡＥＥＡ）−ＭＰＡを伴うＣ３４）、及びＫ３５（ＣＪＣ−１５０９）｝へのリンカー及びＲ１の挿入がＨＩＶ−１のｇｐ４１糖蛋白質のＮ−７反復由来のその標的Ｎ３６ペプチド（ＣＪＣ−１５９２）に結合することからＣ３４を妨げないことを示す。
【００９７】
本発明はそれらの特定の態様に関連して記載されるが、さらなる改良が可能であり、本出願は、一般的に、本発明の原則に加えて、本発明のいずれの変更、使用又は適応をも含むことを意図され、本発明の属する分野において知られた又は慣習的な手順に含まれるくらい近いような、及び上記の本質的特徴に適用され得るような、並びに当該添付の請求項の範囲に含まれるような本発明の開示からの出発物の如きものを含むと理解されるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００９８】
【図１】図１は、Ｃ３４：Ｎ３６（１６５５／１７２２）二量体のＨＰＬＣを示す。
【図２】図２は、Ｃ３４：Ｎ３６（１６５５／１７２３）二量体のＨＰＬＣを示す。
【図３】図３は、Ｃ３４：Ｎ３６（１６４６／１７２２）二量体のＨＰＬＣを示す。
【図４】図４は、共有結合Ｎ３６：Ｃ３４二量体のＬＣ／ＭＳ同定を示す。
【図５】図５は、Ｎ３６／Ｃ３４複合体のネイティブＰＡＧＥを示す。
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本出願は、特異的なウイルス標的のための化合物、及びそれらの関連組成物及び方法に関し、そしてより特異的に、ウイルス侵入阻害剤及び抗融合化合物（ａｎｔｉ−ｆｕｓｉｏｇｅｎｉｃ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
多くの治療分野において、治療戦略は、それらの特異的なウイルス標的に可逆的に結合する阻害剤又はリガンドに基づく。これらの阻害剤及びリガンドは、特異的標的と結合する形式とそれらの遊離型の形式との間で交互に入れ替わる。遊離型のとき、それらは、治療効果の損失を引き起こす酵素分解及び／又は素早い腎臓排出に供され得る。それらの治療効果を持続するために、それらの特異的ウイルス標的に共有結合する及び不可逆的に結合する阻害剤又はリガンドの必要性がある。
【発明の開示】
【０００３】
本発明の概要
本発明に関して、以下の式（Ｉ）：
Ｂ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍ （Ｉ）
｛式中：
−Ｂは、標的を認識し、かつ、結合するための結合要素であり;
−Ｒ１は、当該標的と共有結合を形成するように当該標的の官能基と反応するための原子の第１基であり；
−Ｒ２は原子の第２基であり；ここで、Ｒ１及びＲ２は、Ｒ１と当該標的との間の共有結合の形成がＲ１とＲ２との間の結合の開裂を生じさせて、Ｒ２−Ｍを遊離させる；そして
−Ｍは、水素原子及び医薬として許容される成分からなる群より選択される。｝を有する化合物を提供する。
【０００４】
本発明出願に関して、以下の式（ＩＩ）：
Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍ （ＩＩ）
｛式中、
−Ｂは、標的を認識し、かつ、結合するための結合要素であり;
−Ｒ１は、当該標的と共有結合を形成するように、当該標的の官能基と反応するための原子の第１基であり；
−Ｒ２は原子の第２基であり；ここで、Ｒ１及びＲ２は、Ｒ１と当該標的との間の共有結合の形成がＲ１とＲ２との間の結合の開裂を生じさせて、Ｂ−Ｒ２を遊離させる、；そして
−Ｍは、医薬として許容される成分である。｝
を有する化合物も提供する。
【０００５】
この化合物の成分は、増量剤を含み、好ましくは、薬物又は治療薬、蛋白質、分子、粒子、ポリマー、リポソーム、及び細胞、より好ましくは、血清蛋白質（内因性の、組み換え型又はゲノムの）からなる群より選択され、及びさらにより好ましくは、当該かさ高は血清アルブミンである。
【０００６】
本発明の好ましい態様において、当該Ｒ１は、以下の式（ＩＩＩ）：
Ｘ−Ｃ（Ｙ） （ＩＩＩ）
｛式中、
Ｘは存在しないか、又はアルキル基、及び置換又は非置換フェニル基からなる群より選択され、；そして
Ｙは、硫黄、酸素、リン、及び窒素からなる群より、好ましくは硫黄、及び酸素からなる群より選択される。｝におけるものである。
【０００７】
例として、Ｙが酸素のとき、Ｃ（Ｙ）はカルボニルである。
【０００８】
本発明において、置換フェニル基は、好ましくは、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３の如き少なくとも１つの置換基を担持するフェニル基である。
【０００９】
本発明の好ましい態様において、Ｒ２は、酸素、アセタール、ヘミアセタール、ホスホアセタール、硫黄、アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアミノ誘導体、置換又は非置換のいずれかのフェノキシ、チオフェノキシ、及びアミノフェノキシ誘導体からなる群より選択される。本発明において、置換フェノキシ、チオフェノキシ、又はアミノフェノキシは、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３の如き少なくとも１つの置換基を有するフェニル基を含む。
【００１０】
本発明の他の態様において、Ｒ１Ｒ２は、アルキルエステル、アリールエステル、アルキルチオエステル、アリールチオエステル、ホスホエステル、オルトエステル、イミデート、混合無水物、ジスルフィド、アミド、及びチオアミンからなる群より選択される反応性官能基を含む。当該反応基は、上記のような置換又は非置換フェニル基の如き芳香族部分をも非制限的に含み得る。好ましくは、Ｒ１Ｒ２により形成される当該反応性官能基は、水性環境において安定である。
【００１１】
本発明のある態様において、当該結合要素は、有機化合物、アミノ酸配列、ペプチド、蛋白質、核酸配列、小分子、それらの模倣剤、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される。
【００１２】
本発明のある態様において、当該ウイルス標的は、ウイルス、ウイルス抗原、感染細胞上の受容体、ウイルス性ペプチド、感染細胞、感染細胞の表面に発現されたウイルス蛋白質、それらの断片又はそれらの特異的領域からなる群より選択される。
【００１３】
本発明の好ましい態様において、当該ウイルスは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−１及び２）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エボラウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、エプスタインバーウイルス、肝炎ウイルス、ＨＴＬＶ−１及び２、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）、はしかウイルス（ＭｅＶ）、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、及びダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルスからなる群より選択される。この態様において、当該結合要素は、非制限的に、当該ウイルスのｇｐ４１糖蛋白質の領域又はそれらの類似部分及び相当部分に対する結合親和力を有する結合要素となり得る。
【００１４】
本発明のさらに好ましい態様において、当該結合要素は、配列番号１〜１９からなる群より選択されるアミノ酸配列を有し、当該ウイルスはＨＩＶである。
【００１５】
本発明の他の態様において、当該成分は、治療薬を含む。この治療薬は、薬物蛋白質分解酵素阻害剤、抗増殖剤、アンチセンスオリゴヌクレオチド、抗ウイルス剤、ウイルス侵入阻害剤、及び抗融合剤（ａｎｔｉ−ｆｕｓｉｏｇｅｎｉｃ ａｇｅｎｔ）からなる群より選択され得る。
【００１６】
本発明に関して、当該化合物がＢ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍの構造であるとき、ＢとＲ１との間にリンカーＬ１をさらに含む本発明の化合物をも提供する。さらに又はあるいは、リンカーＬ２は、Ｒ２とＭとの間に存在し得る。
【００１７】
本発明に関して、当該化合物がＢ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍの構造であるとき、ＢとＲ２との間にリンカーＬ２をさらに含む本発明の化合物をも提供する。さらに又はあるいは、リンカーＬ１は、Ｒ１とＭとの間に存在し得る。通常は、当該リンカーは約１〜２０原子の長さであって、当該原子は炭素、窒素、酸素、硫黄、及びリンなどとなり得る。当該リンカーは、一般的に約２〜１６炭素原子、より一般的には約１〜２５炭素原子のアルキレン基；当該アルキレン基が２〜３原子のものであり、約１〜８ユニット、及び好ましくは約１〜６ユニットを有するだろうポリアルキレン基；アルファ及びオメガアミノ酸を含むアミノ酸、又は約１〜８アミノ酸、及び好ましくは約１〜６アミノ酸を有するオリゴヌクレオチドであって、ここで当該アミノ酸が、極性又は非極性、荷電又は非荷電、脂肪族、脂環式、芳香族又は複素環式芳香族、天然素材又は合成、右旋性（Ｄ）又は左旋性（Ｌ）となり得る。本発明において、好ましいことには、当該リンカーは、−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−の式を有し、ここでｎは１〜２５範囲の整数であり、より好ましくは当該リンカーは、−ＮＨ−（ＣＨ２）５−Ｃ（Ｏ）−と−ＮＨ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−から選択される。
【００１８】
本発明に関して、対象に本発明の化合物を、単独で又は医薬として許容される担体と共に投与することを含む、当該対象におけるウイルス標的の活性を調節するための方法であって；当該結合要素が、ウイルス標的の活性に関する当該ウイルス標的の領域に対する結合親和力を有し、それによって、当該標的の領域への化合物の結合は、当該標的の活性の妨害又は低下をもたらす前記方法を提供する。
【００１９】
本発明に関して、医薬として許容される担体とともに本発明の化合物を含む、対象におけるウイルス標的の活性を調節するための抗ウイルス性組成物であって；当該結合要素が、ウイルスの細胞感染の細胞膜融合過程の活性に関する当該ウイルス標的の領域に対する結合親和力を有し、それによって、当該標的の領域への化合物の結合は、当該標的の活性の妨害又は低下をもたらす当該抗ウイルス性組成物をも提供する。
【００２０】
本明細書中の当該活性の調整は、好ましくは、非制限的に、当該活性の妨害又は低下である。
【００２１】
本明細書中のある態様において、当該活性は、ウイルスの細胞感染の膜融合過程の活性である。
【００２２】
本明細書に関して、対象の抗ウイルス治療において使用される薬物の製造のための化合物の使用をさらに提供する。さらに特に、抗ウイルス薬治療を必要とする対象は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−１及び２）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エボラウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、エプスタインバーウイルス、肝炎ウイルス、ＨＴＬＶ−１及び２、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）、はしかウイルス（ＭｅＶ）、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、及びダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルスからなる群より選択されるウイルスにより感染している。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
本発明の詳細な説明
本発明の完全な理解を確実にするために、当該記載において使用される用語の定義を最初に提供する。
【００２４】
結合要素：当該結合要素は、ウイルス標的上の相補的領域に対する特異的結合親和力を有する領域を含み、そして有機化合物、アミノ酸配列、ペプチド、蛋白質、ホルモン、抗体、抗原、核酸配列、上記の模倣薬又は組合せとして具体化され得る。
【００２５】
ウイルス標的：ウイルス標的は、当該活性を調節することが望ましい実体又は調節することが望ましい活性を提供するために他の実体と相互作用する実体である。当該ウイルス標的は、非制限的に、ウイルス、感染細胞の表面上に発現されたウイルス抗原、ウイルス又は感染細胞上の表面受容体のウイルス性抗原に特異的なリガンド、感染細胞表面受容体、ペプチド、感染細胞又はそれらの細胞膜、ｇｐ４１の如き、感染細胞の表面に発現されたウイルス蛋白質、それらの断片又はそれらの特異的領域（すなわち、Ｎ−７反復又はＣ−７反復）となり得る。
【００２６】
官能基：官能基は、当該ウイルス標的の潜在的な反応部位を表す原子の基である。官能基は、非制限的に、カルボキシ、アミノ、チオール、及びヒドロキシル基を含む。アミノ基が好まれ、そして、リジン、アルギニン、アスパラギン又はグルタミン残基、あるいはペプチド又は蛋白質の遊離のＮ末端により提供され得る。
【００２７】
リンカー：リンカーは、場合により、当該結合要素と当該反応基との間、及び／又は当該反応基と当該成分との間に使用される。当該リンカーの長さは、親和力を有することにより当該結合要素が当該ウイルス標的の領域に結合するのを可能とするために、及び当該反応基が当該ウイルス標的の官能基と反応し、そして共有結合を形成するのを同時に可能とするために変化し得る。活性分析、及び結合競合分析法は、当該リンカーの適切な長さを決定するために有用である。
【００２８】
医薬として許容される成分：医薬として許容される成分とは、生体内への投与について対象への使用が許容されるだろう成分を意図する。そのような成分は、水素原子となり得、又は治療薬、プロドラッグ及び／又は増量剤を含み得る。当該増量剤は、天然素材（内因性）あるいは合成、ゲノム又は組み換え源のものであり、例えば血清蛋白質、より好ましくは、血清アルブミンとなり得る。当該成分は、当該増量剤と共有結合する結合基をも含み得る。当該結合基は、もし立体障害を避けるように望まれるならば、当該反応基、及び当該結合要素から当該増量剤の距離を置くための連結基も含み得る。本発明に好適な治療薬の例は、ペプチド、小分子、薬物、アンチセンスオリゴヌクレオチド、抗ウイルス剤、ウイルス侵入阻害剤、及び抗融合体剤から非制限的に選択される。
【００２９】
結合（Ｂｉｎｄ）について：結合が、２つの分子間、２つのアミノ酸配列間、２つの核酸配列間などの電子引力、疎水性引力、静電気引力又はファンデルワールス引力に関することは、本発明の目的として意図される。そのような引力の強さは、通常、結合親和力と呼ばれる。結合は、結合状態と非結合状態との間の可逆的相互作用である。本発明に関して、そのような結合は、当該結合要素と当該ウイルス標的との間に生じる。
【００３０】
結合（Ｂｏｎｄ）について：結合が、２分子間の共有結合を形成するために化学反応及び転位に関することは、本発明の目的として意図される。結合は、不可逆的相互作用である。本発明に関して、そのような結合は、当該反応基（Ｒ１）と当該ウイルス標的との間に生じる。
【００３１】
当該ウイルス標的の活性：当該ウイルス標的の活性は、当該ウイルス標的の固有活性の内の１つを含む。例えば、それは、ウイルス又はウイルス感染細胞の細胞感染の間に関する過程（すなわち、膜融合過程）となり得る。
【００３２】
医薬として許容される担体：医薬として許容される担体は、錠剤、ゲルカプセル、水溶液などの形式をとり得、当該対象により許容され得る純度、及び／又は浸透圧を有する。
【００３３】
対象：対象は、哺乳類又は人間である。
【００３４】
ｇｐ４１糖蛋白質、及びｇｐ４１糖蛋白質類似体：ｇｐ４１糖蛋白質は、ＨＩＶ、ＳＩＶ、ＲＳＶ、ＨＰＶ（ＨＰＩＶ）及びＭｅＶの如きウイルスの侵入過程又は細胞感染過程の膜融合過程に関する蛋白質である。開示され、請求されるようなｇｐ４１糖蛋白質は、それらの切断体、欠失体、及び／又は挿入体を含む。欠失体は、当該ｇｐ４１糖蛋白質からの１又は複数のアミノ酸残基の除去からなり、及びアミノ酸配列の単一連続部分又は複数部分の除去に関し得る。挿入体は、単一アミノ酸残基又は多くの残基を含み、そして当該配列のカルボキシ又はアミノ末端で、又は当該配列内の位置で作られ得る。
【００３５】
ｇｐ４１糖蛋白質類似体は、当該ｇｐ４１糖蛋白質領域に相当するＨＩＶ以外のウイルスのペプチド領域を含む蛋白質であり、並びに、それらの切断体、欠失体、及び／又は挿入体も同様である。
【００３６】
本発明に関して標的とされたｇｐ４１のより特異的な領域は、当該Ｎ−７反復又はＣ−７反復である。
【００３７】
断片：断片はペプチド、ＤＮＡ又は分子の全長配列の一部であって、本発明を達成するための役割を果たすために、完全ペプチド、ＤＮＡ又は分子の特徴のいくつかを保持する。それ故、開示される当該断片は当該ウイルス標的に結合可能であることを意図する。
【００３８】
プロドラッグ：プロドラッグは、酵素的に又は化学的に、生体内の化学的、及び／又は構造的修飾を被る化合物であって、抗ウイルス活性の如き、当初化合物の活性と異なる、分子に対する活性を授与するような化合物である。
【００３９】
本発明の詳細な説明及び好ましい態様
本発明は、式（Ｉ）：Ｂ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍ、又は式（ＩＩ）Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍを有する化合物に関する。
【００４０】
Ｂは、前記のようなウイルス標的についての結合親和力を有する結合要素である。本発明に関して、当該結合要素は、所望のウイルス標的に認識し、そして結合することが可能である。そのような結合要素、及びウイルス標的は、本分野において既に知られたものとなり得る。あるいは、既知の特異的ウイルス標的に対する結合要素が、国際特許公開第ＷＯ９９／２４０７５号に開示されたスクリーニング方法により決定され得、その内容全体を本明細書中に援用する。
【００４１】
Ｒ１は、前記のようなウイルス標的と共有結合を形成するように当該ウイルス標的の官能基と反応可能とする第１反応基である。本発明の好ましい態様において、Ｒ１は、以下の式（ＩＩＩ）：
Ｘ−Ｃ（Ｙ） （ＩＩＩ）
｛式中、
Ｘは存在しないか、又は脂肪族アルキル基、及び環状アルキル基からなる群より選択され、
Ｙは、硫黄原子、酸素原子、リン、及び窒素原子からなる群より、好ましくは、硫黄原子、及び酸素原子からなる群より選択される。｝を有するものである。
【００４２】
Ｒ２は、酸素、アセタール、ヘミアセタール、ホスホアセタール、硫黄、アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアミノ誘導体、前記のような置換又は非置換フェノキシのいずれか、チオフェノキシ、アミノフェノキシ誘導体、及び置換又は非置換のフェニル基からなる群より好ましくは選択される。本発明において、置換されたフェニル基は、好ましくは、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３の如き置換基を有するフェニル基である。本発明において、置換フェニル基は、好ましくは、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３の如き置換基を有するフェニル基である。
【００４３】
本発明の他の態様において、Ｒ１Ｒ２は、アルキルエステル、アリールエステル、アルキルチオエステル、アリールチオエステル、ホスホエステル、オルトエステル、イミデート、混合無水物、ジスルフィド、アミド、及びチオアミンから選択される反応官能基を含む。当該反応基は、非制限的に、上記のような置換又は非置換フェニル基の如き芳香族部分をも含む。好ましくは、Ｒ１Ｒ２により形成される当該反応官能基は、水性環境において安定である。
【００４４】
しかしながら、他の反応基、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ１Ｒ２の組み合わせが本発明の目的に適していることを当業者は容易に認識するであろうことが理解される。
【００４５】
Ｍは、水素原子、及び上記のような医薬として許容される成分からなる群より選択される。
【００４６】
あるいは、本発明の化合物は、ＢとＲ１との間のリンカーＬ１、及び／又はＲ２とＭとの間のリンカーＬ２を含み得る。当該リンカーの目的は、当該結合要素が当該ウイルス標的に既に結合されるとき、当該ウイルス標的と共有結合を形成するように、当該反応基が当該ウイルス標的の適合官能基と結合することを可能とするために、当該化合物の因子と一定の間隔をあけるためのものである。さらに、式Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍの化合物において、当該成分が増量剤を含むとき、ＭとＲ１との間のリンカーは、ウイルス標的への反応基の共有結合及び／又は結合要素とウイルス標的との間の結合相互作用を伴って立体障害を妨害する。
【００４７】
「適合官能基」を用いて、当該反応基と反応し、そしてそれと共有結合を形成し得る官能基が意図される。多くのリンカーは商業的に入手可能又は合成可能であり、そして本発明のリンカーは、特定のものに制限されない。使用に適したリンカーを決定するために、様々な長さ及びフレキシビリティを有する異なるリンカーを分析した。
【００４８】
当該結合要素「Ｂ」は、以下の：５−へリックス、ＮＣＣＧ−ｇｐ４１、Ｎ３６ Ｍｕｔ（例えば）、ＤＰ−１０７、Ｔ−２１、Ｎ３６、エンフュービルタイド（ｅｎｆｕｖｉｒｔｉｄｅ）、Ｔ−２０、Ｆｕｓｅｏｎ、ＤＰ−１７８、ペンタフシド、Ｔ−１２４９、ＡＤＳ−Ｊ１、ＳＣ３４ＥＫ、ＩＱＮ１７、Ｄ１０−ＰＸ−２Ｋ、ＩＱＮ２３、Ｃ１４ｌｉｎｋｍｉｄ、Ｃ３４コイル、（Ｃｙｓ）Ｃ３４−ＧＣＮ４（Ｃｙｓ）ＧＣＮ４、Ｔ−６４９、Ｃ１４、ＳＪ−２１７６、ｓｃＣ３４、ｓＣ３４、Ｃ３４、ｐ３８、ｐ２６、シアマイシン（ｓｉａｍｙｃｉｎ）Ｉ及びＩＩ、ＡＤＳ−Ｊ２、ＡＤＳ−Ｊ１、Ｎ−３６−Ｅ、Ｓ−２９−Ｉ、ＳＰＣ−３、ＣＬＩＶ、ＡＭＤ−０７０、ＫＲＨ−１６３６、ＫＲＨ−１１２０、ＣＸＣＲ４阻害剤又はアンタゴニスト、Ｔ−１３４、Ｔ−１４０、ＡＭＤ−８６６４、ＨＩＶ−１、Ｔａｔ類似体、ＡＬＸ４０−４Ｃ、ＡＭＤ−３１００、Ｔ−２２、５，１２−Ｔｙｒ ７−Ｌｙｓポリフェムシン（ｐｏｌｙｐｈｅｍｕｓｉｎ）ＩＩ、ＴＪＮ−１５１、バイカリン、ＡＭ−１４０１、ＮＳＣ−６５１、コノカルボン（Ｃｏｎｏｃｕｒｖｏｎｅ）、ＤＡＰＴＡ、Ｄ−Ａｌａ１ ペプチド Ｔ−アミン、ＳＣＨ−Ｃ、ＳＣＨ−Ｄ、ＴＡＫ−２２０、ＳＣＨ−３５０、ＣＣＲ５アンタゴニスト、ペプチドＴ、ＵＣＢ−３５、ＥＧＣＧ、エピガロカテキンガレート、Ｃａｒｒａｇｕａｒｄ、ラムダ−カラギーナン、硫酸カードラン、ＯＫＵ−４０、ＯＫＵ−４１、Ｚｉｎｔｅｖｉｒ、コサレイン（ｃｏｓａｌａｎｅ）類似体、デキストリン−２−スルフェイト、Ｓｃｙｌｌａｔｏｘｉｎ類似体、ＣＤＲ２様ループ、ＨＩＶ ｐ７阻害剤、マイケルアミン（ｍｉｃｈｅｌｌａｍｉｎｅ）Ａ，Ｂ及びＦを非制限的に含む。
【００４９】
本発明の第１の好ましい態様の記載
第１の好ましい態様において、当該反応基は、Ｒ１−Ｒ２であって、そして以下の式：Ｂ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍ（Ｉ）のような化合物の式において配向される。この場合、当該ＭはＲ２と共に放出され、そして当該結合要素ＢはＲ１の結合を介してウイルス標的に共有結合したままとなる。当該結合要素の本質は、ウイルス標的の少なくとも１つの特異的活性を調節するためのものである。この態様の例を以下に提供する。
【００５０】
第１の好ましい態様の適用は、ウイルス感染を遮断、低下又は妨害するために見出される。そのような場合に、当該ウイルス標的はウイルスであり、そして当該結合要素は、そのウイルスに対する、例えば、ｇｐ４１に対する結合親和性領域を有する。ｇｐ４１関連ウイルスのための結合要素及びそれらの類似体の例は、下記の表１に示される。そのような領域を結合すること、及び化合物の反応基を用いてそのような領域と共有結合したままでいることにより、ウイルス侵入過程及び膜融合過程は妨害され、そしてＨＩＶ感染は恒久的に阻害される。これは、固有の解離定数（Ｋｄ）に従ってそれらの結合領域から分離する非共有結合要素と異なる。それらは、酵素的分解、及び腎臓を介する血しょうクリアランスに供される。それらの抗ウイルス活性は、変化するウイルス活性によるウイルス抵抗性の発生、並びに化合物に生体内濃縮の変動に少なくとも部分的に起因して時間とともに衰える。これらの結合要素は、侵入、さらに具体的に言うと、非感染細胞へのＨＩＶの浸透に関与する、細胞膜融合過程に関するｇｐ４１糖蛋白質の領域に結合するために選択的であることが見出される。当該化合物のこの作用機構は、他のウイルスの細胞感染過程を阻害することに適用され得、当該他のウイルスとは、例えば、非制限的に、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エボラウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、エプスタインバーウイルス、肝炎ウイルス、ＨＴＬＶ−１及び２、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）、はしかウイルス（ＭｅＶ）である。
【００５１】
異なるファミリーからの多くのウイルスは、非常に類似する構造的特徴を伴った融合蛋白質を有することが現在知られている、当該構造的特徴の例は、細胞膜に対して垂直な配向（「スパイク」のような）、アミノ末端の又はアミノ隣接の融合ペプチドの存在、及びアルファへリックスの３本鎖コイルドコイルを構築する特有の融合後ヘアピン構造の形成である。そのような蛋白質は、オルトミクソウイルス、パラミクソウイルス、レトロウイルス、及びフィロウイルス中に存在し、クラスＩウイルス融合蛋白質に特定される。例えば、ｇｐ４１の融合活性状態の中心は、インフルエンザ（Ｂｕｌｌｏｕｇｈ，Ｐ．Ａ． ｅｔ ａｌ．，（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ，３７１，３７−４３）、モロニーマウス白血病ウイルス（Ｆａｓｓ，Ｄ．，ａｎｄ Ｋｉｍ，Ｐ．Ｓ．（１９９５）Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．，５，１３７７−１３８３；Ｆａｓｓ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｎａｔ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，３，４６５−４６９）、サル・パラインフルエンザ・ウイルス５（Ｂａｋｅｒ，Ｋ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，（１９９９）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．，３，３０９−３１９）、エボラウイルス（Ｍａｌａｓｈｋｅｖｉｃｈ，Ｖ．Ｎ．ｅｔ ａｌ．，（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，９６，２６６２−２６６７）、及びサル免疫欠損ウイルス（Ｃａｆｆｒｅｙ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，（１９９８）ＥＭＢＯ Ｊ．，１７，４５７２−４５８４；Ｙａｎｇ，Ｚ．ｅｔ ａｌ．，（１９９９）Ｊ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．１２６，１３１−１４４；Ｍａｌｅｓｈｋｅｖｉｃｈ，Ｖ．Ｎ．ｅｔ ａｌ．，（１９９８）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，９５，９１３４−９１３９）由来のエンベロープ融合蛋白質の提案された融合遺伝子構造との類似性を示す。
【００５２】
フラビウイルス属、及びアルファウイルス属の融合機構は、完全に異なる構造特徴を有し、それ故、対応する蛋白質は、クラスＩＩウイルス融合蛋白質に特定されるが、提案された融合機構は、クラスＩ融合蛋白質と類似する（Ｂｒｅｓｓａｎｅｌｌｉ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，（２００４）ＥＭＢＯ Ｊ．２３，７２８−７３８；Ｍｏｄｉｓ Ｙ．ｅｔ ａｌ．（２００４）Ｎａｔｕｒｅ ４２７，３１３−３１９）。フラビウイルス属は、ペスチウイルス属、及びヘパシウイルス（ヒトＣ型肝炎ウイルス）属をも含むフラビウイルス科における属を構築する、小さく、２０面体のエンベロープを持ったウイルスである。いくつかのフラビウイルス属は、重大な、蚊が媒介する又はダニが媒介するヒト病原菌であり、例えば、黄熱病、デング熱、日本脳炎、西ナイル熱、及びダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルスである。成熟したウイルス粒子は、３つの蛋白質であって、特定されたＣ（キャップシド）、Ｅ（エンベロープ）、及びＭ（膜）蛋白質を含む。当該Ｅ蛋白質は、当該ウイルス粒子表面の主要な構成要素であり、細胞受容体に結合すること、及びエンドソームにおける低ｐＨ誘発膜融合を媒介することの２重機能を有する。ウイルス集合は、小胞体において生じ、そして第１に、Ｅ蛋白質がＭの前駆体（ｐｒＭ）とヘテロ二量体複合体を形成する融合機能不全の、非成熟ウイルス粒子の産生を導く。未成熟ウイルス粒子は、細胞のエンドサイトーシス経路を通り輸送され、そして、それらの放出のすぐ前に、ｐｒＭは、フリン又はトランスゴルジ網における関連プロテアーゼにより開裂され、融合機能を有する成熟感染ウイルス粒子を産生する。
【００５３】
【表１】
【００５４】
ＨＩＶ−１ウイルスに対する抗ウイルス薬の使用の場合、Ｔ−２０（配列番号１）と呼ばれる既知のウイルス融合阻害剤が使用され得る。当該ウイルス標的は、Ｔ２０（配列番号１）に対する高い結合親和力を有することが知られているＨＩＶ−１ウイルスのエンベロープ蛋白質ｇｐ４１、又は感染細胞表面上に発現されるｇｐ４１である。当該ウイルス標的上の反応官能基は、Ｔ−２０／ｇｐ４１結合部位の近傍に位置するリジン残基のイプシロンアミンであって、例えば、ｇｐ４１膜透過ドメイン又はその周辺におけるＣ７反復でのｇｐ４１におけるＮ７反復対応Ｔ−２０配列である。ウイルス性エンベロープ蛋白質を有するＴ−２０の結合に関して、及びもし当該分子距離が適当であれば、当該反応基は、官能反応基と反応し、当該結合要素を標的分子に結合する共有ペプチド結合を産生する。その標的結合部位に対するＴ−２０（配列番号１）の共有結合は、当該分子の融合事象を永続的に生ずるように妨害し、それ故、当該ウイルスが当該非感染細胞を感染することを妨害する。
【００５５】
天然Ｃ３４（配列番号５）のペプチド類似体も、本発明に関して含まれる。かかる類似体は、Ｘとして下記の式（ＩＶ）において特定された位置に天然ペプチドの１又は複数のアミノ酸変異を含み、それは、６へリックス束構造の間に、これらの残基が、暴露されそしてＮ３６との結合に関与しない溶媒であることに基づく。（Ａｋｉｒａ Ｏｔａｋａ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｇｒｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００２，４１，Ｎｏ．１６，２９３７−２９４０）。従って、いくつかのアミノ酸は、Ｎ３６と当該類似体ペプチドの結合親和力に影響を与えることなしに、これらの位置の１又は複数で置換され得る。好ましい類似体は、１つのリジンのみを含み、そして、かかるリジン残基は、以下の式（ＩＶ）における１、４、５、８、１１、１２、１５、１８、１９、２２、２５、２６、２９、３２、及び３３の位置番号でいくつかのアミノ酸残基を置換し、Ｒ１−Ｒ２−Ｍで化学的に修飾されることを可能とする１つの反応群（すなわち、置換されたフェニル）を創造する。かかるリジン残基の好ましい位置は、１、５、及び８の位置であり、最も好ましくは５の位置である。さらに好ましくは、Ｃ３４の天然配列中の位置２８でのリジン残基は、アルギニンの如きより低い反応性アミノ酸により置換される。
【００５６】
【化１】
【００５７】
好ましくは、ペプチド類似体は、１つのアセチルを有するそれらのＮ末端で、又は少なくとも１つのシステイン酸（１、２又はそれ以上）で修飾され、それらの溶解性を増大する。
【００５８】
表２は、結合要素が配列番号１である本発明の化合物を示す。
【００５９】
【表２】
【００６０】
【表３】
【００６１】
【表４】
【００６２】
【表５】
【００６３】
【表６】
【００６４】
【表７】
【００６５】
【表８】
【００６６】
【表９】
【００６７】
【表１０】
【００６８】
【表１１】
【００６９】
先に述べたように、リンカーは、当該化合物の構造に依存してＢとＲ１との間又はＭとＲ１との間に追加され得、当該化合物と当該標的分子との間の反応を促進する。通常、リンカーは、長さ約１〜２０原子のものであって、当該原子は、炭素、窒素、酸素、硫黄、リンなどとなり得る。
【００７０】
当該リンカーは、一般的には、約２〜１６炭素原子、より一般的には約１〜２５炭素原子のアルキレン基；アルキレン基が２〜３原子のものであって約１〜８構成単位、好ましくは１〜６構成単位を有するポリアルキレン基；アルファ及びオメガアミノ酸、又は約１〜８アミノ酸、好ましくは１〜６アミノ酸を有するオリゴヌクレオチオドを含むアミノ酸となり得、ここで当該アミノ酸は、極性又は非極性、荷電又は非荷電、脂肪族、脂環式、芳香族又は複素環式、天然に生じた又は合成の、右旋性（Ｄ）又は左旋性（Ｌ）となり得る。本発明において、好ましくは、当該リンカーは、式−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（０）−を有し、ここでｎは１〜２５の整数であり、さらに好ましくは、当該リンカーは、−ＮＨ−（ＣＨ２）５−Ｃ（０）−、及び−ＮＨ−ＣＨ２−Ｃ（０）−から選択される。
【００７１】
この目的に好適なリンカーの例が表３に示されるが、それは例証目的のためだけであり、本出願において企図されるリンカーの範囲を限定するように理解すべきではない。
【００７２】
【表１２】
【００７３】
設計目的として、当該化合物の設計のために既存のカルボキシル基を使用しないように選択され得る。この場合、かかる変異が当該結合要素の結合能を低減／変化しない位置で、新たな残基の削除／追加を実施することが適し得る。配列番号２を使用する、かかる変換の例を以下に示す。似たような変換は、当業者が理解するように、当該ペプチド上のどこでも実施され得る。
【００７４】
【化２】
【００７５】
表４は、本発明の化合物を示し、ここで、当該結合要素は、ウイルス融合の他の阻害剤である配列番号３及び配列番号４から選択される配列を有する。
【表１３】
【００７６】
場合により、Ｍは、治療薬を含む成分である。それ故、当該治療薬の効果は、当該結合要素の不活性作用に加えて作用する。好ましくは、当該治療薬は、抗ウイルス治療に有用であり、さらに好ましくは、抗ＨＩＶ治療に有用であり、そして、非制限的に、薬物、プロテアーゼ阻害剤、抗増殖剤、アンチセンス・オリゴヌクレオチド、抗ウイルス剤、ウイルス侵入阻害剤又は抗融合化剤となり得る。
【００７７】
本発明の２番目に好ましい態様の記載
２番目に好ましい態様について、当該反応基は、Ｒ１−Ｒ２であり、そして、Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍのような化合物の式中に配置される。この場合、当該結合要素Ｂは、Ｒ２と共に放出され、そしてＭはＲ１の結合を介して当該標的と共有結合したままである。Ｍは成分であり、当該成分の本質は、当該標的の少なくとも１つの特異的活性を調節するようなものである。当該成分は、好ましくは、蛋白質（内因性の、ゲノムの又は組み換え型の蛋白質）（すなわち、組み換え血清蛋白質）、分子、粒子、ポリマー、リポソーム、及び細胞からなる群より選択される増量剤を含む。例えば、当該成分は、アルブミンとなり得る。
【００７８】
第２の好ましい態様の出願は、ウイルス感染を遮断、低減、及び防止するために有用であることがわかっている。本出願において、当該標的は、ウイルスであり、そして当該化合物は、当該ウイルスのｇｐ４１糖蛋白質又はｇｐ４１糖蛋白質類似体の領域に対する結合親和力を有する結合要素を含む。当該ウイルスがＨＩＶであるとき、かかる結合要素は好ましくは表１に示されるものである。例えば、非制限的に、ＳＩＶ、ＲＳＶ、ＨＰＶ（ＨＰＩＶ）、ＭｅＶである他のウイルスのウイルス感染活性は、本発明の第２の好ましい態様における化合物により止められ、防止され得ることが理解されるべきである。この場合、Ｍは、好ましくは、細胞膜融合過程に干渉することにより、ウイルスの細胞感染活性を遮断、又は低減するような性質を有する成分である。好ましくは、当該成分の大きさは、ｇｐ４１糖蛋白質又はその類似体のフォールディングに物理的に干渉し、細胞膜融合過程を阻害する。
【実施例】
【００７９】
実施例１
ｃａｐ化合物の一般的製造手順
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のペプチド（２０ｍｇ）を、４−メチルモルホリン（２０μＬ）の存在下、室温で４時間、活性化ペンタフルオロフェニル（ｐＦＰ）エステルと反応させた。当該反応を、ＡｃＯＨの添加により急冷し、次いで、２０ｍＬまで水で希釈した。当該水溶液を、半分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ，ＲＰ−１８，１０μ フェニル−ヘキシル ２５０×２１．２ｍｍカラム、９．５ｍＬフラクションの回収で流速９．５ｍＬ／分。１２０分超に渡り、水（０．１％ＴＦＡ）中において３０から６０％へのアセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）の勾配を使用した。）に投入し、対応するｃａｐペプチドを得た。当該精製画分を合わせ、そして凍結乾燥し、白色粉を得た。
【００８０】
リンカー合成
当該置換フェノールを、ジクロロメタン中Ｅｔ３Ｎ（２当量）の存在下、グルタル酸無水物（１．５当量）と反応させた。当該対応する酸を、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより単離し、当該グルタル酸のフェノールエステルを得た。
【００８１】
当該酸を、ジクロロメタン中、１６時間、ペンタフルオロフェニル（２．２当量）及びＥＤＣ（２．２当量）の反応により活性化した。当該活性化ペンタフェニルエステルをフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、固形物又は油を得た。
【００８２】
【化３】
【００８３】
当該長リンカー型を、ＮＭＭの存在下、上記製造された活性化エステルとＤＭＦ中の８−アミノオクタン酸のカップリングにより生成した。当該酸を、ペンタフルオロフェニル及びＥＤＣと反応させ、フラッシュクロマトグラフィー後、対応するｐＦＰエステルを得た。
【００８４】
実施例２
ＨＩＶ−１株ＩＩＩＢを使用した抗ウイルス薬の活性を分析するためのＩＣ−５０の測定
試薬
当該試験は、１薬物あたり６つの濃度以上、１薬物濃度あたり２穴で、１穴あたり５００，０００個のＰＨＡ刺激されたＣＢＭＣ（さい帯血単球）を有する９６穴プレートにおいて実施される。使用した培地は、１０％ＦＢＳ、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）、グルタミン（２ｍＭ）、ヒドロコルチゾン（５μｇ／ｍｌ）、及びＩＬ−２（２０Ｕ／ｍｌ）を伴ったＲＰＭＩ １６４０である。
【００８５】
薬物生成
対照薬物ストックは、天然化合物又は反応化合物に２ｍｌの緩衝液を添加することにより生成される。当該ストックは、−２０セ氏温度で保存される。当該薬物濃度を、ＣｏｎｊｕＣｈｅｍ Ｉｎｃ．により決定した。
【００８６】
【化４】
【００８７】
細胞感染に先立つ当該化合物の添加
標的細胞は、３７セ氏温度で３０〜６０分間、異なる化合物濃度で培養され、その後、ウイルス（感染の多重度（ＭＯＩ）＝０．１〜１．０）が添加される。プレーティング後、標的細胞は、計７日間の間、異なる濃度の阻害剤の存在下に置かれる。
３〜４日の培養後、各化合物が補充される。
逆転写酵素アッセイを使用して、ＩＣ５０を測定する。
ＣＣ５０（細胞毒性濃度）も全化合物に対して評価される。
３ＴＣは、対照阻害剤として使用される。
【００８８】
ＲＴ結果（ｃｐｍ）（７日）
【表１４】
【００８９】
配列番号９３のＣ３４（Ａｓｐ５の位置）のペプチド配列内への（リンカー−Ｒ１−Ｒ２−Ｍ）の化学的挿入後、Ｃ３４天然（非共有）型（配列番号３２）と比較すると抗ＨＩＶ活性における低下は本質的に観察されない。それ故、配列番号３２内に見出される結合要素（Ｂ）は、当該ウイルス標的と直接接触することが知られるアミノ酸残基（すなわち、ＨＩＶ−１のｇｐ４１のＮ−７反復）上の化学的挿入にもかかわらず、天然Ｃ３４（配列番号９３）とウイルス標的に結合することに同程度の有用性である。
【００９０】
ＨＰＬＣ
【化５】
【００９１】
リン酸緩衝液中の反応
・２ｍＭの各Ｃ３４は、５０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）中に作成した。
・１０ｍＭの天然Ｎ３６は９５％ＥＴＯＨ中に作成した→５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ１０．７）＋１９％のＥＴＯＨ中において２ｍＭに希釈した。
・３７℃で、０．２ｍＭのＤＡＣ：Ｃ３４＋５０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）中の０．２ｍＭのＮ３６＋１．９％のＥＴＯＨ。
・ＨＰＬＣ又はＬＣ／ＭＳにペプチド溶液の１０μｌを注入。
【００９２】
５０／５０リン酸緩衝液＋ＥｔＯＨ中の反応
・２ｍＭの各Ｃ３４は、５０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）中に作成した。
・天然Ｎ３６は９５％ＥＴＯＨ中に２ｍＭで作成した。
・３７℃で、０．２ｍＭのＣ３４＋５０％ＥＴＯＨ／５０％リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７）中、０．２ｍＭのＮ３６。
・ＨＰＬＣ又はＬＣ／ＭＳにペプチド溶液の１０μｌを注入。
【００９３】
結果は、図１〜４に示す。結合親和力を摂動しないことに加えて、Ｃ３４の位置５（すなわち、位置５でのアスパラギン酸）で反応成分の挿入は、Ｎ３６ペプチドの単独リジン残基特異的共有結合を形成する。
【００９４】
ＰＡＧＥ
室温で１時間培養後、少なくとも２０マイクログラムの総Ｎ３６／Ｃ３４ペプチド混合物を各穴に充填し、ネイティブポリアクリルアミドゲル電気泳動（１７．５％アクリルアミド）を使用して分離し、クマシーブリリアントブルーを使用して染色した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥとは違って、ネイティブ−ＰＡＧＥは、３つのＣ３４ペプチドにより囲まれた３つの中心Ｎ３６ペプチドからなる約２８ｋＤａの６へリックス束の構造を視覚化することが可能である。この構造及び他のウイルス間のその類似体の形成は、その後の膜融合事象に極めて重要である。
【００９５】
結果を図５に示す。
【００９６】
標準生体外試験を使用したとき天然Ｃ３４（ＣＪＣ−１６４６、配列番号９３）と同程度有効なＨＩＶ−１の逆転写酵素（ＲＴ）活性を阻害する酵素配列番号３２（ＣＪＣ−１６５５）の能力に加えて、ネイティブＰＡＧＥは、Ｃ３４の天然（未反応性）型（ＣＪＣ−１５６０、配列番号５、及びＣＪＣ−１６４６、配列番号９３）と比較して、Ｃ３４の構造中の多様な位置｛すなわち、Ｎ末端（ＣＪＣ−１５０５及びＣＪＣ−１６４８、配列番号５５）；Ｄ５（ＣＪＣ−１６５５、配列番号３２）；Ｉ８（ＣＪＣ−１６５６、配列番号５９）；Ｎ９（ＣＪＣ−１１７９、Ｎ９ Ｌｙｓ（ＡＥＥＡ）−ＭＰＡを伴うＣ３４）、及びＫ３５（ＣＪＣ−１５０９）｝へのリンカー及びＲ１の挿入がＨＩＶ−１のｇｐ４１糖蛋白質のＮ−７反復由来のその標的Ｎ３６ペプチド（ＣＪＣ−１５９２）に結合することからＣ３４を妨げないことを示す。
【００９７】
本発明はそれらの特定の態様に関連して記載されるが、さらなる改良が可能であり、本出願は、一般的に、本発明の原則に加えて、本発明のいずれの変更、使用又は適応をも含むことを意図され、本発明の属する分野において知られた又は慣習的な手順に含まれるくらい近いような、及び上記の本質的特徴に適用され得るような、並びに当該添付の請求項の範囲に含まれるような本発明の開示からの出発物の如きものを含むと理解されるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００９８】
【図１】図１は、Ｃ３４：Ｎ３６（１６５５／１７２２）二量体のＨＰＬＣを示す。
【図２】図２は、Ｃ３４：Ｎ３６（１６５５／１７２３）二量体のＨＰＬＣを示す。
【図３】図３は、Ｃ３４：Ｎ３６（１６４６／１７２２）二量体のＨＰＬＣを示す。
【図４】図４は、共有結合Ｎ３６：Ｃ３４二量体のＬＣ／ＭＳ同定を示す。
【図５】図５は、Ｎ３６／Ｃ３４複合体のネイティブＰＡＧＥを示す。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）：
Ｂ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍ （Ｉ）
｛式中：
−Ｂは、ウイルス標的を認識し、かつ、結合するための結合要素であり;
−Ｒ１は、前記標的と共有結合を形成するように前記ウイルス標的の官能基と反応するための原子の第１基であり；
Ｒ２は原子の第２基であり；ここで、Ｒ１及びＲ２は、Ｒ１と前記標的との間の共有結合の形成がＲ１とＲ２との間の結合の開裂を生じさせて、Ｒ２−Ｍを遊離させる；そして
−Ｍは、水素原子、及び医薬として許容される成分からなる群より選択される。｝又は、以下の式（ＩＩ）
Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍ （ＩＩ）
｛式中、
−Ｂは、ウイルス標的を認識し、かつ、結合するための結合要素であり;
−Ｒ１は、前記標的と共有結合を形成するように前記標的の官能基と反応するための原子の第１基であり；
−Ｒ２は原子の第２基であり；ここで、Ｒ１及びＲ２は、Ｒ１と前記標的との間の共有結合の形成がＲ１とＲ２との間の結合の開裂を生じさせて、Ｂ−Ｒ２を遊離させる；そして
−Ｍは、医薬として許容される成分である。｝
を有する抗ウイルス性化合物。
【請求項２】
前記Ｒ１が、以下の式（ＩＩＩ）：
Ｘ−Ｃ（Ｙ） （ＩＩＩ）
｛式中、
Ｘは存在しないか、又はアルキル基、及び置換又は非置換フェニル基からなる群より選択され、；
Ｙは、水素原子、硫黄原子、酸素原子、及び窒素原子からなる群より選択される。｝を有する基から選択される、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３】
前記置換フェニル基が、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３からなる群より選択される少なくとも１つの置換基を担持する、請求項２に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、硫黄、酸素、リン、及び窒素からなる群より選択される、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項５】
Ｙが、硫黄、及び酸素からなる群より選択される、請求項２に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項６】
前記Ｒ２が、酸素、アセタール、ヘミアセタール、ホスホアセタール、硫黄、アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアミノ誘導体、置換又は非置換フェノキシ、置換又は非置換チオフェノキシ、及び置換又は非置換アミノフェノキシ誘導体からなる群より選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項７】
前記置換フェノキシ、チオフェノキシ、又はアミノフェノキシ誘導体が、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３からなる群より選択される少なくとも１つの置換基を担持する置換フェニル基を含む、請求項６に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項８】
前記Ｒ１−Ｒ２が、アルキルエステル、アリールエステル、アルキルチオエステル、アリールチオエステル、ホスホエステル、オルトエステル、イミデート、混合無水物、ジスルフィド、アミド、及びチオアミンから選択される官能基を含む、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項９】
前記Ｒ１がカルボニル基であり、そして前記Ｒ２が酸素原子である、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１０】
前記ウイルス標的の官能基がＮＨ２からなる群より選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１１】
前記結合要素が、有機化合物、アミノ酸配列、ペプチド、蛋白質、核酸配列、小分子、それらの模倣剤、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１２】
前記ウイルス標的が、ウイルス、感染細胞の表面上に発現されたウイルス抗原、ウイルス又は感染細胞上の表面受容体のウイルス性抗原に特異的なリガンド、感染細胞表面受容体、ペプチド、感染細胞又はそれらの細胞膜、感染細胞の表面に発現されたウイルス蛋白質、それらの断片又はそれらの特異的領域からなる群より選択される、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１３】
前記ウイルスタンパク質がｇｐ４１である、請求項１２に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１４】
前記特異的領域が、ｇｐ−４１のＮ−７反復、及びＣ−７反復である、請求項１２に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１５】
前記ウイルス標的がウイルスである、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１６】
前記ウイルスが、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−１及び２）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エボラウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、エプスタインバーウイルス、肝炎ウイルス、ＨＴＬＶ−１及び２、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）、はしかウイルス（ＭｅＶ）、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、及びダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルスからなる群より選択される、請求項１５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１７】
前記結合要素が、前記ウイルスのｇｐ４１糖蛋白質又はそれらの類似体の領域に対する結合親和力を有する、請求項１６に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１８】
前記結合要素が、以下の：
【化１】
からなる群より選択されるアミノ酸配列を有する、請求項１７に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１９】
前記アミノ酸配列のＮ末端に、１つのアセチル又は少なくとも１つのシステイン酸をさらに含む、請求項１８に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２０】
前記Ｍが治療薬を含む、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２１】
前記治療薬が、薬物、アンチセンスオリゴヌクレオチド、抗ウイルス剤、ウイルス侵入阻害剤、及び抗融合剤（ａｎｔｉ−ｆｕｓｉｏｇｅｎｉｃ ａｇｅｎｔ）からなる群より選択される、請求項２０に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２２】
前記Ｂと前記Ｒ１との間にリンカーＬ１をさらに含む、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２３】
前記Ｒ２と前記Ｍとの間にリンカーＬ２をさらに含む、請求項１又は２２に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２４】
前記リンカーが１〜２０原子の基であり、ここで当該原子は炭素、窒素、酸素、硫黄、及びリンからなる群より選択される、請求項２２又は２３に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２５】
前記リンカーは、アルキレン基、ポリオキシアルキレン基、アミノ酸、及びオリゴペプチドからなる群より選択される、請求項２２又は２３に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２６】
前記アルキレン基が、１〜２５の炭素原子を含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２７】
前記アルキレン基が、２〜１６の炭素原子を含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２８】
前記ポリオキシアルキレン基が、２〜３炭素原子のアルキレン基を含み、そして１〜８ユニットを含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２９】
前記ポリオキシアルキレン基が、２〜３炭素原子のアルキレン基を含み、そして１〜６ユニットを含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３０】
前記オリゴペプチドが、１〜８のアミノ酸を含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３１】
前記オリゴペプチドが、１〜６のアミノ酸を含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３２】
前記リンカーが、式−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−を有し、ここでｎが１〜２５で変化する整数である、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３３】
前記リンカーが、式−ＮＨ−（ＣＨ２）５−Ｃ（Ｏ）−である、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３４】
前記リンカーが、式−ＮＨ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−である、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３５】
配列番号２０〜９２からなる群より選択される抗ウイルス性化合物。
【請求項３６】
医薬として許容される担体とともに請求項１〜３５のいずれか１項に記載の化合物を含む、ウイルス標的の活性を調節するための抗ウイルス性組成物であって；
前記結合要素が、ウイルスの細胞感染の膜融合過程の活性に関わる前記ウイルス標的の領域に対する結合親和力を有し、それにより、前記標的の領域への前記化合物の結合が、前記標的の活性の妨害又は低下をもたらす、前記抗ウイルス性組成物。
【請求項３７】
単独で又は医薬として許容される担体とともに、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の化合物を対象に投与することを含む、前記対象におけるウイルス標的の活性を調節する方法であって；
前記結合要素が、ウイルスの細胞感染の膜融合過程の活性に関わる前記ウイルス標的の領域に対する結合親和力を有し、それにより、前記標的の領域への前記化合物の結合が、前記標的の活性の妨害又は低下をもたらす、前記方法。
【請求項３８】
対象の抗ウイルス治療において使用される薬物の製造のための化合物の使用であって、当該化合物が請求項１〜３５のいずれか１項に記載の化合物である前記使用。
【請求項３９】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−１及び２）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エボラウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、エプスタインバーウイルス、肝炎ウイルス、ＨＴＬＶ−１及び２、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）、はしかウイルス（ＭｅＶ）、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、及びダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルスからなる群より選択されるウイルスにより、前記対象が感染している、請求項３８に記載の使用。
【請求項１】
以下の式（Ｉ）：
Ｂ−Ｒ１−Ｒ２−Ｍ （Ｉ）
｛式中：
−Ｂは、ウイルス標的を認識し、かつ、結合するための結合要素であり;
−Ｒ１は、前記標的と共有結合を形成するように前記ウイルス標的の官能基と反応するための原子の第１基であり；
Ｒ２は原子の第２基であり；ここで、Ｒ１及びＲ２は、Ｒ１と前記標的との間の共有結合の形成がＲ１とＲ２との間の結合の開裂を生じさせて、Ｒ２−Ｍを遊離させる；そして
−Ｍは、水素原子、及び医薬として許容される成分からなる群より選択される。｝又は、以下の式（ＩＩ）
Ｂ−Ｒ２−Ｒ１−Ｍ （ＩＩ）
｛式中、
−Ｂは、ウイルス標的を認識し、かつ、結合するための結合要素であり;
−Ｒ１は、前記標的と共有結合を形成するように前記標的の官能基と反応するための原子の第１基であり；
−Ｒ２は原子の第２基であり；ここで、Ｒ１及びＲ２は、Ｒ１と前記標的との間の共有結合の形成がＲ１とＲ２との間の結合の開裂を生じさせて、Ｂ−Ｒ２を遊離させる；そして
−Ｍは、医薬として許容される成分である。｝
を有する抗ウイルス性化合物。
【請求項２】
前記Ｒ１が、以下の式（ＩＩＩ）：
Ｘ−Ｃ（Ｙ） （ＩＩＩ）
｛式中、
Ｘは存在しないか、又はアルキル基、及び置換又は非置換フェニル基からなる群より選択され、；
Ｙは、水素原子、硫黄原子、酸素原子、及び窒素原子からなる群より選択される。｝を有する基から選択される、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３】
前記置換フェニル基が、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３からなる群より選択される少なくとも１つの置換基を担持する、請求項２に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、硫黄、酸素、リン、及び窒素からなる群より選択される、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項５】
Ｙが、硫黄、及び酸素からなる群より選択される、請求項２に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項６】
前記Ｒ２が、酸素、アセタール、ヘミアセタール、ホスホアセタール、硫黄、アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアミノ誘導体、置換又は非置換フェノキシ、置換又は非置換チオフェノキシ、及び置換又は非置換アミノフェノキシ誘導体からなる群より選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項７】
前記置換フェノキシ、チオフェノキシ、又はアミノフェノキシ誘導体が、ハロゲン、ＮＯ２、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＦ、ＣＦ３、ＣＣｌ３、ＣＢｒ３、Ｃ＝Ｎ、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＣＨＯ、ＮＨＲ、ＯＨ、ＮＨＣＯＣＨ３、ＯＣＨ３、ＣＨ３、及びＣＨ２ＣＨ３からなる群より選択される少なくとも１つの置換基を担持する置換フェニル基を含む、請求項６に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項８】
前記Ｒ１−Ｒ２が、アルキルエステル、アリールエステル、アルキルチオエステル、アリールチオエステル、ホスホエステル、オルトエステル、イミデート、混合無水物、ジスルフィド、アミド、及びチオアミンから選択される官能基を含む、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項９】
前記Ｒ１がカルボニル基であり、そして前記Ｒ２が酸素原子である、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１０】
前記ウイルス標的の官能基がＮＨ２からなる群より選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１１】
前記結合要素が、有機化合物、アミノ酸配列、ペプチド、蛋白質、核酸配列、小分子、それらの模倣剤、及びそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１２】
前記ウイルス標的が、ウイルス、感染細胞の表面上に発現されたウイルス抗原、ウイルス又は感染細胞上の表面受容体のウイルス性抗原に特異的なリガンド、感染細胞表面受容体、ペプチド、感染細胞又はそれらの細胞膜、感染細胞の表面に発現されたウイルス蛋白質、それらの断片又はそれらの特異的領域からなる群より選択される、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１３】
前記ウイルスタンパク質がｇｐ４１である、請求項１２に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１４】
前記特異的領域が、ｇｐ−４１のＮ−７反復、及びＣ−７反復である、請求項１２に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１５】
前記ウイルス標的がウイルスである、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１６】
前記ウイルスが、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−１及び２）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エボラウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、エプスタインバーウイルス、肝炎ウイルス、ＨＴＬＶ−１及び２、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）、はしかウイルス（ＭｅＶ）、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、及びダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルスからなる群より選択される、請求項１５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１７】
前記結合要素が、前記ウイルスのｇｐ４１糖蛋白質又はそれらの類似体の領域に対する結合親和力を有する、請求項１６に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１８】
前記結合要素が、以下の：
【化１】
からなる群より選択されるアミノ酸配列を有する、請求項１７に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項１９】
前記アミノ酸配列のＮ末端に、１つのアセチル又は少なくとも１つのシステイン酸をさらに含む、請求項１８に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２０】
前記Ｍが治療薬を含む、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２１】
前記治療薬が、薬物、アンチセンスオリゴヌクレオチド、抗ウイルス剤、ウイルス侵入阻害剤、及び抗融合剤（ａｎｔｉ−ｆｕｓｉｏｇｅｎｉｃ ａｇｅｎｔ）からなる群より選択される、請求項２０に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２２】
前記Ｂと前記Ｒ１との間にリンカーＬ１をさらに含む、請求項１に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２３】
前記Ｒ２と前記Ｍとの間にリンカーＬ２をさらに含む、請求項１又は２２に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２４】
前記リンカーが１〜２０原子の基であり、ここで当該原子は炭素、窒素、酸素、硫黄、及びリンからなる群より選択される、請求項２２又は２３に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２５】
前記リンカーは、アルキレン基、ポリオキシアルキレン基、アミノ酸、及びオリゴペプチドからなる群より選択される、請求項２２又は２３に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２６】
前記アルキレン基が、１〜２５の炭素原子を含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２７】
前記アルキレン基が、２〜１６の炭素原子を含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２８】
前記ポリオキシアルキレン基が、２〜３炭素原子のアルキレン基を含み、そして１〜８ユニットを含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項２９】
前記ポリオキシアルキレン基が、２〜３炭素原子のアルキレン基を含み、そして１〜６ユニットを含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３０】
前記オリゴペプチドが、１〜８のアミノ酸を含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３１】
前記オリゴペプチドが、１〜６のアミノ酸を含む、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３２】
前記リンカーが、式−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−を有し、ここでｎが１〜２５で変化する整数である、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３３】
前記リンカーが、式−ＮＨ−（ＣＨ２）５−Ｃ（Ｏ）−である、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３４】
前記リンカーが、式−ＮＨ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−である、請求項２５に記載の抗ウイルス性化合物。
【請求項３５】
配列番号２０〜９２からなる群より選択される抗ウイルス性化合物。
【請求項３６】
医薬として許容される担体とともに請求項１〜３５のいずれか１項に記載の化合物を含む、ウイルス標的の活性を調節するための抗ウイルス性組成物であって；
前記結合要素が、ウイルスの細胞感染の膜融合過程の活性に関わる前記ウイルス標的の領域に対する結合親和力を有し、それにより、前記標的の領域への前記化合物の結合が、前記標的の活性の妨害又は低下をもたらす、前記抗ウイルス性組成物。
【請求項３７】
単独で又は医薬として許容される担体とともに、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の化合物を対象に投与することを含む、前記対象におけるウイルス標的の活性を調節する方法であって；
前記結合要素が、ウイルスの細胞感染の膜融合過程の活性に関わる前記ウイルス標的の領域に対する結合親和力を有し、それにより、前記標的の領域への前記化合物の結合が、前記標的の活性の妨害又は低下をもたらす、前記方法。
【請求項３８】
対象の抗ウイルス治療において使用される薬物の製造のための化合物の使用であって、当該化合物が請求項１〜３５のいずれか１項に記載の化合物である前記使用。
【請求項３９】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ−１及び２）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、エボラウイルス、デング熱ウイルス、風疹ウイルス、エプスタインバーウイルス、肝炎ウイルス、ＨＴＬＶ−１及び２、セムリキ森林ウイルス（ＳＦＶ）、はしかウイルス（ＭｅＶ）、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、及びダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルスからなる群より選択されるウイルスにより、前記対象が感染している、請求項３８に記載の使用。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【公表番号】特表２００８−５０５０５９（Ｐ２００８−５０５０５９Ａ）
【公表日】平成２０年２月２１日（２００８．２．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５１１８０２（Ｐ２００７−５１１８０２）
【出願日】平成１７年５月６日（２００５．５．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００５／０００６８９
【国際公開番号】ＷＯ２００５／１０８４１８
【国際公開日】平成１７年１１月１７日（２００５．１１．１７）
【出願人】（５０６２７２８４０）コンジュシェム バイオテクノロジーズ インコーポレイティド (3)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年２月２１日（２００８．２．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年５月６日（２００５．５．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００５／０００６８９
【国際公開番号】ＷＯ２００５／１０８４１８
【国際公開日】平成１７年１１月１７日（２００５．１１．１７）
【出願人】（５０６２７２８４０）コンジュシェム バイオテクノロジーズ インコーポレイティド (3)
【Ｆターム（参考）】
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