糖化最終生成物に親和性を有するペプチド、およびそれを用いた吸着体
【課題】 体液（例えば血液、血漿など）に存在する糖化最終生成物を選択的に吸着除去することにより、糖尿病性腎症等の疾患を改善する目的で使用される吸着体、および前記吸着体を用いた吸着装置が求められている。糖化最終生成物に対して優れた親和性を有するペプチド、および前記ペプチドを水不溶性担体に固定した吸着体を提供することを目的とする。
【解決手段】 糖化最終生成物（ＡＧＥ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ Ｅｎｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ））に親和性を有するペプチド、ＡＧＥに対して親和性を有する吸着体、および吸着装置を提供する。
【解決手段】 糖化最終生成物（ＡＧＥ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ Ｅｎｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ））に親和性を有するペプチド、ＡＧＥに対して親和性を有する吸着体、および吸着装置を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、体液（例えば血液、血漿など）に存在する糖化最終生成物を選択的に吸着除去することにより、糖尿病性腎症等の疾患を改善する目的で使用される吸着体、および前記吸着体を用いた吸着装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖化最終生成物はＡＧＥ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ Ｅｎｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）と呼ばれ、糖尿病性腎症、動脈硬化症、透析アミロイドーシス、腎不全、老化等に関与していると考えられている。ＡＧＥの例としては、ペントシジン、クロスリン、フルオロリンク、ピロピリジン、カルボキシメチルリジン、ピラリン等の化合物が挙げられる（非特許文献１を参照）。ＡＧＥは様々な疾患に関与すると考えられていることから、ＡＧＥの産生を抑制する薬剤の開発や、血液中のＡＧＥ濃度を低下させる手法の開発が求められている。
【０００３】
ＡＧＥに親和性のある蛋白質としてＡＧＥ受容体（ＲＡＧＥ）が知られ、ＲＡＧＥ遺伝子はクローニングされている（非特許文献２を参照）。また、ＲＡＧＥのアミノ酸配列のうちＡＧＥとの親和性を有する領域が、アミノ酸配列２３番目〜１２０番目のＶドメインと呼ばれる細胞外ドメインであること、特に細胞外ドメインの中のアミノ酸配列２３番目〜５２番目の領域であることが示唆されている（特許文献１を参照）。
【特許文献１】米国特許公報 ６、５５５、６５１号
【特許文献２】米国公開特許 ＵＳ２００１／５３３５７号
【特許文献３】日本公開特許 特開２００４−５７５３６号
【特許文献４】日本公開特許 特開２００４−３０６４９９号
【特許文献５】日本公開特許 特開２００４−３０６５００号
【非特許文献１】ＤＯＪＩＮ Ｎｅｗｓ Ｎｏ．１０６（２００３年）１〜８ページ
【非特許文献２】Ｊｏｕｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９２年）２６７巻、１４９８７〜１４９９７ページ
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、ＲＡＧＥを形成する部分ペプチドをＡＧＥ吸着リガンドとして利用しようとした場合のＡＧＥ吸着性能は不明である。また、ＡＧＥを吸着するリガンドとなるペプチドを合成する場合、ペプチドのアミノ酸数が多いと合成および精製が困難になるという課題がある。
【０００５】
そこで、本発明は、上述の課題を解決するためになされたもので、ＡＧＥに対して優れた親和性を有するペプチド、および前記ペプチドを水不溶性担体に固定した吸着体を提供することを目的とする。また、前記吸着体を有する吸着装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
鋭意検討の結果、ＲＡＧＥのうちの、特定の部分ペプチドが、ＡＧＥに対して親和性を有する。よって、本発明が提供するのは以下の通りである：
[１]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチド；
（ここで、Ｘ１＝Ｃ、Ｋ、または欠失
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただし、アミノ酸配列ＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮ（配列番号１）およびその部分配列を除く。
【０００７】
[２]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失）。ただし、アミノ酸配列ＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣ（配列番号２）およびその部分配列を除く。
[３]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただしアミノ酸配列ＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱ（配列番号３）およびその部分配列を除く。
[４]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただしアミノ酸配列ＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮ（配列番号４）およびその部分配列を除く。
[５]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２７−[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]nを含むペプチド；
（ここで、
Ｘ２７＝Ｃ、またはＫ
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
[６]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]n−Ｘ３２からなるペプチド；
（ここで、
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、
Ｘ３２＝Ｃ、またはＫ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
[７]
[１]〜[６]のいずれかに記載のペプチドであって、Ｎ末端アミノ酸残基に、アセチル基、またはビオチン基が結合したことを特徴とするペプチド。
[８]
[１]〜[６]のいずれかに記載のペプチドであって、Ｃ末端アミノ酸残基にアミノ基が結合したことを特徴とするペプチド。
[９]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、Ｘ１＝Ｃ、Ｋ、または欠失
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。
該アミノ酸配列は好ましくは、ＣＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮ（配列番号５）およびその部分配列である。該アミノ酸配列は好ましくはまた、ＬＥＷＫ（配列番号６）およびＬＥＷＫＬＮ（配列番号７）である。
[１０]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失）。該アミノ酸配列は好ましくは、ＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣ（配列番号２）およびその部分配列である。
[１１]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。該アミノ酸配列は好ましくは、ＣＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱ（配列番号８）およびその部分配列である。
[１２]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。該アミノ酸配列は好ましくは、ＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮ（配列番号４）およびその部分配列である。
[１３]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２７−[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]nを含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２７＝Ｃ、またはＫ
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、かつ
ｎは２以上の整数である）。該アミノ酸配列は、好ましくは、ＣＬＥＷＫＬＥＷＫ（配列番号９）である。
[１４]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]n−Ｘ３２を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、
Ｘ３２＝Ｃ、Ｋ、かつ
ｎは２以上の整数である）。該アミノ酸配列は好ましくは、ＬＥＷＫＬＥＷＫＣ（配列番号１０）である。
[１５]
[９]〜[１４]いずれかに記載の吸着体であって、ペプチドのＮ末端アミノ酸残基に、アセチル基、またはビオチン基が結合したことを特徴とする吸着体。
[１６]
[９]〜[１４]のいずれかに記載の吸着体であって、ペプチドのＣ末端アミノ酸残基にアミノ基が結合したことを特徴とする吸着体。
[１７]
[９]〜[１４]いずれかに記載の吸着体であって、前記水不溶性担体が多孔質であることを特徴とする吸着体。
[１８]
[９]〜[１４]いずれか記載の吸着体であって、前記水不溶性担体が親水性であることを特徴とする吸着体。
[１９]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着装置であって、ここで該吸着装置は、[９]〜[１８]いずれかに記載の吸着体を含み、前記吸着体が液体の入口、出口を有する容器内に含まれ、かつ前記吸着体が前記容器の外へ流出することを防ぐ防止手段が備えられている、吸着装置。
[２０]
前記吸着体と接触する液体が、血液、血漿、血清からなる群から選択されることを特徴とする[１９]に記載の吸着装置。
ここで、それぞれのアルファベットはアミノ酸の一文字表記である（Ｐ＝プロリン、Ｇ＝グリシン、Ａ＝アラニン、Ｖ＝バリン、Ｌ＝ロイシン、Ｉ＝イソロイシン、Ｃ＝システイン、Ｋ＝リジン、Ｒ＝アルギニン、Ｈ＝ヒスチジン、Ｑ＝グルタミン酸、Ｎ＝グルタミン、Ｄ＝アスパラギン酸、Ｅ＝グルタミン酸、Ｗ＝トリプトファン、Ｙ＝チロシン、Ｆ＝フェニルアラニン、Ｔ＝トレオニン、Ｓ＝セリン）。
【０００８】
本発明によれば、ＡＧＥに対して親和性の高いペプチドが得られる。本発明によれば、ＡＧＥに親和性を有するリガンドのアミノ酸の数が少ないので、高次構造が変化する等の影響が緩和される。また、本発明によれば、ＡＧＥに対して親和性を有する化合物がペプチドであるので、高温耐性を有する。ここにいう高温耐性とは、約５０℃以上、好ましくは約１００℃、およびより好ましくは約１２１℃以上に暴露された場合、ＡＧＥに対する親和性が実質的に低下しないことを意味する。好ましくは、本発明のペプチドまたは吸着体は、蒸気滅菌等、好ましくは高圧蒸気滅菌しうる。その後においてもＡＧＥへの親和性が低下することを緩和しうる。ここにいう高圧蒸気殺菌は、例えば１２１℃において１５分間行う。
【０００９】
さらには、ペプチドが少ない、好ましくは約１６残基以下であるので、ペプチドを合成する際に不純物が少なくて済み、さらには求めるペプチドの収率、回収率等の点で有利である。さらに、ペプチド作製に伴うコストの低減を図ることができる。
【００１０】
なお、本発明のペプチドは、部分的にＡＧＥと類似の構造を有する、３−デオキシグルコソン、メチルグリオキサール、グリオキサール、グリセルアルデヒド、グリセルアルデヒド ３−リン酸等のＡＧＥ前駆体や、糖化蛋白質に親和性を有しうる。
【００１１】
その機能に影響を及ぼすことなく、ペプチドまたはタンパク質中のアミノ酸位置を、保存的な手法で交換することが可能なことは、当業者には公知である。本発明の場合、「保存的」交換の典型的な例としては、以下のグループ： グループＩ：Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、 グループＩＩ：Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、 グループＩＩＩ：Ｓｅｒ、ＴｈｒグループＩＶ：Ｌｙｓ、Ａｒｇ；の中での交換を意味するものである。その機能に影響を及ぼさない場合、ペプチドまたは蛋白質中のアミノ酸のうち１または数個を、置換、欠失および／又は付加してもよい。
【００１２】
また、本発明によれば、リジン、グルタミン酸、アスパラギン酸等の、塩基性アミノ酸または酸性アミノ酸の割合が高くなるようにペプチドを設計でき、そのためペプチドの合成と精製が容易になるという利点を有する。また、Ｎ末端アミノ酸残基および／またはＣ末端アミノ酸残基がシステインまたはリジンであるので、システインのＳＨ基、またはリジンのアミノ基を用いて、共有結合による水不溶性担体への固定化が容易である。
【００１３】
好ましくはｎが２以上の整数である。この場合、ＡＧＥと親和性を有する領域が複数存在するので、ＡＧＥとの親和性が向上し、より多くのＡＧＥを吸着できる。
【００１４】
また、本発明は、Ｎ末端アミノ酸残基に、アセチル基、またはビオチン基が結合したことを特徴とする糖化最終生成物に親和性を有するペプチドに関する。本明細書では、ペプチドまたは吸着体におけるペプチドは、ペプチドを構成する全部または一部のアミノ酸が、アミノ基またはカルボキシル基において、任意の置換基、例えばアセチル基等の置換基によって修飾されたものも含む。
【００１５】
本発明によれば、エンドペプチダーゼ等の蛋白質分解酵素等の作用によって、Ｎ末端のアミノ酸残基が脱離する等のペプチド分解作用を抑制することができる。
【００１６】
さらに、本発明は、Ｃ末端アミノ酸残基が、アミノ基またはカルボキシル基において、任意の置換基、例えばアミノ基で置換されたことを特徴とする糖化最終生成物に親和性を有するペプチドに関する。
【００１７】
Ｃ末端のアミノ酸残基が例えばシステインであると、特に高温条件下においてラセミ化され、ペプチドが不均一になりやすいが、Ｃ末端のアミノ酸をアミノ基で保護することにより不均一になることを抑制できる。ペプチドは１種または２種以上を混合して用いることもできる。
【００１８】
本明細書で使用するように、「部分配列」は、アミノ酸配列の文脈では、あるアミノ酸配列の一方または両方の端の、１または２以上のアミノ酸を、切断して得られる配列を意味する。そのような部分配列は、オリジナル配列が有する機能と同等の機能を有する限り、本発明の目的のために使用し得る。
【００１９】
本発明のペプチドは、自体公知の方法にしたがって製造できる。化学的方法、例えばＦｍｏｃ法またはｔＢｏｃ法を使用する合成法、または生物学的方法、例えば大腸菌等の微生物を使用する遺伝子組み換え技法によって、目的のペプチドを生産できる。本発明では、ペプチドが比較的短いため、化学的方法が簡便である。本発明はまた、上記本発明のペプチドまたは吸着体の製造方法を提供する。
【００２０】
本発明のペプチドはそれ自体、ＡＧＥに対する吸着体として、使用しうる。また、本発明のいずれかのペプチドを水不溶性担体に固定した糖化最終生成物に親和性を有する吸着体に関する。同様に、ペプチドは１種または２種以上を水不溶性担体に固定化することもできる。水不溶性担体としては、ガラスビーズ、シリカゲルなどの無機担体、架橋ポリビニルアルコール、架橋ポリアクリレート、架橋ポリアクリルアミド、架橋ポリスチレンなどの合成高分子や結晶性セルロース、架橋セルロース、架橋アガロース、架橋デキストランなどの多糖類からなる有機担体、さらにはこれらの組み合わせによって得られる有機-有機、有機-無機などの複合担体等が挙げられる。
なお、水不溶性担体の形態としては、ビーズ状、線維状、膜状、中空糸膜状等から選ぶことができるが、体外循環を行う際に体液の流通面の点で有利であることから、ビーズ状が特に好ましい。ビーズ状の平均粒径は扱いやすいという点で１０〜２５００μｍのものが好ましく、２５〜８００μｍのものが特に好ましい。
【００２１】
なお、水不溶性担体は表面に官能基が存在していると、リガンドの固定化に好都合である。官能基としては、水酸基、アミノ基、アルデヒド基、カルボキシル基、チオール基、シラノール基、アミド基、エポキシ基、サクシニルイミド基、酸無水物基等が挙げられる。なお、架橋剤としてグルタルアルデヒド等を用いてもよい。
【００２２】
なお、水不溶性担体としては硬質担体、軟質担体のいずれも用いることができる。体外循環治療用の吸着材としてカラムに充填して使用する際に、担体の強度が弱いと、通液する際に目詰まりを生じる恐れがある。そこで、担体には十分な機械的強度が求められるので、硬質担体であることがより好ましい。
【００２３】
このとき、水不溶性担体は、表面積が大きいことが好ましいため、多孔質であることが好ましい。水不溶性担体が、適当な大きさの細孔を多数有する構造が好ましい。また、多孔質の排除限界分子量は、ＡＧＥを効率良く吸着するため、ＡＧＥの分子量より大きいことが好ましい。なお、排除限界分子量が大きすぎる場合には担体の強度が低下し、かつ表面積が減少するため、排除限界分子量は２５万以上５００万以下であることがより好ましい。
【００２４】
さらに、水不溶性担体が親水性であると、非特異的吸着が比較的少なくて好ましい。水不溶性担体としては、セルロース、キトサン、およびデキストラン等の多糖類、ポリビニルアルコール、エチレン-酢酸ビニル共重合体鹸化物、ポリアクリルアミド、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリメタクリル酸メチル、ポリアクリル酸グラフト化ポリエチレン、ポリアクリルアミドグラフト化ポリエチレン、ガラス等からなる水不溶性担体が挙げられる。市販品としては多孔質セルロース担体であるＧＣＬ２０００ｍ、エポキシ基で活性化されたポリメタクリルアミドであるオイパーギットＣ２５０Ｌ、臭化シアン活性化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ等が挙げられる。なお、上述の水不溶性担体はそれぞれ単独で用いてもよいし、任意の２種類以上を混合してもよい。
【００２５】
なお、水不溶性担体の多孔質の構造としては、吸着体の単位体積あたりの吸着能から考えて、表面多孔性よりも全多孔性が好ましい。さらには、空孔容積が２０％以上であり、比表面積が３ｍ2／ｇ以上であることが好ましい。
【００２６】
また、本発明の吸着体を有し、前記吸着体が液体の入口、出口を有する容器内に含まれ、かつ前記吸着体が前記容器の外へ流出することを防ぐ防止手段が備えられている糖化最終生成物に親和性を有する吸着装置に関する。
【００２７】
このようにすると、吸着装置を体外循環回路に組み込むことができ、患者の体液から効率よくオンラインでＡＧＥを除去することが可能であり、操作も簡単で好ましい。
【００２８】
さらに、本発明は、吸着体と接触する液体が、体液、例えば血液、血漿、血清からなる群から選択されることを特徴とする。本発明はまた、哺乳動物対象のＡＧＥ介在性疾患、例えば糖尿病、糖尿病性腎症、動脈硬化症、透析アミロイドーシス、腎不全、老化等を処置する方法であって、ここで必要のある哺乳動物対象に由来する体液を、本発明のペプチドまたは吸着体と接触させることを含む方法を提供する。哺乳動物対象は、好ましくはヒト患者であるが、ヒト以外の対象も可能である。
【発明の効果】
【００２９】
本発明によれば、ＡＧＥに対して親和性の高いペプチドが得られる。また、ＡＧＥに対して親和性を有する化合物がペプチドであるので、高圧蒸気滅菌等を行うことによってＡＧＥへの親和性が低下することを緩和できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３０】
図１は、ＡＧＥを吸着除去する目的で体外循環を行う際に用いられる吸着カラムの概略断面図である。図１において、吸着カラム７は、血液等の液体の流出口１および流入口２、ＡＧＥに対する吸着体３、ＡＧＥに対する吸着体３の流出を防止する第１のフィルター４および第２のフィルター５、流出口１および流入口２を有し、ＡＧＥに対する吸着体３を封入するカラム６から構成される。カラム６の形状および材質は特に限定はないが、カラム内にＡＧＥに対する吸着体を均一に詰めることができ、また、血液や血漿等の体液を効率よくＡＧＥに対する吸着体と接触させることができるので、カラムの容量が２０〜４００ｍＬ、カラムの直径が２〜１０ｃｍである筒状容器が好ましい。
【００３１】
ＡＧＥに対する吸着体３については、ＡＧＥに対して親和性を有するペプチドを水不溶性担体に固定化したペプチド固定化担体を利用することができる。
【００３２】
本発明のペプチドまたは吸着体の、ＡＧＥに対する吸着能は、例えば以下のように評価する。
（１）カルボキシメチルリジンに対する吸着能の評価
ＡＧＥ吸着能の評価は、ＡＧＥの一種であるカルボキシメチルリジンへの吸着能として評価を行う。本発明のペプチド固定化担体の各５０μＬに対して、糖尿病患者血清３００μＬをそれぞれ加えて、３７℃で２時間振とうする。上清のカルボキシメチルリジン濃度（Ｉａ）を、抗カルボキシメチルリジン抗体（和光純薬）を用いたＥＬＩＳＡ法によって求める。同様にして糖尿病患者血清の元のカルボキシメチルリジン濃度（Ｉｂ）を求め、次式に従ってペプチド固定化担体によるカルボキシメチルリジン吸着量を評価する。
吸着率（％）＝｛（Ｉｂ−Ｉａ）／Ｉｂ｝ｘ１００
本発明のペプチドまたは吸着体は、ＡＧＥの一種であるカルボキシメチルリジンに対して十分高い親和性を有し得る。
（２）ＡＧＥに対する吸着能の評価
ペプチド固定化担体各５０μＬに対して、糖尿病患者血清３００μＬをそれぞれ加えて、３７℃で２時間振とうする。上清のＡＧＥ濃度を、抗ＡＧＥ抗体（和光純薬）を用いたＥＬＩＳＡ法によって求める。同様にして糖尿病患者血清の元のＡＧＥ濃度を求め、ペプチド固定化担体によるＡＧＥ吸着量を評価する。本発明のペプチドまたは吸着体は、ＡＧＥに対して十分高い親和性を有し得る。
（３）ペントシジンに対する吸着能の評価
ＡＧＥ吸着能の評価は、ＡＧＥの一種であるペントシジンへの吸着能として評価を行う。作製されるペプチド固定化担体の各５０μＬに対して糖尿病患者血清３００μＬをそれぞれ加えて、３７℃で２時間振とうする。上清のペントシジン濃度を、抗ペントシジン抗体（和光純薬）を用いた競合ＥＬＩＳＡ（Ｅｎｚｙｍｅ Ｌｉｎｋｅｄ Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ Ａｓｓａｙ）法によって求める（腎と透析（１９９９年）４７巻、８６８ページ 参照）。同様にして糖尿病患者血清の元のペントシジン濃度を求め、ペプチド固定化担体によるペントシジン吸着量を評価する。
本発明のペプチドまたは吸着体は、ペントシジンに対して十分高い親和性を有し得る。
【実施例】
【００３３】
以下に、実施例を用いて本発明を説明するが、本発明はこれらのみに限定されるものではない。
【００３４】
（実施例１）臭化シアン（ＣＮＢｒ）活性化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅによる吸着体の作製
１−１．ペプチドリガンドの合成
アミノ酸配列が、
Ｃ−Ａ−Ｑ−Ｎ−Ｉ−Ｔ−Ａ−Ｒ−Ｉ−Ｇ−Ｅ−Ｐ−Ｌ−Ｖ−Ｌ−Ｋ−Ｃ−Ｋ−Ｇ− Ａ−Ｐ−Ｋ−Ｋ−Ｐ−Ｐ−Ｑ−Ｒ−Ｌ−Ｅ−Ｗ−Ｋ（配列番号１１）
であるペプチドを、Ｆｍｏｃ法にて化学合成した。得られたペプチドは０．１％トリフルオロ酢酸水溶液に溶解後、高速液体クロマトグラフィーにて逆相カラム（μＢｏｎｄａｓｐｈｅｒｅ Ｃ１８；日本ウォーターズ）を用いて精製した。これを以下、ペプチド１１という。
【００３５】
同様にして、アミノ酸配列が、
Ｃ−Ｌ−Ｅ−Ｗ−Ｋ−Ｌ−Ｅ−Ｗ−Ｋ（配列番号９）
であるペプチドをＦｍｏｃ法にて化学合成し、精製した。これを以下、ペプチド９という。
【００３６】
１−２．ペプチド固定化担体の作製
臭化シアン（ＣＮＢｒ）活性化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ（排除限界分子量約２，０００万；アマシャム バイオサイエンス社）１ｇを少量の１ｍＭ塩酸水溶液で１５分間膨潤させ、１ｍＭ塩酸水溶液、さらにカップリングバッファー（０．５Ｍ塩化ナトリウム、０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム；ｐＨ８．３）で洗浄した。カップリングバッファー１ｍＬに、合成したペプチド（ペプチド１１および９）を溶解し、上記のように洗浄したＣＮＢｒ活性化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂを添加して２５℃で２時間反応させた。この操作によって、ＣＮＢｒ基で活性化されたＳｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ担体と、ペプチド１１および９との間に共有結合が形成される。カップリングバッファーで洗浄後、ブロッキングバッファー（０．１Ｍトリス−塩酸緩衝液；ｐＨ８．０）を添加して、室温で２時間反応した。次に、後処理バッファー１（０．５Ｍ塩化ナトリウム、０．１Ｍ酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液；ｐＨ４．０）、および後処理バッファー２（０．５Ｍ塩化ナトリウム、０．１Ｍトリス−塩酸緩衝液；ｐＨ８．０）で交互に３回ずつ洗浄し、ＡＧＥ吸着体であるペプチド固定化担体（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ−ペプチド１１、およびＳｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ−ペプチド９）を得た。
【００３７】
（実施例２）
ＧＣＬ２０００ｍによる吸着体の作製
２−１．ペプチドリガンドの合成
アミノ酸配列が、
Ａ−Ｑ−Ｎ−Ｉ−Ｔ−Ａ−Ｒ−Ｉ−Ｇ−Ｅ−Ｐ−Ｌ−Ｖ−Ｌ−Ｋ−Ｃ−ＮＨ2（配列 番号２）
であるペプチドを、Ｆｍｏｃ法にて化学合成した。なお、ラセミ化を防ぐため、Ｃ末端のシステイン（Ｃ）のカルボキシル基をアミノ化してアミドとした。得られたペプチドは０．１％トリフルオロ酢酸水溶液に溶解後、高速液体クロマトグラフィーにて逆相カラム（μＢｏｎｄａｓｐｈｅｒｅ Ｃ１８；日本ウォーターズ）を用いて精製した。これを以下、ペプチド２という。
【００３８】
同様にして、アミノ酸配列が、
Ｃ−Ｒ−Ｉ−Ｇ−Ｅ−Ｐ−Ｌ−Ｖ−Ｌ−Ｋ−Ｃ−Ｋ−Ｇ−Ａ−Ｐ−Ｋ−Ｋ−Ｐ−Ｐ− Ｑ（配列番号８）
Ｃ−Ｋ−Ｇ−Ａ−Ｐ−Ｋ−Ｋ−Ｐ−Ｐ−Ｑ−Ｒ−Ｌ−Ｅ−Ｗ−Ｋ−Ｌ−Ｎ（配列番号 ４）
であるペプチドをＦｍｏｃ法にて化学合成し、精製した。これらを以下、それぞれペプチド８およびペプチド４という。
【００３９】
２−２．セルロース担体の活性化
セルロース系多孔質硬質ゲルであるＧＣＬ２０００ｍ（排除限界分子量３００万；チッソ）９０ｍＬに、水９０ｍＬ、２Ｍ水酸化ナトリウム６０ｍＬを加え、４０℃に予備加温した。ここにエピクロルヒドリン２１ｍＬを加え、４０℃において１時間攪拌した。反応終了後、ガラスフィルター上において水で十分洗浄し、エポキシ活性化セルロース担体を得た。
【００４０】
２−３．ペプチド固定化担体の作製
２−１において合成したペプチド（ペプチド２、ペプチド８、ペプチド４）各０．５ｍｇを０．０５Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ１０）０．５ｍＬにそれぞれ溶解し、０．０１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ１０に再調整後、全量を１．０ｍＬとした。このペプチド溶液を、１−２で作製したエポキシ活性化セルロース担体０．４ｍＬにそれぞれ加えて、３７℃で１６時間振とうした。この操作によって、エポキシ基で活性化されたセルロース担体と、ペプチド２、ペプチド８、ペプチド４との間に共有結合が形成される。反応終了後、十分量のＰＢＳ溶液で洗浄し、ＡＧＥ吸着体であるペプチド固定化担体（ＧＣＬ２０００ｍ−ペプチド２、ＧＣＬ２０００ｍ−ペプチド８、およびＧＣＬ２０００ｍ−ペプチド４）を得た。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】本発明のＡＧＥに対する吸着装置の一実施例における概略断面図
【符号の説明】
【００４２】
１ 流入口
２ 流出口
３ ＡＧＥに親和性を有するペプチド
４、５ フィルター
６ カラム
７ 吸着体
【技術分野】
【０００１】
本発明は、体液（例えば血液、血漿など）に存在する糖化最終生成物を選択的に吸着除去することにより、糖尿病性腎症等の疾患を改善する目的で使用される吸着体、および前記吸着体を用いた吸着装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖化最終生成物はＡＧＥ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ Ｅｎｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）と呼ばれ、糖尿病性腎症、動脈硬化症、透析アミロイドーシス、腎不全、老化等に関与していると考えられている。ＡＧＥの例としては、ペントシジン、クロスリン、フルオロリンク、ピロピリジン、カルボキシメチルリジン、ピラリン等の化合物が挙げられる（非特許文献１を参照）。ＡＧＥは様々な疾患に関与すると考えられていることから、ＡＧＥの産生を抑制する薬剤の開発や、血液中のＡＧＥ濃度を低下させる手法の開発が求められている。
【０００３】
ＡＧＥに親和性のある蛋白質としてＡＧＥ受容体（ＲＡＧＥ）が知られ、ＲＡＧＥ遺伝子はクローニングされている（非特許文献２を参照）。また、ＲＡＧＥのアミノ酸配列のうちＡＧＥとの親和性を有する領域が、アミノ酸配列２３番目〜１２０番目のＶドメインと呼ばれる細胞外ドメインであること、特に細胞外ドメインの中のアミノ酸配列２３番目〜５２番目の領域であることが示唆されている（特許文献１を参照）。
【特許文献１】米国特許公報 ６、５５５、６５１号
【特許文献２】米国公開特許 ＵＳ２００１／５３３５７号
【特許文献３】日本公開特許 特開２００４−５７５３６号
【特許文献４】日本公開特許 特開２００４−３０６４９９号
【特許文献５】日本公開特許 特開２００４−３０６５００号
【非特許文献１】ＤＯＪＩＮ Ｎｅｗｓ Ｎｏ．１０６（２００３年）１〜８ページ
【非特許文献２】Ｊｏｕｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９２年）２６７巻、１４９８７〜１４９９７ページ
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、ＲＡＧＥを形成する部分ペプチドをＡＧＥ吸着リガンドとして利用しようとした場合のＡＧＥ吸着性能は不明である。また、ＡＧＥを吸着するリガンドとなるペプチドを合成する場合、ペプチドのアミノ酸数が多いと合成および精製が困難になるという課題がある。
【０００５】
そこで、本発明は、上述の課題を解決するためになされたもので、ＡＧＥに対して優れた親和性を有するペプチド、および前記ペプチドを水不溶性担体に固定した吸着体を提供することを目的とする。また、前記吸着体を有する吸着装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
鋭意検討の結果、ＲＡＧＥのうちの、特定の部分ペプチドが、ＡＧＥに対して親和性を有する。よって、本発明が提供するのは以下の通りである：
[１]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチド；
（ここで、Ｘ１＝Ｃ、Ｋ、または欠失
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただし、アミノ酸配列ＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮ（配列番号１）およびその部分配列を除く。
【０００７】
[２]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失）。ただし、アミノ酸配列ＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣ（配列番号２）およびその部分配列を除く。
[３]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただしアミノ酸配列ＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱ（配列番号３）およびその部分配列を除く。
[４]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただしアミノ酸配列ＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮ（配列番号４）およびその部分配列を除く。
[５]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２７−[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]nを含むペプチド；
（ここで、
Ｘ２７＝Ｃ、またはＫ
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
[６]
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]n−Ｘ３２からなるペプチド；
（ここで、
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、
Ｘ３２＝Ｃ、またはＫ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
[７]
[１]〜[６]のいずれかに記載のペプチドであって、Ｎ末端アミノ酸残基に、アセチル基、またはビオチン基が結合したことを特徴とするペプチド。
[８]
[１]〜[６]のいずれかに記載のペプチドであって、Ｃ末端アミノ酸残基にアミノ基が結合したことを特徴とするペプチド。
[９]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、Ｘ１＝Ｃ、Ｋ、または欠失
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。
該アミノ酸配列は好ましくは、ＣＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮ（配列番号５）およびその部分配列である。該アミノ酸配列は好ましくはまた、ＬＥＷＫ（配列番号６）およびＬＥＷＫＬＮ（配列番号７）である。
[１０]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失）。該アミノ酸配列は好ましくは、ＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣ（配列番号２）およびその部分配列である。
[１１]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。該アミノ酸配列は好ましくは、ＣＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱ（配列番号８）およびその部分配列である。
[１２]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。該アミノ酸配列は好ましくは、ＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮ（配列番号４）およびその部分配列である。
[１３]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２７−[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]nを含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２７＝Ｃ、またはＫ
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、かつ
ｎは２以上の整数である）。該アミノ酸配列は、好ましくは、ＣＬＥＷＫＬＥＷＫ（配列番号９）である。
[１４]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]n−Ｘ３２を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、
Ｘ３２＝Ｃ、Ｋ、かつ
ｎは２以上の整数である）。該アミノ酸配列は好ましくは、ＬＥＷＫＬＥＷＫＣ（配列番号１０）である。
[１５]
[９]〜[１４]いずれかに記載の吸着体であって、ペプチドのＮ末端アミノ酸残基に、アセチル基、またはビオチン基が結合したことを特徴とする吸着体。
[１６]
[９]〜[１４]のいずれかに記載の吸着体であって、ペプチドのＣ末端アミノ酸残基にアミノ基が結合したことを特徴とする吸着体。
[１７]
[９]〜[１４]いずれかに記載の吸着体であって、前記水不溶性担体が多孔質であることを特徴とする吸着体。
[１８]
[９]〜[１４]いずれか記載の吸着体であって、前記水不溶性担体が親水性であることを特徴とする吸着体。
[１９]
糖化最終生成物に親和性を有する吸着装置であって、ここで該吸着装置は、[９]〜[１８]いずれかに記載の吸着体を含み、前記吸着体が液体の入口、出口を有する容器内に含まれ、かつ前記吸着体が前記容器の外へ流出することを防ぐ防止手段が備えられている、吸着装置。
[２０]
前記吸着体と接触する液体が、血液、血漿、血清からなる群から選択されることを特徴とする[１９]に記載の吸着装置。
ここで、それぞれのアルファベットはアミノ酸の一文字表記である（Ｐ＝プロリン、Ｇ＝グリシン、Ａ＝アラニン、Ｖ＝バリン、Ｌ＝ロイシン、Ｉ＝イソロイシン、Ｃ＝システイン、Ｋ＝リジン、Ｒ＝アルギニン、Ｈ＝ヒスチジン、Ｑ＝グルタミン酸、Ｎ＝グルタミン、Ｄ＝アスパラギン酸、Ｅ＝グルタミン酸、Ｗ＝トリプトファン、Ｙ＝チロシン、Ｆ＝フェニルアラニン、Ｔ＝トレオニン、Ｓ＝セリン）。
【０００８】
本発明によれば、ＡＧＥに対して親和性の高いペプチドが得られる。本発明によれば、ＡＧＥに親和性を有するリガンドのアミノ酸の数が少ないので、高次構造が変化する等の影響が緩和される。また、本発明によれば、ＡＧＥに対して親和性を有する化合物がペプチドであるので、高温耐性を有する。ここにいう高温耐性とは、約５０℃以上、好ましくは約１００℃、およびより好ましくは約１２１℃以上に暴露された場合、ＡＧＥに対する親和性が実質的に低下しないことを意味する。好ましくは、本発明のペプチドまたは吸着体は、蒸気滅菌等、好ましくは高圧蒸気滅菌しうる。その後においてもＡＧＥへの親和性が低下することを緩和しうる。ここにいう高圧蒸気殺菌は、例えば１２１℃において１５分間行う。
【０００９】
さらには、ペプチドが少ない、好ましくは約１６残基以下であるので、ペプチドを合成する際に不純物が少なくて済み、さらには求めるペプチドの収率、回収率等の点で有利である。さらに、ペプチド作製に伴うコストの低減を図ることができる。
【００１０】
なお、本発明のペプチドは、部分的にＡＧＥと類似の構造を有する、３−デオキシグルコソン、メチルグリオキサール、グリオキサール、グリセルアルデヒド、グリセルアルデヒド ３−リン酸等のＡＧＥ前駆体や、糖化蛋白質に親和性を有しうる。
【００１１】
その機能に影響を及ぼすことなく、ペプチドまたはタンパク質中のアミノ酸位置を、保存的な手法で交換することが可能なことは、当業者には公知である。本発明の場合、「保存的」交換の典型的な例としては、以下のグループ： グループＩ：Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、 グループＩＩ：Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、 グループＩＩＩ：Ｓｅｒ、ＴｈｒグループＩＶ：Ｌｙｓ、Ａｒｇ；の中での交換を意味するものである。その機能に影響を及ぼさない場合、ペプチドまたは蛋白質中のアミノ酸のうち１または数個を、置換、欠失および／又は付加してもよい。
【００１２】
また、本発明によれば、リジン、グルタミン酸、アスパラギン酸等の、塩基性アミノ酸または酸性アミノ酸の割合が高くなるようにペプチドを設計でき、そのためペプチドの合成と精製が容易になるという利点を有する。また、Ｎ末端アミノ酸残基および／またはＣ末端アミノ酸残基がシステインまたはリジンであるので、システインのＳＨ基、またはリジンのアミノ基を用いて、共有結合による水不溶性担体への固定化が容易である。
【００１３】
好ましくはｎが２以上の整数である。この場合、ＡＧＥと親和性を有する領域が複数存在するので、ＡＧＥとの親和性が向上し、より多くのＡＧＥを吸着できる。
【００１４】
また、本発明は、Ｎ末端アミノ酸残基に、アセチル基、またはビオチン基が結合したことを特徴とする糖化最終生成物に親和性を有するペプチドに関する。本明細書では、ペプチドまたは吸着体におけるペプチドは、ペプチドを構成する全部または一部のアミノ酸が、アミノ基またはカルボキシル基において、任意の置換基、例えばアセチル基等の置換基によって修飾されたものも含む。
【００１５】
本発明によれば、エンドペプチダーゼ等の蛋白質分解酵素等の作用によって、Ｎ末端のアミノ酸残基が脱離する等のペプチド分解作用を抑制することができる。
【００１６】
さらに、本発明は、Ｃ末端アミノ酸残基が、アミノ基またはカルボキシル基において、任意の置換基、例えばアミノ基で置換されたことを特徴とする糖化最終生成物に親和性を有するペプチドに関する。
【００１７】
Ｃ末端のアミノ酸残基が例えばシステインであると、特に高温条件下においてラセミ化され、ペプチドが不均一になりやすいが、Ｃ末端のアミノ酸をアミノ基で保護することにより不均一になることを抑制できる。ペプチドは１種または２種以上を混合して用いることもできる。
【００１８】
本明細書で使用するように、「部分配列」は、アミノ酸配列の文脈では、あるアミノ酸配列の一方または両方の端の、１または２以上のアミノ酸を、切断して得られる配列を意味する。そのような部分配列は、オリジナル配列が有する機能と同等の機能を有する限り、本発明の目的のために使用し得る。
【００１９】
本発明のペプチドは、自体公知の方法にしたがって製造できる。化学的方法、例えばＦｍｏｃ法またはｔＢｏｃ法を使用する合成法、または生物学的方法、例えば大腸菌等の微生物を使用する遺伝子組み換え技法によって、目的のペプチドを生産できる。本発明では、ペプチドが比較的短いため、化学的方法が簡便である。本発明はまた、上記本発明のペプチドまたは吸着体の製造方法を提供する。
【００２０】
本発明のペプチドはそれ自体、ＡＧＥに対する吸着体として、使用しうる。また、本発明のいずれかのペプチドを水不溶性担体に固定した糖化最終生成物に親和性を有する吸着体に関する。同様に、ペプチドは１種または２種以上を水不溶性担体に固定化することもできる。水不溶性担体としては、ガラスビーズ、シリカゲルなどの無機担体、架橋ポリビニルアルコール、架橋ポリアクリレート、架橋ポリアクリルアミド、架橋ポリスチレンなどの合成高分子や結晶性セルロース、架橋セルロース、架橋アガロース、架橋デキストランなどの多糖類からなる有機担体、さらにはこれらの組み合わせによって得られる有機-有機、有機-無機などの複合担体等が挙げられる。
なお、水不溶性担体の形態としては、ビーズ状、線維状、膜状、中空糸膜状等から選ぶことができるが、体外循環を行う際に体液の流通面の点で有利であることから、ビーズ状が特に好ましい。ビーズ状の平均粒径は扱いやすいという点で１０〜２５００μｍのものが好ましく、２５〜８００μｍのものが特に好ましい。
【００２１】
なお、水不溶性担体は表面に官能基が存在していると、リガンドの固定化に好都合である。官能基としては、水酸基、アミノ基、アルデヒド基、カルボキシル基、チオール基、シラノール基、アミド基、エポキシ基、サクシニルイミド基、酸無水物基等が挙げられる。なお、架橋剤としてグルタルアルデヒド等を用いてもよい。
【００２２】
なお、水不溶性担体としては硬質担体、軟質担体のいずれも用いることができる。体外循環治療用の吸着材としてカラムに充填して使用する際に、担体の強度が弱いと、通液する際に目詰まりを生じる恐れがある。そこで、担体には十分な機械的強度が求められるので、硬質担体であることがより好ましい。
【００２３】
このとき、水不溶性担体は、表面積が大きいことが好ましいため、多孔質であることが好ましい。水不溶性担体が、適当な大きさの細孔を多数有する構造が好ましい。また、多孔質の排除限界分子量は、ＡＧＥを効率良く吸着するため、ＡＧＥの分子量より大きいことが好ましい。なお、排除限界分子量が大きすぎる場合には担体の強度が低下し、かつ表面積が減少するため、排除限界分子量は２５万以上５００万以下であることがより好ましい。
【００２４】
さらに、水不溶性担体が親水性であると、非特異的吸着が比較的少なくて好ましい。水不溶性担体としては、セルロース、キトサン、およびデキストラン等の多糖類、ポリビニルアルコール、エチレン-酢酸ビニル共重合体鹸化物、ポリアクリルアミド、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリメタクリル酸メチル、ポリアクリル酸グラフト化ポリエチレン、ポリアクリルアミドグラフト化ポリエチレン、ガラス等からなる水不溶性担体が挙げられる。市販品としては多孔質セルロース担体であるＧＣＬ２０００ｍ、エポキシ基で活性化されたポリメタクリルアミドであるオイパーギットＣ２５０Ｌ、臭化シアン活性化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ等が挙げられる。なお、上述の水不溶性担体はそれぞれ単独で用いてもよいし、任意の２種類以上を混合してもよい。
【００２５】
なお、水不溶性担体の多孔質の構造としては、吸着体の単位体積あたりの吸着能から考えて、表面多孔性よりも全多孔性が好ましい。さらには、空孔容積が２０％以上であり、比表面積が３ｍ2／ｇ以上であることが好ましい。
【００２６】
また、本発明の吸着体を有し、前記吸着体が液体の入口、出口を有する容器内に含まれ、かつ前記吸着体が前記容器の外へ流出することを防ぐ防止手段が備えられている糖化最終生成物に親和性を有する吸着装置に関する。
【００２７】
このようにすると、吸着装置を体外循環回路に組み込むことができ、患者の体液から効率よくオンラインでＡＧＥを除去することが可能であり、操作も簡単で好ましい。
【００２８】
さらに、本発明は、吸着体と接触する液体が、体液、例えば血液、血漿、血清からなる群から選択されることを特徴とする。本発明はまた、哺乳動物対象のＡＧＥ介在性疾患、例えば糖尿病、糖尿病性腎症、動脈硬化症、透析アミロイドーシス、腎不全、老化等を処置する方法であって、ここで必要のある哺乳動物対象に由来する体液を、本発明のペプチドまたは吸着体と接触させることを含む方法を提供する。哺乳動物対象は、好ましくはヒト患者であるが、ヒト以外の対象も可能である。
【発明の効果】
【００２９】
本発明によれば、ＡＧＥに対して親和性の高いペプチドが得られる。また、ＡＧＥに対して親和性を有する化合物がペプチドであるので、高圧蒸気滅菌等を行うことによってＡＧＥへの親和性が低下することを緩和できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３０】
図１は、ＡＧＥを吸着除去する目的で体外循環を行う際に用いられる吸着カラムの概略断面図である。図１において、吸着カラム７は、血液等の液体の流出口１および流入口２、ＡＧＥに対する吸着体３、ＡＧＥに対する吸着体３の流出を防止する第１のフィルター４および第２のフィルター５、流出口１および流入口２を有し、ＡＧＥに対する吸着体３を封入するカラム６から構成される。カラム６の形状および材質は特に限定はないが、カラム内にＡＧＥに対する吸着体を均一に詰めることができ、また、血液や血漿等の体液を効率よくＡＧＥに対する吸着体と接触させることができるので、カラムの容量が２０〜４００ｍＬ、カラムの直径が２〜１０ｃｍである筒状容器が好ましい。
【００３１】
ＡＧＥに対する吸着体３については、ＡＧＥに対して親和性を有するペプチドを水不溶性担体に固定化したペプチド固定化担体を利用することができる。
【００３２】
本発明のペプチドまたは吸着体の、ＡＧＥに対する吸着能は、例えば以下のように評価する。
（１）カルボキシメチルリジンに対する吸着能の評価
ＡＧＥ吸着能の評価は、ＡＧＥの一種であるカルボキシメチルリジンへの吸着能として評価を行う。本発明のペプチド固定化担体の各５０μＬに対して、糖尿病患者血清３００μＬをそれぞれ加えて、３７℃で２時間振とうする。上清のカルボキシメチルリジン濃度（Ｉａ）を、抗カルボキシメチルリジン抗体（和光純薬）を用いたＥＬＩＳＡ法によって求める。同様にして糖尿病患者血清の元のカルボキシメチルリジン濃度（Ｉｂ）を求め、次式に従ってペプチド固定化担体によるカルボキシメチルリジン吸着量を評価する。
吸着率（％）＝｛（Ｉｂ−Ｉａ）／Ｉｂ｝ｘ１００
本発明のペプチドまたは吸着体は、ＡＧＥの一種であるカルボキシメチルリジンに対して十分高い親和性を有し得る。
（２）ＡＧＥに対する吸着能の評価
ペプチド固定化担体各５０μＬに対して、糖尿病患者血清３００μＬをそれぞれ加えて、３７℃で２時間振とうする。上清のＡＧＥ濃度を、抗ＡＧＥ抗体（和光純薬）を用いたＥＬＩＳＡ法によって求める。同様にして糖尿病患者血清の元のＡＧＥ濃度を求め、ペプチド固定化担体によるＡＧＥ吸着量を評価する。本発明のペプチドまたは吸着体は、ＡＧＥに対して十分高い親和性を有し得る。
（３）ペントシジンに対する吸着能の評価
ＡＧＥ吸着能の評価は、ＡＧＥの一種であるペントシジンへの吸着能として評価を行う。作製されるペプチド固定化担体の各５０μＬに対して糖尿病患者血清３００μＬをそれぞれ加えて、３７℃で２時間振とうする。上清のペントシジン濃度を、抗ペントシジン抗体（和光純薬）を用いた競合ＥＬＩＳＡ（Ｅｎｚｙｍｅ Ｌｉｎｋｅｄ Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ Ａｓｓａｙ）法によって求める（腎と透析（１９９９年）４７巻、８６８ページ 参照）。同様にして糖尿病患者血清の元のペントシジン濃度を求め、ペプチド固定化担体によるペントシジン吸着量を評価する。
本発明のペプチドまたは吸着体は、ペントシジンに対して十分高い親和性を有し得る。
【実施例】
【００３３】
以下に、実施例を用いて本発明を説明するが、本発明はこれらのみに限定されるものではない。
【００３４】
（実施例１）臭化シアン（ＣＮＢｒ）活性化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅによる吸着体の作製
１−１．ペプチドリガンドの合成
アミノ酸配列が、
Ｃ−Ａ−Ｑ−Ｎ−Ｉ−Ｔ−Ａ−Ｒ−Ｉ−Ｇ−Ｅ−Ｐ−Ｌ−Ｖ−Ｌ−Ｋ−Ｃ−Ｋ−Ｇ− Ａ−Ｐ−Ｋ−Ｋ−Ｐ−Ｐ−Ｑ−Ｒ−Ｌ−Ｅ−Ｗ−Ｋ（配列番号１１）
であるペプチドを、Ｆｍｏｃ法にて化学合成した。得られたペプチドは０．１％トリフルオロ酢酸水溶液に溶解後、高速液体クロマトグラフィーにて逆相カラム（μＢｏｎｄａｓｐｈｅｒｅ Ｃ１８；日本ウォーターズ）を用いて精製した。これを以下、ペプチド１１という。
【００３５】
同様にして、アミノ酸配列が、
Ｃ−Ｌ−Ｅ−Ｗ−Ｋ−Ｌ−Ｅ−Ｗ−Ｋ（配列番号９）
であるペプチドをＦｍｏｃ法にて化学合成し、精製した。これを以下、ペプチド９という。
【００３６】
１−２．ペプチド固定化担体の作製
臭化シアン（ＣＮＢｒ）活性化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ（排除限界分子量約２，０００万；アマシャム バイオサイエンス社）１ｇを少量の１ｍＭ塩酸水溶液で１５分間膨潤させ、１ｍＭ塩酸水溶液、さらにカップリングバッファー（０．５Ｍ塩化ナトリウム、０．１Ｍ炭酸水素ナトリウム；ｐＨ８．３）で洗浄した。カップリングバッファー１ｍＬに、合成したペプチド（ペプチド１１および９）を溶解し、上記のように洗浄したＣＮＢｒ活性化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂを添加して２５℃で２時間反応させた。この操作によって、ＣＮＢｒ基で活性化されたＳｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ担体と、ペプチド１１および９との間に共有結合が形成される。カップリングバッファーで洗浄後、ブロッキングバッファー（０．１Ｍトリス−塩酸緩衝液；ｐＨ８．０）を添加して、室温で２時間反応した。次に、後処理バッファー１（０．５Ｍ塩化ナトリウム、０．１Ｍ酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液；ｐＨ４．０）、および後処理バッファー２（０．５Ｍ塩化ナトリウム、０．１Ｍトリス−塩酸緩衝液；ｐＨ８．０）で交互に３回ずつ洗浄し、ＡＧＥ吸着体であるペプチド固定化担体（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ−ペプチド１１、およびＳｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ−ペプチド９）を得た。
【００３７】
（実施例２）
ＧＣＬ２０００ｍによる吸着体の作製
２−１．ペプチドリガンドの合成
アミノ酸配列が、
Ａ−Ｑ−Ｎ−Ｉ−Ｔ−Ａ−Ｒ−Ｉ−Ｇ−Ｅ−Ｐ−Ｌ−Ｖ−Ｌ−Ｋ−Ｃ−ＮＨ2（配列 番号２）
であるペプチドを、Ｆｍｏｃ法にて化学合成した。なお、ラセミ化を防ぐため、Ｃ末端のシステイン（Ｃ）のカルボキシル基をアミノ化してアミドとした。得られたペプチドは０．１％トリフルオロ酢酸水溶液に溶解後、高速液体クロマトグラフィーにて逆相カラム（μＢｏｎｄａｓｐｈｅｒｅ Ｃ１８；日本ウォーターズ）を用いて精製した。これを以下、ペプチド２という。
【００３８】
同様にして、アミノ酸配列が、
Ｃ−Ｒ−Ｉ−Ｇ−Ｅ−Ｐ−Ｌ−Ｖ−Ｌ−Ｋ−Ｃ−Ｋ−Ｇ−Ａ−Ｐ−Ｋ−Ｋ−Ｐ−Ｐ− Ｑ（配列番号８）
Ｃ−Ｋ−Ｇ−Ａ−Ｐ−Ｋ−Ｋ−Ｐ−Ｐ−Ｑ−Ｒ−Ｌ−Ｅ−Ｗ−Ｋ−Ｌ−Ｎ（配列番号 ４）
であるペプチドをＦｍｏｃ法にて化学合成し、精製した。これらを以下、それぞれペプチド８およびペプチド４という。
【００３９】
２−２．セルロース担体の活性化
セルロース系多孔質硬質ゲルであるＧＣＬ２０００ｍ（排除限界分子量３００万；チッソ）９０ｍＬに、水９０ｍＬ、２Ｍ水酸化ナトリウム６０ｍＬを加え、４０℃に予備加温した。ここにエピクロルヒドリン２１ｍＬを加え、４０℃において１時間攪拌した。反応終了後、ガラスフィルター上において水で十分洗浄し、エポキシ活性化セルロース担体を得た。
【００４０】
２−３．ペプチド固定化担体の作製
２−１において合成したペプチド（ペプチド２、ペプチド８、ペプチド４）各０．５ｍｇを０．０５Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ１０）０．５ｍＬにそれぞれ溶解し、０．０１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ１０に再調整後、全量を１．０ｍＬとした。このペプチド溶液を、１−２で作製したエポキシ活性化セルロース担体０．４ｍＬにそれぞれ加えて、３７℃で１６時間振とうした。この操作によって、エポキシ基で活性化されたセルロース担体と、ペプチド２、ペプチド８、ペプチド４との間に共有結合が形成される。反応終了後、十分量のＰＢＳ溶液で洗浄し、ＡＧＥ吸着体であるペプチド固定化担体（ＧＣＬ２０００ｍ−ペプチド２、ＧＣＬ２０００ｍ−ペプチド８、およびＧＣＬ２０００ｍ−ペプチド４）を得た。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】本発明のＡＧＥに対する吸着装置の一実施例における概略断面図
【符号の説明】
【００４２】
１ 流入口
２ 流出口
３ ＡＧＥに親和性を有するペプチド
４、５ フィルター
６ カラム
７ 吸着体
【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチド；
（ここで、Ｘ１＝Ｃ、Ｋ、または欠失
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただし、アミノＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮおよびその部分配列を除く。
【請求項２】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失）。ただし、アミノ酸配列ＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣおよびその部分配列を除く。
【請求項３】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただしアミノ酸配列ＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱおよびその部分配列を除く。
【請求項４】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただしアミノ酸配列ＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮおよびその部分配列を除く。
【請求項５】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２７−[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]nを含むペプチド；
（ここで、
Ｘ２７＝Ｃ、またはＫ
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
【請求項６】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]n−Ｘ３２からなるペプチド；
（ここで、
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、
Ｘ３２＝Ｃ、またはＫ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかに記載のペプチドであって、Ｎ末端アミノ酸残基に、アセチル基、またはビオチン基が結合したことを特徴とするペプチド。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれかに記載のペプチドであって、Ｃ末端アミノ酸残基にアミノ基が結合したことを特徴とするペプチド。
【請求項９】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、Ｘ１＝Ｃ、Ｋ、または欠失
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、かつ
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。
【請求項１０】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、またはＳ
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失）。
【請求項１１】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。
【請求項１２】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失）
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。
【請求項１３】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２７−[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]nを含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２７＝Ｃ、またはＫ
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
【請求項１４】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]n−Ｘ３２を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、
Ｘ３２＝Ｃ、Ｋ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
【請求項１５】
請求項９〜１４いずれかに記載の吸着体であって、ペプチドのＮ末端アミノ酸残基に、アセチル基、またはビオチン基が結合したことを特徴とする吸着体。
【請求項１６】
請求項９〜１４のいずれかに記載の吸着体であって、ペプチドのＣ末端アミノ酸残基にアミノ基が結合したことを特徴とする吸着体。
【請求項１７】
請求項９〜１４いずれかに記載の吸着体であって、前記水不溶性担体が多孔質であることを特徴とする吸着体。
【請求項１８】
請求項９〜１４いずれか記載の吸着体であって、前記水不溶性担体が親水性であることを特徴とする吸着体。
【請求項１９】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着装置であって、ここで該吸着装置は、請求項９〜１８いずれかに記載の吸着体を含み、前記吸着体が液体の入口、出口を有する容器内に含まれ、かつ前記吸着体が前記容器の外へ流出することを防ぐ防止手段が備えられている、吸着装置。
【請求項２０】
前記吸着体と接触する液体が、血液、血漿、血清からなる群から選択されることを特徴とする請求項１９に記載の吸着装置。
【請求項１】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチド；
（ここで、Ｘ１＝Ｃ、Ｋ、または欠失
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただし、アミノＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮおよびその部分配列を除く。
【請求項２】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失）。ただし、アミノ酸配列ＡＱＮＩＴＡＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣおよびその部分配列を除く。
【請求項３】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただしアミノ酸配列ＲＩＧＥＰＬＶＬＫＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱおよびその部分配列を除く。
【請求項４】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチド；
（ここで、
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。ただしアミノ酸配列ＣＫＧＡＰＫＫＰＰＱＲＬＥＷＫＬＮおよびその部分配列を除く。
【請求項５】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２７−[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]nを含むペプチド；
（ここで、
Ｘ２７＝Ｃ、またはＫ
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
【請求項６】
糖化最終生成物に親和性を有するペプチドであって、以下のアミノ酸配列：[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]n−Ｘ３２からなるペプチド；
（ここで、
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、
Ｘ３２＝Ｃ、またはＫ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかに記載のペプチドであって、Ｎ末端アミノ酸残基に、アセチル基、またはビオチン基が結合したことを特徴とするペプチド。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれかに記載のペプチドであって、Ｃ末端アミノ酸残基にアミノ基が結合したことを特徴とするペプチド。
【請求項９】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、Ｘ１＝Ｃ、Ｋ、または欠失
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｓ、または欠失
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、かつ
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。
【請求項１０】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４−Ｘ５−Ｘ６−Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ３＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅまたは欠失
Ｘ４＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ５＝Ｉ、Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、または欠失
Ｘ６＝Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｆ、またはＳ
Ｘ７＝Ａ、Ｐ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失）。
【請求項１１】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ７−Ｘ８−Ｘ９−Ｘ１０−Ｘ１１−Ｘ１２−Ｘ１３−Ｘ１４―Ｘ１５−Ｘ１６−Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ８＝Ｒ、Ｋ、または欠失
Ｘ９＝Ｉ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖまたは欠失
Ｘ１０＝Ｇ、Ｌ、Ａ、Ｖ、Ｉまたは欠失
Ｘ１１＝Ｅ、Ｑ、Ｎ、Ｄ、または欠失
Ｘ１２＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ１３＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１４＝Ｖ、Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｉ、または欠失
Ｘ１５＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失
Ｘ１６＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。
【請求項１２】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ１７−Ｘ１８−Ｘ１９−Ｘ２０−Ｘ２１−Ｘ２２−Ｘ２３−Ｘ２４−Ｘ２５−Ｘ２６−Ｘ２７−Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１−Ｘ３２−Ｘ３３ を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ１７＝Ｃ、Ｋまたは欠失
Ｘ１８＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失）
Ｘ１９＝Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２０＝Ａ、Ｇ、Ｖ、Ｌ、Ｉまたは欠失
Ｘ２１＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｃ、または欠失
Ｘ２２＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２３＝Ｋ、Ｒ、Ｈ、または欠失
Ｘ２４＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２５＝Ｐ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、または欠失
Ｘ２６＝Ｑ、Ｎ、Ｄ、Ｅ、または欠失
Ｘ２７＝Ｒ、Ｋ、Ｈ、または欠失
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ
Ｘ３２＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、Ｉ、または欠失、かつ
Ｘ３３＝Ｎ、Ｑ、Ｄ、Ｅ、または欠失）。
【請求項１３】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：Ｘ２７−[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]nを含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２７＝Ｃ、またはＫ
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
【請求項１４】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着体であって、以下のアミノ酸配列：[Ｘ２８−Ｘ２９−Ｘ３０−Ｘ３１]n−Ｘ３２を含むペプチドを水不溶性担体に固定化した吸着体；
（ここで、
Ｘ２８＝Ｌ、Ｇ、Ａ、Ｖ、またはＩ
Ｘ２９＝Ｅ、Ｄ、Ｎ、またはＱ
Ｘ３０＝Ｗ、Ｙ、Ｆ、Ｔ、またはＳ、
Ｘ３１＝Ｋ、Ｒ、またはＨ、
Ｘ３２＝Ｃ、Ｋ、かつ
ｎは２以上の整数である）。
【請求項１５】
請求項９〜１４いずれかに記載の吸着体であって、ペプチドのＮ末端アミノ酸残基に、アセチル基、またはビオチン基が結合したことを特徴とする吸着体。
【請求項１６】
請求項９〜１４のいずれかに記載の吸着体であって、ペプチドのＣ末端アミノ酸残基にアミノ基が結合したことを特徴とする吸着体。
【請求項１７】
請求項９〜１４いずれかに記載の吸着体であって、前記水不溶性担体が多孔質であることを特徴とする吸着体。
【請求項１８】
請求項９〜１４いずれか記載の吸着体であって、前記水不溶性担体が親水性であることを特徴とする吸着体。
【請求項１９】
糖化最終生成物に親和性を有する吸着装置であって、ここで該吸着装置は、請求項９〜１８いずれかに記載の吸着体を含み、前記吸着体が液体の入口、出口を有する容器内に含まれ、かつ前記吸着体が前記容器の外へ流出することを防ぐ防止手段が備えられている、吸着装置。
【請求項２０】
前記吸着体と接触する液体が、血液、血漿、血清からなる群から選択されることを特徴とする請求項１９に記載の吸着装置。
【図１】
【公開番号】特開２００６−６３０２４（Ｐ２００６−６３０２４Ａ）
【公開日】平成１８年３月９日（２００６．３．９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−２４８１９２（Ｐ２００４−２４８１９２）
【出願日】平成１６年８月２７日（２００４．８．２７）
【出願人】（００００００９４１）株式会社カネカ (3,932)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年３月９日（２００６．３．９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年８月２７日（２００４．８．２７）
【出願人】（００００００９４１）株式会社カネカ (3,932)
【Ｆターム（参考）】
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