良性の家族性新生児痙攣（ＢＦＮＣ）および他の癲癇において突然変異されたＫＣＮＱ２およびＫＣＮＱ３−カリウムチャンネル遺伝子
【課題】良性の家族性新生児痙攣ならびにローランド癲癇（ＢＦＮＣ）および若年性ミオクローヌス癲癇の分子的基礎を提供する。
【解決手段】BFNC家族において発作と共分離する染色体２０ｑ１３.３の準顕微的欠失が同定された。欠失した領域に広がるｃDNAの特徴付けにより、カリウム−チャンネルの新たなKCNQ１−様クラスに属する新規の電位−ゲート・カリウムチャンネル、KCNQ２を同定した。第２の遺伝子、KCNQ３は、突然変異が第８染色体上に位置決定された分離BFNC家族において見出された。このことは、カリウムチャンネルにおける欠陥が癲癇を引起こし得ることを示している。さらに、KCQN２中に突然変異を有する１つのBFNC家族における数人のメンバーは、ローランド癲癇をも示し、若年性ミオクローヌスを有する１人の個人はＫＣＮＱ３の別のエキソンに突然変異を有している。
【解決手段】BFNC家族において発作と共分離する染色体２０ｑ１３.３の準顕微的欠失が同定された。欠失した領域に広がるｃDNAの特徴付けにより、カリウム−チャンネルの新たなKCNQ１−様クラスに属する新規の電位−ゲート・カリウムチャンネル、KCNQ２を同定した。第２の遺伝子、KCNQ３は、突然変異が第８染色体上に位置決定された分離BFNC家族において見出された。このことは、カリウムチャンネルにおける欠陥が癲癇を引起こし得ることを示している。さらに、KCQN２中に突然変異を有する１つのBFNC家族における数人のメンバーは、ローランド癲癇をも示し、若年性ミオクローヌスを有する１人の個人はＫＣＮＱ３の別のエキソンに突然変異を有している。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号：２、配列番号：７、配列番号：８９、配列番号：９１または配列番号：９６から選択される蛋白質をコードする核酸を含む単離された核酸またはその相補体。
【請求項２】
該核酸が、配列番号：１のヌクレオチド１２８−２７４３、配列番号：６のヌクレオチド１９−２６３４、配列番号：８８のヌクレオチド１−２２７３、配列番号：９０のヌクレオチド２０２−２８１２または配列番号：９５のヌクレオチド１２８−２９１７の配列を持つ核酸を含む請求項１記載の単離された核酸またはその相補体。
【請求項３】
良性の家族性新生児痙攣（ＢＦＮＣ）、若年性ミオクローヌス癲癇（ＪＭＥ）またはローランド癲癇を引き起こす突然変異体ヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３ポリペプチドをコードする核酸を含む単離された核酸またはその相補体。
【請求項４】
該単離された核酸がＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異を含み、ここに該突然変異が配列番号：１のヌクレオチド９７８におけるＧ、配列番号：１のヌクレオチド１０４３におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１０９４におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド１１２５におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１４６９におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド９７５および９７６の間への２個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド２７３６の後への５個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失、ＫＣＮＱ２のコドン５４４を中断するイントロンの３’末端におけるＧよりはむしろＡ、配列番号：２のコドン３１９においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン５２４においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン３２３においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン４４８においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴ、およびＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在よりなる群から選択される請求項３記載の単離された核酸。
【請求項５】
該単離された核酸が配列番号：２のコドン２８４におけるシステイン、配列番号：２のコドン３０６におけるトレオニン、配列番号：２のコドン３３３におけるグルタミンまたは配列番号：７のコドン３１０におけるバリンをコードする請求項３記載の単離された核酸。
【請求項６】
高ストリンジェンシー下で請求項１記載の核酸に特異的にハイブリダイズする核酸プローブ。
【請求項７】
ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で請求項３記載の核酸に特異的にハイブリダイズし、ここに、該ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件が、該核酸プローブが配列番号：１または配列番号：６によって定義される核酸にハイブリダイズすることを妨げる核酸プローブ。
【請求項８】
ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で請求項４記載の核酸に特異的にハイブリダイズし、ここに、該ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件が、該核酸プローブが配列番号：１または配列番号：６によって定義される核酸にハイブリダイズすることを妨げる核酸プローブ。
【請求項９】
当該突然変異を含む核酸へのプローブのハイブリダイゼーションを可能とするが、該プローブの野生型ヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３へのハイブリダイゼーションを妨げるストリンジェントな条件下で、請求項７記載のプローブをＤＮＡまたはＲＮＡの患者の試料へハイブリダイズさせることを含み、ここに、ハイブリダイゼーションシグナルの存在が該突然変異の存在を示すことを特徴とするＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の診断方法。
【請求項１０】
当該突然変異を含む核酸へのプローブのハイブリダイゼーションを可能とするが、該プローブの野生型ヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３へのハイブリダイゼーションを妨げるストリンジェントな条件下で、請求項８記載のプローブをＤＮＡまたはＲＮＡの患者の試料へハイブリダイズさせることを含み、ここに、ハイブリダイゼーションシグナルの存在が該突然変異の存在を示すことを特徴とするＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の診断方法。
【請求項１１】
患者のＤＮＡまたはＲＮＡが増幅されており、該増幅されたＤＮＡまたはＲＮＡをハイブリダイズさせる請求項９記載の方法。
【請求項１２】
患者のＤＮＡまたはＲＮＡが増幅されており、該増幅されたＤＮＡまたはＲＮＡをハイブリダイズさせる請求項１０記載の方法。
【請求項１３】
ハイブリダイゼーションがイン・サイチュにて行われる請求項９記載の方法。
【請求項１４】
ハイブリダイゼーションがイン・サイチュにて行われる請求項１０記載の方法。
【請求項１５】
該方法が、該突然変異の存在を同定する手段によって行われることを特徴とする、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こすヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３において突然変異の存在を診断する方法。
【請求項１６】
該突然変異が、配列番号：１のヌクレオチド番号９７８におけるＧ、配列番号：１のヌクレオチド番号１０４３におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１０９４におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド番号１１２５におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１４６９におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド番号９７５および９７６の間への２個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド２７３６後への５個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失、配列番号：２のコドン５４４を中断するイントロンの３’末端におけるＧよりはむしろＡ、配列番号：２のコドン３１９におけるまたはその前の停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン５２４におけるまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン３２３においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン４４８においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴの存在、またはＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在である請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
該手段が、該突然変異を検定するために一本鎖立体配座多形技術を用いることを含む請求項１５記載の方法。
【請求項１８】
該突然変異が、配列番号：１のヌクレオチド番号９７８におけるＧ、配列番号：１のヌクレオチド１０４３におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド番号１０９４におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド１１２５におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド番号１４６９におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド９７５および９７６の間への２個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド番号２７３６後への５個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失、ＫＣＮＱ２のコドン５４４を中断するイントロンの３’末端におけるＧよりはむしろＡ、配列番号：２のコドン３１９においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン５２４においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン３２３においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン４４８においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴの存在、またはＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在である請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
該突然変異が配列番号：６の９４７におけるＴであり、さらに該一本鎖立体配座多形技術が増幅された核酸を用い、ここに、該増幅された核酸が配列番号：１８および配列番号：１９のプライマーを用いて調製された請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
該手段がヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３を配列決定することを含む請求項１５記載の方法。
【請求項２１】
該突然変異が、配列番号：１のヌクレオチド番号９７８におけるＧ、配列番号：１のヌクレオチド番号１０４３におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１０９４におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド１１２５におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１４６９におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド９７５および９７６の間への２個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド２７３６後への５個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失、ＫＣＮＱ２のコドン５４４を中断するイントロンの３’末端におけるＧよりはむしろＡ、配列番号：２のコドン３１９においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン５２４においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン３２３においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン４４８においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴの存在、またはＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在である請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
該手段が、ＲＮＡｓｅアッセイを行うことを含む請求項１５記載の方法。
【請求項２３】
該突然変異が、配列番号：１のヌクレオチド番号９７８におけるＧ、配列番号：１のヌクレオチド番号１０４３におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１０９４におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド１１２５におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１４６９におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド９７５および９７６の間への２個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド２７３６後への５個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失、配列番号：２のコドン５４４を中断するイントロンの３’末端におけるＧよりはむしろＡ、配列番号：２のコドン３１９においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン５２４においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン３２３においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン４４８においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴの存在、またはＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在である請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
配列番号：２、配列番号：７、配列番号：８９または配列番号：９１のポリペプチドに結合する抗体。
【請求項２５】
突然変異体ヒトＫＣＮＱ２または突然変異体ヒトＫＣＮＱ３ポリペプチドに結合するが、野生型ヒトＫＣＮＱ２または野生型ＫＣＮＱ３ポリペプチドには結合せず、該突然変異体ポリペプチドがＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす抗体。
【請求項２６】
該突然変異体ポリペプチドが、配列番号：２のアミノ酸残基２１４におけるシステイン、配列番号：２のアミノ酸残基３０６におけるトレオニン、配列番号：２のアミノ酸残基３３３におけるグルタミン、配列番号：７のアミノ酸残基３１０におけるバリンを含み、あるいはここに、該突然変異体ポリペプチドが配列番号：９６である請求項２５記載の抗体。
【請求項２７】
患者からの蛋白質を含む試料を請求項２５記載の抗体と反応させることによって、該患者における突然変異体ＫＣＮＱ２または突然変異体ＫＣＮＱ３ポリペプチドの存在につき検定することを含み、ここに、陽性反応の存在がＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を示すことを特徴とするヒト患者においてＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を診断する方法。
【請求項２８】
該突然変異体ＫＣＮＱ２または突然変異体ＫＣＮＱ３が（ａ）配列番号：２のアミノ酸残基２８４におけるシステインを含むＫＣＮＱ２、（ｂ）配列番号：２のアミノ酸残基３０６におけるトレオニンを含むＫＣＮＱ２、（ｃ）配列番号：２のアミノ酸残基３３３におけるグルタミンを含むＫＣＮＱ２、（ｄ）突然変異した配列番号：１のＤＮＡによってコードされるＫＣＮＱ２、ここに、該突然変異した配列番号：１はヌクレオチド９７５および９７６の間へのＧＴの挿入によって改変された配列番号：１である、（ｅ）突然変異した配列番号：１のＤＮＡによってコードされるＫＣＮＱ２、ここに、該突然変異した配列番号：１は、配列番号：１のヌクレオチド２７３６に続いてのＧＧＧＣＣの挿入によって改変された配列番号：１であり、（ｆ）突然変異した配列番号：１のＤＮＡによってコードされるＫＣＮＱ２、ここに、該突然変異した配列番号：１は、ヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失によって改変された配列番号：１であり、（ｇ）配列番号：２のアミノ酸残基１−３１８を含むＫＣＮＱ２、（ｈ）配列番号：２のアミノ酸残基１−５２３を含むＫＣＮＱ２、（ｉ）配列番号：２のアミノ酸残基１−３２２を含むＫＣＮＱ２、（ｊ）配列番号：２のアミノ酸残基１−４４８を含むＫＣＮＱ２、および（ｋ）配列番号：７のアミノ酸残基３１０におけるバリンを含むＫＣＮＱ３よりなる群から選択される請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
該抗体が、モノクローナル抗体である請求項２７記載の方法。
【請求項３０】
該抗体が、モノクローナル抗体である請求項２８記載の方法。
【請求項３１】
ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異を含む単離されたヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３ポリペプチド。
【請求項３２】
該突然変異が、配列番号：２のアミノ酸残基２８４におけシステイン、配列番号：２のアミノ酸残基３０６におけるトレオニン、配列番号：２のアミノ酸残基３３３におけるグルタミンまたは配列番号：７のアミノ酸残基３１０におけるバリンである請求項３１記載のポリペプチド。
【請求項３３】
（ａ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡは塩基９７５および９７６の間にＧＴの挿入を持つ配列番号：１であり、（ｂ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個の塩基欠失を持つ配列番号：１である、（ｃ）ＤＮＡによってコードされるポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド２７３６に続いてＧＧＧＣＣ挿入を持つ配列番号：１である、（ｄ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１０９４におけるＴを持つ配列番号：１である、および（ｅ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１４６９におけるＴを持つ配列番号：１である、よりなる群から選択される単離されたＫＣＮＱ２ポリペプチド。
【請求項３４】
個体からのＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３ポリペプチドを配列決定し、あるいは、個体に由来する核酸から合成されたＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３ポリペプチドを配列決定することを含み、ここに、ＫＣＮＱ２のアミノ酸残基２８４におけるシステイン、ＫＣＮＱ２のアミノ酸残基３０６におけトレオニン、ＫＣＮＱ２のアミノ酸残基３３３におけるグルタミン、またはＫＣＮＱ３におけるアミノ酸残基３１０におけるバリンの存在が、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を示すことを特徴する、個体においてＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を診断する方法。
【請求項３５】
個体からのＫＣＮＱ２ポリペプチドを配列決定し、あるいは、個体に由来する核酸から合成されたＫＣＮＱ２ポリペプチドを配列決定することを含み、ここに、（ａ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡは塩基９７５および９７６の間にＧＴの挿入を持つ配列番号：１であり、（ｂ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個の塩基欠失を持つ配列番号：１である、（ｃ）ＤＮＡによってコードされるポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド２７３６に続いてＧＧＧＣＣ挿入を持つ配列番号：１である、（ｄ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１０９４におけるＴを持つ配列番号：１である、および（ｅ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１４６９におけるＴを持つ配列番号：１である、の存在がＢＮＦＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を示すことを特徴とする個体において、ＢＮＦＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を診断する方法。
【請求項３６】
請求項１記載のＤＮＡでトランスフェクトされた細胞。
【請求項３７】
請求項２記載のＤＮＡでトランスフェクトされた細胞。
【請求項３８】
請求項３記載のＤＮＡでトランスフェクトされた細胞。
【請求項３９】
ａ）野生型ＫＣＮＱ２または野生型ＫＣＮＱ３を持つ細胞を調製し；
ｂ）工程（ａ）の細胞を浴溶液に入れて電流を測定し；
ｃ）工程（ｂ）の細胞において誘導されたＫ+電流を測定し；
ｄ）もしＫＣＮＱ２を工程（ａ）で使用するならば、突然変異体ＫＣＮＱ２を持つ細胞を調製し、あるいはもしＫＣＮＱ３を工程（ａ）で使用するならば、突然変異体ＫＣＮＱ３を持つ細胞を調製し；
ｅ）工程（ｄ）の細胞を浴溶液に入れて電流を測定し；
ｆ）工程（ｅ）の細胞において、誘導されたＫ+電流を測定し；
ｇ）工程（ｅ）の浴溶液に薬物を添加し；
ｈ）工程（ｇ）の細胞において、誘導されたＫ+電流を測定し；
ｉ）該薬剤の不存在下で、突然変異体ＫＣＮＱ２または突然変異体ＫＣＮＱ３を持つ細胞で観察される電流と比較して、該薬物が、野生型ＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３を持つ細胞で観察される誘導されたＫ+電流に近いまたは近くない誘導されたＫ+電流をもたらすか否かを測定することを含み、ここに、野生型ＫＣＮＱ２または野生型ＫＣＮＱ３を持つ細胞で観察される電流に近い電流をもたらす薬物が、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を治療し、予防するのに有用であることを特徴とする、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を治療または予防するのに有用な薬物をスクリーニングする方法。
【請求項４０】
該突然変異体ＫＣＮＱ２が表２に示された突然変異を含み、該突然変異体ＫＣＮＱ３が配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴを含み、あるいは該突然変異体ＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在を含む請求項３８記載の方法。
【請求項４１】
該細胞が哺乳動物である請求項３９記載の方法。
【請求項４２】
該細胞が哺乳動物である請求項４０記載の方法。
【請求項４３】
該細胞がＣＨＯ細胞である請求項３９記載の方法。
【請求項４４】
該細胞がＣＨＯ細胞である請求項４０記載の方法。
【請求項４５】
ヒトＫＣＮＱ２ ＲＮＡまたはヒトＫＣＮＱ３ ＲＮＡをトランスフェクション工程で使用する請求項３９記載の方法。
【請求項４６】
野生型ヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３を含む核酸ベクター。
【請求項４７】
突然変異体ヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３を含む核酸ベクター。
【請求項４８】
該突然変異体ヒトＫＣＮＱ２が表２に示された突然変異を含み、該突然変異体ＫＣＮＱ３が、配列番号：６のヌクレオチド９４７によって表されるヌクレオチドにおけるＴを含み、あるいはここに、該突然変異体ヒトＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在を含む請求項４７記載の核酸ベクター。
【請求項４９】
野生型ヒトＫＣＮＱ２または野生型ＫＣＮＱ３を含む非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項５０】
突然変異体ヒトＫＣＮＱ２または突然変異体ヒトＫＣＮＱ３を含む非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項５１】
該突然変異体ヒトＫＣＮＱ２が表２に示された突然変異を含み、該突然変異体ＫＣＮＱ３が、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴを含み、あるいは、該突然変異体ヒトＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在を含む請求項５６記載の動物。
【請求項５２】
ａ）野生型ヒトＫＣＮＱ２または野生型ヒトＫＣＮＱ３を持つトランスジェニック動物を調製し；
ｂ）工程（ａ）のトランスジェニック動物において誘導されたＫ+電流を測定し；
ｃ）もしＫＣＮＱ２を工程（ａ）で用いれば、突然変異体ヒトＫＣＮＱ２を持つ、もしＫＣＮＱ３を工程（ａ）で用いれば、突然変異体ヒトＫＣＮＱ３を持つトランスジェニック動物を調製し；
ｄ）工程（ｃ）のトランスジェニック動物において誘導されたＫ+電流を測定し；
ｅ）工程（ｃ）のトランスジェニック動物に薬物を投与し；
ｆ）工程（ｅ）の薬物処理動物において誘導されたＫ+電流を測定し；
ｇ）該薬物不存在下で突然変異体ヒトＫＣＮＱ２または突然変異体ヒトＫＣＮＱ３を持つトランスジェニック動物で観察される電流と比較して、該薬物が、野生型ヒトＫＣＮＱ２または野生型ヒトＫＣＮＱ３を持つトランスジェニック動物で観察される誘導されたＫ+電流に似たまたは似ていない誘導されたＫ+電流をもたらすか否かを測定することを含み、
ここに、野生型ヒトＫＣＮＱにまたは野生型ヒトＫＣＮＱ３を持つトランスジェニック動物で観察される電流に似た電流をもたらす薬物が、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を治療または予防するのに有用であることを特徴とするＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を治療または予防するのに有用な薬物をスクリーニングする方法。
【請求項５３】
該突然変異体ヒトＫＣＮＱ２が表２で示される突然変異を含み、該突然変異体ＫＣＮＱ３が配列番号：６ヌクレオチド９４７におけるＴを含み、あるいは該突然変異体ＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＭＡにおける配列番号：９２に代替エキソンの存在を含む請求項５２記載の方法。
【請求項５４】
ＤＮＡの患者の試料中のＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３を配列決定して、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の存在または不存在を決定することを特徴とする、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の診断方法。
【請求項５５】
該突然変異が表２に示される突然変異、配列番号：６中のヌクレオチド９４７におけるＴの存在から選択され、あるいは該突然変異体ＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在を含む請求項５４記載の方法。
【請求項５６】
ＤＮＡの該患者の試料が増幅されたものである請求項５４記載の方法。
【請求項５７】
ＤＮＡの該患者の試料が増幅されたものである請求項５５記載の方法。
【請求項５８】
ＲＮＡの患者の試料中のＫＣＮＱ２遺伝子またはＫＣＮＱ３遺伝子を配列決定して、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の存在または不存在を決定することを特徴とする、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の診断方法。
【請求項５９】
該突然変異が表２に示される突然変異、配列番号：６中のヌクレオチド９４７におけるＴの存在から選択され、あるいは該突然変異体ＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在を含む請求項５８記載の方法。
【請求項６０】
患者から採取したＲＮＡからｃＤＮＡを調製し、該ｃＤＮＡを配列決定してＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の存在または不存在を決定することによって、患者においてＫＣＮＱ２またはＫＮＱ３配列を決定することを特徴とする、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の診断方法。
【請求項６１】
ＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３に特異的なプローブとのイン・サイチュハイブリダイゼイションを行うことによってＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇の存在を診断する方法であって、ここに、ＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３いずれかの単一コピーのみの存在がＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇の存在を示す該方法。
【請求項６２】
ポリメラーゼ鎖反応によってＫＣＮＱ２のヌクレオチド配列を決定するための一本鎖ＤＮＡプライマーの対であって、ここに、該プライマーの配列はヒト染色体２０ｑ１３に由来し、ここに、ポリメラーゼ鎖反応における該プライマーの使用の結果、ＫＣＮＱ２の配列の全てまたは一部を有するＤＮＡが合成される該対。
【請求項６３】
該対が、
（ａ）配列番号：２２および配列番号：２３、
（ｂ）配列番号：２４および配列番号：２５、
（ｃ）配列番号：２７および配列番号：２８、
（ｄ）配列番号：２９および配列番号：３０、
（ｅ）配列番号：３１および配列番号：３２、
（ｆ）配列番号：３３および配列番号：３４、
（ｇ）配列番号：３５および配列番号：３６、
（ｈ）配列番号：３７および配列番号：３８、
（ｉ）配列番号：３９および配列番号：４０、
（ｊ）配列番号：４１および配列番号：４２、
（ｋ）配列番号：４３および配列番号：４４、
（ｌ）配列番号：４６および配列番号：４７、
（ｍ）配列番号：４８および配列番号：４９、
（ｎ）配列番号：５０および配列番号：５１、または
（ｏ）配列番号：５２および配列番号：５３、
から選択される請求項６２記載の一本鎖ＤＮＡプライマーの対。
【請求項６４】
ポリメラーゼ鎖反応によってＫＣＮＱ３のヌクレオチド配列を決定するための一本鎖ＤＮＡプライマーの対であって、ここに、該プライマーの配列はヒト染色体８ｑ２４に由来し、ここに、ポリメラーゼ鎖反応における該プライマーの使用の結果、ＫＣＮＱ３の配列の全てまたは一部を有するＤＮＡが合成される該対。
【請求項６５】
該対が、
（ａ）配列番号：５４および配列番号：５５、
（ｂ）配列番号：５６および配列番号：５７、
（ｃ）配列番号：５８および配列番号：５９、
（ｄ）配列番号：６０および配列番号：６１、
（ｅ）配列番号：６２および配列番号：６３、
（ｆ）配列番号：６４および配列番号：６５、
（ｇ）配列番号：６６および配列番号：６７、
（ｈ）配列番号：６８および配列番号：６９、
（ｉ）配列番号：７０および配列番号：７１、
（ｊ）配列番号：７２および配列番号：７３、
（ｋ）配列番号：７４および配列番号：７５、
（ｌ）配列番号：７６および配列番号：７７、
（ｍ）配列番号：７８および配列番号：７９、
（ｎ）配列番号：８０および配列番号：８１、
（ｏ）配列番号：８２および配列番号：８３、
（ｐ）配列番号：８４および配列番号：８５または、
（ｑ）配列番号：８６および配列番号：８７
から選択される請求項６４記載の一本鎖ＤＮＡプライマーの対。
【請求項６６】
配列番号：１の塩基１２４４−３２３２の少なくとも８個の連続したヌクレオチドまたは配列番号：６の少なくとも８個の連続したヌクレオチドを有するＤＮＡを含む単離されたＤＮＡ。
【請求項６７】
該ＤＮＡが配列番号：１の塩基１２４４−３２３２の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドまたは配列番号：６の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドを含む請求項６５記載の単離されたＤＮＡ。
【請求項６８】
配列番号：１００−１２９のうちのいずれか１つの少なくとも８個の連続したヌクレオチドを有するＤＮＡを含む単離されたＤＮＡ。
【請求項６９】
配列番号：１００−１２９のいずれか１つの少なくとも１５個に連続したヌクレオチドを有するＤＮＡを含む単離されたＤＮＡ。
【請求項７０】
配列番号：１００−１２９のうちのいずれか１つから選択される配列を含む単離された核酸。
【請求項１】
配列番号：２、配列番号：７、配列番号：８９、配列番号：９１または配列番号：９６から選択される蛋白質をコードする核酸を含む単離された核酸またはその相補体。
【請求項２】
該核酸が、配列番号：１のヌクレオチド１２８−２７４３、配列番号：６のヌクレオチド１９−２６３４、配列番号：８８のヌクレオチド１−２２７３、配列番号：９０のヌクレオチド２０２−２８１２または配列番号：９５のヌクレオチド１２８−２９１７の配列を持つ核酸を含む請求項１記載の単離された核酸またはその相補体。
【請求項３】
良性の家族性新生児痙攣（ＢＦＮＣ）、若年性ミオクローヌス癲癇（ＪＭＥ）またはローランド癲癇を引き起こす突然変異体ヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３ポリペプチドをコードする核酸を含む単離された核酸またはその相補体。
【請求項４】
該単離された核酸がＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異を含み、ここに該突然変異が配列番号：１のヌクレオチド９７８におけるＧ、配列番号：１のヌクレオチド１０４３におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１０９４におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド１１２５におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１４６９におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド９７５および９７６の間への２個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド２７３６の後への５個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失、ＫＣＮＱ２のコドン５４４を中断するイントロンの３’末端におけるＧよりはむしろＡ、配列番号：２のコドン３１９においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン５２４においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン３２３においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン４４８においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴ、およびＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在よりなる群から選択される請求項３記載の単離された核酸。
【請求項５】
該単離された核酸が配列番号：２のコドン２８４におけるシステイン、配列番号：２のコドン３０６におけるトレオニン、配列番号：２のコドン３３３におけるグルタミンまたは配列番号：７のコドン３１０におけるバリンをコードする請求項３記載の単離された核酸。
【請求項６】
高ストリンジェンシー下で請求項１記載の核酸に特異的にハイブリダイズする核酸プローブ。
【請求項７】
ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で請求項３記載の核酸に特異的にハイブリダイズし、ここに、該ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件が、該核酸プローブが配列番号：１または配列番号：６によって定義される核酸にハイブリダイズすることを妨げる核酸プローブ。
【請求項８】
ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で請求項４記載の核酸に特異的にハイブリダイズし、ここに、該ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件が、該核酸プローブが配列番号：１または配列番号：６によって定義される核酸にハイブリダイズすることを妨げる核酸プローブ。
【請求項９】
当該突然変異を含む核酸へのプローブのハイブリダイゼーションを可能とするが、該プローブの野生型ヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３へのハイブリダイゼーションを妨げるストリンジェントな条件下で、請求項７記載のプローブをＤＮＡまたはＲＮＡの患者の試料へハイブリダイズさせることを含み、ここに、ハイブリダイゼーションシグナルの存在が該突然変異の存在を示すことを特徴とするＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の診断方法。
【請求項１０】
当該突然変異を含む核酸へのプローブのハイブリダイゼーションを可能とするが、該プローブの野生型ヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３へのハイブリダイゼーションを妨げるストリンジェントな条件下で、請求項８記載のプローブをＤＮＡまたはＲＮＡの患者の試料へハイブリダイズさせることを含み、ここに、ハイブリダイゼーションシグナルの存在が該突然変異の存在を示すことを特徴とするＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の診断方法。
【請求項１１】
患者のＤＮＡまたはＲＮＡが増幅されており、該増幅されたＤＮＡまたはＲＮＡをハイブリダイズさせる請求項９記載の方法。
【請求項１２】
患者のＤＮＡまたはＲＮＡが増幅されており、該増幅されたＤＮＡまたはＲＮＡをハイブリダイズさせる請求項１０記載の方法。
【請求項１３】
ハイブリダイゼーションがイン・サイチュにて行われる請求項９記載の方法。
【請求項１４】
ハイブリダイゼーションがイン・サイチュにて行われる請求項１０記載の方法。
【請求項１５】
該方法が、該突然変異の存在を同定する手段によって行われることを特徴とする、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こすヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３において突然変異の存在を診断する方法。
【請求項１６】
該突然変異が、配列番号：１のヌクレオチド番号９７８におけるＧ、配列番号：１のヌクレオチド番号１０４３におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１０９４におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド番号１１２５におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１４６９におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド番号９７５および９７６の間への２個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド２７３６後への５個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失、配列番号：２のコドン５４４を中断するイントロンの３’末端におけるＧよりはむしろＡ、配列番号：２のコドン３１９におけるまたはその前の停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン５２４におけるまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン３２３においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン４４８においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴの存在、またはＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在である請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
該手段が、該突然変異を検定するために一本鎖立体配座多形技術を用いることを含む請求項１５記載の方法。
【請求項１８】
該突然変異が、配列番号：１のヌクレオチド番号９７８におけるＧ、配列番号：１のヌクレオチド１０４３におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド番号１０９４におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド１１２５におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド番号１４６９におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド９７５および９７６の間への２個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド番号２７３６後への５個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失、ＫＣＮＱ２のコドン５４４を中断するイントロンの３’末端におけるＧよりはむしろＡ、配列番号：２のコドン３１９においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン５２４においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン３２３においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン４４８においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴの存在、またはＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在である請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
該突然変異が配列番号：６の９４７におけるＴであり、さらに該一本鎖立体配座多形技術が増幅された核酸を用い、ここに、該増幅された核酸が配列番号：１８および配列番号：１９のプライマーを用いて調製された請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
該手段がヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３を配列決定することを含む請求項１５記載の方法。
【請求項２１】
該突然変異が、配列番号：１のヌクレオチド番号９７８におけるＧ、配列番号：１のヌクレオチド番号１０４３におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１０９４におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド１１２５におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１４６９におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド９７５および９７６の間への２個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド２７３６後への５個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失、ＫＣＮＱ２のコドン５４４を中断するイントロンの３’末端におけるＧよりはむしろＡ、配列番号：２のコドン３１９においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン５２４においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン３２３においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン４４８においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴの存在、またはＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在である請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
該手段が、ＲＮＡｓｅアッセイを行うことを含む請求項１５記載の方法。
【請求項２３】
該突然変異が、配列番号：１のヌクレオチド番号９７８におけるＧ、配列番号：１のヌクレオチド番号１０４３におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１０９４におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド１１２５におけるＡ、配列番号：１のヌクレオチド１４６９におけるＴ、配列番号：１のヌクレオチド９７５および９７６の間への２個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド２７３６後への５個のヌクレオチドの挿入、配列番号：１のヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失、配列番号：２のコドン５４４を中断するイントロンの３’末端におけるＧよりはむしろＡ、配列番号：２のコドン３１９においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン５２４においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン３２３においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：２のコドン４４８においてまたはその前に停止コドンを引き起こす突然変異、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴの存在、またはＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在である請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
配列番号：２、配列番号：７、配列番号：８９または配列番号：９１のポリペプチドに結合する抗体。
【請求項２５】
突然変異体ヒトＫＣＮＱ２または突然変異体ヒトＫＣＮＱ３ポリペプチドに結合するが、野生型ヒトＫＣＮＱ２または野生型ＫＣＮＱ３ポリペプチドには結合せず、該突然変異体ポリペプチドがＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす抗体。
【請求項２６】
該突然変異体ポリペプチドが、配列番号：２のアミノ酸残基２１４におけるシステイン、配列番号：２のアミノ酸残基３０６におけるトレオニン、配列番号：２のアミノ酸残基３３３におけるグルタミン、配列番号：７のアミノ酸残基３１０におけるバリンを含み、あるいはここに、該突然変異体ポリペプチドが配列番号：９６である請求項２５記載の抗体。
【請求項２７】
患者からの蛋白質を含む試料を請求項２５記載の抗体と反応させることによって、該患者における突然変異体ＫＣＮＱ２または突然変異体ＫＣＮＱ３ポリペプチドの存在につき検定することを含み、ここに、陽性反応の存在がＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を示すことを特徴とするヒト患者においてＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を診断する方法。
【請求項２８】
該突然変異体ＫＣＮＱ２または突然変異体ＫＣＮＱ３が（ａ）配列番号：２のアミノ酸残基２８４におけるシステインを含むＫＣＮＱ２、（ｂ）配列番号：２のアミノ酸残基３０６におけるトレオニンを含むＫＣＮＱ２、（ｃ）配列番号：２のアミノ酸残基３３３におけるグルタミンを含むＫＣＮＱ２、（ｄ）突然変異した配列番号：１のＤＮＡによってコードされるＫＣＮＱ２、ここに、該突然変異した配列番号：１はヌクレオチド９７５および９７６の間へのＧＴの挿入によって改変された配列番号：１である、（ｅ）突然変異した配列番号：１のＤＮＡによってコードされるＫＣＮＱ２、ここに、該突然変異した配列番号：１は、配列番号：１のヌクレオチド２７３６に続いてのＧＧＧＣＣの挿入によって改変された配列番号：１であり、（ｆ）突然変異した配列番号：１のＤＮＡによってコードされるＫＣＮＱ２、ここに、該突然変異した配列番号：１は、ヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個のヌクレオチドの欠失によって改変された配列番号：１であり、（ｇ）配列番号：２のアミノ酸残基１−３１８を含むＫＣＮＱ２、（ｈ）配列番号：２のアミノ酸残基１−５２３を含むＫＣＮＱ２、（ｉ）配列番号：２のアミノ酸残基１−３２２を含むＫＣＮＱ２、（ｊ）配列番号：２のアミノ酸残基１−４４８を含むＫＣＮＱ２、および（ｋ）配列番号：７のアミノ酸残基３１０におけるバリンを含むＫＣＮＱ３よりなる群から選択される請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
該抗体が、モノクローナル抗体である請求項２７記載の方法。
【請求項３０】
該抗体が、モノクローナル抗体である請求項２８記載の方法。
【請求項３１】
ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異を含む単離されたヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３ポリペプチド。
【請求項３２】
該突然変異が、配列番号：２のアミノ酸残基２８４におけシステイン、配列番号：２のアミノ酸残基３０６におけるトレオニン、配列番号：２のアミノ酸残基３３３におけるグルタミンまたは配列番号：７のアミノ酸残基３１０におけるバリンである請求項３１記載のポリペプチド。
【請求項３３】
（ａ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡは塩基９７５および９７６の間にＧＴの挿入を持つ配列番号：１であり、（ｂ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個の塩基欠失を持つ配列番号：１である、（ｃ）ＤＮＡによってコードされるポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド２７３６に続いてＧＧＧＣＣ挿入を持つ配列番号：１である、（ｄ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１０９４におけるＴを持つ配列番号：１である、および（ｅ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１４６９におけるＴを持つ配列番号：１である、よりなる群から選択される単離されたＫＣＮＱ２ポリペプチド。
【請求項３４】
個体からのＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３ポリペプチドを配列決定し、あるいは、個体に由来する核酸から合成されたＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３ポリペプチドを配列決定することを含み、ここに、ＫＣＮＱ２のアミノ酸残基２８４におけるシステイン、ＫＣＮＱ２のアミノ酸残基３０６におけトレオニン、ＫＣＮＱ２のアミノ酸残基３３３におけるグルタミン、またはＫＣＮＱ３におけるアミノ酸残基３１０におけるバリンの存在が、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を示すことを特徴する、個体においてＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を診断する方法。
【請求項３５】
個体からのＫＣＮＱ２ポリペプチドを配列決定し、あるいは、個体に由来する核酸から合成されたＫＣＮＱ２ポリペプチドを配列決定することを含み、ここに、（ａ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡは塩基９７５および９７６の間にＧＴの挿入を持つ配列番号：１であり、（ｂ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１６９１−１７０３よりなる１３個の塩基欠失を持つ配列番号：１である、（ｃ）ＤＮＡによってコードされるポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド２７３６に続いてＧＧＧＣＣ挿入を持つ配列番号：１である、（ｄ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１０９４におけるＴを持つ配列番号：１である、および（ｅ）ＤＮＡによってコードされたポリペプチド、ここに、該ＤＮＡはヌクレオチド１４６９におけるＴを持つ配列番号：１である、の存在がＢＮＦＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を示すことを特徴とする個体において、ＢＮＦＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を診断する方法。
【請求項３６】
請求項１記載のＤＮＡでトランスフェクトされた細胞。
【請求項３７】
請求項２記載のＤＮＡでトランスフェクトされた細胞。
【請求項３８】
請求項３記載のＤＮＡでトランスフェクトされた細胞。
【請求項３９】
ａ）野生型ＫＣＮＱ２または野生型ＫＣＮＱ３を持つ細胞を調製し；
ｂ）工程（ａ）の細胞を浴溶液に入れて電流を測定し；
ｃ）工程（ｂ）の細胞において誘導されたＫ+電流を測定し；
ｄ）もしＫＣＮＱ２を工程（ａ）で使用するならば、突然変異体ＫＣＮＱ２を持つ細胞を調製し、あるいはもしＫＣＮＱ３を工程（ａ）で使用するならば、突然変異体ＫＣＮＱ３を持つ細胞を調製し；
ｅ）工程（ｄ）の細胞を浴溶液に入れて電流を測定し；
ｆ）工程（ｅ）の細胞において、誘導されたＫ+電流を測定し；
ｇ）工程（ｅ）の浴溶液に薬物を添加し；
ｈ）工程（ｇ）の細胞において、誘導されたＫ+電流を測定し；
ｉ）該薬剤の不存在下で、突然変異体ＫＣＮＱ２または突然変異体ＫＣＮＱ３を持つ細胞で観察される電流と比較して、該薬物が、野生型ＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３を持つ細胞で観察される誘導されたＫ+電流に近いまたは近くない誘導されたＫ+電流をもたらすか否かを測定することを含み、ここに、野生型ＫＣＮＱ２または野生型ＫＣＮＱ３を持つ細胞で観察される電流に近い電流をもたらす薬物が、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を治療し、予防するのに有用であることを特徴とする、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を治療または予防するのに有用な薬物をスクリーニングする方法。
【請求項４０】
該突然変異体ＫＣＮＱ２が表２に示された突然変異を含み、該突然変異体ＫＣＮＱ３が配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴを含み、あるいは該突然変異体ＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在を含む請求項３８記載の方法。
【請求項４１】
該細胞が哺乳動物である請求項３９記載の方法。
【請求項４２】
該細胞が哺乳動物である請求項４０記載の方法。
【請求項４３】
該細胞がＣＨＯ細胞である請求項３９記載の方法。
【請求項４４】
該細胞がＣＨＯ細胞である請求項４０記載の方法。
【請求項４５】
ヒトＫＣＮＱ２ ＲＮＡまたはヒトＫＣＮＱ３ ＲＮＡをトランスフェクション工程で使用する請求項３９記載の方法。
【請求項４６】
野生型ヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３を含む核酸ベクター。
【請求項４７】
突然変異体ヒトＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３を含む核酸ベクター。
【請求項４８】
該突然変異体ヒトＫＣＮＱ２が表２に示された突然変異を含み、該突然変異体ＫＣＮＱ３が、配列番号：６のヌクレオチド９４７によって表されるヌクレオチドにおけるＴを含み、あるいはここに、該突然変異体ヒトＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在を含む請求項４７記載の核酸ベクター。
【請求項４９】
野生型ヒトＫＣＮＱ２または野生型ＫＣＮＱ３を含む非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項５０】
突然変異体ヒトＫＣＮＱ２または突然変異体ヒトＫＣＮＱ３を含む非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項５１】
該突然変異体ヒトＫＣＮＱ２が表２に示された突然変異を含み、該突然変異体ＫＣＮＱ３が、配列番号：６のヌクレオチド９４７におけるＴを含み、あるいは、該突然変異体ヒトＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在を含む請求項５６記載の動物。
【請求項５２】
ａ）野生型ヒトＫＣＮＱ２または野生型ヒトＫＣＮＱ３を持つトランスジェニック動物を調製し；
ｂ）工程（ａ）のトランスジェニック動物において誘導されたＫ+電流を測定し；
ｃ）もしＫＣＮＱ２を工程（ａ）で用いれば、突然変異体ヒトＫＣＮＱ２を持つ、もしＫＣＮＱ３を工程（ａ）で用いれば、突然変異体ヒトＫＣＮＱ３を持つトランスジェニック動物を調製し；
ｄ）工程（ｃ）のトランスジェニック動物において誘導されたＫ+電流を測定し；
ｅ）工程（ｃ）のトランスジェニック動物に薬物を投与し；
ｆ）工程（ｅ）の薬物処理動物において誘導されたＫ+電流を測定し；
ｇ）該薬物不存在下で突然変異体ヒトＫＣＮＱ２または突然変異体ヒトＫＣＮＱ３を持つトランスジェニック動物で観察される電流と比較して、該薬物が、野生型ヒトＫＣＮＱ２または野生型ヒトＫＣＮＱ３を持つトランスジェニック動物で観察される誘導されたＫ+電流に似たまたは似ていない誘導されたＫ+電流をもたらすか否かを測定することを含み、
ここに、野生型ヒトＫＣＮＱにまたは野生型ヒトＫＣＮＱ３を持つトランスジェニック動物で観察される電流に似た電流をもたらす薬物が、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を治療または予防するのに有用であることを特徴とするＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を治療または予防するのに有用な薬物をスクリーニングする方法。
【請求項５３】
該突然変異体ヒトＫＣＮＱ２が表２で示される突然変異を含み、該突然変異体ＫＣＮＱ３が配列番号：６ヌクレオチド９４７におけるＴを含み、あるいは該突然変異体ＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＭＡにおける配列番号：９２に代替エキソンの存在を含む請求項５２記載の方法。
【請求項５４】
ＤＮＡの患者の試料中のＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３を配列決定して、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の存在または不存在を決定することを特徴とする、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の診断方法。
【請求項５５】
該突然変異が表２に示される突然変異、配列番号：６中のヌクレオチド９４７におけるＴの存在から選択され、あるいは該突然変異体ＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在を含む請求項５４記載の方法。
【請求項５６】
ＤＮＡの該患者の試料が増幅されたものである請求項５４記載の方法。
【請求項５７】
ＤＮＡの該患者の試料が増幅されたものである請求項５５記載の方法。
【請求項５８】
ＲＮＡの患者の試料中のＫＣＮＱ２遺伝子またはＫＣＮＱ３遺伝子を配列決定して、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の存在または不存在を決定することを特徴とする、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の診断方法。
【請求項５９】
該突然変異が表２に示される突然変異、配列番号：６中のヌクレオチド９４７におけるＴの存在から選択され、あるいは該突然変異体ＫＣＮＱ３がＫＣＮＱ３のｍＲＮＡにおける配列番号：９２の代替エキソンの存在を含む請求項５８記載の方法。
【請求項６０】
患者から採取したＲＮＡからｃＤＮＡを調製し、該ｃＤＮＡを配列決定してＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の存在または不存在を決定することによって、患者においてＫＣＮＱ２またはＫＮＱ３配列を決定することを特徴とする、ＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇を引き起こす突然変異の診断方法。
【請求項６１】
ＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３に特異的なプローブとのイン・サイチュハイブリダイゼイションを行うことによってＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇の存在を診断する方法であって、ここに、ＫＣＮＱ２またはＫＣＮＱ３いずれかの単一コピーのみの存在がＢＦＮＣ、ＪＭＥまたはローランド癲癇の存在を示す該方法。
【請求項６２】
ポリメラーゼ鎖反応によってＫＣＮＱ２のヌクレオチド配列を決定するための一本鎖ＤＮＡプライマーの対であって、ここに、該プライマーの配列はヒト染色体２０ｑ１３に由来し、ここに、ポリメラーゼ鎖反応における該プライマーの使用の結果、ＫＣＮＱ２の配列の全てまたは一部を有するＤＮＡが合成される該対。
【請求項６３】
該対が、
（ａ）配列番号：２２および配列番号：２３、
（ｂ）配列番号：２４および配列番号：２５、
（ｃ）配列番号：２７および配列番号：２８、
（ｄ）配列番号：２９および配列番号：３０、
（ｅ）配列番号：３１および配列番号：３２、
（ｆ）配列番号：３３および配列番号：３４、
（ｇ）配列番号：３５および配列番号：３６、
（ｈ）配列番号：３７および配列番号：３８、
（ｉ）配列番号：３９および配列番号：４０、
（ｊ）配列番号：４１および配列番号：４２、
（ｋ）配列番号：４３および配列番号：４４、
（ｌ）配列番号：４６および配列番号：４７、
（ｍ）配列番号：４８および配列番号：４９、
（ｎ）配列番号：５０および配列番号：５１、または
（ｏ）配列番号：５２および配列番号：５３、
から選択される請求項６２記載の一本鎖ＤＮＡプライマーの対。
【請求項６４】
ポリメラーゼ鎖反応によってＫＣＮＱ３のヌクレオチド配列を決定するための一本鎖ＤＮＡプライマーの対であって、ここに、該プライマーの配列はヒト染色体８ｑ２４に由来し、ここに、ポリメラーゼ鎖反応における該プライマーの使用の結果、ＫＣＮＱ３の配列の全てまたは一部を有するＤＮＡが合成される該対。
【請求項６５】
該対が、
（ａ）配列番号：５４および配列番号：５５、
（ｂ）配列番号：５６および配列番号：５７、
（ｃ）配列番号：５８および配列番号：５９、
（ｄ）配列番号：６０および配列番号：６１、
（ｅ）配列番号：６２および配列番号：６３、
（ｆ）配列番号：６４および配列番号：６５、
（ｇ）配列番号：６６および配列番号：６７、
（ｈ）配列番号：６８および配列番号：６９、
（ｉ）配列番号：７０および配列番号：７１、
（ｊ）配列番号：７２および配列番号：７３、
（ｋ）配列番号：７４および配列番号：７５、
（ｌ）配列番号：７６および配列番号：７７、
（ｍ）配列番号：７８および配列番号：７９、
（ｎ）配列番号：８０および配列番号：８１、
（ｏ）配列番号：８２および配列番号：８３、
（ｐ）配列番号：８４および配列番号：８５または、
（ｑ）配列番号：８６および配列番号：８７
から選択される請求項６４記載の一本鎖ＤＮＡプライマーの対。
【請求項６６】
配列番号：１の塩基１２４４−３２３２の少なくとも８個の連続したヌクレオチドまたは配列番号：６の少なくとも８個の連続したヌクレオチドを有するＤＮＡを含む単離されたＤＮＡ。
【請求項６７】
該ＤＮＡが配列番号：１の塩基１２４４−３２３２の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドまたは配列番号：６の少なくとも１５個の連続したヌクレオチドを含む請求項６５記載の単離されたＤＮＡ。
【請求項６８】
配列番号：１００−１２９のうちのいずれか１つの少なくとも８個の連続したヌクレオチドを有するＤＮＡを含む単離されたＤＮＡ。
【請求項６９】
配列番号：１００−１２９のいずれか１つの少なくとも１５個に連続したヌクレオチドを有するＤＮＡを含む単離されたＤＮＡ。
【請求項７０】
配列番号：１００−１２９のうちのいずれか１つから選択される配列を含む単離された核酸。
【図１】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図２Ｃ】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７Ａ】
【図７Ｂ】
【図７Ｃ】
【図７Ｄ】
【図７Ｅ】
【図７Ｆ】
【図７Ｇ】
【図７Ｈ】
【図７Ｉ】
【図７Ｊ】
【図７Ｋ】
【図７Ｌ】
【図７Ｍ】
【図７Ｎ】
【図７Ｏ】
【図８Ａ】
【図８Ｂ】
【図８Ｃ】
【図８Ｄ】
【図８Ｅ】
【図８Ｆ】
【図８Ｇ】
【図８Ｈ】
【図８Ｉ】
【図８Ｊ】
【図８Ｋ】
【図８Ｌ】
【図８Ｍ】
【図８Ｎ】
【図８Ｏ】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図２Ｃ】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７Ａ】
【図７Ｂ】
【図７Ｃ】
【図７Ｄ】
【図７Ｅ】
【図７Ｆ】
【図７Ｇ】
【図７Ｈ】
【図７Ｉ】
【図７Ｊ】
【図７Ｋ】
【図７Ｌ】
【図７Ｍ】
【図７Ｎ】
【図７Ｏ】
【図８Ａ】
【図８Ｂ】
【図８Ｃ】
【図８Ｄ】
【図８Ｅ】
【図８Ｆ】
【図８Ｇ】
【図８Ｈ】
【図８Ｉ】
【図８Ｊ】
【図８Ｋ】
【図８Ｌ】
【図８Ｍ】
【図８Ｎ】
【図８Ｏ】
【公開番号】特開２０１０−７５１８２（Ｐ２０１０−７５１８２Ａ）
【公開日】平成２２年４月８日（２０１０．４．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２３９５０１（Ｐ２００９−２３９５０１）
【出願日】平成２１年１０月１６日（２００９．１０．１６）
【分割の表示】特願２０００−５１７９８３（Ｐ２０００−５１７９８３）の分割
【原出願日】平成１０年１０月２３日（１９９８．１０．２３）
【出願人】（５００１８９２３０）ユニバーシティ・オブ・ユタ・リサーチ・ファウンデーション (11)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年４月８日（２０１０．４．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１０月１６日（２００９．１０．１６）
【分割の表示】特願２０００−５１７９８３（Ｐ２０００−５１７９８３）の分割
【原出願日】平成１０年１０月２３日（１９９８．１０．２３）
【出願人】（５００１８９２３０）ユニバーシティ・オブ・ユタ・リサーチ・ファウンデーション (11)
【Ｆターム（参考）】
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