茶抽出物
【課題】苦味、酸味及び雑味が低減され、各種の飲料等への配合性が良く、これを配合した飲料等を殺菌処理した際の非重合体カテキン類の安定性の高い茶抽出物を提供する。
【解決手段】（１）固形分中の非重合体カテキン類が４５〜９０重量％であり、（２）非重合体カテキン類中のガレート体率が０．００１〜４７重量％であり、（３）没食子酸量／非重合体カテキン（重量比）が、０．３以下であり、（４）茶抽出物中の遊離アミノ酸／非重合体カテキン類（重量比）が０．０８以下であり、（５）茶抽出物中の（ショ糖＋ブドウ糖）／非重合体カテキン類（重量比）が０．１５以下である精製茶抽出物。
【解決手段】（１）固形分中の非重合体カテキン類が４５〜９０重量％であり、（２）非重合体カテキン類中のガレート体率が０．００１〜４７重量％であり、（３）没食子酸量／非重合体カテキン（重量比）が、０．３以下であり、（４）茶抽出物中の遊離アミノ酸／非重合体カテキン類（重量比）が０．０８以下であり、（５）茶抽出物中の（ショ糖＋ブドウ糖）／非重合体カテキン類（重量比）が０．１５以下である精製茶抽出物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、苦味、酸味及び雑味が低減され、各種の飲料等への配合性が良く、これを配合した飲料等を殺菌処理した際の非重合性カテキン類の安定性が高い茶抽出物に関する。
【背景技術】
【０００２】
カテキン類の効果としてはコレステロール上昇抑制作用やアミラーゼ活性阻害作用などが報告されている（例えば、特許文献１、２参照）。
また、茶抽出物の製造方法として、ガレート体率が高い茶抽出物とその製造方法が知られている（特許文献３参照）。さらに、飲料の苦味・渋味等の呈味を改善し、オリ、クリームダウンの発生を抑制する方法として、茶飲料にガレート体率が高い茶抽出物を配合することが知られている（特許文献４参照）。また、緑茶抽出物の風味を改善するためにガレート体率をタンナーゼ処理により制御する方法が知られている（特許文献５参照）。
さらに、カテキン類を高濃度に含有する飲料等を殺菌加熱処理するとカテキン類が減少する傾向にある。コーヒー飲料中でｐＨを調整することによりカテキン類の減少を抑制する手段が知られている（特許文献６参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開昭６０−１５６６１４号公報
【特許文献２】特開平３−１３３９２８号公報
【特許文献３】特開２００６−３６６４５号公報
【特許文献４】特開２００６−２７１４０１号公報
【特許文献５】特開２００４−３２１１０５号公報
【特許文献６】特開２００５−１６０３９５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
前記特許文献１及び２に開示されているような、カテキン類のコレステロール上昇抑制作用やアミラーゼ活性阻害作用のような生理効果を発現させるためには、成人一日あたり４〜５杯のお茶を飲むことが必要であることから、より簡便に大量のカテキン類を摂取するために、飲料にカテキン類を高濃度配合する技術が望まれている。
また、前記特許文献３ないし５に示される茶抽出物において、得られる茶抽出物の風味に関しては、一層の改善が望まれていた。
さらに、特許文献６にはカテキン類の減少を抑制する方法が示されているが、これには厳密なｐＨ調整が必要であり、より各種飲料に展開が望まれていた。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、
（１）固形分中の非重合体カテキン類が４５〜９０重量％であり、
（２）非重合体カテキン類中のガレート体率が０．００１〜４７重量％であり、
（３）没食子酸量／非重合体カテキン類（重量比）が、０．３以下であり、
（４）茶抽出物中の遊離アミノ酸／非重合体カテキン類（重量比）が０．０８以下であり、（５）茶抽出物中の（ショ糖＋ブドウ糖）／非重合体カテキン類（重量比）が０．１５以下 である精製茶抽出物を提供するものである。
【０００６】
また、本発明は、茶抽出物中のカフェイン／非重合体カテキン類（重量比）が０．２以下とする精製茶抽出物を提供する。
【０００７】
さらに、本発明は、茶抽出物が緑茶抽出物である精製茶抽出物を提供する。
【０００８】
また、本発明は、前記精製茶抽出物を配合した食品あるいは飲料を提供する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、カテキンを高濃度に含有し、苦味、酸味及び雑味低減し、各種の飲料等への配合性が良く、これを配合した飲料を殺菌処理した際のカテキン含有量の減少が少ない精製茶抽出物が提供できるようになった。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の目的は、苦味、酸味及び雑味が低減され、各種の飲料等への配合性が良く、これを配合した飲料等を殺菌加熱処理した際の非重合体カテキン類の安定性が高い精製茶抽出物を提供することにある。
【００１１】
本発明者らは、高濃度のカテキン類を含有する茶抽出物の風味向上に関して検討した結果、精製茶抽出物の中の非重合体カテキン類、非重合体カテキン類中のガレート体率、及び没食子酸量と非重合体カテキン類を特定の割合にすることにより、渋味、酸味及び雑味の低減に成功し、かつ当該精製茶抽出物を配合した飲料中の殺菌後のカテキン含有量の減少が少ない精製茶抽出物が得られることを見出した。
【００１２】
本発明でいう非重合体カテキン類とは、カテキン、ガロカテキン、カテキンガレート、ガロカテキンガレート、エピカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート及びエピガロカテキンガレートのカテキン類を合わせての総称であり、非重合体カテキン類の濃度は、上記の合計８種の合計量に基づいて定義される。
【００１３】
本発明の精製茶抽出物中には、非重合体カテキン類を、４５〜９０重量％、好ましくは５０〜８８重量％、更に好ましくは５５〜８５重量％、殊更好ましくは、６０〜８３重量％を含有する。非重合体カテキン類含有量がこの範囲内であれば、多量の非重合体カテキン類を容易に摂取し易い。また、非重合体カテキン類含量が４５質量％未満である場合、雑味が多くなり、９０重量％を超えると飲料の苦味が増加する。
【００１４】
本発明の精製茶抽出物中の非重合体カテキン類にはエピガロカテキンガレート、ガロカテキンガレート、エピカテキンガレート、及びカテキンガレートからなるガレート体と、エピガロカテキン、ガロカテキン、エピカテキン及びカテキンからなる非ガレート体がある。エステル型非重合体カテキン類であるガレート体は苦味が強いことから、本発明精製茶抽出物における非重合体カテキン類中の非重合体カテキンガレート体類の割合（ガレート体率）は０．００１〜４７重量％、好ましくは０．０１〜４５重量％、更に好ましくは０．１〜４３重量％、殊更好ましくは、１〜４０重量％、特に好ましくは、５〜３５重量％であることが苦味抑制、生産性の観点から好ましい。
【００１５】
また、本発明の精製茶抽出物中の没食子酸量は、苦味、酸味等の呈味の点から、没食子酸／非重合体カテキン類の比率は、０．３以下、好ましくは０．１以下、更に好ましくは、０．０７以下であり、０以上、好ましくは、０．０００１以上、更に好ましくは、０．００１以上であるのが好ましい。
【００１６】
本発明の精製茶抽出物中の遊離アミノ酸濃度は、非重合体カテキン類対して、遊離アミノ酸／非重合体カテキン類重量比が０．１以下、好ましくは０．０８以下、更に好ましくは、０．０７以下であり、また、０以上、好ましくは、０．００００１以上、更に好ましくは、０．０００１以上であるのが好ましい。
【００１７】
本発明の精製茶抽出物中のショ糖及びブドウ糖の濃度は、非重合体カテキン類に対して、（ショ糖＋ブドウ糖）／非重合体カテキン類重量比が０．１６以下、好ましくは０．１５以下、更に好ましくは、０．１４以下であり、また、０以上、好ましくは、０．０００１以上、更に好ましくは、０．００１以上であるのが好ましい。
【００１８】
本発明の精製茶抽出物中のカフェイン濃度は、非重合体カテキン類に対して、カフェイン／非重合体カテキン類（重量比）が０．２以下、更に０．１５以下、特に０．１以下、殊更に０．０５以下であり、また、０以上、更に、０．０００１以上、特に、０．００１以上であるのが呈味改善の点で好ましい。
【００１９】
本発明の精製茶抽出物に使用する茶抽出物としては、茶葉から得られた抽出液が挙げられる。その他のカフェイン含有植物由来、例えばコーヒー等のカフェイン含有抽出物と茶抽出液の混合物等も用いることができる。使用する茶葉としては、より具体的には、Ｃａｍｅｌｌｉａ属、例えばＣ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ｃ．ａｓｓａｍｉｃａ及びやぶきた種又はそれらの雑種等から得られる茶葉から製茶された茶葉が挙げられる。製茶された茶葉には、煎茶、番茶、玉露、てん茶、釜炒り茶等の緑茶類、烏龍茶に代表される半発酵茶、紅茶に代表される発酵茶がある。また、超臨界状態の二酸化炭素接触処理を施した茶葉を用いてもよい。本発明の精製茶抽出物に使用する茶抽出物としては、特に好ましいのは緑茶抽出物である。
【００２０】
茶抽出物を抽出する方法については、攪拌抽出、ドリップ抽出などの方法が使用できる。また抽出時の水にあらかじめアスコルビン酸ナトリウムなどの有機酸又は有機酸塩類を添加してもよい。また煮沸脱気や窒素ガス等の不活性ガスを通気して溶存酸素を除去しつつ、いわゆる非酸化的雰囲気下で抽出する方法も併用してもよい。このようにして得られた茶抽出物は、そのままでも、乾燥、濃縮しても本発明に使用できる。茶抽出物の形態としては、液体、スラリー、半固体、固体の状態が挙げられる。
【００２１】
精製に使用する茶抽出物には、茶葉から抽出した抽出液を使用する代わりに、茶抽出物の濃縮物を水又は有機溶媒に溶解又は希釈して用いても、茶葉からの抽出液と茶抽出物の濃縮物とを併用してもよい。
ここで、茶抽出物の濃縮物とは、茶葉から熱水又は有機溶媒水溶液により抽出された抽出物を濃縮したものであり、例えば、特開昭５９−２１９３８４号公報、特開平４−２０５８９号公報、特開平５−２６０９０７号公報、特開平５−３０６２７９号公報等に記載されている方法により調製したものをいう。具体的には、茶抽出物として、市販の東京フードテクノ（株）製「ポリフェノン」、伊藤園（株）製「テアフラン」、太陽化学（株）製「サンフェノン」等の粗カテキン製剤を固体の茶抽出物として用いることもできる。
【００２２】
本発明の精製茶抽出物中のガレート率の調整については、天然物のものをそのまま、又は、加水分解処理を行い、ガレート率を低減することができる。加水分解処理としては、具体的には、アルカリによる加水分解、酵素処理による加水分解等が挙げられる。非重合体カテキン類の安定性の観点から、酵素処理による加水分解が好ましい。
【００２３】
茶抽出物の酵素による加水分解処理手段としては、タンナーゼ活性を有する酵素による加水分解処理が好ましい。ここでタンナーゼ活性を有するとは、タンニンを分解する活性を有するものであり、本活性を有するものが使用できる。その起源は、特に限定されるものではないが、アスペルギルス属、ペニシリウム属、リゾプス属、ムコール属などに属するタンナーゼ生産菌を、常法にしたがって培養し得られるタンナーゼが挙げられ、未精製であっても精製品であっても用いることができる。具体的には、タンナーゼ活性を有する酵素として市販品では、タンナーゼ「キッコーマン」（キッコーマン（株）製）、タンナーゼ「三共」（三共ライフテック（株）製）、スミチームＴＡＮ（新日本化学（株）製）などを用いてもよい。当該タンナーゼ活性を有する酵素での処理により、非重合体カテキン類中のガレート体のエステル結合が加水分解され非重合体カテキンガレート体率が低下する。
【００２４】
茶抽出物を、タンナーゼ活性を有する酵素で処理をする時の非重合体カテキン濃度は、好ましくは０．１〜２２重量％、更に好ましくは０．２５〜１８重量％、特に好ましくは０．５〜１６．５重量％である。０．１重量％未満ではこの後の濃縮工程への負荷が大きくなり、生産性の面から好ましくない。また、２２重量％を超えると、加水分解処理に長時間を要し、生産性及び茶抽出物の風味の点から好ましくない。タンナーゼ活性を有する酵素による処理の具体的な手法としては、非重合体カテキンガレート体の低減効果、及び最適の非重合体カテキンガレート体率で酵素反応を停止する点から、茶抽出物中の非重合体カテキン類に対してタンナーゼ活性を有する粉末又は溶液状の酵素を、好ましくは１〜３００Ｕｎｉｔ／ｇ−非重合体カテキン、更に好ましくは３〜２００Ｕｎｉｔ／ｇ−非重合体カテキン、特に好ましくは５〜１５０Ｕｎｉｔ／ｇ−非重合体カテキンになるように添加する。ここで１Ｕｎｉｔは３０℃の水中においてタンニン酸に含まれるエステル結合を１マイクロモル加水分解する酵素量を示す。また、酵素処理時の保持温度は、５〜６０℃が好ましく、更に好ましくは１０〜５０℃、特に好ましくは１０〜４５℃に保持し処理を行う。
【００２５】
タンナーゼ活性を有する酵素による茶抽出物の処理においては、非重合体カテキンガレート体率の低減は、苦渋味低減の面から５重量％以上であるのが好ましい。５重量％未満だと、非重合体カテキンガレート体の減少が少なく、苦渋味低減効果が期待できない。このタンナーゼ活性を有する酵素処理によるガレート体率の制御は処理時の茶抽出液のｐＨによって反応の終点を決定することが好ましい。反応の終点のｐＨは３．０〜６．０、特に３．３〜５．３が好ましい。
【００２６】
酵素による加水分解反応を終了させる為に、酵素活性を失活させ反応を停止する。酵素失活の温度は、６０〜１００℃が好ましく、更に好ましくは７５〜９５℃である。６０℃未満では酵素を短時間で充分に失活することが困難であるため反応が進行し、目的の非重合体カテキンガレート体率の範囲内で酵素反応を停止することができない。又、失活温度に到達してからの保持時間は１０〜１８００秒、更に３０〜１２００秒、特に３０〜６００秒が酵素失活及び風味の点から好ましい。酵素反応の失活方法は、バッチ式加熱もしくはプレート型熱交換機、ホールディングチューブ等を使用した連続保持式加熱等で行う方法が挙げられる。
【００２７】
酵素処理後あるいは酵素処理前に茶抽出液中に残留する微粉を除去する為に、抽出液を遠心分離するのが好ましい。遠心分離機の形式は、微粉を除去するのに十分な遠心力を持つものが好ましく、工業的には大量処理に適した連続式遠心分離機が用いられる。
【００２８】
次いで、酵素で処理された茶抽出物は、例えば減圧濃縮、逆浸透膜処理等で濃縮するのが好ましい。また、必要により、例えば噴霧乾燥、凍結乾燥で乾燥できる。ここでの酵素処理茶抽出物の形態としては液体、スラリー、半固体、固体の状態が挙げられる。エタノール等の有機溶媒中での分散性の観点から、スラリー、半固体、固体の状態が好ましい。また、本発明の精製茶抽出物には、酵素で処理された茶抽出物と未処理の茶抽出物を混合し、混合後の非重合体カテキンガレート体率が０．００１〜４７重量％の範囲としても良い。
【００２９】
加水分解処理によると、没食子酸等の加水分解の副生成物が生成する。これらの副生成物の除去方法としては、非重合体カテキン類と副生成物との溶解度差を利用した有機溶媒による選択溶解法、また、非重合体カテキン類と副生成物の極性の違いを利用して、吸着担体に選択的に吸着させて、没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を低減する方法が挙げられる。
【００３０】
本発明における精製茶抽出物は、ガレート体を低減した茶抽出物から以下の方法により没食子酸、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を除去することにより得ることができる。
非重合体カテキン類と没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖との溶解度差を利用した有機溶媒による選択溶解法としては、加水分解処理品を乾燥後に固液抽出する方法と加水分解処理品溶液を液液抽出する方法が挙げられる。
抽出に使用する溶媒としては、エステル系溶媒、ケトン系溶媒、エーテル系溶媒、アルコール系溶媒、ハロゲン系溶媒が使用できる。具体的には、酢酸エチル、ジエチルエーテール、メチルエチルケトン、ブタノール、クロロホルム、ジクロロンメタンなどが挙げられる。
特に、食品への使用の観点から、酢酸エチル、ジクロロンメタンが好ましい。
【００３１】
吸着担体に選択的に吸着させて、没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を低減する方法としては、吸着担体に没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を吸着させて除去する方法と、非重合体カテキン類を吸着させて没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を吸着させない方法が挙げられる。
【００３２】
吸着担体に没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を吸着させて除去する方法としては、イオン交換樹脂に吸着させて除去する方法が挙げられる。また、非重合体カテキン類との分子サイズの差を利用した分離方法としては、活性炭に吸着させる方法が挙げられる。
【００３３】
非重合体カテキン類と没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖の極性の違いを利用して、吸着担体に選択的に吸着させて、没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を低減する方法としては、非重合体類カテキン類を合成吸着剤に吸着する方法が挙げられる。
【００３４】
この方法は、加水分解後の茶抽出物を合成吸着剤に吸着させることにより行うことができる。
合成吸着剤は、一般に不溶性の三次元架橋構造ポリマーでイオン交換基のような官能基を実質的に持たないものである。好ましくは、イオン交換基が１ｍｅｑ／ｇ未満のものを用いることができる。本発明に用いる合成吸着剤としては、その母体がスチレン系、例えばアンバーライトＸＡＤ４、ＸＡＤ１６ＨＰ、ＸＡＤ１１８０、ＸＡＤ２０００、（供給元：米国ローム＆ハース社）；ダイヤイオンＨＰ２０、ＨＰ２１（三菱化学（株）製）；セパビーズＳＰ８５０、ＳＰ８２５、ＳＰ７００、ＳＰ７０（三菱化学（株）製）；ＶＰＯＣ１０６２（Ｂａｙｅｒ製）、臭素原子を核置換して吸着力を強めた修飾スチレン系、例えばセパビーズＳＰ２０５、ＳＰ２０６、ＳＰ２０７（三菱化学（株）製）、メタクリル系、例えばダイヤイオンＨＰ１ＭＧ、ＨＰ２ＭＧ（三菱化学（株）製）、フェノール系、例えばアンバーライトＸＡＤ７６１（ロームアンドハース（株）製）、アクリル系、例えばアンバーライトＸＡＤ７ＨＰ（ロームアンドハース（株）製）、ポリビニル系、例えばＴＯＹＯＰＥＡＲＬ、ＨＷ−４０Ｃ（東ソー（株）製）、デキストラン系、例えばＳＥＰＨＡＤＥＸ、ＬＨ−２０（ファルマシア社製）等が使用できる。
合成吸着剤としては、その母体がスチレン系、メタクリル系、アクリル系、ポリビニル系が好ましく、特にスチレン系がカテキンと没食子酸との分離性の点から好ましい。
【００３５】
加水分解処理後の茶抽出物を合成吸着剤に吸着させる手段としては、加水分解処理後の茶抽出物に合成吸着剤を添加、撹拌し吸着後、ろ過操作により合成吸着剤を回収するバッチ方法又は合成吸着剤を充填したカラムを用いて連続処理により吸着処理を行なうカラム方法が採用されるが、生産性の点からカラムによる連続処理方法が好ましい。
合成吸着剤が充填されたカラムは、予めＳＶ（空間速度）＝０．５〜１０［ｈ−１］、合成吸着剤に対する通液倍数として２〜１０［ｖ／ｖ］の通液条件で９５ｖｏｌ％エタノール水溶液による洗浄を行い、合成吸着剤の原料モノマーや原料モノマー中の不純物等を除去するのが好ましい。そして、その後ＳＶ＝０．５〜１０［ｈ−１］、合成吸着剤に対する通液倍数として１〜６０［ｖ／ｖ］の通液条件により水洗を行い、エタノールを除去して合成吸着剤の含液を水系に置換する方法により、非重合体カテキン類の吸着能が向上する。
【００３６】
カラムに茶抽出物を通液するときの条件としては、合成吸着剤に吸着させる場合、茶抽
出物中の非重合体カテキン類の濃度は、好ましくは０．１〜２２重量％、更に好ましくは
０．１〜１５重量％、特に好ましくは０．５〜１０重量％、殊更好ましくは０．５〜３重量
％が、合成吸着剤への吸着効率の点から好ましい。
【００３７】
茶抽出物を、合成吸着剤を充填したカラムに通液する条件としては、ＳＶ(空間速度)＝
０．５〜１０[ｈ−１]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍数として０．５〜２０[ｖ
／ｖ]で通液するのが好ましい。１０[ｈ−１]以上の通液速度では、非重合体カテキン類の
吸着が不充分や２０[ｖ／ｖ]以上の通液量であると、非重合体カテキン類の吸着が安定し
ない場合がある。
【００３８】
茶抽出液を吸着後、合成吸着剤は、水又は有機溶媒水溶液で洗浄するのが好ましい。合
成吸着剤の洗浄に使用する水溶液としては、カテキンの回収率の点からｐＨ７以下の水が
好ましく、有機溶媒との混合系においても使用することができる。有機溶媒としては、ア
セトン、メタノール、エタノールなどが挙げられ、食品への使用の観点から、エタノール
が好ましい。含有する有機溶媒の濃度は、０〜２０重量％、好ましくは０〜１０重量％、
より好ましくは０〜５重量％がカテキンの回収率の点から好ましい。
【００３９】
この洗浄工程においては、ＳＶ（空間速度）＝０．５〜１０[ｈ−１]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍数として１〜１０[ｖ／ｖ]で、合成吸着剤に付着した夾雑物を除去することが好ましい。更にＳＶ＝０．５〜５[ｈ−１] の通液速度で、通液倍数として１〜５[ｖ／ｖ] で洗浄することが夾雑物の除去効果及び非重合体カテキン類の回収率の点から好ましい。
【００４０】
非重合カテキン類を溶出させる際の有機溶媒水溶液を溶出液として使用する場合は、有機溶媒としては、水溶性有機溶媒が好ましく、アセトン、メタノール、エタノール等が挙げられ、食品への使用の観点からエタノールが好ましい。かかる有機溶媒は非重合体カテキン類の収率が大きい、及び不純物量が少なくなる等の点から、有機溶媒水溶液として用いるのが好ましく、有機溶媒濃度としては、１〜９５重量％水溶液、更に１０〜９０重量％水溶液、特に２０〜８０重量％水溶液として用いるのが好ましい。
ＳＶ（空間速度）＝０．５〜５[ｈ−１]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍数とし
て１〜１５[ｖ／ｖ]で、非重合体カテキン類を溶出することが好ましい。更にＳＶ＝１〜
３[ｈ−１] の通液速度で、通液倍数として２〜１０[ｖ／ｖ] で溶出することが生産性及び非重合体カテキン類の回収率の点から好ましい。
非重合体カテキン類の溶出に用いる溶出液として有機溶媒水溶液を用いる場合は、工程
の簡略化及び精製コストの点から好ましい。
【００４１】
非重合カテキン類を溶出させる際に塩基性水溶液を用いる場合、非重合体カテキン類の溶出に用いる塩基性水溶液としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩等のアルカリ水溶液、好ましくは、ナトリウム、カリウム系のアルカリ性水溶液、例えば水酸化ナトリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液等を好適に用いることができる。また、アルカリ性水溶液のｐＨは７〜１４の範囲が好ましく、非重合体カテキン類回収率の点から９〜１３．８、特に１０〜１３．５が好ましい。ｐＨ７〜１４のナトリウム系水溶液としては、４％以下の水酸化ナトリウム水溶液、１Ｎ−炭酸ナトリウム水溶液等が挙げられる。塩基性水溶液と有機溶媒は混合して用いてもよい。有機溶媒の濃度としては、カフェインとカテキンの分離性の点から０〜９０重量％の範囲が好ましく、０〜５０重量％がより好ましく、０〜２０重量％が更に好ましい。
【００４２】
溶出工程においては、溶出に用いる塩基性水溶液として互いにｐＨが異なる２種以上の
塩基性水溶液を用い、これら塩基性水溶液をｐＨが低い順に合成吸着剤に接触させること
ができる。それぞれのｐＨ区分で異なる非重合体カテキン類や他の成分を脱着することが
できる。
【００４３】
ＳＶ（空間速度）＝２〜１０[ｈ−１]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍数として
１〜３０[ｖ／ｖ]で、非重合体カテキン類を溶出することが好ましい。更にＳＶ＝３〜７
[ｈ−１] の通液速度で、通液倍数として３〜１５[ｖ／ｖ] で溶出することが生産性及び非重合体カテキン類の回収率の点から好ましい。
非重合体カテキン類の溶出に用いる溶出液として塩基性水溶液を用いる場合は、精製茶
抽出物の色調、活性炭処理での回収率の点から好ましい。
【００４４】
塩基性水溶液で溶出した場合には、非重合体カテキン類の溶出液は、塩基性であり、非
重合カテキン類の安定性の観点から、溶出液のｐＨを７以下に、より好ましくはｐＨを１
〜６、更に好ましくは１〜５、殊更好ましくは２〜４に調整する。具体的には、酸による
中和、電気透析又はイオン交換樹脂によるアルカリ金属イオンの除去が利用できる。イオン交換樹脂としては特にＨ型のカチオン交換樹脂を用いるのが好ましい。プロセスの簡便性からイオン交換樹脂によるｐＨ調整が好ましい。カチオン交換樹脂としては、具体的には、アンバーライト２００ＣＴ、ＩＲ１２０Ｂ、ＩＲ１２４、ＩＲ１１８、ダイヤイオンＳＫ１Ｂ、ＳＫ１ＢＨ、ＳＫ１０２、ＰＫ２０８、ＰＫ２１２等を用いることができる。
【００４５】
本発明で使用される合成吸着剤は本発明実施後に再使用できる。再生処理としては、具体的には、エタノールのような有機溶媒を通液し合成吸着剤上に吸着したカフェイン等の不溶分を脱着させる。又は水酸化ナトリウムのようなアルカリ水溶液を通液・洗浄し、合成吸着剤上に残存する水溶性成分をすべて脱着させるなどの方法が挙げられる。更に水蒸気による洗浄を組み合わせても良い。
【００４６】
更に非重合体カテキン類の溶出液は、必要に応じて濃縮して後の工程に付すことができる。
得られた非重合体カテキン類の溶出液が懸濁する場合は、除濁することが好ましい。除濁の具体的な操作としては、ろ過及び／又は遠心分離処理により固形分と水溶性部分とを固液分離することが挙げられる。
【００４７】
本発明の精製茶抽出物の製造においては、合成吸着剤を使用する方法以外に以下の方法においても、没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を低減することができる。すなわち、ガレート体率が低減した茶抽出物を有機溶媒と水の重量比が９０／１０を超え９７／３以下の混合溶液に混合し、次いで生成した沈殿を分離する。必要に応じて沈殿分離後の混合溶液に加水及び／又は混合溶液から脱有機溶媒して混合溶液中の有機溶媒と水の重量比が４０／６０〜７０／３０の範囲とし、次いで析出した濁り成分を分離する。次に、活性炭及び酸性白土又は活性白土と接触処理を行うことができる。茶抽出物中の有機溶媒と水は、減圧蒸留などの方法を用いて留去できる。また、処理後の緑茶抽出物は液状でも固体状でもいずれでも良いが、固体状態を調製する場合には凍結乾燥やスプレードライなどの方法によって粉末化しても良い。
【００４８】
茶抽出物の精製に用いる有機溶媒としては、エタノール、メタノール、アセトン、酢酸エチル等が挙げられる。これらのうち、メタノール、エタノール、アセトンの親水性有機溶媒が好ましく、特に食品への使用を考慮するとエタノールが好ましい。
水としては、イオン交換水、水道水、天然水等が挙げられる。この有機溶媒と水は、混合して又はそれぞれ別々に緑茶抽出物と混合してもよいが、混合溶液としてから茶抽出物と混合するのが好ましい。
【００４９】
本発明の精製茶抽出物の製造においては、茶抽出物を有機溶媒と水の混合溶液に分散させる時の有機溶媒と水の質量比は、非重合体カテキン類の抽出効率及び風味の点から９０／１０を超え９７／３以下、好ましくは９２／８〜９７／３、更に好ましくは９２／８〜９５／５の範囲に調整するのが好ましい。次いで、生成した沈殿物はろ過等の公知の方法で除去する。
【００５０】
本発明の精製茶抽出物の製造においては、有機溶媒と水の混合溶液１００重量部に対して、乾燥重量換算の茶抽出物を１０〜４０重量部、特に１０〜３０重量部添加して処理するのが、茶抽出物を効率よく処理できるので好ましい。
【００５１】
本発明の精製茶抽出物の製造においては、有機溶媒と水の混合溶液に茶抽出物を混合する方法は、特に制限されず、茶抽出物を最終的に処理する際の有機溶媒と水の重量比が９０／１０を超え９７／３以下になっていれば良い。例えば、茶抽出物を水に溶解した後に有機溶媒を添加していくことによって有機溶媒と水の重量比を９０／１０を超え９７／３以下の範囲にしても良く、茶抽出物を有機溶媒に懸濁させた後、徐々に水を添加して同様の比率としても良い。抽出効率の点から、水に溶解後に有機溶媒を添加していく方法が好ましい。水と有機溶媒の混合溶液又はそれぞれの添加時間は、１０〜６０分程度の時間でゆっくり滴下するのが好ましい。また、カテキン類の抽出効率を上げるために攪拌状態で滴下するのが好ましい。滴下終了後は１０〜６００分程度の攪拌時間を設けると更にカテキン類の抽出効率を上がり好ましい。これらの処理は、１０〜６０℃で行うことができ、特に１０〜５０℃、更に１０〜４０℃で行うのが好ましい。また緑茶抽出物は１回で全量添加しても良いが、２回以上、例えば２〜４回に分割して添加しても良い。次いで、生成した沈殿物はろ過等の方法で除去する。
【００５２】
さらに、沈殿物の除去された混合溶液中の有機溶媒と水の重量比が４０／６０〜７０／３０、好ましくは４５／５５〜６０／４０となるように、混合溶液に加水及び／又は混合溶液から脱有機溶媒するのが好ましい。混合溶液から有機溶媒の含有量を減ずるには、減圧蒸留等の方法で有機溶媒を留去することにより行われる。また、沈澱除去処理後の混合溶液に加水する場合は、イオン交換水、水道水、天然水等の水を加えることにより行われる。
【００５３】
加水及び／又は脱有機溶媒をした後、濁り成分を析出させる静置時間は、特に限定されない。例えば、２分〜５０時間、更に２分〜２４時間、特に５分〜６時間であるのが好ましい。また、濁り成分の析出温度は、−１５〜７８℃、更に５〜４０℃、特に５〜２５℃であるのが好ましい。濁り成分を析出させた後、混合溶液から濁り成分を分離するときの温度は、−１５〜７８℃、更に５〜４０℃、特に５〜２５℃であるのが好ましい。この温度の範囲外であると、分離性が劣り、また溶液の性状に変化が見られるような場合がある。濁り成分を分離する時の方法は特に制限されず、例えば遠心分離法、ろ過法等が挙げられる。
【００５４】
本発明の精製茶抽出物の製造においては、必要に応じてカフェインを除去する為に、茶抽出物を有機溶媒と水の混合溶液に混合する際に活性炭、酸性白土及び活性白土の１種又は２種以上と接触させるのが好ましい。
【００５５】
用いる活性炭としては、一般に工業レベルで使用されているものであれば特に制限されず、例えば、ＺＮ−５０（北越炭素工業（株）製）、クラレコールＧＬＣ、クラレコールＰＫ−Ｄ、クラレコールＰＷ−Ｄ（クラレケミカル（株）製）、白鷲ＡＷ５０、白鷲Ａ、白鷲Ｍ、白鷲Ｃ（武田薬品工業（株）製）等の市販品を用いることができる。活性炭の細孔容積は０．０１〜０．８ｍＬ／ｇ、特に０．１〜０．７ｍＬ／ｇが好ましい。また、比表面積は８００〜２０００ｍ２／ｇ、特に９００〜１６００ｍ２／ｇの範囲のものが好ましい。なお、これらの物性値は窒素吸着法に基づく値である。
【００５６】
活性炭は、有機溶媒と水の混合溶液１００重量部に対して０．５〜１５重量部、更に０．５〜１０重量部、特に１．０〜８重量部添加するのが好ましい。活性炭の添加量が少なすぎると、カフェイン除去効率が悪くなり、また多すぎるとろ過工程におけるケーク抵抗が大きくなり好ましくない。
【００５７】
用いる酸性白土又は活性白土は、ともに一般的な化学成分として、ＳｉＯ２、Ａｌ２Ｏ３、Ｆｅ２Ｏ３、ＣａＯ、ＭｇＯ等を含有するものであるが、ＳｉＯ２／Ａｌ２Ｏ３比が３〜１２、特に４〜９であるのが好ましい。またＦｅ２Ｏ３を２〜５重量％、ＣａＯを０〜１．５重量％、ＭｇＯを１〜７重量％含有する組成のものが好ましい。活性白土は天然に産出する酸性白土（モンモリロナイト系粘土）を硫酸等の鉱酸で処理したものであり、大きい比表面積と吸着能を有する多孔質構造をもった化合物である。酸性白土を更に、酸処理することにより比表面積が変化し、脱色能の改良及び物性が変化することが知られている。
【００５８】
酸性白土又は活性白土の比表面積は、酸処理の程度等により異なるが、５０〜３５０ｍ２／ｇであるのが好ましく、ｐＨ（５質量％サスペンジョン）は２．５〜８、特に３．６〜７のものが好ましい。例えば、酸性白土としては、ミズカエース＃６００（水澤化学社製）等の市販品を用いることができる。
【００５９】
酸性白土又は活性白土は、有機溶媒と水の混合溶液１００重量部に対して０．５〜３０重量部、更に１．５〜２０重量部、特に２．５〜１５重量部添加するのが好ましい。酸性白土又は活性白土の添加量が少なすぎると、カフェイン除去効率が悪くなり、また多すぎるとろ過工程におけるケーク抵抗が大きくなり好ましくない。
【００６０】
また、活性炭と酸性白土又は活性白土を併用する場合の割合は、重量比で活性炭１に対して１〜１０がよく、特に活性炭：酸性白土又は活性白土＝１：１〜１：６であるのが好ましい。
【００６１】
本発明において、必要に応じてカフェインを選択的に除去する為に、茶抽出物を有機溶媒と水の混合溶液に混合する際に活性炭及び／又は酸性白土若しくは活性白土と接触させるのが好ましいが、その場合の茶抽出物、有機溶媒と水の混合溶液並びに活性炭及び／又は、酸性白土若しくは活性白土との接触順序は特に限定されない。例えば（１）有機溶媒と水の混合溶液に茶抽出物を添加し、活性炭接触、次いで酸性白土又は活性白土接触する方法、（２）有機溶媒と水の混合溶液に茶抽出物を添加し、酸性白土又は活性白土接触、次いで活性炭接触する方法、（３）有機溶媒と水との混合溶液に活性炭を添加し、これに茶抽出物を添加し、次いで酸性白土又は活性白土を添加する方法等が挙げられるが、（４）有機溶媒と水の混合溶液に酸性白土又は活性白土を添加し、これに茶抽出物を添加し、次いで活性炭を添加する方法が好ましい。
これらの各成分添加と次の成分添加との間には、ろ過を行うのが好ましい。また緑茶抽出物を２回以上に分割して添加した場合、その間にろ過を行ってもよい。
【００６２】
さらに、茶抽出物を酸性白土又は活性白土と、有機溶媒と水の混合溶液との分散液と接触混合する場合、接触する時のｐＨを３〜６の範囲に調整して行うことが、非重合体カテキン類を効率よく抽出し、精製緑茶抽出物を得るために好ましい。接触の際、クエン酸、乳酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸等の有機酸を、有機酸と非重合体カテキン類の重量比率（有機酸／非重合体カテキン類）が０．０２〜０．２０の範囲で添加するのが好ましい。
【００６３】
また、茶抽出物を酸性白土又は活性白土と、有機溶媒と水の混合溶液との分散液と接触混合する場合、接触するときの溶液の温度は始めに１０〜３０℃とし、その後２０〜６０℃に昇温すると、茶抽出物の溶解が促進されるという点及び分散液へのカテキン抽出効率が促進されるという点で好ましい。
【００６４】
本発明の精製茶抽出物を製造するに当たり、酸性白土又は活性白土と、有機溶媒と水の混合溶液処理を使用する好ましい製造方法は以下の手順である。ガレート体率が低減した茶抽出物を、有機溶媒と水の重量比が９０／１０を超え９７／３以下の混合溶液に混合し、次いで生成した沈殿を除去した後に、更に必要に応じて混合溶液中の有機溶媒と水の重量比が４０／６０〜７０／３０、好ましくは４５／５５〜６０／４０となるように、混合溶液に加水及び／又は混合溶液から脱有機溶媒、次いで析出した濁り成分を分離する。
具体的には、活性炭及び／又は酸性白土又は活性白土と接触混合する場合は、まず茶抽出物を有機溶媒と水の重量比が９０／１０を超え９７／３以下の混合溶液に混合させ、活性炭及び／又は酸性白土若しくは活性白土と接触処理し、次いで生成している沈殿とともに活性炭及び／又は酸性白土又は活性白土を除去し、ろ液部分に加水及び／又は脱有機溶媒を行い、析出した濁り成分を分離するのが好ましい。また、活性炭との接触は、次の工程の加水及び／又は脱有機溶媒を行う前に行っても良いし、加水及び／又は脱有機溶媒を行い、析出した濁り成分を分離した後に活性炭と接触させても良い。
【００６５】
茶抽出物溶液と活性炭及び酸性白土又は活性白土、活性炭とを接触する場合の処理は、バッチ式、カラムによる連続処理等のいずれの方法で行ってもよい。一般には、粉末状の活性炭等を添加、撹拌し、カフェインを選択的に吸着後、ろ過操作によりカフェインを除去したろ液を得る方法又は顆粒状の活性炭等を充填したカラムを用いて連続処理によりカフェインを選択的に吸着する方法等が挙げられる。また、茶抽出物と活性炭との接触方法は、活性炭カラムによる連続処理等の方法で行うのが好ましい。
【００６６】
かくして得られた本発明の精製茶抽出物は、苦味、酸味及び雑味が低減されており、特に当該茶抽出物を配合した飲料及び食品における苦味、酸味及び雑味が低減されている。更に、当該茶抽出物を配合した飲料及び食品を、殺菌処理した際にカテキン含有量が低下しないという特徴を有する。従って、本発明の精製茶抽出物を配合した飲料及び食品は、その飲料及び食品の有する風味が損なわれず、かつカテキン含有量の高いものとなる。
【００６７】
本発明精製茶抽出物を配合できる食品としては、その形態は特に制限されず、飲料；米飯類；パン、ケーキ等の小麦粉食品；ソース、味噌、醤油等の調味料；納豆等の大豆食品；クリーム、ドレッシング、マヨネーズ及びマーガリン等の乳化食品；水産加工食品；食肉加工品；漬物類；麺類；粉末スープを含むスープ類、ゼリー、チーズ、ヨーグルト等の乳製品；スナック菓子、チューインガム、キャンディー、チョコレート等の菓子類；錠剤、顆粒剤等の健康食品等が挙げられる。
【００６８】
本発明精製茶抽出物を配合することができる飲料としては不発酵茶である緑茶、半発酵茶及び発酵茶から選ばれた茶の抽出液；及び非茶系飲料が挙げられる。半発酵茶としては例えば烏龍茶が挙げられ、発酵茶としては例えば紅茶が挙げられる。また非茶系飲料としては例えばソフトドリンクである炭酸飲料、果実ジュース類、野菜ジュース類、豆乳飲料、牛乳、コーヒー飲料、水、ニアウォーター、スポーツ飲料、エンハンスドウォーター、ドリンク剤などの栄養飲料、アルコール飲料などが挙げられる。
【００６９】
これらの飲料及び食品中の非重合体カテキン類濃度は、生理効果の点から１食分あたり２５０〜１０００ｍｇ、更に４００〜８５０ｍｍｇ、特に５００〜７５０ｍｇ含有する濃度が好ましい。
【００７０】
これらの飲料及び食品は、本発明の精製茶抽出物を添加する以外は常法に従って製造することができる。
【実施例】
【００７１】
非重合体カテキン類、カフェイン及び没食子酸の測定法
試料溶液をフィルター（０．４５μｍ）で濾過し、（株）島津製作所製、高速液体クロマトグラフ（型式ＳＣＬ−１０ＡＶＰ）を用い、オクタデシル基導入液体クロマトグラフ用パックドカラムＬ−カラムＴＭ ＯＤＳ（４．６ｍｍφ×２５０ｍｍ：財団法人 化学物質評価研究機構製）を装着し、カラム温度３５℃でグラジエント法で行った。非重合体カテキン類の標準品は、三井農林（株）製のものを、カフェインはアルドリッチ社品、没食子酸は和光純薬品を使用し、検量線法で定量した。移動相Ａ液は酢酸を０．１ｍｏｌ／Ｌ含有の蒸留水溶液、Ｂ液は酢酸を０．１ｍｏｌ／Ｌ含有のアセトニトリル溶液とし、試料注入量は２０μＬ、ＵＶ検出器波長は２８０ｎｍの条件で行った。
【００７２】
遊離アミノ酸の測定
遊離トリプトファン
（分析機器）
機種：ＬＣ−１０ＡＤ（島津製作所社製）
検出器：蛍光分光光度計 ＲＦ−１０Ａｘｌ
カラム：ｌｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−２、内径４．６mm×長さ２５０mm
【００７３】
遊離トリプトファンを除く遊離アミノ酸
（分析機器）
機種：Ｌ−８８００形高速アミノ酸分析計（日立製作所社製）
カラム：日立カスタムイオン交換樹脂、内径４．６mm×長さ６０mm
移動相：Ｌ−８５００ ＰＦ緩衝液
反応液：ニンヒドリン試液
【００７４】
ショ糖およびブドウ糖の分析方法
（分析機器）
機種：ＬＣ−１０ＡＤvp（島津製作所社製）
検出器：示差屈折計 ＲID-10A（島津製作所社製）
カラム：wakosil 5NH2 φ4.6mm×250mm（和光純薬工業株式会社）
溶離液：CH3CN/H2O=75/25(v/v)
試料注入量1０μＬ
【００７５】
風味の評価方法
茶抽出物を非重合体カテキン類濃度が０．１５％になるように水に希釈し、５名の男性モニターが、苦味、酸味、苦味について以下の基準で評点をつけ評価した。
【００７６】
苦味における評価
１ 感じにくい
２ やや感じにくい
３ やや感じる
４ 感じる
【００７７】
酸味における評価
１ 感じにくい
２ やや感じにくい
３ やや感じる
４ 感じる
【００７８】
雑味における評価
１ 感じにくい
２ やや感じにくい
３ やや感じる
４ 感じる
【００７９】
実施例１ 精製緑茶抽出物Ａ
（１）緑茶抽出物（ポリフェノンＨＧ、東京フードテクノ製）５００ｇを水１５０００ｇに溶解し、「緑茶抽出液」１５５００ｇ（ｐＨ５．６）を得た。（緑茶抽出液中の非重合体カテキン類濃度＝１．０５重量％、緑茶抽出液のガレート体率＝５２．５重量％）
この緑茶抽出液を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（キッコーマン（株）製タンナーゼＫＴＦＨ、５００Ｕ／ｇ）を緑茶抽出液に対して５００ｐｐｍとなる濃度で添加し、１５分間保持し、ガレート体率４４．２重量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ５．３）。次いで減圧濃縮にて５５℃、２．７ｋｐａでＢｒｉｘ濃度３０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ活性を有する酵素で処理した緑茶抽出物」４００ｇを得た。得られた緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量３２．１重量％、非重合体カテキンガレート体率４４．０重量％であり、没食子酸含量１．７重量％だった。
【００８０】
（２）酸性白土（ミズカエース＃６００、水澤化学工業（株）製）１００ｇを常温、２５０ｒ／ｍｉｎ攪拌条件下の９２重量％エタノール水溶液８００ｇ中に分散させ、約１０分間攪拌を行った後、（１）で得られたタンナーゼ活性を有する酵素で処理した緑茶抽出物２００ｇを投入し、室温のまま約３時間の攪拌を続けた（ｐＨ４．０）。その後、生成している沈殿及び酸性白土を２号ろ紙でろ過した。得られたろ液にイオン交換水を４１７ｇ添加し、１５℃、１００ｒ／ｍｉｎ攪拌条件下で約５分間攪拌を行った。その混合溶液を小型冷却遠心分離機を用い（日立工機（株）製）、操作温度１５℃で析出した濁り成分を分離した（６０００ｒｐｍ、５分）。分離した溶液を活性炭（クラレコールＧＬＣ、クラレケミカル社製）３０ｇと接触させ、続けて０．２μｍメンブランフィルターによってろ過を行った。最後にイオン交換水２００ｇを添加して、４０℃、２．７ｋｐａでエタノールを留去し、その後、水分量を調整して「精製緑茶抽出物Ａ」を得た。
【００８１】
実施例２ 精製緑茶抽出物Ｂ
（１）上記実施例１と同様に、得た緑茶抽出液を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（タンナーゼＫＴＦＨ）を緑茶抽出液に対して５００ｐｐｍとなる濃度で添加し、４０分間保持し、ガレート体率３０質量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ５．０）。次いで減圧濃縮にて５５℃、２．７ｋｐａでＢｒｉｘ濃度２５％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ活性を有する酵素で処理した緑茶抽出物」４００ｇを得た。得られた緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量重量２９．８％、非重合体カテキンガレート体率３２．５重量％、没食子酸含量３．６重量％であった。
【００８２】
（２）実施例１と同様な精製処理を行い、「精製緑茶抽出物Ｂ」を得た。
【００８３】
実施例３ 精製緑茶抽出物Ｃ
（１）緑茶葉（ケニア産、大葉種）３ｋｇに８８℃の熱水４５ｋｇを添加し、３０分間攪拌バッチ抽出した後、２００メッシュ金網で粗ろ過後、抽出液中の微粉を除去する為に遠心分離操作を行い、「緑茶抽出液」３７．２ｋｇを得た。（緑茶抽出液中の非重合体カテキン類濃度＝０．９１重量％、緑茶抽出液のガレート体率＝５１．２重量％、カフェイン０．１７重量％）
この緑茶抽出液を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（タンナーゼＫＴＦＨ）を緑茶抽出液に対して４５０ｐｐｍとなる濃度で添加し、４０分間保持し、ガレート体率３０．５重量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ５．１）。次いで減圧濃縮にて７０℃、６．７ｋｐａでＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ処理した緑茶抽出物」０．９ｋｇを得た。得られた緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量２７．８重量％、非重合体カテキンガレート体率３０．３重量％、没食子酸３．６重量％であった。「タンナーゼ処理した緑茶抽出物」１０ｇを、脱イオン水３００ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した。
【００８４】
（２）次いで、ステンレスカラム１（内径２２ｍｍ×高さ９６ｍｍ、容積３６．５ｍＬ）に充填した合成吸着剤ＳＰ−７０（三菱化学（株）製）３６ｍＬを、予めＳＶ＝１（ｈ−１）で９５（ｖ／ｖ）エタノール７２０ｍＬによる洗浄を行い、次いで７２０ｍｌのイオン交換水で洗浄した。ガラスカラム２（内径１６ｍｍ×高さ８０ｍｍ、容積１６．１ｍＬ）に充填したイオン交換樹脂ＳＫ１ＢＨ（三菱化学（株）製）１４．７ｍＬを、予めＳＶ＝１（ｈ−１）で９５（ｖ／ｖ）エタノール３００ｍＬによる洗浄を行い、次いで３００ｍｌのイオン交換水で洗浄した。その後、得られたタンナーゼ処理液（２）１４４ｇをＳＶ＝１（ｈ−１）でカラム１に通液した。次いでＳＶ＝２（ｈ−１）で３６ｍＬのイオン交換水で洗浄した。その後、０．１重量％水酸化ナトリウム水溶液をＳＶ＝５（ｈ−１）で２１６ｍＬ通液した。溶出液は連続でカラム２に通液して、脱イオンを行い、非重合体カテキン類組成物５５２ｇ（ｐＨ２．７）を得た。次いで減圧濃縮にて７０℃、６．７ｋｐａで濃縮処理を行い、精製緑茶抽出物Ｃを得た。
【００８５】
実施例４ 精製緑茶抽出物Ｄ
（１）上記実施例３で得られた緑茶抽出液を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（タンナーゼＫＴＦＨ）を緑茶抽出液に対して４３０ｐｐｍとなる濃度で添加し、１２０分間保持し、ガレート体率５．２重量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ４．８）。次いで減圧濃縮にて７０℃、６．７ｋｐａでＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ処理した緑茶抽出物」０．９ｋｇを得た。得られた精製緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量２５．７重量％、非重合体カテキンガレート体４．５重量％、没食子酸７．３重量％であった。
【００８６】
（２）次いで、実施例３同様に合成吸着剤を用いた精製を行い、精製緑茶抽出物Ｄを得た。
【００８７】
比較例１
実施例１−（１）の緑茶抽出物（ポリフェノンＨＧ、東京フードテクノ（株）製）を使用した。
【００８８】
比較例２ 緑茶抽出物Ｅ
実施例４―（１）のタンナーゼ処理した緑茶抽出物を使用した。
【００８９】
比較例３
緑茶抽出物（テアフラン９０Ｓ；伊藤園（株）製）を使用した。
【００９０】
比較例４ 緑茶抽出物Ｆ
（１）内径３５０ｍｍのカラム式抽出機に８８℃の熱水１２４ｋｇを投入し、緑茶葉（ケニア産、大葉種）６．２ｋｇを投入し、５分静置の後に、下方より液を抜き出し、ドリップ抽出を行った。その後、抽出液中の微粉を除去する為に遠心分離操作を行い、「緑茶抽出液」９３．５ｋｇを得た。（緑茶抽出液中の非重合体カテキン類濃度＝０．８６重量％、緑茶抽出液のガレート体率＝５５．２重量％）
この緑茶抽出液を次いで減圧濃縮にて７０℃、６．７ｋｐａでＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「緑茶抽出物」２．１ｋｇを得た。得られた「緑茶抽出物」１０ｇを、脱イオン水３００ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した。
【００９１】
（２）次いで、ステンレスカラム１（内径２２ｍｍ×高さ９６ｍｍ、容積３６．５ｍＬ）に充填した合成吸着剤ＳＰ−７０（三菱化学（株）製）３６ｍＬを、予めＳＶ＝１（ｈ−１）で９５（ｖ／ｖ）エタノール７２０ｍＬによる洗浄を行い、次いで７２０ｍｌのイオン交換水で洗浄した。ガラスカラム２（内径１６ｍｍ×高さ８０ｍｍ、容積１６．１ｍＬ）に充填したイオン交換樹脂ＳＫ１ＢＨ（三菱化学（株）製）１４．７ｍＬを、予めＳＶ＝１（ｈ−１）で９５（ｖ／ｖ）エタノール３００ｍＬによる洗浄を行い、次いで３００ｍｌのイオン交換水で洗浄した。その後、得られたタンナーゼ処理液（２）１４４ｇをＳＶ＝１（ｈ−１）でカラム１に通液した。次いでＳＶ＝２（ｈ−１）で３６ｍＬのイオン交換水で洗浄した。その後、０．１質量％水酸化ナトリウム水溶液をＳＶ＝５（ｈ−１）で２１６ｍＬ通液した。溶出液は連続でカラム２に通液して、脱イオンを行い、非重合体カテキン類組成物５５２ｇ（ｐＨ２．７）を得た。次いで減圧濃縮にて７０℃、６．７ｋｐａで濃縮処理を行い、緑茶抽出物Ｆを得た。
【００９２】
実施例１〜４、比較例１〜４で得られた緑茶抽出物の分析結果及び風味の評価結果を表１に示す。
【００９３】
実施例５
ブラジル産コーヒー豆の抽出液（固形分濃度２％）に、上記実施例１〜４、比較例１〜４の緑茶抽出物を非重合体カテキン類濃度が１％になるように配合し、缶に充填し、その後レトルト殺菌（１２４℃、２０ｍｉｎ）を行った。殺菌処理後、卓上遠心機にて、１２０００ｒｐｍ、５分遠心分離を行い、上清中のカテキン含量を調べ、配合量に対する殺菌後のカテキン残存率を求めた。
【００９４】
実施例６
オレンジジュース（濃縮還元、１００％、Ｂｒｉｘ１１）に上記実施例１〜４、比較例１〜４の緑茶抽出物を非重合体カテキン類濃度が１％になるように配合し、缶に充填し、その後レトルト殺菌（１２４℃、２０ｍｉｎ）を行った。殺菌処理後、卓上遠心機にて、１２０００ｒｐｍ、５分遠心分離を行い、上清中のカテキン含量を調べ、配合量に対する、殺菌後のカテキン残存率を求めた。結果を表１に示す。表１の結果から明らかなように、本発明による緑茶抽出物は、雑味、苦味、酸味が低減されかつ各種飲食品中での安定性に優れていることがわかる。
【００９５】
【表１】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、苦味、酸味及び雑味が低減され、各種の飲料等への配合性が良く、これを配合した飲料等を殺菌処理した際の非重合性カテキン類の安定性が高い茶抽出物に関する。
【背景技術】
【０００２】
カテキン類の効果としてはコレステロール上昇抑制作用やアミラーゼ活性阻害作用などが報告されている（例えば、特許文献１、２参照）。
また、茶抽出物の製造方法として、ガレート体率が高い茶抽出物とその製造方法が知られている（特許文献３参照）。さらに、飲料の苦味・渋味等の呈味を改善し、オリ、クリームダウンの発生を抑制する方法として、茶飲料にガレート体率が高い茶抽出物を配合することが知られている（特許文献４参照）。また、緑茶抽出物の風味を改善するためにガレート体率をタンナーゼ処理により制御する方法が知られている（特許文献５参照）。
さらに、カテキン類を高濃度に含有する飲料等を殺菌加熱処理するとカテキン類が減少する傾向にある。コーヒー飲料中でｐＨを調整することによりカテキン類の減少を抑制する手段が知られている（特許文献６参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開昭６０−１５６６１４号公報
【特許文献２】特開平３−１３３９２８号公報
【特許文献３】特開２００６−３６６４５号公報
【特許文献４】特開２００６−２７１４０１号公報
【特許文献５】特開２００４−３２１１０５号公報
【特許文献６】特開２００５−１６０３９５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
前記特許文献１及び２に開示されているような、カテキン類のコレステロール上昇抑制作用やアミラーゼ活性阻害作用のような生理効果を発現させるためには、成人一日あたり４〜５杯のお茶を飲むことが必要であることから、より簡便に大量のカテキン類を摂取するために、飲料にカテキン類を高濃度配合する技術が望まれている。
また、前記特許文献３ないし５に示される茶抽出物において、得られる茶抽出物の風味に関しては、一層の改善が望まれていた。
さらに、特許文献６にはカテキン類の減少を抑制する方法が示されているが、これには厳密なｐＨ調整が必要であり、より各種飲料に展開が望まれていた。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、
（１）固形分中の非重合体カテキン類が４５〜９０重量％であり、
（２）非重合体カテキン類中のガレート体率が０．００１〜４７重量％であり、
（３）没食子酸量／非重合体カテキン類（重量比）が、０．３以下であり、
（４）茶抽出物中の遊離アミノ酸／非重合体カテキン類（重量比）が０．０８以下であり、（５）茶抽出物中の（ショ糖＋ブドウ糖）／非重合体カテキン類（重量比）が０．１５以下 である精製茶抽出物を提供するものである。
【０００６】
また、本発明は、茶抽出物中のカフェイン／非重合体カテキン類（重量比）が０．２以下とする精製茶抽出物を提供する。
【０００７】
さらに、本発明は、茶抽出物が緑茶抽出物である精製茶抽出物を提供する。
【０００８】
また、本発明は、前記精製茶抽出物を配合した食品あるいは飲料を提供する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、カテキンを高濃度に含有し、苦味、酸味及び雑味低減し、各種の飲料等への配合性が良く、これを配合した飲料を殺菌処理した際のカテキン含有量の減少が少ない精製茶抽出物が提供できるようになった。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の目的は、苦味、酸味及び雑味が低減され、各種の飲料等への配合性が良く、これを配合した飲料等を殺菌加熱処理した際の非重合体カテキン類の安定性が高い精製茶抽出物を提供することにある。
【００１１】
本発明者らは、高濃度のカテキン類を含有する茶抽出物の風味向上に関して検討した結果、精製茶抽出物の中の非重合体カテキン類、非重合体カテキン類中のガレート体率、及び没食子酸量と非重合体カテキン類を特定の割合にすることにより、渋味、酸味及び雑味の低減に成功し、かつ当該精製茶抽出物を配合した飲料中の殺菌後のカテキン含有量の減少が少ない精製茶抽出物が得られることを見出した。
【００１２】
本発明でいう非重合体カテキン類とは、カテキン、ガロカテキン、カテキンガレート、ガロカテキンガレート、エピカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート及びエピガロカテキンガレートのカテキン類を合わせての総称であり、非重合体カテキン類の濃度は、上記の合計８種の合計量に基づいて定義される。
【００１３】
本発明の精製茶抽出物中には、非重合体カテキン類を、４５〜９０重量％、好ましくは５０〜８８重量％、更に好ましくは５５〜８５重量％、殊更好ましくは、６０〜８３重量％を含有する。非重合体カテキン類含有量がこの範囲内であれば、多量の非重合体カテキン類を容易に摂取し易い。また、非重合体カテキン類含量が４５質量％未満である場合、雑味が多くなり、９０重量％を超えると飲料の苦味が増加する。
【００１４】
本発明の精製茶抽出物中の非重合体カテキン類にはエピガロカテキンガレート、ガロカテキンガレート、エピカテキンガレート、及びカテキンガレートからなるガレート体と、エピガロカテキン、ガロカテキン、エピカテキン及びカテキンからなる非ガレート体がある。エステル型非重合体カテキン類であるガレート体は苦味が強いことから、本発明精製茶抽出物における非重合体カテキン類中の非重合体カテキンガレート体類の割合（ガレート体率）は０．００１〜４７重量％、好ましくは０．０１〜４５重量％、更に好ましくは０．１〜４３重量％、殊更好ましくは、１〜４０重量％、特に好ましくは、５〜３５重量％であることが苦味抑制、生産性の観点から好ましい。
【００１５】
また、本発明の精製茶抽出物中の没食子酸量は、苦味、酸味等の呈味の点から、没食子酸／非重合体カテキン類の比率は、０．３以下、好ましくは０．１以下、更に好ましくは、０．０７以下であり、０以上、好ましくは、０．０００１以上、更に好ましくは、０．００１以上であるのが好ましい。
【００１６】
本発明の精製茶抽出物中の遊離アミノ酸濃度は、非重合体カテキン類対して、遊離アミノ酸／非重合体カテキン類重量比が０．１以下、好ましくは０．０８以下、更に好ましくは、０．０７以下であり、また、０以上、好ましくは、０．００００１以上、更に好ましくは、０．０００１以上であるのが好ましい。
【００１７】
本発明の精製茶抽出物中のショ糖及びブドウ糖の濃度は、非重合体カテキン類に対して、（ショ糖＋ブドウ糖）／非重合体カテキン類重量比が０．１６以下、好ましくは０．１５以下、更に好ましくは、０．１４以下であり、また、０以上、好ましくは、０．０００１以上、更に好ましくは、０．００１以上であるのが好ましい。
【００１８】
本発明の精製茶抽出物中のカフェイン濃度は、非重合体カテキン類に対して、カフェイン／非重合体カテキン類（重量比）が０．２以下、更に０．１５以下、特に０．１以下、殊更に０．０５以下であり、また、０以上、更に、０．０００１以上、特に、０．００１以上であるのが呈味改善の点で好ましい。
【００１９】
本発明の精製茶抽出物に使用する茶抽出物としては、茶葉から得られた抽出液が挙げられる。その他のカフェイン含有植物由来、例えばコーヒー等のカフェイン含有抽出物と茶抽出液の混合物等も用いることができる。使用する茶葉としては、より具体的には、Ｃａｍｅｌｌｉａ属、例えばＣ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ｃ．ａｓｓａｍｉｃａ及びやぶきた種又はそれらの雑種等から得られる茶葉から製茶された茶葉が挙げられる。製茶された茶葉には、煎茶、番茶、玉露、てん茶、釜炒り茶等の緑茶類、烏龍茶に代表される半発酵茶、紅茶に代表される発酵茶がある。また、超臨界状態の二酸化炭素接触処理を施した茶葉を用いてもよい。本発明の精製茶抽出物に使用する茶抽出物としては、特に好ましいのは緑茶抽出物である。
【００２０】
茶抽出物を抽出する方法については、攪拌抽出、ドリップ抽出などの方法が使用できる。また抽出時の水にあらかじめアスコルビン酸ナトリウムなどの有機酸又は有機酸塩類を添加してもよい。また煮沸脱気や窒素ガス等の不活性ガスを通気して溶存酸素を除去しつつ、いわゆる非酸化的雰囲気下で抽出する方法も併用してもよい。このようにして得られた茶抽出物は、そのままでも、乾燥、濃縮しても本発明に使用できる。茶抽出物の形態としては、液体、スラリー、半固体、固体の状態が挙げられる。
【００２１】
精製に使用する茶抽出物には、茶葉から抽出した抽出液を使用する代わりに、茶抽出物の濃縮物を水又は有機溶媒に溶解又は希釈して用いても、茶葉からの抽出液と茶抽出物の濃縮物とを併用してもよい。
ここで、茶抽出物の濃縮物とは、茶葉から熱水又は有機溶媒水溶液により抽出された抽出物を濃縮したものであり、例えば、特開昭５９−２１９３８４号公報、特開平４−２０５８９号公報、特開平５−２６０９０７号公報、特開平５−３０６２７９号公報等に記載されている方法により調製したものをいう。具体的には、茶抽出物として、市販の東京フードテクノ（株）製「ポリフェノン」、伊藤園（株）製「テアフラン」、太陽化学（株）製「サンフェノン」等の粗カテキン製剤を固体の茶抽出物として用いることもできる。
【００２２】
本発明の精製茶抽出物中のガレート率の調整については、天然物のものをそのまま、又は、加水分解処理を行い、ガレート率を低減することができる。加水分解処理としては、具体的には、アルカリによる加水分解、酵素処理による加水分解等が挙げられる。非重合体カテキン類の安定性の観点から、酵素処理による加水分解が好ましい。
【００２３】
茶抽出物の酵素による加水分解処理手段としては、タンナーゼ活性を有する酵素による加水分解処理が好ましい。ここでタンナーゼ活性を有するとは、タンニンを分解する活性を有するものであり、本活性を有するものが使用できる。その起源は、特に限定されるものではないが、アスペルギルス属、ペニシリウム属、リゾプス属、ムコール属などに属するタンナーゼ生産菌を、常法にしたがって培養し得られるタンナーゼが挙げられ、未精製であっても精製品であっても用いることができる。具体的には、タンナーゼ活性を有する酵素として市販品では、タンナーゼ「キッコーマン」（キッコーマン（株）製）、タンナーゼ「三共」（三共ライフテック（株）製）、スミチームＴＡＮ（新日本化学（株）製）などを用いてもよい。当該タンナーゼ活性を有する酵素での処理により、非重合体カテキン類中のガレート体のエステル結合が加水分解され非重合体カテキンガレート体率が低下する。
【００２４】
茶抽出物を、タンナーゼ活性を有する酵素で処理をする時の非重合体カテキン濃度は、好ましくは０．１〜２２重量％、更に好ましくは０．２５〜１８重量％、特に好ましくは０．５〜１６．５重量％である。０．１重量％未満ではこの後の濃縮工程への負荷が大きくなり、生産性の面から好ましくない。また、２２重量％を超えると、加水分解処理に長時間を要し、生産性及び茶抽出物の風味の点から好ましくない。タンナーゼ活性を有する酵素による処理の具体的な手法としては、非重合体カテキンガレート体の低減効果、及び最適の非重合体カテキンガレート体率で酵素反応を停止する点から、茶抽出物中の非重合体カテキン類に対してタンナーゼ活性を有する粉末又は溶液状の酵素を、好ましくは１〜３００Ｕｎｉｔ／ｇ−非重合体カテキン、更に好ましくは３〜２００Ｕｎｉｔ／ｇ−非重合体カテキン、特に好ましくは５〜１５０Ｕｎｉｔ／ｇ−非重合体カテキンになるように添加する。ここで１Ｕｎｉｔは３０℃の水中においてタンニン酸に含まれるエステル結合を１マイクロモル加水分解する酵素量を示す。また、酵素処理時の保持温度は、５〜６０℃が好ましく、更に好ましくは１０〜５０℃、特に好ましくは１０〜４５℃に保持し処理を行う。
【００２５】
タンナーゼ活性を有する酵素による茶抽出物の処理においては、非重合体カテキンガレート体率の低減は、苦渋味低減の面から５重量％以上であるのが好ましい。５重量％未満だと、非重合体カテキンガレート体の減少が少なく、苦渋味低減効果が期待できない。このタンナーゼ活性を有する酵素処理によるガレート体率の制御は処理時の茶抽出液のｐＨによって反応の終点を決定することが好ましい。反応の終点のｐＨは３．０〜６．０、特に３．３〜５．３が好ましい。
【００２６】
酵素による加水分解反応を終了させる為に、酵素活性を失活させ反応を停止する。酵素失活の温度は、６０〜１００℃が好ましく、更に好ましくは７５〜９５℃である。６０℃未満では酵素を短時間で充分に失活することが困難であるため反応が進行し、目的の非重合体カテキンガレート体率の範囲内で酵素反応を停止することができない。又、失活温度に到達してからの保持時間は１０〜１８００秒、更に３０〜１２００秒、特に３０〜６００秒が酵素失活及び風味の点から好ましい。酵素反応の失活方法は、バッチ式加熱もしくはプレート型熱交換機、ホールディングチューブ等を使用した連続保持式加熱等で行う方法が挙げられる。
【００２７】
酵素処理後あるいは酵素処理前に茶抽出液中に残留する微粉を除去する為に、抽出液を遠心分離するのが好ましい。遠心分離機の形式は、微粉を除去するのに十分な遠心力を持つものが好ましく、工業的には大量処理に適した連続式遠心分離機が用いられる。
【００２８】
次いで、酵素で処理された茶抽出物は、例えば減圧濃縮、逆浸透膜処理等で濃縮するのが好ましい。また、必要により、例えば噴霧乾燥、凍結乾燥で乾燥できる。ここでの酵素処理茶抽出物の形態としては液体、スラリー、半固体、固体の状態が挙げられる。エタノール等の有機溶媒中での分散性の観点から、スラリー、半固体、固体の状態が好ましい。また、本発明の精製茶抽出物には、酵素で処理された茶抽出物と未処理の茶抽出物を混合し、混合後の非重合体カテキンガレート体率が０．００１〜４７重量％の範囲としても良い。
【００２９】
加水分解処理によると、没食子酸等の加水分解の副生成物が生成する。これらの副生成物の除去方法としては、非重合体カテキン類と副生成物との溶解度差を利用した有機溶媒による選択溶解法、また、非重合体カテキン類と副生成物の極性の違いを利用して、吸着担体に選択的に吸着させて、没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を低減する方法が挙げられる。
【００３０】
本発明における精製茶抽出物は、ガレート体を低減した茶抽出物から以下の方法により没食子酸、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を除去することにより得ることができる。
非重合体カテキン類と没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖との溶解度差を利用した有機溶媒による選択溶解法としては、加水分解処理品を乾燥後に固液抽出する方法と加水分解処理品溶液を液液抽出する方法が挙げられる。
抽出に使用する溶媒としては、エステル系溶媒、ケトン系溶媒、エーテル系溶媒、アルコール系溶媒、ハロゲン系溶媒が使用できる。具体的には、酢酸エチル、ジエチルエーテール、メチルエチルケトン、ブタノール、クロロホルム、ジクロロンメタンなどが挙げられる。
特に、食品への使用の観点から、酢酸エチル、ジクロロンメタンが好ましい。
【００３１】
吸着担体に選択的に吸着させて、没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を低減する方法としては、吸着担体に没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を吸着させて除去する方法と、非重合体カテキン類を吸着させて没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を吸着させない方法が挙げられる。
【００３２】
吸着担体に没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を吸着させて除去する方法としては、イオン交換樹脂に吸着させて除去する方法が挙げられる。また、非重合体カテキン類との分子サイズの差を利用した分離方法としては、活性炭に吸着させる方法が挙げられる。
【００３３】
非重合体カテキン類と没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖の極性の違いを利用して、吸着担体に選択的に吸着させて、没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を低減する方法としては、非重合体類カテキン類を合成吸着剤に吸着する方法が挙げられる。
【００３４】
この方法は、加水分解後の茶抽出物を合成吸着剤に吸着させることにより行うことができる。
合成吸着剤は、一般に不溶性の三次元架橋構造ポリマーでイオン交換基のような官能基を実質的に持たないものである。好ましくは、イオン交換基が１ｍｅｑ／ｇ未満のものを用いることができる。本発明に用いる合成吸着剤としては、その母体がスチレン系、例えばアンバーライトＸＡＤ４、ＸＡＤ１６ＨＰ、ＸＡＤ１１８０、ＸＡＤ２０００、（供給元：米国ローム＆ハース社）；ダイヤイオンＨＰ２０、ＨＰ２１（三菱化学（株）製）；セパビーズＳＰ８５０、ＳＰ８２５、ＳＰ７００、ＳＰ７０（三菱化学（株）製）；ＶＰＯＣ１０６２（Ｂａｙｅｒ製）、臭素原子を核置換して吸着力を強めた修飾スチレン系、例えばセパビーズＳＰ２０５、ＳＰ２０６、ＳＰ２０７（三菱化学（株）製）、メタクリル系、例えばダイヤイオンＨＰ１ＭＧ、ＨＰ２ＭＧ（三菱化学（株）製）、フェノール系、例えばアンバーライトＸＡＤ７６１（ロームアンドハース（株）製）、アクリル系、例えばアンバーライトＸＡＤ７ＨＰ（ロームアンドハース（株）製）、ポリビニル系、例えばＴＯＹＯＰＥＡＲＬ、ＨＷ−４０Ｃ（東ソー（株）製）、デキストラン系、例えばＳＥＰＨＡＤＥＸ、ＬＨ−２０（ファルマシア社製）等が使用できる。
合成吸着剤としては、その母体がスチレン系、メタクリル系、アクリル系、ポリビニル系が好ましく、特にスチレン系がカテキンと没食子酸との分離性の点から好ましい。
【００３５】
加水分解処理後の茶抽出物を合成吸着剤に吸着させる手段としては、加水分解処理後の茶抽出物に合成吸着剤を添加、撹拌し吸着後、ろ過操作により合成吸着剤を回収するバッチ方法又は合成吸着剤を充填したカラムを用いて連続処理により吸着処理を行なうカラム方法が採用されるが、生産性の点からカラムによる連続処理方法が好ましい。
合成吸着剤が充填されたカラムは、予めＳＶ（空間速度）＝０．５〜１０［ｈ−１］、合成吸着剤に対する通液倍数として２〜１０［ｖ／ｖ］の通液条件で９５ｖｏｌ％エタノール水溶液による洗浄を行い、合成吸着剤の原料モノマーや原料モノマー中の不純物等を除去するのが好ましい。そして、その後ＳＶ＝０．５〜１０［ｈ−１］、合成吸着剤に対する通液倍数として１〜６０［ｖ／ｖ］の通液条件により水洗を行い、エタノールを除去して合成吸着剤の含液を水系に置換する方法により、非重合体カテキン類の吸着能が向上する。
【００３６】
カラムに茶抽出物を通液するときの条件としては、合成吸着剤に吸着させる場合、茶抽
出物中の非重合体カテキン類の濃度は、好ましくは０．１〜２２重量％、更に好ましくは
０．１〜１５重量％、特に好ましくは０．５〜１０重量％、殊更好ましくは０．５〜３重量
％が、合成吸着剤への吸着効率の点から好ましい。
【００３７】
茶抽出物を、合成吸着剤を充填したカラムに通液する条件としては、ＳＶ(空間速度)＝
０．５〜１０[ｈ−１]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍数として０．５〜２０[ｖ
／ｖ]で通液するのが好ましい。１０[ｈ−１]以上の通液速度では、非重合体カテキン類の
吸着が不充分や２０[ｖ／ｖ]以上の通液量であると、非重合体カテキン類の吸着が安定し
ない場合がある。
【００３８】
茶抽出液を吸着後、合成吸着剤は、水又は有機溶媒水溶液で洗浄するのが好ましい。合
成吸着剤の洗浄に使用する水溶液としては、カテキンの回収率の点からｐＨ７以下の水が
好ましく、有機溶媒との混合系においても使用することができる。有機溶媒としては、ア
セトン、メタノール、エタノールなどが挙げられ、食品への使用の観点から、エタノール
が好ましい。含有する有機溶媒の濃度は、０〜２０重量％、好ましくは０〜１０重量％、
より好ましくは０〜５重量％がカテキンの回収率の点から好ましい。
【００３９】
この洗浄工程においては、ＳＶ（空間速度）＝０．５〜１０[ｈ−１]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍数として１〜１０[ｖ／ｖ]で、合成吸着剤に付着した夾雑物を除去することが好ましい。更にＳＶ＝０．５〜５[ｈ−１] の通液速度で、通液倍数として１〜５[ｖ／ｖ] で洗浄することが夾雑物の除去効果及び非重合体カテキン類の回収率の点から好ましい。
【００４０】
非重合カテキン類を溶出させる際の有機溶媒水溶液を溶出液として使用する場合は、有機溶媒としては、水溶性有機溶媒が好ましく、アセトン、メタノール、エタノール等が挙げられ、食品への使用の観点からエタノールが好ましい。かかる有機溶媒は非重合体カテキン類の収率が大きい、及び不純物量が少なくなる等の点から、有機溶媒水溶液として用いるのが好ましく、有機溶媒濃度としては、１〜９５重量％水溶液、更に１０〜９０重量％水溶液、特に２０〜８０重量％水溶液として用いるのが好ましい。
ＳＶ（空間速度）＝０．５〜５[ｈ−１]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍数とし
て１〜１５[ｖ／ｖ]で、非重合体カテキン類を溶出することが好ましい。更にＳＶ＝１〜
３[ｈ−１] の通液速度で、通液倍数として２〜１０[ｖ／ｖ] で溶出することが生産性及び非重合体カテキン類の回収率の点から好ましい。
非重合体カテキン類の溶出に用いる溶出液として有機溶媒水溶液を用いる場合は、工程
の簡略化及び精製コストの点から好ましい。
【００４１】
非重合カテキン類を溶出させる際に塩基性水溶液を用いる場合、非重合体カテキン類の溶出に用いる塩基性水溶液としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩等のアルカリ水溶液、好ましくは、ナトリウム、カリウム系のアルカリ性水溶液、例えば水酸化ナトリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液等を好適に用いることができる。また、アルカリ性水溶液のｐＨは７〜１４の範囲が好ましく、非重合体カテキン類回収率の点から９〜１３．８、特に１０〜１３．５が好ましい。ｐＨ７〜１４のナトリウム系水溶液としては、４％以下の水酸化ナトリウム水溶液、１Ｎ−炭酸ナトリウム水溶液等が挙げられる。塩基性水溶液と有機溶媒は混合して用いてもよい。有機溶媒の濃度としては、カフェインとカテキンの分離性の点から０〜９０重量％の範囲が好ましく、０〜５０重量％がより好ましく、０〜２０重量％が更に好ましい。
【００４２】
溶出工程においては、溶出に用いる塩基性水溶液として互いにｐＨが異なる２種以上の
塩基性水溶液を用い、これら塩基性水溶液をｐＨが低い順に合成吸着剤に接触させること
ができる。それぞれのｐＨ区分で異なる非重合体カテキン類や他の成分を脱着することが
できる。
【００４３】
ＳＶ（空間速度）＝２〜１０[ｈ−１]の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍数として
１〜３０[ｖ／ｖ]で、非重合体カテキン類を溶出することが好ましい。更にＳＶ＝３〜７
[ｈ−１] の通液速度で、通液倍数として３〜１５[ｖ／ｖ] で溶出することが生産性及び非重合体カテキン類の回収率の点から好ましい。
非重合体カテキン類の溶出に用いる溶出液として塩基性水溶液を用いる場合は、精製茶
抽出物の色調、活性炭処理での回収率の点から好ましい。
【００４４】
塩基性水溶液で溶出した場合には、非重合体カテキン類の溶出液は、塩基性であり、非
重合カテキン類の安定性の観点から、溶出液のｐＨを７以下に、より好ましくはｐＨを１
〜６、更に好ましくは１〜５、殊更好ましくは２〜４に調整する。具体的には、酸による
中和、電気透析又はイオン交換樹脂によるアルカリ金属イオンの除去が利用できる。イオン交換樹脂としては特にＨ型のカチオン交換樹脂を用いるのが好ましい。プロセスの簡便性からイオン交換樹脂によるｐＨ調整が好ましい。カチオン交換樹脂としては、具体的には、アンバーライト２００ＣＴ、ＩＲ１２０Ｂ、ＩＲ１２４、ＩＲ１１８、ダイヤイオンＳＫ１Ｂ、ＳＫ１ＢＨ、ＳＫ１０２、ＰＫ２０８、ＰＫ２１２等を用いることができる。
【００４５】
本発明で使用される合成吸着剤は本発明実施後に再使用できる。再生処理としては、具体的には、エタノールのような有機溶媒を通液し合成吸着剤上に吸着したカフェイン等の不溶分を脱着させる。又は水酸化ナトリウムのようなアルカリ水溶液を通液・洗浄し、合成吸着剤上に残存する水溶性成分をすべて脱着させるなどの方法が挙げられる。更に水蒸気による洗浄を組み合わせても良い。
【００４６】
更に非重合体カテキン類の溶出液は、必要に応じて濃縮して後の工程に付すことができる。
得られた非重合体カテキン類の溶出液が懸濁する場合は、除濁することが好ましい。除濁の具体的な操作としては、ろ過及び／又は遠心分離処理により固形分と水溶性部分とを固液分離することが挙げられる。
【００４７】
本発明の精製茶抽出物の製造においては、合成吸着剤を使用する方法以外に以下の方法においても、没食子酸等の副生成物、遊離アミノ酸、ショ糖及びブドウ糖を低減することができる。すなわち、ガレート体率が低減した茶抽出物を有機溶媒と水の重量比が９０／１０を超え９７／３以下の混合溶液に混合し、次いで生成した沈殿を分離する。必要に応じて沈殿分離後の混合溶液に加水及び／又は混合溶液から脱有機溶媒して混合溶液中の有機溶媒と水の重量比が４０／６０〜７０／３０の範囲とし、次いで析出した濁り成分を分離する。次に、活性炭及び酸性白土又は活性白土と接触処理を行うことができる。茶抽出物中の有機溶媒と水は、減圧蒸留などの方法を用いて留去できる。また、処理後の緑茶抽出物は液状でも固体状でもいずれでも良いが、固体状態を調製する場合には凍結乾燥やスプレードライなどの方法によって粉末化しても良い。
【００４８】
茶抽出物の精製に用いる有機溶媒としては、エタノール、メタノール、アセトン、酢酸エチル等が挙げられる。これらのうち、メタノール、エタノール、アセトンの親水性有機溶媒が好ましく、特に食品への使用を考慮するとエタノールが好ましい。
水としては、イオン交換水、水道水、天然水等が挙げられる。この有機溶媒と水は、混合して又はそれぞれ別々に緑茶抽出物と混合してもよいが、混合溶液としてから茶抽出物と混合するのが好ましい。
【００４９】
本発明の精製茶抽出物の製造においては、茶抽出物を有機溶媒と水の混合溶液に分散させる時の有機溶媒と水の質量比は、非重合体カテキン類の抽出効率及び風味の点から９０／１０を超え９７／３以下、好ましくは９２／８〜９７／３、更に好ましくは９２／８〜９５／５の範囲に調整するのが好ましい。次いで、生成した沈殿物はろ過等の公知の方法で除去する。
【００５０】
本発明の精製茶抽出物の製造においては、有機溶媒と水の混合溶液１００重量部に対して、乾燥重量換算の茶抽出物を１０〜４０重量部、特に１０〜３０重量部添加して処理するのが、茶抽出物を効率よく処理できるので好ましい。
【００５１】
本発明の精製茶抽出物の製造においては、有機溶媒と水の混合溶液に茶抽出物を混合する方法は、特に制限されず、茶抽出物を最終的に処理する際の有機溶媒と水の重量比が９０／１０を超え９７／３以下になっていれば良い。例えば、茶抽出物を水に溶解した後に有機溶媒を添加していくことによって有機溶媒と水の重量比を９０／１０を超え９７／３以下の範囲にしても良く、茶抽出物を有機溶媒に懸濁させた後、徐々に水を添加して同様の比率としても良い。抽出効率の点から、水に溶解後に有機溶媒を添加していく方法が好ましい。水と有機溶媒の混合溶液又はそれぞれの添加時間は、１０〜６０分程度の時間でゆっくり滴下するのが好ましい。また、カテキン類の抽出効率を上げるために攪拌状態で滴下するのが好ましい。滴下終了後は１０〜６００分程度の攪拌時間を設けると更にカテキン類の抽出効率を上がり好ましい。これらの処理は、１０〜６０℃で行うことができ、特に１０〜５０℃、更に１０〜４０℃で行うのが好ましい。また緑茶抽出物は１回で全量添加しても良いが、２回以上、例えば２〜４回に分割して添加しても良い。次いで、生成した沈殿物はろ過等の方法で除去する。
【００５２】
さらに、沈殿物の除去された混合溶液中の有機溶媒と水の重量比が４０／６０〜７０／３０、好ましくは４５／５５〜６０／４０となるように、混合溶液に加水及び／又は混合溶液から脱有機溶媒するのが好ましい。混合溶液から有機溶媒の含有量を減ずるには、減圧蒸留等の方法で有機溶媒を留去することにより行われる。また、沈澱除去処理後の混合溶液に加水する場合は、イオン交換水、水道水、天然水等の水を加えることにより行われる。
【００５３】
加水及び／又は脱有機溶媒をした後、濁り成分を析出させる静置時間は、特に限定されない。例えば、２分〜５０時間、更に２分〜２４時間、特に５分〜６時間であるのが好ましい。また、濁り成分の析出温度は、−１５〜７８℃、更に５〜４０℃、特に５〜２５℃であるのが好ましい。濁り成分を析出させた後、混合溶液から濁り成分を分離するときの温度は、−１５〜７８℃、更に５〜４０℃、特に５〜２５℃であるのが好ましい。この温度の範囲外であると、分離性が劣り、また溶液の性状に変化が見られるような場合がある。濁り成分を分離する時の方法は特に制限されず、例えば遠心分離法、ろ過法等が挙げられる。
【００５４】
本発明の精製茶抽出物の製造においては、必要に応じてカフェインを除去する為に、茶抽出物を有機溶媒と水の混合溶液に混合する際に活性炭、酸性白土及び活性白土の１種又は２種以上と接触させるのが好ましい。
【００５５】
用いる活性炭としては、一般に工業レベルで使用されているものであれば特に制限されず、例えば、ＺＮ−５０（北越炭素工業（株）製）、クラレコールＧＬＣ、クラレコールＰＫ−Ｄ、クラレコールＰＷ−Ｄ（クラレケミカル（株）製）、白鷲ＡＷ５０、白鷲Ａ、白鷲Ｍ、白鷲Ｃ（武田薬品工業（株）製）等の市販品を用いることができる。活性炭の細孔容積は０．０１〜０．８ｍＬ／ｇ、特に０．１〜０．７ｍＬ／ｇが好ましい。また、比表面積は８００〜２０００ｍ２／ｇ、特に９００〜１６００ｍ２／ｇの範囲のものが好ましい。なお、これらの物性値は窒素吸着法に基づく値である。
【００５６】
活性炭は、有機溶媒と水の混合溶液１００重量部に対して０．５〜１５重量部、更に０．５〜１０重量部、特に１．０〜８重量部添加するのが好ましい。活性炭の添加量が少なすぎると、カフェイン除去効率が悪くなり、また多すぎるとろ過工程におけるケーク抵抗が大きくなり好ましくない。
【００５７】
用いる酸性白土又は活性白土は、ともに一般的な化学成分として、ＳｉＯ２、Ａｌ２Ｏ３、Ｆｅ２Ｏ３、ＣａＯ、ＭｇＯ等を含有するものであるが、ＳｉＯ２／Ａｌ２Ｏ３比が３〜１２、特に４〜９であるのが好ましい。またＦｅ２Ｏ３を２〜５重量％、ＣａＯを０〜１．５重量％、ＭｇＯを１〜７重量％含有する組成のものが好ましい。活性白土は天然に産出する酸性白土（モンモリロナイト系粘土）を硫酸等の鉱酸で処理したものであり、大きい比表面積と吸着能を有する多孔質構造をもった化合物である。酸性白土を更に、酸処理することにより比表面積が変化し、脱色能の改良及び物性が変化することが知られている。
【００５８】
酸性白土又は活性白土の比表面積は、酸処理の程度等により異なるが、５０〜３５０ｍ２／ｇであるのが好ましく、ｐＨ（５質量％サスペンジョン）は２．５〜８、特に３．６〜７のものが好ましい。例えば、酸性白土としては、ミズカエース＃６００（水澤化学社製）等の市販品を用いることができる。
【００５９】
酸性白土又は活性白土は、有機溶媒と水の混合溶液１００重量部に対して０．５〜３０重量部、更に１．５〜２０重量部、特に２．５〜１５重量部添加するのが好ましい。酸性白土又は活性白土の添加量が少なすぎると、カフェイン除去効率が悪くなり、また多すぎるとろ過工程におけるケーク抵抗が大きくなり好ましくない。
【００６０】
また、活性炭と酸性白土又は活性白土を併用する場合の割合は、重量比で活性炭１に対して１〜１０がよく、特に活性炭：酸性白土又は活性白土＝１：１〜１：６であるのが好ましい。
【００６１】
本発明において、必要に応じてカフェインを選択的に除去する為に、茶抽出物を有機溶媒と水の混合溶液に混合する際に活性炭及び／又は酸性白土若しくは活性白土と接触させるのが好ましいが、その場合の茶抽出物、有機溶媒と水の混合溶液並びに活性炭及び／又は、酸性白土若しくは活性白土との接触順序は特に限定されない。例えば（１）有機溶媒と水の混合溶液に茶抽出物を添加し、活性炭接触、次いで酸性白土又は活性白土接触する方法、（２）有機溶媒と水の混合溶液に茶抽出物を添加し、酸性白土又は活性白土接触、次いで活性炭接触する方法、（３）有機溶媒と水との混合溶液に活性炭を添加し、これに茶抽出物を添加し、次いで酸性白土又は活性白土を添加する方法等が挙げられるが、（４）有機溶媒と水の混合溶液に酸性白土又は活性白土を添加し、これに茶抽出物を添加し、次いで活性炭を添加する方法が好ましい。
これらの各成分添加と次の成分添加との間には、ろ過を行うのが好ましい。また緑茶抽出物を２回以上に分割して添加した場合、その間にろ過を行ってもよい。
【００６２】
さらに、茶抽出物を酸性白土又は活性白土と、有機溶媒と水の混合溶液との分散液と接触混合する場合、接触する時のｐＨを３〜６の範囲に調整して行うことが、非重合体カテキン類を効率よく抽出し、精製緑茶抽出物を得るために好ましい。接触の際、クエン酸、乳酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸等の有機酸を、有機酸と非重合体カテキン類の重量比率（有機酸／非重合体カテキン類）が０．０２〜０．２０の範囲で添加するのが好ましい。
【００６３】
また、茶抽出物を酸性白土又は活性白土と、有機溶媒と水の混合溶液との分散液と接触混合する場合、接触するときの溶液の温度は始めに１０〜３０℃とし、その後２０〜６０℃に昇温すると、茶抽出物の溶解が促進されるという点及び分散液へのカテキン抽出効率が促進されるという点で好ましい。
【００６４】
本発明の精製茶抽出物を製造するに当たり、酸性白土又は活性白土と、有機溶媒と水の混合溶液処理を使用する好ましい製造方法は以下の手順である。ガレート体率が低減した茶抽出物を、有機溶媒と水の重量比が９０／１０を超え９７／３以下の混合溶液に混合し、次いで生成した沈殿を除去した後に、更に必要に応じて混合溶液中の有機溶媒と水の重量比が４０／６０〜７０／３０、好ましくは４５／５５〜６０／４０となるように、混合溶液に加水及び／又は混合溶液から脱有機溶媒、次いで析出した濁り成分を分離する。
具体的には、活性炭及び／又は酸性白土又は活性白土と接触混合する場合は、まず茶抽出物を有機溶媒と水の重量比が９０／１０を超え９７／３以下の混合溶液に混合させ、活性炭及び／又は酸性白土若しくは活性白土と接触処理し、次いで生成している沈殿とともに活性炭及び／又は酸性白土又は活性白土を除去し、ろ液部分に加水及び／又は脱有機溶媒を行い、析出した濁り成分を分離するのが好ましい。また、活性炭との接触は、次の工程の加水及び／又は脱有機溶媒を行う前に行っても良いし、加水及び／又は脱有機溶媒を行い、析出した濁り成分を分離した後に活性炭と接触させても良い。
【００６５】
茶抽出物溶液と活性炭及び酸性白土又は活性白土、活性炭とを接触する場合の処理は、バッチ式、カラムによる連続処理等のいずれの方法で行ってもよい。一般には、粉末状の活性炭等を添加、撹拌し、カフェインを選択的に吸着後、ろ過操作によりカフェインを除去したろ液を得る方法又は顆粒状の活性炭等を充填したカラムを用いて連続処理によりカフェインを選択的に吸着する方法等が挙げられる。また、茶抽出物と活性炭との接触方法は、活性炭カラムによる連続処理等の方法で行うのが好ましい。
【００６６】
かくして得られた本発明の精製茶抽出物は、苦味、酸味及び雑味が低減されており、特に当該茶抽出物を配合した飲料及び食品における苦味、酸味及び雑味が低減されている。更に、当該茶抽出物を配合した飲料及び食品を、殺菌処理した際にカテキン含有量が低下しないという特徴を有する。従って、本発明の精製茶抽出物を配合した飲料及び食品は、その飲料及び食品の有する風味が損なわれず、かつカテキン含有量の高いものとなる。
【００６７】
本発明精製茶抽出物を配合できる食品としては、その形態は特に制限されず、飲料；米飯類；パン、ケーキ等の小麦粉食品；ソース、味噌、醤油等の調味料；納豆等の大豆食品；クリーム、ドレッシング、マヨネーズ及びマーガリン等の乳化食品；水産加工食品；食肉加工品；漬物類；麺類；粉末スープを含むスープ類、ゼリー、チーズ、ヨーグルト等の乳製品；スナック菓子、チューインガム、キャンディー、チョコレート等の菓子類；錠剤、顆粒剤等の健康食品等が挙げられる。
【００６８】
本発明精製茶抽出物を配合することができる飲料としては不発酵茶である緑茶、半発酵茶及び発酵茶から選ばれた茶の抽出液；及び非茶系飲料が挙げられる。半発酵茶としては例えば烏龍茶が挙げられ、発酵茶としては例えば紅茶が挙げられる。また非茶系飲料としては例えばソフトドリンクである炭酸飲料、果実ジュース類、野菜ジュース類、豆乳飲料、牛乳、コーヒー飲料、水、ニアウォーター、スポーツ飲料、エンハンスドウォーター、ドリンク剤などの栄養飲料、アルコール飲料などが挙げられる。
【００６９】
これらの飲料及び食品中の非重合体カテキン類濃度は、生理効果の点から１食分あたり２５０〜１０００ｍｇ、更に４００〜８５０ｍｍｇ、特に５００〜７５０ｍｇ含有する濃度が好ましい。
【００７０】
これらの飲料及び食品は、本発明の精製茶抽出物を添加する以外は常法に従って製造することができる。
【実施例】
【００７１】
非重合体カテキン類、カフェイン及び没食子酸の測定法
試料溶液をフィルター（０．４５μｍ）で濾過し、（株）島津製作所製、高速液体クロマトグラフ（型式ＳＣＬ−１０ＡＶＰ）を用い、オクタデシル基導入液体クロマトグラフ用パックドカラムＬ−カラムＴＭ ＯＤＳ（４．６ｍｍφ×２５０ｍｍ：財団法人 化学物質評価研究機構製）を装着し、カラム温度３５℃でグラジエント法で行った。非重合体カテキン類の標準品は、三井農林（株）製のものを、カフェインはアルドリッチ社品、没食子酸は和光純薬品を使用し、検量線法で定量した。移動相Ａ液は酢酸を０．１ｍｏｌ／Ｌ含有の蒸留水溶液、Ｂ液は酢酸を０．１ｍｏｌ／Ｌ含有のアセトニトリル溶液とし、試料注入量は２０μＬ、ＵＶ検出器波長は２８０ｎｍの条件で行った。
【００７２】
遊離アミノ酸の測定
遊離トリプトファン
（分析機器）
機種：ＬＣ−１０ＡＤ（島津製作所社製）
検出器：蛍光分光光度計 ＲＦ−１０Ａｘｌ
カラム：ｌｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−２、内径４．６mm×長さ２５０mm
【００７３】
遊離トリプトファンを除く遊離アミノ酸
（分析機器）
機種：Ｌ−８８００形高速アミノ酸分析計（日立製作所社製）
カラム：日立カスタムイオン交換樹脂、内径４．６mm×長さ６０mm
移動相：Ｌ−８５００ ＰＦ緩衝液
反応液：ニンヒドリン試液
【００７４】
ショ糖およびブドウ糖の分析方法
（分析機器）
機種：ＬＣ−１０ＡＤvp（島津製作所社製）
検出器：示差屈折計 ＲID-10A（島津製作所社製）
カラム：wakosil 5NH2 φ4.6mm×250mm（和光純薬工業株式会社）
溶離液：CH3CN/H2O=75/25(v/v)
試料注入量1０μＬ
【００７５】
風味の評価方法
茶抽出物を非重合体カテキン類濃度が０．１５％になるように水に希釈し、５名の男性モニターが、苦味、酸味、苦味について以下の基準で評点をつけ評価した。
【００７６】
苦味における評価
１ 感じにくい
２ やや感じにくい
３ やや感じる
４ 感じる
【００７７】
酸味における評価
１ 感じにくい
２ やや感じにくい
３ やや感じる
４ 感じる
【００７８】
雑味における評価
１ 感じにくい
２ やや感じにくい
３ やや感じる
４ 感じる
【００７９】
実施例１ 精製緑茶抽出物Ａ
（１）緑茶抽出物（ポリフェノンＨＧ、東京フードテクノ製）５００ｇを水１５０００ｇに溶解し、「緑茶抽出液」１５５００ｇ（ｐＨ５．６）を得た。（緑茶抽出液中の非重合体カテキン類濃度＝１．０５重量％、緑茶抽出液のガレート体率＝５２．５重量％）
この緑茶抽出液を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（キッコーマン（株）製タンナーゼＫＴＦＨ、５００Ｕ／ｇ）を緑茶抽出液に対して５００ｐｐｍとなる濃度で添加し、１５分間保持し、ガレート体率４４．２重量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ５．３）。次いで減圧濃縮にて５５℃、２．７ｋｐａでＢｒｉｘ濃度３０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ活性を有する酵素で処理した緑茶抽出物」４００ｇを得た。得られた緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量３２．１重量％、非重合体カテキンガレート体率４４．０重量％であり、没食子酸含量１．７重量％だった。
【００８０】
（２）酸性白土（ミズカエース＃６００、水澤化学工業（株）製）１００ｇを常温、２５０ｒ／ｍｉｎ攪拌条件下の９２重量％エタノール水溶液８００ｇ中に分散させ、約１０分間攪拌を行った後、（１）で得られたタンナーゼ活性を有する酵素で処理した緑茶抽出物２００ｇを投入し、室温のまま約３時間の攪拌を続けた（ｐＨ４．０）。その後、生成している沈殿及び酸性白土を２号ろ紙でろ過した。得られたろ液にイオン交換水を４１７ｇ添加し、１５℃、１００ｒ／ｍｉｎ攪拌条件下で約５分間攪拌を行った。その混合溶液を小型冷却遠心分離機を用い（日立工機（株）製）、操作温度１５℃で析出した濁り成分を分離した（６０００ｒｐｍ、５分）。分離した溶液を活性炭（クラレコールＧＬＣ、クラレケミカル社製）３０ｇと接触させ、続けて０．２μｍメンブランフィルターによってろ過を行った。最後にイオン交換水２００ｇを添加して、４０℃、２．７ｋｐａでエタノールを留去し、その後、水分量を調整して「精製緑茶抽出物Ａ」を得た。
【００８１】
実施例２ 精製緑茶抽出物Ｂ
（１）上記実施例１と同様に、得た緑茶抽出液を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（タンナーゼＫＴＦＨ）を緑茶抽出液に対して５００ｐｐｍとなる濃度で添加し、４０分間保持し、ガレート体率３０質量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ５．０）。次いで減圧濃縮にて５５℃、２．７ｋｐａでＢｒｉｘ濃度２５％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ活性を有する酵素で処理した緑茶抽出物」４００ｇを得た。得られた緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量重量２９．８％、非重合体カテキンガレート体率３２．５重量％、没食子酸含量３．６重量％であった。
【００８２】
（２）実施例１と同様な精製処理を行い、「精製緑茶抽出物Ｂ」を得た。
【００８３】
実施例３ 精製緑茶抽出物Ｃ
（１）緑茶葉（ケニア産、大葉種）３ｋｇに８８℃の熱水４５ｋｇを添加し、３０分間攪拌バッチ抽出した後、２００メッシュ金網で粗ろ過後、抽出液中の微粉を除去する為に遠心分離操作を行い、「緑茶抽出液」３７．２ｋｇを得た。（緑茶抽出液中の非重合体カテキン類濃度＝０．９１重量％、緑茶抽出液のガレート体率＝５１．２重量％、カフェイン０．１７重量％）
この緑茶抽出液を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（タンナーゼＫＴＦＨ）を緑茶抽出液に対して４５０ｐｐｍとなる濃度で添加し、４０分間保持し、ガレート体率３０．５重量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ５．１）。次いで減圧濃縮にて７０℃、６．７ｋｐａでＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ処理した緑茶抽出物」０．９ｋｇを得た。得られた緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量２７．８重量％、非重合体カテキンガレート体率３０．３重量％、没食子酸３．６重量％であった。「タンナーゼ処理した緑茶抽出物」１０ｇを、脱イオン水３００ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した。
【００８４】
（２）次いで、ステンレスカラム１（内径２２ｍｍ×高さ９６ｍｍ、容積３６．５ｍＬ）に充填した合成吸着剤ＳＰ−７０（三菱化学（株）製）３６ｍＬを、予めＳＶ＝１（ｈ−１）で９５（ｖ／ｖ）エタノール７２０ｍＬによる洗浄を行い、次いで７２０ｍｌのイオン交換水で洗浄した。ガラスカラム２（内径１６ｍｍ×高さ８０ｍｍ、容積１６．１ｍＬ）に充填したイオン交換樹脂ＳＫ１ＢＨ（三菱化学（株）製）１４．７ｍＬを、予めＳＶ＝１（ｈ−１）で９５（ｖ／ｖ）エタノール３００ｍＬによる洗浄を行い、次いで３００ｍｌのイオン交換水で洗浄した。その後、得られたタンナーゼ処理液（２）１４４ｇをＳＶ＝１（ｈ−１）でカラム１に通液した。次いでＳＶ＝２（ｈ−１）で３６ｍＬのイオン交換水で洗浄した。その後、０．１重量％水酸化ナトリウム水溶液をＳＶ＝５（ｈ−１）で２１６ｍＬ通液した。溶出液は連続でカラム２に通液して、脱イオンを行い、非重合体カテキン類組成物５５２ｇ（ｐＨ２．７）を得た。次いで減圧濃縮にて７０℃、６．７ｋｐａで濃縮処理を行い、精製緑茶抽出物Ｃを得た。
【００８５】
実施例４ 精製緑茶抽出物Ｄ
（１）上記実施例３で得られた緑茶抽出液を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（タンナーゼＫＴＦＨ）を緑茶抽出液に対して４３０ｐｐｍとなる濃度で添加し、１２０分間保持し、ガレート体率５．２重量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ４．８）。次いで減圧濃縮にて７０℃、６．７ｋｐａでＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ処理した緑茶抽出物」０．９ｋｇを得た。得られた精製緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量２５．７重量％、非重合体カテキンガレート体４．５重量％、没食子酸７．３重量％であった。
【００８６】
（２）次いで、実施例３同様に合成吸着剤を用いた精製を行い、精製緑茶抽出物Ｄを得た。
【００８７】
比較例１
実施例１−（１）の緑茶抽出物（ポリフェノンＨＧ、東京フードテクノ（株）製）を使用した。
【００８８】
比較例２ 緑茶抽出物Ｅ
実施例４―（１）のタンナーゼ処理した緑茶抽出物を使用した。
【００８９】
比較例３
緑茶抽出物（テアフラン９０Ｓ；伊藤園（株）製）を使用した。
【００９０】
比較例４ 緑茶抽出物Ｆ
（１）内径３５０ｍｍのカラム式抽出機に８８℃の熱水１２４ｋｇを投入し、緑茶葉（ケニア産、大葉種）６．２ｋｇを投入し、５分静置の後に、下方より液を抜き出し、ドリップ抽出を行った。その後、抽出液中の微粉を除去する為に遠心分離操作を行い、「緑茶抽出液」９３．５ｋｇを得た。（緑茶抽出液中の非重合体カテキン類濃度＝０．８６重量％、緑茶抽出液のガレート体率＝５５．２重量％）
この緑茶抽出液を次いで減圧濃縮にて７０℃、６．７ｋｐａでＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「緑茶抽出物」２．１ｋｇを得た。得られた「緑茶抽出物」１０ｇを、脱イオン水３００ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した。
【００９１】
（２）次いで、ステンレスカラム１（内径２２ｍｍ×高さ９６ｍｍ、容積３６．５ｍＬ）に充填した合成吸着剤ＳＰ−７０（三菱化学（株）製）３６ｍＬを、予めＳＶ＝１（ｈ−１）で９５（ｖ／ｖ）エタノール７２０ｍＬによる洗浄を行い、次いで７２０ｍｌのイオン交換水で洗浄した。ガラスカラム２（内径１６ｍｍ×高さ８０ｍｍ、容積１６．１ｍＬ）に充填したイオン交換樹脂ＳＫ１ＢＨ（三菱化学（株）製）１４．７ｍＬを、予めＳＶ＝１（ｈ−１）で９５（ｖ／ｖ）エタノール３００ｍＬによる洗浄を行い、次いで３００ｍｌのイオン交換水で洗浄した。その後、得られたタンナーゼ処理液（２）１４４ｇをＳＶ＝１（ｈ−１）でカラム１に通液した。次いでＳＶ＝２（ｈ−１）で３６ｍＬのイオン交換水で洗浄した。その後、０．１質量％水酸化ナトリウム水溶液をＳＶ＝５（ｈ−１）で２１６ｍＬ通液した。溶出液は連続でカラム２に通液して、脱イオンを行い、非重合体カテキン類組成物５５２ｇ（ｐＨ２．７）を得た。次いで減圧濃縮にて７０℃、６．７ｋｐａで濃縮処理を行い、緑茶抽出物Ｆを得た。
【００９２】
実施例１〜４、比較例１〜４で得られた緑茶抽出物の分析結果及び風味の評価結果を表１に示す。
【００９３】
実施例５
ブラジル産コーヒー豆の抽出液（固形分濃度２％）に、上記実施例１〜４、比較例１〜４の緑茶抽出物を非重合体カテキン類濃度が１％になるように配合し、缶に充填し、その後レトルト殺菌（１２４℃、２０ｍｉｎ）を行った。殺菌処理後、卓上遠心機にて、１２０００ｒｐｍ、５分遠心分離を行い、上清中のカテキン含量を調べ、配合量に対する殺菌後のカテキン残存率を求めた。
【００９４】
実施例６
オレンジジュース（濃縮還元、１００％、Ｂｒｉｘ１１）に上記実施例１〜４、比較例１〜４の緑茶抽出物を非重合体カテキン類濃度が１％になるように配合し、缶に充填し、その後レトルト殺菌（１２４℃、２０ｍｉｎ）を行った。殺菌処理後、卓上遠心機にて、１２０００ｒｐｍ、５分遠心分離を行い、上清中のカテキン含量を調べ、配合量に対する、殺菌後のカテキン残存率を求めた。結果を表１に示す。表１の結果から明らかなように、本発明による緑茶抽出物は、雑味、苦味、酸味が低減されかつ各種飲食品中での安定性に優れていることがわかる。
【００９５】
【表１】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（１）固形分中の非重合体カテキン類が４５〜９０重量％であり、
（２）非重合体カテキン類中のガレート体率が０．００１〜４７重量％であり、
（３）没食子酸量／非重合体カテキン類（重量比）が、０．３以下であり、
（４）茶抽出物中の遊離アミノ酸／非重合体カテキン類（重量比）が０．０８以下であり、（５）茶抽出物中の（ショ糖＋ブドウ糖）／非重合体カテキン類（重量比）が０．１５以下 である精製茶抽出物。
【請求項２】
茶抽出物中のカフェイン／非重合体カテキン類（重量比）が０．２以下である請求項１に記載の精製茶抽出物。
【請求項３】
茶抽出物が緑茶抽出物である請求項１又は２に記載の精製茶抽出物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の精製茶抽出物を配合した食品。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の精製茶抽出物を配合した飲料。
【請求項１】
（１）固形分中の非重合体カテキン類が４５〜９０重量％であり、
（２）非重合体カテキン類中のガレート体率が０．００１〜４７重量％であり、
（３）没食子酸量／非重合体カテキン類（重量比）が、０．３以下であり、
（４）茶抽出物中の遊離アミノ酸／非重合体カテキン類（重量比）が０．０８以下であり、（５）茶抽出物中の（ショ糖＋ブドウ糖）／非重合体カテキン類（重量比）が０．１５以下 である精製茶抽出物。
【請求項２】
茶抽出物中のカフェイン／非重合体カテキン類（重量比）が０．２以下である請求項１に記載の精製茶抽出物。
【請求項３】
茶抽出物が緑茶抽出物である請求項１又は２に記載の精製茶抽出物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の精製茶抽出物を配合した食品。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の精製茶抽出物を配合した飲料。
【公開番号】特開２０１０−１１８５８（Ｐ２０１０−１１８５８Ａ）
【公開日】平成２２年１月２１日（２０１０．１．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２０３２１９（Ｐ２００９−２０３２１９）
【出願日】平成２１年９月３日（２００９．９．３）
【分割の表示】特願２００８−５３３３０８（Ｐ２００８−５３３３０８）の分割
【原出願日】平成１８年１２月２８日（２００６．１２．２８）
【出願人】（００００００９１８）花王株式会社 (8,290)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１月２１日（２０１０．１．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年９月３日（２００９．９．３）
【分割の表示】特願２００８−５３３３０８（Ｐ２００８−５３３３０８）の分割
【原出願日】平成１８年１２月２８日（２００６．１２．２８）
【出願人】（００００００９１８）花王株式会社 (8,290)
【Ｆターム（参考）】
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