ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦアイソフォーム、ＰＤＧＦレセプター、ＶＥＧＦ、およびＶＥＧＦレセプター、またはそれらの任意の組み合わせに、高い親和性および特異性で結合することが可能である腫瘍治療剤として有用なアプタマーを製造および使用するための物質および方法が提供される。本発明の組成物は、固形腫瘍の治療において特に有用であり、かつ固形腫瘍の治療のために、単独でまたは既知の細胞傷害剤と組み合わせて使用され得る。そこに組み込まれるかまたはそこに付加される１つ以上のＣｐＧモチーフを有するアプタマーもまた、開示される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１〜配列番号３、配列番号９〜配列番号３８、配列番号５０、配列番号５４〜配列番号９０、および配列番号９４〜配列番号９９からなる群より選択される配列を含む、ＰＤＧＦに結合するアプタマー。
【請求項２】
２’フルオロ置換基を有する７個未満のヌクレオチドを含む配列を含む、ＰＤＧＦに結合するアプタマー。
【請求項３】
第１の標的に結合可能である第１の配列、および第２の標的に結合可能である第２の配列を含むアプタマー。
【請求項４】
前記第１の標的がＰＤＧＦ、ＰＤＧＦアイソフォーム、およびＰＤＧＦレセプターからなる群より選択され、かつ前記第２の標的がＶＥＧＦおよびＶＥＧＦレセプターからなる群より選択される、請求項３に記載のアプタマー。
【請求項５】
配列番号１〜配列番号３、配列番号９〜配列番号３８、配列番号５０、配列番号５４〜配列番号９０、および配列番号９４〜配列番号９９からなる群より選択される配列を含む、請求項４に記載のアプタマー。
【請求項６】
前記ＰＤＧＦアイソフォームがＰＤＧＦ ＡＡ、ＰＤＧＦ ＢＢ、ＰＤＧＦ ＡＢ、ＰＤＧＦ ＣＣ、およびＰＤＧＦ ＤＤである、請求項４に記載のアプタマー。
【請求項７】
前記第１の標的が前記アプタマーの結合の際に免疫応答を刺激せず、さらに前記第２の標的が該アプタマーの結合の際に免疫応答を刺激する、請求項３に記載のアプタマー。
【請求項８】
前記第２の標的がｔｏｌｌ様レセプターからなる群より選択される、請求項７に記載のアプタマー。
【請求項９】
前記第２の配列が免疫刺激配列である、請求項３に記載のアプタマー。
【請求項１０】
免疫刺激配列がＣｐＧモチーフである、請求項９に記載のアプタマー。
【請求項１１】
前記第１の配列が、ＰＤＧＦ、ＩｇＥ、ＩｇＥ ＦｃεＲ１、ＰＳＭＡ、ＣＤ２２、ＴＮＦ−α、ＣＴＬＡ４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＦｃＲＩＩＢ、ＢＴＬＡ、ＴＩＭ−３、ＣＤ１１ｃ、ＢＡＦＦ、Ｂ７−Ｘ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２５、およびＣＤ３３からなる群より選択される標的に結合可能である、請求項９に記載のアプタマー。
【請求項１２】
前記第１の配列がＰＤＧＦに結合可能である、請求項９に記載のアプタマー。
【請求項１３】
請求項１〜１２のうちのいずれかに記載のアプタマーおよび薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物。
【請求項１４】
請求項１〜１２のうちのいずれかに記載のアプタマー、細胞傷害剤、および薬学的に受容可能なキャリアを含む組成物。
【請求項１５】
前記細胞傷害剤が、チューブリン安定化剤、チューブリン不安定化剤、代謝拮抗物質、プリン合成阻害剤、ヌクレオシドアナログ、ＤＮＡアルキル化剤、ＤＮＡ修飾剤、および血管破壊剤からなる群より選択される細胞傷害剤のクラスに属する、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記細胞傷害剤が、カリケアマイシン、ドキソルビシン、タキソール、メトトレキサート、ゲムシタビン、シタラビン、ビンブラスチン、ダウノルビシン、ドセタキセル、イリノテカン、エポチロンＢ、エポチロンＤ、シスプラチン、カルボプラチン、および５−フルオロ−Ｕからなる群より選択される１つ以上の細胞傷害剤を単独でまたは組み合わせて使用される、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
請求項１に記載のアプタマー、ＶＥＧＦに結合するアプタマー、および薬学的に受容可能なキャリアを含む、組成物。
【請求項１８】
細胞傷害剤をさらに含む、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
前記細胞傷害剤が、チューブリン安定化剤、チューブリン不安定化剤、代謝拮抗物質、プリン合成阻害剤、ヌクレオシドアナログ、ＤＮＡアルキル化剤、ＤＮＡ修飾剤、および血管破壊剤からなる群より選択される細胞傷害剤のクラスに属する、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記細胞傷害剤が、カリケアマイシン、ドキソルビシン、タキソール、メトトレキサート、ゲムシタビン、シタラビン、ビンブラスチン、ダウノルビシン、ドセタキセル、イリノテカン、エポチロンＢ、エポチロンＤ、シスプラチン、カルボプラチン、および５−フルオロ−Ｕからなる群より選択される１つ以上の細胞傷害剤を単独でまたは組み合わせて使用される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２１】
請求項１〜１２のうちのいずれかに記載のアプタマーの治療有効量を投与する工程を包含する、癌を治療する方法。
【請求項２２】
請求項１３、１４、および１８のうちのいずれかに記載の組成物の治療有効量を投与する工程を包含する、癌を治療する方法。
【請求項２３】
前記細胞傷害剤が、チューブリン安定化剤、チューブリン不安定化剤、代謝拮抗物質、プリン合成阻害剤、ヌクレオシドアナログ、ＤＮＡアルキル化剤、ＤＮＡ修飾剤、および血管破壊剤からなる群より選択される細胞傷害剤のクラスに属する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記細胞傷害剤が、カリケアマイシン、ドキソルビシン、タキソール、メトトレキサート、ゲムシタビン、シタラビン、ビンブラスチン、ダウノルビシン、ドセタキセル、イリノテカン、エポチロンＢ、エポチロンＤ、シスプラチン、カルボプラチン、および５−フルオロ−Ｕからなる群より選択される１つ以上の細胞傷害剤を単独でまたは組み合わせて使用される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
請求項１〜１２のうちのいずれか一項に記載のアプタマーの治療有効量を投与する工程を包含する、腫瘍の増殖を阻害する方法。
【請求項２６】
請求項１３、１４、および１８のうちのいずれか一項に記載の組成物の治療有効量を投与する工程を包含する、腫瘍の増殖を阻害する方法。
【請求項２７】
前記細胞傷害剤が、チューブリン安定化剤、チューブリン不安定化剤、代謝拮抗物質、プリン合成阻害剤、ヌクレオシドアナログ、ＤＮＡアルキル化剤、ＤＮＡ修飾剤、および血管破壊剤からなる群より選択される細胞傷害剤のクラスに属する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記細胞傷害剤が、カリケアマイシン、ドキソルビシン、タキソール、メトトレキサート、ゲムシタビン、シタラビン、ビンブラスチン、ダウノルビシン、ドセタキセル、イリノテカン、エポチロンＢ、エポチロンＤ、シスプラチン、カルボプラチン、および５−フルオロ−Ｕからなる群より選択される１つ以上の細胞傷害剤を単独でまたは組み合わせて使用される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
請求項１〜１２のうちのいずれか一項に記載のアプタマーの治療有効量を投与する工程を包含する、固形腫瘍におけるＩＦＰを減少させる方法。
【請求項３０】
請求項１３、１４、および１８のうちのいずれかに記載の組成物の治療有効量を投与する工程を包含する、固形腫瘍におけるＩＦＰを減少させる方法。
【請求項３１】
前記細胞傷害剤が、チューブリン安定化剤、チューブリン不安定化剤、代謝拮抗物質、プリン合成阻害剤、ヌクレオシドアナログ、ＤＮＡアルキル化剤、ＤＮＡ修飾剤、および血管破壊剤からなる群より選択される細胞傷害剤のクラスに属する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記細胞傷害剤が、カリケアマイシン、ドキソルビシン、タキソール、メトトレキサート、ゲムシタビン、シタラビン、ビンブラスチン、ダウノルビシン、ドセタキセル、イリノテカン、エポチロンＢ、エポチロンＤ、シスプラチン、カルボプラチン、および５−フルオロ−Ｕからなる群より選択される１つ以上の細胞傷害剤を単独でまたは組み合わせて使用される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
請求項１〜１２のうちのいずれかに記載のアプタマーの治療有効量を投与する工程を包含する、細胞傷害剤に対する固形腫瘍の浸透性を増加させる方法。
【請求項３４】
請求項１３、１４、および１８のうちのいずれか一項に記載の組成物の治療有効量を投与する工程を包含する、細胞傷害剤に対する固形腫瘍の浸透性を増加させる方法。
【請求項３５】
前記細胞傷害剤が、チューブリン安定化剤、チューブリン不安定化剤、代謝拮抗物質、プリン合成阻害剤、ヌクレオシドアナログ、ＤＮＡアルキル化剤、ＤＮＡ修飾剤、および血管破壊剤からなる群より選択される細胞傷害剤のクラスに属する、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記細胞傷害剤が、カリケアマイシン、ドキソルビシン、タキソール、メトトレキサート、ゲムシタビン、シタラビン、ビンブラスチン、ダウノルビシン、ドセタキセル、イリノテカン、エポチロンＢ、エポチロンＤ、シスプラチン、カルボプラチン、および５−フルオロ−Ｕからなる群より選択される１つ以上の細胞傷害剤を単独でまたは組み合わせて使用される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
請求項１〜１２のうちのいずれかに記載のアプタマーの治療有効量を投与する工程を包含する、腫瘍中での血小板由来増殖因子の構成的発現を減少させる方法。
【請求項３８】
請求項１３、１４、および１８のうちのいずれかに記載の組成物の治療有効量を投与する工程を包含する、腫瘍中での血小板由来増殖因子の構成的活性化を減少させる方法。
【請求項３９】
前記細胞傷害剤が、チューブリン安定化剤、チューブリン不安定化剤、代謝拮抗物質、プリン合成阻害剤、ヌクレオシドアナログ、ＤＮＡアルキル化剤、ＤＮＡ修飾剤、および血管破壊剤からなる群より選択される細胞傷害剤のクラスに属する、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記細胞傷害剤が、カリケアマイシン、ドキソルビシン、タキソール、メトトレキサート、ゲムシタビン、シタラビン、ビンブラスチン、ダウノルビシン、ドセタキセル、イリノテカン、エポチロンＢ、エポチロンＤ、シスプラチン、カルボプラチン、および５−フルオロ−Ｕからなる群より選択される１つ以上の細胞傷害剤を単独でまたは組み合わせて使用される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
請求項１〜１２のうちのいずれかに記載のアプタマーの治療有効量を投与する工程を包含する、固形腫瘍中での血管形成および新生血管形成を減少させる方法。
【請求項４２】
請求項１３、１４、および１８のうちのいずれかに記載の組成物の治療有効量を投与する工程を包含する、固形腫瘍中での血管形成および新生血管形成を減少させる方法。
【請求項４３】
前記細胞傷害剤が、チューブリン安定化剤、チューブリン不安定化剤、代謝拮抗物質、プリン合成阻害剤、ヌクレオシドアナログ、ＤＮＡアルキル化剤、およびＤＮＡ修飾剤からなる群より選択される細胞傷害剤のクラスに属する、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記細胞傷害剤が、カリケアマイシン、ドキソルビシン、タキソール、メトトレキサート、ゲムシタビン、シタラビン、ビンブラスチン、ダウノルビシン、ドセタキセル、イリノテカン、エポチロンＢ、エポチロンＤ、シスプラチン、カルボプラチン、および５−フルオロ−Ｕからなる群より選択される１つ以上の細胞傷害剤を単独でまたは組み合わせて使用される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
前記癌または腫瘍がＰＤＧＦ媒介性の癌または腫瘍である、請求項２１〜４４のうちのいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
前記ＰＤＧＦ媒介性の癌または腫瘍が、膠芽細胞腫、慢性骨髄単球性白血病、隆起性皮膚線維肉腫、消化管間質腫瘍、および軟部組織肉腫からなる群より選択される、請求項２１〜４４のうちのいずれかに記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】


【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】


【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】


【図２２】


【図２４】

【図２５】

【公表番号】特表２００７−５２５１７７（Ｐ２００７−５２５１７７Ａ）
【公表日】平成１９年９月６日（２００７．９．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５１３２８７（Ｐ２００６−５１３２８７）
【出願日】平成１６年４月２１日（２００４．４．２１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１２６７０
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０９４６１４
【国際公開日】平成１６年１１月４日（２００４．１１．４）
【出願人】（５０４４６６４８７）アーケミックス　コーポレイション (10)
【Ｆターム（参考）】