試料摩砕容器並びにそれを用いる用具及び方法
【課題】 比較的硬い試料であっても、簡易かつ高い効率で試料を摩砕できる試料摩砕容器を提供する。
【解決手段】 一端に開口部２１を有し、かつ他端に底部２３を有する筒体２２を備えてなり、筒体２２の内側に、摩砕棒４０に形成される凹凸部４４へ臨み得るように、凹凸部２５を設けた。試料摩砕容器自体が試料にせん断効果を及ぼすことができる。筒体２２は、可撓性材料より形成され、筒体２２の外部から外力が加えられると、筒体２２が変形し筒体２２内の試料を潰しうるようになっている。
【解決手段】 一端に開口部２１を有し、かつ他端に底部２３を有する筒体２２を備えてなり、筒体２２の内側に、摩砕棒４０に形成される凹凸部４４へ臨み得るように、凹凸部２５を設けた。試料摩砕容器自体が試料にせん断効果を及ぼすことができる。筒体２２は、可撓性材料より形成され、筒体２２の外部から外力が加えられると、筒体２２が変形し筒体２２内の試料を潰しうるようになっている。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物又は植物に由来する生体試料等を、容器内で効率よく摩砕するための試料摩砕容器及びその関連技術に関するものである。さらに詳しくは、本発明は、比較的硬い試料（例えば、緩衝液に浸される植物葉等）を摩砕するのに適し、好適な例では、例えばミカン農家が、ミカン畑あるいはその付近でミカンが特定の病気に罹患していないかを検査するため、試料（例えば、ミカンの葉）を摩砕するような場合に適する。
【背景技術】
【０００２】
液体試料、特に生体成分中の検出物質を定性或いは定量的に分析する技術として、操作の簡便性及び迅速性の面から、イムノクロマトグラフィー法が多用されている。より具体的には、試験片の所定の領域に、標識試薬、検出物質に対して特異性を持つ物質が、流動可能あるいは流動不能に装備され、試験片の所定の箇所に設定される試料滴下部に試料を滴下すれば、試験片の検出領域に検査結果を示すサインが現れるようになっている。
【０００３】
本発明者らは、イムノクロマトグラフィー法による検査装置の分野において、技術的蓄積を有し、そのような検査の入り口部分である、試料の摩砕についても、鋭意研究を重ねている。
【０００４】
さて、主として医学、生物学等に関連する技術分野において、さまざまな摩砕法が実施され或いは提案されている。これらの摩砕法は、およそ次のように分類することができる。
【０００５】
（比較例１）
乳鉢に緩衝液に浸した試料を入れ、乳棒をすりこぎ棒のように使用するものである。上記技術分野で、広く実施されているが、次のような問題点がある。
【０００６】
乳鉢の直径は、通常約９０ｍｍ程度である。そのため、検体数が多いと、摩砕作業に広いスペースが必要になる。
【０００７】
乳鉢や乳棒の外面に試料が付着しやすく、試料のロスが多い。殊に、試料が非常に少量であるときは、検出精度の低下を招くおそれがある。
【０００８】
乳鉢と乳棒のセットは、高価（約５００円位）である。
【０００９】
（比較例２）
ペッスル（棒体と、その棒体の先端部に取り付けられた円錐状の頭部とからなる）と、遠心分離に使用される容器とを、用いるものである。比較例１よりも小さいから、少量の試料の摩砕に関しては、比較例１よりも試料のロスが少なく優れている。しかしながら、これでは、ペッスルの頭部及び容器の内面は、いずれも鏡面であり、比較的硬い試料（例えば、植物の葉等）について、摩砕効率が低い。
【００１０】
（比較例３）
文献１（特開昭６３−１１２９７４号公報）が開示するものである。即ち、ペッスルの頭部に溝を形成し、比較的硬い試料についても、摩砕効率を向上させるように意図したものである。しかしながら、後に詳述するように、本発明者らの実験によれば、これによっても、比較的硬い試料に関する摩砕効率は十分とは言えないという結果が出ている。
【００１１】
（比較例４）
文献２（特開平５−１８７９７７号公報）あるいは文献３（特開平９−１５１２３号公報）が開示するように、合成樹脂製の薄い袋を用意し、その内面に網目を設けたものである。しかしながら、本発明者らの検証によれば、摩砕作業中に、力の入れ具合により、袋が破損することがあった。
【特許文献１】特開昭６３−１１２９７４号公報
【特許文献２】特開平５−１８７９７７号公報
【特許文献３】特開平９−１５１２３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
以上をふまえて、本発明は、比較的硬い試料であっても、簡易かつ高い効率で試料を摩砕できる試料摩砕容器を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
第１の発明に係る試料摩砕容器は、ホモジナイズ用の試料摩砕容器であって、一端に開口部を有し、かつ他端に底部を有する筒体を備えてなり、筒体の内側に凹凸部を設けた。
【００１４】
第２の発明に係る試料摩砕容器は、第１の発明に加え、凹凸部は、摩砕棒に形成される凹凸部へ臨み得るように設けられる。
【００１５】
これらの構成により、試料摩砕容器自体が試料にせん断効果を及ぼすことができ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００１６】
第３の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、筒体は、可撓性材料より形成され、筒体の外部から外力が加えられると、筒体が変形し筒体内の試料を潰しうるようになっている。
【００１７】
この構成により、試料摩砕容器の筒体に試料を入れ、外から筒体を手でもめば、筒体内の試料を潰すことができ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００１８】
第４の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、凹凸部は、複数の突起から形成される。
【００１９】
この構成により、複数の突起を試料に接触させ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００２０】
第５の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、凹凸部は、階段状をなし粗面を構成する。
【００２１】
この構成により、粗面を試料に接触させ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００２２】
第６の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、凹凸部は、底部の内側に形成される。
【００２３】
この構成により、試料を底部側へ加圧しながら、凹凸部を試料に接触させ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００２４】
第７の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、筒体の底部付近には、円錐状をなす先細部が設けられる。
【００２５】
円錐状をなす先細部を設けることにより、試料が沈降すると、底部中央付近に集中し、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００２６】
第８の発明に係る試料摩砕容器では、第７の発明に加え、凹凸部は、先細部の内側に形成される。
【００２７】
この構成により、すり鉢状の先細部から試料へせん断効果を作用させることができ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００２８】
第９の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、筒体は、透明又は半透明の材料からなる。
【００２９】
この構成により、作業者は、筒体の外から筒体の内部の試料の状態を観察しながら、試料を効率よく摩砕できる。
【００３０】
第１０の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に係る試料摩砕容器と、試料摩砕容器に挿入され、試料摩砕容器内の試料を摩砕する摩砕棒とを備える試料摩砕用具であって、摩砕棒は、棒体と、棒体の先端部に設けられる頭部とを備え、頭部には、試料摩砕容器の凹凸部へ臨む凹凸部が設けられている。
【００３１】
この構成により、試料摩砕容器の凹凸部と摩砕棒の凹凸部とにより、両方から試料を挟み込み、せん断効果を及ぼすことができる。これにより、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【発明の効果】
【００３２】
本発明によれば、試料摩砕容器の凹凸部により、試料にせん断効果を及ぼすことができ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００３３】
さらに、本発明に係る試料摩砕容器は、イムノクロマトグラフィー法による検査装置と同様に、携帯性に優れるので、現場（例えば、感染のおそれがある果樹のすぐそば等）で試料を効率よく摩砕し、同検査装置により検査結果を得ることができ、感染の発見及びその拡大防止策を、早期にかつ簡易に取ることができ、農業従事者やその関係者に有益である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３４】
（実施の形態１）
以下図面を参照しながら、本発明の実施の形態を説明する。図１は、本発明の実施の形態１における試料摩砕用具の断面図である。
【００３５】
図１に示すように、実施の形態１の試料摩砕用具は、摩砕棒１と、試料摩砕容器５とを備える。
【００３６】
摩砕棒１は、細長い円筒状をなす棒体２と、棒体２の下端部に設けられる頭部３とを備える。また、頭部３の下端部には、凹凸部４が形成される。凹凸部４は、複数の突起群から構成される。
【００３７】
試料摩砕容器５は、筒体７を備え、筒体７は、上端部に開口部６を、下端部に底部８を、それぞれ有する。筒体７には、摩砕棒１の頭部３が挿入できるようになっている。底部８の上面には、上向きに（即ち、頭部３の凹凸部４に臨むように）、凹凸部９が形成される。凹凸部９は、凹凸部４と同様に、複数の突起群から構成される。
【００３８】
そして、開口部６から筒体７へ試料１０を入れ、図１に示すように、摩砕棒１の頭部３を筒体７に挿入すると、凹凸部４と凹凸部９とは、試料１０を挟み込む位置関係になる。この状態において、矢印Ｎ１方向に棒体２を下降させると、凹凸部４が試料１０を加圧して、試料１０を潰すことができる。また、矢印Ｎ２方向あるいはその逆方向に、棒体２を回転させると、凹凸部４と凹凸部９とは、試料１０にせん断効果を及ぼす。その結果、試料１０が植物の葉のように、比較的硬い試料である場合においても、試料１０は、効率よく摩砕される。そして、十分摩砕された試料は、次の処理（例えば、イムノクロマトグラフィー法による検査装置による検査）に移行できる。
【００３９】
ここで、摩砕棒１及び試料摩砕容器５は、合成樹脂を材料とする射出成型品であることが望ましい。こうすれば、安価に製造でき、使い捨ての使用態様を採用できるし、袋よりも堅牢であるため、破損のおそれは少ない。
【００４０】
（実施の形態２）
図２は、本発明の実施の形態２における試料摩砕容器の断面図であり、図３は、同摩砕棒の正面図である。
【００４１】
図３に示すように、本形態の摩砕棒４０は、細長い円筒状をなす棒体４１と、棒体４１の下端部に設けられる頭部４３とを備える。頭部４３の下端部には、第１凹凸部４４が形成される。第１凹凸部４４は、複数の突起群から構成される。さらに、頭部４３の傾斜する側面は、下向きに細くなる円錐状（つまり先細り）をなし、その側面には多数の溝が形成され、第２凹凸部４５となっている。また、棒体４１の上部には、縦の溝が複数条形成され、把持部４２となっている。これにより、摩砕棒４０を把持する作業者の手が滑りにくいようになっている。
【００４２】
図２に示すように、本形態の試料摩砕容器は、試料摩砕容器２０と、キャップ３０と、ノズル３４とを備える。
【００４３】
試料摩砕容器２０は、上端部に開口部２１を、下端部に底部２３を、それぞれ有する筒体２２を備える。また、筒体２２の底部２３付近は、下向きに細くなる円錐状（つまり先細り）の先細部２４となっている。
【００４４】
開口部２１から第２凹凸部２６に至るまで、摩砕棒４０の頭部４３が挿入できるようになっており、摩砕棒４０を最も下まで挿入すると、第２凹凸部２６に第２凹凸部４５が当接する。
【００４５】
底部２３の上面には、上向きに（即ち、摩砕棒４０の第１凹凸部４４に臨むように）、第１凹凸部２５が形成される。第１凹凸部２５は、第１凹凸部４４と同様に、複数の突起群から構成される。
【００４６】
筒体２２の上部には、外径方向へ突出するフランジ２７が周設され、リブ２８は、フランジ２７と筒体２２の外側面とを連結する。なお、フランジ２７、リブ２８は、省略しても差し支えない。
【００４７】
筒体２２の外側面のうち、フランジ２７よりも上部には、雄ねじ部２９が形成され、キャップ３０には、雄ねじ部２９に対応する雌ねじ部３１が形成されている。したがって、筒体２２の上側からキャップ３０を回転させると、雄ねじ部２９と雌ねじ部３１とが螺合し、開口部２１はキャップ３０によって閉鎖され、筒体２２の内部空間は密閉される。
【００４８】
試料摩砕容器２０を使用する前には、例えば、包装袋等に試料摩砕容器２０が収納されることになるが、その場合には、キャップ３０による上記密閉関係を維持する。
【００４９】
使用時には、キャップ３０を外し、次に筒体２２内に溶解液３７を入れる。そうすると、筒体２２内の溶解液３７は、筒体２２内に入ったままの状態となる。溶解液３７は、予め筒体２２内に入れておくこともできる。
【００５０】
次に、試料を筒体２２に入れ、試料を摩砕するときには、キャップ３０を外してしまっても良いが、本形態では、次のようにすることができるようになっている。
【００５１】
即ち、キャップ３０の上端部中央にノッチ３２が突設されている。また、ノッチ３２の下端部には、切り込み溝３３が水平に刻まれており、切り込み溝３３の付近は、意図的に脆弱にされている。そこで、図２の鎖線で示すように、切り込み溝３３を境として、ノッチ３２を折ると、ノッチ３２は、容易に切り離すことができ、その結果、開口部２１はその上部において外部と連通することになる。こうなると、ノッチ３２が取り除かれることにより開いた穴を介して、キャップ３０を取り外すことなしに、試料あるいは摩砕棒を筒体２２内に入れることができる。
【００５２】
以上のように、試料の摩砕が終了したら、ノズル３４をキャップ３０に装着する。ノズル３４の上部は、先細りの漏斗状をなす滴下口３５となっており、ノズル３４の中段部には、溶解液３７に含まれる夾雑物等を取り除くフィルタ３６が装着されている。したがって、ノズル３４を装着した後に、滴下口３５を下に向け、筒体２２を作業者が手で絞れば、溶解液３７は開口部２１、ノッチ３２が除かれることによりできた穴、ノズル３４を介してフィルタ３６へ至り、そこで夾雑物が取り除かれた後、溶解液３７は滴下口３５から外部へ吐出される。
【００５３】
さて、第２凹凸部２６等の形成形態は、種々考えられる。例えば、図４に示すように、第２凹凸部２６を、階段状をなす粗面として構成してもよい。こうすれば、粗面を試料に接触させ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できるだけでなく、試料摩砕容器２０を合成樹脂の射出成型品とする際に、金型から容易に離型することができ、好適である。
【００５４】
また、実施の形態１のように先細りにしない場合や、筒体２２の少なくとも一部の内側面を、図５のように構成しても良い。このようにしても、比較的硬い試料を効率よく摩砕できるだけでなく、試料摩砕容器２０を合成樹脂の射出成型品とする際に、金型から容易に離型することができ、好適である。
【００５５】
ここで、筒体２２は、透明又は半透明の合成樹脂（可撓性材料）より形成されている。したがって、図６に示すように、作業者が例えば親指５０、人差し指５１等を用いて筒体２２に外力を加えると、筒体２２が変形し筒体２２内の試料を潰しうるようになっている。
【００５６】
こうすれば、場合により、摩砕棒４０なしに、溶解液３７を摩砕できる。なお、筒体２２の外側に、凹凸を設ければ、滑り止めの効果によって、試料摩砕がさらに容易となる。しかも、筒体２２は、透明又は半透明であるから、作業者は、筒体２２の外から溶解液３７の状態を目視でき、力加減を調整しながら、摩砕できて非常に好適である。
【００５７】
なお、図２には示していなかったが、図６に示すように、ノズル３４の滴下口３５には、適宜ノズル蓋３８を取付け、不用意に溶解液３７が外部に漏れでないように配慮することが望ましい。
【００５８】
さて、図６に示すように手もみによるか、摩砕棒４０を使用する摩砕によるか、あるいは、その両方であるかは問わず、摩砕が完了したら、図７に示すように、ノズル蓋３８を外し、携帯できる検出装置（操作の利便性及び迅速性の面から、イムノクロマトグラフィー法によるものが望ましい。）へフィルタ３６により濾過された溶解液３７を滴下する。
【００５９】
図７に示す検出装置は、保持具６０と、保持具６０により保持される試験片６１とを備え、試験片６１の試料滴下部は、保持具６０に装着される治具に開設された試料滴下口６２を介して外部へ露呈する。したがって、作業者は、試料滴下口６２を介してフィルタ３６により濾過された溶解液３７を滴下すればよい。
【００６０】
その他の点は、実施の形態１と同様である。
【００６１】
なお以下、本発明者らが使用したイムノクロマト法による果樹ウイルスＳＤＶの検出装置の調製要領を簡単に説明する。
【００６２】
＜抗ＳＤＶモノクローナル抗体＞
抗ＳＤＶモノクローナル抗体を、Ｋｏｈｌｅｒ−Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（Ｎａｔｕｒｅ，２５６，４９５−４９７，１９７５）の方法に準じて調製した。ＳＤＶを免疫したマウスの脾臓から抗体を産出する細胞を取り出し、別に用意したマウスの骨髄腫細胞（ミエローマ）と融合させ、抗ＳＤＶモノクローナル抗体４Ｅ６産生ハイブリドーマ細胞並びに抗ＳＤＶモノクローナル抗体２Ｇ２産生ハイブリドーマ細胞を得た。それぞれのハイブリドーマ細胞を培養し、マウス腹腔内に注射し、腹水を得た。得られた腹水から、硫酸アンモニウム分画し、プロテインＧカラム精製により、抗ＳＤＶモノクローナル抗体４Ｅ６並びに抗ＳＤＶモノクローナル抗体２Ｇ２を得た。
【００６３】
＜標識成分＞
Ｇ．Ｆｒｅｎｓ（Ｎａｔｕｒｅ，２４１，２０−２２，１９７３）の方法に従い、金コロイドを作製した。金コロイド１０ｍｌに対し、抗ＳＤＶモノクローナル抗体２Ｇ２を４０μｇ、室温にて混合し、抗ＳＤＶモノクローナル抗体結合金コロイド（標識成分）を調製した。
【００６４】
＜標識区域＞
抗ＳＤＶモノクローナル抗体結合金コロイドをＯＤ５２０＝０．３０３に調製した。調製液をガラス繊維パッドに、テスト当たり３６μｌ塗布し乾燥させ、抗ＳＤＶモノクローナル抗体結合金コロイド塗布パッドを調製した。
【００６５】
＜検出区域＞
抗ＳＤＶモノクローナル抗体４Ｅ６を、ニトロセルロースメンブレン（ミリポア社：ＳＣＨＦ（商標））に、テスト当たり０．４８μｌでライン状に塗布し検出区域を形成した。カゼイン溶液によるブロッキング処理を経て、抗ＳＤＶモノクローナル抗体固相化メンブレンを調製した。
【００６６】
＜検出装置＞
濾紙（滴下部）、抗ＳＤＶモノクローナル抗体結合金コロイド塗布パッド、抗ＳＤＶモノクローナル抗体固相化メンブレン、濾紙とを、それぞれの端部が３ｍｍづつ重なるように、粘着剤付きの合成樹脂に貼り付け、試験片６１を作製した。この試験片６１を保持具６０上に固定し、検出装置を作製した。
【００６７】
以上の検出装置を用いて、
（実施例１）：実施の形態２による試料摩砕容器２０を、摩砕棒４０は使用せず、手で揉んで摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを試料摩砕容器２０に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。その後、フィルタ３６により濾過された液を摩砕液とした。）；
（実施例２）：実施の形態２による試料摩砕容器２０と摩砕棒４０とを使用して摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを試料摩砕容器２０に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。その後、フィルタ３６により濾過された液を摩砕液とした。）；
（比較例１）：乳鉢と乳棒とで摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを準備し、その一部を乳鉢に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。その後、残りの０．１Ｍクエン酸緩衝液を乳鉢に入れた。遠心分離後の上清を摩砕液とした。）；
（比較例２）：平坦なペッスルと遠心分離器用の容器とで摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを遠心分離器用の容器に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。遠心分離後の上清を摩砕液とした。）；
（比較例３）：溝付きのペッスルと遠心分離器用の容器とで摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを遠心分離器用の容器に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。遠心分離後の上清を摩砕液とした。）；
（比較例４）：網目付きの袋で摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを網目付きの袋に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。遠心分離後の上清を摩砕液とした。）
のそれぞれにより調製した摩砕液について、０．１Ｍクエン酸緩衝液により、希釈系列（×１、×２、×４、×８、×１６、×３２、×６４）を調製した。これを１００μｌだけ、滴下口６２へ滴下し、１５分経過後、金コロイド粒子由来のライン（ここでは、赤紫色）の出現状況を目視により観察した。なお、（比較例１）〜（比較例４）は、「背景技術」の項で述べたとおりである。
【００６８】
以下において、感染樹１、２は果樹ウイルスＳＤＶに感染しているミカン、健全樹１、２は果樹ウイルスＳＤＶに感染していないミカンであり、これらのミカンに関する感度試験結果は、次のとおりである。
果樹名 摩 砕 摩砕液希釈倍率
×１ ×２ ×４ ×８ ×16 ×32 ×64
感染樹１ 実施例１ ＋ ＋ ＋ −
実施例２ ＋ ＋ ＋ −
比較例１ ＋ ＋ ＋ −
比較例２ ＋ − − −
比較例３ ＋ ＋ ＋ −
比較例４ − − − −
感染樹２ 実施例１ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ − −
実施例２ ＋ ＋ ＋ ＋ − − −
比較例１ ＋ ＋ ＋ ＋ − − −
比較例２ ＋ ＋ − − − − −
比較例３ ＋ ＋ − − − − −
比較例４ ＋ ＋ ＋ ＋ − − −
健全樹１ 実施例１ −
実施例２ −
比較例１ −
比較例２ −
比較例３ −
比較例４ −
健全樹２ 実施例１ −
実施例２ −
比較例１ −
比較例２ −
比較例３ −
比較例４ −
この結果は、次の事実を示す。
（１）実施例１、２は、比較例１と同等以上の検出感度をもたらす。加えて、実施例１、２の使い勝手は、比較例１よりも遙かに優れている。
（２）比較例２は、実施例１，２及び比較例１に比べ、検出感度が劣る。
（３）比較例３は、実施例１，２及び比較例１に比べ、試料によっては検出感度が劣る。
（４）比較例４は、実施例１，２及び比較例１に比べ、試料によっては検出感度が劣る。
【００６９】
なお、インフルエンザ検査においては、咽頭を綿棒でぬぐって体液を採取し、溶解液が入れられた容器に、この綿棒を浸し、溶解液中で容器の外から綿棒を絞り、綿棒にしみこんでいた体液を溶解液中へ抽出し、その後、溶解液を用いて検査を行っている。
【００７０】
本発明の試料摩砕容器は、このような容器にも応用でき、そうすれば、凹凸部の作用により、綿棒からの被検査物質の抽出効率を改善できることが期待される。
【００７１】
本発明者らは、インフルエンザ感染の検査に関し、（１）モデル実験及び（２）検体による実験を行い、結果が得られたので報告する。実験の手順は、次の通りである。先端に綿球を備える同一の綿棒を使用し、その綿球の先端部にモデル粘液又は鼻腔吸引液（検体が含まれる可能性があるもの）を付着させる。同一組成及び同量の抽出溶液を、図１の容器５から凹凸部９を除いた第１容器（以下、「比較例５」という。）又は図２の容器２０である第２容器（以下、「本発明例」という。）に溜める。
【００７２】
比較例５の抽出処置は、次の通りである。即ち、モデル粘液又は鼻腔吸引液を付着させた綿球を第１容器の底まで差し込み、第１容器の外側から指で圧力を加え、５回綿球をもむ。
【００７３】
本発明例の抽出処置は、次の通りである。即ち、モデル粘液又は鼻腔吸引液を付着させた綿球を第２容器の底まで差し込み、第２容器の外側から指で綿球をつまみ、綿棒を左右に５回回転させる。
【００７４】
（１）モデル実験
インフルエンザ感染の検査では、鼻腔又は咽頭等内の粘液が使用されるが、このような粘液はかなりの粘性を有する。したがって、モデル実験では、粘性が高いものモデルとして、青色の水性絵の具を使用した。即ち、綿球に青色絵の具を取り、重量を測定し、１mlの抽出溶液により上記抽出処置を行う。その後、６１０nmの吸光度を測る。１mlの抽出溶液に青色絵の具をそのまま添加し完全に溶解させたときの吸光度を理論吸光度（１００％）とし、測定された吸光度を理論吸光度で除した値を、抽出率（％）とする。
【００７５】
比較例５及び本発明例のそれぞれについて、２０回ずつ抽出処理を行い、抽出率を求めたところ、次の結果を得た。
【００７６】
回 数 比較例５の抽出率（％） 本発明例の抽出率（％）
１ １１．６ ６５．５
２ ７．７ ８１．７
３ １５．６ ８２．０
４ ９．９ ７５．３
５ ９．０ ８１．４
６ １１．５ ７９．９
７ ６．６ ７３．０
８ ６．２ ７４．６
９ ７．９ ９２．２
１０ ６．９ ７７．３
１１ １３．１ ７２．３
１２ ８．７ ７７．０
１３ ５．６ ６８．１
１４ ８．３ ８７．１
１５ ６．９ ５９．６
１６ ５．９ ７３．２
１７ ４．５ ８３．３
１８ ４．４ ８８．３
１９ ４．７ ９２．６
２０ ９．２ ８７．１
最小値 ４．４ ５９．６
最大値 １５．６ ９２．６
平均値 ８．２ ７８．６
本発明例では、抽出率が５９．６〜９２．６％、平均値７８．６％であり、比較例５では、抽出率が４．４〜１５．６％、平均値８．２％である。即ち、比較例５に比べると、本発明例では、極めて高い抽出率が得られる。言うまでもなく、高い抽出率が得られるほど、検出精度が向上する。
【００７７】
また、比較例５では指で綿球をもむため、強い指の力が必要であるが、本発明例では、強い力は不要であって抽出処理が容易であるという利点がある。より詳しくは、比較例５では、容器の底部が綿球より半径が大きい円筒状であり、容器の底面に邪魔されて容器の側部が変形しにくいため、綿球を押しづらく、綿球をもみほぐそうとしても試料が十分溶出しないと考えられる。一方、本発明例では、容器の底部が先細りになっており、しかも凹凸部２６が形成されているので、綿棒を回転させるだけで、試料が容易に十分な量だけ溶出し、抽出率が著しく向上したものと考えられる。
【００７８】
（２）検体による実験
本発明者らは、上記モデル実験に加え、上記比較例５及び本発明例のそれぞれについて、検体そのものを用いた実験を行った。ここでは、インフルエンザの陽性患者から、３本の同じ綿棒のそれぞれを用いて鼻腔吸引液を良くホモジナイズして採取した。
【００７９】
また、４つの検体（検体１から検体３は、インフルエンザＡ型陽性の検体であり、検体４はインフルエンザＢ型陽性の検体である。）を使用した。抽出溶液等は、モデル実験と同じであるが、抽出後の溶液を２倍系列希釈して試料とし、イムノクロマト法によるインフルエンザ検出キット（株式会社ミズホメディー製、商標：クイックチェイサーＦｌｕ、品番：６７５００）により測定を行った。
【００８０】
結果は次の通りであるが、「＋」は陽性、「＋Ｗ」は擬陽性、「−」は陰性を示す。
【００８１】
希 釈 倍
検体 例 原液 ２ ４ ８ 16 32 64 128 256 512 1024
１ 比較例５ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − −
１ 本発明例 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ −
２ 比較例５ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − − − − −
２ 本発明例 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − − −
３ 比較例５ ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − − − −
３ 本発明例 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − −
４ 比較例５ ＋ − − − − − − − − − −
４ 本発明例 ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − − − −
以上により、いずれの条件でも、本発明例では、比較例５に比べ、高い抽出率が得られるから（モデル実験参照）、インフルエンザ検出感度が大幅に向上することが明らかである。なお、検体１から検体４のうちでも、検体１は非常に粘性が高く、検体３はそれについで粘性がかなり高いが、検体の粘性が高いほど、本発明例の容器は、高い効果を奏すると言える。
【図面の簡単な説明】
【００８２】
【図１】本発明の実施の形態１における試料摩砕容器の断面図
【図２】本発明の実施の形態２における試料摩砕容器の断面図
【図３】本発明の実施の形態２における摩砕棒の正面図
【図４】本発明の実施の形態２における第２凹凸部の拡大図
【図５】（ａ）本発明の実施の形態２における第２凹凸部の横断面図 （ｂ）本発明の実施の形態２における第２凹凸部の縦断面図
【図６】本発明の実施の形態２における試料摩砕容器の使用状態説明図
【図７】本発明の実施の形態２における試料摩砕容器の使用状態説明図
【符号の説明】
【００８３】
１、４０ 摩砕棒
２、４１ 棒体
３、４３ 頭部
４ 凹凸部
５、２０ 試料摩砕容器
６、２１ 開口部
７、２２ 筒体
８、２３ 底部
９ 凹凸部
１０ 試料
２５、４４ 第１凹凸部
２６、４５ 第２凹凸部
２７ フランジ
２８ リブ
２９ 雄ねじ部
３０ キャップ
３１ 雌ねじ部
３２ ノッチ
３３ 切り込み溝
３４ ノズル
３５、６２ 滴下口
３６ フィルタ
３７ 溶解液
３８ ノズル蓋
４２ 把持部
５０、５１ 指
６０ 保持具
６１ 試験片
６２ 試料滴下口
【技術分野】
【０００１】
本発明は、動物又は植物に由来する生体試料等を、容器内で効率よく摩砕するための試料摩砕容器及びその関連技術に関するものである。さらに詳しくは、本発明は、比較的硬い試料（例えば、緩衝液に浸される植物葉等）を摩砕するのに適し、好適な例では、例えばミカン農家が、ミカン畑あるいはその付近でミカンが特定の病気に罹患していないかを検査するため、試料（例えば、ミカンの葉）を摩砕するような場合に適する。
【背景技術】
【０００２】
液体試料、特に生体成分中の検出物質を定性或いは定量的に分析する技術として、操作の簡便性及び迅速性の面から、イムノクロマトグラフィー法が多用されている。より具体的には、試験片の所定の領域に、標識試薬、検出物質に対して特異性を持つ物質が、流動可能あるいは流動不能に装備され、試験片の所定の箇所に設定される試料滴下部に試料を滴下すれば、試験片の検出領域に検査結果を示すサインが現れるようになっている。
【０００３】
本発明者らは、イムノクロマトグラフィー法による検査装置の分野において、技術的蓄積を有し、そのような検査の入り口部分である、試料の摩砕についても、鋭意研究を重ねている。
【０００４】
さて、主として医学、生物学等に関連する技術分野において、さまざまな摩砕法が実施され或いは提案されている。これらの摩砕法は、およそ次のように分類することができる。
【０００５】
（比較例１）
乳鉢に緩衝液に浸した試料を入れ、乳棒をすりこぎ棒のように使用するものである。上記技術分野で、広く実施されているが、次のような問題点がある。
【０００６】
乳鉢の直径は、通常約９０ｍｍ程度である。そのため、検体数が多いと、摩砕作業に広いスペースが必要になる。
【０００７】
乳鉢や乳棒の外面に試料が付着しやすく、試料のロスが多い。殊に、試料が非常に少量であるときは、検出精度の低下を招くおそれがある。
【０００８】
乳鉢と乳棒のセットは、高価（約５００円位）である。
【０００９】
（比較例２）
ペッスル（棒体と、その棒体の先端部に取り付けられた円錐状の頭部とからなる）と、遠心分離に使用される容器とを、用いるものである。比較例１よりも小さいから、少量の試料の摩砕に関しては、比較例１よりも試料のロスが少なく優れている。しかしながら、これでは、ペッスルの頭部及び容器の内面は、いずれも鏡面であり、比較的硬い試料（例えば、植物の葉等）について、摩砕効率が低い。
【００１０】
（比較例３）
文献１（特開昭６３−１１２９７４号公報）が開示するものである。即ち、ペッスルの頭部に溝を形成し、比較的硬い試料についても、摩砕効率を向上させるように意図したものである。しかしながら、後に詳述するように、本発明者らの実験によれば、これによっても、比較的硬い試料に関する摩砕効率は十分とは言えないという結果が出ている。
【００１１】
（比較例４）
文献２（特開平５−１８７９７７号公報）あるいは文献３（特開平９−１５１２３号公報）が開示するように、合成樹脂製の薄い袋を用意し、その内面に網目を設けたものである。しかしながら、本発明者らの検証によれば、摩砕作業中に、力の入れ具合により、袋が破損することがあった。
【特許文献１】特開昭６３−１１２９７４号公報
【特許文献２】特開平５−１８７９７７号公報
【特許文献３】特開平９−１５１２３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
以上をふまえて、本発明は、比較的硬い試料であっても、簡易かつ高い効率で試料を摩砕できる試料摩砕容器を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
第１の発明に係る試料摩砕容器は、ホモジナイズ用の試料摩砕容器であって、一端に開口部を有し、かつ他端に底部を有する筒体を備えてなり、筒体の内側に凹凸部を設けた。
【００１４】
第２の発明に係る試料摩砕容器は、第１の発明に加え、凹凸部は、摩砕棒に形成される凹凸部へ臨み得るように設けられる。
【００１５】
これらの構成により、試料摩砕容器自体が試料にせん断効果を及ぼすことができ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００１６】
第３の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、筒体は、可撓性材料より形成され、筒体の外部から外力が加えられると、筒体が変形し筒体内の試料を潰しうるようになっている。
【００１７】
この構成により、試料摩砕容器の筒体に試料を入れ、外から筒体を手でもめば、筒体内の試料を潰すことができ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００１８】
第４の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、凹凸部は、複数の突起から形成される。
【００１９】
この構成により、複数の突起を試料に接触させ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００２０】
第５の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、凹凸部は、階段状をなし粗面を構成する。
【００２１】
この構成により、粗面を試料に接触させ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００２２】
第６の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、凹凸部は、底部の内側に形成される。
【００２３】
この構成により、試料を底部側へ加圧しながら、凹凸部を試料に接触させ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００２４】
第７の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、筒体の底部付近には、円錐状をなす先細部が設けられる。
【００２５】
円錐状をなす先細部を設けることにより、試料が沈降すると、底部中央付近に集中し、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００２６】
第８の発明に係る試料摩砕容器では、第７の発明に加え、凹凸部は、先細部の内側に形成される。
【００２７】
この構成により、すり鉢状の先細部から試料へせん断効果を作用させることができ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００２８】
第９の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に加え、筒体は、透明又は半透明の材料からなる。
【００２９】
この構成により、作業者は、筒体の外から筒体の内部の試料の状態を観察しながら、試料を効率よく摩砕できる。
【００３０】
第１０の発明に係る試料摩砕容器では、第１の発明に係る試料摩砕容器と、試料摩砕容器に挿入され、試料摩砕容器内の試料を摩砕する摩砕棒とを備える試料摩砕用具であって、摩砕棒は、棒体と、棒体の先端部に設けられる頭部とを備え、頭部には、試料摩砕容器の凹凸部へ臨む凹凸部が設けられている。
【００３１】
この構成により、試料摩砕容器の凹凸部と摩砕棒の凹凸部とにより、両方から試料を挟み込み、せん断効果を及ぼすことができる。これにより、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【発明の効果】
【００３２】
本発明によれば、試料摩砕容器の凹凸部により、試料にせん断効果を及ぼすことができ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できる。
【００３３】
さらに、本発明に係る試料摩砕容器は、イムノクロマトグラフィー法による検査装置と同様に、携帯性に優れるので、現場（例えば、感染のおそれがある果樹のすぐそば等）で試料を効率よく摩砕し、同検査装置により検査結果を得ることができ、感染の発見及びその拡大防止策を、早期にかつ簡易に取ることができ、農業従事者やその関係者に有益である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３４】
（実施の形態１）
以下図面を参照しながら、本発明の実施の形態を説明する。図１は、本発明の実施の形態１における試料摩砕用具の断面図である。
【００３５】
図１に示すように、実施の形態１の試料摩砕用具は、摩砕棒１と、試料摩砕容器５とを備える。
【００３６】
摩砕棒１は、細長い円筒状をなす棒体２と、棒体２の下端部に設けられる頭部３とを備える。また、頭部３の下端部には、凹凸部４が形成される。凹凸部４は、複数の突起群から構成される。
【００３７】
試料摩砕容器５は、筒体７を備え、筒体７は、上端部に開口部６を、下端部に底部８を、それぞれ有する。筒体７には、摩砕棒１の頭部３が挿入できるようになっている。底部８の上面には、上向きに（即ち、頭部３の凹凸部４に臨むように）、凹凸部９が形成される。凹凸部９は、凹凸部４と同様に、複数の突起群から構成される。
【００３８】
そして、開口部６から筒体７へ試料１０を入れ、図１に示すように、摩砕棒１の頭部３を筒体７に挿入すると、凹凸部４と凹凸部９とは、試料１０を挟み込む位置関係になる。この状態において、矢印Ｎ１方向に棒体２を下降させると、凹凸部４が試料１０を加圧して、試料１０を潰すことができる。また、矢印Ｎ２方向あるいはその逆方向に、棒体２を回転させると、凹凸部４と凹凸部９とは、試料１０にせん断効果を及ぼす。その結果、試料１０が植物の葉のように、比較的硬い試料である場合においても、試料１０は、効率よく摩砕される。そして、十分摩砕された試料は、次の処理（例えば、イムノクロマトグラフィー法による検査装置による検査）に移行できる。
【００３９】
ここで、摩砕棒１及び試料摩砕容器５は、合成樹脂を材料とする射出成型品であることが望ましい。こうすれば、安価に製造でき、使い捨ての使用態様を採用できるし、袋よりも堅牢であるため、破損のおそれは少ない。
【００４０】
（実施の形態２）
図２は、本発明の実施の形態２における試料摩砕容器の断面図であり、図３は、同摩砕棒の正面図である。
【００４１】
図３に示すように、本形態の摩砕棒４０は、細長い円筒状をなす棒体４１と、棒体４１の下端部に設けられる頭部４３とを備える。頭部４３の下端部には、第１凹凸部４４が形成される。第１凹凸部４４は、複数の突起群から構成される。さらに、頭部４３の傾斜する側面は、下向きに細くなる円錐状（つまり先細り）をなし、その側面には多数の溝が形成され、第２凹凸部４５となっている。また、棒体４１の上部には、縦の溝が複数条形成され、把持部４２となっている。これにより、摩砕棒４０を把持する作業者の手が滑りにくいようになっている。
【００４２】
図２に示すように、本形態の試料摩砕容器は、試料摩砕容器２０と、キャップ３０と、ノズル３４とを備える。
【００４３】
試料摩砕容器２０は、上端部に開口部２１を、下端部に底部２３を、それぞれ有する筒体２２を備える。また、筒体２２の底部２３付近は、下向きに細くなる円錐状（つまり先細り）の先細部２４となっている。
【００４４】
開口部２１から第２凹凸部２６に至るまで、摩砕棒４０の頭部４３が挿入できるようになっており、摩砕棒４０を最も下まで挿入すると、第２凹凸部２６に第２凹凸部４５が当接する。
【００４５】
底部２３の上面には、上向きに（即ち、摩砕棒４０の第１凹凸部４４に臨むように）、第１凹凸部２５が形成される。第１凹凸部２５は、第１凹凸部４４と同様に、複数の突起群から構成される。
【００４６】
筒体２２の上部には、外径方向へ突出するフランジ２７が周設され、リブ２８は、フランジ２７と筒体２２の外側面とを連結する。なお、フランジ２７、リブ２８は、省略しても差し支えない。
【００４７】
筒体２２の外側面のうち、フランジ２７よりも上部には、雄ねじ部２９が形成され、キャップ３０には、雄ねじ部２９に対応する雌ねじ部３１が形成されている。したがって、筒体２２の上側からキャップ３０を回転させると、雄ねじ部２９と雌ねじ部３１とが螺合し、開口部２１はキャップ３０によって閉鎖され、筒体２２の内部空間は密閉される。
【００４８】
試料摩砕容器２０を使用する前には、例えば、包装袋等に試料摩砕容器２０が収納されることになるが、その場合には、キャップ３０による上記密閉関係を維持する。
【００４９】
使用時には、キャップ３０を外し、次に筒体２２内に溶解液３７を入れる。そうすると、筒体２２内の溶解液３７は、筒体２２内に入ったままの状態となる。溶解液３７は、予め筒体２２内に入れておくこともできる。
【００５０】
次に、試料を筒体２２に入れ、試料を摩砕するときには、キャップ３０を外してしまっても良いが、本形態では、次のようにすることができるようになっている。
【００５１】
即ち、キャップ３０の上端部中央にノッチ３２が突設されている。また、ノッチ３２の下端部には、切り込み溝３３が水平に刻まれており、切り込み溝３３の付近は、意図的に脆弱にされている。そこで、図２の鎖線で示すように、切り込み溝３３を境として、ノッチ３２を折ると、ノッチ３２は、容易に切り離すことができ、その結果、開口部２１はその上部において外部と連通することになる。こうなると、ノッチ３２が取り除かれることにより開いた穴を介して、キャップ３０を取り外すことなしに、試料あるいは摩砕棒を筒体２２内に入れることができる。
【００５２】
以上のように、試料の摩砕が終了したら、ノズル３４をキャップ３０に装着する。ノズル３４の上部は、先細りの漏斗状をなす滴下口３５となっており、ノズル３４の中段部には、溶解液３７に含まれる夾雑物等を取り除くフィルタ３６が装着されている。したがって、ノズル３４を装着した後に、滴下口３５を下に向け、筒体２２を作業者が手で絞れば、溶解液３７は開口部２１、ノッチ３２が除かれることによりできた穴、ノズル３４を介してフィルタ３６へ至り、そこで夾雑物が取り除かれた後、溶解液３７は滴下口３５から外部へ吐出される。
【００５３】
さて、第２凹凸部２６等の形成形態は、種々考えられる。例えば、図４に示すように、第２凹凸部２６を、階段状をなす粗面として構成してもよい。こうすれば、粗面を試料に接触させ、比較的硬い試料であっても、試料を効率よく摩砕できるだけでなく、試料摩砕容器２０を合成樹脂の射出成型品とする際に、金型から容易に離型することができ、好適である。
【００５４】
また、実施の形態１のように先細りにしない場合や、筒体２２の少なくとも一部の内側面を、図５のように構成しても良い。このようにしても、比較的硬い試料を効率よく摩砕できるだけでなく、試料摩砕容器２０を合成樹脂の射出成型品とする際に、金型から容易に離型することができ、好適である。
【００５５】
ここで、筒体２２は、透明又は半透明の合成樹脂（可撓性材料）より形成されている。したがって、図６に示すように、作業者が例えば親指５０、人差し指５１等を用いて筒体２２に外力を加えると、筒体２２が変形し筒体２２内の試料を潰しうるようになっている。
【００５６】
こうすれば、場合により、摩砕棒４０なしに、溶解液３７を摩砕できる。なお、筒体２２の外側に、凹凸を設ければ、滑り止めの効果によって、試料摩砕がさらに容易となる。しかも、筒体２２は、透明又は半透明であるから、作業者は、筒体２２の外から溶解液３７の状態を目視でき、力加減を調整しながら、摩砕できて非常に好適である。
【００５７】
なお、図２には示していなかったが、図６に示すように、ノズル３４の滴下口３５には、適宜ノズル蓋３８を取付け、不用意に溶解液３７が外部に漏れでないように配慮することが望ましい。
【００５８】
さて、図６に示すように手もみによるか、摩砕棒４０を使用する摩砕によるか、あるいは、その両方であるかは問わず、摩砕が完了したら、図７に示すように、ノズル蓋３８を外し、携帯できる検出装置（操作の利便性及び迅速性の面から、イムノクロマトグラフィー法によるものが望ましい。）へフィルタ３６により濾過された溶解液３７を滴下する。
【００５９】
図７に示す検出装置は、保持具６０と、保持具６０により保持される試験片６１とを備え、試験片６１の試料滴下部は、保持具６０に装着される治具に開設された試料滴下口６２を介して外部へ露呈する。したがって、作業者は、試料滴下口６２を介してフィルタ３６により濾過された溶解液３７を滴下すればよい。
【００６０】
その他の点は、実施の形態１と同様である。
【００６１】
なお以下、本発明者らが使用したイムノクロマト法による果樹ウイルスＳＤＶの検出装置の調製要領を簡単に説明する。
【００６２】
＜抗ＳＤＶモノクローナル抗体＞
抗ＳＤＶモノクローナル抗体を、Ｋｏｈｌｅｒ−Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（Ｎａｔｕｒｅ，２５６，４９５−４９７，１９７５）の方法に準じて調製した。ＳＤＶを免疫したマウスの脾臓から抗体を産出する細胞を取り出し、別に用意したマウスの骨髄腫細胞（ミエローマ）と融合させ、抗ＳＤＶモノクローナル抗体４Ｅ６産生ハイブリドーマ細胞並びに抗ＳＤＶモノクローナル抗体２Ｇ２産生ハイブリドーマ細胞を得た。それぞれのハイブリドーマ細胞を培養し、マウス腹腔内に注射し、腹水を得た。得られた腹水から、硫酸アンモニウム分画し、プロテインＧカラム精製により、抗ＳＤＶモノクローナル抗体４Ｅ６並びに抗ＳＤＶモノクローナル抗体２Ｇ２を得た。
【００６３】
＜標識成分＞
Ｇ．Ｆｒｅｎｓ（Ｎａｔｕｒｅ，２４１，２０−２２，１９７３）の方法に従い、金コロイドを作製した。金コロイド１０ｍｌに対し、抗ＳＤＶモノクローナル抗体２Ｇ２を４０μｇ、室温にて混合し、抗ＳＤＶモノクローナル抗体結合金コロイド（標識成分）を調製した。
【００６４】
＜標識区域＞
抗ＳＤＶモノクローナル抗体結合金コロイドをＯＤ５２０＝０．３０３に調製した。調製液をガラス繊維パッドに、テスト当たり３６μｌ塗布し乾燥させ、抗ＳＤＶモノクローナル抗体結合金コロイド塗布パッドを調製した。
【００６５】
＜検出区域＞
抗ＳＤＶモノクローナル抗体４Ｅ６を、ニトロセルロースメンブレン（ミリポア社：ＳＣＨＦ（商標））に、テスト当たり０．４８μｌでライン状に塗布し検出区域を形成した。カゼイン溶液によるブロッキング処理を経て、抗ＳＤＶモノクローナル抗体固相化メンブレンを調製した。
【００６６】
＜検出装置＞
濾紙（滴下部）、抗ＳＤＶモノクローナル抗体結合金コロイド塗布パッド、抗ＳＤＶモノクローナル抗体固相化メンブレン、濾紙とを、それぞれの端部が３ｍｍづつ重なるように、粘着剤付きの合成樹脂に貼り付け、試験片６１を作製した。この試験片６１を保持具６０上に固定し、検出装置を作製した。
【００６７】
以上の検出装置を用いて、
（実施例１）：実施の形態２による試料摩砕容器２０を、摩砕棒４０は使用せず、手で揉んで摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを試料摩砕容器２０に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。その後、フィルタ３６により濾過された液を摩砕液とした。）；
（実施例２）：実施の形態２による試料摩砕容器２０と摩砕棒４０とを使用して摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを試料摩砕容器２０に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。その後、フィルタ３６により濾過された液を摩砕液とした。）；
（比較例１）：乳鉢と乳棒とで摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを準備し、その一部を乳鉢に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。その後、残りの０．１Ｍクエン酸緩衝液を乳鉢に入れた。遠心分離後の上清を摩砕液とした。）；
（比較例２）：平坦なペッスルと遠心分離器用の容器とで摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを遠心分離器用の容器に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。遠心分離後の上清を摩砕液とした。）；
（比較例３）：溝付きのペッスルと遠心分離器用の容器とで摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを遠心分離器用の容器に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。遠心分離後の上清を摩砕液とした。）；
（比較例４）：網目付きの袋で摩砕した場合（０．１Ｍクエン酸緩衝液０．６ｍｌを網目付きの袋に入れ、つづいて試料葉０．０６グラムを入れ摩砕した。遠心分離後の上清を摩砕液とした。）
のそれぞれにより調製した摩砕液について、０．１Ｍクエン酸緩衝液により、希釈系列（×１、×２、×４、×８、×１６、×３２、×６４）を調製した。これを１００μｌだけ、滴下口６２へ滴下し、１５分経過後、金コロイド粒子由来のライン（ここでは、赤紫色）の出現状況を目視により観察した。なお、（比較例１）〜（比較例４）は、「背景技術」の項で述べたとおりである。
【００６８】
以下において、感染樹１、２は果樹ウイルスＳＤＶに感染しているミカン、健全樹１、２は果樹ウイルスＳＤＶに感染していないミカンであり、これらのミカンに関する感度試験結果は、次のとおりである。
果樹名 摩 砕 摩砕液希釈倍率
×１ ×２ ×４ ×８ ×16 ×32 ×64
感染樹１ 実施例１ ＋ ＋ ＋ −
実施例２ ＋ ＋ ＋ −
比較例１ ＋ ＋ ＋ −
比較例２ ＋ − − −
比較例３ ＋ ＋ ＋ −
比較例４ − − − −
感染樹２ 実施例１ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ − −
実施例２ ＋ ＋ ＋ ＋ − − −
比較例１ ＋ ＋ ＋ ＋ − − −
比較例２ ＋ ＋ − − − − −
比較例３ ＋ ＋ − − − − −
比較例４ ＋ ＋ ＋ ＋ − − −
健全樹１ 実施例１ −
実施例２ −
比較例１ −
比較例２ −
比較例３ −
比較例４ −
健全樹２ 実施例１ −
実施例２ −
比較例１ −
比較例２ −
比較例３ −
比較例４ −
この結果は、次の事実を示す。
（１）実施例１、２は、比較例１と同等以上の検出感度をもたらす。加えて、実施例１、２の使い勝手は、比較例１よりも遙かに優れている。
（２）比較例２は、実施例１，２及び比較例１に比べ、検出感度が劣る。
（３）比較例３は、実施例１，２及び比較例１に比べ、試料によっては検出感度が劣る。
（４）比較例４は、実施例１，２及び比較例１に比べ、試料によっては検出感度が劣る。
【００６９】
なお、インフルエンザ検査においては、咽頭を綿棒でぬぐって体液を採取し、溶解液が入れられた容器に、この綿棒を浸し、溶解液中で容器の外から綿棒を絞り、綿棒にしみこんでいた体液を溶解液中へ抽出し、その後、溶解液を用いて検査を行っている。
【００７０】
本発明の試料摩砕容器は、このような容器にも応用でき、そうすれば、凹凸部の作用により、綿棒からの被検査物質の抽出効率を改善できることが期待される。
【００７１】
本発明者らは、インフルエンザ感染の検査に関し、（１）モデル実験及び（２）検体による実験を行い、結果が得られたので報告する。実験の手順は、次の通りである。先端に綿球を備える同一の綿棒を使用し、その綿球の先端部にモデル粘液又は鼻腔吸引液（検体が含まれる可能性があるもの）を付着させる。同一組成及び同量の抽出溶液を、図１の容器５から凹凸部９を除いた第１容器（以下、「比較例５」という。）又は図２の容器２０である第２容器（以下、「本発明例」という。）に溜める。
【００７２】
比較例５の抽出処置は、次の通りである。即ち、モデル粘液又は鼻腔吸引液を付着させた綿球を第１容器の底まで差し込み、第１容器の外側から指で圧力を加え、５回綿球をもむ。
【００７３】
本発明例の抽出処置は、次の通りである。即ち、モデル粘液又は鼻腔吸引液を付着させた綿球を第２容器の底まで差し込み、第２容器の外側から指で綿球をつまみ、綿棒を左右に５回回転させる。
【００７４】
（１）モデル実験
インフルエンザ感染の検査では、鼻腔又は咽頭等内の粘液が使用されるが、このような粘液はかなりの粘性を有する。したがって、モデル実験では、粘性が高いものモデルとして、青色の水性絵の具を使用した。即ち、綿球に青色絵の具を取り、重量を測定し、１mlの抽出溶液により上記抽出処置を行う。その後、６１０nmの吸光度を測る。１mlの抽出溶液に青色絵の具をそのまま添加し完全に溶解させたときの吸光度を理論吸光度（１００％）とし、測定された吸光度を理論吸光度で除した値を、抽出率（％）とする。
【００７５】
比較例５及び本発明例のそれぞれについて、２０回ずつ抽出処理を行い、抽出率を求めたところ、次の結果を得た。
【００７６】
回 数 比較例５の抽出率（％） 本発明例の抽出率（％）
１ １１．６ ６５．５
２ ７．７ ８１．７
３ １５．６ ８２．０
４ ９．９ ７５．３
５ ９．０ ８１．４
６ １１．５ ７９．９
７ ６．６ ７３．０
８ ６．２ ７４．６
９ ７．９ ９２．２
１０ ６．９ ７７．３
１１ １３．１ ７２．３
１２ ８．７ ７７．０
１３ ５．６ ６８．１
１４ ８．３ ８７．１
１５ ６．９ ５９．６
１６ ５．９ ７３．２
１７ ４．５ ８３．３
１８ ４．４ ８８．３
１９ ４．７ ９２．６
２０ ９．２ ８７．１
最小値 ４．４ ５９．６
最大値 １５．６ ９２．６
平均値 ８．２ ７８．６
本発明例では、抽出率が５９．６〜９２．６％、平均値７８．６％であり、比較例５では、抽出率が４．４〜１５．６％、平均値８．２％である。即ち、比較例５に比べると、本発明例では、極めて高い抽出率が得られる。言うまでもなく、高い抽出率が得られるほど、検出精度が向上する。
【００７７】
また、比較例５では指で綿球をもむため、強い指の力が必要であるが、本発明例では、強い力は不要であって抽出処理が容易であるという利点がある。より詳しくは、比較例５では、容器の底部が綿球より半径が大きい円筒状であり、容器の底面に邪魔されて容器の側部が変形しにくいため、綿球を押しづらく、綿球をもみほぐそうとしても試料が十分溶出しないと考えられる。一方、本発明例では、容器の底部が先細りになっており、しかも凹凸部２６が形成されているので、綿棒を回転させるだけで、試料が容易に十分な量だけ溶出し、抽出率が著しく向上したものと考えられる。
【００７８】
（２）検体による実験
本発明者らは、上記モデル実験に加え、上記比較例５及び本発明例のそれぞれについて、検体そのものを用いた実験を行った。ここでは、インフルエンザの陽性患者から、３本の同じ綿棒のそれぞれを用いて鼻腔吸引液を良くホモジナイズして採取した。
【００７９】
また、４つの検体（検体１から検体３は、インフルエンザＡ型陽性の検体であり、検体４はインフルエンザＢ型陽性の検体である。）を使用した。抽出溶液等は、モデル実験と同じであるが、抽出後の溶液を２倍系列希釈して試料とし、イムノクロマト法によるインフルエンザ検出キット（株式会社ミズホメディー製、商標：クイックチェイサーＦｌｕ、品番：６７５００）により測定を行った。
【００８０】
結果は次の通りであるが、「＋」は陽性、「＋Ｗ」は擬陽性、「−」は陰性を示す。
【００８１】
希 釈 倍
検体 例 原液 ２ ４ ８ 16 32 64 128 256 512 1024
１ 比較例５ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − −
１ 本発明例 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ −
２ 比較例５ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − − − − −
２ 本発明例 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − − −
３ 比較例５ ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − − − −
３ 本発明例 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − −
４ 比較例５ ＋ − − − − − − − − − −
４ 本発明例 ＋ ＋ ＋ ＋Ｗ − − − − − − −
以上により、いずれの条件でも、本発明例では、比較例５に比べ、高い抽出率が得られるから（モデル実験参照）、インフルエンザ検出感度が大幅に向上することが明らかである。なお、検体１から検体４のうちでも、検体１は非常に粘性が高く、検体３はそれについで粘性がかなり高いが、検体の粘性が高いほど、本発明例の容器は、高い効果を奏すると言える。
【図面の簡単な説明】
【００８２】
【図１】本発明の実施の形態１における試料摩砕容器の断面図
【図２】本発明の実施の形態２における試料摩砕容器の断面図
【図３】本発明の実施の形態２における摩砕棒の正面図
【図４】本発明の実施の形態２における第２凹凸部の拡大図
【図５】（ａ）本発明の実施の形態２における第２凹凸部の横断面図 （ｂ）本発明の実施の形態２における第２凹凸部の縦断面図
【図６】本発明の実施の形態２における試料摩砕容器の使用状態説明図
【図７】本発明の実施の形態２における試料摩砕容器の使用状態説明図
【符号の説明】
【００８３】
１、４０ 摩砕棒
２、４１ 棒体
３、４３ 頭部
４ 凹凸部
５、２０ 試料摩砕容器
６、２１ 開口部
７、２２ 筒体
８、２３ 底部
９ 凹凸部
１０ 試料
２５、４４ 第１凹凸部
２６、４５ 第２凹凸部
２７ フランジ
２８ リブ
２９ 雄ねじ部
３０ キャップ
３１ 雌ねじ部
３２ ノッチ
３３ 切り込み溝
３４ ノズル
３５、６２ 滴下口
３６ フィルタ
３７ 溶解液
３８ ノズル蓋
４２ 把持部
５０、５１ 指
６０ 保持具
６１ 試験片
６２ 試料滴下口
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホモジナイズ用の試料摩砕容器であって、
一端に開口部を有し、かつ他端に底部を有する筒体を備えてなり、
前記筒体の内側に凹凸部を設けたことを特徴とする試料摩砕容器。
【請求項２】
前記凹凸部は、摩砕棒に形成される凹凸部へ臨み得るように、凹凸部を設けてられていることを特徴とする請求項１記載の試料摩砕容器。
【請求項３】
前記筒体は、可撓性材料より形成され、前記筒体の外部から外力が加えられると、前記筒体が変形し前記筒体内の試料を潰しうるようになっている請求項１記載の試料摩砕容器。
【請求項４】
前記凹凸部は、複数の突起から形成される請求項１から３のいずれかに記載の試料摩砕容器。
【請求項５】
前記凹凸部は、階段状をなし粗面を構成する請求項１から３のいずれかに記載の試料摩砕容器。
【請求項６】
前記凹凸部は、前記底部の内側に形成される請求項１から５のいずれかに記載の試料摩砕容器。
【請求項７】
前記筒体の前記底部付近には、円錐状をなす先細部が設けられる請求項１から６のいずれかに記載の試料摩砕容器。
【請求項８】
前記凹凸部は、前記先細部の内側に形成される請求項７記載の試料摩砕容器。
【請求項９】
前記筒体は、透明又は半透明の材料からなる請求項１から８のいずれかに記載の試料摩砕容器。
【請求項１０】
請求項１から９のいずれかに記載の試料摩砕容器と、前記試料摩砕容器に挿入され、前記試料摩砕容器内の試料を摩砕する摩砕棒とを備える試料摩砕用具であって、
前記摩砕棒は、棒体と、前記棒体の先端部に設けられる頭部とを備え、
前記頭部には、前記試料摩砕容器の凹凸部へ臨む凹凸部が設けられている試料摩砕用具。
【請求項１１】
請求項１０記載の試料摩砕容器に試料を入れ、前記摩砕棒と前記試料摩砕容器とにより、試料を摩砕する試料摩砕方法。
【請求項１２】
請求項１記載の試料摩砕容器に試料を入れ、前記筒体を手もみすることにより、試料を摩砕する試料摩砕方法。
【請求項１】
ホモジナイズ用の試料摩砕容器であって、
一端に開口部を有し、かつ他端に底部を有する筒体を備えてなり、
前記筒体の内側に凹凸部を設けたことを特徴とする試料摩砕容器。
【請求項２】
前記凹凸部は、摩砕棒に形成される凹凸部へ臨み得るように、凹凸部を設けてられていることを特徴とする請求項１記載の試料摩砕容器。
【請求項３】
前記筒体は、可撓性材料より形成され、前記筒体の外部から外力が加えられると、前記筒体が変形し前記筒体内の試料を潰しうるようになっている請求項１記載の試料摩砕容器。
【請求項４】
前記凹凸部は、複数の突起から形成される請求項１から３のいずれかに記載の試料摩砕容器。
【請求項５】
前記凹凸部は、階段状をなし粗面を構成する請求項１から３のいずれかに記載の試料摩砕容器。
【請求項６】
前記凹凸部は、前記底部の内側に形成される請求項１から５のいずれかに記載の試料摩砕容器。
【請求項７】
前記筒体の前記底部付近には、円錐状をなす先細部が設けられる請求項１から６のいずれかに記載の試料摩砕容器。
【請求項８】
前記凹凸部は、前記先細部の内側に形成される請求項７記載の試料摩砕容器。
【請求項９】
前記筒体は、透明又は半透明の材料からなる請求項１から８のいずれかに記載の試料摩砕容器。
【請求項１０】
請求項１から９のいずれかに記載の試料摩砕容器と、前記試料摩砕容器に挿入され、前記試料摩砕容器内の試料を摩砕する摩砕棒とを備える試料摩砕用具であって、
前記摩砕棒は、棒体と、前記棒体の先端部に設けられる頭部とを備え、
前記頭部には、前記試料摩砕容器の凹凸部へ臨む凹凸部が設けられている試料摩砕用具。
【請求項１１】
請求項１０記載の試料摩砕容器に試料を入れ、前記摩砕棒と前記試料摩砕容器とにより、試料を摩砕する試料摩砕方法。
【請求項１２】
請求項１記載の試料摩砕容器に試料を入れ、前記筒体を手もみすることにより、試料を摩砕する試料摩砕方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公開番号】特開２００７−２１８９０３（Ｐ２００７−２１８９０３Ａ）
【公開日】平成１９年８月３０日（２００７．８．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−６７６３（Ｐ２００７−６７６３）
【出願日】平成１９年１月１６日（２００７．１．１６）
【出願人】（５９８０３４７２０）株式会社ミズホメディー (17)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年８月３０日（２００７．８．３０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年１月１６日（２００７．１．１６）
【出願人】（５９８０３４７２０）株式会社ミズホメディー (17)
【Ｆターム（参考）】
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