【課題】治療、ワクチン及び診断応用のためのＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）用の機能性ＤＮＡクローンの提供。
【解決手段】本物のＨＣＶゲノムＲＮＡ配列の決定、感染性ＨＣＶ・ＤＮＡクローンの構築、及び治療、ワクチン及び診断応用のためのクローン若しくはその誘導体。ＡＴＣＣ登録番号９７８７９として寄託され、特定の塩基配列からなる全長ＨＣＶｃＤＮＡの転写物を内部に有するプラスミドクローン。ＨＣＶベクター、遺伝子治療の遺伝子ワクチン。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＡＴＣＣ登録番号９７８７９として寄託され、配列番号５で表される配列からなる全長ＨＣＶｃＤＮＡの転写物を内部に有するプラスミドクローン、
又は以下のａ）〜ｅ）からなる群から選ばれる複製能を有する前記プラスミドクローンの誘導体、
ａ） 他のＨＣＶ分離体又は遺伝子型からの相同領域の置換により生じる複製能を有する誘導体、
ｂ） 変異誘発により生じる複製能を有する誘導体、
ｃ） 適応され、弱毒化され、複製能を有し非感染性である変異体からなる群から選ばれる誘導体、
ｄ） 発現調節配列と操作上関連する異種遺伝子を含む複製能を有する誘導体、および
ｅ） 前述の誘導体のいずれかの機能性フラグメントからなる複製能を有する誘導体。
【請求項２】
誘導体がＨＣＶ遺伝子型１ｂ、１ｃ、２ａ、２ｂ、２ｃ又は３ａ由来の相同領域の置換によって生産される、請求項１に記載の複製能を有する誘導体。
【請求項３】
誘導体がＨＣＶ遺伝子型１ｂ又は２ａ由来のポリタンパク質コーディング領域又はコンセンサスポリタンパク質コーディング領域の置換によって生産される、請求項１に記載の複製能を有する誘導体。
【請求項４】
誘導体が短いポリピリミジン領域を含む３’ＮＴＲを有するものである、請求項１に記載の複製能を有する誘導体。
【請求項５】
誘導体がＮＣＣＡＧＣＣからなる５’末端配列を有し、Ｎは１〜３の任意のヌクレオチドであって、ＧＣＣＡＧＣＣは配列番号３の５’末端を表す請求項１に記載の複製能を有する誘導体。
【請求項６】
異種遺伝子が哺乳類の細胞用の選択可能なマーカーである、請求項１に記載の複製能を有する誘導体。
【請求項７】
哺乳類の細胞用の選択可能なマーカーが、ジヒドロ葉酸レダクターゼ、チミジンキナーゼ、ピューロマイシンアセチルトランスフェラーゼ、ネオマイシン耐性、ミコフェノール酸耐性、ハイグロマイシン耐性又はゼオシン耐性をコードする遺伝子である請求項６に記載の複製能を有する誘導体。
【請求項８】
異種遺伝子が検定可能な遺伝子である、請求項１に記載の複製能を有する誘導体。
【請求項９】
検定可能な遺伝子がβガラクトシダーゼ、βグルクロニダーゼ、ホタルルシフェラーゼ、バクテリアルシフェラーゼ、グリーン蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、ヒト化グリーン蛍光タンパク質、細胞表面マーカー又は分泌マーカーである、請求項１に記載の複製能を有する誘導体。
【請求項１０】
変異誘発によってサイレント変異又は保存変異が誘発された、請求項１に記載の複製能を有する誘導体。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９−ＡＡ】

【図９−ＡＢ】

【図９−ＡＣ】

【図９−ＡＤ】

【図９−ＡＥ】

【図９−ＡＦ】

【図９−ＡＧ】

【図９−ＡＨ】

【図９−ＡＩ】

【図９−ＡＪ】

【図９−ＡＫ】

【図９−ＡＬ】

【図９−ＡＭ】

【図９−ＡＮ】

【図９−ＡＯ】

【図９−ＡＰ】

【図９−ＡＱ】

【図９−ＡＲ】

【図９−ＡＳ】

【図９−ＡＴ】

【図９−ＡＵ】

【図９−ＡＶ】

【図９−ＡＷ】

【図９−ＡＸ】

【図９−ＡＹ】

【図９−ＡＺ】

【図９−ＢＡ】

【図９−ＢＢ】

【図９−ＢＣ】

【図９−ＢＤ】

【図９−ＢＥ】

【図９−ＢＦ】

【図９−ＢＧ】

【図１０】

【図１１】

【公開番号】特開２００８−１６７７５５（Ｐ２００８−１６７７５５Ａ）
【公開日】平成２０年７月２４日（２００８．７．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−３３９４８８（Ｐ２００７−３３９４８８）
【出願日】平成１９年１２月２８日（２００７．１２．２８）
【分割の表示】特願平１０−５３８８５４の分割
【原出願日】平成１０年２月２６日（１９９８．２．２６）
【出願人】（５００２０４２７８）ワシントン　ユニヴァーシティー (14)
【Ｆターム（参考）】