Ｇタンパク質の機能を阻害するために有用な三環式アミドの代謝産物および増殖性疾患の処置方法
本発明は、構造式（Ｉ）
により示される三環式アミド化合物および構造的に関連する化合物、ならびに式（Ｉ）の化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルの、代謝産物に関する。式（Ｉ）において、Ｒ１は、Ｈおよび＝Ｏからなる群より選択され；Ｒ２〜Ｒ５は、同じであっても異なっていてもよく、その各々は、独立して、Ｈ、−ＯＨ、ハライド、−ＮＨ２、および＝Ｏからなる群より選択され；組み合わせ実線−破線は、独立して、単結合または二重結合のいずれかを示し、二重結合である組み合わせ実線−破線の数は、２以下であり、その数が２である場合、その二重結合は、隣接しておらず、その数が０である場合、Ｒ１〜Ｒ５のうちの１つは、Ｈではない。
により示される三環式アミド化合物および構造的に関連する化合物、ならびに式（Ｉ）の化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルの、代謝産物に関する。式（Ｉ）において、Ｒ１は、Ｈおよび＝Ｏからなる群より選択され；Ｒ２〜Ｒ５は、同じであっても異なっていてもよく、その各々は、独立して、Ｈ、−ＯＨ、ハライド、−ＮＨ２、および＝Ｏからなる群より選択され；組み合わせ実線−破線は、独立して、単結合または二重結合のいずれかを示し、二重結合である組み合わせ実線−破線の数は、２以下であり、その数が２である場合、その二重結合は、隣接しておらず、その数が０である場合、Ｒ１〜Ｒ５のうちの１つは、Ｈではない。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（背景）
（発明の分野）
本発明のいくつかの実施形態は、Ｇタンパク質の機能を阻害するために有用な三環式アミドの代謝産物、関連化合物、および増殖性疾患の処置方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ラット肉腫（「Ｒａｓ」）オンコジーンの生物学的重要性、ならびに正常細胞から癌細胞への変換におけるＲａｓと、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ（「ＦＰＴ」）として公知である酵素との両方の役割が、ＰＣＴ国際公開番号ＷＯ９５／００４９７およびＷＯ９５／１０５１６に記載される。これらの公開の各々はまた、酵素ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの活性を阻害し、それによりＲａｓタンパク質のファルネシル化を阻害する、明確な種類の化合物を記載する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
米国特許第５，８４７，４４２号（これは、本明細書中にその全体が参考として援用される）において、ファルネシルトランスフェラーゼの阻害において有用な多数の三環式アミド化合物が、開示される。これらの化合物には、本明細書中で「化合物Ａ」と呼ばれる、以下のもの：
【０００４】
【化６】
がある。
【０００５】
化合物Ａは、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害において特に有用である。有効量のこの化合物の投与は、米国特許第５，８７４，４４２号に記載されるような、細胞（形質転換細胞を含む）の異常な増殖を阻害するため、および癌処置のための、方法を提供する。
【０００６】
（発明の要旨）
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式（Ｉ）：
【０００７】
【化７】
により示される化合物、および式（Ｉ）の化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルに関し、
上記式（Ｉ）において、
Ｒ１は、Ｈおよび＝Ｏからなる群より選択され；
Ｒ２〜Ｒ５は、同じであっても異なっていてもよく、その各々は、独立して、Ｈ、−ＯＨ、ハライド、−ＮＨ２、および＝Ｏからなる群より選択され；そして
組み合わせ実線−破線は、独立して、単結合または二重結合のいずれかを示し、二重結合である組み合わせ実線−破線の数は、２以下であり、該数が２である場合、該二重結合は、隣接しておらず、該数が０である場合、Ｒ１〜Ｒ５のうちの１つは、Ｈではない。
【０００８】
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式（Ｉ）により示される化合物に関し、上記式（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ５は、各々Ｈであり、Ｒ４は、Ｈおよび−Ｈからなる群より選択され、二重結合である組み合わせ実線−破線の数は、１以下である。
【０００９】
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式：
【００１０】
【化８】
により示される化合物、およびその薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルに関する。さらなる実施形態において、本発明は、上記化合物の純粋でありかつ単離された形態に関する。
【００１１】
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式：
【００１２】
【化９】
により示される化合物、およびその薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルに関する。さらなる実施形態において、本発明は、上記の化合物の純粋かつ単離された形態に関する。
【００１３】
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式：
【００１４】
【化１０】
により示される化合物、およびその薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルに関する。さらなる実施形態において、本発明は、上記の化合物の純粋かつ単離された形態に関する。
【００１５】
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式：
【００１６】
【化１１】
により示される化合物、およびその薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルに関する。さらなる実施形態において、本発明は、上記の化合物の純粋かつ単離された形態に関する。
【００１７】
いくつかの実施形態において、本発明は、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する必要がある患者において、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する方法に関し、この方法は、治療上有効な量の少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を投与する工程を包含する。
【００１８】
いくつかの実施形態において、本発明は、膵臓癌、非小細胞肺癌、骨髄性白血病、甲状腺小胞癌、骨髄異形成症候群、表皮癌、膀胱癌、結腸癌、乳癌、または前立腺癌を、そのような癌を処置する必要がある患者において処置する方法に関する。その方法は、治療上有効な量の式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物を投与する工程、を包含する。
【００１９】
いくつかの実施形態において、本発明は、薬学的組成物に関し、その組成物は、治療上有効な量の式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物を、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて含む。
【００２０】
いくつかの実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物の、純粋でありかつ単離された形態に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
（発明の詳細な説明）
特定の実施形態において、本発明は、化合物Ａの代謝産物に関し、この化合物Ａは：（ｉ）インビトロで、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを潜在的に阻害し得るが、ゲラニルゲラニルタンパク質トランスフェラーゼＩを潜在的に阻害し得ず；（ｉｉ）ファルネシルアクセプターである形質転換Ｒａｓの形態によって誘導される表現型変化をブロックし得るが、ゲラニルゲラニルアクセプターになるように操作された形質転換Ｒａｓの形態によって誘導される表現型変化をブロックし得ず；（ｉｉｉ）ファルシルアクセプターであるＲａｓの細胞内プロセシングをブロックし得るが、ゲラニルゲラニルアクセプターになるように操作されたＲａｓの細胞内プロセシングをブロックし得ず；そして／または（ｉｖ）形質転換Ｒａｓによって誘導される培養物における異常細胞増殖をブロックし得る。以下の４つの化合物（化合物８〜１１と名付ける）は、化合物Ａの代謝産物である：
【００２２】
【化１２】
化合物Ａは、動物モデルにおける抗腫瘍活性を有すると実証されており、従って、その代謝産物は、対応する有用性を有する。
【００２３】
本発明はさらに、化合物Ａの代謝産物に構造的に類似である化合物に関し、対応する有用性を有すると考えられる。このような構造的に関連する化合物は、構造式（Ｉ）：
【００２４】
【化１３】
により表され、
ここで：
Ｒ１は、Ｈおよび＝Ｏからなる群より選択され；
Ｒ２〜Ｒ５は、同じでも異なっていてもよく、各々は独立して、Ｈ、−ＯＨ、ハライド、−ＮＨ２および＝Ｏからなる群より選択され；そして
組み合わせ実線−点線は、独立して、単結合または二重結合のいずれかを表し、ここで、二重結合である組み合わせ実線−点線の数は、２より大きくなく、２である場合、その二重結合は隣接していなく、そして０である場合、Ｒ１〜Ｒ５のうちの１つはＨでない。
【００２５】
本発明は、非晶状態または結晶状態で存在する上記化合物を包含する。
【００２６】
本発明は、細胞（形質転換細胞を含む）の異常な増殖を阻害するための方法を提供し、この方法は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物のうちの少なくとも１種を、そのような処置を必要としている哺乳動物（例えば、ヒト）に投与することによる。異常な細胞増殖とは、正常な制御機構（例えば、接触阻害をなくすこと）に依存しない細胞増殖をいう。これは、（１）活性化Ｒａｓ発癌遺伝子を発現する腫瘍細胞（腫瘍）；（２）Ｒａｓタンパク質が他の遺伝子における発癌性変異の結果として活性化される、腫瘍細胞；および（３）異常なＲａｓ活性化が起こる他の増殖性疾患の良性細胞および悪性細胞、の異常増殖を包含する。
【００２７】
本発明はまた、腫瘍増殖を阻害するための方法を提供し、この方法は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物のうちの少なくとも１種を、そのような処置を必要としている哺乳動物（例えば、ヒト）に投与することによる。特に、本発明は、活性化Ｒａｓ発癌遺伝子を発現する腫瘍の増殖を阻害するための方法を提供し、この方法は、有効量の上記代謝産物のうちの１種を投与することによる。阻害され得る腫瘍の例としては、肺癌（例えば、肺腺癌および非小細胞肺癌）、膵癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ）（例えば、膵癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）（例えば、外分泌膵癌））、結腸癌（例えば、結腸直腸癌（例えば、結腸腺癌および結腸腺腫））、骨髄性白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））、甲状腺濾胞状癌、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、膀胱癌、表皮癌、乳癌ならびに前立腺癌が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２８】
本発明はまた、（良性および悪性の両方の）増殖性疾患を阻害するための方法を提供し、ここで、Ｒａｓタンパク質は、他の遺伝子における発癌性変異の結果として以上に活性化され−−すなわち、Ｒａｓ遺伝子自体は、発癌性形態への変異により活性化されない−−、上記阻害は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物のうちの少なくとも１種を、そのような処置を必要としている哺乳動物（例えば、ヒト）に投与することによって達成される。例えば、良性増殖障害神経線維腫症、またはＲａｓがチロシンキナーゼ癌遺伝子（例えば、ｎｅｕ、ｓｒｃ、ａｂｌ、ｌｃｋ、およびｆｙｎ）の変異または過剰発現に起因して活性化される腫瘍は、本発明の代謝産物によって阻害され得る。
【００２９】
本発明の代謝産物は、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害し、そして癌遺伝子タンパク質Ｒａｓのファルネシル化を阻害する。本発明はさらに、そのような処置を必要としている哺乳動物（特に、ヒト）におけるＲａｓファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する方法を提供し、この方法は、有効量の式（Ｉ）の化合物のうちの少なくとも１種を投与することによる。ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害するための、患者への式（Ｉ）の化合物のうちの少なくとも１種の投与は、上記の癌の処置において有用であり得る。
【００３０】
本発明の方法において有用な化合物は、異常な細胞増殖を阻害する。理論により制約されることを望むことなく、これらの化合物は、Ｇタンパク質（例えば、Ｒａｓ ｐ２１）のイソプレニル化をブロックすることによる、Ｇタンパク質機能の阻害により機能し得、従って、これらの化合物を増殖性疾患（例えば、腫瘍増殖および癌）の処置において有用なものにすると考えられる。理論によって制約されることを望むことなく、これらの化合物はＲａｓファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害し、従って、Ｒａｓ形質転換細胞に対して抗増殖活性を示すと考えられる。
【００３１】
また、式（Ｉ）の化合物は、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害を包含する方法による、他の処置方法において有用性を有し得る。ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する化合物の投与により処置可能なさらなる状態および疾患は、米国仮特許出願６０／４９８，５０９号に開示され、この仮特許出願は、完全に示される場合、本明細書中で参考として援用される。
【００３２】
式（Ｉ）の化合物の塩もまた、本発明の範囲内である。本明細書中での式（Ｉ）の化合物への言及は、他で特に示されない限り、その塩への言及を包含することが理解される。本明細書中で使用される場合、用語「塩」は、無機酸および／または有機酸で形成された酸性塩、ならびに無機塩基および／または有機塩基で形成された塩基性塩を表す。さらに、式（Ｉ）の化合物が、塩基性部分（例えば、ピリジンまたはイミダゾールであるが、これらに限定されない）および酸性部分（例えば、カルボン酸であるが、これらに限定されない）の両方を含む場合、双性イオン（「内部塩」）が形成され得、この双性イオンは、本明細書中で使用される場合、用語「塩」内に包含される。薬学的に受容可能な（すなわち、無毒性で生理学的に受容可能な）塩が好まれるが、他の塩もまた有用である。式（Ｉ）の化合物の塩が、例えば、式（Ｉ）の化合物と、一定量（例えば、当量）の酸または塩基とを、その塩が沈殿するような媒体中、または水性媒体中で反応させて、続いて凍結乾燥することによって形成され得る。本発明の範囲内の塩形成酸としては、塩酸塩、硫酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシレート、マレイン酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、酢酸塩、パモ酸塩／エンボン酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、酪酸塩、メチル硫酸塩、およびフマル酸塩が挙げられる。本発明の範囲内の塩形成塩基としては、ナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、メグルミン、アンモニウム、アルミニウム、亜鉛、ピペラジン、トロメタミン、リチウム、コリン、ジエチルアミン、４−フェニルシクロヘキシルアミンおよびベンザチンが挙げられる。
【００３３】
本発明の化合物の異性体の全て（例えば、幾何異性体、光学異性体など）（その化合物の塩、溶媒和物、エステルおよびプロドラッグ、ならびにそのプロドラッグの塩、溶媒和物およびエステルを含む）（例えば、種々の置換基上の不斉炭素に起因して存在し得る異性体（鏡像異性型（これは、たとえ不斉炭素の非存在下でも存在し得る）を含む））、回転異性型、アトロプ異性体、ならびにジアステレオマー型は、本発明の範囲内に企図される。本発明の化合物の個々の異性体は、例えば、他の異性体を実質的に含み得ないか、または例えば、ラセミ混合物として、または他の立体異性体の全て、もしくは他の選択された立体異性体と混合され得る。本発明のキラル中心は、ＩＵＰＡＣ １９７４推奨で定義されたように、Ｓ立体配置またはＲ立体配置を有し得る。用語「塩」、「溶媒和物」、「プロドラッグ」などの使用は、本発明の化合物の鏡像異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ラセミ化合物またはプロドラッグの、塩、溶媒和物およびプロドラッグに同等に当てはまることが意図される。
【００３４】
本明細書中の本文、スキーム、実施例および表における、結合価が不足している任意の炭素原子およびヘテロ原子は、その結合価を満たすのに十分な数の水素原子を有するとみられることもまた、注意されるべきである。
【００３５】
上で、および明細書全体にわたって使用される場合、以下の用語は、他で特に示されない限り、以下の意味を有すると理解されるべきである：
「患者」は、ヒトおよび動物の両方を包含する。
【００３６】
「哺乳動物」は、ヒトおよび他の哺乳動物を意味する。
【００３７】
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を意味する。「ハロ」または「ハライド」は、フルオロ基、クロロ基、ブロモ基、またはヨード基を意味する。
【００３８】
本発明の化合物のプロドラッグおよび溶媒和物もまた、本明細書中で企図される。本明細書中で使用される場合、用語「プロドラッグ」は、被験体への投与の際に、代謝プロセスまたは化学的プロセスにより化学的変換を受けて、式（Ｉ）の化合物またはその塩および／もしくは溶媒和物を生じる、薬物前駆体である化合物を表す。プロドラッグの考察は、Ｔ．ＨｉｇｕｃｈｉおよびＶ．Ｓｔｅｌｌａ，Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ ａｓ Ｎｏｖｅｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓの第１４巻（１９８７）、ならびにＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ，Ｅｄｗａｒｄ Ｂ．Ｒｏｃｈｅ（編），Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ（１９８７）に提供され、これらの両方は、本明細書中で参考として援用される。
【００３９】
「溶媒和物」は、本発明の化合物と１種以上の溶媒分子との物理的会合を意味する。この物理的会合は、イオン結合および共有結合（水素結合を含む）の変動する程度を包含する。特定の場合、上記溶媒和物は、例えば、１種以上の溶媒分子が結晶固形物の結晶格子中に取り込まれる場合、単離され得る。「溶媒和物」は、溶液相および単離可能な溶媒和物の両方を包含する。適切な溶媒和物の非限定的な例としては、エタノール和物、メタノール和物などが挙げられる。「水和物」は、溶媒分子がＨ２Ｏである溶媒和物である。
【００４０】
「有効量」または「治療有効量」は、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害し、従って、所望の治療効果を生じることに有効な、本発明の化合物または組成物の量を説明することを意味する。
【００４１】
化合物についての、用語「単離された」または「単離形態における」とは、合成プロセスから、もしくは天然供給源から、またはそれらの組み合わせから単離された後の上記化合物の物理的状態をいう。化合物についての、用語「精製された」または「精製形態における」とは、精製プロセスもしくは本明細書中で記載されたプロセス、または当業者に公知のプロセスから得られた後の、本明細書中で記載された標準的な分析技術または当業者に周知の標準的な分析技術により特徴付けられ得るために十分な精度で存在する、上記化合物の物理的状態をいう。
【００４２】
化合物中の部分（例えば、置換基、基または環）の数を参照すると、他で特に定義されない限り、成句「２以下」は、０、１または２を意味する。成句「１以下」は、０または１を意味する。
【００４３】
例えば、「Ｒ２〜Ｒ５は、同じであっても異なってもよく、各々は独立して、Ｈ、−ＯＨ、ハライド、−ＮＨ２および＝Ｏからなる群より選択される」という上記の記述は、命名された各置換基（すなわち、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５）の選択は、その基の任意の他の置換基の選択から独立していることを意味する。従って、例えば、同じ分子中で、Ｒ２がＨであるという選択は、Ｒ３の選択から独立しており、このＲ３は−ＯＨであってもよい。
【００４４】
以下の溶媒および試薬は、本明細書中で以下に示した略語で呼ばれる：テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）；エタノール（ＥｔＯＨ）；メタノール（ＭｅＯＨ）；酢酸（ＨＯＡｃまたはＡｃＯＨ）；酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）；トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）；トリフルオロ酢酸無水物（ＴＦＡＡ）；１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）；ｍ−クロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）；トリエチルアミン（Ｅｔ３Ｎ）；ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）；クロロギ酸エチル（ＣｌＣＯ２Ｅｔ）；１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＤＥＣ）；ジイソブチルアルミニウム水和物（ＤＩＢＡＬ）；イソプロパノール（ｉＰｒＯＨ）；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）；トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）；ジチオスレイトール（ＤＴＴ）；トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）；およびエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）。
【００４５】
他で特に示されない限り、本明細書中で述べられる物理的パラメーター（例えば、温度、質量、体積、濃度）の定量測定は、述べられた量からの偏差の適切な範囲を含むことが理解される。
【００４６】
本発明の化合物は、以下に記載した手順により調製され得る。
【実施例】
【００４７】
（実施例１：化合物８および化合物９の調製）
（工程１）
【００４８】
【化１４】
Ｌａｂｏｕｔａら（Ｌａｂｏｕｔａ，Ａ．Ｍ．ら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−Ｃｈｅｍ．Ｔｈｅｒｍ．，第１７巻，第６号，ｐｐ．５３１−５３５，（１９８２））による手順に従って、４−ピペリドン水和物塩酸塩１（２０．０ｇ、１３０ｍｍｏｌ）を、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）中に溶解した。トリエチルアミン（５８ｍＬ、４１７ｍｍｏｌ、３．２当量）を添加し、続いてＴＨＦ（１００ｍＬ）中ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（３９．８ｇ、１８２ｍｍｏｌ、１．４当量）の溶液を０℃で添加した。この溶液を、一晩撹拌した（０℃→室温）。次いで、この反応混合物を、減圧下で濃縮し、そしてその残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（１０：１ヘキサン−酢酸エチル）により精製し、無色の油状物として、２４．０ｇ（９３％）のｔｅｒｔ−ブチル４−ピペリドン−１−カルボキシレート（０７６４８３−１４１−２６；ＣＡＳ ７９０９９−０７−３）（化合物２）を得た。少量のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートが生成物中に残ったが（１Ｈ ＮＭＲにより）、この物質は、以下の工程を行うためには適切な純度であった。
【００４９】
（工程２）
【００５０】
【化１５】
Ｌａｂｏｕｔａらによる手順にまた従って、乾燥１，２−ジメトキシエタン（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルジエチルホスホノアセテート（１５．０ｇ、５９．６ｍｍｏｌ、１．２当量）を、乾燥１，２−ジメトキシエタン（１５０ｍＬ）中ＮａＨ（鉱物油中６０％分散、未洗浄、２．３８ｇ、５９．６ｍｍｏｌ、１．２当量）の懸濁液を、０℃で滴下した。化合物２を０．５時間撹拌した後、乾燥１，２−ジメトキシエタン（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−ピペリドン−１−カルボキシレート（９．９ｇ、４９．７ｍｍｏｌ）を、上記混合物に０℃で滴下し、次いで、一晩撹拌した（０℃→室温）。次いで、この反応をＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ、飽和水溶液）でクエンチし、それらの層を分離した。この水相を、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）で抽出し、この組み合わせた有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。この残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（９５：５ヘキサン−酢酸エチル）により精製し、無色の油状物として、１０．２ｇ（６９％）のｔｅｒｔ−ブチル−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イリデンアセテート（０７６４８３−１４３−３２；ＣＡＳ ８４８３９−５５−４）（化合物３）を得た。
【００５１】
（工程３）
【００５２】
【化１６】
ｔｅｒｔ−ブチル−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イリデンアセテート（化合物３）（１０．２ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）を、乾燥ｔ−ＢｕＯＨ（１５０ｍＬ）中ｔ−ＢｕＯＮａ（１．６ｇ、０．５当量）の溶液に溶解した。平衡化を、１００℃で０．５時間行い、次いで、室温で一晩行った。次いで、ＮＨ４Ｃｌ（飽和水溶液）をｐＨ＝７になるまで添加し、そしてこの溶液を、ヘキサン（２×２０ｍＬ）で抽出し、続いてＣＨ２Ｃｌ２（４×２０ｍＬ）で抽出した。この組み合わせた有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。この残渣（化合物４（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イリデン酢酸（０７６４８３−１４９−３０））と化合物５（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，５，６−テトラヒドロピリジン酢酸（０７６４８３−１４９−３０））との混合物）を、さらなる精製をせずに次の工程に移した。
【００５３】
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に溶解し、１，４−ジオキサン（４．０Ｍ、１７ｍＬ、６８ｍｍｏｌ、２．０当量）中ＨＣｌの溶液を、０℃で滴下した。この反応を、１時間撹拌させ（０℃→室温）、次いで、このサンプルを減圧下で濃縮し、さらなる精製をせずに次の工程に移した。
【００５４】
次いで、その残渣を、３：１ ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ（１５０ｍＬ）に溶解し、この溶液を、ＮａＯＨ（１．０ Ｎ水溶液）でｐＨ＝１０に調整した。次いで、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１１．２ｇ、５１．４ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、そしてこの反応を一晩室温で撹拌した。サンプルを減圧下で濃縮した後、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を添加し、続いてクエン酸（５％水溶液）をｐＨ＝３になるまで添加した。この生成物を、Ｅｔ２Ｏ（３×５０ｍＬ）で抽出し、そしてこの組み合わせた有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮して、α，β−不飽和酸とβ，γ−不飽和酸との１：１混合物として、２．６ｇ（３つの工程を経て３２％）の生成物を得た。
【００５５】
（工程４）
【００５６】
【化１７】
（＋）−４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］−ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−ピペリジン（３．８ｇ、８．１ｍｍｏｌ）、化合物４、１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イリデン酢酸と化合物５、１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，５，６−テトラヒドロピリジン酢酸（２．６１ｇ、１０．８ｍｍｏｌ、１．３当量）との１：１混合物、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＡＣ、２．６９ｇ、１４．１ｍｍｏｌ、１．７当量）および３−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン（ＨＯＯＢＴ、２．２９ｇ、１．７当量）をＤＭＦ（１００ｍＬ）中に溶解した。Ｎ−メチルモルホリン（９．５ｍＬ、８．８ｇ、８７ｍｍｏｌ、１０．７当量）を添加し、その混合物を室温で５０時間攪拌した。ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ、飽和水溶液）を添加し、その後酢酸エチル（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加した。その水相を酢酸エチル（６×３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（７５：２５ ヘキサン−酢酸エチル→２５：７５ ヘキサン−酢酸エチル）により精製し、灰白色の泡沫状の固形物として、３．６６ｇ（６５％）の結合生成物を得た。この物質を、α，β不飽和アミドおよびβ，γ−不飽和アミドである、化合物６、ｔｅｒｔ−ブチル（＋）−４−［２−［４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチリデン］−１−ピペリジンカルボキシレートと、化合物７、ｔｅｒｔ−ブチル（＋）−４−［２−［４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチル］−３，４−ジデヒドロ−１−ピペリジンカルボキシレート（０７６４８３−１５１−２９）との９：１混合物、、Ｍｐ＝１１２〜１２５℃として、次の工程に移した。
【００５７】
（工程５）
【００５８】
【化１８】
化合物６、ｔｅｒｔ−ブチル（＋）−４−［２−［４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチリデン］−１−ピペリジンカルボキシレートと化合物７、ｔｅｒｔ−ブチル（＋）−４−［２−［４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチル］−３，４−ジデヒドロ−１−ピペリジンカルボキシレートとの９：１混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌの１，４−ジオキサン（４．０Ｍ、４．６ｍＬ、１８．４ｍｍｏｌ、４．０当量）溶液を、０℃で滴下した。この混合物を１時間（０℃→室温）攪拌し、次いで、減圧下で濃縮し、さらなる精製なしに次の工程に移した。
【００５９】
次いで、この物質をＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｎ（２．６ｍＬ、１８．４ｍｍｏｌ、４．０当量）を添加した。トリメチルシリルイソシアネート（２．１ｇ、１８．４ｍｍｏｌ、４．０当量）をその溶液に室温で滴下し、その反応混合物を１時間攪拌した。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮し、白色の固形物を得た。その残渣を調製ＴＬＣ（８５：１５ ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ）により精製し、灰白色の泡沫状の固形物として、９００ｍｇ（３１％）のβ，γ−不飽和アミド、（＋）−４−［２−４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチリデン］−１−ピペリジンカルボキサミド、化合物９（０７８０１７−０１３−２２、主要な異性体）、および黄色の固形物として、１２２ｍｇ（４．２％）のα，β−不飽和アミド、（＋）−４−［２−［４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチル］−３，４−ジデヒドロ−１−ピペリジン−カルボキサミド、化合物８（０７８０１７−０１５−３３、微量の異性体）を得た。ｍｐ（化合物９、主要な異性体）＝１５７〜１６２℃；ｍｐ（化合物８、微量の異性体）＝１６７〜１７１℃。ＨＲＭＳ（化合物９、主要異性体と化合物８、微量の異性体との７．４：１混合物）ｍ／ｚ＝６３７．０４０４。
【００６０】
（化合物１０および１１を調製するために使用したインキュベーション）
化合物１０および化合物１１の構造を有する化合物Ａの代謝産物を、以下の実施例２〜６に記載される手順に従って調製した。
【００６１】
【化１９】
（実施例２）
化合物Ａの、マウス、ラット、サルおよびヒト由来の肝細胞とのインビトロインキュベーションを、２ｍＬのＷａｙｍｏｕｔｈ培地、２．５４μｇ（２μＭ）または６３．８μｇ（５０μＭ）のいずれかの化合物Ａ（約２０μＣｉ／ｍｇ）および酸素：二酸化炭素 ９５：５（ｖ／ｖ）の覆い（ｂｌａｎｋｅｔ）の下での２×１０６細胞を含む、２５ｍＬのＥｒｌｅｎｍｅｙｅｒフラスコ中で行なった。フラスコを、ゴム栓で蓋をし、気体の組成を維持し、３７℃の水浴中に配置した。インキュベーションを、穏やかに振盪しながら５時間継続させた。急速に凍結（−８０℃）することにより、反応を終結させた。熱不活性化肝細胞を、コントロールとして、化合物Ａと並行してインキュベートした。
【００６２】
（実施例３）
化合物Ａ代謝産物のスケールアップした生成を、非誘発動物由来のラット肝臓ミクロソームを使用して行った。ミクロソームを、０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）１ｍＬあたり１ｎｍｏｌのＰ４５０を含有する溶液中でインキュベートした。このインキュベーション混合物はまた、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、５ｍＭ グルコース６リン酸、１．５ユニット／ｍＬのグルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ、０．５ｍＭのβ−ＮＡＤＰ（β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート）および２５μＭの化合物Ａ（約２０μＣｉ／ｍｇ）を含有した。４個のフラスコでインキュベーションを行い、そのそれぞれは、４９．４ｍＬの上記混合物を含有し、ＮＡＤＰなしで３７℃で２分間プレインキュベートした。その反応を、ＮＡＤＰの添加により開始し、２時間インキュベートし、氷冷水中でその混合物を冷却することにより終結させた。次いで、１０個の固相カートリッジ（ｔＣ１８、１０ｇ吸収剤）のそれぞれに等しく分配した体積で、直接適用したインキュベーション混合物を合わせて固相抽出（ＳＰＥ）を行なった。これらのカートリッジは、予めメタノールおよび水で洗浄した。薬物由来の物質を、総体積６７０ｍＬのメタノール（カートリッジ１個あたり約７０ｍＬ）で溶出した。次いで、溶離液を、ＴｕｒｂｏＶａｐ ＬＶワークステーション中で、窒素流下で、３７℃でエバポレートし、その抽出残渣を、後のＨＰＬＣ単離のためにメタノール中に再構成させた。
【００６３】
（実施例４）
２５μＭ化合物Ａおよび１ｎｍｏｌ／ｍＬ ＣＹＰ４５０で、ＮＡＤＰＨ生成系（５ｍＭ グルコース６リン酸、１．５ユニット／ｍｌ グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ、０．５ｍＭ β−ＮＡＤＰ）および３ｍＭの塩化マグネシウムの存在下で、３０分間ヒト肝臓ミクロソームとともにインビトロインキュベーションを行なった。煮沸したミクロソームを、同条件下で、コントロールとしてインキュベートした。３０分間のインキュベーション後、そのサンプルを氷上に配置し、ＳＰＥに供した。メタノール溶出物を、３組に分け、サンプルの１組をＨＰＬＣにより分析し、他の２組を、ＬＣ／ＭＳおよびＮＭＲにより分析した。その後、メタノールをアセトニトリルに置換し、化合物１０または１１とメタノールとの間の化学反応を避けた。
【００６４】
ＮＭＲ分析の結果により、化合物１０が、ペンダントピペリジン環中に二重結合を有することを確認した。ラット肝臓ミクロソームとの大規模なインキュベーションの後、化合物１０の構造を、ＮＭＲにより完全に同定した。
【００６５】
（実施例５）
２５μＭの化合物Ａおよび０．２ｎｍｏｌ／ｍＬのＣＹＰ４５０で、３ｍＭの塩化マグネシウムおよびＮＡＤＰＨ生成系の存在下で、３０分間、ヒトＣＹＰ３Ａ４ ＳＵＰＥＲＳＯＭＥＳ（登録商標）と一緒にインビトロインキュベーションを行なった。コントロールの昆虫のミクロソームを、コントロールとして同条件下でインキュベートした。３０分間のインキュベーション後、そのサンプルを氷上に配置し、ＳＰＥに供した。メタノール溶出物を、２組に分け、サンプルの１組をＨＰＬＣにより分析し、もう１組をＬＣ／ＭＳにより分析した。
【００６６】
ＬＣ／ＭＳ分析の結果は、代謝化合物１１（室温、約５１．９分）および代謝化合物１０（室温、約６１．６分）のｍ／ｚは、それぞれ６５３および６３５であることを示した。
【００６７】
（実施例６）
組換えヒトＣＹＰ３Ａ４酵素（ＧｅｎｔｅｓｔおよびＳＰＲＩ由来）を、一定量のシトクロムＰ４５０（「ＣＹＰ」）（０．２ｎｍｏｌ／ｍＬ）および２５μＭの化合物Ａを用いて別々にインキュベートした。インキュベーションは、３ｍＭの塩化マグネシウムおよびＮＡＤＰＨ生成系の存在下で、６０ｍＬのリン酸カリウム緩衝液（０．０５Ｍ、ｐＨ７．４）中で、空気中で、３７℃で３０分間行なった。薬物を添加することにより反応を開始し、氷と水との混合物中で、インキュベートしたサンプルを冷却することにより反応を終結させ、ただちに、ＳＰＥ（アセトニトリルにより溶出）に供した。各サンプルを別々にエバポレートして乾燥させ、質量分析（ＬＣ／ＭＳおよびＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）ならびにＮＭＲにより分析した。
【００６８】
適切な出発物質、ならびに上記の手順および当該分野で公知の他の手順を使用して、式（Ｉ）の他の化合物が生成され得る。
【００６９】
（化合物の単離）
以下の単離および精製を行い、それらの工程は、本発明の化合物に適用され得る単離プロセスおよび精製プロセスの例示的な型である。以下の単離は、本発明の化合物を単離するために使用され得る単離の非限定的な例である。当業者に公知の他の単離プロセスは、本発明の化合物を単離することに等しく適用可能である。
【００７０】
（化合物１０の単離）
ラットの肝臓ミクロソームを用いたスケールアップした生成から得た代謝産物を、ＳＰＥ後に濃縮し、そしてＨＰＬＣにより分離した。ＨＰＬＣ勾配溶出法を、以下の表１に示すように最適化した。この移動相は、酢酸を用いてｐＨ６．０に調整した２０ｍＭの酢酸アンモニウムおよびアセトニトリルからなる。流速を、１．０ｍＬ／分に設定し、そのカラム温度を４０℃に維持した。この溶出を２７８ｎｍでモニタリングした。
【００７１】
【表１】
化合物１０のＨＰＬＣ溶出ピークは、２７８ｎｍでのＵＶ吸光度に従って、３９．２〜４１．２分から手作業で回収した。化合物１０の画分を、ＬＣ−ＭＳにより試験し、分子イオンを（Ｍ−２）として検出した。そのカラム回収物をプールし、分析のためにＮＭＲサンプルにした。
【００７２】
（代謝化合物１０のＮＭＲ分析）
化合物Ａおよび化合物１０のプロトン割り当てを表２に列挙する。４．７３ｐｐｍおよび６．７１ｐｐｍで観察された二つの新規の共鳴を除いて、ほとんどの共鳴割り当ては、親化合物Ａから変化しないままであった。これらのクロスピークは、プロトン−プロトン相関スペクトルで観察された。これらの二つの共鳴は、Ｈ−１９’およびＨ−２０’位のオレフィンプロトンに割り当てられる。Ｈ−１８、Ｈ−１９およびＨ−２０位のプロトンは、Ｃ−１９’とＨ−２０’との間の二重結合の形成に起因して、低磁場にシフトした。
【００７３】
【表２】
【００７４】
【化２０】
（化合物１１の単離）
ＢＤ Ｇｅｎｅｔｅｓｔ（１Ｅ）由来の組換えＣＹＰ３Ａ４酵素とのスケールアップしたインキュベーションから得た代謝化合物１１を、ＳＰＥにより溶出し、ＨＰＬＣにより単離した。移動相は、酢酸を用いてｐＨ６．０に調整した２０ｍＭの酢酸アンモニウムおよびアセトニトリルからなった。Ｌｕｎａフェニル−ヘキシルセミ調製カラム（５μｍ、２５０×１０ｍｍ ｉ．ｄ．、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｉｎｃ．、Ｔｏｒｒａｎｃｅ、ＣＡ）を用いるＨＰＬＣ勾配溶出方法は、表３に示される。流速を４．０ｍＬ／分に設定し、カラム温度を室温に設定する。代謝産物画分を、２７８ｎｍでのそのＵＶ吸光度に従って回収した。その画分を、プールし、２５℃でのＮＭＲデータ収集のために、ＤＭＳＯ−ｄ６中のＮＭＲサンプルにした。
【００７５】
【表３】
（化合物１１のＮＭＲ分析）
化合物Ａおよび化合物１１のプロトンＮＭＲ割り当てを、以下の表に列挙する。５．５４ｐｐｍでの新規のプロトンの共鳴を除いて、化合物１１のほとんどの共鳴割り当ては、化合物Ａの共鳴割り当てから変化しないままであった。Ｈ−１９とＨ−１９’とでのこの共鳴のクロスピークは、プロトン−プロトン相関スペクトルで観察された。その炭素の化学シフトは、７２．７ｐｐｍに見出され、これは、Ｃ−２０’位での第二級アルコールの形成と一致する。従って、化合物１１の構造は、以下に示すように割り当てられ、Ｈ−２０’のプロトンは、化合物Ａのペンダントピペリジン環のヒドロキシによって置換される。
【００７６】
【表４】
【００７７】
【化２１】
（アッセイ）
（（Ｈ−Ｒａｓ）ファルネシルトランスフェラーゼ阻害アッセイにおける活性）
化合物１０および化合物１１の薬理学的活性を試験するために、化合物Ａを、３０リットルの発酵槽中でＥ．ｃｏｌｉのヒトＣＹＰ３Ａ４およびヒトオキシドレダクターゼの高レベルの組換え発現とともにインキュベートした。化合物Ａを、１リットルの規模で、１５〜２０％の全収率で、化合物１１および化合物１０に変換した。この代謝産物を、固相樹脂吸収に従って単離し、そしてＨＰＬＣにより精製した。両代謝産物の同定をＬＳ−ＭＳ／ＭＳにより確認した。合計４．４５ｍｇの化合物１０および２．２ｍｇの化合物１１を、生物学的活性評価のために提供した。
【００７８】
この代謝産物をＬＣ−ＭＳ（薬理学的アッセイに使用される条件下で）によって試験した。化合物１１混合物は、約７５％の純粋な化合物１１および約２５％の純粋な化合物１０を含有することが見出された。この化合物１０混合物は、約５％の純粋な化合物１１および約９５％の純粋な化合物１０を含有することが見出された。
【００７９】
上記化合物は全て、（Ｈ−Ｒａｓ）ファルネシルトランスフェラーゼ阻害アッセイにおいて、以下のＩＣ５０活性を示した：
化合物８ ２．６ｎＭ
化合物９ ２３．３ｎＭ
化合物１１（混合物） ２２．５ｎＭ
化合物１０（混合物） ４．１ｎＭ
化合物Ａ（コントロール） ２．４ｎＭ。
【００８０】
（Ｈ−Ｒａｓ）ＦＰＴのためのアッセイ条件）
ＦＰＴ活性を、［３Ｈ］ファルネシルピロリン酸からＨ−Ｒａｓ（ビオチン−ＣＶＬＳ）のＣ末端に由来するビオチン化ペプチドへの［３Ｈ］ファルネシルの転移を測定することにより決定した。この反応混合物は、５０ｍＭのＴｒｉｓ ｐＨ７．７、５ｍＭのＭｇＣｌ２、５μＭのＺｎ＋＋、５ｍＭのＤＴＴ、０．１％のＴｒｉｔｏｎ−Ｘ、０．０５μＭのペプチド、０．０３ｎＭの精製されたヒトファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ、０．１８０μＭの［３Ｈ］ファルネシルピロホスフェート、それに加えて示した濃度の三環系化合物またはビヒクルコントロールを、合計体積１００μＬ中に含有した。この反応混合物をＶｏｒｔｅｍｐ振盪インキュベーター中で、３７℃、４５ｒｐｍで６０分間インキュベートし、０．５％ ＢＳＡおよび１．３ｍｇ／ｍｌのストレプトアビジン ＳＰＡビーズを含有する１５０μＬの０．２５Ｍ ＥＤＴＡで停止させた。放射活性を、Ｗａｌｌａｃｈ １４５０ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ液体シンチレーションカウンターで測定した。阻害パーセントを、ビヒクルコントロールに対して計算した。
【００８１】
（薬学的調製物）
本発明により記載される化合物から薬学的組成物を調製するために、不活性で、薬学的に受容可能なキャリアは、固体または液体のどちらかであり得る。固体形態の調製物としては、散剤、錠剤、分散可能顆粒、カプセル剤、カシェ剤および坐剤が挙げられる。散剤および錠剤は、約５％〜７０％の活性成分から構成され得る。適した固体キャリアは、当該分野で公知であって、例えば、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖および乳糖が挙げられる。錠剤、散剤、カシェ剤およびカプセル剤は、経口投与に適した固体投薬形態として使用され得る。
【００８２】
坐剤の調製に関しては、低融点ワックス（例えば、脂肪酸グリセリドの混合物またはカカオ脂）が最初に融解し、そして活性成分は、攪拌することによりその中に均一に分散される。次いで、この融解均一混合物を好都合な大きさの型に注ぎ、冷却し、それによって凝固させる。
【００８３】
液体形態の調製物としては、溶液、懸濁液およびエマルジョンが挙げられる。水または水−プロピレングリコール溶液は、非経口注射のために使用され得る。
【００８４】
液体形態の調製物としてはまた、鼻腔内投与のための溶液が挙げられる。
【００８５】
吸入に適したエアロゾル調製物としては、溶液および粉末形態の固体が挙げられ得、それらは、薬学的に受容可能なキャリア（例えば、不活性な圧縮気体）と組み合わされ得る。
【００８６】
使用の直前に、経口投与または非経口投与のいずれかのための液体形態調製物に変換されることが意図される固体形態の調製物もまた含まれる。このような液体形態としては、溶液、懸濁液およびエマルションが挙げられる。
【００８７】
本発明の化合物はまた、経皮的に送達可能である。経皮組成物は、クリーム、ローション、エアロゾルおよび／またはエマルションの形態をとり得、それらは、この目的に関して当該分野では慣習的であるマトリックス型またはレザバ型の経皮パッチに含まれ得る。
【００８８】
好ましくは、この化合物は、経口投与される。
【００８９】
好ましくは、この薬学的調製物は、単位投薬形態である。このような形態において、この調製物は、適切な量の活性成分（例えば、所望の目的を達成するのに十分な量）を含む単位用量に再分される。
【００９０】
単位用量の調製物中の活性化合物の量は、特定の適用に従って、約０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ、より好ましくは、約１ｍｇ〜３００ｍｇまで変動し得るか、またはこれらの範囲に調節され得る。
【００９１】
使用される実際の投薬量は、患者の必要性および処置すべき状態の重篤度に依存して変動され得る。特定の状況に対する適切な投薬量の決定は、当業者の範囲内である。一般に、処置は、その化合物の最適用量より低い、低投薬量で開始する。その後、その投薬量を、その状況下で最適な効果を達成するまで、少量ずつ増加する。便宜上、一日合計投薬量は、分割され得、所望の場合、一日の間に一部分で投与され得る。
【００９２】
本発明の化合物およびその薬学的に受容可能な塩の投与の量および頻度は、患者の年齢、状態および体重ならびに処置されるべき症状の重篤度のような因子を考慮して、主治医の判断に従って調節される。代表的な推奨投薬レジメンは、腫瘍増殖をブロックするために、２回〜４回の分割された用量で、１０ｍｇ／日〜２０００ｍｇ／日、好ましくは、１０ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日の経口投与である。本化合物は、この投薬範囲内で投与される場合、無毒性である。
【００９３】
以下は、本発明の化合物を含有する薬学的投薬形態の例である。この薬学的組成物局面における本発明の範囲は、提供される例によって限定されるべきではない。
【００９４】
（薬学的投薬形態実施例）
【００９５】
【表５】
（製造方法）
適切なミキサー内で、項目１および項目２を、１０〜１５分間混合する。項目３を含むこの混合物を顆粒化する。この湿気を帯びた顆粒を、必要な場合、粗目篩（例えば、１／４”、０．６３ｃｍ）を通して粉末にする。この湿気を帯びた顆粒を乾燥させる。必要な場合、この乾燥した顆粒をふるいにかけ、項目４と混合し、１０〜１５分間混合する。項目５を添加し、１〜３分間混合する。この混合物を圧縮して、適切な打錠機で、適切な大きさかつ重量にする。
【００９６】
【表６】
（製造方法）
適切な混合機内で、項目１、項目２および項目３を、１０〜１５分間混合する。項目４を添加し、１〜３分間混合する。この混合物を、適切なカプセル化機械で、適切な２個の部分からなる硬質ゼラチンカプセル中に充填する。
【００９７】
さらなる処方物、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する化合物と他の化合物（抗癌剤を含む）との組合せ、ならびにこのような処方物および／または組合せを使用する処置の方法は、米国仮特許出願６０／４９８，５０９に開示され、これは、本明細書中で十分に示される程度に援用される。
【００９８】
本発明を、上記の特定の実施形態と組み合わせて記載してきたが、本発明の多くの代替物、改変および変化が、当業者に明らかである。このような代替物、改変および変化は全て、本発明の精神および範囲内であることが意図される。
【技術分野】
【０００１】
（背景）
（発明の分野）
本発明のいくつかの実施形態は、Ｇタンパク質の機能を阻害するために有用な三環式アミドの代謝産物、関連化合物、および増殖性疾患の処置方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ラット肉腫（「Ｒａｓ」）オンコジーンの生物学的重要性、ならびに正常細胞から癌細胞への変換におけるＲａｓと、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ（「ＦＰＴ」）として公知である酵素との両方の役割が、ＰＣＴ国際公開番号ＷＯ９５／００４９７およびＷＯ９５／１０５１６に記載される。これらの公開の各々はまた、酵素ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの活性を阻害し、それによりＲａｓタンパク質のファルネシル化を阻害する、明確な種類の化合物を記載する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
米国特許第５，８４７，４４２号（これは、本明細書中にその全体が参考として援用される）において、ファルネシルトランスフェラーゼの阻害において有用な多数の三環式アミド化合物が、開示される。これらの化合物には、本明細書中で「化合物Ａ」と呼ばれる、以下のもの：
【０００４】
【化６】
がある。
【０００５】
化合物Ａは、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害において特に有用である。有効量のこの化合物の投与は、米国特許第５，８７４，４４２号に記載されるような、細胞（形質転換細胞を含む）の異常な増殖を阻害するため、および癌処置のための、方法を提供する。
【０００６】
（発明の要旨）
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式（Ｉ）：
【０００７】
【化７】
により示される化合物、および式（Ｉ）の化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルに関し、
上記式（Ｉ）において、
Ｒ１は、Ｈおよび＝Ｏからなる群より選択され；
Ｒ２〜Ｒ５は、同じであっても異なっていてもよく、その各々は、独立して、Ｈ、−ＯＨ、ハライド、−ＮＨ２、および＝Ｏからなる群より選択され；そして
組み合わせ実線−破線は、独立して、単結合または二重結合のいずれかを示し、二重結合である組み合わせ実線−破線の数は、２以下であり、該数が２である場合、該二重結合は、隣接しておらず、該数が０である場合、Ｒ１〜Ｒ５のうちの１つは、Ｈではない。
【０００８】
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式（Ｉ）により示される化合物に関し、上記式（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ５は、各々Ｈであり、Ｒ４は、Ｈおよび−Ｈからなる群より選択され、二重結合である組み合わせ実線−破線の数は、１以下である。
【０００９】
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式：
【００１０】
【化８】
により示される化合物、およびその薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルに関する。さらなる実施形態において、本発明は、上記化合物の純粋でありかつ単離された形態に関する。
【００１１】
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式：
【００１２】
【化９】
により示される化合物、およびその薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルに関する。さらなる実施形態において、本発明は、上記の化合物の純粋かつ単離された形態に関する。
【００１３】
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式：
【００１４】
【化１０】
により示される化合物、およびその薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルに関する。さらなる実施形態において、本発明は、上記の化合物の純粋かつ単離された形態に関する。
【００１５】
いくつかの実施形態において、本発明は、構造式：
【００１６】
【化１１】
により示される化合物、およびその薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルに関する。さらなる実施形態において、本発明は、上記の化合物の純粋かつ単離された形態に関する。
【００１７】
いくつかの実施形態において、本発明は、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する必要がある患者において、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する方法に関し、この方法は、治療上有効な量の少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を投与する工程を包含する。
【００１８】
いくつかの実施形態において、本発明は、膵臓癌、非小細胞肺癌、骨髄性白血病、甲状腺小胞癌、骨髄異形成症候群、表皮癌、膀胱癌、結腸癌、乳癌、または前立腺癌を、そのような癌を処置する必要がある患者において処置する方法に関する。その方法は、治療上有効な量の式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物を投与する工程、を包含する。
【００１９】
いくつかの実施形態において、本発明は、薬学的組成物に関し、その組成物は、治療上有効な量の式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物を、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて含む。
【００２０】
いくつかの実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物の、純粋でありかつ単離された形態に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
（発明の詳細な説明）
特定の実施形態において、本発明は、化合物Ａの代謝産物に関し、この化合物Ａは：（ｉ）インビトロで、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを潜在的に阻害し得るが、ゲラニルゲラニルタンパク質トランスフェラーゼＩを潜在的に阻害し得ず；（ｉｉ）ファルネシルアクセプターである形質転換Ｒａｓの形態によって誘導される表現型変化をブロックし得るが、ゲラニルゲラニルアクセプターになるように操作された形質転換Ｒａｓの形態によって誘導される表現型変化をブロックし得ず；（ｉｉｉ）ファルシルアクセプターであるＲａｓの細胞内プロセシングをブロックし得るが、ゲラニルゲラニルアクセプターになるように操作されたＲａｓの細胞内プロセシングをブロックし得ず；そして／または（ｉｖ）形質転換Ｒａｓによって誘導される培養物における異常細胞増殖をブロックし得る。以下の４つの化合物（化合物８〜１１と名付ける）は、化合物Ａの代謝産物である：
【００２２】
【化１２】
化合物Ａは、動物モデルにおける抗腫瘍活性を有すると実証されており、従って、その代謝産物は、対応する有用性を有する。
【００２３】
本発明はさらに、化合物Ａの代謝産物に構造的に類似である化合物に関し、対応する有用性を有すると考えられる。このような構造的に関連する化合物は、構造式（Ｉ）：
【００２４】
【化１３】
により表され、
ここで：
Ｒ１は、Ｈおよび＝Ｏからなる群より選択され；
Ｒ２〜Ｒ５は、同じでも異なっていてもよく、各々は独立して、Ｈ、−ＯＨ、ハライド、−ＮＨ２および＝Ｏからなる群より選択され；そして
組み合わせ実線−点線は、独立して、単結合または二重結合のいずれかを表し、ここで、二重結合である組み合わせ実線−点線の数は、２より大きくなく、２である場合、その二重結合は隣接していなく、そして０である場合、Ｒ１〜Ｒ５のうちの１つはＨでない。
【００２５】
本発明は、非晶状態または結晶状態で存在する上記化合物を包含する。
【００２６】
本発明は、細胞（形質転換細胞を含む）の異常な増殖を阻害するための方法を提供し、この方法は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物のうちの少なくとも１種を、そのような処置を必要としている哺乳動物（例えば、ヒト）に投与することによる。異常な細胞増殖とは、正常な制御機構（例えば、接触阻害をなくすこと）に依存しない細胞増殖をいう。これは、（１）活性化Ｒａｓ発癌遺伝子を発現する腫瘍細胞（腫瘍）；（２）Ｒａｓタンパク質が他の遺伝子における発癌性変異の結果として活性化される、腫瘍細胞；および（３）異常なＲａｓ活性化が起こる他の増殖性疾患の良性細胞および悪性細胞、の異常増殖を包含する。
【００２７】
本発明はまた、腫瘍増殖を阻害するための方法を提供し、この方法は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物のうちの少なくとも１種を、そのような処置を必要としている哺乳動物（例えば、ヒト）に投与することによる。特に、本発明は、活性化Ｒａｓ発癌遺伝子を発現する腫瘍の増殖を阻害するための方法を提供し、この方法は、有効量の上記代謝産物のうちの１種を投与することによる。阻害され得る腫瘍の例としては、肺癌（例えば、肺腺癌および非小細胞肺癌）、膵癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ）（例えば、膵癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）（例えば、外分泌膵癌））、結腸癌（例えば、結腸直腸癌（例えば、結腸腺癌および結腸腺腫））、骨髄性白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））、甲状腺濾胞状癌、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、膀胱癌、表皮癌、乳癌ならびに前立腺癌が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２８】
本発明はまた、（良性および悪性の両方の）増殖性疾患を阻害するための方法を提供し、ここで、Ｒａｓタンパク質は、他の遺伝子における発癌性変異の結果として以上に活性化され−−すなわち、Ｒａｓ遺伝子自体は、発癌性形態への変異により活性化されない−−、上記阻害は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物のうちの少なくとも１種を、そのような処置を必要としている哺乳動物（例えば、ヒト）に投与することによって達成される。例えば、良性増殖障害神経線維腫症、またはＲａｓがチロシンキナーゼ癌遺伝子（例えば、ｎｅｕ、ｓｒｃ、ａｂｌ、ｌｃｋ、およびｆｙｎ）の変異または過剰発現に起因して活性化される腫瘍は、本発明の代謝産物によって阻害され得る。
【００２９】
本発明の代謝産物は、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害し、そして癌遺伝子タンパク質Ｒａｓのファルネシル化を阻害する。本発明はさらに、そのような処置を必要としている哺乳動物（特に、ヒト）におけるＲａｓファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する方法を提供し、この方法は、有効量の式（Ｉ）の化合物のうちの少なくとも１種を投与することによる。ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害するための、患者への式（Ｉ）の化合物のうちの少なくとも１種の投与は、上記の癌の処置において有用であり得る。
【００３０】
本発明の方法において有用な化合物は、異常な細胞増殖を阻害する。理論により制約されることを望むことなく、これらの化合物は、Ｇタンパク質（例えば、Ｒａｓ ｐ２１）のイソプレニル化をブロックすることによる、Ｇタンパク質機能の阻害により機能し得、従って、これらの化合物を増殖性疾患（例えば、腫瘍増殖および癌）の処置において有用なものにすると考えられる。理論によって制約されることを望むことなく、これらの化合物はＲａｓファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害し、従って、Ｒａｓ形質転換細胞に対して抗増殖活性を示すと考えられる。
【００３１】
また、式（Ｉ）の化合物は、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害を包含する方法による、他の処置方法において有用性を有し得る。ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する化合物の投与により処置可能なさらなる状態および疾患は、米国仮特許出願６０／４９８，５０９号に開示され、この仮特許出願は、完全に示される場合、本明細書中で参考として援用される。
【００３２】
式（Ｉ）の化合物の塩もまた、本発明の範囲内である。本明細書中での式（Ｉ）の化合物への言及は、他で特に示されない限り、その塩への言及を包含することが理解される。本明細書中で使用される場合、用語「塩」は、無機酸および／または有機酸で形成された酸性塩、ならびに無機塩基および／または有機塩基で形成された塩基性塩を表す。さらに、式（Ｉ）の化合物が、塩基性部分（例えば、ピリジンまたはイミダゾールであるが、これらに限定されない）および酸性部分（例えば、カルボン酸であるが、これらに限定されない）の両方を含む場合、双性イオン（「内部塩」）が形成され得、この双性イオンは、本明細書中で使用される場合、用語「塩」内に包含される。薬学的に受容可能な（すなわち、無毒性で生理学的に受容可能な）塩が好まれるが、他の塩もまた有用である。式（Ｉ）の化合物の塩が、例えば、式（Ｉ）の化合物と、一定量（例えば、当量）の酸または塩基とを、その塩が沈殿するような媒体中、または水性媒体中で反応させて、続いて凍結乾燥することによって形成され得る。本発明の範囲内の塩形成酸としては、塩酸塩、硫酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシレート、マレイン酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、酢酸塩、パモ酸塩／エンボン酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、酪酸塩、メチル硫酸塩、およびフマル酸塩が挙げられる。本発明の範囲内の塩形成塩基としては、ナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、メグルミン、アンモニウム、アルミニウム、亜鉛、ピペラジン、トロメタミン、リチウム、コリン、ジエチルアミン、４−フェニルシクロヘキシルアミンおよびベンザチンが挙げられる。
【００３３】
本発明の化合物の異性体の全て（例えば、幾何異性体、光学異性体など）（その化合物の塩、溶媒和物、エステルおよびプロドラッグ、ならびにそのプロドラッグの塩、溶媒和物およびエステルを含む）（例えば、種々の置換基上の不斉炭素に起因して存在し得る異性体（鏡像異性型（これは、たとえ不斉炭素の非存在下でも存在し得る）を含む））、回転異性型、アトロプ異性体、ならびにジアステレオマー型は、本発明の範囲内に企図される。本発明の化合物の個々の異性体は、例えば、他の異性体を実質的に含み得ないか、または例えば、ラセミ混合物として、または他の立体異性体の全て、もしくは他の選択された立体異性体と混合され得る。本発明のキラル中心は、ＩＵＰＡＣ １９７４推奨で定義されたように、Ｓ立体配置またはＲ立体配置を有し得る。用語「塩」、「溶媒和物」、「プロドラッグ」などの使用は、本発明の化合物の鏡像異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ラセミ化合物またはプロドラッグの、塩、溶媒和物およびプロドラッグに同等に当てはまることが意図される。
【００３４】
本明細書中の本文、スキーム、実施例および表における、結合価が不足している任意の炭素原子およびヘテロ原子は、その結合価を満たすのに十分な数の水素原子を有するとみられることもまた、注意されるべきである。
【００３５】
上で、および明細書全体にわたって使用される場合、以下の用語は、他で特に示されない限り、以下の意味を有すると理解されるべきである：
「患者」は、ヒトおよび動物の両方を包含する。
【００３６】
「哺乳動物」は、ヒトおよび他の哺乳動物を意味する。
【００３７】
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を意味する。「ハロ」または「ハライド」は、フルオロ基、クロロ基、ブロモ基、またはヨード基を意味する。
【００３８】
本発明の化合物のプロドラッグおよび溶媒和物もまた、本明細書中で企図される。本明細書中で使用される場合、用語「プロドラッグ」は、被験体への投与の際に、代謝プロセスまたは化学的プロセスにより化学的変換を受けて、式（Ｉ）の化合物またはその塩および／もしくは溶媒和物を生じる、薬物前駆体である化合物を表す。プロドラッグの考察は、Ｔ．ＨｉｇｕｃｈｉおよびＶ．Ｓｔｅｌｌａ，Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ ａｓ Ｎｏｖｅｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓの第１４巻（１９８７）、ならびにＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ，Ｅｄｗａｒｄ Ｂ．Ｒｏｃｈｅ（編），Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ（１９８７）に提供され、これらの両方は、本明細書中で参考として援用される。
【００３９】
「溶媒和物」は、本発明の化合物と１種以上の溶媒分子との物理的会合を意味する。この物理的会合は、イオン結合および共有結合（水素結合を含む）の変動する程度を包含する。特定の場合、上記溶媒和物は、例えば、１種以上の溶媒分子が結晶固形物の結晶格子中に取り込まれる場合、単離され得る。「溶媒和物」は、溶液相および単離可能な溶媒和物の両方を包含する。適切な溶媒和物の非限定的な例としては、エタノール和物、メタノール和物などが挙げられる。「水和物」は、溶媒分子がＨ２Ｏである溶媒和物である。
【００４０】
「有効量」または「治療有効量」は、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害し、従って、所望の治療効果を生じることに有効な、本発明の化合物または組成物の量を説明することを意味する。
【００４１】
化合物についての、用語「単離された」または「単離形態における」とは、合成プロセスから、もしくは天然供給源から、またはそれらの組み合わせから単離された後の上記化合物の物理的状態をいう。化合物についての、用語「精製された」または「精製形態における」とは、精製プロセスもしくは本明細書中で記載されたプロセス、または当業者に公知のプロセスから得られた後の、本明細書中で記載された標準的な分析技術または当業者に周知の標準的な分析技術により特徴付けられ得るために十分な精度で存在する、上記化合物の物理的状態をいう。
【００４２】
化合物中の部分（例えば、置換基、基または環）の数を参照すると、他で特に定義されない限り、成句「２以下」は、０、１または２を意味する。成句「１以下」は、０または１を意味する。
【００４３】
例えば、「Ｒ２〜Ｒ５は、同じであっても異なってもよく、各々は独立して、Ｈ、−ＯＨ、ハライド、−ＮＨ２および＝Ｏからなる群より選択される」という上記の記述は、命名された各置換基（すなわち、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５）の選択は、その基の任意の他の置換基の選択から独立していることを意味する。従って、例えば、同じ分子中で、Ｒ２がＨであるという選択は、Ｒ３の選択から独立しており、このＲ３は−ＯＨであってもよい。
【００４４】
以下の溶媒および試薬は、本明細書中で以下に示した略語で呼ばれる：テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）；エタノール（ＥｔＯＨ）；メタノール（ＭｅＯＨ）；酢酸（ＨＯＡｃまたはＡｃＯＨ）；酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）；トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）；トリフルオロ酢酸無水物（ＴＦＡＡ）；１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）；ｍ−クロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）；トリエチルアミン（Ｅｔ３Ｎ）；ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）；クロロギ酸エチル（ＣｌＣＯ２Ｅｔ）；１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＤＥＣ）；ジイソブチルアルミニウム水和物（ＤＩＢＡＬ）；イソプロパノール（ｉＰｒＯＨ）；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）；トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）；ジチオスレイトール（ＤＴＴ）；トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（トリス）；およびエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）。
【００４５】
他で特に示されない限り、本明細書中で述べられる物理的パラメーター（例えば、温度、質量、体積、濃度）の定量測定は、述べられた量からの偏差の適切な範囲を含むことが理解される。
【００４６】
本発明の化合物は、以下に記載した手順により調製され得る。
【実施例】
【００４７】
（実施例１：化合物８および化合物９の調製）
（工程１）
【００４８】
【化１４】
Ｌａｂｏｕｔａら（Ｌａｂｏｕｔａ，Ａ．Ｍ．ら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−Ｃｈｅｍ．Ｔｈｅｒｍ．，第１７巻，第６号，ｐｐ．５３１−５３５，（１９８２））による手順に従って、４−ピペリドン水和物塩酸塩１（２０．０ｇ、１３０ｍｍｏｌ）を、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）中に溶解した。トリエチルアミン（５８ｍＬ、４１７ｍｍｏｌ、３．２当量）を添加し、続いてＴＨＦ（１００ｍＬ）中ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（３９．８ｇ、１８２ｍｍｏｌ、１．４当量）の溶液を０℃で添加した。この溶液を、一晩撹拌した（０℃→室温）。次いで、この反応混合物を、減圧下で濃縮し、そしてその残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（１０：１ヘキサン−酢酸エチル）により精製し、無色の油状物として、２４．０ｇ（９３％）のｔｅｒｔ−ブチル４−ピペリドン−１−カルボキシレート（０７６４８３−１４１−２６；ＣＡＳ ７９０９９−０７−３）（化合物２）を得た。少量のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートが生成物中に残ったが（１Ｈ ＮＭＲにより）、この物質は、以下の工程を行うためには適切な純度であった。
【００４９】
（工程２）
【００５０】
【化１５】
Ｌａｂｏｕｔａらによる手順にまた従って、乾燥１，２−ジメトキシエタン（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルジエチルホスホノアセテート（１５．０ｇ、５９．６ｍｍｏｌ、１．２当量）を、乾燥１，２−ジメトキシエタン（１５０ｍＬ）中ＮａＨ（鉱物油中６０％分散、未洗浄、２．３８ｇ、５９．６ｍｍｏｌ、１．２当量）の懸濁液を、０℃で滴下した。化合物２を０．５時間撹拌した後、乾燥１，２−ジメトキシエタン（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−ピペリドン−１−カルボキシレート（９．９ｇ、４９．７ｍｍｏｌ）を、上記混合物に０℃で滴下し、次いで、一晩撹拌した（０℃→室温）。次いで、この反応をＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ、飽和水溶液）でクエンチし、それらの層を分離した。この水相を、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２０ｍＬ）で抽出し、この組み合わせた有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。この残渣を、シリカゲルクロマトグラフィー（９５：５ヘキサン−酢酸エチル）により精製し、無色の油状物として、１０．２ｇ（６９％）のｔｅｒｔ−ブチル−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イリデンアセテート（０７６４８３−１４３−３２；ＣＡＳ ８４８３９−５５−４）（化合物３）を得た。
【００５１】
（工程３）
【００５２】
【化１６】
ｔｅｒｔ−ブチル−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イリデンアセテート（化合物３）（１０．２ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）を、乾燥ｔ−ＢｕＯＨ（１５０ｍＬ）中ｔ−ＢｕＯＮａ（１．６ｇ、０．５当量）の溶液に溶解した。平衡化を、１００℃で０．５時間行い、次いで、室温で一晩行った。次いで、ＮＨ４Ｃｌ（飽和水溶液）をｐＨ＝７になるまで添加し、そしてこの溶液を、ヘキサン（２×２０ｍＬ）で抽出し、続いてＣＨ２Ｃｌ２（４×２０ｍＬ）で抽出した。この組み合わせた有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、次いで、減圧下で濃縮した。この残渣（化合物４（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イリデン酢酸（０７６４８３−１４９−３０））と化合物５（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，５，６−テトラヒドロピリジン酢酸（０７６４８３−１４９−３０））との混合物）を、さらなる精製をせずに次の工程に移した。
【００５３】
残渣を、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）に溶解し、１，４−ジオキサン（４．０Ｍ、１７ｍＬ、６８ｍｍｏｌ、２．０当量）中ＨＣｌの溶液を、０℃で滴下した。この反応を、１時間撹拌させ（０℃→室温）、次いで、このサンプルを減圧下で濃縮し、さらなる精製をせずに次の工程に移した。
【００５４】
次いで、その残渣を、３：１ ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ（１５０ｍＬ）に溶解し、この溶液を、ＮａＯＨ（１．０ Ｎ水溶液）でｐＨ＝１０に調整した。次いで、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１１．２ｇ、５１．４ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加し、そしてこの反応を一晩室温で撹拌した。サンプルを減圧下で濃縮した後、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を添加し、続いてクエン酸（５％水溶液）をｐＨ＝３になるまで添加した。この生成物を、Ｅｔ２Ｏ（３×５０ｍＬ）で抽出し、そしてこの組み合わせた有機相を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮して、α，β−不飽和酸とβ，γ−不飽和酸との１：１混合物として、２．６ｇ（３つの工程を経て３２％）の生成物を得た。
【００５５】
（工程４）
【００５６】
【化１７】
（＋）−４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］−ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−ピペリジン（３．８ｇ、８．１ｍｍｏｌ）、化合物４、１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペリジン−４−イリデン酢酸と化合物５、１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−１，２，５，６−テトラヒドロピリジン酢酸（２．６１ｇ、１０．８ｍｍｏｌ、１．３当量）との１：１混合物、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＡＣ、２．６９ｇ、１４．１ｍｍｏｌ、１．７当量）および３−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン（ＨＯＯＢＴ、２．２９ｇ、１．７当量）をＤＭＦ（１００ｍＬ）中に溶解した。Ｎ−メチルモルホリン（９．５ｍＬ、８．８ｇ、８７ｍｍｏｌ、１０．７当量）を添加し、その混合物を室温で５０時間攪拌した。ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ、飽和水溶液）を添加し、その後酢酸エチル（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加した。その水相を酢酸エチル（６×３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。その残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（７５：２５ ヘキサン−酢酸エチル→２５：７５ ヘキサン−酢酸エチル）により精製し、灰白色の泡沫状の固形物として、３．６６ｇ（６５％）の結合生成物を得た。この物質を、α，β不飽和アミドおよびβ，γ−不飽和アミドである、化合物６、ｔｅｒｔ−ブチル（＋）−４−［２−［４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチリデン］−１−ピペリジンカルボキシレートと、化合物７、ｔｅｒｔ−ブチル（＋）−４−［２−［４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチル］−３，４−ジデヒドロ−１−ピペリジンカルボキシレート（０７６４８３−１５１−２９）との９：１混合物、、Ｍｐ＝１１２〜１２５℃として、次の工程に移した。
【００５７】
（工程５）
【００５８】
【化１８】
化合物６、ｔｅｒｔ−ブチル（＋）−４−［２−［４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチリデン］−１−ピペリジンカルボキシレートと化合物７、ｔｅｒｔ−ブチル（＋）−４−［２−［４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチル］−３，４−ジデヒドロ−１−ピペリジンカルボキシレートとの９：１混合物を、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中に溶解し、ＨＣｌの１，４−ジオキサン（４．０Ｍ、４．６ｍＬ、１８．４ｍｍｏｌ、４．０当量）溶液を、０℃で滴下した。この混合物を１時間（０℃→室温）攪拌し、次いで、減圧下で濃縮し、さらなる精製なしに次の工程に移した。
【００５９】
次いで、この物質をＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ）中に溶解し、Ｅｔ２Ｎ（２．６ｍＬ、１８．４ｍｍｏｌ、４．０当量）を添加した。トリメチルシリルイソシアネート（２．１ｇ、１８．４ｍｍｏｌ、４．０当量）をその溶液に室温で滴下し、その反応混合物を１時間攪拌した。次いで、その反応混合物を減圧下で濃縮し、白色の固形物を得た。その残渣を調製ＴＬＣ（８５：１５ ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ）により精製し、灰白色の泡沫状の固形物として、９００ｍｇ（３１％）のβ，γ−不飽和アミド、（＋）−４−［２−４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチリデン］−１−ピペリジンカルボキサミド、化合物９（０７８０１７−０１３−２２、主要な異性体）、および黄色の固形物として、１２２ｍｇ（４．２％）のα，β−不飽和アミド、（＋）−４−［２−［４−（３，１０−ジブロモ−８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［５，６］シクロヘプタ［１，２−ｂ］ピリジン−１１（Ｒ）−イル）−１−ピペリジニル］−２−オキソエチル］−３，４−ジデヒドロ−１−ピペリジン−カルボキサミド、化合物８（０７８０１７−０１５−３３、微量の異性体）を得た。ｍｐ（化合物９、主要な異性体）＝１５７〜１６２℃；ｍｐ（化合物８、微量の異性体）＝１６７〜１７１℃。ＨＲＭＳ（化合物９、主要異性体と化合物８、微量の異性体との７．４：１混合物）ｍ／ｚ＝６３７．０４０４。
【００６０】
（化合物１０および１１を調製するために使用したインキュベーション）
化合物１０および化合物１１の構造を有する化合物Ａの代謝産物を、以下の実施例２〜６に記載される手順に従って調製した。
【００６１】
【化１９】
（実施例２）
化合物Ａの、マウス、ラット、サルおよびヒト由来の肝細胞とのインビトロインキュベーションを、２ｍＬのＷａｙｍｏｕｔｈ培地、２．５４μｇ（２μＭ）または６３．８μｇ（５０μＭ）のいずれかの化合物Ａ（約２０μＣｉ／ｍｇ）および酸素：二酸化炭素 ９５：５（ｖ／ｖ）の覆い（ｂｌａｎｋｅｔ）の下での２×１０６細胞を含む、２５ｍＬのＥｒｌｅｎｍｅｙｅｒフラスコ中で行なった。フラスコを、ゴム栓で蓋をし、気体の組成を維持し、３７℃の水浴中に配置した。インキュベーションを、穏やかに振盪しながら５時間継続させた。急速に凍結（−８０℃）することにより、反応を終結させた。熱不活性化肝細胞を、コントロールとして、化合物Ａと並行してインキュベートした。
【００６２】
（実施例３）
化合物Ａ代謝産物のスケールアップした生成を、非誘発動物由来のラット肝臓ミクロソームを使用して行った。ミクロソームを、０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）１ｍＬあたり１ｎｍｏｌのＰ４５０を含有する溶液中でインキュベートした。このインキュベーション混合物はまた、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、５ｍＭ グルコース６リン酸、１．５ユニット／ｍＬのグルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ、０．５ｍＭのβ−ＮＡＤＰ（β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドホスフェート）および２５μＭの化合物Ａ（約２０μＣｉ／ｍｇ）を含有した。４個のフラスコでインキュベーションを行い、そのそれぞれは、４９．４ｍＬの上記混合物を含有し、ＮＡＤＰなしで３７℃で２分間プレインキュベートした。その反応を、ＮＡＤＰの添加により開始し、２時間インキュベートし、氷冷水中でその混合物を冷却することにより終結させた。次いで、１０個の固相カートリッジ（ｔＣ１８、１０ｇ吸収剤）のそれぞれに等しく分配した体積で、直接適用したインキュベーション混合物を合わせて固相抽出（ＳＰＥ）を行なった。これらのカートリッジは、予めメタノールおよび水で洗浄した。薬物由来の物質を、総体積６７０ｍＬのメタノール（カートリッジ１個あたり約７０ｍＬ）で溶出した。次いで、溶離液を、ＴｕｒｂｏＶａｐ ＬＶワークステーション中で、窒素流下で、３７℃でエバポレートし、その抽出残渣を、後のＨＰＬＣ単離のためにメタノール中に再構成させた。
【００６３】
（実施例４）
２５μＭ化合物Ａおよび１ｎｍｏｌ／ｍＬ ＣＹＰ４５０で、ＮＡＤＰＨ生成系（５ｍＭ グルコース６リン酸、１．５ユニット／ｍｌ グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ、０．５ｍＭ β−ＮＡＤＰ）および３ｍＭの塩化マグネシウムの存在下で、３０分間ヒト肝臓ミクロソームとともにインビトロインキュベーションを行なった。煮沸したミクロソームを、同条件下で、コントロールとしてインキュベートした。３０分間のインキュベーション後、そのサンプルを氷上に配置し、ＳＰＥに供した。メタノール溶出物を、３組に分け、サンプルの１組をＨＰＬＣにより分析し、他の２組を、ＬＣ／ＭＳおよびＮＭＲにより分析した。その後、メタノールをアセトニトリルに置換し、化合物１０または１１とメタノールとの間の化学反応を避けた。
【００６４】
ＮＭＲ分析の結果により、化合物１０が、ペンダントピペリジン環中に二重結合を有することを確認した。ラット肝臓ミクロソームとの大規模なインキュベーションの後、化合物１０の構造を、ＮＭＲにより完全に同定した。
【００６５】
（実施例５）
２５μＭの化合物Ａおよび０．２ｎｍｏｌ／ｍＬのＣＹＰ４５０で、３ｍＭの塩化マグネシウムおよびＮＡＤＰＨ生成系の存在下で、３０分間、ヒトＣＹＰ３Ａ４ ＳＵＰＥＲＳＯＭＥＳ（登録商標）と一緒にインビトロインキュベーションを行なった。コントロールの昆虫のミクロソームを、コントロールとして同条件下でインキュベートした。３０分間のインキュベーション後、そのサンプルを氷上に配置し、ＳＰＥに供した。メタノール溶出物を、２組に分け、サンプルの１組をＨＰＬＣにより分析し、もう１組をＬＣ／ＭＳにより分析した。
【００６６】
ＬＣ／ＭＳ分析の結果は、代謝化合物１１（室温、約５１．９分）および代謝化合物１０（室温、約６１．６分）のｍ／ｚは、それぞれ６５３および６３５であることを示した。
【００６７】
（実施例６）
組換えヒトＣＹＰ３Ａ４酵素（ＧｅｎｔｅｓｔおよびＳＰＲＩ由来）を、一定量のシトクロムＰ４５０（「ＣＹＰ」）（０．２ｎｍｏｌ／ｍＬ）および２５μＭの化合物Ａを用いて別々にインキュベートした。インキュベーションは、３ｍＭの塩化マグネシウムおよびＮＡＤＰＨ生成系の存在下で、６０ｍＬのリン酸カリウム緩衝液（０．０５Ｍ、ｐＨ７．４）中で、空気中で、３７℃で３０分間行なった。薬物を添加することにより反応を開始し、氷と水との混合物中で、インキュベートしたサンプルを冷却することにより反応を終結させ、ただちに、ＳＰＥ（アセトニトリルにより溶出）に供した。各サンプルを別々にエバポレートして乾燥させ、質量分析（ＬＣ／ＭＳおよびＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）ならびにＮＭＲにより分析した。
【００６８】
適切な出発物質、ならびに上記の手順および当該分野で公知の他の手順を使用して、式（Ｉ）の他の化合物が生成され得る。
【００６９】
（化合物の単離）
以下の単離および精製を行い、それらの工程は、本発明の化合物に適用され得る単離プロセスおよび精製プロセスの例示的な型である。以下の単離は、本発明の化合物を単離するために使用され得る単離の非限定的な例である。当業者に公知の他の単離プロセスは、本発明の化合物を単離することに等しく適用可能である。
【００７０】
（化合物１０の単離）
ラットの肝臓ミクロソームを用いたスケールアップした生成から得た代謝産物を、ＳＰＥ後に濃縮し、そしてＨＰＬＣにより分離した。ＨＰＬＣ勾配溶出法を、以下の表１に示すように最適化した。この移動相は、酢酸を用いてｐＨ６．０に調整した２０ｍＭの酢酸アンモニウムおよびアセトニトリルからなる。流速を、１．０ｍＬ／分に設定し、そのカラム温度を４０℃に維持した。この溶出を２７８ｎｍでモニタリングした。
【００７１】
【表１】
化合物１０のＨＰＬＣ溶出ピークは、２７８ｎｍでのＵＶ吸光度に従って、３９．２〜４１．２分から手作業で回収した。化合物１０の画分を、ＬＣ−ＭＳにより試験し、分子イオンを（Ｍ−２）として検出した。そのカラム回収物をプールし、分析のためにＮＭＲサンプルにした。
【００７２】
（代謝化合物１０のＮＭＲ分析）
化合物Ａおよび化合物１０のプロトン割り当てを表２に列挙する。４．７３ｐｐｍおよび６．７１ｐｐｍで観察された二つの新規の共鳴を除いて、ほとんどの共鳴割り当ては、親化合物Ａから変化しないままであった。これらのクロスピークは、プロトン−プロトン相関スペクトルで観察された。これらの二つの共鳴は、Ｈ−１９’およびＨ−２０’位のオレフィンプロトンに割り当てられる。Ｈ−１８、Ｈ−１９およびＨ−２０位のプロトンは、Ｃ−１９’とＨ−２０’との間の二重結合の形成に起因して、低磁場にシフトした。
【００７３】
【表２】
【００７４】
【化２０】
（化合物１１の単離）
ＢＤ Ｇｅｎｅｔｅｓｔ（１Ｅ）由来の組換えＣＹＰ３Ａ４酵素とのスケールアップしたインキュベーションから得た代謝化合物１１を、ＳＰＥにより溶出し、ＨＰＬＣにより単離した。移動相は、酢酸を用いてｐＨ６．０に調整した２０ｍＭの酢酸アンモニウムおよびアセトニトリルからなった。Ｌｕｎａフェニル−ヘキシルセミ調製カラム（５μｍ、２５０×１０ｍｍ ｉ．ｄ．、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｉｎｃ．、Ｔｏｒｒａｎｃｅ、ＣＡ）を用いるＨＰＬＣ勾配溶出方法は、表３に示される。流速を４．０ｍＬ／分に設定し、カラム温度を室温に設定する。代謝産物画分を、２７８ｎｍでのそのＵＶ吸光度に従って回収した。その画分を、プールし、２５℃でのＮＭＲデータ収集のために、ＤＭＳＯ−ｄ６中のＮＭＲサンプルにした。
【００７５】
【表３】
（化合物１１のＮＭＲ分析）
化合物Ａおよび化合物１１のプロトンＮＭＲ割り当てを、以下の表に列挙する。５．５４ｐｐｍでの新規のプロトンの共鳴を除いて、化合物１１のほとんどの共鳴割り当ては、化合物Ａの共鳴割り当てから変化しないままであった。Ｈ−１９とＨ−１９’とでのこの共鳴のクロスピークは、プロトン−プロトン相関スペクトルで観察された。その炭素の化学シフトは、７２．７ｐｐｍに見出され、これは、Ｃ−２０’位での第二級アルコールの形成と一致する。従って、化合物１１の構造は、以下に示すように割り当てられ、Ｈ−２０’のプロトンは、化合物Ａのペンダントピペリジン環のヒドロキシによって置換される。
【００７６】
【表４】
【００７７】
【化２１】
（アッセイ）
（（Ｈ−Ｒａｓ）ファルネシルトランスフェラーゼ阻害アッセイにおける活性）
化合物１０および化合物１１の薬理学的活性を試験するために、化合物Ａを、３０リットルの発酵槽中でＥ．ｃｏｌｉのヒトＣＹＰ３Ａ４およびヒトオキシドレダクターゼの高レベルの組換え発現とともにインキュベートした。化合物Ａを、１リットルの規模で、１５〜２０％の全収率で、化合物１１および化合物１０に変換した。この代謝産物を、固相樹脂吸収に従って単離し、そしてＨＰＬＣにより精製した。両代謝産物の同定をＬＳ−ＭＳ／ＭＳにより確認した。合計４．４５ｍｇの化合物１０および２．２ｍｇの化合物１１を、生物学的活性評価のために提供した。
【００７８】
この代謝産物をＬＣ−ＭＳ（薬理学的アッセイに使用される条件下で）によって試験した。化合物１１混合物は、約７５％の純粋な化合物１１および約２５％の純粋な化合物１０を含有することが見出された。この化合物１０混合物は、約５％の純粋な化合物１１および約９５％の純粋な化合物１０を含有することが見出された。
【００７９】
上記化合物は全て、（Ｈ−Ｒａｓ）ファルネシルトランスフェラーゼ阻害アッセイにおいて、以下のＩＣ５０活性を示した：
化合物８ ２．６ｎＭ
化合物９ ２３．３ｎＭ
化合物１１（混合物） ２２．５ｎＭ
化合物１０（混合物） ４．１ｎＭ
化合物Ａ（コントロール） ２．４ｎＭ。
【００８０】
（Ｈ−Ｒａｓ）ＦＰＴのためのアッセイ条件）
ＦＰＴ活性を、［３Ｈ］ファルネシルピロリン酸からＨ−Ｒａｓ（ビオチン−ＣＶＬＳ）のＣ末端に由来するビオチン化ペプチドへの［３Ｈ］ファルネシルの転移を測定することにより決定した。この反応混合物は、５０ｍＭのＴｒｉｓ ｐＨ７．７、５ｍＭのＭｇＣｌ２、５μＭのＺｎ＋＋、５ｍＭのＤＴＴ、０．１％のＴｒｉｔｏｎ−Ｘ、０．０５μＭのペプチド、０．０３ｎＭの精製されたヒトファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ、０．１８０μＭの［３Ｈ］ファルネシルピロホスフェート、それに加えて示した濃度の三環系化合物またはビヒクルコントロールを、合計体積１００μＬ中に含有した。この反応混合物をＶｏｒｔｅｍｐ振盪インキュベーター中で、３７℃、４５ｒｐｍで６０分間インキュベートし、０．５％ ＢＳＡおよび１．３ｍｇ／ｍｌのストレプトアビジン ＳＰＡビーズを含有する１５０μＬの０．２５Ｍ ＥＤＴＡで停止させた。放射活性を、Ｗａｌｌａｃｈ １４５０ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ液体シンチレーションカウンターで測定した。阻害パーセントを、ビヒクルコントロールに対して計算した。
【００８１】
（薬学的調製物）
本発明により記載される化合物から薬学的組成物を調製するために、不活性で、薬学的に受容可能なキャリアは、固体または液体のどちらかであり得る。固体形態の調製物としては、散剤、錠剤、分散可能顆粒、カプセル剤、カシェ剤および坐剤が挙げられる。散剤および錠剤は、約５％〜７０％の活性成分から構成され得る。適した固体キャリアは、当該分野で公知であって、例えば、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖および乳糖が挙げられる。錠剤、散剤、カシェ剤およびカプセル剤は、経口投与に適した固体投薬形態として使用され得る。
【００８２】
坐剤の調製に関しては、低融点ワックス（例えば、脂肪酸グリセリドの混合物またはカカオ脂）が最初に融解し、そして活性成分は、攪拌することによりその中に均一に分散される。次いで、この融解均一混合物を好都合な大きさの型に注ぎ、冷却し、それによって凝固させる。
【００８３】
液体形態の調製物としては、溶液、懸濁液およびエマルジョンが挙げられる。水または水−プロピレングリコール溶液は、非経口注射のために使用され得る。
【００８４】
液体形態の調製物としてはまた、鼻腔内投与のための溶液が挙げられる。
【００８５】
吸入に適したエアロゾル調製物としては、溶液および粉末形態の固体が挙げられ得、それらは、薬学的に受容可能なキャリア（例えば、不活性な圧縮気体）と組み合わされ得る。
【００８６】
使用の直前に、経口投与または非経口投与のいずれかのための液体形態調製物に変換されることが意図される固体形態の調製物もまた含まれる。このような液体形態としては、溶液、懸濁液およびエマルションが挙げられる。
【００８７】
本発明の化合物はまた、経皮的に送達可能である。経皮組成物は、クリーム、ローション、エアロゾルおよび／またはエマルションの形態をとり得、それらは、この目的に関して当該分野では慣習的であるマトリックス型またはレザバ型の経皮パッチに含まれ得る。
【００８８】
好ましくは、この化合物は、経口投与される。
【００８９】
好ましくは、この薬学的調製物は、単位投薬形態である。このような形態において、この調製物は、適切な量の活性成分（例えば、所望の目的を達成するのに十分な量）を含む単位用量に再分される。
【００９０】
単位用量の調製物中の活性化合物の量は、特定の適用に従って、約０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ、より好ましくは、約１ｍｇ〜３００ｍｇまで変動し得るか、またはこれらの範囲に調節され得る。
【００９１】
使用される実際の投薬量は、患者の必要性および処置すべき状態の重篤度に依存して変動され得る。特定の状況に対する適切な投薬量の決定は、当業者の範囲内である。一般に、処置は、その化合物の最適用量より低い、低投薬量で開始する。その後、その投薬量を、その状況下で最適な効果を達成するまで、少量ずつ増加する。便宜上、一日合計投薬量は、分割され得、所望の場合、一日の間に一部分で投与され得る。
【００９２】
本発明の化合物およびその薬学的に受容可能な塩の投与の量および頻度は、患者の年齢、状態および体重ならびに処置されるべき症状の重篤度のような因子を考慮して、主治医の判断に従って調節される。代表的な推奨投薬レジメンは、腫瘍増殖をブロックするために、２回〜４回の分割された用量で、１０ｍｇ／日〜２０００ｍｇ／日、好ましくは、１０ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日の経口投与である。本化合物は、この投薬範囲内で投与される場合、無毒性である。
【００９３】
以下は、本発明の化合物を含有する薬学的投薬形態の例である。この薬学的組成物局面における本発明の範囲は、提供される例によって限定されるべきではない。
【００９４】
（薬学的投薬形態実施例）
【００９５】
【表５】
（製造方法）
適切なミキサー内で、項目１および項目２を、１０〜１５分間混合する。項目３を含むこの混合物を顆粒化する。この湿気を帯びた顆粒を、必要な場合、粗目篩（例えば、１／４”、０．６３ｃｍ）を通して粉末にする。この湿気を帯びた顆粒を乾燥させる。必要な場合、この乾燥した顆粒をふるいにかけ、項目４と混合し、１０〜１５分間混合する。項目５を添加し、１〜３分間混合する。この混合物を圧縮して、適切な打錠機で、適切な大きさかつ重量にする。
【００９６】
【表６】
（製造方法）
適切な混合機内で、項目１、項目２および項目３を、１０〜１５分間混合する。項目４を添加し、１〜３分間混合する。この混合物を、適切なカプセル化機械で、適切な２個の部分からなる硬質ゼラチンカプセル中に充填する。
【００９７】
さらなる処方物、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する化合物と他の化合物（抗癌剤を含む）との組合せ、ならびにこのような処方物および／または組合せを使用する処置の方法は、米国仮特許出願６０／４９８，５０９に開示され、これは、本明細書中で十分に示される程度に援用される。
【００９８】
本発明を、上記の特定の実施形態と組み合わせて記載してきたが、本発明の多くの代替物、改変および変化が、当業者に明らかである。このような代替物、改変および変化は全て、本発明の精神および範囲内であることが意図される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式（Ｉ）：
【化１】
により示される化合物、および式（Ｉ）の化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルであって、
式（Ｉ）において、
Ｒ１は、Ｈおよび＝Ｏからなる群より選択され；
Ｒ２〜Ｒ５は、同じであっても異なっていてもよく、その各々は、独立して、Ｈ、−ＯＨ、ハライド、−ＮＨ２、および＝Ｏからなる群より選択され；そして
組み合わせ実線−破線は、独立して、単結合または二重結合のいずれかを示し、二重結合である組み合わせ実線−破線の数は、２以下であり、該数が２である場合、該二重結合は、隣接しておらず、該数が０である場合、Ｒ１〜Ｒ５のうちの１つは、Ｈではない、
化合物。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ５は、各々Ｈであり、Ｒ４は、Ｈおよび−ＯＨからなる群より選択され、二重結合である前記組み合わせ実線−破線の数は、１以下である、化合物。
【請求項３】
式：
【化２】
により示される、請求項１に記載の化合物、およびその化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステル。
【請求項４】
式：
【化３】
により示される、請求項１に記載の化合物、およびその化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステル。
【請求項５】
式：
【化４】
により示される、請求項１に記載の化合物、およびその化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステル。
【請求項６】
式：
【化５】
により示される、請求項１に記載の化合物、およびその化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステル。
【請求項７】
ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する必要がある患者においてファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する方法であって、該方法は、
治療上有効な量の請求項１に記載の化合物を投与する工程；
を包含する、方法。
【請求項８】
膵臓癌、非小細胞肺癌、骨髄性白血病、甲状腺小胞癌、骨髄異形成症候群、表皮癌、膀胱癌、結腸癌、乳癌、または前立腺癌を、そのような癌を処置する必要がある患者において処置する方法であって、該方法は、
治療上有効な量の請求項１に記載の化合物を投与する工程；
を包含する、方法。
【請求項９】
薬学的組成物であって、治療上有効な量の請求項１に記載の化合物を、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて含む、組成物。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物の、純粋でありかつ単離された形態。
【請求項１１】
請求項３に記載の化合物の、純粋でありかつ単離された形態。
【請求項１２】
請求項４に記載の化合物の、純粋でありかつ単離された形態。
【請求項１３】
請求項５に記載の化合物の、純粋でありかつ単離された形態。
【請求項１４】
請求項６に記載の化合物の、純粋でありかつ単離された形態。
【請求項１】
構造式（Ｉ）：
【化１】
により示される化合物、および式（Ｉ）の化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステルであって、
式（Ｉ）において、
Ｒ１は、Ｈおよび＝Ｏからなる群より選択され；
Ｒ２〜Ｒ５は、同じであっても異なっていてもよく、その各々は、独立して、Ｈ、−ＯＨ、ハライド、−ＮＨ２、および＝Ｏからなる群より選択され；そして
組み合わせ実線−破線は、独立して、単結合または二重結合のいずれかを示し、二重結合である組み合わせ実線−破線の数は、２以下であり、該数が２である場合、該二重結合は、隣接しておらず、該数が０である場合、Ｒ１〜Ｒ５のうちの１つは、Ｈではない、
化合物。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ５は、各々Ｈであり、Ｒ４は、Ｈおよび−ＯＨからなる群より選択され、二重結合である前記組み合わせ実線−破線の数は、１以下である、化合物。
【請求項３】
式：
【化２】
により示される、請求項１に記載の化合物、およびその化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステル。
【請求項４】
式：
【化３】
により示される、請求項１に記載の化合物、およびその化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステル。
【請求項５】
式：
【化４】
により示される、請求項１に記載の化合物、およびその化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステル。
【請求項６】
式：
【化５】
により示される、請求項１に記載の化合物、およびその化合物の薬学的に受容可能な同位体、塩、溶媒和物、またはエステル。
【請求項７】
ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する必要がある患者においてファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害する方法であって、該方法は、
治療上有効な量の請求項１に記載の化合物を投与する工程；
を包含する、方法。
【請求項８】
膵臓癌、非小細胞肺癌、骨髄性白血病、甲状腺小胞癌、骨髄異形成症候群、表皮癌、膀胱癌、結腸癌、乳癌、または前立腺癌を、そのような癌を処置する必要がある患者において処置する方法であって、該方法は、
治療上有効な量の請求項１に記載の化合物を投与する工程；
を包含する、方法。
【請求項９】
薬学的組成物であって、治療上有効な量の請求項１に記載の化合物を、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて含む、組成物。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物の、純粋でありかつ単離された形態。
【請求項１１】
請求項３に記載の化合物の、純粋でありかつ単離された形態。
【請求項１２】
請求項４に記載の化合物の、純粋でありかつ単離された形態。
【請求項１３】
請求項５に記載の化合物の、純粋でありかつ単離された形態。
【請求項１４】
請求項６に記載の化合物の、純粋でありかつ単離された形態。
【公表番号】特表２００７−５１６１７９（Ｐ２００７−５１６１７９Ａ）
【公表日】平成１９年６月２１日（２００７．６．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５１７５５５（Ｐ２００６−５１７５５５）
【出願日】平成１６年６月２３日（２００４．６．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２００３２
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００３１２０
【国際公開日】平成１７年１月１３日（２００５．１．１３）
【出願人】（５９６１２９２１５）シェーリング コーポレイション (785)
【氏名又は名称原語表記】Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年６月２１日（２００７．６．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年６月２３日（２００４．６．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２００３２
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００３１２０
【国際公開日】平成１７年１月１３日（２００５．１．１３）
【出願人】（５９６１２９２１５）シェーリング コーポレイション (785)
【氏名又は名称原語表記】Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ
【Ｆターム（参考）】
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