シクロウンデカデプシペプチド化合物および医薬としてのその化合物の使用
本発明は、新しいシクロウンデカデプシペプチド化合物、および医薬としての、特に抗ウイルス薬としての、より具体的にはＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための当該化合物の使用に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はシクロウンデカデプシペプチド（シクロウンデカデプシペプチド）化合物に関する。また本発明は、医薬としての、特に抗ウイルス薬としての、より具体的にはＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための、これらの化合物の使用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
ＨＣＶは、約１５年前にＣｈｏｏおよび共同研究者によってクローン化され、特性解析された（非特許文献１を参照）。ＨＣＶはフラビウイルス科に属し、エンベロープ型のヌクレオカプシドおよび＋の極性の一本鎖ＲＮＡゲノムを含む（非特許文献２を参照）。ＨＣＶは、主に血液、血液製剤および妊娠中の母子感染によってうつされる。血液製剤をスクリーニングするための診断検査の導入は、新しい感染の割合を著しく低下させた。
【０００３】
依然として、ＨＣＶは深刻な医学上の問題であり続けている。現在約１億７０００万人の人々がＨＣＶに感染している。感染の初期の過程は、典型的には軽度である。しかしながら、多くの場合、免疫系は、このウイルスを一掃することができず、持続的な感染を有する人々は、肝硬変および肝細胞癌の高いリスクにある（非特許文献３を参照）。
【０００４】
利用できるワクチンはなく、治療法の選択肢は非常に限られている（非特許文献４；非特許文献５を参照）。
【０００５】
サイクロフィリンに強く結合する化合物が同定されたが、それらの化合物は免疫抑制性であった（非特許文献６）。
【０００６】
それゆえ、最近２０年間の間、ＮＩＭ ８１１、またはＨＩＶ−１複製を阻害する高い効力をも提示しかつ本質的に免疫抑制活性を欠く他の化合物などの非免疫抑制性化合物を同定することを目的として、いくつかの医薬品化学の研究が行われてきた。特許文献１（Ｗｅｎｇｅｒら；ＤＥＢＩＯＰＨＡＲＭ ＳＡ）および非特許文献７を参照。
【０００７】
サイクロフィリンに結合する非免疫抑制性化合物が、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に対して阻害効果を有するということが見出された。非Ａ型肝炎、非Ｂ型肝炎の主要な原因因子（ｃａｕｓａｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ）として同定されたＨＣＶによる持続的な感染は、慢性肝炎、肝硬変または肝細胞癌などの肝疾患に密接に関連すると考えられてきた。これらの肝疾患の発症は、主要な公衆衛生の問題である。有効な抗ＨＣＶ治療は、インターフェロン、またはインターフェロンおよびリバビリンの組み合わせを用いた治療に限定されている。しかしながら、このウイルスはこれらの公知の薬剤で処置されたＨＣＶ患者の約半分から取り除かれないため、依然として代替の抗ＨＣＶ剤に対する強いニーズがある。
【０００８】
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）複製の阻害に対して作用する特性を有するシクロウンデカペプチドは、すでに特許文献２（Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａ ＧＭＢＨ）および特許文献３（ＤＥＢＩＯＰＨＡＲＭ ＳＡ）から公知である。非特許文献８は、特許文献３に記載された化合物によるｍＰＴ阻害のより良好な効力を報告する。しかしながら、これらのペプチドのうちのいくつかは現在臨床試験にかけられているが、改善された薬物動態プロファイル（例えば肝トランスポーター阻害プロファイルおよびその結果生じる薬物−薬物相互作用）ならびに改善された毒性学プロファイル（例えば非免疫抑制活性、およびその結果生じる有害事象）とともに、特にＨＣＶの複製を阻害するための満足できる特性を有する新しい抗ウイルス薬を開発するというニーズが依然としてある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第００／０１７１５号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００５／０２１０２８号パンフレット
【特許文献３】国際公開第２００６／０３８０８８号パンフレット
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９８９年、第２４４巻、３５９−３６２頁
【非特許文献２】Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒら、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．、２００３年、第６０巻、９１−１０２頁
【非特許文献３】Ｐｏｙｎａｒｄら、Ｌａｎｃｅｔ、１９９７年、第３４９巻、８２５−８３２頁
【非特許文献４】Ｍａｎｎｓら、Ｉｎｄｉａｎ Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．、２００１年、第２０巻（補遺１）、Ｃ４７−５１頁
【非特許文献５】Ｔａｎら、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．、２００２年、第１巻、８６７−８８１頁
【非特許文献６】Ｎａｋａｇａｗａ Ｍら、Ｂｉｏｃｈｍｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．、米国、フロリダ州、オーランド、２００４年１月２日、第３１３巻、第１号、４２−４７頁、ＸＰ００４４７９１１４
【非特許文献７】Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．、２０００年、第４１巻、７１９３−６頁
【非特許文献８】Ｈａｎｓｓｏｎｓ Ｍ Ｊら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ ａｎｄ ｂｉｏｍｅｍｂｒａｎｅｓ、ｐｌｅｎｕｍ ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、米国、ニューヨーク州、ニューヨーク、２００４年８月１日、第３６巻、第４号、４０７−４１３頁（ＸＰ００２３３０６９９）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
従って、本発明は、Ｃ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害の予防または処置において使用するべきさらなる非免疫抑制性化合物を提供することを目的とする。これらの化合物は、肝トランスポーターの阻害に関連する潜在的な副作用、もしくは肝トランスポーターの阻害に関連する潜在的な薬物−薬物相互作用のいずれかを低減する、またはその両方でさえも低減するという予想外の長所を有する。加えて、特に工業規模でより容易に合成される化合物を提供することも本発明の目的である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
それゆえ、本発明の目的は、上記の改善された特性を有する新しい抗ウイルス薬を提供することであったが、驚くべきことに、これらの要件は式（Ｉ）に定義されるシクロウンデカデプシペプチド化合物
【化１】
（式中、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、４−フルオロ−ＭｅＢｍｔ、ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔ；Ｏ−アセチル−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｎｖａ、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＥｔ２）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（ここで、Ｏｘはメチオニンの硫黄原子はスルホキシドまたはスルホンであることを意味する）、ＭｅＶａｌ、ＭｅＴｈｒ、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｈｒ（ＯｔＢｕ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＡｌａ、ＭｅＩｌｅ、ＭｅＴｈｒ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＥｔＰｈｅ、ＥｔＴｙｒ、ＥｔＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ、ＭｅＴｙｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＰｈｅであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｌａであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである）
によって満たされるということが見出された。
【００１３】
本発明の別の対象は、Ｃ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための医薬組成物であって、１以上の薬学的に許容できる希釈剤または担体と一緒に式Ｉの化合物を含む医薬組成物を提供することである。
【００１４】
本発明のさらなる対象は、少なくともａ）式Ｉの化合物または上記医薬組成物からなる第１の薬剤と、ｂ）ＨＣＶ複製に対して作用する特性を有する第２の薬剤とを含む医薬的組み合わせを提供することである。
【００１５】
式Ｉに係る化合物は、Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害の処置または予防における医薬の製造において使用されてもよい。
【００１６】
本発明のなおさらなる対象は、必要とする対象においてＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための方法であって、当該対象に、治療上有効量の式Ｉの化合物または本発明に係る医薬組成物を投与することを含む方法を提供することである。
【００１７】
あるいは、必要とする患者においてＨＣＶ複製を阻害するための方法であって、当該対象に、治療上有効量の式Ｉの化合物または本発明の医薬組成物を投与することを含む方法も提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
本発明のよりよい理解のために、そして本発明がどのように実施されうるかを示すために、これより、例としてのみであるが、本発明に係る特定の実施形態、方法およびプロセスが添付の図面を参照して示される。
【図１】国際公開第２００６／０３８０８８号パンフレットに係る化合物、すなわち［Ｄ−ＭｅＡｌａ］３−［ＥｔＶａｌ］４−ＣｓＡ（Ｄｅｂｉｏ ０２５）と比較して、本発明に係る化合物の化学合成を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
特に定義しない限り、本願明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般に理解するのと同じ意味を有する。本願明細書に記載されるものと類似または等価な方法および物質を本発明の実施または試験で使用することができるが、適切な方法および物質が以下で示される。本願明細書中で言及されるすべての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照によりその全体を援用したものとする。矛盾する場合には、定義を含めて本願明細書が優先するものとする。加えて、物質、方法、および実施例は説明するためのものに過ぎず、限定を意図するものではない。
【００２０】
本願明細書で使用する場合、本発明の理解を容易にするために、以下の定義が与えられる。
【００２１】
用語「含む」は、一般に「包含する」の意味で使用され、つまり１以上の特徴または構成要素の存在を許容する。
【００２２】
式（Ｉ）のシクロウンデカデプシペプチド化合物を影響することが本発明の対象である。
【化２】
式中、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、４−フルオロ−ＭｅＢｍｔ、ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔ、Ｏ−アセチル−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｎｖａ、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＥｔ２）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＶａｌ、ＭｅＴｈｒ、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＡｌａ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＥｔＰｈｅ、ＥｔＴｙｒ、ＥｔＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ、ＭｅＴｙｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＰｈｅ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）であり、式中、メチオニンの硫黄原子はスルホキシドまたはスルホンであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである。
【００２３】
ＩＵＰＡＣが認める定義によれば、シクロデプシペプチドは、アミノおよびヒドロキシルカルボン酸残基（通常はα−アミノおよびα−ヒドロキシ酸）の配列を有する天然または合成の化合物であり、これらの残基は環として連結されている（ＩＵＰＡＣ Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ、第２版（１９９７）を参照）。このようなシクロデプシペプチドは、少なくとも１つのアミド結合がエステル結合で置き換えられているヘテロデチック（ｈｅｔｅｒｏｄｅｔｉｃ）ペプチドとして記述される（Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｃｉ． １０：１１５−８（２００４）を参照）。
【００２４】
本発明の化合物は１１残基を含み、１０個はα−アミノ酸であり、１個はα−ヒドロキシ酸である。このα−ヒドロキシ酸はＤ−α−ヒドロキシイソ吉草酸としても知られＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＯＨと略号で記される（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブタン酸である。式（Ｉ）では、このヒドロキシル酸は、８位にある。それは、カルボン酸末端で、９位のα−アミノ酸、つまりＮ−メチル−ロイシンのアミノ基とアミド結合を形成し、ヒドロキシル末端で７位のα−アミノ酸、つまりアラニンまたはグリシンのカルボン酸基とエステル結合を形成する。
【００２５】
式（Ｉ）のα−アミノ酸は、アミノ酸を命名するために通常使用される３文字コードの略号を使用して呼ばれ、それらの配置は、特段の記載がない限りＬ配置である。残基のナンバリング（番号付け）は、上で定義されたとおりのＮ−メチル−（４Ｒ）−４−［（Ｅ）−２−ブテニル］−４−メチル−Ｌ−トレオニンまたはＭｅＢｍｔおよびその構造的誘導体を表すＡＸＸ１から始まる。メチル基Ｍｅまたはエチル基Ｅｔなどのアルキル基がアミノ酸の略号の前に現れる場合は、これは、このようなアルキル基がそのアミノ酸残基のアミノ基に固定されているということを意味する。
【００２６】
本発明に係る化合物の利点は、先行技術に記載されている対応するシクロウンデカペプチド化合物の通常の環状アミド骨格と比べた、大環状骨格の内部のエステル結合の影響にある可能性がある。理論に拘束されるわけではないが、７位のアミノ酸ＡＸＸ７と８位のＤ−ＨＩＶとの間のアミドをエステル結合で置き換えると、コンホメーション上の柔軟性の増加（Ｐ．Ｊ．Ｆｌｏｒｙ、Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｍｅｃｈａｎｉｃｓ ｏｆ Ｃｈａｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、Ｈａｎｓｅｒ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、ＮＹ、１９８８にある）および親油性の増加ならびに水素供与体結合の不存在などのコンホメーション上の特性および物理化学的特性に対して強い効果をもたらすと考えられている。
【００２７】
これらの構造的特徴は、ＣｓＡから誘導される類似体の種類と比べて、本発明の化合物の物理化学的特性、薬物動態特性および生物学的特性の顕著な差異に姿を変えて現れると考えられる。系統的なＳＡＲ研究において観察されたアミノ酸置換に対するより高い許容度についての可能な理論的解釈は、生理活性のコンホメーションに対するコンホメーション空間の増加にある可能性がある（Ｖ．Ｍｉｋｏｌら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（１９９８）２８３、４５１−４６１）。
【００２８】
先行技術のシクロウンデカペプチド類似体とは対照的に、米国特許第５，１１６，８１６号明細書、実施例２、または国際公開第０２／０９２０３３号パンフレット、実施例４、工程４−１のいずれかから得られるような、天然のシクロウンデカデプシペプチドの２位のアミノ酸と７位のアミノ酸との間の断片の中の位置での１つまたは複数の置き換えは、本発明の基準を満たす化合物の一覧によって明らかにされるように、サイクロフィリンへの高い結合能力の保持をもたらす。最も注目すべきことには、国際公開第２００６／０３８０８８号パンフレットに係る化合物、すなわち［Ｄ−ＭｅＡｌａ］３−［ＥｔＶａｌ］４−ＣｓＡ（Ｄｅｂｉｏ ０２５）と比べて２〜４倍までの、本発明の化合物についてのＣｙｐ Ａへの結合親和性の増加が観察された。
【００２９】
改善された活性なプロファイル（実施例５および実施例６を参照）とは別に、当該新しい種類の化合物は、とりわけ工業規模での改善された調製プロセスをももたらす。
【００３０】
本発明は、式Ｉの化合物の循環寿命（ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｌｉｆｅｔｉｍｅ）を延ばすための式Ｉの化合物の化学修飾をも包含する。この特性を有する適切なポリ（エチレングリコール）誘導体の例は、例えば米国特許出願公開第２００５１７１３２８号明細書（ＮＥＫＴＡＲ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ ＡＬ ＣＯＲＰ）または米国特許第６，７１３，４５４号明細書（ＮＯＢＥＸ ＣＯＲＰ）に記載されている。
【００３１】
より好ましくは、本発明の化合物は、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（ここで、Ｏｘはメチオニンの硫黄原子はスルホキシドまたはスルホンであることを意味する）、ＭｅＶａｌ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＭｅＴｙｒ、ＭｅＴｙｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＴｈｒ、ＭｅＴｈｒ（ＯｔＢｕ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＰｈｅであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｌａであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである、
式（Ｉ）によって定義される。
【００３２】
さらにより好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（ここで、Ｏｘは−ＳＯＭｅ、−ＳＯ２Ｍｅである）、ＭｅＶａｌ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＭｅＴｙｒであり；かつ
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである、
と定義される。
【００３３】
本発明の特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａであり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＶａｌ、ＥｔＶａｌであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、ＭｅＬｅｕ、Ｓａｒであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである、
と定義される。
【００３４】
本発明の最良の態様のうちの１つによれば、式（Ｉ）の化合物は以下の式：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｂ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｃ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｄ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＡｌａ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｅ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｆ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｇ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｈ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｉ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−Ｓａｒ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｋ）
を与える。
【００３５】
上に列挙された化合物は、本発明の最も重要な基準、つまり化学合成、薬理学的な特性、薬物動態プロファイルおよび毒物学的プロファイルの改善、の全体的な最適化に対応する。
【００３６】
注目すべきことには、これらの化合物は、Ｄｅｂｉｏ ０２５と比べてはるかに低い、ＭＲＰ２またはＯＡＴＰ１Ｂ１などの肝トランスポーターを阻害する効力を示す。それゆえ、これらの化合物は、潜在的な副作用（例えば高ビリルビン血症）、もしくは肝トランスポーターの阻害に関連する潜在的な薬物−薬物相互作用（例えばアトルバスタチンなどのＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤との）のいずれかを低減する、またはその両方でさえも低減することが予想される。
【００３７】
本発明のさらなる化合物は以下のとおりである：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＴｈｒ（ＯｔＢｕ）−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−Ｓａｒ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＡｌａ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＡｌａ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＴｈｒ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（ＯＭｅ）−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＴｙｒ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−Ｓａｒ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ａｌａ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＡｌａ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−Ｓａｒ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）。
【００３８】
注目する他の化合物は、以下の式：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（ＯＭｅ）−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（（８−ヒドロキシ）ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−（５−ＯＨ）Ｎｖａ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（ＯＲ）（Ｒ＝−ＣＯＣＨ３、−ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−ＯＨ）−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＳｅｒ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＳｅｒ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−（３−フルオロ）ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−（３−フルオロ）ＭｅＡｌａ−ＭｅＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＭｅｔ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（Ｏｘ＝−ＳＯＭｅ、−ＳＯ２Ｍｅ）−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＰｈｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＴｙｒ（ＯＲ）（Ｒ＝Ａｃ、Ｍｅ）−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＴｈｒ（ＯＲ）（Ｒ＝Ｍｅ、Ａｃ）−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−（３−フルオロ）ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ジヒドロ）ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（（８−ヒドロキシ）ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（（８−ヒドロキシ）ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
によって同定される。
【００３９】
本発明の化合物は、古典的なペプチド（溶液相または固相ペプチド合成；Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第Ｅ ２２ｄ巻、編集長：Ｍ．Ｇｏｏｄｍａｎ、Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ、シュトゥットガルト、２００３年にある）および有機化学またはバイオテクノロジーを応用することにより、例えばＷｅｎｇｅｒによってＨｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ、６７、５０２−２５、１９８４またはＨｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ、６６、２６７２−７０２（１９８３）に記載されているような化学ツールを応用することにより、ならびにＲｉｃｈ，Ｄ．Ｈ．ら、Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｕｐｌｉｎｇ ｏｆ Ｎ−ｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ，ｓｔｅｒｉｃａｌｌｙ ｈｉｎｄｅｒｅｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ ｄｕｒｉｎｇ ＳＰＰＳ、Ｔｅｔｒ． Ｌｅｔｔｅｒｓ、３５、５９８１−５９８４（１９９４）に記載されているように、ＨＡＴＵをカップリング試薬として用いることにより、得られうる。
【００４０】
例えば、可能性のある一般的スキームのうちの１つは、必要に応じて適切な保護基および活性化基を有する適切な残基を含有する２つの断片、つまり断片Ａおよび断片Ｂを調製し、調製の最後の工程でそれらを一緒に連結して、ウンデカペプチドを得て、次いでこれをシクロウンデカデプシペプチドへと環化するということにある。
【００４１】
例えば、断片（Ａｘ）は、以下のとおり：
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＡＸＸ１−ＯＨ （Ａｘ）
であってもよく、断片（Ｂｘ）は以下のとおり：
Ｈ−ＡＸＸ２−ＡＸＸ３−ＡＸＸ４−ＡＸＸ５−ＡＸＸ６−ＡＸＸ７−ＯＲ、（Ｒはアルキル基である） （Ｂｘ）
であってもよく、次いでＡｘおよびＢｘはウンデカデプシペプチドＡｘ−Ｂｘ、Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＡＸＸ１−ＡＸＸ２−ＡＸＸ３−ＡＸＸ４−ＡＸＸ５−ＡＸＸ６−ＡＸＸ７−ＯＲ（Ｒ＝アルキル、Ｈ）へとカップリングされ、
最終工程はマクロラクトン化である。
【００４２】
α−ヒドロキシ酸残基Ｄ−Ｈｉｖを含有する断片Ａは、天然のシクロウンデカデプシペプチド（つまり、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）の分解によって得てもよく、このシクロウンデカデプシペプチドの調製は、米国特許第５，１１６，８１６号明細書、実施例２、または国際公開第０２／０９２０３３号パンフレット、実施例４、工程４−１のいずれかに記載されている。
【００４３】
先行技術に対する本発明に係る化合物の優位点は、その活性なプロファイル（実施例５および６を参照）にだけでなく、とりわけ工業規模でのその改善された調製プロセスにもある。
【００４４】
１． 天然の化合物（ＣｓＡおよびシクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（図１を参照）から出発して、シクロウンデカデプシペプチド類似体の合成の全収率は、ＤＥＢＩＯ ０２５（国際公開第２００６／０３８０８８号パンフレットに記載されている［Ｄ−ＭｅＡｌａ］３−［ＥｔＶａｌ］４−ＣｓＡ、ＤＥＢＩＯＰＨＡＲＭ ＳＡ）についての２０％と比較して、＞５０％である。
【００４５】
２． 高価なジペプチド誘導体Ｂｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−ＯＨの合成（４つの化学工程を含む）は必要とされない。加えて、当該化合物のうちのいくつかはＣ末端グリシンを含有し（Ｉａ、Ｉｃ、Ｉｆ、Ｉｇ、Ｉｉ、Ｉｋ）、これは、合成の最後の工程（マクロラクトン化、エピマー化なし）を容易にする。
【００４６】
３． 試薬および出発化合物についてのコストは、本発明に係る化合物の場合はかなり低い。注目すべきことに、ＣｓＡの開環反応のために使用される「Ｍｅｅｒｗｅｉｎの試薬」は必要とされない。
【００４７】
４． 断片Ｂ（ヘキサペプチドＡＸＸ２−ＡＸＸ７）は、市販の出発化合物を使用して標準的な固相ペプチド合成によって効率的に得ることができる（図１を参照）。
【００４８】
５．天然の出発化合物からの断片Ａの調製、ならびに縮合（断片Ａと断片Ｂ）、大環状化および最終の精製の工程の最適化において、薬理学的に興味深い化合物を得るための全収率は、８０％にまで達することができる。
【００４９】
６． 全体としては、示された態様は、良好な有効性、およびその結果として、特に工業規模での本発明の化合物の合成に関して良好な商品原価をもたらす。
【００５０】
ＨＣＶの複製を阻害する本発明の化合物の能力はレプリコンアッセイにおいて示され、基本的に免疫抑制活性が存在しないことがＴ細胞増殖アッセイにおいて評価された（実施例５および６を参照）。
【００５１】
本発明に係る「非免疫抑制性」化合物は、シクロスポリンＡ（ＣｓＡ）よりも少なくとも３０倍少なく、好ましくは１５０倍未満、２００倍未満でさえ、好ましくは３００倍未満でさえも免疫抑制性（シクロスポリンＡのＩＣ５０（５０％阻害濃度）に対する当該化合物のＩＣ５０の比（ＩＣ５０化合物／ＩＣ５０ ＣｓＡ）として決定される）である化合物と理解されたい。理想的には、本発明の化合物は、コンカナバリン−Ａによって誘導されるＴ細胞増殖アッセイにおいてＣｓＡと少なくとも２ｌｏｇの差のインビトロでの非免疫抑制活性を有する。
【００５２】
従って、本発明の化合物は、特に抗ウイルス薬として、より具体的にはＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための医薬としての使用について考慮される。Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害は、例えば慢性肝炎、肝硬変または肝癌、例えば肝細胞癌である。本発明の化合物は、例えばＨＣＶ感染した母から生まれる新生児、またはそのウイルスに曝露される医療従事者、または移植後の再発する可能性があるＨＣＶ感染を排除するために、移植レシピエント、例えば器官もしくは組織移植レシピエント、例えば肝臓移植、の予防的処置として使用されてもよい。
【００５３】
「処置」は、治療的処置および予防的または防止的措置の両方を指す。処置を必要とするものには、すでに上記障害を有しているものおよびその障害が防止されるべきであるものが含まれる。従って、本発明で処置されるべき哺乳動物は、その障害を有するとすでに診断されていてもよいし、またはその障害に対する素因があるかもしくはその障害に対して感受性を有していてもよい。
【００５４】
処置の目的のための「哺乳動物」は、ヒト、家畜および農場動物またはペット動物（イヌ、ウマ、ネコ、ウシ、サルなど）を含めた哺乳動物として分類されるいずれかの動物を指す。好ましくは、この哺乳動物はヒトである。
【００５５】
用語「治療上有効量」は、哺乳動物において疾患または障害を処置するのに有効な薬物の量を指す。
【００５６】
本発明の化合物は、例えば予め濃縮されたマイクロエマルションに組み込まれて、必要とする患者に、例えば経口投与されてもよい。
【００５７】
本発明の化合物、使用できる場合にはそれらの薬学的に許容できる塩、およびそれらのプロドラッグは、Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するためにそれらが薬学的に許容できる補助剤、希釈剤または担体と合わせられた医薬組成物の形態で投与されてもよい。
【００５８】
本発明はまた、本願明細書中上記で定義された本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を、薬学的に許容できる補助剤、希釈剤または担体と合わせて含む医薬組成物を提供する。適切な賦形剤、希釈剤および補助剤に関しては、これらを記載する標準的な文献を、例えば「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ １９９０の第５巻の第２５．２章を、およびＨ．Ｐ．Ｆｉｅｄｌｅｒによる「Ｌｅｘｉｋｏｎ ｄｅｒ Ｈｉｌｆｓｓｔｏｆｆｅ ｆｕｅｒ Ｐｈａｒｍａｚｉｅ，Ｋｏｓｍｅｔｉｋ ｕｎｄ ａｎｇｒｅｎｚｅｎｄｅ Ｇｅｂｉｅｔｅ」、Ｅｄｉｔｉｏ Ｃａｎｔｏｒ、２００２を参照してもよい。
【００５９】
本発明の化合物はまた、例えばコアセルベーション技術によってまたは界面重合によって調製されるマイクロカプセル、例えば、それぞれヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセルおよびポリ（メタクリル酸メチル）マイクロカプセルの中に、コロイド状の薬物送達システム（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）の中に、またはマクロエマルションの中に、閉じ込められていてもよい。このような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、第１６版、Ｏｓｏｌ，Ａ．編（１９８０）に開示されている。
【００６０】
持続放出調剤が調製されてもよい。持続放出調剤の適切な例としては、本発明の化合物を含有する固体の疎水性ポリマーの半透性マトリクスが挙げられ、このマトリクスは成形品、例えばフィルム、またはマイクロカプセルの形態にある。持続放出マトリクスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（メタクリル酸２−ヒドロキシエチル）、またはポリ（ビニルアルコール）、ポリラクチド類（米国特許第３，７７３，９１９号明細書）、Ｌ−グルタミン酸および［γ］エチル−Ｌ−グルタメートの共重合体、非分解性エチレン−酢酸ビニル、医薬ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸共重合体および酢酸リュープロリドから構成される注射可能なミクロスフェア）を調製するために使用されるものなどの分解性乳酸−グリコール酸共重合体、ならびにポリＤ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。
【００６１】
本発明の１日用量は、処置される宿主、特定の投与経路、および処置しようとする疾病の重症度および種類に応じて必然的に変えられるであろう。従って、最適の投薬量は、いずれかの特定の患者を処置しようとする医師によって決定されてもよい。
【００６２】
局所投与；例えばエアロゾルもしくは乾燥粉末としての吸入による投与；例えば錠剤、カプセル、ゲル、シロップ、懸濁剤、液剤、散剤もしくは顆粒の形態での経口投与；例えば座薬としての直腸もしくは膣内投与；または滅菌された液剤、懸濁剤もしくは乳剤としての非経口注射（静脈内注射、皮下注射、筋肉注射、脈管内注射、もしくは点滴を含む）が意図される場合、本発明の医薬組成物は、クリーム、ゲル、液剤、軟膏剤、懸濁剤または硬膏剤などとして調合されてもよい。
【００６３】
本発明の活性化合物は、いずれかの従来の経路によって投与されてもよい。本発明の活性化合物は、例えば、注射可能な液剤または懸濁剤の形態で、または注射可能な蓄積製剤（ｄｅｐｏｓｉｔ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）の形態で非経口投与されてもよい。好ましくは、本発明の活性化合物は、飲用のための液剤もしくは懸濁剤、錠剤またはカプセルの形態で経口投与されるであろう。本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物を含む経口投与用の医薬組成物は、実施例に記載される。その実施例によって実証されるように、そのような医薬組成物は、典型的には、本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物と、１以上の薬学的に許容できる担体物質とを含む。典型的には、これらの組成物は、濃縮されており、投与に先立って適切な希釈剤、例えば、水と組み合わせられる必要がある。非経口投与用の医薬組成物もまた、典型的には１以上の賦形剤を含む。任意の賦形剤としては、等張剤、緩衝液または他のｐＨ調整剤、および防腐剤が挙げられる。これらの賦形剤は、当該組成物の維持のため、およびｐＨ（約６．５〜７．５）および浸透圧モル濃度（約３００ｍｏｓｍ／Ｌ）の好ましい範囲を達成するために添加されてもよい。経口投与用の製剤のさらなる例は、米国特許第５，５２５，５９０号明細書および米国特許第５，６３９，７２４号明細書、および米国特許出願公開第２００３／０１０４９９２号明細書に見出すことができる。経口経路によると、毎日〜週に３回（ｔｒｉｃｅ）の投与のための本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物の示される投薬量は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇであってもよい。静脈内経路によると、示される対応する投薬量は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇであってもよい。本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物の有効量は、治療計画の過程においてＨＣＶ感染の処置を必要とする患者に対して反復的に投与されたときに、その患者における血清ＨＣＶ力価の統計的に有意な低下または血清ＡＬＴ活性の有意な低下などの客観的な臨床反応をもたらす量であると理解される。
【００６４】
ＨＣＶ感染に対する本発明の化合物を含む医薬組成物の有効性を試験するための試験的な用量を決定するときに、臨床医によって多くの要因が考慮されることになろう。これらの中でも主なものは、選択された本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物の毒性および半減期である。さらなる要因としては、患者の体重、患者の年齢、患者の全般的な状態（非代償性肝疾患、重篤な先在する骨髄の機能低下および他のウイルス感染症を含めた重大な全身性疾患または重病を含む）、例えば血清アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）レベルによって示されるようなＨＣＶ感染の病期（急性 対 慢性）、ＨＣＶの特定の遺伝子型、ＨＣＶ感染の以前の治療、患者の中の他の薬物の存在などが挙げられる。治療過程は、本発明の医薬組成物の反復的な投与を必要とするであろう。典型的には、十分な薬物用量が週に３〜７回投与されることになり、処置の継続期間は、約４週間〜６ヶ月、好ましくは約４週間〜約１２ヶ月であってもよい。処置のあとに、血清中のＨＣＶの判定および血清ＡＬＴレベル測定が続いてもよい。処置の終点は、ウイルス学的反応、すなわち、処置の過程の最後に、処置の開始の数ヶ月後に、または処置の完結の数ヶ月後にＨＣＶが存在しないことである。血清中のＨＣＶは、定量的ＲＴ−ＰＣＲまたはノーザンブロットなどの方法によってＲＮＡレベルで、またはウイルスタンパク質の酵素イムノアッセイまたは増感化学発光イムノアッセイによってタンパク質レベルで測定されてもよい。この終点はまた、正常範囲での血清ＡＬＴレベルの判定を含んでもよい。
【００６５】
本発明の医薬組成物は、本発明の化合物に加えて、例えば、別の抗ウイルス性薬物物質、例えば、リバビリン、またはインターフェロンαなどのＨＣＶ感染に対して活性な１以上の他の成分を含んでもよい。本発明の化合物およびこのような他の活性成分は、同じ医薬組成物の部分として一緒に投与することができるし、または併用療法の恩恵を得るように設計された適切な用法の部分として別々に投与することができる。適切な用法、投与された各用量の量、および各活性薬剤の用量間の具体的な間隔は、用いられる活性薬剤の特定の組み合わせ、治療されようとする患者の状態、および上記のセクションで論じられた他の要因に応じて変わるであろう。このようなさらなる活性成分は、それらが単独の治療薬として有効である量以下の量で一般に投与されるであろう。ヒトへの投与についてＦＤＡの承認を受けたこのような活性薬剤についてのＦＤＡが承認する投薬量は、公的に利用できる。
【００６６】
本発明の化合物は、単独の成分として、あるいは他の薬物、例えば抗ＨＣＶ活性を有する薬物、例えばインターフェロン、例えばインターフェロン−α−２ａもしくはインターフェロン−α−２ｂ、例えばＩｎｔｒｏｎ Ａ（登録商標）、Ｒｏｆｅｒｏｎ（登録商標）、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）、Ｒｅｂｉｆ（登録商標）またはＢｅｔａｆｅｒｏｎ（登録商標）、または水溶性のポリマーもしくはヒトアルブミンに接合されたインターフェロン、例えばＡｌｂｕｆｅｒｏｎ（登録商標）（Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｏｍｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ）、抗ウイルス薬、例えばリバビリン、ラミブジン、ＮＶ０８もしくはＮＭ２８３、ＨＣＶコード化因子（ＨＣＶ ｅｎｃｏｄｅｄ ｆａｃｔｏｒ）（ＮＳ３−４Ａセリンプロテアーゼ、ヘリカーゼもしくはＲＮＡポリメラーゼなど）の阻害剤またはこのような阻害剤のプロドラッグ、抗線維化剤、例えばＮ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体、例えばイマチニブ、免疫調節剤、例えばミコフェノール酸、その塩もしくはプロドラッグ、例えばミコフェノール酸ナトリウムもしくはミコフェノール酸モフェチル、またはＳ１Ｐ受容体作動薬、例えばＦＴＹ７２０もしくは任意にリン酸化されているその類似体、例えば欧州特許第６２７４０６（Ａ１）号明細書、欧州特許第７７８２６３（Ａ１）号明細書、欧州特許第１００２７９２（Ａ１）号明細書、国際公開第０２／１８３９５号パンフレット、国際公開第０２／７６９９５号パンフレット、国際公開第０２／０６２６８号パンフレット、特開２００２−３１６９８５号公報、国際公開第０３／２９１８４号パンフレット、国際公開第０３／２９２０５号パンフレット、国際公開第０３／６２２５２号パンフレットおよび国際公開第０３／６２２４８号パンフレット（これらは、参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする）に開示されているものと一緒に投与されてもよい。
【００６７】
特定の実施形態では、本発明で使用される例示的なインターフェロンは、Ｉｎｔｒｏｎ−Ａ（登録商標）；ＰＥＧ−Ｉｎｔｒｏｎ（登録商標）；Ｒｏｆｅｒｏｎ（登録商標）；Ｐｅｇａｓｙｓ（登録商標）；Ｂｅｒｅｆｏｒ（登録商標）；Ｓｕｍｉｆｅｒｏｎ（登録商標）；Ｗｅｌｌｆｅｒｏｎ（登録商標）；Ｉｎｆｅｒｇｅｎ（登録商標）；Ａｌｆｅｒｏｎ（登録商標）；Ｖｉｒａｆｅｒｏｎ（登録商標）；Ａｌｂｕｆｅｒｏｎ（登録商標）（Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｏｍｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ）；Ｒｅｂｉｆ；Ｏｍｎｉｆｅｒｏｎ；Ｏｍｅｇａおよびこれらの組合せからなる群から選択される。
【００６８】
水溶性のポリマーへのインターフェロンの接合体は、とりわけ、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリプロピレングリコールなどのポリアルキレンオキシドホモポリマー、ポリオキシエチレン化ポリオール、それらの共重合体およびそれらのブロック共重合体への接合体を含むことを意味する。ポリアルキレンオキシドベースのポリマーの代替物として、デキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、炭水化物ベースのポリマーなどの有効な非抗原性物質を使用することができる。このようなインターフェロン−ポリマー接合体は、米国特許第４，７６６，１０６号明細書；米国特許第４，９１７，８８８号明細書、欧州特許出願公開第０ ２３６ ９８７号明細書、欧州特許出願公開第０ ５１０ ３５６号明細書および国際公開第９５／１３０９０号パンフレットに記載されている。ポリマーによる修飾によって十分に抗原反応が低減するため、外来性のインターフェロンは、完全に自系のもの（ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ）である必要はない。ポリマー接合体を調製するために使用されるインターフェロンは、哺乳類の抽出物、例えばヒト、反芻動物またはウシのインターフェロンから調製されてもよいし、または組み換えにより産生されてもよい。インターフェロンの他の形態としては、インターフェロンβ、γ、τおよびω、例えばＳｅｒｏｎｏによるＲｅｂｉｆ（インターフェロンβ １ａ）、ＶｉｒａｇｅｎによるＯｍｎｉｆｅｒｏｎ（天然のインターフェロン）、またはＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ ＩｎｇｅｌｈｅｉｍによるＯｍｅｇａ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎが挙げられる。Ａｍａｒｉｌｌｏ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓによる経口用インターフェロンαなどの経口用インターフェロン。ペグ化されたインターフェロンとしても公知の、ポリエチレングリコールへのインターフェロンの接合体も好ましい。
【００６９】
インターフェロンのとりわけ好ましい接合体は、ペグ化されたα−インターフェロン、例えばペグ化されたインターフェロン−α−２ａ、ペグ化されたインターフェロン−α−２ｂ；ペグ化されたコンセンサスインターフェロンまたはペグ化された精製されたインターフェロン−ａ生成物である。ペグ化されたインターフェロン−α−２ａは、例えば欧州特許第５９３，８６８号明細書に記載されており、例えば商標名ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標） （Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ）で市販されている。ペグ化されたインターフェロン−α−２ｂは、例えば欧州特許第９７５，３６９号明細書に記載されており、例えば商標名ＰＥＧ−ＩＮＴＲＯＮ Ａ（登録商標） （Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ）で市販されている。ペグ化されたコンセンサスインターフェロンは国際公開第９６／１１９５３号パンフレット（参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする）に記載されている。好ましいペグ化されたα−インターフェロンはペグ化されたインターフェロン−α−２ａおよびペグ化されたインターフェロン−α−２ｂである。ペグ化されたコンセンサスインターフェロンも好ましい。
【００７０】
使用される助剤（ｃｏ−ａｇｅｎｔ）に関する１日の投薬量は、例えば、用いられる化合物、宿主、投与方法および治療されるべき状態の重症度に応じて変わるであろう。例えば、ラミブジンは、１００ｍｇの１日投薬量で投与されてもよい。
【００７１】
ペグ化されたインターフェロンは、週に１〜３回、好ましくは週に１回、２×１０６〜１０×１０６ＩＵ、より好ましくは５×１０６〜１０×１０６ＩＵ、最も好ましくは８×１０６〜１０×１０６ＩＵの範囲の合計の一週用量で非経口投与されてもよい。これは、週に１回、週に３回、一日おきにまたは毎日ベースで、週に０．５〜２．０マイクログラム／キログラムに相当する。
【００７２】
他の実施形態では、インターフェロンαはペグ化されたインターフェロンα−２ａであり、投与されるペグ化されたインターフェロンα−２ａの量は、週に１回、週に３回、一日おきにまたは毎日ベースで、週に２０〜２５０マイクログラム／キログラムである。好ましくは、インターフェロンペグ−ＩＦＮａ２ａは、週に１回、１８０μｇの量で投与される。
【００７３】
ＨＣＶの処置のために典型的に使用される抗ウイルス薬も、本発明に係る組み合わせの中に包含される。このような薬剤としては、哺乳動物の中でのウイルスの形成および／または複製を阻害するのに有効である化合物または生物学的製剤が挙げられる。これには、Ｖａｌｅａｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州、コスタメサ（Ｃｏｓｔａ Ｍｅｓａ）製のリバビリン（１−β−Ｄ−リボフラノシル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−カルボキシアミド）；Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ニュージャージー州、ケニルワース（Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ）製のＲｅｂｅｔｏｌ（登録商標）、およびＨｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ、ニュージャージー州、ナットリー（Ｎｕｔｌｅｙ）製のＣｏｐｅｇｕｓ（登録商標）、開発中のリバビリン類似体（ＶａｌｅａｎｔによるＬｅｖｏｖｉｒｉｎおよびビラミジン（Ｖｉｒａｍｉｄｉｎｅ）、およびミゾリビン一リン酸など）などの薬剤が含まれる。
【００７４】
加えて、本発明の組み合わせは、ＨＣＶ ＮＳ３−４Ａセリンプロテアーゼの基質ベースのプロテアーゼ阻害剤、基質ベースでないＮＳ３プロテアーゼ阻害剤；ＨＣＶ感染に対して活性を有することが示されているフェナントレンキノン、チアゾリジン類およびベンズアニリド類などの投与をさらに含んでもよい。
【００７５】
ＨＣＶの処置のためのプロテアーゼ阻害剤は、例えば米国特許第６，００４，９３３号明細書（Ｓｐｒｕｃｅら）；米国特許第５，９９０，２７６号明細書（Ｚｈａｎｇら）；米国特許第５，５３８，８６５（Ｒｅｙｅｓら）；国際公開第０２／００８２５１号パンフレット（Ｃｏｒｖａｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）、国際公開第０２／０８１８７号パンフレットおよび国際公開第０２／００８２５６号パンフレット（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）；米国特許第６，５３４，５２３号明細書、６，４１０，５３１号明細書および米国特許第６，４２０，３８０号明細書（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）および国際公開第０２／０６０９２６号パンフレット（Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）；国際公開第０２／４８１７２号パンフレットおよび国際公開第０２／１８１９８号パンフレット（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）；国際公開第０２／４８１５７号パンフレットおよび国際公開第０２／４８１１６号パンフレット（Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）；国際公開第９８／１７６７９号パンフレット（Ｖｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）（これらはすべて参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする）に開示されている。
【００７６】
ＲＤ３−４０８２およびＲＤ３−４０７８を含めた２，４，６−トリヒドロキシ−３−ニトロ−ベンズアミド誘導体（Ｓｕｄｏ Ｋ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、１９９７、２３８ ６４３−６４７；Ｓｕｄｏ Ｋ．ら Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、１９９８、９、１８６）などの例示となる基質ベースでないＮＳ３プロテアーゼ阻害剤が使用されてもよい。
【００７７】
ＨＣＶ治療において有効であると示されているさらなる実験的薬剤としては、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ ＩｎｇｅｌｈｅｉｍによるＨＣＶ ＮＳ３−４Ａセリンプロテアーゼ阻害剤ＢＩＬＮ ２０６１、ＶｅｒｔｅｘによるＶＸ−９５０、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−ＰｌｏｕｇｈによるＳＣＨ−６、ＳＣＨ−７、およびＳＣＨ−３５１６３３、ならびにＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ、Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ、Ａｂｂｏｔ、Ｒｏｃｈｅ、Ｍｅｒｃｋ、Ｐｆｉｚｅｒ、およびＧｉｌｅａｄによる前臨床開発および臨床開発中の他のＨＣＶプロテアーゼ阻害剤が挙げられる。本願明細書に記載される本発明の組み合わせにおいて有用である可能性がある、ＨＣＶの処置のために現在臨床開発中のさらなる薬剤としては、ＴＭＣ ４３５３５０（Ｔｉｂｏｔｅｃ）およびＩＴＭ−１９１（Ｉｎｔｅｒｍｕｎｅ）が挙げられる。
【００７８】
ヌクレオシド類似体も使用してよい。１つのこのような類似体の一例は、Ｉｄｅｎｉｘによるテルビブジン（米国特許第６４４４６５２号明細書、米国特許第６５９６７００号明細書、および国際公開第０１９６３５３号パンフレット）である。ＨＣＶ ＮＳ５Ｂ ＲＮＡ依存的ＲＮＡポリメラーゼのヌクレオシド阻害剤または非ヌクレオシド阻害剤、例えば国際公開第２００４／００２４２２号パンフレットに開示される２’−Ｃ−メチル−３’−Ｏ−Ｌ−バリンエステルリボフラノシルシチジン（ＮＭ２８３、Ｉｄｅｎｉｘ）も使用されてもよい。国際公開第０１／９０１２１号パンフレットおよび国際公開第０１／９２２８２号パンフレット（Ｉｄｅｎｉｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）に開示される分岐したヌクレオシドも使用してもよい。これらの国際特許出願の内容は、参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする。
【００７９】
さらなる治療用化合物として、ＨＣＶゲノムに対するアンチセンス分子、または治療の有効性を高める、ＨＣＶゲノムのいずれかの部分に相補的なアンチセンス配列を挙げてもよい。
【００８０】
Ｍｉｇｅｎｉｘによる糖タンパク質プロセシング阻害剤であるセルゴシビル（Ｃｅｌｇｏｓｉｖｉｒ）（ＭＢＩ ３２５３）、Ｔｒｉｍｅｒｉｓによる融合阻害剤、ＡｃｈｉｌｌｉｏｎによるＡＣＨ−０１３７１７１などのＨＣＶ生活環の中の他の標的の阻害剤も企図される。Ｔｏｌｌ様受容体（「ＴＬＲ」）作動薬などの受容体作動薬としては、ＡｎａｄｙｓによるＡＮＡ２４５、ＡＮＡ９７１、ＡＮＡ９７５（米国特許第５０４１４２６号明細書、米国特許第４８８０７８４号明細書）；ＣｐＧ−１０１０１、ＴＬＲ−９作動薬（Ｃｏｌｅｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＩＭＰＤＨ阻害剤、ミコフェノール酸、その塩もしくはプロドラッグ、ミコフェノール酸ナトリウムまたはミコフェノール酸モフェチル、またはメリメボジブ（Ｍｅｒｉｍｅｂｏｄｉｂ）（ＶＸ−４９７、Ｖｅｒｔｅｘによる）；チモシンα−１（Ｚａｄａｘｉｎまたはその合剤（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）、ＳｃｉＣｌｏｎｅによる）；ＳＣＶ−０７（ＳｃｉＣｌｏｎｅ）、Ｂｅｌｅｒｏｆｏｎ（Ｎａｕｔｉｌｕｓによる改良されたＩＦＮ−α）；ＮＡＢＩによるＣＩＶＡＣＩＲ（Ｃ型肝炎免疫グロブリン）、またはＳ１Ｐ受容体作動薬、例えばＦＴＹ７２０または任意にリン酸化されているその類似体、例えば欧州特許第６２７４０６（Ａ１）号明細書、欧州特許第７７８２６３（Ａ１）号明細書、欧州特許第１００２７９２（Ａ１）号明細書、国際公開第０２／１８３９５号パンフレット、国際公開第０２／７６９９５号パンフレット、国際公開第０２／０６２６８号パンフレット、特開２００２−３１６９８５号公報、国際公開第０３／２９１８４号パンフレット、国際公開第０３／２９２０５号パンフレット、国際公開第０３／６２２５２号パンフレットおよび国際公開第０３／６２２４８号パンフレットに開示されているもの（これらの特許文献の開示は参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする）；３Ｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによるレシキモド（Ｒｅｓｉｑｕｉｍｏｄ）［ＶＭＬ ６００］、インターフェロン−αおよび他のサイトカインの強力な誘導因子であるイミキモド類似体、が挙げられる。加えて、本発明の化合物は、インターロイキン−１０（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）、Ｅｎｄｏ Ｌａｂｓ ＳｏｌｖａｙによるＡＭＡＮＴＡＤＩＮＥ（Ｓｙｍｍｅｔｒｅｌ）、Ｉｄｕｎ Ｐｈａｒｍａによるカスパーゼ阻害剤ＩＤＮ−６５５６、ＣｈｉｒｏｎによるＨＣＶ／ＭＦ５９、ＭａｘｉｍによるＣＥＰＬＥＮＥ（ヒスタミン二塩酸塩）、Ｉｄｕｎ ＰＨＡＲＭによるＩＤＮ−６５５６、Ｔ６７、Ｔｕｌａｒｉｋによるβチューブリン阻害剤、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＨｅａｌｔｈｃａｒｅによるＦＫ７８８、ＩｄＢＩ ０１６（Ｓｉｌｉｐｈｏｓ、経口用シリビン−ホスファチジルコリンフィトサム（ｐｈｙｔｏｓｏｍｅ））、ＩｍｍｔｅｃｈによるＤｉｃａｔｉｏｎ、Ａｅｔｈｌｏｎ Ｍｅｄｉｃａｌによるｈｅｍｏｐｕｒｉｆｉｅｒ、Ｕｎｉｔｅｄ ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓによるＵＴ ２３１ Ｂ；ＨｅｐｅＸ−Ｃ ＳＭ１、ＢａｙｅｒによるＰＰＶＯ−Ｂａｙ５５−８８００（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ）；ＡｎｇｉｏｎによるＲｅｆａｎａｌｉｎ（ＨＧＦ模倣薬）、Ｒ８０３（Ｒｉｇｅｌ）、ＪＴＫ−００３、ＪＴＫ−００２、およびＪＴＫ−１０９（すべて日本たばこ産業製）、ＨＣＶ−０８６（ＶｉｒｏＰｈａｒｍａ／Ｗｙｅｔｈ）、ＩＳＩＳ−１４８０３（ＩＳＩＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＧＳ−９１３２（Ａｃｈｉｌｌｉｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによるポリメラーゼ阻害剤）、ＨＣＶ−７９３（ＰｈａｒｍａｓｓｅｔおよびＲｏｃｈｅ）、Ｒ１６２６（Ｒｏｃｈｅ）と組み合わせて使用してもよい。
【００８１】
注目する他の化合物としては、ウルソジオール（Ｕｒｓｏｄｉｏｌ）（欧州特許第００２６９５１６号明細書、Ａｘｃａｎ Ｐｈａｒｍａ）、ＨＥ−２０００（ＤＨＥＡ類似体、Ｃｏｌｔｈｕｒｓｔ Ｌｔｄ）、ＥＨＣ−１８（免疫調節剤、Ｅｎｚｏ ｂｉｏｃｈｅｍ）、ヒスタミン二塩酸塩（Ｈ２作動薬、国際公開第０９１０４０３７号パンフレット、Ｅｓｔｅｒｏ−Ａｎｓｔａｌｔ）、ニタゾキサニド（Ｒｏｍａｒｋ）、１−アミノ−アルキルシクロヘキサン（米国特許第６，０３４，１３４号明細書）、アルキル脂質（米国特許第５，９２２，７５７号明細書）、ビタミンＥおよび他の抗酸化物質（米国特許第５，９２２，７５７号明細書）、胆汁酸（米国特許第５，８４６，９６４号明細書）、Ｎ−（ホスホノアセチル）−Ｌ−アスパラギン酸（米国特許第５，８３０，９０５号明細書）、ベンゼンジカルボキシアミド類（米国特許第５，６３３，３８８号明細書）、ポリアデニル酸誘導体（米国特許第５，４９６，５４６号明細書）、２’３’−ジデオキシイノシン（米国特許第５，０２６，６８７号明細書）、ベンゾイミダゾール類（米国特許第５，８９１，８７４号明細書）、植物エキス（米国特許第５，８３７，２５７号明細書；米国特許第５，７２５，８５９号明細書および米国特許第６，０５６，９６１号明細書）およびピペリジン類（米国特許第５，８３０，９０５号明細書）；Ｎ−（ホスホノアセチル）−Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンジカルボキシアミド類、ポリアデニル酸誘導体、グリコシル化阻害剤、およびウイルス感染によって引き起こされる細胞傷害をブロックする非特異的細胞保護剤が挙げられる。
【００８２】
また本発明に係る化合物は、ＨＣＶ処置に向けたワクチンまたは抗体に基づくアプローチと組み合わせて用いられてもよい。治療ワクチンとしては、Ｉｎｔｅｒｃｅｌｌによるワクチン（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅ ｖａｃｃｉｎｅ ＩＣ４１ ＨＣＶ）、Ｅｐｉｍｍｕｎｅ／Ｇｅｎｅｃｏｒ、Ｍｅｒｉｘ、Ｔｒｉｐｅｐ（Ｃｈｉｒｏｎ−ＶａｃＣ）、Ａｖａｎｔによる免疫療法（Ｔｈｅｒａｐｏｒｅ）、ＣｅｌｌＥｘＳｙｓによるＴ細胞療法、ＳＴＬによるモノクローナル抗体ＸＴＬ−００２、ＡｎａｄｙｓによるＡＮＡ ２４６およびＡＮＡ ２４６、ＩｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓによるＥ２に向けた治療ワクチン、ＸＴＬ ＢｉｏによるＥ２外被タンパク質に対するｍＡｂ（モノクローナル抗体）、ＧＩ−５００５（ＧｌｏｂｅＩｍｍｕｎｅ Ｉｎｃ）、ＩｎｎｏＶａｃ−Ｃ（国際公開第９９６７２８５号パンフレット、Ｉｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＣ−４１（Ｉｎｔｅｒｃｅｌｌ）、インターフェロンα−ｎ３（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）が挙げられる。
【００８３】
上記の内容に従って、本発明は、なおさらなる態様では、少なくともａ）本発明の化合物または本発明に係る医薬組成物からなる第１の薬剤と、ｂ）ＨＣＶ複製に対して作用するという特性を有する第２の薬剤とを含む医薬的組み合わせを提供する。
【００８４】
特に、この医薬的組み合わせは、Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害の予防または処置において使用するためのものである。
【００８５】
また、必要とする対象においてＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための方法であって、当該対象に、治療上有効量の本発明の化合物または本発明の医薬組成物を投与することを含む方法も包含される。
【００８６】
加えて、必要とする患者においてＨＣＶ複製を阻害する方法であって、当該対象に、治療上有効量の本発明の化合物または本発明の医薬組成物を投与することを含む方法が提供される。
【００８７】
本発明の別の対象は、治療上有効量の本発明に係る化合物または本発明の医薬組成物および抗ＨＣＶ特性を有する薬剤から選択される助剤の、相伴うかまたは逐次的な同時投与を含む方法である。
【００８８】
本願明細書で用いられる場合の用語「同時投与」または「併用投与」などは、単一の患者への選択された治療薬の投与を包含することを意図し、その薬剤が必ずしも同じ投与経路によってまたは同じ時に投与されるわけではない処置計画を含むことが意図されている。
【００８９】
本発明の医薬的組み合わせの投与は、有益な効果、例えばその医薬活性成分のうちの１つのみを施用する単独療法と比べた相乗的な治療効果をもたらす。好ましい相乗的な組み合わせは、本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物と、任意にポリマーに接合されているインターフェロンとの組み合わせである。
【００９０】
さらなる好ましい組み合わせは、本発明に係る式Ｉの化合物とミコフェノール酸、その塩もしくはプロドラッグとの、またはＳ１Ｐ受容体作動薬、例えばＦＴＹ７２０との組み合わせである。
【００９１】
本願明細書において引用されたすべての特許、特許出願および刊行物は、参照によりその全体を援用したものと見なされるものとする。
【００９２】
当業者なら、本願明細書に記載される発明は、具体的に記載されたもの以外の変更および改変を受ける余地があるということはわかるであろう。本発明は、本発明の技術思想または本質的な特徴から逸脱しないすべてのそのような変更および改変を包含するということを理解されたい。また、本発明は、本願明細書の中で言及されまたは示された工程、特徴、組成物および化合物のすべてを、個々にまたはまとめて、そしてその工程または特徴のいずれかのおよびすべての組み合わせまたはいずれか２以上を包含する。それゆえ、本開示は、すべての態様において、例証されたものであって限定するものではないと考えられるべきであり、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によって示され、均等の意味および範囲に含まれるすべての変更は本発明の中に包含されるということが意図されている。
【００９３】
種々の参考文献が本願明細書全体にわたって引用され、それらの各々は、参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする。
【００９４】
上記の説明は、以下の実施例を参照してより十分に理解されるであろう。しかしながら、そのような実施例は、本発明を実施する方法を例示するものであり、本発明の範囲を限定することは意図されていない。
【実施例】
【００９５】
実施例１ａ：
シクロウンデカデプシペプチド（Ｉａ）：シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）の調製
１． 天然のシクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）から出発する断片（Ａａ）の調製（米国特許第５，１１６，８１６号明細書、実施例２、または国際公開第０２／０９２０３３号パンフレット）、実施例４、工程４−１を参照）：
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（Ａａ）
【００９６】
１．１ 変異体Ａ
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（１Ａ）の調製
１５ｍＬの無水ＣＨ２Ｃｌ２中のシクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（米国特許第５，１１６，８１６号明細書、実施例２、または国際公開第０２／０９２０３３号パンフレット、実施例４、工程４−１）（３．００ｇ、２．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）および１，１’−カルボニルジイミダゾール（１．１７ｇ、７．２１ｍｍｏｌ、３．０当量）の溶液を室温で２．５時間撹拌した。反応の進行を分析用ＵＰＬＣによってモニターした。８１．１％反応率を得た。さらなる量の１，１’−カルボニルジイミダゾール（０．３９ｇ、２．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）を、この反応混合物に加えた。さらに１６時間撹拌した後、９８．８％反応率を得た。この溶液を減圧下でエバポレーションした。残渣をＡｃＯＥｔ（４５ｍＬ）に溶解し、１０％ クエン酸（４５ｍＬ）およびブライン（４５ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションし、２つの化合物（１Ａ）および（２Ａ）の混合物を白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：（１Ａ）：１３４２．７５［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６８Ｈ１１７Ｎ１２Ｏ１５］＋；計算値１３４２．７３）、（２Ａ）：１２７４．７７［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６５Ｈ１１３Ｎ１０Ｏ１５］＋；計算値１２７４．６５）。
【００９７】
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ，Ｎ−カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（２Ａ）の調製
乾燥ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中の、上記の反応で得た化合物（１Ａ）（３．４１ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）の溶液を撹拌し、アルゴン雰囲気下、１００℃で２時間加熱した。反応の進行を分析用ＵＰＬＣによってモニターした。完全反応率を得た．その後、この溶液をＡｃＯＥｔ（４５ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ １Ｍ（３０ｍＬ）および２３．２％ ＮａＣｌ水溶液（１５ｍＬ）、次いで１１．６％ ＮａＣｌ水溶液（４５ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションし、シクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ，Ｎ−カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（２Ａ）を白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１２７４．６５［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６５Ｈ１１３Ｎ１０Ｏ１５］＋；計算値１２７４．６５。
【００９８】
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＭｅ（断片（Ａａ）メチルエステル（３Ａ）の調製
０℃に冷却した３０ｍＬのＭｅＯＨ（乾燥）中の、上記の反応で得たシクロデプシペプチド（１．００ｇ、０．７８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃａ（ＯＭｅ）２（０．２４ｇ、２．３５ｍｍｏｌ）をアルゴン下で一度に加えた。０℃で５時間、次いで室温で１時間後、ＵＰＬＣによる反応の進行のコントロールから、９８．６％反応率が示された。この溶液を０℃で冷却し、次いで１０％クエン酸の水溶液で中和した。メタノールをエバポレーションした。この水性混合物をＡｃＯＥｔ／ＮａＣｌ ２３．２％（１：１ ｖ／ｖ）の混合物１００ｍＬの中へと注ぎ込んだ。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をカラムクロマトグラフィーによって分離し、ペンタペプチド−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＭｅ（３Ａを得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：６６９．１６［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３５Ｈ６５Ｎ４Ｏ８］＋；計算値６６９．４８）。
【００９９】
断片（Ａａ）Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（４）の調製
ＴＨＦ（８．６ｍＬ）および水（１．１ｍＬ）中の、上記の反応で得たペンタペプチド（３Ａ）（１．１５ｇ、１．７２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を氷水浴の中で０℃に冷却し、次いで２０秒以内に２Ｍ ＬｉＯＨ（１．７２ｍＬ、３．４４ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。次いで冷却浴を取り除き、この混合物（ｐＨ＝１２〜１３）を室温で約３時間撹拌した。ＵＰＬＣによる反応の進行のコントロールから、完全反応率が示される。その後、この溶液を０℃に冷却し、１０％ クエン酸で中和した。テトラヒドロフランを減圧下でエバポレーションした。残渣をＡｃＯＥｔ（５０ｍＬ）に溶解し、１０％ クエン酸（３ｍＬ）および２３．２％ ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）（ｐＨ ３）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションし、断片（Ａａ）Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（４）を白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６５５．２１［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３４Ｈ６３Ｎ４Ｏ８］＋；計算値６５５．４６）。
【０１００】
１．２ 変異体Ｂ
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＭｅＯＨ（９０ｍＬ）中の天然のシクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（米国特許第５，１１６，８１６号明細書、実施例２、または国際公開第０２／０９２０３３号パンフレット、実施例４、工程４−１のいずれかから得られる）（３．０ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下でＭｅＯＮａ（０．５１９ｇ、９．６ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた。０℃で１時間、次いで室温で２時間後、ＨＰＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この溶液を０℃で冷却し、次いで１０％ クエン酸の水溶液で中和した（ｐＨ ５〜６）。メタノールをエバポレーションした。この水性混合物を１５０ｍＬの酢酸エチルの中へと注ぎ込んだ。有機層をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。真空中での溶媒のエバポレーションおよびシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーにより、純粋なＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを得た。
【０１０１】
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（１Ｂ）の調製
５３ｍＬの無水ＣＨ２Ｃｌ２中の、上記の反応で得たウンデカペプチド（２．９６ｇ、２．３１ｍｍｏｌ、１．０当量）および１，１’−カルボニルジイミダゾール（１．５０ｇ、９．２５ｍｍｏｌ、４．０当量）の溶液を室温で２２時間撹拌した。反応の進行を分析用ＨＰＬＣおよびＴＬＣによってモニターした。この溶液を減圧下でエバポレーションした。残渣を１５０ｍＬの酢酸エチルに溶解し、１０％ クエン酸（３０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（１Ｂ）を白色粉末として得た。
【０１０２】
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ，Ｎ−カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（２Ｂ）の調製
乾燥ＤＭＳＯ（４０ｍＬ）中の、上記の反応で得たウンデカペプチド（３．２６ｇ、２．２２ｍｍｏｌ）の溶液を撹拌し、アルゴン雰囲気下、１００℃で３．５時間加熱した。反応の進行をＴＬＣおよび分析用ＨＰＬＣによってモニターした。その後、この溶液を、ＡｃＯＥｔ（２００ｍＬ）に溶解し、１０％ クエン酸水溶液（２回、３０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（１×３０ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。溶媒のエバポレーション後の残渣を高真空の中で乾燥し、ウンデカペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ，Ｎ−カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（２Ｂ）を白色粉末として得た。
【０１０３】
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＭｅ（３Ｂ）の調製
０℃に冷却した１００ｍＬのＭｅＯＨ（乾燥）中の、上記の反応で得たウンデカペプチド（２Ｂ）（３．０５ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＫ（０．４５６ｇ、６．５３ｍｍｏｌ）をアルゴン下で一度に加えた。０℃で１時間、次いで室温で１時間後、ＨＰＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この溶液を０℃で冷却し、次いで１０％ クエン酸の水溶液で中和した。メタノールをエバポレーションした。この水性混合物をＡｃＯＥｔ／Ｈ２Ｏ（１：１ ｖ／ｖ）の混合物１００ｍＬの中へと注ぎ込んだ。有機層をＨ２Ｏ（１×１０ｍＬ）およびブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物を分取ＨＰＬＣによって分離し、ペンタペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＭｅ（３Ｂ）を得た。
【０１０４】
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（４、断片Ａａ）の調製
ＴＨＦ（１８．８ｍＬ）中の、上記の反応で得たペンタペプチド（１．２６５ｇ、１．８８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を氷水浴の中で０℃に冷却し、次いで０．２Ｍ ＬｉＯＨ（１８．８ｍＬ、３．６６ｍｍｏｌ、２．０当量）を２０分間にわたって滴下した。次いで冷却浴を取り除き、この混合物（ｐＨ＝１２〜１３）を室温で約２．５時間撹拌した（ＴＬＣコントロール）。その後、この溶液を０℃に冷却し、０．１Ｍ ＨＣｌ（ｐＨ ２〜３）で中和した。テトラヒドロフランを減圧下でエバポレーションした。残渣をＡｃＯＥｔ（１００ｍＬ）に溶解し、１０％ クエン酸（１×２０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×２０ｍＬ）およびブライン（１×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、ペンタペプチド（ナトリウム塩）Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＮａを白色粉末として得た。
ＨＲ−ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：６７７．４６［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ３４Ｈ６２Ｎ４ＮａＯ８］＋；計算値６７７．４４６５）。
【０１０５】
２． 断片（Ｂａ）の調製：
Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅ（Ｂａ）
２．１． Ｂｏｃ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（２４０ｍＬ）中の市販のＨ−Ｇｌｙ−ＯＭｅ・ＨＣｌ（４．０ｇ、３１．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（３２．８８ｍＬ、１８９．０ｍｍｏｌ、６．０当量）を加えた。その後、１５分後に、ＨＡＴＵ（１５．７２ｇ、４１．３４ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−ＭｅＬｅｕ−ＯＨ（７．８ｇ、３１．８ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で２２．４５時間後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（４００ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×８０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×８０ｍＬ）およびブライン（１×８０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物を分離し、エステルＢｏｃ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを白色の油状フォーム状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３３９．０２３４［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ１５Ｈ２８Ｎ２ＮａＯ５］＋；計算値３３９．１８９６）。
【０１０６】
２．２． Ｈ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（３０ｍＬ、２：３ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たジペプチド（９．９ｇ、３１．２９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃に４５分間、室温で２時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（２０分間）。その後、ＤＣＭ（６０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡ（２．０ｍＬ）を用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、ジペプチドＨ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）２１７．０５４６［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ１０Ｈ２１Ｎ２Ｏ３］＋；計算値２１７．１５５２）。
【０１０７】
２．３． Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１６０ｍＬ）中の、上記の反応で得たジペプチド（３．３８ｇ、１５．６３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（８．０８ｍＬ、４６．８９ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（７．７２ｇ、２０．１４ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（３．９８ｇ、１７．１９ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１５．４５時間後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（３６ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（２４０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×６０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×６０ｍＬ）およびブライン（１×６０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、エステルＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを黄色油状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４３０．０１２０［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ２１Ｈ４０Ｎ３Ｏ６］＋；計算値４３０．２９１７）。
【０１０８】
２．４． Ｈ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（１２ｍＬ、１：１ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たトリペプチド（３．０ｇ、６．９８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１時間および室温で２時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（１５分間）。その後、ＤＣＭ（２０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、Ｈ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの粗製アミン塩をさらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３３０．０２２７［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ１６Ｈ３２Ｎ３Ｏ４］＋；計算値３３０．２３９３）；３５２．００１６［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ１６Ｈ３１Ｎ３ＮａＯ４］＋；計算値３５２．４２４８）；６５９．１６２６［２Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３２Ｈ６３Ｎ６Ｏ８］＋；計算値６５９．１６２６）。
【０１０９】
２．５． Ｂｏｃ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１０５ｍＬ）中の、上記の反応で得たトリペプチド（２．３ｇ、６．９８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（３．６１ｍＬ、２０．３４ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（３．４５ｇ、９．０７ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−ＭｅＶａｌ−ＯＨ（１．７８ｇ、７．６８ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１５．４５時間後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×５０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×５０ｍＬ）およびブライン（１×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物を分離し、エステルＢｏｃ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを黄色油状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）５４３．０４８４［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ２７Ｈ５１Ｎ４Ｏ７］＋；計算値５４３．３７５８）；５６５．０４６７［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ２７Ｈ５０Ｎ４ＮａＯ７］＋；計算値５６５．３５７７）。
【０１１０】
２．６． Ｈ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（１２ｍＬ、１：１ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たテトラペプチド（３．５６ｇ、６．５６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１時間および室温で２時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を高真空下で乾燥した（約１５分間）。その後、ＤＣＭ（４５ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、テトラペプチドＨ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４４３．０６９４［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ２２Ｈ４３Ｎ４Ｏ５］＋；計算値４４３．３２３３）；４６５．００６３［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ２２Ｈ４２Ｎ４ＮａＯ５］＋；計算値４６５．３０５３）。
【０１１１】
２．７． Ｂｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１１０ｍＬ）中の、上記の反応で得たテトラペプチド（２．９０ｇ、６．５６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（３．３９ｍＬ、１９．６８ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（３．２４ｇ、８．５３ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＯＨ（１．４６ｇ、７．２１ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１７．４５時間後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×５０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×５０ｍＬ）およびブライン（１×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物をＣＣによって分離し、エステルＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを黄色がかったフォーム状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６２８．５６［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３１Ｈ５８Ｎ５Ｏ８］＋；計算値６２８．４２８５）；６５０．５３［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ３１Ｈ５７Ｎ５ＮａＯ８］＋；計算値６５０．４１０５）。
【０１１２】
２．８． Ｈ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（６ｍＬ、１：１ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たペンタペプチド（１．６ｇ、２．５５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１時間および室温で２時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（約１５分間）。その後、ＤＣＭ（２０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、ペンタペプチドＨ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）５２８．４９［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ２６Ｈ５０Ｎ５Ｏ６］＋；計算値５２８．３７６１）。
【０１１３】
２．９． Ｂｏｃ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（６０ｍＬ）中の、上記の反応で得たペンタペプチド（１．３３ｇ、２．５２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（１．３０ｍＬ、７．５６ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（１．２５ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−Ａｂｕ−ＯＨ（０．５６ｇ、２．７７ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で一晩の後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×４０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×４０ｍＬ）およびブライン（１×４０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物をＣＣによって分離し、エステルＢｏｃ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを黄色がかったフォーム状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）７１３．１５１３［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３５Ｈ６５Ｎ６Ｏ９］＋；計算値７１３．４８１３）；７３５．１０１０［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ３５Ｈ６４Ｎ６ＮａＯ９］＋；計算値７３５．４６３２）。
【０１１４】
２．１０． Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅ （Ｂａ）の調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（６ｍＬ、１：１ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たヘキサペプチド（０．８２ｇ、１．１５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１時間および室温で１時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（約１５分間）。その後、ＤＣＭ（２５ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、ヘキサペプチドＨ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６１３．１９２５［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３０Ｈ５７Ｎ６Ｏ７］＋；計算値６１３．４２８９）。
【０１１５】
３． 断片（Ａａ）および断片（Ｂａ）のカップリング
３．１． Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（３３ｍＬ）中の、上記の反応で得たヘキサペプチドＨ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅ（０．７ｇ、１．１４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（０．５９ｍＬ、３．４２ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（０．５６ｇ、１．４８ｍｍｏｌ、１．３当量）およびペンタペプチドＤ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（０．７５ｇ、１．１４ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１６．４５時間後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１３０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×３５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×３５ｍＬ）およびブライン（１×３５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗生成物をＣＣによって精製し、ウンデカペプチドＤ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを白色フォーム状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６２５．６９０３［Ｍ／２＋Ｈ］＋（［Ｃ３２Ｈ５９Ｎ５Ｏ７］＋；計算値６２５．４４１５）；１２４９．７７９３［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６４Ｈ１１７Ｎ１０Ｏ１４］＋；計算値１２４９．８７５１）。
【０１１６】
３．２． Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨの調製
ＴＨＦ（１０．４ｍＬ）中の、上記の反応で得たウンデカデプシペプチド（１．３０ｇ、１．０４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を氷水浴の中で０℃に冷却し、次いで０．２Ｍ ＬｉＯＨ（１０．４ｍＬ、２．０８ｍｍｏｌ、２．０当量）を１０分間にわたって滴下した。冷却浴を使用したままにし、この混合物（ｐＨ＝１２〜１３）を０℃で約２０分間および室温で３０分間撹拌した（ＴＬＣコントロール）。その後、この溶液を０℃に冷却し、１０％ クエン酸水溶液（ｐＨ ３〜４）で中和した。この溶液を減圧下でエバポレーションした。残渣をＡｃＯＥｔ（１４０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（１×３０ｍＬ）およびブライン（１×３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗生成物をＣＣによって精製し、ウンデカペプチドＤ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨを白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）１２３５．７６９０［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６３Ｈ１１５Ｎ１０Ｏ１４］＋；計算値１２３５．８５９４）。
【０１１７】
４． マクロラクトン化：シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）の調製
ＤＣＭ（１２８ｍＬ）中のＤＭＡＰ（０．５０７ｇ、４．１４４ｍｍｏｌ、４．０当量）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＰｙＢＯＰ）（１．０７８ｇ、２．０７１ｍｍｏｌ、２．０当量）の溶液に、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の、上記の反応で得たウンデカデプシペプチド酸（１．２８ｇ、１．０３６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を２時間にわたって滴下した。酸の添加が完結した後、この混合物を一晩（２２時間）撹拌し、次いでこの混合物を分液漏斗に移した。全反応時間＝２４時間。この溶液を０．１Ｍ ＨＣｌ（２０ｍＬ）で洗浄し、有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗生成物をＣＣによって精製し、これによりシクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）を白色固体として得た。その後、得た化合物を分取ＨＰＬＣによって再精製し、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）を白色粉末として得た。純度９９．３８％（８０℃、３０分）。
【０１１８】
（Ｃ６３Ｈ１１２Ｎ１０Ｏ１３、ＭＷ＝１２１７．６２２６ｇ／ｍｏｌ）。
ＵＰＬＣ（４０℃、ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ（登録商標） ＢＥＨ Ｃ１８ １．７μｍ、２１４ｎｍ、５０→９５％、７分）ｔＲ＝２．９２３分。
ＵＰＬＣ
【０１１９】
天然のウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）から出発してウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）を得るための全体の収率は、５０％を超える。
【０１２０】
実施例１ｂ：
化合物（Ｉｃ）、（Ｉｆ）、（Ｉｇ）、（Ｉｉ）および（Ｉｋ）は、実施例１ａと同様の反応経路に従って調製することができる。
【０１２１】
実施例２
シクロウンデカデプシペプチド（Ｉｂ）の調製：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｂ）
２． 断片（Ｂｂ）の調製：
Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ （Ｂｂ）
２．１． Ｂｏｃ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１３０ｍＬ）中の市販のＨ−Ａｌａ−ＯＭｅ・ＨＣｌ（２．００ｇ、１４．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（１４．６８ｍＬ、８６．０ｍｍｏｌ、６．０当量）を加えた。その後、１５分後、ＨＡＴＵ（６．５２ｇ、１７．１８ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＢｏｃ−ＭｅＬｅｕ−ＯＨ（３．５１２ｇ、１４．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で４８時間後（ＲＴ＝２日と１５分間）、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×４０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×４０ｍＬ）およびブライン（１×４０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、エステルＢｏｃ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを淡黄色がかった油状物として得た。試料（３０ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、このペプチドを凍結乾燥し、エステルＢｏｃ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
【０１２２】
２．２． Ｈ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（１０ｍＬ、２：３ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たジペプチド（１．７０ｇ、５．１４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１．５時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（２０分間）。その後、ＤＣＭ（１０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。その後、反応混合物をＤＣＭ（６０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（１×１０ｍＬ）およびブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄した。有機相を濾過し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、エバポレーションし、高真空下で乾燥した。Ｈ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程のために使用した。
【０１２３】
２．３ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１０８ｍＬ）中の、上記の反応で得たジペプチド（７）（２．１７ｇ、９．４２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（６．４５ｍＬ、３７．６８ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（４．６５ｇ、１２．２５ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２．３９ｇ、１０．３６ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１５時間後（１５時間と１５分間）、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×２０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×２０ｍＬ）およびブライン（１×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、トリペプチドＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを黄色油状物として得た。この試料を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、このペプチドを凍結乾燥し、トリペプチドＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
【０１２４】
２．４． Ｈ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（１０ｍＬ、２：３ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たトリペプチド（２．００ｇ、４．５０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で２時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。生成物を高真空下で乾燥し（２０分間）、粗製物質を得た。その後、ＤＣＭ（２０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８（リトマス紙）まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、粗製アミンＨ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅをさらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。この試料（２５ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、生成物を凍結乾燥し、トリペプチドＨ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを固体として得た。
【０１２５】
２．５． Ｂｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−ＯＨの調製
Ｂｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−Ｖａｌ−ＯＭｅから出発し、ＢｕＬｉおよびフルオロホウ酸トリエチルオキソニウムを使用して、次いで文献［Ｊｅａｎ Ｆｒａｎｃｏｉｓ． Ｇｕｉｃｈｏｕ、ＰｈＤ学位論文、題名「Ｄｅ ｎｏｕｖｅａｕｘ ａｎａｌｏｇｕｅｓ ｄｅ Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ Ａ ｃｏｍｍｅ ａｇｅｎｔ ａｎｔｉ−ＶＩＨ−１」、Ｆａｃｕｌｔｅ ｄｅｓ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｅ ｄｅ Ｌａｕｓａｎｎｅ（ローザンヌ大学、理学部）、２００１年、１２１−１２２頁］に従ったメチルエステルの加水分解によってＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−ＯＨを得た。
【０１２６】
２．６． Ｂｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
−８℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（８ｍＬ）中のトリペプチドＨ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（０．０９６ｇ、０．２９１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にアルゴン下でＤＩＰＥＡ（０．１５ｍＬ、０．８７ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（０．１３ｇ、０．３５ｍｍｏｌ、１．２当量）およびジペプチドＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−ＯＨ（０．１ｇ、０．２９ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。−８℃で１０分間、次いで室温で４０分後、ＨＰＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（１ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×５ｍＬ）およびブライン（１×５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物をＣＣによって分離し、ペンタペプチドＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを油状物として得た。この試料を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、生成物を凍結乾燥し、ペンタペプチドＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
【０１２７】
２．７． Ｈ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（４．０ｍＬ、２：３ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たペンタペプチド（０．４５ｇ、０．６９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１．５時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。残渣を高真空下で乾燥した（０．５時間）。その後、ＤＣＭ（１０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８（リトマス紙）まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、ペンタペプチドＨ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。試料（３０ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、このペプチドを凍結乾燥し、ペンタペプチドＨ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの遊離アミンを白色粉末として得た。
【０１２８】
２．８． Ｂｏｃ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の、上記の反応で得た粗製ペンタペプチド（０．２ｇ、０．３６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（０．１８ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、５分後、ＨＡＴＵ（０．１９ｇ、０．５ｍｍｏｌ、１．４当量）およびＢｏｃ−Ａｂｕ−ＯＨ（０．０８８ｇ、０．４２ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１．１５時間後（ＲＴ＝１．５時間）、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（２ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×１０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×１０ｍＬ）およびブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、ヘキサペプチドＢｏｃ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを黄色油状物として得た。試料（３０ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、生成物を凍結乾燥し、ヘキサペプチドＢｏｃ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
【０１２９】
２．９． Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ断片（Ｂｂ）の調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（３．０ｍＬ、２：３ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たヘキサペプチド（０．１８７ｇ、０．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１．５時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（０．５時間）。その後、ＤＣＭ（３ｍＬ）を加え、ＴＦＡを除去するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８（リトマス紙）まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、粗製アミンＨ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅをさらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。粗生成物の試料（２３ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、このペプチドを凍結乾燥し、断片（Ｂａ）Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６４１．２５９［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３２Ｈ６１Ｎ６Ｏ７］＋；計算値６４１．４６０２）。
【０１３０】
３． 断片（Ａａ）および断片（Ｂｂ）のカップリング
３．１． Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の、上記の反応で得たヘキサペプチドＨ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（０．１６ｇ、０．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（０．２１４ｍＬ、１．２６ｍｍｏｌ、５．０当量）を加えた。その後、５分後、ＨＡＴＵ（０．１２ｇ、０．３１ｍｍｏｌ、１．２５当量）および上記で得たペンタデプシペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（４）（０．１６ｇ、０．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１．１５時間後（ＲＴ＝１．５時間）、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（３ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（４０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×８ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×８ｍＬ）およびブライン（１×８ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、ウンデカペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色フォーム状物として得た。分析用試料（１８ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、生成物を凍結乾燥し、ウンデカペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
【０１３１】
３．２． Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＨの調製
ＴＨＦ（２．５ｍＬ）中の、上記の反応で得たウンデカペプチドメチルエステル（０．２７ｇ、０．２１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を氷水浴の中で０℃に冷却し、次いで０．２Ｍ ＬｉＯＨ（２．１１ｍＬ、０．４２ｍｍｏｌ、２．０当量）を１０分間にわたって滴下した。次いで冷却浴を取り除き、この混合物（ｐＨ＝１２〜１３；リトマス紙）を室温で１時間２０分の間撹拌した（ＴＬＣコントロール）。その後、この溶液を０℃に冷却し、１．０Ｍ ＨＣｌを用いてｐＨ ３〜４まで酸性にした。この溶液を減圧下でエバポレーションした。残渣をＡｃＯＥｔ（４０ｍＬ）に溶解し、１０％ クエン酸（１×８ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×８ｍＬ）およびブライン（１×８ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物をＣＣによって分離し、酸Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＨを白色粉末として得た。この試料（４０ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、生成物を凍結乾燥し、ウンデカペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＨを白色粉末として得た。
【０１３２】
４． マクロラクトン化：シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｂ）の調製
ＤＣＭ（１２ｍＬ）中のＤＭＡＰ（０．０４８ｇ、０．３９ｍｍｏｌ、４．０当量）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＰｙＢＯＰ）（０．１０２ｇ、０．１９６ｍｍｏｌ、２．０当量）の溶液に、ＤＣＭ（４ｍＬ）中の、上記の反応で得たウンデカペプチド（０．１２４ｇ、０．０９８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を１．５時間にわたって滴下した。酸の添加が完結した後にこの混合物を撹拌し（ＲＴ＝２４時間）、次いで分液漏斗に移した。この溶液を１Ｍ ＨＣｌ（２ｍＬ）で洗浄し、有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、これによりシクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）を白色固体として得た。試料（７７ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、生成物を凍結乾燥し、シクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｂ）を白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）１２４５．７８７［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６５Ｈ１１７Ｎ１０Ｏ１３］＋；計算値１２４５．８８０２）、６２３．４６５［Ｍ／２＋Ｈ］＋（計算値６２３．４４４）。
【０１３３】
実施例３：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｈ）の調製
（Ｉｈ）の調製は、実施例２に記載した化合物の調製と同様にして行った。
【０１３４】
断片（Ｂｂ）の調製について実施例２に記載した反応条件と同様の反応条件を適用することにより、断片（Ｂｈ）を調製した。次いで、実施例２に記載した反応条件と同様の反応条件を適用することにより、断片（Ｂｈ）を断片（Ａａ）にカップリングした。
【０１３５】
次いで、実施例２に記載した条件と同様の条件を適用することにより、マクロラクトン化を行い、シクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ （Ｉｈ）を得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）１２５９．８８８［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６６Ｈ１１９Ｎ１０Ｏ１３］＋；計算値１２５９．８９５８）；１２６０．７８８［Ｍ＋２Ｈ］２＋（［Ｃ６６Ｈ１２０Ｎ１０Ｏ１３］２＋；計算値１２６０．９０３７）。
【０１３６】
実施例４：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｄ）の調製
断片（Ｂａ）の調製について実施例１に記載した反応条件と同様の反応条件を適用することにより、断片Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（Ｂｄ）を調製した。次いで、実施例１に記載した反応条件と同様の反応条件を適用することにより、断片（Ａａ）へのカップリングおよびマクロラクトン化を行い、シクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｄ）を得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）１２６１．８８８［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６６Ｈ１１７Ｎ１０Ｏ１４］＋；計算値１２６１．８７５１）。
【０１３７】
実施例５：
ＨＣＶレプリコン系における阻害効果
本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物が抗ＨＣＶ活性を有するかどうかを判定するために、ＨＣＶレプリコン系におけるこれらの化合物の阻害効果を比較する実験を行った。
【０１３８】
アッセイは、Ｃ型肝炎ウイルス遺伝子型１ｂ Ｃｏｎ１レプリコン（Ｌｏｈｍａｎｎら ２００１． Ｊ．Ｖｉｒｏｌ． ７５：１４３７−１４４９；およびＬｏｈｍａｎｎら １９９９． Ｓｃｉｅｎｃｅ． ２８５：１１０−１１３）を含有するＨｕｈ ９−１３を使用した。細胞を、細胞増殖培地、１：４〜１：５の比で１０％ ＦＣＳ、１％ 非必須アミノ酸、１％ ペニシリン／ストレプトマイシンおよび２％ ジェネティシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を補ったＤＭＥＭの中で継代培養し、７５ｃｍ２の組織培養フラスコ（Ｔｅｃｈｎｏ Ｐｌａｓｔｉｃ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）の中で３〜４日間増殖させ、回収し、細胞増殖抑制効果／細胞毒性効果および抗ウイルス効果の評価のために、９６穴の組織培養マイクロタイタープレート（Ｆａｌｃｏｎ、Ｂｅｃｋｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）の中で、５０００細胞／ウェル（１００μｌ／ウェル）の密度でアッセイ培地（ＤＭＥＭ、１０％ ＦＣＳ、１％ 非必須アミノ酸、１％ ペニシリン／ストレプトマイシン）に播種した。このマイクロタイタープレートを一晩（３７℃、５％ ＣＯ２、９５〜９９％相対湿度）インキュベーションし、コンフルエントでない細胞単層を得た。
【０１３９】
標準的な９６穴プレート（Ｂｅｃｋｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）の中で、ＭＴＴアッセイ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ ９６ ＡＱｕｅｏｕｓ Ｎｏｎ−Ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ、Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、並列の培養物において細胞密度および細胞増殖抑制効果を見積もった。このアッセイでは、３−（４，５−ジメチル−チアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシ−フェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム（ＭＴＳ）をホルマザンへと生物還元し、このホルマザンをプレートリーダーで、４９８ｎｍで定量する。ホルマザンの産生は生細胞の数と直接相関する。吸光度は４９８ｎｍの波長で測定し（Ｓａｆｉｒｅ２、Ｔｅｃａｎ）、光学密度（ＯＤ値）は、未処置の対照に対する百分率へと変換した。
【０１４０】
当該化合物を４ｍｍｏｌ／Ｌの濃度でＤＭＳＯに溶解した。原液を直ちに使用して実験を始めた。当該化合物を０．０００１μｍｏｌ／Ｌ〜１００μｍｏｌ／Ｌの範囲の２４の異なる濃度で試験した。このアッセイでのＤＭＳＯの最高濃度を、２．５％（１００μＭの当該化合物の最終濃度において）であると定めた。このアッセイの設定の中では、ＤＭＳＯ百分率は、当該化合物の濃度の減少に伴って減少した。
【０１４１】
抗ウイルス効果の評価のために、アッセイ培地を吸引し、乾燥した単層を伴うプレートを抽出まで−８０℃で保存した。このプレートを室温で解凍した後、細胞単層を１００μｌのｃｅｌｌ−ｔｏ−ｃＤＮＡ ｌｙｓｉｓ ｂｕｆｆｅｒ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて溶解した。この細胞の溶解を室温で１０分間進行させ、その後、すべての液体をＰＣＲプレート（Ａｘｙｇｅｎ）に移した。このＰＣＲプレートを７５℃で１５分間インキュベーションした（Ｔ３、Ｂｉｏｍｅｔｒａ）。溶解液をＲＮａｓｅ／ＤＮａｓｅ不含水で１：２に希釈し、その後、５μｌをリアルタイムＰＣＲプレート（ＡｐｐＩｌｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）に移した。
【０１４２】
レプリコンＲＮＡ含有量を、リアルタイムの定量的なワンステップＲＴ−ＰＣＲ法（ＲＴ−ｑＰＣＲ）：Ｌｏｗ Ｒｏｘ Ｏｎｅ−Ｓｔｅｐ ＲＴ−ｑＰＣＲ ｍａｓｔｅｒ ｍｉｘ、Ａｂｇｅｎｅ）を使用して定量した。使用した順方向プライマーおよび逆方向プライマーは、それぞれ５’−ＣＣＡ ＧＡＴ ＣＡＴ ＣＣＴ ＧＡＴ ＣＧＡ ＣＣＡ Ｇ−３’および５’−ＣＣＧ ＧＣＴ ＡＣＣ ＴＧＣ ＣＣＡ ＴＴＣ−３’であった。蛍光発生プローブは５’−ＡＣＡＴＣＧＣＡＴＣＧＡＧＣＧＡＧＣＡＣＧＴＡＣ−３’であった。試料の分析は、ＳＤＳ７５００Ｆ（ＡｐｐＩｌｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、標準的な熱サイクリングプロファイル：４８℃で３０分、９５℃で１０分、９５℃で１５秒および６０℃で１分の４０サイクル）を使用して実施し、その後、レプリコンＲＮＡ量を未処置の対照に対する百分率へと変換した。
【０１４３】
ＥＣ５０（用量反応曲線から導かれる値）は、ウイルス複製の５０％阻害が観察される濃度を表す。ＣＣ５０（用量反応曲線から導かれる値）は、当該細胞の代謝活性が未処置の細胞の代謝活性５０％にまで減少する濃度を表す。
【０１４４】
これらの実験からの結果から、ＥＣ５０±ＳＤ（標準偏差またはＳｔｄ．Ｄｅｖ．）（これは、ＨＣＶレプリコン複製を５０％阻害するために必要とされる有効濃度である）、およびＣＣ５０±ＳＤ（可能である場合はいつでも）（これは、指数関数的に増殖する細胞の増殖を５０％阻害するのに必要とされる濃度である）の算出が可能となった。ＥＣ５０およびＣＣ５０±ＳＤの値は、それぞれ、３つの個々の用量反応曲線から導かれるすべてのＥＣ５０、またはＣＣ５０値の中央値として算出した。当該化合物の治療濃度域を示す選択性指数（ＳＩ）をＣＣ５０とＥＣ５０との間の比として算出した。
【０１４５】
表１は、Ｈｕｈ ９−１３細胞における、選択した化合物のＥＣ５０、ＣＣ５０（μｍｏｌ／Ｌ）およびＳＩ値の比較の結果を示す。
【０１４６】
【表１】
【０１４７】
化合物の濃度は、その特定の濃度で抗レプリコン効果が７０％閾値よりも十分に高くかつ３０％以下の代謝活性の減少が観察される場合には、ＨＣＶレプリコン系における真の抗ウイルス効果を引き出すと考えられる。
【０１４８】
表１に示すように、Ｈｕｈ ９−１３細胞で得たこれらの結果は、これらの化合物が、細胞培養液の中でのＣ型肝炎ウイルスレプリコンの複製を選択的に阻害することを示し、２桁のナノモル濃度範囲のＥＣ５０値を有するＤｅｂｉｏ ０２５と同様またはこれより高い効力および同様またはこれより高い選択性指数を実証する。
【０１４９】
実施例６
非免疫抑制活性
本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物が非免疫抑制活性を有するかを判定するために、コンカナバリン−Ａによって誘導されるＴ細胞増殖の用量依存的阻害を比較する実験を行った（表２を参照）。
【０１５０】
このアッセイの方法は、Ｄａｙｔｏｎら（１９９２． Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ４１．６７１−６７６）およびＭｉｓｈｅｌｌら（１９８０． Ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｖ、ＸＸＩＸ、Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ Ｃｏ．、カリフォルニア州、サンフランシスコ、１５３−１６０）によって記載されているようにして、実施した。当該化合物のＩＣ５０（５０％阻害濃度）を用量反応曲線から導き、ＣｓＡのＩＣ５０と比較した（ＩＣ５０比）。
【０１５１】
【表２】
【０１５２】
この研究では、化合物（Ｉａ）、（Ｉｂ）および（Ｉｄ）は、（ＩＣ５０比という点では）シクロスポリンＡ（ＣｓＡ）よりも少なくとも約３００倍小さく免疫抑制性である。
【０１５３】
実施例７：
肝トランスポーター相互作用
本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物が肝トランスポーターと相互作用するかどうかを判定するために、多剤耐性関連タンパク質２（ＭＲＰ２）、有機アニオン輸送ポリペプチド１Ｂ１（ＯＡＴＰ１Ｂ１）、胆汁酸排泄ポンプ（ＢＳＥＰ）およびナトリウム・タウロコール酸共輸送体ポリペプチド（ＮＴＣＰ）に対する濃度依存的阻害を比較する実験を行った。これらのトランスポーターは、胆汁酸塩またはビリルビンなどの内因性化合物の肝胆循環（ｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ）に関与する（総説として、Ｃ．Ｐａｕｌｉ−Ｍａｇｎｕｓら、Ｊ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００５、４３：３４２−３５７を参照）。それらのうちのいくつかは、生体異物の排泄にも寄与する。
【０１５４】
ＭＲＰ２およびＢＳＥＰは、ヨトウガ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）（Ｓｆ９）卵巣細胞を組み換えバキュロウイルスに感染させることにより、ＳＯＬＶＯ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙによってこの昆虫細胞の中で、発現された。当該トランスポーターを含有する反転膜小胞（ｉｎｓｉｄｅ−ｏｕｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｖｅｓｉｃｌｅｓ）への放射活性プローブ基質（ＭＲＰ２およびＢＳＥＰについて、それぞれエストラジオール−１７−β−グルクロニドおよびタウロコール酸塩）の輸送の阻害をシンチレーション計数によって測定した。これらのヒト取り込みトランスポーターを発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を用いてＯＡＴＰ１Ｂ１およびＮＴＣＰアッセイを行った。輸送されたプローブ基質（ＯＡＴＰ１Ｂ１およびＮＴＣＰについて、それぞれエストロン−３−硫酸およびタウロコール酸塩）の量を細胞溶解後の液体シンチレーションまたは蛍光測光によって測定した。当該化合物のＩＣ５０（プローブ基質の輸送を５０％阻害するために必要とされる濃度と定義される。５０％阻害濃度）を濃度−応答曲線から導き、そしてＤｅｂｉｏ ０２５のＩＣ５０と比較した（表中で「Ｄｅｂｉｏ ０２５に対する倍数」として表されるＩＣ５０比）。
【０１５５】
ＭＲＰ２は胆汁酸塩非依存的な胆汁流の主要な駆動力であり、幅広いスペクトルの有機アニオン（ビリルビン−ジグルクロニド、胆汁酸塩接合体ならびにいくつかの薬物が含まれる）を輸送する。表３は、選択した化合物とこのトランスポーターとの相互作用の結果を示す。
【０１５６】
【表３】
【０１５７】
ＯＡＴＰ１Ｂ１はナトリウム非依存的に胆汁酸塩を輸送する。さらには、多くの薬物がＯＡＴＰの基質である。表４は、選択した化合物とＯＡＴＰ１Ｂ１との相互作用の結果を示す。
【０１５８】
【表４】
【０１５９】
ＢＳＥＰは、肝細胞から毛細胆細管の中への親胆汁性（ｃｈｏｌｅｐｈｉｌｉｃ）化合物の分泌に関与する主要な胆汁酸塩排出系である。表５は、選択した化合物とＢＳＥＰとの相互作用の結果を示す。
【０１６０】
【表５】
【０１６１】
ＮＴＣＰは、胆汁形成にとって必須である、門脈循環からの胆汁酸塩のナトリウム依存的な取り込みを媒介する。表６は、選択した化合物とＮＴＣＰとの相互作用の結果を示す。
【０１６２】
【表６】
【０１６３】
肝トランスポーターに関するこれらのインビトロでの検討のほかに、本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物を、インビトロでの代謝酵素の阻害、および動物の中でのインビボでの薬物動態特性に関しても評価した。
【０１６４】
表３〜表６に示すように、インビトロでの輸送実験からの結果は、これらの化合物が、Ｄｅｂｉｏ ０２５と比べてはるかに低い、いくつかの肝トランスポーターを阻害する効力を実証するということを示す。特に、いくつかの化合物は、ＭＲＰ２に対する阻害の不存在および／またはＯＡＴＰ１Ｂ１に対する最高で５０倍低い効力を示す。それゆえ、これらの化合物は、肝トランスポーターの阻害に関連する潜在的な副作用（例えば高ビリルビン血症）、もしくは肝トランスポーターの阻害に関連する潜在的な薬物−薬物相互作用（例えばアトルバスタチンなどのＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤との）のいずれかを低減する、またはその両方でさえも低減することが予想される。
【０１６５】
（略語の一覧）
Ａｂｕ Ｌ−α−アミノ−ｎ−酪酸
Ａｃ アセチル
ＡｃＯＥｔ 酢酸エチル
ＡｃＯＨ 酢酸
Ａｌａ Ｌ−アラニン
Ｂｏｃ ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＢＳＥＰ 胆汁酸排泄ポンプ
ｔ−Ｂｕ ｔｅｒｔ−ブチル
Ｃａ（ＭｅＯ）２ カルシウムメトキシド
ＣＣ カラムクロマトグラフィー
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ ４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
Ｅｑ 当量
ＥＳＩ−ＭＳ エレクトロスプレーイオン化質量分析
ＥｔＶａｌ Ｎ−エチル−Ｌ−バリン
Ｆｍｏｃ ９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＨＡＴＵ Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル−メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロリン酸塩 Ｎ−オキシド
Ｄ−Ｈｉｖ Ｄ−ヒドロキシイソ吉草酸
ｇ グラム
ＨＣＯＯＨ ギ酸
ＨＰＬＣ 高性能液体クロマトグラフィー
ＨＲ−ＭＡＬＤＩ−ＭＳ 高分解能ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析
ＨＲ−Ｑ−ＴＯＦ−ＭＳ 高分解能Ｑ−ＴＯＦ質量分析
Ｉｍ２ＣＯ Ｎ，Ｎ−カルボニル−ジイミダゾール（ＣＤＩ）
Ｋｇ キログラム
ＫＯＭｅ カリウムメトキシド
Ｌ リットル
ＭＡＬＤＩ マトリクス支援レーザー脱離／イオン化
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ 飛行時間型質量分析
Ｍｅ メチル
Ｄ−ＭｅＡｌａ Ｎ−メチル−Ｄ−アラニン
ＭｅＢｍｔ Ｎ−メチル−（４Ｒ）−４−［（Ｅ）−２−ブテニル］−４，４−ジメチル−Ｌ−トレオニン
ＭｅＬｅｕ Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシン
ＭｅＣＮ アセトニトリル
ＭｅＯＨ メタノール
ＭｅＶａｌ Ｎ−メチル−Ｌ−バリン
ｍｇ ミリグラム
ｍＬ ミリリットル
ＭＲＰ２ 多剤耐性関連タンパク質２
ＭＳ 質量分析
ＭｔＢＥ メチル−ｔｅｒｔ−ブチル−エーテル
ＮＭＲ 核磁気共鳴
ＮＴＣＰ ナトリウム・タウロコール酸共輸送体ポリペプチド
ＯＡＴＰ１Ｂ１ 有機アニオン輸送ポリペプチド１Ｂ１
ＰｙＢＯＰ （ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）−トリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロリン酸塩
ＲＰ 逆相
ＲＰ−ＨＰＬＣ 逆相ＨＰＬＣ
ＲＴ 反応時間
Ｔｈｒ Ｌ−トレオニン
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ｔＲ 保持時間
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
Ｔｊ ジャケットの温度
ＴＬＣ 薄層クロマトグラフィー
Ｔｒ 反応器の中の温度
ＵＰＬＣ 超高性能液体クロマトグラフィー
Ｖｏｌ． ボリューム（１ｇの主原料が１ボリュームを意味する）
【技術分野】
【０００１】
本発明はシクロウンデカデプシペプチド（シクロウンデカデプシペプチド）化合物に関する。また本発明は、医薬としての、特に抗ウイルス薬としての、より具体的にはＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための、これらの化合物の使用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
ＨＣＶは、約１５年前にＣｈｏｏおよび共同研究者によってクローン化され、特性解析された（非特許文献１を参照）。ＨＣＶはフラビウイルス科に属し、エンベロープ型のヌクレオカプシドおよび＋の極性の一本鎖ＲＮＡゲノムを含む（非特許文献２を参照）。ＨＣＶは、主に血液、血液製剤および妊娠中の母子感染によってうつされる。血液製剤をスクリーニングするための診断検査の導入は、新しい感染の割合を著しく低下させた。
【０００３】
依然として、ＨＣＶは深刻な医学上の問題であり続けている。現在約１億７０００万人の人々がＨＣＶに感染している。感染の初期の過程は、典型的には軽度である。しかしながら、多くの場合、免疫系は、このウイルスを一掃することができず、持続的な感染を有する人々は、肝硬変および肝細胞癌の高いリスクにある（非特許文献３を参照）。
【０００４】
利用できるワクチンはなく、治療法の選択肢は非常に限られている（非特許文献４；非特許文献５を参照）。
【０００５】
サイクロフィリンに強く結合する化合物が同定されたが、それらの化合物は免疫抑制性であった（非特許文献６）。
【０００６】
それゆえ、最近２０年間の間、ＮＩＭ ８１１、またはＨＩＶ−１複製を阻害する高い効力をも提示しかつ本質的に免疫抑制活性を欠く他の化合物などの非免疫抑制性化合物を同定することを目的として、いくつかの医薬品化学の研究が行われてきた。特許文献１（Ｗｅｎｇｅｒら；ＤＥＢＩＯＰＨＡＲＭ ＳＡ）および非特許文献７を参照。
【０００７】
サイクロフィリンに結合する非免疫抑制性化合物が、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に対して阻害効果を有するということが見出された。非Ａ型肝炎、非Ｂ型肝炎の主要な原因因子（ｃａｕｓａｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ）として同定されたＨＣＶによる持続的な感染は、慢性肝炎、肝硬変または肝細胞癌などの肝疾患に密接に関連すると考えられてきた。これらの肝疾患の発症は、主要な公衆衛生の問題である。有効な抗ＨＣＶ治療は、インターフェロン、またはインターフェロンおよびリバビリンの組み合わせを用いた治療に限定されている。しかしながら、このウイルスはこれらの公知の薬剤で処置されたＨＣＶ患者の約半分から取り除かれないため、依然として代替の抗ＨＣＶ剤に対する強いニーズがある。
【０００８】
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）複製の阻害に対して作用する特性を有するシクロウンデカペプチドは、すでに特許文献２（Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａ ＧＭＢＨ）および特許文献３（ＤＥＢＩＯＰＨＡＲＭ ＳＡ）から公知である。非特許文献８は、特許文献３に記載された化合物によるｍＰＴ阻害のより良好な効力を報告する。しかしながら、これらのペプチドのうちのいくつかは現在臨床試験にかけられているが、改善された薬物動態プロファイル（例えば肝トランスポーター阻害プロファイルおよびその結果生じる薬物−薬物相互作用）ならびに改善された毒性学プロファイル（例えば非免疫抑制活性、およびその結果生じる有害事象）とともに、特にＨＣＶの複製を阻害するための満足できる特性を有する新しい抗ウイルス薬を開発するというニーズが依然としてある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第００／０１７１５号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００５／０２１０２８号パンフレット
【特許文献３】国際公開第２００６／０３８０８８号パンフレット
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９８９年、第２４４巻、３５９−３６２頁
【非特許文献２】Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒら、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ．、２００３年、第６０巻、９１−１０２頁
【非特許文献３】Ｐｏｙｎａｒｄら、Ｌａｎｃｅｔ、１９９７年、第３４９巻、８２５−８３２頁
【非特許文献４】Ｍａｎｎｓら、Ｉｎｄｉａｎ Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．、２００１年、第２０巻（補遺１）、Ｃ４７−５１頁
【非特許文献５】Ｔａｎら、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．、２００２年、第１巻、８６７−８８１頁
【非特許文献６】Ｎａｋａｇａｗａ Ｍら、Ｂｉｏｃｈｍｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．、米国、フロリダ州、オーランド、２００４年１月２日、第３１３巻、第１号、４２−４７頁、ＸＰ００４４７９１１４
【非特許文献７】Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．、２０００年、第４１巻、７１９３−６頁
【非特許文献８】Ｈａｎｓｓｏｎｓ Ｍ Ｊら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ ａｎｄ ｂｉｏｍｅｍｂｒａｎｅｓ、ｐｌｅｎｕｍ ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、米国、ニューヨーク州、ニューヨーク、２００４年８月１日、第３６巻、第４号、４０７−４１３頁（ＸＰ００２３３０６９９）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
従って、本発明は、Ｃ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害の予防または処置において使用するべきさらなる非免疫抑制性化合物を提供することを目的とする。これらの化合物は、肝トランスポーターの阻害に関連する潜在的な副作用、もしくは肝トランスポーターの阻害に関連する潜在的な薬物−薬物相互作用のいずれかを低減する、またはその両方でさえも低減するという予想外の長所を有する。加えて、特に工業規模でより容易に合成される化合物を提供することも本発明の目的である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
それゆえ、本発明の目的は、上記の改善された特性を有する新しい抗ウイルス薬を提供することであったが、驚くべきことに、これらの要件は式（Ｉ）に定義されるシクロウンデカデプシペプチド化合物
【化１】
（式中、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、４−フルオロ−ＭｅＢｍｔ、ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔ；Ｏ−アセチル−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｎｖａ、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＥｔ２）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（ここで、Ｏｘはメチオニンの硫黄原子はスルホキシドまたはスルホンであることを意味する）、ＭｅＶａｌ、ＭｅＴｈｒ、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｈｒ（ＯｔＢｕ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＡｌａ、ＭｅＩｌｅ、ＭｅＴｈｒ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＥｔＰｈｅ、ＥｔＴｙｒ、ＥｔＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ、ＭｅＴｙｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＰｈｅであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｌａであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである）
によって満たされるということが見出された。
【００１３】
本発明の別の対象は、Ｃ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための医薬組成物であって、１以上の薬学的に許容できる希釈剤または担体と一緒に式Ｉの化合物を含む医薬組成物を提供することである。
【００１４】
本発明のさらなる対象は、少なくともａ）式Ｉの化合物または上記医薬組成物からなる第１の薬剤と、ｂ）ＨＣＶ複製に対して作用する特性を有する第２の薬剤とを含む医薬的組み合わせを提供することである。
【００１５】
式Ｉに係る化合物は、Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害の処置または予防における医薬の製造において使用されてもよい。
【００１６】
本発明のなおさらなる対象は、必要とする対象においてＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための方法であって、当該対象に、治療上有効量の式Ｉの化合物または本発明に係る医薬組成物を投与することを含む方法を提供することである。
【００１７】
あるいは、必要とする患者においてＨＣＶ複製を阻害するための方法であって、当該対象に、治療上有効量の式Ｉの化合物または本発明の医薬組成物を投与することを含む方法も提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
本発明のよりよい理解のために、そして本発明がどのように実施されうるかを示すために、これより、例としてのみであるが、本発明に係る特定の実施形態、方法およびプロセスが添付の図面を参照して示される。
【図１】国際公開第２００６／０３８０８８号パンフレットに係る化合物、すなわち［Ｄ−ＭｅＡｌａ］３−［ＥｔＶａｌ］４−ＣｓＡ（Ｄｅｂｉｏ ０２５）と比較して、本発明に係る化合物の化学合成を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
特に定義しない限り、本願明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般に理解するのと同じ意味を有する。本願明細書に記載されるものと類似または等価な方法および物質を本発明の実施または試験で使用することができるが、適切な方法および物質が以下で示される。本願明細書中で言及されるすべての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照によりその全体を援用したものとする。矛盾する場合には、定義を含めて本願明細書が優先するものとする。加えて、物質、方法、および実施例は説明するためのものに過ぎず、限定を意図するものではない。
【００２０】
本願明細書で使用する場合、本発明の理解を容易にするために、以下の定義が与えられる。
【００２１】
用語「含む」は、一般に「包含する」の意味で使用され、つまり１以上の特徴または構成要素の存在を許容する。
【００２２】
式（Ｉ）のシクロウンデカデプシペプチド化合物を影響することが本発明の対象である。
【化２】
式中、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、４−フルオロ−ＭｅＢｍｔ、ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔ、Ｏ−アセチル−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｎｖａ、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＮＥｔ２）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＶａｌ、ＭｅＴｈｒ、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＡｌａ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＥｔＰｈｅ、ＥｔＴｙｒ、ＥｔＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ、ＭｅＴｙｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＰｈｅ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）であり、式中、メチオニンの硫黄原子はスルホキシドまたはスルホンであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである。
【００２３】
ＩＵＰＡＣが認める定義によれば、シクロデプシペプチドは、アミノおよびヒドロキシルカルボン酸残基（通常はα−アミノおよびα−ヒドロキシ酸）の配列を有する天然または合成の化合物であり、これらの残基は環として連結されている（ＩＵＰＡＣ Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ、第２版（１９９７）を参照）。このようなシクロデプシペプチドは、少なくとも１つのアミド結合がエステル結合で置き換えられているヘテロデチック（ｈｅｔｅｒｏｄｅｔｉｃ）ペプチドとして記述される（Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｃｉ． １０：１１５−８（２００４）を参照）。
【００２４】
本発明の化合物は１１残基を含み、１０個はα−アミノ酸であり、１個はα−ヒドロキシ酸である。このα−ヒドロキシ酸はＤ−α−ヒドロキシイソ吉草酸としても知られＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＯＨと略号で記される（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−メチル−ブタン酸である。式（Ｉ）では、このヒドロキシル酸は、８位にある。それは、カルボン酸末端で、９位のα−アミノ酸、つまりＮ−メチル−ロイシンのアミノ基とアミド結合を形成し、ヒドロキシル末端で７位のα−アミノ酸、つまりアラニンまたはグリシンのカルボン酸基とエステル結合を形成する。
【００２５】
式（Ｉ）のα−アミノ酸は、アミノ酸を命名するために通常使用される３文字コードの略号を使用して呼ばれ、それらの配置は、特段の記載がない限りＬ配置である。残基のナンバリング（番号付け）は、上で定義されたとおりのＮ−メチル−（４Ｒ）−４−［（Ｅ）−２−ブテニル］−４−メチル−Ｌ−トレオニンまたはＭｅＢｍｔおよびその構造的誘導体を表すＡＸＸ１から始まる。メチル基Ｍｅまたはエチル基Ｅｔなどのアルキル基がアミノ酸の略号の前に現れる場合は、これは、このようなアルキル基がそのアミノ酸残基のアミノ基に固定されているということを意味する。
【００２６】
本発明に係る化合物の利点は、先行技術に記載されている対応するシクロウンデカペプチド化合物の通常の環状アミド骨格と比べた、大環状骨格の内部のエステル結合の影響にある可能性がある。理論に拘束されるわけではないが、７位のアミノ酸ＡＸＸ７と８位のＤ−ＨＩＶとの間のアミドをエステル結合で置き換えると、コンホメーション上の柔軟性の増加（Ｐ．Ｊ．Ｆｌｏｒｙ、Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｍｅｃｈａｎｉｃｓ ｏｆ Ｃｈａｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、Ｈａｎｓｅｒ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、ＮＹ、１９８８にある）および親油性の増加ならびに水素供与体結合の不存在などのコンホメーション上の特性および物理化学的特性に対して強い効果をもたらすと考えられている。
【００２７】
これらの構造的特徴は、ＣｓＡから誘導される類似体の種類と比べて、本発明の化合物の物理化学的特性、薬物動態特性および生物学的特性の顕著な差異に姿を変えて現れると考えられる。系統的なＳＡＲ研究において観察されたアミノ酸置換に対するより高い許容度についての可能な理論的解釈は、生理活性のコンホメーションに対するコンホメーション空間の増加にある可能性がある（Ｖ．Ｍｉｋｏｌら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（１９９８）２８３、４５１−４６１）。
【００２８】
先行技術のシクロウンデカペプチド類似体とは対照的に、米国特許第５，１１６，８１６号明細書、実施例２、または国際公開第０２／０９２０３３号パンフレット、実施例４、工程４−１のいずれかから得られるような、天然のシクロウンデカデプシペプチドの２位のアミノ酸と７位のアミノ酸との間の断片の中の位置での１つまたは複数の置き換えは、本発明の基準を満たす化合物の一覧によって明らかにされるように、サイクロフィリンへの高い結合能力の保持をもたらす。最も注目すべきことには、国際公開第２００６／０３８０８８号パンフレットに係る化合物、すなわち［Ｄ−ＭｅＡｌａ］３−［ＥｔＶａｌ］４−ＣｓＡ（Ｄｅｂｉｏ ０２５）と比べて２〜４倍までの、本発明の化合物についてのＣｙｐ Ａへの結合親和性の増加が観察された。
【００２９】
改善された活性なプロファイル（実施例５および実施例６を参照）とは別に、当該新しい種類の化合物は、とりわけ工業規模での改善された調製プロセスをももたらす。
【００３０】
本発明は、式Ｉの化合物の循環寿命（ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｌｉｆｅｔｉｍｅ）を延ばすための式Ｉの化合物の化学修飾をも包含する。この特性を有する適切なポリ（エチレングリコール）誘導体の例は、例えば米国特許出願公開第２００５１７１３２８号明細書（ＮＥＫＴＡＲ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ ＡＬ ＣＯＲＰ）または米国特許第６，７１３，４５４号明細書（ＮＯＢＥＸ ＣＯＲＰ）に記載されている。
【００３１】
より好ましくは、本発明の化合物は、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（ここで、Ｏｘはメチオニンの硫黄原子はスルホキシドまたはスルホンであることを意味する）、ＭｅＶａｌ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＭｅＴｙｒ、ＭｅＴｙｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＴｈｒ、ＭｅＴｈｒ（ＯｔＢｕ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＰｈｅであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｌａであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである、
式（Ｉ）によって定義される。
【００３２】
さらにより好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（ここで、Ｏｘは−ＳＯＭｅ、−ＳＯ２Ｍｅである）、ＭｅＶａｌ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＭｅＴｙｒであり；かつ
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである、
と定義される。
【００３３】
本発明の特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａであり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＶａｌ、ＥｔＶａｌであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、ＭｅＬｅｕ、Ｓａｒであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである、
と定義される。
【００３４】
本発明の最良の態様のうちの１つによれば、式（Ｉ）の化合物は以下の式：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｂ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｃ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｄ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＡｌａ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｅ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｆ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｇ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｈ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｉ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−Ｓａｒ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｋ）
を与える。
【００３５】
上に列挙された化合物は、本発明の最も重要な基準、つまり化学合成、薬理学的な特性、薬物動態プロファイルおよび毒物学的プロファイルの改善、の全体的な最適化に対応する。
【００３６】
注目すべきことには、これらの化合物は、Ｄｅｂｉｏ ０２５と比べてはるかに低い、ＭＲＰ２またはＯＡＴＰ１Ｂ１などの肝トランスポーターを阻害する効力を示す。それゆえ、これらの化合物は、潜在的な副作用（例えば高ビリルビン血症）、もしくは肝トランスポーターの阻害に関連する潜在的な薬物−薬物相互作用（例えばアトルバスタチンなどのＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤との）のいずれかを低減する、またはその両方でさえも低減することが予想される。
【００３７】
本発明のさらなる化合物は以下のとおりである：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＴｈｒ（ＯｔＢｕ）−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−Ｓａｒ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＡｌａ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＡｌａ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＴｈｒ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（ＯＭｅ）−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＴｙｒ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−Ｓａｒ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ａｌａ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＡｌａ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−Ｓａｒ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）。
【００３８】
注目する他の化合物は、以下の式：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（ＯＭｅ）−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（（８−ヒドロキシ）ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−（５−ＯＨ）Ｎｖａ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（ＯＲ）（Ｒ＝−ＣＯＣＨ３、−ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−ＯＨ）−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＳｅｒ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＳｅｒ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−（３−フルオロ）ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−（３−フルオロ）ＭｅＡｌａ−ＭｅＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＭｅｔ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（Ｏｘ＝−ＳＯＭｅ、−ＳＯ２Ｍｅ）−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＰｈｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＴｙｒ（ＯＲ）（Ｒ＝Ａｃ、Ｍｅ）−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＴｈｒ（ＯＲ）（Ｒ＝Ｍｅ、Ａｃ）−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−（３−フルオロ）ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（ジヒドロ）ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（（８−ヒドロキシ）ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
シクロ−（（８−ヒドロキシ）ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）
によって同定される。
【００３９】
本発明の化合物は、古典的なペプチド（溶液相または固相ペプチド合成；Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第Ｅ ２２ｄ巻、編集長：Ｍ．Ｇｏｏｄｍａｎ、Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ、シュトゥットガルト、２００３年にある）および有機化学またはバイオテクノロジーを応用することにより、例えばＷｅｎｇｅｒによってＨｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ、６７、５０２−２５、１９８４またはＨｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ、６６、２６７２−７０２（１９８３）に記載されているような化学ツールを応用することにより、ならびにＲｉｃｈ，Ｄ．Ｈ．ら、Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｕｐｌｉｎｇ ｏｆ Ｎ−ｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ，ｓｔｅｒｉｃａｌｌｙ ｈｉｎｄｅｒｅｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ ｄｕｒｉｎｇ ＳＰＰＳ、Ｔｅｔｒ． Ｌｅｔｔｅｒｓ、３５、５９８１−５９８４（１９９４）に記載されているように、ＨＡＴＵをカップリング試薬として用いることにより、得られうる。
【００４０】
例えば、可能性のある一般的スキームのうちの１つは、必要に応じて適切な保護基および活性化基を有する適切な残基を含有する２つの断片、つまり断片Ａおよび断片Ｂを調製し、調製の最後の工程でそれらを一緒に連結して、ウンデカペプチドを得て、次いでこれをシクロウンデカデプシペプチドへと環化するということにある。
【００４１】
例えば、断片（Ａｘ）は、以下のとおり：
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＡＸＸ１−ＯＨ （Ａｘ）
であってもよく、断片（Ｂｘ）は以下のとおり：
Ｈ−ＡＸＸ２−ＡＸＸ３−ＡＸＸ４−ＡＸＸ５−ＡＸＸ６−ＡＸＸ７−ＯＲ、（Ｒはアルキル基である） （Ｂｘ）
であってもよく、次いでＡｘおよびＢｘはウンデカデプシペプチドＡｘ−Ｂｘ、Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＡＸＸ１−ＡＸＸ２−ＡＸＸ３−ＡＸＸ４−ＡＸＸ５−ＡＸＸ６−ＡＸＸ７−ＯＲ（Ｒ＝アルキル、Ｈ）へとカップリングされ、
最終工程はマクロラクトン化である。
【００４２】
α−ヒドロキシ酸残基Ｄ−Ｈｉｖを含有する断片Ａは、天然のシクロウンデカデプシペプチド（つまり、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）の分解によって得てもよく、このシクロウンデカデプシペプチドの調製は、米国特許第５，１１６，８１６号明細書、実施例２、または国際公開第０２／０９２０３３号パンフレット、実施例４、工程４−１のいずれかに記載されている。
【００４３】
先行技術に対する本発明に係る化合物の優位点は、その活性なプロファイル（実施例５および６を参照）にだけでなく、とりわけ工業規模でのその改善された調製プロセスにもある。
【００４４】
１． 天然の化合物（ＣｓＡおよびシクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（図１を参照）から出発して、シクロウンデカデプシペプチド類似体の合成の全収率は、ＤＥＢＩＯ ０２５（国際公開第２００６／０３８０８８号パンフレットに記載されている［Ｄ−ＭｅＡｌａ］３−［ＥｔＶａｌ］４−ＣｓＡ、ＤＥＢＩＯＰＨＡＲＭ ＳＡ）についての２０％と比較して、＞５０％である。
【００４５】
２． 高価なジペプチド誘導体Ｂｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−ＯＨの合成（４つの化学工程を含む）は必要とされない。加えて、当該化合物のうちのいくつかはＣ末端グリシンを含有し（Ｉａ、Ｉｃ、Ｉｆ、Ｉｇ、Ｉｉ、Ｉｋ）、これは、合成の最後の工程（マクロラクトン化、エピマー化なし）を容易にする。
【００４６】
３． 試薬および出発化合物についてのコストは、本発明に係る化合物の場合はかなり低い。注目すべきことに、ＣｓＡの開環反応のために使用される「Ｍｅｅｒｗｅｉｎの試薬」は必要とされない。
【００４７】
４． 断片Ｂ（ヘキサペプチドＡＸＸ２−ＡＸＸ７）は、市販の出発化合物を使用して標準的な固相ペプチド合成によって効率的に得ることができる（図１を参照）。
【００４８】
５．天然の出発化合物からの断片Ａの調製、ならびに縮合（断片Ａと断片Ｂ）、大環状化および最終の精製の工程の最適化において、薬理学的に興味深い化合物を得るための全収率は、８０％にまで達することができる。
【００４９】
６． 全体としては、示された態様は、良好な有効性、およびその結果として、特に工業規模での本発明の化合物の合成に関して良好な商品原価をもたらす。
【００５０】
ＨＣＶの複製を阻害する本発明の化合物の能力はレプリコンアッセイにおいて示され、基本的に免疫抑制活性が存在しないことがＴ細胞増殖アッセイにおいて評価された（実施例５および６を参照）。
【００５１】
本発明に係る「非免疫抑制性」化合物は、シクロスポリンＡ（ＣｓＡ）よりも少なくとも３０倍少なく、好ましくは１５０倍未満、２００倍未満でさえ、好ましくは３００倍未満でさえも免疫抑制性（シクロスポリンＡのＩＣ５０（５０％阻害濃度）に対する当該化合物のＩＣ５０の比（ＩＣ５０化合物／ＩＣ５０ ＣｓＡ）として決定される）である化合物と理解されたい。理想的には、本発明の化合物は、コンカナバリン−Ａによって誘導されるＴ細胞増殖アッセイにおいてＣｓＡと少なくとも２ｌｏｇの差のインビトロでの非免疫抑制活性を有する。
【００５２】
従って、本発明の化合物は、特に抗ウイルス薬として、より具体的にはＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための医薬としての使用について考慮される。Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害は、例えば慢性肝炎、肝硬変または肝癌、例えば肝細胞癌である。本発明の化合物は、例えばＨＣＶ感染した母から生まれる新生児、またはそのウイルスに曝露される医療従事者、または移植後の再発する可能性があるＨＣＶ感染を排除するために、移植レシピエント、例えば器官もしくは組織移植レシピエント、例えば肝臓移植、の予防的処置として使用されてもよい。
【００５３】
「処置」は、治療的処置および予防的または防止的措置の両方を指す。処置を必要とするものには、すでに上記障害を有しているものおよびその障害が防止されるべきであるものが含まれる。従って、本発明で処置されるべき哺乳動物は、その障害を有するとすでに診断されていてもよいし、またはその障害に対する素因があるかもしくはその障害に対して感受性を有していてもよい。
【００５４】
処置の目的のための「哺乳動物」は、ヒト、家畜および農場動物またはペット動物（イヌ、ウマ、ネコ、ウシ、サルなど）を含めた哺乳動物として分類されるいずれかの動物を指す。好ましくは、この哺乳動物はヒトである。
【００５５】
用語「治療上有効量」は、哺乳動物において疾患または障害を処置するのに有効な薬物の量を指す。
【００５６】
本発明の化合物は、例えば予め濃縮されたマイクロエマルションに組み込まれて、必要とする患者に、例えば経口投与されてもよい。
【００５７】
本発明の化合物、使用できる場合にはそれらの薬学的に許容できる塩、およびそれらのプロドラッグは、Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するためにそれらが薬学的に許容できる補助剤、希釈剤または担体と合わせられた医薬組成物の形態で投与されてもよい。
【００５８】
本発明はまた、本願明細書中上記で定義された本発明の化合物、またはその薬学的に許容できる塩を、薬学的に許容できる補助剤、希釈剤または担体と合わせて含む医薬組成物を提供する。適切な賦形剤、希釈剤および補助剤に関しては、これらを記載する標準的な文献を、例えば「Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ １９９０の第５巻の第２５．２章を、およびＨ．Ｐ．Ｆｉｅｄｌｅｒによる「Ｌｅｘｉｋｏｎ ｄｅｒ Ｈｉｌｆｓｓｔｏｆｆｅ ｆｕｅｒ Ｐｈａｒｍａｚｉｅ，Ｋｏｓｍｅｔｉｋ ｕｎｄ ａｎｇｒｅｎｚｅｎｄｅ Ｇｅｂｉｅｔｅ」、Ｅｄｉｔｉｏ Ｃａｎｔｏｒ、２００２を参照してもよい。
【００５９】
本発明の化合物はまた、例えばコアセルベーション技術によってまたは界面重合によって調製されるマイクロカプセル、例えば、それぞれヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセルおよびポリ（メタクリル酸メチル）マイクロカプセルの中に、コロイド状の薬物送達システム（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）の中に、またはマクロエマルションの中に、閉じ込められていてもよい。このような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、第１６版、Ｏｓｏｌ，Ａ．編（１９８０）に開示されている。
【００６０】
持続放出調剤が調製されてもよい。持続放出調剤の適切な例としては、本発明の化合物を含有する固体の疎水性ポリマーの半透性マトリクスが挙げられ、このマトリクスは成形品、例えばフィルム、またはマイクロカプセルの形態にある。持続放出マトリクスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（メタクリル酸２−ヒドロキシエチル）、またはポリ（ビニルアルコール）、ポリラクチド類（米国特許第３，７７３，９１９号明細書）、Ｌ−グルタミン酸および［γ］エチル−Ｌ−グルタメートの共重合体、非分解性エチレン−酢酸ビニル、医薬ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸共重合体および酢酸リュープロリドから構成される注射可能なミクロスフェア）を調製するために使用されるものなどの分解性乳酸−グリコール酸共重合体、ならびにポリＤ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。
【００６１】
本発明の１日用量は、処置される宿主、特定の投与経路、および処置しようとする疾病の重症度および種類に応じて必然的に変えられるであろう。従って、最適の投薬量は、いずれかの特定の患者を処置しようとする医師によって決定されてもよい。
【００６２】
局所投与；例えばエアロゾルもしくは乾燥粉末としての吸入による投与；例えば錠剤、カプセル、ゲル、シロップ、懸濁剤、液剤、散剤もしくは顆粒の形態での経口投与；例えば座薬としての直腸もしくは膣内投与；または滅菌された液剤、懸濁剤もしくは乳剤としての非経口注射（静脈内注射、皮下注射、筋肉注射、脈管内注射、もしくは点滴を含む）が意図される場合、本発明の医薬組成物は、クリーム、ゲル、液剤、軟膏剤、懸濁剤または硬膏剤などとして調合されてもよい。
【００６３】
本発明の活性化合物は、いずれかの従来の経路によって投与されてもよい。本発明の活性化合物は、例えば、注射可能な液剤または懸濁剤の形態で、または注射可能な蓄積製剤（ｄｅｐｏｓｉｔ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）の形態で非経口投与されてもよい。好ましくは、本発明の活性化合物は、飲用のための液剤もしくは懸濁剤、錠剤またはカプセルの形態で経口投与されるであろう。本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物を含む経口投与用の医薬組成物は、実施例に記載される。その実施例によって実証されるように、そのような医薬組成物は、典型的には、本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物と、１以上の薬学的に許容できる担体物質とを含む。典型的には、これらの組成物は、濃縮されており、投与に先立って適切な希釈剤、例えば、水と組み合わせられる必要がある。非経口投与用の医薬組成物もまた、典型的には１以上の賦形剤を含む。任意の賦形剤としては、等張剤、緩衝液または他のｐＨ調整剤、および防腐剤が挙げられる。これらの賦形剤は、当該組成物の維持のため、およびｐＨ（約６．５〜７．５）および浸透圧モル濃度（約３００ｍｏｓｍ／Ｌ）の好ましい範囲を達成するために添加されてもよい。経口投与用の製剤のさらなる例は、米国特許第５，５２５，５９０号明細書および米国特許第５，６３９，７２４号明細書、および米国特許出願公開第２００３／０１０４９９２号明細書に見出すことができる。経口経路によると、毎日〜週に３回（ｔｒｉｃｅ）の投与のための本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物の示される投薬量は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇであってもよい。静脈内経路によると、示される対応する投薬量は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇであってもよい。本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物の有効量は、治療計画の過程においてＨＣＶ感染の処置を必要とする患者に対して反復的に投与されたときに、その患者における血清ＨＣＶ力価の統計的に有意な低下または血清ＡＬＴ活性の有意な低下などの客観的な臨床反応をもたらす量であると理解される。
【００６４】
ＨＣＶ感染に対する本発明の化合物を含む医薬組成物の有効性を試験するための試験的な用量を決定するときに、臨床医によって多くの要因が考慮されることになろう。これらの中でも主なものは、選択された本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物の毒性および半減期である。さらなる要因としては、患者の体重、患者の年齢、患者の全般的な状態（非代償性肝疾患、重篤な先在する骨髄の機能低下および他のウイルス感染症を含めた重大な全身性疾患または重病を含む）、例えば血清アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）レベルによって示されるようなＨＣＶ感染の病期（急性 対 慢性）、ＨＣＶの特定の遺伝子型、ＨＣＶ感染の以前の治療、患者の中の他の薬物の存在などが挙げられる。治療過程は、本発明の医薬組成物の反復的な投与を必要とするであろう。典型的には、十分な薬物用量が週に３〜７回投与されることになり、処置の継続期間は、約４週間〜６ヶ月、好ましくは約４週間〜約１２ヶ月であってもよい。処置のあとに、血清中のＨＣＶの判定および血清ＡＬＴレベル測定が続いてもよい。処置の終点は、ウイルス学的反応、すなわち、処置の過程の最後に、処置の開始の数ヶ月後に、または処置の完結の数ヶ月後にＨＣＶが存在しないことである。血清中のＨＣＶは、定量的ＲＴ−ＰＣＲまたはノーザンブロットなどの方法によってＲＮＡレベルで、またはウイルスタンパク質の酵素イムノアッセイまたは増感化学発光イムノアッセイによってタンパク質レベルで測定されてもよい。この終点はまた、正常範囲での血清ＡＬＴレベルの判定を含んでもよい。
【００６５】
本発明の医薬組成物は、本発明の化合物に加えて、例えば、別の抗ウイルス性薬物物質、例えば、リバビリン、またはインターフェロンαなどのＨＣＶ感染に対して活性な１以上の他の成分を含んでもよい。本発明の化合物およびこのような他の活性成分は、同じ医薬組成物の部分として一緒に投与することができるし、または併用療法の恩恵を得るように設計された適切な用法の部分として別々に投与することができる。適切な用法、投与された各用量の量、および各活性薬剤の用量間の具体的な間隔は、用いられる活性薬剤の特定の組み合わせ、治療されようとする患者の状態、および上記のセクションで論じられた他の要因に応じて変わるであろう。このようなさらなる活性成分は、それらが単独の治療薬として有効である量以下の量で一般に投与されるであろう。ヒトへの投与についてＦＤＡの承認を受けたこのような活性薬剤についてのＦＤＡが承認する投薬量は、公的に利用できる。
【００６６】
本発明の化合物は、単独の成分として、あるいは他の薬物、例えば抗ＨＣＶ活性を有する薬物、例えばインターフェロン、例えばインターフェロン−α−２ａもしくはインターフェロン−α−２ｂ、例えばＩｎｔｒｏｎ Ａ（登録商標）、Ｒｏｆｅｒｏｎ（登録商標）、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）、Ｒｅｂｉｆ（登録商標）またはＢｅｔａｆｅｒｏｎ（登録商標）、または水溶性のポリマーもしくはヒトアルブミンに接合されたインターフェロン、例えばＡｌｂｕｆｅｒｏｎ（登録商標）（Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｏｍｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ）、抗ウイルス薬、例えばリバビリン、ラミブジン、ＮＶ０８もしくはＮＭ２８３、ＨＣＶコード化因子（ＨＣＶ ｅｎｃｏｄｅｄ ｆａｃｔｏｒ）（ＮＳ３−４Ａセリンプロテアーゼ、ヘリカーゼもしくはＲＮＡポリメラーゼなど）の阻害剤またはこのような阻害剤のプロドラッグ、抗線維化剤、例えばＮ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体、例えばイマチニブ、免疫調節剤、例えばミコフェノール酸、その塩もしくはプロドラッグ、例えばミコフェノール酸ナトリウムもしくはミコフェノール酸モフェチル、またはＳ１Ｐ受容体作動薬、例えばＦＴＹ７２０もしくは任意にリン酸化されているその類似体、例えば欧州特許第６２７４０６（Ａ１）号明細書、欧州特許第７７８２６３（Ａ１）号明細書、欧州特許第１００２７９２（Ａ１）号明細書、国際公開第０２／１８３９５号パンフレット、国際公開第０２／７６９９５号パンフレット、国際公開第０２／０６２６８号パンフレット、特開２００２−３１６９８５号公報、国際公開第０３／２９１８４号パンフレット、国際公開第０３／２９２０５号パンフレット、国際公開第０３／６２２５２号パンフレットおよび国際公開第０３／６２２４８号パンフレット（これらは、参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする）に開示されているものと一緒に投与されてもよい。
【００６７】
特定の実施形態では、本発明で使用される例示的なインターフェロンは、Ｉｎｔｒｏｎ−Ａ（登録商標）；ＰＥＧ−Ｉｎｔｒｏｎ（登録商標）；Ｒｏｆｅｒｏｎ（登録商標）；Ｐｅｇａｓｙｓ（登録商標）；Ｂｅｒｅｆｏｒ（登録商標）；Ｓｕｍｉｆｅｒｏｎ（登録商標）；Ｗｅｌｌｆｅｒｏｎ（登録商標）；Ｉｎｆｅｒｇｅｎ（登録商標）；Ａｌｆｅｒｏｎ（登録商標）；Ｖｉｒａｆｅｒｏｎ（登録商標）；Ａｌｂｕｆｅｒｏｎ（登録商標）（Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｏｍｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ）；Ｒｅｂｉｆ；Ｏｍｎｉｆｅｒｏｎ；Ｏｍｅｇａおよびこれらの組合せからなる群から選択される。
【００６８】
水溶性のポリマーへのインターフェロンの接合体は、とりわけ、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリプロピレングリコールなどのポリアルキレンオキシドホモポリマー、ポリオキシエチレン化ポリオール、それらの共重合体およびそれらのブロック共重合体への接合体を含むことを意味する。ポリアルキレンオキシドベースのポリマーの代替物として、デキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、炭水化物ベースのポリマーなどの有効な非抗原性物質を使用することができる。このようなインターフェロン−ポリマー接合体は、米国特許第４，７６６，１０６号明細書；米国特許第４，９１７，８８８号明細書、欧州特許出願公開第０ ２３６ ９８７号明細書、欧州特許出願公開第０ ５１０ ３５６号明細書および国際公開第９５／１３０９０号パンフレットに記載されている。ポリマーによる修飾によって十分に抗原反応が低減するため、外来性のインターフェロンは、完全に自系のもの（ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ）である必要はない。ポリマー接合体を調製するために使用されるインターフェロンは、哺乳類の抽出物、例えばヒト、反芻動物またはウシのインターフェロンから調製されてもよいし、または組み換えにより産生されてもよい。インターフェロンの他の形態としては、インターフェロンβ、γ、τおよびω、例えばＳｅｒｏｎｏによるＲｅｂｉｆ（インターフェロンβ １ａ）、ＶｉｒａｇｅｎによるＯｍｎｉｆｅｒｏｎ（天然のインターフェロン）、またはＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ ＩｎｇｅｌｈｅｉｍによるＯｍｅｇａ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎが挙げられる。Ａｍａｒｉｌｌｏ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓによる経口用インターフェロンαなどの経口用インターフェロン。ペグ化されたインターフェロンとしても公知の、ポリエチレングリコールへのインターフェロンの接合体も好ましい。
【００６９】
インターフェロンのとりわけ好ましい接合体は、ペグ化されたα−インターフェロン、例えばペグ化されたインターフェロン−α−２ａ、ペグ化されたインターフェロン−α−２ｂ；ペグ化されたコンセンサスインターフェロンまたはペグ化された精製されたインターフェロン−ａ生成物である。ペグ化されたインターフェロン−α−２ａは、例えば欧州特許第５９３，８６８号明細書に記載されており、例えば商標名ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標） （Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ）で市販されている。ペグ化されたインターフェロン−α−２ｂは、例えば欧州特許第９７５，３６９号明細書に記載されており、例えば商標名ＰＥＧ−ＩＮＴＲＯＮ Ａ（登録商標） （Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ）で市販されている。ペグ化されたコンセンサスインターフェロンは国際公開第９６／１１９５３号パンフレット（参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする）に記載されている。好ましいペグ化されたα−インターフェロンはペグ化されたインターフェロン−α−２ａおよびペグ化されたインターフェロン−α−２ｂである。ペグ化されたコンセンサスインターフェロンも好ましい。
【００７０】
使用される助剤（ｃｏ−ａｇｅｎｔ）に関する１日の投薬量は、例えば、用いられる化合物、宿主、投与方法および治療されるべき状態の重症度に応じて変わるであろう。例えば、ラミブジンは、１００ｍｇの１日投薬量で投与されてもよい。
【００７１】
ペグ化されたインターフェロンは、週に１〜３回、好ましくは週に１回、２×１０６〜１０×１０６ＩＵ、より好ましくは５×１０６〜１０×１０６ＩＵ、最も好ましくは８×１０６〜１０×１０６ＩＵの範囲の合計の一週用量で非経口投与されてもよい。これは、週に１回、週に３回、一日おきにまたは毎日ベースで、週に０．５〜２．０マイクログラム／キログラムに相当する。
【００７２】
他の実施形態では、インターフェロンαはペグ化されたインターフェロンα−２ａであり、投与されるペグ化されたインターフェロンα−２ａの量は、週に１回、週に３回、一日おきにまたは毎日ベースで、週に２０〜２５０マイクログラム／キログラムである。好ましくは、インターフェロンペグ−ＩＦＮａ２ａは、週に１回、１８０μｇの量で投与される。
【００７３】
ＨＣＶの処置のために典型的に使用される抗ウイルス薬も、本発明に係る組み合わせの中に包含される。このような薬剤としては、哺乳動物の中でのウイルスの形成および／または複製を阻害するのに有効である化合物または生物学的製剤が挙げられる。これには、Ｖａｌｅａｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州、コスタメサ（Ｃｏｓｔａ Ｍｅｓａ）製のリバビリン（１−β−Ｄ−リボフラノシル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−カルボキシアミド）；Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ニュージャージー州、ケニルワース（Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ）製のＲｅｂｅｔｏｌ（登録商標）、およびＨｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ、ニュージャージー州、ナットリー（Ｎｕｔｌｅｙ）製のＣｏｐｅｇｕｓ（登録商標）、開発中のリバビリン類似体（ＶａｌｅａｎｔによるＬｅｖｏｖｉｒｉｎおよびビラミジン（Ｖｉｒａｍｉｄｉｎｅ）、およびミゾリビン一リン酸など）などの薬剤が含まれる。
【００７４】
加えて、本発明の組み合わせは、ＨＣＶ ＮＳ３−４Ａセリンプロテアーゼの基質ベースのプロテアーゼ阻害剤、基質ベースでないＮＳ３プロテアーゼ阻害剤；ＨＣＶ感染に対して活性を有することが示されているフェナントレンキノン、チアゾリジン類およびベンズアニリド類などの投与をさらに含んでもよい。
【００７５】
ＨＣＶの処置のためのプロテアーゼ阻害剤は、例えば米国特許第６，００４，９３３号明細書（Ｓｐｒｕｃｅら）；米国特許第５，９９０，２７６号明細書（Ｚｈａｎｇら）；米国特許第５，５３８，８６５（Ｒｅｙｅｓら）；国際公開第０２／００８２５１号パンフレット（Ｃｏｒｖａｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）、国際公開第０２／０８１８７号パンフレットおよび国際公開第０２／００８２５６号パンフレット（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）；米国特許第６，５３４，５２３号明細書、６，４１０，５３１号明細書および米国特許第６，４２０，３８０号明細書（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）および国際公開第０２／０６０９２６号パンフレット（Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）；国際公開第０２／４８１７２号パンフレットおよび国際公開第０２／１８１９８号パンフレット（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）；国際公開第０２／４８１５７号パンフレットおよび国際公開第０２／４８１１６号パンフレット（Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）；国際公開第９８／１７６７９号パンフレット（Ｖｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）（これらはすべて参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする）に開示されている。
【００７６】
ＲＤ３−４０８２およびＲＤ３−４０７８を含めた２，４，６−トリヒドロキシ−３−ニトロ−ベンズアミド誘導体（Ｓｕｄｏ Ｋ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、１９９７、２３８ ６４３−６４７；Ｓｕｄｏ Ｋ．ら Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、１９９８、９、１８６）などの例示となる基質ベースでないＮＳ３プロテアーゼ阻害剤が使用されてもよい。
【００７７】
ＨＣＶ治療において有効であると示されているさらなる実験的薬剤としては、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ ＩｎｇｅｌｈｅｉｍによるＨＣＶ ＮＳ３−４Ａセリンプロテアーゼ阻害剤ＢＩＬＮ ２０６１、ＶｅｒｔｅｘによるＶＸ−９５０、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−ＰｌｏｕｇｈによるＳＣＨ−６、ＳＣＨ−７、およびＳＣＨ−３５１６３３、ならびにＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ、Ｂｒｉｓｔｏｌ Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ、Ａｂｂｏｔ、Ｒｏｃｈｅ、Ｍｅｒｃｋ、Ｐｆｉｚｅｒ、およびＧｉｌｅａｄによる前臨床開発および臨床開発中の他のＨＣＶプロテアーゼ阻害剤が挙げられる。本願明細書に記載される本発明の組み合わせにおいて有用である可能性がある、ＨＣＶの処置のために現在臨床開発中のさらなる薬剤としては、ＴＭＣ ４３５３５０（Ｔｉｂｏｔｅｃ）およびＩＴＭ−１９１（Ｉｎｔｅｒｍｕｎｅ）が挙げられる。
【００７８】
ヌクレオシド類似体も使用してよい。１つのこのような類似体の一例は、Ｉｄｅｎｉｘによるテルビブジン（米国特許第６４４４６５２号明細書、米国特許第６５９６７００号明細書、および国際公開第０１９６３５３号パンフレット）である。ＨＣＶ ＮＳ５Ｂ ＲＮＡ依存的ＲＮＡポリメラーゼのヌクレオシド阻害剤または非ヌクレオシド阻害剤、例えば国際公開第２００４／００２４２２号パンフレットに開示される２’−Ｃ−メチル−３’−Ｏ−Ｌ−バリンエステルリボフラノシルシチジン（ＮＭ２８３、Ｉｄｅｎｉｘ）も使用されてもよい。国際公開第０１／９０１２１号パンフレットおよび国際公開第０１／９２２８２号パンフレット（Ｉｄｅｎｉｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）に開示される分岐したヌクレオシドも使用してもよい。これらの国際特許出願の内容は、参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする。
【００７９】
さらなる治療用化合物として、ＨＣＶゲノムに対するアンチセンス分子、または治療の有効性を高める、ＨＣＶゲノムのいずれかの部分に相補的なアンチセンス配列を挙げてもよい。
【００８０】
Ｍｉｇｅｎｉｘによる糖タンパク質プロセシング阻害剤であるセルゴシビル（Ｃｅｌｇｏｓｉｖｉｒ）（ＭＢＩ ３２５３）、Ｔｒｉｍｅｒｉｓによる融合阻害剤、ＡｃｈｉｌｌｉｏｎによるＡＣＨ−０１３７１７１などのＨＣＶ生活環の中の他の標的の阻害剤も企図される。Ｔｏｌｌ様受容体（「ＴＬＲ」）作動薬などの受容体作動薬としては、ＡｎａｄｙｓによるＡＮＡ２４５、ＡＮＡ９７１、ＡＮＡ９７５（米国特許第５０４１４２６号明細書、米国特許第４８８０７８４号明細書）；ＣｐＧ−１０１０１、ＴＬＲ−９作動薬（Ｃｏｌｅｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＩＭＰＤＨ阻害剤、ミコフェノール酸、その塩もしくはプロドラッグ、ミコフェノール酸ナトリウムまたはミコフェノール酸モフェチル、またはメリメボジブ（Ｍｅｒｉｍｅｂｏｄｉｂ）（ＶＸ−４９７、Ｖｅｒｔｅｘによる）；チモシンα−１（Ｚａｄａｘｉｎまたはその合剤（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）、ＳｃｉＣｌｏｎｅによる）；ＳＣＶ−０７（ＳｃｉＣｌｏｎｅ）、Ｂｅｌｅｒｏｆｏｎ（Ｎａｕｔｉｌｕｓによる改良されたＩＦＮ−α）；ＮＡＢＩによるＣＩＶＡＣＩＲ（Ｃ型肝炎免疫グロブリン）、またはＳ１Ｐ受容体作動薬、例えばＦＴＹ７２０または任意にリン酸化されているその類似体、例えば欧州特許第６２７４０６（Ａ１）号明細書、欧州特許第７７８２６３（Ａ１）号明細書、欧州特許第１００２７９２（Ａ１）号明細書、国際公開第０２／１８３９５号パンフレット、国際公開第０２／７６９９５号パンフレット、国際公開第０２／０６２６８号パンフレット、特開２００２−３１６９８５号公報、国際公開第０３／２９１８４号パンフレット、国際公開第０３／２９２０５号パンフレット、国際公開第０３／６２２５２号パンフレットおよび国際公開第０３／６２２４８号パンフレットに開示されているもの（これらの特許文献の開示は参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする）；３Ｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによるレシキモド（Ｒｅｓｉｑｕｉｍｏｄ）［ＶＭＬ ６００］、インターフェロン−αおよび他のサイトカインの強力な誘導因子であるイミキモド類似体、が挙げられる。加えて、本発明の化合物は、インターロイキン−１０（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）、Ｅｎｄｏ Ｌａｂｓ ＳｏｌｖａｙによるＡＭＡＮＴＡＤＩＮＥ（Ｓｙｍｍｅｔｒｅｌ）、Ｉｄｕｎ Ｐｈａｒｍａによるカスパーゼ阻害剤ＩＤＮ−６５５６、ＣｈｉｒｏｎによるＨＣＶ／ＭＦ５９、ＭａｘｉｍによるＣＥＰＬＥＮＥ（ヒスタミン二塩酸塩）、Ｉｄｕｎ ＰＨＡＲＭによるＩＤＮ−６５５６、Ｔ６７、Ｔｕｌａｒｉｋによるβチューブリン阻害剤、Ｆｕｊｉｓａｗａ ＨｅａｌｔｈｃａｒｅによるＦＫ７８８、ＩｄＢＩ ０１６（Ｓｉｌｉｐｈｏｓ、経口用シリビン−ホスファチジルコリンフィトサム（ｐｈｙｔｏｓｏｍｅ））、ＩｍｍｔｅｃｈによるＤｉｃａｔｉｏｎ、Ａｅｔｈｌｏｎ Ｍｅｄｉｃａｌによるｈｅｍｏｐｕｒｉｆｉｅｒ、Ｕｎｉｔｅｄ ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓによるＵＴ ２３１ Ｂ；ＨｅｐｅＸ−Ｃ ＳＭ１、ＢａｙｅｒによるＰＰＶＯ−Ｂａｙ５５−８８００（Ｐａｒａｐｏｘｖｉｒｕｓ ｏｖｉｓ）；ＡｎｇｉｏｎによるＲｅｆａｎａｌｉｎ（ＨＧＦ模倣薬）、Ｒ８０３（Ｒｉｇｅｌ）、ＪＴＫ−００３、ＪＴＫ−００２、およびＪＴＫ−１０９（すべて日本たばこ産業製）、ＨＣＶ−０８６（ＶｉｒｏＰｈａｒｍａ／Ｗｙｅｔｈ）、ＩＳＩＳ−１４８０３（ＩＳＩＳ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＧＳ−９１３２（Ａｃｈｉｌｌｉｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによるポリメラーゼ阻害剤）、ＨＣＶ−７９３（ＰｈａｒｍａｓｓｅｔおよびＲｏｃｈｅ）、Ｒ１６２６（Ｒｏｃｈｅ）と組み合わせて使用してもよい。
【００８１】
注目する他の化合物としては、ウルソジオール（Ｕｒｓｏｄｉｏｌ）（欧州特許第００２６９５１６号明細書、Ａｘｃａｎ Ｐｈａｒｍａ）、ＨＥ−２０００（ＤＨＥＡ類似体、Ｃｏｌｔｈｕｒｓｔ Ｌｔｄ）、ＥＨＣ−１８（免疫調節剤、Ｅｎｚｏ ｂｉｏｃｈｅｍ）、ヒスタミン二塩酸塩（Ｈ２作動薬、国際公開第０９１０４０３７号パンフレット、Ｅｓｔｅｒｏ−Ａｎｓｔａｌｔ）、ニタゾキサニド（Ｒｏｍａｒｋ）、１−アミノ−アルキルシクロヘキサン（米国特許第６，０３４，１３４号明細書）、アルキル脂質（米国特許第５，９２２，７５７号明細書）、ビタミンＥおよび他の抗酸化物質（米国特許第５，９２２，７５７号明細書）、胆汁酸（米国特許第５，８４６，９６４号明細書）、Ｎ−（ホスホノアセチル）−Ｌ−アスパラギン酸（米国特許第５，８３０，９０５号明細書）、ベンゼンジカルボキシアミド類（米国特許第５，６３３，３８８号明細書）、ポリアデニル酸誘導体（米国特許第５，４９６，５４６号明細書）、２’３’−ジデオキシイノシン（米国特許第５，０２６，６８７号明細書）、ベンゾイミダゾール類（米国特許第５，８９１，８７４号明細書）、植物エキス（米国特許第５，８３７，２５７号明細書；米国特許第５，７２５，８５９号明細書および米国特許第６，０５６，９６１号明細書）およびピペリジン類（米国特許第５，８３０，９０５号明細書）；Ｎ−（ホスホノアセチル）−Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンジカルボキシアミド類、ポリアデニル酸誘導体、グリコシル化阻害剤、およびウイルス感染によって引き起こされる細胞傷害をブロックする非特異的細胞保護剤が挙げられる。
【００８２】
また本発明に係る化合物は、ＨＣＶ処置に向けたワクチンまたは抗体に基づくアプローチと組み合わせて用いられてもよい。治療ワクチンとしては、Ｉｎｔｅｒｃｅｌｌによるワクチン（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅ ｖａｃｃｉｎｅ ＩＣ４１ ＨＣＶ）、Ｅｐｉｍｍｕｎｅ／Ｇｅｎｅｃｏｒ、Ｍｅｒｉｘ、Ｔｒｉｐｅｐ（Ｃｈｉｒｏｎ−ＶａｃＣ）、Ａｖａｎｔによる免疫療法（Ｔｈｅｒａｐｏｒｅ）、ＣｅｌｌＥｘＳｙｓによるＴ細胞療法、ＳＴＬによるモノクローナル抗体ＸＴＬ−００２、ＡｎａｄｙｓによるＡＮＡ ２４６およびＡＮＡ ２４６、ＩｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓによるＥ２に向けた治療ワクチン、ＸＴＬ ＢｉｏによるＥ２外被タンパク質に対するｍＡｂ（モノクローナル抗体）、ＧＩ−５００５（ＧｌｏｂｅＩｍｍｕｎｅ Ｉｎｃ）、ＩｎｎｏＶａｃ−Ｃ（国際公開第９９６７２８５号パンフレット、Ｉｎｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ）、ＩＣ−４１（Ｉｎｔｅｒｃｅｌｌ）、インターフェロンα−ｎ３（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）が挙げられる。
【００８３】
上記の内容に従って、本発明は、なおさらなる態様では、少なくともａ）本発明の化合物または本発明に係る医薬組成物からなる第１の薬剤と、ｂ）ＨＣＶ複製に対して作用するという特性を有する第２の薬剤とを含む医薬的組み合わせを提供する。
【００８４】
特に、この医薬的組み合わせは、Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害の予防または処置において使用するためのものである。
【００８５】
また、必要とする対象においてＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための方法であって、当該対象に、治療上有効量の本発明の化合物または本発明の医薬組成物を投与することを含む方法も包含される。
【００８６】
加えて、必要とする患者においてＨＣＶ複製を阻害する方法であって、当該対象に、治療上有効量の本発明の化合物または本発明の医薬組成物を投与することを含む方法が提供される。
【００８７】
本発明の別の対象は、治療上有効量の本発明に係る化合物または本発明の医薬組成物および抗ＨＣＶ特性を有する薬剤から選択される助剤の、相伴うかまたは逐次的な同時投与を含む方法である。
【００８８】
本願明細書で用いられる場合の用語「同時投与」または「併用投与」などは、単一の患者への選択された治療薬の投与を包含することを意図し、その薬剤が必ずしも同じ投与経路によってまたは同じ時に投与されるわけではない処置計画を含むことが意図されている。
【００８９】
本発明の医薬的組み合わせの投与は、有益な効果、例えばその医薬活性成分のうちの１つのみを施用する単独療法と比べた相乗的な治療効果をもたらす。好ましい相乗的な組み合わせは、本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物と、任意にポリマーに接合されているインターフェロンとの組み合わせである。
【００９０】
さらなる好ましい組み合わせは、本発明に係る式Ｉの化合物とミコフェノール酸、その塩もしくはプロドラッグとの、またはＳ１Ｐ受容体作動薬、例えばＦＴＹ７２０との組み合わせである。
【００９１】
本願明細書において引用されたすべての特許、特許出願および刊行物は、参照によりその全体を援用したものと見なされるものとする。
【００９２】
当業者なら、本願明細書に記載される発明は、具体的に記載されたもの以外の変更および改変を受ける余地があるということはわかるであろう。本発明は、本発明の技術思想または本質的な特徴から逸脱しないすべてのそのような変更および改変を包含するということを理解されたい。また、本発明は、本願明細書の中で言及されまたは示された工程、特徴、組成物および化合物のすべてを、個々にまたはまとめて、そしてその工程または特徴のいずれかのおよびすべての組み合わせまたはいずれか２以上を包含する。それゆえ、本開示は、すべての態様において、例証されたものであって限定するものではないと考えられるべきであり、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によって示され、均等の意味および範囲に含まれるすべての変更は本発明の中に包含されるということが意図されている。
【００９３】
種々の参考文献が本願明細書全体にわたって引用され、それらの各々は、参照によりその全体を本願明細書に援用したものとする。
【００９４】
上記の説明は、以下の実施例を参照してより十分に理解されるであろう。しかしながら、そのような実施例は、本発明を実施する方法を例示するものであり、本発明の範囲を限定することは意図されていない。
【実施例】
【００９５】
実施例１ａ：
シクロウンデカデプシペプチド（Ｉａ）：シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）の調製
１． 天然のシクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）から出発する断片（Ａａ）の調製（米国特許第５，１１６，８１６号明細書、実施例２、または国際公開第０２／０９２０３３号パンフレット）、実施例４、工程４−１を参照）：
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（Ａａ）
【００９６】
１．１ 変異体Ａ
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（１Ａ）の調製
１５ｍＬの無水ＣＨ２Ｃｌ２中のシクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（米国特許第５，１１６，８１６号明細書、実施例２、または国際公開第０２／０９２０３３号パンフレット、実施例４、工程４−１）（３．００ｇ、２．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）および１，１’−カルボニルジイミダゾール（１．１７ｇ、７．２１ｍｍｏｌ、３．０当量）の溶液を室温で２．５時間撹拌した。反応の進行を分析用ＵＰＬＣによってモニターした。８１．１％反応率を得た。さらなる量の１，１’−カルボニルジイミダゾール（０．３９ｇ、２．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）を、この反応混合物に加えた。さらに１６時間撹拌した後、９８．８％反応率を得た。この溶液を減圧下でエバポレーションした。残渣をＡｃＯＥｔ（４５ｍＬ）に溶解し、１０％ クエン酸（４５ｍＬ）およびブライン（４５ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションし、２つの化合物（１Ａ）および（２Ａ）の混合物を白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：（１Ａ）：１３４２．７５［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６８Ｈ１１７Ｎ１２Ｏ１５］＋；計算値１３４２．７３）、（２Ａ）：１２７４．７７［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６５Ｈ１１３Ｎ１０Ｏ１５］＋；計算値１２７４．６５）。
【００９７】
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ，Ｎ−カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（２Ａ）の調製
乾燥ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中の、上記の反応で得た化合物（１Ａ）（３．４１ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）の溶液を撹拌し、アルゴン雰囲気下、１００℃で２時間加熱した。反応の進行を分析用ＵＰＬＣによってモニターした。完全反応率を得た．その後、この溶液をＡｃＯＥｔ（４５ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ １Ｍ（３０ｍＬ）および２３．２％ ＮａＣｌ水溶液（１５ｍＬ）、次いで１１．６％ ＮａＣｌ水溶液（４５ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションし、シクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ，Ｎ−カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（２Ａ）を白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１２７４．６５［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６５Ｈ１１３Ｎ１０Ｏ１５］＋；計算値１２７４．６５。
【００９８】
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＭｅ（断片（Ａａ）メチルエステル（３Ａ）の調製
０℃に冷却した３０ｍＬのＭｅＯＨ（乾燥）中の、上記の反応で得たシクロデプシペプチド（１．００ｇ、０．７８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃａ（ＯＭｅ）２（０．２４ｇ、２．３５ｍｍｏｌ）をアルゴン下で一度に加えた。０℃で５時間、次いで室温で１時間後、ＵＰＬＣによる反応の進行のコントロールから、９８．６％反応率が示された。この溶液を０℃で冷却し、次いで１０％クエン酸の水溶液で中和した。メタノールをエバポレーションした。この水性混合物をＡｃＯＥｔ／ＮａＣｌ ２３．２％（１：１ ｖ／ｖ）の混合物１００ｍＬの中へと注ぎ込んだ。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をカラムクロマトグラフィーによって分離し、ペンタペプチド−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＭｅ（３Ａを得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：６６９．１６［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３５Ｈ６５Ｎ４Ｏ８］＋；計算値６６９．４８）。
【００９９】
断片（Ａａ）Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（４）の調製
ＴＨＦ（８．６ｍＬ）および水（１．１ｍＬ）中の、上記の反応で得たペンタペプチド（３Ａ）（１．１５ｇ、１．７２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を氷水浴の中で０℃に冷却し、次いで２０秒以内に２Ｍ ＬｉＯＨ（１．７２ｍＬ、３．４４ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。次いで冷却浴を取り除き、この混合物（ｐＨ＝１２〜１３）を室温で約３時間撹拌した。ＵＰＬＣによる反応の進行のコントロールから、完全反応率が示される。その後、この溶液を０℃に冷却し、１０％ クエン酸で中和した。テトラヒドロフランを減圧下でエバポレーションした。残渣をＡｃＯＥｔ（５０ｍＬ）に溶解し、１０％ クエン酸（３ｍＬ）および２３．２％ ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）（ｐＨ ３）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションし、断片（Ａａ）Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（４）を白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６５５．２１［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３４Ｈ６３Ｎ４Ｏ８］＋；計算値６５５．４６）。
【０１００】
１．２ 変異体Ｂ
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＭｅＯＨ（９０ｍＬ）中の天然のシクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）（米国特許第５，１１６，８１６号明細書、実施例２、または国際公開第０２／０９２０３３号パンフレット、実施例４、工程４−１のいずれかから得られる）（３．０ｇ、２．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下でＭｅＯＮａ（０．５１９ｇ、９．６ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた。０℃で１時間、次いで室温で２時間後、ＨＰＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この溶液を０℃で冷却し、次いで１０％ クエン酸の水溶液で中和した（ｐＨ ５〜６）。メタノールをエバポレーションした。この水性混合物を１５０ｍＬの酢酸エチルの中へと注ぎ込んだ。有機層をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。真空中での溶媒のエバポレーションおよびシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーにより、純粋なＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを得た。
【０１０１】
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（１Ｂ）の調製
５３ｍＬの無水ＣＨ２Ｃｌ２中の、上記の反応で得たウンデカペプチド（２．９６ｇ、２．３１ｍｍｏｌ、１．０当量）および１，１’−カルボニルジイミダゾール（１．５０ｇ、９．２５ｍｍｏｌ、４．０当量）の溶液を室温で２２時間撹拌した。反応の進行を分析用ＨＰＬＣおよびＴＬＣによってモニターした。この溶液を減圧下でエバポレーションした。残渣を１５０ｍＬの酢酸エチルに溶解し、１０％ クエン酸（３０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（１Ｂ）を白色粉末として得た。
【０１０２】
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ，Ｎ−カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（２Ｂ）の調製
乾燥ＤＭＳＯ（４０ｍＬ）中の、上記の反応で得たウンデカペプチド（３．２６ｇ、２．２２ｍｍｏｌ）の溶液を撹拌し、アルゴン雰囲気下、１００℃で３．５時間加熱した。反応の進行をＴＬＣおよび分析用ＨＰＬＣによってモニターした。その後、この溶液を、ＡｃＯＥｔ（２００ｍＬ）に溶解し、１０％ クエン酸水溶液（２回、３０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（１×３０ｍＬ）で連続的に洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。溶媒のエバポレーション後の残渣を高真空の中で乾燥し、ウンデカペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ（Ｏ−（Ｎ−イミダゾリル）カルボニル）−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ（Ｏ，Ｎ−カルボニル）−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（２Ｂ）を白色粉末として得た。
【０１０３】
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＭｅ（３Ｂ）の調製
０℃に冷却した１００ｍＬのＭｅＯＨ（乾燥）中の、上記の反応で得たウンデカペプチド（２Ｂ）（３．０５ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＫ（０．４５６ｇ、６．５３ｍｍｏｌ）をアルゴン下で一度に加えた。０℃で１時間、次いで室温で１時間後、ＨＰＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この溶液を０℃で冷却し、次いで１０％ クエン酸の水溶液で中和した。メタノールをエバポレーションした。この水性混合物をＡｃＯＥｔ／Ｈ２Ｏ（１：１ ｖ／ｖ）の混合物１００ｍＬの中へと注ぎ込んだ。有機層をＨ２Ｏ（１×１０ｍＬ）およびブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物を分取ＨＰＬＣによって分離し、ペンタペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＭｅ（３Ｂ）を得た。
【０１０４】
Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（４、断片Ａａ）の調製
ＴＨＦ（１８．８ｍＬ）中の、上記の反応で得たペンタペプチド（１．２６５ｇ、１．８８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を氷水浴の中で０℃に冷却し、次いで０．２Ｍ ＬｉＯＨ（１８．８ｍＬ、３．６６ｍｍｏｌ、２．０当量）を２０分間にわたって滴下した。次いで冷却浴を取り除き、この混合物（ｐＨ＝１２〜１３）を室温で約２．５時間撹拌した（ＴＬＣコントロール）。その後、この溶液を０℃に冷却し、０．１Ｍ ＨＣｌ（ｐＨ ２〜３）で中和した。テトラヒドロフランを減圧下でエバポレーションした。残渣をＡｃＯＥｔ（１００ｍＬ）に溶解し、１０％ クエン酸（１×２０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×２０ｍＬ）およびブライン（１×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、ペンタペプチド（ナトリウム塩）Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＮａを白色粉末として得た。
ＨＲ−ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：６７７．４６［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ３４Ｈ６２Ｎ４ＮａＯ８］＋；計算値６７７．４４６５）。
【０１０５】
２． 断片（Ｂａ）の調製：
Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅ（Ｂａ）
２．１． Ｂｏｃ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（２４０ｍＬ）中の市販のＨ−Ｇｌｙ−ＯＭｅ・ＨＣｌ（４．０ｇ、３１．８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（３２．８８ｍＬ、１８９．０ｍｍｏｌ、６．０当量）を加えた。その後、１５分後に、ＨＡＴＵ（１５．７２ｇ、４１．３４ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−ＭｅＬｅｕ−ＯＨ（７．８ｇ、３１．８ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で２２．４５時間後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（４００ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×８０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×８０ｍＬ）およびブライン（１×８０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物を分離し、エステルＢｏｃ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを白色の油状フォーム状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３３９．０２３４［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ１５Ｈ２８Ｎ２ＮａＯ５］＋；計算値３３９．１８９６）。
【０１０６】
２．２． Ｈ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（３０ｍＬ、２：３ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たジペプチド（９．９ｇ、３１．２９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃に４５分間、室温で２時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（２０分間）。その後、ＤＣＭ（６０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡ（２．０ｍＬ）を用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、ジペプチドＨ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）２１７．０５４６［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ１０Ｈ２１Ｎ２Ｏ３］＋；計算値２１７．１５５２）。
【０１０７】
２．３． Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１６０ｍＬ）中の、上記の反応で得たジペプチド（３．３８ｇ、１５．６３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（８．０８ｍＬ、４６．８９ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（７．７２ｇ、２０．１４ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（３．９８ｇ、１７．１９ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１５．４５時間後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（３６ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（２４０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×６０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×６０ｍＬ）およびブライン（１×６０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、エステルＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを黄色油状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４３０．０１２０［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ２１Ｈ４０Ｎ３Ｏ６］＋；計算値４３０．２９１７）。
【０１０８】
２．４． Ｈ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（１２ｍＬ、１：１ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たトリペプチド（３．０ｇ、６．９８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１時間および室温で２時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（１５分間）。その後、ＤＣＭ（２０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、Ｈ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの粗製アミン塩をさらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）３３０．０２２７［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ１６Ｈ３２Ｎ３Ｏ４］＋；計算値３３０．２３９３）；３５２．００１６［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ１６Ｈ３１Ｎ３ＮａＯ４］＋；計算値３５２．４２４８）；６５９．１６２６［２Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３２Ｈ６３Ｎ６Ｏ８］＋；計算値６５９．１６２６）。
【０１０９】
２．５． Ｂｏｃ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１０５ｍＬ）中の、上記の反応で得たトリペプチド（２．３ｇ、６．９８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（３．６１ｍＬ、２０．３４ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（３．４５ｇ、９．０７ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−ＭｅＶａｌ−ＯＨ（１．７８ｇ、７．６８ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１５．４５時間後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×５０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×５０ｍＬ）およびブライン（１×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物を分離し、エステルＢｏｃ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを黄色油状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）５４３．０４８４［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ２７Ｈ５１Ｎ４Ｏ７］＋；計算値５４３．３７５８）；５６５．０４６７［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ２７Ｈ５０Ｎ４ＮａＯ７］＋；計算値５６５．３５７７）。
【０１１０】
２．６． Ｈ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（１２ｍＬ、１：１ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たテトラペプチド（３．５６ｇ、６．５６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１時間および室温で２時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を高真空下で乾燥した（約１５分間）。その後、ＤＣＭ（４５ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、テトラペプチドＨ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４４３．０６９４［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ２２Ｈ４３Ｎ４Ｏ５］＋；計算値４４３．３２３３）；４６５．００６３［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ２２Ｈ４２Ｎ４ＮａＯ５］＋；計算値４６５．３０５３）。
【０１１１】
２．７． Ｂｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１１０ｍＬ）中の、上記の反応で得たテトラペプチド（２．９０ｇ、６．５６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（３．３９ｍＬ、１９．６８ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（３．２４ｇ、８．５３ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＯＨ（１．４６ｇ、７．２１ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１７．４５時間後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１５０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×５０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×５０ｍＬ）およびブライン（１×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物をＣＣによって分離し、エステルＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを黄色がかったフォーム状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６２８．５６［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３１Ｈ５８Ｎ５Ｏ８］＋；計算値６２８．４２８５）；６５０．５３［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ３１Ｈ５７Ｎ５ＮａＯ８］＋；計算値６５０．４１０５）。
【０１１２】
２．８． Ｈ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（６ｍＬ、１：１ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たペンタペプチド（１．６ｇ、２．５５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１時間および室温で２時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（約１５分間）。その後、ＤＣＭ（２０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、ペンタペプチドＨ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）５２８．４９［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ２６Ｈ５０Ｎ５Ｏ６］＋；計算値５２８．３７６１）。
【０１１３】
２．９． Ｂｏｃ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（６０ｍＬ）中の、上記の反応で得たペンタペプチド（１．３３ｇ、２．５２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（１．３０ｍＬ、７．５６ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（１．２５ｇ、３．２８ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−Ａｂｕ−ＯＨ（０．５６ｇ、２．７７ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で一晩の後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×４０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×４０ｍＬ）およびブライン（１×４０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物をＣＣによって分離し、エステルＢｏｃ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを黄色がかったフォーム状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）７１３．１５１３［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３５Ｈ６５Ｎ６Ｏ９］＋；計算値７１３．４８１３）；７３５．１０１０［Ｍ＋Ｎａ］＋（［Ｃ３５Ｈ６４Ｎ６ＮａＯ９］＋；計算値７３５．４６３２）。
【０１１４】
２．１０． Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅ （Ｂａ）の調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（６ｍＬ、１：１ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たヘキサペプチド（０．８２ｇ、１．１５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１時間および室温で１時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（約１５分間）。その後、ＤＣＭ（２５ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、ヘキサペプチドＨ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６１３．１９２５［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３０Ｈ５７Ｎ６Ｏ７］＋；計算値６１３．４２８９）。
【０１１５】
３． 断片（Ａａ）および断片（Ｂａ）のカップリング
３．１． Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（３３ｍＬ）中の、上記の反応で得たヘキサペプチドＨ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅ（０．７ｇ、１．１４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（０．５９ｍＬ、３．４２ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（０．５６ｇ、１．４８ｍｍｏｌ、１．３当量）およびペンタペプチドＤ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（０．７５ｇ、１．１４ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１６．４５時間後、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（１３０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×３５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×３５ｍＬ）およびブライン（１×３５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗生成物をＣＣによって精製し、ウンデカペプチドＤ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＭｅを白色フォーム状物として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６２５．６９０３［Ｍ／２＋Ｈ］＋（［Ｃ３２Ｈ５９Ｎ５Ｏ７］＋；計算値６２５．４４１５）；１２４９．７７９３［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６４Ｈ１１７Ｎ１０Ｏ１４］＋；計算値１２４９．８７５１）。
【０１１６】
３．２． Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨの調製
ＴＨＦ（１０．４ｍＬ）中の、上記の反応で得たウンデカデプシペプチド（１．３０ｇ、１．０４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を氷水浴の中で０℃に冷却し、次いで０．２Ｍ ＬｉＯＨ（１０．４ｍＬ、２．０８ｍｍｏｌ、２．０当量）を１０分間にわたって滴下した。冷却浴を使用したままにし、この混合物（ｐＨ＝１２〜１３）を０℃で約２０分間および室温で３０分間撹拌した（ＴＬＣコントロール）。その後、この溶液を０℃に冷却し、１０％ クエン酸水溶液（ｐＨ ３〜４）で中和した。この溶液を減圧下でエバポレーションした。残渣をＡｃＯＥｔ（１４０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２Ｏ（１×３０ｍＬ）およびブライン（１×３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗生成物をＣＣによって精製し、ウンデカペプチドＤ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−ＯＨを白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）１２３５．７６９０［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６３Ｈ１１５Ｎ１０Ｏ１４］＋；計算値１２３５．８５９４）。
【０１１７】
４． マクロラクトン化：シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）の調製
ＤＣＭ（１２８ｍＬ）中のＤＭＡＰ（０．５０７ｇ、４．１４４ｍｍｏｌ、４．０当量）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＰｙＢＯＰ）（１．０７８ｇ、２．０７１ｍｍｏｌ、２．０当量）の溶液に、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の、上記の反応で得たウンデカデプシペプチド酸（１．２８ｇ、１．０３６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を２時間にわたって滴下した。酸の添加が完結した後、この混合物を一晩（２２時間）撹拌し、次いでこの混合物を分液漏斗に移した。全反応時間＝２４時間。この溶液を０．１Ｍ ＨＣｌ（２０ｍＬ）で洗浄し、有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗生成物をＣＣによって精製し、これによりシクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）を白色固体として得た。その後、得た化合物を分取ＨＰＬＣによって再精製し、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）を白色粉末として得た。純度９９．３８％（８０℃、３０分）。
【０１１８】
（Ｃ６３Ｈ１１２Ｎ１０Ｏ１３、ＭＷ＝１２１７．６２２６ｇ／ｍｏｌ）。
ＵＰＬＣ（４０℃、ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ（登録商標） ＢＥＨ Ｃ１８ １．７μｍ、２１４ｎｍ、５０→９５％、７分）ｔＲ＝２．９２３分。
ＵＰＬＣ
【０１１９】
天然のウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｔｈｒ−Ｓａｒ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）から出発してウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ）を得るための全体の収率は、５０％を超える。
【０１２０】
実施例１ｂ：
化合物（Ｉｃ）、（Ｉｆ）、（Ｉｇ）、（Ｉｉ）および（Ｉｋ）は、実施例１ａと同様の反応経路に従って調製することができる。
【０１２１】
実施例２
シクロウンデカデプシペプチド（Ｉｂ）の調製：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｂ）
２． 断片（Ｂｂ）の調製：
Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ （Ｂｂ）
２．１． Ｂｏｃ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１３０ｍＬ）中の市販のＨ−Ａｌａ−ＯＭｅ・ＨＣｌ（２．００ｇ、１４．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（１４．６８ｍＬ、８６．０ｍｍｏｌ、６．０当量）を加えた。その後、１５分後、ＨＡＴＵ（６．５２ｇ、１７．１８ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＢｏｃ−ＭｅＬｅｕ−ＯＨ（３．５１２ｇ、１４．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で４８時間後（ＲＴ＝２日と１５分間）、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×４０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×４０ｍＬ）およびブライン（１×４０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、エステルＢｏｃ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを淡黄色がかった油状物として得た。試料（３０ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、このペプチドを凍結乾燥し、エステルＢｏｃ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
【０１２２】
２．２． Ｈ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（１０ｍＬ、２：３ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たジペプチド（１．７０ｇ、５．１４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１．５時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（２０分間）。その後、ＤＣＭ（１０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８まで粉砕した。その後、反応混合物をＤＣＭ（６０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（１×１０ｍＬ）およびブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄した。有機相を濾過し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、エバポレーションし、高真空下で乾燥した。Ｈ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程のために使用した。
【０１２３】
２．３ Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１０８ｍＬ）中の、上記の反応で得たジペプチド（７）（２．１７ｇ、９．４２ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（６．４５ｍＬ、３７．６８ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（４．６５ｇ、１２．２５ｍｍｏｌ、１．３当量）およびＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ（２．３９ｇ、１０．３６ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１５時間後（１５時間と１５分間）、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×２０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×２０ｍＬ）およびブライン（１×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、トリペプチドＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを黄色油状物として得た。この試料を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、このペプチドを凍結乾燥し、トリペプチドＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
【０１２４】
２．４． Ｈ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（１０ｍＬ、２：３ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たトリペプチド（２．００ｇ、４．５０ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で２時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。生成物を高真空下で乾燥し（２０分間）、粗製物質を得た。その後、ＤＣＭ（２０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８（リトマス紙）まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、粗製アミンＨ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅをさらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。この試料（２５ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、生成物を凍結乾燥し、トリペプチドＨ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを固体として得た。
【０１２５】
２．５． Ｂｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−ＯＨの調製
Ｂｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−Ｖａｌ−ＯＭｅから出発し、ＢｕＬｉおよびフルオロホウ酸トリエチルオキソニウムを使用して、次いで文献［Ｊｅａｎ Ｆｒａｎｃｏｉｓ． Ｇｕｉｃｈｏｕ、ＰｈＤ学位論文、題名「Ｄｅ ｎｏｕｖｅａｕｘ ａｎａｌｏｇｕｅｓ ｄｅ Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ Ａ ｃｏｍｍｅ ａｇｅｎｔ ａｎｔｉ−ＶＩＨ−１」、Ｆａｃｕｌｔｅ ｄｅｓ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｅ ｄｅ Ｌａｕｓａｎｎｅ（ローザンヌ大学、理学部）、２００１年、１２１−１２２頁］に従ったメチルエステルの加水分解によってＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−ＯＨを得た。
【０１２６】
２．６． Ｂｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
−８℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（８ｍＬ）中のトリペプチドＨ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（０．０９６ｇ、０．２９１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にアルゴン下でＤＩＰＥＡ（０．１５ｍＬ、０．８７ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、１０分後、ＨＡＴＵ（０．１３ｇ、０．３５ｍｍｏｌ、１．２当量）およびジペプチドＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−ＯＨ（０．１ｇ、０．２９ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。−８℃で１０分間、次いで室温で４０分後、ＨＰＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（１ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×５ｍＬ）およびブライン（１×５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物をＣＣによって分離し、ペンタペプチドＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを油状物として得た。この試料を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、生成物を凍結乾燥し、ペンタペプチドＢｏｃ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
【０１２７】
２．７． Ｈ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（４．０ｍＬ、２：３ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たペンタペプチド（０．４５ｇ、０．６９ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１．５時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。残渣を高真空下で乾燥した（０．５時間）。その後、ＤＣＭ（１０ｍＬ）を加え、過剰のＴＦＡを中和するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８（リトマス紙）まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、ペンタペプチドＨ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの粗製アミン塩を、さらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。試料（３０ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、このペプチドを凍結乾燥し、ペンタペプチドＨ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの遊離アミンを白色粉末として得た。
【０１２８】
２．８． Ｂｏｃ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の、上記の反応で得た粗製ペンタペプチド（０．２ｇ、０．３６ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（０．１８ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。その後、５分後、ＨＡＴＵ（０．１９ｇ、０．５ｍｍｏｌ、１．４当量）およびＢｏｃ−Ａｂｕ−ＯＨ（０．０８８ｇ、０．４２ｍｍｏｌ、１．１当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１．１５時間後（ＲＴ＝１．５時間）、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（２ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×１０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×１０ｍＬ）およびブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、ヘキサペプチドＢｏｃ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを黄色油状物として得た。試料（３０ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、生成物を凍結乾燥し、ヘキサペプチドＢｏｃ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
【０１２９】
２．９． Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ断片（Ｂｂ）の調製
ＴＦＡ／ＤＣＭ（３．０ｍＬ、２：３ ｖ／ｖ）中の、上記の反応で得たヘキサペプチド（０．１８７ｇ、０．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を０℃で１．５時間保ち、溶媒を減圧下で除去した。この粗生成物を高真空下で乾燥した（０．５時間）。その後、ＤＣＭ（３ｍＬ）を加え、ＴＦＡを除去するために、この混合物を０℃でＤＩＰＥＡを用いてｐＨ ７〜８（リトマス紙）まで粉砕した。エバポレーションおよび乾燥後、粗製アミンＨ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅをさらに精製することなく次のカップリング工程に使用した。粗生成物の試料（２３ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、このペプチドを凍結乾燥し、断片（Ｂａ）Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）６４１．２５９［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ３２Ｈ６１Ｎ６Ｏ７］＋；計算値６４１．４６０２）。
【０１３０】
３． 断片（Ａａ）および断片（Ｂｂ）のカップリング
３．１． Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅの調製
０℃に冷却した乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の、上記の反応で得たヘキサペプチドＨ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（０．１６ｇ、０．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン下でＤＩＰＥＡ（０．２１４ｍＬ、１．２６ｍｍｏｌ、５．０当量）を加えた。その後、５分後、ＨＡＴＵ（０．１２ｇ、０．３１ｍｍｏｌ、１．２５当量）および上記で得たペンタデプシペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−ＯＨ（４）（０．１６ｇ、０．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）を一度に加えた。０℃で１５分間、次いで室温で１．１５時間後（ＲＴ＝１．５時間）、ＴＬＣによる反応の進行のコントロールから、完結が示される。この反応液を１０％ ＮａＨＣＯ３（３ｍＬ）の添加によってクエンチし、１５分間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（４０ｍＬ）で希釈し、１０％ クエン酸（１×８ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×８ｍＬ）およびブライン（１×８ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。粗製混合物をＣＣによって分離し、ウンデカペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色フォーム状物として得た。分析用試料（１８ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、生成物を凍結乾燥し、ウンデカペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅを白色粉末として得た。
【０１３１】
３．２． Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＨの調製
ＴＨＦ（２．５ｍＬ）中の、上記の反応で得たウンデカペプチドメチルエステル（０．２７ｇ、０．２１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を氷水浴の中で０℃に冷却し、次いで０．２Ｍ ＬｉＯＨ（２．１１ｍＬ、０．４２ｍｍｏｌ、２．０当量）を１０分間にわたって滴下した。次いで冷却浴を取り除き、この混合物（ｐＨ＝１２〜１３；リトマス紙）を室温で１時間２０分の間撹拌した（ＴＬＣコントロール）。その後、この溶液を０℃に冷却し、１．０Ｍ ＨＣｌを用いてｐＨ ３〜４まで酸性にした。この溶液を減圧下でエバポレーションした。残渣をＡｃＯＥｔ（４０ｍＬ）に溶解し、１０％ クエン酸（１×８ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１×８ｍＬ）およびブライン（１×８ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下でエバポレーションした。この粗製混合物をＣＣによって分離し、酸Ｈ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＨを白色粉末として得た。この試料（４０ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再精製し、生成物を凍結乾燥し、ウンデカペプチドＨ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ−ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＨを白色粉末として得た。
【０１３２】
４． マクロラクトン化：シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｂ）の調製
ＤＣＭ（１２ｍＬ）中のＤＭＡＰ（０．０４８ｇ、０．３９ｍｍｏｌ、４．０当量）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＰｙＢＯＰ）（０．１０２ｇ、０．１９６ｍｍｏｌ、２．０当量）の溶液に、ＤＣＭ（４ｍＬ）中の、上記の反応で得たウンデカペプチド（０．１２４ｇ、０．０９８ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を１．５時間にわたって滴下した。酸の添加が完結した後にこの混合物を撹拌し（ＲＴ＝２４時間）、次いで分液漏斗に移した。この溶液を１Ｍ ＨＣｌ（２ｍＬ）で洗浄し、有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、これによりシクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）を白色固体として得た。試料（７７ｍｇ）を半分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、生成物を凍結乾燥し、シクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｂ）を白色粉末として得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）１２４５．７８７［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６５Ｈ１１７Ｎ１０Ｏ１３］＋；計算値１２４５．８８０２）、６２３．４６５［Ｍ／２＋Ｈ］＋（計算値６２３．４４４）。
【０１３３】
実施例３：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｈ）の調製
（Ｉｈ）の調製は、実施例２に記載した化合物の調製と同様にして行った。
【０１３４】
断片（Ｂｂ）の調製について実施例２に記載した反応条件と同様の反応条件を適用することにより、断片（Ｂｈ）を調製した。次いで、実施例２に記載した反応条件と同様の反応条件を適用することにより、断片（Ｂｈ）を断片（Ａａ）にカップリングした。
【０１３５】
次いで、実施例２に記載した条件と同様の条件を適用することにより、マクロラクトン化を行い、シクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ （Ｉｈ）を得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）１２５９．８８８［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６６Ｈ１１９Ｎ１０Ｏ１３］＋；計算値１２５９．８９５８）；１２６０．７８８［Ｍ＋２Ｈ］２＋（［Ｃ６６Ｈ１２０Ｎ１０Ｏ１３］２＋；計算値１２６０．９０３７）。
【０１３６】
実施例４：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｄ）の調製
断片（Ｂａ）の調製について実施例１に記載した反応条件と同様の反応条件を適用することにより、断片Ｈ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−ＯＭｅ（Ｂｄ）を調製した。次いで、実施例１に記載した反応条件と同様の反応条件を適用することにより、断片（Ａａ）へのカップリングおよびマクロラクトン化を行い、シクロウンデカデプシペプチド、シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｄ）を得た。
ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）１２６１．８８８［Ｍ＋Ｈ］＋（［Ｃ６６Ｈ１１７Ｎ１０Ｏ１４］＋；計算値１２６１．８７５１）。
【０１３７】
実施例５：
ＨＣＶレプリコン系における阻害効果
本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物が抗ＨＣＶ活性を有するかどうかを判定するために、ＨＣＶレプリコン系におけるこれらの化合物の阻害効果を比較する実験を行った。
【０１３８】
アッセイは、Ｃ型肝炎ウイルス遺伝子型１ｂ Ｃｏｎ１レプリコン（Ｌｏｈｍａｎｎら ２００１． Ｊ．Ｖｉｒｏｌ． ７５：１４３７−１４４９；およびＬｏｈｍａｎｎら １９９９． Ｓｃｉｅｎｃｅ． ２８５：１１０−１１３）を含有するＨｕｈ ９−１３を使用した。細胞を、細胞増殖培地、１：４〜１：５の比で１０％ ＦＣＳ、１％ 非必須アミノ酸、１％ ペニシリン／ストレプトマイシンおよび２％ ジェネティシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を補ったＤＭＥＭの中で継代培養し、７５ｃｍ２の組織培養フラスコ（Ｔｅｃｈｎｏ Ｐｌａｓｔｉｃ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）の中で３〜４日間増殖させ、回収し、細胞増殖抑制効果／細胞毒性効果および抗ウイルス効果の評価のために、９６穴の組織培養マイクロタイタープレート（Ｆａｌｃｏｎ、Ｂｅｃｋｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）の中で、５０００細胞／ウェル（１００μｌ／ウェル）の密度でアッセイ培地（ＤＭＥＭ、１０％ ＦＣＳ、１％ 非必須アミノ酸、１％ ペニシリン／ストレプトマイシン）に播種した。このマイクロタイタープレートを一晩（３７℃、５％ ＣＯ２、９５〜９９％相対湿度）インキュベーションし、コンフルエントでない細胞単層を得た。
【０１３９】
標準的な９６穴プレート（Ｂｅｃｋｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）の中で、ＭＴＴアッセイ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ ９６ ＡＱｕｅｏｕｓ Ｎｏｎ−Ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ、Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、並列の培養物において細胞密度および細胞増殖抑制効果を見積もった。このアッセイでは、３−（４，５−ジメチル−チアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシ−フェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム（ＭＴＳ）をホルマザンへと生物還元し、このホルマザンをプレートリーダーで、４９８ｎｍで定量する。ホルマザンの産生は生細胞の数と直接相関する。吸光度は４９８ｎｍの波長で測定し（Ｓａｆｉｒｅ２、Ｔｅｃａｎ）、光学密度（ＯＤ値）は、未処置の対照に対する百分率へと変換した。
【０１４０】
当該化合物を４ｍｍｏｌ／Ｌの濃度でＤＭＳＯに溶解した。原液を直ちに使用して実験を始めた。当該化合物を０．０００１μｍｏｌ／Ｌ〜１００μｍｏｌ／Ｌの範囲の２４の異なる濃度で試験した。このアッセイでのＤＭＳＯの最高濃度を、２．５％（１００μＭの当該化合物の最終濃度において）であると定めた。このアッセイの設定の中では、ＤＭＳＯ百分率は、当該化合物の濃度の減少に伴って減少した。
【０１４１】
抗ウイルス効果の評価のために、アッセイ培地を吸引し、乾燥した単層を伴うプレートを抽出まで−８０℃で保存した。このプレートを室温で解凍した後、細胞単層を１００μｌのｃｅｌｌ−ｔｏ−ｃＤＮＡ ｌｙｓｉｓ ｂｕｆｆｅｒ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて溶解した。この細胞の溶解を室温で１０分間進行させ、その後、すべての液体をＰＣＲプレート（Ａｘｙｇｅｎ）に移した。このＰＣＲプレートを７５℃で１５分間インキュベーションした（Ｔ３、Ｂｉｏｍｅｔｒａ）。溶解液をＲＮａｓｅ／ＤＮａｓｅ不含水で１：２に希釈し、その後、５μｌをリアルタイムＰＣＲプレート（ＡｐｐＩｌｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）に移した。
【０１４２】
レプリコンＲＮＡ含有量を、リアルタイムの定量的なワンステップＲＴ−ＰＣＲ法（ＲＴ−ｑＰＣＲ）：Ｌｏｗ Ｒｏｘ Ｏｎｅ−Ｓｔｅｐ ＲＴ−ｑＰＣＲ ｍａｓｔｅｒ ｍｉｘ、Ａｂｇｅｎｅ）を使用して定量した。使用した順方向プライマーおよび逆方向プライマーは、それぞれ５’−ＣＣＡ ＧＡＴ ＣＡＴ ＣＣＴ ＧＡＴ ＣＧＡ ＣＣＡ Ｇ−３’および５’−ＣＣＧ ＧＣＴ ＡＣＣ ＴＧＣ ＣＣＡ ＴＴＣ−３’であった。蛍光発生プローブは５’−ＡＣＡＴＣＧＣＡＴＣＧＡＧＣＧＡＧＣＡＣＧＴＡＣ−３’であった。試料の分析は、ＳＤＳ７５００Ｆ（ＡｐｐＩｌｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、標準的な熱サイクリングプロファイル：４８℃で３０分、９５℃で１０分、９５℃で１５秒および６０℃で１分の４０サイクル）を使用して実施し、その後、レプリコンＲＮＡ量を未処置の対照に対する百分率へと変換した。
【０１４３】
ＥＣ５０（用量反応曲線から導かれる値）は、ウイルス複製の５０％阻害が観察される濃度を表す。ＣＣ５０（用量反応曲線から導かれる値）は、当該細胞の代謝活性が未処置の細胞の代謝活性５０％にまで減少する濃度を表す。
【０１４４】
これらの実験からの結果から、ＥＣ５０±ＳＤ（標準偏差またはＳｔｄ．Ｄｅｖ．）（これは、ＨＣＶレプリコン複製を５０％阻害するために必要とされる有効濃度である）、およびＣＣ５０±ＳＤ（可能である場合はいつでも）（これは、指数関数的に増殖する細胞の増殖を５０％阻害するのに必要とされる濃度である）の算出が可能となった。ＥＣ５０およびＣＣ５０±ＳＤの値は、それぞれ、３つの個々の用量反応曲線から導かれるすべてのＥＣ５０、またはＣＣ５０値の中央値として算出した。当該化合物の治療濃度域を示す選択性指数（ＳＩ）をＣＣ５０とＥＣ５０との間の比として算出した。
【０１４５】
表１は、Ｈｕｈ ９−１３細胞における、選択した化合物のＥＣ５０、ＣＣ５０（μｍｏｌ／Ｌ）およびＳＩ値の比較の結果を示す。
【０１４６】
【表１】
【０１４７】
化合物の濃度は、その特定の濃度で抗レプリコン効果が７０％閾値よりも十分に高くかつ３０％以下の代謝活性の減少が観察される場合には、ＨＣＶレプリコン系における真の抗ウイルス効果を引き出すと考えられる。
【０１４８】
表１に示すように、Ｈｕｈ ９−１３細胞で得たこれらの結果は、これらの化合物が、細胞培養液の中でのＣ型肝炎ウイルスレプリコンの複製を選択的に阻害することを示し、２桁のナノモル濃度範囲のＥＣ５０値を有するＤｅｂｉｏ ０２５と同様またはこれより高い効力および同様またはこれより高い選択性指数を実証する。
【０１４９】
実施例６
非免疫抑制活性
本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物が非免疫抑制活性を有するかを判定するために、コンカナバリン−Ａによって誘導されるＴ細胞増殖の用量依存的阻害を比較する実験を行った（表２を参照）。
【０１５０】
このアッセイの方法は、Ｄａｙｔｏｎら（１９９２． Ｍｏｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ４１．６７１−６７６）およびＭｉｓｈｅｌｌら（１９８０． Ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｖ、ＸＸＩＸ、Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ Ｃｏ．、カリフォルニア州、サンフランシスコ、１５３−１６０）によって記載されているようにして、実施した。当該化合物のＩＣ５０（５０％阻害濃度）を用量反応曲線から導き、ＣｓＡのＩＣ５０と比較した（ＩＣ５０比）。
【０１５１】
【表２】
【０１５２】
この研究では、化合物（Ｉａ）、（Ｉｂ）および（Ｉｄ）は、（ＩＣ５０比という点では）シクロスポリンＡ（ＣｓＡ）よりも少なくとも約３００倍小さく免疫抑制性である。
【０１５３】
実施例７：
肝トランスポーター相互作用
本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物が肝トランスポーターと相互作用するかどうかを判定するために、多剤耐性関連タンパク質２（ＭＲＰ２）、有機アニオン輸送ポリペプチド１Ｂ１（ＯＡＴＰ１Ｂ１）、胆汁酸排泄ポンプ（ＢＳＥＰ）およびナトリウム・タウロコール酸共輸送体ポリペプチド（ＮＴＣＰ）に対する濃度依存的阻害を比較する実験を行った。これらのトランスポーターは、胆汁酸塩またはビリルビンなどの内因性化合物の肝胆循環（ｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ）に関与する（総説として、Ｃ．Ｐａｕｌｉ−Ｍａｇｎｕｓら、Ｊ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００５、４３：３４２−３５７を参照）。それらのうちのいくつかは、生体異物の排泄にも寄与する。
【０１５４】
ＭＲＰ２およびＢＳＥＰは、ヨトウガ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）（Ｓｆ９）卵巣細胞を組み換えバキュロウイルスに感染させることにより、ＳＯＬＶＯ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙによってこの昆虫細胞の中で、発現された。当該トランスポーターを含有する反転膜小胞（ｉｎｓｉｄｅ−ｏｕｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｖｅｓｉｃｌｅｓ）への放射活性プローブ基質（ＭＲＰ２およびＢＳＥＰについて、それぞれエストラジオール−１７−β−グルクロニドおよびタウロコール酸塩）の輸送の阻害をシンチレーション計数によって測定した。これらのヒト取り込みトランスポーターを発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を用いてＯＡＴＰ１Ｂ１およびＮＴＣＰアッセイを行った。輸送されたプローブ基質（ＯＡＴＰ１Ｂ１およびＮＴＣＰについて、それぞれエストロン−３−硫酸およびタウロコール酸塩）の量を細胞溶解後の液体シンチレーションまたは蛍光測光によって測定した。当該化合物のＩＣ５０（プローブ基質の輸送を５０％阻害するために必要とされる濃度と定義される。５０％阻害濃度）を濃度−応答曲線から導き、そしてＤｅｂｉｏ ０２５のＩＣ５０と比較した（表中で「Ｄｅｂｉｏ ０２５に対する倍数」として表されるＩＣ５０比）。
【０１５５】
ＭＲＰ２は胆汁酸塩非依存的な胆汁流の主要な駆動力であり、幅広いスペクトルの有機アニオン（ビリルビン−ジグルクロニド、胆汁酸塩接合体ならびにいくつかの薬物が含まれる）を輸送する。表３は、選択した化合物とこのトランスポーターとの相互作用の結果を示す。
【０１５６】
【表３】
【０１５７】
ＯＡＴＰ１Ｂ１はナトリウム非依存的に胆汁酸塩を輸送する。さらには、多くの薬物がＯＡＴＰの基質である。表４は、選択した化合物とＯＡＴＰ１Ｂ１との相互作用の結果を示す。
【０１５８】
【表４】
【０１５９】
ＢＳＥＰは、肝細胞から毛細胆細管の中への親胆汁性（ｃｈｏｌｅｐｈｉｌｉｃ）化合物の分泌に関与する主要な胆汁酸塩排出系である。表５は、選択した化合物とＢＳＥＰとの相互作用の結果を示す。
【０１６０】
【表５】
【０１６１】
ＮＴＣＰは、胆汁形成にとって必須である、門脈循環からの胆汁酸塩のナトリウム依存的な取り込みを媒介する。表６は、選択した化合物とＮＴＣＰとの相互作用の結果を示す。
【０１６２】
【表６】
【０１６３】
肝トランスポーターに関するこれらのインビトロでの検討のほかに、本発明のシクロウンデカデプシペプチド化合物を、インビトロでの代謝酵素の阻害、および動物の中でのインビボでの薬物動態特性に関しても評価した。
【０１６４】
表３〜表６に示すように、インビトロでの輸送実験からの結果は、これらの化合物が、Ｄｅｂｉｏ ０２５と比べてはるかに低い、いくつかの肝トランスポーターを阻害する効力を実証するということを示す。特に、いくつかの化合物は、ＭＲＰ２に対する阻害の不存在および／またはＯＡＴＰ１Ｂ１に対する最高で５０倍低い効力を示す。それゆえ、これらの化合物は、肝トランスポーターの阻害に関連する潜在的な副作用（例えば高ビリルビン血症）、もしくは肝トランスポーターの阻害に関連する潜在的な薬物−薬物相互作用（例えばアトルバスタチンなどのＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤との）のいずれかを低減する、またはその両方でさえも低減することが予想される。
【０１６５】
（略語の一覧）
Ａｂｕ Ｌ−α−アミノ−ｎ−酪酸
Ａｃ アセチル
ＡｃＯＥｔ 酢酸エチル
ＡｃＯＨ 酢酸
Ａｌａ Ｌ−アラニン
Ｂｏｃ ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＢＳＥＰ 胆汁酸排泄ポンプ
ｔ−Ｂｕ ｔｅｒｔ−ブチル
Ｃａ（ＭｅＯ）２ カルシウムメトキシド
ＣＣ カラムクロマトグラフィー
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ ４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
Ｅｑ 当量
ＥＳＩ−ＭＳ エレクトロスプレーイオン化質量分析
ＥｔＶａｌ Ｎ−エチル−Ｌ−バリン
Ｆｍｏｃ ９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＨＡＴＵ Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イル−メチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロリン酸塩 Ｎ−オキシド
Ｄ−Ｈｉｖ Ｄ−ヒドロキシイソ吉草酸
ｇ グラム
ＨＣＯＯＨ ギ酸
ＨＰＬＣ 高性能液体クロマトグラフィー
ＨＲ−ＭＡＬＤＩ−ＭＳ 高分解能ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析
ＨＲ−Ｑ−ＴＯＦ−ＭＳ 高分解能Ｑ−ＴＯＦ質量分析
Ｉｍ２ＣＯ Ｎ，Ｎ−カルボニル−ジイミダゾール（ＣＤＩ）
Ｋｇ キログラム
ＫＯＭｅ カリウムメトキシド
Ｌ リットル
ＭＡＬＤＩ マトリクス支援レーザー脱離／イオン化
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ 飛行時間型質量分析
Ｍｅ メチル
Ｄ−ＭｅＡｌａ Ｎ−メチル−Ｄ−アラニン
ＭｅＢｍｔ Ｎ−メチル−（４Ｒ）−４−［（Ｅ）−２−ブテニル］−４，４−ジメチル−Ｌ−トレオニン
ＭｅＬｅｕ Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシン
ＭｅＣＮ アセトニトリル
ＭｅＯＨ メタノール
ＭｅＶａｌ Ｎ−メチル−Ｌ−バリン
ｍｇ ミリグラム
ｍＬ ミリリットル
ＭＲＰ２ 多剤耐性関連タンパク質２
ＭＳ 質量分析
ＭｔＢＥ メチル−ｔｅｒｔ−ブチル−エーテル
ＮＭＲ 核磁気共鳴
ＮＴＣＰ ナトリウム・タウロコール酸共輸送体ポリペプチド
ＯＡＴＰ１Ｂ１ 有機アニオン輸送ポリペプチド１Ｂ１
ＰｙＢＯＰ （ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）−トリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロリン酸塩
ＲＰ 逆相
ＲＰ−ＨＰＬＣ 逆相ＨＰＬＣ
ＲＴ 反応時間
Ｔｈｒ Ｌ−トレオニン
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ｔＲ 保持時間
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
Ｔｊ ジャケットの温度
ＴＬＣ 薄層クロマトグラフィー
Ｔｒ 反応器の中の温度
ＵＰＬＣ 超高性能液体クロマトグラフィー
Ｖｏｌ． ボリューム（１ｇの主原料が１ボリュームを意味する）
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）のシクロウンデカデプシペプチド化合物
【化１】
（式中、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、４−フルオロ−ＭｅＢｍｔ、ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔ；Ｏ−アセチル−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｎｖａ、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＥｔ２）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＶａｌ、ＭｅＴｈｒ、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＡｌａ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＥｔＰｈｅ、ＥｔＴｙｒ、ＥｔＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ、ＭｅＴｙｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＰｈｅ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（この場合、メチオニンの硫黄原子はスルホキシドまたはスルホンである）であり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである）。
【請求項２】
式（Ｉ）において、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（ここで、Ｏｘは−ＳＯＭｅ、−ＳＯ２Ｍｅである）、ＭｅＶａｌ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＭｅＴｙｒであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａであり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＶａｌ、ＥｔＶａｌであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、ＭｅＬｅｕ、Ｓａｒであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
以下の式：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｂ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｃ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｄ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＡｌａ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｅ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｆ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｇ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｈ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｉ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−Ｓａｒ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｋ）
を有する、請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｃ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための医薬組成物であって、１以上の薬学的に許容できる希釈剤または担体と一緒に、請求項１から請求項４のずれか１項に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項６】
少なくともａ）請求項１から請求項４のずれか１項に記載の化合物および請求項５に記載の医薬組成物からなる第１の薬剤と、ｂ）ＨＣＶ複製に対して作用する特性を有する第２の薬剤とを含む、医薬的組み合わせ。
【請求項７】
Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害の予防または処置において使用するための、請求項６に記載の医薬的組み合わせ。
【請求項８】
医薬としての、請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
抗ウイルス薬としての、請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害の処置または予防における医薬の製造における、請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１１】
必要とする対象においてＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための方法であって、前記対象に、治療上有効量の請求項１から請求項４のずれか１項に記載の化合物または請求項５に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
【請求項１２】
必要とする患者においてＨＣＶ複製を阻害する方法であって、前記対象に、治療上有効量の請求項１から請求項４のずれか１項に記載の化合物または請求項５に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
【請求項１３】
治療上有効量の請求項１から請求項４のずれか１項に記載の化合物または請求項５に記載の医薬組成物、および少なくともＨＣＶ複製に対して作用する特性を有する薬剤から選択される第２の薬剤の、相伴うかまたは逐次的な同時投与を含む、請求項１１または請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
抗ＨＣＶ特性を有する前記薬剤は、インターフェロン、例えばインターフェロン−α−２ａもしくはインターフェロン−α−２ｂ；または水溶性のポリマーもしくはヒトアルブミンに接合されたインターフェロン；抗ウイルス薬、例えばリバビリン、ラミブジン、ＮＶ０８もしくはＮＭ２８３；ＮＳ３−４Ａセリンプロテアーゼ、ヘリカーゼもしくはＲＮＡポリメラーゼなどのＨＣＶコード化因子の阻害剤；抗線維化剤、例えばＮ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体；免疫調節剤、例えばミコフェノール酸；または、Ｓ１Ｐ受容体作動薬、例えばＦＴＹ７２０もしくは任意にリン酸化されているその類似体からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１】
式（Ｉ）のシクロウンデカデプシペプチド化合物
【化１】
（式中、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、４−フルオロ−ＭｅＢｍｔ、ジヒドロ−ＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔ；Ｏ−アセチル−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｎｖａ、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＥｔ２）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＶａｌ、ＭｅＴｈｒ、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＡｌａ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＥｔＰｈｅ、ＥｔＴｙｒ、ＥｔＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｈｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ、ＭｅＴｙｒ（ＯＡｃ）、ＭｅＴｙｒ（ＯＭｅ）、ＭｅＰｈｅ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（この場合、メチオニンの硫黄原子はスルホキシドまたはスルホンである）であり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである）。
【請求項２】
式（Ｉ）において、
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔ、８−ヒドロキシ−ＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｔｈｒ（ＯＭｅ）、Ｔｈｒ（ＯＡｃ）、Ｔｈｒ（ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、５−ヒドロキシ−Ｎｖａであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−３−フルオロ−ＭｅＡｌａ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ、Ｄ−ＭｅＳｅｒ（ＯＡｃ）、Ｄ−ＭｅＡｓｐ（ＯＭｅ）であり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＭｅｔ（Ｏｘ）（ここで、Ｏｘは−ＳＯＭｅ、−ＳＯ２Ｍｅである）、ＭｅＶａｌ、ＥｔＶａｌ、ＥｔＩｌｅ、ＭｅＴｙｒであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、Ｓａｒ、ＭｅＬｅｕであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＡＸＸ１はＭｅＢｍｔであり；
ＡＸＸ２はＡｂｕ、Ｖａｌ、Ｔｈｒであり；
ＡＸＸ３はＤ−ＭｅＡｌａであり；
ＡＸＸ４はＭｅＩｌｅ、ＭｅＶａｌ、ＥｔＶａｌであり；
ＡＸＸ５はＬｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅであり；
ＡＸＸ６はＭｅＡｌａ、ＭｅＬｅｕ、Ｓａｒであり；かつ
ＡＸＸ７はＧｌｙ、Ａｌａである、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
以下の式：
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉａ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｂ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｃ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｄ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＡｌａ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｅ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｆ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｉｌｅ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｇ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＥｔＶａｌ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ａｌａ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｈ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ａｂｕ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＩｌｅ−Ｌｅｕ−ＭｅＬｅｕ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｉ）
シクロ−（ＭｅＢｍｔ−Ｖａｌ−Ｄ−ＭｅＡｌａ−ＭｅＶａｌ−Ｖａｌ−Ｓａｒ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｈｉｖ−ＭｅＬｅｕ−Ｌｅｕ−ＭｅＶａｌ） （Ｉｋ）
を有する、請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｃ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための医薬組成物であって、１以上の薬学的に許容できる希釈剤または担体と一緒に、請求項１から請求項４のずれか１項に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項６】
少なくともａ）請求項１から請求項４のずれか１項に記載の化合物および請求項５に記載の医薬組成物からなる第１の薬剤と、ｂ）ＨＣＶ複製に対して作用する特性を有する第２の薬剤とを含む、医薬的組み合わせ。
【請求項７】
Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害の予防または処置において使用するための、請求項６に記載の医薬的組み合わせ。
【請求項８】
医薬としての、請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
抗ウイルス薬としての、請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｃ型肝炎感染またはＨＣＶに誘導される障害の処置または予防における医薬の製造における、請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１１】
必要とする対象においてＣ型肝炎感染もしくはＨＣＶに誘導される障害を予防または処置するための方法であって、前記対象に、治療上有効量の請求項１から請求項４のずれか１項に記載の化合物または請求項５に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
【請求項１２】
必要とする患者においてＨＣＶ複製を阻害する方法であって、前記対象に、治療上有効量の請求項１から請求項４のずれか１項に記載の化合物または請求項５に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
【請求項１３】
治療上有効量の請求項１から請求項４のずれか１項に記載の化合物または請求項５に記載の医薬組成物、および少なくともＨＣＶ複製に対して作用する特性を有する薬剤から選択される第２の薬剤の、相伴うかまたは逐次的な同時投与を含む、請求項１１または請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
抗ＨＣＶ特性を有する前記薬剤は、インターフェロン、例えばインターフェロン−α−２ａもしくはインターフェロン−α−２ｂ；または水溶性のポリマーもしくはヒトアルブミンに接合されたインターフェロン；抗ウイルス薬、例えばリバビリン、ラミブジン、ＮＶ０８もしくはＮＭ２８３；ＮＳ３−４Ａセリンプロテアーゼ、ヘリカーゼもしくはＲＮＡポリメラーゼなどのＨＣＶコード化因子の阻害剤；抗線維化剤、例えばＮ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体；免疫調節剤、例えばミコフェノール酸；または、Ｓ１Ｐ受容体作動薬、例えばＦＴＹ７２０もしくは任意にリン酸化されているその類似体からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【図１】
【公表番号】特表２０１２−５０７５７６（Ｐ２０１２−５０７５７６Ａ）
【公表日】平成２４年３月２９日（２０１２．３．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５３５１７７（Ｐ２０１１−５３５１７７）
【出願日】平成２１年１１月６日（２００９．１１．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００９／００７３６１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０５２５５９
【国際公開日】平成２２年５月１４日（２０１０．５．１４）
【出願人】（５９１２５３３０８）デビオ ルシェルシュ ファルマスーティク ソシエテ アノニム (1)
【氏名又は名称原語表記】ＤＥＢＩＯ ＲＥＣＨＥＲＣＨＥ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＱＵＥ ＳＯＣＩＥＴＥ ＡＮＯＮＹＭＥ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年３月２９日（２０１２．３．２９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１１月６日（２００９．１１．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００９／００７３６１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０５２５５９
【国際公開日】平成２２年５月１４日（２０１０．５．１４）
【出願人】（５９１２５３３０８）デビオ ルシェルシュ ファルマスーティク ソシエテ アノニム (1)
【氏名又は名称原語表記】ＤＥＢＩＯ ＲＥＣＨＥＲＣＨＥ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＱＵＥ ＳＯＣＩＥＴＥ ＡＮＯＮＹＭＥ
【Ｆターム（参考）】
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