シクロヘキサンカルボン酸類
水に対する溶解性が高く、また長期安定性が良好なＶＬＡ−４阻害薬を提供する。トランス−４−［１−［２，５−ジクロロ−４−［（１−メチル−１Ｈ−３−インドリルカルボニル）アミノ］フェニルアセチル］−（４Ｓ）−メトキシ−（２Ｓ）−ピロリジニルメトキシ］シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩・５水和物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、優れたＶＬＡ−４（Ｖｅｒｙ Ｌａｔｅ Ａｎｔｉｇｅｎ−４）阻害作用を有し、水溶性に優れ、かつ長期保存安定性にも優れ、細胞接着に起因する疾患の予防薬及び／又は治療薬として有用なシクロヘキサンカルボン酸類及びこれを含有する医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞接着と各種疾患との関係が明らかにされるに従い、細胞接着を阻害することにより種々の疾患の予防及び治療が可能になることが知られている。当該細胞接着には、いくつかの細胞接着分子が深く関与しており、ＶＬＡ−４は白血球の接着を媒介する分子として知られている。かかる観点から、ＶＬＡ−４阻害剤が種々開発されており、特許文献１には優れたＶＬＡ−４阻害活性を有し、細胞接着に起因する疾患の予防及び／又は治療薬として有用である化合物が記載されている。
そして、当該特許文献１の実施例１７０には、トランス−４−〔１−〔２，５−ジクロロ−４−〔（１−メチル−１Ｈ−３−インドリルカルボニル）アミノ〕フェニルアセチル〕−（４Ｓ）−メトキシ−（２Ｓ）−ピロリジニルメトキシ〕シクロヘキサンカルボン酸（以下、化合物（ａ）という）が無色固形物として単離されたことが記載されている。
【０００３】
【特許文献１】国際公開第０２／０５３５３４号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、前記特許文献１で無色固形物として単離された化合物（ａ）は、水に対する溶解性が低く、また長期安定性が懸念された。水に対する溶解性と長期保存安定性は、この化合物（ａ）を医薬品として開発するうえで極めて重要である。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
そこで本発明者らは、薬理作用だけでなく、水に対する溶解性や長期保存安定性などにおいても医薬品として有用な化合物を見出すべく検討した結果、上記化合物（ａ）のナトリウム塩５水和物が、他の種々の塩に比べて水溶性が高く、かつ吸湿放性の問題もなく長期保存安定性も良好であり、医薬品として有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、次式（１）
【０００７】
【０００８】
で表されるトランス−４−〔１−〔２，５−ジクロロ−４−〔（１−メチル−１Ｈ−３−インドリルカルボニル）アミノ〕フェニルアセチル〕−（４Ｓ）−メトキシ−（２Ｓ）−ピロリジニルメトキシ〕シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩・５水和物（以下、化合物（１）という）を提供するものである。
また、本発明は、上記化合物（１）の結晶を提供するものである。
さらに、本発明は上記化合物（１）を有効成分とする医薬を提供するものである。
さらにまた、本発明は上記化合物（１）と製薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供するものである。
さらにまた、本発明は上記化合物（１）の医薬製造のための使用を提供するものである。
さらにまた、本発明は上記化合物（１）の有効量を投与することを特徴とする細胞接着に起因する疾患の処置方法を提供するものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明化合物（１）は、水溶性が高く、かつ吸脱湿性による重量変化が少ないので保存安定性にも優れ、かつ優れたＶＬＡ−４阻害活性を有することから、細胞接着に起因する疾患の予防薬及び／又は治療薬として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
［図１］化合物（ａ）の吸脱湿性を示す図である。
［図２］化合物（ａ）のｔ−ブチルアミン塩の吸脱湿性を示す図である。
［図３］化合物（１）の吸脱湿性を示す図である。
［図４］化合物（１）のＩ型結晶及びＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折図を示す図である。
［図５］化合物（１）のＩ型結晶（Ａ）及びＩＩ型結晶（Ｂ）の吸脱湿性を示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
化合物（１）は、前記特許文献１に記載の化合物（ａ）のナトリウム塩・５水和物である。従って、化合物（１）は、当該化合物（ａ）又は化合物（ａ）を含む反応混合物にナトリウムイオン供給化合物を反応させ、含水溶媒から晶析されることにより得られる。ここで用いられるナトリウムイオン供給化合物としては、水酸化ナトリウムの他、炭酸ナトリウム等のナトリウム塩が挙げられるが、水酸化ナトリウムが特に好ましい。化合物（ａ）とナトリウムイオン供給化合物との反応は、化合物（ａ）に対して１．０〜１．２モルのナトリウムイオン供給化合物の水溶液を加え、２０〜３５℃で行えばよい。
【００１２】
化合物（ａ）が完全に溶解した後、必要により不溶物を除去し、含水溶媒を用いて化合物（１）を晶析させる。用いられる含水溶媒としては、含水アセトン、含水アセトニトリル、含水１−プロパノール、含水２−プロパノール、含水エタノール等が挙げられるが、含水アセトンが特に好ましい。
【００１３】
かくして得られた化合物（１）は、後記実施例に示すように、化合物（ａ）、エタノールアミン塩、ジベンジルエチレンジアミン塩及びリチウム塩等の他の種類の塩に比べて水への溶解性が高かった。
また、化合物（ａ）の各種の塩についての吸脱湿性を検討し、長期保存安定性の指標とした。その結果、化合物（ａ）は重量変化を示し、水和形態が規格できなかった。
また、化合物（１）、化合物（ａ）のリチウム塩、エタノールアミン塩、ジベンジルエチレンジアミン塩は通常湿度条件下で重量変化がなく安定であったが、ｔ−ブチルアミンは若干重量変化を示した。
これらの水に対する溶解性及び吸脱湿性（保存安定性）の両者ともに良好であったのは、化合物（１）のみであった。
【００１４】
また、化合物（１）は晶析時の撹拌刺激により結晶多形が生成する。晶析時の撹拌刺激が少ない場合には板状結晶（ＩＩ型）が生成し、撹拌刺激が大きい場合には針状結晶（Ｉ型）が生成する。ＩＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として７．２、１７．３、１８．９、１９．４、２０．４及び２１．６（°）に特徴的ピークを有する。一方、Ｉ型結晶は、粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として７．２、１２．９、１７．３、１８．９、１９．８、２１．６、２６．８及び３０．５（°）に特徴的ピークを有する。
【００１５】
これらの化合物（１）のＩ型結晶及びＩＩ型結晶は、いずれも水に対する溶解性が高く、かつ保存安定性（吸脱湿性）も良好であった。ただし、大量製造時の晶析条件のコントロール及び取り扱いのし易さを考慮するとＩＩ型結晶が好ましい。
【００１６】
かように本発明の化合物（１）は、水に対する溶解性及び保存安定性が良好であり、特許文献１に記載のように、細胞接着分子がＶＬＡ−４に結合するのを選択的に阻害する。従って、本発明化合物（１）は、ＶＬＡ−４が関与する細胞接着に起因する疾患、すなわち白血球の漂流及び接着により媒介される各種疾患、例えば炎症性疾患、自己免疫疾患、癌転移、気管支喘息、鼻閉、糖尿病、関節炎、乾癬、多発性硬化症、炎症性腸疾患及び移植時拒絶反応等の予防薬及び／又は治療薬として有用である。
【００１７】
本発明の医薬は、経口投与を始めとして種々の方法によって投与することができる。また、注射剤とする場合には静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射等の何れの方法によっても投与できる。
【００１８】
斯かる製剤の調製方法については、投与法に応じ適当な製剤を選択し、通常用いられている各種製剤の調製法にて調製できる。
【００１９】
経口製剤としては、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤や、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、油性ないし水性の懸濁液等を例示できる。注射剤としては製剤中に安定剤、防腐剤、溶解補助剤を使用することもあり、これらの補助剤等を含むこともある溶液を容器に収納後、所望によって凍結乾燥等によって固形製剤として用時調製の製剤としてもよい。また、液体製剤としては溶液、懸濁液、乳液剤等を挙げることができるが、これらの製剤を調製する際、添加剤として懸濁化剤、乳化剤等を使用することもできる。
【００２０】
本発明化合物（１）を含有する医薬は、化合物（１）として成人１人１日当り一回投与し、適当な間隔で繰り返すのが望ましい。投与量は０．０１ｍｇ〜２０００ｍｇの範囲、好ましくは０．１ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲である。
【００２１】
さらに、本発明の医薬には、本発明の効果を損なわない範囲において、必要に応じ、抗炎症剤、抗関節炎薬、副腎皮質ステロイド（コルチコステロイド）、免疫抑制薬、抗乾癬薬、気管支拡張薬、抗気管支喘息薬又は抗糖尿病薬を併用して用いることができる。
【実施例】
【００２２】
以下、実施例により本発明を具体的に説明する。
【００２３】
参考例１（化合物（ａ）の合成）
トランス−４−〔（４Ｓ）−メトキシ−（２Ｓ）−ピロリジニルメトキシ〕シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル（１００ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、〔２，５−ジクロロ−４−〔（１−メチル−１Ｈ−３−インドリルカルボニル）アミノ〕フェニル〕酢酸（１４０ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（９５ｍｇ，０．７０ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（触媒量）及び１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ）（１０７ｍｇ，０．５６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合液を室温で１８時間撹拌する。反応液を１Ｍ ＨＣｌに注ぎ、酢酸エチルにて３回抽出する。抽出液を飽和食塩水洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下に溶媒留去。残渣をシリカゲルを用いるカラムクロマトグラフィー（ｍｉｄｄｌｅ ｐｒｅｓｓｕｒｅ Ｙａｍａｚｅｎ，クロロホルム／メタノール１０：０〜９７：３，２０ｍｌ／ｍｉｎ，φ５０ｍｍ×１５０ｍｍ）にて精製した。本エステル体をＴＨＦ（４ｍＬ）に溶解し、０．２５Ｍ ＮａＯＨ（２．４ｍＬ，０．６１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１８時間撹拌した。反応液を減圧下に溶媒留去して得られる残渣に１Ｍ ＨＣｌを加えて結晶化し、析出結晶を減圧濾取、水洗後、減圧乾燥して化合物（ａ）（１５０ｍｇ，６６％）を無色固形物として得た。
【００２４】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１０−１．４０（ｍ，４Ｈ），１．８０−２．２０（ｍ，８Ｈ），３．１５−４．３０（ｍ，８Ｈ），３．２８（ｓ，３Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），７．２１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．３１（ｓ，１Ｈ），９．３９（ｓ，１Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ６１７（Ｍ＋１）＋；
Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ３５Ｃｌ２Ｎ３Ｏ６・０．５Ｈ２Ｏ：Ｃ，５９．５２；Ｈ，５．８０；Ｎ，６．７２．
Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，５９．３６；Ｈ，５．７２；Ｎ，６．６８．
【００２５】
［実施例１］（化合物（１）の合成：Ｉ型）
化合物（ａ）５．０ｇ（８．１ｍｏｌ）をアセトン１００ｍＬに懸濁させ、１Ｍ ＮａＯＨ水溶液（８．１ｍＬ）を加え、室温にて１８時間スターラーにて撹拌した。析出結晶を減圧濾取、アセトンにて洗浄後、減圧乾燥した。乾燥結晶を相対湿度５２％以上で調湿した。化合物（１）を白色針状晶として５．６ｇ（９５％）得た。粉末Ｘ線回折にてＩ型を確認した。
Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ．Ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ３４Ｃｌ２Ｎ３ＮａＯ６・５Ｈ２Ｏ：Ｃ，５１．１０；Ｈ，６．０９；Ｎ，５．７６；Ｃｌ，９．７３；Ｎａ，３．１６
Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，５０．８０；Ｈ，５．９９；Ｎ，５．６０；Ｃｌ，９．７０；Ｎａ，３．４１
【００２６】
［実施例２］（化合物（１）の合成：ＩＩ型）
化合物（１）１５．０ｇを５０％含水アセトン９０ｍＬに加温（３０〜４０℃）溶解後、不溶物を濾過し、濾液にアセトン３６０ｍＬを加え、室温にて２０時間撹拌羽にて撹拌した。析出結晶を減圧濾取、１０％含水アセトンにて洗浄後、減圧乾燥した。乾燥結晶を相対湿度５２％以上で調湿した。化合物（１）を白色板状晶として１４．２ｇ（９５％）得た。粉末Ｘ線回折にてＩＩ型を確認した。
【００２７】
比較例１（化合物（ａ）のリチウム塩の合成）
化合物（ａ）１１２ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）をエタノール５ｍＬに懸濁させ、１Ｍ ＬｉＯＨ水溶液（０．１８ｍＬ）を加え、減圧で溶媒を留去し乾固した。残渣に２０％含水アセトニトリル３ｍＬを加え、加熱溶解後４℃にて２日間放置した。析出結晶を減圧濾取、１日室温にて風乾し、化合物（ａ）のリチウム塩を白色結晶として９８ｍｇ（７８％）得た。
Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ．Ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ３４Ｃｌ２ＬｉＮ３Ｏ６・４Ｈ２Ｏ：Ｃ，５３．６１；Ｈ，６．１０；Ｎ，６．０５；Ｃｌ，１０．２１
Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，５３．４７；Ｈ，６．０８；Ｎ，６．０２；Ｃｌ，１０．３３
同様にして化合物（ａ）のエタノールアミン塩、ジベンジルエチレンジアミン塩及びｔ−ブチルアミン塩を得た。
【００２８】
試験例１
実施例１、参考例１及び比較例１で得られた化合物（１）、化合物（ａ）および化合物（ａ）の各種の塩について吸脱湿性を評価した。すなわち、結晶約２０ｍｇをマイクロバランス（自動水蒸気吸着装置）に付し、相対湿度（ＲＨ）範囲１０〜９０％での経時的重量変化を測定することにより水分の吸脱着量を評価した。
【００２９】
その結果、化合物（ａ）は、４０〜６０％ＲＨにおいて重量変化を示し、水和形態を規格することが困難であった（図１）。また化合物（ａ）のｔ−ブチルアミン塩も、若干重量変化を示し、保存安定性の点で懸念される（図２）。これに対し、化合物（１）は、通常湿度条件下で重量変化がなく安定であった（図３）。また、化合物（ａ）のリチウム塩、エタノールアミン塩及びジベンジルエチレンジアミン塩も通常湿度条件下で安定であった。
【００３０】
試験例２
実施例１、参考例１及び比較例１で得られた化合物（１）、化合物（ａ）及び化合物（ａ）の各種の塩について水（３７℃）に対する溶解性を評価した。
【００３１】
その結果、表１に示すように、化合物（ａ）の水溶性は極めて低かった。これに対し、化合物（１）及び化合物（ａ）ｔ−ブチルアミン塩の水への溶解性は極めて高いことが判明した。
【００３２】
【００３３】
［実施例３］
実施例１及び２において晶析時の条件により結晶の形の相違する結晶が得られることが判明した。そこで結晶多形の制御を行った。その結果、晶析温度、含水溶媒の含水率、撹拌時間では制御できず、撹拌刺激により結晶形を制御できることが判明した。撹拌による刺激が少ない（羽根撹拌）場合、ＩＩ型（板状結晶）が生成し、刺激が大きい（スターラー撹拌）場合、Ｉ型（針状結晶）が生成した。
１０％含水アセトン中、羽根撹拌下での結晶転移について経時的に検討し、得られた粉末Ｘ線回折パターンを測定した結果、Ｉ型由来の２θ＝２０°の回折ピークが撹拌３日後に現れ、撹拌時間の延長に伴い徐々にその割合は増加した。この結果から、室温下羽根撹拌においてもＩ型への転移は起こるものと考えられた。
【００３４】
Ｉ型結晶とＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折を図４に、そのピークを表２に示す。
【００３５】
【００３６】
Ｉ型結晶とＩＩ型結晶それぞれについて、試験例１及び２と同様にして吸脱湿性及び水に対する溶解性を評価した。その結果を図５及び表３に示す。
【００３７】
【００３８】
なお、本発明化合物（１）のＶＬＡ−４阻害活性は、化合物（ａ）と同等であった。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、優れたＶＬＡ−４（Ｖｅｒｙ Ｌａｔｅ Ａｎｔｉｇｅｎ−４）阻害作用を有し、水溶性に優れ、かつ長期保存安定性にも優れ、細胞接着に起因する疾患の予防薬及び／又は治療薬として有用なシクロヘキサンカルボン酸類及びこれを含有する医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞接着と各種疾患との関係が明らかにされるに従い、細胞接着を阻害することにより種々の疾患の予防及び治療が可能になることが知られている。当該細胞接着には、いくつかの細胞接着分子が深く関与しており、ＶＬＡ−４は白血球の接着を媒介する分子として知られている。かかる観点から、ＶＬＡ−４阻害剤が種々開発されており、特許文献１には優れたＶＬＡ−４阻害活性を有し、細胞接着に起因する疾患の予防及び／又は治療薬として有用である化合物が記載されている。
そして、当該特許文献１の実施例１７０には、トランス−４−〔１−〔２，５−ジクロロ−４−〔（１−メチル−１Ｈ−３−インドリルカルボニル）アミノ〕フェニルアセチル〕−（４Ｓ）−メトキシ−（２Ｓ）−ピロリジニルメトキシ〕シクロヘキサンカルボン酸（以下、化合物（ａ）という）が無色固形物として単離されたことが記載されている。
【０００３】
【特許文献１】国際公開第０２／０５３５３４号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、前記特許文献１で無色固形物として単離された化合物（ａ）は、水に対する溶解性が低く、また長期安定性が懸念された。水に対する溶解性と長期保存安定性は、この化合物（ａ）を医薬品として開発するうえで極めて重要である。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
そこで本発明者らは、薬理作用だけでなく、水に対する溶解性や長期保存安定性などにおいても医薬品として有用な化合物を見出すべく検討した結果、上記化合物（ａ）のナトリウム塩５水和物が、他の種々の塩に比べて水溶性が高く、かつ吸湿放性の問題もなく長期保存安定性も良好であり、医薬品として有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、次式（１）
【０００７】
【０００８】
で表されるトランス−４−〔１−〔２，５−ジクロロ−４−〔（１−メチル−１Ｈ−３−インドリルカルボニル）アミノ〕フェニルアセチル〕−（４Ｓ）−メトキシ−（２Ｓ）−ピロリジニルメトキシ〕シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩・５水和物（以下、化合物（１）という）を提供するものである。
また、本発明は、上記化合物（１）の結晶を提供するものである。
さらに、本発明は上記化合物（１）を有効成分とする医薬を提供するものである。
さらにまた、本発明は上記化合物（１）と製薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供するものである。
さらにまた、本発明は上記化合物（１）の医薬製造のための使用を提供するものである。
さらにまた、本発明は上記化合物（１）の有効量を投与することを特徴とする細胞接着に起因する疾患の処置方法を提供するものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明化合物（１）は、水溶性が高く、かつ吸脱湿性による重量変化が少ないので保存安定性にも優れ、かつ優れたＶＬＡ−４阻害活性を有することから、細胞接着に起因する疾患の予防薬及び／又は治療薬として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
［図１］化合物（ａ）の吸脱湿性を示す図である。
［図２］化合物（ａ）のｔ−ブチルアミン塩の吸脱湿性を示す図である。
［図３］化合物（１）の吸脱湿性を示す図である。
［図４］化合物（１）のＩ型結晶及びＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折図を示す図である。
［図５］化合物（１）のＩ型結晶（Ａ）及びＩＩ型結晶（Ｂ）の吸脱湿性を示す図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
化合物（１）は、前記特許文献１に記載の化合物（ａ）のナトリウム塩・５水和物である。従って、化合物（１）は、当該化合物（ａ）又は化合物（ａ）を含む反応混合物にナトリウムイオン供給化合物を反応させ、含水溶媒から晶析されることにより得られる。ここで用いられるナトリウムイオン供給化合物としては、水酸化ナトリウムの他、炭酸ナトリウム等のナトリウム塩が挙げられるが、水酸化ナトリウムが特に好ましい。化合物（ａ）とナトリウムイオン供給化合物との反応は、化合物（ａ）に対して１．０〜１．２モルのナトリウムイオン供給化合物の水溶液を加え、２０〜３５℃で行えばよい。
【００１２】
化合物（ａ）が完全に溶解した後、必要により不溶物を除去し、含水溶媒を用いて化合物（１）を晶析させる。用いられる含水溶媒としては、含水アセトン、含水アセトニトリル、含水１−プロパノール、含水２−プロパノール、含水エタノール等が挙げられるが、含水アセトンが特に好ましい。
【００１３】
かくして得られた化合物（１）は、後記実施例に示すように、化合物（ａ）、エタノールアミン塩、ジベンジルエチレンジアミン塩及びリチウム塩等の他の種類の塩に比べて水への溶解性が高かった。
また、化合物（ａ）の各種の塩についての吸脱湿性を検討し、長期保存安定性の指標とした。その結果、化合物（ａ）は重量変化を示し、水和形態が規格できなかった。
また、化合物（１）、化合物（ａ）のリチウム塩、エタノールアミン塩、ジベンジルエチレンジアミン塩は通常湿度条件下で重量変化がなく安定であったが、ｔ−ブチルアミンは若干重量変化を示した。
これらの水に対する溶解性及び吸脱湿性（保存安定性）の両者ともに良好であったのは、化合物（１）のみであった。
【００１４】
また、化合物（１）は晶析時の撹拌刺激により結晶多形が生成する。晶析時の撹拌刺激が少ない場合には板状結晶（ＩＩ型）が生成し、撹拌刺激が大きい場合には針状結晶（Ｉ型）が生成する。ＩＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として７．２、１７．３、１８．９、１９．４、２０．４及び２１．６（°）に特徴的ピークを有する。一方、Ｉ型結晶は、粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として７．２、１２．９、１７．３、１８．９、１９．８、２１．６、２６．８及び３０．５（°）に特徴的ピークを有する。
【００１５】
これらの化合物（１）のＩ型結晶及びＩＩ型結晶は、いずれも水に対する溶解性が高く、かつ保存安定性（吸脱湿性）も良好であった。ただし、大量製造時の晶析条件のコントロール及び取り扱いのし易さを考慮するとＩＩ型結晶が好ましい。
【００１６】
かように本発明の化合物（１）は、水に対する溶解性及び保存安定性が良好であり、特許文献１に記載のように、細胞接着分子がＶＬＡ−４に結合するのを選択的に阻害する。従って、本発明化合物（１）は、ＶＬＡ−４が関与する細胞接着に起因する疾患、すなわち白血球の漂流及び接着により媒介される各種疾患、例えば炎症性疾患、自己免疫疾患、癌転移、気管支喘息、鼻閉、糖尿病、関節炎、乾癬、多発性硬化症、炎症性腸疾患及び移植時拒絶反応等の予防薬及び／又は治療薬として有用である。
【００１７】
本発明の医薬は、経口投与を始めとして種々の方法によって投与することができる。また、注射剤とする場合には静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射等の何れの方法によっても投与できる。
【００１８】
斯かる製剤の調製方法については、投与法に応じ適当な製剤を選択し、通常用いられている各種製剤の調製法にて調製できる。
【００１９】
経口製剤としては、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤や、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、油性ないし水性の懸濁液等を例示できる。注射剤としては製剤中に安定剤、防腐剤、溶解補助剤を使用することもあり、これらの補助剤等を含むこともある溶液を容器に収納後、所望によって凍結乾燥等によって固形製剤として用時調製の製剤としてもよい。また、液体製剤としては溶液、懸濁液、乳液剤等を挙げることができるが、これらの製剤を調製する際、添加剤として懸濁化剤、乳化剤等を使用することもできる。
【００２０】
本発明化合物（１）を含有する医薬は、化合物（１）として成人１人１日当り一回投与し、適当な間隔で繰り返すのが望ましい。投与量は０．０１ｍｇ〜２０００ｍｇの範囲、好ましくは０．１ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲である。
【００２１】
さらに、本発明の医薬には、本発明の効果を損なわない範囲において、必要に応じ、抗炎症剤、抗関節炎薬、副腎皮質ステロイド（コルチコステロイド）、免疫抑制薬、抗乾癬薬、気管支拡張薬、抗気管支喘息薬又は抗糖尿病薬を併用して用いることができる。
【実施例】
【００２２】
以下、実施例により本発明を具体的に説明する。
【００２３】
参考例１（化合物（ａ）の合成）
トランス−４−〔（４Ｓ）−メトキシ−（２Ｓ）−ピロリジニルメトキシ〕シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル（１００ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、〔２，５−ジクロロ−４−〔（１−メチル−１Ｈ−３−インドリルカルボニル）アミノ〕フェニル〕酢酸（１４０ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（９５ｍｇ，０．７０ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（触媒量）及び１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ）（１０７ｍｇ，０．５６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合液を室温で１８時間撹拌する。反応液を１Ｍ ＨＣｌに注ぎ、酢酸エチルにて３回抽出する。抽出液を飽和食塩水洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下に溶媒留去。残渣をシリカゲルを用いるカラムクロマトグラフィー（ｍｉｄｄｌｅ ｐｒｅｓｓｕｒｅ Ｙａｍａｚｅｎ，クロロホルム／メタノール１０：０〜９７：３，２０ｍｌ／ｍｉｎ，φ５０ｍｍ×１５０ｍｍ）にて精製した。本エステル体をＴＨＦ（４ｍＬ）に溶解し、０．２５Ｍ ＮａＯＨ（２．４ｍＬ，０．６１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１８時間撹拌した。反応液を減圧下に溶媒留去して得られる残渣に１Ｍ ＨＣｌを加えて結晶化し、析出結晶を減圧濾取、水洗後、減圧乾燥して化合物（ａ）（１５０ｍｇ，６６％）を無色固形物として得た。
【００２４】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．１０−１．４０（ｍ，４Ｈ），１．８０−２．２０（ｍ，８Ｈ），３．１５−４．３０（ｍ，８Ｈ），３．２８（ｓ，３Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），７．２１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．３１（ｓ，１Ｈ），９．３９（ｓ，１Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ６１７（Ｍ＋１）＋；
Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ３５Ｃｌ２Ｎ３Ｏ６・０．５Ｈ２Ｏ：Ｃ，５９．５２；Ｈ，５．８０；Ｎ，６．７２．
Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，５９．３６；Ｈ，５．７２；Ｎ，６．６８．
【００２５】
［実施例１］（化合物（１）の合成：Ｉ型）
化合物（ａ）５．０ｇ（８．１ｍｏｌ）をアセトン１００ｍＬに懸濁させ、１Ｍ ＮａＯＨ水溶液（８．１ｍＬ）を加え、室温にて１８時間スターラーにて撹拌した。析出結晶を減圧濾取、アセトンにて洗浄後、減圧乾燥した。乾燥結晶を相対湿度５２％以上で調湿した。化合物（１）を白色針状晶として５．６ｇ（９５％）得た。粉末Ｘ線回折にてＩ型を確認した。
Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ．Ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ３４Ｃｌ２Ｎ３ＮａＯ６・５Ｈ２Ｏ：Ｃ，５１．１０；Ｈ，６．０９；Ｎ，５．７６；Ｃｌ，９．７３；Ｎａ，３．１６
Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，５０．８０；Ｈ，５．９９；Ｎ，５．６０；Ｃｌ，９．７０；Ｎａ，３．４１
【００２６】
［実施例２］（化合物（１）の合成：ＩＩ型）
化合物（１）１５．０ｇを５０％含水アセトン９０ｍＬに加温（３０〜４０℃）溶解後、不溶物を濾過し、濾液にアセトン３６０ｍＬを加え、室温にて２０時間撹拌羽にて撹拌した。析出結晶を減圧濾取、１０％含水アセトンにて洗浄後、減圧乾燥した。乾燥結晶を相対湿度５２％以上で調湿した。化合物（１）を白色板状晶として１４．２ｇ（９５％）得た。粉末Ｘ線回折にてＩＩ型を確認した。
【００２７】
比較例１（化合物（ａ）のリチウム塩の合成）
化合物（ａ）１１２ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）をエタノール５ｍＬに懸濁させ、１Ｍ ＬｉＯＨ水溶液（０．１８ｍＬ）を加え、減圧で溶媒を留去し乾固した。残渣に２０％含水アセトニトリル３ｍＬを加え、加熱溶解後４℃にて２日間放置した。析出結晶を減圧濾取、１日室温にて風乾し、化合物（ａ）のリチウム塩を白色結晶として９８ｍｇ（７８％）得た。
Ａｎａｌ．Ｃａｌｃｄ．Ｆｏｒ Ｃ３１Ｈ３４Ｃｌ２ＬｉＮ３Ｏ６・４Ｈ２Ｏ：Ｃ，５３．６１；Ｈ，６．１０；Ｎ，６．０５；Ｃｌ，１０．２１
Ｆｏｕｎｄ：Ｃ，５３．４７；Ｈ，６．０８；Ｎ，６．０２；Ｃｌ，１０．３３
同様にして化合物（ａ）のエタノールアミン塩、ジベンジルエチレンジアミン塩及びｔ−ブチルアミン塩を得た。
【００２８】
試験例１
実施例１、参考例１及び比較例１で得られた化合物（１）、化合物（ａ）および化合物（ａ）の各種の塩について吸脱湿性を評価した。すなわち、結晶約２０ｍｇをマイクロバランス（自動水蒸気吸着装置）に付し、相対湿度（ＲＨ）範囲１０〜９０％での経時的重量変化を測定することにより水分の吸脱着量を評価した。
【００２９】
その結果、化合物（ａ）は、４０〜６０％ＲＨにおいて重量変化を示し、水和形態を規格することが困難であった（図１）。また化合物（ａ）のｔ−ブチルアミン塩も、若干重量変化を示し、保存安定性の点で懸念される（図２）。これに対し、化合物（１）は、通常湿度条件下で重量変化がなく安定であった（図３）。また、化合物（ａ）のリチウム塩、エタノールアミン塩及びジベンジルエチレンジアミン塩も通常湿度条件下で安定であった。
【００３０】
試験例２
実施例１、参考例１及び比較例１で得られた化合物（１）、化合物（ａ）及び化合物（ａ）の各種の塩について水（３７℃）に対する溶解性を評価した。
【００３１】
その結果、表１に示すように、化合物（ａ）の水溶性は極めて低かった。これに対し、化合物（１）及び化合物（ａ）ｔ−ブチルアミン塩の水への溶解性は極めて高いことが判明した。
【００３２】
【００３３】
［実施例３］
実施例１及び２において晶析時の条件により結晶の形の相違する結晶が得られることが判明した。そこで結晶多形の制御を行った。その結果、晶析温度、含水溶媒の含水率、撹拌時間では制御できず、撹拌刺激により結晶形を制御できることが判明した。撹拌による刺激が少ない（羽根撹拌）場合、ＩＩ型（板状結晶）が生成し、刺激が大きい（スターラー撹拌）場合、Ｉ型（針状結晶）が生成した。
１０％含水アセトン中、羽根撹拌下での結晶転移について経時的に検討し、得られた粉末Ｘ線回折パターンを測定した結果、Ｉ型由来の２θ＝２０°の回折ピークが撹拌３日後に現れ、撹拌時間の延長に伴い徐々にその割合は増加した。この結果から、室温下羽根撹拌においてもＩ型への転移は起こるものと考えられた。
【００３４】
Ｉ型結晶とＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折を図４に、そのピークを表２に示す。
【００３５】
【００３６】
Ｉ型結晶とＩＩ型結晶それぞれについて、試験例１及び２と同様にして吸脱湿性及び水に対する溶解性を評価した。その結果を図５及び表３に示す。
【００３７】
【００３８】
なお、本発明化合物（１）のＶＬＡ−４阻害活性は、化合物（ａ）と同等であった。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トランス−４−〔１−〔２，５−ジクロロ−４−〔（１−メチル−１Ｈ−３−インドリルカルボニル）アミノ〕フェニルアセチル〕−（４Ｓ）−メトキシ−（２Ｓ）−ピロリジニルメトキシ〕シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩・５水和物。
【請求項２】
結晶である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
板状結晶である請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として７．２、１７．３、１８．９、１９．４、２０．４及び２１．６（°）に特徴的ピークを有する結晶である請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項５】
針状結晶である請求項１又は２記載の化合物。
【請求項６】
粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として７．２、１２．９、１７．３、１８．９、１９．８、２１．６、２６．８及び３０．５（°）に特徴的ピークを有する結晶である請求項１、２又は５記載の化合物。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項記載の化合物を有効成分とする医薬。
【請求項８】
細胞接着に起因する疾患の予防薬及び／又は治療薬である請求項７記載の医薬。
【請求項９】
細胞接着に起因する疾患が、炎症性疾患、自己免疫疾患、癌転移、気管支喘息、鼻閉、糖尿病、関節炎、乾癬、多発性硬化症、炎症性腸疾患及び移植時拒絶反応から選ばれるものである請求項８記載の医薬。
【請求項１０】
請求項１〜６のいずれか１項記載の化合物と製薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜６のいずれか１項記載の化合物の医薬製造のための使用。
【請求項１２】
医薬が、細胞接着に起因する疾患の予防薬及び／又は治療薬である請求項１１記載の使用。
【請求項１３】
細胞接着に起因する疾患が、炎症性疾患、自己免疫疾患、癌転移、気管支喘息、鼻閉、糖尿病、関節炎、乾癬、多発性硬化症、炎症性腸疾患及び移植時拒絶反応から選ばれるものである請求項１２記載の使用。
【請求項１４】
請求項１〜６のいずれか１項記載の化合物の有効量を投与することを特徴とする細胞接着に起因する疾患の処置方法。
【請求項１５】
細胞接着に起因する疾患が、炎症性疾患、自己免疫疾患、癌転移、気管支喘息、鼻閉、糖尿病、関節炎、乾癬、多発性硬化症、炎症性腸疾患及び移植時拒絶反応から選ばれるものである請求項１４記載の処置方法。
【請求項１】
トランス−４−〔１−〔２，５−ジクロロ−４−〔（１−メチル−１Ｈ−３−インドリルカルボニル）アミノ〕フェニルアセチル〕−（４Ｓ）−メトキシ−（２Ｓ）−ピロリジニルメトキシ〕シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩・５水和物。
【請求項２】
結晶である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
板状結晶である請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として７．２、１７．３、１８．９、１９．４、２０．４及び２１．６（°）に特徴的ピークを有する結晶である請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項５】
針状結晶である請求項１又は２記載の化合物。
【請求項６】
粉末Ｘ線回折による回折角（２θ）として７．２、１２．９、１７．３、１８．９、１９．８、２１．６、２６．８及び３０．５（°）に特徴的ピークを有する結晶である請求項１、２又は５記載の化合物。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項記載の化合物を有効成分とする医薬。
【請求項８】
細胞接着に起因する疾患の予防薬及び／又は治療薬である請求項７記載の医薬。
【請求項９】
細胞接着に起因する疾患が、炎症性疾患、自己免疫疾患、癌転移、気管支喘息、鼻閉、糖尿病、関節炎、乾癬、多発性硬化症、炎症性腸疾患及び移植時拒絶反応から選ばれるものである請求項８記載の医薬。
【請求項１０】
請求項１〜６のいずれか１項記載の化合物と製薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜６のいずれか１項記載の化合物の医薬製造のための使用。
【請求項１２】
医薬が、細胞接着に起因する疾患の予防薬及び／又は治療薬である請求項１１記載の使用。
【請求項１３】
細胞接着に起因する疾患が、炎症性疾患、自己免疫疾患、癌転移、気管支喘息、鼻閉、糖尿病、関節炎、乾癬、多発性硬化症、炎症性腸疾患及び移植時拒絶反応から選ばれるものである請求項１２記載の使用。
【請求項１４】
請求項１〜６のいずれか１項記載の化合物の有効量を投与することを特徴とする細胞接着に起因する疾患の処置方法。
【請求項１５】
細胞接着に起因する疾患が、炎症性疾患、自己免疫疾患、癌転移、気管支喘息、鼻閉、糖尿病、関節炎、乾癬、多発性硬化症、炎症性腸疾患及び移植時拒絶反応から選ばれるものである請求項１４記載の処置方法。
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００９９９２
【国際公開日】平成１７年２月３日（２００５．２．３）
【発行日】平成１８年９月７日（２００６．９．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−５１２０２４（Ｐ２００５−５１２０２４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１０４５７
【国際出願日】平成１６年７月２３日（２００４．７．２３）
【出願人】（０００００２８３１）第一製薬株式会社 (129)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１７年２月３日（２００５．２．３）
【発行日】平成１８年９月７日（２００６．９．７）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１０４５７
【国際出願日】平成１６年７月２３日（２００４．７．２３）
【出願人】（０００００２８３１）第一製薬株式会社 (129)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]