ジアゼニウムジオール化に有用なポリマー骨格に反応性第２級アミンペンダントを導入するための方法
ジアゼニウムジオール化に適切な少なくとも１つの第２級アミンを有するポリマー骨格を有する生体適合性ポリマーを開示する。具体的には、エポキシド開環反応を使用する、第２級アミン含有ポリマーを提供するための方法を提供する。より具体的には、これらのポリマーを使用して作製される一酸化窒素放出性医療装置を開示する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医療装置を製造し、被覆するためのエポキシド由来一酸化窒素（ＮＯ）供与性ポリマーに関する。
【背景技術】
【０００２】
一酸化窒素（ＮＯ）は、細胞生理学における多様、かつ複雑な役割を果たす単純二原子分子である。ほんの２５年前、ＮＯは、空気と混合する化石燃料が燃焼する間に形成される煙霧成分であると主に考えられた。しかしながら、Ｆｅｒｉｄ Ｍｕｒａｄ ｅｔ ａｌ．の先駆的研究の結果、ＮＯは、現在、内皮細胞、神経系細胞、およびマクロファージを含むほとんどすべての組織に見られる強力なシグナル伝達化合物および細胞毒性／細胞増殖抑制剤であることが周知である。哺乳類細胞は、Ｌ−アルギニンをＮ−ω−ヒドロキシ−Ｌ−アルギニンに酸化させ、その後、Ｌ−シトルリンおよび非荷電ＮＯ遊離基に変換する二段階酵素過程を使用してＮＯを合成する。３つの異なる一酸化窒素シンターゼ酵素が、ＮＯ製造を調節する。神経系一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳｌ、またはｎＮＯＳ）は、神経組織内で形成され、神経伝達における重要な役割を果たし、内皮一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ３またはｅＮＯＳ）は、内皮細胞によって分泌され、血管拡張を誘導し、誘導性一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ２またはｉＮＯＳ）は、主にマクロファージ、肝細胞、および軟骨細胞で見られ、免疫細胞毒性に関連する。
【０００３】
神経系ＮＯＳおよびｅＮＯＳは、少量のＮＯの迅速、かつ短期間の放出を調節する構成酵素である。これらの微量では、ＮＯは、環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）濃度を上昇させ、次に、細胞内Ｃａ2+レベルを増加させるグアニル酸シクラーゼを活性化する。細胞内Ｃａ2+濃度の増加は、ＮＯの血管拡張作用の主な原因となる平滑筋弛緩を引き起こす。誘発性ＮＯＳは、大量のＮＯの持続放出に関与し、内毒素およびサイトカインを含む細胞外因子によって活性化される。これらの高いＮＯレベルは、細胞性免疫における重要な役割を果たす。
【０００４】
医学研究により、血管外科および介入臓病学の分野を含め、ＮＯの治療的用途が急速に発見されている。経皮経管冠動脈形成（ＰＴＣＡ）（バルーン血管形成としても周知）ならびにアテローム切除および／またはステント留置等の閉塞動脈を除去するために使用される手順は、バルーン膨張またはステント配置の部位で血管壁外傷を引き起こし得る。この外傷に反応して、再狭窄として周知の複雑な多因子過程が生じ得、それにより、以前は開いていた血管腔が狭くなり、再閉塞となる。再狭窄は、外傷部位へ移動する血小板が、外傷内皮にマイトジェンを放出する際に始まる。血小板は、凝集し始め、外傷部位に付着し、血栓形成、または血塊形成を開始する。結果として、以前は開いていた腔は、血小板およびフィブリンが血管壁を収集するにつれて狭くなり始める。再狭窄のより頻繁に見られる機序では、血管壁に付着する活性化血小板によって分泌されるマイトジェンは、治癒過程の間、血管平滑筋細胞の過剰増殖を刺激し、外傷血管腔を制限するか、または閉塞する。得られた新生内膜過形成は、ステント再狭窄の主要な原因である。
【０００５】
近年、ＮＯは、血小板凝集および付着を著しく低下させることを示し、これは、ＮＯの直接的な細胞毒性／細胞増殖抑制作用と組み合わせて、血管平滑筋細胞増殖を著しく低下させ、再狭窄の予防に役立つ可能性がある。血小板凝集は、初期血管傷害後数分で生じ、再狭窄につながるイベントのカスケードが開始されると、回復困難な損傷がもたらされ得る。さらに、血栓形成および再狭窄のリスクは、血管腔の内側を覆う内皮が修復されるまで存続する。したがって、ＮＯ、または任意の抗再狭窄薬が、直ぐに外傷部位に到達することが不可欠である。
【０００６】
外傷部位で治療レベルのＮＯを提供するための１つの方法は、予防的に全身的ＮＯレベルを増加させることである。これは、内因性ＮＯ製造を刺激するか、または外因性ＮＯ源を使用することによって行うことができる。内因性ＮＯ放出を調節する方法は、主に、Ｌ−アルギニン等の過量のＮＯ前駆体を使用する合成経路の活性化、または遺伝子治療を使用して一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）の発現を増加させることに注目している。米国特許第（ＵＳＰＮ）５，９４５，４５２号、同第５，８９１，４５９号および同第５，４２８，０７０号では、経口投与のＬ−アルギニンおよび／またはＬ−リジンを使用する持続ＮＯの上昇が記載される。しかしながら、これらの方法は、再狭窄の予防における効果が証明されていない。遺伝子治療法を使用する内因性発現ＮＯの調節は、未だ非常に実験的であり、安全性および有効性が証明されていない。米国特許第５，２６８，４６５号、同第５，４６８，６３０号、および同第５，６５８，５６５号では、様々な遺伝子治療法が記載される。
【０００７】
純粋なＮＯガス等の外因性ＮＯ源は、毒性が高く、短命であり、生理液中で比較的不溶性である。結果として、全身的外因性ＮＯ送達は、該して、ニトログリセリン錠剤、静脈内懸濁液、スプレー、および経皮パッチ等の有機硝酸塩プロドラッグを使用して行われる。ヒトの体は、ニトログリセリンをＮＯに急速に変換するが、プロドラッグを活性化するために必要な酵素レベルおよび補因子が急速に枯渇し、薬剤耐性を引き起こす。さらに、全身的ＮＯ投与は、低血圧および遊離基細胞傷害を含む深刻な副作用を有し得る。したがって、全身的な抗再狭窄治療のための血液レベルを維持するために有機硝酸塩プロドラッグを使用することは、現在不可能である。
【０００８】
したがって、全身的予防法に関する不利点を改善するための限局的または部位特異的ＮＯ送達が大きく注目されている。ＮＯ放出化合物、またはＮＯＳ遺伝子を標的細胞に送達するベクターで被覆される医療装置を含む、埋め込み型医療装置および／または局部的遺伝子治療手技が評価されている。それらの全身的対応物と同様に、限局的ＮＯ送達のための遺伝子治療手技は、安全性および有効性が証明されていない。部位特異的ＮＯＳ遺伝子送達が現実となる前に、克服しなければならない重要な技術的問題および安全性に対する懸念が未だ存在する。
【０００９】
しかしながら、限局的外因性ＮＯの適用の分野において、著しい進歩が見られている。再狭窄の予防に対して効果的であるために、ＮＯ等の抑制性治療薬は、治療レベルで持続した期間で投与しなければならない。結果として、再狭窄を治療するために使用されるいずれのＮＯ放出性医療装置も移植に適さなければならない。理想的な候補装置は、血管ステントである。したがって、ＮＯの治療的有効量を正確な位置に安全に提供するステントは、再狭窄治療および予防において著しい伸展を提示する。
【００１０】
体内での適用に適する一酸化窒素放出化合物は、多くの研究者によって開発されている。早くも１９６０年には、ＮＯガスは、アミン、例えば、ジエチルアミンと反応して、次の一般式Ｒ--Ｒ′Ｎ--Ｎ（Ｏ）ＮＯで表されるＮＯ放出アニオンを形成することができることが証明された。これらの化合物の塩は、溶液中で自然に分解し、ＮＯを放出することができる。
治療薬として有用な、体温で十分な安定性を有する一酸化窒素放出化合物は、米国特許第４，９５４，５２６号、同第５，０３９，７０５号、同第５，１５５，１３７号、同第５，２１２，２０４号、同第５，２５０，５５０号、同第５，３６６，９９７号、同第５，４０５，９１９号、同第５，５２５，３５７号、および同第５，６５０，４４７号において記載されるように、Ｋｅｅｆｅｒ ｅｔ ａｌ．によって最終的に開発され、これらのすべての内容は、参照することにより本明細書に含まれる。
【００１１】
しかしながら、ＮＯの体内半減期は、限定され、ＮＯの目的とする部分への送達を困難にする。したがって、ＮＯの持続放出を製造することができるＮＯ放出化合物が必要とされる。例えば、ＮＯ供与アスピリン誘導体、亜硝酸アミル、および硝酸イソソルビドを含む、いくつかの例示的なＮＯ放出化合物が、この目的で開発されている。さらに、ＮＯ付加物を有し（例えば、米国特許公開第２００６／０００８５２９号、および同第２００４／００３７８３６号を参照）、制御された方法でＮＯを放出する生体適合性ポリマーが報告されている。
第２級アミンは、２モルのＮＯに結合し、水性の環境においてそれらを放出する能力を有する。２つのＮＯ分子に結合することが可能な例示的な第２級アミンの一般構造は、式１に示され、以下においてジアゼニウムジオレートと称される（式中、Ｍは、対イオンであり、適切な荷電を有する金属、またはプロトンであり得、Ｒ1およびＲ2は、有機および無機化学基に対する一般表記である）。高圧下でＮＯガスを組み込みながら、第２級アミンを塩基性条件に暴露させることは、ジアゼニウムジオレートの形成につながる。
【００１２】
【化１】
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、医療装置を製造及び被覆するのに適切な一酸化窒素（ＮＯ）供与性ポリマーを提供する。より具体的には、本発明は、生理環境において、ＮＯを制御可能に放出または供与するようにジアゼニウムジオレート化することができる少なくとも１つの第２級アミンを含むエポキシド由来ポリマーを提供する。さらに、エポキシドからの第２級アミンを含むポリマーの合成のための方法を開示する。
【００１４】
本発明の一実施態様において、少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するポリマーを提供する方法が開示され、（ａ）エポキシドペンダント基を有するポリマーを提供する工程と、（ｂ）該ポリマーを、一般式Ｒ2−ＮＨ2で表される化合物と、第２級アミンが形成される条件下で反応させる工程と（式中、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ20直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ20シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重（multiple）アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、およびＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールから成る群より選択される）、（ｃ）該第２級アミンを圧力下でＮＯと反応させ、そのジアゼニウムジオレートを形成する工程とを含む。
本発明の別の実施態様においては、少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するモノマーを提供する方法が開示され、
（ａ）式２で表される重合可能な第１のモノマーを提供する工程と、
【００１５】
【化２】
【００１６】
（式中、Ｒ1は、アクリレート、メタクリレート、ラクトン、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、およびＣ2−Ｃ20アルキニルから成る群より選択される重合可能な部分である）
（ｂ）該第１のモノマーを、一般式Ｒ2−ＮＨ2で表される化合物と、式３で表される反応性第２級アミンを有するモノマーが形成される条件下で反応させる工程（式中、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ20直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ20シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、およびＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールから成る群より選択される）とを含む。
【００１７】
【化３】
【００１８】
本発明の別の実施態様において、反応工程（ｂ）は、ＬｉＣｌＯ4、鉱酸、ブレンステッド酸、イオン交換樹脂、ゼオライト、酸素親和性（oxophilic）金属、プロトンスポンジ（proton sponge）、緩衝液、アルカリ土類金属、アルカリ土類金属、遷移金属、および有機金属化合物から成る群より選択される触媒をさらに含む。
【００１９】
別の実施態様において、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素は、Ｎ−メチルエチレンジアミン、Ｎ−メチルプロピリレンジアミン、Ｎ−メチルブチレンジアミン、Ｎ−エチルエチレンジアミン、Ｎ−エチルプロピリレンジアミン、Ｎ−エチルブチレンジアミン、Ｎ−ベンジルエチレンジアミン、Ｎ−ベンジルプロピリレンジアミン、Ｎ−ベンジルブチレンジアミン、Ｎ−プロピルエチレンジアミン、Ｎ−プロピルプロピリレンジアミン、Ｎ−プロピルブチレンジアミン、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチレンペンタミン、およびペンタエチレンヘキサミンから成る群より選択される。
【００２０】
反応性第２級アミンを有するポリマーを提供する方法の別の実施態様において、該ポリマーは、ポリエーテル、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリスチレン、およびポリ（塩化ビニル）等のビニルポリマー、ポリカーボネート、ポリウレタン、およびポリエステルから成る群より選択される。別の実施態様において、該ポリマーとしては、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、プロピルメタクリレート、ブチルメタクリレート、ペンチルメタクリレート、ヘキシルメタクリレート、ヘプチルメタクリレート、オクチルメタクリレート、ドデシルメタクリレート、２−（エトキシエチルメタクリレート）、グリシジルメタクリレート、ポリ（エチレングリコール）メタクリレート、メチルアクリレート、エチルアクリレート、プロピルアクリレート、ブチルアクリレート、ペンチルアクリレート、ヘキシルアクリレート、ヘプチルアクリレート、オクチルアクリレート、ドデシルアクリレート、２−エトキシエチルアクリレート、グリシジルアクリレート、ポリ（エチレングリコール）アクリレート、ε−カプロラクトン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、トリメチレンカーボネート、ラクチド、グリコリド、Ｎ−アセチル４−アザ−カプロラクトン、シクロヘキシルカプロラクトン、４−ｔｅｒｔ−ブチルカプロラクトン、および式４のカプロラクトンから成る群より選択されるモノマーがあげられる。
【００２１】
本発明の一実施態様において、ＮＯ供与性ポリマーを提供する方法が開示され、（ａ）少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するモノマーを含むポリマーを提供する工程と、（ｂ）該第２級アミンを圧力下でＮＯと反応させ、そのジアゼニウムジオレートを形成する工程と、を含む。
本発明の別の実施態様において、本発明の方法によって調製されるポリマーを含む医療装置が提供される。別の実施態様において、該医療装置は、血管ステントを備える。
一実施態様において、ポリマー被覆を含む医療装置が提供され、該ポリマーは、本発明の方法によって調製される。別の実施態様において、該医療装置は、血管ステントを備える。
【００２２】
本発明の別の実施態様において、該ポリマーは、ＦＫＢＰ−１２結合剤、エストロゲン、シャペロン阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、レプトマイシンＢ、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体ガンマリガンド（ＰＰＡＲγ）、ヒポテマイシン、ＮＯ、ビスフォスフォネート、上皮細胞増殖因子阻害剤、抗体、プロテアソーム阻害剤、抗生物質、抗炎症薬、アンチセンスヌクレオチド、および形質転換核酸から成る群より選択される少なくとも１つの薬物をさらに含む。別の実施態様において、該薬物は、シロリムス（ラパマイシン）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、エベロリムス（サーティカン）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）、およびゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８）から成る群より選択される少なくとも１つの化合物を含む。さらに別の実施態様において、該薬物は、ゾタロリムスである。
【００２３】
用語の定義
ラクチド：本明細書において、ラクチドは、３，６−ジメチル−１，４−ジオキサン−２，５−ジオンを指す。より一般的に、ラクチドは、本明細書において、乳酸のＲおよびＳ型のヘテロ二量体、乳酸のＳ型のホモ二量体、および乳酸のＲ型のホモ二量体とも称される。乳酸およびラクチドは、本明細書において、ほとんど同じ意味で使用される。二量体という用語は、当業者に周知である。
【００２４】
【化４】
【００２５】
グリコリド：本明細書において、グリコリドは、以下の一般構造を有する分子を指す。
【００２６】
【化５】
【００２７】
４−ｔｅｒｔ−ブチルカプロラクトン：本明細書において、４−ｔｅｒｔ−ブチルカプロラクトンは、以下の一般構造を有する分子を指す。
【００２８】
【化６】
【００２９】
Ｎ−アセチル４−アザ−カプロラクトン：本明細書において、Ｎ−アセチル４−アザ−カプロラクトンは、以下の一般構造を有する分子を指す。
【００３０】
【化７】
【００３１】
骨格：本明細書において、「骨格」は、本発明のポリマーまたはコポリマーの主鎖を指す。本明細書において、「ポリエステル骨格」は、エステル結合を含む生分解性ポリマーの主鎖を指す。
生物活性剤：本明細書において、「生物活性剤」は、動物において治療効果を有する任意の薬物、医薬化合物、または分子を含む。例示的、かつ非限定的な例としては、これらに限定されないが、ＦＫＢＰ１２結合性化合物を含むマクロライド抗生物質、エストロゲン、シャペロン阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、レプトマイシンＢ、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体ガンマリガンド（ＰＰＡＲγ）、ヒポテマイシン、ＮＯ、ビスフォスフォネート、上皮細胞増殖因子阻害剤、抗体、プロテアソーム阻害剤、抗生物質、抗炎症薬、アンチセンスヌクレオチド、および形質転換核酸を含む、抗増殖剤が挙げられる。生物活性剤は、これらに限定されないが、細胞増殖抑制化合物、化学療法剤、鎮痛剤、スタチン、核酸、ポリペプチド、成長因子、および組み換え微生物、およびリポソームを含む送達ベクターも含み得る。
例示的なＦＫＢＰ１２結合性化合物としては、シロリムス（ラパマイシン）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、エベロリムス（サーティカンまたはＲＡＤ−００１）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９または３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピオン酸を有する非晶質ラパマイシン４２−エステル）、およびゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８）が挙げられる。さらに、他のラパマイシンヒドロキシエステルも、本発明のポリマーと組み合わせて使用することができる。
【００３２】
生体適合性：本明細書において、「生体適合性」は、動物の組織と密接に接触する位置に配置される場合、動物に外傷または死をもたらさないか、または動物において有害反応を誘導しない任意の材料を意味する。有害反応としては、炎症、感染、線維性組織形成、細胞死、または血栓形成が挙げられる。
コポリマー：本明細書において、「コポリマー」は、モノマー等の２つ以上の異種単位の同時鎖付加重合によって製造される高分子である。コポリマーとしては、二元ポリマー（２つの異種単位）、三元ポリマー（３つの異種単位）等が挙げられる。
【００３３】
制御放出：本明細書において、「制御放出」は、所定の速度での医療装置表面からの生物活性化合物の放出を指す。制御放出は、特別に意図されない限り、生物活性化合物が、予測不可能な方法で散発的に医療装置表面から剥がれず、生物環境との接触後に装置を「破裂」（本明細書において、一次速度過程とも称される）させないという意味を含む。しかしながら、本明細書において、「制御放出」という用語は、配置に関連する「バースト現象」を除外しない。本発明の一部の実施態様において、後により段階的な放出が続く薬物の初期バーストは、好ましい場合がある。放出速度は、定常状態（一般的に、「徐放」またはゼロ次速度過程と称される）であり得、つまり、薬物は、所定の時間にわたって均一な量で放出される（初期バースト段階を伴うか、または伴わない）か、または勾配放出であり得る。勾配放出は、装置表面から放出される薬物の濃度が経時的に変化するという意味を含む。
【００３４】
ジアゼニウムジオレート：本明細書において、「ジアゼニウムジオレート」は、[Ｎ（Ｏ）ＮＯ]−官能基を有し、予測可能な速度で、生理条件下において一酸化窒素（ＮＯ）分子を放出する化学種であるＮＯＮＯａｔｅ（１−置換ジアゼニウム−１，２−ジオレート）としても称される、一酸化窒素供与性分子のクラスを指す。さらに、「ジアゼニウムジオレート化された」または「ジアゼニウムジオール化」は、ジアゼニウムジオレート基を有する分子、またはそのような基をポリマーに添加する過程を指す。
ガラス転移温度（Ｔg）：本明細書において、「ガラス転移温度」または「Ｔg」は、温度を指し、ポリマーは、構造的に、弾力性のある柔軟な状態から堅い不安定な状態へ転移する。
グリシジルメタクリレート：本明細書において、グリシジルメタクリレートは、以下の一般構造を有する分子を指す。
【００３５】
【化８】
【００３６】
Ｍn：本明細書において、Ｍnは、数平均分子量を指す。数学的に、以下の式によって表される。
Ｍn＝ΣiＮiＭi／ΣiＮi
（式中、Ｎiは、重量がＭiであるモルの数である。）
Ｍw：本明細書において、Ｍwは、既定のポリマーが有し得る平均重量である重量平均分子量を指す。数学的に、以下の式によって表される。
Ｍw＝ΣiＮiＭi2／ΣiＮiＭi
(式中、Ｎiは、重量がＭiである分子の数である。）
【発明を実施するための形態】
【００３７】
一酸化窒素（ＮＯ）分子を有する第２級アミンを含むポリマーが合成され、ジアゼニウムジオレートが形成されている。ポリマー中の第２級アミンの数を増加させることにより、ＮＯ負荷（loading）を増加し、より安定的なジアゼニウムジオレートを提供し、より細かく調製された制御放出の可能性を高める。出願人は、第１級アミンとのエポキシド開環反応に基づく生体適合性ポリマーにより、医療装置を製造及び被覆するのに適切なＮＯ供与性ポリマーを提供すると判断した。
本発明により、医療装置を製造及び被覆するのに適切なエポキシド由来ＮＯ供与性ポリマーを提供する。より具体的には、本発明は、生理環境において、ＮＯを制御可能に放出または供与するようにジアゼニウムジオレート化することができる少なくとも１つのエポキシド由来第２級アミンを有する側鎖を含むポリマーを提供する。さらに、エポキシドからの第２級アミンを含むエポキシド由来ポリマーの合成のための方法を開示する。
本発明のポリマーは、ホモポリマーおよびコポリマーを含む。ホモポリマーは、各側鎖上に少なくとも１つの第２級アミン基を含むモノマー単位から成る。本発明のポリマーとしては、これらに限定されないが、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリスチレン、ポリ（塩化ビニル）、ポリエステル、ポリカーボネート、ポリエーテル、ポリウレタン、ならびに他の生体安定性および生分解性ポリマーが挙げられる。
本発明の方法における使用のために適切なモノマーは、式２で表されるモノマーを含む。
【００３８】
【化９】
【００３９】
式中、Ｒ1は、これらに限定されないが、メタクリレート、アクリレート、ラクトン、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、およびＣ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキルを含む、重合可能な部分である。
本発明の方法において使用するのに適切なポリマー骨格としては、ポリエーテル、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリスチレンおよびポリ（塩化ビニル）等のビニルポリマー、ポリカーボネート、ポリウレタン、ポリエステル、およびそれらの誘導体から成る群より選択される骨格があげられる。
【００４０】
アクリレートまたはメタクリレートポリマーとしては、これらに限定されないが、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、プロピルメタクリレート、ブチルメタクリレート、ペンチルメタクリレート、ヘキシルメタクリレート、ヘプチルメタクリレート、オクチルメタクリレート、ドデシルメタクリレート、２−（エトキシエチルメタクリレート）、グリシジルメタクリレート、ポリ（エチレングリコール）メタクリレート、メチルアクリレート、エチルアクリレート、プロピルアクリレート、ブチルアクリレート、ペンチルアクリレート、ヘキシルアクリレート、ヘプチルアクリレート、オクチルアクリレート、ドデシルアクリレート、２−エトキシエチルアクリレート、グリシジルアクリレート、ポリ（エチレングリコール）アクリレートを含む、アクリルまたはメタクリルモノマーが挙げられる。一実施態様において、メタクリレートモノマーは、エポキシド側鎖を有するグリシジルメタクリレートである。本発明の非アクリレートモノマーとしては、これらに限定されないが、ε−カプロラクトン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、トリメチレンカーボネート、ラクチド、グリコリド、Ｎ−アセチル４−アザ−カプロラクトン、シクロヘキシルカプロラクトン、４−ｔｅｒｔ−ブチルカプロラクトン、式４のカプロラクトン、およびそれらの誘導体が挙げられる。
【００４１】
本発明のポリマーは、側鎖を含み、側鎖のうちの１つ以上は、少なくとも１つの第２級アミン基をさらに含む。第２級アミン基は、モノマー重合の前（式３を製造するスキーム１における反応１）または後（スキーム１における反応２）のいずれかで導入することができる。一実施態様において、第２級アミンは、モノマーまたはポリマーのいずれかに対する求核または求電子エポキシド開環反応により導入することができる。一般反応がスキーム１に示され、式中、Ｒ1は、これらに限定されないが、アクリレート、メタクリレート、ラクトン、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、およびＣ2−Ｃ20アルキニルを含む、重合可能な部分であり、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ10直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、またはＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールである。Ｒ1およびＲ2は、同じであるか、または異なり得る。例示的なＣ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素としては、これらに限定されないが、Ｎ−メチルエチレンジアミン、Ｎ−メチルプロピリレンジアミン、Ｎ−メチルブチレンジアミン、Ｎ−エチルエチレンジアミン、Ｎ−エチルプロピリレンジアミン、Ｎ−エチルブチレンジアミン、Ｎ−ベンジルエチレンジアミン、Ｎ−ベンジルプロピリレンジアミン、Ｎ−ベンジルブチレンジアミン、Ｎ−プロピルエチレンジアミン、Ｎ−プロピルプロピリレンジアミン、およびＮ−プロピルブチレンジアミン、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチレンペンタミン、およびペンタエチレンヘキサミンが挙げられる。
【００４２】
【化１０】
【００４３】
ポリマー側鎖におけるエポキシドは、脱水反応、アルケンの酸化、および閉環反応を含む、反応によって合成される。エポキシド含有側鎖を有する例示的なモノマーは、グリシジルメタクリレートである。本発明は、モノマー上のエポキシド側鎖を合成し、モノマーを重合するために調製する方法も含む。一実施態様において、アルケンを含有する重合可能なモノマーは、エポキシド含有側鎖を得るためにジメチルジオキシランで処理される。別の実施態様において、アルケン含有モノマーは、２−アリルカプロラクトンである（式４）。アルケン含有モノマーのエポキシ化は、モノマーの重合前または重合後のいずれかに行われる。
【００４４】
【化１１】
【００４５】
アルケン含有モノマーは、異なるモノマーでホモ重合または共重合することができる。一実施態様において、２−アリルカプロラクトン（式４）は、これらに限定されないが、グリコリド、ラクチド、および他の生体適合性ラクトン等の他のラクトンで共重合される。その後、得られたコポリマーは、エポキシ化される。アルケン含有モノマーまたはアルケン含有ポリマーに対するエポキシ化反応は、これらに限定されないが、ジメチルジオキシラン、ｍＣＰＢＡ、金属酸化物、過酸化物、過酸、環状過酸化物、およびそれらの誘導体等の多くの試薬で行うことができる。別の実施態様において、２−アリルカプロラクトン（式４）は、ホモ重合され、その後、得られたポリマーは、エポキシ化される。エポキシド含有側鎖を有するポリマーが合成されると、それらは第２級アミン側鎖を有するポリマーを得るために第１級アミンで処理される（スキーム１に示される）。反応２の生成物において示される（スキーム１）第２級側鎖を有する得られたポリマーは、アミノアルコールとしても見なされる。
【００４６】
本発明のポリマーは、アミン含有モノマー単位当たり少なくとも１つの第２級アミンを含む。第２級アミンは、モノマー単位上の求電子部分に対するアミンの求核攻撃により導入される。求核攻撃によりアミンを導入する反応は、触媒されてもよい。本発明のポリマーを合成する際に有用な触媒としては、これらに限定されないが、ＬｉＣｌＯ4、鉱酸、ブレンステッド酸、イオン交換樹脂、ゼオライト、酸素親和性金属、プロトンスポンジ、緩衝液、アルカリ土類金属、アルカリ土類金属、遷移金属、および有機金属化合物が挙げられる。式５に示される本発明の一実施態様において、アミンは、エポキシドに対する求核攻撃による、グリシジルメタクリレート（サブユニットａ）およびメタクリレート（サブユニットｂ）に由来するポリマーに対して導入される。式５および６において、Ｒ3は、Ｃ1−Ｃ20直鎖アルキル、Ｃ5−Ｃ10シクロアルキル、アルコキシ置換Ｃ2−Ｃ10アルキル、またはヘテロ原子置換Ｃ2−Ｃ10アルキル、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である（反応３）。式６において、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ10直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、またはＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールである。
【００４７】
【化１２】
【００４８】
本発明の一実施態様において、式５および６のａおよびｂ単位は、それぞれ、１〜２０，０００の整数である。更なる実施態様において、ａは、１０〜２０，０００、５０〜１５，０００、１００〜１０，０００、２００〜５，０００、５００〜４，０００、７００〜３，０００、または１０００〜２０００の整数である。更なる実施態様において、ｂは、１０〜２０，０００、５０〜１５，０００、１００〜１０，０００、２００〜５，０００、５００〜４，０００、７００〜３，０００、または１０００〜２０００の整数である。
側鎖は、前駆体ポリマーに対する求核攻撃に適切なアミンを選択することによって、ＮＯの制御放出を提供するように合成的に微調整することができる。
本発明の非アクリレートポリマーとしては、ポリエステル、ポリカーボネート、ポリエーテル、ポリウレタン、および他の生体安定性または生分解性ポリマーが挙げられる。本発明の一実施態様において、ＮＯ供与ポリマーは、式９のポリエステルであり、式中、ｎは、０〜４の整数であり、ｍは、１〜２０，０００の整数である。式９のポリエステルは、第１級アミンとの標準開環反応により式８のエポキシドから合成される。式９では、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ10直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、またはＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールである。
【００４９】
【化１３】
【００５０】
本発明の式７、８、および９の一実施態様において、ｍは、１〜２０，０００の整数である。更なる実施態様において、ｍは、１０〜１９，０００、２００〜１７，０００、４００〜１５，０００、５００〜１４，０００、６００〜１３，０００、７００〜１２，０００、８００〜１１，０００、９００〜１２，０００、１，０００〜１１，０００、１，１００〜１０，０００、１，２００〜９，０００、１，３００〜８，０００、１，４００〜７，０００、１，５００〜６，０００、１，６００〜５，０００、１，６００〜４，０００、１，７００〜３，０００、１，８００〜２，０００、または１，９００〜１，９５０の整数である。本発明の式７、８、および９の別の実施態様において、ｎは、０〜４の整数である。更なる実施態様において、ｎは、２または３である。
【００５１】
本発明の非アクリルポリマーは、ホモポリマーに限定されない。本発明の一実施態様において、ポリエーテルおよびポリエステルのコポリマーは、式１１のエポキシドを形成するように上述の反応を受ける式１０によって合成される。その後、式１１のエポキシドは、式１２のポリマーを得るために第１級アミンで処理される。式１２では、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ10直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、またはＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールである。式１２では、ｎは、０〜４の整数であり、ｍは、１〜２０，０００の整数であり、ｆは、１〜２０，０００の整数である。
【００５２】
【化１４】
【００５３】
本発明の式１０、１１、および１２の一実施態様において、ｍおよびｆは、それぞれ、１〜２０，０００の整数である。更なる実施態様において、ｍは、１０〜１９，０００、２００〜１７，０００、４００〜１５，０００、５００〜１４，０００、６００〜１３，０００、７００〜１２，０００、８００〜１１，０００、９００〜１２，０００、１，０００〜１１，０００、１，１００〜１０，０００、１，２００〜９，０００、１，３００〜８，０００、１，４００〜７，０００、１，５００〜６，０００、１，６００〜５，０００、１，６００〜４，０００、１，７００〜３，０００、１，８００〜２，０００、または１，９００〜１，９５０の整数である。更なる実施態様において、ｆは、１０〜１９，０００、２００〜１７，０００、４００〜１５，０００、５００〜１４，０００、６００〜１３，０００、７００〜１２，０００、８００〜１１，０００、９００〜１２，０００、１，０００〜１１，０００、１，１００〜１０，０００、１，２００〜９，０００、１，３００〜８，０００、１，４００〜７，０００、１，５００〜６，０００、１，６００〜５，０００、１，６００〜４，０００、１，７００〜３，０００、１，８００〜２，０００、または１，９００〜１，９５０の整数である。本発明の式１０、１１、および１２の別の実施態様において、ｎは、１〜４の整数である。更なる実施態様において、ｎは、２または３である。
【００５４】
本発明のポリマーの物理的特性は、ポリマーがそれらの目的の用途のために任意に機能することができるように、微調整することができる。微調整することができる特性は、制限されないが、Ｔg、分子量（ＭnおよびＭwの両方）、多分散性指数（ＰＤＩ、Ｍw／Ｍnの商）、弾性度、および両親媒性の程度を含む。本発明の一実施態様において、ポリマーのＴgは、約−１０℃〜約８５℃である。本発明のさらに別の実施態様において、ポリマーのＰＤＩは、約１．３〜約４．０である。本発明の別の実施態様において、ポリマーのＴgは、約０℃〜約４０℃である。本発明のさらに別の実施態様において、ポリマーのＰＤＩは、約１．５〜約２．５である。
【００５５】
本発明のエポキシド由来ＮＯ供与性ポリマーで被覆するために適切な埋め込み型医療装置としては、これらに限定されないが、血管ステント、ステントグラフト、尿道ステント、胆管ステント、カテーテル、ガイドワイヤ、ペースメーカーリード、骨ねじ、縫合、および人工心臓弁が挙げられる。本発明のポリマーは、埋め込み型医療装置を製造するために適切である。本発明のエポキシド由来ＮＯ供与性ポリマーから製造することができる医療装置としては、これらに限定されないが、血管ステント、ステントグラフト、尿道ステント、胆管ステント、カテーテル、ガイドワイヤ、ペースメーカーリード、骨ねじ、縫合、および人工心臓弁が挙げられる。
本発明のポリマー被覆剤は、血行力学的環境に配置される医療装置を対象とし、優れた付着性を有する。つまり、被覆剤は、医療装置表面に安定的に連結しなければならない。これらに限定されないが、ステンレス鋼、ニチノール、アルミニウム、クロム、チタン、金、コバルト、セラミック、および幅広い合成ポリマー、ならびにこれらに限定されないが、コラーゲン、フィブリン、および植物繊維を含む天然材料を含む、多くの異なる材料は、埋め込み型医療装置を製造するために使用することができる。これらの材料のすべて、および他の材料は、本発明の教示に従って作製されるポリマー被覆剤と併用することができる。さらに、本発明のポリマーは、医療装置の全体を製造するために使用することができる。
【００５６】
ポリマーがどのようにして表面に付着するかということの我々の理解を説明しようと試みるか、またはそれに貢献する多くの理論が存在する。最も重要な力としては、静電および水素結合が挙げられる。しかしながら、湿潤性、吸収性、および弾力性を含む他の要因も、ポリマーが異なる表面にいかに良く付着するかを決定する。したがって、ポリマー塩基被膜、またはプライマーは、しばしば、より均一な被覆表面を作製するために使用される。
本発明のエポキシド由来ＮＯ供与性ポリマー被覆剤は、当業者に周知の任意の方法で下塗りされるか、または裸の医療装置表面に塗布することができる。本発明に適合する塗布法としては、これらに限定されないが、溶射、浸漬、ブラッシング、真空蒸着、静電スプレー被覆、血漿被覆、回転被覆電気化学的被覆、および他の方法が挙げられる。さらに、本発明のエポキシド由来のＮＯ供与性ポリマー被覆剤は、キャップ被膜と併用することができる。本明細書において、キャップ被膜は、別の被覆剤上に塗布される最外被覆層を指す。ＮＯ供与性ポリマー被覆剤は、プライマー被膜上に塗布される。その後、ポリマーキャップ被膜は、エポキシド由来のＮＯ供与性ポリマー被覆剤上に塗布される。キャップ被膜は、任意で、ＮＯ放出を制御する拡散障壁として機能することができる。キャップ被膜は、単に、ステントを保護し、ＮＯ放出速度に影響を与えないようにステントの表面に塗布される生体適合性ポリマーであり得る。
【００５７】
本発明のエポキシド由来ＮＯ供与性ポリマーは、薬物の送達および制御放出にも有用である。本発明のポリマーからの放出に適切な薬物としては、これらに限定されないが、抗増殖化合物、細胞増殖抑制化合物、毒性化合物、抗炎症化合物、化学療法剤、鎮痛剤、抗生物質、プロテアーゼ阻害剤、スタチン、核酸、ポリペプチド、成長因子、および組み換え微生物、リポソームを含む送達ベクター等が挙げられる。
本発明の一実施態様において、制御可能に放出される薬物としては、これらに限定されないが、ＦＫＢＰ−１２結合剤を含む、マクロライド抗生物質が挙げられる。このクラスの例示的な薬物としては、シロリムス（ラパマイシン）（式２）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、エベロリムス（サーティカンまたはＲＡＤ−００１）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９、または米国特許出願第１０／９３０，４８７号に開示される３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピオン酸を有する非晶質ラパマイシン４２−エステル）、およびゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８、米国特許第６，０１５，８１５号および同第６，３２９，３８６号を参照）（式１）が挙げられる。加えて、米国特許第５，３６２，７１８号に開示される他のラパマイシンヒドロキシエステルが、本発明のポリマーと組み合わせて使用することができる。前述の特許および特許出願のすべての全内容は、ＦＫＢＰ−１２結合性化合物および誘導体に関する、それらが教示するすべてを参照することにより、本明細書において組み込まれる。
【００５８】
実施例
以下の非限定的な例により、本発明の教示による例示的なポリマーの合成方法を提供する。
実施例１
グリシジルメタクリレート／ヘキシルメタクリレートコポリマーの合成
【００５９】
【化１５】
【００６０】
グリシジルメタクリレート（９．０２ｇ）、ｎ−ヘキシルメタクリレート（２１．０３ｇ）、１，４−ジオキサン（５９．９８ｇ）、およびＡＩＢＮ（２４０ｍｇ）を１２０ｍＬの瓶の中で混合し、密封し、窒素で３０分間パージした。瓶を、油浴中で攪拌しながら６０℃で３時間加熱した。ポリマーを、ジクロロメタン溶液からメタノール中で繰り返し（３回）沈殿させることにより精製した。真空オーブンにおいて４５℃で一晩乾燥させた後、ｎ−ヘキシルメタクリレート（５６モル％）およびグリシジルメタクリレート（４４モル％）のコポリマーを、1Ｈ ＮＭＲによって得た。ポリマーは、ＧＰＣ（ＴＨＦ、３５Ｃおよびポリスチレン標準）による、２３２２４０の重量平均分子量および２．０のＰＤＩを有した。第２の熱に対する２０℃／分の加熱速度で、ＤＳＣによって測定されたポリマーのＴgは、２８．８℃であった。
【００６１】
実施例２
側鎖における第２級アミン基へのエポキシド基の変換
【００６２】
【化１６】
【００６３】
この実施例において、１．０ｇの実施例１のポリマーを、瓶の中で３ｍｌのＴＨＦに溶解させた。その後、１４．５ｍＬの１−ヘキシルアミンを添加した。瓶を密封し、油浴中で５０℃で一晩加熱した。ＮＭＲは、エポキシドが消費されたことを示した。得られたポリマーは、ＴＨＦ溶液からヘキサン／酢酸エチル（ｖ／ｖ ８０／２０）への繰り返し（３回）沈殿させることにより精製した。ポリマーを、真空で、室温で一晩乾燥させた。
【００６４】
実施例３
第２級アミン機能性ポリマーのジアゼニウムジオレート化ポリマーへの変換
約１ｍｇの実施例２のポリマー（Ｎ２７）を、４分の１インチのステンレス鋼切り取り試片上にＴＨＦ溶液から浸漬被覆した。切り取り試片は、真空で乾燥させ、被覆ポリマーを、８０ｐｓｉのＮＯ下で３日間乾燥ジアゼニウムジオレート化した。切り取り試片をＰＢＳ（ｐＨ７．４）バッファー管中でインキュベートし、放出された一酸化窒素が、一酸化窒素分析器（ＧＥ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ２８０ｉ）で検出された。ジアゼニウムジオレート化ポリマーは、５．７８ｐｍｏｌ／分／ｍｇの初期放出速度を示し、１８．５時間で１．４９ｎｍｏｌ／ｍｇの一酸化窒素を放出した。
【００６５】
実施例４
側鎖における多重第２級アミン基へのエポキシド基の変換
【００６６】
【化１７】
【００６７】
ヘキシルメタクリレート（６４モル％）およびグリシジルメタクリレート（３６モル％）の前駆体コポリマーを、実施例１と同様に調製した。この実施例において、２．０３グラムの前駆体ポリマーを、４ｍＬのＴＨＦに溶解し、瓶の中で１９．２ｍＬのＮ−メチルエチレンジアミンと混合した。瓶を密封し、油浴中で６０℃で２２時間加熱した。ポリマーを、ＴＨＦ溶液からのヘキサン中で繰り返し（３回）沈殿させることにより精製した。ポリマーを、真空で、室温で一晩乾燥させた。
【００６８】
実施例５
約１ｍｇの実施例２のポリマー（Ｎ４７）を、４分の１インチのステンレス鋼切り取り試片上にＴＨＦ溶液から浸漬被覆した。切り取り試片は、真空で乾燥させ、被覆ポリマーを、８０ｐｓｉのＮＯ下で３日間乾燥ジアゼニウムジオレート化した。切り取り試片をＰＢＳ（ｐＨ７．４）バッファー管中でインキュベートし、放出された一酸化窒素が、一酸化窒素分析器（ＧＥ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ２８０ｉ）で検出された。ジアゼニウムジオレート化ポリマーは、４０１ｐｍｏｌ／分／ｍｇの初期放出速度を示し、２３．５時間で１１０ｎｍｏｌ／ｍｇの一酸化窒素を放出した。
【００６９】
実施例６
側鎖における多重アミン基へのエポキシド基の変換
【００７０】
【化１８】
【００７１】
重量２．０ｇの実施例３の前駆体ポリマーを、８ｍＬのＴＨＦに溶解した。それとは別に、２３．９ｍＬのジエチレントリアミンを、１２ｍＬのＴＨＦと混合することによって、別の溶液を調製した。ポリマー溶液を、攪拌下において、滴下でジエチレントリアミン溶液に添加した。混合物を、油浴中で５０℃で３日間加熱した。得られたポリマーを、ＴＨＦ溶液から脱イオン水へ沈殿させることによって精製した。ｄ4−メタノール中の1Ｈ ＮＭＲスペクトルは、エポキシド官能基の消失、およびＮＣＨ2基に対応する約２．７ｐｐｍの新規ピークの出現を示した。
【００７２】
実施例７
約１ｍｇの実施例６のポリマー（Ｎ５９）を、４分の１インチのステンレス鋼切り取り試片上にＴＨＦ溶液から浸漬被覆し、８０ｐｓｉのＮＯ圧力下で３日間ジアゼニウムジオレート化した。切り取り試片をＰＢＳ（ｐＨ７．４）バッファー管中でインキュベートし、放出されたＮＯが、ＮＯ分析器（ＧＥ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ２８０ｉ）で検出された。ジアゼニウムジオレート化ポリマーは、６３５ｐｍｏｌ／分／ｍｇの初期放出速度を示し、以下の一酸化窒素放出曲線に示されるように１２２．１時間で１４１ｎｍｏｌ／ｍｇのＮＯを放出した。
【００７３】
【化１９】
【００７４】
実施例８
エポキシド由来ＮＯ供与性ポリマーからのステントの製造
例示的、非限定的な目的のために、血管ステントを説明する。生分解性ＮＯ供与性ポリマーは、射出成形機のバレル中で溶融するまで加熱し、圧力下でステント鋳型へ押し込められる。成形ポリマー（ここで、ステントに類似し、ステントである）が冷却し、固化した後、ステントは、鋳型から取り出される。本発明の一実施態様において、ステントは、第１および第２の端部、ならびに第１と第２の端部との間に配置される壁付き表面を有するチューブ状部材である。壁は、編組状形態に織り込まれた押出ポリマーモノフィラメントから成る。第２の実施態様において、ステントは、射出成形または押し出される。穿孔は、チューブの壁に成形、レーザー切断、ダイス切断、または機械加工される。編組ステント形態モノフィラメントは、小球状にされ、乾燥したポリマー材料から製造される。その後、乾燥ポリマー小球は、押し出され、粗いモノフィラメントを形成し、それは、急冷される。その後、押出急冷粗モノフィラメントは、約０．０１ｍｍ〜０．６ｍｍ、好ましくは、約０．０５ｍｍ〜０．１５ｍｍの平均直径を有する最終モノフィラメントに成形される。その後、約１０〜約５０の最終モノフィラメントは、用途に対して適切な大きさの編組マンドレル上において編組角度約９０〜１７０度で編み込み法によって織り込まれる。その後、編み込みステントは、編組マンドレルから外され、編組マンドレル直径以下の外径を有するアニールマンドレル上に配置され、空気中、不活性雰囲気中、または真空下において、約５分〜約１８時間、約ポリマーＴgからポリマー混合物の融解温度の温度でアニールされる。その後、ステントは、冷却させられ、切断される。
【００７５】
他に示されない限り、本明細書および請求項で使用される成分の量、分子量、反応条件等の特性を表す、すべての数は、「約」という用語によって、いかなる場合にも修正されるものと理解される。したがって、これと異なることが示されない限り、以下の明細書および添付請求項で説明される数値パラメータは、本発明によって得ようとされる所望の特性によって異なり得る近似値である。少なくとも請求項の範囲への均等論の適用を制限する試みとしてではなく、各数値パラメータは、少なくとも、報告された有効桁の数を踏まえ、一般的な四捨五入法を適用することによって解釈されるべきである。本発明の広い範囲を説明する数値域およびパラメータが近似値であるにもかかわらず、特定の実施例で説明される数値は、できるだけ正確に報告される。しかしながら、いかなる数値も、それぞれの試験測定で見られる標準偏差からやむを得ず得られるある程度の誤差を本質的に包含する。
本発明の記載内容（特に、以下の請求項の内容）で使用される「１つの」、「ある」、「前記」という用語、および同様の指示対象は、本明細書において指示されるか、または内容によって明確に反論されない限り、単数形および複数形の両方を対象とするように解釈される。本明細書における値域の列挙は、単に、範囲に該当する各別々の値を個々に言及する速記法として機能することを目的とする。本明細書において指示されない限り、個々の値は、本明細書において個々に記載されているかのように、本明細書に組み込まれる。本明細書において記載されるすべての方法は、本明細書において指示されるか、または内容によって明確に反論されない限り、任意の適切な順序で行うことができる。本明細書において提供される任意およびすべての例、または例示的な言葉（例えば、「等」）の使用は、単に、本発明をより明らかにすることを目的とし、主張される本発明の範囲を限定するものではない。本明細書における言葉は、本発明の実行に不可欠な任意の非主張的構成要素を示すものとして解釈されるべきではない。
【００７６】
本明細書において開示される本発明の代替の構成要素または実施態様の分類は、限定と解釈されるものではない。各群の要素は、個々に言及され、主張されるか、または本明細書において見られる群の他の要素または他の構成要素と任意で組み合わされ得る。群の１つ以上の要素は、便宜および／または特許性の理由で、群に含まれるか、または削除され得ることが予期される。任意のそのような包含または削除が生じる場合、本明細書は、修正される群を包含すると見なされるため、付属請求項で使用されるすべてのマーカッシュ群の記述を実行する。
【００７７】
本発明のある実施態様は、本明細書において記載され、本発明を実行するための発明者に周知の最良の態様を含む。当然のことながら、これらの記述された実施態様に対する変更は、前述の説明を読むと、当業者にとって明らかとなる。発明者は、当業者が、必要に応じてそのような変更を使用することを予期し、発明者は、本明細書において明確に記載される以外に、本発明が実行されることを目的とする。したがって、本発明は、適用法によって許可されるように、本明細書に添付される請求項で記載される主題のすべての修正および同等物を含む。さらに、そのすべての可能な変更における上述の構成要素の任意の組み合わせは、本明細書において指示されるか、または内容によって明確に反論されない限り、包含される。
【００７８】
さらに、本明細書を通して多数の特許および刊行物が言及された。上述の各参考文献および刊行物は、それらの全体として参照することにより、本明細書にそれぞれ組み込まれる。
最後に、当然のことながら、本明細書において開示される本発明の実施態様は、本発明の原理を反映する。使用することができる他の修正は、本発明の範囲内である。したがって、例として、限定ではないが、本発明の代替の構成が、本明細書における教示に従って使用することができる。したがって、本発明は、示され、記載されるように正確なものに限定するものではない。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医療装置を製造し、被覆するためのエポキシド由来一酸化窒素（ＮＯ）供与性ポリマーに関する。
【背景技術】
【０００２】
一酸化窒素（ＮＯ）は、細胞生理学における多様、かつ複雑な役割を果たす単純二原子分子である。ほんの２５年前、ＮＯは、空気と混合する化石燃料が燃焼する間に形成される煙霧成分であると主に考えられた。しかしながら、Ｆｅｒｉｄ Ｍｕｒａｄ ｅｔ ａｌ．の先駆的研究の結果、ＮＯは、現在、内皮細胞、神経系細胞、およびマクロファージを含むほとんどすべての組織に見られる強力なシグナル伝達化合物および細胞毒性／細胞増殖抑制剤であることが周知である。哺乳類細胞は、Ｌ−アルギニンをＮ−ω−ヒドロキシ−Ｌ−アルギニンに酸化させ、その後、Ｌ−シトルリンおよび非荷電ＮＯ遊離基に変換する二段階酵素過程を使用してＮＯを合成する。３つの異なる一酸化窒素シンターゼ酵素が、ＮＯ製造を調節する。神経系一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳｌ、またはｎＮＯＳ）は、神経組織内で形成され、神経伝達における重要な役割を果たし、内皮一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ３またはｅＮＯＳ）は、内皮細胞によって分泌され、血管拡張を誘導し、誘導性一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ２またはｉＮＯＳ）は、主にマクロファージ、肝細胞、および軟骨細胞で見られ、免疫細胞毒性に関連する。
【０００３】
神経系ＮＯＳおよびｅＮＯＳは、少量のＮＯの迅速、かつ短期間の放出を調節する構成酵素である。これらの微量では、ＮＯは、環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）濃度を上昇させ、次に、細胞内Ｃａ2+レベルを増加させるグアニル酸シクラーゼを活性化する。細胞内Ｃａ2+濃度の増加は、ＮＯの血管拡張作用の主な原因となる平滑筋弛緩を引き起こす。誘発性ＮＯＳは、大量のＮＯの持続放出に関与し、内毒素およびサイトカインを含む細胞外因子によって活性化される。これらの高いＮＯレベルは、細胞性免疫における重要な役割を果たす。
【０００４】
医学研究により、血管外科および介入臓病学の分野を含め、ＮＯの治療的用途が急速に発見されている。経皮経管冠動脈形成（ＰＴＣＡ）（バルーン血管形成としても周知）ならびにアテローム切除および／またはステント留置等の閉塞動脈を除去するために使用される手順は、バルーン膨張またはステント配置の部位で血管壁外傷を引き起こし得る。この外傷に反応して、再狭窄として周知の複雑な多因子過程が生じ得、それにより、以前は開いていた血管腔が狭くなり、再閉塞となる。再狭窄は、外傷部位へ移動する血小板が、外傷内皮にマイトジェンを放出する際に始まる。血小板は、凝集し始め、外傷部位に付着し、血栓形成、または血塊形成を開始する。結果として、以前は開いていた腔は、血小板およびフィブリンが血管壁を収集するにつれて狭くなり始める。再狭窄のより頻繁に見られる機序では、血管壁に付着する活性化血小板によって分泌されるマイトジェンは、治癒過程の間、血管平滑筋細胞の過剰増殖を刺激し、外傷血管腔を制限するか、または閉塞する。得られた新生内膜過形成は、ステント再狭窄の主要な原因である。
【０００５】
近年、ＮＯは、血小板凝集および付着を著しく低下させることを示し、これは、ＮＯの直接的な細胞毒性／細胞増殖抑制作用と組み合わせて、血管平滑筋細胞増殖を著しく低下させ、再狭窄の予防に役立つ可能性がある。血小板凝集は、初期血管傷害後数分で生じ、再狭窄につながるイベントのカスケードが開始されると、回復困難な損傷がもたらされ得る。さらに、血栓形成および再狭窄のリスクは、血管腔の内側を覆う内皮が修復されるまで存続する。したがって、ＮＯ、または任意の抗再狭窄薬が、直ぐに外傷部位に到達することが不可欠である。
【０００６】
外傷部位で治療レベルのＮＯを提供するための１つの方法は、予防的に全身的ＮＯレベルを増加させることである。これは、内因性ＮＯ製造を刺激するか、または外因性ＮＯ源を使用することによって行うことができる。内因性ＮＯ放出を調節する方法は、主に、Ｌ−アルギニン等の過量のＮＯ前駆体を使用する合成経路の活性化、または遺伝子治療を使用して一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）の発現を増加させることに注目している。米国特許第（ＵＳＰＮ）５，９４５，４５２号、同第５，８９１，４５９号および同第５，４２８，０７０号では、経口投与のＬ−アルギニンおよび／またはＬ−リジンを使用する持続ＮＯの上昇が記載される。しかしながら、これらの方法は、再狭窄の予防における効果が証明されていない。遺伝子治療法を使用する内因性発現ＮＯの調節は、未だ非常に実験的であり、安全性および有効性が証明されていない。米国特許第５，２６８，４６５号、同第５，４６８，６３０号、および同第５，６５８，５６５号では、様々な遺伝子治療法が記載される。
【０００７】
純粋なＮＯガス等の外因性ＮＯ源は、毒性が高く、短命であり、生理液中で比較的不溶性である。結果として、全身的外因性ＮＯ送達は、該して、ニトログリセリン錠剤、静脈内懸濁液、スプレー、および経皮パッチ等の有機硝酸塩プロドラッグを使用して行われる。ヒトの体は、ニトログリセリンをＮＯに急速に変換するが、プロドラッグを活性化するために必要な酵素レベルおよび補因子が急速に枯渇し、薬剤耐性を引き起こす。さらに、全身的ＮＯ投与は、低血圧および遊離基細胞傷害を含む深刻な副作用を有し得る。したがって、全身的な抗再狭窄治療のための血液レベルを維持するために有機硝酸塩プロドラッグを使用することは、現在不可能である。
【０００８】
したがって、全身的予防法に関する不利点を改善するための限局的または部位特異的ＮＯ送達が大きく注目されている。ＮＯ放出化合物、またはＮＯＳ遺伝子を標的細胞に送達するベクターで被覆される医療装置を含む、埋め込み型医療装置および／または局部的遺伝子治療手技が評価されている。それらの全身的対応物と同様に、限局的ＮＯ送達のための遺伝子治療手技は、安全性および有効性が証明されていない。部位特異的ＮＯＳ遺伝子送達が現実となる前に、克服しなければならない重要な技術的問題および安全性に対する懸念が未だ存在する。
【０００９】
しかしながら、限局的外因性ＮＯの適用の分野において、著しい進歩が見られている。再狭窄の予防に対して効果的であるために、ＮＯ等の抑制性治療薬は、治療レベルで持続した期間で投与しなければならない。結果として、再狭窄を治療するために使用されるいずれのＮＯ放出性医療装置も移植に適さなければならない。理想的な候補装置は、血管ステントである。したがって、ＮＯの治療的有効量を正確な位置に安全に提供するステントは、再狭窄治療および予防において著しい伸展を提示する。
【００１０】
体内での適用に適する一酸化窒素放出化合物は、多くの研究者によって開発されている。早くも１９６０年には、ＮＯガスは、アミン、例えば、ジエチルアミンと反応して、次の一般式Ｒ--Ｒ′Ｎ--Ｎ（Ｏ）ＮＯで表されるＮＯ放出アニオンを形成することができることが証明された。これらの化合物の塩は、溶液中で自然に分解し、ＮＯを放出することができる。
治療薬として有用な、体温で十分な安定性を有する一酸化窒素放出化合物は、米国特許第４，９５４，５２６号、同第５，０３９，７０５号、同第５，１５５，１３７号、同第５，２１２，２０４号、同第５，２５０，５５０号、同第５，３６６，９９７号、同第５，４０５，９１９号、同第５，５２５，３５７号、および同第５，６５０，４４７号において記載されるように、Ｋｅｅｆｅｒ ｅｔ ａｌ．によって最終的に開発され、これらのすべての内容は、参照することにより本明細書に含まれる。
【００１１】
しかしながら、ＮＯの体内半減期は、限定され、ＮＯの目的とする部分への送達を困難にする。したがって、ＮＯの持続放出を製造することができるＮＯ放出化合物が必要とされる。例えば、ＮＯ供与アスピリン誘導体、亜硝酸アミル、および硝酸イソソルビドを含む、いくつかの例示的なＮＯ放出化合物が、この目的で開発されている。さらに、ＮＯ付加物を有し（例えば、米国特許公開第２００６／０００８５２９号、および同第２００４／００３７８３６号を参照）、制御された方法でＮＯを放出する生体適合性ポリマーが報告されている。
第２級アミンは、２モルのＮＯに結合し、水性の環境においてそれらを放出する能力を有する。２つのＮＯ分子に結合することが可能な例示的な第２級アミンの一般構造は、式１に示され、以下においてジアゼニウムジオレートと称される（式中、Ｍは、対イオンであり、適切な荷電を有する金属、またはプロトンであり得、Ｒ1およびＲ2は、有機および無機化学基に対する一般表記である）。高圧下でＮＯガスを組み込みながら、第２級アミンを塩基性条件に暴露させることは、ジアゼニウムジオレートの形成につながる。
【００１２】
【化１】
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、医療装置を製造及び被覆するのに適切な一酸化窒素（ＮＯ）供与性ポリマーを提供する。より具体的には、本発明は、生理環境において、ＮＯを制御可能に放出または供与するようにジアゼニウムジオレート化することができる少なくとも１つの第２級アミンを含むエポキシド由来ポリマーを提供する。さらに、エポキシドからの第２級アミンを含むポリマーの合成のための方法を開示する。
【００１４】
本発明の一実施態様において、少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するポリマーを提供する方法が開示され、（ａ）エポキシドペンダント基を有するポリマーを提供する工程と、（ｂ）該ポリマーを、一般式Ｒ2−ＮＨ2で表される化合物と、第２級アミンが形成される条件下で反応させる工程と（式中、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ20直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ20シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重（multiple）アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、およびＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールから成る群より選択される）、（ｃ）該第２級アミンを圧力下でＮＯと反応させ、そのジアゼニウムジオレートを形成する工程とを含む。
本発明の別の実施態様においては、少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するモノマーを提供する方法が開示され、
（ａ）式２で表される重合可能な第１のモノマーを提供する工程と、
【００１５】
【化２】
【００１６】
（式中、Ｒ1は、アクリレート、メタクリレート、ラクトン、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、およびＣ2−Ｃ20アルキニルから成る群より選択される重合可能な部分である）
（ｂ）該第１のモノマーを、一般式Ｒ2−ＮＨ2で表される化合物と、式３で表される反応性第２級アミンを有するモノマーが形成される条件下で反応させる工程（式中、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ20直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ20シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、およびＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールから成る群より選択される）とを含む。
【００１７】
【化３】
【００１８】
本発明の別の実施態様において、反応工程（ｂ）は、ＬｉＣｌＯ4、鉱酸、ブレンステッド酸、イオン交換樹脂、ゼオライト、酸素親和性（oxophilic）金属、プロトンスポンジ（proton sponge）、緩衝液、アルカリ土類金属、アルカリ土類金属、遷移金属、および有機金属化合物から成る群より選択される触媒をさらに含む。
【００１９】
別の実施態様において、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素は、Ｎ−メチルエチレンジアミン、Ｎ−メチルプロピリレンジアミン、Ｎ−メチルブチレンジアミン、Ｎ−エチルエチレンジアミン、Ｎ−エチルプロピリレンジアミン、Ｎ−エチルブチレンジアミン、Ｎ−ベンジルエチレンジアミン、Ｎ−ベンジルプロピリレンジアミン、Ｎ−ベンジルブチレンジアミン、Ｎ−プロピルエチレンジアミン、Ｎ−プロピルプロピリレンジアミン、Ｎ−プロピルブチレンジアミン、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチレンペンタミン、およびペンタエチレンヘキサミンから成る群より選択される。
【００２０】
反応性第２級アミンを有するポリマーを提供する方法の別の実施態様において、該ポリマーは、ポリエーテル、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリスチレン、およびポリ（塩化ビニル）等のビニルポリマー、ポリカーボネート、ポリウレタン、およびポリエステルから成る群より選択される。別の実施態様において、該ポリマーとしては、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、プロピルメタクリレート、ブチルメタクリレート、ペンチルメタクリレート、ヘキシルメタクリレート、ヘプチルメタクリレート、オクチルメタクリレート、ドデシルメタクリレート、２−（エトキシエチルメタクリレート）、グリシジルメタクリレート、ポリ（エチレングリコール）メタクリレート、メチルアクリレート、エチルアクリレート、プロピルアクリレート、ブチルアクリレート、ペンチルアクリレート、ヘキシルアクリレート、ヘプチルアクリレート、オクチルアクリレート、ドデシルアクリレート、２−エトキシエチルアクリレート、グリシジルアクリレート、ポリ（エチレングリコール）アクリレート、ε−カプロラクトン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、トリメチレンカーボネート、ラクチド、グリコリド、Ｎ−アセチル４−アザ−カプロラクトン、シクロヘキシルカプロラクトン、４−ｔｅｒｔ−ブチルカプロラクトン、および式４のカプロラクトンから成る群より選択されるモノマーがあげられる。
【００２１】
本発明の一実施態様において、ＮＯ供与性ポリマーを提供する方法が開示され、（ａ）少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するモノマーを含むポリマーを提供する工程と、（ｂ）該第２級アミンを圧力下でＮＯと反応させ、そのジアゼニウムジオレートを形成する工程と、を含む。
本発明の別の実施態様において、本発明の方法によって調製されるポリマーを含む医療装置が提供される。別の実施態様において、該医療装置は、血管ステントを備える。
一実施態様において、ポリマー被覆を含む医療装置が提供され、該ポリマーは、本発明の方法によって調製される。別の実施態様において、該医療装置は、血管ステントを備える。
【００２２】
本発明の別の実施態様において、該ポリマーは、ＦＫＢＰ−１２結合剤、エストロゲン、シャペロン阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、レプトマイシンＢ、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体ガンマリガンド（ＰＰＡＲγ）、ヒポテマイシン、ＮＯ、ビスフォスフォネート、上皮細胞増殖因子阻害剤、抗体、プロテアソーム阻害剤、抗生物質、抗炎症薬、アンチセンスヌクレオチド、および形質転換核酸から成る群より選択される少なくとも１つの薬物をさらに含む。別の実施態様において、該薬物は、シロリムス（ラパマイシン）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、エベロリムス（サーティカン）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）、およびゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８）から成る群より選択される少なくとも１つの化合物を含む。さらに別の実施態様において、該薬物は、ゾタロリムスである。
【００２３】
用語の定義
ラクチド：本明細書において、ラクチドは、３，６−ジメチル−１，４−ジオキサン−２，５−ジオンを指す。より一般的に、ラクチドは、本明細書において、乳酸のＲおよびＳ型のヘテロ二量体、乳酸のＳ型のホモ二量体、および乳酸のＲ型のホモ二量体とも称される。乳酸およびラクチドは、本明細書において、ほとんど同じ意味で使用される。二量体という用語は、当業者に周知である。
【００２４】
【化４】
【００２５】
グリコリド：本明細書において、グリコリドは、以下の一般構造を有する分子を指す。
【００２６】
【化５】
【００２７】
４−ｔｅｒｔ−ブチルカプロラクトン：本明細書において、４−ｔｅｒｔ−ブチルカプロラクトンは、以下の一般構造を有する分子を指す。
【００２８】
【化６】
【００２９】
Ｎ−アセチル４−アザ−カプロラクトン：本明細書において、Ｎ−アセチル４−アザ−カプロラクトンは、以下の一般構造を有する分子を指す。
【００３０】
【化７】
【００３１】
骨格：本明細書において、「骨格」は、本発明のポリマーまたはコポリマーの主鎖を指す。本明細書において、「ポリエステル骨格」は、エステル結合を含む生分解性ポリマーの主鎖を指す。
生物活性剤：本明細書において、「生物活性剤」は、動物において治療効果を有する任意の薬物、医薬化合物、または分子を含む。例示的、かつ非限定的な例としては、これらに限定されないが、ＦＫＢＰ１２結合性化合物を含むマクロライド抗生物質、エストロゲン、シャペロン阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、レプトマイシンＢ、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体ガンマリガンド（ＰＰＡＲγ）、ヒポテマイシン、ＮＯ、ビスフォスフォネート、上皮細胞増殖因子阻害剤、抗体、プロテアソーム阻害剤、抗生物質、抗炎症薬、アンチセンスヌクレオチド、および形質転換核酸を含む、抗増殖剤が挙げられる。生物活性剤は、これらに限定されないが、細胞増殖抑制化合物、化学療法剤、鎮痛剤、スタチン、核酸、ポリペプチド、成長因子、および組み換え微生物、およびリポソームを含む送達ベクターも含み得る。
例示的なＦＫＢＰ１２結合性化合物としては、シロリムス（ラパマイシン）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、エベロリムス（サーティカンまたはＲＡＤ−００１）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９または３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピオン酸を有する非晶質ラパマイシン４２−エステル）、およびゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８）が挙げられる。さらに、他のラパマイシンヒドロキシエステルも、本発明のポリマーと組み合わせて使用することができる。
【００３２】
生体適合性：本明細書において、「生体適合性」は、動物の組織と密接に接触する位置に配置される場合、動物に外傷または死をもたらさないか、または動物において有害反応を誘導しない任意の材料を意味する。有害反応としては、炎症、感染、線維性組織形成、細胞死、または血栓形成が挙げられる。
コポリマー：本明細書において、「コポリマー」は、モノマー等の２つ以上の異種単位の同時鎖付加重合によって製造される高分子である。コポリマーとしては、二元ポリマー（２つの異種単位）、三元ポリマー（３つの異種単位）等が挙げられる。
【００３３】
制御放出：本明細書において、「制御放出」は、所定の速度での医療装置表面からの生物活性化合物の放出を指す。制御放出は、特別に意図されない限り、生物活性化合物が、予測不可能な方法で散発的に医療装置表面から剥がれず、生物環境との接触後に装置を「破裂」（本明細書において、一次速度過程とも称される）させないという意味を含む。しかしながら、本明細書において、「制御放出」という用語は、配置に関連する「バースト現象」を除外しない。本発明の一部の実施態様において、後により段階的な放出が続く薬物の初期バーストは、好ましい場合がある。放出速度は、定常状態（一般的に、「徐放」またはゼロ次速度過程と称される）であり得、つまり、薬物は、所定の時間にわたって均一な量で放出される（初期バースト段階を伴うか、または伴わない）か、または勾配放出であり得る。勾配放出は、装置表面から放出される薬物の濃度が経時的に変化するという意味を含む。
【００３４】
ジアゼニウムジオレート：本明細書において、「ジアゼニウムジオレート」は、[Ｎ（Ｏ）ＮＯ]−官能基を有し、予測可能な速度で、生理条件下において一酸化窒素（ＮＯ）分子を放出する化学種であるＮＯＮＯａｔｅ（１−置換ジアゼニウム−１，２−ジオレート）としても称される、一酸化窒素供与性分子のクラスを指す。さらに、「ジアゼニウムジオレート化された」または「ジアゼニウムジオール化」は、ジアゼニウムジオレート基を有する分子、またはそのような基をポリマーに添加する過程を指す。
ガラス転移温度（Ｔg）：本明細書において、「ガラス転移温度」または「Ｔg」は、温度を指し、ポリマーは、構造的に、弾力性のある柔軟な状態から堅い不安定な状態へ転移する。
グリシジルメタクリレート：本明細書において、グリシジルメタクリレートは、以下の一般構造を有する分子を指す。
【００３５】
【化８】
【００３６】
Ｍn：本明細書において、Ｍnは、数平均分子量を指す。数学的に、以下の式によって表される。
Ｍn＝ΣiＮiＭi／ΣiＮi
（式中、Ｎiは、重量がＭiであるモルの数である。）
Ｍw：本明細書において、Ｍwは、既定のポリマーが有し得る平均重量である重量平均分子量を指す。数学的に、以下の式によって表される。
Ｍw＝ΣiＮiＭi2／ΣiＮiＭi
(式中、Ｎiは、重量がＭiである分子の数である。）
【発明を実施するための形態】
【００３７】
一酸化窒素（ＮＯ）分子を有する第２級アミンを含むポリマーが合成され、ジアゼニウムジオレートが形成されている。ポリマー中の第２級アミンの数を増加させることにより、ＮＯ負荷（loading）を増加し、より安定的なジアゼニウムジオレートを提供し、より細かく調製された制御放出の可能性を高める。出願人は、第１級アミンとのエポキシド開環反応に基づく生体適合性ポリマーにより、医療装置を製造及び被覆するのに適切なＮＯ供与性ポリマーを提供すると判断した。
本発明により、医療装置を製造及び被覆するのに適切なエポキシド由来ＮＯ供与性ポリマーを提供する。より具体的には、本発明は、生理環境において、ＮＯを制御可能に放出または供与するようにジアゼニウムジオレート化することができる少なくとも１つのエポキシド由来第２級アミンを有する側鎖を含むポリマーを提供する。さらに、エポキシドからの第２級アミンを含むエポキシド由来ポリマーの合成のための方法を開示する。
本発明のポリマーは、ホモポリマーおよびコポリマーを含む。ホモポリマーは、各側鎖上に少なくとも１つの第２級アミン基を含むモノマー単位から成る。本発明のポリマーとしては、これらに限定されないが、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリスチレン、ポリ（塩化ビニル）、ポリエステル、ポリカーボネート、ポリエーテル、ポリウレタン、ならびに他の生体安定性および生分解性ポリマーが挙げられる。
本発明の方法における使用のために適切なモノマーは、式２で表されるモノマーを含む。
【００３８】
【化９】
【００３９】
式中、Ｒ1は、これらに限定されないが、メタクリレート、アクリレート、ラクトン、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、およびＣ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキルを含む、重合可能な部分である。
本発明の方法において使用するのに適切なポリマー骨格としては、ポリエーテル、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリスチレンおよびポリ（塩化ビニル）等のビニルポリマー、ポリカーボネート、ポリウレタン、ポリエステル、およびそれらの誘導体から成る群より選択される骨格があげられる。
【００４０】
アクリレートまたはメタクリレートポリマーとしては、これらに限定されないが、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、プロピルメタクリレート、ブチルメタクリレート、ペンチルメタクリレート、ヘキシルメタクリレート、ヘプチルメタクリレート、オクチルメタクリレート、ドデシルメタクリレート、２−（エトキシエチルメタクリレート）、グリシジルメタクリレート、ポリ（エチレングリコール）メタクリレート、メチルアクリレート、エチルアクリレート、プロピルアクリレート、ブチルアクリレート、ペンチルアクリレート、ヘキシルアクリレート、ヘプチルアクリレート、オクチルアクリレート、ドデシルアクリレート、２−エトキシエチルアクリレート、グリシジルアクリレート、ポリ（エチレングリコール）アクリレートを含む、アクリルまたはメタクリルモノマーが挙げられる。一実施態様において、メタクリレートモノマーは、エポキシド側鎖を有するグリシジルメタクリレートである。本発明の非アクリレートモノマーとしては、これらに限定されないが、ε−カプロラクトン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、トリメチレンカーボネート、ラクチド、グリコリド、Ｎ−アセチル４−アザ−カプロラクトン、シクロヘキシルカプロラクトン、４−ｔｅｒｔ−ブチルカプロラクトン、式４のカプロラクトン、およびそれらの誘導体が挙げられる。
【００４１】
本発明のポリマーは、側鎖を含み、側鎖のうちの１つ以上は、少なくとも１つの第２級アミン基をさらに含む。第２級アミン基は、モノマー重合の前（式３を製造するスキーム１における反応１）または後（スキーム１における反応２）のいずれかで導入することができる。一実施態様において、第２級アミンは、モノマーまたはポリマーのいずれかに対する求核または求電子エポキシド開環反応により導入することができる。一般反応がスキーム１に示され、式中、Ｒ1は、これらに限定されないが、アクリレート、メタクリレート、ラクトン、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、およびＣ2−Ｃ20アルキニルを含む、重合可能な部分であり、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ10直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、またはＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールである。Ｒ1およびＲ2は、同じであるか、または異なり得る。例示的なＣ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素としては、これらに限定されないが、Ｎ−メチルエチレンジアミン、Ｎ−メチルプロピリレンジアミン、Ｎ−メチルブチレンジアミン、Ｎ−エチルエチレンジアミン、Ｎ−エチルプロピリレンジアミン、Ｎ−エチルブチレンジアミン、Ｎ−ベンジルエチレンジアミン、Ｎ−ベンジルプロピリレンジアミン、Ｎ−ベンジルブチレンジアミン、Ｎ−プロピルエチレンジアミン、Ｎ−プロピルプロピリレンジアミン、およびＮ−プロピルブチレンジアミン、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチレンペンタミン、およびペンタエチレンヘキサミンが挙げられる。
【００４２】
【化１０】
【００４３】
ポリマー側鎖におけるエポキシドは、脱水反応、アルケンの酸化、および閉環反応を含む、反応によって合成される。エポキシド含有側鎖を有する例示的なモノマーは、グリシジルメタクリレートである。本発明は、モノマー上のエポキシド側鎖を合成し、モノマーを重合するために調製する方法も含む。一実施態様において、アルケンを含有する重合可能なモノマーは、エポキシド含有側鎖を得るためにジメチルジオキシランで処理される。別の実施態様において、アルケン含有モノマーは、２−アリルカプロラクトンである（式４）。アルケン含有モノマーのエポキシ化は、モノマーの重合前または重合後のいずれかに行われる。
【００４４】
【化１１】
【００４５】
アルケン含有モノマーは、異なるモノマーでホモ重合または共重合することができる。一実施態様において、２−アリルカプロラクトン（式４）は、これらに限定されないが、グリコリド、ラクチド、および他の生体適合性ラクトン等の他のラクトンで共重合される。その後、得られたコポリマーは、エポキシ化される。アルケン含有モノマーまたはアルケン含有ポリマーに対するエポキシ化反応は、これらに限定されないが、ジメチルジオキシラン、ｍＣＰＢＡ、金属酸化物、過酸化物、過酸、環状過酸化物、およびそれらの誘導体等の多くの試薬で行うことができる。別の実施態様において、２−アリルカプロラクトン（式４）は、ホモ重合され、その後、得られたポリマーは、エポキシ化される。エポキシド含有側鎖を有するポリマーが合成されると、それらは第２級アミン側鎖を有するポリマーを得るために第１級アミンで処理される（スキーム１に示される）。反応２の生成物において示される（スキーム１）第２級側鎖を有する得られたポリマーは、アミノアルコールとしても見なされる。
【００４６】
本発明のポリマーは、アミン含有モノマー単位当たり少なくとも１つの第２級アミンを含む。第２級アミンは、モノマー単位上の求電子部分に対するアミンの求核攻撃により導入される。求核攻撃によりアミンを導入する反応は、触媒されてもよい。本発明のポリマーを合成する際に有用な触媒としては、これらに限定されないが、ＬｉＣｌＯ4、鉱酸、ブレンステッド酸、イオン交換樹脂、ゼオライト、酸素親和性金属、プロトンスポンジ、緩衝液、アルカリ土類金属、アルカリ土類金属、遷移金属、および有機金属化合物が挙げられる。式５に示される本発明の一実施態様において、アミンは、エポキシドに対する求核攻撃による、グリシジルメタクリレート（サブユニットａ）およびメタクリレート（サブユニットｂ）に由来するポリマーに対して導入される。式５および６において、Ｒ3は、Ｃ1−Ｃ20直鎖アルキル、Ｃ5−Ｃ10シクロアルキル、アルコキシ置換Ｃ2−Ｃ10アルキル、またはヘテロ原子置換Ｃ2−Ｃ10アルキル、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である（反応３）。式６において、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ10直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、またはＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールである。
【００４７】
【化１２】
【００４８】
本発明の一実施態様において、式５および６のａおよびｂ単位は、それぞれ、１〜２０，０００の整数である。更なる実施態様において、ａは、１０〜２０，０００、５０〜１５，０００、１００〜１０，０００、２００〜５，０００、５００〜４，０００、７００〜３，０００、または１０００〜２０００の整数である。更なる実施態様において、ｂは、１０〜２０，０００、５０〜１５，０００、１００〜１０，０００、２００〜５，０００、５００〜４，０００、７００〜３，０００、または１０００〜２０００の整数である。
側鎖は、前駆体ポリマーに対する求核攻撃に適切なアミンを選択することによって、ＮＯの制御放出を提供するように合成的に微調整することができる。
本発明の非アクリレートポリマーとしては、ポリエステル、ポリカーボネート、ポリエーテル、ポリウレタン、および他の生体安定性または生分解性ポリマーが挙げられる。本発明の一実施態様において、ＮＯ供与ポリマーは、式９のポリエステルであり、式中、ｎは、０〜４の整数であり、ｍは、１〜２０，０００の整数である。式９のポリエステルは、第１級アミンとの標準開環反応により式８のエポキシドから合成される。式９では、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ10直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、またはＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールである。
【００４９】
【化１３】
【００５０】
本発明の式７、８、および９の一実施態様において、ｍは、１〜２０，０００の整数である。更なる実施態様において、ｍは、１０〜１９，０００、２００〜１７，０００、４００〜１５，０００、５００〜１４，０００、６００〜１３，０００、７００〜１２，０００、８００〜１１，０００、９００〜１２，０００、１，０００〜１１，０００、１，１００〜１０，０００、１，２００〜９，０００、１，３００〜８，０００、１，４００〜７，０００、１，５００〜６，０００、１，６００〜５，０００、１，６００〜４，０００、１，７００〜３，０００、１，８００〜２，０００、または１，９００〜１，９５０の整数である。本発明の式７、８、および９の別の実施態様において、ｎは、０〜４の整数である。更なる実施態様において、ｎは、２または３である。
【００５１】
本発明の非アクリルポリマーは、ホモポリマーに限定されない。本発明の一実施態様において、ポリエーテルおよびポリエステルのコポリマーは、式１１のエポキシドを形成するように上述の反応を受ける式１０によって合成される。その後、式１１のエポキシドは、式１２のポリマーを得るために第１級アミンで処理される。式１２では、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ10直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、またはＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールである。式１２では、ｎは、０〜４の整数であり、ｍは、１〜２０，０００の整数であり、ｆは、１〜２０，０００の整数である。
【００５２】
【化１４】
【００５３】
本発明の式１０、１１、および１２の一実施態様において、ｍおよびｆは、それぞれ、１〜２０，０００の整数である。更なる実施態様において、ｍは、１０〜１９，０００、２００〜１７，０００、４００〜１５，０００、５００〜１４，０００、６００〜１３，０００、７００〜１２，０００、８００〜１１，０００、９００〜１２，０００、１，０００〜１１，０００、１，１００〜１０，０００、１，２００〜９，０００、１，３００〜８，０００、１，４００〜７，０００、１，５００〜６，０００、１，６００〜５，０００、１，６００〜４，０００、１，７００〜３，０００、１，８００〜２，０００、または１，９００〜１，９５０の整数である。更なる実施態様において、ｆは、１０〜１９，０００、２００〜１７，０００、４００〜１５，０００、５００〜１４，０００、６００〜１３，０００、７００〜１２，０００、８００〜１１，０００、９００〜１２，０００、１，０００〜１１，０００、１，１００〜１０，０００、１，２００〜９，０００、１，３００〜８，０００、１，４００〜７，０００、１，５００〜６，０００、１，６００〜５，０００、１，６００〜４，０００、１，７００〜３，０００、１，８００〜２，０００、または１，９００〜１，９５０の整数である。本発明の式１０、１１、および１２の別の実施態様において、ｎは、１〜４の整数である。更なる実施態様において、ｎは、２または３である。
【００５４】
本発明のポリマーの物理的特性は、ポリマーがそれらの目的の用途のために任意に機能することができるように、微調整することができる。微調整することができる特性は、制限されないが、Ｔg、分子量（ＭnおよびＭwの両方）、多分散性指数（ＰＤＩ、Ｍw／Ｍnの商）、弾性度、および両親媒性の程度を含む。本発明の一実施態様において、ポリマーのＴgは、約−１０℃〜約８５℃である。本発明のさらに別の実施態様において、ポリマーのＰＤＩは、約１．３〜約４．０である。本発明の別の実施態様において、ポリマーのＴgは、約０℃〜約４０℃である。本発明のさらに別の実施態様において、ポリマーのＰＤＩは、約１．５〜約２．５である。
【００５５】
本発明のエポキシド由来ＮＯ供与性ポリマーで被覆するために適切な埋め込み型医療装置としては、これらに限定されないが、血管ステント、ステントグラフト、尿道ステント、胆管ステント、カテーテル、ガイドワイヤ、ペースメーカーリード、骨ねじ、縫合、および人工心臓弁が挙げられる。本発明のポリマーは、埋め込み型医療装置を製造するために適切である。本発明のエポキシド由来ＮＯ供与性ポリマーから製造することができる医療装置としては、これらに限定されないが、血管ステント、ステントグラフト、尿道ステント、胆管ステント、カテーテル、ガイドワイヤ、ペースメーカーリード、骨ねじ、縫合、および人工心臓弁が挙げられる。
本発明のポリマー被覆剤は、血行力学的環境に配置される医療装置を対象とし、優れた付着性を有する。つまり、被覆剤は、医療装置表面に安定的に連結しなければならない。これらに限定されないが、ステンレス鋼、ニチノール、アルミニウム、クロム、チタン、金、コバルト、セラミック、および幅広い合成ポリマー、ならびにこれらに限定されないが、コラーゲン、フィブリン、および植物繊維を含む天然材料を含む、多くの異なる材料は、埋め込み型医療装置を製造するために使用することができる。これらの材料のすべて、および他の材料は、本発明の教示に従って作製されるポリマー被覆剤と併用することができる。さらに、本発明のポリマーは、医療装置の全体を製造するために使用することができる。
【００５６】
ポリマーがどのようにして表面に付着するかということの我々の理解を説明しようと試みるか、またはそれに貢献する多くの理論が存在する。最も重要な力としては、静電および水素結合が挙げられる。しかしながら、湿潤性、吸収性、および弾力性を含む他の要因も、ポリマーが異なる表面にいかに良く付着するかを決定する。したがって、ポリマー塩基被膜、またはプライマーは、しばしば、より均一な被覆表面を作製するために使用される。
本発明のエポキシド由来ＮＯ供与性ポリマー被覆剤は、当業者に周知の任意の方法で下塗りされるか、または裸の医療装置表面に塗布することができる。本発明に適合する塗布法としては、これらに限定されないが、溶射、浸漬、ブラッシング、真空蒸着、静電スプレー被覆、血漿被覆、回転被覆電気化学的被覆、および他の方法が挙げられる。さらに、本発明のエポキシド由来のＮＯ供与性ポリマー被覆剤は、キャップ被膜と併用することができる。本明細書において、キャップ被膜は、別の被覆剤上に塗布される最外被覆層を指す。ＮＯ供与性ポリマー被覆剤は、プライマー被膜上に塗布される。その後、ポリマーキャップ被膜は、エポキシド由来のＮＯ供与性ポリマー被覆剤上に塗布される。キャップ被膜は、任意で、ＮＯ放出を制御する拡散障壁として機能することができる。キャップ被膜は、単に、ステントを保護し、ＮＯ放出速度に影響を与えないようにステントの表面に塗布される生体適合性ポリマーであり得る。
【００５７】
本発明のエポキシド由来ＮＯ供与性ポリマーは、薬物の送達および制御放出にも有用である。本発明のポリマーからの放出に適切な薬物としては、これらに限定されないが、抗増殖化合物、細胞増殖抑制化合物、毒性化合物、抗炎症化合物、化学療法剤、鎮痛剤、抗生物質、プロテアーゼ阻害剤、スタチン、核酸、ポリペプチド、成長因子、および組み換え微生物、リポソームを含む送達ベクター等が挙げられる。
本発明の一実施態様において、制御可能に放出される薬物としては、これらに限定されないが、ＦＫＢＰ−１２結合剤を含む、マクロライド抗生物質が挙げられる。このクラスの例示的な薬物としては、シロリムス（ラパマイシン）（式２）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、エベロリムス（サーティカンまたはＲＡＤ−００１）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９、または米国特許出願第１０／９３０，４８７号に開示される３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピオン酸を有する非晶質ラパマイシン４２−エステル）、およびゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８、米国特許第６，０１５，８１５号および同第６，３２９，３８６号を参照）（式１）が挙げられる。加えて、米国特許第５，３６２，７１８号に開示される他のラパマイシンヒドロキシエステルが、本発明のポリマーと組み合わせて使用することができる。前述の特許および特許出願のすべての全内容は、ＦＫＢＰ−１２結合性化合物および誘導体に関する、それらが教示するすべてを参照することにより、本明細書において組み込まれる。
【００５８】
実施例
以下の非限定的な例により、本発明の教示による例示的なポリマーの合成方法を提供する。
実施例１
グリシジルメタクリレート／ヘキシルメタクリレートコポリマーの合成
【００５９】
【化１５】
【００６０】
グリシジルメタクリレート（９．０２ｇ）、ｎ−ヘキシルメタクリレート（２１．０３ｇ）、１，４−ジオキサン（５９．９８ｇ）、およびＡＩＢＮ（２４０ｍｇ）を１２０ｍＬの瓶の中で混合し、密封し、窒素で３０分間パージした。瓶を、油浴中で攪拌しながら６０℃で３時間加熱した。ポリマーを、ジクロロメタン溶液からメタノール中で繰り返し（３回）沈殿させることにより精製した。真空オーブンにおいて４５℃で一晩乾燥させた後、ｎ−ヘキシルメタクリレート（５６モル％）およびグリシジルメタクリレート（４４モル％）のコポリマーを、1Ｈ ＮＭＲによって得た。ポリマーは、ＧＰＣ（ＴＨＦ、３５Ｃおよびポリスチレン標準）による、２３２２４０の重量平均分子量および２．０のＰＤＩを有した。第２の熱に対する２０℃／分の加熱速度で、ＤＳＣによって測定されたポリマーのＴgは、２８．８℃であった。
【００６１】
実施例２
側鎖における第２級アミン基へのエポキシド基の変換
【００６２】
【化１６】
【００６３】
この実施例において、１．０ｇの実施例１のポリマーを、瓶の中で３ｍｌのＴＨＦに溶解させた。その後、１４．５ｍＬの１−ヘキシルアミンを添加した。瓶を密封し、油浴中で５０℃で一晩加熱した。ＮＭＲは、エポキシドが消費されたことを示した。得られたポリマーは、ＴＨＦ溶液からヘキサン／酢酸エチル（ｖ／ｖ ８０／２０）への繰り返し（３回）沈殿させることにより精製した。ポリマーを、真空で、室温で一晩乾燥させた。
【００６４】
実施例３
第２級アミン機能性ポリマーのジアゼニウムジオレート化ポリマーへの変換
約１ｍｇの実施例２のポリマー（Ｎ２７）を、４分の１インチのステンレス鋼切り取り試片上にＴＨＦ溶液から浸漬被覆した。切り取り試片は、真空で乾燥させ、被覆ポリマーを、８０ｐｓｉのＮＯ下で３日間乾燥ジアゼニウムジオレート化した。切り取り試片をＰＢＳ（ｐＨ７．４）バッファー管中でインキュベートし、放出された一酸化窒素が、一酸化窒素分析器（ＧＥ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ２８０ｉ）で検出された。ジアゼニウムジオレート化ポリマーは、５．７８ｐｍｏｌ／分／ｍｇの初期放出速度を示し、１８．５時間で１．４９ｎｍｏｌ／ｍｇの一酸化窒素を放出した。
【００６５】
実施例４
側鎖における多重第２級アミン基へのエポキシド基の変換
【００６６】
【化１７】
【００６７】
ヘキシルメタクリレート（６４モル％）およびグリシジルメタクリレート（３６モル％）の前駆体コポリマーを、実施例１と同様に調製した。この実施例において、２．０３グラムの前駆体ポリマーを、４ｍＬのＴＨＦに溶解し、瓶の中で１９．２ｍＬのＮ−メチルエチレンジアミンと混合した。瓶を密封し、油浴中で６０℃で２２時間加熱した。ポリマーを、ＴＨＦ溶液からのヘキサン中で繰り返し（３回）沈殿させることにより精製した。ポリマーを、真空で、室温で一晩乾燥させた。
【００６８】
実施例５
約１ｍｇの実施例２のポリマー（Ｎ４７）を、４分の１インチのステンレス鋼切り取り試片上にＴＨＦ溶液から浸漬被覆した。切り取り試片は、真空で乾燥させ、被覆ポリマーを、８０ｐｓｉのＮＯ下で３日間乾燥ジアゼニウムジオレート化した。切り取り試片をＰＢＳ（ｐＨ７．４）バッファー管中でインキュベートし、放出された一酸化窒素が、一酸化窒素分析器（ＧＥ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ２８０ｉ）で検出された。ジアゼニウムジオレート化ポリマーは、４０１ｐｍｏｌ／分／ｍｇの初期放出速度を示し、２３．５時間で１１０ｎｍｏｌ／ｍｇの一酸化窒素を放出した。
【００６９】
実施例６
側鎖における多重アミン基へのエポキシド基の変換
【００７０】
【化１８】
【００７１】
重量２．０ｇの実施例３の前駆体ポリマーを、８ｍＬのＴＨＦに溶解した。それとは別に、２３．９ｍＬのジエチレントリアミンを、１２ｍＬのＴＨＦと混合することによって、別の溶液を調製した。ポリマー溶液を、攪拌下において、滴下でジエチレントリアミン溶液に添加した。混合物を、油浴中で５０℃で３日間加熱した。得られたポリマーを、ＴＨＦ溶液から脱イオン水へ沈殿させることによって精製した。ｄ4−メタノール中の1Ｈ ＮＭＲスペクトルは、エポキシド官能基の消失、およびＮＣＨ2基に対応する約２．７ｐｐｍの新規ピークの出現を示した。
【００７２】
実施例７
約１ｍｇの実施例６のポリマー（Ｎ５９）を、４分の１インチのステンレス鋼切り取り試片上にＴＨＦ溶液から浸漬被覆し、８０ｐｓｉのＮＯ圧力下で３日間ジアゼニウムジオレート化した。切り取り試片をＰＢＳ（ｐＨ７．４）バッファー管中でインキュベートし、放出されたＮＯが、ＮＯ分析器（ＧＥ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ２８０ｉ）で検出された。ジアゼニウムジオレート化ポリマーは、６３５ｐｍｏｌ／分／ｍｇの初期放出速度を示し、以下の一酸化窒素放出曲線に示されるように１２２．１時間で１４１ｎｍｏｌ／ｍｇのＮＯを放出した。
【００７３】
【化１９】
【００７４】
実施例８
エポキシド由来ＮＯ供与性ポリマーからのステントの製造
例示的、非限定的な目的のために、血管ステントを説明する。生分解性ＮＯ供与性ポリマーは、射出成形機のバレル中で溶融するまで加熱し、圧力下でステント鋳型へ押し込められる。成形ポリマー（ここで、ステントに類似し、ステントである）が冷却し、固化した後、ステントは、鋳型から取り出される。本発明の一実施態様において、ステントは、第１および第２の端部、ならびに第１と第２の端部との間に配置される壁付き表面を有するチューブ状部材である。壁は、編組状形態に織り込まれた押出ポリマーモノフィラメントから成る。第２の実施態様において、ステントは、射出成形または押し出される。穿孔は、チューブの壁に成形、レーザー切断、ダイス切断、または機械加工される。編組ステント形態モノフィラメントは、小球状にされ、乾燥したポリマー材料から製造される。その後、乾燥ポリマー小球は、押し出され、粗いモノフィラメントを形成し、それは、急冷される。その後、押出急冷粗モノフィラメントは、約０．０１ｍｍ〜０．６ｍｍ、好ましくは、約０．０５ｍｍ〜０．１５ｍｍの平均直径を有する最終モノフィラメントに成形される。その後、約１０〜約５０の最終モノフィラメントは、用途に対して適切な大きさの編組マンドレル上において編組角度約９０〜１７０度で編み込み法によって織り込まれる。その後、編み込みステントは、編組マンドレルから外され、編組マンドレル直径以下の外径を有するアニールマンドレル上に配置され、空気中、不活性雰囲気中、または真空下において、約５分〜約１８時間、約ポリマーＴgからポリマー混合物の融解温度の温度でアニールされる。その後、ステントは、冷却させられ、切断される。
【００７５】
他に示されない限り、本明細書および請求項で使用される成分の量、分子量、反応条件等の特性を表す、すべての数は、「約」という用語によって、いかなる場合にも修正されるものと理解される。したがって、これと異なることが示されない限り、以下の明細書および添付請求項で説明される数値パラメータは、本発明によって得ようとされる所望の特性によって異なり得る近似値である。少なくとも請求項の範囲への均等論の適用を制限する試みとしてではなく、各数値パラメータは、少なくとも、報告された有効桁の数を踏まえ、一般的な四捨五入法を適用することによって解釈されるべきである。本発明の広い範囲を説明する数値域およびパラメータが近似値であるにもかかわらず、特定の実施例で説明される数値は、できるだけ正確に報告される。しかしながら、いかなる数値も、それぞれの試験測定で見られる標準偏差からやむを得ず得られるある程度の誤差を本質的に包含する。
本発明の記載内容（特に、以下の請求項の内容）で使用される「１つの」、「ある」、「前記」という用語、および同様の指示対象は、本明細書において指示されるか、または内容によって明確に反論されない限り、単数形および複数形の両方を対象とするように解釈される。本明細書における値域の列挙は、単に、範囲に該当する各別々の値を個々に言及する速記法として機能することを目的とする。本明細書において指示されない限り、個々の値は、本明細書において個々に記載されているかのように、本明細書に組み込まれる。本明細書において記載されるすべての方法は、本明細書において指示されるか、または内容によって明確に反論されない限り、任意の適切な順序で行うことができる。本明細書において提供される任意およびすべての例、または例示的な言葉（例えば、「等」）の使用は、単に、本発明をより明らかにすることを目的とし、主張される本発明の範囲を限定するものではない。本明細書における言葉は、本発明の実行に不可欠な任意の非主張的構成要素を示すものとして解釈されるべきではない。
【００７６】
本明細書において開示される本発明の代替の構成要素または実施態様の分類は、限定と解釈されるものではない。各群の要素は、個々に言及され、主張されるか、または本明細書において見られる群の他の要素または他の構成要素と任意で組み合わされ得る。群の１つ以上の要素は、便宜および／または特許性の理由で、群に含まれるか、または削除され得ることが予期される。任意のそのような包含または削除が生じる場合、本明細書は、修正される群を包含すると見なされるため、付属請求項で使用されるすべてのマーカッシュ群の記述を実行する。
【００７７】
本発明のある実施態様は、本明細書において記載され、本発明を実行するための発明者に周知の最良の態様を含む。当然のことながら、これらの記述された実施態様に対する変更は、前述の説明を読むと、当業者にとって明らかとなる。発明者は、当業者が、必要に応じてそのような変更を使用することを予期し、発明者は、本明細書において明確に記載される以外に、本発明が実行されることを目的とする。したがって、本発明は、適用法によって許可されるように、本明細書に添付される請求項で記載される主題のすべての修正および同等物を含む。さらに、そのすべての可能な変更における上述の構成要素の任意の組み合わせは、本明細書において指示されるか、または内容によって明確に反論されない限り、包含される。
【００７８】
さらに、本明細書を通して多数の特許および刊行物が言及された。上述の各参考文献および刊行物は、それらの全体として参照することにより、本明細書にそれぞれ組み込まれる。
最後に、当然のことながら、本明細書において開示される本発明の実施態様は、本発明の原理を反映する。使用することができる他の修正は、本発明の範囲内である。したがって、例として、限定ではないが、本発明の代替の構成が、本明細書における教示に従って使用することができる。したがって、本発明は、示され、記載されるように正確なものに限定するものではない。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するポリマーを提供する方法であって、
（ａ）エポキシドペンダント基を有するポリマーを提供する工程と、
（ｂ）前記ポリマーを、第２級アミンが形成される条件下で、一般式Ｒ2−ＮＨ2で表される化合物と反応させる工程と（式中、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ20直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、およびＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールから成る群より選択される）、
（ｃ）前記第２級アミンを圧力下でＮＯと反応させ、そのジアゼニウムジオレートを形成する工程と、
を含む前記方法。
【請求項２】
少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するモノマーを提供する方法であって、
（ａ）式２で表される重合可能な第１のモノマーを提供する工程と、
【化１】
（式中、Ｒ1は、アクリレート、メタクリレート、ラクトン、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、およびＣ2−Ｃ20アルキニルから成る群より選択される重合可能な部分である）、
（ｂ）前記第１のモノマーを、式３で表される反応性第２級アミンを有するモノマーが形成される条件下で、一般式Ｒ2−ＮＨ2で表される化合物と反応させる工程と（式中、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ20直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、およびＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールから成る群より選択される）、
【化２】
を含む前記方法。
【請求項３】
前記反応工程（ｂ）が触媒をさらに含む、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項４】
前記触媒が、ＬｉＣｌＯ4、鉱酸、ブレンステッド酸、イオン交換樹脂、ゼオライト、酸素親和性金属、プロトンスポンジ、緩衝液、アルカリ土類金属、アルカリ土類金属、遷移金属、および有機金属化合物から成る群より選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素が、Ｎ−メチルエチレンジアミン、Ｎ−メチルプロピリレンジアミン、Ｎ−メチルブチレンジアミン、Ｎ−エチルエチレンジアミン、Ｎ−エチルプロピリレンジアミン、Ｎ−エチルブチレンジアミン、Ｎ−ベンジルエチレンジアミン、Ｎ−ベンジルプロピリレンジアミン、Ｎ−ベンジルブチレンジアミン、Ｎ−プロピルエチレンジアミン、Ｎ−プロピルプロピリレンジアミン、およびＮ−プロピルブチレンジアミン、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチレンペンタミン、およびペンタエチレンヘキサミンから成る群より選択される、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記ポリマーが、ポリエーテル、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリスチレンおよびポリ（塩化ビニル）のビニルポリマー、ポリカーボネート、ポリウレタン、およびポリエステルから成る群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記ポリマーが、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、プロピルメタクリレート、ブチルメタクリレート、ペンチルメタクリレート、ヘキシルメタクリレート、ヘプチルメタクリレート、オクチルメタクリレート、ドデシルメタクリレート、２−（エトキシエチルメタクリレート）、グリシジルメタクリレート、ポリ（エチレングリコール）メタクリレート、メチルアクリレート、エチルアクリレート、プロピルアクリレート、ブチルアクリレート、ペンチルアクリレート、ヘキシルアクリレート、ヘプチルアクリレート、オクチルアクリレート、ドデシルアクリレート、２−エトキシエチルアクリレート、グリシジルアクリレート、ポリ（エチレングリコール）アクリレート、ε−カプロラクトン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、トリメチレンカーボネート、ラクチド、グリコリド、Ｎ−アセチル４−アザ−カプロラクトン、シクロヘキシルカプロラクトン、４−ｔｅｒｔ−ブチルカプロラクトン、および式４のカプロラクトンから成る群より選択されるモノマーから構成される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
一酸化窒素供与性ポリマーを提供する方法であって、
（ａ）請求項２に記載の少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するモノマーを含むポリマーを提供する工程と、
（ｂ）前記第２級アミンを圧力下でＮＯと反応させ、そのジアゼニウムジオレートを形成する工程と、
を含む、前記方法。
【請求項９】
請求項１または８のいずれかの方法によって調製されるポリマーを含む医療装置。
【請求項１０】
前記医療装置が血管ステントを備える、請求項９に記載の医療装置。
【請求項１１】
前記ポリマーが、ＦＫＢＰ−１２結合剤、エストロゲン、シャペロン阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、レプトマイシンＢ、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体ガンマリガンド（ＰＰＡＲγ）、ヒポテマイシン、一酸化窒素、ビスフォスフォネート、上皮細胞増殖因子阻害剤、抗体、プロテアソーム阻害剤、抗生物質、抗炎症薬、アンチセンスヌクレオチド、および形質転換核酸から成る群より選択される少なくとも１つの薬物をさらに含む、請求項９に記載の医療装置。
【請求項１２】
前記薬物が、シロリムス（ラパマイシン）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、エベロリムス（サーティカン）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）、およびゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８）から成る群より選択される少なくとも１つの化合物を含む、請求項１１に記載の医療装置。
【請求項１３】
前記薬物が、ゾタロリムスを含む、請求項１２に記載の医療装置。
【請求項１４】
ポリマー被覆剤を含む医療装置であって、前記ポリマーは、請求項１または８のいずれかに記載の方法によって調製される、前記医療装置。
【請求項１５】
前記医療装置が、血管ステントを備える、請求項１４に記載の医療装置。
【請求項１６】
前記ポリマーが、ＦＫＢＰ−１２結合剤、エストロゲン、シャペロン阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、レプトマイシンＢ、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体ガンマリガンド（ＰＰＡＲγ）、ヒポテマイシン、一酸化窒素、ビスフォスフォネート、上皮細胞増殖因子阻害剤、抗体、プロテアソーム阻害剤、抗生物質、抗炎症薬、アンチセンスヌクレオチド、および形質転換核酸から成る群より選択される少なくとも１つの薬物をさらに含む、請求項１４に記載の医療装置。
【請求項１７】
前記薬物が、シロリムス（ラパマイシン）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、エベロリムス（サーティカン）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）、およびゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８）から成る群より選択される少なくとも１つの化合物を含む、請求項１６に記載の医療装置。
【請求項１８】
前記薬物が、ゾタロリムスを含む、請求項１７に記載の医療装置。
【請求項１】
少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するポリマーを提供する方法であって、
（ａ）エポキシドペンダント基を有するポリマーを提供する工程と、
（ｂ）前記ポリマーを、第２級アミンが形成される条件下で、一般式Ｒ2−ＮＨ2で表される化合物と反応させる工程と（式中、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ20直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、およびＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールから成る群より選択される）、
（ｃ）前記第２級アミンを圧力下でＮＯと反応させ、そのジアゼニウムジオレートを形成する工程と、
を含む前記方法。
【請求項２】
少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するモノマーを提供する方法であって、
（ａ）式２で表される重合可能な第１のモノマーを提供する工程と、
【化１】
（式中、Ｒ1は、アクリレート、メタクリレート、ラクトン、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、およびＣ2−Ｃ20アルキニルから成る群より選択される重合可能な部分である）、
（ｂ）前記第１のモノマーを、式３で表される反応性第２級アミンを有するモノマーが形成される条件下で、一般式Ｒ2−ＮＨ2で表される化合物と反応させる工程と（式中、Ｒ2は、Ｃ1−Ｃ20直鎖アルキル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、Ｃ2−Ｃ20アルケニル、Ｃ2−Ｃ20アルキニル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換アルキル、Ｃ2−Ｃ14ヘテロ原子置換シクロアルキル、Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素、Ｃ4−Ｃ10置換アリール、およびＣ4−Ｃ10置換ヘテロ原子置換ヘテロアリールから成る群より選択される）、
【化２】
を含む前記方法。
【請求項３】
前記反応工程（ｂ）が触媒をさらに含む、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項４】
前記触媒が、ＬｉＣｌＯ4、鉱酸、ブレンステッド酸、イオン交換樹脂、ゼオライト、酸素親和性金属、プロトンスポンジ、緩衝液、アルカリ土類金属、アルカリ土類金属、遷移金属、および有機金属化合物から成る群より選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記Ｃ1−Ｃ10多重アミン含有炭化水素が、Ｎ−メチルエチレンジアミン、Ｎ−メチルプロピリレンジアミン、Ｎ−メチルブチレンジアミン、Ｎ−エチルエチレンジアミン、Ｎ−エチルプロピリレンジアミン、Ｎ−エチルブチレンジアミン、Ｎ−ベンジルエチレンジアミン、Ｎ−ベンジルプロピリレンジアミン、Ｎ−ベンジルブチレンジアミン、Ｎ−プロピルエチレンジアミン、Ｎ−プロピルプロピリレンジアミン、およびＮ−プロピルブチレンジアミン、エチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチレンペンタミン、およびペンタエチレンヘキサミンから成る群より選択される、請求項１または２のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記ポリマーが、ポリエーテル、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリスチレンおよびポリ（塩化ビニル）のビニルポリマー、ポリカーボネート、ポリウレタン、およびポリエステルから成る群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記ポリマーが、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、プロピルメタクリレート、ブチルメタクリレート、ペンチルメタクリレート、ヘキシルメタクリレート、ヘプチルメタクリレート、オクチルメタクリレート、ドデシルメタクリレート、２−（エトキシエチルメタクリレート）、グリシジルメタクリレート、ポリ（エチレングリコール）メタクリレート、メチルアクリレート、エチルアクリレート、プロピルアクリレート、ブチルアクリレート、ペンチルアクリレート、ヘキシルアクリレート、ヘプチルアクリレート、オクチルアクリレート、ドデシルアクリレート、２−エトキシエチルアクリレート、グリシジルアクリレート、ポリ（エチレングリコール）アクリレート、ε−カプロラクトン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、トリメチレンカーボネート、ラクチド、グリコリド、Ｎ−アセチル４−アザ−カプロラクトン、シクロヘキシルカプロラクトン、４−ｔｅｒｔ−ブチルカプロラクトン、および式４のカプロラクトンから成る群より選択されるモノマーから構成される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
一酸化窒素供与性ポリマーを提供する方法であって、
（ａ）請求項２に記載の少なくとも１つの反応性第２級アミンを有するモノマーを含むポリマーを提供する工程と、
（ｂ）前記第２級アミンを圧力下でＮＯと反応させ、そのジアゼニウムジオレートを形成する工程と、
を含む、前記方法。
【請求項９】
請求項１または８のいずれかの方法によって調製されるポリマーを含む医療装置。
【請求項１０】
前記医療装置が血管ステントを備える、請求項９に記載の医療装置。
【請求項１１】
前記ポリマーが、ＦＫＢＰ−１２結合剤、エストロゲン、シャペロン阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、レプトマイシンＢ、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体ガンマリガンド（ＰＰＡＲγ）、ヒポテマイシン、一酸化窒素、ビスフォスフォネート、上皮細胞増殖因子阻害剤、抗体、プロテアソーム阻害剤、抗生物質、抗炎症薬、アンチセンスヌクレオチド、および形質転換核酸から成る群より選択される少なくとも１つの薬物をさらに含む、請求項９に記載の医療装置。
【請求項１２】
前記薬物が、シロリムス（ラパマイシン）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、エベロリムス（サーティカン）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）、およびゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８）から成る群より選択される少なくとも１つの化合物を含む、請求項１１に記載の医療装置。
【請求項１３】
前記薬物が、ゾタロリムスを含む、請求項１２に記載の医療装置。
【請求項１４】
ポリマー被覆剤を含む医療装置であって、前記ポリマーは、請求項１または８のいずれかに記載の方法によって調製される、前記医療装置。
【請求項１５】
前記医療装置が、血管ステントを備える、請求項１４に記載の医療装置。
【請求項１６】
前記ポリマーが、ＦＫＢＰ−１２結合剤、エストロゲン、シャペロン阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、レプトマイシンＢ、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体ガンマリガンド（ＰＰＡＲγ）、ヒポテマイシン、一酸化窒素、ビスフォスフォネート、上皮細胞増殖因子阻害剤、抗体、プロテアソーム阻害剤、抗生物質、抗炎症薬、アンチセンスヌクレオチド、および形質転換核酸から成る群より選択される少なくとも１つの薬物をさらに含む、請求項１４に記載の医療装置。
【請求項１７】
前記薬物が、シロリムス（ラパマイシン）、タクロリムス（ＦＫ５０６）、エベロリムス（サーティカン）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）、およびゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８）から成る群より選択される少なくとも１つの化合物を含む、請求項１６に記載の医療装置。
【請求項１８】
前記薬物が、ゾタロリムスを含む、請求項１７に記載の医療装置。
【公表番号】特表２０１０−５３４２７０（Ｐ２０１０−５３４２７０Ａ）
【公表日】平成２２年１１月４日（２０１０．１１．４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５１８２５２（Ｐ２０１０−５１８２５２）
【出願日】平成２０年６月１８日（２００８．６．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６７３２３
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０１４８２９
【国際公開日】平成２１年１月２９日（２００９．１．２９）
【出願人】（５０２１２９３５７）メドトロニック カルディオ ヴァスキュラー インコーポレイテッド (125)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年１１月４日（２０１０．１１．４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年６月１８日（２００８．６．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６７３２３
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０１４８２９
【国際公開日】平成２１年１月２９日（２００９．１．２９）
【出願人】（５０２１２９３５７）メドトロニック カルディオ ヴァスキュラー インコーポレイテッド (125)
【Ｆターム（参考）】
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