本発明は、一般に、核酸の分野に関する。より具体的には、本発明は、フォン・ビルブラント因子媒介血小板凝集が関与している血栓性疾患もしくは血栓性障害および／または他の疾患もしくは他の障害の処置剤および診断剤として有用な、フォン・ビルブラント因子に結合可能であるアプタマーに関する。本発明はさらに、フォン・ビルブラント因子に結合可能であるアプタマーの投与のための物質およびフォン・ビルブラント因子に結合可能であるアプタマーの投与のための方法に関する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＡＲＣ１０２９（配列番号２１４）、ＡＲＣ１１１５（配列番号２２１）、ＡＲＣ１１７２（配列番号２２２）、ＡＲＣ１３４６（配列番号２８１）、ＡＲＣ１３６１（配列番号２８４）、ＡＲＣ１３６８（配列番号２９１）、配列番号１６３５（配列番号３１９）、ＡＲＣ１７５９（配列番号３１８）およびＡＲＣ１８８４（配列番号３２２）からなる群より選択される配列に対して９５％同一である核酸配列を含む、アプタマー。
【請求項２】
前記アプタマーは、ＡＲＣ１０２９（配列番号２１４）、ＡＲＣ１１１５（配列番号２２１）、ＡＲＣ１１７２（配列番号２２２）、ＡＲＣ１３４６（配列番号２８１）、ＡＲＣ１３６１（配列番号２８４）、ＡＲＣ１３６８（配列番号２９１）、配列番号１６３５（配列番号３１９）、ＡＲＣ１７５９（配列番号３１８）およびＡＲＣ１８８４（配列番号３２２）からなる群より選択される一次核酸配列に対して９５％同一である一次核酸配列を含む、請求項１に記載のアプタマー。
【請求項３】
前記アプタマー核酸配列が、化学的改変を含み、かつ該アプタマー核酸配列は、ＡＲＣ１０２９（配列番号２１４）、ＡＲＣ１１１５（配列番号２２１）、ＡＲＣ１１７２（配列番号２２２）、ＡＲＣ１３４６（配列番号２８１）、ＡＲＣ１３６１（配列番号２８４）、ＡＲＣ１３６８（配列番号２９１）、配列番号１６３５（配列番号３１９）、ＡＲＣ１７５９（配列番号３１８）およびＡＲＣ１８８４（配列番号３２２）からなる群より選択される該化学的改変を含む核酸配列に対して９５％同一である、請求項１に記載のアプタマー。
【請求項４】
前記アプタマーが、高分子量の非免疫原性化合物または親油性化合物に結合体化されている、請求項１に記載のアプタマー。
【請求項５】
前記アプタマーが、ポリアルキレングリコールである非免疫原性高分子量化合物に結合体化されている、請求項４に記載のアプタマー。
【請求項６】
前記ポリアルキレングリコールが、ポリエチレングリコールである、請求項５に記載のアプタマー。
【請求項７】
前記ポリエチレングリコールが、５ｋＤａ、１０ｋＤＡ、２０ｋＤａおよび４０ｋＤａからなる群より選択される分子量を含む、請求項６に記載のアプタマー。
【請求項８】
前記アプタマーが、ＡＲＣ１７７９（配列番号３２０）、ＡＲＣ１７８０（配列番号３２１）およびＡＲＣ１８８５（配列番号３２３）からなる群より選択される、請求項７に記載のアプタマー。
【請求項９】
治療有効量の請求項１に記載のアプタマーまたはその塩と、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤とを含有する、組成物。
【請求項１０】
フォン・ビルブラント因子（ｖＷＦ）によって媒介される疾患を処置、予防または改善するための方法であって、
請求項９に記載の組成物を哺乳動物に投与する工程；
を包含する、方法。
【請求項１１】
患者を処置するための方法であって、
透析、ＣＡＢＧ手術、経皮的冠動脈介入または心臓弁置換の前、間および／または後に、請求項９に記載の組成物を、該組成物を必要とする患者に投与する工程；
を包含する、方法。
【請求項１２】
前記組成物が、２０ｋＤＡ ＰＥＧに結合体化されたＡＲＣ１３６８（配列番号２９１）またはそのフラグメントを含有する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記組成物が、ＡＲＣ１７７９（配列番号３２０）を含有する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記組成物が、２０ｋＤＡ ＰＥＧに結合体化されたＡＲＣ１３６８（配列番号２９１）またはそのフラグメントを含有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記組成物が、ＡＲＣ１７７９（配列番号３２０）を含有する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
治療有効量の請求項８に記載のアプタマーまたはその塩と、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤とを含有する、組成物。
【請求項１７】
フォン・ビルブラント因子（ｖＷＦ）によって媒介される疾患を処置、予防または改善するための方法であって、
請求項１６に記載の組成物を哺乳動物に投与する工程；
を包含する、方法。
【請求項１８】
フォン・ビルブラント因子標的に特異的に結合する、アプタマー。
【請求項１９】
前記フォン・ビルブラント因子標的が、ヒトフォン・ビルブラント因子である、請求項１８に記載のアプタマー。
【請求項２０】
前記アプタマーが、フォン・ビルブラント因子媒介性血小板凝集を調節する、請求項１８に記載のアプタマー。
【請求項２１】
フォン・ビルブラント因子全長標的とフォン・ビルブラント因子ドメインＡ１標的とに特異的に結合する、請求項１８に記載のアプタマー。
【請求項２２】
前記フォン・ビルブラント因子全長標的と前記フォン・ビルブラント因子ドメインＡ１標的とが、異なる種に由来する、請求項２１に記載のアプタマー。
【請求項２３】
診断方法であって、
請求項１８に記載のアプタマーを、フォン・ビルブラント因子またはその改変体を含有すると疑われる組成物と接触させる工程；および
フォン・ビルブラント因子またはその改変体の有無を検出する工程；
を包含する、方法。
【請求項２４】
アプタマー標的の生物学的機能を調節するアプタマーを同定するための方法であって、
ａ）一本鎖核酸の候補混合物を調製する工程；
ｂ）該候補混合物を、全長タンパク質標的および該全長タンパク質標的のドメインの両方と接触させる工程；
ｃ）該全長タンパク質標的または該タンパク質標的ドメインに対する増大した親和性を有する核酸を分離する工程；ならびに
ｄ）該増大した親和性の核酸をインビトロで増幅して、タンパク質標的特異的な富化アプタマー混合物を生じる工程；
を含む、方法。
【請求項２５】
請求項２４に記載の方法であって、該方法は、
ｅ）前記標的特異的な富化アプタマー混合物を前記全長タンパク質標的と接触させる工程；
ｆ）該全長タンパク質標的に対する増大した親和性を有する核酸を分離する工程；および
ｇ）該増大した親和性の核酸をインビトロで増幅して、標的特異的な富化アプタマー混合物を生じる工程；
ｈ）該標的特異的な富化アプタマー混合物を、前記タンパク質標的ドメインと接触させる工程、
ｆ）該タンパク質標的ドメインに対する増大した親和性を有する核酸を分離する工程；および
ｇ）該増大した親和性の核酸をインビトロで増幅して、タンパク質標的特異的な富化アプタマー混合物を生じる工程；
をさらに包含する、方法。
【請求項２６】
請求項２５に記載の方法であって、該方法は、
前記全長タンパク質標的の生物学的機能をインビボでブロックするアプタマーを選択する工程；
をさらに包含する、方法。
【請求項２７】
前記全長タンパク質標的が、第一の種由来であり、前記タンパク質標的ドメインが、第二の種由来である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記第一の種および第二の種の両方のタンパク質標的に結合可能であるアプタマーを選択する工程；
をさらに包含する、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
請求項２６に記載の方法によって同定される、アプタマー。
【請求項３０】
フォン・ビルブラント因子に特異的に結合するアプタマーであって、該アプタマーは、配列番号３１〜５０、配列番号５４〜９４、配列番号９８〜１６４、配列番号１７７、配列番号１８０、配列番号１８３、配列番号１８６、配列番号１８９、配列番号１９２、配列番号１９８、配列番号２０１、配列番号２０５、配列番号２０８、配列番号２１２〜２１４、ＡＲＣ１１１５（配列番号２２１）、ＡＲＣ１１７２（配列番号２２２）、ＡＲＣ１１９４（配列番号２２３）〜ＡＲＣ１２４０（配列番号２６９）、ＡＲＣ１３３８（配列番号２７３）〜ＡＲＣ１３４６（配列番号２８１）、ＡＲＣ１３６１（配列番号２８４）〜ＡＲＣ１３８１（配列番号３０４）、ＡＲＣ１５２４（配列番号３０５）、ＡＲＣ１５２６（配列番号３０７）〜ＡＲＣ１５３５（配列番号３１６）、ＡＲＣ１５４６（配列番号３１７）、ＡＲＣ１７５９（配列番号３１８）、ＡＲＣ１６３５（配列番号３１９）、ＡＲＣ１７７９（配列番号３２０）〜ＡＲＣ１７８０（配列番号３２１）およびＡＲＣ１８８４（配列番号３２２）〜ＡＲＣ１８８５（配列番号３２３）からなる群より選択される一次核酸配列のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％同一である一次核酸配列を含む、アプタマー。
【請求項３１】
治療有効量の請求項３０に記載のアプタマーまたはその塩と、薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤とを含有する、組成物。
【請求項３２】
フォン・ビルブラント因子（ｖＷＦ）によって媒介される疾患を処置、予防または改善するための方法であって、
請求項３１に記載の組成物を哺乳動物に投与する工程；
を包含する、方法。
【請求項３３】
患者を処置するための方法であって、
透析、ＣＡＢＧ手術、経皮的冠動脈介入または心臓弁置換の前、間および／または後に、請求項３１に記載の組成物を、該組成物を必要とする患者に投与する工程；
を包含する、方法。
【請求項３４】
診断方法であって、
請求項３０に記載のアプタマーを、フォン・ビルブラント因子またはその改変体を含有すると疑われる組成物と接触させる工程；および
フォン・ビルブラント因子またはその改変体の有無を検出する工程；
を包含する、方法。
【請求項３５】
インビトロ診断剤としての使用のための、請求項３０に記載のアプタマー。
【請求項３６】
インビボ診断剤としての使用のための、請求項３０に記載のアプタマー。
【請求項３７】
前記アプタマー標的が、フォン・ビルブラント因子である、請求項２４に記載の方法。
【請求項３８】
前記全長タンパク質標的のドメインが、フォン・ビルブラント因子ドメインＡ１である、請求項２４に記載の方法。
【請求項３９】
前記全長タンパク質標的が、フォン・ビルブラント因子である、請求項２５に記載の方法。
【請求項４０】
前記タンパク質標的ドメインが、フォン・ビルブラント因子ドメインＡ１である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記第一の種および第二の種の両方のタンパク質標的が、フォン・ビルブラント因子である、請求項２８に記載の方法。
【請求項４２】
請求項４１に記載の方法に従って同定される、アプタマー。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【公表番号】特表２００８−５１２０９８（Ｐ２００８−５１２０９８Ａ）
【公表日】平成２０年４月２４日（２００８．４．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５３０５０４（Ｐ２００７−５３０５０４）
【出願日】平成１７年９月７日（２００５．９．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０３２１３４
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０３３８５４
【国際公開日】平成１８年３月３０日（２００６．３．３０）
【出願人】（５０４４６６４８７）アーケミックス　コーポレイション (10)
【Ｆターム（参考）】