プロオピオメラノコルチコトロピン（ＰＯＭＣ）ｍＲＮＡ発現上昇抑制剤
【課題】ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有する物質を見出し、当該物質を有効成分とするＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤及びＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤を提供する。
【解決手段】ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤及びＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤に、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上を有効成分として含有せしめる。
【解決手段】ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤及びＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤に、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上を有効成分として含有せしめる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プロオピオメラノコルチコトロピン（ＰＯＭＣ）ｍＲＮＡ発現上昇抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
シミ、ソバカス、日焼け後の皮膚色素沈着症等は、皮膚内に存在する色素細胞（メラノサイト）が活性化することにより、メラニンの産生が著しく亢進した結果として生じるものであり、中高年齢層における肌の悩みの一つになっている。
【０００３】
皮膚表皮細胞から分泌されメラノサイトを刺激し、メラニンの生成を促進する作用を持つホルモンである副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）やメラノサイトを活性化するサイトカインとしての色素細胞刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）は、プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）を前駆体として産生されることが知られている。そのため、ＰＯＭＣの産生を抑制すること、すなわちＰＯＭＣｍＲＮＡの発現上昇を抑制することで、結果的にメラニンの生成を抑制することができ、日焼け後の色素沈着、シミ、ソバカス等を予防又は改善することができると考えられる。
【０００４】
従来、ＰＯＭＣの発現を抑制する作用を有するものとしては、例えば、パンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミド等が知られている（特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００７−１７６８１０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有する物質を見出し、当該物質を有効成分とするＰＯＭＣ発現上昇抑制剤、ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するために、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤、ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤は、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、シミ、ソバカス、皮膚の色黒（皮膚色素沈着症）等を予防、治療又は改善可能なＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤を提供することができるとともに、ＰＯＭＣｍＲＮＡの発現上昇に起因する各種疾患を予防又は治療可能なＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下、本発明について説明する。
本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を有効成分として含有する。
【００１０】
ここで、本発明において「抽出物」には、上記植物を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１１】
本発明において使用する抽出原料は、オランダガラシ、オタネニンジン、センブリ及びソウハクヒである。２種以上の植物を抽出原料として用いる場合、上記植物を任意に組み合わせて使用することができる。
【００１２】
オランダガラシ（学名：Ｎａｓｔｕｒｔｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）は、アブラナ科に属し、サラダ等に利用されている。オランダガラシはヨーロッパから中央アジア原産で、日本でも広く自生しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る部位としては、例えば、葉、茎、花、根、地上部又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは葉及び地上部である。
【００１３】
オタネニンジン（学名：Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ）は、ウコギ科に属する植物であり、中国東北部等に自生又は韓国や中国等で栽培されており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る部位としては、例えば、葉部、茎部、地上部、根部、全草又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは根部である。
【００１４】
センブリ（学名：Ｓｗｅｒｔｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ）は、リンドウ科に属する植物であり、九州から北海道までの山野で自生しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る部位としては、例えば、葉部、幹部、地上部、地下部、全草又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは全草である。
【００１５】
ソウハクヒは、クワ（学名：Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）の根の皮を乾燥したものであり、クワは日本各地に自生又は栽培されておりこれらの地域から容易に入手することができる。抽出原料としてはクワの根の皮を使用する。
【００１６】
上記抽出原料からの抽出物に含有されるＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有する物質の詳細は不明であるが、天然物の抽出に一般に使用されている抽出方法によって、上記抽出原料からこれらの作用を有する抽出物を得ることができる。
【００１７】
例えば、上記抽出原料を必要に応じて乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、植物の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００１８】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用するのが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等
が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温
度で使用するのが好ましい。
【００１９】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２０】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００２１】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族アルコール１〜９０容量部を混合することが好ましく、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族ケトン１〜４０容量部を混合することが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して多価アルコール１０〜９０容量部を混合することが好ましい。
【００２２】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物をさらに乾燥すると乾燥物が得られる。
【００２３】
以上のようにして得られるオランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物は、ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有しているため、それらの作用を利用してＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤の有効成分として使用することができる。
【００２４】
また、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物は、そのＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を利用して、ＰＯＭＣｍＲＮＡの発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤（例えば、血管新生抑制剤、抗がん剤、抗腫瘍剤、がん細胞の転移を抑制する医薬組成物等）の有効成分として用いることもできる。
【００２５】
本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物のみからなるものでもよいし、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を製剤化したものでもよい。
【００２６】
オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、安定剤、矯臭剤等を用いることができる。オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を製剤化したＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤の形態としては、例えば、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等が挙げられる。
【００２７】
なお、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、必要に応じて、ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有する植物抽出物等を、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物とともに配合して有効成分として用いることができる。
【００２８】
本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤の患者に対する投与方法としては、皮下組織内投与、筋肉内投与、静脈内投与、経口投与、経皮投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。また、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００２９】
本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物が有するＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を通じて、ＰＯＭＣの発現の上昇を抑制することができ、これによりメラノサイトを活性化するサイトカインとしてのα−ＭＳＨの生合成を抑制し、シミ、ソバカス、皮膚色素沈着症等を予防又は改善することができ、美白効果を得ることができる。また、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物が有するＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を通じて、ストレス性の皮膚掻痒症等を予防、治療又は改善をすることができる。ただし、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、これらの用途以外にもＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００３０】
なお、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【実施例】
【００３１】
以下、試験例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。
【００３２】
なお、本実施例で使用する、オランダガラシ抽出物、ニンジン（オタネニンジン）抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物は、オランダガラシ抽出液、ニンジン（オタネニンジン）抽出液、センブリ抽出液及びソウハクヒ抽出液（全て丸善製薬社製）の各凍結乾燥品を各植物の抽出物（試料）として用いた。
【００３３】
〔試験例３〕ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用試験
各植物抽出物について、以下のようにしてＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を試験した。
【００３４】
正常ヒト新生児包皮表皮角化細胞（ＮＨＥＫ）を８０ｃｍ２フラスコで正常ヒト表皮角化細胞長期培養用増殖培地（ＥｐｉＬｉｆｅ−ＫＧ２）において、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で前培養し、トリプシン処理により細胞を集めた。
【００３５】
EpiLife-KG2を用いて３５ｍｍシャーレ（ＦＡＬＣＯＮ社製）に４０×１０４ｃｅｌｌｓ／２ｍＬ／シャーレずつ播き、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で一晩培養した。２４時間後に培養液を捨て、ＨＥＰＥＳ緩衝液１ｍＬを加えてＵＶ−Ｂ照射（５０ｍＪ／ｃｍ２）を行い、その後ＥｐｉＬｉｆｅ−ＫＧ２で必要濃度に溶解した試験試料（試料濃度は下記表を参照）を各シャーレに２ｍＬずつ添加し、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で２４時間培養した。培養後、培養液を捨て、ＩＳＯＧＥＮ（ニッポンジーン社製，Ｃａｔ．ｎｏ．３１１−０２５０１）にて総ＲＮＡを抽出し、それぞれのＲＮＡ量を分光光度計にて測定し、２００ｎｇ／μＬになるように総ＲＮＡを調製した。
【００３６】
この総ＲＮＡを鋳型とし、ＰＯＭＣ及び内部標準であるＧＡＰＤＨのｍＲＮＡの発現量を測定した。検出はリアルタイムＰＣＲ装置Ｓｍａｒｔ Ｃｙｃｌｅｒ（Ｃｅｐｈｅｉｄ社）を用いて、ＴａＫａＲａ ＳＹＢＲ ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ ＲＴ−ＰＣＲ Ｋｉｔ（Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ，ｃｏｄｅ Ｎｏ．ＲＲ０６３Ａ）によるリアルタイム２ Ｓｔｅｐ ＲＴ−ＰＣＲ反応により行った。ＰＯＭＣのｍＲＮＡの発現量は、紫外線未照射・試料無添加、紫外線照射・試料無添加及び紫外線照射・試料添加でそれぞれ培養した細胞から調製した総ＲＮＡ標品を基にして、ＧＡＰＤＨの値で補正値を求め、さらに紫外線未照射・試料無添加の補正値を１００とした時の紫外線照射・試料無添加および紫外線照射・試料添加の補正値を算出した。得られた結果から、下記式によりＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制率（％）を算出した。
【００３７】
ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制率（％）＝｛（Ａ−Ｂ）−（Ａ−Ｃ）｝／（Ａ−Ｂ）×１００
式中Ａは「紫外線未照射・試料無添加時の補正値」を表し、Ｂは「紫外線照射・試料無添加時の補正値」を表し、Ｃは「紫外線照射・試料添加時の補正値」を表す。結果を表１に示す。
【００３８】
〔表１〕
試料名 試料添加濃度(μｇ／ｍＬ) POMCmRNA発現上昇抑制率(％)
オランダガラシ抽出物 １ ６６．３
１０ ２９．０
オタネニンジン抽出物 １ ４１．２
１０ １４．８
センブリ抽出物 １ ３６．１
ソウハクヒ抽出物 １ ４６．２
【００３９】
表１に示すように、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物には、優れたＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有することが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００４０】
本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、シミ、ソバカス、皮膚の色黒（皮膚色素沈着症）等の予防・改善に大きく貢献できる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プロオピオメラノコルチコトロピン（ＰＯＭＣ）ｍＲＮＡ発現上昇抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
シミ、ソバカス、日焼け後の皮膚色素沈着症等は、皮膚内に存在する色素細胞（メラノサイト）が活性化することにより、メラニンの産生が著しく亢進した結果として生じるものであり、中高年齢層における肌の悩みの一つになっている。
【０００３】
皮膚表皮細胞から分泌されメラノサイトを刺激し、メラニンの生成を促進する作用を持つホルモンである副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）やメラノサイトを活性化するサイトカインとしての色素細胞刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）は、プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）を前駆体として産生されることが知られている。そのため、ＰＯＭＣの産生を抑制すること、すなわちＰＯＭＣｍＲＮＡの発現上昇を抑制することで、結果的にメラニンの生成を抑制することができ、日焼け後の色素沈着、シミ、ソバカス等を予防又は改善することができると考えられる。
【０００４】
従来、ＰＯＭＣの発現を抑制する作用を有するものとしては、例えば、パンテノール、塩酸ピリドキシン及びニコチン酸アミド等が知られている（特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００７−１７６８１０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有する物質を見出し、当該物質を有効成分とするＰＯＭＣ発現上昇抑制剤、ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するために、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤、ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤は、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、シミ、ソバカス、皮膚の色黒（皮膚色素沈着症）等を予防、治療又は改善可能なＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤を提供することができるとともに、ＰＯＭＣｍＲＮＡの発現上昇に起因する各種疾患を予防又は治療可能なＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下、本発明について説明する。
本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を有効成分として含有する。
【００１０】
ここで、本発明において「抽出物」には、上記植物を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１１】
本発明において使用する抽出原料は、オランダガラシ、オタネニンジン、センブリ及びソウハクヒである。２種以上の植物を抽出原料として用いる場合、上記植物を任意に組み合わせて使用することができる。
【００１２】
オランダガラシ（学名：Ｎａｓｔｕｒｔｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）は、アブラナ科に属し、サラダ等に利用されている。オランダガラシはヨーロッパから中央アジア原産で、日本でも広く自生しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る部位としては、例えば、葉、茎、花、根、地上部又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは葉及び地上部である。
【００１３】
オタネニンジン（学名：Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ）は、ウコギ科に属する植物であり、中国東北部等に自生又は韓国や中国等で栽培されており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る部位としては、例えば、葉部、茎部、地上部、根部、全草又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは根部である。
【００１４】
センブリ（学名：Ｓｗｅｒｔｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ）は、リンドウ科に属する植物であり、九州から北海道までの山野で自生しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る部位としては、例えば、葉部、幹部、地上部、地下部、全草又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは全草である。
【００１５】
ソウハクヒは、クワ（学名：Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）の根の皮を乾燥したものであり、クワは日本各地に自生又は栽培されておりこれらの地域から容易に入手することができる。抽出原料としてはクワの根の皮を使用する。
【００１６】
上記抽出原料からの抽出物に含有されるＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有する物質の詳細は不明であるが、天然物の抽出に一般に使用されている抽出方法によって、上記抽出原料からこれらの作用を有する抽出物を得ることができる。
【００１７】
例えば、上記抽出原料を必要に応じて乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、植物の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００１８】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用するのが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等
が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温
度で使用するのが好ましい。
【００１９】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２０】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００２１】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族アルコール１〜９０容量部を混合することが好ましく、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族ケトン１〜４０容量部を混合することが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して多価アルコール１０〜９０容量部を混合することが好ましい。
【００２２】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物をさらに乾燥すると乾燥物が得られる。
【００２３】
以上のようにして得られるオランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物は、ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有しているため、それらの作用を利用してＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤の有効成分として使用することができる。
【００２４】
また、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物は、そのＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を利用して、ＰＯＭＣｍＲＮＡの発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤（例えば、血管新生抑制剤、抗がん剤、抗腫瘍剤、がん細胞の転移を抑制する医薬組成物等）の有効成分として用いることもできる。
【００２５】
本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物のみからなるものでもよいし、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を製剤化したものでもよい。
【００２６】
オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、安定剤、矯臭剤等を用いることができる。オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を製剤化したＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤の形態としては、例えば、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等が挙げられる。
【００２７】
なお、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、必要に応じて、ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有する植物抽出物等を、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物とともに配合して有効成分として用いることができる。
【００２８】
本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤の患者に対する投与方法としては、皮下組織内投与、筋肉内投与、静脈内投与、経口投与、経皮投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。また、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００２９】
本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物が有するＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を通じて、ＰＯＭＣの発現の上昇を抑制することができ、これによりメラノサイトを活性化するサイトカインとしてのα−ＭＳＨの生合成を抑制し、シミ、ソバカス、皮膚色素沈着症等を予防又は改善することができ、美白効果を得ることができる。また、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物からなる群より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物が有するＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を通じて、ストレス性の皮膚掻痒症等を予防、治療又は改善をすることができる。ただし、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、これらの用途以外にもＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００３０】
なお、本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【実施例】
【００３１】
以下、試験例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。
【００３２】
なお、本実施例で使用する、オランダガラシ抽出物、ニンジン（オタネニンジン）抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物は、オランダガラシ抽出液、ニンジン（オタネニンジン）抽出液、センブリ抽出液及びソウハクヒ抽出液（全て丸善製薬社製）の各凍結乾燥品を各植物の抽出物（試料）として用いた。
【００３３】
〔試験例３〕ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用試験
各植物抽出物について、以下のようにしてＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を試験した。
【００３４】
正常ヒト新生児包皮表皮角化細胞（ＮＨＥＫ）を８０ｃｍ２フラスコで正常ヒト表皮角化細胞長期培養用増殖培地（ＥｐｉＬｉｆｅ−ＫＧ２）において、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で前培養し、トリプシン処理により細胞を集めた。
【００３５】
EpiLife-KG2を用いて３５ｍｍシャーレ（ＦＡＬＣＯＮ社製）に４０×１０４ｃｅｌｌｓ／２ｍＬ／シャーレずつ播き、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で一晩培養した。２４時間後に培養液を捨て、ＨＥＰＥＳ緩衝液１ｍＬを加えてＵＶ−Ｂ照射（５０ｍＪ／ｃｍ２）を行い、その後ＥｐｉＬｉｆｅ−ＫＧ２で必要濃度に溶解した試験試料（試料濃度は下記表を参照）を各シャーレに２ｍＬずつ添加し、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で２４時間培養した。培養後、培養液を捨て、ＩＳＯＧＥＮ（ニッポンジーン社製，Ｃａｔ．ｎｏ．３１１−０２５０１）にて総ＲＮＡを抽出し、それぞれのＲＮＡ量を分光光度計にて測定し、２００ｎｇ／μＬになるように総ＲＮＡを調製した。
【００３６】
この総ＲＮＡを鋳型とし、ＰＯＭＣ及び内部標準であるＧＡＰＤＨのｍＲＮＡの発現量を測定した。検出はリアルタイムＰＣＲ装置Ｓｍａｒｔ Ｃｙｃｌｅｒ（Ｃｅｐｈｅｉｄ社）を用いて、ＴａＫａＲａ ＳＹＢＲ ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ ＲＴ−ＰＣＲ Ｋｉｔ（Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ，ｃｏｄｅ Ｎｏ．ＲＲ０６３Ａ）によるリアルタイム２ Ｓｔｅｐ ＲＴ−ＰＣＲ反応により行った。ＰＯＭＣのｍＲＮＡの発現量は、紫外線未照射・試料無添加、紫外線照射・試料無添加及び紫外線照射・試料添加でそれぞれ培養した細胞から調製した総ＲＮＡ標品を基にして、ＧＡＰＤＨの値で補正値を求め、さらに紫外線未照射・試料無添加の補正値を１００とした時の紫外線照射・試料無添加および紫外線照射・試料添加の補正値を算出した。得られた結果から、下記式によりＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制率（％）を算出した。
【００３７】
ＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制率（％）＝｛（Ａ−Ｂ）−（Ａ−Ｃ）｝／（Ａ−Ｂ）×１００
式中Ａは「紫外線未照射・試料無添加時の補正値」を表し、Ｂは「紫外線照射・試料無添加時の補正値」を表し、Ｃは「紫外線照射・試料添加時の補正値」を表す。結果を表１に示す。
【００３８】
〔表１〕
試料名 試料添加濃度(μｇ／ｍＬ) POMCmRNA発現上昇抑制率(％)
オランダガラシ抽出物 １ ６６．３
１０ ２９．０
オタネニンジン抽出物 １ ４１．２
１０ １４．８
センブリ抽出物 １ ３６．１
ソウハクヒ抽出物 １ ４６．２
【００３９】
表１に示すように、オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物には、優れたＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制作用を有することが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００４０】
本発明のＰＯＭＣｍＲＮＡ発現上昇抑制剤は、シミ、ソバカス、皮膚の色黒（皮膚色素沈着症）等の予防・改善に大きく貢献できる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を有効成分として含有することを特徴とするプロオピオメラノコルチコトロピン（ＰＯＭＣ）ｍＲＮＡ発現上昇抑制剤。
【請求項２】
オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を有効成分として含有することを特徴とするプロオピオメラノコルチコトロピン（ＰＯＭＣ）ｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤。
【請求項１】
オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を有効成分として含有することを特徴とするプロオピオメラノコルチコトロピン（ＰＯＭＣ）ｍＲＮＡ発現上昇抑制剤。
【請求項２】
オランダガラシ抽出物、オタネニンジン抽出物、センブリ抽出物及びソウハクヒ抽出物より選ばれる１種又は２種以上の植物抽出物を有効成分として含有することを特徴とするプロオピオメラノコルチコトロピン（ＰＯＭＣ）ｍＲＮＡ発現上昇に起因する疾患の予防・治療剤。
【公開番号】特開２０１１−１３２５（Ｐ２０１１−１３２５Ａ）
【公開日】平成２３年１月６日（２０１１．１．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１４７２２０（Ｐ２００９−１４７２２０）
【出願日】平成２１年６月２２日（２００９．６．２２）
【出願人】（５９１０８２４２１）丸善製薬株式会社 (239)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１月６日（２０１１．１．６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年６月２２日（２００９．６．２２）
【出願人】（５９１０８２４２１）丸善製薬株式会社 (239)
【Ｆターム（参考）】
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