光音響断層撮影装置
【課題】
従来、多光子励起を利用した光音響断層撮影装置において、1光子励起による光音響信号の混入により断層像のコントラストが低くなるという問題点があった。
【解決手段】
近赤外光パルスを発生する光源１０と、該パルス光を集光して被測定体１５に照射する方法、該パルス光の焦点位置を走査するレーザ走査部１１と、該パルス光の多光子励起により被測定体１５から発生する音響波を選択的に検出する音響トランスデューサ１８、信号増幅部１９、信号処理部２２と、発生位置情報とに基づいて被測定体１５内部の物質分布を示す３次元データを取得し、任意の面における断層画像を表示する表示部２３を有する。
従来、多光子励起を利用した光音響断層撮影装置において、1光子励起による光音響信号の混入により断層像のコントラストが低くなるという問題点があった。
【解決手段】
近赤外光パルスを発生する光源１０と、該パルス光を集光して被測定体１５に照射する方法、該パルス光の焦点位置を走査するレーザ走査部１１と、該パルス光の多光子励起により被測定体１５から発生する音響波を選択的に検出する音響トランスデューサ１８、信号増幅部１９、信号処理部２２と、発生位置情報とに基づいて被測定体１５内部の物質分布を示す３次元データを取得し、任意の面における断層画像を表示する表示部２３を有する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は多光子励起による光音響効果と光音響信号の周波数フィルタリングを利用した被測定体の内部情報を可視化するための光音響断層撮影装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、生体組織の断層像撮影の必要性が高まっている。しかし、従来のＭＲＩ、ＣＴでは、解像度が不十分であり（分解能：〜１ｍｍ）、また光学顕微鏡では深部の観察が困難であった。そこで、高解像度に深部観察をする生体断層像の撮影技術として、光音響断層撮影（ＰＡＴ：Ｐｈｏｔｏａｃｏｕｓｔｉｃ Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）法と呼ばれる手法が開発され、その有用性が明らかになりつつある。これは、測定対象に光パルスを照射することによって試料内の吸収物質を励起し、吸収物質の熱弾性膨張により生じる光音響波を検出することで測定対象内の吸収情報を取得して画像化するものである。このように、光音響断層撮影法は、被測定体に光を照射することにより、生体内減衰の少ない音響波を発生させ、その音響波の検出により被測定体内部の情報を取得するものであるため、より深い部分からの信号検出が可能である。しかしながら、従来の光音響断層撮影装置では、光軸方法（深さ方向）の分解能が音波の性質によって決定され高空間分解能化が困難という理由により、吸収物質の断面構造を正確に捉えることが難しい。さらに、吸収係数の大きい物質では、表面での吸収の効果が大きく、吸収物質の深部の情報を捉えることができない。
【０００３】
そこで、光軸方法（深さ方向）の分解能を音波の性質ではなく、多光子励起という光の性質を利用することで向上させ、吸収物質内部の情報を正確に捉える方法として、多光子励起による光音響断層撮影装置が開発されている（特許文献１を参照）。この方法は、パルスレーザを集光照射することにより多光子励起を起こし、その多光子励起により発生する音響波を検出することにより、測定対象内の吸収情報を画像化するものである。多光子励起は測定対象の吸収波長の2倍の波長を使用し吸収物質を励起するため、吸収物質の表面だけではなく深部の情報を取得することが可能である。また、光音響波発生は集光された非常に小さい領域でしか起こらないため、高分解能のイメージングが可能である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特願２００７―５５６８０１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、多光子吸収の起こる確率は1光子吸収の起こる確率に比べて小さく、1光子吸収による光音響波が多光子励起光音響断層撮影をする際に混じってしまうという問題点がある。
【０００６】
そこで、本発明が解決しようという課題は、吸収の大きい被測定体の深部情報（構造）を高分解能で測定することのできる光音響断層撮影装置を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するために成された本発明の光音響断層撮影装置は、多光子励起光音響効果を利用して被測定内部の吸収物質分布を可視化する光音響断層撮影装置において、
a）被測定体に対してパルスレーザを照射することで多光子励起を誘起するパルスレーザ照射手段と、
b）前記多光子励起により被測定体から発生した音響波だけを検出する手段と、
c）前記音響波検出手段による検出結果を基に被測定体内部の吸収物質情報を画像化する信号処理手段と、
を有することを特徴としている。
【０００８】
ここで、パルスレーザとは、多光子励起を行うことができるものであればどのようなものでもよい。一般的に、被測定体の吸収波長の倍の波長を発振するレーザを使用し、ピークパワーの高いパルス光を被測定体に集光入射することにより多光子励起を誘起することができる。このようなパルスレーザとしては、ピコ秒パルスレーザ、あるいはフェムト秒パルスレーザを好適に用いることができる。また、ナノ秒パルスレーザであっても高いピークパワーを有するものを用いることで多光子励起を誘起することが可能である。
【０００９】
また、上記多光子励起により被測定体から発生した音響波を1光子励起により発生した光音響波と区別して検出する手段とは、1光子による音響波と多光子による光音響波の中に含まれる周波数成分の違いにより、選択的に多光子励起による光音響波を検出するため、周波数帯域の違う音響トランスデューサの２個以上の組み合わせを利用するものである。あるいは、１つの広帯域のトランスデューサを使用し、信号処理部で音響信号の周波数解析を行い、それぞれの周波数の成分の寄与率（強度情報）を計算するものでもよい。
【００１０】
音響波検出手段による検出結果を基に被測定体内部の吸収物質情報を画像化する信号処理手段とは、２個以上の音響トランスデューサからの信号強度の演算、あるいは、周波数解析によるそれぞれの周波数帯域の信号成分の寄与率（強度情報）により、レーザ集光位置における物質量の情報を取得可能にするものである。
【００１１】
また、本発明の光音響断層撮影装置には、上記パルスレーザの焦点位置を２次元的又は３次元的に走査するレーザ走査手段を設け、上記信号処理手段によって、各焦点位置から発生した音響波の強度情報を基に、被測定体内部の２次元的又は３次元的な物質分布情報を取得して画像化するものとすることが望ましい。
【００１２】
なお、上記レーザ走査手段は、レーザ光の焦点位置を固定して被測定体を移動するものであっても、被測定体を固定してレーザ光の焦点位置を移動するものであってもよく、両者を組み合わせたものであってもよい。
【発明の効果】
【００１３】
上記構成を有する本発明の光音響断層撮影装置は、パルスレーザを励起光として、被測定体に集光照射することにより多光子励起を誘起するものであり、その多光子励起によって発生した光音響波を選択的に検出できるものである。結果として焦点領域のみで局在的に励起された音響波のみを選択的に検出することが可能である。従って、本発明の光音響断層撮影装置により、測定したい領域以外の領域からの音響波の発生（例えば、吸収係数の大きい物質からなる構造物の表面からの信号）を防止することができ、高分解能を維持したまま試料のより深い領域の観察を行うことが可能となる。
【００１４】
なお、上記パルスレーザ照射手段としては、波長 ７００ｎｍ〜２５００ｎｍである近赤外光パルスを照射可能なものを用いることが望ましい。図２に示すように、近赤外領域の光はメラニンや水による吸収が少なく生体内における減衰が起こりにくいため、励起光の浸透深度を大きくすることができ、深部領域の高解像度観察を可能とする上記本発明の利点を一層発揮させることができる（図２：オレゴンメディカルセンターのウェブサイトｈｔｔｐ：／／ｏｍｌｃ．ｏｇｉ．ｅｄｕ／ｓｐｅｃｔｒａ／より）。ここで、例えば、８００ｎｍの波長を有する近赤外パルスレーザを生体に集光照射した場合、非線形光学効果による２光子励起により、焦点領域のみにおいて４００ｎｍ付近に吸収を持つ物質（例えば、酸化ヘモグロビン又は還元ヘモグロビン）が励起される。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明に係る光音響断層撮影装置の一実施例を示す模式図。
【図２】酸化ヘモグロビン、還元ヘモグロビン、メラニンの吸光モル係数の波長特性、及び水の吸光係数の波長特性を示すグラフ。
【図３】本発明に係る試験例１で使用した（Ａ）1光子吸収色素（ＩＲＡ９８０ＢＴ）と（Ｂ）２光子吸収色素（ローダミンＢ）の吸収スペクトル。
【図４】本発明に係る試験例1におけるシミュレーションにより求められた（Ａ）1光子吸収色素（ＩＲＡ９８０ＢＴ、飽和溶液の１／５１２）と（Ｂ）2光子吸収色素（ローダミンＢ）の光音響信号時間波形とそのパワースペクトル。
【図５】本研究に係る試験例１において実験により得られた1光子吸収色素（ＩＲＡ９８０ＢＴ、飽和溶液の１／５１２）と2光子吸収色素（ローダミンＢ）のパワースペクトル。
【図６】本発明に係る試験例２における1光子励起色素（ＩＲＡ９８０ＢＴ）（上段）、2光子励起色素（ローダミンＢ）（中段）、１光子吸収色素と２光子吸収色素両方を混合させた溶液（下段）で満たしたガラスキャピラリーの周波数フィルターを用いた断面像の測定例を示す図。
【図７】本発明に係る光音響断層撮影装置の一実施例を示す模式図。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明を実施するための形態について実施例に基づいて説明する。図１は、本発明の一実施例に係る光音響断層撮影装置の概略構成を示す図である。本実施例の光音響断層撮影装置は、近赤外パルス光源１０と、レーザ走査部１１、レーザ光を被測定体１５に照射するための照射光学系、音響トランスデューサ１８、信号増幅部１９、信号処理部２２、及び上記各部を制御するための制御部２１で構成された。なお、上記信号処理部２２及び制御部２１は所定のソフトウェアを搭載したパーソナルコンピュータ２０（図中では「ＰＣ」と略す）によって具現化され、このＰＣ２０にはモニタを備えた表示部２３が接続されている。
【００１７】
近赤外パルス光源１０としては、例えば、チタンサファイアレーザ、ＹＡＧレーザ等の近赤外の光パルスを生成可能なものを使用する。上記照射光学系は、パルス光を集光して被測定体１５に照射するための対物レンズ１４と、近赤外パルス光源１０から出射されたパルス光を対物レンズ１４に入射させるための反射鏡１３とを備えた顕微鏡１２によって具現化される。顕微鏡１２には、更に、被測定体１５を載置するためのステージ１６及びステージ１６を駆動するためのステージ駆動部１７が設けられており、ステージ駆動部１７によってステージ１６を上下に移動させることにより、レーザ光の焦点位置を光軸方向（すなわち図中のＺ軸方向）に走査することができる。
【００１８】
レーザ走査部１１は、上記顕微鏡１２に付設されるものであり、レーザ走査部１１の内部に設けられた可動式ミラー（図示略）を駆動することにより被測定体１５に照射されるパルス光をその光軸方向と直交する面内（すなわち、図中のＸ軸及びＹ軸方向）において走査するためのものである。なお、このようなレーザ走査部１１を設ける代わりに、上記ステージ１６をＸＹ軸方向に移動可能な構成とすることで、被測定体１５に対するパルス光の焦点位置をＸＹ平面内で走査できるようにしてもよい。
【００１９】
音響トランスデューサ１８は、パルス光の吸収によって被測定体１５内部から放出される音響波を集音して電気信号に変換する圧電素子から成り、該音響トランスデューサ１８からの電気信号は信号増幅部１９で増幅され、信号処理部２２においてデジタル信号に変換される。
【００２０】
この音響トランスデューサ１８は、様々な周波数帯域をもつ音響トランスデューサの組み合わせでもよい。様々な音響トランスデューサからの電気信号は信号増幅部１９で増幅され、信号処理部２２においてデジタル信号に変換される。
【００２１】
上記信号処理部２２は、信号増幅部１９から送出される音響波の強度情報、周波数情報と、該音響波の発生位置情報、すなわちレーザ走査部１１から送出されるパルス光のＸ軸及びＹ軸方向の焦点位置情報と、ステージ駆動部１７から送出されるパルス光のＺ軸方向の焦点位置情報とを受信して、デジタル化し、これらの情報に基づいて所定の演算を行うことにより被測定体１５内部の物質分布を示す３次元画像データを生成するものである。更に、該信号処理部２２では、生成された３次元画像データを基に被測定体１５の任意の断面を表した２次元画像（断層像）が生成され、表示部２３のモニタ上に表示される。
【００２２】
上記構成の光音響断層撮影装置を用いて生体の断層画像を撮影する際には、まず、近赤外パルス光源１０から所定の間隔でパルス光を出射させて被測定体１５に照射する。このとき、近赤外パルス光源１０から出射されたパルス光はレーザ走査部１１を経て上記顕微鏡１２に設けられた反射鏡１３で反射され、対物レンズ１４で集光されてステージ１６上に載置された被測定体１５に照射される。これにより、被測定体１５の内部では、近赤外パルスによる多光子励起により焦点領域のみにおいて音響波が発生する。焦点位置で発生した音響波は生体内を伝播し音響トランスデューサ１８によって検出され、該検出信号が信号増幅部１９を経て信号処理部２２に送出される。
【００２３】
ここで、レーザ走査部１１を用いてパルス光の焦点位置をＸ軸及びＹ軸方向に走査しながら上記のようなパルス光の照射及び音響波の検出を行うことで、被測定体１５内の所定の深さ位置におけるＸＹ平面の２次元画像を撮影することができ、更に、ステージ駆動部１７を用いてパルス光の焦点位置をＺ軸方向（すなわち被測定体１５の深さ方向）に変化させながらこのような２次元画像を複数枚撮影することで、被測定体１５内部の３次元データを取得することができる。
【００２４】
以上のような、本実施例の光音響断層撮影装置によれば、近赤外光パルスによる多光子励起により焦点領域から局在的に音響波を発生させ、選択的に検出することができるため、目的外の領域からの光音響信号の発生を防止し、空間分解能を低下させることなく深部領域の観察を行うことが可能となる。
【００２５】
以下の試験例１に示されるように多光子励起と1光子励起の光音響信号に含まれる周波数成分は違うので、光音響信号の周波数解析を行うことにより、多光子励起のみによる光音響信号を取り出すことが可能である。そのことにより、表面で強く起こる1光子吸収による信号を効率よく取り除くことができ、よりコントラスト高く、生体深部の情報を直接取り出すことが可能となる。
【００２６】
また、近赤外パルス光により励起される２光子吸収物質を被測定体に導入すれば、近赤外光により２光子吸収が励起される物質を含まない被測定体の場合でも可視化することが可能となる。
【００２７】
（試験例１）（Ａ）１光子励起による光音響波の周波数成分と（Ｂ）２光子励起による光音響波の周波数成分の違いをシミュレーションにより行った（図４）。被測定体として吸収色素（（Ａ）ＩＲＡ９８０ＢＴと（Ｂ）ローダミンＢ（吸収スペクトルを図３（出典：オレゴンメディカルセンターのウェブサイトｈｔｔｐ：／／ｏｍｌｃ．ｏｇｉ．ｅｄｕ／ｓｐｅｃｔｒａ／、Ｅｘｉｔｏｎ社のウェブサイト）に示す））溶液を、使用波長としては１０６４ｎｍを仮定した。本計算は光の吸収量の深さ依存性によって発生する音波の波形が記述され、その音波波形のフーリエ変換により音波のスペクトルを計算している。また２光子励起による光音響波の周波数成分は、レーザビームをガウシアンビームと仮定し、光強度の２乗で光音響波が発生すると仮定し、音響波のスペクトルを計算している。この結果からわかるように、（Ａ）１光子励起による光音響波の場合（例えば、ＩＲＡ９８０ＢＴのような１０６４ｎｍに１光子の吸収ピークがある場合）と（Ｂ）２光子励起による光音響波の場合（例えば、ローダミンＢのような５３２ｎｍに吸収ピークがある場合）を比べると、２光子励起による光音響波のほうが、高周波の成分が発生していることがわかる。図５に示す実験により得られた１光子励起と２光子励起により発生する光音響波の周波数成分も同様に、シミュレーション結果と同じ傾向があることがわかる。
【００２８】
（試験例２）被測定体として吸収色素（ローダミンＢとＩＲＡ９８０ＢＴ）溶液で満たしたガラスキャピラリー（ＴＯＨＯ社製、外径３ｍｍ、内径２．４ｍｍ）の断面を従来法である多光子励起光音響断層撮影法（全周波数選択）と本発明である周波数解析を用いた多光子励起光音響断層撮影法（周波数選択あり）によって測定した（図６）。使用波長は１０６４ｎｍ。上段は1光子吸収を起こす色素ＩＲＡ９８０ＢＴ（Ｅｘｉｔｏｎ社製）のエタノール溶液の場合、中段は２光子吸収を起こす色素ローダミンＢ（Ｓｉｇｍａ社製）のエタノール溶液の場合、下段は２光子吸収を示す色素（ローダミンＢ）と１光子吸収を示す色素（ＩＲＡ９８０ＢＴ）の両方を入れたガラスキャピラリーの断面を測定したものである。左側の列はすべての周波数成分を用いて画像を作成した場合（従来法）で、中央の列は０−１ＭＨｚの周波数を用いて画像を作成した場合、１−１０ＭＨｚの周波数を用いて画像を作成した場合を示している。この図６の上段と中段の比較から見てわかるように１光子励起光音響の場合に比べて、２光子励起光音響の場合は、ガラスキャピラリーの断面がコントラストよく捉えられていることがわかる。また、周波数に関して高周波の成分のみから画像を構築したほうが断面をコントラストよく捉えられていることがわかる。このように周波数解析を行うことにより、コントラストの向上が可能であり、１光子と２光子吸収色素を混合した場合（図６下段）でも周波数選択をすることによりコントラストの向上が得られる。
【００２９】
このように、１光子励起による光音響波の周波数成分が多光子励起によるものと違うことが理論計算から導出され、実験においても高周波成分を抜き出すことにより、多光子励起による光音響波だけを抜き出すことができ、コントラストの向上が可能である。
【００３０】
従って、本実施例の光音響断層撮影装置は、特に毛細血管や小動静脈のイメージング、組織や臓器の深部構造の測定等に好適に用いることができる。
【００３１】
なお、被対象物としては、近赤外パルスレーザにより多光子励起されるものであればどのようなものでも良いが、特に血液成分が望ましい。例えば、酸化ヘモグロビンと還元ヘモグロビンを被対象物とすることにより、酸化ヘモグロビンと還元ヘモグロビンの２光子吸収のピークの違い（図３参照）を利用して脳内血中酸素濃度分布を測定し、脳の働きをみるような機能イメージングが可能となる。具体的には、酸化ヘモグロビンの１光子吸収ピーク波長の２倍の波長を持つレーザをＸＹＺ方向にスキャンし、発生する光音響波強度の位置依存性を測定すると、酸化ヘモグロビンの多い血液から信号が強く発生するので、酸素濃度の高い血液を含む血管のみが可視化される。同様に、還元ヘモグロビンの１光子吸収の２倍の波長を持つレーザを用いて測定を行うと、酸素濃度の低い血液を多く含む血管のみが可視化できる。このように波長を変化させて測定を行うことにより血管内酸素濃度情報を含めた血管の画像化ができ、例えば、脳内の活性化部位の観察が可能となる。上記近赤外パルス光源としては、酸化ヘモグロビン及び還元ヘモグロビンを２光子励起可能な近赤外領域（７００ｎｍ 〜２５００ｎｍ）で波長可変なレーザを用いることが望ましい。また、上記近赤外パルスレーザとしては、多光子励起を行うことができるものであればどのようなものでもよいが、一般的には、ナノ秒パルスレーザ、ピコ秒パルスレーザ、あるいはフェムト秒パルスレーザが用いられる。
【００３２】
本実施例の光音響断層撮影装置は、焦点位置のみから発生する音響波を効率よく検出することができるので、血管のように非常に吸収の強い物質の断面を正確に捉えることができる。例えば、血管の収縮運動は心筋虚血が起こった場合に変化することが知られており、血管収縮運動は様々な病気と係っている。従って、生体深部における血管収縮運動の可視化は非常に重要である。
【００３３】
以上、実施例を用いて本発明の光音響断層撮影装置を実施するための最良の形態について説明したが、本発明は上記実施例に限定されるものではなく、本発明の範囲内で適宜変更が許容されるものである。
【００３４】
本発明の光音響断層撮影装置は、上記のような顕微鏡を利用した構成に限定されるものではなく、例えば、レーザ光の照射手段と音響波の検出手段を被測定体の表面に直接当接させることでレーザ光の照射及び音響波の受信を行うものとしてもよい。このような光音響断層撮影装置の構成の一例を図７に示す。なお、図１と同様の構成については同一符号を付し、適宜説明を省略する。ここでは、被測定体１５に当接させて用いられるプローブ３０の表面（被測定体１５と当接する面）に、近赤外パルス光源１０から導かれたパルス光を集光して被測定体１５に照射するための光照射部３１と、該パルス光の吸収により被測定体１５内で発生した音響波を検出するためのＰＶＤＦ（ポリフッ化ビニリデン樹脂）等の圧電素子から成る音響トランスデューサ１８とを配設した構成となっている。なお、光照射部３１はパルス光の光軸方向の焦点位置を変更可能なものとし、更に、プローブ内には光照射部３１によるパルス光の焦点位置をその光軸に直交する平面内で走査するための走査部３２を設け、被測定体１５内の２次元的又は３次元的な物質分布情報を取得できるものとすることが望ましい。なお、上記のような光照射部３１と音響トランスデューサ１８とをプローブ３０の表面に多数個配列させ、それらを切り換えて動作させることによりパルス光を走査する構成としてもよい。また、周波数感度曲線の違うトランスデューサを並べることにより、信号処理部２２における周波数選択の信号処理を簡略化する構成としてもよい。
【００３５】
上記のような光音響断層撮影装置の動作を、上述の脳機能イメージングの例で説明する。脳内の血中酸素濃度は脳活動と密接な関連があるため、その濃度分布情報を取得して画像化することにより脳の活動部位等を観察することができる。まず、プローブ３０を被測定体１５の頭部に当接させ、２光子励起により酸化ヘモグロビンを特異的に励起可能な波長のパルス光を光照射部３１から照射すると共に、該２光子励起によって焦点位置から発生する音響波を音響トランスデューサ１８で検出する。このとき、光照射部３１及び走査部３２によってパルス光の焦点位置を３次元的に走査することにより、脳の各部についてパルス光の照射及び音響波信号の検出が行われる。続いて、同様にして、２光子励起により還元ヘモグロビンを特異的に励起可能な波長におけるパルス光の照射及び音響波の検出を行い、以上により取得された酸化ヘモグロビン又は還元ヘモグロビン由来の音響波の検出信号とプローブ３０から送出されるパルス光の焦点位置情報に基づいて信号処理部２２で所定の演算を行う。これにより脳の各部における血中酸素濃度が算出され、該血中酸素濃度の分布を示す３次元画像データが生成される。更に、信号処理部２２は生成された３次元画像データに基づいて３次元画像又は脳の任意の断面を示した２次元画像を生成し、表示部２３のモニタ上に表示する。
【００３６】
なお、本発明の光音響断層撮影装置は、上記のような生体の観察に限定されるものではなく、例えば、半導体素子の製品検査など種々の試料の非破壊検査に応用可能である。この場合には、検出対象となる物質の多光子吸収に応じた適切な波長を使用することが望ましい。
【符号の説明】
【００３７】
１０…近赤外パルス光源
１１…レーザ走査部
１２…顕微鏡
１３…反射鏡
１４…対物レンズ
１５…被測定体
１６…ステージ
１７…ステージ駆動部
１８…音響トランスデューサ
１９…信号増幅部
２０…パーソナルコンピュータ
２１…制御部
２２…信号処理部
２３…表示部
３０…プローブ
３１…光照射部
３２…走査部
【技術分野】
【０００１】
本発明は多光子励起による光音響効果と光音響信号の周波数フィルタリングを利用した被測定体の内部情報を可視化するための光音響断層撮影装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、生体組織の断層像撮影の必要性が高まっている。しかし、従来のＭＲＩ、ＣＴでは、解像度が不十分であり（分解能：〜１ｍｍ）、また光学顕微鏡では深部の観察が困難であった。そこで、高解像度に深部観察をする生体断層像の撮影技術として、光音響断層撮影（ＰＡＴ：Ｐｈｏｔｏａｃｏｕｓｔｉｃ Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）法と呼ばれる手法が開発され、その有用性が明らかになりつつある。これは、測定対象に光パルスを照射することによって試料内の吸収物質を励起し、吸収物質の熱弾性膨張により生じる光音響波を検出することで測定対象内の吸収情報を取得して画像化するものである。このように、光音響断層撮影法は、被測定体に光を照射することにより、生体内減衰の少ない音響波を発生させ、その音響波の検出により被測定体内部の情報を取得するものであるため、より深い部分からの信号検出が可能である。しかしながら、従来の光音響断層撮影装置では、光軸方法（深さ方向）の分解能が音波の性質によって決定され高空間分解能化が困難という理由により、吸収物質の断面構造を正確に捉えることが難しい。さらに、吸収係数の大きい物質では、表面での吸収の効果が大きく、吸収物質の深部の情報を捉えることができない。
【０００３】
そこで、光軸方法（深さ方向）の分解能を音波の性質ではなく、多光子励起という光の性質を利用することで向上させ、吸収物質内部の情報を正確に捉える方法として、多光子励起による光音響断層撮影装置が開発されている（特許文献１を参照）。この方法は、パルスレーザを集光照射することにより多光子励起を起こし、その多光子励起により発生する音響波を検出することにより、測定対象内の吸収情報を画像化するものである。多光子励起は測定対象の吸収波長の2倍の波長を使用し吸収物質を励起するため、吸収物質の表面だけではなく深部の情報を取得することが可能である。また、光音響波発生は集光された非常に小さい領域でしか起こらないため、高分解能のイメージングが可能である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特願２００７―５５６８０１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、多光子吸収の起こる確率は1光子吸収の起こる確率に比べて小さく、1光子吸収による光音響波が多光子励起光音響断層撮影をする際に混じってしまうという問題点がある。
【０００６】
そこで、本発明が解決しようという課題は、吸収の大きい被測定体の深部情報（構造）を高分解能で測定することのできる光音響断層撮影装置を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するために成された本発明の光音響断層撮影装置は、多光子励起光音響効果を利用して被測定内部の吸収物質分布を可視化する光音響断層撮影装置において、
a）被測定体に対してパルスレーザを照射することで多光子励起を誘起するパルスレーザ照射手段と、
b）前記多光子励起により被測定体から発生した音響波だけを検出する手段と、
c）前記音響波検出手段による検出結果を基に被測定体内部の吸収物質情報を画像化する信号処理手段と、
を有することを特徴としている。
【０００８】
ここで、パルスレーザとは、多光子励起を行うことができるものであればどのようなものでもよい。一般的に、被測定体の吸収波長の倍の波長を発振するレーザを使用し、ピークパワーの高いパルス光を被測定体に集光入射することにより多光子励起を誘起することができる。このようなパルスレーザとしては、ピコ秒パルスレーザ、あるいはフェムト秒パルスレーザを好適に用いることができる。また、ナノ秒パルスレーザであっても高いピークパワーを有するものを用いることで多光子励起を誘起することが可能である。
【０００９】
また、上記多光子励起により被測定体から発生した音響波を1光子励起により発生した光音響波と区別して検出する手段とは、1光子による音響波と多光子による光音響波の中に含まれる周波数成分の違いにより、選択的に多光子励起による光音響波を検出するため、周波数帯域の違う音響トランスデューサの２個以上の組み合わせを利用するものである。あるいは、１つの広帯域のトランスデューサを使用し、信号処理部で音響信号の周波数解析を行い、それぞれの周波数の成分の寄与率（強度情報）を計算するものでもよい。
【００１０】
音響波検出手段による検出結果を基に被測定体内部の吸収物質情報を画像化する信号処理手段とは、２個以上の音響トランスデューサからの信号強度の演算、あるいは、周波数解析によるそれぞれの周波数帯域の信号成分の寄与率（強度情報）により、レーザ集光位置における物質量の情報を取得可能にするものである。
【００１１】
また、本発明の光音響断層撮影装置には、上記パルスレーザの焦点位置を２次元的又は３次元的に走査するレーザ走査手段を設け、上記信号処理手段によって、各焦点位置から発生した音響波の強度情報を基に、被測定体内部の２次元的又は３次元的な物質分布情報を取得して画像化するものとすることが望ましい。
【００１２】
なお、上記レーザ走査手段は、レーザ光の焦点位置を固定して被測定体を移動するものであっても、被測定体を固定してレーザ光の焦点位置を移動するものであってもよく、両者を組み合わせたものであってもよい。
【発明の効果】
【００１３】
上記構成を有する本発明の光音響断層撮影装置は、パルスレーザを励起光として、被測定体に集光照射することにより多光子励起を誘起するものであり、その多光子励起によって発生した光音響波を選択的に検出できるものである。結果として焦点領域のみで局在的に励起された音響波のみを選択的に検出することが可能である。従って、本発明の光音響断層撮影装置により、測定したい領域以外の領域からの音響波の発生（例えば、吸収係数の大きい物質からなる構造物の表面からの信号）を防止することができ、高分解能を維持したまま試料のより深い領域の観察を行うことが可能となる。
【００１４】
なお、上記パルスレーザ照射手段としては、波長 ７００ｎｍ〜２５００ｎｍである近赤外光パルスを照射可能なものを用いることが望ましい。図２に示すように、近赤外領域の光はメラニンや水による吸収が少なく生体内における減衰が起こりにくいため、励起光の浸透深度を大きくすることができ、深部領域の高解像度観察を可能とする上記本発明の利点を一層発揮させることができる（図２：オレゴンメディカルセンターのウェブサイトｈｔｔｐ：／／ｏｍｌｃ．ｏｇｉ．ｅｄｕ／ｓｐｅｃｔｒａ／より）。ここで、例えば、８００ｎｍの波長を有する近赤外パルスレーザを生体に集光照射した場合、非線形光学効果による２光子励起により、焦点領域のみにおいて４００ｎｍ付近に吸収を持つ物質（例えば、酸化ヘモグロビン又は還元ヘモグロビン）が励起される。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明に係る光音響断層撮影装置の一実施例を示す模式図。
【図２】酸化ヘモグロビン、還元ヘモグロビン、メラニンの吸光モル係数の波長特性、及び水の吸光係数の波長特性を示すグラフ。
【図３】本発明に係る試験例１で使用した（Ａ）1光子吸収色素（ＩＲＡ９８０ＢＴ）と（Ｂ）２光子吸収色素（ローダミンＢ）の吸収スペクトル。
【図４】本発明に係る試験例1におけるシミュレーションにより求められた（Ａ）1光子吸収色素（ＩＲＡ９８０ＢＴ、飽和溶液の１／５１２）と（Ｂ）2光子吸収色素（ローダミンＢ）の光音響信号時間波形とそのパワースペクトル。
【図５】本研究に係る試験例１において実験により得られた1光子吸収色素（ＩＲＡ９８０ＢＴ、飽和溶液の１／５１２）と2光子吸収色素（ローダミンＢ）のパワースペクトル。
【図６】本発明に係る試験例２における1光子励起色素（ＩＲＡ９８０ＢＴ）（上段）、2光子励起色素（ローダミンＢ）（中段）、１光子吸収色素と２光子吸収色素両方を混合させた溶液（下段）で満たしたガラスキャピラリーの周波数フィルターを用いた断面像の測定例を示す図。
【図７】本発明に係る光音響断層撮影装置の一実施例を示す模式図。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明を実施するための形態について実施例に基づいて説明する。図１は、本発明の一実施例に係る光音響断層撮影装置の概略構成を示す図である。本実施例の光音響断層撮影装置は、近赤外パルス光源１０と、レーザ走査部１１、レーザ光を被測定体１５に照射するための照射光学系、音響トランスデューサ１８、信号増幅部１９、信号処理部２２、及び上記各部を制御するための制御部２１で構成された。なお、上記信号処理部２２及び制御部２１は所定のソフトウェアを搭載したパーソナルコンピュータ２０（図中では「ＰＣ」と略す）によって具現化され、このＰＣ２０にはモニタを備えた表示部２３が接続されている。
【００１７】
近赤外パルス光源１０としては、例えば、チタンサファイアレーザ、ＹＡＧレーザ等の近赤外の光パルスを生成可能なものを使用する。上記照射光学系は、パルス光を集光して被測定体１５に照射するための対物レンズ１４と、近赤外パルス光源１０から出射されたパルス光を対物レンズ１４に入射させるための反射鏡１３とを備えた顕微鏡１２によって具現化される。顕微鏡１２には、更に、被測定体１５を載置するためのステージ１６及びステージ１６を駆動するためのステージ駆動部１７が設けられており、ステージ駆動部１７によってステージ１６を上下に移動させることにより、レーザ光の焦点位置を光軸方向（すなわち図中のＺ軸方向）に走査することができる。
【００１８】
レーザ走査部１１は、上記顕微鏡１２に付設されるものであり、レーザ走査部１１の内部に設けられた可動式ミラー（図示略）を駆動することにより被測定体１５に照射されるパルス光をその光軸方向と直交する面内（すなわち、図中のＸ軸及びＹ軸方向）において走査するためのものである。なお、このようなレーザ走査部１１を設ける代わりに、上記ステージ１６をＸＹ軸方向に移動可能な構成とすることで、被測定体１５に対するパルス光の焦点位置をＸＹ平面内で走査できるようにしてもよい。
【００１９】
音響トランスデューサ１８は、パルス光の吸収によって被測定体１５内部から放出される音響波を集音して電気信号に変換する圧電素子から成り、該音響トランスデューサ１８からの電気信号は信号増幅部１９で増幅され、信号処理部２２においてデジタル信号に変換される。
【００２０】
この音響トランスデューサ１８は、様々な周波数帯域をもつ音響トランスデューサの組み合わせでもよい。様々な音響トランスデューサからの電気信号は信号増幅部１９で増幅され、信号処理部２２においてデジタル信号に変換される。
【００２１】
上記信号処理部２２は、信号増幅部１９から送出される音響波の強度情報、周波数情報と、該音響波の発生位置情報、すなわちレーザ走査部１１から送出されるパルス光のＸ軸及びＹ軸方向の焦点位置情報と、ステージ駆動部１７から送出されるパルス光のＺ軸方向の焦点位置情報とを受信して、デジタル化し、これらの情報に基づいて所定の演算を行うことにより被測定体１５内部の物質分布を示す３次元画像データを生成するものである。更に、該信号処理部２２では、生成された３次元画像データを基に被測定体１５の任意の断面を表した２次元画像（断層像）が生成され、表示部２３のモニタ上に表示される。
【００２２】
上記構成の光音響断層撮影装置を用いて生体の断層画像を撮影する際には、まず、近赤外パルス光源１０から所定の間隔でパルス光を出射させて被測定体１５に照射する。このとき、近赤外パルス光源１０から出射されたパルス光はレーザ走査部１１を経て上記顕微鏡１２に設けられた反射鏡１３で反射され、対物レンズ１４で集光されてステージ１６上に載置された被測定体１５に照射される。これにより、被測定体１５の内部では、近赤外パルスによる多光子励起により焦点領域のみにおいて音響波が発生する。焦点位置で発生した音響波は生体内を伝播し音響トランスデューサ１８によって検出され、該検出信号が信号増幅部１９を経て信号処理部２２に送出される。
【００２３】
ここで、レーザ走査部１１を用いてパルス光の焦点位置をＸ軸及びＹ軸方向に走査しながら上記のようなパルス光の照射及び音響波の検出を行うことで、被測定体１５内の所定の深さ位置におけるＸＹ平面の２次元画像を撮影することができ、更に、ステージ駆動部１７を用いてパルス光の焦点位置をＺ軸方向（すなわち被測定体１５の深さ方向）に変化させながらこのような２次元画像を複数枚撮影することで、被測定体１５内部の３次元データを取得することができる。
【００２４】
以上のような、本実施例の光音響断層撮影装置によれば、近赤外光パルスによる多光子励起により焦点領域から局在的に音響波を発生させ、選択的に検出することができるため、目的外の領域からの光音響信号の発生を防止し、空間分解能を低下させることなく深部領域の観察を行うことが可能となる。
【００２５】
以下の試験例１に示されるように多光子励起と1光子励起の光音響信号に含まれる周波数成分は違うので、光音響信号の周波数解析を行うことにより、多光子励起のみによる光音響信号を取り出すことが可能である。そのことにより、表面で強く起こる1光子吸収による信号を効率よく取り除くことができ、よりコントラスト高く、生体深部の情報を直接取り出すことが可能となる。
【００２６】
また、近赤外パルス光により励起される２光子吸収物質を被測定体に導入すれば、近赤外光により２光子吸収が励起される物質を含まない被測定体の場合でも可視化することが可能となる。
【００２７】
（試験例１）（Ａ）１光子励起による光音響波の周波数成分と（Ｂ）２光子励起による光音響波の周波数成分の違いをシミュレーションにより行った（図４）。被測定体として吸収色素（（Ａ）ＩＲＡ９８０ＢＴと（Ｂ）ローダミンＢ（吸収スペクトルを図３（出典：オレゴンメディカルセンターのウェブサイトｈｔｔｐ：／／ｏｍｌｃ．ｏｇｉ．ｅｄｕ／ｓｐｅｃｔｒａ／、Ｅｘｉｔｏｎ社のウェブサイト）に示す））溶液を、使用波長としては１０６４ｎｍを仮定した。本計算は光の吸収量の深さ依存性によって発生する音波の波形が記述され、その音波波形のフーリエ変換により音波のスペクトルを計算している。また２光子励起による光音響波の周波数成分は、レーザビームをガウシアンビームと仮定し、光強度の２乗で光音響波が発生すると仮定し、音響波のスペクトルを計算している。この結果からわかるように、（Ａ）１光子励起による光音響波の場合（例えば、ＩＲＡ９８０ＢＴのような１０６４ｎｍに１光子の吸収ピークがある場合）と（Ｂ）２光子励起による光音響波の場合（例えば、ローダミンＢのような５３２ｎｍに吸収ピークがある場合）を比べると、２光子励起による光音響波のほうが、高周波の成分が発生していることがわかる。図５に示す実験により得られた１光子励起と２光子励起により発生する光音響波の周波数成分も同様に、シミュレーション結果と同じ傾向があることがわかる。
【００２８】
（試験例２）被測定体として吸収色素（ローダミンＢとＩＲＡ９８０ＢＴ）溶液で満たしたガラスキャピラリー（ＴＯＨＯ社製、外径３ｍｍ、内径２．４ｍｍ）の断面を従来法である多光子励起光音響断層撮影法（全周波数選択）と本発明である周波数解析を用いた多光子励起光音響断層撮影法（周波数選択あり）によって測定した（図６）。使用波長は１０６４ｎｍ。上段は1光子吸収を起こす色素ＩＲＡ９８０ＢＴ（Ｅｘｉｔｏｎ社製）のエタノール溶液の場合、中段は２光子吸収を起こす色素ローダミンＢ（Ｓｉｇｍａ社製）のエタノール溶液の場合、下段は２光子吸収を示す色素（ローダミンＢ）と１光子吸収を示す色素（ＩＲＡ９８０ＢＴ）の両方を入れたガラスキャピラリーの断面を測定したものである。左側の列はすべての周波数成分を用いて画像を作成した場合（従来法）で、中央の列は０−１ＭＨｚの周波数を用いて画像を作成した場合、１−１０ＭＨｚの周波数を用いて画像を作成した場合を示している。この図６の上段と中段の比較から見てわかるように１光子励起光音響の場合に比べて、２光子励起光音響の場合は、ガラスキャピラリーの断面がコントラストよく捉えられていることがわかる。また、周波数に関して高周波の成分のみから画像を構築したほうが断面をコントラストよく捉えられていることがわかる。このように周波数解析を行うことにより、コントラストの向上が可能であり、１光子と２光子吸収色素を混合した場合（図６下段）でも周波数選択をすることによりコントラストの向上が得られる。
【００２９】
このように、１光子励起による光音響波の周波数成分が多光子励起によるものと違うことが理論計算から導出され、実験においても高周波成分を抜き出すことにより、多光子励起による光音響波だけを抜き出すことができ、コントラストの向上が可能である。
【００３０】
従って、本実施例の光音響断層撮影装置は、特に毛細血管や小動静脈のイメージング、組織や臓器の深部構造の測定等に好適に用いることができる。
【００３１】
なお、被対象物としては、近赤外パルスレーザにより多光子励起されるものであればどのようなものでも良いが、特に血液成分が望ましい。例えば、酸化ヘモグロビンと還元ヘモグロビンを被対象物とすることにより、酸化ヘモグロビンと還元ヘモグロビンの２光子吸収のピークの違い（図３参照）を利用して脳内血中酸素濃度分布を測定し、脳の働きをみるような機能イメージングが可能となる。具体的には、酸化ヘモグロビンの１光子吸収ピーク波長の２倍の波長を持つレーザをＸＹＺ方向にスキャンし、発生する光音響波強度の位置依存性を測定すると、酸化ヘモグロビンの多い血液から信号が強く発生するので、酸素濃度の高い血液を含む血管のみが可視化される。同様に、還元ヘモグロビンの１光子吸収の２倍の波長を持つレーザを用いて測定を行うと、酸素濃度の低い血液を多く含む血管のみが可視化できる。このように波長を変化させて測定を行うことにより血管内酸素濃度情報を含めた血管の画像化ができ、例えば、脳内の活性化部位の観察が可能となる。上記近赤外パルス光源としては、酸化ヘモグロビン及び還元ヘモグロビンを２光子励起可能な近赤外領域（７００ｎｍ 〜２５００ｎｍ）で波長可変なレーザを用いることが望ましい。また、上記近赤外パルスレーザとしては、多光子励起を行うことができるものであればどのようなものでもよいが、一般的には、ナノ秒パルスレーザ、ピコ秒パルスレーザ、あるいはフェムト秒パルスレーザが用いられる。
【００３２】
本実施例の光音響断層撮影装置は、焦点位置のみから発生する音響波を効率よく検出することができるので、血管のように非常に吸収の強い物質の断面を正確に捉えることができる。例えば、血管の収縮運動は心筋虚血が起こった場合に変化することが知られており、血管収縮運動は様々な病気と係っている。従って、生体深部における血管収縮運動の可視化は非常に重要である。
【００３３】
以上、実施例を用いて本発明の光音響断層撮影装置を実施するための最良の形態について説明したが、本発明は上記実施例に限定されるものではなく、本発明の範囲内で適宜変更が許容されるものである。
【００３４】
本発明の光音響断層撮影装置は、上記のような顕微鏡を利用した構成に限定されるものではなく、例えば、レーザ光の照射手段と音響波の検出手段を被測定体の表面に直接当接させることでレーザ光の照射及び音響波の受信を行うものとしてもよい。このような光音響断層撮影装置の構成の一例を図７に示す。なお、図１と同様の構成については同一符号を付し、適宜説明を省略する。ここでは、被測定体１５に当接させて用いられるプローブ３０の表面（被測定体１５と当接する面）に、近赤外パルス光源１０から導かれたパルス光を集光して被測定体１５に照射するための光照射部３１と、該パルス光の吸収により被測定体１５内で発生した音響波を検出するためのＰＶＤＦ（ポリフッ化ビニリデン樹脂）等の圧電素子から成る音響トランスデューサ１８とを配設した構成となっている。なお、光照射部３１はパルス光の光軸方向の焦点位置を変更可能なものとし、更に、プローブ内には光照射部３１によるパルス光の焦点位置をその光軸に直交する平面内で走査するための走査部３２を設け、被測定体１５内の２次元的又は３次元的な物質分布情報を取得できるものとすることが望ましい。なお、上記のような光照射部３１と音響トランスデューサ１８とをプローブ３０の表面に多数個配列させ、それらを切り換えて動作させることによりパルス光を走査する構成としてもよい。また、周波数感度曲線の違うトランスデューサを並べることにより、信号処理部２２における周波数選択の信号処理を簡略化する構成としてもよい。
【００３５】
上記のような光音響断層撮影装置の動作を、上述の脳機能イメージングの例で説明する。脳内の血中酸素濃度は脳活動と密接な関連があるため、その濃度分布情報を取得して画像化することにより脳の活動部位等を観察することができる。まず、プローブ３０を被測定体１５の頭部に当接させ、２光子励起により酸化ヘモグロビンを特異的に励起可能な波長のパルス光を光照射部３１から照射すると共に、該２光子励起によって焦点位置から発生する音響波を音響トランスデューサ１８で検出する。このとき、光照射部３１及び走査部３２によってパルス光の焦点位置を３次元的に走査することにより、脳の各部についてパルス光の照射及び音響波信号の検出が行われる。続いて、同様にして、２光子励起により還元ヘモグロビンを特異的に励起可能な波長におけるパルス光の照射及び音響波の検出を行い、以上により取得された酸化ヘモグロビン又は還元ヘモグロビン由来の音響波の検出信号とプローブ３０から送出されるパルス光の焦点位置情報に基づいて信号処理部２２で所定の演算を行う。これにより脳の各部における血中酸素濃度が算出され、該血中酸素濃度の分布を示す３次元画像データが生成される。更に、信号処理部２２は生成された３次元画像データに基づいて３次元画像又は脳の任意の断面を示した２次元画像を生成し、表示部２３のモニタ上に表示する。
【００３６】
なお、本発明の光音響断層撮影装置は、上記のような生体の観察に限定されるものではなく、例えば、半導体素子の製品検査など種々の試料の非破壊検査に応用可能である。この場合には、検出対象となる物質の多光子吸収に応じた適切な波長を使用することが望ましい。
【符号の説明】
【００３７】
１０…近赤外パルス光源
１１…レーザ走査部
１２…顕微鏡
１３…反射鏡
１４…対物レンズ
１５…被測定体
１６…ステージ
１７…ステージ駆動部
１８…音響トランスデューサ
１９…信号増幅部
２０…パーソナルコンピュータ
２１…制御部
２２…信号処理部
２３…表示部
３０…プローブ
３１…光照射部
３２…走査部
【特許請求の範囲】
【請求項１】
光音響効果を利用して被測定体内部の物質分布を可視化する光音響断層撮影装置において、
a）被測定体に対してパルスレーザを照射することで多光子励起を誘起するパルスレーザ照射手段と、
b）前記多光子励起により被測定体から発生した音響波だけを検出する音響波検出手段と、
c）前記音響波検出手段による検出結果を基に被測定体内部の吸収物質情報を画像化する信号処理手段と、
を有することを特徴とする光音響断層撮影装置。
【請求項２】
被測定体に対してパルスレーザを照射することによって発生した音響波の中から、当該音響波の周波数フィルタリング手段を用いることにより、多光子励起により被測定体から発生した音響波のみを検出することを特徴とする請求項１に記載の光音響断層撮影装置。
【請求項３】
前記周波数フィルタリング手段は、前記音響波の全周波数成分に対する閾値周波数より高い周波数成分の寄与率、あるいは、閾値周波数より低い周波数成分の寄与率を検出し、使用することを特徴とする請求項２に記載の光音響断層撮影装置。
【請求項４】
前記周波数フィルタリング手段は、前記音響波の全周波数成分に対する閾値周波数１と閾値周波数２の間の範囲内にある周波数成分の寄与率を検出し、使用することを特徴とする請求項２に記載の光音響断層撮影装置。
【請求項１】
光音響効果を利用して被測定体内部の物質分布を可視化する光音響断層撮影装置において、
a）被測定体に対してパルスレーザを照射することで多光子励起を誘起するパルスレーザ照射手段と、
b）前記多光子励起により被測定体から発生した音響波だけを検出する音響波検出手段と、
c）前記音響波検出手段による検出結果を基に被測定体内部の吸収物質情報を画像化する信号処理手段と、
を有することを特徴とする光音響断層撮影装置。
【請求項２】
被測定体に対してパルスレーザを照射することによって発生した音響波の中から、当該音響波の周波数フィルタリング手段を用いることにより、多光子励起により被測定体から発生した音響波のみを検出することを特徴とする請求項１に記載の光音響断層撮影装置。
【請求項３】
前記周波数フィルタリング手段は、前記音響波の全周波数成分に対する閾値周波数より高い周波数成分の寄与率、あるいは、閾値周波数より低い周波数成分の寄与率を検出し、使用することを特徴とする請求項２に記載の光音響断層撮影装置。
【請求項４】
前記周波数フィルタリング手段は、前記音響波の全周波数成分に対する閾値周波数１と閾値周波数２の間の範囲内にある周波数成分の寄与率を検出し、使用することを特徴とする請求項２に記載の光音響断層撮影装置。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公開番号】特開２０１１−４５５１４（Ｐ２０１１−４５５１４Ａ）
【公開日】平成２３年３月１０日（２０１１．３．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１９６２３７（Ｐ２００９−１９６２３７）
【出願日】平成２１年８月２７日（２００９．８．２７）
【出願人】（３０９０２９１４２）
【出願人】（３０９０２９７９５）
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年３月１０日（２０１１．３．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年８月２７日（２００９．８．２７）
【出願人】（３０９０２９１４２）
【出願人】（３０９０２９７９５）
【Ｆターム（参考）】
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