カリクレイン（１２）タンパク質、カリクレイン（１４）タンパク質およびカリクレイン（１５）タンパク質、ならびに、該タンパク質をコードする核酸は、内分泌腺ガン（特に卵巣ガン）の検出において特に適用される。カリクレイン（１２）タンパク質、カリクレイン（１４）タンパク質およびカリクレイン（１５）タンパク質、ならびに、該タンパク質をコードする核酸は、内分泌腺ガンの診断およびモニターリング（すなわち、内分泌腺ガンの進行または治療的処置をモニターすること）のための新しいバイオマーカーを構成する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者における内分泌腺ガンに関連するカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、ならびに／あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸を検出するための方法であって、
（ａ）サンプルを患者から得ること、
（ｂ）カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、ならびに／あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸をサンプルにおいて検出または同定すること、および
（ｃ）検出された量を、標準について検出された量と比較すること
を含む方法。
【請求項２】
患者が内分泌腺ガンに冒されているか、または内分泌腺ガンに対する素因を有するかを評価する方法であって、
（ａ）患者から得られたサンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸のレベル、および
（ｂ）コントロール被験者から得られた同じタイプのサンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸のレベル
を比較することを含み、
カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸のコントロール被験者由来の対応するレベルに対して、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸の著しく変化したレベルにより、患者が内分泌腺ガンに冒されているということが示される、方法。
【請求項３】
カリクレイン１４のレベルが、コントロールの正常な被験者に由来するレベルと比較され、正常な被験者に対するレベルに対してカリクレイン１４の上昇したレベルにより、患者が乳ガンまたは卵巣ガンに冒されているということが示される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
患者における内分泌腺ガンの進行をモニターするための方法であって、
（ａ）患者から得られたサンプルにおけるカリクレイン１２タンパク質、カリクレイン１４タンパク質および／またはカリクレイン１５タンパク質、あるいは、該タンパク質をコードする核酸を第１の時点において検出すること、
（ｂ）その後の時点において工程（ａ）を繰り返すこと、および
（ｃ）（ａ）および（ｂ）で検出されたレベルを比較し、それから、内分泌腺ガンの進行をモニターすること
を含む方法。
【請求項５】
内分泌腺ガンの攻撃性または無痛性を評価するための方法であって、
（ａ）患者サンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸のレベル、および
（ｂ）コントロールサンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸のレベル
を比較することを含み、
患者サンプルにおけるレベルと、コントロールサンプルにおけるレベルとの間における著しい差により、ガンが攻撃性または無痛性であるということが示される、方法。
【請求項６】
内分泌腺ガンが転移しているか、または、将来に転移する可能性があるかを決定するための方法であって、
（ａ）患者サンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸のレベル、および
（ｂ）コントロールサンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸の非転移性レベル
を比較することを含む、方法。
【請求項７】
被験者における卵巣ガン腫を診断およびモニターするための方法であって、被験者から得られたサンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５を測定することを含む方法。
【請求項８】
カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５が、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、あるいはその一部分と特異的に反応し得る抗体を使用して測定される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
内分泌腺ガンについて被験者をスクリーニングするための方法であって、（ａ）生物学的サンプルを被験者から得ること；（ｂ）前記サンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５の量を検出すること；および（ｃ）検出されたカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５の前記量を所定の標準と比較することを含み、標準のレベルと著しく異なるレベルのカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５が検出されることにより、内分泌腺ガンが示される、方法。
【請求項１０】
カリクレイン１４のレベルが正常なレベルと比較され、正常なサンプルと比較してサンプルにおけるカリクレイン１４の上昇したレベルにより、卵巣ガンまたは乳ガンが示される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
（ａ）被験者から得られた生物学的サンプルを、検出可能な物質で直接的または間接的に標識される、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５について特異的な第１の抗体、および、固定化されている、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５について特異的な第２の抗体とインキュベーションすること、
（ｂ）検出可能な物質を検出し、それにより、生物学的サンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５を定量すること、および
（ｃ）定量されたカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５を、所定の標準に対するレベルと比較すること
を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
被験者から得られたサンプルにおける内分泌腺ガンを診断およびモニターするための方法であって、サンプルから核酸、好ましくはｍＲＮＡを単離すること、および、サンプルにおけるＫＬＫ１２核酸、ＫＬＫ１４核酸および／またはＫＬＫ１５核酸を検出することを含む、方法。
【請求項１３】
標準またはコントロールと比較して、サンプルにおけるＫＬＫ１２核酸、ＫＬＫ１４核酸および／またはＫＬＫ１５核酸の異なるレベルの存在により、疾患、疾患段階および／または予後が示される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
被験者における卵巣ガンの存在または非存在を決定するための方法であって、（ａ）被験者から得られたサンプルを、ＫＬＫ１２、ＫＬＫ１４および／またはＫＬＫ１５にハイブリダイゼーションするオリゴヌクレオチドと接触させること；および（ｂ）ＫＬＫ１２、ＫＬＫ１４および／またはＫＬＫ１５にハイブリダイゼーションするポリヌクレオチドのレベルを、所定のカットオフ値に対して、サンプルにおいて検出し、それから、被験者における卵巣ガンの存在または非存在を決定することを含む、方法。
【請求項１５】
ポリヌクレオチドがｍＲＮＡであり、ポリヌクレオチドのレベルがポリメラーゼ連鎖反応によって検出される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ポリヌクレオチドがｍＲＮＡであり、ｍＲＮＡの量が、ＫＬＫ１２、ＫＬＫ１４および／またはＫＬＫ１５、あるいは、ＫＬＫ１２、ＫＬＫ１４および／またはＫＬＫ１５の相補体にハイブリダイゼーションするオリゴヌクレオチドプローブを用いるハイブリダイゼーション技術を使用して検出される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
（ａ）被験者から得られたサンプルを、ＫＬＫ１４またはＫＬＫ１５の一方または両方にハイブリダイゼーションするオリゴヌクレオチドと接触させること；および（ｂ）ＫＬＫ１４またはＫＬＫ１５の一方または両方にハイブリダイゼーションするポリヌクレオチドのレベルを、所定のカットオフ値に対して、サンプルにおいて検出し、それから、被験者における卵巣ガンの存在または非存在を決定すること
を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ＫＬＫ１４のｍＲＮＡおよびＫＬＫ１５のｍＲＮＡの一方または両方が、（ａ）サンプルからｍＲＮＡを単離し、該ｍＲＮＡを、ｃＤＮＡに変換するための試薬と一緒にすること；（ｂ）変換されたｃＤＮＡを、増幅反応試薬、ならびに、ＫＬＫ１４およびＫＬＫ１５の一方または両方にハイブリダイゼーションする核酸プライマーで処理して、増幅生成物を得ること；（ｄ）増幅生成物を分析して、ＫＬＫ１４のｍＲＮＡおよびＫＬＫ１５のｍＲＮＡの一方または両方の量を検出すること；および（ｅ）ｍＲＮＡの量を、類似する核酸プライマーを使用して得られる正常な組織および悪性の組織に対する予測値のパネルに対して検出された量と比較することによって検出される、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１９】
コントロールと比較して患者におけるＫＬＫ１４の上昇したレベルにより、早期段階の疾患（病期ＩまたはＩＩ）、最適な縮小化、より長い進行のない疾患生存および全生存が示され、かつ／または、被験者が化学療法に応答し得ることが示される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
コントロールと比較して患者におけるＫＬＫ１５の上昇したレベルにより、卵巣ガンが示される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
コントロールと比較して患者におけるＫＬＫ１５の上昇したレベルにより、低下した進行のない生存および全生存が示される、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
卵巣ガンを画像化するためのインビボ方法であって、
（ａ）ガンを画像化するための標識を有する、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５に結合する薬剤を患者に注射すること、
（ｂ）前記薬剤をインビボでインキュベーションし、ガンに関連するカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５に結合させること、および
（ｃ）ガンに局在化した標識の存在を検出すること
を含む、方法。
【請求項２３】
内分泌腺ガンに寄与する試験化合物の潜在的可能性を評価する方法であって、
（ａ）内分泌腺ガン疾患細胞の個々のアリコートを試験化合物の存在下および非存在下で維持すること、および
（ｂ）アリコートのそれぞれにおける、カリクレイン１２タンパク質、カリクレイン１４タンパク質および／またはカリクレイン１５タンパク質、あるいは、該タンパク質をコードする核酸のレベルを比較すること
を含み、
試験化合物の非存在下で維持されたアリコートに対して、試験化合物の存在下におけるカリクレイン１２タンパク質、カリクレイン１４タンパク質および／またはカリクレイン１５タンパク質、あるいは、該タンパク質をコードする核酸のレベルの著しい差により、試験化合物が、内分泌腺ガンに寄与する潜在的可能性を有するということが示される、方法。
【請求項２４】
患者における内分泌腺ガンを阻害するための試験薬剤の潜在的効力を評価するための方法であって、
（ａ）患者から得られ、試験薬剤に曝された第１のサンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、ならびに／あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸、ならびに、場合によっては他の内分泌腺ガンマーカーのレベル、および
（ｂ）患者から得られ、試験薬剤に曝されていない第２のサンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、ならびに、場合によっては他のマーカーのレベル
を比較することを含み、
第２のサンプルに対して、第１のサンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、ならびに／あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸、ならびに、場合によっては他のマーカーの発現レベルの著しい差により、試験薬剤が、患者における内分泌腺ガンを阻害するために潜在的に有効であるということが示される、方法。
【請求項２５】
患者における内分泌腺ガンを阻害するための治療の効力を評価するための方法であって、（ａ）治療の少なくとも一部を患者に施す前の患者から得られた患者由来のサンプルにおけるカリクレイン１２タンパク質、カリクレイン１４タンパク質および／またはカリクレイン１５タンパク質、あるいは、該タンパク質をコードする核酸のレベルと、（ｂ）治療後の患者から得られた第２のサンプルにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、あるいは、該タンパク質をコードする核酸のレベルとを比較することを含む、方法。
【請求項２６】
患者における内分泌腺ガンを阻害するための薬剤を同定または選択するための方法であって、
（ａ）サンプルを患者から得ること、
（ｂ）サンプルのアリコートを複数の試験薬剤の存在下で個々に維持すること、
（ｃ）それぞれのアリコートにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、ならびに／あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸、ならびに、場合によっては他の内分泌腺ガンマーカーを比較すること、および
（ｄ）カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、ならびに／あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸、ならびに、場合によっては他の内分泌腺ガンマーカーのレベルを、他の試験薬剤に対して、その試験薬剤を含有するアリコートにおいて変化させる試験薬剤の１つを選択すること、
を含む、方法。
【請求項２７】
患者における内分泌腺ガンを阻害する方法であって、
（ａ）疾患細胞を含むサンプルを患者から得ること、
（ｂ）サンプルのアリコートを複数の試験薬剤の存在下で個々に維持すること、
（ｃ）それぞれのアリコートにおけるカリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、ならびに／あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸のレベルを比較すること、および
（ｄ）カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５、ならびに／あるいは、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５をコードする核酸のレベルを、他の試験薬剤に対して、その試験薬剤を含有するアリコートにおいて変化させる試験薬剤の少なくとも１つを患者に投与すること、
を含む、方法。
【請求項２８】
サンプルが血清を含む、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
内分泌腺ガンが卵巣ガンである、前記請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
カリクレイン１２タンパク質、カリクレイン１４タンパク質および／またはカリクレイン１５タンパク質、あるいは、カリクレイン１２タンパク質、カリクレイン１４タンパク質および／またはカリクレイン１５タンパク質に結合する薬剤、あるいは、ＫＬＫ１２、ＫＬＫ１４および／またはＫＬＫ１５、あるいは、ＫＬＫ１２、ＫＬＫ１４および／またはＫＬＫ１５にハイブリダイゼーションするプローブまたはプライマーを含む診断組成物。
【請求項３１】
卵巣ガンを処置するための医薬組成物を調製する際の、カリクレイン１２、カリクレイン１４および／またはカリクレイン１５の使用。
【請求項３２】
前記請求項のいずれかに記載されるような方法を行うためのキット。
【請求項３３】
患者における卵巣ガンまたは乳ガンの存在を決定するためのキットであって、カリクレイン１４に特異的に結合する結合性薬剤の既知量を含み、結合性薬剤が検出可能な物質を含むか、または、検出可能な物質に直接的もしくは間接的に結合する、キット。
【請求項３４】
患者における卵巣ガンの存在を決定するためのキットであって、ＫＬＫ１４およびＫＬＫ１５の一方または両方に結合するオリゴヌクレオチドの既知量を含み、オリゴヌクレオチドが検出可能な物質で直接的または間接的に標識される、キット。
【請求項３５】
患者における卵巣ガンを阻害するための複数の薬剤のそれぞれの好適性を評価するためのキットであって、カリクレイン１４、ＫＬＫ１４および／またはＫＬＫ１５を検出するための複数の薬剤および試薬を含む、キット。
【請求項３６】
薬物発見業務を行う方法であって、
（ａ）患者における内分泌腺ガンを阻害する薬剤を同定するために、請求項２６に記載される方法を提供すること、
（ｂ）動物における効力および毒性について、工程（ａ）において同定された薬剤またはそのさらなるアナログの治療プロファイリングを行うこと、および
（ｃ）許容され得る治療プロフィルを有するとして工程（ｂ）において同定された１つ以上の薬剤を含む医薬用調製物を配合すること
を含む、方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１５】

【図１６】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図１３】

【図１４】

【図１７】

【公表番号】特表２００６−５０００３６（Ｐ２００６−５０００３６Ａ）
【公表日】平成１８年１月５日（２００６．１．５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５３８６１４（Ｐ２００４−５３８６１４）
【出願日】平成１５年９月２６日（２００３．９．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００３／００１４７８
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０２９２８５
【国際公開日】平成１６年４月８日（２００４．４．８）
【出願人】（５０５１０９８７５）マウント　シナイ　ホスピタル (4)
【Ｆターム（参考）】