小脳由来成長因子、及びそれに関連する利用
【課題】
脊椎動物の分化組織の秩序ある空間構成の形成及び維持に幅広く関わるものであり、試験管内及び生体内の両方において様々な脊椎動物組織のアレイを作成及び／又は維持するために用いることが可能で新規なｅｒｂＢレセプタ・リガンド族（たんぱく質）を提供する。
【解決手段】
本発明は、「小脳由来成長因子」又は「ＣＤＧＦ」と呼称する新規なｅｒｂＢレセプタ・リガンドの発見に関し、このたんぱく質は、明らかに、脊椎動物の分化組織の秩序ある空間構成の形成及び維持に幅広く関わるものであり、また、試験管内及び生体内の両方において様々な脊椎動物組織のアレイを作成及び／又は維持するために用いることができるものである。
脊椎動物の分化組織の秩序ある空間構成の形成及び維持に幅広く関わるものであり、試験管内及び生体内の両方において様々な脊椎動物組織のアレイを作成及び／又は維持するために用いることが可能で新規なｅｒｂＢレセプタ・リガンド族（たんぱく質）を提供する。
【解決手段】
本発明は、「小脳由来成長因子」又は「ＣＤＧＦ」と呼称する新規なｅｒｂＢレセプタ・リガンドの発見に関し、このたんぱく質は、明らかに、脊椎動物の分化組織の秩序ある空間構成の形成及び維持に幅広く関わるものであり、また、試験管内及び生体内の両方において様々な脊椎動物組織のアレイを作成及び／又は維持するために用いることができるものである。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
分離された及び／又は組換え体であるＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２】
配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すアミノ酸配列又はその一部分に対して少なくとも７０パーセント相同のＣＤＧＦアミノ酸配列を含むと共に、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項３】
配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すＥＧＦ様ドメインに相当するＥＧＦ様ドメインを含むと共に、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項４】
哺乳類のＣＤＧＦ遺伝子に対して緊縮条件下で交雑する核酸により符号化されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項５】
配列同定番号第２番、第４番又は第７番のいずれかの示すＣＤＧＦたんぱく質に特異的な抗体に対して交差反応性のアミノ酸配列を含むと共に、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項６】
ｅｒｂＢレセプタに特異的に結合する、請求項１又は４のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項７】
ｅｒｂＢレセプタがｅｒｂＢ４である、請求項２、３、５又は６のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項８】
ｅｒｂＢ型レセプタを発現する細胞の細胞活性を変更する、請求項２、３、５又は６のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項９】
前記細胞の増殖、分化、細胞対細胞の接触及び生存率のうち少なくとも一つを変更する、請求項８に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１０】
前記ｅｒｂＢ型レセプタの媒介する細胞内シグナル形質導入経路を刺激する、請求項８に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１１】
前記ｅｒｂＢ型レセプタの媒介する細胞内シグナル形質導入経路に拮抗する、請求項８に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１２】
前記ｅｒｂＢ型レセプタのリン酸化を誘発する、請求項２、３、５又は６のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１３】
可溶性、かつ約７８乃至８３ｋＤの分子重量を有する、請求項１乃至５のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１４】
可溶性、かつ約３１乃至３６ｋＤの分子重量を有する、請求項１乃至５のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１５】
前記ＣＤＧＦ遺伝子がヒトＣＤＧＦ遺伝子である、請求項４に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１６】
前記ヒトＣＤＧＦ遺伝子が、配列同定番号第６番の示すコーディング配列を含む、請求項１５に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１７】
配列同定番号第１番、第５番及び第６番のいずれかの表す核酸配列に緊縮条件下で交雑する核酸により符号化される、請求項４に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１８】
配列同定番号第１番のヌクレオチド１８０乃至６９５又はヌクレオチド８７０乃至９２９の少なくとも一つに相当する核酸配列に緊縮条件下で交雑する核酸により符号化される、請求項４に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１９】
前記ＥＧＦ様ドメインが、配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すＥＧＦ様ドメインに対して少なくとも７０パーセント相同である、請求項３に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２０】
前記ＥＧＦ様ドメインが、一般式ＣＮＥＴＡＫＳＹＣＶＮＧＧＶＣＹＹＩＥＧＩＮＱＬＳＣＫＣＰＸＧＸＸＧＸＲＣで表されるアミノ酸を含む、請求項３に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２１】
前記ＣＤＧＦアミノ酸配列が、配列同定番号第２番のアミノ酸残基１乃至３１４に相当する配列又は分泌シグナルペプチドを欠いたその配列を含む、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２２】
前記ＣＤＧＦアミノ酸配列が、配列同定番号第４番のアミノ酸残基１乃至３３０に相当する配列又は分泌シグナルペプチドを欠いたその配列を含む、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２３】
炭水化物成分を含むように翻訳後に変更された、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２４】
ＣＤＧＦポリペプチド配列に加えて、前記ＣＤＧＦポリペプチドに関係のないアミノ酸配列を有する第二のポリペプチド配列を更に含む融合たんぱく質である、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２５】
前記融合たんぱく質が、前記融合たんぱく質の存在を検出する検出可能な標識として、又は、前記融合たんぱく質を固定するマトリックス結合ドメインとして働くポリペプチドを、第二のポリペプチド配列として含む、請求項２４に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２６】
自然に結び付いたその他の細胞たんぱく質を概ね持たない、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２７】
組換えポリペプチドである、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２８】
哺乳類を源とする、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２９】
ヒトを源とする、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項３０】
請求項１乃至５のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチドのエピトープに対して特異的反応性を有する抗体製剤。
【請求項３１】
組換えＣＤＧＦポリペプチドを符号化するポリペプチド・コーディング配列を含む概ね純粋な核酸。
【請求項３２】
前記ＣＤＧＦポリペプチドが、配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すアミノ酸配列又はその一部分に対して少なくとも７０％相同のＣＤＧＦアミノ酸配列を含み、かつ、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３３】
前記ＣＤＧＦポリペプチドが、配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すＥＧＦ様ドメインに相当するＥＧＦ様ドメインを含むと共に、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３４】
前記ポリペプチド・コーディング配列が、哺乳類のＣＤＧＦ遺伝子に対して緊縮条件下で交雑するＣＤＧＦコーディング配列を含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３５】
前記ＣＤＧＦポリペプチドが、配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの示すＣＤＧＦたんぱく質に特異的な抗体に対して交差反応性のアミノ酸配列を含むと共に、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３６】
前記ＣＤＧＦポリペプチドがｅｒｂＢレセプタに特異的に結合する、請求項３１又は３４のいずれかに記載の核酸。
【請求項３７】
前記ｅｒｂＢレセプタがｅｒｂＢ４である、請求項３２、３３、３５又は６３のいずれかに記載の核酸。
【請求項３８】
前記ＣＤＧＦ遺伝子がヒトＣＤＧＦ遺伝子である、請求項３４に記載の核酸。
【請求項３９】
前記ヒトＣＤＧＦ遺伝子が配列同定番号第６番の示すコーディング配列を含む、請求項３８に記載の核酸。
【請求項４０】
前記ＣＤＧＦコーディング配列が、配列同定番号第１番、第５番及び第６番のいずれかの表す核酸配列に緊縮条件下で交雑する、請求項３４に記載の核酸。
【請求項４１】
前記ＣＤＧＦコーディング配列が、配列同定番号第１番のヌクレオチド１８０乃至６９５又はヌクレオチド８７０乃至９２９の少なくとも一つに相当する核酸配列に緊縮条件下で交雑する、請求項３４に記載の核酸。
【請求項４２】
前記ＥＧＦ様ドメインが、配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すＥＧＦ様ドメインに対して少なくとも７０パーセント相同である、請求項３３に記載の核酸。
【請求項４３】
前記ＥＧＦ様ドメインが、一般式ＣＮＥＴＡＫＳＹＣＶＮＧＧＶＣＹＹＩＥＧＩＮＱＬＳＣＫＣＰＸＧＸＸＧＸＲＣで表されるアミノ酸を含む、請求項３３に記載の核酸。
【請求項４４】
前記ＣＤＧＦポリペプチドが、配列同定番号第２番のアミノ酸残基１乃至３１４に相当するＣＤＧＦアミノ酸配列、又は分泌シグナルペプチドを欠いたその配列を含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４５】
前記ＣＤＧＦポリペプチドが、配列同定番号第４番のアミノ酸残基１乃至３３０に相当するＣＤＧＦアミノ酸配列、又は分泌シグナルペプチドを欠いたその配列を含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４６】
配列同定番号第１番、第３番又は第６番の少なくとも６０の連続したヌクレオチドが表す配列を有する核酸プローブに緊縮条件下で交雑する、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４７】
前記核酸を前記組換えＣＤＧＦポリペプチドの発現ベクタとして用いるのに適切なものにするために、前記ポリペプチドコーディング配列に操作可能に結び付けられた転写調節配列を更に含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４８】
請求項３１に記載の前記核酸を含む、原核細胞及び真核細胞のうち少なくとも一方において複製を作ることが可能である発現ベクタ。
【請求項４９】
請求項４８に記載の発現ベクタで形質移入させた、組換えＣＤＧＦポリペプチドを発現する宿主細胞。
【請求項５０】
請求項４９に記載の前記細胞を細胞培地で培養して組換えＣＤＧＦポリペプチドを発現させ、前記細胞培養物から前記組換えＣＤＧＦポリペプチドを分離するステップを含む、組換えＣＤＧＦポリペプチドを生成する方法。
【請求項５１】
請求項３１に記載の前記核酸を含む移植遺伝子を持つか、あるいは、一つ又は複数の内生ＣＤＧＦ遺伝子が破壊された、組換えにより操作された細胞を含む遺伝子導入動物。
【請求項５２】
（ｉ）請求項１３１７の前記核酸を含むと共に、真核細胞において前記組換えＣＤＧＦポリペプチドの発現を起こさせるために転写調節配列に操作可能に結び付けられた遺伝子構造物であって、前記組換えＣＤＧＦポリペプチドはｅｒｂＢ型レセプタへの結合能力を特徴とするものである、遺伝子構造物と、（ｉｉ）前記遺伝子構造物を細胞に運搬すると共に、前記細胞に前記遺伝子構造物で形質移入させる遺伝子運搬組成物とを含む、組換え体形質移入系。
【請求項５３】
前記遺伝子運搬組成物が、組換えウィルス粒子、リポソーム、及びポリ−陽イオン性核酸結合物質のいずれかから選択される、請求項５２に記載の組換え体形質移入系。
【請求項５４】
配列同定番号第１番、第３番又は第６番のセンス又はアンチセンス配列、あるいはその自然発生変異体の少なくとも２０の連続したヌクレオチドに緊縮条件下で交雑するヌクレオチド配列の一領域を含む、概ね精製されたオリゴヌクレオチドを含むプローブ／プライマ。
【請求項５５】
配列同定番号第１番、第３番又は第６番のセンス又はアンチセンス配列、あるいはその自然発生変異体の少なくとも６０の連続したヌクレオチドに緊縮条件下で交雑する、請求項５４に記載のプローブ／プライマ。
【請求項５６】
配列同定番号第１番のヌクレオチド１８０乃至６９５又はヌクレオチド８７０乃至９２９の少なくとも一つに相当するセンス又はアンチセンス核酸配列に緊縮条件下で交雑する、請求項５４に記載のプローブ／プライマ。
【請求項５７】
付着した検出可能な標識群を更に含む、請求項５４に記載のプローブ／プライマ。
【請求項５８】
細胞の試料中で、ＣＤＧＦたんぱく質を符号化する核酸のレベルを測定する請求項５４に記載のプローブ／プライマを含む、ＣＤＧＦｍＲＮＡの写しを含む細胞を検出するテスト器具。
【請求項５９】
ｉ．ＣＤＧＦポリペプチド、ｅｒｂＢレセプタたんぱく質、及びテスト化合物を化合させるステップと、ｉｉ．前記ＣＤＧＦポリペプチド及び前記ｅｒｂＢレセプタたんぱく質を含む錯体の形成を検出するステップとを含み、前記テスト化合物がある状態のときの前記錯体の形成の変化は、ＣＤＧＦとｅｒｂＢレセプタとの間の相互作用の調節物質であることを示すものである、ＣＤＧＦポリペプチドのｅｒｂＢ型レセプタとの結合を調節するテスト化合物をスクリーニングする検定。
【請求項６０】
前記ｅｒｂＢ型レセプタがｅｒｂＢ４レセプタである、請求項５９に記載の検定。
【請求項６１】
好ましくない細胞増殖又は分化を特徴とする疾患の危険性のある、一つの細胞又は複数の細胞を判別する診断的検定であって、（ｉ）ＣＤＧＦたんぱく質を符号化する遺伝子の異常な変更又は変異、（ｉｉ）前記遺伝子の誤発現、（ｉｉｉ）異常なレベルの可溶性ＣＤＧＦたんぱく質、のうち少なくとも一つを特徴とする遺伝子の病変があるかないかを、細胞試料中で検出するステップを含む、検定。
【請求項６２】
前記病変の検出が、ｉ．前記遺伝子のセンス又はアンチセンス配列、あるいはその自然発生変異体、あるいは前記ＣＤＧＦ遺伝子に自然に結び付いた５’又は３’フランキング配列に交雑するヌクレオチド配列の一領域を含む核酸を含む診断用プローブを提供するステップと、ｉｉ．前記プローブを前記細胞試料の核酸に化合させるステップと、ｉｉｉ．前記遺伝子からの一つ又は複数のヌクレオチドの削除、前記遺伝子への一つ又は複数のヌクレオチドの追加、前記遺伝子の一つ又は複数のヌクレオチドの置換、前記遺伝子の全部又は一部の総体的染色体再配列、前記遺伝子のｍＲＮＡ写しレベルの総体的変化、又は前記遺伝子のｍＲＮＡ写しの非野生型スプライシング・パターン、のうち少なくとも一つの存在を、前記細胞核酸への前記プローブの交雑により、検出するステップとを含む、請求項６１に記載の検定。
【請求項６３】
前記プローブの交雑が、前記プローブ及び細胞核酸をポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）にさらすステップと、増幅された生成物中に異常を検出するステップとを更に含む、請求項６２に記載の検定。
【請求項６４】
前記プローブの交雑が、前記プローブ及び細胞核酸を結紮連鎖反応（ＬＣＲ）にさらすステップと、増幅された生成物中に異常を検出するステップとを更に含む、請求項６２に記載の検定。
【請求項６５】
遺伝子の病変の検出が、組織試料の細胞に関連する、及び／又は、体液中の可溶性たんぱく質として、ＣＤＧＦたんぱく質、又はその一部分があるかないかを検出するステップを含む、請求項６１に記載の検定。
【請求項１】
分離された及び／又は組換え体であるＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２】
配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すアミノ酸配列又はその一部分に対して少なくとも７０パーセント相同のＣＤＧＦアミノ酸配列を含むと共に、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項３】
配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すＥＧＦ様ドメインに相当するＥＧＦ様ドメインを含むと共に、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項４】
哺乳類のＣＤＧＦ遺伝子に対して緊縮条件下で交雑する核酸により符号化されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項５】
配列同定番号第２番、第４番又は第７番のいずれかの示すＣＤＧＦたんぱく質に特異的な抗体に対して交差反応性のアミノ酸配列を含むと共に、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項６】
ｅｒｂＢレセプタに特異的に結合する、請求項１又は４のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項７】
ｅｒｂＢレセプタがｅｒｂＢ４である、請求項２、３、５又は６のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項８】
ｅｒｂＢ型レセプタを発現する細胞の細胞活性を変更する、請求項２、３、５又は６のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項９】
前記細胞の増殖、分化、細胞対細胞の接触及び生存率のうち少なくとも一つを変更する、請求項８に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１０】
前記ｅｒｂＢ型レセプタの媒介する細胞内シグナル形質導入経路を刺激する、請求項８に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１１】
前記ｅｒｂＢ型レセプタの媒介する細胞内シグナル形質導入経路に拮抗する、請求項８に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１２】
前記ｅｒｂＢ型レセプタのリン酸化を誘発する、請求項２、３、５又は６のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１３】
可溶性、かつ約７８乃至８３ｋＤの分子重量を有する、請求項１乃至５のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１４】
可溶性、かつ約３１乃至３６ｋＤの分子重量を有する、請求項１乃至５のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１５】
前記ＣＤＧＦ遺伝子がヒトＣＤＧＦ遺伝子である、請求項４に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１６】
前記ヒトＣＤＧＦ遺伝子が、配列同定番号第６番の示すコーディング配列を含む、請求項１５に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１７】
配列同定番号第１番、第５番及び第６番のいずれかの表す核酸配列に緊縮条件下で交雑する核酸により符号化される、請求項４に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１８】
配列同定番号第１番のヌクレオチド１８０乃至６９５又はヌクレオチド８７０乃至９２９の少なくとも一つに相当する核酸配列に緊縮条件下で交雑する核酸により符号化される、請求項４に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項１９】
前記ＥＧＦ様ドメインが、配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すＥＧＦ様ドメインに対して少なくとも７０パーセント相同である、請求項３に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２０】
前記ＥＧＦ様ドメインが、一般式ＣＮＥＴＡＫＳＹＣＶＮＧＧＶＣＹＹＩＥＧＩＮＱＬＳＣＫＣＰＸＧＸＸＧＸＲＣで表されるアミノ酸を含む、請求項３に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２１】
前記ＣＤＧＦアミノ酸配列が、配列同定番号第２番のアミノ酸残基１乃至３１４に相当する配列又は分泌シグナルペプチドを欠いたその配列を含む、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２２】
前記ＣＤＧＦアミノ酸配列が、配列同定番号第４番のアミノ酸残基１乃至３３０に相当する配列又は分泌シグナルペプチドを欠いたその配列を含む、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２３】
炭水化物成分を含むように翻訳後に変更された、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２４】
ＣＤＧＦポリペプチド配列に加えて、前記ＣＤＧＦポリペプチドに関係のないアミノ酸配列を有する第二のポリペプチド配列を更に含む融合たんぱく質である、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２５】
前記融合たんぱく質が、前記融合たんぱく質の存在を検出する検出可能な標識として、又は、前記融合たんぱく質を固定するマトリックス結合ドメインとして働くポリペプチドを、第二のポリペプチド配列として含む、請求項２４に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２６】
自然に結び付いたその他の細胞たんぱく質を概ね持たない、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２７】
組換えポリペプチドである、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２８】
哺乳類を源とする、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項２９】
ヒトを源とする、請求項１に記載のＣＤＧＦポリペプチド。
【請求項３０】
請求項１乃至５のいずれかに記載のＣＤＧＦポリペプチドのエピトープに対して特異的反応性を有する抗体製剤。
【請求項３１】
組換えＣＤＧＦポリペプチドを符号化するポリペプチド・コーディング配列を含む概ね純粋な核酸。
【請求項３２】
前記ＣＤＧＦポリペプチドが、配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すアミノ酸配列又はその一部分に対して少なくとも７０％相同のＣＤＧＦアミノ酸配列を含み、かつ、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３３】
前記ＣＤＧＦポリペプチドが、配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すＥＧＦ様ドメインに相当するＥＧＦ様ドメインを含むと共に、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３４】
前記ポリペプチド・コーディング配列が、哺乳類のＣＤＧＦ遺伝子に対して緊縮条件下で交雑するＣＤＧＦコーディング配列を含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３５】
前記ＣＤＧＦポリペプチドが、配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの示すＣＤＧＦたんぱく質に特異的な抗体に対して交差反応性のアミノ酸配列を含むと共に、ｅｒｂＢ型レセプタに特異的に結合する、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３６】
前記ＣＤＧＦポリペプチドがｅｒｂＢレセプタに特異的に結合する、請求項３１又は３４のいずれかに記載の核酸。
【請求項３７】
前記ｅｒｂＢレセプタがｅｒｂＢ４である、請求項３２、３３、３５又は６３のいずれかに記載の核酸。
【請求項３８】
前記ＣＤＧＦ遺伝子がヒトＣＤＧＦ遺伝子である、請求項３４に記載の核酸。
【請求項３９】
前記ヒトＣＤＧＦ遺伝子が配列同定番号第６番の示すコーディング配列を含む、請求項３８に記載の核酸。
【請求項４０】
前記ＣＤＧＦコーディング配列が、配列同定番号第１番、第５番及び第６番のいずれかの表す核酸配列に緊縮条件下で交雑する、請求項３４に記載の核酸。
【請求項４１】
前記ＣＤＧＦコーディング配列が、配列同定番号第１番のヌクレオチド１８０乃至６９５又はヌクレオチド８７０乃至９２９の少なくとも一つに相当する核酸配列に緊縮条件下で交雑する、請求項３４に記載の核酸。
【請求項４２】
前記ＥＧＦ様ドメインが、配列同定番号第２番、第４番及び第７番のいずれかの表すＥＧＦ様ドメインに対して少なくとも７０パーセント相同である、請求項３３に記載の核酸。
【請求項４３】
前記ＥＧＦ様ドメインが、一般式ＣＮＥＴＡＫＳＹＣＶＮＧＧＶＣＹＹＩＥＧＩＮＱＬＳＣＫＣＰＸＧＸＸＧＸＲＣで表されるアミノ酸を含む、請求項３３に記載の核酸。
【請求項４４】
前記ＣＤＧＦポリペプチドが、配列同定番号第２番のアミノ酸残基１乃至３１４に相当するＣＤＧＦアミノ酸配列、又は分泌シグナルペプチドを欠いたその配列を含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４５】
前記ＣＤＧＦポリペプチドが、配列同定番号第４番のアミノ酸残基１乃至３３０に相当するＣＤＧＦアミノ酸配列、又は分泌シグナルペプチドを欠いたその配列を含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４６】
配列同定番号第１番、第３番又は第６番の少なくとも６０の連続したヌクレオチドが表す配列を有する核酸プローブに緊縮条件下で交雑する、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４７】
前記核酸を前記組換えＣＤＧＦポリペプチドの発現ベクタとして用いるのに適切なものにするために、前記ポリペプチドコーディング配列に操作可能に結び付けられた転写調節配列を更に含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４８】
請求項３１に記載の前記核酸を含む、原核細胞及び真核細胞のうち少なくとも一方において複製を作ることが可能である発現ベクタ。
【請求項４９】
請求項４８に記載の発現ベクタで形質移入させた、組換えＣＤＧＦポリペプチドを発現する宿主細胞。
【請求項５０】
請求項４９に記載の前記細胞を細胞培地で培養して組換えＣＤＧＦポリペプチドを発現させ、前記細胞培養物から前記組換えＣＤＧＦポリペプチドを分離するステップを含む、組換えＣＤＧＦポリペプチドを生成する方法。
【請求項５１】
請求項３１に記載の前記核酸を含む移植遺伝子を持つか、あるいは、一つ又は複数の内生ＣＤＧＦ遺伝子が破壊された、組換えにより操作された細胞を含む遺伝子導入動物。
【請求項５２】
（ｉ）請求項１３１７の前記核酸を含むと共に、真核細胞において前記組換えＣＤＧＦポリペプチドの発現を起こさせるために転写調節配列に操作可能に結び付けられた遺伝子構造物であって、前記組換えＣＤＧＦポリペプチドはｅｒｂＢ型レセプタへの結合能力を特徴とするものである、遺伝子構造物と、（ｉｉ）前記遺伝子構造物を細胞に運搬すると共に、前記細胞に前記遺伝子構造物で形質移入させる遺伝子運搬組成物とを含む、組換え体形質移入系。
【請求項５３】
前記遺伝子運搬組成物が、組換えウィルス粒子、リポソーム、及びポリ−陽イオン性核酸結合物質のいずれかから選択される、請求項５２に記載の組換え体形質移入系。
【請求項５４】
配列同定番号第１番、第３番又は第６番のセンス又はアンチセンス配列、あるいはその自然発生変異体の少なくとも２０の連続したヌクレオチドに緊縮条件下で交雑するヌクレオチド配列の一領域を含む、概ね精製されたオリゴヌクレオチドを含むプローブ／プライマ。
【請求項５５】
配列同定番号第１番、第３番又は第６番のセンス又はアンチセンス配列、あるいはその自然発生変異体の少なくとも６０の連続したヌクレオチドに緊縮条件下で交雑する、請求項５４に記載のプローブ／プライマ。
【請求項５６】
配列同定番号第１番のヌクレオチド１８０乃至６９５又はヌクレオチド８７０乃至９２９の少なくとも一つに相当するセンス又はアンチセンス核酸配列に緊縮条件下で交雑する、請求項５４に記載のプローブ／プライマ。
【請求項５７】
付着した検出可能な標識群を更に含む、請求項５４に記載のプローブ／プライマ。
【請求項５８】
細胞の試料中で、ＣＤＧＦたんぱく質を符号化する核酸のレベルを測定する請求項５４に記載のプローブ／プライマを含む、ＣＤＧＦｍＲＮＡの写しを含む細胞を検出するテスト器具。
【請求項５９】
ｉ．ＣＤＧＦポリペプチド、ｅｒｂＢレセプタたんぱく質、及びテスト化合物を化合させるステップと、ｉｉ．前記ＣＤＧＦポリペプチド及び前記ｅｒｂＢレセプタたんぱく質を含む錯体の形成を検出するステップとを含み、前記テスト化合物がある状態のときの前記錯体の形成の変化は、ＣＤＧＦとｅｒｂＢレセプタとの間の相互作用の調節物質であることを示すものである、ＣＤＧＦポリペプチドのｅｒｂＢ型レセプタとの結合を調節するテスト化合物をスクリーニングする検定。
【請求項６０】
前記ｅｒｂＢ型レセプタがｅｒｂＢ４レセプタである、請求項５９に記載の検定。
【請求項６１】
好ましくない細胞増殖又は分化を特徴とする疾患の危険性のある、一つの細胞又は複数の細胞を判別する診断的検定であって、（ｉ）ＣＤＧＦたんぱく質を符号化する遺伝子の異常な変更又は変異、（ｉｉ）前記遺伝子の誤発現、（ｉｉｉ）異常なレベルの可溶性ＣＤＧＦたんぱく質、のうち少なくとも一つを特徴とする遺伝子の病変があるかないかを、細胞試料中で検出するステップを含む、検定。
【請求項６２】
前記病変の検出が、ｉ．前記遺伝子のセンス又はアンチセンス配列、あるいはその自然発生変異体、あるいは前記ＣＤＧＦ遺伝子に自然に結び付いた５’又は３’フランキング配列に交雑するヌクレオチド配列の一領域を含む核酸を含む診断用プローブを提供するステップと、ｉｉ．前記プローブを前記細胞試料の核酸に化合させるステップと、ｉｉｉ．前記遺伝子からの一つ又は複数のヌクレオチドの削除、前記遺伝子への一つ又は複数のヌクレオチドの追加、前記遺伝子の一つ又は複数のヌクレオチドの置換、前記遺伝子の全部又は一部の総体的染色体再配列、前記遺伝子のｍＲＮＡ写しレベルの総体的変化、又は前記遺伝子のｍＲＮＡ写しの非野生型スプライシング・パターン、のうち少なくとも一つの存在を、前記細胞核酸への前記プローブの交雑により、検出するステップとを含む、請求項６１に記載の検定。
【請求項６３】
前記プローブの交雑が、前記プローブ及び細胞核酸をポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）にさらすステップと、増幅された生成物中に異常を検出するステップとを更に含む、請求項６２に記載の検定。
【請求項６４】
前記プローブの交雑が、前記プローブ及び細胞核酸を結紮連鎖反応（ＬＣＲ）にさらすステップと、増幅された生成物中に異常を検出するステップとを更に含む、請求項６２に記載の検定。
【請求項６５】
遺伝子の病変の検出が、組織試料の細胞に関連する、及び／又は、体液中の可溶性たんぱく質として、ＣＤＧＦたんぱく質、又はその一部分があるかないかを検出するステップを含む、請求項６１に記載の検定。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【図１Ｃ】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図４Ａ】
【図４Ｂ】
【図１Ｂ】
【図１Ｃ】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図４Ａ】
【図４Ｂ】
【公開番号】特開２０１１−３６２６０（Ｐ２０１１−３６２６０Ａ）
【公開日】平成２３年２月２４日（２０１１．２．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−２１１３４５（Ｐ２０１０−２１１３４５）
【出願日】平成２２年９月２日（２０１０．９．２）
【分割の表示】特願平９−５１１４４８の分割
【原出願日】平成８年９月９日（１９９６．９．９）
【出願人】（５９９１５４６２９）プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバードカレッジ (2)
【出願人】（５０７０５５０５１）トラスティーズ オブ リランド エス．スタンフォード ユニバーシティ (1)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年２月２４日（２０１１．２．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年９月２日（２０１０．９．２）
【分割の表示】特願平９−５１１４４８の分割
【原出願日】平成８年９月９日（１９９６．９．９）
【出願人】（５９９１５４６２９）プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバードカレッジ (2)
【出願人】（５０７０５５０５１）トラスティーズ オブ リランド エス．スタンフォード ユニバーシティ (1)
【Ｆターム（参考）】
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