抗腫瘍薬としての５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体
本発明は、一般式Ｄによって表される５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体、薬学的に許容されるその塩、及びかかる化合物を含有する組成物に関する。前記化合物を投与することによる高増殖性疾患の治療方法も含まれる。式（Ｉ）。
【化１】
【化１】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリール−イソキノリンアミン化合物、その薬学的に許容される塩、及びかかる化合物を含有する組成物、並びに癌を含む高増殖性疾患を治療するための、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリール−イソキノリンアミン化合物を投与することによる治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
化学療法薬は、細胞分裂過程の様々な段階を妨げて、腫瘍細胞を死滅させる。アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、カルムスチン、シスプラチン）、代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサート、５−ＦＵ、ゲムシタビン）、細胞傷害性抗生物質（例えば、ドキソルビシン、マイトマイシン）、及び植物誘導体（例えば、パクリタキセル、ビンクリスチン、エトポシド）を含め、いくつかの部類の化学療法薬が存在する。化学療法は、白血病、他の血液癌、並びに手術不能又は転移性の固形癌の一次治療として用いられる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
現在の化学療法剤は、限られた有効性、衰弱させる有害な副作用、及び多剤耐性の出現を含めて、いくつかの問題点を有する。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
一連の５，６，又は７置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を合成し、抗癌活性を含む治療活性を分析した。本発明の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、前立腺腫瘍、大腸腫瘍、膵臓腫瘍、及び卵巣腫瘍などの腫瘍を含む高増殖性疾患の治療に有用であることが実証されている。
【０００５】
本発明は、新規な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリール−イソキノリンアミン化合物及び誘導体に関する。本発明はまた、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体の抗腫瘍薬としての使用にも関する。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
「５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン」、「５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物」、及び「５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体」という用語は、本出願では互換的に用いられ、以下に定義する式Ｄの化合物を意味する。本出願で使用する科学技術用語はすべて、別段の指定がない限り、当技術分野で通常使用される意味を有する。本出願で使用するとき、以下の語句又は表現は、特定の意味を有する。
【０００７】
本明細書では、「薬学的に許容される担体」とは、本発明の化合物と組み合わせた場合、前記化合物が、マスト細胞及びマクロファージの抗菌活性を増強する能力等の生物活性を維持できる、任意の固体又は液体の物質を意味する。例としては、標準の医薬担体のいずれか、例えば、リン酸緩衝溶液、水、水中油乳濁液等の乳濁液、及び様々なタイプの湿潤剤が挙げられるがこの限りではない。そのような担体を含む組成物は、周知の従来の方法によって製剤される（例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Chapter 43, 14th Ed.、Mack Publishing社、ペンシルヴェニア州イーストンを参照されたい）。
【０００８】
「コンジュゲート」という用語は、２つ以上の分子の複合体として生成した化合物を意味する。より詳細には、本発明では、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体を、細胞特異的なターゲティング部分に結合、例えば共有結合させ、所望の細胞にこの物質を効率的かつ特異的に送達するためのコンジュゲート化合物を生成することができる。
【０００９】
「ターゲティング部分」という表現は、所望の活性に特異的な部位に本発明の化合物を送達するのに役立つ分子を意味する。ターゲティング部分には、例えば、特定の細胞表面上の分子を特異的に結合する分子が含まれる。本発明において有用なそのようなターゲティング部分には、抗細胞表面抗原抗体が含まれる。インターロイキン、及び顆粒球／マクロファージ刺激因子（ＧＭＣＳＦ）などの因子を含むサイトカインも、特異的なターゲティング部分であり、これらの受容体を高レベルで発現する特定の細胞に結合することが知られている。
【００１０】
用語「プロドラッグ部分」は、例えば薬物の細胞への侵入又は化合物の投与を円滑にすることによって本発明の化合物の使用を容易にする置換基である。プロドラッグ部分は、例えば開裂酵素によって、インビボで化合物から切断することができる。プロドラッグ部分の例には、リン酸基、ペプチドリンカー、及び糖が含まれ、これらの部分は、インビボで加水分解され得る。
【００１１】
「高増殖性疾患」という用語は、細胞の異常又は病的な増殖を特徴とする疾患、例えば、腫瘍、癌、腫瘍性組織、並びに他の前癌性及び非腫瘍性又は良性の高増殖性疾患を指す。
【００１２】
本発明によって治療することのできる腫瘍、癌、及び腫瘍性組織の例には、悪性疾患、例えば、乳癌、骨肉腫、血管肉腫、線維肉腫及び他の肉腫、白血病、リンパ腫、洞腫瘍、卵巣癌、尿道癌、膀胱癌、前立腺癌、及び他の泌尿生殖器の癌、大腸食道癌、胃癌及び他の消化器癌、肺癌、骨髄腫、膵癌、肝癌、腎癌、内分泌癌、皮膚癌、並びに神経膠腫及び神経芽細胞腫を含む悪性又は良性の脳又は中枢性及び末梢神経（ＣＮＳ）系の腫瘍が含まれるがこの限りではない。
【００１３】
前癌性及び非腫瘍性又は良性の高増殖性疾患の例には、骨髄異形成障害、上皮内子宮頸癌、ガードナー症候群などの家族性腸ポリープ症、口腔白斑症、組織球増加症、ケロイド、血管腫、高増殖性の動脈狭窄、炎症性関節炎；関節炎を含む過角化及び丘疹鱗屑性の発疹が含まれるがこの限りではない。ウイルスによる高増殖性疾患、例えばいぼやＥＢＶによって誘発される疾患（すなわち伝染性単核球症）、瘢痕形成なども含まれる。本明細書で開示する治療法は、本明細書で定義した高増殖性疾患に罹患したことが判明しているか、若しくは疑われる、又は発症のリスクがある任意の対象に使用することができる。
【００１４】
本明細書では、高増殖性疾患の「治療」とは、高増殖性細胞の本体若しくは集団の成長若しくは大きさの増加又は腫瘍若しくは癌の増殖を阻止し、抑制し、又は緩慢にし、高増殖性細胞数を減少させ、又は他の解剖学的部位への広がりを予防するだけでなく、高増殖性の成長の規模又は高増殖性細胞の数を減少させる方法を指す。本明細書では、「治療」は、必ずしも高増殖性の成長の治癒又は完全な消滅を意味しない。本明細書では、治療有効量は、高増殖性細胞の成長の阻止、その速度の緩慢化、高増殖性細胞本体の大きさの縮小、及び／又は高増殖性細胞の数の減少をもたらすのに有効な量である。強化薬（又は強化薬類）は第１の化合物の活性を強化するのに十分な量で含まれ、したがって、２種（又はそれ以上）の化合物を組み合わせて投与した場合の治療効果は、個々の化合物を単独で投与した場合よりも大きくなる（例えば、相乗的な相互作用、組み合わせた場合の毒性の低下等）。
【００１５】
新規な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、腫瘍等の疾患を治療するための強力な新しい治療用分子となり得る。抗腫瘍薬の新たな開発に関連して、韓国特許第０４１２３１９号明細書は、Ｒ６が水素又は６−メチルであり、Ｒ７が水素、モノ２−、３−、又は４−メチルであり、Ｒ８がアミン、ベンジルアミン、４−メトキシベンジルアミン、ピペリジン、トリメチルエタンジアミン、モルホリン、４−メチルピペラジン、又は４−メチルホモピペラジンである式（Ａ）を有する３−アリールイソキノリンアミン化合物を開示している。韓国特許第０４１２３１９号明細書で開示されている化合物の中でも、６−メチル−３−（２−メチルフェニル）−１−イソキノリンアミンが、ヒトＡ５４９肺癌、ヒトＨＣＴ−１５大腸腺癌、ヒトＳＫ−ＯＶ−３卵巣腺癌、及びヒトＳＫ−ＭＥＬ−２黒色腫に対して有意な治療活性を有する抗癌剤として特許請求の範囲に記載されている。
【００１６】
【化１】
(A)
【００１７】
Carl H.Behrensらによる１９９０年７月１７日発行の米国特許第４９４２１６３号明細書は、式（Ｂ）の３−（１−ナフタレニル）−１（２Ｈ）イソキノリノン及び３−（１−ナフタレニル）−１−イソキノリンアミンを有用な癌化学療法薬として開示している。
【００１８】
【化２】
(B)
【００１９】
さらに、ＰＣＴ国際出願第ＷＯ２００５／０７５４３１号パンフレット及び第ＷＯ２００５／０７５４３２号パンフレットでは、式（Ｃ）を有する１−（２Ｈ）−イソキノロン誘導体の調製が示されている。
【００２０】
【化３】
(C)
【００２１】
本発明は、顕著な抗腫瘍活性を有し、毒性が非常に低く、水への溶解性が十分な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体に関し、韓国特許第０４１２３１９号明細書及び米国特許第４９４２１６３号明細書の特許請求の範囲に記載されていない新規な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体、かかる新規化合物の調製方法及び強力な抗腫瘍活性について示す。
【００２２】
より詳細には、本発明は、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物、並びに対象（例えばヒト患者又は他の動物対象）における高増殖性の障害、疾患、又は病態の治療におけるその使用に関する。本発明による方法は、対象に、有効量の本発明による５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を投与することを含む。そのような治療は、例えば、高増殖性病態を予防し、寛解させ、及び／若しくはその症状を抑制することができ、かつ／又は例えば悪性腫瘍などの腫瘍において細胞増殖若しくは成長を阻止又は抑制することができる。本発明の治療戦略は、全身腫瘍組織量（tumor burden）を少なくとも測定可能な程度軽減し、高増殖性病態を有する患者の生存時間を延長させる。本発明の薬剤による治療に感受性高い疾患、障害、及び状態の例としては、新生物、より詳細には様々な起源の腫瘍（肺、大腸、胃、平滑筋、食道、非ホジキンリンパ腫（non-Hodgkin's lymphoma）、非小細胞肺癌等）が挙げられる。
【００２３】
本発明の方法において有用な化合物には、式Ｄを有する５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミンが含まれる。
【００２４】
【化４】
Ｄ
【００２５】
［式中、
ｎは、０又は１であり
Ｘは独立に、Ｎ、Ｃ、Ｏ、又はＳであり、
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、独立に、Ｈ、ハロゲン、ＮＨ２、ＮＨＲ５、Ｎ（Ｒ５）２、−Ｏ−Ｒ５、又は−ＯＲ５で置換されていてもよいＲ５であり、
Ｒ４は、Ｈ、３，４−メチレンジオキシド、ハロゲン、−Ｏ−Ｒ５、又は−Ｏ−Ｒ５で置換されていてもよいＲ５から選択される１又は２個の置換基であり、
Ｒ５はＣ１−Ｃ６アルキルである。ここで、化合物が複数のＲ５基を含む場合、Ｒ５基はそれぞれ、同じでも異なっていてもよい］。
【００２６】
上の規定において、「ハロゲン」という呼称は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩを表す。
【００２７】
本明細書では、Ｃ１−Ｃ６アルキルは、１〜６個の炭素原子を有する直鎖状、分枝状、及び環状のアルキル基を表し、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、及びシクロヘキシルがこれに含まれる。
【００２８】
本発明の範囲から特に除外されるのは、（ａ）Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、かつＲ４＝Ｈ、２−メチル、３−メチル、又は４−メチルである化合物及び、（ｂ）Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチル、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、かつＲ４＝Ｈ、２−メチル、又は３−メチルである化合物である。
【００２９】
本発明は、これらの化合物の薬学的に許容される塩も含む。一般式（Ｄ）の化合物の薬学的に許容される塩は、薬学的に許容される無機酸、有機酸、アルカリ金属、及びアンモニウム塩であり、例えば、塩酸、臭素酸、硫酸、硫酸水素ナトリウム、リン酸、硝酸、炭酸等の無機酸との塩、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、コハク酸、安息香酸、クエン酸、マレイン酸、マロン酸、酒石酸、グルコン酸、乳酸、フマル酸、ラクトビオン酸、サリチル酸、アセチルサリチル酸（アスピリン）等の有機酸との塩、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、システイン、シスチン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、チロシン、プロリン等のアミノ酸との塩、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸等のスルホン酸との塩、ナトリウム又はカリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム又はマグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、及びメチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン又はトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン等との塩といった、生理的に許容される塩をもたらす有機塩基との塩である。
【００３０】
本発明の化合物は、腫瘍を含めた広範囲な高増殖性疾患に対して非常に活性があると言え、抗腫瘍薬として使用することができる。例えば、本発明による化合物は、卵巣腫瘍、前立腺腫瘍、乳房腫瘍、腎臓腫瘍、大腸腫瘍、膵臓腫瘍、脳腫瘍、及び黒色腫に対して活性をもち得る。非常に活性があるとは、特定の腫瘍の少なくとも１種の細胞株に関して、化合物のＩＣ５０が、５．０μＭ以下、２．０μＭ以下、１．０μＭ以下、０．５μＭ以下、０．２μＭ以下、又は０．１μＭ以下となり得ることを意味する。
【００３１】
一般式（Ｄ）の新規な化合物及び薬学的に許容されるその塩は、担体、アジュバント、及び／又は賦形剤などの、薬学的に許容される非毒性の媒体と合わせることができ、次いで混合物を、錠剤、カプセル剤、トローチ、溶液、懸濁液の形で経口的又は非経口的に投与して、ヒト又は哺乳動物の様々な種類の腫瘍を予防又は治療することができる。
【００３２】
一般式（Ｄ）の化合物を活性成分として含有する薬剤組成物の調製で使用することができる媒体には、甘味剤、結合剤、溶解剤、溶解助剤、湿潤剤、乳化剤、等張化剤、吸着剤、崩壊剤（degrading agent）、酸化防止剤、防腐剤、滑沢剤、充填剤、香料等、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース、グリシン、シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、デンプン、ゼラチン、トラガカントガム、グリシン、シリカ、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、寒天、水、エタノール、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、塩化ナトリウム、塩化カリウム、オレンジエッセンス、ストロベリーエッセンス、バニラ香等を含めることができる。
【００３３】
本発明の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、医薬組成物として製剤し、治療を必要とする対象、例えばヒト患者などの哺乳動物に、選択された投与経路に適合させた様々な形態で、例えば、経口的若しくは非経口的に、静脈内、筋肉内、局所、若しくは皮下の経路によって、又は高増殖性の組織若しくは細胞への直接の注射によって投与することができる。
【００３４】
したがって、本発明の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、例えば、不活性希釈剤や同化できる可食性担体などの薬学的に許容される媒体と組み合わせて経口的に、又は吸入若しくはガス注入によって全身に投与することができる。化合物は、硬若しくは軟シェルゼラチンカプセル封入してもよいし、圧縮して錠剤にしてもよいし、又は患者の食事の食物と直接混ぜてもよい。治療的な経口投与では、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、１又は複数の賦形剤と合わせ、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル剤、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウェーハなどの形で使用することができる。５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、微細な不活性粉末担体と合わせ、対象によって吸入されてもよいし、又は吹き込んでもよい。そのような組成物及び製剤は、少なくとも０．１％の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を含有すべきである。組成物及び製剤の百分率は当然、様々でよく、所与の単位剤形の重量の約２％〜約６０％の間にあることが好都合である。このような治療上有用な組成物中の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の量は、有効投与量レベルが得られる量である。
【００３５】
錠剤、トローチ、丸剤、カプセル剤等は、トラガカントゴム、アカシア、トウモロコシデンプン、ゼラチンなどの結合剤、リン酸二カルシウム（dicalcium phosphate）等の賦形剤、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、アルギン酸などの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、及びスクロース、フルクトース、ラクトース、アスパルテーム等の甘味剤も含有してよく、又はハッカ、冬緑油、チェリーフレーバー等の香料を加えてもよい。単位剤形がカプセル剤であるとき、上記種類の材料に加え、植物油及びポリエチレングリコール等の液体担体も含有してよい。コーティングとしての、又は固形単位剤形の物理形態を別な形で変更するための、他の様々な材料が存在する場合もある。例えば、錠剤、丸剤、又はカプセル剤は、ゼラチン、ワックス、セラック、又は糖等でコーティングすることができる。シロップ又はエリキシルは、活性化合物、甘味剤としてのスクロース又はフルクトース、保存剤としてのメチルパラベン及びプロピルパラベン、色素、及びチェリーフレーバーやオレンジフレーバー等の香料を含有してよい。当然、単位剤形を調製する際に使用するどんな材料も、薬学的に許容され、用いられる量では実質的に非毒性であるべきである。さらに、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、徐放性製剤及びデバイスに組み込むこともできる。
【００３６】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、注入又は注射によって静脈内又は腹腔内に投与することもできる。５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の溶液は水で調製することができ、必要に応じて非毒性の界面活性剤と混合されていてもよい。分散液は、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、トリアセチン、及びこれらの混合物中に、また油中に調製することもできる。貯蔵及び使用の通常の条件では、これらの製剤は、微生物の増殖を防ぐために保存剤を含有してよい。
【００３７】
注射又は注入に適する医薬品剤形は、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を含む無菌の水性溶液若しくは分散液又は無菌粉末を含むことができる。かかる無菌の水性溶液若しくは分散液又は無菌粉末は、無菌の注射若しくは注入用溶液又は分散液の要時調合用製剤（extemporaneous preparation）に適し、必要に応じてリポソームにカプセル封入されていてもよい。すべての場合において、最終的な剤形は、製造及び貯蔵条件下で無菌、液体、安定であるべきである。液体担体又は媒体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、植物油、非毒性のグリセリルエステル、及びこれらの適切な混合物を含む溶媒又は液体分散媒でよい。例えば、リポソームを生成し、分散液の場合では必要な粒径を保ち、又は界面活性剤を使用して、適切な流動度を維持することができる。微生物の作用は、様々な抗菌剤及び抗かび剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによって防止することができる。多くの場合では、等張化剤、例えば、糖、緩衝剤、又は塩化ナトリウムを含めることが好ましい。注射用組成物の持続性吸収は、組成物中に吸収を遅らせる物質、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを使用して実現することができる。
【００３８】
無菌の注射用溶液は、必要な量の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を、必要に応じて、上で列挙した他の成分のいく種類かと共に適切な溶媒中に包含させた後、フィルター滅菌にかけて調製する。無菌注射用溶液を調製するための無菌粉末の場合では、好ましい調製方法は、真空乾燥法及び凍結乾燥法であるが、これらの方法では、以前には除菌された溶液中に存在した活性成分と任意の所望の追加成分の粉末が得られる。
【００３９】
局所投与では、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、純粋な形で適用することができる。しかし、一般に、皮膚科学的に許容される担体と組み合わせて、固体でも液体でもよい組成物又は製剤として皮膚に投与することが望ましい。
【００４０】
有用な固体担体には、タルク、粘土、微結晶セルロース、シリカ、アルミナなどの、砕かれた固体が含まれる。他の固体担体としては、非毒性の高分子ナノ粒子又は微粒子が挙げられる。有用な液体担体としては、水、アルコール、グリコール、又は水／アルコール／グリコールブレンドが挙げられるが、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、必要に応じて非毒性界面活性剤を採用して、これに有効なレベルで溶解又は分散させることができる。香料や追加の抗菌剤などのアジュバントを加えると、その性質を所与の用途向けに最適化することができる。得られる液体組成物は、吸収性のパッドから適用し、絆創膏及び他の包帯剤に含浸させるのに使用し、又はポンプ型噴霧器若しくはエアロゾル噴霧器を使用して患部に噴霧することができる。
【００４１】
液体担体と共に、合成ポリマー、脂肪酸、脂肪酸の塩及びエステル、脂肪アルコール、化工セルロース、改質された鉱物材料などの増粘剤も使用すると、使用者の皮膚に直接適用するための、のびのよいペースト、ゲル、軟膏、石鹸などを調製することができる。
【００４２】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の皮膚への送達に使用することのできる有用な皮膚科用組成物の例は、当業者に知られており、例えば、Jacquetら（米国特許第４６０８３９２号明細書）、Geria（米国特許第４９９２４７８号明細書）、Smithら（米国特許第４５５９１５７号明細書）、及びWortzman（米国特許第４８２０５０８号明細書）を参照されたい。
【００４３】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の有用な投与量は、そのインビトロ活性及び動物モデルでのインビボ活性を比較して求めることができる。マウス及び他の動物においてヒトの有効投与量を推定する方法は、当業者に知られており、例えば、米国特許第４９３８９４９号明細書を参照されたい。
【００４４】
一般に、ローションなどの液体組成物中の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の濃度は、約０．１〜２５重量％、又は約０．５〜１０重量％となる。ゲルや粉末などの半固体又は固体組成物中の濃度は、約０．１〜５重量％、又は約０．５〜２．５重量％であってよい。
【００４５】
治療の用途に必要な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の量は、選択される特定の塩及び投与経路、治療対象となる病体の性質、並びに患者の年齢及び状態に応じて様々であり、最終的に担当医師又は臨床医の裁量によるところとなる。
【００４６】
本発明の薬剤の有効投与量及び投与経路は、標準的である。５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の正確な量（有効量）は、例えば、対象の種、年齢、体重、一般的また臨床的な状態、治療対象となる疾患の重症度又は機序、使用する特定の薬剤又は媒体、方法及び投与スケジュールなどに応じて対象によって様々となる。治療有効量は、当業者に知られている従来の手順によって経験的に求めることができる。例えば、The Pharmacological Basis of Therapeutics, Goodman and Gilman, eds., Macmillan Publishing Co., New Yorkを参照されたい。例えば、有効量は、最初に細胞培養アッセイ又は適切な動物モデルにおいて推定することができる。動物モデルを使用して、適切な濃度範囲及び投与経路を求めることもできる。次いで、そのような情報を使用して、ヒトにおける有用な用量及び投与経路を求めることができる。治療量は、同等の治療薬の投与量からの類推によって選択することもできる。
【００４７】
特定の投与方式及び投与計画は、診療する臨床医によって、症例の詳細（例えば、対象、疾患、関わる疾患状態、及び治療が予防的であるかどうか）を考慮して選択される。治療では、１日量又は複数回の１日量（multi-daily dose）の化合物を、２〜３日から数カ月、又は数年の期間にわたり使用することができる。
【００４８】
しかし、一般には、適切な用量は、体重１ｋｇあたり１日約０．５〜約１００ｍｇ、例えば約１０〜約７５ｍｇ、例えばレシピエントの体重１キログラムあたり１日３〜約５０ｍｇ、６〜９０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、又は１５〜６０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲にある。例えば、適切な用量は、１日あたり０．５、５、１０、２５、５０、１００、２５０、又は５００ｍｇ／体重ｋｇとすることができる。
【００４９】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、例えば、単位剤形あたり５〜１０００ｍｇ、１０〜７５０ｍｇ、又は５０〜５００ｍｇの活性成分を含有する単位剤形にして投与すると好都合である。
【００５０】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、約０．５〜約７５μＭ、約１〜５０μＭ、又は約２〜約３０μＭのピーク血漿濃度を実現するように投与することができる。好例となる望ましい血漿濃度としては、０．２５、０．５、１、５、１０、２５、５０、７５、１００、又は２００μＭ以上又は以下が挙げられる。これは、例えば、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の０．０５〜５％溶液（任意選択で食塩水溶液）を静脈内注射して実現し、又は約１〜１００ｍｇの５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を含有するボーラス投与として経口的投与することができる。望ましい血中濃度は、約０．０１〜５．０ｍｇ／ｋｇ／ｈｒ、例えば０．００５、０．０１、０．１、２．５、５．０、又は１０．０ｍｇ／ｋｇ／ｈｒ以上又は以下をもたらす連続的な注入によって維持することができる。或いは、そのようなレベルは、約０．４〜１５ｍｇ／ｋｇ、例えば０．２５、０．５、１．０、５．０、１０．０、１５．０、又は２５．０ｍｇ／ｋｇ以上又は以下の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を含有する断続的な注入によって実現することもできる。
【００５１】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、１回で、又は適切な間隔で投与される分割された用量、例えば１日あたり２、３、４回、又はそれ以上の部分用量として好都合に投与することができる。部分用量それ自体も、例えば、注入器からの複数回の吸入などの、漠然と間隙を挟んだ幾回かの別々の投与に、又は眼への複数の液滴の適用によって、さらに分けることができる。
【００５２】
[５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミンの細胞への標的指向化]
好例となる実施形態では、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を、治療が所望される細胞、例えば、ヒト癌細胞に標的指向化する。化合物は、所望の細胞を特異的に結合するターゲティング部分に結合させ、それによってコンジュゲート分子の投与が振り向けられることにより、所望の細胞に標的指向化される。有用なターゲティング部分は、細胞抗原を特異的に結合するリガンド、又は細胞表面リガンド、例えば、Ｂ細胞抗原に対する抗体、ＣＤ１９（Ｂ４３など）などである。
【００５３】
本発明のコンジュゲートを生成するには、ターゲティング部分を、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物上の部位に共有結合させる。ターゲティング部分は、ポリペプチド分子であることが多く、本発明の化合物に、ＮＨ２、ＳＨ、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ等を含む反応部位で結合させる。化合物を連結する特定の連結剤（linking agent）を使用する。連結剤は、ターゲティング部分を結合させる反応部位にしたがって選択する。
【００５４】
本発明の化合物にターゲティング部分を結合させるのに適する連結剤及び反応部位を選択する方法は、知られており、例えば、Hermanson, et al., Bioconjugate Techniques, Academic Press, 1996、Hermanson, et al., Immobilized Affinity Ligand Techniques, Academic Press, 1992、及びPierce Catalog and Handbook, 1996, pp. T155-T201に記載されている。
［実施例］
【００５５】
本発明は、以下の実施例を参照することでさらに明快になり得るが、好ましい実施形態の一部を例示するのに役立てるものであり、いかなる点でも本発明を限定しない。
【００５６】
実施例１〜３．
[イソキノリンアミン誘導体の合成]
すべての化学薬品は、試薬一級（reagent grade）であり、Aldrich Chemical Company（ウィスコンシン州ミルウォーキー）、Sigma Chemical Company（ミズーリ州セントルイス）、又はTrans World Chemicals（メリーランド州ロックヴィル）から購入した。溶媒は、使用前に常法どおりに蒸留した。無水ＴＨＦは、使用前にナトリウム／ベンゾフェノンから蒸留した。
【００５７】
融点は、Electrothermal IA9200融点測定装置で求め、補正していない。核磁気共鳴スペクトルは、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）をゼロｐｐｍでの内部標準として使用して、Varian 300分光計で記録し、化学シフトは百万分率（ｐｐｍ）で報告し、結合定数（Ｊ）はヘルツで示し、略語のｓ、ｄ、ｔ、ｑ、及びｍは、それぞれ一重線、二重線、三重線、四重線、及び多重線を指す。
【００５８】
ＩＲスペクトルは、ＫＢｒペレットを使用して、パーキン・エルマー７８３分光計及びニコレット機器で記録した。元素分析は、CaHo Erba元素分析計で実施した。カラムクロマトグラフィーは、Merck社製シリカゲル６０（７０〜２３０メッシュ）で実施した。ＴＬＣは、Merck社から購入したシリカゲル６０Ｆ２５４でコートしたプレートを使用して実施した。
【実施例１】
【００５９】
[化合物１〜化合物１２の一般合成手順]
化合物１〜化合物１２は、スキーム１で論述するとおりに合成し、特徴付けた。構造及び物性データを以下に示す。
【００６０】
スキーム１
【化５】
【００６１】
表１
【表１】
【００６２】
３−（２−クロロフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物１）の調製−無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）に、−７０℃でＬｉＮＭｅ２（５％のヘキサン懸濁液５ｍＬ、３．３ｍｍｏｌ）を加えた。ＨＭＰＡ（５９０ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加えた後、反応混合物をｏ−トルニトリル（３５０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液で処理した。得られる赤色−青紫色の溶液を３０分間撹拌し、次いで２−クロロベンゾニトリル（８２５ｍｇ、６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液で処理した。反応混合物を６０℃で１時間加熱し、１０％のＨＣｌ（２０ｍＬ）を使用して加水分解した。得られる塩酸塩懸濁液を、ジエチルエーテルで３回洗浄した。次いで、懸濁液をＮａＯＨで中和し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせて水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去した後、残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（１：１）でのカラムクロマトグラフィーによって精製して、１−アミノ化合物を得た。１−アミノ化合物のアセトン（５ｍＬ）溶液にｃ−ＨＣｌを加えて、沈殿を得た。沈殿を収集し、アセトンで洗浄して、アミン塩酸塩（１８３．４ｍｇ、２１％）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.80-7.29 (m, 9H), 5.41 (s, 2H).
【００６３】
以下の化合物２〜１２は、化合物１と同様の方法に従って調製した。
【００６４】
３−（３−クロロフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物２）の調製−ｏ−トルニトリルを３−クロロベンゾニトリルと反応させると、化合物２（白色固体、５３％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.05-7.29 (m, 9H), 5.49 (s, 2H).
【００６５】
３−（４−クロロフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物３）の調製−ｏ−トルニトリルを４−クロロベンゾニトリルと反応させると、化合物３（白色固体、３２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.00 (m, 2H), 7.78 (m, 2H), 7.61 (m, 1H), 7.49-7.40 (m, 4H), 5.26 (s, 2H)
【００６６】
３−（３−メトキシフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物４）の調製−ｏ−トルニトリルを３−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物４（白色固体、３６％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.99 (d, 1H), 7.95-7.30 (m, 7H), 6.96 (d, 1H), 5.26 (s, 2H), 3.90 (s, 3H).
【００６７】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物５）の調製−ｏ−トルニトリルを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物５（黄色の固体、５２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.04 (d, 1H), 7.71-7.46 (m, 5H), 7.21 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.94 (s, 3H).
【００６８】
３−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−６−イル）イソキノリン−１−アミン（化合物６）の調製−ｏ−トルニトリルをベンゾ［１，３］ジオキソール−５−カルボニトリルと反応させると、化合物６（黄色の固体、３０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.71 (m, 2H), 7.59-7.54 (m, 3H), 7.40 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.89 (m, 1H), 5.98 (s, 2H), 5.25 (s, 2H).
【００６９】
３−（ピリジン−３−イル）イソキノリン−１−アミン（化合物７）の調製−ｏ−トルニトリルを３−シアノピリジンと反応させると、化合物７（黄色の固体、６２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 9.24 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.32 (m, 1H), 7.81-7.45 (m, 6H), 5.57 (s, 2H).
【００７０】
３−（チオフェン−２−イル）イソキノリン−１−アミン（化合物８）の調製−ｏ−トルニトリルをチオフェン−２−カルボニトリルと反応させると、化合物８（黄色の固体、２０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.58 (m, 3H), 7.49 (m, 1H), 7.35(s, 1H), 7.29 (m, 2H), 7.07 (m, 1H), 5.35 (s, 2H)．
【００７１】
３−（フラン−２−イル）イソキノリン−１−アミン（化合物９）の調製−ｏ−トルニトリルを２−フロニトリルと反応させると、化合物９（黄色の固体、２０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.73-7.70 (m, 2H), 7.49- 7.57 (m, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.26 (m, 1H), 6.99 (m, 1H), 6.47 (m, 1H), 5.47 (s, 2H).
【００７２】
７−クロロ−３−（５−クロロ−２−メチルフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物１０）の調製−５−クロル−２−メチルベンゾニトリルを５−クロロ−２−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物１０（黄色の固体、２２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.81 (s, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.23 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 2.53 (s, 3H).
【００７３】
６−メトキシ−３−フェニルイソキノリン−１−アミン（化合物１１）の調製−４−メトキシ−２−メチルベンゾニトリルをベンゾニトリルと反応させると、化合物１１（黄色の固体、３３％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.02 (m, 2H), 7.57 (d, 1H), 7.44-7.30 (m, 4H), 6.93 (m, 2H), 5.40 (s, 2H), 3.79 (s, 3H).
【００７４】
６−メトキシ−３−（３，４−ジメトキシフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物１２）の調製−４−メトキシ−２−メチルベンゾニトリルを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物１２（黄色の固体、３５％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.72 (s, 1H), 7.60-7.52 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.92-6.81 (m, 3H), 5.69 (s, 2H), 3.87(s, 3H), 3.77(s, 3H), 3.74(s, 3H).
【実施例２】
【００７５】
[置換２−メチル−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミドの合成]
【００７６】
スキーム２
【化６】
【００７７】
ａ）２，Ｎ，Ｎ−トリメチル−５−ニトロベンズアミド（２）の調製
２，Ｎ，Ｎ−トリメチル−５−ニトロベンズアミドの調製では、米国特許第４９４２１６３号明細書に記載の手順を利用した。２−メチル−５−ニトロ安息香酸（５ｇ、２７．６ｍｍｏｌ）と塩化チオニル（１６．４ｇ、１３８ｍｍｏｌ）の反応混合物を終夜還流させた。減圧蒸留によって過剰の塩化チオニルを除去して、塩化２−メチル−５−ニトロ−ベンゾイルを固体残渣として得た。この材料を塩化メチレン（３０ｍＬ）に溶解させ、温度を０〜１２℃に保ちながら、市販の４０％ジメチルアミン溶液（３０ｇ、２７０ｍｍｏｌ）に撹拌しながら滴下した。加え終えた後、反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、塩化メチレンで抽出した。有機抽出物を合わせて水で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製して、アミドを固体（５．４６ｇ、９５％）として得た。同一性を１Ｈ ＮＭＲによって検証した。
【００７８】
ｂ）５−アミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミド（３）の調製
アミド（５．４５ｇ、２６．２ｍｍｏｌ）のメタノール（３０ｍＬ）溶液を、６０ｐｓｉのＨ２中にて５％のＰｄ／Ｃ（０．３ｇ）の存在下、Parr社製水素化装置を使用して終夜水素化した。反応混合物をセライトで濾過し、濾過ケーキをメタノールで洗浄した。濃縮した後、残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（１：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物を固体（４．６３ｇ、９９％）として得た。同一性を１Ｈ ＮＭＲによって検証した。
【００７９】
ｃ）５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミド（４）の調製
アミン（４．６３ｇ、２６ｍｍｏｌ）及びＨＣＨＯ（７．０２ｇ、７８ｍｍｏｌ）の０℃のメタノール（４０ｍＬ）溶液に、ＮａＢＨ３ＣＮ（３．２２ｇ、５２ｍｍｏｌ）及びＺｎＣｌ２（３．５３ｇ、２６ｍｍｏｌ）のメタノール（３０ｍＬ）溶液を滴下した。加え終えた後、反応混合物を室温に温めた。反応混合物を１．０Ｎ ＮａＯＨ（１００ｍＬ）で失活させ、メタノールを除去した。残渣を酢酸エチルで抽出し、有機抽出物を合わせて水で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製して、アミドを油（５．０４ｇ、９４％）として得た。同一性を１Ｈ ＮＭＲによって検証した。
【００８０】
他の３又は４−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドは、５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミド（４）と同様の方法に従って調製した。３−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドの合成は、Bioorganic & Medicinal Chemistry paper (vol. 6、2449 (1998))に記載されている。４−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドの合成は、国際公開第ＷＯ２００５／０７５４３２号パンフレットに記載されている。５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドの合成は、米国特許第４９４２１６３号明細書に記載されている。
【実施例３】
【００８１】
[化合物１３〜化合物５６の合成]
化合物１３〜化合物５６は、スキーム３で論述するとおりに合成し、特徴付けた。構造及び物性データを以下に示す。
【００８２】
スキーム３
【化７】
【００８３】
表２
【表２】
【００８４】
[３−（３−メトキシフェニル）−Ｎ７，Ｎ７−ジメチルイソキノリン−１，７−ジアミン塩酸塩（化合物１３）の調製]
【００８５】
ａ）７−ジメチルアミノ−３−（３−メトキシフェニル）−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（Ｉ）
ジイソプロピルアミン（１．５ｇ、１５ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、−７８℃でｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍを６ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミド（２．０６ｇ、１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−７８℃で滴下し、赤橙色の溶液を同温度で１時間撹拌した。３−メトキシベンゾニトリル（１．７ｇ、１３ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を加え、反応混合物を−７８℃で２時間撹拌した。反応液を水で失活させ、酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去した後、残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉを黄色の固体（５９６ｍｇ、２０％）として得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 9.73 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.50 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.38 (m, 1H), 7.23-7.22 (m, 3H), 6.96 (m, 1H), 6.74 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.09 (s, 6H).
【００８６】
ｂ）［１−クロロ−３−（３−メトキシフェニル）イソキノリン−７−イル］ジメチルアミン（II）
３−アリールイソキノリノンＩ（５５０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）とＰＯＣｌ３（１０ｍＬ）の反応混合物を５０℃で終夜撹拌した。ＰＯＣｌ３を減圧蒸留によって除去し、残渣を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせて水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去した後、残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物IIを黄色の固体（５３０ｍｇ、９０％）として得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.85 (s, 1H), 7.72 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.64-7.62 (m, 2H), 7.39-7.35 (m, 2H), 7.22 (d, J = 2Hz, 1H), 6.92 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.13 (s, 6H).
【００８７】
ｃ）Ｎ１−（４−メトキシベンジル）−３−（３−メトキシフェニル）−Ｎ７，Ｎ７−ジメチルイソキノリン−１，７−ジアミン（III）
１−クロロイミンイソキノリンII（５００ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、４−メトキシベンジルアミン（８７７ｍｇ、６．４ｍｍｏｌ）、及び炭酸カリウム（２ｇ、１５ｍｍｏｌ）をＤＭＦに混ぜた混合物を、終夜還流させた。反応混合物を室温に冷却し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせて水で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物III（３１０ｍｇ、４７％）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.74-7.62 (m, 3H), 7.45-7.33 (m, 4H), 7.22 (m, 1H), 6.92 (m, 3H), 6.66 (m, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.91 (d, 2H) , 3.91 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.09 (s, 6H).
【００８８】
ｄ）３−（３−メトキシフェニル）−Ｎ７，Ｎ７−ジメチルイソキノリン−１，７−ジアミン塩酸塩（IV、化合物１３）
Ｎ１−（４−メトキシベンジル）−イソキノリンアミン化合物III（３００ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を塩化メチレン（５ｍＬ）に混ぜた反応混合物を、２日間還流させた。ＮａＨＣＯ３の溶液を加え、反応混合物を塩化メチレンで抽出した。有機抽出物を合わせて水で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（１：１）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、１−アミノイソキノリン（１５１ｍｇ、７１％）を得た。１−アミノ化合物をアセトン（５ｍＬ）に溶解させ、濃ＨＣｌ ５滴を加えた。塩酸塩を濾過し、濾過ケーキをアセトンで洗浄した。乾燥後、１２０ｍｇの１−アミノイソキノリン塩酸塩が得られた（化合物１３、５０％）。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 13.57 (s, 1H), 9.37 (s, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.55-7.39 (m, 6H), 7.02 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.06 (s, 6H).
【００８９】
以下の化合物１４〜５６は、化合物２２〜５６の調製ではステップ（ａ）でジイソプロピルアミンを利用しなかったことを除き、化合物１３と同様の方法に従って調製した。
【００９０】
Ｎ７，Ｎ７−ジメチル−３−ｍ−トリルイソキノリン−１，７−ジアミン塩酸塩（化合物１４）−５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドをｍ−トルニトリルと反応させると、化合物１４（黄色の固体、６２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.85 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.35-7.24 (m, 2H), 7.15 (m, 1H), 6.76 (m, 1H), 5.30 (s, 2H), 3.06 (s, 6H), 2.43 (s, 3H).
【００９１】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）−Ｎ７，Ｎ７−ジメチルイソキノリン−１，７−ジアミン塩酸塩（化合物１５）−５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物１５（黄色の固体、６３％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 13.56 (s, 1H), 9.34 (s, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.58-7.46 (m, 5H), 7.06 (d, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.06 (s, 6H).
【００９２】
３−（３，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ７，Ｎ７−ジメチルイソキノリン−１，７−ジアミン塩酸塩（化合物１６）−５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドを３，５−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物１６（黄色の固体、７６％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 13.50 (s, 1H), 9.31 (s, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.54-7.47 (m, 2H), 7.14 (d, 2H), 6.58 (t, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.07 (s, 6H).
【００９３】
Ｎ５，Ｎ５−ジメチル−３−フェニルイソキノリン−１，５−ジアミン（化合物１７）−３−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドをベンゾニトリルと反応させると、化合物１７（黄色の固体、７３％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.08 (m, 2H), 7.82 (s, 1H), 7.48-7.33 (m, 5H), 7.18 (m, 2H), 5.24 (s, 2H), 2.89 (s, 6H).
【００９４】
Ｎ５，Ｎ５−ジメチル−３−ｏ−トリルイソキノリン−１，５−ジアミン（化合物１８）−３−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドをｏ−トルニトリルと反応させると、化合物１８（黄色の固体、６０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 13.87 (s, 1H), 8.42 (d, 1H), 7.82-7.71 (m, 2H), 7.50-7.33 (m, 5H), 2.91 (s, 6H), 2.42 (s, 3H).
【００９５】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）−Ｎ５，Ｎ５−ジメチルイソキノリン−１，５−ジアミン（化合物１９）−３−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物１９（黄色の固体、４０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9.69 (s, 2H), 8.40 (d, 1H), 7.93-7.91 (m, 2H), 7.75-7.67 (m, 3H), 7.13 (d, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 3.03 (s, 6H).
【００９６】
Ｎ５，Ｎ５−ジメチル−３−（２，６−ジメチルフェニル）イソキノリン−１，５−ジアミン（化合物２０）−３−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドを２，６−ジメチルベンゾニトリルと反応させると、化合物２０（黄色の固体、６０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.46-7.41 (m, 2H), 7.29-7.09 (m, 5H), 5.58 (s, 2H), 2.83 (s, 6H), 2.14 (s, 6H).
【００９７】
３−（３−メトキシフェニル）−Ｎ６，Ｎ６−ジメチル−イソキノリン−１，６−ジアミン（化合物２１）−４−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドを３−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２１（褐色の固体、３５％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7.70 (d J = 8.4 Hz, 1H), 7.57-7.51 (m, 2H), 7.38 (d J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.03 (dd, J = 8.1 Hz, J = 2.8 Hz, 1H), 6.94 (m, 1H), 6.74 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.11 (s, 6H).
【００９８】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）−５−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２２）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，３−ジメチルベンズアミドを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２２（黄色の固体、６５％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.70(m, 1H), 7.57-7.62 (m, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.40 (m, 1H), 7.28 (m, 1H), 6.94 (d, J= 8.4Hz, 1H), 5.42 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.88(s, 3H), 2.63 (s, 3H).
【００９９】
６−メチル−３−ｏ−トリルイソキノリン−１−アミン塩酸塩（化合物２３）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドをｏ−トルニトリルと反応させると、化合物２３（黄色の固体、６７％）が得られた。Mp 269.1-270.2℃. IR (cm-1): 3300, 1650. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 13.84 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.79-7.57 (m, 7H), 7.38 (s, 1H), 2.75 (s, 3H), 2.61 (s, 3H). 13C NMR (DMSO-d6) δ: 153.4, 144.4, 137.0, 135.9, 134.8, 131.6, 129.4, 128.7, 128.5, 128.4, 125.7, 124.8, 124.0, 113.0, 109.5. MS, m/e (%): 248 (M+, 100), 232 (87), 230 (54). C17H17ClN2(C, H, N)の元素分析計算値: 71.70, 6.02, 9.84. 実測値: 71.58, 6.27, 9.58.
【０１００】
３−（２−メトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２４）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを２−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２４（黄色の固体、６４％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.03 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.35-7.23 (m, 3H), 7.05- 6.97 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.47 (s, 3H).
【０１０１】
３−（３−メトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２５）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを３−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２５（黄色の固体、６８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.67-7.59 (m, 3H), 7.51 (s, 1H), 7.38-7.24 (m, 3H), 6.94-6.90 (m, 1H), 5.26 (bs, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.48 (s, 3H).
【０１０２】
３−（４−メトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２６）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを４−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２６（黄色の固体、６０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.04 (d, J= 8.1Hz, 2H), 7.65 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.17 (d, J= 8.2Hz, 1H), 6.95 (d, J= 8.5Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.43 (s, 3H).
【０１０３】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２７）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２７（黄色の固体、７９％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.67-7.64 (m, 2H), 7.54 (m, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.18 (m, 1H), 6.91 (d, J= 8.5Hz, 1H), 5.76 (s, 2H), 3.96(s, 3H), 3.89 (s, 3H), 2.50(s, 3H).
【０１０４】
３−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−６−イル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２８）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドをベンゾ［１，３］ジオキソール−５−カルボニトリルと反応させると、化合物２８（黄色の固体、７１％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.63 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.54 (m, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.22 (m, 2H), 6.88 (d, J= 8.5Hz, 1H), 5.98 (s, 2H), 5.40 (s, 2H), 2.46 (s, 3H).
【０１０５】
３−（４−エトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２９）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを４−エトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２９（黄色の固体、６７％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.96 (m, 2H), 7.66 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.47(s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.23(m, 1H), 6.97(m ,2H), 5.36 (s, 2H), 4.05 (q, J= 7.0Hz, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.43 (t, J= 7.0Hz, 3H).
【０１０６】
３−（３，５−ジメトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３０）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを３，５−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物３０（黄色の固体、９０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8.42 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.60 (m, 2H), 7.11 (m, 2H), 6.62 (s, 1H), 3.45 (s, 6H), 2.49 (s, 3H).
【０１０７】
３−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３１）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを４−メトキシ−２−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物３１（黄色の固体、６７％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.97 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.37-7.28 (m, 2H), 7.15-6.91 (b, 2H), 6.85 (s, 1H), 6.76 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.37 (s, 3H).
【０１０８】
３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３２）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを３，４，５−トリメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物３２（黄色の固体、２６％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.73 (d, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.32-7.25 (m, 3H), 6.97-6.71 (m, 1H), 5.63 (s, 2H ), 4.04 (s, 6H), 3.90 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
【０１０９】
３−（２−フルオロフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３３）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを２−フルオロベンゾニトリルと反応させると、化合物３３（黄色の固体、６９％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.00 (m, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.34-7.14 (m, 4H), 5.39 (s, 2H), 2.51 (s, 3H).
【０１１０】
６−メチル−３−（２，６−ジメチルフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物３４）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを２，６−ジメチルベンゾニトリルと反応させると、化合物３４（黄色の固体、６８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.72 (d, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.20-7.08 (m, 3H), 6.89 (s, 1H), 5.26 (s, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.12 (s, 6H).
【０１１１】
６−メチル−３−ｍ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物３５）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドをｍ−トルニトリルと反応させると、化合物３５（白色固体、８９％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 9.36 (s, 2H), 8.44 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.83-7.79 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.46-7.39 (m, 2H), 7.28 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 2.57 (s, 3H), 2.46 (s, 3H).
【０１１２】
６−メチル−３−ｐ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物３６）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドをｐ−トルニトリルと反応させると、化合物３６（白色固体、７５％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.94 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.29-7.24 (m, 3H), 5.43 (s, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.40 (s, 3H).
【０１１３】
３−（２−メトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３７）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを２−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物３７（黄色の固体、３８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.00 (s, 1H), 7.63-7.50 (m, 3H), 7.41 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.06-7.00 (m, 2H), 3.87(s, 3H), 2.50 (s, 3H).
【０１１４】
３−（３−メトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３８）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを３−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物３８（黄色の固体、９２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.74 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.54-7.45 (m, 3H), 7.37 (t, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.93 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 2.49 (s, 3H).
【０１１５】
３−（４−メトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３９）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを４−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物３９（黄色の固体、５４％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.97 (d, 2H), 7.63 (d, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.97 (d, 2H), 3.86 (s, 3H), 2.51 (s, 3H).
【０１１６】
３−（４−エトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４０）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを４−エトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物４０（黄色の固体、６７％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.97 (d, 2H), 7.62 (d, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.96 (d, 2H), 5.26 (s, 2H), 4.06 (q, 2H), 2.49 (s, 3H), 1.43 (t, 3H).
【０１１７】
３−（２−フルオロフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４１）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを２−フルオロベンゾニトリルと反応させると、化合物４１（黄色の固体、７９％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.05 (m, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.31-7.06 (m, 3H), 5.17 (s, 2H), 2.52 (s, 3H).
【０１１８】
３−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４２）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを４−メトキシ−２−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物４２（黄色の固体、９０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.93 (s, 2H), 7.57-7.55 (d, 2H), 7.32 (d, 1H), 6.82-6.78 (m, 3H), 3.82 (s, 3H), 2.53 (s, 3H), 2.36 (s, 3H).
【０１１９】
７−メチル−３−（２，６−ジメチルフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物４３）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを２，６−ジメチルベンゾニトリルと反応させると、化合物４３（黄色の固体、６８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.63-7.46 (m, 3H), 7.19-7.08 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 5.17 (s, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.12 (s, 6H).
【０１２０】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４４）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物４４（黄色の固体、４６％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.80 (s, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.55-7.46 (m, 3H), 7.19 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.02 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
【０１２１】
３−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−６−イル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４５）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドをベンゾ［１，３］ジオキソール−５−カルボニトリルと反応させると、化合物４５（黄色の固体、７０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.62-7.55 (m, 4H), 7.45 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.90 (m, 1H), 6.00 (s, 2H), 5.16 (s, 2H), 2.51 (s, 3H).
【０１２２】
３−（３，５−ジメトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４６）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを３，５−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物４６（黄色の固体、７１％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.85 (s, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.38 (d, 1H), 6.86 (d, 1H), 6.69-6.67 (d, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
【０１２３】
３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４７）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを３，４，５−トリメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物４７（黄色の固体、９５％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.66 (d, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.29 (s, 2H), 3.96 (s, 6H), 3.89 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
【０１２４】
７−メチル−３−ｏ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物４８）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドをｏ−トルニトリルと反応させると、化合物４８（黄色の固体、９１％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.63-7.58 (m, 2H), 7.47-7.40 (m, 2H), 7.27-7.20 (m, 3H), 7.05 (s, 1H), 5.41 (s, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.38 (s, 3H).
【０１２５】
７−メチル−３−ｍ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物４９）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドをｍ−トルニトリルと反応させると、化合物４９（黄色の固体、９７％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.82 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.63-7.58 (m, 2H), 7.43-7.32 (m, 3H), 7.17 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.86 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.42 (s, 3H).
【０１２６】
３−（５−メトキシ−２−メチルフェニル）−７−メチル−イソキノリン−１−アミン（化合物５０）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを５−メトキシ−２−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物５０（黄色の固体、７７％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.64-7.60 (m, 2H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.06 (s, 1H), 7.02 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.83 (dd, J = 8.1 Hz, J = 2.8 Hz, 1H), 5.41 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.31 (s, 3H).
【０１２７】
６，７−ジメトキシ−３−フェニルイソキノリン−１−アミン（化合物５１）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドをベンゾニトリルと反応させると、化合物５１（黄色の固体、７１％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.97-7.95 (m, 2H), 7.45-7.30 (m, 4H), 7.05 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 5.29 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.82 (s, 3H).
【０１２８】
６，７−ジメトキシ−３−（３−メトキシフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物５２）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドを３−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物５２（黄色の固体、６０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.53-7.46 (m, 2H), 7.30 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.88 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 3.82 (s, 3H).
【０１２９】
６，７−ジメトキシ−３−（２，６−ジメチルフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物５３）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドを２，６−ジメチルベンゾニトリルと反応させると、化合物５３（黄色の固体、５６％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.23-7.07 (m, 4H), 7.01 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 4.02 (s, 3H), 2.12 (s, 6H).
【０１３０】
６，７−ジメトキシ−３−ｍ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物５４）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドを３−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物５４（黄色の固体、４３％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.93 (s, 2H), 7.92 (s, 1H), 7.68-7.64 (m, 2H), 7.37-7.20 (m, 2H), 7.11 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 2.38 (s, 3H).
【０１３１】
６，７−ジメトキシ−３−（３，５−ジメトキシフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物５５）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドを３，５−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物５５（黄色の固体、４８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.38 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.86 (s, 6H).
【０１３２】
６，７−ジメトキシ−３−ｏ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物５６）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドを２−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物５６（黄色の固体、６８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.45-7.03 (m, 7H), 5.01 (s, 2H), 4.02 (s, 3H), 4.02 (s, 3H), 2.40 (s, 3H).
【０１３３】
[医薬製剤]
以下では、式（Ｄ）の化合物又はその薬学的に許容される塩（以下では化合物Ｘ）を含有する、ヒトにおける治療的又は予防的な使用のための代表的な医薬品剤形を例示する。製剤は、製薬業界でよく知られている従来の手順によって実現することができ、その代表的な医薬品剤形に限定されない。
【０１３４】
１）錠剤（直接圧縮）
ふるいにかけた化合物Ｘ（５．０ｍｇ）を、ラクトース（１４．１ｍｇ）、クロスポビドンＵＳＮＦ（０．８ｍｇ）、及びステアリン酸マグネシウム（０．１ｍｇ）と混合する。混合物を圧縮して錠剤にする。
【０１３５】
２）錠剤（湿式法（Hydroassembly））
ふるいにかけた化合物Ｘ（５．０ｍｇ）を、ラクトース（１６．０ｍｇ）、デンプン（４．０ｍｇ）、及びポリソルベート８０（０．３ｍｇ）と混合する。純水を混合物に加え、混合物を溶解させた。混合物を粒子にし、粒子を乾燥させ、ふるいにかけ、コロイド状二酸化ケイ素（２．７ｍｇ）及びステアリン酸マグネシウム（２．０ｍｇ）と混合する。粒子を錠剤に圧縮する。
【０１３６】
３）粉末及びカプセル剤
ふるいにかけた化合物Ｘ（５．０ｍｇ）を、ラクトース（１４．８ｍｇ）、ポリビニルピロリドン（１０．０ｍｇ）、及びステアリン酸マグネシウム（０．２ｍｇ）と混合する。混合物を、適切な機器を使用してＮｏ．５ゼラチンカプセルに詰める。
【０１３７】
４）注射
化合物Ｘ（１００ｍｇ）、マンニトール（１８０ｍｇ）、及びＮａ２ＨＰＯ４・１２Ｈ２Ｏ（２６ｍｇ）を約２９７４ｍｌの蒸留水に溶解させる。
【０１３８】
[生物学的試験]
１）癌細胞株の成長
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の効果を判定するための癌細胞株は、以下の供給源から得た。アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ、American Type Culture Collection）（バージニア州マナッサス）からのヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１（乳房）、ＰＣ３（前立腺）、ＨＣＴ−１５（結腸）、ＨＣＴ１１６（結腸）、ＯＶＣＡＲ−３（卵巣）、Ｃａｋｉ−１（腎臓）、ＰＡＮＣ−１（膵臓）、ＳＮＢ−１９（膠芽細胞腫）、及びＳＫ−ＭＥＬ−２８（黒色腫）。ＰＣ３、ＯＶＣＡＲ−３、ＳＫ−ＭＥＬ−２８、及びＳＮＢ−１９は、１０％のウシ胎児血清（「ＦＢＳ」、fetal bovine serum）、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、並びに１００Ｕ／ｍｌのペニシリンと１００のμｇ／ｍｌのストレプトマイシン（「Ｐ／Ｓ」）を補充したＲＰＭＩ１６４０培地（Invitrogen、カリフォルニア州カールズバッド）中で成長させた。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、Ｃａｋｉ−１、ＨＣＴ−１５（結腸）、及びＰＡＮＣ−１細胞は、１０％のＦＢＳ、Ｐ／Ｓ、及び１０ｍＭのＨＥＰＥＳを補充したダルベッコ変法イーグル培地（「ＤＭＥＭ」、Dulbecco's modified Eagle's medium、Invitrogen）で維持した。ＨＣＴ１１６細胞は、インビトロ細胞増殖アッセイについては１０％のＦＢＳ、Ｐ／Ｓ、及び１０ｍＭのＨＥＰＥＳを補充したＤＭＥＭ中で、インビトロ細胞周期分析については１０％のＦＢＳ、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、及びＰ／Ｓを補充したＲＰＭＩ１６４０培地で維持した。すべての細胞は、加湿した５％ＣＯ２中にて３７℃でインキュベートした。
【０１３９】
２）ヒト腫瘍細胞株に対するインビトロ細胞増殖アッセイ
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体の様々なヒト腫瘍細胞に対する増殖抑制を評価して、化合物上の特定の置換基の相対的な重要性を調査した。上述のように調製した５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体を、対照としてＤＭＳＯで試験した。
【０１４０】
代表的な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体のヒト腫瘍細胞株に対する増殖抑制アッセイは、スルホローダミンＢ（「ＳＲＢ」Sulforhodamine B）法（Skehan et al., J. National Cancer Institute, 82: 1107-1112 (1990)）を使用して実施した。簡潔に述べると、指数関数的に成長している腫瘍細胞を、２〜３×１０３細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートに播種し、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物で翌日に処理した。各処理に３通りのウェルを使用した。細胞を種々の化合物と共に、加湿した５％ＣＯ２雰囲気中にて３７℃で９６時間インキュベートした。９６時間インキュベートした後、細胞を１０％のトリクロロ酢酸（「ＴＣＡ」、trichloroacetic acid）で固定した、４℃で１時間インキュベートし、水道水で３回洗浄した。その後、細胞を１％酢酸中の０．４％スルホローダミンＢで３０分間染色し、１％の酢酸で４回洗浄し、再度風乾した。１０ｍＭのトリス溶液中で５分間撹拌した後、Benchmark Plus Microplate読取り装置（Bio-Rad Laboratories、カリフォルニア州Hercules）を使用して、各ウェルの吸光度を５３０ｎｍで測定した。
【０１４１】
ＯＤ５３０値を各ウェル中の生細胞数に変換するために、ＯＤ５３０値を、各細胞株について作成した標準のＯＤ５３０対細胞数曲線上の値と対照した。生存度（パーセント）は、次式を使用して算出した。
生存度（％）＝生細胞数［試験］／生細胞数［対照］×１００
ＩＣ５０値は、非線形回帰分析によって算出した。
【０１４２】
ＱＳＡＲ及び医薬品化学技術を使用して、上の表１〜２に示す化合物を含む非常に多くの化合物が合成された。合成された化合物を、約１μＭの濃度で少なくとも４種の癌細胞株、ＰＡＮＣ−１、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＨＣＴ１１６、及びＣａｋｉ−１に対してスクリーニングした。これらの細胞株の少なくとも１つにおいて活性を示す化合物を、新たなスクリーニング用に選択した。それらの化合物から、３０種の化合物を選択して、以下の表３に示すように広域スペクトル抗増殖薬としてさらに評価した。
【０１４３】
表３
【表３】
【０１４４】
表３に示す本発明の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体は、広範囲の腫瘍細胞株に対して活性を有する。化合物の多くは、ＩＣ５０値によって決定される活性が、１μＭ、０．５μＭ、又は０．１μＭよりも著しく小さい。表３にある化合物の中でも、化合物１０、化合物１３、化合物１４、化合物１５、化合物１６、化合物２１、化合物２５、化合物２８、化合物３１、化合物３４、化合物３６、化合物４２、化合物４３、化合物４５、化合物４８、化合物５０、化合物５２などの１７種の化合物は、ヒト癌細胞の増殖抑制において、韓国特許第０４１２３１９号明細書の特許請求の範囲に記載の化合物２３、６−メチル−３−（２−メチルフェニル）−１−イソキノリンアミンと同等又はそれより良好な活性を示した。特に、化合物１３及び化合物１４は、試験した細胞株において化合物２３の５〜１３倍の活性を有する。表３からわかるように、試験した他の化合物の多くは、いくつかの細胞株でＩＣ５０＜１μＭであり、いくつかでＩＣ５０＜０．３μＭであった。２．０μＭ、１．５μＭ、１．０μＭ、又は０．５μＭ以下のＩＣ５０値は、有意な治療活性を表す。したがって、表３の化合物のＩＣ５０は、有意な治療活性を示す。
【０１４５】
３）インビトロの細胞周期分析
このアッセイを使用して、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物が細胞を細胞周期の特定の期で静止させる能力を測定した。薬物処理の前の日に、ＨＣＴ１１６細胞を、１０ｃｍシャーレの１０％ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ１６４０培地に５０〜７０％の飽和度で播き、次いで加湿した３７℃のインキュベーターに入れて５％ＣＯ２雰囲気中で終夜インキュベートした。翌日、ＤＭＳＯに可溶化した適切な濃度の試験化合物を含むＲＰＭＩ１６４０培地（１０％ＦＢＳ含有）をシャーレに加えた。化合物なしの対照処理も含まれた（０．２５％ＤＭＳＯ）。次いで、細胞を１２時間インキュベートし、７０００ｒｐｍで５分間の遠心分離によって収集した。細胞ペレットを、０．１％のグルコース及び２％のＦＢＳを含有する０．２ｍｌのＰＢＳに再懸濁した。その後、振盪しながら５ｍｌの氷冷７０％エタノールを滴下し、処理した細胞を−２０℃で少なくとも３０分間保存した。細胞を、２０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、０．１％のグルコース及び２％のＦＢＳを含有する１ｍｌのＰＢＳで１回洗浄した。上清を除去した後、細胞を、０．１％のトリトンＸ１００、４０ｍＭのクエン酸ナトリウム、ｐＨ７．４を含有する７０μＭのヨウ化プロピジウム（ＰＩ）溶液０．５ｍｌに再懸濁した。ＲＮａｓｅを５０μｇ／ｍｌの最終濃度で加え、細胞を３７℃で３０分間インキュベートした。ＰＩで染色した細胞を、PCA-AFP機器によって、その細胞周期ソフトウェアプログラム（Guava Technologies、カリフォルニア州ヘイワード）を使用して分析し、細胞周期のＧ１、Ｓ、及びＧ２／Ｍ期にある細胞の百分率として示した。以下の表４は、ＨＣＴ１１６細胞を化合物１４又は４３で処理したときの細胞周期のパーセントの変化を示す。
【０１４６】
表４
【表４】
【０１４７】
４）パクリタキセル抵抗性のＨＣＴ−１５ヒト直腸結腸癌細胞に対するインビトロ抗腫瘍効果
化合物１３及び１４を大腸癌細胞で試験し、その抗腫瘍活性をパクリタキセル（タキソール（登録商標））と比較した。表５に示すように、化合物１３及び１４は、インビトロで強力な抗増殖活性を示し、ＩＣ５０値が両方の細胞で低ナノモル範囲にあり、パクリタキセル抵抗性のＨＣＴ−１５直腸結腸癌細胞に対する抗腫瘍活性がパクリタキセルより高かった。ＩＣ５０値を両方の大腸癌細胞で比較したとき、パクリタキセルは、ＨＣＴ−１５細胞でその活性が７０分の１になったが、化合物１３及び１４は両方とも、依然としてこの細胞の成長を強力に抑制した。
【０１４８】
表５
【表５】
【０１４９】
５）エキソビボ異種移植研究
動物モデルにおいて腫瘍成長の抑制を観察するために、化合物１３を利用して、ヌードマウスのエキソビボ異種移植研究を行った。０日目に、パクリタキセル抵抗性ＨＣＴ１５細胞懸濁液（０．２ｍｌのＲＰＭＩ中１×１０６細胞）を、６週齢の雌胸腺欠損マウス（ＢＡＬＢ／ｃ ｎｕ／ｎｕ）の右側腹部に皮下注射した。処置開始日に、可能な限り狭い体積範囲で試験用の腫瘍を選択するのに十分な数のマウスに、ＨＣＴ１５細胞懸濁液を注射した。適切なサイズ範囲の腫瘍を有する動物を種々の処置群に割り振った。パクリタキセルを陽性対照として使用した。化合物１３及びパクリタキセルをＰＢＳ中の５％Cremophor及び５％エタノールに溶解させ、溶媒のみを媒体対照として利用した。すべての研究薬物（媒体対照、パクリタキセル：１０ｍｇ／ｋｇ／日、化合物１３：１０ｍｇ／ｋｇ／日）は、腹腔内投与によって週３回与え、ＨＣＴ１５細胞の接種後１０日目から出発し、２９日目に終えた。腫瘍成長を定量化するために、腫瘍の垂直方向の３通りの直径を３〜５日毎にキャリパーで測定し、毒性についてはマウスの体重をモニターした。式：腫瘍体積（ｍｍ３）＝（幅）×（長さ）×（高さ）×π／６を使用して腫瘍体積を算出した。
【０１５０】
各群の動物の腫瘍体積（平均±ＳＥＭ）を表５に示すが、腫瘍体積の測定値は、ＨＣＴ１５ヒト結腸癌異種移植片に対する化合物１３の有効性の指標として示される。化合物１３での処置では、死亡することなく十分に耐容性が示され、１ｇ以下の体重変動しか認められなかった。２９日目にヌードマウスにおいてＨＣＴ−１５ヒト直腸結腸癌に対する抗腫瘍作用を測定した結果として、以下の表６に示すように、化合物１３の抗腫瘍効力（６９．２％抑制）が、対照薬物のパクリタキセル（４８．８％抑制）より高いことがわかった。
【０１５１】
表６
【表６】
【０１５２】
本発明の新規な化合物は、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体又はその薬学的に許容される塩であるが、これらの化合物は、強力な抗増殖性効果を有し、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を投与することによる、癌を含めた過剰増殖性障害の治療に有用である。本明細書で例示し、論述した実施形態は、本発明を実施し、使用するための、発明者にわかっている最良の方法を当業者に教示するものにすぎない。本明細書では、本発明の範囲を限定するものはないと考えるべきである。提供する例はすべて、典型であり、非限定的である。上述の本発明の実施形態は、上記教示に照らして当業者に得心されるように、本発明から逸脱することなく改変し、又は様々に変更することができる。したがって、請求項及びその相当物の範囲内で、本発明を詳細に記載したものとは別な形で実施してもよいことは理解される。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリール−イソキノリンアミン化合物、その薬学的に許容される塩、及びかかる化合物を含有する組成物、並びに癌を含む高増殖性疾患を治療するための、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリール−イソキノリンアミン化合物を投与することによる治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
化学療法薬は、細胞分裂過程の様々な段階を妨げて、腫瘍細胞を死滅させる。アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、カルムスチン、シスプラチン）、代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサート、５−ＦＵ、ゲムシタビン）、細胞傷害性抗生物質（例えば、ドキソルビシン、マイトマイシン）、及び植物誘導体（例えば、パクリタキセル、ビンクリスチン、エトポシド）を含め、いくつかの部類の化学療法薬が存在する。化学療法は、白血病、他の血液癌、並びに手術不能又は転移性の固形癌の一次治療として用いられる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
現在の化学療法剤は、限られた有効性、衰弱させる有害な副作用、及び多剤耐性の出現を含めて、いくつかの問題点を有する。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
一連の５，６，又は７置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を合成し、抗癌活性を含む治療活性を分析した。本発明の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、前立腺腫瘍、大腸腫瘍、膵臓腫瘍、及び卵巣腫瘍などの腫瘍を含む高増殖性疾患の治療に有用であることが実証されている。
【０００５】
本発明は、新規な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリール−イソキノリンアミン化合物及び誘導体に関する。本発明はまた、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体の抗腫瘍薬としての使用にも関する。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
「５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン」、「５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物」、及び「５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体」という用語は、本出願では互換的に用いられ、以下に定義する式Ｄの化合物を意味する。本出願で使用する科学技術用語はすべて、別段の指定がない限り、当技術分野で通常使用される意味を有する。本出願で使用するとき、以下の語句又は表現は、特定の意味を有する。
【０００７】
本明細書では、「薬学的に許容される担体」とは、本発明の化合物と組み合わせた場合、前記化合物が、マスト細胞及びマクロファージの抗菌活性を増強する能力等の生物活性を維持できる、任意の固体又は液体の物質を意味する。例としては、標準の医薬担体のいずれか、例えば、リン酸緩衝溶液、水、水中油乳濁液等の乳濁液、及び様々なタイプの湿潤剤が挙げられるがこの限りではない。そのような担体を含む組成物は、周知の従来の方法によって製剤される（例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Chapter 43, 14th Ed.、Mack Publishing社、ペンシルヴェニア州イーストンを参照されたい）。
【０００８】
「コンジュゲート」という用語は、２つ以上の分子の複合体として生成した化合物を意味する。より詳細には、本発明では、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体を、細胞特異的なターゲティング部分に結合、例えば共有結合させ、所望の細胞にこの物質を効率的かつ特異的に送達するためのコンジュゲート化合物を生成することができる。
【０００９】
「ターゲティング部分」という表現は、所望の活性に特異的な部位に本発明の化合物を送達するのに役立つ分子を意味する。ターゲティング部分には、例えば、特定の細胞表面上の分子を特異的に結合する分子が含まれる。本発明において有用なそのようなターゲティング部分には、抗細胞表面抗原抗体が含まれる。インターロイキン、及び顆粒球／マクロファージ刺激因子（ＧＭＣＳＦ）などの因子を含むサイトカインも、特異的なターゲティング部分であり、これらの受容体を高レベルで発現する特定の細胞に結合することが知られている。
【００１０】
用語「プロドラッグ部分」は、例えば薬物の細胞への侵入又は化合物の投与を円滑にすることによって本発明の化合物の使用を容易にする置換基である。プロドラッグ部分は、例えば開裂酵素によって、インビボで化合物から切断することができる。プロドラッグ部分の例には、リン酸基、ペプチドリンカー、及び糖が含まれ、これらの部分は、インビボで加水分解され得る。
【００１１】
「高増殖性疾患」という用語は、細胞の異常又は病的な増殖を特徴とする疾患、例えば、腫瘍、癌、腫瘍性組織、並びに他の前癌性及び非腫瘍性又は良性の高増殖性疾患を指す。
【００１２】
本発明によって治療することのできる腫瘍、癌、及び腫瘍性組織の例には、悪性疾患、例えば、乳癌、骨肉腫、血管肉腫、線維肉腫及び他の肉腫、白血病、リンパ腫、洞腫瘍、卵巣癌、尿道癌、膀胱癌、前立腺癌、及び他の泌尿生殖器の癌、大腸食道癌、胃癌及び他の消化器癌、肺癌、骨髄腫、膵癌、肝癌、腎癌、内分泌癌、皮膚癌、並びに神経膠腫及び神経芽細胞腫を含む悪性又は良性の脳又は中枢性及び末梢神経（ＣＮＳ）系の腫瘍が含まれるがこの限りではない。
【００１３】
前癌性及び非腫瘍性又は良性の高増殖性疾患の例には、骨髄異形成障害、上皮内子宮頸癌、ガードナー症候群などの家族性腸ポリープ症、口腔白斑症、組織球増加症、ケロイド、血管腫、高増殖性の動脈狭窄、炎症性関節炎；関節炎を含む過角化及び丘疹鱗屑性の発疹が含まれるがこの限りではない。ウイルスによる高増殖性疾患、例えばいぼやＥＢＶによって誘発される疾患（すなわち伝染性単核球症）、瘢痕形成なども含まれる。本明細書で開示する治療法は、本明細書で定義した高増殖性疾患に罹患したことが判明しているか、若しくは疑われる、又は発症のリスクがある任意の対象に使用することができる。
【００１４】
本明細書では、高増殖性疾患の「治療」とは、高増殖性細胞の本体若しくは集団の成長若しくは大きさの増加又は腫瘍若しくは癌の増殖を阻止し、抑制し、又は緩慢にし、高増殖性細胞数を減少させ、又は他の解剖学的部位への広がりを予防するだけでなく、高増殖性の成長の規模又は高増殖性細胞の数を減少させる方法を指す。本明細書では、「治療」は、必ずしも高増殖性の成長の治癒又は完全な消滅を意味しない。本明細書では、治療有効量は、高増殖性細胞の成長の阻止、その速度の緩慢化、高増殖性細胞本体の大きさの縮小、及び／又は高増殖性細胞の数の減少をもたらすのに有効な量である。強化薬（又は強化薬類）は第１の化合物の活性を強化するのに十分な量で含まれ、したがって、２種（又はそれ以上）の化合物を組み合わせて投与した場合の治療効果は、個々の化合物を単独で投与した場合よりも大きくなる（例えば、相乗的な相互作用、組み合わせた場合の毒性の低下等）。
【００１５】
新規な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、腫瘍等の疾患を治療するための強力な新しい治療用分子となり得る。抗腫瘍薬の新たな開発に関連して、韓国特許第０４１２３１９号明細書は、Ｒ６が水素又は６−メチルであり、Ｒ７が水素、モノ２−、３−、又は４−メチルであり、Ｒ８がアミン、ベンジルアミン、４−メトキシベンジルアミン、ピペリジン、トリメチルエタンジアミン、モルホリン、４−メチルピペラジン、又は４−メチルホモピペラジンである式（Ａ）を有する３−アリールイソキノリンアミン化合物を開示している。韓国特許第０４１２３１９号明細書で開示されている化合物の中でも、６−メチル−３−（２−メチルフェニル）−１−イソキノリンアミンが、ヒトＡ５４９肺癌、ヒトＨＣＴ−１５大腸腺癌、ヒトＳＫ−ＯＶ−３卵巣腺癌、及びヒトＳＫ−ＭＥＬ−２黒色腫に対して有意な治療活性を有する抗癌剤として特許請求の範囲に記載されている。
【００１６】
【化１】
(A)
【００１７】
Carl H.Behrensらによる１９９０年７月１７日発行の米国特許第４９４２１６３号明細書は、式（Ｂ）の３−（１−ナフタレニル）−１（２Ｈ）イソキノリノン及び３−（１−ナフタレニル）−１−イソキノリンアミンを有用な癌化学療法薬として開示している。
【００１８】
【化２】
(B)
【００１９】
さらに、ＰＣＴ国際出願第ＷＯ２００５／０７５４３１号パンフレット及び第ＷＯ２００５／０７５４３２号パンフレットでは、式（Ｃ）を有する１−（２Ｈ）−イソキノロン誘導体の調製が示されている。
【００２０】
【化３】
(C)
【００２１】
本発明は、顕著な抗腫瘍活性を有し、毒性が非常に低く、水への溶解性が十分な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体に関し、韓国特許第０４１２３１９号明細書及び米国特許第４９４２１６３号明細書の特許請求の範囲に記載されていない新規な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体、かかる新規化合物の調製方法及び強力な抗腫瘍活性について示す。
【００２２】
より詳細には、本発明は、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物、並びに対象（例えばヒト患者又は他の動物対象）における高増殖性の障害、疾患、又は病態の治療におけるその使用に関する。本発明による方法は、対象に、有効量の本発明による５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を投与することを含む。そのような治療は、例えば、高増殖性病態を予防し、寛解させ、及び／若しくはその症状を抑制することができ、かつ／又は例えば悪性腫瘍などの腫瘍において細胞増殖若しくは成長を阻止又は抑制することができる。本発明の治療戦略は、全身腫瘍組織量（tumor burden）を少なくとも測定可能な程度軽減し、高増殖性病態を有する患者の生存時間を延長させる。本発明の薬剤による治療に感受性高い疾患、障害、及び状態の例としては、新生物、より詳細には様々な起源の腫瘍（肺、大腸、胃、平滑筋、食道、非ホジキンリンパ腫（non-Hodgkin's lymphoma）、非小細胞肺癌等）が挙げられる。
【００２３】
本発明の方法において有用な化合物には、式Ｄを有する５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミンが含まれる。
【００２４】
【化４】
Ｄ
【００２５】
［式中、
ｎは、０又は１であり
Ｘは独立に、Ｎ、Ｃ、Ｏ、又はＳであり、
Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、独立に、Ｈ、ハロゲン、ＮＨ２、ＮＨＲ５、Ｎ（Ｒ５）２、−Ｏ−Ｒ５、又は−ＯＲ５で置換されていてもよいＲ５であり、
Ｒ４は、Ｈ、３，４−メチレンジオキシド、ハロゲン、−Ｏ−Ｒ５、又は−Ｏ−Ｒ５で置換されていてもよいＲ５から選択される１又は２個の置換基であり、
Ｒ５はＣ１−Ｃ６アルキルである。ここで、化合物が複数のＲ５基を含む場合、Ｒ５基はそれぞれ、同じでも異なっていてもよい］。
【００２６】
上の規定において、「ハロゲン」という呼称は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩを表す。
【００２７】
本明細書では、Ｃ１−Ｃ６アルキルは、１〜６個の炭素原子を有する直鎖状、分枝状、及び環状のアルキル基を表し、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、及びシクロヘキシルがこれに含まれる。
【００２８】
本発明の範囲から特に除外されるのは、（ａ）Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、かつＲ４＝Ｈ、２−メチル、３−メチル、又は４−メチルである化合物及び、（ｂ）Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチル、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、かつＲ４＝Ｈ、２−メチル、又は３−メチルである化合物である。
【００２９】
本発明は、これらの化合物の薬学的に許容される塩も含む。一般式（Ｄ）の化合物の薬学的に許容される塩は、薬学的に許容される無機酸、有機酸、アルカリ金属、及びアンモニウム塩であり、例えば、塩酸、臭素酸、硫酸、硫酸水素ナトリウム、リン酸、硝酸、炭酸等の無機酸との塩、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、コハク酸、安息香酸、クエン酸、マレイン酸、マロン酸、酒石酸、グルコン酸、乳酸、フマル酸、ラクトビオン酸、サリチル酸、アセチルサリチル酸（アスピリン）等の有機酸との塩、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、システイン、シスチン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、チロシン、プロリン等のアミノ酸との塩、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸等のスルホン酸との塩、ナトリウム又はカリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム又はマグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、及びメチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリン又はトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン等との塩といった、生理的に許容される塩をもたらす有機塩基との塩である。
【００３０】
本発明の化合物は、腫瘍を含めた広範囲な高増殖性疾患に対して非常に活性があると言え、抗腫瘍薬として使用することができる。例えば、本発明による化合物は、卵巣腫瘍、前立腺腫瘍、乳房腫瘍、腎臓腫瘍、大腸腫瘍、膵臓腫瘍、脳腫瘍、及び黒色腫に対して活性をもち得る。非常に活性があるとは、特定の腫瘍の少なくとも１種の細胞株に関して、化合物のＩＣ５０が、５．０μＭ以下、２．０μＭ以下、１．０μＭ以下、０．５μＭ以下、０．２μＭ以下、又は０．１μＭ以下となり得ることを意味する。
【００３１】
一般式（Ｄ）の新規な化合物及び薬学的に許容されるその塩は、担体、アジュバント、及び／又は賦形剤などの、薬学的に許容される非毒性の媒体と合わせることができ、次いで混合物を、錠剤、カプセル剤、トローチ、溶液、懸濁液の形で経口的又は非経口的に投与して、ヒト又は哺乳動物の様々な種類の腫瘍を予防又は治療することができる。
【００３２】
一般式（Ｄ）の化合物を活性成分として含有する薬剤組成物の調製で使用することができる媒体には、甘味剤、結合剤、溶解剤、溶解助剤、湿潤剤、乳化剤、等張化剤、吸着剤、崩壊剤（degrading agent）、酸化防止剤、防腐剤、滑沢剤、充填剤、香料等、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース、グリシン、シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、デンプン、ゼラチン、トラガカントガム、グリシン、シリカ、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、寒天、水、エタノール、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、塩化ナトリウム、塩化カリウム、オレンジエッセンス、ストロベリーエッセンス、バニラ香等を含めることができる。
【００３３】
本発明の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、医薬組成物として製剤し、治療を必要とする対象、例えばヒト患者などの哺乳動物に、選択された投与経路に適合させた様々な形態で、例えば、経口的若しくは非経口的に、静脈内、筋肉内、局所、若しくは皮下の経路によって、又は高増殖性の組織若しくは細胞への直接の注射によって投与することができる。
【００３４】
したがって、本発明の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、例えば、不活性希釈剤や同化できる可食性担体などの薬学的に許容される媒体と組み合わせて経口的に、又は吸入若しくはガス注入によって全身に投与することができる。化合物は、硬若しくは軟シェルゼラチンカプセル封入してもよいし、圧縮して錠剤にしてもよいし、又は患者の食事の食物と直接混ぜてもよい。治療的な経口投与では、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、１又は複数の賦形剤と合わせ、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル剤、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウェーハなどの形で使用することができる。５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、微細な不活性粉末担体と合わせ、対象によって吸入されてもよいし、又は吹き込んでもよい。そのような組成物及び製剤は、少なくとも０．１％の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を含有すべきである。組成物及び製剤の百分率は当然、様々でよく、所与の単位剤形の重量の約２％〜約６０％の間にあることが好都合である。このような治療上有用な組成物中の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の量は、有効投与量レベルが得られる量である。
【００３５】
錠剤、トローチ、丸剤、カプセル剤等は、トラガカントゴム、アカシア、トウモロコシデンプン、ゼラチンなどの結合剤、リン酸二カルシウム（dicalcium phosphate）等の賦形剤、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、アルギン酸などの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤、及びスクロース、フルクトース、ラクトース、アスパルテーム等の甘味剤も含有してよく、又はハッカ、冬緑油、チェリーフレーバー等の香料を加えてもよい。単位剤形がカプセル剤であるとき、上記種類の材料に加え、植物油及びポリエチレングリコール等の液体担体も含有してよい。コーティングとしての、又は固形単位剤形の物理形態を別な形で変更するための、他の様々な材料が存在する場合もある。例えば、錠剤、丸剤、又はカプセル剤は、ゼラチン、ワックス、セラック、又は糖等でコーティングすることができる。シロップ又はエリキシルは、活性化合物、甘味剤としてのスクロース又はフルクトース、保存剤としてのメチルパラベン及びプロピルパラベン、色素、及びチェリーフレーバーやオレンジフレーバー等の香料を含有してよい。当然、単位剤形を調製する際に使用するどんな材料も、薬学的に許容され、用いられる量では実質的に非毒性であるべきである。さらに、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、徐放性製剤及びデバイスに組み込むこともできる。
【００３６】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、注入又は注射によって静脈内又は腹腔内に投与することもできる。５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の溶液は水で調製することができ、必要に応じて非毒性の界面活性剤と混合されていてもよい。分散液は、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、トリアセチン、及びこれらの混合物中に、また油中に調製することもできる。貯蔵及び使用の通常の条件では、これらの製剤は、微生物の増殖を防ぐために保存剤を含有してよい。
【００３７】
注射又は注入に適する医薬品剤形は、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を含む無菌の水性溶液若しくは分散液又は無菌粉末を含むことができる。かかる無菌の水性溶液若しくは分散液又は無菌粉末は、無菌の注射若しくは注入用溶液又は分散液の要時調合用製剤（extemporaneous preparation）に適し、必要に応じてリポソームにカプセル封入されていてもよい。すべての場合において、最終的な剤形は、製造及び貯蔵条件下で無菌、液体、安定であるべきである。液体担体又は媒体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、植物油、非毒性のグリセリルエステル、及びこれらの適切な混合物を含む溶媒又は液体分散媒でよい。例えば、リポソームを生成し、分散液の場合では必要な粒径を保ち、又は界面活性剤を使用して、適切な流動度を維持することができる。微生物の作用は、様々な抗菌剤及び抗かび剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによって防止することができる。多くの場合では、等張化剤、例えば、糖、緩衝剤、又は塩化ナトリウムを含めることが好ましい。注射用組成物の持続性吸収は、組成物中に吸収を遅らせる物質、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを使用して実現することができる。
【００３８】
無菌の注射用溶液は、必要な量の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を、必要に応じて、上で列挙した他の成分のいく種類かと共に適切な溶媒中に包含させた後、フィルター滅菌にかけて調製する。無菌注射用溶液を調製するための無菌粉末の場合では、好ましい調製方法は、真空乾燥法及び凍結乾燥法であるが、これらの方法では、以前には除菌された溶液中に存在した活性成分と任意の所望の追加成分の粉末が得られる。
【００３９】
局所投与では、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、純粋な形で適用することができる。しかし、一般に、皮膚科学的に許容される担体と組み合わせて、固体でも液体でもよい組成物又は製剤として皮膚に投与することが望ましい。
【００４０】
有用な固体担体には、タルク、粘土、微結晶セルロース、シリカ、アルミナなどの、砕かれた固体が含まれる。他の固体担体としては、非毒性の高分子ナノ粒子又は微粒子が挙げられる。有用な液体担体としては、水、アルコール、グリコール、又は水／アルコール／グリコールブレンドが挙げられるが、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、必要に応じて非毒性界面活性剤を採用して、これに有効なレベルで溶解又は分散させることができる。香料や追加の抗菌剤などのアジュバントを加えると、その性質を所与の用途向けに最適化することができる。得られる液体組成物は、吸収性のパッドから適用し、絆創膏及び他の包帯剤に含浸させるのに使用し、又はポンプ型噴霧器若しくはエアロゾル噴霧器を使用して患部に噴霧することができる。
【００４１】
液体担体と共に、合成ポリマー、脂肪酸、脂肪酸の塩及びエステル、脂肪アルコール、化工セルロース、改質された鉱物材料などの増粘剤も使用すると、使用者の皮膚に直接適用するための、のびのよいペースト、ゲル、軟膏、石鹸などを調製することができる。
【００４２】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の皮膚への送達に使用することのできる有用な皮膚科用組成物の例は、当業者に知られており、例えば、Jacquetら（米国特許第４６０８３９２号明細書）、Geria（米国特許第４９９２４７８号明細書）、Smithら（米国特許第４５５９１５７号明細書）、及びWortzman（米国特許第４８２０５０８号明細書）を参照されたい。
【００４３】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の有用な投与量は、そのインビトロ活性及び動物モデルでのインビボ活性を比較して求めることができる。マウス及び他の動物においてヒトの有効投与量を推定する方法は、当業者に知られており、例えば、米国特許第４９３８９４９号明細書を参照されたい。
【００４４】
一般に、ローションなどの液体組成物中の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の濃度は、約０．１〜２５重量％、又は約０．５〜１０重量％となる。ゲルや粉末などの半固体又は固体組成物中の濃度は、約０．１〜５重量％、又は約０．５〜２．５重量％であってよい。
【００４５】
治療の用途に必要な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の量は、選択される特定の塩及び投与経路、治療対象となる病体の性質、並びに患者の年齢及び状態に応じて様々であり、最終的に担当医師又は臨床医の裁量によるところとなる。
【００４６】
本発明の薬剤の有効投与量及び投与経路は、標準的である。５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の正確な量（有効量）は、例えば、対象の種、年齢、体重、一般的また臨床的な状態、治療対象となる疾患の重症度又は機序、使用する特定の薬剤又は媒体、方法及び投与スケジュールなどに応じて対象によって様々となる。治療有効量は、当業者に知られている従来の手順によって経験的に求めることができる。例えば、The Pharmacological Basis of Therapeutics, Goodman and Gilman, eds., Macmillan Publishing Co., New Yorkを参照されたい。例えば、有効量は、最初に細胞培養アッセイ又は適切な動物モデルにおいて推定することができる。動物モデルを使用して、適切な濃度範囲及び投与経路を求めることもできる。次いで、そのような情報を使用して、ヒトにおける有用な用量及び投与経路を求めることができる。治療量は、同等の治療薬の投与量からの類推によって選択することもできる。
【００４７】
特定の投与方式及び投与計画は、診療する臨床医によって、症例の詳細（例えば、対象、疾患、関わる疾患状態、及び治療が予防的であるかどうか）を考慮して選択される。治療では、１日量又は複数回の１日量（multi-daily dose）の化合物を、２〜３日から数カ月、又は数年の期間にわたり使用することができる。
【００４８】
しかし、一般には、適切な用量は、体重１ｋｇあたり１日約０．５〜約１００ｍｇ、例えば約１０〜約７５ｍｇ、例えばレシピエントの体重１キログラムあたり１日３〜約５０ｍｇ、６〜９０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、又は１５〜６０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲にある。例えば、適切な用量は、１日あたり０．５、５、１０、２５、５０、１００、２５０、又は５００ｍｇ／体重ｋｇとすることができる。
【００４９】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、例えば、単位剤形あたり５〜１０００ｍｇ、１０〜７５０ｍｇ、又は５０〜５００ｍｇの活性成分を含有する単位剤形にして投与すると好都合である。
【００５０】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、約０．５〜約７５μＭ、約１〜５０μＭ、又は約２〜約３０μＭのピーク血漿濃度を実現するように投与することができる。好例となる望ましい血漿濃度としては、０．２５、０．５、１、５、１０、２５、５０、７５、１００、又は２００μＭ以上又は以下が挙げられる。これは、例えば、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の０．０５〜５％溶液（任意選択で食塩水溶液）を静脈内注射して実現し、又は約１〜１００ｍｇの５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を含有するボーラス投与として経口的投与することができる。望ましい血中濃度は、約０．０１〜５．０ｍｇ／ｋｇ／ｈｒ、例えば０．００５、０．０１、０．１、２．５、５．０、又は１０．０ｍｇ／ｋｇ／ｈｒ以上又は以下をもたらす連続的な注入によって維持することができる。或いは、そのようなレベルは、約０．４〜１５ｍｇ／ｋｇ、例えば０．２５、０．５、１．０、５．０、１０．０、１５．０、又は２５．０ｍｇ／ｋｇ以上又は以下の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を含有する断続的な注入によって実現することもできる。
【００５１】
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物は、１回で、又は適切な間隔で投与される分割された用量、例えば１日あたり２、３、４回、又はそれ以上の部分用量として好都合に投与することができる。部分用量それ自体も、例えば、注入器からの複数回の吸入などの、漠然と間隙を挟んだ幾回かの別々の投与に、又は眼への複数の液滴の適用によって、さらに分けることができる。
【００５２】
[５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミンの細胞への標的指向化]
好例となる実施形態では、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を、治療が所望される細胞、例えば、ヒト癌細胞に標的指向化する。化合物は、所望の細胞を特異的に結合するターゲティング部分に結合させ、それによってコンジュゲート分子の投与が振り向けられることにより、所望の細胞に標的指向化される。有用なターゲティング部分は、細胞抗原を特異的に結合するリガンド、又は細胞表面リガンド、例えば、Ｂ細胞抗原に対する抗体、ＣＤ１９（Ｂ４３など）などである。
【００５３】
本発明のコンジュゲートを生成するには、ターゲティング部分を、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物上の部位に共有結合させる。ターゲティング部分は、ポリペプチド分子であることが多く、本発明の化合物に、ＮＨ２、ＳＨ、ＣＨＯ、ＣＯＯＨ等を含む反応部位で結合させる。化合物を連結する特定の連結剤（linking agent）を使用する。連結剤は、ターゲティング部分を結合させる反応部位にしたがって選択する。
【００５４】
本発明の化合物にターゲティング部分を結合させるのに適する連結剤及び反応部位を選択する方法は、知られており、例えば、Hermanson, et al., Bioconjugate Techniques, Academic Press, 1996、Hermanson, et al., Immobilized Affinity Ligand Techniques, Academic Press, 1992、及びPierce Catalog and Handbook, 1996, pp. T155-T201に記載されている。
［実施例］
【００５５】
本発明は、以下の実施例を参照することでさらに明快になり得るが、好ましい実施形態の一部を例示するのに役立てるものであり、いかなる点でも本発明を限定しない。
【００５６】
実施例１〜３．
[イソキノリンアミン誘導体の合成]
すべての化学薬品は、試薬一級（reagent grade）であり、Aldrich Chemical Company（ウィスコンシン州ミルウォーキー）、Sigma Chemical Company（ミズーリ州セントルイス）、又はTrans World Chemicals（メリーランド州ロックヴィル）から購入した。溶媒は、使用前に常法どおりに蒸留した。無水ＴＨＦは、使用前にナトリウム／ベンゾフェノンから蒸留した。
【００５７】
融点は、Electrothermal IA9200融点測定装置で求め、補正していない。核磁気共鳴スペクトルは、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）をゼロｐｐｍでの内部標準として使用して、Varian 300分光計で記録し、化学シフトは百万分率（ｐｐｍ）で報告し、結合定数（Ｊ）はヘルツで示し、略語のｓ、ｄ、ｔ、ｑ、及びｍは、それぞれ一重線、二重線、三重線、四重線、及び多重線を指す。
【００５８】
ＩＲスペクトルは、ＫＢｒペレットを使用して、パーキン・エルマー７８３分光計及びニコレット機器で記録した。元素分析は、CaHo Erba元素分析計で実施した。カラムクロマトグラフィーは、Merck社製シリカゲル６０（７０〜２３０メッシュ）で実施した。ＴＬＣは、Merck社から購入したシリカゲル６０Ｆ２５４でコートしたプレートを使用して実施した。
【実施例１】
【００５９】
[化合物１〜化合物１２の一般合成手順]
化合物１〜化合物１２は、スキーム１で論述するとおりに合成し、特徴付けた。構造及び物性データを以下に示す。
【００６０】
スキーム１
【化５】
【００６１】
表１
【表１】
【００６２】
３−（２−クロロフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物１）の調製−無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）に、−７０℃でＬｉＮＭｅ２（５％のヘキサン懸濁液５ｍＬ、３．３ｍｍｏｌ）を加えた。ＨＭＰＡ（５９０ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を加えた後、反応混合物をｏ−トルニトリル（３５０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液で処理した。得られる赤色−青紫色の溶液を３０分間撹拌し、次いで２−クロロベンゾニトリル（８２５ｍｇ、６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液で処理した。反応混合物を６０℃で１時間加熱し、１０％のＨＣｌ（２０ｍＬ）を使用して加水分解した。得られる塩酸塩懸濁液を、ジエチルエーテルで３回洗浄した。次いで、懸濁液をＮａＯＨで中和し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせて水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去した後、残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（１：１）でのカラムクロマトグラフィーによって精製して、１−アミノ化合物を得た。１−アミノ化合物のアセトン（５ｍＬ）溶液にｃ−ＨＣｌを加えて、沈殿を得た。沈殿を収集し、アセトンで洗浄して、アミン塩酸塩（１８３．４ｍｇ、２１％）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.80-7.29 (m, 9H), 5.41 (s, 2H).
【００６３】
以下の化合物２〜１２は、化合物１と同様の方法に従って調製した。
【００６４】
３−（３−クロロフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物２）の調製−ｏ−トルニトリルを３−クロロベンゾニトリルと反応させると、化合物２（白色固体、５３％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.05-7.29 (m, 9H), 5.49 (s, 2H).
【００６５】
３−（４−クロロフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物３）の調製−ｏ−トルニトリルを４−クロロベンゾニトリルと反応させると、化合物３（白色固体、３２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.00 (m, 2H), 7.78 (m, 2H), 7.61 (m, 1H), 7.49-7.40 (m, 4H), 5.26 (s, 2H)
【００６６】
３−（３−メトキシフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物４）の調製−ｏ−トルニトリルを３−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物４（白色固体、３６％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.99 (d, 1H), 7.95-7.30 (m, 7H), 6.96 (d, 1H), 5.26 (s, 2H), 3.90 (s, 3H).
【００６７】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物５）の調製−ｏ−トルニトリルを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物５（黄色の固体、５２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.04 (d, 1H), 7.71-7.46 (m, 5H), 7.21 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.94 (s, 3H).
【００６８】
３−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−６−イル）イソキノリン−１−アミン（化合物６）の調製−ｏ−トルニトリルをベンゾ［１，３］ジオキソール−５−カルボニトリルと反応させると、化合物６（黄色の固体、３０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.71 (m, 2H), 7.59-7.54 (m, 3H), 7.40 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.89 (m, 1H), 5.98 (s, 2H), 5.25 (s, 2H).
【００６９】
３−（ピリジン−３−イル）イソキノリン−１−アミン（化合物７）の調製−ｏ−トルニトリルを３−シアノピリジンと反応させると、化合物７（黄色の固体、６２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 9.24 (s, 1H), 8.58 (d, 1H), 8.32 (m, 1H), 7.81-7.45 (m, 6H), 5.57 (s, 2H).
【００７０】
３−（チオフェン−２−イル）イソキノリン−１−アミン（化合物８）の調製−ｏ−トルニトリルをチオフェン−２−カルボニトリルと反応させると、化合物８（黄色の固体、２０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.58 (m, 3H), 7.49 (m, 1H), 7.35(s, 1H), 7.29 (m, 2H), 7.07 (m, 1H), 5.35 (s, 2H)．
【００７１】
３−（フラン−２−イル）イソキノリン−１−アミン（化合物９）の調製−ｏ−トルニトリルを２−フロニトリルと反応させると、化合物９（黄色の固体、２０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.73-7.70 (m, 2H), 7.49- 7.57 (m, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.26 (m, 1H), 6.99 (m, 1H), 6.47 (m, 1H), 5.47 (s, 2H).
【００７２】
７−クロロ−３−（５−クロロ−２−メチルフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物１０）の調製−５−クロル−２−メチルベンゾニトリルを５−クロロ−２−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物１０（黄色の固体、２２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.81 (s, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.23 (m, 2H), 7.09 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 2.53 (s, 3H).
【００７３】
６−メトキシ−３−フェニルイソキノリン−１−アミン（化合物１１）の調製−４−メトキシ−２−メチルベンゾニトリルをベンゾニトリルと反応させると、化合物１１（黄色の固体、３３％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.02 (m, 2H), 7.57 (d, 1H), 7.44-7.30 (m, 4H), 6.93 (m, 2H), 5.40 (s, 2H), 3.79 (s, 3H).
【００７４】
６−メトキシ−３−（３，４−ジメトキシフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物１２）の調製−４−メトキシ−２−メチルベンゾニトリルを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物１２（黄色の固体、３５％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.72 (s, 1H), 7.60-7.52 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.92-6.81 (m, 3H), 5.69 (s, 2H), 3.87(s, 3H), 3.77(s, 3H), 3.74(s, 3H).
【実施例２】
【００７５】
[置換２−メチル−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミドの合成]
【００７６】
スキーム２
【化６】
【００７７】
ａ）２，Ｎ，Ｎ−トリメチル−５−ニトロベンズアミド（２）の調製
２，Ｎ，Ｎ−トリメチル−５−ニトロベンズアミドの調製では、米国特許第４９４２１６３号明細書に記載の手順を利用した。２−メチル−５−ニトロ安息香酸（５ｇ、２７．６ｍｍｏｌ）と塩化チオニル（１６．４ｇ、１３８ｍｍｏｌ）の反応混合物を終夜還流させた。減圧蒸留によって過剰の塩化チオニルを除去して、塩化２−メチル−５−ニトロ−ベンゾイルを固体残渣として得た。この材料を塩化メチレン（３０ｍＬ）に溶解させ、温度を０〜１２℃に保ちながら、市販の４０％ジメチルアミン溶液（３０ｇ、２７０ｍｍｏｌ）に撹拌しながら滴下した。加え終えた後、反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、塩化メチレンで抽出した。有機抽出物を合わせて水で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製して、アミドを固体（５．４６ｇ、９５％）として得た。同一性を１Ｈ ＮＭＲによって検証した。
【００７８】
ｂ）５−アミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミド（３）の調製
アミド（５．４５ｇ、２６．２ｍｍｏｌ）のメタノール（３０ｍＬ）溶液を、６０ｐｓｉのＨ２中にて５％のＰｄ／Ｃ（０．３ｇ）の存在下、Parr社製水素化装置を使用して終夜水素化した。反応混合物をセライトで濾過し、濾過ケーキをメタノールで洗浄した。濃縮した後、残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（１：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物を固体（４．６３ｇ、９９％）として得た。同一性を１Ｈ ＮＭＲによって検証した。
【００７９】
ｃ）５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミド（４）の調製
アミン（４．６３ｇ、２６ｍｍｏｌ）及びＨＣＨＯ（７．０２ｇ、７８ｍｍｏｌ）の０℃のメタノール（４０ｍＬ）溶液に、ＮａＢＨ３ＣＮ（３．２２ｇ、５２ｍｍｏｌ）及びＺｎＣｌ２（３．５３ｇ、２６ｍｍｏｌ）のメタノール（３０ｍＬ）溶液を滴下した。加え終えた後、反応混合物を室温に温めた。反応混合物を１．０Ｎ ＮａＯＨ（１００ｍＬ）で失活させ、メタノールを除去した。残渣を酢酸エチルで抽出し、有機抽出物を合わせて水で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製して、アミドを油（５．０４ｇ、９４％）として得た。同一性を１Ｈ ＮＭＲによって検証した。
【００８０】
他の３又は４−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドは、５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミド（４）と同様の方法に従って調製した。３−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドの合成は、Bioorganic & Medicinal Chemistry paper (vol. 6、2449 (1998))に記載されている。４−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドの合成は、国際公開第ＷＯ２００５／０７５４３２号パンフレットに記載されている。５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドの合成は、米国特許第４９４２１６３号明細書に記載されている。
【実施例３】
【００８１】
[化合物１３〜化合物５６の合成]
化合物１３〜化合物５６は、スキーム３で論述するとおりに合成し、特徴付けた。構造及び物性データを以下に示す。
【００８２】
スキーム３
【化７】
【００８３】
表２
【表２】
【００８４】
[３−（３−メトキシフェニル）−Ｎ７，Ｎ７−ジメチルイソキノリン−１，７−ジアミン塩酸塩（化合物１３）の調製]
【００８５】
ａ）７−ジメチルアミノ−３−（３−メトキシフェニル）−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（Ｉ）
ジイソプロピルアミン（１．５ｇ、１５ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、−７８℃でｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍを６ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミド（２．０６ｇ、１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を−７８℃で滴下し、赤橙色の溶液を同温度で１時間撹拌した。３−メトキシベンゾニトリル（１．７ｇ、１３ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を加え、反応混合物を−７８℃で２時間撹拌した。反応液を水で失活させ、酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去した後、残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物Ｉを黄色の固体（５９６ｍｇ、２０％）として得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 9.73 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.50 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.38 (m, 1H), 7.23-7.22 (m, 3H), 6.96 (m, 1H), 6.74 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.09 (s, 6H).
【００８６】
ｂ）［１−クロロ−３−（３−メトキシフェニル）イソキノリン−７−イル］ジメチルアミン（II）
３−アリールイソキノリノンＩ（５５０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）とＰＯＣｌ３（１０ｍＬ）の反応混合物を５０℃で終夜撹拌した。ＰＯＣｌ３を減圧蒸留によって除去し、残渣を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせて水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を除去した後、残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物IIを黄色の固体（５３０ｍｇ、９０％）として得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.85 (s, 1H), 7.72 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.64-7.62 (m, 2H), 7.39-7.35 (m, 2H), 7.22 (d, J = 2Hz, 1H), 6.92 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.13 (s, 6H).
【００８７】
ｃ）Ｎ１−（４−メトキシベンジル）−３−（３−メトキシフェニル）−Ｎ７，Ｎ７−ジメチルイソキノリン−１，７−ジアミン（III）
１−クロロイミンイソキノリンII（５００ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、４−メトキシベンジルアミン（８７７ｍｇ、６．４ｍｍｏｌ）、及び炭酸カリウム（２ｇ、１５ｍｍｏｌ）をＤＭＦに混ぜた混合物を、終夜還流させた。反応混合物を室温に冷却し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせて水で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（３：１）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物III（３１０ｍｇ、４７％）を得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.74-7.62 (m, 3H), 7.45-7.33 (m, 4H), 7.22 (m, 1H), 6.92 (m, 3H), 6.66 (m, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.91 (d, 2H) , 3.91 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.09 (s, 6H).
【００８８】
ｄ）３−（３−メトキシフェニル）−Ｎ７，Ｎ７−ジメチルイソキノリン−１，７−ジアミン塩酸塩（IV、化合物１３）
Ｎ１−（４−メトキシベンジル）−イソキノリンアミン化合物III（３００ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（５ｍＬ）を塩化メチレン（５ｍＬ）に混ぜた反応混合物を、２日間還流させた。ＮａＨＣＯ３の溶液を加え、反応混合物を塩化メチレンで抽出した。有機抽出物を合わせて水で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。残渣を、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（１：１）を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、１−アミノイソキノリン（１５１ｍｇ、７１％）を得た。１−アミノ化合物をアセトン（５ｍＬ）に溶解させ、濃ＨＣｌ ５滴を加えた。塩酸塩を濾過し、濾過ケーキをアセトンで洗浄した。乾燥後、１２０ｍｇの１−アミノイソキノリン塩酸塩が得られた（化合物１３、５０％）。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 13.57 (s, 1H), 9.37 (s, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.55-7.39 (m, 6H), 7.02 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.06 (s, 6H).
【００８９】
以下の化合物１４〜５６は、化合物２２〜５６の調製ではステップ（ａ）でジイソプロピルアミンを利用しなかったことを除き、化合物１３と同様の方法に従って調製した。
【００９０】
Ｎ７，Ｎ７−ジメチル−３−ｍ−トリルイソキノリン−１，７−ジアミン塩酸塩（化合物１４）−５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドをｍ−トルニトリルと反応させると、化合物１４（黄色の固体、６２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.85 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.35-7.24 (m, 2H), 7.15 (m, 1H), 6.76 (m, 1H), 5.30 (s, 2H), 3.06 (s, 6H), 2.43 (s, 3H).
【００９１】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）−Ｎ７，Ｎ７−ジメチルイソキノリン−１，７−ジアミン塩酸塩（化合物１５）−５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物１５（黄色の固体、６３％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 13.56 (s, 1H), 9.34 (s, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.58-7.46 (m, 5H), 7.06 (d, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.06 (s, 6H).
【００９２】
３−（３，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ７，Ｎ７−ジメチルイソキノリン−１，７−ジアミン塩酸塩（化合物１６）−５−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドを３，５−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物１６（黄色の固体、７６％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 13.50 (s, 1H), 9.31 (s, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.54-7.47 (m, 2H), 7.14 (d, 2H), 6.58 (t, 1H), 3.84 (s, 6H), 3.07 (s, 6H).
【００９３】
Ｎ５，Ｎ５−ジメチル−３−フェニルイソキノリン−１，５−ジアミン（化合物１７）−３−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドをベンゾニトリルと反応させると、化合物１７（黄色の固体、７３％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.08 (m, 2H), 7.82 (s, 1H), 7.48-7.33 (m, 5H), 7.18 (m, 2H), 5.24 (s, 2H), 2.89 (s, 6H).
【００９４】
Ｎ５，Ｎ５−ジメチル−３−ｏ−トリルイソキノリン−１，５−ジアミン（化合物１８）−３−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドをｏ−トルニトリルと反応させると、化合物１８（黄色の固体、６０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 13.87 (s, 1H), 8.42 (d, 1H), 7.82-7.71 (m, 2H), 7.50-7.33 (m, 5H), 2.91 (s, 6H), 2.42 (s, 3H).
【００９５】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）−Ｎ５，Ｎ５−ジメチルイソキノリン−１，５−ジアミン（化合物１９）−３−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物１９（黄色の固体、４０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9.69 (s, 2H), 8.40 (d, 1H), 7.93-7.91 (m, 2H), 7.75-7.67 (m, 3H), 7.13 (d, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 3.03 (s, 6H).
【００９６】
Ｎ５，Ｎ５−ジメチル−３−（２，６−ジメチルフェニル）イソキノリン−１，５−ジアミン（化合物２０）−３−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドを２，６−ジメチルベンゾニトリルと反応させると、化合物２０（黄色の固体、６０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.46-7.41 (m, 2H), 7.29-7.09 (m, 5H), 5.58 (s, 2H), 2.83 (s, 6H), 2.14 (s, 6H).
【００９７】
３−（３−メトキシフェニル）−Ｎ６，Ｎ６−ジメチル−イソキノリン−１，６−ジアミン（化合物２１）−４−ジメチルアミノ−２，Ｎ，Ｎ−トリメチルベンズアミドを３−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２１（褐色の固体、３５％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7.70 (d J = 8.4 Hz, 1H), 7.57-7.51 (m, 2H), 7.38 (d J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.03 (dd, J = 8.1 Hz, J = 2.8 Hz, 1H), 6.94 (m, 1H), 6.74 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.11 (s, 6H).
【００９８】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）−５−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２２）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，３−ジメチルベンズアミドを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２２（黄色の固体、６５％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.70(m, 1H), 7.57-7.62 (m, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.40 (m, 1H), 7.28 (m, 1H), 6.94 (d, J= 8.4Hz, 1H), 5.42 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.88(s, 3H), 2.63 (s, 3H).
【００９９】
６−メチル−３−ｏ−トリルイソキノリン−１−アミン塩酸塩（化合物２３）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドをｏ−トルニトリルと反応させると、化合物２３（黄色の固体、６７％）が得られた。Mp 269.1-270.2℃. IR (cm-1): 3300, 1650. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 13.84 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.79-7.57 (m, 7H), 7.38 (s, 1H), 2.75 (s, 3H), 2.61 (s, 3H). 13C NMR (DMSO-d6) δ: 153.4, 144.4, 137.0, 135.9, 134.8, 131.6, 129.4, 128.7, 128.5, 128.4, 125.7, 124.8, 124.0, 113.0, 109.5. MS, m/e (%): 248 (M+, 100), 232 (87), 230 (54). C17H17ClN2(C, H, N)の元素分析計算値: 71.70, 6.02, 9.84. 実測値: 71.58, 6.27, 9.58.
【０１００】
３−（２−メトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２４）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを２−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２４（黄色の固体、６４％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.03 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.35-7.23 (m, 3H), 7.05- 6.97 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.47 (s, 3H).
【０１０１】
３−（３−メトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２５）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを３−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２５（黄色の固体、６８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.67-7.59 (m, 3H), 7.51 (s, 1H), 7.38-7.24 (m, 3H), 6.94-6.90 (m, 1H), 5.26 (bs, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.48 (s, 3H).
【０１０２】
３−（４−メトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２６）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを４−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２６（黄色の固体、６０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.04 (d, J= 8.1Hz, 2H), 7.65 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.17 (d, J= 8.2Hz, 1H), 6.95 (d, J= 8.5Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.43 (s, 3H).
【０１０３】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２７）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２７（黄色の固体、７９％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.67-7.64 (m, 2H), 7.54 (m, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.18 (m, 1H), 6.91 (d, J= 8.5Hz, 1H), 5.76 (s, 2H), 3.96(s, 3H), 3.89 (s, 3H), 2.50(s, 3H).
【０１０４】
３−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−６−イル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２８）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドをベンゾ［１，３］ジオキソール−５−カルボニトリルと反応させると、化合物２８（黄色の固体、７１％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.63 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.54 (m, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.22 (m, 2H), 6.88 (d, J= 8.5Hz, 1H), 5.98 (s, 2H), 5.40 (s, 2H), 2.46 (s, 3H).
【０１０５】
３−（４−エトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物２９）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを４−エトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物２９（黄色の固体、６７％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.96 (m, 2H), 7.66 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.47(s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.23(m, 1H), 6.97(m ,2H), 5.36 (s, 2H), 4.05 (q, J= 7.0Hz, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.43 (t, J= 7.0Hz, 3H).
【０１０６】
３−（３，５−ジメトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３０）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを３，５−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物３０（黄色の固体、９０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8.42 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.60 (m, 2H), 7.11 (m, 2H), 6.62 (s, 1H), 3.45 (s, 6H), 2.49 (s, 3H).
【０１０７】
３−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３１）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを４−メトキシ−２−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物３１（黄色の固体、６７％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.97 (d, J= 8.5Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.37-7.28 (m, 2H), 7.15-6.91 (b, 2H), 6.85 (s, 1H), 6.76 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.37 (s, 3H).
【０１０８】
３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３２）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを３，４，５−トリメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物３２（黄色の固体、２６％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.73 (d, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.32-7.25 (m, 3H), 6.97-6.71 (m, 1H), 5.63 (s, 2H ), 4.04 (s, 6H), 3.90 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
【０１０９】
３−（２−フルオロフェニル）−６−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３３）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを２−フルオロベンゾニトリルと反応させると、化合物３３（黄色の固体、６９％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.00 (m, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.34-7.14 (m, 4H), 5.39 (s, 2H), 2.51 (s, 3H).
【０１１０】
６−メチル−３−（２，６−ジメチルフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物３４）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドを２，６−ジメチルベンゾニトリルと反応させると、化合物３４（黄色の固体、６８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.72 (d, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.20-7.08 (m, 3H), 6.89 (s, 1H), 5.26 (s, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.12 (s, 6H).
【０１１１】
６−メチル−３−ｍ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物３５）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドをｍ−トルニトリルと反応させると、化合物３５（白色固体、８９％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 9.36 (s, 2H), 8.44 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.83-7.79 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.46-7.39 (m, 2H), 7.28 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 2.57 (s, 3H), 2.46 (s, 3H).
【０１１２】
６−メチル−３−ｐ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物３６）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，４−ジメチルベンズアミドをｐ−トルニトリルと反応させると、化合物３６（白色固体、７５％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.94 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.29-7.24 (m, 3H), 5.43 (s, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.40 (s, 3H).
【０１１３】
３−（２−メトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３７）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを２−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物３７（黄色の固体、３８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.00 (s, 1H), 7.63-7.50 (m, 3H), 7.41 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.06-7.00 (m, 2H), 3.87(s, 3H), 2.50 (s, 3H).
【０１１４】
３−（３−メトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３８）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを３−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物３８（黄色の固体、９２％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.74 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.54-7.45 (m, 3H), 7.37 (t, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.93 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 2.49 (s, 3H).
【０１１５】
３−（４−メトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物３９）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを４−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物３９（黄色の固体、５４％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.97 (d, 2H), 7.63 (d, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.97 (d, 2H), 3.86 (s, 3H), 2.51 (s, 3H).
【０１１６】
３−（４−エトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４０）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを４−エトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物４０（黄色の固体、６７％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.97 (d, 2H), 7.62 (d, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.96 (d, 2H), 5.26 (s, 2H), 4.06 (q, 2H), 2.49 (s, 3H), 1.43 (t, 3H).
【０１１７】
３−（２−フルオロフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４１）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを２−フルオロベンゾニトリルと反応させると、化合物４１（黄色の固体、７９％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.05 (m, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.31-7.06 (m, 3H), 5.17 (s, 2H), 2.52 (s, 3H).
【０１１８】
３−（４−メトキシ−２−メチルフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４２）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを４−メトキシ−２−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物４２（黄色の固体、９０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.93 (s, 2H), 7.57-7.55 (d, 2H), 7.32 (d, 1H), 6.82-6.78 (m, 3H), 3.82 (s, 3H), 2.53 (s, 3H), 2.36 (s, 3H).
【０１１９】
７−メチル−３−（２，６−ジメチルフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物４３）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを２，６−ジメチルベンゾニトリルと反応させると、化合物４３（黄色の固体、６８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.63-7.46 (m, 3H), 7.19-7.08 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 5.17 (s, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.12 (s, 6H).
【０１２０】
３−（３，４−ジメトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４４）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを３，４−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物４４（黄色の固体、４６％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.80 (s, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.55-7.46 (m, 3H), 7.19 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.02 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
【０１２１】
３−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−６−イル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４５）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドをベンゾ［１，３］ジオキソール−５−カルボニトリルと反応させると、化合物４５（黄色の固体、７０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.62-7.55 (m, 4H), 7.45 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.90 (m, 1H), 6.00 (s, 2H), 5.16 (s, 2H), 2.51 (s, 3H).
【０１２２】
３−（３，５−ジメトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４６）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを３，５−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物４６（黄色の固体、７１％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.85 (s, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.38 (d, 1H), 6.86 (d, 1H), 6.69-6.67 (d, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
【０１２３】
３−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−７−メチルイソキノリン−１−アミン（化合物４７）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを３，４，５−トリメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物４７（黄色の固体、９５％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.66 (d, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.29 (s, 2H), 3.96 (s, 6H), 3.89 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
【０１２４】
７−メチル−３−ｏ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物４８）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドをｏ−トルニトリルと反応させると、化合物４８（黄色の固体、９１％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.63-7.58 (m, 2H), 7.47-7.40 (m, 2H), 7.27-7.20 (m, 3H), 7.05 (s, 1H), 5.41 (s, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.38 (s, 3H).
【０１２５】
７−メチル−３−ｍ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物４９）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドをｍ−トルニトリルと反応させると、化合物４９（黄色の固体、９７％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.82 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.63-7.58 (m, 2H), 7.43-7.32 (m, 3H), 7.17 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.86 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.42 (s, 3H).
【０１２６】
３−（５−メトキシ−２−メチルフェニル）−７−メチル−イソキノリン−１−アミン（化合物５０）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−２，５−ジメチルベンズアミドを５−メトキシ−２−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物５０（黄色の固体、７７％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.64-7.60 (m, 2H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.06 (s, 1H), 7.02 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.83 (dd, J = 8.1 Hz, J = 2.8 Hz, 1H), 5.41 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.31 (s, 3H).
【０１２７】
６，７−ジメトキシ−３−フェニルイソキノリン−１−アミン（化合物５１）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドをベンゾニトリルと反応させると、化合物５１（黄色の固体、７１％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.97-7.95 (m, 2H), 7.45-7.30 (m, 4H), 7.05 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 5.29 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.82 (s, 3H).
【０１２８】
６，７−ジメトキシ−３−（３−メトキシフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物５２）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドを３−メトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物５２（黄色の固体、６０％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.53-7.46 (m, 2H), 7.30 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.88 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 3.82 (s, 3H).
【０１２９】
６，７−ジメトキシ−３−（２，６−ジメチルフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物５３）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドを２，６−ジメチルベンゾニトリルと反応させると、化合物５３（黄色の固体、５６％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.23-7.07 (m, 4H), 7.01 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 4.02 (s, 3H), 2.12 (s, 6H).
【０１３０】
６，７−ジメトキシ−３−ｍ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物５４）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドを３−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物５４（黄色の固体、４３％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 8.93 (s, 2H), 7.92 (s, 1H), 7.68-7.64 (m, 2H), 7.37-7.20 (m, 2H), 7.11 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 2.38 (s, 3H).
【０１３１】
６，７−ジメトキシ−３−（３，５−ジメトキシフェニル）イソキノリン−１−アミン（化合物５５）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドを３，５−ジメトキシベンゾニトリルと反応させると、化合物５５（黄色の固体、４８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.38 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.86 (s, 6H).
【０１３２】
６，７−ジメトキシ−３−ｏ−トリルイソキノリン−１−アミン（化合物５６）−Ｎ，Ｎ−ジエチル−４，５−ジメトキシ−２−メチルベンズアミドを２−メチルベンゾニトリルと反応させると、化合物５６（黄色の固体、６８％）が得られた。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.45-7.03 (m, 7H), 5.01 (s, 2H), 4.02 (s, 3H), 4.02 (s, 3H), 2.40 (s, 3H).
【０１３３】
[医薬製剤]
以下では、式（Ｄ）の化合物又はその薬学的に許容される塩（以下では化合物Ｘ）を含有する、ヒトにおける治療的又は予防的な使用のための代表的な医薬品剤形を例示する。製剤は、製薬業界でよく知られている従来の手順によって実現することができ、その代表的な医薬品剤形に限定されない。
【０１３４】
１）錠剤（直接圧縮）
ふるいにかけた化合物Ｘ（５．０ｍｇ）を、ラクトース（１４．１ｍｇ）、クロスポビドンＵＳＮＦ（０．８ｍｇ）、及びステアリン酸マグネシウム（０．１ｍｇ）と混合する。混合物を圧縮して錠剤にする。
【０１３５】
２）錠剤（湿式法（Hydroassembly））
ふるいにかけた化合物Ｘ（５．０ｍｇ）を、ラクトース（１６．０ｍｇ）、デンプン（４．０ｍｇ）、及びポリソルベート８０（０．３ｍｇ）と混合する。純水を混合物に加え、混合物を溶解させた。混合物を粒子にし、粒子を乾燥させ、ふるいにかけ、コロイド状二酸化ケイ素（２．７ｍｇ）及びステアリン酸マグネシウム（２．０ｍｇ）と混合する。粒子を錠剤に圧縮する。
【０１３６】
３）粉末及びカプセル剤
ふるいにかけた化合物Ｘ（５．０ｍｇ）を、ラクトース（１４．８ｍｇ）、ポリビニルピロリドン（１０．０ｍｇ）、及びステアリン酸マグネシウム（０．２ｍｇ）と混合する。混合物を、適切な機器を使用してＮｏ．５ゼラチンカプセルに詰める。
【０１３７】
４）注射
化合物Ｘ（１００ｍｇ）、マンニトール（１８０ｍｇ）、及びＮａ２ＨＰＯ４・１２Ｈ２Ｏ（２６ｍｇ）を約２９７４ｍｌの蒸留水に溶解させる。
【０１３８】
[生物学的試験]
１）癌細胞株の成長
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物の効果を判定するための癌細胞株は、以下の供給源から得た。アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ、American Type Culture Collection）（バージニア州マナッサス）からのヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１（乳房）、ＰＣ３（前立腺）、ＨＣＴ−１５（結腸）、ＨＣＴ１１６（結腸）、ＯＶＣＡＲ−３（卵巣）、Ｃａｋｉ−１（腎臓）、ＰＡＮＣ−１（膵臓）、ＳＮＢ−１９（膠芽細胞腫）、及びＳＫ−ＭＥＬ−２８（黒色腫）。ＰＣ３、ＯＶＣＡＲ−３、ＳＫ−ＭＥＬ−２８、及びＳＮＢ−１９は、１０％のウシ胎児血清（「ＦＢＳ」、fetal bovine serum）、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、並びに１００Ｕ／ｍｌのペニシリンと１００のμｇ／ｍｌのストレプトマイシン（「Ｐ／Ｓ」）を補充したＲＰＭＩ１６４０培地（Invitrogen、カリフォルニア州カールズバッド）中で成長させた。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、Ｃａｋｉ−１、ＨＣＴ−１５（結腸）、及びＰＡＮＣ−１細胞は、１０％のＦＢＳ、Ｐ／Ｓ、及び１０ｍＭのＨＥＰＥＳを補充したダルベッコ変法イーグル培地（「ＤＭＥＭ」、Dulbecco's modified Eagle's medium、Invitrogen）で維持した。ＨＣＴ１１６細胞は、インビトロ細胞増殖アッセイについては１０％のＦＢＳ、Ｐ／Ｓ、及び１０ｍＭのＨＥＰＥＳを補充したＤＭＥＭ中で、インビトロ細胞周期分析については１０％のＦＢＳ、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、及びＰ／Ｓを補充したＲＰＭＩ１６４０培地で維持した。すべての細胞は、加湿した５％ＣＯ２中にて３７℃でインキュベートした。
【０１３９】
２）ヒト腫瘍細胞株に対するインビトロ細胞増殖アッセイ
５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体の様々なヒト腫瘍細胞に対する増殖抑制を評価して、化合物上の特定の置換基の相対的な重要性を調査した。上述のように調製した５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体を、対照としてＤＭＳＯで試験した。
【０１４０】
代表的な５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体のヒト腫瘍細胞株に対する増殖抑制アッセイは、スルホローダミンＢ（「ＳＲＢ」Sulforhodamine B）法（Skehan et al., J. National Cancer Institute, 82: 1107-1112 (1990)）を使用して実施した。簡潔に述べると、指数関数的に成長している腫瘍細胞を、２〜３×１０３細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートに播種し、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物で翌日に処理した。各処理に３通りのウェルを使用した。細胞を種々の化合物と共に、加湿した５％ＣＯ２雰囲気中にて３７℃で９６時間インキュベートした。９６時間インキュベートした後、細胞を１０％のトリクロロ酢酸（「ＴＣＡ」、trichloroacetic acid）で固定した、４℃で１時間インキュベートし、水道水で３回洗浄した。その後、細胞を１％酢酸中の０．４％スルホローダミンＢで３０分間染色し、１％の酢酸で４回洗浄し、再度風乾した。１０ｍＭのトリス溶液中で５分間撹拌した後、Benchmark Plus Microplate読取り装置（Bio-Rad Laboratories、カリフォルニア州Hercules）を使用して、各ウェルの吸光度を５３０ｎｍで測定した。
【０１４１】
ＯＤ５３０値を各ウェル中の生細胞数に変換するために、ＯＤ５３０値を、各細胞株について作成した標準のＯＤ５３０対細胞数曲線上の値と対照した。生存度（パーセント）は、次式を使用して算出した。
生存度（％）＝生細胞数［試験］／生細胞数［対照］×１００
ＩＣ５０値は、非線形回帰分析によって算出した。
【０１４２】
ＱＳＡＲ及び医薬品化学技術を使用して、上の表１〜２に示す化合物を含む非常に多くの化合物が合成された。合成された化合物を、約１μＭの濃度で少なくとも４種の癌細胞株、ＰＡＮＣ−１、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＨＣＴ１１６、及びＣａｋｉ−１に対してスクリーニングした。これらの細胞株の少なくとも１つにおいて活性を示す化合物を、新たなスクリーニング用に選択した。それらの化合物から、３０種の化合物を選択して、以下の表３に示すように広域スペクトル抗増殖薬としてさらに評価した。
【０１４３】
表３
【表３】
【０１４４】
表３に示す本発明の５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体は、広範囲の腫瘍細胞株に対して活性を有する。化合物の多くは、ＩＣ５０値によって決定される活性が、１μＭ、０．５μＭ、又は０．１μＭよりも著しく小さい。表３にある化合物の中でも、化合物１０、化合物１３、化合物１４、化合物１５、化合物１６、化合物２１、化合物２５、化合物２８、化合物３１、化合物３４、化合物３６、化合物４２、化合物４３、化合物４５、化合物４８、化合物５０、化合物５２などの１７種の化合物は、ヒト癌細胞の増殖抑制において、韓国特許第０４１２３１９号明細書の特許請求の範囲に記載の化合物２３、６−メチル−３−（２−メチルフェニル）−１−イソキノリンアミンと同等又はそれより良好な活性を示した。特に、化合物１３及び化合物１４は、試験した細胞株において化合物２３の５〜１３倍の活性を有する。表３からわかるように、試験した他の化合物の多くは、いくつかの細胞株でＩＣ５０＜１μＭであり、いくつかでＩＣ５０＜０．３μＭであった。２．０μＭ、１．５μＭ、１．０μＭ、又は０．５μＭ以下のＩＣ５０値は、有意な治療活性を表す。したがって、表３の化合物のＩＣ５０は、有意な治療活性を示す。
【０１４５】
３）インビトロの細胞周期分析
このアッセイを使用して、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物が細胞を細胞周期の特定の期で静止させる能力を測定した。薬物処理の前の日に、ＨＣＴ１１６細胞を、１０ｃｍシャーレの１０％ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ１６４０培地に５０〜７０％の飽和度で播き、次いで加湿した３７℃のインキュベーターに入れて５％ＣＯ２雰囲気中で終夜インキュベートした。翌日、ＤＭＳＯに可溶化した適切な濃度の試験化合物を含むＲＰＭＩ１６４０培地（１０％ＦＢＳ含有）をシャーレに加えた。化合物なしの対照処理も含まれた（０．２５％ＤＭＳＯ）。次いで、細胞を１２時間インキュベートし、７０００ｒｐｍで５分間の遠心分離によって収集した。細胞ペレットを、０．１％のグルコース及び２％のＦＢＳを含有する０．２ｍｌのＰＢＳに再懸濁した。その後、振盪しながら５ｍｌの氷冷７０％エタノールを滴下し、処理した細胞を−２０℃で少なくとも３０分間保存した。細胞を、２０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、０．１％のグルコース及び２％のＦＢＳを含有する１ｍｌのＰＢＳで１回洗浄した。上清を除去した後、細胞を、０．１％のトリトンＸ１００、４０ｍＭのクエン酸ナトリウム、ｐＨ７．４を含有する７０μＭのヨウ化プロピジウム（ＰＩ）溶液０．５ｍｌに再懸濁した。ＲＮａｓｅを５０μｇ／ｍｌの最終濃度で加え、細胞を３７℃で３０分間インキュベートした。ＰＩで染色した細胞を、PCA-AFP機器によって、その細胞周期ソフトウェアプログラム（Guava Technologies、カリフォルニア州ヘイワード）を使用して分析し、細胞周期のＧ１、Ｓ、及びＧ２／Ｍ期にある細胞の百分率として示した。以下の表４は、ＨＣＴ１１６細胞を化合物１４又は４３で処理したときの細胞周期のパーセントの変化を示す。
【０１４６】
表４
【表４】
【０１４７】
４）パクリタキセル抵抗性のＨＣＴ−１５ヒト直腸結腸癌細胞に対するインビトロ抗腫瘍効果
化合物１３及び１４を大腸癌細胞で試験し、その抗腫瘍活性をパクリタキセル（タキソール（登録商標））と比較した。表５に示すように、化合物１３及び１４は、インビトロで強力な抗増殖活性を示し、ＩＣ５０値が両方の細胞で低ナノモル範囲にあり、パクリタキセル抵抗性のＨＣＴ−１５直腸結腸癌細胞に対する抗腫瘍活性がパクリタキセルより高かった。ＩＣ５０値を両方の大腸癌細胞で比較したとき、パクリタキセルは、ＨＣＴ−１５細胞でその活性が７０分の１になったが、化合物１３及び１４は両方とも、依然としてこの細胞の成長を強力に抑制した。
【０１４８】
表５
【表５】
【０１４９】
５）エキソビボ異種移植研究
動物モデルにおいて腫瘍成長の抑制を観察するために、化合物１３を利用して、ヌードマウスのエキソビボ異種移植研究を行った。０日目に、パクリタキセル抵抗性ＨＣＴ１５細胞懸濁液（０．２ｍｌのＲＰＭＩ中１×１０６細胞）を、６週齢の雌胸腺欠損マウス（ＢＡＬＢ／ｃ ｎｕ／ｎｕ）の右側腹部に皮下注射した。処置開始日に、可能な限り狭い体積範囲で試験用の腫瘍を選択するのに十分な数のマウスに、ＨＣＴ１５細胞懸濁液を注射した。適切なサイズ範囲の腫瘍を有する動物を種々の処置群に割り振った。パクリタキセルを陽性対照として使用した。化合物１３及びパクリタキセルをＰＢＳ中の５％Cremophor及び５％エタノールに溶解させ、溶媒のみを媒体対照として利用した。すべての研究薬物（媒体対照、パクリタキセル：１０ｍｇ／ｋｇ／日、化合物１３：１０ｍｇ／ｋｇ／日）は、腹腔内投与によって週３回与え、ＨＣＴ１５細胞の接種後１０日目から出発し、２９日目に終えた。腫瘍成長を定量化するために、腫瘍の垂直方向の３通りの直径を３〜５日毎にキャリパーで測定し、毒性についてはマウスの体重をモニターした。式：腫瘍体積（ｍｍ３）＝（幅）×（長さ）×（高さ）×π／６を使用して腫瘍体積を算出した。
【０１５０】
各群の動物の腫瘍体積（平均±ＳＥＭ）を表５に示すが、腫瘍体積の測定値は、ＨＣＴ１５ヒト結腸癌異種移植片に対する化合物１３の有効性の指標として示される。化合物１３での処置では、死亡することなく十分に耐容性が示され、１ｇ以下の体重変動しか認められなかった。２９日目にヌードマウスにおいてＨＣＴ−１５ヒト直腸結腸癌に対する抗腫瘍作用を測定した結果として、以下の表６に示すように、化合物１３の抗腫瘍効力（６９．２％抑制）が、対照薬物のパクリタキセル（４８．８％抑制）より高いことがわかった。
【０１５１】
表６
【表６】
【０１５２】
本発明の新規な化合物は、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン誘導体又はその薬学的に許容される塩であるが、これらの化合物は、強力な抗増殖性効果を有し、５，６，又は７−置換−３−（ヘテロ）アリールイソキノリンアミン化合物を投与することによる、癌を含めた過剰増殖性障害の治療に有用である。本明細書で例示し、論述した実施形態は、本発明を実施し、使用するための、発明者にわかっている最良の方法を当業者に教示するものにすぎない。本明細書では、本発明の範囲を限定するものはないと考えるべきである。提供する例はすべて、典型であり、非限定的である。上述の本発明の実施形態は、上記教示に照らして当業者に得心されるように、本発明から逸脱することなく改変し、又は様々に変更することができる。したがって、請求項及びその相当物の範囲内で、本発明を詳細に記載したものとは別な形で実施してもよいことは理解される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｄによる化合物又はその薬学的に許容される塩
【化１】
D
［式中、ｎは、０又は１であり、
Ｘは独立に、Ｎ、Ｃ、Ｏ、又はＳであり、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は独立に、Ｈ、ハロゲン、ＮＨ２、ＮＨＲ５、Ｎ（Ｒ５）２、−Ｏ−Ｒ５、又は−ＯＲ５で置換されていてもよいＲ５であり、
Ｒ４は、Ｈ、３，４−メチレンジオキシド、ハロゲン、−Ｏ−Ｒ５、及び−Ｏ−Ｒ５で置換されていてもよいＲ５からそれぞれ独立に選択される１又は２個の置換基であり、
Ｒ５はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
複数のＲ５基が存在するとき、Ｒ５基はそれぞれ、同じでも異なっていてもよく、
但し、この化合物は、（ａ）Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ４＝Ｈ、２−メチル、３−メチル、若しくは４−メチルである化合物、又は（ｂ）Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチル、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ４＝Ｈ、２−メチル、若しくは３−メチルである化合物ではない］。
【請求項２】
以下の（ａ）〜（ｌ）を含む群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
（ａ）ｎ＝０、Ｘ＝Ｏ又はＳであり、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｎ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈである、
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈであり、Ｒ４が、２−クロロ、３−クロロ、４−クロロ、３−メトキシ、３，４−ジメトキシ、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される、
（ｄ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝クロロ、Ｒ４＝５−クロロ−２−メチルである、
（ｅ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メトキシ、Ｒ４＝水素又は３，４−ジメトキシである、
（ｆ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝メチル、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ４＝３，４−ジメトキシである、
（ｇ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチルであり、Ｒ４が、４−メチル、２−メトキシ、３−メトキシ、４−メトキシ、３，４−ジメトキシ、３，４−メチレンジオキシド、４−エトキシ、３，５−ジメトキシ、４−メトキシ−２−メチル、３，４，５−トリメトキシ、２−フルオロ、及び２，６−ジメチルから選択される、
（ｈ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、３−メチル、２−メトキシ、３−メトキシ、４−メトキシ、４−エトキシ、２−フルオロ、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、３，４−ジメトキシ、３，４−メチレンジオキシド、３，５−ジメトキシ、及び３，４，５−トリメトキシから選択される、
（ｉ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝ジメチルアミノ、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈであり、Ｒ４が、水素、２−メチル、３，４−ジメトキシ、及び２，６−ジメチルから選択される、
（ｊ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｋ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｒ３＝メトキシ、Ｒ４＝水素、２−メチル、３−メチル、２，６−ジメチル、３−メトキシ、又は３，５−ジメトキシである、並びに
（ｌ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、３，４−ジメトキシ、及び３，５−ジメトキシから選択される
【請求項３】
以下の（ａ）〜（ｆ）を含む群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
（ａ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝クロロ、Ｒ４＝５−クロロ−２−メチルである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチルであり、Ｒ４が、４−メチル、３−メトキシ、４−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される、
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｄ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｒ３＝メトキシ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｅ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、３，４−ジメトキシ、及び３，５−ジメトキシから選択される、並びに
（ｆ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される
【請求項４】
以下の（ａ）〜（ｃ）を含む群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
（ａ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、及び３，５−ジメトキシから選択される、
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、及び２，６−ジメチルから選択される
【請求項５】
以下を含む群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ及び３−メチルから選択される
【請求項６】
乳房腫瘍、前立腺腫瘍、結腸腫瘍、卵巣腫瘍、腎臓腫瘍、膵臓腫瘍、膠芽細胞腫、及び黒色腫から選択される１種の腫瘍の、少なくとも１つの細胞株に関するＩＣ５０が０．２μＭ以下である、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項７】
細胞株が、ヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＰＣ３、ＨＣＴ１１６、ＨＣＴ−１５、ＯＶＣＡＲ−３、Ｃａｋｉ−１、ＰＡＮＣ−１、ＳＮＢ−１９、及びＳＫ−ＭＥＬ−２８から選択される、請求項６に記載の化合物又は塩。
【請求項８】
乳房腫瘍、前立腺腫瘍、結腸腫瘍、卵巣腫瘍、腎臓腫瘍、膵臓腫瘍、膠芽細胞腫、及び黒色腫から選択される１種の腫瘍の、少なくとも１つの細胞株に関するＩＣ５０が０．１μＭ以下である、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項９】
細胞株が、ヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＰＣ３、ＨＣＴ１１６、ＨＣＴ−１５、ＯＶＣＡＲ−３、Ｃａｋｉ−１、ＰＡＮＣ−１、ＳＮＢ−１９、及びＳＫ−ＭＥＬ−２８から選択される、請求項８に記載の化合物又は塩。
【請求項１０】
治療有効量の請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体又は希釈剤とを含む医薬組成物。
【請求項１１】
式Ｄによる化合物又はその薬学的に許容される塩を含む組成物の投与を含む、高増殖性疾患の治療方法
【化２】
Ｄ
［式中、ｎは、０又は１であり、
Ｘは独立に、Ｎ、Ｃ、Ｏ、又はＳであり、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は独立に、Ｈ、ハロゲン、ＮＨ２、ＮＨＲ５、Ｎ（Ｒ５）２、−Ｏ−Ｒ５、又は−ＯＲ５で置換されていてもよいＲ５であり、
Ｒ４は、Ｈ、３，４−メチレンジオキシド、ハロゲン、−Ｏ−Ｒ５、及び−Ｏ−Ｒ５で置換されていてもよいＲ５から選択される１又は２個の置換基であり、
Ｒ５は、Ｃ１−Ｃ６アルキルであり、
複数のＲ５基が存在するとき、Ｒ５基はそれぞれ、同じでも異なっていてもよく、
但し、この化合物は、（ａ）Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ４＝Ｈ、２−メチル、３−メチル、若しくは４−メチルである化合物、又は（ｂ）Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチル、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ４＝Ｈ、２−メチル、若しくは３−メチルである化合物ではない］。
【請求項１２】
化合物又はその塩が、以下の（ａ）〜（ｌ）を含む群から選択される、請求項１１に記載の方法。
（ａ）ｎ＝０、Ｘ＝Ｏ又はＳ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｎ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈである、
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈであり、Ｒ４が、２−クロロ、３−クロロ、４−クロロ、３−メトキシ、３，４−ジメトキシ、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される、
（ｄ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝クロロ、Ｒ４＝５−クロロ−２−メチルである、
（ｅ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メトキシ、Ｒ４＝水素又は３，４−ジメトキシである、
（ｆ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝メチル、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ４＝３，４−ジメトキシである、
（ｇ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチルであり、Ｒ４が、４−メチル、２−メトキシ、３−メトキシ、４−メトキシ、３，４−ジメトキシ、３，４−メチレンジオキシド、４−エトキシ、３，５−ジメトキシ、４−メトキシ−２−メチル、３，４，５−トリメトキシ、２−フルオロ、及び２，６−ジメチルから選択される、
（ｈ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、３−メチル、２−メトキシ、３−メトキシ、４−メトキシ、４−エトキシ、２−フルオロ、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、３，４−ジメトキシ、３，４−メチレンジオキシド、３，５−ジメトキシ、及び３，４，５−トリメトキシから選択される、
（ｉ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝ジメチルアミノ、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈであり、Ｒ４が、水素、２−メチル、３，４−ジメトキシ、及び２，６−ジメチルから選択される、
（ｊ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｋ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｒ３＝メトキシ、Ｒ４＝水素、２−メチル、３−メチル、２，６−ジメチル、３−メトキシ、又は３，５−ジメトキシである、並びに
（ｌ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、３，４−ジメトキシ、及び３，５−ジメトキシから選択される
から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
化合物又はその塩が、以下の（ａ）〜（ｆ）を含む群から選択される、請求項１１に記載の方法。
（ａ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝クロロ、Ｒ４＝５−クロロ−２−メチルである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチルであり、Ｒ４が、４−メチル、３−メトキシ、４−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される、
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｄ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｒ３＝メトキシ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｅ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、３，４−ジメトキシ、及び３，５−ジメトキシから選択される、並びに
（ｆ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される
【請求項１４】
化合物又はその塩が、以下の（ａ）〜（ｃ）を含む群から選択される、請求項１１に記載の方法。
（ａ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、及び３，５−ジメトキシから選択される、並びに
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、及び２，６−ジメチルから選択される
から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
化合物又はその塩が、以下を含む群から選択される請求項１１記載の方法。
ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ及び３−メチルから選択される
【請求項１６】
高剰増殖性疾患が腫瘍を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
腫瘍が、乳房腫瘍、前立腺腫瘍、結腸腫瘍、卵巣腫瘍、腎臓腫瘍、膵臓腫瘍、膠芽細胞腫、及び黒色腫から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
化合物又はその塩を、必要に応じて連結剤を介してターゲティング部分にコンジュゲートさせる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１】
式Ｄによる化合物又はその薬学的に許容される塩
【化１】
D
［式中、ｎは、０又は１であり、
Ｘは独立に、Ｎ、Ｃ、Ｏ、又はＳであり、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は独立に、Ｈ、ハロゲン、ＮＨ２、ＮＨＲ５、Ｎ（Ｒ５）２、−Ｏ−Ｒ５、又は−ＯＲ５で置換されていてもよいＲ５であり、
Ｒ４は、Ｈ、３，４−メチレンジオキシド、ハロゲン、−Ｏ−Ｒ５、及び−Ｏ−Ｒ５で置換されていてもよいＲ５からそれぞれ独立に選択される１又は２個の置換基であり、
Ｒ５はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
複数のＲ５基が存在するとき、Ｒ５基はそれぞれ、同じでも異なっていてもよく、
但し、この化合物は、（ａ）Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ４＝Ｈ、２−メチル、３−メチル、若しくは４−メチルである化合物、又は（ｂ）Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチル、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ４＝Ｈ、２−メチル、若しくは３−メチルである化合物ではない］。
【請求項２】
以下の（ａ）〜（ｌ）を含む群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
（ａ）ｎ＝０、Ｘ＝Ｏ又はＳであり、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｎ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈである、
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈであり、Ｒ４が、２−クロロ、３−クロロ、４−クロロ、３−メトキシ、３，４−ジメトキシ、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される、
（ｄ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝クロロ、Ｒ４＝５−クロロ−２−メチルである、
（ｅ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メトキシ、Ｒ４＝水素又は３，４−ジメトキシである、
（ｆ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝メチル、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ４＝３，４−ジメトキシである、
（ｇ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチルであり、Ｒ４が、４−メチル、２−メトキシ、３−メトキシ、４−メトキシ、３，４−ジメトキシ、３，４−メチレンジオキシド、４−エトキシ、３，５−ジメトキシ、４−メトキシ−２−メチル、３，４，５−トリメトキシ、２−フルオロ、及び２，６−ジメチルから選択される、
（ｈ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、３−メチル、２−メトキシ、３−メトキシ、４−メトキシ、４−エトキシ、２−フルオロ、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、３，４−ジメトキシ、３，４−メチレンジオキシド、３，５−ジメトキシ、及び３，４，５−トリメトキシから選択される、
（ｉ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝ジメチルアミノ、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈであり、Ｒ４が、水素、２−メチル、３，４−ジメトキシ、及び２，６−ジメチルから選択される、
（ｊ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｋ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｒ３＝メトキシ、Ｒ４＝水素、２−メチル、３−メチル、２，６−ジメチル、３−メトキシ、又は３，５−ジメトキシである、並びに
（ｌ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、３，４−ジメトキシ、及び３，５−ジメトキシから選択される
【請求項３】
以下の（ａ）〜（ｆ）を含む群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
（ａ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝クロロ、Ｒ４＝５−クロロ−２−メチルである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチルであり、Ｒ４が、４−メチル、３−メトキシ、４−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される、
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｄ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｒ３＝メトキシ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｅ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、３，４−ジメトキシ、及び３，５−ジメトキシから選択される、並びに
（ｆ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される
【請求項４】
以下の（ａ）〜（ｃ）を含む群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
（ａ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、及び３，５−ジメトキシから選択される、
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、及び２，６−ジメチルから選択される
【請求項５】
以下を含む群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ及び３−メチルから選択される
【請求項６】
乳房腫瘍、前立腺腫瘍、結腸腫瘍、卵巣腫瘍、腎臓腫瘍、膵臓腫瘍、膠芽細胞腫、及び黒色腫から選択される１種の腫瘍の、少なくとも１つの細胞株に関するＩＣ５０が０．２μＭ以下である、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項７】
細胞株が、ヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＰＣ３、ＨＣＴ１１６、ＨＣＴ−１５、ＯＶＣＡＲ−３、Ｃａｋｉ−１、ＰＡＮＣ−１、ＳＮＢ−１９、及びＳＫ−ＭＥＬ−２８から選択される、請求項６に記載の化合物又は塩。
【請求項８】
乳房腫瘍、前立腺腫瘍、結腸腫瘍、卵巣腫瘍、腎臓腫瘍、膵臓腫瘍、膠芽細胞腫、及び黒色腫から選択される１種の腫瘍の、少なくとも１つの細胞株に関するＩＣ５０が０．１μＭ以下である、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項９】
細胞株が、ヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＰＣ３、ＨＣＴ１１６、ＨＣＴ−１５、ＯＶＣＡＲ−３、Ｃａｋｉ−１、ＰＡＮＣ−１、ＳＮＢ−１９、及びＳＫ−ＭＥＬ−２８から選択される、請求項８に記載の化合物又は塩。
【請求項１０】
治療有効量の請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体又は希釈剤とを含む医薬組成物。
【請求項１１】
式Ｄによる化合物又はその薬学的に許容される塩を含む組成物の投与を含む、高増殖性疾患の治療方法
【化２】
Ｄ
［式中、ｎは、０又は１であり、
Ｘは独立に、Ｎ、Ｃ、Ｏ、又はＳであり、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は独立に、Ｈ、ハロゲン、ＮＨ２、ＮＨＲ５、Ｎ（Ｒ５）２、−Ｏ−Ｒ５、又は−ＯＲ５で置換されていてもよいＲ５であり、
Ｒ４は、Ｈ、３，４−メチレンジオキシド、ハロゲン、−Ｏ−Ｒ５、及び−Ｏ−Ｒ５で置換されていてもよいＲ５から選択される１又は２個の置換基であり、
Ｒ５は、Ｃ１−Ｃ６アルキルであり、
複数のＲ５基が存在するとき、Ｒ５基はそれぞれ、同じでも異なっていてもよく、
但し、この化合物は、（ａ）Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ４＝Ｈ、２−メチル、３−メチル、若しくは４−メチルである化合物、又は（ｂ）Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチル、ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ４＝Ｈ、２−メチル、若しくは３−メチルである化合物ではない］。
【請求項１２】
化合物又はその塩が、以下の（ａ）〜（ｌ）を含む群から選択される、請求項１１に記載の方法。
（ａ）ｎ＝０、Ｘ＝Ｏ又はＳ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｎ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈである、
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈであり、Ｒ４が、２−クロロ、３−クロロ、４−クロロ、３−メトキシ、３，４−ジメトキシ、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される、
（ｄ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝クロロ、Ｒ４＝５−クロロ−２−メチルである、
（ｅ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メトキシ、Ｒ４＝水素又は３，４−ジメトキシである、
（ｆ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝メチル、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ４＝３，４−ジメトキシである、
（ｇ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチルであり、Ｒ４が、４−メチル、２−メトキシ、３−メトキシ、４−メトキシ、３，４−ジメトキシ、３，４−メチレンジオキシド、４−エトキシ、３，５−ジメトキシ、４−メトキシ−２−メチル、３，４，５−トリメトキシ、２−フルオロ、及び２，６−ジメチルから選択される、
（ｈ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、３−メチル、２−メトキシ、３−メトキシ、４−メトキシ、４−エトキシ、２−フルオロ、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、３，４−ジメトキシ、３，４−メチレンジオキシド、３，５−ジメトキシ、及び３，４，５−トリメトキシから選択される、
（ｉ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝ジメチルアミノ、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈであり、Ｒ４が、水素、２−メチル、３，４−ジメトキシ、及び２，６−ジメチルから選択される、
（ｊ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｋ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｒ３＝メトキシ、Ｒ４＝水素、２−メチル、３−メチル、２，６−ジメチル、３−メトキシ、又は３，５−ジメトキシである、並びに
（ｌ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、３，４−ジメトキシ、及び３，５−ジメトキシから選択される
から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
化合物又はその塩が、以下の（ａ）〜（ｆ）を含む群から選択される、請求項１１に記載の方法。
（ａ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝クロロ、Ｒ４＝５−クロロ−２−メチルである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝メチルであり、Ｒ４が、４−メチル、３−メトキシ、４−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される、
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｄ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｒ３＝メトキシ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｅ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、３，４−ジメトキシ、及び３，５−ジメトキシから選択される、並びに
（ｆ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、２，６−ジメチル、及び３，４−メチレンジオキシドから選択される
【請求項１４】
化合物又はその塩が、以下の（ａ）〜（ｃ）を含む群から選択される、請求項１１に記載の方法。
（ａ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝ジメチルアミノ、Ｒ４＝３−メトキシである、
（ｂ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ、３−メチル、及び３，５−ジメトキシから選択される、並びに
（ｃ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝メチルであり、Ｒ４が、２−メチル、４−メトキシ−２−メチル、５−メトキシ−２−メチル、及び２，６−ジメチルから選択される
から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
化合物又はその塩が、以下を含む群から選択される請求項１１記載の方法。
ｎ＝１、Ｘ＝Ｃ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝ジメチルアミノであり、Ｒ４が、３−メトキシ及び３−メチルから選択される
【請求項１６】
高剰増殖性疾患が腫瘍を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
腫瘍が、乳房腫瘍、前立腺腫瘍、結腸腫瘍、卵巣腫瘍、腎臓腫瘍、膵臓腫瘍、膠芽細胞腫、及び黒色腫から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
化合物又はその塩を、必要に応じて連結剤を介してターゲティング部分にコンジュゲートさせる、請求項１１に記載の方法。
【公表番号】特表２０１０−５１０２１７（Ｐ２０１０−５１０２１７Ａ）
【公表日】平成２２年４月２日（２０１０．４．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５３７２１５（Ｐ２００９−５３７２１５）
【出願日】平成１９年１１月１６日（２００７．１１．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０２４０４１
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０６３５４８
【国際公開日】平成２０年５月２９日（２００８．５．２９）
【出願人】（５０９１３１３９５）レグザン ファーマシューティカルズ，インク． (1)
【氏名又は名称原語表記】ＲＥＸＡＨＮ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ， ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年４月２日（２０１０．４．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年１１月１６日（２００７．１１．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０２４０４１
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０６３５４８
【国際公開日】平成２０年５月２９日（２００８．５．２９）
【出願人】（５０９１３１３９５）レグザン ファーマシューティカルズ，インク． (1)
【氏名又は名称原語表記】ＲＥＸＡＨＮ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ， ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】
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