神経向性薬として利用可能なハイドロキシル化された長鎖をもつトコフェノール誘導体
【課題】神経幹細胞の細胞成分を変化させ、分化過程にある神経膠細胞及びニューロンの分化及びその後の生存力を促進させ、及び稀突起神経膠細胞前駆細胞の成熟稀突起神経膠細胞への分化を促進させる単離化合物あるいは合成化合物、特に化学式（１）で表される化合物を提供する。さらに、例えば小神経膠及び／または星状細胞の活性化を減ずることにより、及び／または反応性神経膠症を減ずることにより、神経系に悪影響を与える疾病の炎症性成分を減少させることができる化合物を提供する。さらに、これら化合物の製造方法、及び神経系に悪影響を与える疾病の予防及び治癒を目的とした医薬組成物製造へのこれら化合物の使用方法を提供する。
【解決手段】化学式（１）で表される化合物を製造し、及び医薬組成物の有効成分として使用する。
【化１】
【解決手段】化学式（１）で表される化合物を製造し、及び医薬組成物の有効成分として使用する。
【化１】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は単離あるいは合成化合物、特に神経系細胞の細胞成分を変化させる（ニューロン／神経膠細胞比を変化させる）ことができ、分化及び分化過程にあるニューロン及び神経膠細胞のその後の生存力を促進させ、さらに稀突起神経膠細胞前駆細胞の成熟稀突起神経膠細胞への分化を促進させることができる化学式（１)で表される化合物に関する。また、本発明に係る化合物によって、特に小神経膠細胞及び／または星状細胞の活性化を減じ、及び／または反応性神経膠症を減ずることにより、神経系に悪影響を及ぼす疾病の炎症性成分を減じることも可能である。本発明はさらに、これら化合物を含む組成物、これら化合物の製造方法、さらにこれら化合物の神経系に悪影響を及ぼす疾病の予防あるいは治療を目的とする医薬組成物製剤への利用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
中枢神経系（ＣＮＳ）は、神経細胞として特徴付けられる２種の細胞集合体、すなわちニューロンと神経膠細胞として分類される他のすべての細胞種から構成される。成人における主要な神経膠細胞種は星状細胞及び稀突起神経膠細胞である。これらの細胞は胎児段階を通して産生され、さらに出産後から成人に至るまで脳の一定部分において産生され続ける。
ニューロン、星状細胞及び稀突起神経膠細胞は、理論的に無制限な増殖能をもち、かつ神経管中に位置している共通の前駆体としての多型潜在性細胞から生ずる。これら前駆体は、自己再生性、無限の増殖能及び細胞自体が由来する組織を形成する細胞種の産生能をもつという幹細胞の定義基準を満たすことから、神経幹細胞と考えることが可能である。
【０００３】
過度特殊化細胞であるニューロンは支持組織中及び神経膠環境中において発達する。中心神経膠は中枢神経系に由来する神経膠細胞から成り、末梢神経膠は末梢神経系に由来する神経膠細胞から成る。より正確に言えば、末梢神経膠は星状細胞（大神経膠細胞）、稀突起神経膠細胞（稀突起神経膠）及び小神経膠細胞から成る。末梢神経膠は中心神経膠の稀突起神経膠細胞に相当するシュワン細胞から成る。
星状細胞は血液脳関門（ＢＨＥ）の構成成分である。これら星状細胞は中枢代謝調節に関与し、毛細血管周囲を包む突起（偽足）を用いて毛細血管とニューロン間の界面（栄養的役割）として機能する。これら星状細胞は神経伝達物質の奪還に与る他、グリアフィラメント（細胞骨格構成成分）生成による治癒にも関与している。
小神経膠細胞は胎児期に中枢神経系へ侵入する骨髄系に由来した神経膠細胞である。小神経膠は、高分子の排除、アポプトシスあるいはネクロシスにおける細胞食作用、病原体の認知及び排除、さらには免疫反応調節に特殊化した細胞である。
稀突起神経膠細胞によって中枢神経系における軸索の髄鞘形成が与えられる。稀突起神経膠細胞は多種に亘る前駆体に由来する。これら稀突起神経膠細胞はすべて神経管に沿った極めて限定的な脳室帯中において生成される。成人の場合、稀突起神経膠細胞は脳実質組織全体に分散されているが、特に白室のクラスター中に多く存在する。
【０００４】
稀突起神経膠細胞によって合成される髄鞘は、軸索周囲を包む膜付随タンパク質である。この髄鞘には二つの機能、すなわち電気絶縁体として作用する機能と神経衝撃伝達速度の増大を可能とする機能がある。この髄鞘が破壊されると、スローダウン、さらには運動不能、情報神経伝達の撹乱、また神経障害の誘発がひき起こされる。ミエリンの欠乏あるいは不足状態では脱髄疾患あるいは髄鞘形成不全疾患がひき起こされる。これら疾患の最も一般的かつ最も荒廃した状態が多発性硬化症（ＭＳ）である。
【０００５】
多発性硬化症は炎症性あるいは免疫性要素を伴う脱髄に結び付いた若年成人の神経性疾患である。最近の治療法では炎症症状に関しては比較的良好な結果が得られている。しかしながら、脱髄に対しては全く効果がなく、永続的かつ累積的ハンディキャップがひき起こされる。先に考察した場合とは異なり、この疾病の初期段階においても稀突起神経膠細胞には新たなミエリンの産生能（リミエリネーション）が保持されていることが立証されている。他方、慢性段階においては、このようなリミエリネーション能は完全に消失されると考えられる。大多数の患者について見ると、ＭＳはまず「再発緩和型」で進行し、その後に「進行型」となる。稀突起神経膠細胞及びその前駆体は初期段階の炎症現象下においても生存可能であると考えられるが、それらの細胞数及び有効性は慢性段階において大きく減じられる。現在まで二つの治療可能性、すなわち稀突起神経膠細胞前駆体（移植組織）の移植、または生存している稀突起神経膠細胞及び内因性稀突起神経膠細胞前駆体に対する化学物質によるミエリネーションの刺激が検討されている。
【０００６】
前記移植に関しては、先行技術においては、脱髄領域を最大量まで修復するため、成人稀突起神経膠細胞よりもミエリン産生能及び遊走能が大きいことが示唆される稀突起神経膠細胞（僅かに分化した若い細胞）の前駆体の使用が考慮されている。稀突起神経膠細胞の理想源は極めて若いヒト神経組織（胎児組織）であるが、かかる組織には倫理的及び実施上の問題がある。また、これら組織の遊走特性についても未知である。大多数の患者においては多数の病変があり、それらの個々について個別に移植を行うことは考えられないことである。さらに、これら稀突起神経膠細胞がそれ自体で遊走できるか否か、あるいは特定の化学的要因の介入が必要とされるかについても未知であり、また前記細胞の寿命についても未知である。
【０００７】
また、前記で神経向性因子として確認された種々のペプチド物質については先行技術（神経向性因子研究における最近の進展と臨床的連関、Ｌ．Ｓｈｅｎ，Ａ．Ｆｉｇｕｒｏｖ及びＢ．Ｌｕｕ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、１９９７年、Ｖｏｌ．７５，６３７−６４４頁）に記載がある。これら物質は脳に特異的な成長因子である。これら物質は神経細胞を種々の攻撃から、特に活性化された小神経膠細胞から遊離されて脳炎症の原因と成る物質から、保護し、さらに神経系の機能不全によってひき起こされる種々疾病から神経細胞を保護する。通常、これら神経向性因子によって神経細胞の生存力が増強され、また神経細胞の分化に好ましい影響、すなわち完全な成長が与えられ、またそれら神経細胞の使用が可能となる。
【０００８】
本発明に関連して、本願発明者は新規化合物の幹細胞に対する影響について調べた（幹細胞−臨床的応用と展望、Ｍ．Ｂｒｅｈｍ，Ｔ．Ｚｅｕｓ及びＢ．Ｅ．Ｓｔｒａｕｅｒ、Ｈｅｒｚ、２００２年、Ｖｏｌ．２７，６１１−６２０頁）。実際、最近の発見によって生物医学における重大な発展が認識されている。これらの幹細胞は再生医薬として知られる医薬の新分野にとって不可欠な手段であると考えることができる。（再生医薬のための幹細胞、組織及び器官処理技術の進歩、Ｊ．Ｒｉｎｇｅ，Ｃ．Ｋａｐｓ，Ｇ．Ｒ．Ｂｕｒｍｅｓｔｅｒ及びＭ．Ｓｉｔｔｉｎｇｅｒ、２００２年、ＶＯＬ．８９，３３８−３５１頁）、（損傷中枢神経系の再生、Ｐ．Ｊ．Ｈｏｒｎｅｒ及びＦ．Ｈ．Ｇａｇｅ、Ｎａｔｕｒｅ、２０００年、Ｖｏｌ．４０７，９６３−９７０頁）。かかる医薬には、年齢関連疾病及び変性神経障害（老化及び老化過程における疾病の標的としてのヒト幹細胞、Ｍｅｄｉｃａｌ Ｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓ、２００３年、Ｖｏｌ．６０，Ｎ３，４３９４４７）の治療、及び神経系の外傷性疾患への有効な応用が見出されるであろう。
【０００９】
神経幹細胞によってＣＮＳに３種の主要な細胞が生成される機構は未だ知られていない。しかしながら、これら細胞の生成は連続した段階を経て進行し、これら段階において神経幹細胞の発達可能性は漸進的に制限を受けることは知られている。徐々に可能性が制限された中間前駆体が生成され、これら前駆体は高度に分化された細胞となる。当初、幹細胞は未発達起源のものである。従って、それらは本質的に胎児及び乳児中に存在する。これら幹細胞は殆ど無限に増殖可能である。これら幹細胞は神経向性因子によって成熟した異なるタイプの機能性細胞へと変換される（幹細胞をニューロン及び星状細胞それぞれへ分化させるニューロン及び星状細胞分泌因子、Ｍ．Ｙ．Ｃｈａｎｇ，Ｈ．Ｓｏｎ，Ｙ．Ｓ．Ｌｅｅ，及びＳ．Ｈ．Ｌｅｅ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２００３年、Ｖｏｌ．２３，Ｎ３，４１４−４２６頁）。つい最近、幹細胞がより発達した器官中、特に脳中（哺乳類における成人性神経組織発生及び中枢神経系神経幹細胞、Ｐｈ．Ｔａｕｐｉｎ及びＦ．Ｈ．Ｇａｇｅ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２００２年、Ｖｏｌ．６９，７４５−７４９頁）及び成人脊髄中にも存在することが見出されている。従って、種々の成長因子の作用下において、神経幹細胞、すなわち脳中に存在する幹細胞をニューロン、星状細胞あるいは稀突起神経膠細胞、すなわち基本的タイプの神経細胞へ変換させることが可能である。
【００１０】
しかしながら、前記星状細胞の分子サイズ及び物理化学的特性に起因して、前記タンパク質成長因子が種々の生物的障壁、特に脳血液関門を越えることはできない。そのため、前記成長因子の十分量が脳中へ入り込んで何らかの有利な効果を与えることはできない。さらに、それら成長因子の生物学的利用能は極めて乏しく、従ってそれらの有効性及び用途には制限がある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は新規化合物の使用から構成される、移植の有利な代替方法を提供することを目的とする。これら新規化合物は脳血液関門を越えることができ、また神経幹細胞の細胞成分を変化させ（ニューロン／神経膠細胞の比を変化させ）、及び稀突起神経膠細胞前駆体の稀突起神経膠細胞への分化を促進させることによって内因性リミエリネーションを促進させることが可能である。事実、本発明には、まず脳中へ十分量入り込んで所望の生物効果を促進させ、次いで一定の神経向性因子の作用をまねて作用することができる小さな疎水性分子について記載している。これらの模倣分子は脳中の原位置において神経幹細胞を分化された神経細胞へと変換させることができ、また稀突起神経膠細胞前駆体を稀突起神経膠細胞へと変換させることができる。それゆえ、本代替方法によれば手術の介入は全く必要とされない。
実際、幹細胞が変性神経障害の治療に用いられる場合、幹細胞は稀突起神経膠細胞前駆体が導入されるのと全く同様に外科手術によって脳中へ導入される（発達過程にある中枢神経系における神経幹細胞：移植を介した細胞治療に関して、Ｃ．Ｎ．Ｓｖｅｎｄｓｅｎ及びＭ．Ａ．Ｃａｌｄｗｅｌｌ、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２０００年、Ｖｏｌ．１２７，１３−３４頁）。だから、本願発明者は神経幹細胞の細胞成分を生体内、生体外、あるいは試験管内で変化させ、すなわち神経幹細胞の選択に影響を与えてその選択をニューロン経路あるいは神経膠経路へと向けさせる（ニューロン／神経膠細胞比の変化）ことができる化合物を開発及び合成した。さらに、これら化合物によって分化及び分化過程にあるニューロン及び神経膠細胞の生存力を助長することが可能である。より具体的には、本発明に従った化合物はニューロンの生存力及び神経突起の成長を助長する。本発明に従った化合物は同時に稀突起神経膠細胞前駆細胞の稀突起神経膠細胞への分化を助長させることができる。さらに本発明に従った化合物は神経系に悪影響を与える疾病において炎症性成分を減少させることも可能である。特には、これら化合物は小神経膠及び／または星状細胞の活性化を減ずることも可能である。さらには、これら化合物は星状細胞の細胞骨格の一定化合物の発現を変化させることにより、反応性神経膠症、すなわち神経膠損傷を減ずることも可能である。
【００１２】
従って、本発明の第一の態様は、生体内、試験管内、あるいは生体外において神経幹細胞の成分変化及び／または稀突起神経膠細胞前駆体の稀突起神経膠細胞への分化をひき起こし、また小神経膠細胞の活性化、及び／または星状細胞及び／または反応性神経膠症の活性化を抑制する単離化合物あるいは合成化合物に関する。
【００１３】
好ましくは、本発明は生体内、試験管内、あるいは生体外において神経幹細胞の成分変化及び／または稀突起神経膠細胞前駆体の稀突起神経膠細胞への分化をひき起こし、及び／または小神経膠細胞の活性化及び／または、星状細胞及び／または反応性神経膠症の活性化を抑制する単離化合物あるいは合成化合物に関する。本発明はさらに、非ステロイド系抗炎症性化合物（ＮＳＡＩＤ）として小神経膠細胞の活性化を変化、好ましくは抑制するための前記化合物の生体内における使用に関する。但し、この非ステロイド系抗炎症性化合物は、本発明に従った化合物あるいは組成物とは異なって脳血液関門を越えることはできない。
【００１４】
本発明に従った化合物は、特に多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病等の神経変性疾患あるいは脱髄疾患／髄鞘形成不全の治療剤として、さらには血管痴呆、筋萎縮性側索硬化症、乳児脊髄筋萎縮症及び脳血管偶発症候と結び付いた神経障害の治療剤として優れる。本発明はさらに、前記化合物の製剤方法及び前記化合物を含む医薬組成物にも関する。
【００１５】
本発明は、特定の態様として、トコフェノール系環で置換された長鎖炭化水素アルコール類及びそれら類縁化合物に関する。これら化合物はトコフェノール脂肪アルコール類（ＴＦＡ）と称される。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明に従った化合物には好ましくは長鎖ω−アルカノール及びトコフェノール型環が含まれる。適度な大きさの鎖長と適切に選ばれた置換基をもつかかる化合物により、神経幹細胞中の細胞成分を変化させて分化、ニューロン生存力及び神経成長を促進させ、さらに稀突起神経膠細胞の分化及び生存力を促進させることが可能である。先述したように、本発明化合物により神経系に悪影響を与える疾病において生ずる炎症成分を減少させることも可能である。より具体的には、本発明化合物により小神経膠の活性化及び星状細胞の活性化を減じあるいは抑制することが可能である。またこれら化合物によって、より詳細には星状細胞の細胞骨格の一定化合物の発現を変化させることにより反応性神経膠を減ずることも可能である。小神経膠細胞の活性化の発現及び神経幹細胞の成熟稀突起神経膠細胞への変換は、多発性硬化症等の神経変性疾患あるいは脱髄／髄鞘形成不全疾患の治療にとって不可欠な特徴である。
【００１７】
従って、本発明の特定の態様は下記化学式（１）：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は同一あるいは異なっていてもよい水素原子、ヒドロキシ基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ基、または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシル基を表し、
Ｒ５は水素原子または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し、
ｍは０〜２の整数、好ましくは１または２を表し、及び
ｎは８〜２５の整数、好ましくは８〜２０の整数、さらに好ましくは８〜１６または８〜１４の整数を表す、で表される化合物に関する。
【００１８】
前記化学式（１）の化合物は従って５、６または７員環（ｍ＝０，１，２）へ融合された芳香環、すなわちベンゾフラン、ベンゾピランまたはそれらのより高級な同族体から成っている。この化合物は好ましくはベンゾピランであり、ｍは好ましくは１である。
【００１９】
前記化学式（１）で表される化合物には、置換基Ｒ５をもつ炭素原子がＲ，Ｓ配置をもつか、あるいは混合物（好ましくはラセミ体）である化合物が含まれる。
【００２０】
本発明においては、用語「アルキル」は１〜６個の炭素原子をもつ直鎖あるいは枝分かれ鎖の炭化水素基、すなわちメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル等を表わす。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の少なくとも一つがアルキル基である場合、該アルキル基は好ましくはメチル基、エチル基、イソプロピル基またはｔ−ブチル基である。
【００２１】
前記アルキル基は−Ｏ−結合（エーテル結合）を介して分子残基と結合しているアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）基は特に好ましくはメトキシ基、エトキシ基、イソプロポキシ基、またはｔ−ブトキシ基である。
【００２２】
前記カルボキシル基は−ＯＣＯ−アルキル基に相当する基であり、ここでアルキルは前記と同様のアルキルである。かかるカルボキシル基としてはアセタート、プロピオネート、ブチレート、ペンタノエートまたはヘキサノエート等を挙げることができる。
【００２３】
本発明の特定の態様では、前記化学式（１）で表される化合物は、芳香環上の置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び／またはＲ４の少なくとも一つ、好ましくは一つだけがヒドロキシル基、アルコキシ基、またはカルボキシル基である化合物に相当する。
【００２４】
本発明の別の特定の態様では、Ｒ５は水素原子、またはＲ，Ｓ配置をもつか、あるいは混合物（好ましくはラセミ体）であるアルキル基、好ましくはメチル基を表す。
【００２５】
従って前記化学式（１）で表される化合物の側鎖は、ｎが８〜２５、好ましくは８〜２０、さらに好ましくは８〜１６または８〜１４の整数であるω−アルカノールに相当する。ｎが１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６である前記化学式（１）で表される化合物は本発明において特に有効な化合物である。特に好ましい化合物は、少なくとも１２個かつ多くても１８個の炭素原子をもつ側鎖を有する化合物、すなわちＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４、ＴＦＡ−１５、ＴＦＡ−１６及びＴＦＡ−１８である。以下において述べる方法に従って合成可能である、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４がメトキシ基またはアセタート基であり、かつそれらの側鎖に前記と同数の炭素原子が含まれる他の化合物も同様に有効である。
【００２６】
従って、本発明は一態様として、生体内、試験管内あるいは生体外において神経幹細胞の細胞成分を変化させて生体内、試験管内あるいは生体外における神経幹細胞及び／または稀突起神経膠細胞前駆体細胞の稀突起神経膠細胞への分化及び前記稀突起神経膠細胞の生存力を促進させ、あるいは他方において神経幹細胞のニューロンへの分化及び前記ニューロンの生存力を促進させ、あるいは小神経膠細胞の活性化、及び／または星状細胞及び／または反応性神経膠の活性化をさらに変化、好ましくは抑制することができる、少なくとも１種の単離化合物あるいは合成化合物を有効成分として含みかつ医薬的に許容可能なキャリアを用いた医薬組成物に関する。本発明による好ましい医薬組成物には、有効成分として、神経幹細胞の細胞成分を変化させ、かつ稀突起神経膠細胞前駆細胞の稀突起神経膠細胞への分化、及び／または小神経膠細胞及び／または星状細胞の活性化の変化、好ましくは抑制、あるいは減少をひき起こすことができ、及び／または反応性神経膠を変化、好ましくは抑制できる少なくとも１種の単離化合物あるいは合成化合物が医薬的に許容可能なキャリアと共に含まれる。
【００２７】
本発明は、別の一態様として、有効成分として前記化学式（１）で表される化合物の少なくとも１種を医薬的に許容可能なキャリアまたは賦形剤と共に含む医薬組成物に関する。
【００２８】
どのような投薬経路によっても、本発明に従った好ましい医薬組成物はその活性成分の保護及び最適な同化が有利に為される形態で提供される。
【００２９】
本発明に従った化合物または組成物は種々経路かつ種々形態で投薬可能である。すなわち、前記化合物または組成物は、経口、吸入あるいは例えば静脈、筋肉、皮下、経皮、動脈注射等により全身方式で投薬可能であるが、特に好ましい投薬法は静脈、筋肉及び皮下注射、経口及び吸入投薬法である。
注射用として用いる場合、前記化合物は一般的には注射器を用いて、あるいは潅流によって注入可能な液状懸濁液の形態に製剤される。その際、前記化合物は医薬用途に適合しかつ当業者に公知である塩水、生理的塩類溶液、等張液、緩衝液等中に溶解される。そのために、前記化合物へ分散剤、可溶化剤、安定剤、保存剤等から選択される１種または数種の薬剤または媒体を含ませることが可能である。液剤または注射剤中に使用可能な主要な薬剤あるいは媒体としては、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリソルベート８０、マンニトール、ゼラチン、乳糖、植物油、アラビアゴム等がある。
前記化合物を、薬物放出を確実に持続的及び／または遅効的にするガレヌス製剤あるいは手段を用いて、ゲル、油剤、錠剤、坐剤、粉剤、ゲルカプセル、カプセル。エアゾール等の形態として投薬することも可能である。セルロース、炭酸塩エステルあるいは澱粉等の薬剤をこの種の製剤に用いると有利である。
【００３０】
とりわけ、本発明に従った化合物は１０−５〜１０−１２Ｍ、好ましくは１０−６〜１０−８Ｍ、さらに好ましくは１０−５〜１０−８Ｍの濃度において小神経膠及び星状細胞の活性化を変化させることが可能である。同じ好ましい濃度条件において、これら化合物は稀突起神経膠細胞前駆体を成熟稀突起神経膠細胞へと変換させる。このような条件下において、本発明に従った化合物はニューロンの分化及び生存力を促進させることも可能である。
【００３１】
本願発明者は本発明化合物の上記濃度における活性について示したが、投与速度及び／または注射量は、当業者により患者、病状、投薬経路等との関連において適合させることが可能である。さらに必要な場合、反復注射を行うことも可能である。また、慢性疾患の治療には遅効性あるいは持続性放出製剤を用いることも有利である。
【００３２】
さらに本発明は、神経系へ悪影響を与える疾病の予防及び治療を目的とする、中枢神経系の稀突起神経膠細胞あるいは他の細胞、及び／または神経系の炎症を改変させる医薬組成物製剤への本発明化合物の使用に関する。このような疾病の主要なものは、変性神経障害、特に脱髄疾患あるいは髄鞘形成不全、さらにはアルツハイマー病である。
【００３３】
本発明に関し、用語「治療」は、単独で、あるいは他剤あるいは他の治療法と組合せて用いられる予防治療及び治癒治療の双方を意味すると理解されたい。
また治療は、慢性疾患に対する治療と急性疾患に対する治療の双方を含めた治療である。
【００３４】
それゆえ、前記ＴＦＡ化合物を神経変性疾患及び脱髄疾患、特に多発性硬化症の治療に医薬成分として用いることが可能である。
【００３５】
本発明の別の態様は、生体内における神経幹細胞の細胞成分の変化、ニューロン及び稀突起神経膠細胞の分化及び生存力の促進、及び小神経膠細胞及び星状細胞、さらには反応性神経膠症の変化をひき起こす本発明に従った化合物あるいは組成物の使用に関する。
【００３６】
本発明の別の態様は、前述したような幹細胞あるいは稀突起神経膠細胞前駆細胞の生体外における治療への本発明に従った化合物あるいは組成物の使用に関する。特に、この治療法は前記細胞の成分及び／または分化の誘導から構成されている。
【００３７】
本発明はさらに、稀突起神経膠細胞あるいはそれらの活性及び／または神経系の炎症を変化させる神経系疾患の予防及び治癒のための治療方法に関する。この治療方法は、前記疾患を患いあるいは疾患が進行するおそれのある患者への本発明に従った化合物あるいは組成物、例えば前記式（１）で表される化合物の有効薬量の投薬、さらには前記生体外治療が為された幹細胞あるいは稀突起神経膠細胞前駆細胞の投与から構成される。
【００３８】
本発明に従った化合物によって治療可能な疾病は、特に多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病である。治療可能な他の疾病としては、血管痴呆、筋萎縮性側索硬化症、乳児脊髄筋萎縮症がある。同様に、脳血管偶発症候から起こる病変及び神経系のあらゆる他の病変も本発明化合物及び組成物によって治療可能である。
【００３９】
本発明化合物は、当業者に公知の化学反応を用い、以下に述べる前記化学式（１）で表される化合物の製造方法に基づいて市販の化学品から製造可能である。
【００４０】
前記化学式（１）で表される化合物は、以下に述べる工程、すなわちワインレブアミドの生成、付加−脱離、グリニャール付加（マグネシウム付加）及びＺｎＣｌ２及びＨＣｌを触媒とするカップリング反応から成る製造方法を用いることにより特に生成可能である。
【００４１】
前記化学式（１）で表される化合物は、例えば下記された特定の反応式に従って製造可能である。
【化２】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びｎは前記と同様であり、Ｒ６はベンジル基またはｔ−ブチルジメチルシリル基を表す。
【００４２】
より具体的には、化学式（１）で表される化合物（Ｉ）は以下の工程を経て製造される。まずトリメチルアルミニウムの存在下で化合物（１）をジメチルヒドロキシルアミンと反応させて化合物（２）が与えられ、次いで化合物（２）のアルコール官能基が保護されて化合物（３）が与えられ、化合物（３）へ有機リチウム化合物が求核付加されて化合物（４）が与えられ、ビニルマグネシウムの存在下で化合物（４）から化合物（５）が与えられ、次いで亜鉛及び塩酸の存在下で化合物（５）と化合物（６）との反応が行われて化合物（７）が与えられ、最後に化合物（７）のアルコール官能基の脱保護が行われることにより化学式（１）で表される化合物（Ｉ）が与えられる。
【００４３】
さらに具体的に言えば、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５がメチル基、Ｒ２がヒドロキシル基、ｍ＝１、ｎ＝１３である化合物（Ｉ）は下記により製造可能である。すなわち、オキサシクロヘプタデカン−２−オンをトリメチルアルミニウムの存在下、０℃、大気圧下でジメチルヒドロキシルアミンと反応させてＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ヒドロキシヘキサデカンアミドを得る。次いでこの化合物のヒドロキシ官能基を−７８℃において水素化ナトリウム及びベンジルブロマイドの存在下で保護する。次いで生じたＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ベンジルオキシヘキサデカンアミドを−７８℃、大気圧下においてメチルリチウム処理して１７−ベンジルオキシヘプタデカン−２−オンを得る。得られたこの化合物をビニルマグネシウムと反応させて１８−ベンジルオキシ−３−メチルオクタデク−１−エン−３−オールを得、次いでこの化合物をトリメチルヒドロキノンの存在下で塩化亜鉛及び濃塩酸と反応させて２−（１５−ベンジルオキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールを得る。得られたこの化合物をパラジウムの存在下木炭上で接触水素化することにより２−（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールを得る。
【００４４】
本発明はさらに、前記された方法のいずれか一つあるいは他の方法が含まれた処理において用いることが意図された処理器具及び器具一式に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４５】
以下に記載した非限定的実施例を理解することにより、本発明の他の観点及び利点がさらに明らかにされる。
【実施例】
【００４６】
Ａ．化学式（１）で表される化合物の製造
１）Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ヒドロキシヘキサデカンアミドの製造
ジメチルヒドロキシルアミン（１７．６８７ｍｍｏｌ；３等量、ＭＷ＝９７．５５）１．７８ｇをアルゴン下において蒸留されかつ−７８℃まで冷却されたＣＨ２Ｃｌ２１０ｍＬ中に溶解する。２ＭのＡｌＭｅ３・ヘキサン溶液（１７．６８７ｍｍｏｌ；３等量；分子量＝７２．０９）８．８ｍＬを−７８℃において滴下により加え、得られた反応混合液を室温下で３０分間撹拌した。次いでこの混合液を０℃まで冷却し、蒸留ＣＨ２Ｃｌ２５ｍＬ中に溶解されたオキサシクロヘプタデカン−２−オン（５．８９５ｍｍｏｌ；１等量；分子量＝２５４．４２）１．５５ｇをこの混合液中へ滴下によって加えた。次いで前記反応混合物を撹拌しながら室温下に置いた。薄層クロマトグラフィーによる分析を行って１時間３０分後に反応が完了していることを確認した。この反応混合液へ−７８℃まで冷却されたＥｔ２Ｏ／ＭｅＯＨ混合液（混合比２：１）６０ｍＬを滴下によって加えてからセライトを用いて濾過した。ＮａＨＣＯ３飽和水溶液１００ｍＬを加え、得られた水性層をエーテルで抽出した。得られた有機層を集めて硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次いで減圧下で蒸留して５．２６２ｍｍｏｌ及び収量８９％に相当するＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ヒドロキシヘキサデカンアミド１．６６ｇを得た。上記方法により得られたアミド化合物はさらに精製することなく後続処理において用いられた。
Ｒｆ＝０．１、溶離剤：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２４（ｓブロード，２２Ｈ，Ｈ−４〜Ｈ−１４）；１．５２−１．６３（ｍ，４Ｈ，Ｈ−３及びＨ−１５）；２．３９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，Ｈ−２）；３．１６（ｓ，３Ｈ，Ｈ−Ｉ’）；３．６１−３．６６（ｍ，５Ｈ，Ｈ−１６及びＨ−２’）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２４．６（ＣＨ２，Ｃ−１４）；２５．７（ＣＨ２，Ｃ−３），２９．４−２９．６（１０×ＣＨ２，Ｃ−４〜Ｃ−１３）；３１．９（ＣＨ２，Ｃ−２）；３２．０（ＣＨ３，Ｃ−１’）；３２．８（ＣＨ２，Ｃ−１５）；６１．１６（ＣＨ３，Ｃ−２’）；６３．０（ＣＨ２，Ｃ−１６）
【００４７】
２）Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ベンジルオキシヘキサデカンアミドの製造
Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ヒドロキシヘキサデカンアミド３．２７ｇ（１０．３６４ｍｍｏｌ；１等量；分子量＝３１５．４９）を蒸留ＴＨＦ４０ｍＬ中へ撹拌しながら溶解させた。ヘキサン中で洗浄された６０％ＮａＨ・油溶液０．８３ｇ（２０．７２９ｍｍｏｌ；２当量；分子量＝２４）を加えて、得られた溶液を還流（７５℃）下で３０分間加熱した。ＢｎＢｒ１．４８ｍＬ（１２．４３７ｍｍｏｌ；１．２当量；分子量＝１７１．０４）を加え、得られた溶液を還流下で加熱した。薄層クロマトグラフィーによる分析を行って２４時間後に反応が完了していることを確認した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液１００ｍＬを加えて、得られた水性層をエーテルで抽出した。得られた有機層を集めて硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次いで減圧下で蒸留して黄色の残渣を得た。前記残渣についてシリカカラム上でクロマトグラフ（５×１５ｃｍ、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液）を行った。これにより、７．１９８ｍｍｏｌ及び収量６９．４％に相当する全量で２．９２ｇのＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ベンジルオキシヘキサデカンアミドが得られた。
Ｒｆ＝０．５、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２５（ｓブロード、２２Ｈ，Ｈ−４〜Ｈ−１４）；１．５６−１．６５（ｍ，４Ｈ，Ｈ−３及びＨ−１５）；２．４０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｈ−２）；３．１７（ｓ，３Ｈ，Ｈ−１”）；３．４６（ｍ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１６）；３．６７（ｓ，３Ｈ，Ｈ−２”）；４．５０（ｓ，２Ｈ，Ｈ−１７）；７．２４−７．３４（ｍ，５Ｈ，Ｈ−２’〜Ｈ−６’）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２４．６（ＣＨ２，Ｃ−１５）；２６．２（ＣＨ２．Ｃ−３）；２９．３−２９．７（１０×ＣＨ２．Ｃ−４〜Ｃ−１４）；３１．９（ＣＨ２，Ｃ−２）；３２．１（ＣＨ３，Ｃ−１”）；６１．２（ＣＨ３，Ｃ−２”）；７０．５（ＣＨ２，Ｃ−１６）；７２．８（Ｐｈ−ＣＨ２，Ｃ−１７）；１２７．４（Ｐｈ，Ｃ−４’）；１２７．６（Ｐｈ，Ｃ−２’及びＣ−６’）；１２８．３（Ｐｈ，Ｃ−３’及びＣ−５’）；１３８．７（Ｐｈ，Ｃ−１’）
【００４８】
３）１７−ベンジルオキシヘプタデカン−２−オンの製造
Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ベンジルオキシヘキサデカンアミド０．５ｇ（１．２３２ｍｍｏｌ；１当量、分子量＝４０５．６２）をアルゴン下で蒸留しかつ−７８℃まで冷却したＴＨＦ８ｍＬ中に溶解した。得られた溶液へ１．５ＭのＭｅＬｉ・エーテル溶液２．４６ｍＬ（３．６９８ｍｍｏｌ，３当量、分子量＝２１．９５）を−７８℃において滴下によって加えた。薄層クロマトグラフィーによる分析の結果、瞬時に反応が起こっていることが確認された。この溶液へＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液１００ｍＬを加え、得られた水性層をエーテルで抽出した。得られた有機層を集めて硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次いで減圧下で蒸留して黄色の残渣を得た。この残渣についてシリカカラム上でのクロマトグラフを行った（５×１５ｃｍ、溶離液：１５％酢酸エチル・ヘキサン溶液）。これにより、０．９４１ｍｍｏｌ及び収量７６．３％に相当する全量で０．３４ｇの１７−ベンジルオキシヘキサデカン−２−オンが得られた。
Ｒｆ＝０．６、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２６（ｓ，ブロード、２２Ｈ，Ｈ−５〜Ｈ−１５）；１．５５−１．６５（ｍ，４Ｈ，Ｈ−４及びＨ−１６）；２．１４（ｓ，３Ｈ，Ｈ−１）；２．４２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｈ−３）；３．４７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１７）；４．５１（ｓ，２Ｈ，Ｈ−１８）；７．２５−７．３６（ｍ，５Ｈ，Ｈ−２’〜Ｈ−６’）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２３．９（ＣＨ２，Ｃ−４）；２６．２−２９．８（１３×ＣＨ２，Ｃ−１，Ｃ−５〜Ｃ−１６）；４３．８（ＣＨ２，Ｃ−３）；７０．５（ＣＨ２，Ｃ−１７）；７２．８（Ｐｈ−ＣＨ２，Ｃ−１８）；１２７．４（Ｐｈ，Ｃ−４’）；１２７．６（Ｐｈ，Ｃ−２’及びＣ−６’）；１２８．３（Ｐｈ，Ｃ−３’及びＣ−５’）；１３８．７（Ｐｈ，Ｃ−１’）；２０９．４（Ｃ＝Ｏ）
【００４９】
４）１８−ベンジルオキシ−３−メチルオクタデク−１−エン−３−オールの製造
１７−ベンジルオキシヘプタデカン−２−オン０．３３ｇ（０．９１５ｍｍｏｌ；１当量、分子量＝３６０．６）を蒸留ＴＨＦ１０ｍＬ中に撹拌しながら溶解してから０℃まで冷却した。この溶液へ１Ｍビニルマグネシウムブロマイド・ＴＨＦ溶液２．７５ｍＬ（２．７４５ｍｍｏｌ；３当量、分子量＝ｇ／ｍｏｌ）を０℃下で滴下によって加えた。得られた反応混合液を室温下において撹拌し続けた。薄層クロマトグラフ分析を行って３時間後反応が完了していることを確認した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液１００ｍＬを加え、得られた水性層をエーテルで抽出した。得られた有機層を集めて硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次いで減圧下で蒸留して黄色の残渣を得た。この残渣についてシリカカラム上でクロマトグラフ分析を行った（４×１５ｃｍ、溶離液：２０％酢酸エチル・ヘキサン溶液）。これにより、０．８１２ｍｍｏｌ及び収量８８．７％に相当する全量で０．３１ｇの１８−ベンジルオキシ−３−メチルオクタデク−１−エン−３−オールが得られた。
Ｒｆ＝０．７、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２６（ｓ，３Ｈ，Ｈ−３ａ）；１．２７（ｓブロード、２４Ｈ，Ｈ−５〜Ｈ−１６）；１．５４−１．６４（ｍ，４Ｈ，Ｈ−４及びＨ−１７）；３．４７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１８）；４．５１（ｓ，２Ｈ，Ｈ−１９）；５．０４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１ａ−１ｂ＝１．２Ｈｚ，Ｊ１ａ−２＝１０．６Ｈｚ，Ｈ１ａ）：５．２０（ｄｄ．１Ｈ，Ｊ１ｂ−１ａ＝１．２Ｈｚ，Ｊ１ｂ−２＝１７．３Ｈｚ，Ｈ１ｂ）；５．９１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ２−１ａ＝１０．６Ｈｚ，Ｊ２−１ｂ＝１７．３Ｈｚ，Ｈ１ｂ）；７．２６−７．３５（ｍ，５Ｈ，Ｈ−２’〜Ｈ−６’）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２３．９（ＣＨ２，Ｃ−５）；２６．２（ＣＨ２，Ｃ−６）；２７．７（ＣＨ３，Ｃ−３ａ）；２９．５−３０．０（１１×ＣＨ２，Ｃ−７〜Ｃ−１７）；４２．４（ＣＨ２，Ｃ−４）；７０．５（ＣＨ２，Ｃ−１８）；７２．８（Ｐｈ−ＣＨ２，Ｃ−１９）；７３．３（Ｃ第４級、Ｃ−３）；１１１．４（ＣＨ２，Ｃ−１）；１２７．４（Ｐｈ，Ｃ−４’）；１２７．６（Ｐｈ，Ｃ−２’及びＣ−６’）；１２８．３（Ｐｈ，Ｃ−３’及びＣ−５’）；１３８．７（Ｐｈ，Ｃ−１’）；１４５．３（ＣＨ，Ｃ−２）
【００５０】
５）２−（１５−ベンジルオキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチル−クロマン−６−オールの製造
トリメチルヒドロキノン０．１１ｇ（０．７２８ｍｍｏｌ；１当量、分子量＝１５２．１９）を酢酸エチル３ｍＬ中に溶解した。この溶液へＺｎＣｌ２０．０８ｇ（０．７２８ｍｍｏｌ；０．８当量、分子量＝１３６．２９）、次いで濃塩酸０．０１ｍＬ（０．１４５ｍｍｏｌ；０．２当量、分子量＝３６．４６）を加えた。室温下に５分間置いた後、酢酸エチル４ｍＬ中に溶解された１８−ベンジルオキシ−３−メチルオクタデク−１−エン−３−オール０．２８ｇ（０．７２８ｍｍｏｌ；１当量、分子量＝３８８．３３）を滴下によって加えた。薄層クロマトグラフ分析により４８時間後に反応が完了していることが確認された。ＮａＨＣＯ３飽和水溶液１００ｍＬを加え、得られた水性層をエーテルで抽出した。得られた有機層を集めて硫酸マグネシウム上で乾燥させ、その後に減圧下で蒸留して赤色の残渣を得た。この残渣についてシリカカラム上でクロマトグラフを行い（４×１５ｃｍ、溶離液：１５％酢酸エチル・ヘキサン溶液）、０．５５４ｍｍｏｌ及び収量７６％に相当する全量で０．２９ｇの２−（１５−ベンジルオキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールを得た。
Ｒｆ＝０．７４、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２２（ｓ，３Ｈ，Ｈ−２ａ）；１．２５（ｓブロード，２４Ｈ，Ｈ−２’〜Ｈ−１３’）；１．５１−１．６６（ｍ，４Ｈ，Ｈ−１’及びＨ−１４’）；１．７０−１．８６（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３）；２．１１（ｓ，６Ｈ，Ｈ−５ａ，Ｈ−７ａ）；２．１６（ｓ，３Ｈ，Ｈ−８ａ）；２．６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，Ｈ−４）；３．４６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１５’）；４．１８（ｓ，１Ｈ，フェノキシ）；４．５０（ｓ，２Ｈ，Ｈ−１６’）；７．２７−７．３５（ｍ，５Ｈ，Ｈ−２”〜Ｈ−６”）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１１．３（ＣＨ３，Ｃ−５ａ）；１１．８（ＣＨ２，Ｃ−７ａ）；１２．２（ＣＨ３，Ｃ−８ａ）；２０．７（ＣＨ２，Ｃ−４）；２３．６（ＣＨ２，Ｃ−２’）；２３．８（ＣＨ３，Ｃ−２ａ）；２６．２（ＣＨ３，Ｃ−３’）；２９．５−３０．０（１１×ＣＨ２，Ｃ−４’〜Ｃ−１４’）；３１．５（ＣＨ２，Ｃ−３）；３９．５（ＣＨ２，Ｃ−１’）；７０．５（ＣＨ２，Ｃ−１５’）；７２．８（Ｐｈ−ＣＨ２，Ｃ−１６’）；７４．５（Ｃ第４級，Ｃ−２）；１１７．３（Ｐｈ，Ｃ−５）；１１８．４（Ｐｈ，Ｃ−６）；１２１．０（Ｐｈ，Ｃ−８）；１２２．６（Ｐｈ，Ｃ−７）；１２７．６（Ｐｈ，Ｃ−２”及びＣ−６”）；１２８．３（Ｐｈ，Ｃ−３”及びＣ−５”）；１３８．７（Ｐｈ，Ｃ−１”）；１４４．５（Ｐｈ，Ｃ−４ａ）；１４５．６（Ｐｈ，Ｃ−８ｂ）
【００５１】
６）２−（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールの製造
２−（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール０．１６ｇ（０．３１２ｍｍｏｌ；１当量、分子量＝５２２．５２）をエタノール８ｍＬ中に溶解した。この溶液へアルゴン下でＰｄ／Ｃ（５％）（２０重量％）を加え、次いでアルゴンを水素で置き換えた。全部で３サイクルの真空−Ｈ２を行った。薄層クロマトグラフ分析により４時間後に水素化が完了していることが確認された。得られた溶液をセライトを通して濾過し、次いで減圧下で蒸留して白色の残渣を得た。この残渣についてシリカカラム上でクロマトグフを行った（３×１５ｃｍ、溶離液：４０％酢酸エチル・ヘキサン溶液）。これにより、０．３ｍｍｏｌ及び収量９６．４％に相当する全量で０．１３ｇの２−（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールを得た。
Ｒｆ＝０．５６、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２２（ｓ，３Ｈ，Ｈ−２ａ）；１．２５（ｓブロード，２４Ｈ，Ｈ−２’〜Ｈ−１３’）；１．５１−１．６１（ｍ，４Ｈ，Ｈ−１’及びＨ−１４’）；１．７０−１．８６（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３）；２．１１（ｓ，６Ｈ，Ｈ−５ａ，Ｈ−７ａ）；２．１６（ｓ，３Ｈ，Ｈ−８ａ）；２．６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，Ｈ−４）；３．６４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１５’）；４．２４（ｓ，１Ｈ，フェノキシ）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１１．３（ＣＨ３，Ｃ−５ａ）；１１．８（ＣＨ２，Ｃ−７ａ）；１２．２（ＣＨ３，Ｃ−８ａ）；２０．７（ＣＨ２，Ｃ−４）；２３．６（ＣＨ２，Ｃ−２’）；２３．８（ＣＨ３，Ｃ−２ａ）；２６．２（ＣＨ３，Ｃ−３’）；２９．５−３０．０（１１×ＣＨ２，Ｃ−４’〜Ｃ−１４’）；３１．５（ＣＨ２，Ｃ−３）；３９．５（ＣＨ２，Ｃ−１’）；７０．５（ＣＨ２，Ｃ−１５’）；７２．８（Ｐｈ−ＣＨ２，Ｃ−１６’）；７４．５（Ｃ第４級、Ｃ−２）；１１７．３（Ｐｈ，Ｃ−５）；１１８．４（Ｐｈ，Ｃ−６）；１２１．０（Ｐｈ，Ｃ−８）；１２２．６（Ｐｈ，Ｃ−７）；１４４．５（Ｐｈ，Ｃ−４ａ）；１４５．６（Ｐｈ，Ｃ−８ｂ）
【００５２】
Ｒ２がメチル基あるいは酢酸基（ｎは１３、及びｍは１）であり、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５が前記と同じ、特にメチル基である化合物が前記と同じ方法で合成されている。Ｒ１、Ｒ３またはＲ４がヒドロキシ基、メトキシ基または酢酸基であり、他の置換基が前記に同じであって特にメチル基である他の化合物も合成されている。
【００５３】
Ｂ．ＴＦＡ（Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５がメチル基であり、Ｒ２がヒドロキシ基であるトコフェノール脂肪アルコール類）による小神経膠活性化の阻害
これら分子の亜硝酸エステル類放出能及び活性化小神経膠中の腫瘍壊死因子阻害能に関する試験を実施した。また他の試験においてＭＨＣＩＩの発現についても検討を行った。
【００５４】
１．亜硝酸エステル類放出の測定
ＩＩ型ＮＯ−シンターゼ（ＮＯＳＩＩ）活性は文献においてしばしば分析が行われる小神経膠活性のパラメータである。この酵素は炎症活性化条件において酸化窒素ラジカルを合成する酵素である。活性化が２４〜４８時間行われると、この酵素が大量に発現される。この酵素の生成物であるＮＯは培基中で急速に分解して亜硝酸エステルとなる。比色定量分析（グリース法）により、ＮＯ２−レベルも同じ傾向を辿ることが示されている。
本願発明者は試験を実施し、ＬＰＳ０．０１μｇ／ｍｌで処理された小神経膠細胞培養中におけるＮＯ２濃度を、ＴＦＡ−１０、ＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４、ＴＦＡ−１６及びビタミンＥそれぞれの１０−５、１０−６及び１０−７Ｍの各濃度の存在下で活性化２４時間後及び４８時間後に測定を行った。
異なる３試験において得られた結果は、脂肪アルコールであるＴＦＡ−１０、ＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４、ＴＦＡ−１６が濃度１０−５Ｍにおいて小神経膠による亜硝酸エステル類の生成を対照値に対して５０％まで減少させることを示している。これらのアルコールの活性は濃度依存的であり、濃度とともにその活性は減少する。ＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４及びＴＦＡ−１６は濃度１０−５ＭにおいてＴＦＡ−１０より高い活性をもつと考えられる。
これらの結果は、本発明に従った前記脂肪アルコール類がＬＰＳによって活性化された小神経膠細胞による亜硝酸エステル類の生成を減少させることができることを示している。また前記結果より、ＴＦＡ−１０（鎖長が最も短い）がこれらトコフェノール系脂肪アルコールの中で最も活性が低いことから、これら脂肪アルコール類の鎖長とそれらの活性には相関があることも示される。
【００５５】
２．ＴＮＦ−α放出の測定
ＴＮＦ−αの発現は文献においてしばしば分析される小神経膠活性のパラメータとなる。不活性化された小神経膠細胞はこのサイトカインを発現しない。ＬＰＳによって２４時間活性化を行うことにより、ＥＬＩＳＡテストで検出可能なＴＮＦ−α発現レベルの高い増加が引き起こされる。
発明者による試験において、１０−５、１０−６及び１０−７Ｍの各濃度に調製されたＴＦＡ−１０、ＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４、ＴＦＡ−１６及びビタミンＥそれぞれの存在下で、ＬＰＳ０．０１μｇ／ｍｌ処理された培養小神経膠細胞中のＴＮＦ−α濃度の測定を活性化２４時間後に行った。
ＴＮＦ−αに関して個別に行われたそれぞれの試験結果から、トコフェノール系脂肪アルコールであるＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４及びＴＦＡ−１６が濃度１０−５Ｍにおいて前記細胞中におけるＴＮＦ−α生成を対照に対して３０〜４０％まで減少させることが示された。これら脂肪アルコール類の活性は濃度依存的であり、濃度とともに前記活性は減少した。ビタミンＥと同様に、ＴＦＡ−１０には前記活性は認められなかった。
これらのＴＮＦ−αに関する予備試験結果から亜硝酸エステル類の生成に関する試験において得られた結果が確認された。
従って、これら結果からトコフェノール系脂肪アルコール類の鎖長と活性間に相関があることが示された。
【技術分野】
【０００１】
本発明は単離あるいは合成化合物、特に神経系細胞の細胞成分を変化させる（ニューロン／神経膠細胞比を変化させる）ことができ、分化及び分化過程にあるニューロン及び神経膠細胞のその後の生存力を促進させ、さらに稀突起神経膠細胞前駆細胞の成熟稀突起神経膠細胞への分化を促進させることができる化学式（１)で表される化合物に関する。また、本発明に係る化合物によって、特に小神経膠細胞及び／または星状細胞の活性化を減じ、及び／または反応性神経膠症を減ずることにより、神経系に悪影響を及ぼす疾病の炎症性成分を減じることも可能である。本発明はさらに、これら化合物を含む組成物、これら化合物の製造方法、さらにこれら化合物の神経系に悪影響を及ぼす疾病の予防あるいは治療を目的とする医薬組成物製剤への利用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
中枢神経系（ＣＮＳ）は、神経細胞として特徴付けられる２種の細胞集合体、すなわちニューロンと神経膠細胞として分類される他のすべての細胞種から構成される。成人における主要な神経膠細胞種は星状細胞及び稀突起神経膠細胞である。これらの細胞は胎児段階を通して産生され、さらに出産後から成人に至るまで脳の一定部分において産生され続ける。
ニューロン、星状細胞及び稀突起神経膠細胞は、理論的に無制限な増殖能をもち、かつ神経管中に位置している共通の前駆体としての多型潜在性細胞から生ずる。これら前駆体は、自己再生性、無限の増殖能及び細胞自体が由来する組織を形成する細胞種の産生能をもつという幹細胞の定義基準を満たすことから、神経幹細胞と考えることが可能である。
【０００３】
過度特殊化細胞であるニューロンは支持組織中及び神経膠環境中において発達する。中心神経膠は中枢神経系に由来する神経膠細胞から成り、末梢神経膠は末梢神経系に由来する神経膠細胞から成る。より正確に言えば、末梢神経膠は星状細胞（大神経膠細胞）、稀突起神経膠細胞（稀突起神経膠）及び小神経膠細胞から成る。末梢神経膠は中心神経膠の稀突起神経膠細胞に相当するシュワン細胞から成る。
星状細胞は血液脳関門（ＢＨＥ）の構成成分である。これら星状細胞は中枢代謝調節に関与し、毛細血管周囲を包む突起（偽足）を用いて毛細血管とニューロン間の界面（栄養的役割）として機能する。これら星状細胞は神経伝達物質の奪還に与る他、グリアフィラメント（細胞骨格構成成分）生成による治癒にも関与している。
小神経膠細胞は胎児期に中枢神経系へ侵入する骨髄系に由来した神経膠細胞である。小神経膠は、高分子の排除、アポプトシスあるいはネクロシスにおける細胞食作用、病原体の認知及び排除、さらには免疫反応調節に特殊化した細胞である。
稀突起神経膠細胞によって中枢神経系における軸索の髄鞘形成が与えられる。稀突起神経膠細胞は多種に亘る前駆体に由来する。これら稀突起神経膠細胞はすべて神経管に沿った極めて限定的な脳室帯中において生成される。成人の場合、稀突起神経膠細胞は脳実質組織全体に分散されているが、特に白室のクラスター中に多く存在する。
【０００４】
稀突起神経膠細胞によって合成される髄鞘は、軸索周囲を包む膜付随タンパク質である。この髄鞘には二つの機能、すなわち電気絶縁体として作用する機能と神経衝撃伝達速度の増大を可能とする機能がある。この髄鞘が破壊されると、スローダウン、さらには運動不能、情報神経伝達の撹乱、また神経障害の誘発がひき起こされる。ミエリンの欠乏あるいは不足状態では脱髄疾患あるいは髄鞘形成不全疾患がひき起こされる。これら疾患の最も一般的かつ最も荒廃した状態が多発性硬化症（ＭＳ）である。
【０００５】
多発性硬化症は炎症性あるいは免疫性要素を伴う脱髄に結び付いた若年成人の神経性疾患である。最近の治療法では炎症症状に関しては比較的良好な結果が得られている。しかしながら、脱髄に対しては全く効果がなく、永続的かつ累積的ハンディキャップがひき起こされる。先に考察した場合とは異なり、この疾病の初期段階においても稀突起神経膠細胞には新たなミエリンの産生能（リミエリネーション）が保持されていることが立証されている。他方、慢性段階においては、このようなリミエリネーション能は完全に消失されると考えられる。大多数の患者について見ると、ＭＳはまず「再発緩和型」で進行し、その後に「進行型」となる。稀突起神経膠細胞及びその前駆体は初期段階の炎症現象下においても生存可能であると考えられるが、それらの細胞数及び有効性は慢性段階において大きく減じられる。現在まで二つの治療可能性、すなわち稀突起神経膠細胞前駆体（移植組織）の移植、または生存している稀突起神経膠細胞及び内因性稀突起神経膠細胞前駆体に対する化学物質によるミエリネーションの刺激が検討されている。
【０００６】
前記移植に関しては、先行技術においては、脱髄領域を最大量まで修復するため、成人稀突起神経膠細胞よりもミエリン産生能及び遊走能が大きいことが示唆される稀突起神経膠細胞（僅かに分化した若い細胞）の前駆体の使用が考慮されている。稀突起神経膠細胞の理想源は極めて若いヒト神経組織（胎児組織）であるが、かかる組織には倫理的及び実施上の問題がある。また、これら組織の遊走特性についても未知である。大多数の患者においては多数の病変があり、それらの個々について個別に移植を行うことは考えられないことである。さらに、これら稀突起神経膠細胞がそれ自体で遊走できるか否か、あるいは特定の化学的要因の介入が必要とされるかについても未知であり、また前記細胞の寿命についても未知である。
【０００７】
また、前記で神経向性因子として確認された種々のペプチド物質については先行技術（神経向性因子研究における最近の進展と臨床的連関、Ｌ．Ｓｈｅｎ，Ａ．Ｆｉｇｕｒｏｖ及びＢ．Ｌｕｕ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、１９９７年、Ｖｏｌ．７５，６３７−６４４頁）に記載がある。これら物質は脳に特異的な成長因子である。これら物質は神経細胞を種々の攻撃から、特に活性化された小神経膠細胞から遊離されて脳炎症の原因と成る物質から、保護し、さらに神経系の機能不全によってひき起こされる種々疾病から神経細胞を保護する。通常、これら神経向性因子によって神経細胞の生存力が増強され、また神経細胞の分化に好ましい影響、すなわち完全な成長が与えられ、またそれら神経細胞の使用が可能となる。
【０００８】
本発明に関連して、本願発明者は新規化合物の幹細胞に対する影響について調べた（幹細胞−臨床的応用と展望、Ｍ．Ｂｒｅｈｍ，Ｔ．Ｚｅｕｓ及びＢ．Ｅ．Ｓｔｒａｕｅｒ、Ｈｅｒｚ、２００２年、Ｖｏｌ．２７，６１１−６２０頁）。実際、最近の発見によって生物医学における重大な発展が認識されている。これらの幹細胞は再生医薬として知られる医薬の新分野にとって不可欠な手段であると考えることができる。（再生医薬のための幹細胞、組織及び器官処理技術の進歩、Ｊ．Ｒｉｎｇｅ，Ｃ．Ｋａｐｓ，Ｇ．Ｒ．Ｂｕｒｍｅｓｔｅｒ及びＭ．Ｓｉｔｔｉｎｇｅｒ、２００２年、ＶＯＬ．８９，３３８−３５１頁）、（損傷中枢神経系の再生、Ｐ．Ｊ．Ｈｏｒｎｅｒ及びＦ．Ｈ．Ｇａｇｅ、Ｎａｔｕｒｅ、２０００年、Ｖｏｌ．４０７，９６３−９７０頁）。かかる医薬には、年齢関連疾病及び変性神経障害（老化及び老化過程における疾病の標的としてのヒト幹細胞、Ｍｅｄｉｃａｌ Ｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓ、２００３年、Ｖｏｌ．６０，Ｎ３，４３９４４７）の治療、及び神経系の外傷性疾患への有効な応用が見出されるであろう。
【０００９】
神経幹細胞によってＣＮＳに３種の主要な細胞が生成される機構は未だ知られていない。しかしながら、これら細胞の生成は連続した段階を経て進行し、これら段階において神経幹細胞の発達可能性は漸進的に制限を受けることは知られている。徐々に可能性が制限された中間前駆体が生成され、これら前駆体は高度に分化された細胞となる。当初、幹細胞は未発達起源のものである。従って、それらは本質的に胎児及び乳児中に存在する。これら幹細胞は殆ど無限に増殖可能である。これら幹細胞は神経向性因子によって成熟した異なるタイプの機能性細胞へと変換される（幹細胞をニューロン及び星状細胞それぞれへ分化させるニューロン及び星状細胞分泌因子、Ｍ．Ｙ．Ｃｈａｎｇ，Ｈ．Ｓｏｎ，Ｙ．Ｓ．Ｌｅｅ，及びＳ．Ｈ．Ｌｅｅ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２００３年、Ｖｏｌ．２３，Ｎ３，４１４−４２６頁）。つい最近、幹細胞がより発達した器官中、特に脳中（哺乳類における成人性神経組織発生及び中枢神経系神経幹細胞、Ｐｈ．Ｔａｕｐｉｎ及びＦ．Ｈ．Ｇａｇｅ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２００２年、Ｖｏｌ．６９，７４５−７４９頁）及び成人脊髄中にも存在することが見出されている。従って、種々の成長因子の作用下において、神経幹細胞、すなわち脳中に存在する幹細胞をニューロン、星状細胞あるいは稀突起神経膠細胞、すなわち基本的タイプの神経細胞へ変換させることが可能である。
【００１０】
しかしながら、前記星状細胞の分子サイズ及び物理化学的特性に起因して、前記タンパク質成長因子が種々の生物的障壁、特に脳血液関門を越えることはできない。そのため、前記成長因子の十分量が脳中へ入り込んで何らかの有利な効果を与えることはできない。さらに、それら成長因子の生物学的利用能は極めて乏しく、従ってそれらの有効性及び用途には制限がある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は新規化合物の使用から構成される、移植の有利な代替方法を提供することを目的とする。これら新規化合物は脳血液関門を越えることができ、また神経幹細胞の細胞成分を変化させ（ニューロン／神経膠細胞の比を変化させ）、及び稀突起神経膠細胞前駆体の稀突起神経膠細胞への分化を促進させることによって内因性リミエリネーションを促進させることが可能である。事実、本発明には、まず脳中へ十分量入り込んで所望の生物効果を促進させ、次いで一定の神経向性因子の作用をまねて作用することができる小さな疎水性分子について記載している。これらの模倣分子は脳中の原位置において神経幹細胞を分化された神経細胞へと変換させることができ、また稀突起神経膠細胞前駆体を稀突起神経膠細胞へと変換させることができる。それゆえ、本代替方法によれば手術の介入は全く必要とされない。
実際、幹細胞が変性神経障害の治療に用いられる場合、幹細胞は稀突起神経膠細胞前駆体が導入されるのと全く同様に外科手術によって脳中へ導入される（発達過程にある中枢神経系における神経幹細胞：移植を介した細胞治療に関して、Ｃ．Ｎ．Ｓｖｅｎｄｓｅｎ及びＭ．Ａ．Ｃａｌｄｗｅｌｌ、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２０００年、Ｖｏｌ．１２７，１３−３４頁）。だから、本願発明者は神経幹細胞の細胞成分を生体内、生体外、あるいは試験管内で変化させ、すなわち神経幹細胞の選択に影響を与えてその選択をニューロン経路あるいは神経膠経路へと向けさせる（ニューロン／神経膠細胞比の変化）ことができる化合物を開発及び合成した。さらに、これら化合物によって分化及び分化過程にあるニューロン及び神経膠細胞の生存力を助長することが可能である。より具体的には、本発明に従った化合物はニューロンの生存力及び神経突起の成長を助長する。本発明に従った化合物は同時に稀突起神経膠細胞前駆細胞の稀突起神経膠細胞への分化を助長させることができる。さらに本発明に従った化合物は神経系に悪影響を与える疾病において炎症性成分を減少させることも可能である。特には、これら化合物は小神経膠及び／または星状細胞の活性化を減ずることも可能である。さらには、これら化合物は星状細胞の細胞骨格の一定化合物の発現を変化させることにより、反応性神経膠症、すなわち神経膠損傷を減ずることも可能である。
【００１２】
従って、本発明の第一の態様は、生体内、試験管内、あるいは生体外において神経幹細胞の成分変化及び／または稀突起神経膠細胞前駆体の稀突起神経膠細胞への分化をひき起こし、また小神経膠細胞の活性化、及び／または星状細胞及び／または反応性神経膠症の活性化を抑制する単離化合物あるいは合成化合物に関する。
【００１３】
好ましくは、本発明は生体内、試験管内、あるいは生体外において神経幹細胞の成分変化及び／または稀突起神経膠細胞前駆体の稀突起神経膠細胞への分化をひき起こし、及び／または小神経膠細胞の活性化及び／または、星状細胞及び／または反応性神経膠症の活性化を抑制する単離化合物あるいは合成化合物に関する。本発明はさらに、非ステロイド系抗炎症性化合物（ＮＳＡＩＤ）として小神経膠細胞の活性化を変化、好ましくは抑制するための前記化合物の生体内における使用に関する。但し、この非ステロイド系抗炎症性化合物は、本発明に従った化合物あるいは組成物とは異なって脳血液関門を越えることはできない。
【００１４】
本発明に従った化合物は、特に多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病等の神経変性疾患あるいは脱髄疾患／髄鞘形成不全の治療剤として、さらには血管痴呆、筋萎縮性側索硬化症、乳児脊髄筋萎縮症及び脳血管偶発症候と結び付いた神経障害の治療剤として優れる。本発明はさらに、前記化合物の製剤方法及び前記化合物を含む医薬組成物にも関する。
【００１５】
本発明は、特定の態様として、トコフェノール系環で置換された長鎖炭化水素アルコール類及びそれら類縁化合物に関する。これら化合物はトコフェノール脂肪アルコール類（ＴＦＡ）と称される。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明に従った化合物には好ましくは長鎖ω−アルカノール及びトコフェノール型環が含まれる。適度な大きさの鎖長と適切に選ばれた置換基をもつかかる化合物により、神経幹細胞中の細胞成分を変化させて分化、ニューロン生存力及び神経成長を促進させ、さらに稀突起神経膠細胞の分化及び生存力を促進させることが可能である。先述したように、本発明化合物により神経系に悪影響を与える疾病において生ずる炎症成分を減少させることも可能である。より具体的には、本発明化合物により小神経膠の活性化及び星状細胞の活性化を減じあるいは抑制することが可能である。またこれら化合物によって、より詳細には星状細胞の細胞骨格の一定化合物の発現を変化させることにより反応性神経膠を減ずることも可能である。小神経膠細胞の活性化の発現及び神経幹細胞の成熟稀突起神経膠細胞への変換は、多発性硬化症等の神経変性疾患あるいは脱髄／髄鞘形成不全疾患の治療にとって不可欠な特徴である。
【００１７】
従って、本発明の特定の態様は下記化学式（１）：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は同一あるいは異なっていてもよい水素原子、ヒドロキシ基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ基、または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシル基を表し、
Ｒ５は水素原子または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基を表し、
ｍは０〜２の整数、好ましくは１または２を表し、及び
ｎは８〜２５の整数、好ましくは８〜２０の整数、さらに好ましくは８〜１６または８〜１４の整数を表す、で表される化合物に関する。
【００１８】
前記化学式（１）の化合物は従って５、６または７員環（ｍ＝０，１，２）へ融合された芳香環、すなわちベンゾフラン、ベンゾピランまたはそれらのより高級な同族体から成っている。この化合物は好ましくはベンゾピランであり、ｍは好ましくは１である。
【００１９】
前記化学式（１）で表される化合物には、置換基Ｒ５をもつ炭素原子がＲ，Ｓ配置をもつか、あるいは混合物（好ましくはラセミ体）である化合物が含まれる。
【００２０】
本発明においては、用語「アルキル」は１〜６個の炭素原子をもつ直鎖あるいは枝分かれ鎖の炭化水素基、すなわちメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル等を表わす。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の少なくとも一つがアルキル基である場合、該アルキル基は好ましくはメチル基、エチル基、イソプロピル基またはｔ−ブチル基である。
【００２１】
前記アルキル基は−Ｏ−結合（エーテル結合）を介して分子残基と結合しているアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）基は特に好ましくはメトキシ基、エトキシ基、イソプロポキシ基、またはｔ−ブトキシ基である。
【００２２】
前記カルボキシル基は−ＯＣＯ−アルキル基に相当する基であり、ここでアルキルは前記と同様のアルキルである。かかるカルボキシル基としてはアセタート、プロピオネート、ブチレート、ペンタノエートまたはヘキサノエート等を挙げることができる。
【００２３】
本発明の特定の態様では、前記化学式（１）で表される化合物は、芳香環上の置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び／またはＲ４の少なくとも一つ、好ましくは一つだけがヒドロキシル基、アルコキシ基、またはカルボキシル基である化合物に相当する。
【００２４】
本発明の別の特定の態様では、Ｒ５は水素原子、またはＲ，Ｓ配置をもつか、あるいは混合物（好ましくはラセミ体）であるアルキル基、好ましくはメチル基を表す。
【００２５】
従って前記化学式（１）で表される化合物の側鎖は、ｎが８〜２５、好ましくは８〜２０、さらに好ましくは８〜１６または８〜１４の整数であるω−アルカノールに相当する。ｎが１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６である前記化学式（１）で表される化合物は本発明において特に有効な化合物である。特に好ましい化合物は、少なくとも１２個かつ多くても１８個の炭素原子をもつ側鎖を有する化合物、すなわちＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４、ＴＦＡ−１５、ＴＦＡ−１６及びＴＦＡ−１８である。以下において述べる方法に従って合成可能である、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４がメトキシ基またはアセタート基であり、かつそれらの側鎖に前記と同数の炭素原子が含まれる他の化合物も同様に有効である。
【００２６】
従って、本発明は一態様として、生体内、試験管内あるいは生体外において神経幹細胞の細胞成分を変化させて生体内、試験管内あるいは生体外における神経幹細胞及び／または稀突起神経膠細胞前駆体細胞の稀突起神経膠細胞への分化及び前記稀突起神経膠細胞の生存力を促進させ、あるいは他方において神経幹細胞のニューロンへの分化及び前記ニューロンの生存力を促進させ、あるいは小神経膠細胞の活性化、及び／または星状細胞及び／または反応性神経膠の活性化をさらに変化、好ましくは抑制することができる、少なくとも１種の単離化合物あるいは合成化合物を有効成分として含みかつ医薬的に許容可能なキャリアを用いた医薬組成物に関する。本発明による好ましい医薬組成物には、有効成分として、神経幹細胞の細胞成分を変化させ、かつ稀突起神経膠細胞前駆細胞の稀突起神経膠細胞への分化、及び／または小神経膠細胞及び／または星状細胞の活性化の変化、好ましくは抑制、あるいは減少をひき起こすことができ、及び／または反応性神経膠を変化、好ましくは抑制できる少なくとも１種の単離化合物あるいは合成化合物が医薬的に許容可能なキャリアと共に含まれる。
【００２７】
本発明は、別の一態様として、有効成分として前記化学式（１）で表される化合物の少なくとも１種を医薬的に許容可能なキャリアまたは賦形剤と共に含む医薬組成物に関する。
【００２８】
どのような投薬経路によっても、本発明に従った好ましい医薬組成物はその活性成分の保護及び最適な同化が有利に為される形態で提供される。
【００２９】
本発明に従った化合物または組成物は種々経路かつ種々形態で投薬可能である。すなわち、前記化合物または組成物は、経口、吸入あるいは例えば静脈、筋肉、皮下、経皮、動脈注射等により全身方式で投薬可能であるが、特に好ましい投薬法は静脈、筋肉及び皮下注射、経口及び吸入投薬法である。
注射用として用いる場合、前記化合物は一般的には注射器を用いて、あるいは潅流によって注入可能な液状懸濁液の形態に製剤される。その際、前記化合物は医薬用途に適合しかつ当業者に公知である塩水、生理的塩類溶液、等張液、緩衝液等中に溶解される。そのために、前記化合物へ分散剤、可溶化剤、安定剤、保存剤等から選択される１種または数種の薬剤または媒体を含ませることが可能である。液剤または注射剤中に使用可能な主要な薬剤あるいは媒体としては、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリソルベート８０、マンニトール、ゼラチン、乳糖、植物油、アラビアゴム等がある。
前記化合物を、薬物放出を確実に持続的及び／または遅効的にするガレヌス製剤あるいは手段を用いて、ゲル、油剤、錠剤、坐剤、粉剤、ゲルカプセル、カプセル。エアゾール等の形態として投薬することも可能である。セルロース、炭酸塩エステルあるいは澱粉等の薬剤をこの種の製剤に用いると有利である。
【００３０】
とりわけ、本発明に従った化合物は１０−５〜１０−１２Ｍ、好ましくは１０−６〜１０−８Ｍ、さらに好ましくは１０−５〜１０−８Ｍの濃度において小神経膠及び星状細胞の活性化を変化させることが可能である。同じ好ましい濃度条件において、これら化合物は稀突起神経膠細胞前駆体を成熟稀突起神経膠細胞へと変換させる。このような条件下において、本発明に従った化合物はニューロンの分化及び生存力を促進させることも可能である。
【００３１】
本願発明者は本発明化合物の上記濃度における活性について示したが、投与速度及び／または注射量は、当業者により患者、病状、投薬経路等との関連において適合させることが可能である。さらに必要な場合、反復注射を行うことも可能である。また、慢性疾患の治療には遅効性あるいは持続性放出製剤を用いることも有利である。
【００３２】
さらに本発明は、神経系へ悪影響を与える疾病の予防及び治療を目的とする、中枢神経系の稀突起神経膠細胞あるいは他の細胞、及び／または神経系の炎症を改変させる医薬組成物製剤への本発明化合物の使用に関する。このような疾病の主要なものは、変性神経障害、特に脱髄疾患あるいは髄鞘形成不全、さらにはアルツハイマー病である。
【００３３】
本発明に関し、用語「治療」は、単独で、あるいは他剤あるいは他の治療法と組合せて用いられる予防治療及び治癒治療の双方を意味すると理解されたい。
また治療は、慢性疾患に対する治療と急性疾患に対する治療の双方を含めた治療である。
【００３４】
それゆえ、前記ＴＦＡ化合物を神経変性疾患及び脱髄疾患、特に多発性硬化症の治療に医薬成分として用いることが可能である。
【００３５】
本発明の別の態様は、生体内における神経幹細胞の細胞成分の変化、ニューロン及び稀突起神経膠細胞の分化及び生存力の促進、及び小神経膠細胞及び星状細胞、さらには反応性神経膠症の変化をひき起こす本発明に従った化合物あるいは組成物の使用に関する。
【００３６】
本発明の別の態様は、前述したような幹細胞あるいは稀突起神経膠細胞前駆細胞の生体外における治療への本発明に従った化合物あるいは組成物の使用に関する。特に、この治療法は前記細胞の成分及び／または分化の誘導から構成されている。
【００３７】
本発明はさらに、稀突起神経膠細胞あるいはそれらの活性及び／または神経系の炎症を変化させる神経系疾患の予防及び治癒のための治療方法に関する。この治療方法は、前記疾患を患いあるいは疾患が進行するおそれのある患者への本発明に従った化合物あるいは組成物、例えば前記式（１）で表される化合物の有効薬量の投薬、さらには前記生体外治療が為された幹細胞あるいは稀突起神経膠細胞前駆細胞の投与から構成される。
【００３８】
本発明に従った化合物によって治療可能な疾病は、特に多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病である。治療可能な他の疾病としては、血管痴呆、筋萎縮性側索硬化症、乳児脊髄筋萎縮症がある。同様に、脳血管偶発症候から起こる病変及び神経系のあらゆる他の病変も本発明化合物及び組成物によって治療可能である。
【００３９】
本発明化合物は、当業者に公知の化学反応を用い、以下に述べる前記化学式（１）で表される化合物の製造方法に基づいて市販の化学品から製造可能である。
【００４０】
前記化学式（１）で表される化合物は、以下に述べる工程、すなわちワインレブアミドの生成、付加−脱離、グリニャール付加（マグネシウム付加）及びＺｎＣｌ２及びＨＣｌを触媒とするカップリング反応から成る製造方法を用いることにより特に生成可能である。
【００４１】
前記化学式（１）で表される化合物は、例えば下記された特定の反応式に従って製造可能である。
【化２】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びｎは前記と同様であり、Ｒ６はベンジル基またはｔ−ブチルジメチルシリル基を表す。
【００４２】
より具体的には、化学式（１）で表される化合物（Ｉ）は以下の工程を経て製造される。まずトリメチルアルミニウムの存在下で化合物（１）をジメチルヒドロキシルアミンと反応させて化合物（２）が与えられ、次いで化合物（２）のアルコール官能基が保護されて化合物（３）が与えられ、化合物（３）へ有機リチウム化合物が求核付加されて化合物（４）が与えられ、ビニルマグネシウムの存在下で化合物（４）から化合物（５）が与えられ、次いで亜鉛及び塩酸の存在下で化合物（５）と化合物（６）との反応が行われて化合物（７）が与えられ、最後に化合物（７）のアルコール官能基の脱保護が行われることにより化学式（１）で表される化合物（Ｉ）が与えられる。
【００４３】
さらに具体的に言えば、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５がメチル基、Ｒ２がヒドロキシル基、ｍ＝１、ｎ＝１３である化合物（Ｉ）は下記により製造可能である。すなわち、オキサシクロヘプタデカン−２−オンをトリメチルアルミニウムの存在下、０℃、大気圧下でジメチルヒドロキシルアミンと反応させてＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ヒドロキシヘキサデカンアミドを得る。次いでこの化合物のヒドロキシ官能基を−７８℃において水素化ナトリウム及びベンジルブロマイドの存在下で保護する。次いで生じたＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ベンジルオキシヘキサデカンアミドを−７８℃、大気圧下においてメチルリチウム処理して１７−ベンジルオキシヘプタデカン−２−オンを得る。得られたこの化合物をビニルマグネシウムと反応させて１８−ベンジルオキシ−３−メチルオクタデク−１−エン−３−オールを得、次いでこの化合物をトリメチルヒドロキノンの存在下で塩化亜鉛及び濃塩酸と反応させて２−（１５−ベンジルオキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールを得る。得られたこの化合物をパラジウムの存在下木炭上で接触水素化することにより２−（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールを得る。
【００４４】
本発明はさらに、前記された方法のいずれか一つあるいは他の方法が含まれた処理において用いることが意図された処理器具及び器具一式に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４５】
以下に記載した非限定的実施例を理解することにより、本発明の他の観点及び利点がさらに明らかにされる。
【実施例】
【００４６】
Ａ．化学式（１）で表される化合物の製造
１）Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ヒドロキシヘキサデカンアミドの製造
ジメチルヒドロキシルアミン（１７．６８７ｍｍｏｌ；３等量、ＭＷ＝９７．５５）１．７８ｇをアルゴン下において蒸留されかつ−７８℃まで冷却されたＣＨ２Ｃｌ２１０ｍＬ中に溶解する。２ＭのＡｌＭｅ３・ヘキサン溶液（１７．６８７ｍｍｏｌ；３等量；分子量＝７２．０９）８．８ｍＬを−７８℃において滴下により加え、得られた反応混合液を室温下で３０分間撹拌した。次いでこの混合液を０℃まで冷却し、蒸留ＣＨ２Ｃｌ２５ｍＬ中に溶解されたオキサシクロヘプタデカン−２−オン（５．８９５ｍｍｏｌ；１等量；分子量＝２５４．４２）１．５５ｇをこの混合液中へ滴下によって加えた。次いで前記反応混合物を撹拌しながら室温下に置いた。薄層クロマトグラフィーによる分析を行って１時間３０分後に反応が完了していることを確認した。この反応混合液へ−７８℃まで冷却されたＥｔ２Ｏ／ＭｅＯＨ混合液（混合比２：１）６０ｍＬを滴下によって加えてからセライトを用いて濾過した。ＮａＨＣＯ３飽和水溶液１００ｍＬを加え、得られた水性層をエーテルで抽出した。得られた有機層を集めて硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次いで減圧下で蒸留して５．２６２ｍｍｏｌ及び収量８９％に相当するＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ヒドロキシヘキサデカンアミド１．６６ｇを得た。上記方法により得られたアミド化合物はさらに精製することなく後続処理において用いられた。
Ｒｆ＝０．１、溶離剤：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２４（ｓブロード，２２Ｈ，Ｈ−４〜Ｈ−１４）；１．５２−１．６３（ｍ，４Ｈ，Ｈ−３及びＨ−１５）；２．３９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，Ｈ−２）；３．１６（ｓ，３Ｈ，Ｈ−Ｉ’）；３．６１−３．６６（ｍ，５Ｈ，Ｈ−１６及びＨ−２’）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２４．６（ＣＨ２，Ｃ−１４）；２５．７（ＣＨ２，Ｃ−３），２９．４−２９．６（１０×ＣＨ２，Ｃ−４〜Ｃ−１３）；３１．９（ＣＨ２，Ｃ−２）；３２．０（ＣＨ３，Ｃ−１’）；３２．８（ＣＨ２，Ｃ−１５）；６１．１６（ＣＨ３，Ｃ−２’）；６３．０（ＣＨ２，Ｃ−１６）
【００４７】
２）Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ベンジルオキシヘキサデカンアミドの製造
Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ヒドロキシヘキサデカンアミド３．２７ｇ（１０．３６４ｍｍｏｌ；１等量；分子量＝３１５．４９）を蒸留ＴＨＦ４０ｍＬ中へ撹拌しながら溶解させた。ヘキサン中で洗浄された６０％ＮａＨ・油溶液０．８３ｇ（２０．７２９ｍｍｏｌ；２当量；分子量＝２４）を加えて、得られた溶液を還流（７５℃）下で３０分間加熱した。ＢｎＢｒ１．４８ｍＬ（１２．４３７ｍｍｏｌ；１．２当量；分子量＝１７１．０４）を加え、得られた溶液を還流下で加熱した。薄層クロマトグラフィーによる分析を行って２４時間後に反応が完了していることを確認した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液１００ｍＬを加えて、得られた水性層をエーテルで抽出した。得られた有機層を集めて硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次いで減圧下で蒸留して黄色の残渣を得た。前記残渣についてシリカカラム上でクロマトグラフ（５×１５ｃｍ、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液）を行った。これにより、７．１９８ｍｍｏｌ及び収量６９．４％に相当する全量で２．９２ｇのＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ベンジルオキシヘキサデカンアミドが得られた。
Ｒｆ＝０．５、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２５（ｓブロード、２２Ｈ，Ｈ−４〜Ｈ−１４）；１．５６−１．６５（ｍ，４Ｈ，Ｈ−３及びＨ−１５）；２．４０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｈ−２）；３．１７（ｓ，３Ｈ，Ｈ−１”）；３．４６（ｍ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１６）；３．６７（ｓ，３Ｈ，Ｈ−２”）；４．５０（ｓ，２Ｈ，Ｈ−１７）；７．２４−７．３４（ｍ，５Ｈ，Ｈ−２’〜Ｈ−６’）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２４．６（ＣＨ２，Ｃ−１５）；２６．２（ＣＨ２．Ｃ−３）；２９．３−２９．７（１０×ＣＨ２．Ｃ−４〜Ｃ−１４）；３１．９（ＣＨ２，Ｃ−２）；３２．１（ＣＨ３，Ｃ−１”）；６１．２（ＣＨ３，Ｃ−２”）；７０．５（ＣＨ２，Ｃ−１６）；７２．８（Ｐｈ−ＣＨ２，Ｃ−１７）；１２７．４（Ｐｈ，Ｃ−４’）；１２７．６（Ｐｈ，Ｃ−２’及びＣ−６’）；１２８．３（Ｐｈ，Ｃ−３’及びＣ−５’）；１３８．７（Ｐｈ，Ｃ−１’）
【００４８】
３）１７−ベンジルオキシヘプタデカン−２−オンの製造
Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−１６−ベンジルオキシヘキサデカンアミド０．５ｇ（１．２３２ｍｍｏｌ；１当量、分子量＝４０５．６２）をアルゴン下で蒸留しかつ−７８℃まで冷却したＴＨＦ８ｍＬ中に溶解した。得られた溶液へ１．５ＭのＭｅＬｉ・エーテル溶液２．４６ｍＬ（３．６９８ｍｍｏｌ，３当量、分子量＝２１．９５）を−７８℃において滴下によって加えた。薄層クロマトグラフィーによる分析の結果、瞬時に反応が起こっていることが確認された。この溶液へＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液１００ｍＬを加え、得られた水性層をエーテルで抽出した。得られた有機層を集めて硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次いで減圧下で蒸留して黄色の残渣を得た。この残渣についてシリカカラム上でのクロマトグラフを行った（５×１５ｃｍ、溶離液：１５％酢酸エチル・ヘキサン溶液）。これにより、０．９４１ｍｍｏｌ及び収量７６．３％に相当する全量で０．３４ｇの１７−ベンジルオキシヘキサデカン−２−オンが得られた。
Ｒｆ＝０．６、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２６（ｓ，ブロード、２２Ｈ，Ｈ−５〜Ｈ−１５）；１．５５−１．６５（ｍ，４Ｈ，Ｈ−４及びＨ−１６）；２．１４（ｓ，３Ｈ，Ｈ−１）；２．４２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｈ−３）；３．４７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１７）；４．５１（ｓ，２Ｈ，Ｈ−１８）；７．２５−７．３６（ｍ，５Ｈ，Ｈ−２’〜Ｈ−６’）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２３．９（ＣＨ２，Ｃ−４）；２６．２−２９．８（１３×ＣＨ２，Ｃ−１，Ｃ−５〜Ｃ−１６）；４３．８（ＣＨ２，Ｃ−３）；７０．５（ＣＨ２，Ｃ−１７）；７２．８（Ｐｈ−ＣＨ２，Ｃ−１８）；１２７．４（Ｐｈ，Ｃ−４’）；１２７．６（Ｐｈ，Ｃ−２’及びＣ−６’）；１２８．３（Ｐｈ，Ｃ−３’及びＣ−５’）；１３８．７（Ｐｈ，Ｃ−１’）；２０９．４（Ｃ＝Ｏ）
【００４９】
４）１８−ベンジルオキシ−３−メチルオクタデク−１−エン−３−オールの製造
１７−ベンジルオキシヘプタデカン−２−オン０．３３ｇ（０．９１５ｍｍｏｌ；１当量、分子量＝３６０．６）を蒸留ＴＨＦ１０ｍＬ中に撹拌しながら溶解してから０℃まで冷却した。この溶液へ１Ｍビニルマグネシウムブロマイド・ＴＨＦ溶液２．７５ｍＬ（２．７４５ｍｍｏｌ；３当量、分子量＝ｇ／ｍｏｌ）を０℃下で滴下によって加えた。得られた反応混合液を室温下において撹拌し続けた。薄層クロマトグラフ分析を行って３時間後反応が完了していることを確認した。ＮＨ４Ｃｌ飽和水溶液１００ｍＬを加え、得られた水性層をエーテルで抽出した。得られた有機層を集めて硫酸マグネシウム上で乾燥させ、次いで減圧下で蒸留して黄色の残渣を得た。この残渣についてシリカカラム上でクロマトグラフ分析を行った（４×１５ｃｍ、溶離液：２０％酢酸エチル・ヘキサン溶液）。これにより、０．８１２ｍｍｏｌ及び収量８８．７％に相当する全量で０．３１ｇの１８−ベンジルオキシ−３−メチルオクタデク−１−エン−３−オールが得られた。
Ｒｆ＝０．７、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２６（ｓ，３Ｈ，Ｈ−３ａ）；１．２７（ｓブロード、２４Ｈ，Ｈ−５〜Ｈ−１６）；１．５４−１．６４（ｍ，４Ｈ，Ｈ−４及びＨ−１７）；３．４７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１８）；４．５１（ｓ，２Ｈ，Ｈ−１９）；５．０４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１ａ−１ｂ＝１．２Ｈｚ，Ｊ１ａ−２＝１０．６Ｈｚ，Ｈ１ａ）：５．２０（ｄｄ．１Ｈ，Ｊ１ｂ−１ａ＝１．２Ｈｚ，Ｊ１ｂ−２＝１７．３Ｈｚ，Ｈ１ｂ）；５．９１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ２−１ａ＝１０．６Ｈｚ，Ｊ２−１ｂ＝１７．３Ｈｚ，Ｈ１ｂ）；７．２６−７．３５（ｍ，５Ｈ，Ｈ−２’〜Ｈ−６’）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２３．９（ＣＨ２，Ｃ−５）；２６．２（ＣＨ２，Ｃ−６）；２７．７（ＣＨ３，Ｃ−３ａ）；２９．５−３０．０（１１×ＣＨ２，Ｃ−７〜Ｃ−１７）；４２．４（ＣＨ２，Ｃ−４）；７０．５（ＣＨ２，Ｃ−１８）；７２．８（Ｐｈ−ＣＨ２，Ｃ−１９）；７３．３（Ｃ第４級、Ｃ−３）；１１１．４（ＣＨ２，Ｃ−１）；１２７．４（Ｐｈ，Ｃ−４’）；１２７．６（Ｐｈ，Ｃ−２’及びＣ−６’）；１２８．３（Ｐｈ，Ｃ−３’及びＣ−５’）；１３８．７（Ｐｈ，Ｃ−１’）；１４５．３（ＣＨ，Ｃ−２）
【００５０】
５）２−（１５−ベンジルオキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチル−クロマン−６−オールの製造
トリメチルヒドロキノン０．１１ｇ（０．７２８ｍｍｏｌ；１当量、分子量＝１５２．１９）を酢酸エチル３ｍＬ中に溶解した。この溶液へＺｎＣｌ２０．０８ｇ（０．７２８ｍｍｏｌ；０．８当量、分子量＝１３６．２９）、次いで濃塩酸０．０１ｍＬ（０．１４５ｍｍｏｌ；０．２当量、分子量＝３６．４６）を加えた。室温下に５分間置いた後、酢酸エチル４ｍＬ中に溶解された１８−ベンジルオキシ−３−メチルオクタデク−１−エン−３−オール０．２８ｇ（０．７２８ｍｍｏｌ；１当量、分子量＝３８８．３３）を滴下によって加えた。薄層クロマトグラフ分析により４８時間後に反応が完了していることが確認された。ＮａＨＣＯ３飽和水溶液１００ｍＬを加え、得られた水性層をエーテルで抽出した。得られた有機層を集めて硫酸マグネシウム上で乾燥させ、その後に減圧下で蒸留して赤色の残渣を得た。この残渣についてシリカカラム上でクロマトグラフを行い（４×１５ｃｍ、溶離液：１５％酢酸エチル・ヘキサン溶液）、０．５５４ｍｍｏｌ及び収量７６％に相当する全量で０．２９ｇの２−（１５−ベンジルオキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールを得た。
Ｒｆ＝０．７４、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２２（ｓ，３Ｈ，Ｈ−２ａ）；１．２５（ｓブロード，２４Ｈ，Ｈ−２’〜Ｈ−１３’）；１．５１−１．６６（ｍ，４Ｈ，Ｈ−１’及びＨ−１４’）；１．７０−１．８６（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３）；２．１１（ｓ，６Ｈ，Ｈ−５ａ，Ｈ−７ａ）；２．１６（ｓ，３Ｈ，Ｈ−８ａ）；２．６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，Ｈ−４）；３．４６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１５’）；４．１８（ｓ，１Ｈ，フェノキシ）；４．５０（ｓ，２Ｈ，Ｈ−１６’）；７．２７−７．３５（ｍ，５Ｈ，Ｈ−２”〜Ｈ−６”）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１１．３（ＣＨ３，Ｃ−５ａ）；１１．８（ＣＨ２，Ｃ−７ａ）；１２．２（ＣＨ３，Ｃ−８ａ）；２０．７（ＣＨ２，Ｃ−４）；２３．６（ＣＨ２，Ｃ−２’）；２３．８（ＣＨ３，Ｃ−２ａ）；２６．２（ＣＨ３，Ｃ−３’）；２９．５−３０．０（１１×ＣＨ２，Ｃ−４’〜Ｃ−１４’）；３１．５（ＣＨ２，Ｃ−３）；３９．５（ＣＨ２，Ｃ−１’）；７０．５（ＣＨ２，Ｃ−１５’）；７２．８（Ｐｈ−ＣＨ２，Ｃ−１６’）；７４．５（Ｃ第４級，Ｃ−２）；１１７．３（Ｐｈ，Ｃ−５）；１１８．４（Ｐｈ，Ｃ−６）；１２１．０（Ｐｈ，Ｃ−８）；１２２．６（Ｐｈ，Ｃ−７）；１２７．６（Ｐｈ，Ｃ−２”及びＣ−６”）；１２８．３（Ｐｈ，Ｃ−３”及びＣ−５”）；１３８．７（Ｐｈ，Ｃ−１”）；１４４．５（Ｐｈ，Ｃ−４ａ）；１４５．６（Ｐｈ，Ｃ−８ｂ）
【００５１】
６）２−（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールの製造
２−（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール０．１６ｇ（０．３１２ｍｍｏｌ；１当量、分子量＝５２２．５２）をエタノール８ｍＬ中に溶解した。この溶液へアルゴン下でＰｄ／Ｃ（５％）（２０重量％）を加え、次いでアルゴンを水素で置き換えた。全部で３サイクルの真空−Ｈ２を行った。薄層クロマトグラフ分析により４時間後に水素化が完了していることが確認された。得られた溶液をセライトを通して濾過し、次いで減圧下で蒸留して白色の残渣を得た。この残渣についてシリカカラム上でクロマトグフを行った（３×１５ｃｍ、溶離液：４０％酢酸エチル・ヘキサン溶液）。これにより、０．３ｍｍｏｌ及び収量９６．４％に相当する全量で０．１３ｇの２−（１５−ヒドロキシペンタデシル）−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールを得た。
Ｒｆ＝０．５６、溶離液：３０％酢酸エチル・ヘキサン溶液
ＮＭＲ １Ｈ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２２（ｓ，３Ｈ，Ｈ−２ａ）；１．２５（ｓブロード，２４Ｈ，Ｈ−２’〜Ｈ−１３’）；１．５１−１．６１（ｍ，４Ｈ，Ｈ−１’及びＨ−１４’）；１．７０−１．８６（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３）；２．１１（ｓ，６Ｈ，Ｈ−５ａ，Ｈ−７ａ）；２．１６（ｓ，３Ｈ，Ｈ−８ａ）；２．６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，Ｈ−４）；３．６４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，Ｈ−１５’）；４．２４（ｓ，１Ｈ，フェノキシ）
ＮＭＲ １３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１１．３（ＣＨ３，Ｃ−５ａ）；１１．８（ＣＨ２，Ｃ−７ａ）；１２．２（ＣＨ３，Ｃ−８ａ）；２０．７（ＣＨ２，Ｃ−４）；２３．６（ＣＨ２，Ｃ−２’）；２３．８（ＣＨ３，Ｃ−２ａ）；２６．２（ＣＨ３，Ｃ−３’）；２９．５−３０．０（１１×ＣＨ２，Ｃ−４’〜Ｃ−１４’）；３１．５（ＣＨ２，Ｃ−３）；３９．５（ＣＨ２，Ｃ−１’）；７０．５（ＣＨ２，Ｃ−１５’）；７２．８（Ｐｈ−ＣＨ２，Ｃ−１６’）；７４．５（Ｃ第４級、Ｃ−２）；１１７．３（Ｐｈ，Ｃ−５）；１１８．４（Ｐｈ，Ｃ−６）；１２１．０（Ｐｈ，Ｃ−８）；１２２．６（Ｐｈ，Ｃ−７）；１４４．５（Ｐｈ，Ｃ−４ａ）；１４５．６（Ｐｈ，Ｃ−８ｂ）
【００５２】
Ｒ２がメチル基あるいは酢酸基（ｎは１３、及びｍは１）であり、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５が前記と同じ、特にメチル基である化合物が前記と同じ方法で合成されている。Ｒ１、Ｒ３またはＲ４がヒドロキシ基、メトキシ基または酢酸基であり、他の置換基が前記に同じであって特にメチル基である他の化合物も合成されている。
【００５３】
Ｂ．ＴＦＡ（Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５がメチル基であり、Ｒ２がヒドロキシ基であるトコフェノール脂肪アルコール類）による小神経膠活性化の阻害
これら分子の亜硝酸エステル類放出能及び活性化小神経膠中の腫瘍壊死因子阻害能に関する試験を実施した。また他の試験においてＭＨＣＩＩの発現についても検討を行った。
【００５４】
１．亜硝酸エステル類放出の測定
ＩＩ型ＮＯ−シンターゼ（ＮＯＳＩＩ）活性は文献においてしばしば分析が行われる小神経膠活性のパラメータである。この酵素は炎症活性化条件において酸化窒素ラジカルを合成する酵素である。活性化が２４〜４８時間行われると、この酵素が大量に発現される。この酵素の生成物であるＮＯは培基中で急速に分解して亜硝酸エステルとなる。比色定量分析（グリース法）により、ＮＯ２−レベルも同じ傾向を辿ることが示されている。
本願発明者は試験を実施し、ＬＰＳ０．０１μｇ／ｍｌで処理された小神経膠細胞培養中におけるＮＯ２濃度を、ＴＦＡ−１０、ＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４、ＴＦＡ−１６及びビタミンＥそれぞれの１０−５、１０−６及び１０−７Ｍの各濃度の存在下で活性化２４時間後及び４８時間後に測定を行った。
異なる３試験において得られた結果は、脂肪アルコールであるＴＦＡ−１０、ＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４、ＴＦＡ−１６が濃度１０−５Ｍにおいて小神経膠による亜硝酸エステル類の生成を対照値に対して５０％まで減少させることを示している。これらのアルコールの活性は濃度依存的であり、濃度とともにその活性は減少する。ＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４及びＴＦＡ−１６は濃度１０−５ＭにおいてＴＦＡ−１０より高い活性をもつと考えられる。
これらの結果は、本発明に従った前記脂肪アルコール類がＬＰＳによって活性化された小神経膠細胞による亜硝酸エステル類の生成を減少させることができることを示している。また前記結果より、ＴＦＡ−１０（鎖長が最も短い）がこれらトコフェノール系脂肪アルコールの中で最も活性が低いことから、これら脂肪アルコール類の鎖長とそれらの活性には相関があることも示される。
【００５５】
２．ＴＮＦ−α放出の測定
ＴＮＦ−αの発現は文献においてしばしば分析される小神経膠活性のパラメータとなる。不活性化された小神経膠細胞はこのサイトカインを発現しない。ＬＰＳによって２４時間活性化を行うことにより、ＥＬＩＳＡテストで検出可能なＴＮＦ−α発現レベルの高い増加が引き起こされる。
発明者による試験において、１０−５、１０−６及び１０−７Ｍの各濃度に調製されたＴＦＡ−１０、ＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４、ＴＦＡ−１６及びビタミンＥそれぞれの存在下で、ＬＰＳ０．０１μｇ／ｍｌ処理された培養小神経膠細胞中のＴＮＦ−α濃度の測定を活性化２４時間後に行った。
ＴＮＦ−αに関して個別に行われたそれぞれの試験結果から、トコフェノール系脂肪アルコールであるＴＦＡ−１２、ＴＦＡ−１４及びＴＦＡ−１６が濃度１０−５Ｍにおいて前記細胞中におけるＴＮＦ−α生成を対照に対して３０〜４０％まで減少させることが示された。これら脂肪アルコール類の活性は濃度依存的であり、濃度とともに前記活性は減少した。ビタミンＥと同様に、ＴＦＡ−１０には前記活性は認められなかった。
これらのＴＮＦ−αに関する予備試験結果から亜硝酸エステル類の生成に関する試験において得られた結果が確認された。
従って、これら結果からトコフェノール系脂肪アルコール類の鎖長と活性間に相関があることが示された。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式（１）で表される化合物：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、同一あるいはそれぞれ異なって、水素原子、ヒドロキシ基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシル基、
Ｒ５は水素原子または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、
ｍは１または２の整数、及び
ｎは８〜２０の整数を表す。
【請求項２】
ｎが８〜１６の整数であることを特徴とする請求項１項記載の化合物。
【請求項３】
ｎが８、１０、１２、１３、１４または１６のいずれかの整数であることを特徴とする請求項２項記載の化合物。
【請求項４】
前記化合物がＴＦＡ１２、ＴＦＡ１４、ＴＦＡ１５、ＴＦＡ１６及びＴＦＡ１８から選択される化合物であることを特徴とする請求項１項記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ５が水素原子またはメチル基であることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
置換基Ｒ５をもつ炭素原子がＲまたはＳ配置をもち、あるいは混合物であることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
芳香環上の置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の少なくとも１つ、好ましくは１つのみがヒドロキシ基、アルコキシ基、またはカルボキシル基であることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の化学式（１）で表される化合物。
【請求項８】
前記直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基がメチル基、エチル基、イソプロピル基、またはｔ−ブチル基であることを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の化学式（１）で表される化合物。
【請求項９】
前記直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基がメトキシ基、エトキシ基、イソプロポキシ基、またはｔ−ブトキシ基であることを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の化学式（１）で表される化合物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれかに記載の化合物の少なくとも１種を医薬的に許容可能なキャリアと共に含んで成る医薬組成物。
【請求項１１】
医薬的に許容可能なキャリアと伴に、神経幹細胞の成分の変化及び稀突起神経膠細胞中の稀突起神経膠細胞前駆体である細胞の分化を刺激し、及び／または小神経膠細胞の活性化及び／または、星状細胞及び／または反応性神経膠の活性化を発現させる下記化学式（１）：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、同一あるいはそれぞれ異なって、水素原子、ヒドロキシ基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ基、または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシル基、
Ｒ５は水素原子または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、
ｍは１または２の整数、及び
ｎは８〜２０の整数を表す、で表される化合物の少なくとも１種を有効成分として含む医薬組成物。
【請求項１２】
神経系の稀突起神経膠細胞あるいは他の細胞、及び／または神経系の炎症を変化させる神経系疾病の予防または治療を目的とする医薬組成物製剤への下記化学式（１）：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、同一あるいはそれぞれ異なって、水素原子、ヒドロキシ基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ基、または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシル基、
Ｒ５は水素原子または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、
ｍは１または２の整数、及び
ｎは８〜２０の整数を表す、で表される化合物の少なくとも１種の使用。
【請求項１３】
変性神経障害の予防または治療を目的とする医薬組成物製剤への下記化学式（１）：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、同一あるいはそれぞれ異なって、水素原子、ヒドロキシ基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ基、または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシル基、
Ｒ５は水素原子または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、
ｍは１または２の整数、及び
ｎは８〜２０の整数を表す、で表される化合物の少なくとも１種の使用。
【請求項１４】
前記医薬組成物が脱髄疾患あるいは髄鞘形成不全の予防または治療を目的とすることを特徴とする請求項１３項記載の使用。
【請求項１５】
前記医薬組成物によって、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、脳血管偶発症候、あるいは神経系を損傷させる他の疾患が予防あるいは治療されることを特徴とする請求項１３または１４に記載の使用。
【請求項１６】
神経幹細胞の細胞成分を生体内あるいは試験管内で変化させて分化過程にあるニューロン及び神経膠細胞の分化及び生存力を促進させ、稀突起神経膠細胞前駆細胞の稀突起神経膠細胞への分化を促進させ、及び／または小神経膠の活性化、及び／または星状細胞及び／または反応性神経膠症の活性化を減ずることを目的とする医薬組成物製剤への請求項１〜９のいずれかに記載の化合物の少なくとも１種の使用。
【請求項１７】
下記反応式：
【化２】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びｎは請求項２項と同様であり、及び
Ｒ６はベンジル基またはｔ−ブチルジメチルシリル基を表す、で表される反応段階を含んで構成される、請求項１〜９のいずれかに記載の化学式（１）で表される化合物の製造方法。
【請求項１】
化学式（１）で表される化合物：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、同一あるいはそれぞれ異なって、水素原子、ヒドロキシ基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシル基、
Ｒ５は水素原子または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、
ｍは１または２の整数、及び
ｎは８〜２０の整数を表す。
【請求項２】
ｎが８〜１６の整数であることを特徴とする請求項１項記載の化合物。
【請求項３】
ｎが８、１０、１２、１３、１４または１６のいずれかの整数であることを特徴とする請求項２項記載の化合物。
【請求項４】
前記化合物がＴＦＡ１２、ＴＦＡ１４、ＴＦＡ１５、ＴＦＡ１６及びＴＦＡ１８から選択される化合物であることを特徴とする請求項１項記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ５が水素原子またはメチル基であることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
置換基Ｒ５をもつ炭素原子がＲまたはＳ配置をもち、あるいは混合物であることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
芳香環上の置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の少なくとも１つ、好ましくは１つのみがヒドロキシ基、アルコキシ基、またはカルボキシル基であることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の化学式（１）で表される化合物。
【請求項８】
前記直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基がメチル基、エチル基、イソプロピル基、またはｔ−ブチル基であることを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の化学式（１）で表される化合物。
【請求項９】
前記直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基がメトキシ基、エトキシ基、イソプロポキシ基、またはｔ−ブトキシ基であることを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の化学式（１）で表される化合物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれかに記載の化合物の少なくとも１種を医薬的に許容可能なキャリアと共に含んで成る医薬組成物。
【請求項１１】
医薬的に許容可能なキャリアと伴に、神経幹細胞の成分の変化及び稀突起神経膠細胞中の稀突起神経膠細胞前駆体である細胞の分化を刺激し、及び／または小神経膠細胞の活性化及び／または、星状細胞及び／または反応性神経膠の活性化を発現させる下記化学式（１）：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、同一あるいはそれぞれ異なって、水素原子、ヒドロキシ基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ基、または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシル基、
Ｒ５は水素原子または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、
ｍは１または２の整数、及び
ｎは８〜２０の整数を表す、で表される化合物の少なくとも１種を有効成分として含む医薬組成物。
【請求項１２】
神経系の稀突起神経膠細胞あるいは他の細胞、及び／または神経系の炎症を変化させる神経系疾病の予防または治療を目的とする医薬組成物製剤への下記化学式（１）：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、同一あるいはそれぞれ異なって、水素原子、ヒドロキシ基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ基、または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシル基、
Ｒ５は水素原子または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、
ｍは１または２の整数、及び
ｎは８〜２０の整数を表す、で表される化合物の少なくとも１種の使用。
【請求項１３】
変性神経障害の予防または治療を目的とする医薬組成物製剤への下記化学式（１）：
【化１】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、同一あるいはそれぞれ異なって、水素原子、ヒドロキシ基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ基、または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）カルボキシル基、
Ｒ５は水素原子または直鎖あるいは枝分かれ鎖の（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基、
ｍは１または２の整数、及び
ｎは８〜２０の整数を表す、で表される化合物の少なくとも１種の使用。
【請求項１４】
前記医薬組成物が脱髄疾患あるいは髄鞘形成不全の予防または治療を目的とすることを特徴とする請求項１３項記載の使用。
【請求項１５】
前記医薬組成物によって、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、脳血管偶発症候、あるいは神経系を損傷させる他の疾患が予防あるいは治療されることを特徴とする請求項１３または１４に記載の使用。
【請求項１６】
神経幹細胞の細胞成分を生体内あるいは試験管内で変化させて分化過程にあるニューロン及び神経膠細胞の分化及び生存力を促進させ、稀突起神経膠細胞前駆細胞の稀突起神経膠細胞への分化を促進させ、及び／または小神経膠の活性化、及び／または星状細胞及び／または反応性神経膠症の活性化を減ずることを目的とする医薬組成物製剤への請求項１〜９のいずれかに記載の化合物の少なくとも１種の使用。
【請求項１７】
下記反応式：
【化２】
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びｎは請求項２項と同様であり、及び
Ｒ６はベンジル基またはｔ−ブチルジメチルシリル基を表す、で表される反応段階を含んで構成される、請求項１〜９のいずれかに記載の化学式（１）で表される化合物の製造方法。
【公表番号】特表２００７−５０６７１４（Ｐ２００７−５０６７１４Ａ）
【公表日】平成１９年３月２２日（２００７．３．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５２７４４８（Ｐ２００６−５２７４４８）
【出願日】平成１６年９月２４日（２００４．９．２４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００４／００２４２４
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３０７４８
【国際公開日】平成１７年４月７日（２００５．４．７）
【出願人】（５９４１９７８５０）ユニヴェルシテ ルイ パスツール (3)
【出願人】（５０６０７１０４７）サントル ナスィオナル ド ラ ルシェルシュ シアンティフィック (1)
【氏名又は名称原語表記】ＣＥＮＴＲＥ ＮＡＴＩＯＮＡＬ ＤＥ ＬＡ ＲＥＣＨＥＲＣＨＥ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＱＵＥ
【出願人】（５０６０７１０５８）ユニヴェルシテ ドュ ルクセンブルグ (1)
【氏名又は名称原語表記】ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＥ ＤＵ ＬＵＸＥＭＢＯＵＲＧ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年３月２２日（２００７．３．２２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年９月２４日（２００４．９．２４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２００４／００２４２４
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３０７４８
【国際公開日】平成１７年４月７日（２００５．４．７）
【出願人】（５９４１９７８５０）ユニヴェルシテ ルイ パスツール (3)
【出願人】（５０６０７１０４７）サントル ナスィオナル ド ラ ルシェルシュ シアンティフィック (1)
【氏名又は名称原語表記】ＣＥＮＴＲＥ ＮＡＴＩＯＮＡＬ ＤＥ ＬＡ ＲＥＣＨＥＲＣＨＥ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＱＵＥ
【出願人】（５０６０７１０５８）ユニヴェルシテ ドュ ルクセンブルグ (1)
【氏名又は名称原語表記】ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＥ ＤＵ ＬＵＸＥＭＢＯＵＲＧ
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]