細胞系、ならびにそれらを作製および使用するための方法
本発明は、新規な細胞および細胞系、ならびにそれらを作製および使用するための方法に関する。いくつかの実施形態において、本発明は、対象とするヘテロ二量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする導入核酸から対象とするヘテロ二量体タンパク質を発現する細胞を提供し、機能アッセイでの使用に適した形で対象とするヘテロ二量体タンパク質を産生することを特徴とし、前記対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または前記タンパク質が、細胞が機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または前記細胞が選択圧の不在下で培養される、またはその任意の組合せである。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象とするヘテロ二量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする導入核酸から該対象とするヘテロ二量体タンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするヘテロ二量体タンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項２】
対象とするヘテロ二量体タンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、該対象とするヘテロ二量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするヘテロ二量体タンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項３】
対象とするヘテロ二量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする導入核酸から該対象とするヘテロ二量体タンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とし、選択圧の不在下で培養される、細胞。
【請求項４】
対象とするヘテロ二量体タンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、該対象とするヘテロ二量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とし、選択圧の不在下で培養される、細胞。
【請求項５】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質の第２サブユニットをコードする核酸が内因性である、請求項１から４のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質の第２サブユニットをコードする核酸が導入されている、請求項２または４に記載の細胞。
【請求項７】
前記対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まない、請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項８】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が、イオンチャネル、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）、チロシン受容体キナーゼ、サイトカイン受容体、核ステロイドホルモン受容体および免疫学的受容体からなる群より選択される、請求項１から７のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項９】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が、甘味受容体およびうま味受容体からなる群より選択される、請求項８に記載の細胞。
【請求項１０】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が公知のリガンドを有さない、請求項１から８のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１１】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が同じ型の細胞中で発現されない、請求項１から１０のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１２】
哺乳動物細胞である、請求項１から１１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１３】
１を超えるシグナル対ノイズ比、時間をわたって安定であること、発現の消失を伴わない選択圧なしでの増殖、生理的なＥＣ５０値、および生理的なＩＣ５０値からなる群より選択される追加の望ましい特性を有することをさらに特徴とする、請求項１から１２のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１４】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、および少なくとも９ヶ月から選択される期間１つの形で一貫して再現性よく産生される、請求項１、２および５から１３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１５】
前記機能アッセイが細胞ベースアッセイ、蛍光細胞ベースアッセイ、高スループットスクリーニングアッセイ、受容体細胞ベースアッセイ、Ｇタンパク質媒介細胞ベースアッセイ、およびカルシウムフラックス細胞ベースアッセイからなる群より選択される、請求項１、２および５から１３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１６】
前記細胞が細胞ベースの高スループットスクリーニングでの利用に適している、請求項１、２および５から１３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１７】
前記選択圧が抗生物質である、請求項３から１３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１８】
少なくとも１５日間、３０日間、４５日間、６０日間、７５日間、１００日間、１２０日間、または１５０日間、選択圧の不在下で前記ヘテロ二量体タンパク質を発現する、請求項３から１３および１７のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１９】
対象とするヘテロ多量体タンパク質を発現する細胞であって、該ヘテロ多量体タンパク質が少なくとも３つのサブユニットを含み、該対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットが導入核酸によってコードされており、該細胞は、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするヘテロ二量体タンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項２０】
対象とするヘテロ多量体タンパク質を発現する細胞であって、該ヘテロ多量体タンパク質が少なくとも３つのサブユニットを含み、該細胞は、該対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするヘテロ二量体タンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項２１】
対象とするヘテロ多量体タンパク質を発現する細胞であって、該ヘテロ多量体タンパク質が少なくとも３つのサブユニットを含み、該対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットが導入核酸によってコードされており、該細胞が生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とする、細胞。
【請求項２２】
対象とするヘテロ多量体タンパク質を発現する細胞であって、該ヘテロ多量体タンパク質が少なくとも３つのサブユニットを含み、該細胞が該対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、該細胞が生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とする細胞。
【請求項２３】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする前記核酸が内因性である、請求項１９から２２のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項２４】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする前記核酸が導入されている、請求項２０または２２に記載の細胞。
【請求項２５】
前記対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まない、請求項１９から２４のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項２６】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質が、イオンチャネル、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）、チロシン受容体キナーゼ、サイトカイン受容体、核ステロイドホルモン受容体および免疫学的受容体からなる群より選択される、請求項１９から２５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項２７】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質が、ＧＡＢＡ、ＥＮａＣおよびＮａＶからなる群より選択される、請求項２６に記載の細胞。
【請求項２８】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質が公知のリガンドを有さない、請求項１９から２６のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項２９】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が同じ型の細胞中で発現されない、請求項１９から２８のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３０】
哺乳動物細胞である、請求項１９から２９のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３１】
１を超えるシグナル対ノイズ比、時間をわたって安定であること、発現の消失を伴わない選択圧なしでの増殖、生理的なＥＣ５０値、および生理的なＩＣ５０値からなる群より選択される追加の望ましい特性を有することをさらに特徴とする、請求項１９から３０のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３２】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質が少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、および少なくとも９ヶ月から選択される期間１つの形で一貫して再現性よく産生される、請求項１９、２０および２３から３１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３３】
前記機能アッセイが細胞ベースアッセイ、蛍光細胞ベースアッセイ、高スループットスクリーニングアッセイ、受容体細胞ベースアッセイ、Ｇタンパク質媒介細胞ベースアッセイ、およびカルシウムフラックス細胞ベースアッセイからなる群より選択される、請求項１９、２０および２３から３１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３４】
細胞ベースの高スループットスクリーニングでの利用に適している、請求項１９、２０および２３から３１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３５】
選択圧の不在下で培養される、請求項２１から３１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３６】
前記選択圧が抗生物質である、請求項３５に記載の細胞。
【請求項３７】
少なくとも１５日間、３０日間、４５日間、６０日間、７５日間、１００日間、１２０日間、または１５０日間、選択圧の不在下で前記ヘテロ多量体タンパク質を発現する、請求項３５または３６に記載の細胞。
【請求項３８】
対象とするタンパク質の少なくとも１つをコードする導入核酸から２つ以上の該対象とするタンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項３９】
２つ以上の対象とするタンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、該対象とするタンパク質の少なくとも１つをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項４０】
対象とするタンパク質の少なくとも１つをコードする導入核酸から２つ以上の該対象とするタンパク質を発現する細胞であって、生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とする細胞。
【請求項４１】
２つ以上の対象とするタンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、該対象とするタンパク質の少なくとも１つをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とする細胞。
【請求項４２】
対象とする少なくとも１つのタンパク質が二量体タンパク質である、請求項３８から４１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項４３】
前記対象とする二量体タンパク質がホモ二量体タンパク質である、請求項４２に記載の細胞。
【請求項４４】
前記対象とする二量体タンパク質がヘテロ二量体タンパク質である、請求項４２に記載の細胞。
【請求項４５】
対象とする少なくとも１つのタンパク質が多量体タンパク質である、請求項３８から４１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項４６】
前記対象とする多量体タンパク質がホモ多量体タンパク質である、請求項４５に記載の細胞。
【請求項４７】
前記対象とする多量体タンパク質がヘテロ多量体タンパク質である、請求項４５に記載の細胞。
【請求項４８】
前記タンパク質の１つが内因性核酸によってコードされている、請求項３８から４７のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項４９】
前記タンパク質の１つが導入核酸によってコードされている、請求項３９または４１に記載の細胞。
【請求項５０】
前記対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まない、請求項３８から４９のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５１】
前記対象とするタンパク質の１つが、イオンチャネル、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）、チロシン受容体キナーゼ、サイトカイン受容体、核ステロイドホルモン受容体および免疫学的受容体からなる群より選択される、請求項３８から４９のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５２】
前記対象とするタンパク質の１つが公知のリガンドを有さない、請求項３８から５１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５３】
前記対象とするタンパク質の１つが同じ型の細胞中で発現されない、請求項３８から５２のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５４】
哺乳動物細胞である、請求項３８から５３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５５】
１を超えるシグナル対ノイズ比、時間をわたって安定であること、発現の消失を伴わない選択圧なしでの増殖、生理的なＥＣ５０値、および生理的なＩＣ５０値からなる群より選択される追加の望ましい特性を有することをさらに特徴とする、請求項３８から５４のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５６】
前記対象とする２つ以上のタンパク質が少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、および少なくとも９ヶ月から選択される期間１つの形で一貫して再現性よく産生される、請求項３８、３９および４２から５５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５７】
前記機能アッセイが細胞ベースアッセイ、蛍光細胞ベースアッセイ、高スループットスクリーニングアッセイ、受容体細胞ベースアッセイ、Ｇタンパク質媒介細胞ベースアッセイ、およびカルシウムフラックス細胞ベースアッセイからなる群より選択される、請求項３８、３９および４２から５５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５８】
細胞ベースの高スループットスクリーニングでの利用に適している、請求項３８、３９および４２から５５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５９】
選択圧の不在下で培養される、請求項４０から５５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６０】
前記選択圧が抗生物質である、請求項５９に記載の細胞。
【請求項６１】
少なくとも１５日間、３０日間、４５日間、６０日間、７５日間、１００日間、１２０日間、または１５０日間、選択圧の不在下で前記２つ以上のタンパク質を発現する、請求項５９または６０に記載の細胞。
【請求項６２】
対象とする少なくとも１つのＲＮＡを発現する細胞であって、該対象とするＲＮＡが導入核酸によってコードされており、該細胞が機能アッセイでの使用に適した形で該対象とする少なくとも１つのＲＮＡを産生することを特徴とし、該対象とするＲＮＡがタグを含まず、または該ＲＮＡが、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項６３】
対象とする少なくとも１つのＲＮＡを発現する細胞であって、該細胞は、該対象とする少なくとも１つのＲＮＡをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とする少なくとも１つのＲＮＡを産生することを特徴とし、該対象とするＲＮＡがタグを含まず、または該ＲＮＡが、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項６４】
対象とする少なくとも２つのＲＮＡを発現する、請求項６２または６３に記載の細胞。
【請求項６５】
対象とする少なくとも３つのＲＮＡを発現する、請求項６２または６３に記載の細胞。
【請求項６６】
導入核酸によってコードされるＲＮＡをさらに発現する、請求項６４から６５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６７】
前記対象とするＲＮＡが、イオンチャネルをコードするＲＮＡ、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）をコードするＲＮＡ、チロシン受容体キナーゼをコードするＲＮＡ、サイトカイン受容体をコードするＲＮＡ、核ステロイドホルモン受容体をコードするＲＮＡおよび免疫学的受容体をコードするＲＮＡからなる群より選択される、請求項６２から６６のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６８】
前記対象とするＲＮＡが同じ型の細胞中で発現されない、請求項６２から６７のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６９】
哺乳動物細胞である、請求項６２から６８のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７０】
１を超えるシグナル対ノイズ比、時間をわたって安定であること、発現の消失を伴わない選択圧なしでの増殖、生理的なＥＣ５０値、および生理的なＩＣ５０値からなる群より選択される追加の望ましい特性を有することをさらに特徴とする、請求項６２から６９のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７１】
前記対象とするＲＮＡが少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、および少なくとも９ヶ月から選択される期間１つの形で一貫して再現性よく産生される、請求項６２から７０のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７２】
前記機能アッセイが細胞ベースアッセイ、蛍光細胞ベースアッセイ、高スループットスクリーニングアッセイ、受容体細胞ベースアッセイ、Ｇタンパク質媒介細胞ベースアッセイ、およびカルシウムフラックス細胞ベースアッセイからなる群より選択される、請求項６２から７１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７３】
細胞ベースの高スループットスクリーニングでの利用に適している、請求項６１から７２のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７４】
請求項１から７３のいずれか一項に記載の細胞から作製された細胞系。
【請求項７５】
対象とするタンパク質を発現する細胞を作製するための方法であって、該細胞が時間をわたって一貫する少なくとも１つの望ましい特性を有し、
ａ）該対象とするタンパク質をコードするｍＲＮＡを発現する複数の細胞を提供するステップと、
ｂ）細胞を個々の培養容器中に個々に分散させ、それによって複数の別々の細胞培養物を提供するステップと、
ｃ）自動化細胞培養方法を使用して一組の望ましい培養条件下で該細胞を培養するステップであって、該条件が該別々の細胞培養物のそれぞれについて実質的に同一であり、該培養中、別々の細胞培養物当たりの細胞数を培養物毎に正規化し、該別々の培養物を同じスケジュールで継代することを特徴とする、ステップと、
ｄ）該対象とするタンパク質の少なくとも１つの望ましい特徴について該別々の細胞培養物を少なくとも２回アッセイするステップと、
ｅ）両方のアッセイで該望ましい特徴を有する別々の細胞培養物を同定するステップであって、該細胞がその細胞（ａ ｃｅｌｌ ｔｈａｔ）であるステップ、と
を含む、方法。
【請求項７６】
ステップａ）における複数の細胞を、ステップｂ）の分散させることの前に、ある程度の期間培養する、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記個々の培養容器がマルチウエルプレートの個々のウエルおよびバイアルからなる群より選択される、請求項７５に記載の方法。
【請求項７８】
複数の前記別々の細胞培養物の増殖速度を決定するステップ、および任意の群中で最も速い増殖速度と最も遅い増殖速度との差がステップｂ）とｃ）の間で１、２、３、４、または５日を超えないように、その増殖速度によって該別々の細胞培養物を群に分けるステップをさらに含む、請求項７５に記載の方法。
【請求項７９】
１つまたは複数の前記別々の培養物の保存ストックを調製するステップをさらに含む、請求項７５または請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記別々の細胞培養物の１つまたは複数の複製セットのステップ、および供給源である前記別々の細胞培養物由来の該１つまたは複数の複製セットを別々に培養するステップをさらに含む、請求項７５に記載の方法。
【請求項８１】
ステップｄ）でのアッセイが前記タンパク質の機能アッセイである、請求項７５に記載の方法。
【請求項８２】
ステップｅ）で一定のままである前記少なくとも１つの特徴がタンパク質機能である、請求項７５に記載の方法。
【請求項８３】
ステップｃ）での前記培養がロボット細胞培養装置におけるものである、請求項７５に記載の方法。
【請求項８４】
前記ロボット細胞培養装置がマルチチャネルロボットピペッターを含む、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
前記マルチチャネルロボットピペッターが少なくとも９６チャネルを含む、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
前記ロボット細胞培養装置がチェリーピッキングアームをさらに含む、請求項８４に記載の方法。
【請求項８７】
前記自動化方法が培地除去、培地交換、細胞洗浄、試薬添加、細胞の除去、細胞分散、および細胞継代の１つまたは複数を含む、請求項７５に記載の方法。
【請求項８８】
複数の前記別々の細胞培養物が少なくとも５０個の培養物である、請求項７５に記載の方法。
【請求項８９】
複数の前記別々の細胞培養物が少なくとも１００個の培養物である、請求項７５に記載の方法。
【請求項９０】
複数の前記別々の細胞培養物が少なくとも５００個の培養物である、請求項７５に記載の方法。
【請求項９１】
複数の前記別々の細胞培養物が少なくとも１０００個の培養物である、請求項７５に記載の方法。
【請求項９２】
ＡＴＰの測定、細胞集密度の測定、光散乱、光学濃度測定からなる群より選択される方法によって前記増殖速度を決定する、請求項７８に記載の方法。
【請求項９３】
前記群中で最も速い増殖速度と最も遅い増殖速度との差が１、２、３、４、または５時間を超えない、請求項７８に記載の方法。
【請求項９４】
ステップｃ）での培養が少なくとも２日間である、請求項７５に記載の方法。
【請求項９５】
複数の前記別々の細胞培養物の増殖速度を前記細胞を分散させることおよび細胞集密度を測定することによって決定する、請求項７８に記載の方法。
【請求項９６】
前記それぞれ別々の細胞培養物中の細胞を細胞集密度の測定前に分散させる、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
前記分散ステップがトリプシンを前記ウエルに加えて塊を除去することを含む、請求項９５または９６に記載の方法。
【請求項９８】
複数の前記別々の細胞培養物の細胞集密度を、自動化マイクロプレートリーダーを使用して測定する、請求項９５に記載の方法。
【請求項９９】
少なくとも２回の集密度測定を、増殖速度を計算する前に実施する、請求項９５に記載の方法。
【請求項１００】
前記細胞集密度を自動化プレートリーダーによって測定し、かつ増殖速度を計算するソフトウェアプログラムと共に該集密度値を使用する、請求項９８に記載の方法。
【請求項１０１】
ステップｄ）での別々の細胞培養物が、脆弱性、形態、固体表面との接着性、固体表面との接着性の欠如およびタンパク質機能の１つまたは複数から選択される望ましい特質を特徴とする、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０２】
前記細胞が真核細胞である、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０３】
前記真核細胞が哺乳動物細胞である、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０４】
前記哺乳動物細胞系がＮＳ０細胞、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＥＫ−２９３細胞、ＨＵＶＥＣ、３Ｔ３細胞およびＨｅＬａ細胞からなる群より選択される、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０５】
前記対象とするタンパク質がヒトタンパク質である、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０６】
前記対象とするタンパク質がヘテロ多量体である、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記対象とするタンパク質がＧタンパク質共役受容体である、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０８】
前記タンパク質が公知のリガンドを有さない、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０９】
前記同定ステップの後に、
ａ）望ましい培養条件下においてステップｅ）で同定した細胞培養物の保存アリコートを拡大増殖させるステップと、
ｂ）該ａ）の拡大増殖させた細胞培養物が望ましい特徴を有するかどうかを決定するステップと
をさらに含む、請求項７５に記載の方法。
【請求項１１０】
クローン細胞系の適合パネルであって、該クローン細胞系が同じ細胞型であり、該パネル中のそれぞれの細胞系が対象とするタンパク質を発現し、該パネル中のクローン細胞系が同じ生理学的特徴を共有するように適合されていることにより並行処理が可能となる、クローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１１】
前記生理学的特徴が増殖速度である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１２】
前記生理学的特徴が組織培養物表面との接着性である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１３】
前記生理学的特徴がＺ’係数である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１４】
前記生理学的特徴が前記対象とするタンパク質をコードするＲＮＡの発現レベルである、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１５】
前記生理学的特徴が前記対象とするタンパク質の発現レベルである、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１６】
前記パネル中のクローン細胞系の増殖速度が互いに１、２、３、４、または５時間の範囲内にある、請求項１１１に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１７】
前記培養条件が前記パネル中の全てのクローン細胞系で同じである、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１８】
前記クローン細胞系が真核細胞系である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１９】
前記真核細胞系が哺乳動物細胞系である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２０】
前記細胞系の細胞が初代細胞および不死化細胞からなる群より選択される、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２１】
前記細胞系の細胞が原核細胞または真核細胞である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２２】
前記細胞系の細胞が真核細胞であり、真菌細胞、昆虫細胞、哺乳動物細胞、酵母細胞、藻類、甲殻類細胞、節足動物細胞、鳥類細胞、爬虫類細胞、両生類細胞および植物細胞からなる群より選択される、請求項１２１に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２３】
前記細胞系の細胞が哺乳動物細胞であり、ヒト、非ヒト霊長類、ウシ、ブタ、ネコ、ラット、有袋動物、ネズミ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、ウサギ、モルモット、ハムスターからなる群より選択される、請求項１２２に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２４】
前記細胞系の細胞が前記対象とするタンパク質を発現するように操作されている、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２５】
前記細胞系の細胞が、前記対象とするタンパク質をコードする、または多量体タンパク質の場合では該タンパク質のサブユニットをコードする導入核酸から該タンパク質を発現する、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２６】
前記細胞が内因性核酸から前記対象とするタンパク質を発現し、該細胞が内因性タンパク質の転写を活性化する、または多量体タンパク質の場合では該タンパク質のサブユニットの転写を活性化するように操作されている、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２７】
前記パネルが少なくとも４個のクローン細胞系を含む、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２８】
前記パネルが少なくとも６個のクローン細胞系を含む、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２９】
前記パネルが少なくとも２５個のクローン細胞系を含む、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３０】
前記パネル中の２つ以上のクローン細胞系が対象とする同じタンパク質を発現する、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３１】
前記パネル中の２つ以上のクローン細胞系が対象とする異なるタンパク質を発現する、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３２】
前記パネル中の細胞系が異なる形態の対象とするタンパク質を発現し、該形態がアイソフォーム、アミノ酸配列変異体、スプライス変異体、切断型、融合タンパク質、キメラ、またはそれらの組合せからなる群より選択される、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３３】
前記パネル中の細胞系が対象とするタンパク質の群中の異なるタンパク質を発現し、該対象とするタンパク質の群が同じシグナル伝達経路中のタンパク質、類似したタンパク質の発現ライブラリー、モノクローナル抗体重鎖ライブラリー、モノクローナル抗体軽鎖ライブラリーおよびＳＮＰからなる群より選択される、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３４】
前記対象とするタンパク質が単鎖タンパク質である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３５】
前記単鎖タンパク質がＧタンパク質共役受容体である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３６】
前記Ｇタンパク質共役受容体が味覚受容体である、請求項１３５に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３７】
前記味覚受容体が苦味受容体、甘味受容体、塩味受容体およびうま味受容体からなる群より選択される、請求項１３６に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３８】
前記タンパク質が多量体タンパク質である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３９】
前記タンパク質がヘテロ二量体またはヘテロ多量体である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４０】
前記タンパク質が、イオンチャネル、イオンチャネル、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）、チロシン受容体キナーゼ、サイトカイン受容体、核ステロイドホルモン受容体および免疫学的受容体からなる群より選択される、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４１】
前記タンパク質が上皮ナトリウムチャネル（ＥＮａＣ）である、請求項１４０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４２】
前記ＥＮａＣがαサブユニット、βサブユニットおよびγサブユニットを含む、請求項１４０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４３】
前記パネル中の細胞系が異なるＥＮａＣアイソフォームを発現する、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４４】
前記パネル中の細胞系がＥＮａＣの異なるタンパク質分解アイソフォームを含む、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４５】
前記ＥＮａＣがヒトＥＮａＣである、請求項１４１から１４３のいずれか一項に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４６】
前記タンパク質が電位依存性ナトリウムチャネル（ＮａＶ）である、請求項１４０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４７】
前記ＮａＶが１つのαサブユニットおよび２つのβサブユニットを含む、請求項１４６に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４８】
前記ＮａＶがヒトＮａＶである、請求項１４０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４９】
前記タンパク質がγ−アミノ酪酸Ａ受容体（ＧＡＢＡＡ受容体）、γ−アミノ酪酸Ｂ受容体（ＧＡＢＡＢ受容体）およびγ−アミノ酪酸Ｃ受容体（ＧＡＢＡＣ受容体）からなる群より選択される、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１５０】
前記タンパク質がＧＡＢＡＡ受容体である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１５１】
前記ＧＡＢＡＡ受容体が２つのαサブユニット、２つのβサブユニットおよび１つのγまたはδサブユニットを含む、請求項１５０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１５２】
前記パネル中のクローン細胞系が同時に、または互いに４週間を超えない内に作製された、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１５３】
対象とする単量体タンパク質をコードする導入核酸から該対象とする単量体タンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とし、該細胞は選択圧の不在下で培養され、かつ該タンパク質の発現が３ヶ月にわたって３０％を超えて変化しない、細胞。
【請求項１５４】
前記タンパク質の発現が６ヶ月にわたって３０％を超えて変化しない、請求項１５３に記載の細胞。
【請求項１５５】
前記対象とするタンパク質が公知のリガンドを有さない、請求項１５３または１５４に記載の細胞。
【請求項１５６】
対象とするタンパク質のモジュレーターを同定するための方法であって、該細胞は：
ａ）請求項１から７４のいずれか一項に記載の細胞を試験化合物と接触させるステップと、
ｂ）該試験化合物と接触させなかった細胞における該タンパク質の活性と比較した、該試験化合物と接触させた細胞における該対象とするタンパク質の活性の変化を検出するステップと
を含み、不在下と比較して存在下で活性の差を生じる化合物が該対象とするタンパク質のモジュレーターである、方法。
【請求項１５７】
請求項１５６に記載の方法によって同定されたモジュレーター。
【請求項１５８】
請求項１５６に記載の方法によって同定されたモジュレーター。
【請求項１５９】
前記対象とするＲＮＡがｓｉＲＮＡまたはアンチセンスＲＮＡである、請求項６３に記載の細胞。
【請求項１６０】
対象とする少なくとも１つのタンパク質を発現する細胞であって、該対象とするタンパク質が公知のリガンドを有さないか、または該対象とするタンパク質の機能的発現を検出する公知のアッセイが存在せず、かつ該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まない細胞。
【請求項１６１】
前記対象とするタンパク質が少なくとも２、３、４、５、または６つのサブユニットを含む、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６２】
前記対象とするタンパク質が
【化９】
からなる群より選択される表３に示すヒト遺伝子記号によって特定されるオーファン受容体である、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６３】
前記対象とするタンパク質の少なくとも１つのサブユニットが遺伝子活性化によって発現される、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６４】
前記対象とするタンパク質の少なくとも１つのサブユニットが導入核酸から発現される、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６５】
前記対象とするタンパク質が公知のリガンドを有さない、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６６】
前記対象とするタンパク質が公知の機能を有さない、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６７】
前記対象とするタンパク質が公知のリガンドを有さず、公知の機能も有さない、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６８】
前記タンパク質の発現が３ヶ月にわたって５％を超えて変化しない、請求項１５３に記載の細胞。
【請求項１６９】
細胞系を生成するための方法であって、同一培養条件下で複数の並行培養物中の複数の細胞系を培養するステップ、および時間をわたって一貫した状態のままである少なくとも１つの特徴を有する細胞系を同定するステップを含む、方法。
【請求項１７０】
前記複数の並行培養物が少なくとも５０個の細胞培養物を含む、請求項１６８に記載の方法。
【請求項１７１】
前記複数の並行培養物が少なくとも１００個の細胞培養物を含む、請求項１６８に記載の方法。
【請求項１７２】
前記複数の並行培養物が少なくとも２００個の細胞培養物を含む、請求項１６８に記載の方法。
【請求項１】
対象とするヘテロ二量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする導入核酸から該対象とするヘテロ二量体タンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするヘテロ二量体タンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項２】
対象とするヘテロ二量体タンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、該対象とするヘテロ二量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするヘテロ二量体タンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項３】
対象とするヘテロ二量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする導入核酸から該対象とするヘテロ二量体タンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とし、選択圧の不在下で培養される、細胞。
【請求項４】
対象とするヘテロ二量体タンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、該対象とするヘテロ二量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とし、選択圧の不在下で培養される、細胞。
【請求項５】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質の第２サブユニットをコードする核酸が内因性である、請求項１から４のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質の第２サブユニットをコードする核酸が導入されている、請求項２または４に記載の細胞。
【請求項７】
前記対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まない、請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項８】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が、イオンチャネル、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）、チロシン受容体キナーゼ、サイトカイン受容体、核ステロイドホルモン受容体および免疫学的受容体からなる群より選択される、請求項１から７のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項９】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が、甘味受容体およびうま味受容体からなる群より選択される、請求項８に記載の細胞。
【請求項１０】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が公知のリガンドを有さない、請求項１から８のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１１】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が同じ型の細胞中で発現されない、請求項１から１０のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１２】
哺乳動物細胞である、請求項１から１１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１３】
１を超えるシグナル対ノイズ比、時間をわたって安定であること、発現の消失を伴わない選択圧なしでの増殖、生理的なＥＣ５０値、および生理的なＩＣ５０値からなる群より選択される追加の望ましい特性を有することをさらに特徴とする、請求項１から１２のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１４】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、および少なくとも９ヶ月から選択される期間１つの形で一貫して再現性よく産生される、請求項１、２および５から１３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１５】
前記機能アッセイが細胞ベースアッセイ、蛍光細胞ベースアッセイ、高スループットスクリーニングアッセイ、受容体細胞ベースアッセイ、Ｇタンパク質媒介細胞ベースアッセイ、およびカルシウムフラックス細胞ベースアッセイからなる群より選択される、請求項１、２および５から１３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１６】
前記細胞が細胞ベースの高スループットスクリーニングでの利用に適している、請求項１、２および５から１３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１７】
前記選択圧が抗生物質である、請求項３から１３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１８】
少なくとも１５日間、３０日間、４５日間、６０日間、７５日間、１００日間、１２０日間、または１５０日間、選択圧の不在下で前記ヘテロ二量体タンパク質を発現する、請求項３から１３および１７のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１９】
対象とするヘテロ多量体タンパク質を発現する細胞であって、該ヘテロ多量体タンパク質が少なくとも３つのサブユニットを含み、該対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットが導入核酸によってコードされており、該細胞は、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするヘテロ二量体タンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項２０】
対象とするヘテロ多量体タンパク質を発現する細胞であって、該ヘテロ多量体タンパク質が少なくとも３つのサブユニットを含み、該細胞は、該対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするヘテロ二量体タンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項２１】
対象とするヘテロ多量体タンパク質を発現する細胞であって、該ヘテロ多量体タンパク質が少なくとも３つのサブユニットを含み、該対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットが導入核酸によってコードされており、該細胞が生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とする、細胞。
【請求項２２】
対象とするヘテロ多量体タンパク質を発現する細胞であって、該ヘテロ多量体タンパク質が少なくとも３つのサブユニットを含み、該細胞が該対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、該細胞が生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とする細胞。
【請求項２３】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする前記核酸が内因性である、請求項１９から２２のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項２４】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質の少なくとも１つのサブユニットをコードする前記核酸が導入されている、請求項２０または２２に記載の細胞。
【請求項２５】
前記対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まない、請求項１９から２４のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項２６】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質が、イオンチャネル、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）、チロシン受容体キナーゼ、サイトカイン受容体、核ステロイドホルモン受容体および免疫学的受容体からなる群より選択される、請求項１９から２５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項２７】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質が、ＧＡＢＡ、ＥＮａＣおよびＮａＶからなる群より選択される、請求項２６に記載の細胞。
【請求項２８】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質が公知のリガンドを有さない、請求項１９から２６のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項２９】
前記対象とするヘテロ二量体タンパク質が同じ型の細胞中で発現されない、請求項１９から２８のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３０】
哺乳動物細胞である、請求項１９から２９のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３１】
１を超えるシグナル対ノイズ比、時間をわたって安定であること、発現の消失を伴わない選択圧なしでの増殖、生理的なＥＣ５０値、および生理的なＩＣ５０値からなる群より選択される追加の望ましい特性を有することをさらに特徴とする、請求項１９から３０のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３２】
前記対象とするヘテロ多量体タンパク質が少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、および少なくとも９ヶ月から選択される期間１つの形で一貫して再現性よく産生される、請求項１９、２０および２３から３１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３３】
前記機能アッセイが細胞ベースアッセイ、蛍光細胞ベースアッセイ、高スループットスクリーニングアッセイ、受容体細胞ベースアッセイ、Ｇタンパク質媒介細胞ベースアッセイ、およびカルシウムフラックス細胞ベースアッセイからなる群より選択される、請求項１９、２０および２３から３１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３４】
細胞ベースの高スループットスクリーニングでの利用に適している、請求項１９、２０および２３から３１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３５】
選択圧の不在下で培養される、請求項２１から３１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項３６】
前記選択圧が抗生物質である、請求項３５に記載の細胞。
【請求項３７】
少なくとも１５日間、３０日間、４５日間、６０日間、７５日間、１００日間、１２０日間、または１５０日間、選択圧の不在下で前記ヘテロ多量体タンパク質を発現する、請求項３５または３６に記載の細胞。
【請求項３８】
対象とするタンパク質の少なくとも１つをコードする導入核酸から２つ以上の該対象とするタンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項３９】
２つ以上の対象とするタンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、該対象とするタンパク質の少なくとも１つをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とし、該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まないか、または該タンパク質が、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項４０】
対象とするタンパク質の少なくとも１つをコードする導入核酸から２つ以上の該対象とするタンパク質を発現する細胞であって、生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とする細胞。
【請求項４１】
２つ以上の対象とするタンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、該対象とするタンパク質の少なくとも１つをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とする細胞。
【請求項４２】
対象とする少なくとも１つのタンパク質が二量体タンパク質である、請求項３８から４１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項４３】
前記対象とする二量体タンパク質がホモ二量体タンパク質である、請求項４２に記載の細胞。
【請求項４４】
前記対象とする二量体タンパク質がヘテロ二量体タンパク質である、請求項４２に記載の細胞。
【請求項４５】
対象とする少なくとも１つのタンパク質が多量体タンパク質である、請求項３８から４１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項４６】
前記対象とする多量体タンパク質がホモ多量体タンパク質である、請求項４５に記載の細胞。
【請求項４７】
前記対象とする多量体タンパク質がヘテロ多量体タンパク質である、請求項４５に記載の細胞。
【請求項４８】
前記タンパク質の１つが内因性核酸によってコードされている、請求項３８から４７のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項４９】
前記タンパク質の１つが導入核酸によってコードされている、請求項３９または４１に記載の細胞。
【請求項５０】
前記対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まない、請求項３８から４９のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５１】
前記対象とするタンパク質の１つが、イオンチャネル、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）、チロシン受容体キナーゼ、サイトカイン受容体、核ステロイドホルモン受容体および免疫学的受容体からなる群より選択される、請求項３８から４９のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５２】
前記対象とするタンパク質の１つが公知のリガンドを有さない、請求項３８から５１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５３】
前記対象とするタンパク質の１つが同じ型の細胞中で発現されない、請求項３８から５２のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５４】
哺乳動物細胞である、請求項３８から５３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５５】
１を超えるシグナル対ノイズ比、時間をわたって安定であること、発現の消失を伴わない選択圧なしでの増殖、生理的なＥＣ５０値、および生理的なＩＣ５０値からなる群より選択される追加の望ましい特性を有することをさらに特徴とする、請求項３８から５４のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５６】
前記対象とする２つ以上のタンパク質が少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、および少なくとも９ヶ月から選択される期間１つの形で一貫して再現性よく産生される、請求項３８、３９および４２から５５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５７】
前記機能アッセイが細胞ベースアッセイ、蛍光細胞ベースアッセイ、高スループットスクリーニングアッセイ、受容体細胞ベースアッセイ、Ｇタンパク質媒介細胞ベースアッセイ、およびカルシウムフラックス細胞ベースアッセイからなる群より選択される、請求項３８、３９および４２から５５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５８】
細胞ベースの高スループットスクリーニングでの利用に適している、請求項３８、３９および４２から５５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項５９】
選択圧の不在下で培養される、請求項４０から５５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６０】
前記選択圧が抗生物質である、請求項５９に記載の細胞。
【請求項６１】
少なくとも１５日間、３０日間、４５日間、６０日間、７５日間、１００日間、１２０日間、または１５０日間、選択圧の不在下で前記２つ以上のタンパク質を発現する、請求項５９または６０に記載の細胞。
【請求項６２】
対象とする少なくとも１つのＲＮＡを発現する細胞であって、該対象とするＲＮＡが導入核酸によってコードされており、該細胞が機能アッセイでの使用に適した形で該対象とする少なくとも１つのＲＮＡを産生することを特徴とし、該対象とするＲＮＡがタグを含まず、または該ＲＮＡが、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項６３】
対象とする少なくとも１つのＲＮＡを発現する細胞であって、該細胞は、該対象とする少なくとも１つのＲＮＡをコードする内因性核酸の転写を活性化するように操作されており、機能アッセイでの使用に適した形で該対象とする少なくとも１つのＲＮＡを産生することを特徴とし、該対象とするＲＮＡがタグを含まず、または該ＲＮＡが、該細胞が該機能アッセイ中で少なくとも０．４のＺ’係数を有するようにその形で一貫して再現性よく産生されるか、または該細胞が選択圧の不在下で培養されるか、またはそれらの任意の組合せである、細胞。
【請求項６４】
対象とする少なくとも２つのＲＮＡを発現する、請求項６２または６３に記載の細胞。
【請求項６５】
対象とする少なくとも３つのＲＮＡを発現する、請求項６２または６３に記載の細胞。
【請求項６６】
導入核酸によってコードされるＲＮＡをさらに発現する、請求項６４から６５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６７】
前記対象とするＲＮＡが、イオンチャネルをコードするＲＮＡ、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）をコードするＲＮＡ、チロシン受容体キナーゼをコードするＲＮＡ、サイトカイン受容体をコードするＲＮＡ、核ステロイドホルモン受容体をコードするＲＮＡおよび免疫学的受容体をコードするＲＮＡからなる群より選択される、請求項６２から６６のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６８】
前記対象とするＲＮＡが同じ型の細胞中で発現されない、請求項６２から６７のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項６９】
哺乳動物細胞である、請求項６２から６８のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７０】
１を超えるシグナル対ノイズ比、時間をわたって安定であること、発現の消失を伴わない選択圧なしでの増殖、生理的なＥＣ５０値、および生理的なＩＣ５０値からなる群より選択される追加の望ましい特性を有することをさらに特徴とする、請求項６２から６９のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７１】
前記対象とするＲＮＡが少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、および少なくとも９ヶ月から選択される期間１つの形で一貫して再現性よく産生される、請求項６２から７０のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７２】
前記機能アッセイが細胞ベースアッセイ、蛍光細胞ベースアッセイ、高スループットスクリーニングアッセイ、受容体細胞ベースアッセイ、Ｇタンパク質媒介細胞ベースアッセイ、およびカルシウムフラックス細胞ベースアッセイからなる群より選択される、請求項６２から７１のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７３】
細胞ベースの高スループットスクリーニングでの利用に適している、請求項６１から７２のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項７４】
請求項１から７３のいずれか一項に記載の細胞から作製された細胞系。
【請求項７５】
対象とするタンパク質を発現する細胞を作製するための方法であって、該細胞が時間をわたって一貫する少なくとも１つの望ましい特性を有し、
ａ）該対象とするタンパク質をコードするｍＲＮＡを発現する複数の細胞を提供するステップと、
ｂ）細胞を個々の培養容器中に個々に分散させ、それによって複数の別々の細胞培養物を提供するステップと、
ｃ）自動化細胞培養方法を使用して一組の望ましい培養条件下で該細胞を培養するステップであって、該条件が該別々の細胞培養物のそれぞれについて実質的に同一であり、該培養中、別々の細胞培養物当たりの細胞数を培養物毎に正規化し、該別々の培養物を同じスケジュールで継代することを特徴とする、ステップと、
ｄ）該対象とするタンパク質の少なくとも１つの望ましい特徴について該別々の細胞培養物を少なくとも２回アッセイするステップと、
ｅ）両方のアッセイで該望ましい特徴を有する別々の細胞培養物を同定するステップであって、該細胞がその細胞（ａ ｃｅｌｌ ｔｈａｔ）であるステップ、と
を含む、方法。
【請求項７６】
ステップａ）における複数の細胞を、ステップｂ）の分散させることの前に、ある程度の期間培養する、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記個々の培養容器がマルチウエルプレートの個々のウエルおよびバイアルからなる群より選択される、請求項７５に記載の方法。
【請求項７８】
複数の前記別々の細胞培養物の増殖速度を決定するステップ、および任意の群中で最も速い増殖速度と最も遅い増殖速度との差がステップｂ）とｃ）の間で１、２、３、４、または５日を超えないように、その増殖速度によって該別々の細胞培養物を群に分けるステップをさらに含む、請求項７５に記載の方法。
【請求項７９】
１つまたは複数の前記別々の培養物の保存ストックを調製するステップをさらに含む、請求項７５または請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記別々の細胞培養物の１つまたは複数の複製セットのステップ、および供給源である前記別々の細胞培養物由来の該１つまたは複数の複製セットを別々に培養するステップをさらに含む、請求項７５に記載の方法。
【請求項８１】
ステップｄ）でのアッセイが前記タンパク質の機能アッセイである、請求項７５に記載の方法。
【請求項８２】
ステップｅ）で一定のままである前記少なくとも１つの特徴がタンパク質機能である、請求項７５に記載の方法。
【請求項８３】
ステップｃ）での前記培養がロボット細胞培養装置におけるものである、請求項７５に記載の方法。
【請求項８４】
前記ロボット細胞培養装置がマルチチャネルロボットピペッターを含む、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
前記マルチチャネルロボットピペッターが少なくとも９６チャネルを含む、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
前記ロボット細胞培養装置がチェリーピッキングアームをさらに含む、請求項８４に記載の方法。
【請求項８７】
前記自動化方法が培地除去、培地交換、細胞洗浄、試薬添加、細胞の除去、細胞分散、および細胞継代の１つまたは複数を含む、請求項７５に記載の方法。
【請求項８８】
複数の前記別々の細胞培養物が少なくとも５０個の培養物である、請求項７５に記載の方法。
【請求項８９】
複数の前記別々の細胞培養物が少なくとも１００個の培養物である、請求項７５に記載の方法。
【請求項９０】
複数の前記別々の細胞培養物が少なくとも５００個の培養物である、請求項７５に記載の方法。
【請求項９１】
複数の前記別々の細胞培養物が少なくとも１０００個の培養物である、請求項７５に記載の方法。
【請求項９２】
ＡＴＰの測定、細胞集密度の測定、光散乱、光学濃度測定からなる群より選択される方法によって前記増殖速度を決定する、請求項７８に記載の方法。
【請求項９３】
前記群中で最も速い増殖速度と最も遅い増殖速度との差が１、２、３、４、または５時間を超えない、請求項７８に記載の方法。
【請求項９４】
ステップｃ）での培養が少なくとも２日間である、請求項７５に記載の方法。
【請求項９５】
複数の前記別々の細胞培養物の増殖速度を前記細胞を分散させることおよび細胞集密度を測定することによって決定する、請求項７８に記載の方法。
【請求項９６】
前記それぞれ別々の細胞培養物中の細胞を細胞集密度の測定前に分散させる、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
前記分散ステップがトリプシンを前記ウエルに加えて塊を除去することを含む、請求項９５または９６に記載の方法。
【請求項９８】
複数の前記別々の細胞培養物の細胞集密度を、自動化マイクロプレートリーダーを使用して測定する、請求項９５に記載の方法。
【請求項９９】
少なくとも２回の集密度測定を、増殖速度を計算する前に実施する、請求項９５に記載の方法。
【請求項１００】
前記細胞集密度を自動化プレートリーダーによって測定し、かつ増殖速度を計算するソフトウェアプログラムと共に該集密度値を使用する、請求項９８に記載の方法。
【請求項１０１】
ステップｄ）での別々の細胞培養物が、脆弱性、形態、固体表面との接着性、固体表面との接着性の欠如およびタンパク質機能の１つまたは複数から選択される望ましい特質を特徴とする、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０２】
前記細胞が真核細胞である、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０３】
前記真核細胞が哺乳動物細胞である、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０４】
前記哺乳動物細胞系がＮＳ０細胞、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＥＫ−２９３細胞、ＨＵＶＥＣ、３Ｔ３細胞およびＨｅＬａ細胞からなる群より選択される、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０５】
前記対象とするタンパク質がヒトタンパク質である、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０６】
前記対象とするタンパク質がヘテロ多量体である、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記対象とするタンパク質がＧタンパク質共役受容体である、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０８】
前記タンパク質が公知のリガンドを有さない、請求項７５に記載の方法。
【請求項１０９】
前記同定ステップの後に、
ａ）望ましい培養条件下においてステップｅ）で同定した細胞培養物の保存アリコートを拡大増殖させるステップと、
ｂ）該ａ）の拡大増殖させた細胞培養物が望ましい特徴を有するかどうかを決定するステップと
をさらに含む、請求項７５に記載の方法。
【請求項１１０】
クローン細胞系の適合パネルであって、該クローン細胞系が同じ細胞型であり、該パネル中のそれぞれの細胞系が対象とするタンパク質を発現し、該パネル中のクローン細胞系が同じ生理学的特徴を共有するように適合されていることにより並行処理が可能となる、クローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１１】
前記生理学的特徴が増殖速度である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１２】
前記生理学的特徴が組織培養物表面との接着性である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１３】
前記生理学的特徴がＺ’係数である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１４】
前記生理学的特徴が前記対象とするタンパク質をコードするＲＮＡの発現レベルである、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１５】
前記生理学的特徴が前記対象とするタンパク質の発現レベルである、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１６】
前記パネル中のクローン細胞系の増殖速度が互いに１、２、３、４、または５時間の範囲内にある、請求項１１１に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１７】
前記培養条件が前記パネル中の全てのクローン細胞系で同じである、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１８】
前記クローン細胞系が真核細胞系である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１１９】
前記真核細胞系が哺乳動物細胞系である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２０】
前記細胞系の細胞が初代細胞および不死化細胞からなる群より選択される、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２１】
前記細胞系の細胞が原核細胞または真核細胞である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２２】
前記細胞系の細胞が真核細胞であり、真菌細胞、昆虫細胞、哺乳動物細胞、酵母細胞、藻類、甲殻類細胞、節足動物細胞、鳥類細胞、爬虫類細胞、両生類細胞および植物細胞からなる群より選択される、請求項１２１に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２３】
前記細胞系の細胞が哺乳動物細胞であり、ヒト、非ヒト霊長類、ウシ、ブタ、ネコ、ラット、有袋動物、ネズミ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、ウサギ、モルモット、ハムスターからなる群より選択される、請求項１２２に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２４】
前記細胞系の細胞が前記対象とするタンパク質を発現するように操作されている、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２５】
前記細胞系の細胞が、前記対象とするタンパク質をコードする、または多量体タンパク質の場合では該タンパク質のサブユニットをコードする導入核酸から該タンパク質を発現する、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２６】
前記細胞が内因性核酸から前記対象とするタンパク質を発現し、該細胞が内因性タンパク質の転写を活性化する、または多量体タンパク質の場合では該タンパク質のサブユニットの転写を活性化するように操作されている、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２７】
前記パネルが少なくとも４個のクローン細胞系を含む、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２８】
前記パネルが少なくとも６個のクローン細胞系を含む、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１２９】
前記パネルが少なくとも２５個のクローン細胞系を含む、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３０】
前記パネル中の２つ以上のクローン細胞系が対象とする同じタンパク質を発現する、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３１】
前記パネル中の２つ以上のクローン細胞系が対象とする異なるタンパク質を発現する、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３２】
前記パネル中の細胞系が異なる形態の対象とするタンパク質を発現し、該形態がアイソフォーム、アミノ酸配列変異体、スプライス変異体、切断型、融合タンパク質、キメラ、またはそれらの組合せからなる群より選択される、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３３】
前記パネル中の細胞系が対象とするタンパク質の群中の異なるタンパク質を発現し、該対象とするタンパク質の群が同じシグナル伝達経路中のタンパク質、類似したタンパク質の発現ライブラリー、モノクローナル抗体重鎖ライブラリー、モノクローナル抗体軽鎖ライブラリーおよびＳＮＰからなる群より選択される、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３４】
前記対象とするタンパク質が単鎖タンパク質である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３５】
前記単鎖タンパク質がＧタンパク質共役受容体である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３６】
前記Ｇタンパク質共役受容体が味覚受容体である、請求項１３５に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３７】
前記味覚受容体が苦味受容体、甘味受容体、塩味受容体およびうま味受容体からなる群より選択される、請求項１３６に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３８】
前記タンパク質が多量体タンパク質である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１３９】
前記タンパク質がヘテロ二量体またはヘテロ多量体である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４０】
前記タンパク質が、イオンチャネル、イオンチャネル、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）、チロシン受容体キナーゼ、サイトカイン受容体、核ステロイドホルモン受容体および免疫学的受容体からなる群より選択される、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４１】
前記タンパク質が上皮ナトリウムチャネル（ＥＮａＣ）である、請求項１４０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４２】
前記ＥＮａＣがαサブユニット、βサブユニットおよびγサブユニットを含む、請求項１４０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４３】
前記パネル中の細胞系が異なるＥＮａＣアイソフォームを発現する、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４４】
前記パネル中の細胞系がＥＮａＣの異なるタンパク質分解アイソフォームを含む、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４５】
前記ＥＮａＣがヒトＥＮａＣである、請求項１４１から１４３のいずれか一項に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４６】
前記タンパク質が電位依存性ナトリウムチャネル（ＮａＶ）である、請求項１４０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４７】
前記ＮａＶが１つのαサブユニットおよび２つのβサブユニットを含む、請求項１４６に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４８】
前記ＮａＶがヒトＮａＶである、請求項１４０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１４９】
前記タンパク質がγ−アミノ酪酸Ａ受容体（ＧＡＢＡＡ受容体）、γ−アミノ酪酸Ｂ受容体（ＧＡＢＡＢ受容体）およびγ−アミノ酪酸Ｃ受容体（ＧＡＢＡＣ受容体）からなる群より選択される、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１５０】
前記タンパク質がＧＡＢＡＡ受容体である、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１５１】
前記ＧＡＢＡＡ受容体が２つのαサブユニット、２つのβサブユニットおよび１つのγまたはδサブユニットを含む、請求項１５０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１５２】
前記パネル中のクローン細胞系が同時に、または互いに４週間を超えない内に作製された、請求項１１０に記載のクローン細胞系の適合パネル。
【請求項１５３】
対象とする単量体タンパク質をコードする導入核酸から該対象とする単量体タンパク質を発現する細胞であって、該細胞は、生物学的に活性な形もしくは生物学的に活性になることができる形で該対象とするタンパク質を産生することを特徴とし、該細胞は選択圧の不在下で培養され、かつ該タンパク質の発現が３ヶ月にわたって３０％を超えて変化しない、細胞。
【請求項１５４】
前記タンパク質の発現が６ヶ月にわたって３０％を超えて変化しない、請求項１５３に記載の細胞。
【請求項１５５】
前記対象とするタンパク質が公知のリガンドを有さない、請求項１５３または１５４に記載の細胞。
【請求項１５６】
対象とするタンパク質のモジュレーターを同定するための方法であって、該細胞は：
ａ）請求項１から７４のいずれか一項に記載の細胞を試験化合物と接触させるステップと、
ｂ）該試験化合物と接触させなかった細胞における該タンパク質の活性と比較した、該試験化合物と接触させた細胞における該対象とするタンパク質の活性の変化を検出するステップと
を含み、不在下と比較して存在下で活性の差を生じる化合物が該対象とするタンパク質のモジュレーターである、方法。
【請求項１５７】
請求項１５６に記載の方法によって同定されたモジュレーター。
【請求項１５８】
請求項１５６に記載の方法によって同定されたモジュレーター。
【請求項１５９】
前記対象とするＲＮＡがｓｉＲＮＡまたはアンチセンスＲＮＡである、請求項６３に記載の細胞。
【請求項１６０】
対象とする少なくとも１つのタンパク質を発現する細胞であって、該対象とするタンパク質が公知のリガンドを有さないか、または該対象とするタンパク質の機能的発現を検出する公知のアッセイが存在せず、かつ該対象とするタンパク質がタンパク質タグを含まない細胞。
【請求項１６１】
前記対象とするタンパク質が少なくとも２、３、４、５、または６つのサブユニットを含む、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６２】
前記対象とするタンパク質が
【化９】
からなる群より選択される表３に示すヒト遺伝子記号によって特定されるオーファン受容体である、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６３】
前記対象とするタンパク質の少なくとも１つのサブユニットが遺伝子活性化によって発現される、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６４】
前記対象とするタンパク質の少なくとも１つのサブユニットが導入核酸から発現される、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６５】
前記対象とするタンパク質が公知のリガンドを有さない、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６６】
前記対象とするタンパク質が公知の機能を有さない、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６７】
前記対象とするタンパク質が公知のリガンドを有さず、公知の機能も有さない、請求項１５９に記載の細胞。
【請求項１６８】
前記タンパク質の発現が３ヶ月にわたって５％を超えて変化しない、請求項１５３に記載の細胞。
【請求項１６９】
細胞系を生成するための方法であって、同一培養条件下で複数の並行培養物中の複数の細胞系を培養するステップ、および時間をわたって一貫した状態のままである少なくとも１つの特徴を有する細胞系を同定するステップを含む、方法。
【請求項１７０】
前記複数の並行培養物が少なくとも５０個の細胞培養物を含む、請求項１６８に記載の方法。
【請求項１７１】
前記複数の並行培養物が少なくとも１００個の細胞培養物を含む、請求項１６８に記載の方法。
【請求項１７２】
前記複数の並行培養物が少なくとも２００個の細胞培養物を含む、請求項１６８に記載の方法。
【公表番号】特表２０１１−５１０６６４（Ｐ２０１１−５１０６６４Ａ）
【公表日】平成２３年４月７日（２０１１．４．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５４５２６３（Ｐ２０１０−５４５２６３）
【出願日】平成２１年２月２日（２００９．２．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３２９００
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１０２５６９
【国際公開日】平成２１年８月２０日（２００９．８．２０）
【出願人】（３１００２５００７）クロモセル コーポレイション (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年４月７日（２０１１．４．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年２月２日（２００９．２．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３２９００
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１０２５６９
【国際公開日】平成２１年８月２０日（２００９．８．２０）
【出願人】（３１００２５００７）クロモセル コーポレイション (1)
【Ｆターム（参考）】
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