組換えエラスターゼタンパク質ならびにその製造方法および使用
本発明は、生物学的に活性な組換えエラスターゼタンパク質の製造、精製、製剤化、および使用のための方法に関する。前記エラスターゼタンパク質を含む医薬組成物と同様に、治療的に有用なエラスターゼを作製する組換え法が説明される。新規の組換えエラスターゼタンパク質およびタンパク質調製物もまた開示される。本発明のエラスターゼタンパク質を含有する医薬組成物を用いて生体導管疾患を治療および予防する方法が説明される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）エラスターゼ認識配列を含むエラスターゼ活性化配列が（ｉｉ）成熟エラスターゼのアミノ酸配列に作動的に連結されているタンパク質。
【請求項２】
エラスターゼ認識配列が配列番号１１を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項３】
エラスターゼ認識配列が配列番号１２を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項４】
エラスターゼ認識配列が配列番号１３を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項５】
エラスターゼ認識配列が配列番号９３を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項６】
エラスターゼ認識配列が配列番号１４、配列番号１５、配列番号１８、配列番号２０、または配列番号２１のいずれか１つを含む、請求項１、請求項２、または請求項４のいずれかに記載のタンパク質。
【請求項７】
活性化配列が配列番号８０を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項８】
活性化配列が配列番号２３、配列番号７２、または配列番号７３のいずれか１つを含む、請求項１または請求項７に記載のタンパク質。
【請求項９】
配列番号７４を含む切断ドメインを含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項１０】
切断ドメインが配列番号４２、配列番号４３、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、および配列番号５５のいずれか１つを含む、請求項１または請求項９に記載のタンパク質。
【請求項１１】
配列番号６４を含む、請求項１から５および７のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１２】
配列番号６９を含む、請求項１から５および７のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１３】
配列番号７４の切断ドメインを含むＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１４】
切断ドメインが配列番号４２、配列番号４３、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、または配列番号５５のいずれか１つを含む、請求項１３に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１５】
成熟エラスターゼ配列が、配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列と少なくとも８５％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１６】
配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１７】
配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列と少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１８】
成熟エラスターゼが、配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列に対して、最大１０カ所の保存的アミノ酸変化を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１９】
配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列に対して、最大７カ所の保存的アミノ酸変化を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２０】
配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列に対して、最大５カ所の保存的アミノ酸変化を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２１】
配列番号７４中の「Ｘａａ１」によって示されるアミノ酸残基がグルタミン酸またはヒスチジンである、請求項１３から２０のいずれか一項に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２２】
配列番号７４中の「Ｘａａ４」によって示されるアミノ酸残基がプロリンである、請求項１３から２１のいずれか一項に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２３】
配列番号７４中の「Ｘａａ５」によって示されるアミノ酸残基がアラニンである、請求項１３から２２のいずれか一項に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２４】
配列番号７４中の「Ｘａａ１」によって示されるアミノ酸残基がヒスチジンであり、配列番号７４中の「Ｘａａ４」によって示されるアミノ酸残基がプロリンであり、配列番号７４中の「Ｘａａ５」によって示されるアミノ酸残基がアラニンである、請求項１３から２３のいずれか一項に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２５】
配列番号１０３のアミノ酸配列を含む、請求項１３から２４のいずれか一項に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２６】
配列番号６４のアミノ酸配列を含む、請求項２５に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２７】
配列番号６９のアミノ酸配列を含む、請求項２５に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２８】
単離された、請求項１から２７のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項２９】
シグナル配列を含む、請求項１から２７のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項３０】
（ｉ）シグナル配列と、（ｉｉ）エラスターゼ認識配列を含むエラスターゼ活性化配列と、（ｉｉｉ）成熟エラスターゼのアミノ酸配列とを含むタンパク質。
【請求項３１】
シグナル配列がメタノール資化酵母（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）において作動的である、請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項３２】
シグナル配列が酵母α因子シグナルペプチドである、請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項３３】
酵母α因子シグナルペプチドが配列番号３４のアミノ酸配列を含む、請求項３２に記載のタンパク質。
【請求項３４】
シグナル配列が哺乳動物の分泌シグナル配列である、請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項３５】
哺乳動物の分泌シグナル配列がブタＩ型エラスターゼシグナル配列である、請求項３４に記載のタンパク質。
【請求項３６】
哺乳動物の分泌シグナル配列がヒトＩ型エラスターゼシグナル配列である、請求項３４に記載のタンパク質。
【請求項３７】
エラスターゼ認識配列がヒトＩ型エラスターゼ認識配列である、請求項１または請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項３８】
成熟エラスターゼがヒトＩ型エラスターゼである、請求項１または請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項３９】
成熟エラスターゼがブタＩ型エラスターゼである、請求項１または請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項４０】
請求項１から３９のいずれか一項に記載のタンパク質をコードする核酸。
【請求項４１】
（ｉ）エラスターゼ認識配列を含む活性化配列が（ｉｉ）エラスターゼのアミノ酸配列に作動的に連結されているタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
【請求項４２】
タンパク質が、前記活性化配列に作動的に連結されたシグナル配列をさらに含む、請求項４１に記載の核酸分子。
【請求項４３】
シグナル配列がメタノール資化酵母において作動的である、請求項４１または請求項４２に記載の核酸分子。
【請求項４４】
エラスターゼ認識配列がＩ型エラスターゼ認識配列である、請求項４１から４３のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４５】
エラスターゼ認識配列がＩ型ヒトエラスターゼ認識配列である、請求項４１から４４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４６】
エラスターゼ認識配列が配列番号１１を含む、請求項４１から４５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４７】
エラスターゼ認識配列が配列番号１２を含む、請求項４１から４５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４８】
エラスターゼ認識配列が配列番号１３を含む、請求項４１から４５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４９】
エラスターゼ認識配列が配列番号９３を含む、請求項４１から４５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５０】
エラスターゼ認識配列が配列番号１４、配列番号１５、配列番号１８、配列番号２０、または配列番号２１のいずれか１つを含む、請求項４１から４６および４８のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５１】
活性化配列が配列番号８０を含む、請求項４１から５０のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５２】
活性化配列が配列番号２３、配列番号７２、または配列番号７３を含む、請求項４１から４５および５１のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５３】
タンパク質が、配列番号７４を含む切断ドメインを含む、請求項４１から４６のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５４】
切断ドメインが配列番号４２、配列番号４３、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、および配列番号５５のいずれか１つを含む、請求項４１から４６および５３のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５５】
エラスターゼが成熟ヒトＩ型エラスターゼである、請求項４１から５４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５６】
エラスターゼが成熟ブタＩ型エラスターゼである、請求項４１から５４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５７】
エラスターゼが配列番号５、配列番号８４、配列番号８７、および配列番号３９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項４１から５４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５８】
エラスターゼが配列番号１または配列番号４のアミノ酸配列を含む、請求項５７に記載の核酸分子。
【請求項５９】
シグナル配列が酵母α因子シグナルペプチドである、請求項４２から５８のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項６０】
タンパク質が配列番号３４、配列番号５０、配列番号５１、配列番号９６、および配列番号９７のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項５９に記載の核酸分子。
【請求項６１】
シグナル配列が哺乳動物の分泌シグナル配列である、請求項４２および４４から５８のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項６２】
哺乳動物の分泌シグナル配列がブタＩ型エラスターゼシグナル配列である、請求項６１に記載の核酸分子。
【請求項６３】
哺乳動物の分泌シグナル配列がヒトＩ型エラスターゼシグナル配列である、請求項６１に記載の核酸分子。
【請求項６４】
タンパク質が、配列番号８８から９１および９８から１０３のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項４１から６３のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項６５】
タンパク質が、配列番号６から９および６４から６９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項６４に記載の核酸分子。
【請求項６６】
タンパク質が、表２に記載されるエラスターゼ多型の組合せのいずれかを含む、請求項６４に記載の核酸分子。
【請求項６７】
タンパク質が、表３に記載されるエラスターゼ多型の組合せのいずれかを含む、請求項６４に記載の核酸分子。
【請求項６８】
請求項４１から６７のいずれか一項に記載の核酸分子によりコードされるタンパク質。
【請求項６９】
単離された、請求項６８に記載のタンパク質。
【請求項７０】
請求項４１から６７のいずれか一項に記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項７１】
前記タンパク質をコードするヌクレオチド配列に作動的に連結された、遺伝子発現を制御するヌクレオチド配列をさらに含む、請求項７０に記載のベクター。
【請求項７２】
前記タンパク質をコードするヌクレオチド配列が多量体化される、請求項７０または請求項７１に記載のベクター。
【請求項７３】
請求項７０から７２のいずれか一項に記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項７４】
前記ベクターの少なくとも１コピーが宿主細胞ゲノム内に組み込まれる、請求項７３に記載の宿主細胞。
【請求項７５】
前記ベクターの１コピーが宿主細胞ゲノム内に組み込まれる、請求項７４に記載の宿主細胞。
【請求項７６】
前記ベクターの２〜５コピーが宿主細胞ゲノム内に組み込まれる、請求項７４に記載の宿主細胞。
【請求項７７】
前記ベクターの２コピーが宿主細胞ゲノム内に組み込まれる、請求項７４または７６に記載の宿主細胞。
【請求項７８】
前記ベクターの３コピーが宿主細胞ゲノム内に組み込まれる、請求項７４または７６に記載の宿主細胞。
【請求項７９】
請求項４１から６７のいずれか一項に記載の核酸分子の少なくとも１コピーがそのゲノム内に組み込まれる宿主細胞。
【請求項８０】
前記核酸分子の１コピーがそのゲノム内に組み込まれる、請求項７９に記載の宿主細胞。
【請求項８１】
前記核酸分子の２〜５コピーがそのゲノム内に組み込まれる、請求項７９に記載の宿主細胞。
【請求項８２】
前記核酸分子の２コピーがそのゲノム内に組み込まれる、請求項７９に記載の宿主細胞。
【請求項８３】
前記核酸分子の３コピーがそのゲノム内に組み込まれる、請求項７９に記載の宿主細胞。
【請求項８４】
請求項４１から６７のいずれか一項に記載の核酸分子を発現するように遺伝子改変された細胞。
【請求項８５】
前記ヌクレオチド配列がメタノール誘導性プロモーターに作動的に連結されている、請求項８４に記載の細胞。
【請求項８６】
請求項４１から６７のいずれか一項に記載のヌクレオチド配列を発現するように遺伝子改変されたメタノール資化酵母細胞。
【請求項８７】
前記ヌクレオチド配列がメタノール誘導性プロモーターに作動的に連結されている、請求項８７に記載のメタノール資化酵母細胞。
【請求項８８】
請求項１から２７または請求項６８のいずれか一項に記載のタンパク質を含む細胞培養物上清。
【請求項８９】
請求項８４に記載の宿主細胞をタンパク質が生成される条件下で培養するステップを含む、エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項９０】
請求項８５に記載の宿主細胞をタンパク質が生成される条件下で培養するステップを含む、エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項９１】
請求項８６に記載の宿主細胞をタンパク質が生成される条件下で培養するステップを含む、エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項９２】
請求項８７に記載の宿主細胞をタンパク質が生成される条件下で培養するステップを含む、エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項９３】
前記条件が、ｐＨ２〜６での増殖時間または誘導時間を含む、請求項９１または請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
前記条件が、２２℃〜２８℃の温度での増殖時間または誘導時間を含む、請求項９１または請求項９２に記載の方法。
【請求項９５】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項８９から９２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９６】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
宿主細胞がクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養される、請求項８９から９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項９７または請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項９７または請求項９８に記載の方法。
【請求項１０１】
タンパク質を回収するステップをさらに含む、請求項８９から１００のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０２】
タンパク質が、上清を回収することによって回収される、請求項９５に記載の方法。
【請求項１０３】
タンパク質が上清から回収される、請求項９５に記載の方法。
【請求項１０４】
回収されたタンパク質がシグナル配列を欠く、請求項９５から１０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０５】
回収されたタンパク質がシグナル配列および活性化配列を欠く、請求項９５から１０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０６】
タンパク質を含有する溶液のｐＨをｐＨ６〜１２まで上昇させるステップをさらに含む、請求項８９から９２および９３から１０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０７】
タンパク質を触媒量のエラスターゼと接触させるステップをさらに含む、請求項８９から９２および９３から１０６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０８】
タンパク質を自己活性化条件下に置くステップ、タンパク質を触媒量のエラスターゼと接触させるステップ、またはこれらの両方のステップをさらに含む、請求項８９から９２および９３から１０６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０９】
タンパク質が自己活性化条件下に置かれる、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
自己活性化条件下に置かれるとき、タンパク質が上清中にある、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
エラスターゼタンパク質を作製する方法であって、
（ａ）組換えプロエラスターゼタンパク質の発現が可能な宿主細胞を、第１のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養するステップと、
（ｂ）前記宿主細胞の培養物から組換えプロエラスターゼタンパク質を回収するステップと、
（ｃ）場合によって、前記組換えプロエラスターゼタンパク質を活性化条件に曝露して、成熟エラスターゼタンパク質を作製するステップと
を含み、これらによりエラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項１１２】
組換えプロエラスターゼタンパク質を活性化条件に曝露して、成熟エラスターゼタンパク質を作製するステップを含む、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
活性化条件への前記曝露前に組換えプロエラスターゼタンパク質が精製される、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
精製されたプロエラスターゼタンパク質と、第２のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物とを含む溶液が生成されるように、前記組換えプロエラスターゼタンパク質が、第２のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で精製される、請求項１１３に記載の方法。
【請求項１１５】
前記第１のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項１１１から１１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１６】
前記第２のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項１１４または請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
前記第１および第２のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が同じである、請求項１１４から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１８】
前記第１および第２のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が異なる、請求項１１４から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１９】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項１１４から１１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２０】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記培養物中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項１１４から１１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２１】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記溶液中に存在する、請求項１１１から１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２２】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記溶液中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項１１１から１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２３】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項１１１から１２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２４】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２５】
プロエラスターゼタンパク質が、前記宿主細胞の上清から回収される、請求項１１１から１２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２６】
前記活性化条件がトリプシンへの曝露を含む、請求項１１１から１２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２７】
前記活性化条件が自己活性化条件である、請求項１１１から１２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２８】
前記成熟エラスターゼタンパク質を単離するステップをさらに含む、請求項１１１から１２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２９】
成熟エラスターゼタンパク質が成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質である、請求項１１１から１２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３０】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１２９に記載の方法。
【請求項１３１】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１２９に記載の方法。
【請求項１３２】
成熟エラスターゼタンパク質を作製する方法であって、
（ａ）プロエラスターゼタンパク質を凍結乾燥させるステップと、
（ｂ）凍結乾燥したプロエラスターゼタンパク質を保存するステップと、
（ｃ）凍結乾燥したプロエラスターゼタンパク質を再溶解するステップと、
（ｄ）再溶解されたプロエラスターゼタンパク質を活性化するステップと
を含み、これらにより成熟エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項１３３】
プロエラスターゼタンパク質が組換え体である、請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３４】
（ｉ）プロエラスターゼタンパク質を発現させることが可能な宿主細胞をプロエラスターゼタンパク質が発現する条件下で培養するステップと、（ｉｉ）プロエラスターゼタンパク質を回収するステップとを含む工程により、プロエラスターゼタンパク質が作製されるかまたは得ることができる、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項１３４に記載の方法。
【請求項１３６】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項１３５に記載の方法。
【請求項１３７】
宿主細胞が、クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養される、請求項１３２から１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３８】
クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項１３７に記載の方法。
【請求項１３９】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項１３７または請求項１３８に記載の方法。
【請求項１４０】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項１３７または請求項１３８に記載の方法。
【請求項１４１】
プロエラスターゼタンパク質が、前記宿主細胞の上清から回収される、請求項１３２から１４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４２】
プロエラスターゼタンパク質が、凍結乾燥前に精製される、請求項１３２から１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４３】
凍結乾燥したプロエラスターゼタンパク質が、少なくとも１日間、少なくとも１週間、少なくとも１カ月間、または少なくとも３カ月間にわたり保存される、請求項１３２から１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４４】
プロエラスターゼタンパク質が−８０℃〜＋４℃の温度で保存される、請求項１３２から１４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４５】
前記活性化するステップがトリプシン活性化を含む、請求項１３２から１４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４６】
前記活性化するステップが自己活性化を含む、請求項１３２から１４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４７】
前記成熟エラスターゼタンパク質を単離するステップをさらに含む、請求項１３２から１４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４８】
成熟エラスターゼタンパク質が成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質である、請求項１３２から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４９】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１４８に記載の方法。
【請求項１５０】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１４８に記載の方法。
【請求項１５１】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を作製する方法であって、組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を自己活性化条件下に置くステップ、組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を触媒量のエラスターゼと接触させるステップ、またはこれらの両方のステップを含み、これらにより成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項１５２】
（ａ）請求項８４または８６に記載の宿主細胞を前記タンパク質が発現する条件下で培養するステップと、
（ｂ）発現したタンパク質を回収するステップと
を含み、これらにより組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を作製する工程により、前記組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼタンパク質が得られるかまたは得ることができる、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１５３】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項１５２に記載の方法。
【請求項１５４】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項１５３に記載の方法。
【請求項１５５】
宿主細胞が、クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養される、請求項１５２から１５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５６】
クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項１５５に記載の方法。
【請求項１５７】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項１５５または請求項１５６に記載の方法。
【請求項１５８】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項１５５または請求項１５６に記載の方法。
【請求項１５９】
発現したタンパク質を回収するステップが、上清を回収することを含む、請求項１５２から１５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６０】
前記自己活性化ステップが上清中において実施される、請求項１５９に記載の方法。
【請求項１６１】
発現したタンパク質が上清から回収される、請求項１５２から１５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６２】
前記自己活性化ステップが上清中において実施される、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６３】
発現したタンパク質を精製するステップをさらに含む、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６４】
組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を自己活性化条件下に置くステップが、回収されたタンパク質を含有する溶液のｐＨを上昇させることを含む、請求項１５１から１６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６５】
溶液のｐＨを塩基性ｐＨまで上昇させる、請求項１６４に記載の方法。
【請求項１６６】
塩基性ｐＨが７〜９の範囲内にある、請求項１６５に記載の方法。
【請求項１６７】
塩基性ｐＨが８である、請求項１６６に記載の方法。
【請求項１６８】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において１０ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６９】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７０】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において２ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７１】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において１ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７２】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において０．５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７３】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において０．２５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７４】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において少なくとも０．１ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１６５から１７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７５】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において少なくとも０．２ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１６５から１７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７６】
回収されたタンパク質が、０．５〜８時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項１６５から１７５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７７】
回収されたタンパク質が、２〜７時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項１７４に記載の方法。
【請求項１７８】
回収されたタンパク質が、６時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項１７７に記載の方法。
【請求項１７９】
前記塩基性ｐＨへの曝露が２２℃〜２８℃の温度で実施される、請求項１６５から１７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８０】
前記塩基性ｐＨへの曝露が２６℃の温度で実施される、請求項１７９に記載の方法。
【請求項１８１】
回収されたタンパク質が自己活性化前に保存される、請求項１５２から１８０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８２】
回収されたタンパク質が保存前に乾燥凍結される、請求項１８１に記載の方法。
【請求項１８３】
回収されたタンパク質が乾燥凍結前に精製される、請求項１８２に記載の方法。
【請求項１８４】
回収されたタンパク質が、少なくとも１日間、少なくとも１週間、少なくとも１カ月間、または少なくとも３カ月間にわたり保存される、請求項１８１から１８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８５】
回収されたタンパク質が８０℃〜＋４℃の温度で保存される、請求項１８４に記載の方法。
【請求項１８６】
組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼが、自己活性化条件下に置かれる前に精製される、請求項１５０から１８５のいずれか一項に記載の方法（ただし、これらの請求項が請求項１６０または１６２に従属しない場合に限る）。
【請求項１８７】
前記成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を単離するステップをさらに含む、請求項１５０から１８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８８】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１５０から１８７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８９】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１５０から１８７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９０】
成熟Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を作製する方法であって、
（ａ）請求項８４または８６に記載の宿主細胞を前記タンパク質が発現する条件下で培養するステップと、
（ｂ）発現したタンパク質を回収するステップと、
（ｃ）回収されたタンパク質を精製するステップと、
（ｄ）前記タンパク質を含有する溶液のｐＨを上昇させるか、または回収されたタンパク質を触媒量のエラスターゼと接触させて、成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を作製するステップと
を含み、これらにより成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項１９１】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項１９０に記載の方法。
【請求項１９２】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９３】
宿主細胞が、クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養される、請求項１９０から１９２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９４】
クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項１９３に記載の方法。
【請求項１９５】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項１９３または請求項１９４に記載の方法。
【請求項１９６】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項１９３または請求項１９４に記載の方法。
【請求項１９７】
（ｅ）前記成熟Ｉ型エラスターゼを精製するステップをさらに含む、請求項１９０から１９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９８】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１９０から１９７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９９】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１９０から１９７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２００】
成熟Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を作製する方法であって、
（ａ）請求項８４または８６に記載の宿主細胞を前記タンパク質が発現する条件下で培養するステップと、
（ｂ）発現したタンパク質を回収するステップと、
（ｃ）成熟タンパク質が生成されるまで、回収されたタンパク質を塩基性ｐＨに曝露するステップと
を含み、これらにより成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項２０１】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項２００に記載の方法。
【請求項２０２】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項２０１に記載の方法。
【請求項２０３】
宿主細胞が、クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養される、請求項２００から２０２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０４】
クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２０５】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項２０３または請求項２０４に記載の方法。
【請求項２０６】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項２０３または請求項２０４に記載の方法。
【請求項２０７】
塩基性ｐＨが７〜９である、請求項２００から２０６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０８】
塩基性ｐＨが８である、請求項２０７に記載の方法。
【請求項２０９】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに１０ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１０】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１１】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに２ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１２】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに１ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１３】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに０．５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１４】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに０．２５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１５】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに少なくとも０．１ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項２０９から２１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１６】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに少なくとも０．２ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項２０９から２１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１７】
回収されたタンパク質が、０．５〜８時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項２００から２１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１８】
回収されたタンパク質が、２〜７時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項２１７に記載の方法。
【請求項２１９】
回収されたタンパク質が、６時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項２１８に記載の方法。
【請求項２２０】
前記塩基性ｐＨへの曝露が２２℃〜２８℃の温度で実施される、請求項２００から２１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２１】
前記塩基性ｐＨへの曝露が２６℃の温度で実施される、請求項２２０に記載の方法。
【請求項２２２】
（ｄ）前記成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を単離するステップをさらに含む、請求項２００から２２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２３】
成熟Ｉ型エラスターゼが成熟ブタＩ型エラスターゼである、請求項１５０から２２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２４】
成熟Ｉ型エラスターゼが成熟ヒトＩ型エラスターゼである、請求項１５０から２２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２５】
成熟エラスターゼタンパク質の製剤を作製する方法であって、
（ａ）活性化プロエラスターゼタンパク質を自己活性化条件下に置いて成熟エラスターゼタンパク質を作製するステップと、
（ｂ）成熟エラスターゼタンパク質を製剤化するステップと
を含み、これらにより成熟エラスターゼタンパク質の製剤を作製する方法。
【請求項２２６】
自己活性化プロエラスターゼタンパク質が組換え体である、請求項２２５に記載の方法。
【請求項２２７】
ステップ（ａ）の前に、プロエラスターゼタンパク質が発現する条件下で増殖した前記自己活性化プロエラスターゼタンパク質を発現させることが可能な宿主細胞の培養物からプロエラスターゼタンパク質を回収するステップをさらに含む、請求項２２６に記載の方法。
【請求項２２８】
ステップ（ｂ）の前に、前記成熟エラスターゼタンパク質を精製するステップをさらに含む、請求項２２５または請求項２２６に記載の方法。
【請求項２２９】
前記製剤化するステップが、前記成熟エラスターゼタンパク質を凍結乾燥させることを含む、請求項２２５から２２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３０】
凍結乾燥前に、成熟エラスターゼタンパク質が緩衝液または緩衝成分と混合されない、請求項２２９に記載の方法。
【請求項２３１】
凍結乾燥後に、成熟エラスターゼタンパク質が１種または複数種の緩衝成分と混合される、請求項２３０に記載の方法。
【請求項２３２】
凍結乾燥前に、成熟エラスターゼタンパク質が緩衝液または１種もしくは複数種の緩衝成分と混合される、請求項２２９に記載の方法。
【請求項２３３】
緩衝液がリン酸緩衝生理食塩水（「ＰＢＳ」）バッファーであるか、または緩衝成分がＰＢＳ緩衝成分である、請求項２３１または２３２に記載の方法。
【請求項２３４】
緩衝液がデキストランを含むか、または緩衝成分がデキストランを含む、請求項２３１から２３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３５】
デキストランがデキストラン−１８である、請求項２３４に記載の方法。
【請求項２３６】
緩衝液がポリソルベート８０を含む、請求項２３０から２３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３７】
前記製剤化するステップが、凍結乾燥した成熟エラスターゼタンパク質を液体で再溶解することをさらに含む、請求項２２９から２３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３８】
液体が水である、請求項２３７に記載の方法。
【請求項２３９】
液体が緩衝液である、請求項２３７に記載の方法。
【請求項２４０】
緩衝液が、希釈されない緩衝液であるか、濃縮緩衝液であるか、または希釈緩衝液である、請求項２３９に記載の方法。
【請求項２４１】
再溶解時において、成熟エラスターゼタンパク質溶液が、希釈されない緩衝液、濃縮緩衝液、または希釈緩衝液中において生成される、請求項２３７から２４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４２】
緩衝成分が凍結乾燥物中に存在するか、再溶解時に添加されるか、またはその両方である、請求項２４１に記載の方法。
【請求項２４３】
希釈されない緩衝液が１×ＰＢＳを含む、請求項２４０から２４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４４】
希釈緩衝液が０．１×ＰＢＳ〜０．５×ＰＢＳを含む、請求項２４０または請求項２４１に記載の方法。
【請求項２４５】
希釈緩衝液が０．１×ＰＢＳを含む、請求項２４４に記載の方法。
【請求項２４６】
希釈緩衝液が０．５×ＰＢＳを含む、請求項２４４に記載の方法。
【請求項２４７】
濃縮緩衝液が１．１×ＰＢＳ〜３×ＰＢＳを含む、請求項２４０または請求項２４１に記載の方法。
【請求項２４８】
濃縮緩衝液が１．５×ＰＢＳ〜２×ＰＢＳを含む、請求項２４７に記載の方法。
【請求項２４９】
緩衝液がデキストランを含む、請求項２４１から２４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５０】
デキストランがデキストラン１８である、請求項２４９に記載の方法。
【請求項２５１】
緩衝液がポリソルベート８０を含む、請求項２４１から２５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５２】
緩衝液がｐＨ７〜８である、請求項２４１から２５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５３】
緩衝液がｐＨ７．４である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２５４】
成熟エラスターゼタンパク質が０．００１ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で再溶解される、請求項２３７から２５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５５】
成熟エラスターゼタンパク質が０．１ｍｇ／ｍｌ〜４０ｍｇ／ｍｌの濃度で再溶解される、請求項２５４に記載の方法。
【請求項２５６】
成熟エラスターゼタンパク質が５ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌの濃度で再溶解される、請求項２５５に記載の方法。
【請求項２５７】
成熟エラスターゼタンパク質が１０ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で再溶解される、請求項２５６に記載の方法。
【請求項２５８】
前記製剤が、前記成熟エラスターゼタンパク質を含む医薬組成物である、請求項２２５から２５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５９】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項２２５から２５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６０】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項２２５から２５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６１】
凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼを作製する方法であって、
（ａ）請求項１５１から１８１のいずれか一項に記載の方法に従って成熟Ｉ型エラスターゼを作製するステップと、
（ｂ）成熟Ｉ型エラスターゼを単離するステップと、
（ｃ）前記単離された成熟Ｉ型エラスターゼを凍結乾燥させるステップと
を含み、これらにより凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼを作製する方法。
【請求項２６２】
凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼが９５％〜１００％の純度にある、請求項２６１に記載の方法。
【請求項２６３】
凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼが少なくとも９５％の純度にある、請求項２６１または請求項２６２に記載の方法。
【請求項２６４】
凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼが少なくとも９８％の純度にある、請求項２６１または請求項２６２に記載の方法。
【請求項２６５】
凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼが均一になるまで精製される、請求項２６１から２６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６６】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項２６１から２６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６７】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項２６１から２６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６８】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号５、配列番号８４、または配列番号８７から本質的になる、請求項１３０、１４９、１８８、１９８、２２３、２５９、および２６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６９】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号１または配列番号４から本質的になる、請求項２６８に記載の方法。
【請求項２７０】
成熟ブタＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号３９から本質的になる、請求項１３１、１５０、１８９、１９９、２２４、２６０、および２６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７１】
プロエラスターゼタンパク質が、請求項１３から２７のいずれか一項に記載のタンパク質である、請求項１１１から１２８、１３２から１４８、１５１から１９７、および２２５から２５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７２】
発現されるタンパク質が請求項１３から２７のいずれか一項に記載のタンパク質である、請求項２００から請求項２２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７３】
請求項１４９、１８８、１９８、および２２３のいずれか一項に記載の方法により作製されるかまたは得ることができる成熟ヒトＩ型エラスターゼ。
【請求項２７４】
１〜４０Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を有する、請求項２７３に記載の成熟ヒトＩ型エラスターゼ。
【請求項２７５】
請求項１５０、１８９、１９９、および２２４のいずれか一項に記載の方法により作製されるかまたは得ることができる、成熟ブタＩ型エラスターゼ。
【請求項２７６】
１０〜１００Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を有する、請求項２７５に記載の成熟ヒトＩ型エラスターゼ。
【請求項２７７】
治療有効量の（ａ）請求項２７３もしくは請求項２７４に記載の成熟ヒトＩ型エラスターゼ、または（ｂ）請求項２５９に記載の方法により作製されるかもしくは得ることができる成熟ヒトＩ型エラスターゼの製剤を含む医薬組成物。
【請求項２７８】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号５、配列番号８４、または配列番号８７から本質的になる、請求項２７７に記載の医薬組成物。
【請求項２７９】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号１または配列番号４から本質的になる、請求項２７８に記載の医薬組成物。
【請求項２８０】
治療有効量の（ａ）請求項２７５もしくは請求項２７６に記載の成熟ブタＩ型エラスターゼ、または（ｂ）請求項２６０に記載の方法により作製されるかもしくは得ることができる成熟ブタＩ型エラスターゼの製剤を含む医薬組成物。
【請求項２８１】
成熟ブタＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号３９から本質的になる、請求項２８０に記載の医薬組成物。
【請求項２８２】
（ｉ）治療有効量の成熟ヒトＩ型エラスターゼと、（ｉｉ）薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物であって、以下の特性：
（ａ）組成物がトリプシンを含まないこと、
（ｂ）組成物がトリプシンを実質的に含まないこと、
（ｃ）組成物が配列番号２、３、３７、３８、７０および／または７１からなる任意のタンパク質を含まないこと、
（ｄ）組成物が配列番号２、３、３７、３８、７０および／または７１からなる任意のタンパク質を実質的に含まないこと、
（ｅ）組成物が細菌タンパク質を含まないこと、
（ｆ）組成物が細菌タンパク質を実質的に含まないこと、
（ｇ）組成物が、前記成熟ヒトＩ型エラスターゼ以外の哺乳動物タンパク質を含まないこと、
（ｈ）組成物が、前記成熟ヒトＩ型エラスターゼ以外の哺乳動物タンパク質を実質的に含まないこと
の少なくとも１つを特徴とする医薬組成物。
【請求項２８３】
（ｉ）治療有効量の成熟ヒトＩ型エラスターゼと、（ｉｉ）薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物であって、以下の特性：
（ａ）組成物がトリプシンを含まないこと、
（ｂ）組成物がトリプシンを実質的に含まないこと、
（ｃ）組成物が配列番号７０および７１からなる任意のタンパク質を含まないこと、
（ｄ）組成物が配列番号２および３からなる任意のタンパク質を実質的に含まないこと、
（ｅ）組成物が細菌タンパク質を含まないこと、
（ｆ）組成物が細菌タンパク質を実質的に含まないこと、
（ｇ）組成物が、前記成熟ヒトＩ型エラスターゼ以外の哺乳動物タンパク質を含まないこと、
（ｈ）組成物が、前記成熟ヒトＩ型エラスターゼ以外の哺乳動物タンパク質を実質的に含まないこと
の少なくとも１つを特徴とする医薬組成物。
【請求項２８４】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも２つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２８５】
前記少なくとも２つの特性が（ａ）および（ｃ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２８６】
前記少なくとも２つの特性が（ｂ）および（ｄ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２８７】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも３つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２８８】
前記少なくとも３つの特性が（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２８９】
前記少なくとも３つの特性が（ｂ）、（ｄ）、および（ｆ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２９０】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも４つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２９１】
前記少なくとも４つの特性が（ａ）、（ｃ）、（ｅ）、および（ｇ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２９２】
前記少なくとも４つの特性が（ｂ）、（ｄ）、（ｆ）、および（ｈ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２９３】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも５つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２９４】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも６つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２９５】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも７つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２９６】
特性（ａ）〜（ｈ）のすべてを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２９７】
配列番号８５、８６、９４、および９５からなる１つ、２つ、３つ、または４つすべてのタンパク質を含まないかまたは実質的に含まない、請求項２８２から２９６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２９８】
配列番号８５および配列番号８６からなるタンパク質を含まないかまたは実質的に含まない、請求項２８２から２９７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２９９】
配列番号９４および配列番号９５からなるタンパク質を含まないかまたは実質的に含まない、請求項２８２から２９７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３００】
配列番号１０６、１０７、および１０８からなる１つ、２つ、または３つすべてのタンパク質を含まないかまたは実質的に含まない、請求項２８２から２９７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３０１】
薬学的に許容されるレベルのエンドトキシンを含有する、請求項２８２から３００のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３０２】
前記医薬組成物が液体組成物であり、前記薬学的に許容されるレベルのエンドトキシンが８ＥＵ／ｍｌ以下である、請求項３０１に記載の医薬組成物。
【請求項３０３】
前記薬学的に許容されるレベルのエンドトキシンが５ＥＵ／ｍｌ以下である、請求項３０２に記載の医薬組成物。
【請求項３０４】
前記医薬組成物が固体組成物であり、前記薬学的に許容されるレベルのエンドトキシンが成熟ヒトＩ型エラスターゼ１グラム当たり１０ＥＵ以下である、請求項３０１に記載の医薬組成物。
【請求項３０５】
前記薬学的に許容されるレベルのエンドトキシンが成熟ヒトＩ型エラスターゼ１グラム当たり５ＥＵ以下である、請求項３０４に記載の医薬組成物。
【請求項３０６】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、１〜４０Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を特徴とする、請求項２８２から３０５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３０７】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、２５〜３５Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を特徴とする、請求項３０６に記載の医薬組成物。
【請求項３０８】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、１０Ｕ／タンパク質ｍｇを超える比活性を特徴とする、請求項３０６に記載の医薬組成物。
【請求項３０９】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、２０Ｕ／タンパク質ｍｇを超える比活性を特徴とする、請求項３０６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３１０】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、配列番号５、８４、または８７から本質的になる、請求項２８２から３０９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３１１】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、配列番号１または配列番号４から本質的になる、請求項３１０に記載の医薬組成物。
【請求項３１２】
トリプシン活性が、成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質１ｍｇ当たり４ｎｇ未満に相当する、請求項２８２から３１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３１３】
トリプシン活性が、成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質１ｍｇ当たり２ｎｇ未満に相当する、請求項３１２に記載の医薬組成物。
【請求項３１４】
１ｍｇ／ｍｌの前記タンパク質濃度への再溶解時において、トリプシン活性が２ｎｇ／トリプシンｍｌ未満に相当する、配列番号５、８４、または８７から本質的になるタンパク質の凍結乾燥製剤。
【請求項３１５】
水分含量が５％未満である、請求項３１４に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３１６】
ナトリウムイオン、カリウムイオン、リン酸イオン、および塩化物イオンを含む、請求項３１５に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３１７】
ポリソルベート８０を含む、請求項３１５に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３１８】
デキストランを含む、請求項３１５に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３１９】
デキストランがデキストラン−１８である、請求項３１８に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２０】
ナトリウムイオン、カリウムイオン、リン酸イオン、塩化物イオン、およびポリソルベート８０を含む、請求項３１１に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２１】
ナトリウムイオン、カリウムイオン、リン酸イオン、塩化物イオン、およびデキストランを含む、請求項３１４に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２２】
デキストランがデキストラン−１８である、請求項３２１に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２３】
ナトリウムイオン、カリウムイオン、リン酸イオン、塩化物イオン、ポリソルベート８０、およびデキストランを含む、請求項３１４に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２４】
デキストランがデキストラン−１８である、請求項３２３に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２５】
トリプシン活性が２ｎｇ／トリプシンｍｌ未満に相当する、配列番号５、８４、または８７から本質的になる少なくとも０．１ｍｇ／ｍｌのタンパク質溶液を含む液体製剤。
【請求項３２６】
溶液が緩衝液である、請求項３２５に記載の液体製剤。
【請求項３２７】
溶液がｐＨ７〜８まで緩衝される、請求項３２６に記載の液体製剤。
【請求項３２８】
溶液がＰＢＳである、請求項３２６に記載の液体製剤。
【請求項３２９】
溶液が１３７ｍＭの塩化ナトリウム、２．７ｍＭのリン酸カリウム、および１０ｍＭのリン酸ナトリウムを含む、請求項３２８に記載の液体製剤。
【請求項３３０】
１種または複数種の賦形剤をさらに含む、請求項３２５から３２９のいずれか一項に記載の液体製剤。
【請求項３３１】
前記１種または複数種の賦形剤がデキストラン−１８を含む、請求項３３０に記載の液体製剤。
【請求項３３２】
デキストラン−１８が、前記溶液に対する重量／容量比で８％の量である、請求項３３１に記載の液体製剤。
【請求項３３３】
前記１種または複数種の賦形剤がポリソルベート８０を含む、請求項３３０に記載の液体製剤。
【請求項３３４】
ポリソルベート８０が、前記溶液に対する重量／容量比で０．０１％の量である、請求項３３３に記載の液体製剤。
【請求項３３５】
前記溶液中における前記タンパク質の濃度が０．００１ｍｇ／ｍｌ〜４０ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項３２５から３３４のいずれか一項に記載の液体製剤。
【請求項３３６】
前記溶液中における前記タンパク質の濃度が０．１ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項３３５に記載の液体製剤。
【請求項３３７】
１種または複数種の防腐剤、溶解剤、および着色剤をさらに含む、請求項３２５から３３６のいずれか一項に記載の液体製剤。
【請求項３３８】
配列番号５、８４、または８７の前記タンパク質以外の哺乳動物タンパク質を実質的に含まない、請求項３２５から３３７のいずれか一項に記載の液体製剤。
【請求項３３９】
細菌タンパク質を実質的に含まない、請求項３２５から３３８のいずれか一項に記載の液体製剤。
【請求項３４０】
請求項２２５から２５８のいずれか一項に記載の方法により作製されるかまたは得ることができる製剤。
【請求項３４１】
液体製剤である、請求項３４０に記載の製剤。
【請求項３４２】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項３４０または３４１に記載の製剤。
【請求項３４３】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号５、配列番号８４、または配列番号８７から本質的になる、請求項３４２に記載の製剤。
【請求項３４４】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号１または配列番号４から本質的になる、請求項３４２に記載の製剤。
【請求項３４５】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項３４０または３４１に記載の製剤。
【請求項３４６】
成熟ブタＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号３９から本質的になる、請求項３４５に記載の製剤。
【請求項３４７】
正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質および不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質の混合物から、１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質を除去する方法であって、
（ａ）正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質および不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質の混合物を含む組成物を、正確にプロセシングされた成熟酵素が活性となるｐＨ下に置くステップと、
（ｂ）１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が分解される時間までこのようなｐＨを維持するステップと
を含み、これらにより、正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質および不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質の混合物から、前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質を除去する方法。
【請求項３４８】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が、正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質と比べて、少なくとも１つの付加的アミノ酸またはより少数のアミノ酸をＮ末端において含有する、請求項３４７に記載の方法。
【請求項３４９】
前記ｐＨが５〜１２である、請求項３４７または３４８に記載の方法。
【請求項３５０】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が５０％〜１００％分解される、請求項３４７から３４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５１】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が５０％〜９９％分解される、請求項３４８に記載の方法。
【請求項３５２】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が５０％〜９８％分解される、請求項３４８に記載の方法。
【請求項３５３】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が５０％〜９５％分解される、請求項３４８に記載の方法。
【請求項３５４】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が５０％〜９０％分解される、請求項３４８に記載の方法。
【請求項３５５】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも５０％分解される、請求項３５０から３５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５６】
混合物中におけるすべての不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも５０％分解される、請求項３５５に記載の方法。
【請求項３５７】
少なくとも１種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも７５％分解される、請求項３５０から３５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５８】
複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも７５％分解される、請求項３５７に記載の方法。
【請求項３５９】
混合物中におけるすべての不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも７５％分解される、請求項３５７に記載の方法。
【請求項３６０】
少なくとも１種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも９０％分解される、請求項３５０から３５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６１】
複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも９０％分解される、請求項３６０に記載の方法。
【請求項３６２】
混合物中のすべての不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも９０％分解される、請求項３６０に記載の方法。
【請求項３６３】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が１０ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６４】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６５】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が２ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６６】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が１ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６７】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が０．５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６８】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が０．２５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６９】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が少なくとも０．１ｍｇ／ｍｌの濃度である液体組成物である、請求項３６３から３６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７０】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が少なくとも０．２ｍｇ／ｍｌの濃度である液体組成物である、請求項３６３から３６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７１】
前記組成物中におけるトリプシン活性が、総エラスターゼタンパク質１ｍｇ当たり４ｎｇ／トリプシンｍｌ未満である、請求項３４７から３７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７２】
前記組成物中におけるトリプシン活性が、総エラスターゼタンパク質１ｍｇ当たり２ｎｇ／トリプシンｍｌ未満である、請求項３４７から３７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７３】
組成物が、配列番号１０４からなるタンパク質を含まないかもしくは実質的に含まず、かつ／または配列番号１０５からなるタンパク質を含まないかもしくは実質的に含まない、請求項３４７から３７２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７４】
成熟Ｉ型エラスターゼを含む医薬組成物を作製する方法であって、（ｉ）請求項２６１から２６５のいずれか一項に記載の方法により凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼを作製するステップと、（ｉｉ）水または薬学的に許容される担体中において凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼを再溶解するステップとを含み、これらにより成熟ヒトＩ型エラスターゼを含む医薬組成物を作製する方法。
【請求項３７５】
成熟Ｉ型エラスターゼを含む医薬組成物を作製する方法であって、水または薬学的に許容される担体中において請求項３１４から３２４のいずれか一項に記載の乾燥凍結製剤を再溶解するステップを含み、これにより成熟Ｉ型エラスターゼを含む医薬組成物を作製する方法。
【請求項３７６】
医薬組成物がリン酸を含む、請求項３７４または３７５に記載の方法。
【請求項３７７】
成熟Ｉ型エラスターゼが成熟ヒトＩ型エラスターゼである、請求項３７４から３７６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７８】
１〜４０Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を特徴とする、請求項３７７に記載の方法。
【請求項３７９】
成熟Ｉ型エラスターゼが２５〜３５Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を特徴とする、請求項３７７に記載の方法。
【請求項３８０】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後、４℃で少なくとも１カ月間の保存後、４℃で少なくとも２カ月間の保存後、４℃で少なくとも３カ月間の保存後、または４℃で少なくとも６カ月間の保存後において、その比活性の６０％〜１００％を維持する、請求項３７７から３７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８１】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後、４℃で少なくとも１カ月間の保存後、４℃で少なくとも２カ月間の保存後、４℃で少なくとも３カ月間の保存後、または４℃で少なくとも６カ月間の保存後において、その比活性の６０％〜９８％を維持する、請求項３７７から３７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８２】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後、４℃で少なくとも１カ月間の保存後、４℃で少なくとも２カ月間の保存後、４℃で少なくとも３カ月間の保存後、または４℃で少なくとも６カ月間の保存後において、その比活性の６０％〜９５％を維持する、請求項３７７から３７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８３】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後、４℃で少なくとも１カ月間の保存後、４℃で少なくとも２カ月間の保存後、４℃で少なくとも３カ月間の保存後、または４℃で少なくとも６カ月間の保存後において、その比活性の６０％〜９０％を維持する、請求項３７７から３７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８４】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後、４℃で少なくとも１カ月間の保存後、４℃で少なくとも２カ月間の保存後、４℃で少なくとも３カ月間の保存後、または４℃で少なくとも６カ月間の保存後において、その比活性の６０％〜８０％を維持する、請求項３７７から３７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８５】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後において、その比活性の少なくとも７０％を維持する、請求項３７７から３８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８６】
請求項３７４から３８５のいずれか一項に記載の方法により作製されるかまたは得ることができる医薬組成物。
【請求項３８７】
それを必要とするヒト対象における動脈または静脈の直径を治療的に増大させる方法であって、（ａ）請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の医薬組成物、（ｂ）請求項３２５から３３９のいずれか一項に記載の液体製剤、または（ｃ）請求項３４１に記載の製剤を、前記動脈または静脈の直径を増大させるのに十分な用量で、前記ヒト対象における動脈壁または静脈壁へと局所投与するステップを含む方法。
【請求項３８８】
血管の直径、血管の内腔径、またはこれらの両方が増大する、請求項３８７に記載の方法。
【請求項３８９】
それを必要とするヒト対象における動脈または静脈の血管攣縮を予防または治療する方法であって、（ａ）請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の医薬組成物、（ｂ）請求項３２５から３３９のいずれか一項に記載の液体製剤、または（ｃ）請求項３４１に記載の製剤を、前記動脈または静脈の血管攣縮を予防または治療するのに十分な用量で、前記ヒト対象における動脈壁または静脈壁へと局所投与するステップを含む方法。
【請求項３９０】
そのような治療を必要とするヒト対象における動脈または静脈の閉塞を治療する方法であって、（ａ）請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の医薬組成物、（ｂ）請求項３２５から３３９のいずれか一項に記載の液体製剤、または（ｃ）請求項３４１に記載の製剤を前記ヒト対象における動脈壁または静脈壁へと局所投与するステップを含み、前記投与の結果として前記動脈壁または静脈壁内におけるエラスチンのタンパク質分解をもたらし、前記動脈または静脈の直径を拡張する方法。
【請求項３９１】
そのような治療を必要とするヒト対象における動静脈の血液透析グラフトまたは動静脈瘻へと接合される動脈または静脈を治療する方法であって、（ａ）請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の医薬組成物、（ｂ）請求項３２５から３３９のいずれか一項に記載の液体製剤、または（ｃ）請求項３４１に記載の製剤を前記ヒト対象における動脈壁または静脈壁へと局所投与するステップを含み、前記投与の結果として前記動脈壁または静脈壁内におけるエラスチンのタンパク質分解をもたらし、前記動脈または静脈の直径を拡張する方法。
【請求項３９２】
血液透析において用いられるヒト対象における静脈を治療する方法であって、（ａ）請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の医薬組成物、（ｂ）請求項３２５から３３９のいずれか一項に記載の液体製剤、または（ｃ）請求項３４１に記載の製剤を前記ヒト対象における静脈壁へと局所投与するステップを含み、前記投与の結果として前記静脈壁内におけるエラスチンのタンパク質分解をもたらし、前記静脈の直径を拡張する方法。
【請求項３９３】
動脈壁または静脈壁内に送達装置の一部を挿入し、動脈壁または静脈壁へとエラスターゼを送達するステップをさらに含む、請求項３８７から３９２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９４】
医薬製剤または液体製剤がカテーテルにより投与される、請求項３８７から３９３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９５】
医薬組成物または液体製剤が、動脈壁または静脈壁内へと直接に投与される、請求項３８７から３９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９６】
動脈または静脈が閉塞している、請求項３８７から３９５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９７】
動脈または静脈が狭窄により閉塞している、請求項３９６に記載の方法。
【請求項３９８】
治療前において、閉塞により不十分な量の血液しか流過できない、請求項３９７に記載の方法。
【請求項３９９】
閉塞が狭窄である、請求項３９８に記載の方法。
【請求項４００】
動脈または静脈が内膜過形成により閉塞している、請求項３９９に記載の方法。
【請求項４０１】
医薬組成物または液体製剤が、閉塞した冠動脈または末梢動脈に投与される、請求項３８７から４００のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０２】
動脈または静脈が内膜過形成による閉塞を受けやすい、請求項３８７から３９５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０３】
組成物が静脈壁へと投与される、請求項３８７から４００および４０２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０４】
静脈が、動静脈の血液透析グラフトまたは動静脈瘻へと接合される、請求項４０３に記載の方法。
【請求項４０５】
静脈が血液透析において用いられる、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４０６】
前記静脈を動脈へと直接に接合するか、またはグラフトを介して前記静脈を動脈へと接合するステップをさらに含む、請求項４０５に記載の方法。
【請求項４０７】
組成物が、手術で露出した動脈または静脈の外膜表面へと投与される、請求項３８７から３９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０８】
それぞれ、前記医薬組成物、液体製剤、または製剤中における成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質が、ヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項３８７から４０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０９】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号５、配列番号８４、または配列番号８７から本質的になる、請求項４０８に記載の方法。
【請求項４１０】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号１または配列番号４から本質的になる、請求項４０８に記載の方法。
【請求項４１１】
それぞれ、前記医薬組成物、液体製剤、または製剤中における成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質が、ブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項３８７から４０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１２】
成熟ブタＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号３９から本質的になる、請求項４１１に記載の方法。
【請求項４１３】
０．００３３ｍｇ〜２００ｍｇの（ａ）請求項２７３または２７４に記載の成熟ヒトＩ型エラスターゼ、または（ｂ）請求項２５９に記載の方法により作製されるかもしくは得ることができる成熟ヒトＩ型エラスターゼの製剤を含む単位用量。
【請求項４１４】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号５、配列番号８４、または配列番号８７から本質的になる、請求項４１３に記載の単位用量。
【請求項４１５】
０．００３３ｍｇ〜２００ｍｇの（ａ）請求項２７５または２７６に記載の成熟ブタＩ型エラスターゼ、または（ｂ）請求項２６０に記載の方法により作製されるかもしくは得ることができる成熟ブタＩ型エラスターゼの製剤を含む単位用量。
【請求項４１６】
成熟ブタＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号３９から本質的になる、請求項４１５に記載の単位用量。
【請求項４１７】
０．５ｍｇ〜５０ｍｇの前記成熟Ｉ型エラスターゼを含む、請求項４１３から４１６のいずれか一項に記載の単位用量。
【請求項４１８】
１ｍｇ〜２０ｍｇの前記成熟Ｉ型エラスターゼを含む、請求項４１７に記載の単位用量。
【請求項４１９】
５ｍｇ〜１０ｍｇの前記成熟Ｉ型エラスターゼを含む、請求項４１８に記載の単位用量。
【請求項４２０】
容器、パック、分注器、またはカテーテル内にある、請求項４１３から４１９のいずれか一項に記載の単位用量。
【請求項４２１】
請求項１から３９および６８から６９のいずれか一項に記載のエラスターゼタンパク質または請求項８９から２２４、２６１から２７６、および３４７から３７３のいずれか一項に記載の方法により得られるかもしくは得ることができるエラスターゼタンパク質、請求項４０から６７のいずれか一項に記載の核酸、請求項７０から７２のいずれか一項に記載のベクター、請求項７３から８７のいずれか一項に記載の細胞、請求項８８に記載の細胞培養物上清、請求項３１４から３４６のいずれか一項に記載のエラスターゼ製剤または請求項２６１から２７６のいずれか一項に記載の方法により得られるかもしくは得ることができるエラスターゼ製剤、請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の方法による医薬組成物または請求項３７４から３８５のいずれか一項に記載の方法により得られるかもしくは得ることができる医薬組成物、あるいは請求項４１５から４２０のいずれか一項に記載の単位用量を含むキット。
【請求項４２２】
治療用のキットである、請求項４２１に記載のキット。
【請求項４２３】
容器、パック、分注器、またはカテーテルを含む、請求項４２２に記載のキット。
【請求項４２４】
製造キットである、請求項４２３に記載のキット。
【請求項１】
（ｉ）エラスターゼ認識配列を含むエラスターゼ活性化配列が（ｉｉ）成熟エラスターゼのアミノ酸配列に作動的に連結されているタンパク質。
【請求項２】
エラスターゼ認識配列が配列番号１１を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項３】
エラスターゼ認識配列が配列番号１２を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項４】
エラスターゼ認識配列が配列番号１３を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項５】
エラスターゼ認識配列が配列番号９３を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項６】
エラスターゼ認識配列が配列番号１４、配列番号１５、配列番号１８、配列番号２０、または配列番号２１のいずれか１つを含む、請求項１、請求項２、または請求項４のいずれかに記載のタンパク質。
【請求項７】
活性化配列が配列番号８０を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項８】
活性化配列が配列番号２３、配列番号７２、または配列番号７３のいずれか１つを含む、請求項１または請求項７に記載のタンパク質。
【請求項９】
配列番号７４を含む切断ドメインを含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項１０】
切断ドメインが配列番号４２、配列番号４３、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、および配列番号５５のいずれか１つを含む、請求項１または請求項９に記載のタンパク質。
【請求項１１】
配列番号６４を含む、請求項１から５および７のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１２】
配列番号６９を含む、請求項１から５および７のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１３】
配列番号７４の切断ドメインを含むＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１４】
切断ドメインが配列番号４２、配列番号４３、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、または配列番号５５のいずれか１つを含む、請求項１３に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１５】
成熟エラスターゼ配列が、配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列と少なくとも８５％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１６】
配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列と少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１７】
配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列と少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１８】
成熟エラスターゼが、配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列に対して、最大１０カ所の保存的アミノ酸変化を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項１９】
配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列に対して、最大７カ所の保存的アミノ酸変化を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２０】
配列番号８４または配列番号１の位置６から最後までのアミノ酸配列に対して、最大５カ所の保存的アミノ酸変化を有する配列を含む、請求項１３または請求項１４に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２１】
配列番号７４中の「Ｘａａ１」によって示されるアミノ酸残基がグルタミン酸またはヒスチジンである、請求項１３から２０のいずれか一項に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２２】
配列番号７４中の「Ｘａａ４」によって示されるアミノ酸残基がプロリンである、請求項１３から２１のいずれか一項に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２３】
配列番号７４中の「Ｘａａ５」によって示されるアミノ酸残基がアラニンである、請求項１３から２２のいずれか一項に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２４】
配列番号７４中の「Ｘａａ１」によって示されるアミノ酸残基がヒスチジンであり、配列番号７４中の「Ｘａａ４」によって示されるアミノ酸残基がプロリンであり、配列番号７４中の「Ｘａａ５」によって示されるアミノ酸残基がアラニンである、請求項１３から２３のいずれか一項に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２５】
配列番号１０３のアミノ酸配列を含む、請求項１３から２４のいずれか一項に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２６】
配列番号６４のアミノ酸配列を含む、請求項２５に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２７】
配列番号６９のアミノ酸配列を含む、請求項２５に記載のＩ型プロエラスターゼタンパク質。
【請求項２８】
単離された、請求項１から２７のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項２９】
シグナル配列を含む、請求項１から２７のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項３０】
（ｉ）シグナル配列と、（ｉｉ）エラスターゼ認識配列を含むエラスターゼ活性化配列と、（ｉｉｉ）成熟エラスターゼのアミノ酸配列とを含むタンパク質。
【請求項３１】
シグナル配列がメタノール資化酵母（Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）において作動的である、請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項３２】
シグナル配列が酵母α因子シグナルペプチドである、請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項３３】
酵母α因子シグナルペプチドが配列番号３４のアミノ酸配列を含む、請求項３２に記載のタンパク質。
【請求項３４】
シグナル配列が哺乳動物の分泌シグナル配列である、請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項３５】
哺乳動物の分泌シグナル配列がブタＩ型エラスターゼシグナル配列である、請求項３４に記載のタンパク質。
【請求項３６】
哺乳動物の分泌シグナル配列がヒトＩ型エラスターゼシグナル配列である、請求項３４に記載のタンパク質。
【請求項３７】
エラスターゼ認識配列がヒトＩ型エラスターゼ認識配列である、請求項１または請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項３８】
成熟エラスターゼがヒトＩ型エラスターゼである、請求項１または請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項３９】
成熟エラスターゼがブタＩ型エラスターゼである、請求項１または請求項３０に記載のタンパク質。
【請求項４０】
請求項１から３９のいずれか一項に記載のタンパク質をコードする核酸。
【請求項４１】
（ｉ）エラスターゼ認識配列を含む活性化配列が（ｉｉ）エラスターゼのアミノ酸配列に作動的に連結されているタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
【請求項４２】
タンパク質が、前記活性化配列に作動的に連結されたシグナル配列をさらに含む、請求項４１に記載の核酸分子。
【請求項４３】
シグナル配列がメタノール資化酵母において作動的である、請求項４１または請求項４２に記載の核酸分子。
【請求項４４】
エラスターゼ認識配列がＩ型エラスターゼ認識配列である、請求項４１から４３のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４５】
エラスターゼ認識配列がＩ型ヒトエラスターゼ認識配列である、請求項４１から４４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４６】
エラスターゼ認識配列が配列番号１１を含む、請求項４１から４５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４７】
エラスターゼ認識配列が配列番号１２を含む、請求項４１から４５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４８】
エラスターゼ認識配列が配列番号１３を含む、請求項４１から４５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項４９】
エラスターゼ認識配列が配列番号９３を含む、請求項４１から４５のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５０】
エラスターゼ認識配列が配列番号１４、配列番号１５、配列番号１８、配列番号２０、または配列番号２１のいずれか１つを含む、請求項４１から４６および４８のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５１】
活性化配列が配列番号８０を含む、請求項４１から５０のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５２】
活性化配列が配列番号２３、配列番号７２、または配列番号７３を含む、請求項４１から４５および５１のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５３】
タンパク質が、配列番号７４を含む切断ドメインを含む、請求項４１から４６のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５４】
切断ドメインが配列番号４２、配列番号４３、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、および配列番号５５のいずれか１つを含む、請求項４１から４６および５３のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５５】
エラスターゼが成熟ヒトＩ型エラスターゼである、請求項４１から５４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５６】
エラスターゼが成熟ブタＩ型エラスターゼである、請求項４１から５４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５７】
エラスターゼが配列番号５、配列番号８４、配列番号８７、および配列番号３９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項４１から５４のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項５８】
エラスターゼが配列番号１または配列番号４のアミノ酸配列を含む、請求項５７に記載の核酸分子。
【請求項５９】
シグナル配列が酵母α因子シグナルペプチドである、請求項４２から５８のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項６０】
タンパク質が配列番号３４、配列番号５０、配列番号５１、配列番号９６、および配列番号９７のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項５９に記載の核酸分子。
【請求項６１】
シグナル配列が哺乳動物の分泌シグナル配列である、請求項４２および４４から５８のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項６２】
哺乳動物の分泌シグナル配列がブタＩ型エラスターゼシグナル配列である、請求項６１に記載の核酸分子。
【請求項６３】
哺乳動物の分泌シグナル配列がヒトＩ型エラスターゼシグナル配列である、請求項６１に記載の核酸分子。
【請求項６４】
タンパク質が、配列番号８８から９１および９８から１０３のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項４１から６３のいずれか一項に記載の核酸分子。
【請求項６５】
タンパク質が、配列番号６から９および６４から６９のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項６４に記載の核酸分子。
【請求項６６】
タンパク質が、表２に記載されるエラスターゼ多型の組合せのいずれかを含む、請求項６４に記載の核酸分子。
【請求項６７】
タンパク質が、表３に記載されるエラスターゼ多型の組合せのいずれかを含む、請求項６４に記載の核酸分子。
【請求項６８】
請求項４１から６７のいずれか一項に記載の核酸分子によりコードされるタンパク質。
【請求項６９】
単離された、請求項６８に記載のタンパク質。
【請求項７０】
請求項４１から６７のいずれか一項に記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項７１】
前記タンパク質をコードするヌクレオチド配列に作動的に連結された、遺伝子発現を制御するヌクレオチド配列をさらに含む、請求項７０に記載のベクター。
【請求項７２】
前記タンパク質をコードするヌクレオチド配列が多量体化される、請求項７０または請求項７１に記載のベクター。
【請求項７３】
請求項７０から７２のいずれか一項に記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項７４】
前記ベクターの少なくとも１コピーが宿主細胞ゲノム内に組み込まれる、請求項７３に記載の宿主細胞。
【請求項７５】
前記ベクターの１コピーが宿主細胞ゲノム内に組み込まれる、請求項７４に記載の宿主細胞。
【請求項７６】
前記ベクターの２〜５コピーが宿主細胞ゲノム内に組み込まれる、請求項７４に記載の宿主細胞。
【請求項７７】
前記ベクターの２コピーが宿主細胞ゲノム内に組み込まれる、請求項７４または７６に記載の宿主細胞。
【請求項７８】
前記ベクターの３コピーが宿主細胞ゲノム内に組み込まれる、請求項７４または７６に記載の宿主細胞。
【請求項７９】
請求項４１から６７のいずれか一項に記載の核酸分子の少なくとも１コピーがそのゲノム内に組み込まれる宿主細胞。
【請求項８０】
前記核酸分子の１コピーがそのゲノム内に組み込まれる、請求項７９に記載の宿主細胞。
【請求項８１】
前記核酸分子の２〜５コピーがそのゲノム内に組み込まれる、請求項７９に記載の宿主細胞。
【請求項８２】
前記核酸分子の２コピーがそのゲノム内に組み込まれる、請求項７９に記載の宿主細胞。
【請求項８３】
前記核酸分子の３コピーがそのゲノム内に組み込まれる、請求項７９に記載の宿主細胞。
【請求項８４】
請求項４１から６７のいずれか一項に記載の核酸分子を発現するように遺伝子改変された細胞。
【請求項８５】
前記ヌクレオチド配列がメタノール誘導性プロモーターに作動的に連結されている、請求項８４に記載の細胞。
【請求項８６】
請求項４１から６７のいずれか一項に記載のヌクレオチド配列を発現するように遺伝子改変されたメタノール資化酵母細胞。
【請求項８７】
前記ヌクレオチド配列がメタノール誘導性プロモーターに作動的に連結されている、請求項８７に記載のメタノール資化酵母細胞。
【請求項８８】
請求項１から２７または請求項６８のいずれか一項に記載のタンパク質を含む細胞培養物上清。
【請求項８９】
請求項８４に記載の宿主細胞をタンパク質が生成される条件下で培養するステップを含む、エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項９０】
請求項８５に記載の宿主細胞をタンパク質が生成される条件下で培養するステップを含む、エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項９１】
請求項８６に記載の宿主細胞をタンパク質が生成される条件下で培養するステップを含む、エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項９２】
請求項８７に記載の宿主細胞をタンパク質が生成される条件下で培養するステップを含む、エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項９３】
前記条件が、ｐＨ２〜６での増殖時間または誘導時間を含む、請求項９１または請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
前記条件が、２２℃〜２８℃の温度での増殖時間または誘導時間を含む、請求項９１または請求項９２に記載の方法。
【請求項９５】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項８９から９２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９６】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
宿主細胞がクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養される、請求項８９から９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項９７または請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項９７または請求項９８に記載の方法。
【請求項１０１】
タンパク質を回収するステップをさらに含む、請求項８９から１００のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０２】
タンパク質が、上清を回収することによって回収される、請求項９５に記載の方法。
【請求項１０３】
タンパク質が上清から回収される、請求項９５に記載の方法。
【請求項１０４】
回収されたタンパク質がシグナル配列を欠く、請求項９５から１０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０５】
回収されたタンパク質がシグナル配列および活性化配列を欠く、請求項９５から１０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０６】
タンパク質を含有する溶液のｐＨをｐＨ６〜１２まで上昇させるステップをさらに含む、請求項８９から９２および９３から１０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０７】
タンパク質を触媒量のエラスターゼと接触させるステップをさらに含む、請求項８９から９２および９３から１０６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０８】
タンパク質を自己活性化条件下に置くステップ、タンパク質を触媒量のエラスターゼと接触させるステップ、またはこれらの両方のステップをさらに含む、請求項８９から９２および９３から１０６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０９】
タンパク質が自己活性化条件下に置かれる、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
自己活性化条件下に置かれるとき、タンパク質が上清中にある、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
エラスターゼタンパク質を作製する方法であって、
（ａ）組換えプロエラスターゼタンパク質の発現が可能な宿主細胞を、第１のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養するステップと、
（ｂ）前記宿主細胞の培養物から組換えプロエラスターゼタンパク質を回収するステップと、
（ｃ）場合によって、前記組換えプロエラスターゼタンパク質を活性化条件に曝露して、成熟エラスターゼタンパク質を作製するステップと
を含み、これらによりエラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項１１２】
組換えプロエラスターゼタンパク質を活性化条件に曝露して、成熟エラスターゼタンパク質を作製するステップを含む、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
活性化条件への前記曝露前に組換えプロエラスターゼタンパク質が精製される、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
精製されたプロエラスターゼタンパク質と、第２のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物とを含む溶液が生成されるように、前記組換えプロエラスターゼタンパク質が、第２のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で精製される、請求項１１３に記載の方法。
【請求項１１５】
前記第１のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項１１１から１１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１６】
前記第２のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項１１４または請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
前記第１および第２のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が同じである、請求項１１４から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１８】
前記第１および第２のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が異なる、請求項１１４から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１９】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項１１４から１１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２０】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記培養物中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項１１４から１１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２１】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記溶液中に存在する、請求項１１１から１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２２】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記溶液中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項１１１から１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２３】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項１１１から１２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２４】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２５】
プロエラスターゼタンパク質が、前記宿主細胞の上清から回収される、請求項１１１から１２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２６】
前記活性化条件がトリプシンへの曝露を含む、請求項１１１から１２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２７】
前記活性化条件が自己活性化条件である、請求項１１１から１２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２８】
前記成熟エラスターゼタンパク質を単離するステップをさらに含む、請求項１１１から１２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２９】
成熟エラスターゼタンパク質が成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質である、請求項１１１から１２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３０】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１２９に記載の方法。
【請求項１３１】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１２９に記載の方法。
【請求項１３２】
成熟エラスターゼタンパク質を作製する方法であって、
（ａ）プロエラスターゼタンパク質を凍結乾燥させるステップと、
（ｂ）凍結乾燥したプロエラスターゼタンパク質を保存するステップと、
（ｃ）凍結乾燥したプロエラスターゼタンパク質を再溶解するステップと、
（ｄ）再溶解されたプロエラスターゼタンパク質を活性化するステップと
を含み、これらにより成熟エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項１３３】
プロエラスターゼタンパク質が組換え体である、請求項１３２に記載の方法。
【請求項１３４】
（ｉ）プロエラスターゼタンパク質を発現させることが可能な宿主細胞をプロエラスターゼタンパク質が発現する条件下で培養するステップと、（ｉｉ）プロエラスターゼタンパク質を回収するステップとを含む工程により、プロエラスターゼタンパク質が作製されるかまたは得ることができる、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項１３４に記載の方法。
【請求項１３６】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項１３５に記載の方法。
【請求項１３７】
宿主細胞が、クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養される、請求項１３２から１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３８】
クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項１３７に記載の方法。
【請求項１３９】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項１３７または請求項１３８に記載の方法。
【請求項１４０】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項１３７または請求項１３８に記載の方法。
【請求項１４１】
プロエラスターゼタンパク質が、前記宿主細胞の上清から回収される、請求項１３２から１４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４２】
プロエラスターゼタンパク質が、凍結乾燥前に精製される、請求項１３２から１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４３】
凍結乾燥したプロエラスターゼタンパク質が、少なくとも１日間、少なくとも１週間、少なくとも１カ月間、または少なくとも３カ月間にわたり保存される、請求項１３２から１４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４４】
プロエラスターゼタンパク質が−８０℃〜＋４℃の温度で保存される、請求項１３２から１４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４５】
前記活性化するステップがトリプシン活性化を含む、請求項１３２から１４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４６】
前記活性化するステップが自己活性化を含む、請求項１３２から１４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４７】
前記成熟エラスターゼタンパク質を単離するステップをさらに含む、請求項１３２から１４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４８】
成熟エラスターゼタンパク質が成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質である、請求項１３２から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４９】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１４８に記載の方法。
【請求項１５０】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１４８に記載の方法。
【請求項１５１】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を作製する方法であって、組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を自己活性化条件下に置くステップ、組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を触媒量のエラスターゼと接触させるステップ、またはこれらの両方のステップを含み、これらにより成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項１５２】
（ａ）請求項８４または８６に記載の宿主細胞を前記タンパク質が発現する条件下で培養するステップと、
（ｂ）発現したタンパク質を回収するステップと
を含み、これらにより組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を作製する工程により、前記組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼタンパク質が得られるかまたは得ることができる、請求項１５１に記載の方法。
【請求項１５３】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項１５２に記載の方法。
【請求項１５４】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項１５３に記載の方法。
【請求項１５５】
宿主細胞が、クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養される、請求項１５２から１５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５６】
クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項１５５に記載の方法。
【請求項１５７】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項１５５または請求項１５６に記載の方法。
【請求項１５８】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項１５５または請求項１５６に記載の方法。
【請求項１５９】
発現したタンパク質を回収するステップが、上清を回収することを含む、請求項１５２から１５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６０】
前記自己活性化ステップが上清中において実施される、請求項１５９に記載の方法。
【請求項１６１】
発現したタンパク質が上清から回収される、請求項１５２から１５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６２】
前記自己活性化ステップが上清中において実施される、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６３】
発現したタンパク質を精製するステップをさらに含む、請求項１６１に記載の方法。
【請求項１６４】
組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を自己活性化条件下に置くステップが、回収されたタンパク質を含有する溶液のｐＨを上昇させることを含む、請求項１５１から１６３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６５】
溶液のｐＨを塩基性ｐＨまで上昇させる、請求項１６４に記載の方法。
【請求項１６６】
塩基性ｐＨが７〜９の範囲内にある、請求項１６５に記載の方法。
【請求項１６７】
塩基性ｐＨが８である、請求項１６６に記載の方法。
【請求項１６８】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において１０ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６９】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７０】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において２ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７１】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において１ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７２】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において０．５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７３】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において０．２５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項１６４から１６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７４】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において少なくとも０．１ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１６５から１７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７５】
回収されたタンパク質が、前記溶液中において少なくとも０．２ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１６５から１７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７６】
回収されたタンパク質が、０．５〜８時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項１６５から１７５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７７】
回収されたタンパク質が、２〜７時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項１７４に記載の方法。
【請求項１７８】
回収されたタンパク質が、６時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項１７７に記載の方法。
【請求項１７９】
前記塩基性ｐＨへの曝露が２２℃〜２８℃の温度で実施される、請求項１６５から１７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８０】
前記塩基性ｐＨへの曝露が２６℃の温度で実施される、請求項１７９に記載の方法。
【請求項１８１】
回収されたタンパク質が自己活性化前に保存される、請求項１５２から１８０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８２】
回収されたタンパク質が保存前に乾燥凍結される、請求項１８１に記載の方法。
【請求項１８３】
回収されたタンパク質が乾燥凍結前に精製される、請求項１８２に記載の方法。
【請求項１８４】
回収されたタンパク質が、少なくとも１日間、少なくとも１週間、少なくとも１カ月間、または少なくとも３カ月間にわたり保存される、請求項１８１から１８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８５】
回収されたタンパク質が８０℃〜＋４℃の温度で保存される、請求項１８４に記載の方法。
【請求項１８６】
組換え自己活性化Ｉ型プロエラスターゼが、自己活性化条件下に置かれる前に精製される、請求項１５０から１８５のいずれか一項に記載の方法（ただし、これらの請求項が請求項１６０または１６２に従属しない場合に限る）。
【請求項１８７】
前記成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を単離するステップをさらに含む、請求項１５０から１８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８８】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１５０から１８７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８９】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１５０から１８７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９０】
成熟Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を作製する方法であって、
（ａ）請求項８４または８６に記載の宿主細胞を前記タンパク質が発現する条件下で培養するステップと、
（ｂ）発現したタンパク質を回収するステップと、
（ｃ）回収されたタンパク質を精製するステップと、
（ｄ）前記タンパク質を含有する溶液のｐＨを上昇させるか、または回収されたタンパク質を触媒量のエラスターゼと接触させて、成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を作製するステップと
を含み、これらにより成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項１９１】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項１９０に記載の方法。
【請求項１９２】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９３】
宿主細胞が、クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養される、請求項１９０から１９２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９４】
クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項１９３に記載の方法。
【請求項１９５】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項１９３または請求項１９４に記載の方法。
【請求項１９６】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項１９３または請求項１９４に記載の方法。
【請求項１９７】
（ｅ）前記成熟Ｉ型エラスターゼを精製するステップをさらに含む、請求項１９０から１９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９８】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１９０から１９７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９９】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項１９０から１９７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２００】
成熟Ｉ型プロエラスターゼタンパク質を作製する方法であって、
（ａ）請求項８４または８６に記載の宿主細胞を前記タンパク質が発現する条件下で培養するステップと、
（ｂ）発現したタンパク質を回収するステップと、
（ｃ）成熟タンパク質が生成されるまで、回収されたタンパク質を塩基性ｐＨに曝露するステップと
を含み、これらにより成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を作製する方法。
【請求項２０１】
宿主細胞が複合培地中で培養される、請求項２００に記載の方法。
【請求項２０２】
複合培地が、緩衝されたメタノール複合培地または緩衝されたグリセロール複合培地である、請求項２０１に記載の方法。
【請求項２０３】
宿主細胞が、クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の存在下で培養される、請求項２００から２０２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０４】
クエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、それぞれ、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、または酢酸ナトリウムである、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２０５】
１種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が、５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭの濃度で前記培養物中に存在する、請求項２０３または請求項２０４に記載の方法。
【請求項２０６】
複数種のクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物が前記培養物中に存在し、前記溶液中におけるクエン酸化合物、コハク酸化合物、または酢酸化合物の総濃度が５〜５０ｍＭ、７．５〜１００ｍＭ、１０〜１５０ｍＭ、５０〜２００ｍＭ、１００〜１５０ｍＭ、７５〜１２５ｍＭ、または９０〜１１０ｍＭである、請求項２０３または請求項２０４に記載の方法。
【請求項２０７】
塩基性ｐＨが７〜９である、請求項２００から２０６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０８】
塩基性ｐＨが８である、請求項２０７に記載の方法。
【請求項２０９】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに１０ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１０】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１１】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに２ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１２】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに１ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１３】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに０．５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１４】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに０．２５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である、請求項２００から２０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１５】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに少なくとも０．１ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項２０９から２１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１６】
回収されたタンパク質が、塩基性ｐＨに曝露したときに少なくとも０．２ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項２０９から２１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１７】
回収されたタンパク質が、０．５〜８時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項２００から２１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１８】
回収されたタンパク質が、２〜７時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項２１７に記載の方法。
【請求項２１９】
回収されたタンパク質が、６時間にわたり塩基性ｐＨに曝露される、請求項２１８に記載の方法。
【請求項２２０】
前記塩基性ｐＨへの曝露が２２℃〜２８℃の温度で実施される、請求項２００から２１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２１】
前記塩基性ｐＨへの曝露が２６℃の温度で実施される、請求項２２０に記載の方法。
【請求項２２２】
（ｄ）前記成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質を単離するステップをさらに含む、請求項２００から２２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２３】
成熟Ｉ型エラスターゼが成熟ブタＩ型エラスターゼである、請求項１５０から２２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２４】
成熟Ｉ型エラスターゼが成熟ヒトＩ型エラスターゼである、請求項１５０から２２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２５】
成熟エラスターゼタンパク質の製剤を作製する方法であって、
（ａ）活性化プロエラスターゼタンパク質を自己活性化条件下に置いて成熟エラスターゼタンパク質を作製するステップと、
（ｂ）成熟エラスターゼタンパク質を製剤化するステップと
を含み、これらにより成熟エラスターゼタンパク質の製剤を作製する方法。
【請求項２２６】
自己活性化プロエラスターゼタンパク質が組換え体である、請求項２２５に記載の方法。
【請求項２２７】
ステップ（ａ）の前に、プロエラスターゼタンパク質が発現する条件下で増殖した前記自己活性化プロエラスターゼタンパク質を発現させることが可能な宿主細胞の培養物からプロエラスターゼタンパク質を回収するステップをさらに含む、請求項２２６に記載の方法。
【請求項２２８】
ステップ（ｂ）の前に、前記成熟エラスターゼタンパク質を精製するステップをさらに含む、請求項２２５または請求項２２６に記載の方法。
【請求項２２９】
前記製剤化するステップが、前記成熟エラスターゼタンパク質を凍結乾燥させることを含む、請求項２２５から２２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３０】
凍結乾燥前に、成熟エラスターゼタンパク質が緩衝液または緩衝成分と混合されない、請求項２２９に記載の方法。
【請求項２３１】
凍結乾燥後に、成熟エラスターゼタンパク質が１種または複数種の緩衝成分と混合される、請求項２３０に記載の方法。
【請求項２３２】
凍結乾燥前に、成熟エラスターゼタンパク質が緩衝液または１種もしくは複数種の緩衝成分と混合される、請求項２２９に記載の方法。
【請求項２３３】
緩衝液がリン酸緩衝生理食塩水（「ＰＢＳ」）バッファーであるか、または緩衝成分がＰＢＳ緩衝成分である、請求項２３１または２３２に記載の方法。
【請求項２３４】
緩衝液がデキストランを含むか、または緩衝成分がデキストランを含む、請求項２３１から２３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３５】
デキストランがデキストラン−１８である、請求項２３４に記載の方法。
【請求項２３６】
緩衝液がポリソルベート８０を含む、請求項２３０から２３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３７】
前記製剤化するステップが、凍結乾燥した成熟エラスターゼタンパク質を液体で再溶解することをさらに含む、請求項２２９から２３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３８】
液体が水である、請求項２３７に記載の方法。
【請求項２３９】
液体が緩衝液である、請求項２３７に記載の方法。
【請求項２４０】
緩衝液が、希釈されない緩衝液であるか、濃縮緩衝液であるか、または希釈緩衝液である、請求項２３９に記載の方法。
【請求項２４１】
再溶解時において、成熟エラスターゼタンパク質溶液が、希釈されない緩衝液、濃縮緩衝液、または希釈緩衝液中において生成される、請求項２３７から２４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４２】
緩衝成分が凍結乾燥物中に存在するか、再溶解時に添加されるか、またはその両方である、請求項２４１に記載の方法。
【請求項２４３】
希釈されない緩衝液が１×ＰＢＳを含む、請求項２４０から２４２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４４】
希釈緩衝液が０．１×ＰＢＳ〜０．５×ＰＢＳを含む、請求項２４０または請求項２４１に記載の方法。
【請求項２４５】
希釈緩衝液が０．１×ＰＢＳを含む、請求項２４４に記載の方法。
【請求項２４６】
希釈緩衝液が０．５×ＰＢＳを含む、請求項２４４に記載の方法。
【請求項２４７】
濃縮緩衝液が１．１×ＰＢＳ〜３×ＰＢＳを含む、請求項２４０または請求項２４１に記載の方法。
【請求項２４８】
濃縮緩衝液が１．５×ＰＢＳ〜２×ＰＢＳを含む、請求項２４７に記載の方法。
【請求項２４９】
緩衝液がデキストランを含む、請求項２４１から２４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５０】
デキストランがデキストラン１８である、請求項２４９に記載の方法。
【請求項２５１】
緩衝液がポリソルベート８０を含む、請求項２４１から２５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５２】
緩衝液がｐＨ７〜８である、請求項２４１から２５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５３】
緩衝液がｐＨ７．４である、請求項２５２に記載の方法。
【請求項２５４】
成熟エラスターゼタンパク質が０．００１ｍｇ／ｍｌ〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で再溶解される、請求項２３７から２５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５５】
成熟エラスターゼタンパク質が０．１ｍｇ／ｍｌ〜４０ｍｇ／ｍｌの濃度で再溶解される、請求項２５４に記載の方法。
【請求項２５６】
成熟エラスターゼタンパク質が５ｍｇ／ｍｌ〜３０ｍｇ／ｍｌの濃度で再溶解される、請求項２５５に記載の方法。
【請求項２５７】
成熟エラスターゼタンパク質が１０ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度で再溶解される、請求項２５６に記載の方法。
【請求項２５８】
前記製剤が、前記成熟エラスターゼタンパク質を含む医薬組成物である、請求項２２５から２５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５９】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項２２５から２５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６０】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項２２５から２５８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６１】
凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼを作製する方法であって、
（ａ）請求項１５１から１８１のいずれか一項に記載の方法に従って成熟Ｉ型エラスターゼを作製するステップと、
（ｂ）成熟Ｉ型エラスターゼを単離するステップと、
（ｃ）前記単離された成熟Ｉ型エラスターゼを凍結乾燥させるステップと
を含み、これらにより凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼを作製する方法。
【請求項２６２】
凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼが９５％〜１００％の純度にある、請求項２６１に記載の方法。
【請求項２６３】
凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼが少なくとも９５％の純度にある、請求項２６１または請求項２６２に記載の方法。
【請求項２６４】
凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼが少なくとも９８％の純度にある、請求項２６１または請求項２６２に記載の方法。
【請求項２６５】
凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼが均一になるまで精製される、請求項２６１から２６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６６】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項２６１から２６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６７】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項２６１から２６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６８】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号５、配列番号８４、または配列番号８７から本質的になる、請求項１３０、１４９、１８８、１９８、２２３、２５９、および２６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６９】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号１または配列番号４から本質的になる、請求項２６８に記載の方法。
【請求項２７０】
成熟ブタＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号３９から本質的になる、請求項１３１、１５０、１８９、１９９、２２４、２６０、および２６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７１】
プロエラスターゼタンパク質が、請求項１３から２７のいずれか一項に記載のタンパク質である、請求項１１１から１２８、１３２から１４８、１５１から１９７、および２２５から２５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７２】
発現されるタンパク質が請求項１３から２７のいずれか一項に記載のタンパク質である、請求項２００から請求項２２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７３】
請求項１４９、１８８、１９８、および２２３のいずれか一項に記載の方法により作製されるかまたは得ることができる成熟ヒトＩ型エラスターゼ。
【請求項２７４】
１〜４０Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を有する、請求項２７３に記載の成熟ヒトＩ型エラスターゼ。
【請求項２７５】
請求項１５０、１８９、１９９、および２２４のいずれか一項に記載の方法により作製されるかまたは得ることができる、成熟ブタＩ型エラスターゼ。
【請求項２７６】
１０〜１００Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を有する、請求項２７５に記載の成熟ヒトＩ型エラスターゼ。
【請求項２７７】
治療有効量の（ａ）請求項２７３もしくは請求項２７４に記載の成熟ヒトＩ型エラスターゼ、または（ｂ）請求項２５９に記載の方法により作製されるかもしくは得ることができる成熟ヒトＩ型エラスターゼの製剤を含む医薬組成物。
【請求項２７８】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号５、配列番号８４、または配列番号８７から本質的になる、請求項２７７に記載の医薬組成物。
【請求項２７９】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号１または配列番号４から本質的になる、請求項２７８に記載の医薬組成物。
【請求項２８０】
治療有効量の（ａ）請求項２７５もしくは請求項２７６に記載の成熟ブタＩ型エラスターゼ、または（ｂ）請求項２６０に記載の方法により作製されるかもしくは得ることができる成熟ブタＩ型エラスターゼの製剤を含む医薬組成物。
【請求項２８１】
成熟ブタＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号３９から本質的になる、請求項２８０に記載の医薬組成物。
【請求項２８２】
（ｉ）治療有効量の成熟ヒトＩ型エラスターゼと、（ｉｉ）薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物であって、以下の特性：
（ａ）組成物がトリプシンを含まないこと、
（ｂ）組成物がトリプシンを実質的に含まないこと、
（ｃ）組成物が配列番号２、３、３７、３８、７０および／または７１からなる任意のタンパク質を含まないこと、
（ｄ）組成物が配列番号２、３、３７、３８、７０および／または７１からなる任意のタンパク質を実質的に含まないこと、
（ｅ）組成物が細菌タンパク質を含まないこと、
（ｆ）組成物が細菌タンパク質を実質的に含まないこと、
（ｇ）組成物が、前記成熟ヒトＩ型エラスターゼ以外の哺乳動物タンパク質を含まないこと、
（ｈ）組成物が、前記成熟ヒトＩ型エラスターゼ以外の哺乳動物タンパク質を実質的に含まないこと
の少なくとも１つを特徴とする医薬組成物。
【請求項２８３】
（ｉ）治療有効量の成熟ヒトＩ型エラスターゼと、（ｉｉ）薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物であって、以下の特性：
（ａ）組成物がトリプシンを含まないこと、
（ｂ）組成物がトリプシンを実質的に含まないこと、
（ｃ）組成物が配列番号７０および７１からなる任意のタンパク質を含まないこと、
（ｄ）組成物が配列番号２および３からなる任意のタンパク質を実質的に含まないこと、
（ｅ）組成物が細菌タンパク質を含まないこと、
（ｆ）組成物が細菌タンパク質を実質的に含まないこと、
（ｇ）組成物が、前記成熟ヒトＩ型エラスターゼ以外の哺乳動物タンパク質を含まないこと、
（ｈ）組成物が、前記成熟ヒトＩ型エラスターゼ以外の哺乳動物タンパク質を実質的に含まないこと
の少なくとも１つを特徴とする医薬組成物。
【請求項２８４】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも２つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２８５】
前記少なくとも２つの特性が（ａ）および（ｃ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２８６】
前記少なくとも２つの特性が（ｂ）および（ｄ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２８７】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも３つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２８８】
前記少なくとも３つの特性が（ａ）、（ｃ）、および（ｅ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２８９】
前記少なくとも３つの特性が（ｂ）、（ｄ）、および（ｆ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２９０】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも４つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２９１】
前記少なくとも４つの特性が（ａ）、（ｃ）、（ｅ）、および（ｇ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２９２】
前記少なくとも４つの特性が（ｂ）、（ｄ）、（ｆ）、および（ｈ）を含む、請求項２８４に記載の医薬組成物。
【請求項２９３】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも５つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２９４】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも６つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２９５】
特性（ａ）〜（ｈ）の少なくとも７つを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２９６】
特性（ａ）〜（ｈ）のすべてを特徴とする、請求項２８２または請求項２８３に記載の医薬組成物。
【請求項２９７】
配列番号８５、８６、９４、および９５からなる１つ、２つ、３つ、または４つすべてのタンパク質を含まないかまたは実質的に含まない、請求項２８２から２９６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２９８】
配列番号８５および配列番号８６からなるタンパク質を含まないかまたは実質的に含まない、請求項２８２から２９７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２９９】
配列番号９４および配列番号９５からなるタンパク質を含まないかまたは実質的に含まない、請求項２８２から２９７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３００】
配列番号１０６、１０７、および１０８からなる１つ、２つ、または３つすべてのタンパク質を含まないかまたは実質的に含まない、請求項２８２から２９７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３０１】
薬学的に許容されるレベルのエンドトキシンを含有する、請求項２８２から３００のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３０２】
前記医薬組成物が液体組成物であり、前記薬学的に許容されるレベルのエンドトキシンが８ＥＵ／ｍｌ以下である、請求項３０１に記載の医薬組成物。
【請求項３０３】
前記薬学的に許容されるレベルのエンドトキシンが５ＥＵ／ｍｌ以下である、請求項３０２に記載の医薬組成物。
【請求項３０４】
前記医薬組成物が固体組成物であり、前記薬学的に許容されるレベルのエンドトキシンが成熟ヒトＩ型エラスターゼ１グラム当たり１０ＥＵ以下である、請求項３０１に記載の医薬組成物。
【請求項３０５】
前記薬学的に許容されるレベルのエンドトキシンが成熟ヒトＩ型エラスターゼ１グラム当たり５ＥＵ以下である、請求項３０４に記載の医薬組成物。
【請求項３０６】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、１〜４０Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を特徴とする、請求項２８２から３０５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３０７】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、２５〜３５Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を特徴とする、請求項３０６に記載の医薬組成物。
【請求項３０８】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、１０Ｕ／タンパク質ｍｇを超える比活性を特徴とする、請求項３０６に記載の医薬組成物。
【請求項３０９】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、２０Ｕ／タンパク質ｍｇを超える比活性を特徴とする、請求項３０６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３１０】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、配列番号５、８４、または８７から本質的になる、請求項２８２から３０９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３１１】
成熟ヒトＩ型エラスターゼが、配列番号１または配列番号４から本質的になる、請求項３１０に記載の医薬組成物。
【請求項３１２】
トリプシン活性が、成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質１ｍｇ当たり４ｎｇ未満に相当する、請求項２８２から３１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３１３】
トリプシン活性が、成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質１ｍｇ当たり２ｎｇ未満に相当する、請求項３１２に記載の医薬組成物。
【請求項３１４】
１ｍｇ／ｍｌの前記タンパク質濃度への再溶解時において、トリプシン活性が２ｎｇ／トリプシンｍｌ未満に相当する、配列番号５、８４、または８７から本質的になるタンパク質の凍結乾燥製剤。
【請求項３１５】
水分含量が５％未満である、請求項３１４に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３１６】
ナトリウムイオン、カリウムイオン、リン酸イオン、および塩化物イオンを含む、請求項３１５に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３１７】
ポリソルベート８０を含む、請求項３１５に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３１８】
デキストランを含む、請求項３１５に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３１９】
デキストランがデキストラン−１８である、請求項３１８に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２０】
ナトリウムイオン、カリウムイオン、リン酸イオン、塩化物イオン、およびポリソルベート８０を含む、請求項３１１に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２１】
ナトリウムイオン、カリウムイオン、リン酸イオン、塩化物イオン、およびデキストランを含む、請求項３１４に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２２】
デキストランがデキストラン−１８である、請求項３２１に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２３】
ナトリウムイオン、カリウムイオン、リン酸イオン、塩化物イオン、ポリソルベート８０、およびデキストランを含む、請求項３１４に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２４】
デキストランがデキストラン−１８である、請求項３２３に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３２５】
トリプシン活性が２ｎｇ／トリプシンｍｌ未満に相当する、配列番号５、８４、または８７から本質的になる少なくとも０．１ｍｇ／ｍｌのタンパク質溶液を含む液体製剤。
【請求項３２６】
溶液が緩衝液である、請求項３２５に記載の液体製剤。
【請求項３２７】
溶液がｐＨ７〜８まで緩衝される、請求項３２６に記載の液体製剤。
【請求項３２８】
溶液がＰＢＳである、請求項３２６に記載の液体製剤。
【請求項３２９】
溶液が１３７ｍＭの塩化ナトリウム、２．７ｍＭのリン酸カリウム、および１０ｍＭのリン酸ナトリウムを含む、請求項３２８に記載の液体製剤。
【請求項３３０】
１種または複数種の賦形剤をさらに含む、請求項３２５から３２９のいずれか一項に記載の液体製剤。
【請求項３３１】
前記１種または複数種の賦形剤がデキストラン−１８を含む、請求項３３０に記載の液体製剤。
【請求項３３２】
デキストラン−１８が、前記溶液に対する重量／容量比で８％の量である、請求項３３１に記載の液体製剤。
【請求項３３３】
前記１種または複数種の賦形剤がポリソルベート８０を含む、請求項３３０に記載の液体製剤。
【請求項３３４】
ポリソルベート８０が、前記溶液に対する重量／容量比で０．０１％の量である、請求項３３３に記載の液体製剤。
【請求項３３５】
前記溶液中における前記タンパク質の濃度が０．００１ｍｇ／ｍｌ〜４０ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項３２５から３３４のいずれか一項に記載の液体製剤。
【請求項３３６】
前記溶液中における前記タンパク質の濃度が０．１ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの範囲にある、請求項３３５に記載の液体製剤。
【請求項３３７】
１種または複数種の防腐剤、溶解剤、および着色剤をさらに含む、請求項３２５から３３６のいずれか一項に記載の液体製剤。
【請求項３３８】
配列番号５、８４、または８７の前記タンパク質以外の哺乳動物タンパク質を実質的に含まない、請求項３２５から３３７のいずれか一項に記載の液体製剤。
【請求項３３９】
細菌タンパク質を実質的に含まない、請求項３２５から３３８のいずれか一項に記載の液体製剤。
【請求項３４０】
請求項２２５から２５８のいずれか一項に記載の方法により作製されるかまたは得ることができる製剤。
【請求項３４１】
液体製剤である、請求項３４０に記載の製剤。
【請求項３４２】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項３４０または３４１に記載の製剤。
【請求項３４３】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号５、配列番号８４、または配列番号８７から本質的になる、請求項３４２に記載の製剤。
【請求項３４４】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号１または配列番号４から本質的になる、請求項３４２に記載の製剤。
【請求項３４５】
成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質がブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項３４０または３４１に記載の製剤。
【請求項３４６】
成熟ブタＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号３９から本質的になる、請求項３４５に記載の製剤。
【請求項３４７】
正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質および不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質の混合物から、１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質を除去する方法であって、
（ａ）正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質および不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質の混合物を含む組成物を、正確にプロセシングされた成熟酵素が活性となるｐＨ下に置くステップと、
（ｂ）１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が分解される時間までこのようなｐＨを維持するステップと
を含み、これらにより、正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質および不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質の混合物から、前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質を除去する方法。
【請求項３４８】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が、正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質と比べて、少なくとも１つの付加的アミノ酸またはより少数のアミノ酸をＮ末端において含有する、請求項３４７に記載の方法。
【請求項３４９】
前記ｐＨが５〜１２である、請求項３４７または３４８に記載の方法。
【請求項３５０】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が５０％〜１００％分解される、請求項３４７から３４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５１】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が５０％〜９９％分解される、請求項３４８に記載の方法。
【請求項３５２】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が５０％〜９８％分解される、請求項３４８に記載の方法。
【請求項３５３】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が５０％〜９５％分解される、請求項３４８に記載の方法。
【請求項３５４】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が５０％〜９０％分解される、請求項３４８に記載の方法。
【請求項３５５】
前記１種または複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも５０％分解される、請求項３５０から３５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５６】
混合物中におけるすべての不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも５０％分解される、請求項３５５に記載の方法。
【請求項３５７】
少なくとも１種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも７５％分解される、請求項３５０から３５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５８】
複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも７５％分解される、請求項３５７に記載の方法。
【請求項３５９】
混合物中におけるすべての不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも７５％分解される、請求項３５７に記載の方法。
【請求項３６０】
少なくとも１種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも９０％分解される、請求項３５０から３５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６１】
複数種の不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも９０％分解される、請求項３６０に記載の方法。
【請求項３６２】
混合物中のすべての不正確にプロセシングされた成熟エラスターゼタンパク質が少なくとも９０％分解される、請求項３６０に記載の方法。
【請求項３６３】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が１０ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６４】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６５】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が２ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６６】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が１ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６７】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が０．５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６８】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が０．２５ｍｇ／ｍｌ以下の濃度である液体組成物である、請求項３４７から３６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６９】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が少なくとも０．１ｍｇ／ｍｌの濃度である液体組成物である、請求項３６３から３６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７０】
組成物が、総エラスターゼタンパク質が少なくとも０．２ｍｇ／ｍｌの濃度である液体組成物である、請求項３６３から３６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７１】
前記組成物中におけるトリプシン活性が、総エラスターゼタンパク質１ｍｇ当たり４ｎｇ／トリプシンｍｌ未満である、請求項３４７から３７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７２】
前記組成物中におけるトリプシン活性が、総エラスターゼタンパク質１ｍｇ当たり２ｎｇ／トリプシンｍｌ未満である、請求項３４７から３７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７３】
組成物が、配列番号１０４からなるタンパク質を含まないかもしくは実質的に含まず、かつ／または配列番号１０５からなるタンパク質を含まないかもしくは実質的に含まない、請求項３４７から３７２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７４】
成熟Ｉ型エラスターゼを含む医薬組成物を作製する方法であって、（ｉ）請求項２６１から２６５のいずれか一項に記載の方法により凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼを作製するステップと、（ｉｉ）水または薬学的に許容される担体中において凍結乾燥した成熟Ｉ型エラスターゼを再溶解するステップとを含み、これらにより成熟ヒトＩ型エラスターゼを含む医薬組成物を作製する方法。
【請求項３７５】
成熟Ｉ型エラスターゼを含む医薬組成物を作製する方法であって、水または薬学的に許容される担体中において請求項３１４から３２４のいずれか一項に記載の乾燥凍結製剤を再溶解するステップを含み、これにより成熟Ｉ型エラスターゼを含む医薬組成物を作製する方法。
【請求項３７６】
医薬組成物がリン酸を含む、請求項３７４または３７５に記載の方法。
【請求項３７７】
成熟Ｉ型エラスターゼが成熟ヒトＩ型エラスターゼである、請求項３７４から３７６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７８】
１〜４０Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を特徴とする、請求項３７７に記載の方法。
【請求項３７９】
成熟Ｉ型エラスターゼが２５〜３５Ｕ／タンパク質ｍｇの比活性を特徴とする、請求項３７７に記載の方法。
【請求項３８０】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後、４℃で少なくとも１カ月間の保存後、４℃で少なくとも２カ月間の保存後、４℃で少なくとも３カ月間の保存後、または４℃で少なくとも６カ月間の保存後において、その比活性の６０％〜１００％を維持する、請求項３７７から３７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８１】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後、４℃で少なくとも１カ月間の保存後、４℃で少なくとも２カ月間の保存後、４℃で少なくとも３カ月間の保存後、または４℃で少なくとも６カ月間の保存後において、その比活性の６０％〜９８％を維持する、請求項３７７から３７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８２】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後、４℃で少なくとも１カ月間の保存後、４℃で少なくとも２カ月間の保存後、４℃で少なくとも３カ月間の保存後、または４℃で少なくとも６カ月間の保存後において、その比活性の６０％〜９５％を維持する、請求項３７７から３７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８３】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後、４℃で少なくとも１カ月間の保存後、４℃で少なくとも２カ月間の保存後、４℃で少なくとも３カ月間の保存後、または４℃で少なくとも６カ月間の保存後において、その比活性の６０％〜９０％を維持する、請求項３７７から３７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８４】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後、４℃で少なくとも１カ月間の保存後、４℃で少なくとも２カ月間の保存後、４℃で少なくとも３カ月間の保存後、または４℃で少なくとも６カ月間の保存後において、その比活性の６０％〜８０％を維持する、請求項３７７から３７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８５】
前記医薬組成物中における成熟ヒトＩ型エラスターゼが、４℃で少なくとも１週間の保存後において、その比活性の少なくとも７０％を維持する、請求項３７７から３８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８６】
請求項３７４から３８５のいずれか一項に記載の方法により作製されるかまたは得ることができる医薬組成物。
【請求項３８７】
それを必要とするヒト対象における動脈または静脈の直径を治療的に増大させる方法であって、（ａ）請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の医薬組成物、（ｂ）請求項３２５から３３９のいずれか一項に記載の液体製剤、または（ｃ）請求項３４１に記載の製剤を、前記動脈または静脈の直径を増大させるのに十分な用量で、前記ヒト対象における動脈壁または静脈壁へと局所投与するステップを含む方法。
【請求項３８８】
血管の直径、血管の内腔径、またはこれらの両方が増大する、請求項３８７に記載の方法。
【請求項３８９】
それを必要とするヒト対象における動脈または静脈の血管攣縮を予防または治療する方法であって、（ａ）請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の医薬組成物、（ｂ）請求項３２５から３３９のいずれか一項に記載の液体製剤、または（ｃ）請求項３４１に記載の製剤を、前記動脈または静脈の血管攣縮を予防または治療するのに十分な用量で、前記ヒト対象における動脈壁または静脈壁へと局所投与するステップを含む方法。
【請求項３９０】
そのような治療を必要とするヒト対象における動脈または静脈の閉塞を治療する方法であって、（ａ）請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の医薬組成物、（ｂ）請求項３２５から３３９のいずれか一項に記載の液体製剤、または（ｃ）請求項３４１に記載の製剤を前記ヒト対象における動脈壁または静脈壁へと局所投与するステップを含み、前記投与の結果として前記動脈壁または静脈壁内におけるエラスチンのタンパク質分解をもたらし、前記動脈または静脈の直径を拡張する方法。
【請求項３９１】
そのような治療を必要とするヒト対象における動静脈の血液透析グラフトまたは動静脈瘻へと接合される動脈または静脈を治療する方法であって、（ａ）請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の医薬組成物、（ｂ）請求項３２５から３３９のいずれか一項に記載の液体製剤、または（ｃ）請求項３４１に記載の製剤を前記ヒト対象における動脈壁または静脈壁へと局所投与するステップを含み、前記投与の結果として前記動脈壁または静脈壁内におけるエラスチンのタンパク質分解をもたらし、前記動脈または静脈の直径を拡張する方法。
【請求項３９２】
血液透析において用いられるヒト対象における静脈を治療する方法であって、（ａ）請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の医薬組成物、（ｂ）請求項３２５から３３９のいずれか一項に記載の液体製剤、または（ｃ）請求項３４１に記載の製剤を前記ヒト対象における静脈壁へと局所投与するステップを含み、前記投与の結果として前記静脈壁内におけるエラスチンのタンパク質分解をもたらし、前記静脈の直径を拡張する方法。
【請求項３９３】
動脈壁または静脈壁内に送達装置の一部を挿入し、動脈壁または静脈壁へとエラスターゼを送達するステップをさらに含む、請求項３８７から３９２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９４】
医薬製剤または液体製剤がカテーテルにより投与される、請求項３８７から３９３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９５】
医薬組成物または液体製剤が、動脈壁または静脈壁内へと直接に投与される、請求項３８７から３９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９６】
動脈または静脈が閉塞している、請求項３８７から３９５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９７】
動脈または静脈が狭窄により閉塞している、請求項３９６に記載の方法。
【請求項３９８】
治療前において、閉塞により不十分な量の血液しか流過できない、請求項３９７に記載の方法。
【請求項３９９】
閉塞が狭窄である、請求項３９８に記載の方法。
【請求項４００】
動脈または静脈が内膜過形成により閉塞している、請求項３９９に記載の方法。
【請求項４０１】
医薬組成物または液体製剤が、閉塞した冠動脈または末梢動脈に投与される、請求項３８７から４００のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０２】
動脈または静脈が内膜過形成による閉塞を受けやすい、請求項３８７から３９５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０３】
組成物が静脈壁へと投与される、請求項３８７から４００および４０２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０４】
静脈が、動静脈の血液透析グラフトまたは動静脈瘻へと接合される、請求項４０３に記載の方法。
【請求項４０５】
静脈が血液透析において用いられる、請求項４０４に記載の方法。
【請求項４０６】
前記静脈を動脈へと直接に接合するか、またはグラフトを介して前記静脈を動脈へと接合するステップをさらに含む、請求項４０５に記載の方法。
【請求項４０７】
組成物が、手術で露出した動脈または静脈の外膜表面へと投与される、請求項３８７から３９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０８】
それぞれ、前記医薬組成物、液体製剤、または製剤中における成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質が、ヒトＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項３８７から４０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０９】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号５、配列番号８４、または配列番号８７から本質的になる、請求項４０８に記載の方法。
【請求項４１０】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号１または配列番号４から本質的になる、請求項４０８に記載の方法。
【請求項４１１】
それぞれ、前記医薬組成物、液体製剤、または製剤中における成熟Ｉ型エラスターゼタンパク質が、ブタＩ型成熟エラスターゼタンパク質である、請求項３８７から４０７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１２】
成熟ブタＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号３９から本質的になる、請求項４１１に記載の方法。
【請求項４１３】
０．００３３ｍｇ〜２００ｍｇの（ａ）請求項２７３または２７４に記載の成熟ヒトＩ型エラスターゼ、または（ｂ）請求項２５９に記載の方法により作製されるかもしくは得ることができる成熟ヒトＩ型エラスターゼの製剤を含む単位用量。
【請求項４１４】
成熟ヒトＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号５、配列番号８４、または配列番号８７から本質的になる、請求項４１３に記載の単位用量。
【請求項４１５】
０．００３３ｍｇ〜２００ｍｇの（ａ）請求項２７５または２７６に記載の成熟ブタＩ型エラスターゼ、または（ｂ）請求項２６０に記載の方法により作製されるかもしくは得ることができる成熟ブタＩ型エラスターゼの製剤を含む単位用量。
【請求項４１６】
成熟ブタＩ型エラスターゼタンパク質が、配列番号３９から本質的になる、請求項４１５に記載の単位用量。
【請求項４１７】
０．５ｍｇ〜５０ｍｇの前記成熟Ｉ型エラスターゼを含む、請求項４１３から４１６のいずれか一項に記載の単位用量。
【請求項４１８】
１ｍｇ〜２０ｍｇの前記成熟Ｉ型エラスターゼを含む、請求項４１７に記載の単位用量。
【請求項４１９】
５ｍｇ〜１０ｍｇの前記成熟Ｉ型エラスターゼを含む、請求項４１８に記載の単位用量。
【請求項４２０】
容器、パック、分注器、またはカテーテル内にある、請求項４１３から４１９のいずれか一項に記載の単位用量。
【請求項４２１】
請求項１から３９および６８から６９のいずれか一項に記載のエラスターゼタンパク質または請求項８９から２２４、２６１から２７６、および３４７から３７３のいずれか一項に記載の方法により得られるかもしくは得ることができるエラスターゼタンパク質、請求項４０から６７のいずれか一項に記載の核酸、請求項７０から７２のいずれか一項に記載のベクター、請求項７３から８７のいずれか一項に記載の細胞、請求項８８に記載の細胞培養物上清、請求項３１４から３４６のいずれか一項に記載のエラスターゼ製剤または請求項２６１から２７６のいずれか一項に記載の方法により得られるかもしくは得ることができるエラスターゼ製剤、請求項２７７から３１３および３８６のいずれか一項に記載の方法による医薬組成物または請求項３７４から３８５のいずれか一項に記載の方法により得られるかもしくは得ることができる医薬組成物、あるいは請求項４１５から４２０のいずれか一項に記載の単位用量を含むキット。
【請求項４２２】
治療用のキットである、請求項４２１に記載のキット。
【請求項４２３】
容器、パック、分注器、またはカテーテルを含む、請求項４２２に記載のキット。
【請求項４２４】
製造キットである、請求項４２３に記載のキット。
【図１Ａ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５Ａ】
【図５Ｂ】
【図５Ｃ】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５Ａ】
【図５Ｂ】
【図５Ｃ】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【公表番号】特表２０１１−５０５１６４（Ｐ２０１１−５０５１６４Ａ）
【公表日】平成２３年２月２４日（２０１１．２．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３７０７５（Ｐ２０１０−５３７０７５）
【出願日】平成２０年１２月４日（２００８．１２．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０８５５５９
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７９２２０
【国際公開日】平成２１年６月２５日（２００９．６．２５）
【出願人】（５０７１３９２６９）プロテオン セラピューティクス，インコーポレーテッド (3)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年２月２４日（２０１１．２．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１２月４日（２００８．１２．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０８５５５９
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７９２２０
【国際公開日】平成２１年６月２５日（２００９．６．２５）
【出願人】（５０７１３９２６９）プロテオン セラピューティクス，インコーポレーテッド (3)
【Ｆターム（参考）】
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