ヒトプロタンパク質転換酵素スブチリシン−ケキシン９型（「ＰＣＳＫ９」）のアンタゴニストを開示する。開示したアンタゴニストは、ＰＣＳＫ９機能の阻害に有効であり、したがって、ＰＣＳＫ９活性と関連している病状の処置における使用のための望ましいアンタゴニストを提示する。また、本発明は、前記アンタゴニストをコードする核酸、ベクター、宿主細胞、および該アンタゴニストを含む組成物を開示する。また、ＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストの作製方法、ならびにＰＣＳＫ９機能を阻害またはアンタゴナイズするための該アンタゴニストの使用方法も開示され、本開示の重要なさらなる態様を構成する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域、ここで、
（ｉ）ＣＤＲ１配列は、配列番号：１、２、４、６、１６９、ならびに配列番号：１、２、および６の残基４〜１３からなる群より選択される；
（ｉｉ）ＣＤＲ２配列は、配列番号：８、９、１１、１３、１７１ならびに配列番号：８、９および１３の残基４〜２０からなる群より選択される；ならびに
（ｉｉｉ）ＣＤＲ３配列は、配列番号：１５、１６、１８、２０、１７３ならびに配列番号：１５、１６および２０の残基４〜１５からなる群より選択される、および／または
（ｂ）ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域、ここで、
（ｉ）ＣＤＲ１配列は、配列番号：２２〜２４、２６および２８からなる群より選択される；
（ｉｉ）ＣＤＲ２配列は、配列番号：３０および３１からなる群より選択される；ならびに
（ｉｉｉ）ＣＤＲ３配列は、配列番号：３３〜３５、３７および３９からなる群より選択される
を含み；
細胞内ＬＤＬ取込みのヒトＰＣＳＫ９依存性阻害を少なくとも１０％阻害する、
単離されたＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項２】
（ａ）それぞれ配列番号：９４、９５、９６および９７である重鎖フレームワーク（ＦＲ）配列１、２、３および４；および／または
（ｂ）それぞれ配列番号：９８、９９、１００および１０１（または１０２）である軽鎖ＦＲ配列１、２、３および４
を含むフレームワーク（ＦＲ）１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の配列を、連続的に順に有する重鎖領域および／または軽鎖領域を含む、請求項１に記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項３】
（ａ）それぞれＣＤＲ１、２および３配列：配列番号：２、９および１６
を含む重鎖可変領域、ならびに、それぞれ、ＣＤＲ１、２および３配列：配列番号：２４、３１および３５を含む軽鎖可変領域；
（ｂ）それぞれ、ＣＤＲ１、２および３配列：配列番号：６、１３および２０
を含む重鎖可変領域、ならびに、それぞれＣＤＲ１、２および３配列：配列番号：２６、３１および３７を含む軽鎖可変領域；または
（ｃ）それぞれ、ＣＤＲ１、２および３配列：配列番号：６、１３および２０を含む重鎖可変領域、ならびに、それぞれＣＤＲ１、２および３配列：配列番号：２８、３１および３９を含む軽鎖可変領域
を含む、請求項１に記載のＰＣＳＫ−９特異的アンタゴニスト。
【請求項４】
（ａ）配列番号：４１、４３および４５〜４９からなる群より選択される配列を含む重鎖可変領域および／または
（ｂ）配列番号：５０、５２、５３、５５〜６６および６７からなる群より選択される配列を含む軽鎖可変領域
を含む、請求項１に記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項５】
（ａ）配列番号：４１を含む重鎖可変領域；および
（ｂ）配列番号：５０または配列番号：５２を含む軽鎖可変領域
を含む、請求項４に記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項６】
（ａ）配列番号：４３を含む重鎖可変領域；および
（ｂ）配列番号：５３または配列番号：６７を含む軽鎖可変領域
を含む、請求項４に記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項７】
（ａ）配列番号：６９、７１、７９、８１および８３からなる群より選択される配列を含む重鎖；および／または
（ｂ）配列番号：７３、７５、７７、８５、８７および８９からなる群より選択される配列を含む軽鎖
を含む、請求項１に記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項８】
（ａ）配列番号：８０を含む重鎖；および
（ｂ）配列番号：８６を含む軽鎖
を含む、請求項７に記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項９】
（ａ）配列番号：８２を含む重鎖；および
（ｂ）配列番号：８８を含む軽鎖
を含む、請求項７に記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項１０】
（ａ）配列番号：８４を含む重鎖；および
（ｂ）配列番号：９０を含む軽鎖
を含む、請求項７に記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項１１】
（ａ）ＰＣＳＫ９について請求項１に記載の抗体と競合する；および
（ｂ）配列番号：１０５〜１１３、１３３〜１３４、１６６、１５８−ＥＲ、３６６ＥＤＩおよび３８０−ＳＱＳからなる群より選択される１つ以上の配列内のＰＣＳＫ９に特異的に結合し；
細胞内ＬＤＬ取込みのヒトＰＣＳＫ９依存性阻害を少なくとも１０％阻害する、
単離されたＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項１２】
ヒトＰＣＳＫ９に５ｎＭ未満のＫ_Ｄで結合する、請求項１〜１１のいずれかに記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項１３】
細胞内ＬＤＬ取込みのＰＣＳＫ９の阻害を１００ｎＭ未満のＩＣ_５０でアンタゴナイズする、請求項１〜１１のいずれかに記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項１４】
細胞内取込みのＰＣＳＫ９の阻害を少なくとも５０％アンタゴナイズする、請求項１〜１１のいずれかに記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項１５】
抗体分子である、請求項１〜１１のいずれかに記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニスト。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれかに記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストおよび薬学的に許容され得る担体を含む組成物。
【請求項１７】
請求項１〜１５のいずれかに記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストを投与することを含む、ＰＣＳＫ９機能をアンタゴナイズする方法。
【請求項１８】
ＰＣＳＫ９機能によって引き起こされる、および／または増悪する障害、病状または疾患を改善するための医薬の製造における請求項１〜１５のいずれかに記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストの使用。
【請求項１９】
請求項１〜１５のいずれかに記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストをコードする単離された核酸。
【請求項２０】
請求項１９に記載の核酸を含むベクター。
【請求項２１】
請求項１９に記載の核酸を含む、インビトロまたはインサイチュの単離された宿主細胞または宿主細胞集団。
【請求項２２】
（ａ）請求項２１に記載の細胞を、ＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストの生成に適切な条件下で培養すること；および
（ｂ）生成されたＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストを単離すること
を含む、ＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストの作製方法。
【請求項２３】
（ａ）請求項２１に記載のベクターを細胞内に挿入すること；ここで、該ベクターはファージ外被タンパク質ＰＩＩＩまたはｐＶＩＩＩリーダー配列を含む；
（ｂ）該細胞をＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストの生成に適切な条件下で培養すること；
（ｃ）生成されたＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストを、温和な溶解条件を用いたペリプラズム抽出によって単離すること
を含む、ＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストの作製方法。
【請求項２４】
請求項１〜１５のいずれかに記載のＰＣＳＫ９特異的アンタゴニストを含む、インビトロまたはインサイチュの単離された宿主細胞または宿主細胞集団。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【公表番号】特表２０１３−５０９１９１（Ｐ２０１３−５０９１９１Ａ）
【公表日】平成２５年３月１４日（２０１３．３．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５３７０９８（Ｐ２０１２−５３７０９８）
【出願日】平成２２年１０月２９日（２０１０．１０．２９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５４６４０
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０５３７５９
【国際公開日】平成２３年５月５日（２０１１．５．５）
【出願人】（３９００２３５２６）メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション (924)
【Ｆターム（参考）】