ＢＭＰ−１０のアゴニストおよびアンタゴニストを用いて、心臓、腎臓および血管の細胞機能および恒常性を調整する方法および組成物が開示されている。特に、ＢＭＰ−１０関連の血管、腎臓、線維性および心臓の疾患および／または障害を治療、予防、および／または診断する方法が開示されている。ＢＭＰ−１０モジュレータ、例えば、アゴニストおよびアンタゴニストを評価するスクリーニング方法も開示されている。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＢＭＰ−１０応答性細胞または組織における骨形態形成タンパク質−１０（ＢＭＰ−１０）の一つ以上の生物活性を減少させる方法であって、ＢＭＰ−１０応答性細胞または組織であって、一つ以上のＢＭＰ−１０生物活性を増加させる前記細胞または組織を細胞または組織における一つ以上のＢＭＰ−１０生物活性を減少させるのに十分な量のＢＭＰ−１０アンタゴニストと接触させることを含み、ＢＭＰ−１０応答性細胞または組織が、血管または腎臓の細胞または組織、または線維性組織であって、ＢＭＰ−１０アンタゴニストが、抗ＢＭＰ−１０抗体分子、抗ＢＭＰ−１０レセプター抗体分子、可溶性ＢＭＰ−１０レセプター、ＢＭＰ−１０核酸抑制物質、ＢＭＰ−１０レセプター核酸抑制物質、ＢＭＰ−１０拮抗性プロペプチド、ＢＭＰ−１０結合領域融合変異体、およびＢＭＰ−１０レセプター結合領域融合変異体からなる群より選択されるところの、方法。
【請求項２】
ＢＭＰ−１０アンタゴニストが、
（ｉ）Ｓｍａｄタンパク質のリン酸エステル化；
（ｉｉ）ミオスタチン、エンドグリンまたは抑制性Ｓｍａｄの遺伝子発現の誘導；
（ｉｉｉ）プロ血管形成遺伝子の発現の増加；
（ｉｖ）Ｒａｓ関連タンパク質−１ａ（Ｒａｐ１ａ）の発現の減少；
（ｖ）図２２−２８において確認された、インビトロまたはインビボにおける内皮細胞のＢＭＰ−１０刺激に応答する一つ以上の遺伝子の発現の調整；
（ｖｉ）ストロマ由来分化因子（ＳＤＦ−１）またはマトリックスメタロペプチダーゼ９（ＭＭＰ−９）の血清濃度の増加；または
（ｖｉｉ）血管異常、例えば、血管異形成、大量出血、毛細管拡張症、および／または、動静脈奇形の増加から選択される一つ以上のＢＭＰ−１０生物活性を低下させる、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ＢＭＰ−１０アンタゴニストが、一つ以上の血管恒常性、腎機能、または線維組織の形成もしくは蓄積を変化させる、請求項１記載の方法。
【請求項４】
血管細胞または組織が、内皮または平滑筋の細胞または組織である、請求項１記載の方法。
【請求項５】
接触ステップが細胞培養に存在するＢＭＰ−１０応答性細胞または組織に生じ、前記細胞培養があらかじめまたは同時にＢＭＰ−１０にさらされる、請求項１記載の方法。
【請求項６】
接触ステップが被験者に存在するＢＭＰ−１０応答性細胞または組織に生じる、請求項１記載の方法。
【請求項７】
被験者が、血管、腎臓、または、線維形成の疾患または障害を有するかまたは有する危険性があるヒト患者である、請求項６記載の方法。
【請求項８】
哺乳類の被験者における、血管、腎臓または線維性疾患または障害を治療または予防する方法であって、被験者において血管または腎臓の細胞または組織または線維性組織における一つ以上のＢＭＰ−１０生物活性を阻害または低下させるのに十分な量で、ＢＭＰ−１０アンタゴニストを哺乳類の被験者に投与することを含み、ＢＭＰ−１０アンタゴニストが、抗ＢＭＰ−１０抗体分子、抗ＢＭＰ−１０レセプター抗体分子、可溶性ＢＭＰ−１０レセプター、ＢＭＰ−１０核酸抑制物質、ＢＭＰ−１０レセプター核酸抑制物質、ＢＭＰ−１０拮抗性プロペプチド、ＢＭＰ−１０結合領域融合変異体およびＢＭＰ−１０レセプター結合領域融合変異体からなる群より選択されるところの、方法。
【請求項９】
血管の疾患または障害が、内皮または平滑筋細胞の機能不全によって特徴づけられる、請求項７または８記載の方法。
【請求項１０】
被験者が、一つ以上の遺伝性出血性毛細管拡張（ＨＨＴ）、腎炎症候群、腎症、糖尿病ネフロパシ、網膜症、脳卒中、アテローム硬化、動脈硬化、末梢血管障害、高血圧、高脂血症、血栓症または再狭窄から選択される障害を有するかまたは有する危険性があるヒトである、請求項７または８記載の方法。
【請求項１１】
被験者が、結腸直腸癌、胃癌、乳癌、肺癌、食道癌、および肝臓癌腫からなる群から選択される腫瘍性障害を有するかまたは有する危険性があるヒトである、請求項７または８記載の方法。
【請求項１２】
線維性疾患または障害が、肝臓、肺、腎臓または心臓の線維組織の形成または蓄積によって特徴づけられる、請求項７または８記載の方法。
【請求項１３】
ＢＭＰ−１０が、成熟したまたはプロペプチドのヒトＢＭＰ−１０である、請求項１または８記載の方法。
【請求項１４】
ＢＭＰ−１０アンタゴニストが、ヒトＢＭＰ−１０またはヒトＢＭＰ−１０レセプターと結合する抗体分子である、請求項１または８記載の方法。
【請求項１５】
抗体分子が、ヒトＢＭＰ−１０またはヒトＢＭＰ−１０レセプター・ポリペプチドに対する、ヒト、ヒト化、キメラ、ラクダ科の動物、サメまたはインビトロで生成された抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
ＢＭＰ−１０アンタゴニストが、ＢＭＰ−１０レセプターまたはＢＭＰ−１０拮抗プロペプチドの可溶性断片である、請求項１または８記載の方法。
【請求項１７】
可溶性断片が、免疫グロブリンＦｃ領域に融合する、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
ＢＭＰ−１アンタゴニストが、エンドグリン、ＡＬＫレセプター、コーディン、ＵＳＡＧ−１、スクレロジンおよびアクチビン・レセプターＩＩＢからなる群より選択される、ＢＭＰ−１０レセプターまたはその断片である、請求項１または８記載の方法。
【請求項１９】
ＢＭＰ−１０核酸抑制物質またはＢＭＰ−１０レセプター核酸抑制物質が、アンチセンス分子、リボザイム、ＲＮＡｉおよび三重らせん分子からなる群より選択される、請求項１または８記載の方法。
【請求項２０】
不活発なまたは途絶えた血管または心臓の細胞増殖または活性によって特徴づけられる障害を治療する方法であって、血管または心臓の細胞または組織の一つ以上のＢＭＰ−１０生物活性を増加または刺激するのに十分な量で、ＢＭＰ−１０ポリペプチドまたはその機能的断片を被験者に投与することによって、障害を治療または予防することを含み、疾患が内皮細胞損傷に伴う障害または疾患であるところの、方法。
【請求項２１】
試験サンプルにおいて、ＢＭＰ−１０関連の血管、腎臓、または線維性障害または疾患を評価、診断、またはその進行をモニターする方法であって、対照標準サンプルに対する核酸またはポリペプチドのレベルの違いが、障害または疾患の存在または進行を示すように、ＢＭＰ−１０またはＢＭＰ−１０関連遺伝子から選択される核酸またはポリペプチドの発現または活性を評価することを含む、方法。
【請求項２２】
ＢＭＰ−１０関連遺伝子が、一つ以上のＧＤＦ−８、ＧＤＦ−１０、エンドグリン、抑制性Ｓｍａｄおよびプロ血管形成遺伝子を含む、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
血管または腎臓の機能を調整する試験化合物を同定する方法またはアッセイであって、
（ｉ）ＢＭＰ−１０またはＢＭＰ−１０レセプター・ポリペプチドまたは核酸と相互作用または結合する試験薬を提供するかまたは同定すること；および
（ｉｉ）参照サンプルに対する試験薬の存在下における血管または腎臓の細胞または組織の活性の変化を評価することを含み、試験化合物が、抗体分子、ＢＭＰ−１０ペプチド、可溶性ＢＭＰ−１０レセプター、可溶性ＢＭＰ−１０レセプターの融合体、低分子、自然に生じるＢＭＰ−１０アンタゴニスト、アンチセンス分子、リボザイム、ＲＮＡｉおよび三重らせん分子からなる群から選択されるところの、方法またはアッセイ。
【請求項２４】
評価ステップが、１つ以上のＢＭＰ−１０もしくはＢＭＰ−１０レセプター・ポリペプチド、またはＢＭＰ−１０もしくはＢＭＰ−１０レセプターをコード化する核酸を試験化合物と接触させること；および
試験化合物を含まないコントロールサンプルに対する、試験化合物の存在下における、ＢＭＰ−１０またはＢＭＰ−１０レセプター・ポリペプチドまたは核酸の一つ以上の活性の変化を検出することを含み、ここで、血管または腎臓の細胞または組織の活性の変化が、参照サンプルに対する、テスト化合物の存在下における、１つ以上の
（ｉ）Ｓｍａｄタンパク質のリン酸エステル化；
（ｉｉ）ミオスタチン、エンドグリン、または、抑制性Ｓｍａｄの遺伝子発現；
（ｉｉｉ）一つ以上のプロ血管形成遺伝子の発現；
（ｉｖ）Ｒａｓ関連タンパク質１ａ（Ｒａｐ１ａ）の発現；
（ｖ）図２２−２８において確認された、インビトロまたはインビボにおける内皮細胞のＢＭＰ−１０刺激に応答する一つ以上の遺伝子の発現；
（ｖｉ）ストロマ由来分化因子（ＳＤＦ−１）またはマトリックスメタロペプチダーゼ９（ＭＭＰ−９）の血清濃度；または
（ｖｉｉ）血管異常、例えば、血管異形成、大量出血、毛細管拡張症または動静脈奇形
の変化を測定することによって検出され、一つ以上の（ｉ）−（ｉｉｉ）および（ｖｉ）における減少、および（ｖｉ）における増加が、ＢＭＰ−１０機能のアンタゴニストを示し、そして、一つ以上の（ｉ）−（ｉｉｉ）および（ｖｉ）の増加、および（ｉｖ）の減少が、ＢＭＰ−１０機能のアゴニストを示すところの、請求項２６記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図４Ｃ】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３Ａ】

【図２３Ｂ−１】

【図２３Ｂ−２】

【図２３Ｃ−１】

【図２３Ｃ−２】

【図２３Ｄ−１】

【図２３Ｄ−２】

【図２４Ａ】

【図２４Ｂ】

【図２４Ｃ】

【図２４Ｄ】

【図２５Ａ】

【図２５Ｂ−１】

【図２５Ｂ−２】

【図２５Ｃ−１】

【図２５Ｃ−２】

【図２５Ｄ−１】

【図２５Ｄ−２】

【図２５Ｅ−１】

【図２５Ｅ−２】

【図２６Ａ】

【図２６Ｂ】

【図２６Ｃ】

【図２６Ｄ−１】

【図２６Ｄ−２】

【図２６Ｅ−１】

【図２６Ｅ−２】

【図２６Ｆ】

【図２６Ｇ】

【図２６Ｈ】

【図２６Ｉ】

【図２６Ｊ】


【図２６Ｋ】

【図２６Ｌ】

【図２７Ａ】

【図２７Ｂ】

【図２７Ｃ】

【図２７Ｄ】

【図２７Ｅ】

【図２７Ｆ】


【図２７Ｇ−１】

【図２７Ｇ−２】

【図２７Ｈ】

【図２７Ｉ】

【図２７Ｊ】

【図２７Ｋ】

【図２７Ｌ】

【図２７Ｍ】


【図２７Ｎ−１】

【図２７Ｎ−２】

【図２７Ｏ−１】

【図２７Ｏ−２】

【図２７Ｐ】

【図２７Ｑ−１】

【図２７Ｑ−２】

【図２７Ｒ−１】

【図２７Ｒ−２】

【図２７Ｓ−１】

【図２７Ｓ−２】

【図２７Ｔ−１】

【図２７Ｔ−２】

【図２８Ａ】

【図２８Ｂ】

【図２８Ｃ】

【図２８Ｄ】

【図２９】

【公表番号】特表２０１０−５２９０４１（Ｐ２０１０−５２９０４１Ａ）
【公表日】平成２２年８月２６日（２０１０．８．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５１０５３４（Ｐ２０１０−５１０５３４）
【出願日】平成２０年５月３０日（２００８．５．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６５４１６
【国際公開番号】ＷＯ２００８／１５１０７８
【国際公開日】平成２０年１２月１１日（２００８．１２．１１）
【出願人】（３０９０４０７０１）ワイス・エルエルシー (181)
【Ｆターム（参考）】