テトラヒドロキノリン誘導体の結晶
【課題】 Ａ形と称される化合物（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩を提供することを目的とする。
【解決手段】 本発明は、ノシセプチン受容体拮抗薬である化合物（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩の新規結晶に関する。本結晶は、熱力学的安定性および医薬品製剤に包含するための適合性に関してすぐれており、ノシセプチン受容体が関連する疾患、例えば、痛みや食欲の調節又は記憶・学習等に関連する医薬として有用である。
【解決手段】 本発明は、ノシセプチン受容体拮抗薬である化合物（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩の新規結晶に関する。本結晶は、熱力学的安定性および医薬品製剤に包含するための適合性に関してすぐれており、ノシセプチン受容体が関連する疾患、例えば、痛みや食欲の調節又は記憶・学習等に関連する医薬として有用である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ノシセプチン受容体ＯＲＬ１（Ｏｐｉｏｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｌｉｋｅ−１受容体）へのノシセプチンの結合を阻害する作用を有する物質、すなわちテトラヒドロキノリン誘導体の結晶に関し、より詳しくは（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩の結晶に関する。
【０００２】
ノシセプチン受容体ＯＲＬ１へのノシセプチンの結合を阻害する化合物は、癌性疼痛、術後疼痛、偏頭痛、痛風、慢性リウマチ、慢性疼痛、神経痛等の痛みを伴う疾患に対する鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；低血圧治療薬等として有用である。
【背景技術】
【０００３】
ノシセプチン（ｏｒｐｈａｎｉｎ ＦＱと同一物質）は、オピオイドペプチドと類似の構造を持つ17個のアミノ酸単位よりなるペプチドである。ノシセプチンは侵害刺激に対する反応性の増強活性、食欲増進活性、空間学習能力を低下させる活性、古典的オピエイト作動薬の鎮痛作用に対する拮抗作用、ドーパミン放出抑制作用、水利尿作用、血管拡張作用、全身血圧降下作用などを有しており、脳内でノシセプチン受容体ＯＲＬ１を介して痛みや食欲の調節又は記憶・学習等に関与していると考えられている［ネイチャー，３７７巻，５３２頁（１９９５）；ソサエティフォーニューロサイエンス（Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ），２２巻，４５５頁（１９９６）；ニューロレポート（ＮｅｕｒｏＲｅｐｏｒｔ），８巻，４２３頁（１９９７）；ヨーロピアンジャーナルオブニューロサイエンス（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ），９巻，１９４頁（１９９７）；ニューロサイエンス（Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ），７５巻，１頁（１９９６）；ｉｂｉｄ．，３３３頁（１９９６）；ライフサイエンス，６０巻，ＰＬ１５頁（１９９７）；ｉｂｉｄ．，ＰＬ１４１頁（１９９７）；プロシーディングフォーナショナルアカデミーオブサイエンス（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌ ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ sｃｉｅｎｃｅｓ），９４巻，１４８５８頁（１９９７）参照］。
【０００４】
また、ノシセプチン受容体ＯＲＬ１の発現が阻止されたノックアウト・マウスにおいては、モルヒネ耐性が減弱されること又は記憶・学習能力が向上することが知られている［ニューロサイエンスレターズ（Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｅｔｔｅｒｓ），２３７巻，１３６頁（１９９７）；ネイチャー，３９４巻，５７７頁（１９９８）参照］。
【０００５】
更に、ノシセプチン自身はモルヒネ退薬時に見られるような禁断症状様の症状を引き起こすこと、及び非ペプチド性のノシセプチン受容体アンタゴニストはモルヒネ耐性、依存性、退薬症候群様の症状を改善することが報告されている［サイコファーマコロジー（Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ），１５１巻，３４４−３５０頁（２０００）、ジャーナルオブニューロサイエンス（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ），２０巻，７６４０頁（２０００）参照）］。
【０００６】
一方、ノシセプチン前駆蛋白質の欠損マウスにおいては、不安様作用およびストレスに対する反応の変化が示されている［プロシーディングフォーナショナルアカデミーオブサイエンス（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌ ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ ｓｃｉｅｎｃｅｓ），９６巻，１０４４４頁（１９９９）参照］。
【０００７】
したがって、ノシセプチン受容体ＯＲＬ１へのノシセプチンの結合を特異的に阻害する物質は、癌性疼痛、術後疼痛、偏頭痛、痛風、慢性リウマチ、慢性疼痛、神経痛等の痛みを伴う疾患に対する鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；低血圧治療薬等として有用である。
【０００８】
ノシセプチン受容体ＯＲＬ１へのノシセプチンの結合を特異的に阻害する物質としては、例えばＷＯ９９／０２９６９６号、ＷＯ００／２７８１５号、ＷＯ０１／８３４５４号、ＷＯ０３／４００９９号、ＷＯ０３／６４４２５号に開示がある。これらの化合物は、いずれもベンゼン骨核にシクロアルカンが縮合した骨核を有しているが、本発明は、ピリジン骨核にシクロアルカンが縮合しており、骨核が異なるものである。
【０００９】
一方、テトラヘドロンレターズ、２０００年、４１巻、９８２９〜９８３３頁には下記構造を有する化合物が開示されている。
【００１０】
【化１】
この化合物は、ハロペリドールの誘導体として開発されたものであり、作用メカニズムは、本発明化合物と異なるものである。
【特許文献１】ＷＯ９９／０２９６９６号、
【特許文献２】ＷＯ００／２７８１５号、
【特許文献３】ＷＯ０１／８３４５４号、
【特許文献４】ＷＯ０３／４００９９号、
【特許文献５】ＷＯ０３／６４４２５号、
【非特許文献１】テトラヘドロンレターズ、２０００年、４１巻、９８２９〜９８３３頁、
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、ノシセプチン受容体ＯＲＬ１へのノシセプチンの結合を阻害する化合物の結晶を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
臨床試験および安定性試験において多形結晶が一定に保たれないと、用いられた、または測定された正確な用量があるロットから次のロットまで同等にならないことから、医薬化合物の多形結晶は、適当な剤形の開発に関連する重要な事柄である。医薬化合物を使用目的で製造する場合には、それぞれの投与において送達される多形結晶を知ることにより、製造工程で同一の結晶形が用いられ、それぞれの用量に同量の薬物が含まれていることを保証することが重要である。したがって、単一の多形結晶あるいは何種類かの既知の多形結晶の組合せが存在することを確かめることが不可欠である。さらに、ある種の多形結晶は、大きな熱力学的安定性を示し、医薬品製剤に包含する場合に、他の多形結晶に比べてより適していることもある。
【００１３】
本発明は、ノシセプチン受容体ＯＲＬ１へのノシセプチンの結合を阻害する化合物である、（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のA形結晶を提供する。
【００１４】
化合物（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オールは、下式の構造を有する。
【００１５】
【化２】
【００１６】
そして、この化合物には、Ａ形、B形、C形と呼ばれる多形結晶が存在し、B形、C形の結晶は、溶媒中で平衡化することによりA形へと変化する。すなわち、Ａ形は、この化合物の他の結晶形を上回る優れた特性を有しており、無水物で非吸湿性であり、他の多形結晶に比べて熱力学的により安定であり、医薬品製剤に包含する場合にもより安定であり、且つ生体内に取り込まれたときに高いバイオアベイラビリティを有する。
【００１７】
Ａ形結晶は、典型的には、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．１°）約１３．６°、１５．０°、１５，７°、１８．１°、２２．９°、２３．３°、２７．４°、２８．２°および２９．５°に主要なピークを有し、より詳しくは、回折角度（２θ±０．１°）２３．３°、１５．０°および１５．７°に強いピークを有し、回折角度（２θ±０．１°）２３．３°、１５．０°、１５．７°、２８．２°、２２．９°および１８．９°に中程度のピークを有し、そして、回折角度（２θ±０．１°）２９．５°、２７．４°および１３．６°にもピークを有する。そして、好ましくは、粉末Ｘ線回折において、図１に示される回折パターン又はこれと結晶学的に同等の回折パターンを示す。
【００１８】
Ａ形結晶は、示差走査熱量計測定において、２８６−２８９℃に吸熱ピークを有している。又、２０７℃付近にも小さな吸熱ピークを有している。
【００１９】
Ａ形結晶を調製する際の出発の（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オールの形態学的組成は特に限定されず、塩酸塩の非晶形、Ｂ形、Ｃ形結晶からＡ形結晶に平衡化させることができる。
【００２０】
本発明の化合物、（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩は、癌性疼痛、術後疼痛、偏頭痛、痛風、慢性リウマチ、慢性疼痛、神経痛等の痛みを伴う疾患に対する鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；低血圧治療薬等として有用である。特にA形結晶は、バイオアベイラビリティが高いので、他の結晶形のものと比べて少ない量で作用が発現しやすい。
【００２１】
したがって、本発明はさらに、この結晶を活性成分として含む医薬品製剤およびある種の障害の治療におけるこのＡ形結晶およびその製剤の用途に関する。
【発明の効果】
【００２２】
この発明によれば、ノシセプチンのノシセプチン受容体への結合に拮抗する作用を有する物質のなかでも、熱力学的に安定であり、医薬品製剤に包含する場合にも安定であり、且つ生体内に取り込まれたときに高いバイオアベイラビリティを有する物質が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
Ａ形結晶の調製
（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オールは、以下のスキームにより調製可能である。
【００２４】
【化３】
【００２５】
プロセス１
化合物１とプロパルギルアミンとをアルコール溶媒中、NaAuCl4の存在下で反応させ、化合物２とする。続いて化合物２をｍ−クロロ過安息香酸を用いて酸化し、化合物３とする。化合物３を無水酢酸中で加熱反応し、化合物４を得た後、化合物４のアセチル基を加水分解して化合物５を得る。ここで、化合物５は、シス体／トランス体に分割可能である。
【００２６】
化合物５のトランス体の水酸基をトリエチルシリル基で保護し化合物６としたのち、水素化リチウムアルミニウムにより還元し、化合物７を得る。そして化合物７をトシル化して化合物８とする。
【００２７】
プロセス２
Boc-4−ピペリドンを塩基中でPhNTf2と反応させた後、ビス(ピナコレート)ジボラン、塩化［1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン］パラジウム（以下、「PdCl2(dppf)」という）及びdppfと反応させた後、２-クロロ-4-フルオロ-1-ヨードベンゼンと反応を行い、化合物９を得る。化合物９をハイドロボレーションして化合物１０を得る。化合物１０の保護基を除去し、ついで光学分割することにより、化合物１１を得る。
【００２８】
プロセス３
化合物８と化合物１１とをヨウ化ナトリウムの存在下、縮合し、化合物１２とし、更にトリエチルシリル基を除去して目的の化合物を得ることができる。
【００２９】
得られた（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オールを、メタノール、エタノール等の溶媒に溶解させ、例えば１N−HCｌ溶液を加えて塩酸塩を形成させ、溶媒を留去して塩酸塩の固体（非結晶形）を得る。
【００３０】
Ａ形結晶を調製する場合の原料となる（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩は、非結晶形であっても差し支えなく、又、Ｂ形、Ｃ形の結晶形を用いてもＡ形に平衡化が可能である。
【００３１】
平衡化は、（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩（非結晶形）を、例えばエタノールに溶解させ、ついでｎ−ヘプタン、アセトン等の溶媒を滴下して混合液を室温まで冷却することにより行なわれる。
【００３２】
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）
本発明化合物のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンは、３ｋｗＸ線発生器（ＣｕＫα１放射）およびＮａＩ（Ｔｉ）シンチレーション検出器を備えたPhilips Analytical X'Pert PRO X-ray Diffraction Systemで測定した。試料を周囲温度に維持し、３．５°から４０°（２シータ）まで測定した。その結果を、第１図に示す。
【００３３】
Ａ形（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩の特徴は、約１３．６°、１５．０°、１５，７°、１８．１°、２２．９°、２３．３°、２７．４°、２８．２°および２９．５°（２シータ±０．１°）に主要な反射を有するＸ線粉末回折パターンであった。
【００３４】
Ａ形結晶は、示差走査熱量計測定において、２８６〜２８９℃に吸熱ピークを有している。又、２０７℃付近にも小さな吸熱ピークを有している。
【００３５】
医薬組成物
本発明の化合物は、経口又は非経口的に投与することができ、その投与に適する形態に製剤化することにより、癌性疼痛、術後疼痛、偏頭痛、痛風、慢性リウマチ、慢性疼痛、神経痛等の痛みを伴う疾患に対する鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；低血圧治療薬等として使用することができる。
【００３６】
本発明の化合物は、実際に臨床的に使用する場合、通常、その投与形態に合わせて薬学的に許容されうる添加剤と共に各種剤形に製剤化した後投与することができる。その際の添加剤としては、製剤分野において通常用いられる各種の添加剤を使用することができ、具体的には例えば、ゼラチン、乳糖、白糖、酸化チタン、デンプン、結晶セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、トウモロコシデンプン、マイクロクリスタリンワックス、白色ワセリン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、無水りん酸カルシウム、クエン酸、クエン酸三ナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ソルビトール、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリソルベート、ショ糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン、硬化ヒマシ油、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸マグネシウム、軽質無水ケイ酸、タルク、植物油、ベンジルアルコール、アラビアゴム、プロピレングリコール、ポリアルキレングリコール、シクロデキストリン又はヒドロキシプロピルシクロデキストリン等が挙げられる。
【００３７】
これらの添加剤を用いて製剤化される剤形としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、坐剤等の固形製剤；例えばシロップ剤、エリキシル剤、注射剤等の液体製剤等が挙げられ、これらは、製剤分野における通常の方法に従って調製することができる。なお、液体製剤としては、用時に水又は他の適当な媒体に溶解又は懸濁させる形であってもよい。また、特に注射剤の場合、必要に応じて生理食塩水又はブドウ糖液に溶解又は懸濁させてもよく、更に緩衝剤や保存剤を添加してもよい。
【００３８】
これらの製剤は、本発明の結晶を医薬組成物を基準にして１〜１００重量％、好ましくは１〜６０重量％の割合で含有することができる。これらの製剤は、さらに、治療上有効な他の化合物を含んでいてもよい。
【００３９】
本発明の化合物を、癌性疼痛、術後疼痛、偏頭痛、痛風、慢性リウマチ、慢性疼痛、神経痛等の痛みを伴う疾患に対する鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；低血圧治療薬等として使用する場合、その投与量及び投与回数は、患者の性別、年齢、体重、症状の程度及び目的とする治療効果の種類や範囲等により変えることができる。又、投与量は通常、１日あたり体重１ｋｇにつき０．００１から５０ｍｇであり、単回または複数回で投与することができる。投与量は、１日あたり約０．０１から約２５ｍｇ／ｋｇであるのが好ましく、１日あたり約０．０５から約１０ｍｇ／ｋｇであるのがより好ましい。
【実施例】
【００４０】
以下に実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらによってなんら限定されるものではない。
【００４１】
実施例
Ａ形（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩の製造
プロセス１
（６Ｒ，８Ｓ）−トルエン−４−スルホン酸−８−トリエチルシラニルオキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−イルメチルエステルの合成
４−シクロヘキサノンカルボン酸エチル(100g、0.588mol)とNaAuCl4・2H2O(6.0g)のエタノール溶液(500mL)に、ゆっくりとプロパルギルアミン(75.3mL)を加えた。還流下、一昼夜攪拌後、反応液を室温まで冷却し、セライトろ過後、ろ液を減圧下、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、1:1)により精製し、５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−カルボン酸エチル（化合物２）を赤褐色オイルとして124ｇ(>100%不純物を含む)得た。
【００４２】
化合物２(124g)のクロロホルム溶液(800mL)に０℃にてm−クロロ過安息香酸(1.5eq、153g)を加えた。混合物を室温で２時間攪拌後、水で希釈した。得られた混合物をクロロホルムで抽出し、有機層を飽和亜硫酸水素ナトリウム溶液、飽和重曹溶液で順次洗浄し、ついで硫酸ナトリウム上で乾燥後、減圧下で濃縮し、130gの５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−カルボン酸エチル１−オキシド（化合物３）を得た。
【００４３】
上記で得られた化合物３を無水酢酸(300ｍL)に溶解し、１３０℃で１時間攪拌した。溶媒を留去後、残渣を酢酸エチルに溶解し、酢酸エチルを飽和重曹にて洗浄した。得られた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、3:1〜1:1)にて精製し、78.2gの８−アセトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−カルボン酸エチル（化合物４）を赤褐色オイル状で得た。化合物４は、シス／トランス混合物（1：1）であり、不純物を含む。
【００４４】
化合物４（78.2ｇ）のTHF（500ｍL）溶液に０℃にてNaOEt（1.0eq）を加え、混合物を室温で３０分攪拌した。ついで飽和塩化アンモニム水溶液を用いてクエンチした。得られた混合物を水で希釈後、混合物をクロロホルム抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、2:1〜1:1)にて精製し、18.7ｇ（化合物１から14％）の（６ＲＳ，８ＳＲ）−８−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−カルボン酸エチル（化合物５）(シス体)をオレンジの固体として得、又、化合物５のトランス体42.2gを赤褐色固体として得た。
【００４５】
化合物５のトランス体のDMF（700ｍL）溶液にイミダゾール(300eq)、トリエチルシリルクロリド(2.0eｑ)を加え、室温で３時間攪拌した。反応液を酢酸エチルで希釈後、得られた溶液を飽和食塩水、水で順次洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、9:1〜17:3)にて精製し、33.7g(化合物１から17％)の（６ＲＳ，８ＳＲ）−８−トリエチルシラニルオキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−カルボン酸エチルエステル（化合物６）を青白色オイル状で得た。
【００４６】
化合物６（78.2ｇ）のTHF(500mL)溶液に０℃にて水素化リチウムアルミニウム(0.8eq)を加え、室温で１０分間攪拌した。水を用いてクエンチした後、混合物をセライトろ過し、ついでろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、2:1〜1:1)にて精製し、31.4ｇ(>100%)のラセミ体の化合物７を黄青色オイルとして得た。ラセミ体の化合物７の光学分割は、キラルパックAD(hexane/IPA、50:1、0.1wt%Et2NH含有、流速:200mL/min)により行ない、（６Ｒ，８Ｓ）及び（６R，８R）の（８−トリエチルシラニルオキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−イル）メタノール（化合物７）の光学活性アイソマー(15.3g、99.9%ee)を先行画分から得た。
【００４７】
化合物７(15.3g)のクロロホルム(400mL)溶液に、氷冷下、トシルクロリド(1.5eq)、トリエチルアミン(3.0eq)、ジメチルアミノピリジン(0.1eq)を加え、室温で２．５時間攪拌した。反応液を濃縮後、得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。更に有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、9:1〜2:1)にて精製し、22.9g(98%)の（６Ｒ，８Ｓ）−トルエン−４−スルホン酸−８−トリエチルシラニルオキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−イルメチルエステル（化合物８）を青白色オイル状で得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．６０（３Ｈ，ｍ），０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），１．５９（１Ｈ，ｍ），１．９４（１Ｈ，ｍ），２．４５（３Ｈ，ｓ），２．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．１，１６．５Ｈｚ），２．６７（１Ｈ，ｍ），２．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．１，１６．５Ｈｚ），４．０１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．２，９．５Ｈｚ），４．１０（１Ｈ，ｍ），４．８２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．９Ｈｚ），７．０８（１Ｈ，ｍ），７．３４（３Ｈ，ｍ），７．７９（２Ｈ，ｍ），８．３８（１Ｈ，ｍ）
ＥＳＩ−ＭＳ Ｆｏｕｎｄ：ｍ／ｚ ４４８．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【００４８】
プロセス２：
（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）ピペリジン−３−オールの合成
1-Boc-4-ピペリドン(251.3g、1.261mol)のTHF(6L)溶液にリチウムヘキサメチルシラジド(1.6L、1.0M in THF)を−７８℃にてカニューレを用いて加え、同温度で１時間攪拌した。得られた反応溶液にPhNTf2(450.5g、1.26lmol)のTHF(1.5L)溶液を１５分かけて滴下した。−７８℃で３０分攪拌後、更に２℃で３時間攪拌した。反応液に水(4L)を加え、水層を酢酸エチルを用いて抽出した。次いで有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をジオキサン(9L)に溶解し、酢酸カリウム(371.3g、3.783mol)、ビス(ピナコレート)ジボラン(320.2g、1.261mol)、PdCl2(dppf)(51.5g、0.063mol)及びdppf(35.0g、0.063mol)を加え、８０℃で１２時間攪拌した。反応液を氷水(4.5L)に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下濃縮した。次いで残渣をDMF(8L)に溶解させ、得られた溶液に炭酸カリウム(522.8g、3.783mol)と２-クロロ-4-フルオロ-1-ヨードベンゼン(323.4g、1.261mol)を加え、８０℃で２１時間攪拌した。反応液を氷水(8L)中に注ぎ、ジエチルエーテルを用いて抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、ついで減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(n-Hexane/EtOAc=20:1〜10:1)により精製し、４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−１−t−ブチルオキシカルボニル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン（化合物９）(154.6g、39%)をオレンジ色のオイル状で得た。
【００４９】
R-Alpine-boramine(268.5g、0.645mol)のDME(2.7L)溶液にBF3OEt(162mL、1.290mol)を滴下し、室温で2時間攪拌した。得られた溶液に化合物９(154.5g、0.496mol)のDME(800mL)溶液を約30分かけて滴下し、室温で13時間攪拌した。更に、得られた溶液にエタノール(110mL)、水(55mL)、5N-NaOH溶液(200mL)及び30%H2O2を順次加え、室温で10時間攪拌した。反応液を水(2L)に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(n-hexane/EtOAc=10:1〜5:1〜3:1〜1:1)で精製し、４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−１−t-ブチルオキシカルボニルピペリジン−３−オール（化合物１０）(84.8g、52%)を無色オイル状で得た。
【００５０】
化合物１０(84.6g、0.257mol)を4N-HCl/Dioxane(700mL)に溶解し、室温で4時間攪拌した。ついで5N-NaOH溶液を０℃(ice bath)でゆっくりと加え、10分間攪拌した。反応液を酢酸エチルで抽出し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下濃縮して粗生成物(53.6g、91%)を淡黄色固体として得た。得られた結晶をキラルパックAD(内径5.0cmｘ長さ50cm、n-Hexane/EtOH/Et2NH=900:100:1)により精製し、（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）ピペリジン−３−オール（化合物１1）(slower、37.3g、63%)を淡茶色固体として得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ），２．１１（１Ｈ，ｍ），２．５５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ），２．７０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ），３．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ），３．３６（２Ｈ，ｍ），４．２３（１Ｈ，ｂｓ），６．９９（１Ｈ，ｍ），７．１９（２Ｈ，ｍ）
ＥＳＩ−ＭＳ Ｆｏｕｎｄ：ｍ／ｚ ２３０［Ｍ＋Ｈ］＋
【００５１】
プロセス３：化合物８と化合物１1の縮合
化合物８(20.0g、44.68mmol)、化合物１1(12.3g、53.55mmol)、ヨウ化ナトリウム(67.0g、0.44７mol)及びトリエチルアミン(31.1mL、0.223mol)のDMF(1L)溶液を８０℃で12時間攪拌し、得られた反応液を氷水(1L)に注ぎ、ついで酢酸エチルにて抽出した。有機層を水及び飽和食塩水で順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(n-hexane/EtOAc=1:1〜CHCl3/MeOH=20:1)にて精製し、（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−８−トリエチルシラニルオキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン（化合物１２）(18.2g、81%)を淡茶色オイル状で得た。
【００５２】
化合物１２(18.1g、35.8mmol)のTHF(400mL)溶液にTBAF(179mL、1.0M in THF)を室温で加え、13時間攪拌した。ついで反応液に飽和重炭酸ナトリウム溶液(400mL)及び水(400mL)を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をNHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(CHCl3/MeOH=100:1〜10:1)で精製し、ついで酢酸エチルで洗浄することにより（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール(7.78g、56%)を固体として得た。
【００５３】
上記化合物（7.77ｇ、19.9mmol）をメタノール(100mL)に懸濁させ、この懸濁液に1N-HClを滴下し、室温で30分間攪拌した後、溶媒を減圧下留去した。ついで得られた塩酸塩を８０℃にてエタノール(360mL)に溶解させたのち、n-Heptane(360mL)を滴下し、混合液をゆっくり室温まで冷却した。得られた沈殿を濾別し、n-Heptane/EtOH混合溶液(1:1)にて洗浄し、室温で乾燥して、塩酸塩(6.67g、78%)を針状の白色結晶として得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：１．６５−１．８１（１Ｈ，ｍ），１．８３−２．０９（２Ｈ，ｍ），２．２０−２．３１（１Ｈ，ｍ），２．４９−２．７８（３Ｈ，ｍ），２．８０−２．９６（１Ｈ，ｍ），３．００−３．１８（３Ｈ，ｍ），３．１８−３．３４（１Ｈ，ｍ），３．４５−３．７２（２Ｈ，ｍ），４．２０−４．３５（１Ｈ，ｍ），４．４７（２Ｈ，ｓ），４．７５−５．００（１Ｈ，ｍ），７．０２−７．１６（１Ｈ，ｍ），７．１６−７．３３（２Ｈ，ｍ），７．４０−７．５２（１Ｈ，ｍ），７．６０−７．７１（１Ｈ，ｍ），８．３５−８．４３（１Ｈ，ｍ）
ＥＳＩ−ＭＳ Ｆｏｕｎｄ：ｍ／ｚ ３９１．１［Ｍ＋Ｈ］＋
【００５４】
このようにして得られた（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のＡ形結晶について、全自動粉末X線回折装置X'pert PROを用い、PW3373/00 ceramic Cu LFF X線チューブK-α照射により、粉末X線回折を行った。測定条件は以下の表１の通りであり、以下の表２に示すデータが得られた。
【００５５】
【表１】
【００５６】
【表２】
【００５７】
（製剤例１）
（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のＡ形結晶１０部、重質酸化マグネシウム１５部及び乳糖７５部を均一に混合して、３５０μｍ以下の粉末状又は細粒状の散剤とする。この散剤をカプセル容器に入れてカプセル剤とする。
【００５８】
（製剤例２）
（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のＡ形結晶４５部、澱粉１５部、乳糖１６部、結晶性セルロース２１部、ポリビニルアルコール３部及び蒸留水３０部を均一に混合した後、破砕造粒して乾燥し、次いで篩別して直径１４００〜１８０μｍの大きさの顆粒剤とする。
【００５９】
（製剤例３）
製剤例２と同様の方法で顆粒剤を作製した後、この顆粒剤９６部に対してステアリン酸カルシウム３部を加えて圧縮成形し直径１０ｍｍの錠剤を作製する。
【００６０】
（製剤例４）
製剤例２の方法で得られた顆粒剤９０部に対して結晶性セルロース１０部及びステアリン酸カルシウム３部を加えて圧縮成形し、直径８ｍｍの錠剤とした後、これにシロップゼラチン、沈降性炭酸カルシウム混合懸濁液を加えて糖衣錠を作製する。
【００６１】
これらの製剤は、また、治療上有効な他の化合物を含んでいてもよい。
【００６２】
本発明の化合物の医薬としての有用性は、例えば、下記の薬理試験例により証明される。
薬理試験例１（ノシセプチン受容体結合阻害実験）
ヒトノシセプチン受容体遺伝子をコードするｃＤＮＡを発現ベクターｐＣＲ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）に組み込み、ｐＣＲ３／ＯＲＬ１を作製した。次に、ｐＣＲ３／ＯＲＬ１をトランスフェクタム（Ｎｉｐｐｏｎｇｅｎｅ社製）を用いてＣＨＯ細胞に導入し、１ｍｇ／ｍｌ Ｇ４１８に耐性の安定発現株（ＣＨＯ／ＯＲＬ１細胞）を得た。この安定発現株より膜画分を調製し、受容体結合実験を行なった。膜画分１１μｇ、５０ｐＭ［１２５Ｉ］Ｔｙｒ１４−Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ社製）、１ｍｇのＷｈｅａｔｇｅｒｍ ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ ＳＰＡ ｂｅａｄｓ（ＰＶＴベースのもの；Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ社製）及び被験化合物をＮＣ ｂｕｆｆｅｒ（５０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、１０ｍＭ塩化ナトリウム、１ｍＭ塩化マグネシウム、２．５ｍＭ塩化カルシウム、０．１％ＢＳＡ、０．０２５％バシトラシン、ｐＨ７．４）に懸濁させ、３７℃で６０分間インキュベーションした後、放射活性を測定した。ノシセプチン受容体に対する結合活性は、本発明の化合物による［１２５Ｉ］Ｔｙｒ１４−Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ結合の５０％阻害濃度（ＩＣ５０値）で表示する。その結果、本発明化合物は、9.00ｎＭであった。
【００６３】
薬理試験例２（ノシセプチン誘導Ｇ蛋白質活性化に対する拮抗作用）
ノシセプチン受容体ＯＲＬ１を安定発現したＣＨＯ細胞を用いて、ノシセプチン誘導Ｇ蛋白質活性化に対する被験化合物の作用を検討した。ＣＨＯ／ＯＲＬ１細胞より調製した膜画分、５０ｎＭノシセプチン、２００ｐＭ ＧＴＰγ［３５Ｓ］（ＮＥＮ社製）、１．５ｍｇのＷｈｅａｔｇｅｒｍ ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ ＳＰＡ ｂｅａｄｓ（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ社製）及び被験化合物をＧＤＰ ｂｕｆｆｅｒ（２０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、１００ｍＭ塩化ナトリウム、１０ｍＭ塩化マグネシウム、１ｍＭ ＥＤＴＡ、５μＭ ＧＤＰ、ｐＨ７．４）中で混合し、２５℃で１５０分間インキュベートした後、放射活性を測定した。ノシセプチン誘導Ｇ蛋白質活性化に対する拮抗作用は、本発明化合物によるＧＴＰγ［３５Ｓ］結合の５０％阻害濃度（ＩＣ５０値）で表示する。その結果、本発明化合物は、5.90ｎＭであった。
【００６４】
薬理試験例３（拮抗試験）
雄性ＩＣＲ（ＣＤ−１）マウス（20-40g）を使用し、ノシセプチンアゴニストにより生じる運動抑制に対する拮抗作用を観察した。即ち、２０cm×３０cm×２０cmのケージ内でのマウスの運動量を、赤外線センサーを用いて測定した。０．５％メチルセルロース液もしくは溶媒に溶かした試験化合物（1-10ｍｇ／ｋｇ）とノシセプチンアゴニスト（1ｍｇ／ｋｇ）を皮下投与し、６０分間の運動量を測定した。測定期間中のノシセプチンアゴニスト群の運動量と溶媒投与群の運動量の差を１００％として、試験化合物群の運動量を％で表すことにより評価した。その結果、本発明化合物を投与した場合の運動量は75％以上であった。
【図面の簡単な説明】
【００６５】
【図１】A形（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のX線粉末回折パターンである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ノシセプチン受容体ＯＲＬ１（Ｏｐｉｏｉｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｌｉｋｅ−１受容体）へのノシセプチンの結合を阻害する作用を有する物質、すなわちテトラヒドロキノリン誘導体の結晶に関し、より詳しくは（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩の結晶に関する。
【０００２】
ノシセプチン受容体ＯＲＬ１へのノシセプチンの結合を阻害する化合物は、癌性疼痛、術後疼痛、偏頭痛、痛風、慢性リウマチ、慢性疼痛、神経痛等の痛みを伴う疾患に対する鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；低血圧治療薬等として有用である。
【背景技術】
【０００３】
ノシセプチン（ｏｒｐｈａｎｉｎ ＦＱと同一物質）は、オピオイドペプチドと類似の構造を持つ17個のアミノ酸単位よりなるペプチドである。ノシセプチンは侵害刺激に対する反応性の増強活性、食欲増進活性、空間学習能力を低下させる活性、古典的オピエイト作動薬の鎮痛作用に対する拮抗作用、ドーパミン放出抑制作用、水利尿作用、血管拡張作用、全身血圧降下作用などを有しており、脳内でノシセプチン受容体ＯＲＬ１を介して痛みや食欲の調節又は記憶・学習等に関与していると考えられている［ネイチャー，３７７巻，５３２頁（１９９５）；ソサエティフォーニューロサイエンス（Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ），２２巻，４５５頁（１９９６）；ニューロレポート（ＮｅｕｒｏＲｅｐｏｒｔ），８巻，４２３頁（１９９７）；ヨーロピアンジャーナルオブニューロサイエンス（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ），９巻，１９４頁（１９９７）；ニューロサイエンス（Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ），７５巻，１頁（１９９６）；ｉｂｉｄ．，３３３頁（１９９６）；ライフサイエンス，６０巻，ＰＬ１５頁（１９９７）；ｉｂｉｄ．，ＰＬ１４１頁（１９９７）；プロシーディングフォーナショナルアカデミーオブサイエンス（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌ ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ sｃｉｅｎｃｅｓ），９４巻，１４８５８頁（１９９７）参照］。
【０００４】
また、ノシセプチン受容体ＯＲＬ１の発現が阻止されたノックアウト・マウスにおいては、モルヒネ耐性が減弱されること又は記憶・学習能力が向上することが知られている［ニューロサイエンスレターズ（Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｅｔｔｅｒｓ），２３７巻，１３６頁（１９９７）；ネイチャー，３９４巻，５７７頁（１９９８）参照］。
【０００５】
更に、ノシセプチン自身はモルヒネ退薬時に見られるような禁断症状様の症状を引き起こすこと、及び非ペプチド性のノシセプチン受容体アンタゴニストはモルヒネ耐性、依存性、退薬症候群様の症状を改善することが報告されている［サイコファーマコロジー（Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ），１５１巻，３４４−３５０頁（２０００）、ジャーナルオブニューロサイエンス（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ），２０巻，７６４０頁（２０００）参照）］。
【０００６】
一方、ノシセプチン前駆蛋白質の欠損マウスにおいては、不安様作用およびストレスに対する反応の変化が示されている［プロシーディングフォーナショナルアカデミーオブサイエンス（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｆｏｒ Ｎａｔｉｏｎａｌ ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ ｓｃｉｅｎｃｅｓ），９６巻，１０４４４頁（１９９９）参照］。
【０００７】
したがって、ノシセプチン受容体ＯＲＬ１へのノシセプチンの結合を特異的に阻害する物質は、癌性疼痛、術後疼痛、偏頭痛、痛風、慢性リウマチ、慢性疼痛、神経痛等の痛みを伴う疾患に対する鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；低血圧治療薬等として有用である。
【０００８】
ノシセプチン受容体ＯＲＬ１へのノシセプチンの結合を特異的に阻害する物質としては、例えばＷＯ９９／０２９６９６号、ＷＯ００／２７８１５号、ＷＯ０１／８３４５４号、ＷＯ０３／４００９９号、ＷＯ０３／６４４２５号に開示がある。これらの化合物は、いずれもベンゼン骨核にシクロアルカンが縮合した骨核を有しているが、本発明は、ピリジン骨核にシクロアルカンが縮合しており、骨核が異なるものである。
【０００９】
一方、テトラヘドロンレターズ、２０００年、４１巻、９８２９〜９８３３頁には下記構造を有する化合物が開示されている。
【００１０】
【化１】
この化合物は、ハロペリドールの誘導体として開発されたものであり、作用メカニズムは、本発明化合物と異なるものである。
【特許文献１】ＷＯ９９／０２９６９６号、
【特許文献２】ＷＯ００／２７８１５号、
【特許文献３】ＷＯ０１／８３４５４号、
【特許文献４】ＷＯ０３／４００９９号、
【特許文献５】ＷＯ０３／６４４２５号、
【非特許文献１】テトラヘドロンレターズ、２０００年、４１巻、９８２９〜９８３３頁、
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、ノシセプチン受容体ＯＲＬ１へのノシセプチンの結合を阻害する化合物の結晶を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
臨床試験および安定性試験において多形結晶が一定に保たれないと、用いられた、または測定された正確な用量があるロットから次のロットまで同等にならないことから、医薬化合物の多形結晶は、適当な剤形の開発に関連する重要な事柄である。医薬化合物を使用目的で製造する場合には、それぞれの投与において送達される多形結晶を知ることにより、製造工程で同一の結晶形が用いられ、それぞれの用量に同量の薬物が含まれていることを保証することが重要である。したがって、単一の多形結晶あるいは何種類かの既知の多形結晶の組合せが存在することを確かめることが不可欠である。さらに、ある種の多形結晶は、大きな熱力学的安定性を示し、医薬品製剤に包含する場合に、他の多形結晶に比べてより適していることもある。
【００１３】
本発明は、ノシセプチン受容体ＯＲＬ１へのノシセプチンの結合を阻害する化合物である、（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のA形結晶を提供する。
【００１４】
化合物（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オールは、下式の構造を有する。
【００１５】
【化２】
【００１６】
そして、この化合物には、Ａ形、B形、C形と呼ばれる多形結晶が存在し、B形、C形の結晶は、溶媒中で平衡化することによりA形へと変化する。すなわち、Ａ形は、この化合物の他の結晶形を上回る優れた特性を有しており、無水物で非吸湿性であり、他の多形結晶に比べて熱力学的により安定であり、医薬品製剤に包含する場合にもより安定であり、且つ生体内に取り込まれたときに高いバイオアベイラビリティを有する。
【００１７】
Ａ形結晶は、典型的には、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．１°）約１３．６°、１５．０°、１５，７°、１８．１°、２２．９°、２３．３°、２７．４°、２８．２°および２９．５°に主要なピークを有し、より詳しくは、回折角度（２θ±０．１°）２３．３°、１５．０°および１５．７°に強いピークを有し、回折角度（２θ±０．１°）２３．３°、１５．０°、１５．７°、２８．２°、２２．９°および１８．９°に中程度のピークを有し、そして、回折角度（２θ±０．１°）２９．５°、２７．４°および１３．６°にもピークを有する。そして、好ましくは、粉末Ｘ線回折において、図１に示される回折パターン又はこれと結晶学的に同等の回折パターンを示す。
【００１８】
Ａ形結晶は、示差走査熱量計測定において、２８６−２８９℃に吸熱ピークを有している。又、２０７℃付近にも小さな吸熱ピークを有している。
【００１９】
Ａ形結晶を調製する際の出発の（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オールの形態学的組成は特に限定されず、塩酸塩の非晶形、Ｂ形、Ｃ形結晶からＡ形結晶に平衡化させることができる。
【００２０】
本発明の化合物、（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩は、癌性疼痛、術後疼痛、偏頭痛、痛風、慢性リウマチ、慢性疼痛、神経痛等の痛みを伴う疾患に対する鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；低血圧治療薬等として有用である。特にA形結晶は、バイオアベイラビリティが高いので、他の結晶形のものと比べて少ない量で作用が発現しやすい。
【００２１】
したがって、本発明はさらに、この結晶を活性成分として含む医薬品製剤およびある種の障害の治療におけるこのＡ形結晶およびその製剤の用途に関する。
【発明の効果】
【００２２】
この発明によれば、ノシセプチンのノシセプチン受容体への結合に拮抗する作用を有する物質のなかでも、熱力学的に安定であり、医薬品製剤に包含する場合にも安定であり、且つ生体内に取り込まれたときに高いバイオアベイラビリティを有する物質が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
Ａ形結晶の調製
（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オールは、以下のスキームにより調製可能である。
【００２４】
【化３】
【００２５】
プロセス１
化合物１とプロパルギルアミンとをアルコール溶媒中、NaAuCl4の存在下で反応させ、化合物２とする。続いて化合物２をｍ−クロロ過安息香酸を用いて酸化し、化合物３とする。化合物３を無水酢酸中で加熱反応し、化合物４を得た後、化合物４のアセチル基を加水分解して化合物５を得る。ここで、化合物５は、シス体／トランス体に分割可能である。
【００２６】
化合物５のトランス体の水酸基をトリエチルシリル基で保護し化合物６としたのち、水素化リチウムアルミニウムにより還元し、化合物７を得る。そして化合物７をトシル化して化合物８とする。
【００２７】
プロセス２
Boc-4−ピペリドンを塩基中でPhNTf2と反応させた後、ビス(ピナコレート)ジボラン、塩化［1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン］パラジウム（以下、「PdCl2(dppf)」という）及びdppfと反応させた後、２-クロロ-4-フルオロ-1-ヨードベンゼンと反応を行い、化合物９を得る。化合物９をハイドロボレーションして化合物１０を得る。化合物１０の保護基を除去し、ついで光学分割することにより、化合物１１を得る。
【００２８】
プロセス３
化合物８と化合物１１とをヨウ化ナトリウムの存在下、縮合し、化合物１２とし、更にトリエチルシリル基を除去して目的の化合物を得ることができる。
【００２９】
得られた（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オールを、メタノール、エタノール等の溶媒に溶解させ、例えば１N−HCｌ溶液を加えて塩酸塩を形成させ、溶媒を留去して塩酸塩の固体（非結晶形）を得る。
【００３０】
Ａ形結晶を調製する場合の原料となる（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩は、非結晶形であっても差し支えなく、又、Ｂ形、Ｃ形の結晶形を用いてもＡ形に平衡化が可能である。
【００３１】
平衡化は、（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩（非結晶形）を、例えばエタノールに溶解させ、ついでｎ−ヘプタン、アセトン等の溶媒を滴下して混合液を室温まで冷却することにより行なわれる。
【００３２】
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）
本発明化合物のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンは、３ｋｗＸ線発生器（ＣｕＫα１放射）およびＮａＩ（Ｔｉ）シンチレーション検出器を備えたPhilips Analytical X'Pert PRO X-ray Diffraction Systemで測定した。試料を周囲温度に維持し、３．５°から４０°（２シータ）まで測定した。その結果を、第１図に示す。
【００３３】
Ａ形（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩の特徴は、約１３．６°、１５．０°、１５，７°、１８．１°、２２．９°、２３．３°、２７．４°、２８．２°および２９．５°（２シータ±０．１°）に主要な反射を有するＸ線粉末回折パターンであった。
【００３４】
Ａ形結晶は、示差走査熱量計測定において、２８６〜２８９℃に吸熱ピークを有している。又、２０７℃付近にも小さな吸熱ピークを有している。
【００３５】
医薬組成物
本発明の化合物は、経口又は非経口的に投与することができ、その投与に適する形態に製剤化することにより、癌性疼痛、術後疼痛、偏頭痛、痛風、慢性リウマチ、慢性疼痛、神経痛等の痛みを伴う疾患に対する鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；低血圧治療薬等として使用することができる。
【００３６】
本発明の化合物は、実際に臨床的に使用する場合、通常、その投与形態に合わせて薬学的に許容されうる添加剤と共に各種剤形に製剤化した後投与することができる。その際の添加剤としては、製剤分野において通常用いられる各種の添加剤を使用することができ、具体的には例えば、ゼラチン、乳糖、白糖、酸化チタン、デンプン、結晶セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、トウモロコシデンプン、マイクロクリスタリンワックス、白色ワセリン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、無水りん酸カルシウム、クエン酸、クエン酸三ナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ソルビトール、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリソルベート、ショ糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン、硬化ヒマシ油、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸マグネシウム、軽質無水ケイ酸、タルク、植物油、ベンジルアルコール、アラビアゴム、プロピレングリコール、ポリアルキレングリコール、シクロデキストリン又はヒドロキシプロピルシクロデキストリン等が挙げられる。
【００３７】
これらの添加剤を用いて製剤化される剤形としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、坐剤等の固形製剤；例えばシロップ剤、エリキシル剤、注射剤等の液体製剤等が挙げられ、これらは、製剤分野における通常の方法に従って調製することができる。なお、液体製剤としては、用時に水又は他の適当な媒体に溶解又は懸濁させる形であってもよい。また、特に注射剤の場合、必要に応じて生理食塩水又はブドウ糖液に溶解又は懸濁させてもよく、更に緩衝剤や保存剤を添加してもよい。
【００３８】
これらの製剤は、本発明の結晶を医薬組成物を基準にして１〜１００重量％、好ましくは１〜６０重量％の割合で含有することができる。これらの製剤は、さらに、治療上有効な他の化合物を含んでいてもよい。
【００３９】
本発明の化合物を、癌性疼痛、術後疼痛、偏頭痛、痛風、慢性リウマチ、慢性疼痛、神経痛等の痛みを伴う疾患に対する鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；低血圧治療薬等として使用する場合、その投与量及び投与回数は、患者の性別、年齢、体重、症状の程度及び目的とする治療効果の種類や範囲等により変えることができる。又、投与量は通常、１日あたり体重１ｋｇにつき０．００１から５０ｍｇであり、単回または複数回で投与することができる。投与量は、１日あたり約０．０１から約２５ｍｇ／ｋｇであるのが好ましく、１日あたり約０．０５から約１０ｍｇ／ｋｇであるのがより好ましい。
【実施例】
【００４０】
以下に実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらによってなんら限定されるものではない。
【００４１】
実施例
Ａ形（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩の製造
プロセス１
（６Ｒ，８Ｓ）−トルエン−４−スルホン酸−８−トリエチルシラニルオキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−イルメチルエステルの合成
４−シクロヘキサノンカルボン酸エチル(100g、0.588mol)とNaAuCl4・2H2O(6.0g)のエタノール溶液(500mL)に、ゆっくりとプロパルギルアミン(75.3mL)を加えた。還流下、一昼夜攪拌後、反応液を室温まで冷却し、セライトろ過後、ろ液を減圧下、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、1:1)により精製し、５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−カルボン酸エチル（化合物２）を赤褐色オイルとして124ｇ(>100%不純物を含む)得た。
【００４２】
化合物２(124g)のクロロホルム溶液(800mL)に０℃にてm−クロロ過安息香酸(1.5eq、153g)を加えた。混合物を室温で２時間攪拌後、水で希釈した。得られた混合物をクロロホルムで抽出し、有機層を飽和亜硫酸水素ナトリウム溶液、飽和重曹溶液で順次洗浄し、ついで硫酸ナトリウム上で乾燥後、減圧下で濃縮し、130gの５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−カルボン酸エチル１−オキシド（化合物３）を得た。
【００４３】
上記で得られた化合物３を無水酢酸(300ｍL)に溶解し、１３０℃で１時間攪拌した。溶媒を留去後、残渣を酢酸エチルに溶解し、酢酸エチルを飽和重曹にて洗浄した。得られた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、3:1〜1:1)にて精製し、78.2gの８−アセトキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−カルボン酸エチル（化合物４）を赤褐色オイル状で得た。化合物４は、シス／トランス混合物（1：1）であり、不純物を含む。
【００４４】
化合物４（78.2ｇ）のTHF（500ｍL）溶液に０℃にてNaOEt（1.0eq）を加え、混合物を室温で３０分攪拌した。ついで飽和塩化アンモニム水溶液を用いてクエンチした。得られた混合物を水で希釈後、混合物をクロロホルム抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、2:1〜1:1)にて精製し、18.7ｇ（化合物１から14％）の（６ＲＳ，８ＳＲ）−８−ヒドロキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−カルボン酸エチル（化合物５）(シス体)をオレンジの固体として得、又、化合物５のトランス体42.2gを赤褐色固体として得た。
【００４５】
化合物５のトランス体のDMF（700ｍL）溶液にイミダゾール(300eq)、トリエチルシリルクロリド(2.0eｑ)を加え、室温で３時間攪拌した。反応液を酢酸エチルで希釈後、得られた溶液を飽和食塩水、水で順次洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、9:1〜17:3)にて精製し、33.7g(化合物１から17％)の（６ＲＳ，８ＳＲ）−８−トリエチルシラニルオキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−カルボン酸エチルエステル（化合物６）を青白色オイル状で得た。
【００４６】
化合物６（78.2ｇ）のTHF(500mL)溶液に０℃にて水素化リチウムアルミニウム(0.8eq)を加え、室温で１０分間攪拌した。水を用いてクエンチした後、混合物をセライトろ過し、ついでろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、2:1〜1:1)にて精製し、31.4ｇ(>100%)のラセミ体の化合物７を黄青色オイルとして得た。ラセミ体の化合物７の光学分割は、キラルパックAD(hexane/IPA、50:1、0.1wt%Et2NH含有、流速:200mL/min)により行ない、（６Ｒ，８Ｓ）及び（６R，８R）の（８−トリエチルシラニルオキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−イル）メタノール（化合物７）の光学活性アイソマー(15.3g、99.9%ee)を先行画分から得た。
【００４７】
化合物７(15.3g)のクロロホルム(400mL)溶液に、氷冷下、トシルクロリド(1.5eq)、トリエチルアミン(3.0eq)、ジメチルアミノピリジン(0.1eq)を加え、室温で２．５時間攪拌した。反応液を濃縮後、得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。更に有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥後、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane/EtOAc、9:1〜2:1)にて精製し、22.9g(98%)の（６Ｒ，８Ｓ）−トルエン−４−スルホン酸−８−トリエチルシラニルオキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−６−イルメチルエステル（化合物８）を青白色オイル状で得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．６０（３Ｈ，ｍ），０．８８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），１．５９（１Ｈ，ｍ），１．９４（１Ｈ，ｍ），２．４５（３Ｈ，ｓ），２．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．１，１６．５Ｈｚ），２．６７（１Ｈ，ｍ），２．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．１，１６．５Ｈｚ），４．０１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．２，９．５Ｈｚ），４．１０（１Ｈ，ｍ），４．８２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．９Ｈｚ），７．０８（１Ｈ，ｍ），７．３４（３Ｈ，ｍ），７．７９（２Ｈ，ｍ），８．３８（１Ｈ，ｍ）
ＥＳＩ−ＭＳ Ｆｏｕｎｄ：ｍ／ｚ ４４８．３［Ｍ＋Ｈ］＋
【００４８】
プロセス２：
（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）ピペリジン−３−オールの合成
1-Boc-4-ピペリドン(251.3g、1.261mol)のTHF(6L)溶液にリチウムヘキサメチルシラジド(1.6L、1.0M in THF)を−７８℃にてカニューレを用いて加え、同温度で１時間攪拌した。得られた反応溶液にPhNTf2(450.5g、1.26lmol)のTHF(1.5L)溶液を１５分かけて滴下した。−７８℃で３０分攪拌後、更に２℃で３時間攪拌した。反応液に水(4L)を加え、水層を酢酸エチルを用いて抽出した。次いで有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をジオキサン(9L)に溶解し、酢酸カリウム(371.3g、3.783mol)、ビス(ピナコレート)ジボラン(320.2g、1.261mol)、PdCl2(dppf)(51.5g、0.063mol)及びdppf(35.0g、0.063mol)を加え、８０℃で１２時間攪拌した。反応液を氷水(4.5L)に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下濃縮した。次いで残渣をDMF(8L)に溶解させ、得られた溶液に炭酸カリウム(522.8g、3.783mol)と２-クロロ-4-フルオロ-1-ヨードベンゼン(323.4g、1.261mol)を加え、８０℃で２１時間攪拌した。反応液を氷水(8L)中に注ぎ、ジエチルエーテルを用いて抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、ついで減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(n-Hexane/EtOAc=20:1〜10:1)により精製し、４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−１−t−ブチルオキシカルボニル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン（化合物９）(154.6g、39%)をオレンジ色のオイル状で得た。
【００４９】
R-Alpine-boramine(268.5g、0.645mol)のDME(2.7L)溶液にBF3OEt(162mL、1.290mol)を滴下し、室温で2時間攪拌した。得られた溶液に化合物９(154.5g、0.496mol)のDME(800mL)溶液を約30分かけて滴下し、室温で13時間攪拌した。更に、得られた溶液にエタノール(110mL)、水(55mL)、5N-NaOH溶液(200mL)及び30%H2O2を順次加え、室温で10時間攪拌した。反応液を水(2L)に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(n-hexane/EtOAc=10:1〜5:1〜3:1〜1:1)で精製し、４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−１−t-ブチルオキシカルボニルピペリジン−３−オール（化合物１０）(84.8g、52%)を無色オイル状で得た。
【００５０】
化合物１０(84.6g、0.257mol)を4N-HCl/Dioxane(700mL)に溶解し、室温で4時間攪拌した。ついで5N-NaOH溶液を０℃(ice bath)でゆっくりと加え、10分間攪拌した。反応液を酢酸エチルで抽出し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下濃縮して粗生成物(53.6g、91%)を淡黄色固体として得た。得られた結晶をキラルパックAD(内径5.0cmｘ長さ50cm、n-Hexane/EtOH/Et2NH=900:100:1)により精製し、（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）ピペリジン−３−オール（化合物１1）(slower、37.3g、63%)を淡茶色固体として得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ），２．１１（１Ｈ，ｍ），２．５５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ），２．７０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ），３．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ），３．３６（２Ｈ，ｍ），４．２３（１Ｈ，ｂｓ），６．９９（１Ｈ，ｍ），７．１９（２Ｈ，ｍ）
ＥＳＩ−ＭＳ Ｆｏｕｎｄ：ｍ／ｚ ２３０［Ｍ＋Ｈ］＋
【００５１】
プロセス３：化合物８と化合物１1の縮合
化合物８(20.0g、44.68mmol)、化合物１1(12.3g、53.55mmol)、ヨウ化ナトリウム(67.0g、0.44７mol)及びトリエチルアミン(31.1mL、0.223mol)のDMF(1L)溶液を８０℃で12時間攪拌し、得られた反応液を氷水(1L)に注ぎ、ついで酢酸エチルにて抽出した。有機層を水及び飽和食塩水で順次洗浄後、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(n-hexane/EtOAc=1:1〜CHCl3/MeOH=20:1)にて精製し、（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−８−トリエチルシラニルオキシ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン（化合物１２）(18.2g、81%)を淡茶色オイル状で得た。
【００５２】
化合物１２(18.1g、35.8mmol)のTHF(400mL)溶液にTBAF(179mL、1.0M in THF)を室温で加え、13時間攪拌した。ついで反応液に飽和重炭酸ナトリウム溶液(400mL)及び水(400mL)を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をNHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(CHCl3/MeOH=100:1〜10:1)で精製し、ついで酢酸エチルで洗浄することにより（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール(7.78g、56%)を固体として得た。
【００５３】
上記化合物（7.77ｇ、19.9mmol）をメタノール(100mL)に懸濁させ、この懸濁液に1N-HClを滴下し、室温で30分間攪拌した後、溶媒を減圧下留去した。ついで得られた塩酸塩を８０℃にてエタノール(360mL)に溶解させたのち、n-Heptane(360mL)を滴下し、混合液をゆっくり室温まで冷却した。得られた沈殿を濾別し、n-Heptane/EtOH混合溶液(1:1)にて洗浄し、室温で乾燥して、塩酸塩(6.67g、78%)を針状の白色結晶として得た。
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：１．６５−１．８１（１Ｈ，ｍ），１．８３−２．０９（２Ｈ，ｍ），２．２０−２．３１（１Ｈ，ｍ），２．４９−２．７８（３Ｈ，ｍ），２．８０−２．９６（１Ｈ，ｍ），３．００−３．１８（３Ｈ，ｍ），３．１８−３．３４（１Ｈ，ｍ），３．４５−３．７２（２Ｈ，ｍ），４．２０−４．３５（１Ｈ，ｍ），４．４７（２Ｈ，ｓ），４．７５−５．００（１Ｈ，ｍ），７．０２−７．１６（１Ｈ，ｍ），７．１６−７．３３（２Ｈ，ｍ），７．４０−７．５２（１Ｈ，ｍ），７．６０−７．７１（１Ｈ，ｍ），８．３５−８．４３（１Ｈ，ｍ）
ＥＳＩ−ＭＳ Ｆｏｕｎｄ：ｍ／ｚ ３９１．１［Ｍ＋Ｈ］＋
【００５４】
このようにして得られた（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のＡ形結晶について、全自動粉末X線回折装置X'pert PROを用い、PW3373/00 ceramic Cu LFF X線チューブK-α照射により、粉末X線回折を行った。測定条件は以下の表１の通りであり、以下の表２に示すデータが得られた。
【００５５】
【表１】
【００５６】
【表２】
【００５７】
（製剤例１）
（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のＡ形結晶１０部、重質酸化マグネシウム１５部及び乳糖７５部を均一に混合して、３５０μｍ以下の粉末状又は細粒状の散剤とする。この散剤をカプセル容器に入れてカプセル剤とする。
【００５８】
（製剤例２）
（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のＡ形結晶４５部、澱粉１５部、乳糖１６部、結晶性セルロース２１部、ポリビニルアルコール３部及び蒸留水３０部を均一に混合した後、破砕造粒して乾燥し、次いで篩別して直径１４００〜１８０μｍの大きさの顆粒剤とする。
【００５９】
（製剤例３）
製剤例２と同様の方法で顆粒剤を作製した後、この顆粒剤９６部に対してステアリン酸カルシウム３部を加えて圧縮成形し直径１０ｍｍの錠剤を作製する。
【００６０】
（製剤例４）
製剤例２の方法で得られた顆粒剤９０部に対して結晶性セルロース１０部及びステアリン酸カルシウム３部を加えて圧縮成形し、直径８ｍｍの錠剤とした後、これにシロップゼラチン、沈降性炭酸カルシウム混合懸濁液を加えて糖衣錠を作製する。
【００６１】
これらの製剤は、また、治療上有効な他の化合物を含んでいてもよい。
【００６２】
本発明の化合物の医薬としての有用性は、例えば、下記の薬理試験例により証明される。
薬理試験例１（ノシセプチン受容体結合阻害実験）
ヒトノシセプチン受容体遺伝子をコードするｃＤＮＡを発現ベクターｐＣＲ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）に組み込み、ｐＣＲ３／ＯＲＬ１を作製した。次に、ｐＣＲ３／ＯＲＬ１をトランスフェクタム（Ｎｉｐｐｏｎｇｅｎｅ社製）を用いてＣＨＯ細胞に導入し、１ｍｇ／ｍｌ Ｇ４１８に耐性の安定発現株（ＣＨＯ／ＯＲＬ１細胞）を得た。この安定発現株より膜画分を調製し、受容体結合実験を行なった。膜画分１１μｇ、５０ｐＭ［１２５Ｉ］Ｔｙｒ１４−Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ社製）、１ｍｇのＷｈｅａｔｇｅｒｍ ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ ＳＰＡ ｂｅａｄｓ（ＰＶＴベースのもの；Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ社製）及び被験化合物をＮＣ ｂｕｆｆｅｒ（５０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、１０ｍＭ塩化ナトリウム、１ｍＭ塩化マグネシウム、２．５ｍＭ塩化カルシウム、０．１％ＢＳＡ、０．０２５％バシトラシン、ｐＨ７．４）に懸濁させ、３７℃で６０分間インキュベーションした後、放射活性を測定した。ノシセプチン受容体に対する結合活性は、本発明の化合物による［１２５Ｉ］Ｔｙｒ１４−Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｎ結合の５０％阻害濃度（ＩＣ５０値）で表示する。その結果、本発明化合物は、9.00ｎＭであった。
【００６３】
薬理試験例２（ノシセプチン誘導Ｇ蛋白質活性化に対する拮抗作用）
ノシセプチン受容体ＯＲＬ１を安定発現したＣＨＯ細胞を用いて、ノシセプチン誘導Ｇ蛋白質活性化に対する被験化合物の作用を検討した。ＣＨＯ／ＯＲＬ１細胞より調製した膜画分、５０ｎＭノシセプチン、２００ｐＭ ＧＴＰγ［３５Ｓ］（ＮＥＮ社製）、１．５ｍｇのＷｈｅａｔｇｅｒｍ ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ ＳＰＡ ｂｅａｄｓ（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ社製）及び被験化合物をＧＤＰ ｂｕｆｆｅｒ（２０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、１００ｍＭ塩化ナトリウム、１０ｍＭ塩化マグネシウム、１ｍＭ ＥＤＴＡ、５μＭ ＧＤＰ、ｐＨ７．４）中で混合し、２５℃で１５０分間インキュベートした後、放射活性を測定した。ノシセプチン誘導Ｇ蛋白質活性化に対する拮抗作用は、本発明化合物によるＧＴＰγ［３５Ｓ］結合の５０％阻害濃度（ＩＣ５０値）で表示する。その結果、本発明化合物は、5.90ｎＭであった。
【００６４】
薬理試験例３（拮抗試験）
雄性ＩＣＲ（ＣＤ−１）マウス（20-40g）を使用し、ノシセプチンアゴニストにより生じる運動抑制に対する拮抗作用を観察した。即ち、２０cm×３０cm×２０cmのケージ内でのマウスの運動量を、赤外線センサーを用いて測定した。０．５％メチルセルロース液もしくは溶媒に溶かした試験化合物（1-10ｍｇ／ｋｇ）とノシセプチンアゴニスト（1ｍｇ／ｋｇ）を皮下投与し、６０分間の運動量を測定した。測定期間中のノシセプチンアゴニスト群の運動量と溶媒投与群の運動量の差を１００％として、試験化合物群の運動量を％で表すことにより評価した。その結果、本発明化合物を投与した場合の運動量は75％以上であった。
【図面の簡単な説明】
【００６５】
【図１】A形（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のX線粉末回折パターンである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のA形結晶。
【請求項２】
粉末X線回折において、回折角度（２シータ±０．１°）２３．３°、１５．０°および１５．７°（２シータ±０．１°）にピークを有する、請求項１に記載のA形結晶。
【請求項３】
粉末X線回折において、回折角度（２シータ±０．１°）２３．３°、１５．０°、１５．７°、２８．２°、２２．９°および１８．９°にピークを有する、請求項１に記載のA形結晶。
【請求項４】
粉末X線回折において、回折角度（２シータ±０．１°）１３．６°、１５．０°、１５，７°、１８．１°、２２．９°、２３．３°、２７．４°、２８．２°および２９．５°にピークを有する、請求項１に記載のA形結晶。
【請求項５】
粉末Ｘ線回折において、図１に示される回折パターン又はこれと結晶学的に同等の回折パターンを示す、請求項１に記載のA形結晶。
【請求項６】
薬学的に許容される添加剤および有効量の請求項１〜５に記載のA形結晶を含む医薬組成物。
【請求項７】
化合物（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のA形結晶を有効成分として含有する、鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；又は低血圧治療薬。
【請求項１】
化合物（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のA形結晶。
【請求項２】
粉末X線回折において、回折角度（２シータ±０．１°）２３．３°、１５．０°および１５．７°（２シータ±０．１°）にピークを有する、請求項１に記載のA形結晶。
【請求項３】
粉末X線回折において、回折角度（２シータ±０．１°）２３．３°、１５．０°、１５．７°、２８．２°、２２．９°および１８．９°にピークを有する、請求項１に記載のA形結晶。
【請求項４】
粉末X線回折において、回折角度（２シータ±０．１°）１３．６°、１５．０°、１５，７°、１８．１°、２２．９°、２３．３°、２７．４°、２８．２°および２９．５°にピークを有する、請求項１に記載のA形結晶。
【請求項５】
粉末Ｘ線回折において、図１に示される回折パターン又はこれと結晶学的に同等の回折パターンを示す、請求項１に記載のA形結晶。
【請求項６】
薬学的に許容される添加剤および有効量の請求項１〜５に記載のA形結晶を含む医薬組成物。
【請求項７】
化合物（６Ｒ，８Ｓ）−６−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−イルメチル］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−８−オール・塩酸塩のA形結晶を有効成分として含有する、鎮痛薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬耐性克服薬；モルヒネに代表される麻薬性鎮痛薬による依存性もしくは退薬性症候群克服薬；鎮痛作用増強薬；抗肥満薬もしくは食欲調節薬；加齢、脳血管障害及びアルツハイマー病に代表される学習記憶力低下もしくは痴呆症状の改善薬もしくは予防薬；注意欠陥多動性障害及び学習障害に代表される発達期認知機能改善薬；精神分裂症治療薬；パーキンソン病及び舞踏病に代表される退行性神経変性疾患治療薬；抗うつ薬もしくは感情調節薬；尿崩症治療薬もしくは予防薬；多尿症治療薬もしくは予防薬；又は低血圧治療薬。
【図１】
【公開番号】特開２００６−２４１０９６（Ｐ２００６−２４１０９６Ａ）
【公開日】平成１８年９月１４日（２００６．９．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−６０６３２（Ｐ２００５−６０６３２）
【出願日】平成１７年３月４日（２００５．３．４）
【出願人】（０００００５０７２）萬有製薬株式会社 (51)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年９月１４日（２００６．９．１４）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年３月４日（２００５．３．４）
【出願人】（０００００５０７２）萬有製薬株式会社 (51)
【Ｆターム（参考）】
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