ベンジルイソキノリン誘導体またはビスベンジルイソキノリン誘導体を含有する向精神薬、鎮痛薬および／または抗炎症薬、ならびに健康食品
【課題】
天然物由来で、長期に服用しても安全な向精神薬、特には鬱病の症状を予防および／または軽減する作用を有する向精神薬を提供すること。
【解決手段】
特定のベンジルイソキノリン誘導体である、アルメパビン、Ｏ−メチルアルメパビンおよびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を有効成分として含有する鬱病の症状を予防および／または軽減するための向精神薬。
天然物由来で、長期に服用しても安全な向精神薬、特には鬱病の症状を予防および／または軽減する作用を有する向精神薬を提供すること。
【解決手段】
特定のベンジルイソキノリン誘導体である、アルメパビン、Ｏ−メチルアルメパビンおよびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を有効成分として含有する鬱病の症状を予防および／または軽減するための向精神薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、蓮子心由来のベンジルイソキノリン誘導体またはビスベンジルイソキノリン誘導体を含有する向精神薬、鎮痛薬および／または抗炎症薬、ならびに健康食品、該誘導体の向精神薬、鎮痛薬および／または抗炎症薬、ならびに健康食品の製造のための使用、該誘導体を使用する精神疾患、疼痛および／または炎症の予防および／または治療の方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年のストレス社会を反映し、精神疾患は増加の一途をたどっている。精神疾患は社会への適応が困難になるため、社会的な問題であるとともに、医療経済的にも重要な問題となっている。精神活動や行動に変化をもたらすことを主要な薬理作用とする薬物を向精神薬と称しているが、向精神薬は統合失調症治療薬、気分安定薬、抗鬱薬、抗不安薬、睡眠薬、鎮静薬、抗てんかん薬、嫌酒薬、抗パーキンソン病薬、抗痴呆薬などに分類され、それぞれ作用機序が異なる薬剤が開発され、各種の精神疾患治療に用いられている。
【０００３】
近年とくに広く知られ、社会的に重大な問題となってきている不安障害を例に取るならば、恐怖症性不安障害、広場恐怖、社会恐怖、パニック障害、全般性不安障害、強迫性障害、特定の恐怖症、他の不安障害に分類されるが、これらは互いに合併することもしばしばである。
【０００４】
また、鬱病の症状としては、抑うつ状態、アンヘドニア、精神運動抑制、思考／認知のゆがみ、不安と焦燥、自律神経症状などが挙げられる。
【０００５】
統合失調症とは、思考や行動、感情を１つの目的に沿ってまとめていく能力、すなわち統合する能力が長期間にわたって低下し、その経過中にある種の幻覚、妄想、ひどくまとまりのない行動が見られる病態であるが、うつ病や引きこもり、適応障害などと区別しにくいことがあり、確定診断は幻覚、妄想などの症状によって下される。しかし、この病気の原因は充分明らかにされておらず、単一の疾患であることにさえ疑いが向けられている。
【０００６】
前記症状の治療薬の例としては、抗鬱薬として現在使用されているものとして、イミプラミン、クロミプラミン、トリミプラミンなどの三環系抗鬱薬、マプロチリン、ミアンセリンなどの四環系抗鬱薬、トリアゾロピリジン系のトラゾドン、ベンズケトオキシム系の選択的セロトニン再取り込み阻害薬（ＳＳＲＩ）であるフルボキサミンなどが挙げられる。
【０００７】
また、睡眠剤としては、古くはバルビツール系睡眠薬があり、その後トリアゾラム、エチゾラム、ブロチゾラム、フルニトロラゼパム、ニトラゼパム、クアゼパム、ゾピクロンゾルピデム等のベンゾジアゼピン系睡眠薬が登場した。さらに抗不安薬としては、上記ベンゾジアゼピン系の薬剤やＳＳＲＩと称されるフルボキサミンやパロキセチンなどが推奨されてきている。
【０００８】
統合失調症の治療薬については、従来は脳内のドーパミン神経系に作用する薬物が用いられてきたが、副作用としての錐体外路障害（パーキンソン症候群）、すなわち動物実験系においてカタレプシーとして観測される副作用が問題となっている。最近ではセロトニン神経系にも作用する非定型統合失調症治療薬が導入され、治療効果を高めている。また従来から使用されている別の治療薬としては、緩和精神安定薬ともよばれ、主として、脳の視床、海馬、扁桃核などの大脳辺縁系に作用して、不安や緊張などの情動面の障害を選択的に改善し、また自律神経活動の安定効果を持つとされているベンゾジアゼピン系化合物やアザピロン系化合物が代表的な治療薬である。しかし、ベンゾジアゼピン系化合物では運動協調性障害、依存性、健忘、肝機能障害などの副作用が、アザピロン系化合物では肝機能障害、セロトニン症候群、眠気、ふらつき、めまいなどの副作用などの問題も残されている。
【０００９】
また、三環系あるいは類似の環状抗鬱薬では、抗コリン作用である口渇、目の調節障害（霧視）、便秘、排尿困難、抗ヒスタミン作用に起因するとされる体重増加、抗アドレナリン作用といえる低血圧、めまい、ふらつき、そしてさらに心毒症などの副作用や過剰摂取による急性中毒等が指摘されている。
【００１０】
また、上記ＳＳＲＩ群の薬剤においては副作用がかなり軽減されているとされてはいるが、セロトニン症候群の発症の危険が指摘されている。
【００１１】
一方、前記のような中枢神経系の異常に起因する各種の症状を軽減させる為の健康食品としては、例えばセントジョンズワートが有名で、鬱病に有効であるとされている（非特許文献１）。セントジョンズワートは、西洋オトギリ草とも云われ、欧州では古くから創傷や神経痛などの治療薬として使われてきたといわれる。近年では健康食品のタブレットとして欧米を中心に、我が国でも広く用いられている。
【００１２】
しかしながら、セントジョンズワートに含まれる成分によって重篤な副作用として光過敏症が表れることが知られているし、また成分中にシクロスポリンの体内動態に影響を及ぼす副作用も知られている。
【００１３】
次に、鎮痛薬には、麻薬性鎮痛薬と解熱性鎮痛薬が知られている。モルヒネを代表とする麻薬性鎮痛薬は強力な鎮痛効力を有し、癌性疼痛、術後の疼痛など激しい痛みに有効である。モルヒネなどの麻薬性鎮痛薬は、中枢神経内でオピオイド受容体を介して強力な鎮痛作用を示すが、薬物依存を起こしやすいという問題がある。解熱性鎮痛薬は鎮痛効力はモルヒネほど強くなく内臓痛などには無効であるが依存性はないことから、歯痛、頭痛、神経痛、関節炎などに広く使用されている。解熱鎮痛剤には、中枢神経に作用点を有するアセトアミノフェンに代表される抗炎症作用を有しない薬物や、アスピリンなどの、抗炎症作用を有し鎮痛作用を発揮する非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）が知られている。非ステロイド性抗炎症薬の作用機序はプロスタグランジンの生合成阻害にあると考えられている。しかしながら、非ステロイド性抗炎症薬は効力が比較的強い薬剤ほど胃腸障害などの副作用の発生頻度が高くなる傾向がある。
【００１４】
スイレン科の植物であるハス（Nelumbo nucifera Gaertner）は古くから、薬膳の食材として、根から花まで広く利用されている。とくに成熟した種子の緑色胚芽（Nelumbinis embryo）である蓮子心は、東洋医学では、熱を去る、止血する、精を鈍らせる等の効能を持つとして、熱病、労心吐血、遺精の治療に使用されている（非特許文献２および非特許文献３）。
【００１５】
蓮子心のアルカロイドを中心とした成分研究としては、ベンジルイソキノリンアルカロイド類ならびに、ビスベンジルイソキノリンアルカロイド類の構造決定のデータが報告されている（非特許文献４、非特許文献５および非特許文献６）が、ビスベンジルイソキノリンアルカロイドの一種であるネフェリン以外では、薬効に関しての報告はされていない。
【００１６】
一方、蓮子心についての最近の薬効研究としては、古くは、西部らによって解熱作用、血圧降下作用、抗精神病作用の記載（非特許文献７）を見いだすが、これら作用については何ら充分なその根拠が示されていない。すなわち、西部らは、(1)蓮子心から４種のアルカロイドを精製単離したこと、(2)血圧降下についての動物試験方法、および(3)４種のアルカロイドのうちの１種であるネフェリンに血圧降下作用を認めたことのみを開示しているものであり、解熱作用および抗精神作用の事実については全くその根拠が示されておらず、また血圧降下作用についても具体的なデータは示されていない（非特許文献７）。さらに、鎮痛作用、抗炎症作用については全く報告されていない。
【００１７】
また、２００２年に２つの報告が日本薬学会でなされた。佐藤らはラットを用いての研究結果から、蓮子心に体温調節機能があることを報告し（非特許文献８）、川嶋らはヒト骨芽細胞の系で蓮子心抽出液の抗骨粗鬆作用を報告している（非特許文献９）。
【００１８】
一方、我々はマウスを用いた研究から、蓮子心の一成分であるネフェリンに自発運動抑制作用が認められたことを報告した（非特許文献１０）。
【００１９】
しかし、蓮子心成分については、上記以外の薬効について報告されている例は知られていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２０】
【非特許文献１】リンドレら、ブリティッシュ・メジカル・ジャーナル、３１３巻（１９９６年）２５３頁
【非特許文献２】「和漢薬百科事典」難波恒雄著、２１６頁
【非特許文献３】「中薬大辞典」上海科学技術出版社、小学館編集、（１９８５年）２７５０頁
【非特許文献４】古川ら、薬学雑誌、８４巻（１９６５年）３３５頁
【非特許文献５】冨田ら、ケミカル・ファーマスーティカル・ブレチン、１３巻（１９６５年）３９頁
【非特許文献６】國友ら、フィトケミストリー、１２巻（１９７３年）６６９頁
【非特許文献７】西部ら、ジャーナル・オブ・ナチュラル・プロダクツ誌、４９巻（１９８６年）５４７頁
【非特許文献８】佐藤ら，日本薬学会第１２３年会要旨集２ １１２頁
【非特許文献９】川島ら，日本薬学会第１２３年会要旨集２ １４６頁
【非特許文献１０】伊藤ら，日本生薬学会第５０回年会要旨集 １１６頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２１】
本発明の目的は、天然物由来で、長期に服用しても安全な向精神薬、特には統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される少なくとも１つの症状を予防および／または軽減する作用、および／または鎮静作用を有する向精神薬、ならびに健康食品を提供することである。
【００２２】
本発明の他の目的は、天然物由来で、長期に服用しても安全な鎮痛作用および／または抗炎症作用を有する薬剤、特には疼痛を予防および／または軽減する作用、および／または、炎症を予防および／または軽減する作用を有する薬剤、ならびに健康食品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００２３】
前記の目的で、より安全な中枢神経系作用物質および鎮痛、抗炎症作用物質を発見するために鋭意検討した結果、蓮子心より抽出されるベンジルイソキノリン誘導体およびビスベンジルイソキノリン誘導体に、安全性の高い向精神作用を示す物質および鎮痛、抗炎症作用物質を見出し、本発明を完成するに至った。
【００２４】
すなわち本発明は、下記に示す、蓮子心由来のベンジルイソキノリン誘導体またはビスベンジルイソキノリン誘導体を含有する向精神薬、鎮痛薬および／または抗炎症薬、ならびに健康食品、該誘導体の向精神薬、鎮痛薬および／または抗炎症薬、ならびに健康食品の製造のための使用、該誘導体を使用する精神疾患、疼痛および／または炎症の予防および／または治療の方法を提供する。
【００２５】
（１）一般式（Ｉ）：
【化１】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を有効成分として含有する向精神薬。
【００２６】
（２）向精神作用が、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される少なくとも１つの症状を予防および／または軽減する作用、および／または鎮静作用である前記（１）項記載の向精神薬。
【００２７】
（３）一般式（II）：
【化２】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を有効成分として含有する、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減するための向精神薬。
【００２８】
（４）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化３】
である前記（３）項記載の向精神薬。
【００２９】
（５）一般式（II）で表わされる化合物がリエンシニン：
【化４】
である前記（３）項記載の向精神薬。
【００３０】
（６）一般式（II）で表わされる化合物がイソリエンシニン：
【化５】
である前記（３）項記載の向精神薬。
【００３１】
（７）前記（１）項記載の一般式（Ｉ）で表わされる化合物；およびその塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含有することを特徴とする、向精神用健康食品。
【００３２】
（８）前記（３）項記載の一般式（II）で表わされる化合物；およびその塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含有することを特徴とする、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減するための健康食品。
【００３３】
（９）飲料またはドリンク剤である前記（７）項または（８）項記載の健康食品。
【００３４】
（１０）一般式（Ｉ）：
【化６】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；一般式（II）：
【化７】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびそれらの薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含有する鎮痛作用および／または抗炎症作用を有する薬剤。
【００３５】
（１１）鎮痛作用および／または抗炎症作用が抗炎症作用に基づく鎮痛作用である前記（１０）項記載の薬剤。
【００３６】
（１２）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化８】
である前記（１０）項または（１１）項記載の薬剤。
【００３７】
（１３）前記（１０）項記載の一般式（Ｉ）で表わされる化合物、一般式（ＩＩ）で表わされる化合物およびそれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含有することを特徴とする、疼痛および／または炎症を予防および／または軽減するための健康食品。
【００３８】
（１４）飲料またはドリンク剤である前記（１３）項記載の健康食品。
【００３９】
（１５）一般式（Ｉ）：
【化９】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、向精神薬を製造するための使用。
【００４０】
（１６）向精神作用が、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される少なくとも１つの症状を予防および／または軽減する作用、および／または鎮静作用である前記（１５）項記載の使用。
【００４１】
（１７）一般式（II）：
【化１０】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減するための向精神薬を製造するための使用。
【００４２】
（１８）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化１１】
である前記（１７）項記載の使用。
【００４３】
（１９）一般式（II）で表わされる化合物がリエンシニン：
【化１２】
である前記（１７）項記載の使用。
【００４４】
（２０）一般式（II）で表わされる化合物がイソリエンシニン：
【化１３】
である前記（１７）項記載の使用。
【００４５】
（２１）前記（１５）項記載の一般式（Ｉ）で表わされる化合物；およびその塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、向精神用健康食品を製造するための使用。
【００４６】
（２２）前記（１７）項記載の一般式（II）で表わされる化合物およびその塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減するための健康食品を製造するための使用。
【００４７】
（２３）健康食品が飲料またはドリンク剤である前記（２１）項または（２２）項記載の使用。
【００４８】
（２４）一般式（Ｉ）：
【化１４】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；一般式（II）：
【化１５】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびそれらの薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、鎮痛作用および／または抗炎症作用を有する薬剤を製造するための使用。
【００４９】
（２５）鎮痛作用および／または抗炎症作用が抗炎症作用に基づく鎮痛作用である前記（２４）項記載の使用。
【００５０】
（２６）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化１６】
である前記（２４）項または（２５）項記載の使用。
【００５１】
（２７）前記（２４）項記載の一般式（Ｉ）で表わされる化合物、一般式（ＩＩ）で表わされる化合物およびそれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、疼痛および／または炎症を予防および／または軽減するための健康食品を製造するための使用。
【００５２】
（２８）健康食品が飲料またはドリンク剤である前記（２７）項記載の使用。
【００５３】
（２９）一般式（Ｉ）：
【化１７】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を、有効成分として、必要な患者に投与することを特徴とする、精神疾患を予防および／または軽減し、および／または鎮静作用をもたらす方法。
【００５４】
（３０）精神疾患が、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される少なくとも１つの症状である前記（２９）項記載の方法。
【００５５】
（３１）患者が鎮静作用を必要としている前記（２９）項記載の方法。
【００５６】
（３２）前記化合物が、該化合物を含有する健康食品の一部として経口投与される前記（２９）項記載の方法。
【００５７】
（３３）健康食品が飲料またはドリンク剤である前記（３２）項記載の方法。
【００５８】
（３４）一般式（II）：
【化１８】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を、有効成分として必要な患者に投与することを特徴とする、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減する方法。
【００５９】
（３５）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化１９】
である前記（３４）項記載の方法。
【００６０】
（３６）一般式（II）で表わされる化合物がリエンシニン：
【化２０】
である前記（３４）項記載の方法。
【００６１】
（３７）一般式（II）で表わされる化合物がイソリエンシニン：
【化２１】
である前記（３４）項記載の使用。
【００６２】
（３８）前記化合物が、該化合物を含有する健康食品の一部として経口投与される前記（３４）項記載の方法。
【００６３】
（３９）健康食品が飲料またはドリンク剤である前記（３８）項記載の方法。
【００６４】
（４０）一般式（Ｉ）：
【化２２】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を、有効成分として、必要な患者に投与することを特徴とする、向精神作用をもたらす方法。
【００６５】
（４１）前記向精神作用が鎮静作用であり、かつ患者が鎮静作用を必要としている前記（４０）項記載の方法。
【００６６】
（４２）前記向精神作用が精神疾患の軽減作用であり、かつ患者が統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される少なくとも１つの症状を有する前記（４０）項記載の方法。
【００６７】
（４３）一般式（Ｉ）：
【化２３】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；一般式（II）：
【化２４】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびそれらの薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を、有効成分として、必要な患者に投与することを特徴とする、疼痛および／または炎症を予防および／または治療するための方法。
【００６８】
（４４）炎症による疼痛を予防および／または治療する前記（４３）項記載の方法。
【００６９】
（４５）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化２５】
である前記（４３）項または（４４）項記載の方法。
【００７０】
（４６）前記化合物が、該化合物を含有する健康食品の一部として経口投与される前記（４３）項記載の方法。
【００７１】
（４７）健康食品が飲料またはドリンク剤である前記（４６）項記載の方法。
【００７２】
本発明によって活性を見出された蓮子心由来のベンジルイソキノリン誘導体およびビスベンジルイソキノリン誘導体は、生体に対して毒性がなく安全性の高い中枢神経系疾患の予防効果および／または治療効果、疼痛および／または炎症の予防および／または治療効果を期待できる。また、健康食品、健康飲料としての利用も可能である。
【００７３】
さらに、本発明の向精神薬は、従来の薬剤と比較して副作用がなく、また広範囲な精神疾患、向精神作用に対して活性が見られ、非常に優れたものである。
【００７４】
さらに、本発明の鎮痛作用および／または抗炎症作用を有する薬剤は、従来の薬剤と比較して副作用がなく、また広範囲な疼痛、炎症に対して活性が見られ、非常に優れたものである。
【発明を実施するための形態】
【００７５】
本発明においてベンジルイソキノリン誘導体とは、一般式（Ｉ）
【化２６】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）
で表される化合物をいう。
【００７６】
本発明においてビスベンジルイソキノリン誘導体とは、一般式（II）：
【化２７】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）
で表わされる化合物をいう。
【００７７】
前記式（Ｉ）または（II）の化合物において、「置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基」におけるＣ1-6のアルキル基としては、たとえば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などの炭素数１〜６個の直鎖状または分岐鎖状のアルキル基などが用いられる。これらＣ1-6のアルキル基の置換基としては、たとえばハロゲン原子などがあげられる。「置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基」としては、天然の蓮子心に多量に含まれ、食経験があることなどの点からメチル基が好ましい。
【００７８】
前記式（Ｉ）または（II）の化合物において、「置換されていてもよいアリール基」におけるアリール基としては、フェニル基、ナフチル基、アントリル基などが用いられる。これらアリール基の置換基としては、たとえばハロゲン原子またはＣ1-6のアルキル基などが用いられ、置換されたアリール基としては、たとえば、トレイル基、フェネチル基などがあげられる。
【００７９】
「置換されていてもよいヘテロアリール基」におけるヘテロアリール基としては、フリル基、チオフェニル基、ピロリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イミダゾリル基、トリアゾリル基、ピリジル基、ピリミジル基、ピラゾニル基、キノリル基、ベンゾチオフェニル基、モルフォリル基などが用いられる。これらへテロアリール基の置換基としては、たとえばハロゲン原子またはＣ1-6のアルキル基などが用いられる。
【００８０】
本発明のベンジルイソキノリン誘導体の具体例としては、
【化２８】
【化２９】
などがあげられるがこれらに限定されるものではない。
【００８１】
本発明のビスベンジルイソキノリン誘導体の具体例としては、
【化３０】
などがあげられるがこれらに限定されるものではない。
【００８２】
さらに前記式（Ｉ）または式（II）の化合物の塩としては、薬学的に許容し得る塩であればどのようなものでも使用することができる。薬学的に許容し得る塩としては、無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩のいずれも可能であるが、具体的には、塩酸塩、グルコン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、サリチル酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パモ酸塩、安息香酸塩、酒石酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、ジ−ｐ−トルオイル酒石酸塩、酢酸塩、硫酸塩、ヨウ化水素酸塩、マンデル酸塩などがあげられる。
【００８３】
本発明の薬剤（向精神薬、鎮痛剤および／または抗炎症剤）および健康食品に含有される、式（Ｉ）および式（II）の化合物は、T. Kametani, S. Takano, J. Chem. Soc.(C), 1969, 298-300およびT.Kametani, H. Yagi, S.Kaneda, Chem. Pharm. Bull. 14(9), 947-980, (1966) に記載された方法と同一の方法、またはこれらと類似の方法により、合成することができる。
【００８４】
たとえば、式（Ｉ）の化合物は、それぞれ対応する置換基を有するフェネチルアミンとフェニル酢酸とをアミド化し、さらにオキシ塩化リンなどにより環化し、イソキノリン骨格を形成することにより合成することができる。また、必要に応じてイソキノリン骨格のアミンに既知の方法により置換基を導入することもできる。
【００８５】
式（II）の化合物は、たとえば、上述の式（Ｉ）の如くして得られるイソキノリン骨格を有する誘導体から銅などを触媒とするウルマン反応などのカップリング反応によって、誘導体２分子を縮合させてビスイソキノリン骨格を有する式（II）の化合物を合成することができる。
【００８６】
また、本発明の薬剤および健康食品に含有される、式（Ｉ）または式（II）の化合物は、従来の天然物からの抽出技術を使用して蓮子心から抽出したものを用いることができる。
【００８７】
本発明の薬剤および健康食品において、式（Ｉ）の化合物は一種または二種以上を組合わせて用いてもよく、式（II）の化合物も一種または二種以上を組合わせて用いてもよい。さらに、式（Ｉ）の化合物と式（II）の化合物を組合わせて用いることもできる。
【００８８】
蓮子心から抽出、単離する場合は、たとえば、蓮子心を乾燥させたのち、熱時メタノール、エタノール、含水エタノール、ヘキサンまたはクロロホルムなどの有機溶剤で抽出、濃縮する。また、このようにして得られる抽出物をさらにシリカゲルのような吸着剤に吸着させ、クロロホルム／メタノール混合物を溶離液として、単離精製することができる。また、本発明の式（Ｉ）または（II）の化合物を含有する抽出画分は、それ以上精製することなく、混合物の状態で本発明のベンジルイソキノリン誘導体またはジベンジルイソキノリン誘導体として、使用することができる。
【００８９】
このように、本発明の式（Ｉ）または式（II）の化合物としては、前記のように合成により製造されたものまたは蓮子心から抽出、単離されたもののどちらでも使用することができる。
【００９０】
また、本発明の薬剤および健康食品においては、式（Ｉ）または（II）の化合物を有効成分として調製することができるが、該化合物を主成分として含有する蓮子心の抽出物を使用することも可能である。
【００９１】
さらに、これらベンジルイソキノリン誘導体およびビスベンジルイソキノリン誘導体を含有する蓮子心は、前述したように古来より摂取されており、安全な食品である。また、蓮子心は、様々な漢方専門店より入手可能であり、たとえば、上海葯材公司（中国上海市延安路１１０号）などより入手可能である。
【００９２】
本発明の向精神薬の投与方法は特に限定されるものではないが、経口、静脈内、筋肉内、皮下、経皮、経粘膜または腹腔内投与などがあり、ヒトでの内服が容易である点から経口投与が好ましい。
【００９３】
本発明の向精神薬の剤形としては、種々の剤形が可能であるが、経口投与可能な剤形が好ましい。例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、溶液剤、酒精剤、シロップ剤等があげられるが、これらに限定されない。また、製剤には例えば、賦形剤、着香剤、着色剤、甘味剤、乳化剤、コーティング剤、ビタミンＣ、抗酸化剤などの薬剤的に許容できる種々の担体を加えることができるが、これらに限定されない。
【００９４】
本発明の向精神薬の投与量は、ベンジルイソキノリン誘導体の場合では、成人１日用量として０．１ｍｇ〜２００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１００ｍｇであり、ビスベンジルイソキノリン誘導体の場合では、１ｍｇ〜２０００ｍｇ、好ましくは１ｍｇ〜１０００ｍｇである。もちろん、このような投与量は、投与されるヒトの年齢、体重、症状、投与方法等に応じて変化させることもできる。
【００９５】
１日当たりの量を数回に分けて投与することもできる。また、他の抗鬱剤や治療法と組み合わせて投与することもできる。
【００９６】
本発明のベンジルイソキノリン誘導体を含有する向精神薬は、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減すること、または鎮静作用を示すことができる。
【００９７】
本発明の鎮痛薬および／または抗炎症薬の投与方法は特に限定されるものではないが、経口、静脈内、筋肉内、皮下、経皮、経粘膜または腹腔内投与などがあり、ヒトでの内服が容易である点から経口投与が好ましい。
【００９８】
本発明の鎮痛薬および／または抗炎症薬の剤形としては、種々の剤形が可能であるが、経口投与可能な剤形が好ましい。例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、溶液剤、酒精剤、シロップ剤等があげられるが、これらに限定されない。また、製剤には例えば、賦形剤、着香剤、着色剤、甘味剤、乳化剤、コーティング剤、ビタミンＣ、抗酸化剤などの薬剤的に許容できる種々の担体を加えることができるが、これらに限定されない。
【００９９】
本発明の鎮痛薬および／または抗炎症薬の投与量は、ベンジルイソキノリン誘導体の場合では、成人１日用量として０．１ｍｇ〜２００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１００ｍｇであり、ビスベンジルイソキノリン誘導体の場合では、１ｍｇ〜２０００ｍｇ、好ましくは１ｍｇ〜１０００ｍｇである。もちろん、このような投与量は、投与されるヒトの年齢、体重、症状、投与方法等に応じて変化させることもできる。
【０１００】
１日当たりの量を数回に分けて投与することもできる。また、他の鎮痛薬、抗炎症薬や治療法と組み合わせて投与することもできる。
【０１０１】
本発明のベンジルイソキノリン誘導体またはビスベンジルイソキノリン誘導体を含有する鎮痛薬および／または抗炎症薬は、頭痛、歯痛、神経痛、関節痛、筋肉痛、月経困難症、打撲痛、手術、外傷後の疼痛など各種の疼痛を予防および／または軽減することができる。また、関節炎、結合組織炎、痛風、慢性関節リウマチ、リウマチ熱、変形性関節症、手術、外傷後の炎症、上気道炎などの各種の炎症性疾患や炎症性病態を予防および／または軽減することができる。本発明の鎮痛薬および／または抗炎症薬は、特に抗炎症作用に基づく鎮痛作用を有効に発現すると考えられ、したがって炎症に起因する疼痛の予防および／または治療に有効である。
【０１０２】
本発明におけるもう１つの実施態様は、前記式（I）または式（II）の化合物を含有する健康食品を提供することである。
【０１０３】
本発明において「健康食品」とは、一般的に使用されている用語として、食品のうち「ふつうの食品よりも健康によいと称して売られている食品」のことをさす。現在我が国では、このいわゆる健康食品に関する単独の法律はなく、主に食品衛生法、栄養改善法、薬事法により規制をうけているが、平成１３年度４月から保健機能食品制度が創設され、これまであった特定保健用食品（特保）に加え一部のビタミン・ミネラルに関する栄養成分機能表示ができる「栄養機能食品」という分類ができ、これら全ての食品の総称を意味する。本発明の「健康食品」には、栄養補助食品の定義として、一般的な意味で、「栄養成分を補給し、又は特別の保健の用途に資するものとして販売の用に供する食品のうち、錠剤、カプセル等通常の食品の形態でないもの」などと表現されている、特別の保健の用途に資する「特殊用途食品」が含まれる。
【０１０４】
本発明の健康食品は、経口摂取できるものであればどのようなものでもよく、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、溶液剤、酒精剤、シロップ剤等とすることができる。また、式（Ｉ）または式（II）の化合物を原材料に配合することにより種々の飲食品の形態とすることができる。そのような飲食品としては、麺類、粥、リゾット、ゼリー、クッキー、スープ、飲料があげられるが、これらに限定されない。
【０１０５】
このような食品には他に、賦形剤、着香剤、着色剤、甘味剤、乳化剤、コーティング剤、ビタミンＣ、抗酸化剤などの薬剤的に許容できる種々の担体や、鉄、マグネシウム、カルシウム等のミネラル、ビタミン類、アルギン酸等の食物繊維のほか各種のタンパク質、脂質、乳糖等の糖類を加えることができる。
【０１０６】
また、本発明の健康食品に、西洋ニンジン抽出物、イチョウ葉抽出物、大豆抽出物、甘草抽出物、ザクロ抽出物、ヤムイモ抽出物などを組み合わせることにより、精神的ストレス等から陥る前記各症状への改善効果を有する健康食品を得ることもできる。
【０１０７】
ドリンク剤は、式（Ｉ）または（II）の化合物と水を主成分として混合して調製する。式（Ｉ）または（II）の化合物と、水との混合割合は、限定的ではないが、両者の重量比で、１対５０００から１対１００００００の範囲が適当であるが、好ましくは１対１００００、さらに好ましくは１対１０００００が推奨される。
【０１０８】
健康食品として、式（Ｉ）または式（II）の化合物を含有するタブレットを成形するためには、賦型剤および各種の添加剤、例えば、クリーミーパウダー、麦芽糖、セルロース粉末、シュガーエステル、リン酸カリウム、澱粉グリコール酸ナトリウム、焼成カルシウム、ボレー粉、シクロデキストリン、クエン酸マグネシウムなどを添加・混合した後、直接粉末圧縮法で打錠成形することによって製造することができる。
【０１０９】
本発明の健康食品、飲料の投与量は特に制限されず、投与形態、年齢、体重、症状に応じて適宜選択することができる。
【０１１０】
本発明の式（Ｉ）または（II）の化合物の中枢神経系の作用を評価する方法としては、一般的に使われているスクリーニング試験、すなわち向精神作用の範疇での各種作用や薬効の評価に用いられる動物試験法により評価することができる。たとえば、鎮静作用については、自発運動抑制試験（Hirose, A., Kato, T., Shimizu, H., Tanaka, H., Nakamura, N., Katsube, J., Jpn. J. Pharmacol. 53, 321-329 (1990)））、統合失調症治療作用については、メタンフェタミン誘発運動抑制試験（Hirose, A., Kato, T., Shimizu, H., Tanaka, H., Nakamura, N., Katsube, J., Jpn. J. Pharmacol. 53, 321-329 (1990)）、抗鬱作用については、強制水泳試験（Porsolt, R.D., Bertin, A., Jalfre, M., Arch. Int. Pharmacodyn. 299, 327-336 (1977)）、抗不安作用については、高架式十字迷路テスト（Lister, R.G., Psychopharmacology, 112, 13-20 (1993)）、強迫性障害治療作用については、ガラス玉覆い隠し行動試験（Njung’e, K., Hadley, S.L., Pharmacol. Biochem. Behav., 38, 65-67 (1991)）、睡眠障害改善作用については、チオペンタール睡眠増強試験（Sukma, M., Chaichamtipyuth, C., Murakami, Y., Tohda, M., Matsumoto, K., Watanabe, H., J. Ethopharmacology, 83, 87-94 (2002)）などである。
【０１１１】
また、従来の薬剤で見られる副作用である、運動協調性の低下やカタレプシー惹起については、ロータロッドテスト（Souri, E., Sharifzadeh, M., Farasam, H., Gharavi, N., J. Pharm. Pharmacol, 51, 853-855 (1999)）、カタレプシーテスト（Hirose, A., Kato, T., Shimizu, H., Tanaka, H., Nakamura, N., Katsube, J., Jpn. J. Pharmacol. 53, 321-329 (1990)）などの動物試験法により評価することができる。
【０１１２】
本発明の式（Ｉ）または（II）の化合物の鎮痛作用および／または抗炎症作用は、一般的に使われているスクリーニング試験、すなわち鎮痛作用、抗炎症作用の範疇での各種作用や薬効の評価に用いられる動物試験法により評価することができる。たとえば、酢酸誘発writhing試験（Koster, R., Anderson, M., de Beer, E. J., Fed. Proc. 18, 412(1959)）、tail-flick 試験（D'Amour, F. E., Smith, D. L., J. Pharmacol. Exp. Ther. 72, 74-79(1941)）、ホルマリン足蹠試験（Abbott, F. C., Franklin, K. B. J., Westbrook, R. C., Pain 60, 91-102(1995)）、ヒスタミン誘発足浮腫試験（Y. Oyanagui, Life Sci., 62, PL241-249(1998))などの動物試験法により評価できる。
【実施例】
【０１１３】
本発明を以下の製造例および実施例によりさらに詳しく説明するが、本発明はこれに限定されない。本発明によるベンジルイソキノリン誘導体およびビスベンジルイソキノリン誘導体には、当業者によれば種々の変更、修飾が可能であるが、これらの変更、修飾も本発明に含まれる。
【０１１４】
製造例１（ビスベンジルイソキノリン誘導体の抽出）
まず蓮子心（上海葯材公司、中国上海市延安路１１０号）を水にて十分洗浄後、乾燥する。乾燥体５００ｇを、エタノール１Ｌを用いて加熱還流処理を３回行った。得られた抽出液を濾別後、減圧下乾燥し、ペーストを約５０ｇ得た。得られたペーストの薄層クロマトグラフィー（シリカゲル６０Ｆ254、クロロホルム／メタノール／アンモニア水 ９０／９／１）のＲｆ値からビスベンジルイソキノリン誘導体を定量した結果、ネフェリン、リエンシニン、イソリエンシニン、タリフォリンの含量はそれぞれ、０．４％、０．１％、０．１％、０．１％であった。これを以下の実施例において、抽出物１として使用した。
【０１１５】
製造例２（ビスベンジルイソキノリン誘導体の抽出）
蓮子心を水にて十分洗浄後、乾燥する。乾燥体１２００ｇを熱メタノール２Ｌを用いて３回抽出処理をした。得られたメタノールエキスを減圧乾固し、水に懸濁後ｎ−ヘキサン、クロロホルムで順次抽出する。このクロロホルム可溶画分を減圧乾固し、得られた固形画分は約８ｇであった。続けて以下の方法でさらに精製を行った。
【０１１６】
すなわち、カラム長５８０ｍｍ、カラム径４６ｍｍ、充填剤としてシリカゲル１６０ｇを用いて精製した。溶出はクロロホルム／メタノール混液を溶離液として用いて混合比率を変化させることで分画した。２０％メタノール画分として４８９ｍｇ相当の固形分を得た。薄層クロマトグラフィー（シリカゲル６０Ｆ254、クロロホルム／メタノール／アンモニア水 ９０／９／１）のＲｆ値からビスベンジルイソキノリン誘導体を定量した結果、ネフェリン、リエンシニン、イソリエンシニンの含量はそれぞれ、４．０％、７．０％、１．８％であった。これを以下の実施例において、抽出物２として使用した。
【０１１７】
製造例３（ネフェリンの単離）
まず蓮子心を水にて十分洗浄後、乾燥する。乾燥体１２００ｇを熱メタノール２Ｌを用いて３回抽出処理をした。得られたメタノールエキスを減圧乾固し、水に懸濁後ｎ−ヘキサン、クロロホルムで順次抽出する。このクロロホルム可溶画分を減圧乾固し、得られた固形画分は約８ｇであった。続けて以下の方法でさらに精製を行った。
【０１１８】
すなわち、カラム長５８０ｍｍ、カラム径４６ｍｍ、充填剤としてシリカゲル１６０ｇを用いて精製した。溶出はクロロホルム／メタノール混液を溶離液として用いて混合比率を変化させることで分画した。５％メタノール画分として２．１６ｍｇ相当の固形分を得た。
【０１１９】
得られた結晶固形物のＴＬＣのＲｆ値は０．３９（シリカゲル６０Ｆ２５４、クロロホルム：メタノール：アンモニア水 ９０：９：１）であった。
【０１２０】
1Ｈ−ＮＭＲにおいて、２個のＮ−メチル基、３個のメトキシル基および１１水素分芳香族水素シグナルが観測され、ＭＳ、ＵＶ、ＩＲの結果を総合して本化合物は、ネフェリンと同定された。ネフェリンの物性値を以下に示す。
【０１２１】
1H-NMR (CDCl3) (δ 2.49, 2.52 (6H, each s)), (δ 3.51, 3.73, 3.80, 3.81 (12H, each s)), (δ 5.96 (1H, s), 6.35 (1H, s), 6.51 (1H, s), 6.54 (1H, d, J=2.0 Hz), 6.64 (1H, s), 6.69 (2H, d, J=8.5 Hz), 6.70 (1H, dd, J=8.0, 2.0 Hz), 6.86 (1H, d, J=8.0 Hz), 6.90 (2H, d, J=8.5 Hz))
EI-MS m/z: 624 [M]+, 503, 206.
UV λmax (MeOH) nm (log ε): 230 sh (4.47), 283 (4.00).
IR νmax (KBr) cm-1: 3421, 1612, 1510.
【０１２２】
製造例４（リエンシニンおよびイソリエンシニンの単離）
製造例３と同様にして、まず蓮子心を水にて十分洗浄後、乾燥する。乾燥体１２００ｇを熱メタノール２Ｌを用いて３回抽出処理をした。得られたメタノールエキスを減圧乾固し、水に懸濁後ｎ−ヘキサン、クロロホルムで順次抽出する。このクロロホルム可溶画分を減圧乾固し、固形画分８ｇを得た。これを、カラム長５８０ｍｍ、カラム径４６ｍｍ、充填剤としてシリカゲル１６０ｇを用いて精製した。溶出はクロロホルム／メタノール混液を溶離液として用いて混合比率を変化させることで分画した。２０％メタノール溶出画分４８８．５ｍｇをさらにシリカゲルクロマトグラフィーに付しクロロホルム−メタノールで溶出した。７．５％メタノール溶出画分（１６．４ｍｇ）、１０％メタノール溶出画分（４０．８ｍｇ）、１５％メタノール溶出画分（７４．９ｍｇ）２０％メタノール溶出画分（３３．０ｍｇ）、３０％メタノール溶出画分（８２．８ｍｇ）をそれぞれさらにプリパラティブ薄層クロマトグラフィー（展開溶媒、クロロホルム：メタノール：水酸化アンモニウム＝９０：９：１）で分離して、ネフェリン（１９．７ｍｇ）、粗リエンシニン（４１．３ｍｇ）、粗イソリエンシニン（１２．５ｍｇ）を得た。これらをさらに同様のプリパラティブ薄層クロマトグラフィーにより精製し、それぞれリエンシニン（３４．１ｍｇ）、イソリエンシニン（８．９ｍｇ）を得た。それぞれの物性値を以下に示す。
【０１２３】
リエンシニン
1H-NMR (CDCl3), (δ 2.55, 2.59 (6H, each s)), (δ 3.43, 3.84, 3.90 (9H, each s)), (δ 5.71 (1H, s), 6.39 (1H, dd, J=8.0, 2.0 Hz), 6.44 (1H, s), 6.59 (1H, s), 6.69 (1H, s), 6.72 (1H, d, J=8.0 Hz), 6.81 (2H, d, J=8.5 Hz), 6.81 (1H, d, J=2.0 Hz), 7.00 (2H, d, J=8.5 Hz).
SI-MS m/z: 611 [M+H]+, 503, 206.
UV λmax (MeOH) nm (log ε): 228 sh (4.43), 282 (3.96).
IR νmax (KBr) cm-1: 3415, 1612, 1514.
【０１２４】
イソリエンシニン
1H-NMR (CDCl3) (δ 2.39, 2.51 (6H, each s)), (δ 3.74, 3.80, 3.81 (9H, each s), (δ 6.32 (1H, s), 6.37 (1H, s), 6.46 (1H, s), 6.49 (1H, d, J=2.0 Hz), 6.65 (1H, s), 6.71 (2H, d, J=8.5 Hz), 6.73 (1H, dd, J=8.0, 2.0 Hz), 6.83 (1H, d, J=8.0 Hz), 6.91 (2H, d, J=8.5 Hz).
CI-MS m/z: 611 [M+H]+.
UV λmax (MeOH) nm (log ε): 230 sh (4.44), 283 (4.02).
IR νmax (KBr) cm-1: 3394, 1611, 1514.
【０１２５】
製造例５（Ｎ−ノルアルメパビンの合成）
３，４−ジメトキシフェネチルアミン ４．０２ｇ（２２．２ｍｍｏｌ）とｐ−ヒドロキシフェニル酢酸 ３．３７ｇ（２２．２ｍｍｏｌ）をアルゴン気流下１７０℃で１時間１５分間撹拌した。反応液を冷却後、メタノールを加えて析出した結晶を濾取し、アミド４．２９ｇを得た。このアミド ４．０２ｇ(１２．８ｍｍｏｌ)をアセトニトリル８０ｍＬに溶解後、室温でオキシ塩化リン ８．０ｍＬを滴下し、その後１５分間油浴上で加熱還流した。冷却後溶媒を減圧留去し、残渣にメタノール８０ｍＬを加え溶解した。さらにアンモニア水を加えてｐＨ ７〜８に調整後、ＮａＢＨ4 ８００ｍｇを徐々に加え３０分間室温で撹拌した。溶媒を減圧留去後、クロロホルムでアルカロイドを抽出、さらにカラムクロマトグラフィーにより精製し、Ｎ−ノルアルメパビン ２．４６ ｇ（収率６４％）を得た。物性値を以下に示す。
【０１２６】
mp 199-201 ℃(MeOH, 塩酸塩). EI-MS m/z 296, 192 (100 %). CI-MS m/z 300 [M+H]+. 1H-NMR δ(CDCl3, 200 MHz) 2.76 (2H, brt, J=6.0 Hz, H2-4), 2.86 (1H, dd, J=14.0, 9.0 Hz, H-α), 2.95 (1H, dt, J=12.5, 6.0 Hz, H-3), 3.15 (1H, dd, J=14.0, 4.0 Hz, H-α), 3.24 (1H, dt, J=12.5, 6.0 Hz, H-3), 3.84, 3.86 (6H, each s, OMe x 2), 4.15 (1H, dd, J=9.0, 4.0 Hz, H-1), 6.59, 6.66 (2H, each s, H-5, 8), 6.65 (2H, d, J=8.5 Hz, H-11, 13), 7.03 (2H, d, J=8.5 Hz, H-10, 14).
【０１２７】
製造例６（アルメパビンの合成）
製造例５で得られたＮ−ノルアルメパビン １．２０ｇ(４．０１ ｍｍｏｌ)をメタノール ４５ｍＬに溶解し、ホルマリン２．２２ｍＬを加えて室温で３０分間撹拌後、ＮａＢＨ4 ８９０ｍｇを加えてさらに室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧留去後クロロホルムでアルカロイドを抽出し、さらにカラムクロマトグラフィーにより精製してアルメパビン １．１２ ｇ（収率８９％）を得た。物性値を以下に示す。
【０１２８】
EI-MS m/z 311, 206 (100 %). CI-MS m/z 314 [M+H]+. 1H-NMR δ(CDCl3, 300 MHz) 2.52 (3H, s, NMe), 2.62 (1H, m, H-4), 2.74 (1H, dd, J=13.5, 8.0 Hz, H-α), 2.78-2.95 (2H, m, H-3, 4), 3.14 (1H, dd, J=13.5, 5.0 Hz, H-α), 3.26 (1H, m, H-3), 3.54 (3H, s, OMe), 3.72 (1H, dd, J=8.0, 5.0 Hz, H-1), 3.83 (3H, s, OMe), 5.99, 6.56 (2H, each s, H-5, 8), 6.63 (2H, d, J=8.5 Hz, H-11, 13), 6.90 (2H, d, J=8.5 Hz, H-10, 14).
【０１２９】
製造例７（Ｏ，Ｏ−ジメチルコクラウリンの合成）
３，４−ジメトキシフェネチルアミン ８．０１ｇ（４４．３ｍｍｏｌ）とｐ−メトキシフェニル酢酸 ７．３４ｇ（４４．２ｍｍｏｌ）をアルゴン気流下１７０℃で１時間３０分間撹拌した。反応液を冷却後、メタノールを加えて析出した結晶を濾取し、アミド １２．５ｇ（収率８６％）を得た。このアミド ５．００ｇ(１５．２ｍｍｏｌ)をアセトニトリル １００ｍＬに溶解後、室温でオキシ塩化リン １０．０ｍＬを滴下し、その後３０分間油浴上で加熱還流した。冷却後溶媒を減圧留去し、残渣にメタノール １００ｍＬを加え溶解した。さらにアンモニア水を加えてｐＨ ７〜８に調整後、ＮａＢＨ4 １．５２ ｇを徐々に加え１５分間室温で撹拌した。溶媒を減圧留去後、クロロホルムでアルカロイドを抽出、さらにカラムクロマトグラフィーにより精製し、Ｏ，Ｏ−ジメチルコクラウリン ４．４３ｇ（収率９３％）を得た。物性値を以下に示す。
【０１３０】
mp 185-187 ℃(MeOH, 塩酸塩). EI-MS m/z 313 [M]+, 192 (100 %). CI-MS m/z 314 [M+H]+. 1H-NMR δ(CDCl3, 300 MHz) 2.69 (1H, dt, J=16.0, 6.0 Hz, H-4), 2.77 (1H, brdt, J=16.0, 6.0 Hz, H-4), 2.87 (1H, dd, J=14.0, 9.0 Hz, H-α), 2.92 (1H, dt, J=12.0, 6.0 Hz, H-3), 3.15 (1H, dd, J=14.0, 4.5 Hz, H-α), 3.21 (1H, dt, J=12.0, 6.0 Hz, H-3), 3.80, 3.81, 3.86 (9H, each s, OMe x 3), 4.11 (1H, dd, J=9.0, 4.5 Hz, H-1), 6.59, 6.62 (2H, each s, H-5, 8), 6.87 (2H, d, J=8.5 Hz, H-11, 13), 7.17 (2H, d, J=8.5 Hz, H-10, 14).
【０１３１】
製造例８（Ｏ−メチルアルメパビンの合成）
製造例７で得られたＯ，Ｏ−ジメチルコクラウリン １．５１ｇ（４．８２ｍｍｏｌ）をメタノール ７５ｍＬに溶解し、ホルマリン ３．０ｍＬを加えて室温で３０分間撹拌後、ＮａＢＨ4 １．２１ｇを加えてさらに室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧留去後クロロホルムでアルカロイドを抽出し、さらにカラムクロマトグラフィーにより精製してＯ−メチルアルメパビン １．１９ｇ（収率７５％）を得た。物性値を以下に示す。
【０１３２】
EI-MS m/z 326, 206 (100 %). CI-MS m/z 328 [M+H]+. 1H-NMR δ(CDCl3, 300 MHz) 2.53 (3H, s, NMe), 2.59 (1H, m, H-4), 2.75 (1H, dd, J=13.0, 7.5 Hz, H-α), 2.74-2.89 (2H, m, H-3, 4), 3.14 (1H, dd, J=13.0, 5.0 Hz, H-α), 3.18 (1H, m, H-3), 3.55, 3.77, 3.83 (9H, each s, OMe x 3), 3.67 (1H, dd, J=7.5, 5.0 Hz, H-1), 6.01, 6.55 (2H, each s, H-5, 8), 6.80 (2H, d, J=8.5 Hz, H-11, 13), 7.01 (2H, d, J=8.5 Hz, H-10, 14).
【０１３３】
以下の実施例において、腹腔内投与の場合は、抽出物や薬物はすべて生理食塩水に溶解して使用し、投与量は、すべて生理食塩水溶液０．１ｍｌ／１０ｇマウス体重で投与した。経口投与の場合は、抽出物や薬物はすべて１％カルボキシメチルセルロースＮａ生理食塩水に懸濁して使用し、投与量は、すべて１％カルボキシメチルセルロースＮａ生理食塩水懸濁液０．１ｍｌ／１０ｇマウス体重で投与した。また、以下の試験例においては、特別の定めのない場合はすべて、体重２５〜３０ｇの雄性ＩＣＲ系マウス（日本ＳＬＣ社製）を使用し、室温２３±１℃、相対湿度５５±５％、７時から１９時までの１２時間毎の明暗サイクルの環境下で３〜５日予備飼育した。また、マウスには水道水および飼料は自由に摂取させた。
【０１３４】
実施例１（鎮静作用評価）
マウス２５匹を５匹ずつの５群に分け、それぞれに、Ｎ−メチルコクラウリン塩酸塩 ５ｍｇ／ｋｇ（投与群１−１：腹腔内投与）、ネフェリン塩酸塩 ５０ｍｇ／ｋｇ（投与群１−２：経口投与、投与群１−３：腹腔内投与）、リエンシニン塩酸塩 ５０ｍｇ／ｋｇ（投与群１−４：経口投与）、および生理食塩水（陰性対照群１−１：腹腔内投与）を投与した。これらのマウスを用いて、自発運動量測定装置（モデルＮＳ−ＡＳ０１、ニューロサイエンス社）による試験を実施した。自発運動量の測定は５分毎に６０分間行い、各測定時点でのカウント値から判定した。結果を表１に示す。
【０１３５】
【表１】
【０１３６】
以上の結果、経口、腹腔内投与とも明らかな鎮静作用を惹起することが認められた。また、この結果は、ビスベンジルイソキノリン誘導体であるネフェリンやリエンシニンと比較して、ベンジルイソキノリン誘導体であるＮ−メチルコクラウリンが極めて活性が強いことを示している。
【０１３７】
同様の試験を、Ｎ−ノルアルメパビン ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群１−５、ｎ＝６）、Ｏ，Ｏ−ジメチルコクラウリン ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群１−６、ｎ＝５）、アルメパビン １０ｍｇおよび２５ｍｇ／ｋｇ（それぞれ投与群１−７、ｎ＝６、および投与群１−８、ｎ＝６）、Ｏ−メチルアルメパビン １０ ｍｇおよび２５ ｍｇ／ｋｇ（それぞれ投与群１−９、ｎ＝６、および投与群１−１０、ｎ＝６）ならびに生理食塩水（陰性対照群１−２、ｎ＝５）についても、腹腔内投与により行なった。自発運動量の測定は５分毎に６０分間行い、各測定時点でのカウント値から有意差検定（テューキー（Ｔｕｋｅｙ）法）を行なった。結果を表２に示す。
【０１３８】
【表２】
【０１３９】
いずれの投与群も対照群に対し有意な自発運動の抑制を示した。
【０１４０】
実施例２（睡眠増強作用評価）
チオペンタール睡眠に対する各種化合物の作用を検討した。チオペンタールを生理食塩水に溶解し６０ｍｇ／ｋｇをマウスに腹腔内投与した。ネフェリン塩酸塩 ５０ｍｇ／ｋｇ（投与群２−１、ｎ＝９）、イソリエンシニン塩酸塩 ５０ｍｇ／ｋｇ（投与群２−２、ｎ＝９）、蓮子心抽出物２ １００ｍｇ／ｋｇ（投与群２−３、ｎ＝９）、生理食塩水のみ（陰性対照群、ｎ＝６）、またはジアゼパム １ｍｇ／ｋｇ（陽性対照群、ｎ＝９）をチオペンタール投与の１５分前にマウスに腹腔内投与した。チオペンタール投与後、マウスの正向反射が消失した時間を睡眠発現時間とし、正向反射回復時間を覚醒時間として睡眠持続時間を算出した。結果を表３に示す。
【０１４１】
【表３】
【０１４２】
以上の結果から明らかなように、投与群ではチオペンタール睡眠の睡眠持続時間を明らかに延長した。
【０１４３】
実施例３（統合失調症における精神興奮への作用評価）
ネフェリンを用いて、メタンフェタミンによる自発運動亢進に対するネフェリンによる抑制効果を判定した。
【０１４４】
マウス１５匹を各群５匹の３群に分け、それぞれネフェリン塩酸塩 ５０ｍｇ／ｋｇ（投与群３−１）、１００ｍｇ／ｋｇ（投与群３−２）および生理食塩水のみ（陰性対照群）を腹腔内投与した。投与１５分後に、メタンフェタミン（１ｍｇ／ｋｇ）を投与した。メタンフェタミン投与後、マウスを１匹ずつポリカーボネート製の透明ケージ（２２．５ｃｍ×３３．８ｃｍ×１４．０ｃｍ）に入れ、６０分間のマウスの自発運動量を、自発運動測定装置（モデルＮＳ−ＡＳ０１、ニューロサイエンス社製）により測定した。
【０１４５】
結果を自発運動量のカウントとして表４に示す。
【０１４６】
【表４】
【０１４７】
以上の結果から明らかなように、ネフェリンには、対照群と比較して明らかなメタンフェタミンによる自発運動量亢進に対しての抑制作用が認められ、このことから、ネフェリンは、統合失調症における精神興奮に有効であることが確認された。
【０１４８】
実施例４（抗鬱作用評価）
強制水泳試験をポルソルトらの方法に準拠して行なった。すなわち、直径１０ｃｍ、高さ２５ｃｍの円筒系ガラス水槽に水（水温２３℃）を１０ｃｍ入れ、そこに試験マウスを入れて強制水泳試験を行なった。１４匹のマウスを各群７匹の２群に分け、それぞれネフェリン塩酸塩 １００ｍｇ／ｋｇ（投与群４−１）または生理食塩水（陰性対照群４−１）を腹腔内投与した。投与後、１５分および３０分後に強制水泳を試行させ、６分間における不動時間を測定した。
【０１４９】
結果を各群７匹の平均値として表５に示す。
【０１５０】
【表５】
【０１５１】
陰性対照群と比較して、投与群では不動時間に明らかな短縮が認められた。強制水泳試験は抗鬱薬の薬効評価に広く使用されており、このことから、ネフェリンに抗鬱作用があることが確認された。
【０１５２】
同様の試験を、アルメパビン ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群４−２、ｎ＝７）、Ｏ−メチルアルメパビン ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群４−３、ｎ＝６）および生理食塩水（陰性対照群４−２、ｎ＝５）についても、腹腔内投与により行なった。有意差検定はダネット（Ｄｕｎｎｅｔ）法により行なった。結果を表６に示す。
【０１５３】
【表６】
【０１５４】
表６に示すように、いずれの投与群も対照群に対し有意に不動時間を短縮した。
【０１５５】
実施例５（抗不安作用評価）
高架式十字迷路としては、２本の壁無し走行路と２本の壁あり走行路が十字に直交しているマウス用高架式十字迷路（ニューロサイエンス社製）を使用した。中央のプラットホーム上にマウスの頭が壁無し走行路に向くように置き、試験マウスが、５分間に、両走行路に侵入した回数、壁無し走行路における滞在時間を測定した。結果は全侵入回数に対する壁無し走行路に侵入した回数の％および試験時間に対する壁無し走行路における滞在時間の％で評価した。
【０１５６】
ネフェリン塩酸塩 １００ｍｇ／ｋｇ（投与群５−１、ｎ＝５）、蓮子心抽出物２の塩酸塩 １００ｍｇ／ｋｇ（投与群５−２、ｎ＝５）または生理食塩水（陰性対照群、ｎ＝５）をそれぞれ腹腔内に投与したマウスを用いて、投与３０分後に測定した。
【０１５７】
結果を表７に示す。
【０１５８】
【表７】
【０１５９】
以上の結果から、全ての投与群で壁無し走行路へ侵入した回数と滞在時間について陰性対照群に比べ明らかな増加が認められた。この成績はネフェリンが抗不安作用を有することを示した結果である。
【０１６０】
実施例６（強迫性障害治療作用評価）
ガラス玉覆い隠し行動は、実施例３記載の透明ケージの中に飼育用木屑（ベータチップ）（オリエンタル酵母社製）を深さ５ｃｍになるよう敷き詰め、ガラス玉（直径１．５ｃｍ）２０個を均等に並べた。
【０１６１】
マウス２１匹を７匹ずつの３群に分け、それぞれに、ネフェリン塩酸塩 ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群６−１）、５０ｍｇ／ｋｇ（投与群６−２）および生理食塩水（陰性対照群）を腹腔内投与した。投与１５分後にマウスをケージに入れ、１０分毎に木屑で覆い隠されていないガラス玉の個数を目視にて数えた。なお、判定基準としては、ケージを上方から観察した際にガラス玉表面の２／３以上が埋もれているものは埋もれたガラス玉としてカウントした。
【０１６２】
７匹の平均値で、結果を表８に示す。
【０１６３】
【表８】
【０１６４】
陰性対照群と比較して、全ての投与群で隠したガラス玉の数は明らかに少なかった。この試験成績と強迫性障害治療効果は良く相関することから、ネフェリンは強迫性障害治療薬として応用できることが確認された。
【０１６５】
実施例７（運動協調性の評価）
ネフェリン塩酸塩 ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群７−１、ｎ＝６）、リエンシニン塩酸塩 ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群、ｎ＝６）、および生理食塩水（陰性対照群、ｎ＝６）とジアゼパム ５ｍｇ／ｋｇ（陽性対照群、ｎ＝６）を腹腔内に投与したマウスを用いて、ロータロッド装置（ＵＧＯ ＢＡＳＩＬＥ社、イタリア）と自発運動量測定装置（モデルＮＳ−ＡＳ０１、ニューロサイエンス社）による試験を実施した。ロータロッドテストは、薬物投与１５分後に８ｒｐｍで回転する直径４ｃｍの回転棒の上に乗せ、回転棒上で動物が落下せずに、留まっていられるか否かを３分間測定した。３分間の測定中に回転棒から落下した個体を「運動協調性障害作用あり」と判定した。なお、試験当日に試験に先立ち３分間のプレテストを実施し、落下しない個体を選別して試験に用いた。また、自発運動量の測定は５分毎に６０分間行い、各測定時点でのカウント値から有意差検定（テューキー（Ｔｕｋｅｙ）法）をした。
【０１６６】
結果を表９に示す。
【０１６７】
【表９】
【０１６８】
この結果は、全ての投与群が、筋弛緩作用や運動協調性障害の副作用を発現しないで鎮静作用を引き起こすことが明らかになった。
【０１６９】
実施例８（カタレプシー評価）
蓮子心の抽出物１塩酸塩 ２００ｍｇ／ｋｇ（投与群８−１、ｎ＝６）および抽出物２塩酸塩 １００ｍｇ／ｋｇ（投与群８−２、ｎ＝６）、ネフェリン １００ｍｇ／ｋｇ（投与群８−３、ｎ＝６）、アルメパビン ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群８−４、ｎ＝５）ならびにＯ−メチルアルメパビン ２５ｍｇ（投与群８−５、ｎ＝５）を用いて、カタレプシーテストを行った。ただし投与群１においては、マウスに通常の飼料の代わりに蓮子心の抽出物１を飼料に１０％添加混合した物を与えた。
【０１７０】
投与群１以外のマウスには、薬物をそれぞれ腹腔内に投与した。投与１５分後、飼育中に適宜に高さ５．５ｃｍの棒にマウスを掴まらせ、３０秒間、姿勢を保持した各６匹中のマウスの匹数（＊／６で表示する）のカタレプシー陽性度を評価した。
【０１７１】
対照例としては、生理食塩水（陰性対照群、ｎ＝５）および薬剤ハロペリドール１ ｍｇ／ｋｇ（陽性対照群、ｎ＝５）をそれぞれ用いた。
【０１７２】
その結果、陰性対照群で（０／５）、投与群８−１〜８−３で（０／６）、投与群８−４および８−５で（０／５）、陽性対照群では（６／６）のカタレプシー発現であった。すなわち投与群ではカタレプシー惹起は認められなかった。
【０１７３】
この結果は、投与群が錐体外路障害の副作用を発現していないことを示している。
【０１７４】
実施例９
（ネフェリンの鎮痛作用評価…酢酸誘発writhing試験−１）
ネフェリンの皮下投与における鎮痛作用を酢酸誘発writhing試験により評価した。
【０１７５】
酢酸誘発writhing試験は、マウスに化学的刺激物質である酢酸を腹腔内投与すると腹膜炎が惹起され、writhingと称されている特異な症状（後脚を伸展し、腹部を延ばし、下半身をよじるなどの行動を間欠的に発する症状）を呈するので、これを利用して鎮痛作用を判定する方法である。生理食塩水を投与した対照群と被検薬を投与した群との間でこのwrithing回数を比較し、被検薬によるwrithing回数の抑制を調べ、鎮痛作用を評価する。
【０１７６】
各群７〜１０匹のマウスを使用した。ネフェリン塩酸塩は５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で背部皮下に投与し、１５分後に０．６重量％酢酸水溶液を体重１０ｇ当り０．１ｍＬ腹腔内に投与した。酢酸投与直後から３０分の間１０分毎（０〜１０分、１０〜２０分、２０〜３０分）にwrithing回数を計測した。また酢酸投与直後から３０分間におけるwrithingの合計回数も求めた。得られた結果についてダネット（Ｄｕｎｎｅｔ）の多重比較検定法により有意差検定を行なった。結果を表１０に示す。
【０１７７】
【表１０】
【０１７８】
表１０から明らかなように、ネフェリンは１５分前皮下投与において、陰性対照群に対して投与量１０ｍｇ／ｋｇ以上で有意な鎮痛作用を示す。
【０１７９】
（ネフェリンの鎮痛作用評価…酢酸誘発writhing試験−２）
前記酢酸誘発writhing試験−１において、ネフェリンの皮下投与の３０分後に酢酸を腹腔内投与したほかは、酢酸誘発writhing試験−１と同様にして酢酸誘発writhing試験を行なった。ただしネフェリンの投与量は５０ｍｇ／ｋｇのみとした。結果を表１１に示す。
【０１８０】
【表１１】
【０１８１】
表１１から明らかなように、ネフェリンは３０分前皮下投与においても、陰性対照群に対して有意な鎮痛作用を示す。
【０１８２】
（ネフェリンの鎮痛作用評価…酢酸誘発writhing試験−３）
ネフェリンの経口投与における鎮痛作用を酢酸誘発writhing試験により評価した。
【０１８３】
前記酢酸誘発writhing試験−１において、ネフェリンの経口投与の３０分後に酢酸を腹腔内投与したほかは、酢酸誘発writhing試験−１と同様にして酢酸誘発writhing試験を行なった。ただし、各群５〜６匹のマウスを使用した。またネフェリンの投与量は１０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇとした。また陽性対照薬としてアスピリンを使用した。アスピリンの投与量は５０ｍｇ／ｋｇとした。結果を表１２に示す。
【０１８４】
【表１２】
【０１８５】
表１２から明らかなように、経口投与でネフェリンはアスピリンに比較して強い鎮痛作用を示す。
【０１８６】
実施例１０
（アルメパビンの鎮痛作用評価…酢酸誘発writhing試験）
アルメパビンの皮下投与における鎮痛作用を酢酸誘発writhing試験により評価した。
【０１８７】
前記酢酸誘発writhing試験−１において、ネフェリンに代えてアルメパビンを使用したほかは、酢酸誘発writhing試験−１と同様にして酢酸誘発writhing試験を行なった。ただしアルメパビンの投与量は５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇとした。結果を表１３に示す。
【０１８８】
【表１３】
【０１８９】
表１３から明らかなように、アルメパビンは投与量５〜１０ｍｇ／ｋｇで陰性対照群に対して有意な鎮痛作用を示す。
【０１９０】
実施例１１
（Ｏ−メチルアルメパビンの鎮痛作用評価…酢酸誘発writhing試験）
Ｏ−メチルアルメパビンの皮下投与における鎮痛作用を酢酸誘発writhing試験により評価した。
【０１９１】
前記酢酸誘発writhing試験−１において、ネフェリンに代えてＯ−メチルアルメパビンを使用したほかは、酢酸誘発writhing試験−１と同様にして酢酸誘発writhing試験を行なった。ただしＯ−メチルアルメパビンの投与量は５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇとした。結果を表１４に示す。
【０１９２】
【表１４】
【０１９３】
表１４から明らかなように、Ｏ−メチルアルメパビンは投与量５〜１０ｍｇ／ｋｇで陰性対照群に比べて有意な鎮痛作用を示す。
【０１９４】
実施例１２
（ネフェリンの鎮痛作用評価…tail-flick試験）
tail-flick試験は、マウスの尾根部から１〜２ｃｍの尾の部分へ局所的に輻射熱刺激を加えると、仮性疼痛反応として尾を振り上げる反応を発現するが、この反応を利用して抗侵害作用を判定する方法である。
【０１９５】
各群７〜９匹のマウスを使用した。マウスを固定し、tail-flick unit 装置（Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌ 社製）を用いて尾根部から１〜２ｃｍの部分へ局部的に輻射熱刺激を加え、マウスが輻射熱により尾を振り上げる反応を仮性疼痛反応とみなし、その発現までの時間（潜時）を測定した。ネフェリン塩酸塩は５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で腹腔内に投与した。被検薬投与後の潜時を測定潜時（test latency)とし、被検薬投与１５分後に測定した。マウスの尾の損傷を避けるため、カットオフタイムは１０秒とした。
【０１９６】
％ＭＰＥ（percent maximum possible effect）
＝[(被検薬投与群の潜時−対照群の潜時)／（１０−対照群の平均潜時）]×１００
【０１９７】
得られた結果についてダネット（Ｄｕｎｎｅｔ）の多重比較検定法により有意差検定を行なった。結果を表１５に示す。
【０１９８】
【表１５】
【０１９９】
表１５から明らかなように、ネフェリンは投与量１００ｍｇ／ｋｇで陰性対照群に対して仮性疼痛反応発現までの潜時を有意に延長した。
【０２００】
実施例１３
（ネフェリンの鎮痛作用評価…ホルマリン足蹠試験）
ホルマリン足蹠試験は、マウスの足蹠にホルマリンを皮下投与すると、足をなめる行動（licking）を起こすので、これを利用して被検薬の鎮痛作用を判定する方法である。生理食塩水を投与した対照群に対して被検薬を投与した群における足なめ行動の抑制を調べ、鎮痛作用を評価する。
【０２０１】
各群６匹のマウスを使用した。ネフェリン塩酸塩は２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で腹腔内に投与し、１５分後に０．２重量％ホルマリン水溶液の２０μｌを右後肢足蹠に皮下投与した。ホルマリン投与後、足なめ行動を仮性疼痛反応とみなし、ホルマリン投与直後から５分後までを第一相、１５分から３０分までを第二相とし、足なめ行動の持続時間を測定した。得られた結果についてダネット（Ｄｕｎｎｅｔ）の多重比較検定法により有意差検定を行なった。結果を表１６に示す。
【０２０２】
【表１６】
【０２０３】
表１６から明らかなように、第一相反応ではネフェリン１００ｍｇ／ｋｇ投与群でのみマウスの足なめ行動の抑制がみられた。第二相反応ではネフェリン２５ｍｇ／ｋｇ投与群では有意な差はみられなかったが、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ投与群では用量依存的にマウスの足なめ行動の抑制を引き起こした。
【０２０４】
ホルマリン誘発疼痛試験における第一相はホルマリン自体の神経終末への直接作用による疼痛反応であり、第二相はそれに続く炎症による疼痛反応である。ネフェリンについての前記試験結果から、ネフェリンは炎症に基づく第二相の足なめ行動を強く抑制することが認められた。したがって、酢酸誘発writhing試験およびtail-flick試験の結果（酢酸誘発writhing反応に対してネフェリンは１０ｍｇ／ｋｇ以上で抑制作用が認められるが、tail-flick試験ではネフェリン１００ｍｇ／ｋｇ投与群が弱い抑制作用を示すのみである）から、ネフェリンの鎮痛作用は主に抗炎症作用を惹起することにより発現すると考えられる。
【０２０５】
炎症は、生体への侵襲に対して起こる組織・全身反応である。炎症による疼痛にはＰＧＥ2やＰＧＩ2が関与する。ＰＧｓ（プロスタグランジン類）は炎症部位の血流量を増加させ、疼痛を助長する。前述したＮＳＡＩＤはＰＧｓの生成を抑制し鎮痛作用を示す。ネフェリンも炎症反応機構に作用し、鎮痛作用を惹起すると考えられる。また、炎症が起こっている場合には、ヒスタミンやセロトニンなども遊離され痛覚の調節に関わっている。ネフェリンがこれら生体内物質に作用することによっても鎮痛作用を発現すると推察される。
【０２０６】
実施例１４
（Ｏ−メチルアルメパビンの鎮痛作用評価…ホルマリン足蹠試験）
ネフェリンに代えてＯ−メチルアルメパビン１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与したほかは実施例１３と同様にしてホルマリン足蹠試験を行なった。結果を表１７に示す。
【０２０７】
【表１７】
【０２０８】
表１７から明らかなように、Ｏ−メチルアルメパビン１０ｍｇ／ｋｇ投与群においては、第一相反応ではマウスの足なめ行動の抑制はみられなかったが、第二相反応ではマウスの足なめ行動の抑制を引き起こした。
【０２０９】
実施例１５
（ネフェリンの抗炎症作用評価…ヒスタミン誘発足浮腫試験）
各群６匹のマウスを使用した。ネフェリン塩酸塩１００ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与し、３０分後に起炎剤であるヒスタミン１０μｇを右後肢足蹠に皮下投与した。ヒスタミン投与直前およびヒスタミン投与１２分後に右後肢の厚さを測定した。ヒスタミン投与後の足の厚さから投与直前の厚さを差し引き、足浮腫の厚さとした。結果を表１８に示す。表１８から明らかなように、ネフェリンによりヒスタミンによる足浮腫は抑制された。
【０２１０】
【表１８】
【０２１１】
実施例１６
（Ｏ−メチルアルメパビンの抗炎症作用評価…ヒスタミン誘発足浮腫試験）
Ｏ−メチルアルメパビン１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与し、１５分後に起炎剤であるヒスタミン１０μｇを右後肢足蹠に皮下投与したほかは実施例１５と同様にしてヒスタミン誘発足浮腫試験を行なった。結果を表１９に示す。表１９から明らかなように、Ｏ−メチルアルメパビンによりヒスタミンによる足浮腫は抑制された。
【０２１２】
【表１９】
【０２１３】
実施例１７（製剤例）
（Ａ）タブレットの製造例：
ネフェリン４ｇにオリゴ糖４００ｇ、リン酸カルシウム３０ｇ、蔗糖脂肪酸エステル１７０ｇを加え、Ｖ型混合機で２０分間混合した後、ロータリープレスで８００ｋｇｆ／ｃｍ2で加圧成形し、１錠１００ｍｇの錠剤を作成した。
【０２１４】
（Ｂ）ドリンク剤の製造例：
ネフェリン０．１ｇ、ジャスミン茶の煎じ液 ２０ｇを水９７０ｃｃに溶解し、濾過した。
【０２１５】
（Ｃ）カプセル剤の製造例：
ネフェリン２ｇをボールミルで平均粒径を約１００μｍに破砕したものに乳糖５０ｇを良く混合し、これをゼラチンカプセル化することによりカプセル剤を製造した。
【０２１６】
（Ｄ）散剤の製造例：
ネフェリン２ｇと西洋人参抽出液２０ｇ、ひまし油１０ｇ、ハイビスワコー（和光純薬工業（株）製）５ｇを混合した。これを回転ディスク上に滴下することで直径約３０μｍの散剤を得た。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、蓮子心由来のベンジルイソキノリン誘導体またはビスベンジルイソキノリン誘導体を含有する向精神薬、鎮痛薬および／または抗炎症薬、ならびに健康食品、該誘導体の向精神薬、鎮痛薬および／または抗炎症薬、ならびに健康食品の製造のための使用、該誘導体を使用する精神疾患、疼痛および／または炎症の予防および／または治療の方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年のストレス社会を反映し、精神疾患は増加の一途をたどっている。精神疾患は社会への適応が困難になるため、社会的な問題であるとともに、医療経済的にも重要な問題となっている。精神活動や行動に変化をもたらすことを主要な薬理作用とする薬物を向精神薬と称しているが、向精神薬は統合失調症治療薬、気分安定薬、抗鬱薬、抗不安薬、睡眠薬、鎮静薬、抗てんかん薬、嫌酒薬、抗パーキンソン病薬、抗痴呆薬などに分類され、それぞれ作用機序が異なる薬剤が開発され、各種の精神疾患治療に用いられている。
【０００３】
近年とくに広く知られ、社会的に重大な問題となってきている不安障害を例に取るならば、恐怖症性不安障害、広場恐怖、社会恐怖、パニック障害、全般性不安障害、強迫性障害、特定の恐怖症、他の不安障害に分類されるが、これらは互いに合併することもしばしばである。
【０００４】
また、鬱病の症状としては、抑うつ状態、アンヘドニア、精神運動抑制、思考／認知のゆがみ、不安と焦燥、自律神経症状などが挙げられる。
【０００５】
統合失調症とは、思考や行動、感情を１つの目的に沿ってまとめていく能力、すなわち統合する能力が長期間にわたって低下し、その経過中にある種の幻覚、妄想、ひどくまとまりのない行動が見られる病態であるが、うつ病や引きこもり、適応障害などと区別しにくいことがあり、確定診断は幻覚、妄想などの症状によって下される。しかし、この病気の原因は充分明らかにされておらず、単一の疾患であることにさえ疑いが向けられている。
【０００６】
前記症状の治療薬の例としては、抗鬱薬として現在使用されているものとして、イミプラミン、クロミプラミン、トリミプラミンなどの三環系抗鬱薬、マプロチリン、ミアンセリンなどの四環系抗鬱薬、トリアゾロピリジン系のトラゾドン、ベンズケトオキシム系の選択的セロトニン再取り込み阻害薬（ＳＳＲＩ）であるフルボキサミンなどが挙げられる。
【０００７】
また、睡眠剤としては、古くはバルビツール系睡眠薬があり、その後トリアゾラム、エチゾラム、ブロチゾラム、フルニトロラゼパム、ニトラゼパム、クアゼパム、ゾピクロンゾルピデム等のベンゾジアゼピン系睡眠薬が登場した。さらに抗不安薬としては、上記ベンゾジアゼピン系の薬剤やＳＳＲＩと称されるフルボキサミンやパロキセチンなどが推奨されてきている。
【０００８】
統合失調症の治療薬については、従来は脳内のドーパミン神経系に作用する薬物が用いられてきたが、副作用としての錐体外路障害（パーキンソン症候群）、すなわち動物実験系においてカタレプシーとして観測される副作用が問題となっている。最近ではセロトニン神経系にも作用する非定型統合失調症治療薬が導入され、治療効果を高めている。また従来から使用されている別の治療薬としては、緩和精神安定薬ともよばれ、主として、脳の視床、海馬、扁桃核などの大脳辺縁系に作用して、不安や緊張などの情動面の障害を選択的に改善し、また自律神経活動の安定効果を持つとされているベンゾジアゼピン系化合物やアザピロン系化合物が代表的な治療薬である。しかし、ベンゾジアゼピン系化合物では運動協調性障害、依存性、健忘、肝機能障害などの副作用が、アザピロン系化合物では肝機能障害、セロトニン症候群、眠気、ふらつき、めまいなどの副作用などの問題も残されている。
【０００９】
また、三環系あるいは類似の環状抗鬱薬では、抗コリン作用である口渇、目の調節障害（霧視）、便秘、排尿困難、抗ヒスタミン作用に起因するとされる体重増加、抗アドレナリン作用といえる低血圧、めまい、ふらつき、そしてさらに心毒症などの副作用や過剰摂取による急性中毒等が指摘されている。
【００１０】
また、上記ＳＳＲＩ群の薬剤においては副作用がかなり軽減されているとされてはいるが、セロトニン症候群の発症の危険が指摘されている。
【００１１】
一方、前記のような中枢神経系の異常に起因する各種の症状を軽減させる為の健康食品としては、例えばセントジョンズワートが有名で、鬱病に有効であるとされている（非特許文献１）。セントジョンズワートは、西洋オトギリ草とも云われ、欧州では古くから創傷や神経痛などの治療薬として使われてきたといわれる。近年では健康食品のタブレットとして欧米を中心に、我が国でも広く用いられている。
【００１２】
しかしながら、セントジョンズワートに含まれる成分によって重篤な副作用として光過敏症が表れることが知られているし、また成分中にシクロスポリンの体内動態に影響を及ぼす副作用も知られている。
【００１３】
次に、鎮痛薬には、麻薬性鎮痛薬と解熱性鎮痛薬が知られている。モルヒネを代表とする麻薬性鎮痛薬は強力な鎮痛効力を有し、癌性疼痛、術後の疼痛など激しい痛みに有効である。モルヒネなどの麻薬性鎮痛薬は、中枢神経内でオピオイド受容体を介して強力な鎮痛作用を示すが、薬物依存を起こしやすいという問題がある。解熱性鎮痛薬は鎮痛効力はモルヒネほど強くなく内臓痛などには無効であるが依存性はないことから、歯痛、頭痛、神経痛、関節炎などに広く使用されている。解熱鎮痛剤には、中枢神経に作用点を有するアセトアミノフェンに代表される抗炎症作用を有しない薬物や、アスピリンなどの、抗炎症作用を有し鎮痛作用を発揮する非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）が知られている。非ステロイド性抗炎症薬の作用機序はプロスタグランジンの生合成阻害にあると考えられている。しかしながら、非ステロイド性抗炎症薬は効力が比較的強い薬剤ほど胃腸障害などの副作用の発生頻度が高くなる傾向がある。
【００１４】
スイレン科の植物であるハス（Nelumbo nucifera Gaertner）は古くから、薬膳の食材として、根から花まで広く利用されている。とくに成熟した種子の緑色胚芽（Nelumbinis embryo）である蓮子心は、東洋医学では、熱を去る、止血する、精を鈍らせる等の効能を持つとして、熱病、労心吐血、遺精の治療に使用されている（非特許文献２および非特許文献３）。
【００１５】
蓮子心のアルカロイドを中心とした成分研究としては、ベンジルイソキノリンアルカロイド類ならびに、ビスベンジルイソキノリンアルカロイド類の構造決定のデータが報告されている（非特許文献４、非特許文献５および非特許文献６）が、ビスベンジルイソキノリンアルカロイドの一種であるネフェリン以外では、薬効に関しての報告はされていない。
【００１６】
一方、蓮子心についての最近の薬効研究としては、古くは、西部らによって解熱作用、血圧降下作用、抗精神病作用の記載（非特許文献７）を見いだすが、これら作用については何ら充分なその根拠が示されていない。すなわち、西部らは、(1)蓮子心から４種のアルカロイドを精製単離したこと、(2)血圧降下についての動物試験方法、および(3)４種のアルカロイドのうちの１種であるネフェリンに血圧降下作用を認めたことのみを開示しているものであり、解熱作用および抗精神作用の事実については全くその根拠が示されておらず、また血圧降下作用についても具体的なデータは示されていない（非特許文献７）。さらに、鎮痛作用、抗炎症作用については全く報告されていない。
【００１７】
また、２００２年に２つの報告が日本薬学会でなされた。佐藤らはラットを用いての研究結果から、蓮子心に体温調節機能があることを報告し（非特許文献８）、川嶋らはヒト骨芽細胞の系で蓮子心抽出液の抗骨粗鬆作用を報告している（非特許文献９）。
【００１８】
一方、我々はマウスを用いた研究から、蓮子心の一成分であるネフェリンに自発運動抑制作用が認められたことを報告した（非特許文献１０）。
【００１９】
しかし、蓮子心成分については、上記以外の薬効について報告されている例は知られていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２０】
【非特許文献１】リンドレら、ブリティッシュ・メジカル・ジャーナル、３１３巻（１９９６年）２５３頁
【非特許文献２】「和漢薬百科事典」難波恒雄著、２１６頁
【非特許文献３】「中薬大辞典」上海科学技術出版社、小学館編集、（１９８５年）２７５０頁
【非特許文献４】古川ら、薬学雑誌、８４巻（１９６５年）３３５頁
【非特許文献５】冨田ら、ケミカル・ファーマスーティカル・ブレチン、１３巻（１９６５年）３９頁
【非特許文献６】國友ら、フィトケミストリー、１２巻（１９７３年）６６９頁
【非特許文献７】西部ら、ジャーナル・オブ・ナチュラル・プロダクツ誌、４９巻（１９８６年）５４７頁
【非特許文献８】佐藤ら，日本薬学会第１２３年会要旨集２ １１２頁
【非特許文献９】川島ら，日本薬学会第１２３年会要旨集２ １４６頁
【非特許文献１０】伊藤ら，日本生薬学会第５０回年会要旨集 １１６頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２１】
本発明の目的は、天然物由来で、長期に服用しても安全な向精神薬、特には統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される少なくとも１つの症状を予防および／または軽減する作用、および／または鎮静作用を有する向精神薬、ならびに健康食品を提供することである。
【００２２】
本発明の他の目的は、天然物由来で、長期に服用しても安全な鎮痛作用および／または抗炎症作用を有する薬剤、特には疼痛を予防および／または軽減する作用、および／または、炎症を予防および／または軽減する作用を有する薬剤、ならびに健康食品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００２３】
前記の目的で、より安全な中枢神経系作用物質および鎮痛、抗炎症作用物質を発見するために鋭意検討した結果、蓮子心より抽出されるベンジルイソキノリン誘導体およびビスベンジルイソキノリン誘導体に、安全性の高い向精神作用を示す物質および鎮痛、抗炎症作用物質を見出し、本発明を完成するに至った。
【００２４】
すなわち本発明は、下記に示す、蓮子心由来のベンジルイソキノリン誘導体またはビスベンジルイソキノリン誘導体を含有する向精神薬、鎮痛薬および／または抗炎症薬、ならびに健康食品、該誘導体の向精神薬、鎮痛薬および／または抗炎症薬、ならびに健康食品の製造のための使用、該誘導体を使用する精神疾患、疼痛および／または炎症の予防および／または治療の方法を提供する。
【００２５】
（１）一般式（Ｉ）：
【化１】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を有効成分として含有する向精神薬。
【００２６】
（２）向精神作用が、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される少なくとも１つの症状を予防および／または軽減する作用、および／または鎮静作用である前記（１）項記載の向精神薬。
【００２７】
（３）一般式（II）：
【化２】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を有効成分として含有する、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減するための向精神薬。
【００２８】
（４）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化３】
である前記（３）項記載の向精神薬。
【００２９】
（５）一般式（II）で表わされる化合物がリエンシニン：
【化４】
である前記（３）項記載の向精神薬。
【００３０】
（６）一般式（II）で表わされる化合物がイソリエンシニン：
【化５】
である前記（３）項記載の向精神薬。
【００３１】
（７）前記（１）項記載の一般式（Ｉ）で表わされる化合物；およびその塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含有することを特徴とする、向精神用健康食品。
【００３２】
（８）前記（３）項記載の一般式（II）で表わされる化合物；およびその塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含有することを特徴とする、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減するための健康食品。
【００３３】
（９）飲料またはドリンク剤である前記（７）項または（８）項記載の健康食品。
【００３４】
（１０）一般式（Ｉ）：
【化６】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；一般式（II）：
【化７】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびそれらの薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含有する鎮痛作用および／または抗炎症作用を有する薬剤。
【００３５】
（１１）鎮痛作用および／または抗炎症作用が抗炎症作用に基づく鎮痛作用である前記（１０）項記載の薬剤。
【００３６】
（１２）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化８】
である前記（１０）項または（１１）項記載の薬剤。
【００３７】
（１３）前記（１０）項記載の一般式（Ｉ）で表わされる化合物、一般式（ＩＩ）で表わされる化合物およびそれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含有することを特徴とする、疼痛および／または炎症を予防および／または軽減するための健康食品。
【００３８】
（１４）飲料またはドリンク剤である前記（１３）項記載の健康食品。
【００３９】
（１５）一般式（Ｉ）：
【化９】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、向精神薬を製造するための使用。
【００４０】
（１６）向精神作用が、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される少なくとも１つの症状を予防および／または軽減する作用、および／または鎮静作用である前記（１５）項記載の使用。
【００４１】
（１７）一般式（II）：
【化１０】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減するための向精神薬を製造するための使用。
【００４２】
（１８）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化１１】
である前記（１７）項記載の使用。
【００４３】
（１９）一般式（II）で表わされる化合物がリエンシニン：
【化１２】
である前記（１７）項記載の使用。
【００４４】
（２０）一般式（II）で表わされる化合物がイソリエンシニン：
【化１３】
である前記（１７）項記載の使用。
【００４５】
（２１）前記（１５）項記載の一般式（Ｉ）で表わされる化合物；およびその塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、向精神用健康食品を製造するための使用。
【００４６】
（２２）前記（１７）項記載の一般式（II）で表わされる化合物およびその塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減するための健康食品を製造するための使用。
【００４７】
（２３）健康食品が飲料またはドリンク剤である前記（２１）項または（２２）項記載の使用。
【００４８】
（２４）一般式（Ｉ）：
【化１４】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；一般式（II）：
【化１５】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびそれらの薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、鎮痛作用および／または抗炎症作用を有する薬剤を製造するための使用。
【００４９】
（２５）鎮痛作用および／または抗炎症作用が抗炎症作用に基づく鎮痛作用である前記（２４）項記載の使用。
【００５０】
（２６）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化１６】
である前記（２４）項または（２５）項記載の使用。
【００５１】
（２７）前記（２４）項記載の一般式（Ｉ）で表わされる化合物、一般式（ＩＩ）で表わされる化合物およびそれらの塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物の、疼痛および／または炎症を予防および／または軽減するための健康食品を製造するための使用。
【００５２】
（２８）健康食品が飲料またはドリンク剤である前記（２７）項記載の使用。
【００５３】
（２９）一般式（Ｉ）：
【化１７】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を、有効成分として、必要な患者に投与することを特徴とする、精神疾患を予防および／または軽減し、および／または鎮静作用をもたらす方法。
【００５４】
（３０）精神疾患が、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される少なくとも１つの症状である前記（２９）項記載の方法。
【００５５】
（３１）患者が鎮静作用を必要としている前記（２９）項記載の方法。
【００５６】
（３２）前記化合物が、該化合物を含有する健康食品の一部として経口投与される前記（２９）項記載の方法。
【００５７】
（３３）健康食品が飲料またはドリンク剤である前記（３２）項記載の方法。
【００５８】
（３４）一般式（II）：
【化１８】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を、有効成分として必要な患者に投与することを特徴とする、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減する方法。
【００５９】
（３５）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化１９】
である前記（３４）項記載の方法。
【００６０】
（３６）一般式（II）で表わされる化合物がリエンシニン：
【化２０】
である前記（３４）項記載の方法。
【００６１】
（３７）一般式（II）で表わされる化合物がイソリエンシニン：
【化２１】
である前記（３４）項記載の使用。
【００６２】
（３８）前記化合物が、該化合物を含有する健康食品の一部として経口投与される前記（３４）項記載の方法。
【００６３】
（３９）健康食品が飲料またはドリンク剤である前記（３８）項記載の方法。
【００６４】
（４０）一般式（Ｉ）：
【化２２】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を、有効成分として、必要な患者に投与することを特徴とする、向精神作用をもたらす方法。
【００６５】
（４１）前記向精神作用が鎮静作用であり、かつ患者が鎮静作用を必要としている前記（４０）項記載の方法。
【００６６】
（４２）前記向精神作用が精神疾患の軽減作用であり、かつ患者が統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される少なくとも１つの症状を有する前記（４０）項記載の方法。
【００６７】
（４３）一般式（Ｉ）：
【化２３】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）で表わされるベンジルイソキノリン誘導体；一般式（II）：
【化２４】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）で表わされるビスベンジルイソキノリン誘導体；およびそれらの薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を、有効成分として、必要な患者に投与することを特徴とする、疼痛および／または炎症を予防および／または治療するための方法。
【００６８】
（４４）炎症による疼痛を予防および／または治療する前記（４３）項記載の方法。
【００６９】
（４５）一般式（II）で表わされる化合物がネフェリン：
【化２５】
である前記（４３）項または（４４）項記載の方法。
【００７０】
（４６）前記化合物が、該化合物を含有する健康食品の一部として経口投与される前記（４３）項記載の方法。
【００７１】
（４７）健康食品が飲料またはドリンク剤である前記（４６）項記載の方法。
【００７２】
本発明によって活性を見出された蓮子心由来のベンジルイソキノリン誘導体およびビスベンジルイソキノリン誘導体は、生体に対して毒性がなく安全性の高い中枢神経系疾患の予防効果および／または治療効果、疼痛および／または炎症の予防および／または治療効果を期待できる。また、健康食品、健康飲料としての利用も可能である。
【００７３】
さらに、本発明の向精神薬は、従来の薬剤と比較して副作用がなく、また広範囲な精神疾患、向精神作用に対して活性が見られ、非常に優れたものである。
【００７４】
さらに、本発明の鎮痛作用および／または抗炎症作用を有する薬剤は、従来の薬剤と比較して副作用がなく、また広範囲な疼痛、炎症に対して活性が見られ、非常に優れたものである。
【発明を実施するための形態】
【００７５】
本発明においてベンジルイソキノリン誘導体とは、一般式（Ｉ）
【化２６】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、Ｘは、ＮＲ4またはＮ+Ｒ5Ｒ6Ｙ（式中、Ｒ4は水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して水素原子またはＣ1-6のアルキル基であり、Ｙはハロゲン化物イオン、水酸化物イオンまたは硫酸化物イオンである）である）
で表される化合物をいう。
【００７６】
本発明においてビスベンジルイソキノリン誘導体とは、一般式（II）：
【化２７】
（式中、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立して、水素原子、置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である）
で表わされる化合物をいう。
【００７７】
前記式（Ｉ）または（II）の化合物において、「置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基」におけるＣ1-6のアルキル基としては、たとえば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基などの炭素数１〜６個の直鎖状または分岐鎖状のアルキル基などが用いられる。これらＣ1-6のアルキル基の置換基としては、たとえばハロゲン原子などがあげられる。「置換されていてもよいＣ1-6のアルキル基」としては、天然の蓮子心に多量に含まれ、食経験があることなどの点からメチル基が好ましい。
【００７８】
前記式（Ｉ）または（II）の化合物において、「置換されていてもよいアリール基」におけるアリール基としては、フェニル基、ナフチル基、アントリル基などが用いられる。これらアリール基の置換基としては、たとえばハロゲン原子またはＣ1-6のアルキル基などが用いられ、置換されたアリール基としては、たとえば、トレイル基、フェネチル基などがあげられる。
【００７９】
「置換されていてもよいヘテロアリール基」におけるヘテロアリール基としては、フリル基、チオフェニル基、ピロリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、イミダゾリル基、トリアゾリル基、ピリジル基、ピリミジル基、ピラゾニル基、キノリル基、ベンゾチオフェニル基、モルフォリル基などが用いられる。これらへテロアリール基の置換基としては、たとえばハロゲン原子またはＣ1-6のアルキル基などが用いられる。
【００８０】
本発明のベンジルイソキノリン誘導体の具体例としては、
【化２８】
【化２９】
などがあげられるがこれらに限定されるものではない。
【００８１】
本発明のビスベンジルイソキノリン誘導体の具体例としては、
【化３０】
などがあげられるがこれらに限定されるものではない。
【００８２】
さらに前記式（Ｉ）または式（II）の化合物の塩としては、薬学的に許容し得る塩であればどのようなものでも使用することができる。薬学的に許容し得る塩としては、無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩のいずれも可能であるが、具体的には、塩酸塩、グルコン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、サリチル酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パモ酸塩、安息香酸塩、酒石酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、ジ−ｐ−トルオイル酒石酸塩、酢酸塩、硫酸塩、ヨウ化水素酸塩、マンデル酸塩などがあげられる。
【００８３】
本発明の薬剤（向精神薬、鎮痛剤および／または抗炎症剤）および健康食品に含有される、式（Ｉ）および式（II）の化合物は、T. Kametani, S. Takano, J. Chem. Soc.(C), 1969, 298-300およびT.Kametani, H. Yagi, S.Kaneda, Chem. Pharm. Bull. 14(9), 947-980, (1966) に記載された方法と同一の方法、またはこれらと類似の方法により、合成することができる。
【００８４】
たとえば、式（Ｉ）の化合物は、それぞれ対応する置換基を有するフェネチルアミンとフェニル酢酸とをアミド化し、さらにオキシ塩化リンなどにより環化し、イソキノリン骨格を形成することにより合成することができる。また、必要に応じてイソキノリン骨格のアミンに既知の方法により置換基を導入することもできる。
【００８５】
式（II）の化合物は、たとえば、上述の式（Ｉ）の如くして得られるイソキノリン骨格を有する誘導体から銅などを触媒とするウルマン反応などのカップリング反応によって、誘導体２分子を縮合させてビスイソキノリン骨格を有する式（II）の化合物を合成することができる。
【００８６】
また、本発明の薬剤および健康食品に含有される、式（Ｉ）または式（II）の化合物は、従来の天然物からの抽出技術を使用して蓮子心から抽出したものを用いることができる。
【００８７】
本発明の薬剤および健康食品において、式（Ｉ）の化合物は一種または二種以上を組合わせて用いてもよく、式（II）の化合物も一種または二種以上を組合わせて用いてもよい。さらに、式（Ｉ）の化合物と式（II）の化合物を組合わせて用いることもできる。
【００８８】
蓮子心から抽出、単離する場合は、たとえば、蓮子心を乾燥させたのち、熱時メタノール、エタノール、含水エタノール、ヘキサンまたはクロロホルムなどの有機溶剤で抽出、濃縮する。また、このようにして得られる抽出物をさらにシリカゲルのような吸着剤に吸着させ、クロロホルム／メタノール混合物を溶離液として、単離精製することができる。また、本発明の式（Ｉ）または（II）の化合物を含有する抽出画分は、それ以上精製することなく、混合物の状態で本発明のベンジルイソキノリン誘導体またはジベンジルイソキノリン誘導体として、使用することができる。
【００８９】
このように、本発明の式（Ｉ）または式（II）の化合物としては、前記のように合成により製造されたものまたは蓮子心から抽出、単離されたもののどちらでも使用することができる。
【００９０】
また、本発明の薬剤および健康食品においては、式（Ｉ）または（II）の化合物を有効成分として調製することができるが、該化合物を主成分として含有する蓮子心の抽出物を使用することも可能である。
【００９１】
さらに、これらベンジルイソキノリン誘導体およびビスベンジルイソキノリン誘導体を含有する蓮子心は、前述したように古来より摂取されており、安全な食品である。また、蓮子心は、様々な漢方専門店より入手可能であり、たとえば、上海葯材公司（中国上海市延安路１１０号）などより入手可能である。
【００９２】
本発明の向精神薬の投与方法は特に限定されるものではないが、経口、静脈内、筋肉内、皮下、経皮、経粘膜または腹腔内投与などがあり、ヒトでの内服が容易である点から経口投与が好ましい。
【００９３】
本発明の向精神薬の剤形としては、種々の剤形が可能であるが、経口投与可能な剤形が好ましい。例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、溶液剤、酒精剤、シロップ剤等があげられるが、これらに限定されない。また、製剤には例えば、賦形剤、着香剤、着色剤、甘味剤、乳化剤、コーティング剤、ビタミンＣ、抗酸化剤などの薬剤的に許容できる種々の担体を加えることができるが、これらに限定されない。
【００９４】
本発明の向精神薬の投与量は、ベンジルイソキノリン誘導体の場合では、成人１日用量として０．１ｍｇ〜２００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１００ｍｇであり、ビスベンジルイソキノリン誘導体の場合では、１ｍｇ〜２０００ｍｇ、好ましくは１ｍｇ〜１０００ｍｇである。もちろん、このような投与量は、投与されるヒトの年齢、体重、症状、投与方法等に応じて変化させることもできる。
【００９５】
１日当たりの量を数回に分けて投与することもできる。また、他の抗鬱剤や治療法と組み合わせて投与することもできる。
【００９６】
本発明のベンジルイソキノリン誘導体を含有する向精神薬は、統合失調症、鬱病、不安障害、気分不安定、躁状態、てんかんおよび睡眠障害よりなる群から選択される症状を予防および／または軽減すること、または鎮静作用を示すことができる。
【００９７】
本発明の鎮痛薬および／または抗炎症薬の投与方法は特に限定されるものではないが、経口、静脈内、筋肉内、皮下、経皮、経粘膜または腹腔内投与などがあり、ヒトでの内服が容易である点から経口投与が好ましい。
【００９８】
本発明の鎮痛薬および／または抗炎症薬の剤形としては、種々の剤形が可能であるが、経口投与可能な剤形が好ましい。例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、溶液剤、酒精剤、シロップ剤等があげられるが、これらに限定されない。また、製剤には例えば、賦形剤、着香剤、着色剤、甘味剤、乳化剤、コーティング剤、ビタミンＣ、抗酸化剤などの薬剤的に許容できる種々の担体を加えることができるが、これらに限定されない。
【００９９】
本発明の鎮痛薬および／または抗炎症薬の投与量は、ベンジルイソキノリン誘導体の場合では、成人１日用量として０．１ｍｇ〜２００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１００ｍｇであり、ビスベンジルイソキノリン誘導体の場合では、１ｍｇ〜２０００ｍｇ、好ましくは１ｍｇ〜１０００ｍｇである。もちろん、このような投与量は、投与されるヒトの年齢、体重、症状、投与方法等に応じて変化させることもできる。
【０１００】
１日当たりの量を数回に分けて投与することもできる。また、他の鎮痛薬、抗炎症薬や治療法と組み合わせて投与することもできる。
【０１０１】
本発明のベンジルイソキノリン誘導体またはビスベンジルイソキノリン誘導体を含有する鎮痛薬および／または抗炎症薬は、頭痛、歯痛、神経痛、関節痛、筋肉痛、月経困難症、打撲痛、手術、外傷後の疼痛など各種の疼痛を予防および／または軽減することができる。また、関節炎、結合組織炎、痛風、慢性関節リウマチ、リウマチ熱、変形性関節症、手術、外傷後の炎症、上気道炎などの各種の炎症性疾患や炎症性病態を予防および／または軽減することができる。本発明の鎮痛薬および／または抗炎症薬は、特に抗炎症作用に基づく鎮痛作用を有効に発現すると考えられ、したがって炎症に起因する疼痛の予防および／または治療に有効である。
【０１０２】
本発明におけるもう１つの実施態様は、前記式（I）または式（II）の化合物を含有する健康食品を提供することである。
【０１０３】
本発明において「健康食品」とは、一般的に使用されている用語として、食品のうち「ふつうの食品よりも健康によいと称して売られている食品」のことをさす。現在我が国では、このいわゆる健康食品に関する単独の法律はなく、主に食品衛生法、栄養改善法、薬事法により規制をうけているが、平成１３年度４月から保健機能食品制度が創設され、これまであった特定保健用食品（特保）に加え一部のビタミン・ミネラルに関する栄養成分機能表示ができる「栄養機能食品」という分類ができ、これら全ての食品の総称を意味する。本発明の「健康食品」には、栄養補助食品の定義として、一般的な意味で、「栄養成分を補給し、又は特別の保健の用途に資するものとして販売の用に供する食品のうち、錠剤、カプセル等通常の食品の形態でないもの」などと表現されている、特別の保健の用途に資する「特殊用途食品」が含まれる。
【０１０４】
本発明の健康食品は、経口摂取できるものであればどのようなものでもよく、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、溶液剤、酒精剤、シロップ剤等とすることができる。また、式（Ｉ）または式（II）の化合物を原材料に配合することにより種々の飲食品の形態とすることができる。そのような飲食品としては、麺類、粥、リゾット、ゼリー、クッキー、スープ、飲料があげられるが、これらに限定されない。
【０１０５】
このような食品には他に、賦形剤、着香剤、着色剤、甘味剤、乳化剤、コーティング剤、ビタミンＣ、抗酸化剤などの薬剤的に許容できる種々の担体や、鉄、マグネシウム、カルシウム等のミネラル、ビタミン類、アルギン酸等の食物繊維のほか各種のタンパク質、脂質、乳糖等の糖類を加えることができる。
【０１０６】
また、本発明の健康食品に、西洋ニンジン抽出物、イチョウ葉抽出物、大豆抽出物、甘草抽出物、ザクロ抽出物、ヤムイモ抽出物などを組み合わせることにより、精神的ストレス等から陥る前記各症状への改善効果を有する健康食品を得ることもできる。
【０１０７】
ドリンク剤は、式（Ｉ）または（II）の化合物と水を主成分として混合して調製する。式（Ｉ）または（II）の化合物と、水との混合割合は、限定的ではないが、両者の重量比で、１対５０００から１対１００００００の範囲が適当であるが、好ましくは１対１００００、さらに好ましくは１対１０００００が推奨される。
【０１０８】
健康食品として、式（Ｉ）または式（II）の化合物を含有するタブレットを成形するためには、賦型剤および各種の添加剤、例えば、クリーミーパウダー、麦芽糖、セルロース粉末、シュガーエステル、リン酸カリウム、澱粉グリコール酸ナトリウム、焼成カルシウム、ボレー粉、シクロデキストリン、クエン酸マグネシウムなどを添加・混合した後、直接粉末圧縮法で打錠成形することによって製造することができる。
【０１０９】
本発明の健康食品、飲料の投与量は特に制限されず、投与形態、年齢、体重、症状に応じて適宜選択することができる。
【０１１０】
本発明の式（Ｉ）または（II）の化合物の中枢神経系の作用を評価する方法としては、一般的に使われているスクリーニング試験、すなわち向精神作用の範疇での各種作用や薬効の評価に用いられる動物試験法により評価することができる。たとえば、鎮静作用については、自発運動抑制試験（Hirose, A., Kato, T., Shimizu, H., Tanaka, H., Nakamura, N., Katsube, J., Jpn. J. Pharmacol. 53, 321-329 (1990)））、統合失調症治療作用については、メタンフェタミン誘発運動抑制試験（Hirose, A., Kato, T., Shimizu, H., Tanaka, H., Nakamura, N., Katsube, J., Jpn. J. Pharmacol. 53, 321-329 (1990)）、抗鬱作用については、強制水泳試験（Porsolt, R.D., Bertin, A., Jalfre, M., Arch. Int. Pharmacodyn. 299, 327-336 (1977)）、抗不安作用については、高架式十字迷路テスト（Lister, R.G., Psychopharmacology, 112, 13-20 (1993)）、強迫性障害治療作用については、ガラス玉覆い隠し行動試験（Njung’e, K., Hadley, S.L., Pharmacol. Biochem. Behav., 38, 65-67 (1991)）、睡眠障害改善作用については、チオペンタール睡眠増強試験（Sukma, M., Chaichamtipyuth, C., Murakami, Y., Tohda, M., Matsumoto, K., Watanabe, H., J. Ethopharmacology, 83, 87-94 (2002)）などである。
【０１１１】
また、従来の薬剤で見られる副作用である、運動協調性の低下やカタレプシー惹起については、ロータロッドテスト（Souri, E., Sharifzadeh, M., Farasam, H., Gharavi, N., J. Pharm. Pharmacol, 51, 853-855 (1999)）、カタレプシーテスト（Hirose, A., Kato, T., Shimizu, H., Tanaka, H., Nakamura, N., Katsube, J., Jpn. J. Pharmacol. 53, 321-329 (1990)）などの動物試験法により評価することができる。
【０１１２】
本発明の式（Ｉ）または（II）の化合物の鎮痛作用および／または抗炎症作用は、一般的に使われているスクリーニング試験、すなわち鎮痛作用、抗炎症作用の範疇での各種作用や薬効の評価に用いられる動物試験法により評価することができる。たとえば、酢酸誘発writhing試験（Koster, R., Anderson, M., de Beer, E. J., Fed. Proc. 18, 412(1959)）、tail-flick 試験（D'Amour, F. E., Smith, D. L., J. Pharmacol. Exp. Ther. 72, 74-79(1941)）、ホルマリン足蹠試験（Abbott, F. C., Franklin, K. B. J., Westbrook, R. C., Pain 60, 91-102(1995)）、ヒスタミン誘発足浮腫試験（Y. Oyanagui, Life Sci., 62, PL241-249(1998))などの動物試験法により評価できる。
【実施例】
【０１１３】
本発明を以下の製造例および実施例によりさらに詳しく説明するが、本発明はこれに限定されない。本発明によるベンジルイソキノリン誘導体およびビスベンジルイソキノリン誘導体には、当業者によれば種々の変更、修飾が可能であるが、これらの変更、修飾も本発明に含まれる。
【０１１４】
製造例１（ビスベンジルイソキノリン誘導体の抽出）
まず蓮子心（上海葯材公司、中国上海市延安路１１０号）を水にて十分洗浄後、乾燥する。乾燥体５００ｇを、エタノール１Ｌを用いて加熱還流処理を３回行った。得られた抽出液を濾別後、減圧下乾燥し、ペーストを約５０ｇ得た。得られたペーストの薄層クロマトグラフィー（シリカゲル６０Ｆ254、クロロホルム／メタノール／アンモニア水 ９０／９／１）のＲｆ値からビスベンジルイソキノリン誘導体を定量した結果、ネフェリン、リエンシニン、イソリエンシニン、タリフォリンの含量はそれぞれ、０．４％、０．１％、０．１％、０．１％であった。これを以下の実施例において、抽出物１として使用した。
【０１１５】
製造例２（ビスベンジルイソキノリン誘導体の抽出）
蓮子心を水にて十分洗浄後、乾燥する。乾燥体１２００ｇを熱メタノール２Ｌを用いて３回抽出処理をした。得られたメタノールエキスを減圧乾固し、水に懸濁後ｎ−ヘキサン、クロロホルムで順次抽出する。このクロロホルム可溶画分を減圧乾固し、得られた固形画分は約８ｇであった。続けて以下の方法でさらに精製を行った。
【０１１６】
すなわち、カラム長５８０ｍｍ、カラム径４６ｍｍ、充填剤としてシリカゲル１６０ｇを用いて精製した。溶出はクロロホルム／メタノール混液を溶離液として用いて混合比率を変化させることで分画した。２０％メタノール画分として４８９ｍｇ相当の固形分を得た。薄層クロマトグラフィー（シリカゲル６０Ｆ254、クロロホルム／メタノール／アンモニア水 ９０／９／１）のＲｆ値からビスベンジルイソキノリン誘導体を定量した結果、ネフェリン、リエンシニン、イソリエンシニンの含量はそれぞれ、４．０％、７．０％、１．８％であった。これを以下の実施例において、抽出物２として使用した。
【０１１７】
製造例３（ネフェリンの単離）
まず蓮子心を水にて十分洗浄後、乾燥する。乾燥体１２００ｇを熱メタノール２Ｌを用いて３回抽出処理をした。得られたメタノールエキスを減圧乾固し、水に懸濁後ｎ−ヘキサン、クロロホルムで順次抽出する。このクロロホルム可溶画分を減圧乾固し、得られた固形画分は約８ｇであった。続けて以下の方法でさらに精製を行った。
【０１１８】
すなわち、カラム長５８０ｍｍ、カラム径４６ｍｍ、充填剤としてシリカゲル１６０ｇを用いて精製した。溶出はクロロホルム／メタノール混液を溶離液として用いて混合比率を変化させることで分画した。５％メタノール画分として２．１６ｍｇ相当の固形分を得た。
【０１１９】
得られた結晶固形物のＴＬＣのＲｆ値は０．３９（シリカゲル６０Ｆ２５４、クロロホルム：メタノール：アンモニア水 ９０：９：１）であった。
【０１２０】
1Ｈ−ＮＭＲにおいて、２個のＮ−メチル基、３個のメトキシル基および１１水素分芳香族水素シグナルが観測され、ＭＳ、ＵＶ、ＩＲの結果を総合して本化合物は、ネフェリンと同定された。ネフェリンの物性値を以下に示す。
【０１２１】
1H-NMR (CDCl3) (δ 2.49, 2.52 (6H, each s)), (δ 3.51, 3.73, 3.80, 3.81 (12H, each s)), (δ 5.96 (1H, s), 6.35 (1H, s), 6.51 (1H, s), 6.54 (1H, d, J=2.0 Hz), 6.64 (1H, s), 6.69 (2H, d, J=8.5 Hz), 6.70 (1H, dd, J=8.0, 2.0 Hz), 6.86 (1H, d, J=8.0 Hz), 6.90 (2H, d, J=8.5 Hz))
EI-MS m/z: 624 [M]+, 503, 206.
UV λmax (MeOH) nm (log ε): 230 sh (4.47), 283 (4.00).
IR νmax (KBr) cm-1: 3421, 1612, 1510.
【０１２２】
製造例４（リエンシニンおよびイソリエンシニンの単離）
製造例３と同様にして、まず蓮子心を水にて十分洗浄後、乾燥する。乾燥体１２００ｇを熱メタノール２Ｌを用いて３回抽出処理をした。得られたメタノールエキスを減圧乾固し、水に懸濁後ｎ−ヘキサン、クロロホルムで順次抽出する。このクロロホルム可溶画分を減圧乾固し、固形画分８ｇを得た。これを、カラム長５８０ｍｍ、カラム径４６ｍｍ、充填剤としてシリカゲル１６０ｇを用いて精製した。溶出はクロロホルム／メタノール混液を溶離液として用いて混合比率を変化させることで分画した。２０％メタノール溶出画分４８８．５ｍｇをさらにシリカゲルクロマトグラフィーに付しクロロホルム−メタノールで溶出した。７．５％メタノール溶出画分（１６．４ｍｇ）、１０％メタノール溶出画分（４０．８ｍｇ）、１５％メタノール溶出画分（７４．９ｍｇ）２０％メタノール溶出画分（３３．０ｍｇ）、３０％メタノール溶出画分（８２．８ｍｇ）をそれぞれさらにプリパラティブ薄層クロマトグラフィー（展開溶媒、クロロホルム：メタノール：水酸化アンモニウム＝９０：９：１）で分離して、ネフェリン（１９．７ｍｇ）、粗リエンシニン（４１．３ｍｇ）、粗イソリエンシニン（１２．５ｍｇ）を得た。これらをさらに同様のプリパラティブ薄層クロマトグラフィーにより精製し、それぞれリエンシニン（３４．１ｍｇ）、イソリエンシニン（８．９ｍｇ）を得た。それぞれの物性値を以下に示す。
【０１２３】
リエンシニン
1H-NMR (CDCl3), (δ 2.55, 2.59 (6H, each s)), (δ 3.43, 3.84, 3.90 (9H, each s)), (δ 5.71 (1H, s), 6.39 (1H, dd, J=8.0, 2.0 Hz), 6.44 (1H, s), 6.59 (1H, s), 6.69 (1H, s), 6.72 (1H, d, J=8.0 Hz), 6.81 (2H, d, J=8.5 Hz), 6.81 (1H, d, J=2.0 Hz), 7.00 (2H, d, J=8.5 Hz).
SI-MS m/z: 611 [M+H]+, 503, 206.
UV λmax (MeOH) nm (log ε): 228 sh (4.43), 282 (3.96).
IR νmax (KBr) cm-1: 3415, 1612, 1514.
【０１２４】
イソリエンシニン
1H-NMR (CDCl3) (δ 2.39, 2.51 (6H, each s)), (δ 3.74, 3.80, 3.81 (9H, each s), (δ 6.32 (1H, s), 6.37 (1H, s), 6.46 (1H, s), 6.49 (1H, d, J=2.0 Hz), 6.65 (1H, s), 6.71 (2H, d, J=8.5 Hz), 6.73 (1H, dd, J=8.0, 2.0 Hz), 6.83 (1H, d, J=8.0 Hz), 6.91 (2H, d, J=8.5 Hz).
CI-MS m/z: 611 [M+H]+.
UV λmax (MeOH) nm (log ε): 230 sh (4.44), 283 (4.02).
IR νmax (KBr) cm-1: 3394, 1611, 1514.
【０１２５】
製造例５（Ｎ−ノルアルメパビンの合成）
３，４−ジメトキシフェネチルアミン ４．０２ｇ（２２．２ｍｍｏｌ）とｐ−ヒドロキシフェニル酢酸 ３．３７ｇ（２２．２ｍｍｏｌ）をアルゴン気流下１７０℃で１時間１５分間撹拌した。反応液を冷却後、メタノールを加えて析出した結晶を濾取し、アミド４．２９ｇを得た。このアミド ４．０２ｇ(１２．８ｍｍｏｌ)をアセトニトリル８０ｍＬに溶解後、室温でオキシ塩化リン ８．０ｍＬを滴下し、その後１５分間油浴上で加熱還流した。冷却後溶媒を減圧留去し、残渣にメタノール８０ｍＬを加え溶解した。さらにアンモニア水を加えてｐＨ ７〜８に調整後、ＮａＢＨ4 ８００ｍｇを徐々に加え３０分間室温で撹拌した。溶媒を減圧留去後、クロロホルムでアルカロイドを抽出、さらにカラムクロマトグラフィーにより精製し、Ｎ−ノルアルメパビン ２．４６ ｇ（収率６４％）を得た。物性値を以下に示す。
【０１２６】
mp 199-201 ℃(MeOH, 塩酸塩). EI-MS m/z 296, 192 (100 %). CI-MS m/z 300 [M+H]+. 1H-NMR δ(CDCl3, 200 MHz) 2.76 (2H, brt, J=6.0 Hz, H2-4), 2.86 (1H, dd, J=14.0, 9.0 Hz, H-α), 2.95 (1H, dt, J=12.5, 6.0 Hz, H-3), 3.15 (1H, dd, J=14.0, 4.0 Hz, H-α), 3.24 (1H, dt, J=12.5, 6.0 Hz, H-3), 3.84, 3.86 (6H, each s, OMe x 2), 4.15 (1H, dd, J=9.0, 4.0 Hz, H-1), 6.59, 6.66 (2H, each s, H-5, 8), 6.65 (2H, d, J=8.5 Hz, H-11, 13), 7.03 (2H, d, J=8.5 Hz, H-10, 14).
【０１２７】
製造例６（アルメパビンの合成）
製造例５で得られたＮ−ノルアルメパビン １．２０ｇ(４．０１ ｍｍｏｌ)をメタノール ４５ｍＬに溶解し、ホルマリン２．２２ｍＬを加えて室温で３０分間撹拌後、ＮａＢＨ4 ８９０ｍｇを加えてさらに室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧留去後クロロホルムでアルカロイドを抽出し、さらにカラムクロマトグラフィーにより精製してアルメパビン １．１２ ｇ（収率８９％）を得た。物性値を以下に示す。
【０１２８】
EI-MS m/z 311, 206 (100 %). CI-MS m/z 314 [M+H]+. 1H-NMR δ(CDCl3, 300 MHz) 2.52 (3H, s, NMe), 2.62 (1H, m, H-4), 2.74 (1H, dd, J=13.5, 8.0 Hz, H-α), 2.78-2.95 (2H, m, H-3, 4), 3.14 (1H, dd, J=13.5, 5.0 Hz, H-α), 3.26 (1H, m, H-3), 3.54 (3H, s, OMe), 3.72 (1H, dd, J=8.0, 5.0 Hz, H-1), 3.83 (3H, s, OMe), 5.99, 6.56 (2H, each s, H-5, 8), 6.63 (2H, d, J=8.5 Hz, H-11, 13), 6.90 (2H, d, J=8.5 Hz, H-10, 14).
【０１２９】
製造例７（Ｏ，Ｏ−ジメチルコクラウリンの合成）
３，４−ジメトキシフェネチルアミン ８．０１ｇ（４４．３ｍｍｏｌ）とｐ−メトキシフェニル酢酸 ７．３４ｇ（４４．２ｍｍｏｌ）をアルゴン気流下１７０℃で１時間３０分間撹拌した。反応液を冷却後、メタノールを加えて析出した結晶を濾取し、アミド １２．５ｇ（収率８６％）を得た。このアミド ５．００ｇ(１５．２ｍｍｏｌ)をアセトニトリル １００ｍＬに溶解後、室温でオキシ塩化リン １０．０ｍＬを滴下し、その後３０分間油浴上で加熱還流した。冷却後溶媒を減圧留去し、残渣にメタノール １００ｍＬを加え溶解した。さらにアンモニア水を加えてｐＨ ７〜８に調整後、ＮａＢＨ4 １．５２ ｇを徐々に加え１５分間室温で撹拌した。溶媒を減圧留去後、クロロホルムでアルカロイドを抽出、さらにカラムクロマトグラフィーにより精製し、Ｏ，Ｏ−ジメチルコクラウリン ４．４３ｇ（収率９３％）を得た。物性値を以下に示す。
【０１３０】
mp 185-187 ℃(MeOH, 塩酸塩). EI-MS m/z 313 [M]+, 192 (100 %). CI-MS m/z 314 [M+H]+. 1H-NMR δ(CDCl3, 300 MHz) 2.69 (1H, dt, J=16.0, 6.0 Hz, H-4), 2.77 (1H, brdt, J=16.0, 6.0 Hz, H-4), 2.87 (1H, dd, J=14.0, 9.0 Hz, H-α), 2.92 (1H, dt, J=12.0, 6.0 Hz, H-3), 3.15 (1H, dd, J=14.0, 4.5 Hz, H-α), 3.21 (1H, dt, J=12.0, 6.0 Hz, H-3), 3.80, 3.81, 3.86 (9H, each s, OMe x 3), 4.11 (1H, dd, J=9.0, 4.5 Hz, H-1), 6.59, 6.62 (2H, each s, H-5, 8), 6.87 (2H, d, J=8.5 Hz, H-11, 13), 7.17 (2H, d, J=8.5 Hz, H-10, 14).
【０１３１】
製造例８（Ｏ−メチルアルメパビンの合成）
製造例７で得られたＯ，Ｏ−ジメチルコクラウリン １．５１ｇ（４．８２ｍｍｏｌ）をメタノール ７５ｍＬに溶解し、ホルマリン ３．０ｍＬを加えて室温で３０分間撹拌後、ＮａＢＨ4 １．２１ｇを加えてさらに室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧留去後クロロホルムでアルカロイドを抽出し、さらにカラムクロマトグラフィーにより精製してＯ−メチルアルメパビン １．１９ｇ（収率７５％）を得た。物性値を以下に示す。
【０１３２】
EI-MS m/z 326, 206 (100 %). CI-MS m/z 328 [M+H]+. 1H-NMR δ(CDCl3, 300 MHz) 2.53 (3H, s, NMe), 2.59 (1H, m, H-4), 2.75 (1H, dd, J=13.0, 7.5 Hz, H-α), 2.74-2.89 (2H, m, H-3, 4), 3.14 (1H, dd, J=13.0, 5.0 Hz, H-α), 3.18 (1H, m, H-3), 3.55, 3.77, 3.83 (9H, each s, OMe x 3), 3.67 (1H, dd, J=7.5, 5.0 Hz, H-1), 6.01, 6.55 (2H, each s, H-5, 8), 6.80 (2H, d, J=8.5 Hz, H-11, 13), 7.01 (2H, d, J=8.5 Hz, H-10, 14).
【０１３３】
以下の実施例において、腹腔内投与の場合は、抽出物や薬物はすべて生理食塩水に溶解して使用し、投与量は、すべて生理食塩水溶液０．１ｍｌ／１０ｇマウス体重で投与した。経口投与の場合は、抽出物や薬物はすべて１％カルボキシメチルセルロースＮａ生理食塩水に懸濁して使用し、投与量は、すべて１％カルボキシメチルセルロースＮａ生理食塩水懸濁液０．１ｍｌ／１０ｇマウス体重で投与した。また、以下の試験例においては、特別の定めのない場合はすべて、体重２５〜３０ｇの雄性ＩＣＲ系マウス（日本ＳＬＣ社製）を使用し、室温２３±１℃、相対湿度５５±５％、７時から１９時までの１２時間毎の明暗サイクルの環境下で３〜５日予備飼育した。また、マウスには水道水および飼料は自由に摂取させた。
【０１３４】
実施例１（鎮静作用評価）
マウス２５匹を５匹ずつの５群に分け、それぞれに、Ｎ−メチルコクラウリン塩酸塩 ５ｍｇ／ｋｇ（投与群１−１：腹腔内投与）、ネフェリン塩酸塩 ５０ｍｇ／ｋｇ（投与群１−２：経口投与、投与群１−３：腹腔内投与）、リエンシニン塩酸塩 ５０ｍｇ／ｋｇ（投与群１−４：経口投与）、および生理食塩水（陰性対照群１−１：腹腔内投与）を投与した。これらのマウスを用いて、自発運動量測定装置（モデルＮＳ−ＡＳ０１、ニューロサイエンス社）による試験を実施した。自発運動量の測定は５分毎に６０分間行い、各測定時点でのカウント値から判定した。結果を表１に示す。
【０１３５】
【表１】
【０１３６】
以上の結果、経口、腹腔内投与とも明らかな鎮静作用を惹起することが認められた。また、この結果は、ビスベンジルイソキノリン誘導体であるネフェリンやリエンシニンと比較して、ベンジルイソキノリン誘導体であるＮ−メチルコクラウリンが極めて活性が強いことを示している。
【０１３７】
同様の試験を、Ｎ−ノルアルメパビン ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群１−５、ｎ＝６）、Ｏ，Ｏ−ジメチルコクラウリン ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群１−６、ｎ＝５）、アルメパビン １０ｍｇおよび２５ｍｇ／ｋｇ（それぞれ投与群１−７、ｎ＝６、および投与群１−８、ｎ＝６）、Ｏ−メチルアルメパビン １０ ｍｇおよび２５ ｍｇ／ｋｇ（それぞれ投与群１−９、ｎ＝６、および投与群１−１０、ｎ＝６）ならびに生理食塩水（陰性対照群１−２、ｎ＝５）についても、腹腔内投与により行なった。自発運動量の測定は５分毎に６０分間行い、各測定時点でのカウント値から有意差検定（テューキー（Ｔｕｋｅｙ）法）を行なった。結果を表２に示す。
【０１３８】
【表２】
【０１３９】
いずれの投与群も対照群に対し有意な自発運動の抑制を示した。
【０１４０】
実施例２（睡眠増強作用評価）
チオペンタール睡眠に対する各種化合物の作用を検討した。チオペンタールを生理食塩水に溶解し６０ｍｇ／ｋｇをマウスに腹腔内投与した。ネフェリン塩酸塩 ５０ｍｇ／ｋｇ（投与群２−１、ｎ＝９）、イソリエンシニン塩酸塩 ５０ｍｇ／ｋｇ（投与群２−２、ｎ＝９）、蓮子心抽出物２ １００ｍｇ／ｋｇ（投与群２−３、ｎ＝９）、生理食塩水のみ（陰性対照群、ｎ＝６）、またはジアゼパム １ｍｇ／ｋｇ（陽性対照群、ｎ＝９）をチオペンタール投与の１５分前にマウスに腹腔内投与した。チオペンタール投与後、マウスの正向反射が消失した時間を睡眠発現時間とし、正向反射回復時間を覚醒時間として睡眠持続時間を算出した。結果を表３に示す。
【０１４１】
【表３】
【０１４２】
以上の結果から明らかなように、投与群ではチオペンタール睡眠の睡眠持続時間を明らかに延長した。
【０１４３】
実施例３（統合失調症における精神興奮への作用評価）
ネフェリンを用いて、メタンフェタミンによる自発運動亢進に対するネフェリンによる抑制効果を判定した。
【０１４４】
マウス１５匹を各群５匹の３群に分け、それぞれネフェリン塩酸塩 ５０ｍｇ／ｋｇ（投与群３−１）、１００ｍｇ／ｋｇ（投与群３−２）および生理食塩水のみ（陰性対照群）を腹腔内投与した。投与１５分後に、メタンフェタミン（１ｍｇ／ｋｇ）を投与した。メタンフェタミン投与後、マウスを１匹ずつポリカーボネート製の透明ケージ（２２．５ｃｍ×３３．８ｃｍ×１４．０ｃｍ）に入れ、６０分間のマウスの自発運動量を、自発運動測定装置（モデルＮＳ−ＡＳ０１、ニューロサイエンス社製）により測定した。
【０１４５】
結果を自発運動量のカウントとして表４に示す。
【０１４６】
【表４】
【０１４７】
以上の結果から明らかなように、ネフェリンには、対照群と比較して明らかなメタンフェタミンによる自発運動量亢進に対しての抑制作用が認められ、このことから、ネフェリンは、統合失調症における精神興奮に有効であることが確認された。
【０１４８】
実施例４（抗鬱作用評価）
強制水泳試験をポルソルトらの方法に準拠して行なった。すなわち、直径１０ｃｍ、高さ２５ｃｍの円筒系ガラス水槽に水（水温２３℃）を１０ｃｍ入れ、そこに試験マウスを入れて強制水泳試験を行なった。１４匹のマウスを各群７匹の２群に分け、それぞれネフェリン塩酸塩 １００ｍｇ／ｋｇ（投与群４−１）または生理食塩水（陰性対照群４−１）を腹腔内投与した。投与後、１５分および３０分後に強制水泳を試行させ、６分間における不動時間を測定した。
【０１４９】
結果を各群７匹の平均値として表５に示す。
【０１５０】
【表５】
【０１５１】
陰性対照群と比較して、投与群では不動時間に明らかな短縮が認められた。強制水泳試験は抗鬱薬の薬効評価に広く使用されており、このことから、ネフェリンに抗鬱作用があることが確認された。
【０１５２】
同様の試験を、アルメパビン ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群４−２、ｎ＝７）、Ｏ−メチルアルメパビン ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群４−３、ｎ＝６）および生理食塩水（陰性対照群４−２、ｎ＝５）についても、腹腔内投与により行なった。有意差検定はダネット（Ｄｕｎｎｅｔ）法により行なった。結果を表６に示す。
【０１５３】
【表６】
【０１５４】
表６に示すように、いずれの投与群も対照群に対し有意に不動時間を短縮した。
【０１５５】
実施例５（抗不安作用評価）
高架式十字迷路としては、２本の壁無し走行路と２本の壁あり走行路が十字に直交しているマウス用高架式十字迷路（ニューロサイエンス社製）を使用した。中央のプラットホーム上にマウスの頭が壁無し走行路に向くように置き、試験マウスが、５分間に、両走行路に侵入した回数、壁無し走行路における滞在時間を測定した。結果は全侵入回数に対する壁無し走行路に侵入した回数の％および試験時間に対する壁無し走行路における滞在時間の％で評価した。
【０１５６】
ネフェリン塩酸塩 １００ｍｇ／ｋｇ（投与群５−１、ｎ＝５）、蓮子心抽出物２の塩酸塩 １００ｍｇ／ｋｇ（投与群５−２、ｎ＝５）または生理食塩水（陰性対照群、ｎ＝５）をそれぞれ腹腔内に投与したマウスを用いて、投与３０分後に測定した。
【０１５７】
結果を表７に示す。
【０１５８】
【表７】
【０１５９】
以上の結果から、全ての投与群で壁無し走行路へ侵入した回数と滞在時間について陰性対照群に比べ明らかな増加が認められた。この成績はネフェリンが抗不安作用を有することを示した結果である。
【０１６０】
実施例６（強迫性障害治療作用評価）
ガラス玉覆い隠し行動は、実施例３記載の透明ケージの中に飼育用木屑（ベータチップ）（オリエンタル酵母社製）を深さ５ｃｍになるよう敷き詰め、ガラス玉（直径１．５ｃｍ）２０個を均等に並べた。
【０１６１】
マウス２１匹を７匹ずつの３群に分け、それぞれに、ネフェリン塩酸塩 ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群６−１）、５０ｍｇ／ｋｇ（投与群６−２）および生理食塩水（陰性対照群）を腹腔内投与した。投与１５分後にマウスをケージに入れ、１０分毎に木屑で覆い隠されていないガラス玉の個数を目視にて数えた。なお、判定基準としては、ケージを上方から観察した際にガラス玉表面の２／３以上が埋もれているものは埋もれたガラス玉としてカウントした。
【０１６２】
７匹の平均値で、結果を表８に示す。
【０１６３】
【表８】
【０１６４】
陰性対照群と比較して、全ての投与群で隠したガラス玉の数は明らかに少なかった。この試験成績と強迫性障害治療効果は良く相関することから、ネフェリンは強迫性障害治療薬として応用できることが確認された。
【０１６５】
実施例７（運動協調性の評価）
ネフェリン塩酸塩 ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群７−１、ｎ＝６）、リエンシニン塩酸塩 ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群、ｎ＝６）、および生理食塩水（陰性対照群、ｎ＝６）とジアゼパム ５ｍｇ／ｋｇ（陽性対照群、ｎ＝６）を腹腔内に投与したマウスを用いて、ロータロッド装置（ＵＧＯ ＢＡＳＩＬＥ社、イタリア）と自発運動量測定装置（モデルＮＳ−ＡＳ０１、ニューロサイエンス社）による試験を実施した。ロータロッドテストは、薬物投与１５分後に８ｒｐｍで回転する直径４ｃｍの回転棒の上に乗せ、回転棒上で動物が落下せずに、留まっていられるか否かを３分間測定した。３分間の測定中に回転棒から落下した個体を「運動協調性障害作用あり」と判定した。なお、試験当日に試験に先立ち３分間のプレテストを実施し、落下しない個体を選別して試験に用いた。また、自発運動量の測定は５分毎に６０分間行い、各測定時点でのカウント値から有意差検定（テューキー（Ｔｕｋｅｙ）法）をした。
【０１６６】
結果を表９に示す。
【０１６７】
【表９】
【０１６８】
この結果は、全ての投与群が、筋弛緩作用や運動協調性障害の副作用を発現しないで鎮静作用を引き起こすことが明らかになった。
【０１６９】
実施例８（カタレプシー評価）
蓮子心の抽出物１塩酸塩 ２００ｍｇ／ｋｇ（投与群８−１、ｎ＝６）および抽出物２塩酸塩 １００ｍｇ／ｋｇ（投与群８−２、ｎ＝６）、ネフェリン １００ｍｇ／ｋｇ（投与群８−３、ｎ＝６）、アルメパビン ２５ｍｇ／ｋｇ（投与群８−４、ｎ＝５）ならびにＯ−メチルアルメパビン ２５ｍｇ（投与群８−５、ｎ＝５）を用いて、カタレプシーテストを行った。ただし投与群１においては、マウスに通常の飼料の代わりに蓮子心の抽出物１を飼料に１０％添加混合した物を与えた。
【０１７０】
投与群１以外のマウスには、薬物をそれぞれ腹腔内に投与した。投与１５分後、飼育中に適宜に高さ５．５ｃｍの棒にマウスを掴まらせ、３０秒間、姿勢を保持した各６匹中のマウスの匹数（＊／６で表示する）のカタレプシー陽性度を評価した。
【０１７１】
対照例としては、生理食塩水（陰性対照群、ｎ＝５）および薬剤ハロペリドール１ ｍｇ／ｋｇ（陽性対照群、ｎ＝５）をそれぞれ用いた。
【０１７２】
その結果、陰性対照群で（０／５）、投与群８−１〜８−３で（０／６）、投与群８−４および８−５で（０／５）、陽性対照群では（６／６）のカタレプシー発現であった。すなわち投与群ではカタレプシー惹起は認められなかった。
【０１７３】
この結果は、投与群が錐体外路障害の副作用を発現していないことを示している。
【０１７４】
実施例９
（ネフェリンの鎮痛作用評価…酢酸誘発writhing試験−１）
ネフェリンの皮下投与における鎮痛作用を酢酸誘発writhing試験により評価した。
【０１７５】
酢酸誘発writhing試験は、マウスに化学的刺激物質である酢酸を腹腔内投与すると腹膜炎が惹起され、writhingと称されている特異な症状（後脚を伸展し、腹部を延ばし、下半身をよじるなどの行動を間欠的に発する症状）を呈するので、これを利用して鎮痛作用を判定する方法である。生理食塩水を投与した対照群と被検薬を投与した群との間でこのwrithing回数を比較し、被検薬によるwrithing回数の抑制を調べ、鎮痛作用を評価する。
【０１７６】
各群７〜１０匹のマウスを使用した。ネフェリン塩酸塩は５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で背部皮下に投与し、１５分後に０．６重量％酢酸水溶液を体重１０ｇ当り０．１ｍＬ腹腔内に投与した。酢酸投与直後から３０分の間１０分毎（０〜１０分、１０〜２０分、２０〜３０分）にwrithing回数を計測した。また酢酸投与直後から３０分間におけるwrithingの合計回数も求めた。得られた結果についてダネット（Ｄｕｎｎｅｔ）の多重比較検定法により有意差検定を行なった。結果を表１０に示す。
【０１７７】
【表１０】
【０１７８】
表１０から明らかなように、ネフェリンは１５分前皮下投与において、陰性対照群に対して投与量１０ｍｇ／ｋｇ以上で有意な鎮痛作用を示す。
【０１７９】
（ネフェリンの鎮痛作用評価…酢酸誘発writhing試験−２）
前記酢酸誘発writhing試験−１において、ネフェリンの皮下投与の３０分後に酢酸を腹腔内投与したほかは、酢酸誘発writhing試験−１と同様にして酢酸誘発writhing試験を行なった。ただしネフェリンの投与量は５０ｍｇ／ｋｇのみとした。結果を表１１に示す。
【０１８０】
【表１１】
【０１８１】
表１１から明らかなように、ネフェリンは３０分前皮下投与においても、陰性対照群に対して有意な鎮痛作用を示す。
【０１８２】
（ネフェリンの鎮痛作用評価…酢酸誘発writhing試験−３）
ネフェリンの経口投与における鎮痛作用を酢酸誘発writhing試験により評価した。
【０１８３】
前記酢酸誘発writhing試験−１において、ネフェリンの経口投与の３０分後に酢酸を腹腔内投与したほかは、酢酸誘発writhing試験−１と同様にして酢酸誘発writhing試験を行なった。ただし、各群５〜６匹のマウスを使用した。またネフェリンの投与量は１０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇとした。また陽性対照薬としてアスピリンを使用した。アスピリンの投与量は５０ｍｇ／ｋｇとした。結果を表１２に示す。
【０１８４】
【表１２】
【０１８５】
表１２から明らかなように、経口投与でネフェリンはアスピリンに比較して強い鎮痛作用を示す。
【０１８６】
実施例１０
（アルメパビンの鎮痛作用評価…酢酸誘発writhing試験）
アルメパビンの皮下投与における鎮痛作用を酢酸誘発writhing試験により評価した。
【０１８７】
前記酢酸誘発writhing試験−１において、ネフェリンに代えてアルメパビンを使用したほかは、酢酸誘発writhing試験−１と同様にして酢酸誘発writhing試験を行なった。ただしアルメパビンの投与量は５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇとした。結果を表１３に示す。
【０１８８】
【表１３】
【０１８９】
表１３から明らかなように、アルメパビンは投与量５〜１０ｍｇ／ｋｇで陰性対照群に対して有意な鎮痛作用を示す。
【０１９０】
実施例１１
（Ｏ−メチルアルメパビンの鎮痛作用評価…酢酸誘発writhing試験）
Ｏ−メチルアルメパビンの皮下投与における鎮痛作用を酢酸誘発writhing試験により評価した。
【０１９１】
前記酢酸誘発writhing試験−１において、ネフェリンに代えてＯ−メチルアルメパビンを使用したほかは、酢酸誘発writhing試験−１と同様にして酢酸誘発writhing試験を行なった。ただしＯ−メチルアルメパビンの投与量は５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇとした。結果を表１４に示す。
【０１９２】
【表１４】
【０１９３】
表１４から明らかなように、Ｏ−メチルアルメパビンは投与量５〜１０ｍｇ／ｋｇで陰性対照群に比べて有意な鎮痛作用を示す。
【０１９４】
実施例１２
（ネフェリンの鎮痛作用評価…tail-flick試験）
tail-flick試験は、マウスの尾根部から１〜２ｃｍの尾の部分へ局所的に輻射熱刺激を加えると、仮性疼痛反応として尾を振り上げる反応を発現するが、この反応を利用して抗侵害作用を判定する方法である。
【０１９５】
各群７〜９匹のマウスを使用した。マウスを固定し、tail-flick unit 装置（Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌ 社製）を用いて尾根部から１〜２ｃｍの部分へ局部的に輻射熱刺激を加え、マウスが輻射熱により尾を振り上げる反応を仮性疼痛反応とみなし、その発現までの時間（潜時）を測定した。ネフェリン塩酸塩は５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で腹腔内に投与した。被検薬投与後の潜時を測定潜時（test latency)とし、被検薬投与１５分後に測定した。マウスの尾の損傷を避けるため、カットオフタイムは１０秒とした。
【０１９６】
％ＭＰＥ（percent maximum possible effect）
＝[(被検薬投与群の潜時−対照群の潜時)／（１０−対照群の平均潜時）]×１００
【０１９７】
得られた結果についてダネット（Ｄｕｎｎｅｔ）の多重比較検定法により有意差検定を行なった。結果を表１５に示す。
【０１９８】
【表１５】
【０１９９】
表１５から明らかなように、ネフェリンは投与量１００ｍｇ／ｋｇで陰性対照群に対して仮性疼痛反応発現までの潜時を有意に延長した。
【０２００】
実施例１３
（ネフェリンの鎮痛作用評価…ホルマリン足蹠試験）
ホルマリン足蹠試験は、マウスの足蹠にホルマリンを皮下投与すると、足をなめる行動（licking）を起こすので、これを利用して被検薬の鎮痛作用を判定する方法である。生理食塩水を投与した対照群に対して被検薬を投与した群における足なめ行動の抑制を調べ、鎮痛作用を評価する。
【０２０１】
各群６匹のマウスを使用した。ネフェリン塩酸塩は２５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で腹腔内に投与し、１５分後に０．２重量％ホルマリン水溶液の２０μｌを右後肢足蹠に皮下投与した。ホルマリン投与後、足なめ行動を仮性疼痛反応とみなし、ホルマリン投与直後から５分後までを第一相、１５分から３０分までを第二相とし、足なめ行動の持続時間を測定した。得られた結果についてダネット（Ｄｕｎｎｅｔ）の多重比較検定法により有意差検定を行なった。結果を表１６に示す。
【０２０２】
【表１６】
【０２０３】
表１６から明らかなように、第一相反応ではネフェリン１００ｍｇ／ｋｇ投与群でのみマウスの足なめ行動の抑制がみられた。第二相反応ではネフェリン２５ｍｇ／ｋｇ投与群では有意な差はみられなかったが、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ投与群では用量依存的にマウスの足なめ行動の抑制を引き起こした。
【０２０４】
ホルマリン誘発疼痛試験における第一相はホルマリン自体の神経終末への直接作用による疼痛反応であり、第二相はそれに続く炎症による疼痛反応である。ネフェリンについての前記試験結果から、ネフェリンは炎症に基づく第二相の足なめ行動を強く抑制することが認められた。したがって、酢酸誘発writhing試験およびtail-flick試験の結果（酢酸誘発writhing反応に対してネフェリンは１０ｍｇ／ｋｇ以上で抑制作用が認められるが、tail-flick試験ではネフェリン１００ｍｇ／ｋｇ投与群が弱い抑制作用を示すのみである）から、ネフェリンの鎮痛作用は主に抗炎症作用を惹起することにより発現すると考えられる。
【０２０５】
炎症は、生体への侵襲に対して起こる組織・全身反応である。炎症による疼痛にはＰＧＥ2やＰＧＩ2が関与する。ＰＧｓ（プロスタグランジン類）は炎症部位の血流量を増加させ、疼痛を助長する。前述したＮＳＡＩＤはＰＧｓの生成を抑制し鎮痛作用を示す。ネフェリンも炎症反応機構に作用し、鎮痛作用を惹起すると考えられる。また、炎症が起こっている場合には、ヒスタミンやセロトニンなども遊離され痛覚の調節に関わっている。ネフェリンがこれら生体内物質に作用することによっても鎮痛作用を発現すると推察される。
【０２０６】
実施例１４
（Ｏ−メチルアルメパビンの鎮痛作用評価…ホルマリン足蹠試験）
ネフェリンに代えてＯ−メチルアルメパビン１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与したほかは実施例１３と同様にしてホルマリン足蹠試験を行なった。結果を表１７に示す。
【０２０７】
【表１７】
【０２０８】
表１７から明らかなように、Ｏ−メチルアルメパビン１０ｍｇ／ｋｇ投与群においては、第一相反応ではマウスの足なめ行動の抑制はみられなかったが、第二相反応ではマウスの足なめ行動の抑制を引き起こした。
【０２０９】
実施例１５
（ネフェリンの抗炎症作用評価…ヒスタミン誘発足浮腫試験）
各群６匹のマウスを使用した。ネフェリン塩酸塩１００ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与し、３０分後に起炎剤であるヒスタミン１０μｇを右後肢足蹠に皮下投与した。ヒスタミン投与直前およびヒスタミン投与１２分後に右後肢の厚さを測定した。ヒスタミン投与後の足の厚さから投与直前の厚さを差し引き、足浮腫の厚さとした。結果を表１８に示す。表１８から明らかなように、ネフェリンによりヒスタミンによる足浮腫は抑制された。
【０２１０】
【表１８】
【０２１１】
実施例１６
（Ｏ−メチルアルメパビンの抗炎症作用評価…ヒスタミン誘発足浮腫試験）
Ｏ−メチルアルメパビン１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与し、１５分後に起炎剤であるヒスタミン１０μｇを右後肢足蹠に皮下投与したほかは実施例１５と同様にしてヒスタミン誘発足浮腫試験を行なった。結果を表１９に示す。表１９から明らかなように、Ｏ−メチルアルメパビンによりヒスタミンによる足浮腫は抑制された。
【０２１２】
【表１９】
【０２１３】
実施例１７（製剤例）
（Ａ）タブレットの製造例：
ネフェリン４ｇにオリゴ糖４００ｇ、リン酸カルシウム３０ｇ、蔗糖脂肪酸エステル１７０ｇを加え、Ｖ型混合機で２０分間混合した後、ロータリープレスで８００ｋｇｆ／ｃｍ2で加圧成形し、１錠１００ｍｇの錠剤を作成した。
【０２１４】
（Ｂ）ドリンク剤の製造例：
ネフェリン０．１ｇ、ジャスミン茶の煎じ液 ２０ｇを水９７０ｃｃに溶解し、濾過した。
【０２１５】
（Ｃ）カプセル剤の製造例：
ネフェリン２ｇをボールミルで平均粒径を約１００μｍに破砕したものに乳糖５０ｇを良く混合し、これをゼラチンカプセル化することによりカプセル剤を製造した。
【０２１６】
（Ｄ）散剤の製造例：
ネフェリン２ｇと西洋人参抽出液２０ｇ、ひまし油１０ｇ、ハイビスワコー（和光純薬工業（株）製）５ｇを混合した。これを回転ディスク上に滴下することで直径約３０μｍの散剤を得た。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルメパビン：
【化１】
Ｏ−メチルアルメパビン：
【化２】
であるベンジルイソキノリン誘導体およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を有効成分として含有する鬱病の症状を予防および／または軽減するための向精神薬。
【請求項２】
前記ベンジルイソキノリン誘導体がアルメパビンである請求項１記載の向精神薬。
【請求項３】
前記ベンジルイソキノリン誘導体がＯ−メチルアルメパビンである請求項１記載の向精神薬。
【請求項１】
アルメパビン：
【化１】
Ｏ−メチルアルメパビン：
【化２】
であるベンジルイソキノリン誘導体およびその薬学的に許容し得る塩よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を有効成分として含有する鬱病の症状を予防および／または軽減するための向精神薬。
【請求項２】
前記ベンジルイソキノリン誘導体がアルメパビンである請求項１記載の向精神薬。
【請求項３】
前記ベンジルイソキノリン誘導体がＯ−メチルアルメパビンである請求項１記載の向精神薬。
【公開番号】特開２０１１−１２０８６（Ｐ２０１１−１２０８６Ａ）
【公開日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−２３４９６５（Ｐ２０１０−２３４９６５）
【出願日】平成２２年１０月１９日（２０１０．１０．１９）
【分割の表示】特願２００６−５３１４４０（Ｐ２００６−５３１４４０）の分割
【原出願日】平成１７年７月２９日（２００５．７．２９）
【出願人】（３０００６５８２２）株式会社漢方医科学研究所 (2)
【出願人】（５０４２９７０３２）
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１０月１９日（２０１０．１０．１９）
【分割の表示】特願２００６−５３１４４０（Ｐ２００６−５３１４４０）の分割
【原出願日】平成１７年７月２９日（２００５．７．２９）
【出願人】（３０００６５８２２）株式会社漢方医科学研究所 (2)
【出願人】（５０４２９７０３２）
【Ｆターム（参考）】
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