光活性剤としてのクロリンｅ６誘導体の組成物およびクロリンｅ６誘導体を製造する方法
モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の製造のための改善された２段階反応プロセス。第１段階で、クロリンｅ６とカルボジイミドとの間の活性化反応により、活性化反応生成物中にこれまで未知の無水物が生成される。この反応生成物を精製して、有意な割合のジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を除去する。精製した活性化反応生成物は、これまで未知の無水物をより高濃度含有する。この精製した反応生成物を第２段階で、すなわち精製した活性化反応生成物とアスパラギン酸塩とのカップリング反応で使用する。このカップリング反応により、有意に低減したジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６濃度を有するカップリング反応生成物が生成される。この低減したジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６濃度は、カップリング反応混合物からのモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の精製を促進する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
この出願は、米国特許法§１１９（ｅ）の下、２００６年６月３０日に出願された米国仮特許出願第６０／８１７，７６９号（この出願は、その全体が参考として本明細書に援用される）の利益を主張する。
【０００２】
本開示は、一般的には生体作用組成物および身体治療組成物の分野に関し、より具体的には、例えば、癌組織の検出、予防および／または治療において有用な光活性化合物、組成物および方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
関連技術の説明
モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６四ナトリウム塩は、タラポルフィンナトリウムとして一般的に知られており、光活性化学薬品または薬物であることが知られている。例えば、米国特許第ＲＥ３７，１８０号は、患者に対する薬物の静脈内投与と、薬物を含有する組織に適当な波長の光をあてて薬物を光活性化することを広い意味で含むモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の使用方法に関する。薬物は活性化されると、新しい血管を閉塞する。したがって、この薬物は、血管閉塞がプラスの効果をもつことが期待される疾病の治療において有用である。
【０００４】
タラポルフィンナトリウムは、典型的には、植物原料から製造される。抽出手順と反応手順の両方を含むプロセス中に、副生成物が生成される。これらの副生成物の一つは、ジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６である。ジアスパルチルクロリンｅ６は、十分制御されたプロセスにおいて、比較的低量（典型的には約５％）で反応副生成物として生じる一方で、タラポルフィンナトリウム生成物を許容基準に精製するには徹底的な除去処理を必要とする。例えば、粗タラポルフィンナトリウム反応生成物の精製および／または種々の不純物（例えば、ジアスパルチルクロリンｅ６）の除去は、通常、反応生成物を複数のＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）手順にかけて許容されるタラポルフィンナトリウム純度レベルを達成することを必要とする。この精製手順はコストと時間がかかり、また除去した不純物とともに約５０％以下のタラポルフィンナトリウムの実質的損失をもたらすおそれがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、コストのかかる繰り返しの精製手順を使用しないで、あるいは少ない処理手順でタラポルフィンナトリウム生成物を生成するプロセスを開発することが望ましい。さらに、大部分のタラポルフィンナトリウムを損失せずに反応生成物を精製することおよび／または原料投入量の質量当たりのタラポルフィンナトリウム生成物の収率を維持するまたは増加させることが望ましい。
【０００６】
タラポルフィンナトリウムの市場的受容性は、製造コスト、貯蔵寿命、貯蔵中の安定性、製造の容易性、効力、生物学的利用能、薬物動態特性などの種々の要因に左右される。そのため、製造コストを有意に低減するタラポルフィンナトリウムを製造する新規の手法を得ることが望ましい。また、より純粋な形態のタラポルフィンナトリウムをもたらす新規の組成物を得ることも望ましい。
【０００７】
本開示は、上に記載した欠点の１つ以上を克服し、さらに関連した利点を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
要旨
一態様において、本開示は、クロリンｅ６とカルボジイミドの化学反応生成物に関する。いくつかの実施形態において、化学反応生成物は、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【０００９】
【化１】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む。いくつかの実施形態において、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、前記化学反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満を含む。
【００１０】
別の態様において、本開示は、以下の式Ｉの化合物：
【００１１】
【化２】
またはその薬学的に許容される塩を実質的に純粋な形態で含む組成物に関する。
【００１２】
別の態様において、本開示は、クロリンｅ６無水物またはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスに関する。前記プロセスは、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて以下の式：
【００１３】
【化３】
を有するクロリンｅ６無水物またはその塩を含む混合物を得ることを含む。前記プロセスはさらに、クロリンｅ６無水物またはその塩を精製することを含んでもよい。
【００１４】
別の態様において、本開示は、中間体を調製する方法に関する。前記方法は、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤で活性化して中間体を含む混合物を得ることを含み、前記中間体は、ｄ６‐アセトンとｄ６‐ジメチルスルホキシドを含む溶媒を使用し、５００ＭＨｚでプロトン核磁気共鳴（１Ｈ‐ＮＭＲ）分光法により分析すると、
【００１５】
【化３ａ】
の付近のｐｐｍの化学シフトを含むスペクトルを示す。前記方法はさらに、中間体を単離することを含む。
【００１６】
別の態様において、本開示は、タラポルフィンナトリウムまたはその薬学的に許容される塩を調製する方法に関する。前記方法は、有機溶媒の存在下で、約１０〜約１２の範囲のｐＨを有するアスパラギン酸塩組成物を請求項１に記載の化学反応生成物と合わせて反応混合物を形成することを含む。前記方法はさらに、反応混合物を塩基性にすることを含んでもよい。前記方法はさらに、塩基性反応混合物からタラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を沈殿させることを含む。
【００１７】
別の態様において、本開示は、タラポルフィンナトリウムを調製する方法に関する。前記方法は、精製した中間体反応混合物を反応において利用してタラポルフィンナトリウムを調製することを含み、前記精製した中間体反応混合物は、有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が除去されたクロリンｅ６、クロリンｅ６無水物、およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む粗反応混合物から得られたものである。
【００１８】
別の態様において、本開示は、第１の反応体積と第２の反応体積との間のカップリング反応の生成物を含む反応生成物であって、前記第１の反応体積が、以下の式のクロリンｅ６無水物：
【００１９】
【化４】
と、反応生成物中の全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含み、前記第２の反応体積が、Ｌ‐アスパラギン酸またはそのエステルを含む、反応生成物に関する。いくつかの実施形態において、前記反応生成物は、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩およびジアスパルチルクロリンｅ６を含む。クロリン種の例には、クロリンｅ６、クロリンｅ６無水物、およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質、ならびにクロリン発色団を含む化合物が含まれる。
【００２０】
別の態様において、本開示は、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスに関する。前記プロセスは、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて、以下の式Ｉの中間体：
【００２１】
【化５】
またはその塩を含む混合物を得ることを含む。前記プロセスはさらに、式Ｉの中間体またはその塩を単離することを含む。いくつかの実施形態において、前記プロセスはさらに、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせて、タラポルフィンナトリウムまたはその薬学的に許容される塩を形成する工程を含む。
【００２２】
別の態様において、本開示は、光活性剤（ｐｈｏｔｏａｃｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ）またはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスに関する。前記プロセスは、以下の式の化合物：
【００２３】
【化６】
またはその薬学的に許容される塩、有機溶媒および１つ以上のジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質を含む組成物を塩基性水性アスパラギン酸ナトリウム組成物と合わせて、粗モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６反応混合物を形成することを含む。いくつかの実施形態において、前記粗反応混合物は、粗反応混合物中に存在する全クロリン種に基づいて約２ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む。前記プロセスはさらに、反応混合物を塩基性にすることを含む。いくつかの実施形態において、前記プロセスはさらに、実質的な量のモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６を反応混合物から沈殿させることを含む。
【００２４】
別の態様において、本開示は、クロリンｅ６と脱水剤との化学反応生成物であって、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【００２５】
【化７】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む、化学反応生成物に関する。いくつかの実施形態において、前記ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、前記化学反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満を含む。
【００２６】
別の態様において、本開示は、クロリンｅ６の反応生成物を含む混合物に関する。前記混合物は、これまで未知のクロリンｅ６無水物および／またはその誘導体を含む。前記クロリンｅ６無水物は、以下の式からなる：
【００２７】
【化８】
前記混合物は、有意に低減した濃度のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質および存在する全クロリン種に対して典型的に５％未満の他の好ましくない化学種を含む。
【００２８】
前記混合物は、クロリンｅ６とカルボジイミドとの活性化反応の精製した反応生成物であってもよい。前記カルボジイミドは、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）‐カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）またはＮ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミド（ＤＣＣ）であってもよい。
【００２９】
いくつかの実施形態において、上記式のクロリンｅ６無水物は、反応混合物中の全クロリン種に基づいて約５％以下のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む混合物中に存在してもよい。別の態様において、前記クロリンｅ６無水物は、混合物中の全クロリン種に対して３％以下のジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質を含有する混合物中に存在してもよい。
【００３０】
別の態様において、本開示は、タラポルフィンナトリウムを調製する方法であって、クロリンｅ６、その無水物およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む中間体反応混合物を調製し、有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を混合物から除去して混合物を精製し、反応における精製混合物を利用してタラポルフィンナトリウムを調製する手順を含む。
【００３１】
いくつかの実施形態において、前記中間体反応混合物は、ジメチルスルホキシドを含んでもよい。いくつかの実施形態において、前記中間体反応混合物は、（ＥＤＣ）およびジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含んでもよい。精製手順は、活性シリカの層を介してろ過することを含んでもよい。
【００３２】
前記精製手順はまた、前駆物質の形成の抑制を目的とする薬剤をジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６および他の好ましくない化学種に加えることを含んでもよい。前記精製手順は、ジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質を中間体反応混合物中に存在する全クロリン種に基づいて約５％未満または約３％未満の濃度に除去することを含んでもよい。
【００３３】
前記利用手順は、ジメチルスルホキシド中、高ｐＨでのＬ‐アスパラギン酸またはその誘導体またはエステルとのカップリングを含んでもよい。前記利用手順はまた、アルカリ水溶液中でのＬ‐アスパラギン酸またはその誘導体またはエステルとのカップリングを含んでもよい。
【００３４】
別の態様において、本開示は、（存在する全クロリン種に対して）約５％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む第１の反応体積であって、以下の式のクロリンｅ６無水物：
【００３５】
【化９】
を含む、第１の反応体積と、Ｌ‐アスパラギン酸またはその誘導体またはエステルを含む第２の反応物との間のカップリング反応の生成物を含む反応生成物に関する。
【００３６】
前記反応生成物は、存在する全クロリン種に基づいて約１％以下のジアスパルチルクロリンｅ６を含んでもよい。前記第１の反応体積は、ジメチルスルホキシドを含んでもよい。第１の反応体積を精製して活性シリカの層を介するろ過などの適した分離工程等によってジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質および他の好ましくない反応生成物を除去してもよい。
【００３７】
さらに別の態様において、本開示は、ペプチド結合を介して他の化学部分に結合したクロリンｅ６を含む化合物の調製における中間体としての精製したクロリンｅ６無水物の使用に関する。
【００３８】
以下の図と合わせて考えると、詳細な説明および特許請求の範囲を参照することにより、本開示のより完全な理解が得られる。以下の図において、同様の参照番号は、図全体を通して類似の要素を示す。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】一例示的実施形態に基づきクロリンｅ６からタラポルフィンナトリウムを合成する２段階プロセス（活性化の後にカップリング）の概略図である。
【図２Ａ】一例示的実施形態に基づき精製したクロリンｅ６無水物の組成物の相対強度対質量電荷比（ｍ／ｚ）の質量分光分析グラフである。
【図２Ｂ】一例示的実施形態に基づきクロリンｅ６無水物の組成物の４１０ｎｍの吸光度（ＡＵ）対時間（分）のＨＰＬＣ（高圧液体クロマトグラフィー）グラフである。５９６．８および５７８．８と標示したピークは、それぞれクロリンｅ６およびクロリンｅ６無水物である。
【図３】一例示的実施形態に基づくジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の１つの異性体の構造式の概略図である。
【図４】一例示的実施形態に基づく単離したクロリンｅ６無水物のタラポルフィンナトリウムへの転化の概略図である。
【図５】活性シリカで処理した後に活性化反応から得られる反応混合物の相対強度対質量電荷比（ｍ／ｚ）の質量分光分析グラフであり、一例示的実施形態に基づき混合物中の主要な化学種がクロリンｅ６無水物であることを例示するグラフである。
【図６】一例示的実施形態に基づき精製した反応生成物中に存在するクロリン種の相対百分率を示す、ＵＶ検出を使用した４１０ｎｍの吸光度（ＡＵ）対時間（分）のＨＰＬＣグラフである。
【図７】一例示的実施形態に基づき５００ＭＨｚで収集した、ｄ６‐アセトン／ｄ６‐ジメチルスルホキシド中のクロリンｅ６無水物のプロトン核磁気共鳴（１Ｈ‐ＮＭＲ）スペクトルである。
【図８】一例示的実施形態に基づき５００ＭＨｚで収集した、ｄ６‐アセトン／ｄ６‐ジメチルスルホキシド中のクロリンｅ６無水物の１Ｈ‐ＮＭＲスペクトルの選択領域と、ｄ６‐アセトン／ｄ６‐ジメチルスルホキシド中のクロリンｅ６の１Ｈ‐ＮＭＲスペクトルの選択領域との比較である。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
詳細な説明
以下の説明においては、種々の開示した実施形態の完全な理解を提供するために、ある特定の詳細な説明が含まれる。しかしながら、実施形態が１つ以上のこれらの特定の詳細な説明なしに、あるいは他の方法、成分、材料等を使用して実施されてもよいことを、当業者は理解するであろう。他の場合には、分離カラム、ろ過床等を含むがこれらに限定されない抽出、分離、クロマトグラフィーおよび／または精製装置と関連した公知の構造は、実施形態の説明を不必要に分かりにくくするのを避けるために詳細に表示あるいは記載されていない。
【００４１】
特に文脈において必要とされない限り、以下に続く明細書および特許請求の範囲全体を通して、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という用語、およびその「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変形は、「含まれるが、これらに限定されない」のようなオープンな包括的意味で解釈されるものとする。
【００４２】
本明細書全体における「一実施形態」または「実施形態」または「別の実施形態において」または「いくつかの実施形態において」の言及は、実施形態と関連して記載される特定の対象特性、構造または特徴が少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味する。したがって、本明細書全体を通して種々の箇所に出現する「一実施形態において」または「実施形態において」または「別の実施形態において」または「いくつかの実施形態において」という語句は、必ずしもすべてが同じ実施形態を示すとは限らない。さらに、特定の特性、構造または特徴を、１つ以上の実施形態において適した方法で組み合わせてもよい。
【００４３】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、特に内容において明確に規定されない限り、複数の対象物を含むことに留意しなければならない。したがって、例えば、クロリンｅ６無水物の中間体とアミン含有試薬との化学反応の言及は、単一のアミン含有試薬または２つ以上のアミン含有試薬を含む。また、「または」という用語は、特に内容において明確に規定されない限り、一般的に「および／または」を含む意味で使用されることに留意しなければならない。
【００４４】
以下の詳細な説明は、基本的に単に例示するものであって、本開示または本開示の適用および使用を限定するものではない。さらに、前述の技術分野、背景技術、発明の開示または以下の詳細な説明において提示される、いかなる明示的または暗示的な理論によっても拘束されるものではない。
【００４５】
本明細書および特許請求の範囲で使用される「脱水剤」または「カルボキシル活性化剤」という用語は一般的に、求核攻撃に対して、カルボン酸を活性化できる化合物、分子または物質を指す。いくつかの実施形態において、脱水剤またはカルボキシル活性化剤は、攻撃する求核試薬がアミンまたはアルコールであるカルボン酸を活性化し、その結果アミドまたはエステル形成を生じることができる。
【００４６】
このような脱水剤の非限定的な例には、カルボジイミド（例えば、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩など）及びシアンアミドが含まれる。
【００４７】
さらなる脱水試薬の例には、トリエチルアミンのような第３級アミンとともに一般的に使用されるアルキルクロロホルメート（例えば、Ｋｉｍ，Ｌｅｅ，Ｋｉｍ Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８５，５０，５６０を参照）、トリフェニルホスフィンを使用したジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）（例えば、Ｃａｍｐ；Ｊｅｎｋｉｎｓ Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８９，５４，３０４５，３０４９（光延反応）を参照）、種々のクロロシラン（例えば、Ｎａｋａｏ；Ｏｋａ；Ｆｕｋｕｍｏｔｏ Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊｐｎ．１９８１，５４，１２６７を参照。また、例えば、Ｂｒｏｏｋ；Ｃｈａｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９８３，２０１を参照）、クロロスルホニルイソシアネート（例えば、Ｄｈａｒ，Ｍｕｒｔｈｙ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９８８，４３７‐４５０を参照）、およびＮ，Ｎ’‐カルボニルジイミダゾール（例えば、Ｍｏｒｔｏｎ，Ｍａｎｇｒｏｏ，Ｇｅｒｂｅｒ Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．１９８８，６６，１７０１を参照）が含まれる。いくつかの実施形態において、前記脱水剤はカルボジイミドである。いくつかの実施形態において、前記カルボジイミドは、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩またはＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシル‐カルボジイミドである。
【００４８】
いくつかの実施形態において、反応物の脱水は、カルボン酸とアミンとの反応を、それらがアミノ酸の一部であろうとなかろうと含んでもよい。いくつかの実施形態において、所望のカップリング反応を得るために反応物を脱水するさらに一般的な方法を使用してもよい（例えば、Ｂｅｃｋｗｉｔｈ’ｓ ｍｏｎｏｇｒａｐｈ，ｐｐ．７３‐１８５，ｉｎ Ｔｈｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｍｉｄｅｓを参照）。例えば、一つの一般的な方法は、アミンと酸塩化物との反応である。いくつかの実施形態においては、第１の級アミンを使用したクロロホルメートで反応物を処理する。なぜなら、これは、ある目的でアミンを必要とする場合に、後で転化することができるためである（例えば、Ｚａｂｉｃｋｙ，Ａ．Ａ．，Ｅｄ．；Ｗｉｌｅｙ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９７０；Ｒａｕｃｈｅｒ；Ｊｏｎｅｓ Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９８５，１５，１０２５を参照）。本明細書および特許請求の範囲で使用される「アミン含有薬剤」という用語は一般的に、第１の級または第２の級アミン基を含有する化合物、分子または物質、またはアンモニアを指す。このようなアミン含有薬剤の非限定的な例には、アミノ酸（例えば、Ｌ‐アスパラギン酸）、アスパラギン酸等、またはそのエステルまたは誘導体が含まれる。
【００４９】
タラポルフィンナトリウムは、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６、ＮＰｅ６、ＭＡＣＥ、タポルフィン、ＭＥ２９０６、Ａｃｅ６、ＡＣ６およびＬＳ１１として一般的に知られている。この化学抄録サービス登録番号は、２２０２０１‐３４‐３であり、化学名は、（＋）‐テトラナトリウム（２Ｓ，３Ｓ）‐１８‐カルボキシラト‐２０‐［Ｎ‐（Ｓ）‐１，２‐ジカルボキシラトエチル］‐カルバモイルメチル‐１３‐エチル‐３，７，１２，１７‐テトラメチル‐８‐ビニルクロリン‐２‐プロパノエートである。
【００５０】
タラポルフィンナトリウムは、光活性化薬物療法で典型的に使用される感光剤である。光活性化後、タラポルフィンナトリウムは、一重項酸素の形成を促進する長期間の高エネルギー電子状態を形成し、一重項酸素媒介の細胞死を生じる。いくつかの実施形態において、前記タラポルフィンナトリウムは、癌細胞と相互作用し、光にあてられると、癌細胞を死滅させるか破壊することができる。
【００５１】
図１に示すように、クロリンｅ６からタラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を調製するには、一般的に２段階プロセスが必要となる。いくつかの実施形態においては、第１の段階で、クロリンｅ６が脱水剤によって活性化され、第２の段階で、活性化混合物がアミン含有薬剤と反応して、タラポルフィンナトリウムを形成する。
【００５２】
これまで活性化手順の反応生成物は、高エネルギーで短寿命の不安定な化学種であると考えられていたため、単離または精製することはできない。しかしながら、本出願人等は、この反応の有意な成分をクロリンｅ６無水物と同定し、この中間体が安定な化学種であることを思いがけなく発見した。いくつかの実施形態において、中間体は、単離または精製されると、Ｌ‐アスパラギン酸塩と反応して、クロリンｅ６無水物の単離または精製を行わなかった場合よりも純粋なタラポルフィンナトリウムを形成する。
【００５３】
いくつかの実施形態において、タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスは、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤で化合して、以下の式Ｉの中間体：
【００５４】
【化１０】
またはその塩を含む活性化反応混合物を得ることを含んでもよい。
【００５５】
前記プロセスはさらに、１つ以上の分離を使用して反応混合物から式Ｉの中間体またはその塩を単離することを含んでもよい。式Ｉの中間体またはその塩を混合物から抽出、単離、分離および／または精製するのに適した技法および／または方法には、液体クロマトグラフィー（例えば、ＨＰＬＣ）、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、平面クロマトグラフィー等などの抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術が含まれる。いくつかの実施形態においては、活性シリカ層に混合物を通過させて、得られたシリカ処理した反応生成物を質量分光法で分析してもよい。図５は、クロリンｅ６の脱水剤による活性化反応前のシリカ処理した反応生成物の質量スペクトルを示す。電子スプレーイオン化を使用し、極性をプラスに設定したＡｇｉｌｅｎｔ １１００シリーズＬＣ／ＭＳＤ機器上でスペクトルを記録した。
【００５６】
図５に示すように、クロリンｅ６無水物のピークは、現時点で、反応副生成物のピークよりも比例してはるかに高い。最も強いピークは、クロリンｅ６無水物のピークである。
【００５７】
アルカリ水溶液（水酸化ナトリウムを使用してアルカリ状態を作り出す）中で、現時点で、高いクロリンｅ６無水物濃度を有する、シリカ処理した、またはその他の方法で精製した活性化反応生成物をＬ‐アスパラギン酸と反応させると、従来のものと比べてはるかに純粋なタラポルフィンナトリウム含有反応生成物が生成した。カップリング反応生成物のＨＰＬＣ分析を図６に示す。（存在する全クロリン種に対して）約９５％のカップリング反応生成物がタラポルフィンナトリウムで、わずかに約５％が他の反応生成物である。このカップリング反応生成物を９６％のタラポルフィンナトリウムにさらに精製することは、非常に低い割合のタラポルフィンナトリウムを含む従来の反応生成物の場合と比べて、はるかに簡単で、コストもかからない。いくつかの実施形態において、得られたタラポルフィンナトリウムは、約９０％〜約９９％以上の純度を有する。
【００５８】
カップリング反応生成物の精製は、不純物を除去するＨＰＬＣによる一連の処理を必要とする。そのため、いくつかの実施形態においては、増加したタラポルフィンナトリウム濃度（およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質などの低減した濃度の他の（好ましくない）活性化反応生成物）を有する反応生成物を使用して精製プロセスを開始することで、ＨＰＬＣ精製プロセスの必要性がなくなる可能性ももたらされる。したがって、いくつかの実施形態は、高いタラポルフィンナトリウム純度のみならず、高いタラポルフィンナトリウム収率の可能性も提供する。
【００５９】
いくつかの実施形態において、活性化反応から生成した活性化反応混合物は、最初に精製されて、増加した濃度のクロリンｅ６無水物と、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質などの低減した濃度の他の（望ましくない）活性化反応生成物を含む精製した活性化反応混合物を生成する（ジアスパルチルクロリンｅ６の１つの異性体の図を図３に示す）。ジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６は、典型的には全生成物混合物の３〜４％を含む。一般的に、ジアスパルチルクロリンｅ６は、一連の逆相ＨＰＬＣ手順の多段階によって除去される。しかしながら、使用したＨＰＬＣプロセスは、コストと時間の両方がかかる。さらに、多段階のＨＰＬＣ分離は、タラポルフィンナトリウム生成物の損失をもたらし、それによって生成物の収率を５０％程度低下させる。
【００６０】
以下の式Ｉの構造：
【００６１】
【化１１】
を有し、活性化混合物中にこれまで存在すら知られていない「活性化中間体」が存在することがすでに明らかにされている。
【００６２】
この式Ｉのクロリンｅ６無水物は、「クロリンｅ６環状無水物」または「無水物」と呼んでもよい。図４に示すように、活性化混合物から精製されたこのクロリンｅ６無水物をＬ‐アスパルチルクロリンｅ６とのカップリング反応で反応させると、ジアスパルチルクロリンｅ６の生成が急激に低下する。
【００６３】
いくつかの実施形態において、前記プロセスはさらに、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせて、タラポルフィンナトリウムまたはその薬学的に許容される塩を形成する工程を含む。いくつかの実施形態において、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせることは、クロリンｅ６をカルボジイミドと反応させることを含む。いくつかの実施形態において、前記カルボジイミドは、ＤＣＣまたはＥＤＣである。
【００６４】
いくつかの実施形態において、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせることは、ジメチルスルホキシドまたはジメチルホルムアミドの存在下で、クロリンｅ６をカルボジイミドと合わせることを含む。いくつかの実施形態において、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせることは、クロリンｅ６をＥＤＣまたはＤＣＣと合わせることを含む。
【００６５】
いくつかの実施形態において、式Ｉの中間体またはその塩を単離することは、活性シリカを使用して式Ｉの中間体またはその塩を混合物から分離して、実質的に純粋な式Ｉの中間体またはその塩を得ることを含む。
【００６６】
いくつかの実施形態において、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせることは、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアスパラギン酸ナトリウムと合わせて、タラポルフィンナトリウムを形成することを含む。
【００６７】
いくつかの実施形態において、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせることは、ジメチルスルホキシドの存在下で、単離した式Ｉの中間体またはその塩をＬ‐アスパラギン酸またはそのエステルと合わせて、タラポルフィンナトリウムを形成することを含む。
【００６８】
いくつかの実施形態において、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせることは、アルカリ水溶液中で、クロリンｅ６無水物とＬ‐アスパラギン酸またはそのエステルとをカップリングさせてモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の四ナトリウム塩を形成する工程を含む。
【００６９】
本開示の特定の実施形態は、クロリンｅ６無水物またはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスに関する。前記プロセスは、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて以下の式：
【００７０】
【化１２】
を有するクロリンｅ６無水物またはその塩を含む混合物を得ることを含む。いくつかの実施形態において、前記カルボキシル活性化剤は、ＤＣＣまたはＥＤＣである。
【００７１】
前記プロセスはさらに、クロリンｅ６無水物またはその塩を精製することを含んでもよい。いくつかの実施形態において、クロリンｅ６無水物またはその塩を精製することは、１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術を使用して混合物からクロリンｅ６無水物またはその塩を単離することを含む。
【００７２】
図７は、一例示的実施形態によるアセトンｄ６中のクロリンｅ６無水物の１Ｈ‐ＮＭＲスペクトルを示す。表１を参照すると、位置の割当ては、以下の式Ｉのクロリンｅ６無水物：
【００７３】
【化１３】
で示される対応する原子に従って番号が付けられる。
【００７４】
【化１４】
図８は、図７のＮＭＲスペクトルの４〜６ｐｐｍの拡大部分、ならびに同様の条件下で採取したクロリンｅ６のＮＭＲスペクトルの４〜６ｐｐｍの拡大部分を示す。これらのグラフは、クロリンｅ６とその無水物間のいくつかの構造の違いを明らかにする。
【００７５】
本開示の特定の実施形態は、中間体を調製する方法に関する。前記方法は、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤で活性化して中間体を含む混合物を得ることを含み、前記中間体は、溶媒としてｄ６‐アセトン／ｄ６‐ジメチルスルホキシドを使用し、５００ＭＨｚでプロトン核磁気共鳴（１Ｈ‐ＮＭＲ）分光法により分析すると、
【００７６】
【化１４ａ】
の付近のｐｐｍの化学シフトを含むスペクトルを示す。
【００７７】
前記方法はさらに、中間体を単離することを含む。いくつかの実施形態において、中間体を単離することは、１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術を使用して混合物から中間体を分離することを含む。いくつかの実施形態において、１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術は、混合物を活性シリカと接触させることを含む。
【００７８】
前記方法はさらに、単離した中間体を真空下で乾燥させる工程を含む。
【００７９】
本開示の特定の実施形態は、タラポルフィンとその塩を調製する方法に関する。前記方法は、中間体（クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて、以下の式：
【００８０】
【化１５】
を有するクロリンｅ６無水物またはその塩を含む混合物を得て、クロリンｅ６無水物またはその塩を精製することにより調製）をアミン含有試薬と合わせて、モノアミノ酸クロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩を形成する工程を含む。いくつかの実施形態において、前記アミン含有試薬は、Ｌ‐アスパラギン酸またはそのエステルである。
【００８１】
本開示の特定の実施形態は、反応生成物に関する。前記反応生成物は、第１の反応体積と第２の反応体積との間のカップリング反応の生成物であって、前記第１の反応体積が、以下の式のクロリンｅ６無水物：
【００８２】
【化１６】
と、第１の反応体積中に存在する全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含み、前記第２の反応体積が、Ｌ‐アスパラギン酸またはそのエステルを含む、生成物に関する。いくつかの実施形態において、ｍｏｌ％と％ＡＵＣ（曲線の下の面積）の単位は、交換可能に使用される。％ＡＵＣは、曲線の下の面積の割合として定義され、約４００ｎｍまたは約４１０ｎｍの波長を有する検出信号を使用したＨＰＬＣ‐ＵＶ吸光度分析によって判定される。クロマトグラムにおいて、対象のピークの曲線の下の面積をすべてのピークの曲線の下の面積で除算することにより、％ＡＵＣを計算する。いくつかの実施形態において、％ＡＵＣは、混合物中のクロリン種が同じ発色団を共有することから、混合物中のクロリン種の濃度に比例することが予想される。したがって、ＨＰＬＣクロマトグラム中の分離した化学種の％ＡＵＣを測定することによって、反応混合物中に存在する化学種の相対濃度および／またはｍｏｌ％を判定することができる。いくつかの実施形態においては、各ＨＰＬＣグラフのピークに対する相対ＡＵＣを使用して反応混合物中に存在する化学種の相対濃度および／またはｍｏｌ％を判定してもよい。
【００８３】
いくつかの実施形態において、前記反応生成物は、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩、およびジアスパルチルクロリンｅ６を含む。いくつかの実施形態において、前記反応生成物は、前記反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約２ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む。いくつかの実施形態において、前記反応生成物は、前記反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約１ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む。いくつかの実施形態において、前記第１の反応体積はさらに、ジメチルスルホキシドまたはジメチルホルムアミドを含む。
【００８４】
前記第１の反応体積は、精製して、分離プロセスによってジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を除去することができる。いくつかの実施形態において、前記分離プロセスは、活性シリカクロマトグラフィーである。いくつかの実施形態において、得られた活性化混合物は、アルカリ水溶液中でＬ‐アスパラギン酸（図４に示す）と合わせて、他の副生成物中にタラポルフィンナトリウムを生じる。
【００８５】
本開示の特定の実施形態は、クロリンｅ６とカルボジイミドの化学反応生成物であって、前記化学反応生成物が、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【００８６】
【化１７】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む、化学反応生成物に関する。いくつかの実施形態において、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、前記化学反応生成物中に存在する全クロリン種の約５ｍｏｌ％未満を含む。いくつかのさらなる実施形態において、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、前記化学反応生成物中に存在する全クロリン種の約３ｍｏｌ％未満を含む。いくつかの実施形態において、前記クロリンｅ６無水物は、前記化学反応生成物中に存在する全クロリン種の少なくとも約８５ｍｏｌ％を含む。
【００８７】
いくつかの実施形態において、前記カルボジイミドは、ＥＤＣまたはＤＣＣである。
【００８８】
本開示の特定の実施形態は、以下の式Ｉの化合物：
【００８９】
【化１８】
またはその薬学的に許容される塩を実質的に純粋な形態で含む組成物に関する。
【００９０】
いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物中の全クロリン種の約８５ｍｏｌ％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物中の全クロリン種の約９０ｍｏｌ％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物中の全クロリン種の約９５ｍｏｌ％を超える。
【００９１】
いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物の約８５重量％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物の約９０重量％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物の約９５重量％を超える。
【００９２】
本開示の特定の実施形態は、以下の式Ｉの化合物：
【００９３】
【化１９】
またはその薬学的に許容される塩を実質的に純粋な形態で含む化学反応生成物に関する。
【００９４】
いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物の全含有量は、前記化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約８５ｍｏｌ％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物の全含有量は、前記化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約９０ｍｏｌ％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物の全含有量は、前記化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約９５ｍｏｌ％を超える。
【００９５】
本開示の特定の実施形態は、タラポルフィンナトリウムまたはその薬学的に許容される塩の製造方法に関する。前記方法は、有機溶媒の存在下で、約８〜約１２の範囲のｐＨを有するアスパラギン酸塩組成物をクロリンｅ６とカルボジイミドの化学反応生成物と合わせて、反応混合物を形成することを含む。いくつかの実施形態において、前記有機溶媒は、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、塩化メチレンまたはそれらの混合物から選択される。
【００９６】
いくつかの実施形態において、前記化学反応生成物は、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【００９７】
【化２０】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む。いくつかの実施形態において、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、前記化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約５ｍｏｌ％未満を含む。
【００９８】
前記方法はさらに、反応混合物を塩基性にすることを含む。いくつかの実施形態において、反応混合物を塩基性にすることは、水酸化物を加えて反応混合物のｐＨを約８〜約１２に維持することを含む。
【００９９】
いくつかの実施形態において、前記方法はさらに、塩基性反応混合物からタラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を沈殿させることを含んでもよい。いくつかの実施形態において、タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を沈殿させることは、適した沈殿溶媒を塩基性反応混合物に加えることを含む。
【０１００】
前記方法はさらに、タラポルフィン（またはその薬学的に許容される塩）の沈殿物を塩基性反応混合物からろ過、遠心分離および／またはクロマトグラフィーによって分離することを含む。
【０１０１】
本開示の特定の実施形態は、タラポルフィンナトリウムを調製する方法に関する。前記方法は、精製した中間体反応混合物を反応において利用してタラポルフィンナトリウムを調製することを含み、前記精製した中間体反応混合物は、有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が除去されたクロリンｅ６、クロリンｅ６無水物、およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む粗反応混合物から得られたものである。
【０１０２】
いくつかの実施形態において、前記精製した中間体反応混合物は、全クロリン種に基づいて約５％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む。いくつかの実施形態において、前記精製した中間体反応混合物は、全クロリン種に基づいて約３％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、クロリンｅ６環状無水物は、以下の式Ｉのクロリンｅ６環状無水物：
【０１０４】
【化２１】
またはその塩である。
【０１０５】
いくつかの実施形態において、前記精製した中間体反応混合物はさらに、ジメチルスルホキシドを含む。いくつかの実施形態において、前記精製した中間体反応混合物はさらに、ＥＤＣまたはＤＣＣおよびジメチルホルムアミドを含む。いくつかの実施形態において、有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、活性シリカを使用して除去されている。
【０１０６】
本開示の特定の実施形態は、光活性剤またはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスに関する。前記プロセスは、以下の式の化合物：
【０１０７】
【化２２】
またはその薬学的に許容される塩、有機溶媒および１つ以上のジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質を含む組成物を塩基性水性アスパラギン酸ナトリウム組成物と合わせて、粗モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６反応混合物を形成することを含み、前記粗反応混合物は、粗反応混合物中に存在する全クロリン種に基づいて約２ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む。
【０１０８】
前記プロセスはさらに、反応混合物を塩基性にすることを含む。前記プロセスはさらに、実質的な量のモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６を反応混合物から沈殿させることを含む。いくつかの実施形態において、実質的な量のモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６を反応混合物から沈殿させることは、十分な量の有機溶媒を提供して反応混合物から存在するモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の約５０ｍｏｌ％を超える沈殿物を生じることを含む。
【０１０９】
いくつかの実施形態において、反応混合物を塩基性にすることは、十分な量のアルカリ性物質を反応混合物に提供して約８〜約１２の範囲のｐＨを維持することを含む。いくつかの実施形態において、反応混合物を塩基性にすることは、十分な量のアルカリ性物質を反応混合物に提供して約１０〜約１２の範囲のｐＨを維持することを含む。
【０１１０】
いくつかの実施形態において、少なくとも１つのジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質は、前記反応混合物中に存在する全クロリン種の約１ｍｏｌ％〜約２ｍｏｌ％未満を含む。
【０１１１】
本開示の特定の実施形態は、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【０１１２】
【化２３】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む反応生成物であって、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が、存在する全クロリン種の約１〜２ｍｏｌ％未満を構成する、反応生成物に関する。
【実施例】
【０１１３】
（実施例１） クロリンｅ６無水物の合成
クロリンｅ６（２．０ｇ、３．３ｍｍｏｌ）（Ｆｒｏｎｔｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を１０ｍＬのＤＭＦに溶解した。ＥＤＣ（０．６１ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を混合物に添加して、１．５時間反応させた。この反応混合物をシリカゲル（Ｓｉｇｍａ‐Ａｌｄｒｉｃｈ）の層に充填し、アセトンで溶離した。着色部分を収集し、真空下で濃縮した。無水物をさらに真空下で乾燥させた。
【０１１４】
（実施例２） タラポルフィンナトリウムの合成
ｐＨ１１に達するまで１０Ｍ ＮａＯＨを１０ｍＬの水中のアスパラギン酸（約１．３ｇ、１０ｍｍｏｌ）に添加することにより、アスパラギン酸ナトリウム溶液を調製した。実施例１で得たクロリンｅ６無水物をＤＭＦに溶解し、アスパラギン酸ナトリウム溶液に緩徐に添加した。混合物を１０Ｍ ＮａＯＨで塩基性にした。過剰のＤＭＦを暗黒色の懸濁液に添加して、生成物を沈殿させた。この生成物を濾取し、アセトンで洗浄した。この材料をアセトン中に再懸濁させて濾取した。得られた粗タラポルフィンナトリウムを真空下で乾燥させた。
【０１１５】
前述の詳細な説明において少なくとも１つの実施例の実施形態を示したが、莫大な数の変形が存在することを理解しなければならない。また、本明細書に記載の１つ以上の例示的実施形態は、本開示の適用範囲、適用可能性または構成を何ら限定するものではないことも理解しなければならない。むしろ、前述の詳細な説明は、記載した１つ以上の実施形態を実施するのに簡便なロードマップを当業者に提供するものとなる。添付の特許請求の範囲に記載の開示およびその法的同等物の範囲から逸脱することなく、要素の機能および配置に種々の変更を行えることを理解しなければならない。
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
この出願は、米国特許法§１１９（ｅ）の下、２００６年６月３０日に出願された米国仮特許出願第６０／８１７，７６９号（この出願は、その全体が参考として本明細書に援用される）の利益を主張する。
【０００２】
本開示は、一般的には生体作用組成物および身体治療組成物の分野に関し、より具体的には、例えば、癌組織の検出、予防および／または治療において有用な光活性化合物、組成物および方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
関連技術の説明
モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６四ナトリウム塩は、タラポルフィンナトリウムとして一般的に知られており、光活性化学薬品または薬物であることが知られている。例えば、米国特許第ＲＥ３７，１８０号は、患者に対する薬物の静脈内投与と、薬物を含有する組織に適当な波長の光をあてて薬物を光活性化することを広い意味で含むモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の使用方法に関する。薬物は活性化されると、新しい血管を閉塞する。したがって、この薬物は、血管閉塞がプラスの効果をもつことが期待される疾病の治療において有用である。
【０００４】
タラポルフィンナトリウムは、典型的には、植物原料から製造される。抽出手順と反応手順の両方を含むプロセス中に、副生成物が生成される。これらの副生成物の一つは、ジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６である。ジアスパルチルクロリンｅ６は、十分制御されたプロセスにおいて、比較的低量（典型的には約５％）で反応副生成物として生じる一方で、タラポルフィンナトリウム生成物を許容基準に精製するには徹底的な除去処理を必要とする。例えば、粗タラポルフィンナトリウム反応生成物の精製および／または種々の不純物（例えば、ジアスパルチルクロリンｅ６）の除去は、通常、反応生成物を複数のＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）手順にかけて許容されるタラポルフィンナトリウム純度レベルを達成することを必要とする。この精製手順はコストと時間がかかり、また除去した不純物とともに約５０％以下のタラポルフィンナトリウムの実質的損失をもたらすおそれがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、コストのかかる繰り返しの精製手順を使用しないで、あるいは少ない処理手順でタラポルフィンナトリウム生成物を生成するプロセスを開発することが望ましい。さらに、大部分のタラポルフィンナトリウムを損失せずに反応生成物を精製することおよび／または原料投入量の質量当たりのタラポルフィンナトリウム生成物の収率を維持するまたは増加させることが望ましい。
【０００６】
タラポルフィンナトリウムの市場的受容性は、製造コスト、貯蔵寿命、貯蔵中の安定性、製造の容易性、効力、生物学的利用能、薬物動態特性などの種々の要因に左右される。そのため、製造コストを有意に低減するタラポルフィンナトリウムを製造する新規の手法を得ることが望ましい。また、より純粋な形態のタラポルフィンナトリウムをもたらす新規の組成物を得ることも望ましい。
【０００７】
本開示は、上に記載した欠点の１つ以上を克服し、さらに関連した利点を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
要旨
一態様において、本開示は、クロリンｅ６とカルボジイミドの化学反応生成物に関する。いくつかの実施形態において、化学反応生成物は、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【０００９】
【化１】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む。いくつかの実施形態において、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、前記化学反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満を含む。
【００１０】
別の態様において、本開示は、以下の式Ｉの化合物：
【００１１】
【化２】
またはその薬学的に許容される塩を実質的に純粋な形態で含む組成物に関する。
【００１２】
別の態様において、本開示は、クロリンｅ６無水物またはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスに関する。前記プロセスは、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて以下の式：
【００１３】
【化３】
を有するクロリンｅ６無水物またはその塩を含む混合物を得ることを含む。前記プロセスはさらに、クロリンｅ６無水物またはその塩を精製することを含んでもよい。
【００１４】
別の態様において、本開示は、中間体を調製する方法に関する。前記方法は、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤で活性化して中間体を含む混合物を得ることを含み、前記中間体は、ｄ６‐アセトンとｄ６‐ジメチルスルホキシドを含む溶媒を使用し、５００ＭＨｚでプロトン核磁気共鳴（１Ｈ‐ＮＭＲ）分光法により分析すると、
【００１５】
【化３ａ】
の付近のｐｐｍの化学シフトを含むスペクトルを示す。前記方法はさらに、中間体を単離することを含む。
【００１６】
別の態様において、本開示は、タラポルフィンナトリウムまたはその薬学的に許容される塩を調製する方法に関する。前記方法は、有機溶媒の存在下で、約１０〜約１２の範囲のｐＨを有するアスパラギン酸塩組成物を請求項１に記載の化学反応生成物と合わせて反応混合物を形成することを含む。前記方法はさらに、反応混合物を塩基性にすることを含んでもよい。前記方法はさらに、塩基性反応混合物からタラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を沈殿させることを含む。
【００１７】
別の態様において、本開示は、タラポルフィンナトリウムを調製する方法に関する。前記方法は、精製した中間体反応混合物を反応において利用してタラポルフィンナトリウムを調製することを含み、前記精製した中間体反応混合物は、有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が除去されたクロリンｅ６、クロリンｅ６無水物、およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む粗反応混合物から得られたものである。
【００１８】
別の態様において、本開示は、第１の反応体積と第２の反応体積との間のカップリング反応の生成物を含む反応生成物であって、前記第１の反応体積が、以下の式のクロリンｅ６無水物：
【００１９】
【化４】
と、反応生成物中の全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含み、前記第２の反応体積が、Ｌ‐アスパラギン酸またはそのエステルを含む、反応生成物に関する。いくつかの実施形態において、前記反応生成物は、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩およびジアスパルチルクロリンｅ６を含む。クロリン種の例には、クロリンｅ６、クロリンｅ６無水物、およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質、ならびにクロリン発色団を含む化合物が含まれる。
【００２０】
別の態様において、本開示は、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスに関する。前記プロセスは、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて、以下の式Ｉの中間体：
【００２１】
【化５】
またはその塩を含む混合物を得ることを含む。前記プロセスはさらに、式Ｉの中間体またはその塩を単離することを含む。いくつかの実施形態において、前記プロセスはさらに、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせて、タラポルフィンナトリウムまたはその薬学的に許容される塩を形成する工程を含む。
【００２２】
別の態様において、本開示は、光活性剤（ｐｈｏｔｏａｃｔｉｖｅ ａｇｅｎｔ）またはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスに関する。前記プロセスは、以下の式の化合物：
【００２３】
【化６】
またはその薬学的に許容される塩、有機溶媒および１つ以上のジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質を含む組成物を塩基性水性アスパラギン酸ナトリウム組成物と合わせて、粗モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６反応混合物を形成することを含む。いくつかの実施形態において、前記粗反応混合物は、粗反応混合物中に存在する全クロリン種に基づいて約２ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む。前記プロセスはさらに、反応混合物を塩基性にすることを含む。いくつかの実施形態において、前記プロセスはさらに、実質的な量のモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６を反応混合物から沈殿させることを含む。
【００２４】
別の態様において、本開示は、クロリンｅ６と脱水剤との化学反応生成物であって、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【００２５】
【化７】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む、化学反応生成物に関する。いくつかの実施形態において、前記ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、前記化学反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満を含む。
【００２６】
別の態様において、本開示は、クロリンｅ６の反応生成物を含む混合物に関する。前記混合物は、これまで未知のクロリンｅ６無水物および／またはその誘導体を含む。前記クロリンｅ６無水物は、以下の式からなる：
【００２７】
【化８】
前記混合物は、有意に低減した濃度のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質および存在する全クロリン種に対して典型的に５％未満の他の好ましくない化学種を含む。
【００２８】
前記混合物は、クロリンｅ６とカルボジイミドとの活性化反応の精製した反応生成物であってもよい。前記カルボジイミドは、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）‐カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）またはＮ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミド（ＤＣＣ）であってもよい。
【００２９】
いくつかの実施形態において、上記式のクロリンｅ６無水物は、反応混合物中の全クロリン種に基づいて約５％以下のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む混合物中に存在してもよい。別の態様において、前記クロリンｅ６無水物は、混合物中の全クロリン種に対して３％以下のジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質を含有する混合物中に存在してもよい。
【００３０】
別の態様において、本開示は、タラポルフィンナトリウムを調製する方法であって、クロリンｅ６、その無水物およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む中間体反応混合物を調製し、有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を混合物から除去して混合物を精製し、反応における精製混合物を利用してタラポルフィンナトリウムを調製する手順を含む。
【００３１】
いくつかの実施形態において、前記中間体反応混合物は、ジメチルスルホキシドを含んでもよい。いくつかの実施形態において、前記中間体反応混合物は、（ＥＤＣ）およびジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を含んでもよい。精製手順は、活性シリカの層を介してろ過することを含んでもよい。
【００３２】
前記精製手順はまた、前駆物質の形成の抑制を目的とする薬剤をジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６および他の好ましくない化学種に加えることを含んでもよい。前記精製手順は、ジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質を中間体反応混合物中に存在する全クロリン種に基づいて約５％未満または約３％未満の濃度に除去することを含んでもよい。
【００３３】
前記利用手順は、ジメチルスルホキシド中、高ｐＨでのＬ‐アスパラギン酸またはその誘導体またはエステルとのカップリングを含んでもよい。前記利用手順はまた、アルカリ水溶液中でのＬ‐アスパラギン酸またはその誘導体またはエステルとのカップリングを含んでもよい。
【００３４】
別の態様において、本開示は、（存在する全クロリン種に対して）約５％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む第１の反応体積であって、以下の式のクロリンｅ６無水物：
【００３５】
【化９】
を含む、第１の反応体積と、Ｌ‐アスパラギン酸またはその誘導体またはエステルを含む第２の反応物との間のカップリング反応の生成物を含む反応生成物に関する。
【００３６】
前記反応生成物は、存在する全クロリン種に基づいて約１％以下のジアスパルチルクロリンｅ６を含んでもよい。前記第１の反応体積は、ジメチルスルホキシドを含んでもよい。第１の反応体積を精製して活性シリカの層を介するろ過などの適した分離工程等によってジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質および他の好ましくない反応生成物を除去してもよい。
【００３７】
さらに別の態様において、本開示は、ペプチド結合を介して他の化学部分に結合したクロリンｅ６を含む化合物の調製における中間体としての精製したクロリンｅ６無水物の使用に関する。
【００３８】
以下の図と合わせて考えると、詳細な説明および特許請求の範囲を参照することにより、本開示のより完全な理解が得られる。以下の図において、同様の参照番号は、図全体を通して類似の要素を示す。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】一例示的実施形態に基づきクロリンｅ６からタラポルフィンナトリウムを合成する２段階プロセス（活性化の後にカップリング）の概略図である。
【図２Ａ】一例示的実施形態に基づき精製したクロリンｅ６無水物の組成物の相対強度対質量電荷比（ｍ／ｚ）の質量分光分析グラフである。
【図２Ｂ】一例示的実施形態に基づきクロリンｅ６無水物の組成物の４１０ｎｍの吸光度（ＡＵ）対時間（分）のＨＰＬＣ（高圧液体クロマトグラフィー）グラフである。５９６．８および５７８．８と標示したピークは、それぞれクロリンｅ６およびクロリンｅ６無水物である。
【図３】一例示的実施形態に基づくジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の１つの異性体の構造式の概略図である。
【図４】一例示的実施形態に基づく単離したクロリンｅ６無水物のタラポルフィンナトリウムへの転化の概略図である。
【図５】活性シリカで処理した後に活性化反応から得られる反応混合物の相対強度対質量電荷比（ｍ／ｚ）の質量分光分析グラフであり、一例示的実施形態に基づき混合物中の主要な化学種がクロリンｅ６無水物であることを例示するグラフである。
【図６】一例示的実施形態に基づき精製した反応生成物中に存在するクロリン種の相対百分率を示す、ＵＶ検出を使用した４１０ｎｍの吸光度（ＡＵ）対時間（分）のＨＰＬＣグラフである。
【図７】一例示的実施形態に基づき５００ＭＨｚで収集した、ｄ６‐アセトン／ｄ６‐ジメチルスルホキシド中のクロリンｅ６無水物のプロトン核磁気共鳴（１Ｈ‐ＮＭＲ）スペクトルである。
【図８】一例示的実施形態に基づき５００ＭＨｚで収集した、ｄ６‐アセトン／ｄ６‐ジメチルスルホキシド中のクロリンｅ６無水物の１Ｈ‐ＮＭＲスペクトルの選択領域と、ｄ６‐アセトン／ｄ６‐ジメチルスルホキシド中のクロリンｅ６の１Ｈ‐ＮＭＲスペクトルの選択領域との比較である。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
詳細な説明
以下の説明においては、種々の開示した実施形態の完全な理解を提供するために、ある特定の詳細な説明が含まれる。しかしながら、実施形態が１つ以上のこれらの特定の詳細な説明なしに、あるいは他の方法、成分、材料等を使用して実施されてもよいことを、当業者は理解するであろう。他の場合には、分離カラム、ろ過床等を含むがこれらに限定されない抽出、分離、クロマトグラフィーおよび／または精製装置と関連した公知の構造は、実施形態の説明を不必要に分かりにくくするのを避けるために詳細に表示あるいは記載されていない。
【００４１】
特に文脈において必要とされない限り、以下に続く明細書および特許請求の範囲全体を通して、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という用語、およびその「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変形は、「含まれるが、これらに限定されない」のようなオープンな包括的意味で解釈されるものとする。
【００４２】
本明細書全体における「一実施形態」または「実施形態」または「別の実施形態において」または「いくつかの実施形態において」の言及は、実施形態と関連して記載される特定の対象特性、構造または特徴が少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味する。したがって、本明細書全体を通して種々の箇所に出現する「一実施形態において」または「実施形態において」または「別の実施形態において」または「いくつかの実施形態において」という語句は、必ずしもすべてが同じ実施形態を示すとは限らない。さらに、特定の特性、構造または特徴を、１つ以上の実施形態において適した方法で組み合わせてもよい。
【００４３】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、特に内容において明確に規定されない限り、複数の対象物を含むことに留意しなければならない。したがって、例えば、クロリンｅ６無水物の中間体とアミン含有試薬との化学反応の言及は、単一のアミン含有試薬または２つ以上のアミン含有試薬を含む。また、「または」という用語は、特に内容において明確に規定されない限り、一般的に「および／または」を含む意味で使用されることに留意しなければならない。
【００４４】
以下の詳細な説明は、基本的に単に例示するものであって、本開示または本開示の適用および使用を限定するものではない。さらに、前述の技術分野、背景技術、発明の開示または以下の詳細な説明において提示される、いかなる明示的または暗示的な理論によっても拘束されるものではない。
【００４５】
本明細書および特許請求の範囲で使用される「脱水剤」または「カルボキシル活性化剤」という用語は一般的に、求核攻撃に対して、カルボン酸を活性化できる化合物、分子または物質を指す。いくつかの実施形態において、脱水剤またはカルボキシル活性化剤は、攻撃する求核試薬がアミンまたはアルコールであるカルボン酸を活性化し、その結果アミドまたはエステル形成を生じることができる。
【００４６】
このような脱水剤の非限定的な例には、カルボジイミド（例えば、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩など）及びシアンアミドが含まれる。
【００４７】
さらなる脱水試薬の例には、トリエチルアミンのような第３級アミンとともに一般的に使用されるアルキルクロロホルメート（例えば、Ｋｉｍ，Ｌｅｅ，Ｋｉｍ Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８５，５０，５６０を参照）、トリフェニルホスフィンを使用したジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）（例えば、Ｃａｍｐ；Ｊｅｎｋｉｎｓ Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８９，５４，３０４５，３０４９（光延反応）を参照）、種々のクロロシラン（例えば、Ｎａｋａｏ；Ｏｋａ；Ｆｕｋｕｍｏｔｏ Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊｐｎ．１９８１，５４，１２６７を参照。また、例えば、Ｂｒｏｏｋ；Ｃｈａｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９８３，２０１を参照）、クロロスルホニルイソシアネート（例えば、Ｄｈａｒ，Ｍｕｒｔｈｙ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９８８，４３７‐４５０を参照）、およびＮ，Ｎ’‐カルボニルジイミダゾール（例えば、Ｍｏｒｔｏｎ，Ｍａｎｇｒｏｏ，Ｇｅｒｂｅｒ Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．１９８８，６６，１７０１を参照）が含まれる。いくつかの実施形態において、前記脱水剤はカルボジイミドである。いくつかの実施形態において、前記カルボジイミドは、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩またはＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシル‐カルボジイミドである。
【００４８】
いくつかの実施形態において、反応物の脱水は、カルボン酸とアミンとの反応を、それらがアミノ酸の一部であろうとなかろうと含んでもよい。いくつかの実施形態において、所望のカップリング反応を得るために反応物を脱水するさらに一般的な方法を使用してもよい（例えば、Ｂｅｃｋｗｉｔｈ’ｓ ｍｏｎｏｇｒａｐｈ，ｐｐ．７３‐１８５，ｉｎ Ｔｈｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｍｉｄｅｓを参照）。例えば、一つの一般的な方法は、アミンと酸塩化物との反応である。いくつかの実施形態においては、第１の級アミンを使用したクロロホルメートで反応物を処理する。なぜなら、これは、ある目的でアミンを必要とする場合に、後で転化することができるためである（例えば、Ｚａｂｉｃｋｙ，Ａ．Ａ．，Ｅｄ．；Ｗｉｌｅｙ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９７０；Ｒａｕｃｈｅｒ；Ｊｏｎｅｓ Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９８５，１５，１０２５を参照）。本明細書および特許請求の範囲で使用される「アミン含有薬剤」という用語は一般的に、第１の級または第２の級アミン基を含有する化合物、分子または物質、またはアンモニアを指す。このようなアミン含有薬剤の非限定的な例には、アミノ酸（例えば、Ｌ‐アスパラギン酸）、アスパラギン酸等、またはそのエステルまたは誘導体が含まれる。
【００４９】
タラポルフィンナトリウムは、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６、ＮＰｅ６、ＭＡＣＥ、タポルフィン、ＭＥ２９０６、Ａｃｅ６、ＡＣ６およびＬＳ１１として一般的に知られている。この化学抄録サービス登録番号は、２２０２０１‐３４‐３であり、化学名は、（＋）‐テトラナトリウム（２Ｓ，３Ｓ）‐１８‐カルボキシラト‐２０‐［Ｎ‐（Ｓ）‐１，２‐ジカルボキシラトエチル］‐カルバモイルメチル‐１３‐エチル‐３，７，１２，１７‐テトラメチル‐８‐ビニルクロリン‐２‐プロパノエートである。
【００５０】
タラポルフィンナトリウムは、光活性化薬物療法で典型的に使用される感光剤である。光活性化後、タラポルフィンナトリウムは、一重項酸素の形成を促進する長期間の高エネルギー電子状態を形成し、一重項酸素媒介の細胞死を生じる。いくつかの実施形態において、前記タラポルフィンナトリウムは、癌細胞と相互作用し、光にあてられると、癌細胞を死滅させるか破壊することができる。
【００５１】
図１に示すように、クロリンｅ６からタラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を調製するには、一般的に２段階プロセスが必要となる。いくつかの実施形態においては、第１の段階で、クロリンｅ６が脱水剤によって活性化され、第２の段階で、活性化混合物がアミン含有薬剤と反応して、タラポルフィンナトリウムを形成する。
【００５２】
これまで活性化手順の反応生成物は、高エネルギーで短寿命の不安定な化学種であると考えられていたため、単離または精製することはできない。しかしながら、本出願人等は、この反応の有意な成分をクロリンｅ６無水物と同定し、この中間体が安定な化学種であることを思いがけなく発見した。いくつかの実施形態において、中間体は、単離または精製されると、Ｌ‐アスパラギン酸塩と反応して、クロリンｅ６無水物の単離または精製を行わなかった場合よりも純粋なタラポルフィンナトリウムを形成する。
【００５３】
いくつかの実施形態において、タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスは、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤で化合して、以下の式Ｉの中間体：
【００５４】
【化１０】
またはその塩を含む活性化反応混合物を得ることを含んでもよい。
【００５５】
前記プロセスはさらに、１つ以上の分離を使用して反応混合物から式Ｉの中間体またはその塩を単離することを含んでもよい。式Ｉの中間体またはその塩を混合物から抽出、単離、分離および／または精製するのに適した技法および／または方法には、液体クロマトグラフィー（例えば、ＨＰＬＣ）、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、平面クロマトグラフィー等などの抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術が含まれる。いくつかの実施形態においては、活性シリカ層に混合物を通過させて、得られたシリカ処理した反応生成物を質量分光法で分析してもよい。図５は、クロリンｅ６の脱水剤による活性化反応前のシリカ処理した反応生成物の質量スペクトルを示す。電子スプレーイオン化を使用し、極性をプラスに設定したＡｇｉｌｅｎｔ １１００シリーズＬＣ／ＭＳＤ機器上でスペクトルを記録した。
【００５６】
図５に示すように、クロリンｅ６無水物のピークは、現時点で、反応副生成物のピークよりも比例してはるかに高い。最も強いピークは、クロリンｅ６無水物のピークである。
【００５７】
アルカリ水溶液（水酸化ナトリウムを使用してアルカリ状態を作り出す）中で、現時点で、高いクロリンｅ６無水物濃度を有する、シリカ処理した、またはその他の方法で精製した活性化反応生成物をＬ‐アスパラギン酸と反応させると、従来のものと比べてはるかに純粋なタラポルフィンナトリウム含有反応生成物が生成した。カップリング反応生成物のＨＰＬＣ分析を図６に示す。（存在する全クロリン種に対して）約９５％のカップリング反応生成物がタラポルフィンナトリウムで、わずかに約５％が他の反応生成物である。このカップリング反応生成物を９６％のタラポルフィンナトリウムにさらに精製することは、非常に低い割合のタラポルフィンナトリウムを含む従来の反応生成物の場合と比べて、はるかに簡単で、コストもかからない。いくつかの実施形態において、得られたタラポルフィンナトリウムは、約９０％〜約９９％以上の純度を有する。
【００５８】
カップリング反応生成物の精製は、不純物を除去するＨＰＬＣによる一連の処理を必要とする。そのため、いくつかの実施形態においては、増加したタラポルフィンナトリウム濃度（およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質などの低減した濃度の他の（好ましくない）活性化反応生成物）を有する反応生成物を使用して精製プロセスを開始することで、ＨＰＬＣ精製プロセスの必要性がなくなる可能性ももたらされる。したがって、いくつかの実施形態は、高いタラポルフィンナトリウム純度のみならず、高いタラポルフィンナトリウム収率の可能性も提供する。
【００５９】
いくつかの実施形態において、活性化反応から生成した活性化反応混合物は、最初に精製されて、増加した濃度のクロリンｅ６無水物と、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質などの低減した濃度の他の（望ましくない）活性化反応生成物を含む精製した活性化反応混合物を生成する（ジアスパルチルクロリンｅ６の１つの異性体の図を図３に示す）。ジ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６は、典型的には全生成物混合物の３〜４％を含む。一般的に、ジアスパルチルクロリンｅ６は、一連の逆相ＨＰＬＣ手順の多段階によって除去される。しかしながら、使用したＨＰＬＣプロセスは、コストと時間の両方がかかる。さらに、多段階のＨＰＬＣ分離は、タラポルフィンナトリウム生成物の損失をもたらし、それによって生成物の収率を５０％程度低下させる。
【００６０】
以下の式Ｉの構造：
【００６１】
【化１１】
を有し、活性化混合物中にこれまで存在すら知られていない「活性化中間体」が存在することがすでに明らかにされている。
【００６２】
この式Ｉのクロリンｅ６無水物は、「クロリンｅ６環状無水物」または「無水物」と呼んでもよい。図４に示すように、活性化混合物から精製されたこのクロリンｅ６無水物をＬ‐アスパルチルクロリンｅ６とのカップリング反応で反応させると、ジアスパルチルクロリンｅ６の生成が急激に低下する。
【００６３】
いくつかの実施形態において、前記プロセスはさらに、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせて、タラポルフィンナトリウムまたはその薬学的に許容される塩を形成する工程を含む。いくつかの実施形態において、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせることは、クロリンｅ６をカルボジイミドと反応させることを含む。いくつかの実施形態において、前記カルボジイミドは、ＤＣＣまたはＥＤＣである。
【００６４】
いくつかの実施形態において、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせることは、ジメチルスルホキシドまたはジメチルホルムアミドの存在下で、クロリンｅ６をカルボジイミドと合わせることを含む。いくつかの実施形態において、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせることは、クロリンｅ６をＥＤＣまたはＤＣＣと合わせることを含む。
【００６５】
いくつかの実施形態において、式Ｉの中間体またはその塩を単離することは、活性シリカを使用して式Ｉの中間体またはその塩を混合物から分離して、実質的に純粋な式Ｉの中間体またはその塩を得ることを含む。
【００６６】
いくつかの実施形態において、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせることは、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアスパラギン酸ナトリウムと合わせて、タラポルフィンナトリウムを形成することを含む。
【００６７】
いくつかの実施形態において、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせることは、ジメチルスルホキシドの存在下で、単離した式Ｉの中間体またはその塩をＬ‐アスパラギン酸またはそのエステルと合わせて、タラポルフィンナトリウムを形成することを含む。
【００６８】
いくつかの実施形態において、単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせることは、アルカリ水溶液中で、クロリンｅ６無水物とＬ‐アスパラギン酸またはそのエステルとをカップリングさせてモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の四ナトリウム塩を形成する工程を含む。
【００６９】
本開示の特定の実施形態は、クロリンｅ６無水物またはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスに関する。前記プロセスは、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて以下の式：
【００７０】
【化１２】
を有するクロリンｅ６無水物またはその塩を含む混合物を得ることを含む。いくつかの実施形態において、前記カルボキシル活性化剤は、ＤＣＣまたはＥＤＣである。
【００７１】
前記プロセスはさらに、クロリンｅ６無水物またはその塩を精製することを含んでもよい。いくつかの実施形態において、クロリンｅ６無水物またはその塩を精製することは、１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術を使用して混合物からクロリンｅ６無水物またはその塩を単離することを含む。
【００７２】
図７は、一例示的実施形態によるアセトンｄ６中のクロリンｅ６無水物の１Ｈ‐ＮＭＲスペクトルを示す。表１を参照すると、位置の割当ては、以下の式Ｉのクロリンｅ６無水物：
【００７３】
【化１３】
で示される対応する原子に従って番号が付けられる。
【００７４】
【化１４】
図８は、図７のＮＭＲスペクトルの４〜６ｐｐｍの拡大部分、ならびに同様の条件下で採取したクロリンｅ６のＮＭＲスペクトルの４〜６ｐｐｍの拡大部分を示す。これらのグラフは、クロリンｅ６とその無水物間のいくつかの構造の違いを明らかにする。
【００７５】
本開示の特定の実施形態は、中間体を調製する方法に関する。前記方法は、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤で活性化して中間体を含む混合物を得ることを含み、前記中間体は、溶媒としてｄ６‐アセトン／ｄ６‐ジメチルスルホキシドを使用し、５００ＭＨｚでプロトン核磁気共鳴（１Ｈ‐ＮＭＲ）分光法により分析すると、
【００７６】
【化１４ａ】
の付近のｐｐｍの化学シフトを含むスペクトルを示す。
【００７７】
前記方法はさらに、中間体を単離することを含む。いくつかの実施形態において、中間体を単離することは、１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術を使用して混合物から中間体を分離することを含む。いくつかの実施形態において、１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術は、混合物を活性シリカと接触させることを含む。
【００７８】
前記方法はさらに、単離した中間体を真空下で乾燥させる工程を含む。
【００７９】
本開示の特定の実施形態は、タラポルフィンとその塩を調製する方法に関する。前記方法は、中間体（クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて、以下の式：
【００８０】
【化１５】
を有するクロリンｅ６無水物またはその塩を含む混合物を得て、クロリンｅ６無水物またはその塩を精製することにより調製）をアミン含有試薬と合わせて、モノアミノ酸クロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩を形成する工程を含む。いくつかの実施形態において、前記アミン含有試薬は、Ｌ‐アスパラギン酸またはそのエステルである。
【００８１】
本開示の特定の実施形態は、反応生成物に関する。前記反応生成物は、第１の反応体積と第２の反応体積との間のカップリング反応の生成物であって、前記第１の反応体積が、以下の式のクロリンｅ６無水物：
【００８２】
【化１６】
と、第１の反応体積中に存在する全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含み、前記第２の反応体積が、Ｌ‐アスパラギン酸またはそのエステルを含む、生成物に関する。いくつかの実施形態において、ｍｏｌ％と％ＡＵＣ（曲線の下の面積）の単位は、交換可能に使用される。％ＡＵＣは、曲線の下の面積の割合として定義され、約４００ｎｍまたは約４１０ｎｍの波長を有する検出信号を使用したＨＰＬＣ‐ＵＶ吸光度分析によって判定される。クロマトグラムにおいて、対象のピークの曲線の下の面積をすべてのピークの曲線の下の面積で除算することにより、％ＡＵＣを計算する。いくつかの実施形態において、％ＡＵＣは、混合物中のクロリン種が同じ発色団を共有することから、混合物中のクロリン種の濃度に比例することが予想される。したがって、ＨＰＬＣクロマトグラム中の分離した化学種の％ＡＵＣを測定することによって、反応混合物中に存在する化学種の相対濃度および／またはｍｏｌ％を判定することができる。いくつかの実施形態においては、各ＨＰＬＣグラフのピークに対する相対ＡＵＣを使用して反応混合物中に存在する化学種の相対濃度および／またはｍｏｌ％を判定してもよい。
【００８３】
いくつかの実施形態において、前記反応生成物は、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩、およびジアスパルチルクロリンｅ６を含む。いくつかの実施形態において、前記反応生成物は、前記反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約２ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む。いくつかの実施形態において、前記反応生成物は、前記反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約１ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む。いくつかの実施形態において、前記第１の反応体積はさらに、ジメチルスルホキシドまたはジメチルホルムアミドを含む。
【００８４】
前記第１の反応体積は、精製して、分離プロセスによってジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を除去することができる。いくつかの実施形態において、前記分離プロセスは、活性シリカクロマトグラフィーである。いくつかの実施形態において、得られた活性化混合物は、アルカリ水溶液中でＬ‐アスパラギン酸（図４に示す）と合わせて、他の副生成物中にタラポルフィンナトリウムを生じる。
【００８５】
本開示の特定の実施形態は、クロリンｅ６とカルボジイミドの化学反応生成物であって、前記化学反応生成物が、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【００８６】
【化１７】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む、化学反応生成物に関する。いくつかの実施形態において、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、前記化学反応生成物中に存在する全クロリン種の約５ｍｏｌ％未満を含む。いくつかのさらなる実施形態において、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、前記化学反応生成物中に存在する全クロリン種の約３ｍｏｌ％未満を含む。いくつかの実施形態において、前記クロリンｅ６無水物は、前記化学反応生成物中に存在する全クロリン種の少なくとも約８５ｍｏｌ％を含む。
【００８７】
いくつかの実施形態において、前記カルボジイミドは、ＥＤＣまたはＤＣＣである。
【００８８】
本開示の特定の実施形態は、以下の式Ｉの化合物：
【００８９】
【化１８】
またはその薬学的に許容される塩を実質的に純粋な形態で含む組成物に関する。
【００９０】
いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物中の全クロリン種の約８５ｍｏｌ％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物中の全クロリン種の約９０ｍｏｌ％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物中の全クロリン種の約９５ｍｏｌ％を超える。
【００９１】
いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物の約８５重量％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物の約９０重量％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量は、組成物の約９５重量％を超える。
【００９２】
本開示の特定の実施形態は、以下の式Ｉの化合物：
【００９３】
【化１９】
またはその薬学的に許容される塩を実質的に純粋な形態で含む化学反応生成物に関する。
【００９４】
いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物の全含有量は、前記化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約８５ｍｏｌ％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物の全含有量は、前記化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約９０ｍｏｌ％を超える。いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物の全含有量は、前記化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約９５ｍｏｌ％を超える。
【００９５】
本開示の特定の実施形態は、タラポルフィンナトリウムまたはその薬学的に許容される塩の製造方法に関する。前記方法は、有機溶媒の存在下で、約８〜約１２の範囲のｐＨを有するアスパラギン酸塩組成物をクロリンｅ６とカルボジイミドの化学反応生成物と合わせて、反応混合物を形成することを含む。いくつかの実施形態において、前記有機溶媒は、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、塩化メチレンまたはそれらの混合物から選択される。
【００９６】
いくつかの実施形態において、前記化学反応生成物は、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【００９７】
【化２０】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む。いくつかの実施形態において、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、前記化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約５ｍｏｌ％未満を含む。
【００９８】
前記方法はさらに、反応混合物を塩基性にすることを含む。いくつかの実施形態において、反応混合物を塩基性にすることは、水酸化物を加えて反応混合物のｐＨを約８〜約１２に維持することを含む。
【００９９】
いくつかの実施形態において、前記方法はさらに、塩基性反応混合物からタラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を沈殿させることを含んでもよい。いくつかの実施形態において、タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を沈殿させることは、適した沈殿溶媒を塩基性反応混合物に加えることを含む。
【０１００】
前記方法はさらに、タラポルフィン（またはその薬学的に許容される塩）の沈殿物を塩基性反応混合物からろ過、遠心分離および／またはクロマトグラフィーによって分離することを含む。
【０１０１】
本開示の特定の実施形態は、タラポルフィンナトリウムを調製する方法に関する。前記方法は、精製した中間体反応混合物を反応において利用してタラポルフィンナトリウムを調製することを含み、前記精製した中間体反応混合物は、有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が除去されたクロリンｅ６、クロリンｅ６無水物、およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む粗反応混合物から得られたものである。
【０１０２】
いくつかの実施形態において、前記精製した中間体反応混合物は、全クロリン種に基づいて約５％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む。いくつかの実施形態において、前記精製した中間体反応混合物は、全クロリン種に基づいて約３％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、クロリンｅ６環状無水物は、以下の式Ｉのクロリンｅ６環状無水物：
【０１０４】
【化２１】
またはその塩である。
【０１０５】
いくつかの実施形態において、前記精製した中間体反応混合物はさらに、ジメチルスルホキシドを含む。いくつかの実施形態において、前記精製した中間体反応混合物はさらに、ＥＤＣまたはＤＣＣおよびジメチルホルムアミドを含む。いくつかの実施形態において、有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質は、活性シリカを使用して除去されている。
【０１０６】
本開示の特定の実施形態は、光活性剤またはその薬学的に許容される塩を調製するプロセスに関する。前記プロセスは、以下の式の化合物：
【０１０７】
【化２２】
またはその薬学的に許容される塩、有機溶媒および１つ以上のジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質を含む組成物を塩基性水性アスパラギン酸ナトリウム組成物と合わせて、粗モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６反応混合物を形成することを含み、前記粗反応混合物は、粗反応混合物中に存在する全クロリン種に基づいて約２ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む。
【０１０８】
前記プロセスはさらに、反応混合物を塩基性にすることを含む。前記プロセスはさらに、実質的な量のモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６を反応混合物から沈殿させることを含む。いくつかの実施形態において、実質的な量のモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６を反応混合物から沈殿させることは、十分な量の有機溶媒を提供して反応混合物から存在するモノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の約５０ｍｏｌ％を超える沈殿物を生じることを含む。
【０１０９】
いくつかの実施形態において、反応混合物を塩基性にすることは、十分な量のアルカリ性物質を反応混合物に提供して約８〜約１２の範囲のｐＨを維持することを含む。いくつかの実施形態において、反応混合物を塩基性にすることは、十分な量のアルカリ性物質を反応混合物に提供して約１０〜約１２の範囲のｐＨを維持することを含む。
【０１１０】
いくつかの実施形態において、少なくとも１つのジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質は、前記反応混合物中に存在する全クロリン種の約１ｍｏｌ％〜約２ｍｏｌ％未満を含む。
【０１１１】
本開示の特定の実施形態は、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【０１１２】
【化２３】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む反応生成物であって、ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が、存在する全クロリン種の約１〜２ｍｏｌ％未満を構成する、反応生成物に関する。
【実施例】
【０１１３】
（実施例１） クロリンｅ６無水物の合成
クロリンｅ６（２．０ｇ、３．３ｍｍｏｌ）（Ｆｒｏｎｔｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を１０ｍＬのＤＭＦに溶解した。ＥＤＣ（０．６１ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を混合物に添加して、１．５時間反応させた。この反応混合物をシリカゲル（Ｓｉｇｍａ‐Ａｌｄｒｉｃｈ）の層に充填し、アセトンで溶離した。着色部分を収集し、真空下で濃縮した。無水物をさらに真空下で乾燥させた。
【０１１４】
（実施例２） タラポルフィンナトリウムの合成
ｐＨ１１に達するまで１０Ｍ ＮａＯＨを１０ｍＬの水中のアスパラギン酸（約１．３ｇ、１０ｍｍｏｌ）に添加することにより、アスパラギン酸ナトリウム溶液を調製した。実施例１で得たクロリンｅ６無水物をＤＭＦに溶解し、アスパラギン酸ナトリウム溶液に緩徐に添加した。混合物を１０Ｍ ＮａＯＨで塩基性にした。過剰のＤＭＦを暗黒色の懸濁液に添加して、生成物を沈殿させた。この生成物を濾取し、アセトンで洗浄した。この材料をアセトン中に再懸濁させて濾取した。得られた粗タラポルフィンナトリウムを真空下で乾燥させた。
【０１１５】
前述の詳細な説明において少なくとも１つの実施例の実施形態を示したが、莫大な数の変形が存在することを理解しなければならない。また、本明細書に記載の１つ以上の例示的実施形態は、本開示の適用範囲、適用可能性または構成を何ら限定するものではないことも理解しなければならない。むしろ、前述の詳細な説明は、記載した１つ以上の実施形態を実施するのに簡便なロードマップを当業者に提供するものとなる。添付の特許請求の範囲に記載の開示およびその法的同等物の範囲から逸脱することなく、要素の機能および配置に種々の変更を行えることを理解しなければならない。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロリンｅ６とカルボジイミドの化学反応生成物であって、該化学反応生成物が、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【化２４】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含み、該ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が、該化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約５ｍｏｌ％未満を構成する、化学反応生成物。
【請求項２】
前記ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が、前記化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約３ｍｏｌ％未満を構成する、請求項１に記載の化学反応生成物。
【請求項３】
前記クロリンｅ６無水物が、前記化学反応生成物の少なくとも約８５ｍｏｌ％を構成する、請求項１に記載の化学反応生成物。
【請求項４】
前記カルボジイミドが、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）‐カルボジイミド塩酸塩またはＮ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミドである、請求項１に記載の化学反応生成物。
【請求項５】
以下の式Ｉの化合物：
【化２５】
またはその薬学的に許容される塩を実質的に純粋な形態で含む組成物。
【請求項６】
前記式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量が、前記組成物の約８５重量％を超える、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量が、前記組成物の約９０重量％を超える、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
前記式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量が、前記組成物の約９５重量％を超える、請求項５に記載の組成物。
【請求項９】
クロリンｅ６無水物またはその薬学的に許容される塩を調製するためのプロセスであって、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて、以下の式を有するクロリンｅ６無水物：
【化２６】
またはその薬学的に許容される塩を含む混合物を得る工程、該クロリンｅ６無水物またはその薬学的に許容される塩を精製する工程を含む、プロセス。
【請求項１０】
前記カルボキシル活性化剤が、Ｎ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミドまたはＮ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩である、請求項９に記載のプロセス。
【請求項１１】
前記クロリンｅ６無水物またはその塩を精製する工程が、１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術を使用して前記混合物から前記クロリンｅ６無水物またはその塩を単離することを含む、請求項９に記載のプロセス。
【請求項１２】
中間体を調製するための方法であって、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤で活性化して、中間体を含む混合物を得る工程、および該中間体を単離する工程を含み、該中間体は、ｄ６‐アセトン／ｄ６‐ジメチルスルホキシドを溶媒として使用し、５００ＭＨｚでプロトン核磁気共鳴（１Ｈ‐ＮＭＲ）分光法により分析すると、
【化２７】
の付近のｐｐｍの化学シフトを含むスペクトルを示す、方法。
【請求項１３】
前記中間体を単離する工程が、１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術を使用して前記混合物から該中間体を分離することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術が、前記混合物を活性シリカと接触させることを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記単離した中間体を真空下で乾燥させる工程をさらに含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
タラポルフィンを調製するための方法であって、請求項９にしたがって調製した中間体をアミン含有試薬と合わせて、モノアミノ酸クロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩を形成する工程を含む、方法。
【請求項１７】
前記アミン含有試薬が、Ｌ‐アスパラギン酸またはそのエステルである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を調製するための方法であって、
有機溶媒の存在下で、約１０〜約１２の範囲のｐＨを有するアスパラギン酸塩組成物を請求項１に記載の化学反応生成物と合わせて反応混合物を形成する工程、
該反応混合物を塩基性にする工程、
該塩基性反応混合物から該タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を沈殿させる工程、
を含む、方法。
【請求項１９】
前記有機溶媒が、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、塩化メチレンまたはそれらの混合物である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記反応混合物を塩基性にする工程が、水酸化物を添加して該反応混合物のｐＨを約８〜約１２の範囲内に維持することを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を沈殿させる工程が、適した沈殿溶媒を前記塩基性反応混合物に添加することを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
ろ過および／またはクロマトグラフィーによって前記塩基性反応混合物から沈殿した前記タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を分離する工程をさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２３】
タラポルフィンナトリウムを調製する方法であって、精製した中間体反応混合物を反応において利用して、タラポルフィンナトリウムを調製する工程を含み、該精製した中間体反応混合物が、有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が除去されたクロリンｅ６、クロリンｅ６無水物、およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む粗反応混合物から得られたものである、方法。
【請求項２４】
前記精製した中間体反応混合物が、該精製した中間体反応混合物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約５ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む、請求項２３の方法。
【請求項２５】
前記精製した中間体反応混合物が、該精製した中間体反応混合物中に存在する全クロリン種に基づいて約３ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記クロリンｅ６環状無水物が、以下の式Ｉのクロリンｅ６環状無水物：
【化２８】
またはその塩である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記精製した中間体反応混合物が、ジメチルスルホキシドをさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
前記精製した中間体反応混合物が、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、Ｎ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミドまたはジメチルホルムアミド、またはそれらの組み合わせをさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
前記有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が、活性シリカを使用して除去されている、請求項２３に記載の方法。
【請求項３０】
第１の反応体積と第２の反応体積との間のカップリング反応の生成物を含む反応生成物であって、
該第１の反応体積が、以下の式のクロリンｅ６無水物：
【化２９】
と、該第１反応体積中に存在する全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含み、該第２の反応体積が、Ｌ‐アスパラギン酸またはそのエステルを含み、
該反応生成物が、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩およびジアスパルチルクロリンｅ６を含む、
反応生成物。
【請求項３１】
前記反応生成物が、該反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約２ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む、請求項３０に記載の反応生成物。
【請求項３２】
反応生成物が、該反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約１ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む、請求項３０に記載の反応生成物。
【請求項３３】
前記第１の反応体積がさらに、ジメチルスルホキシドまたはジメチルホルムアミドを含む、請求項３０に記載の反応生成物。
【請求項３４】
前記第１の反応体積が精製されて、分離プロセスによってジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を除去する、請求項３０に記載の反応生成物。
【請求項３５】
前記分離プロセスが、活性シリカクロマトグラフィーである、請求項３４に記載の反応生成物。
【請求項３６】
モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩を調製するためのプロセスであって、
クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて、以下の式Ｉの中間体：
【化３０】
またはその塩を含む混合物を得る工程、
該式Ｉの中間体またはその塩を単離する工程、
該単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせて、タラポルフィンナトリウムまたはその薬学的に許容される塩を形成する工程
を含む、プロセス。
【請求項３７】
前記クロリンｅ６を前記カルボキシル活性化剤と合わせる工程が、該クロリンｅ６をカルボジイミドと反応させることを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項３８】
前記カルボジイミドが、Ｎ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミド、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、Ｎ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミド、またはそれらの混合物である、請求項３７に記載のプロセス。
【請求項３９】
前記クロリンｅ６を前記カルボキシル活性化剤と合わせる工程が、ジメチルスルホキシドまたはジメチルホルムアミドの存在下で、該クロリンｅ６をカルボジイミドと反応させることを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４０】
前記クロリンｅ６を前記カルボキシル活性化剤と反応させる工程が、該クロリンｅ６をＮ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩またはＮ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミドと反応させることを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４１】
前記式Ｉの中間体またはその塩を単離する工程が、活性シリカを使用して該式Ｉの中間体またはその塩を前記混合物から分離して、実質的に純粋な式Ｉの中間体またはその塩を得ることを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４２】
前記単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせる工程が、該単離した式Ｉの中間体またはその塩をアスパラギン酸ナトリウムと反応させて、タラポルフィンナトリウムを形成することを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４３】
前記単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせる工程が、ジメチルスルホキシドの存在下で、該単離した式Ｉの中間体またはその塩をＬ‐アスパラギン酸またはそのエステルと合わせて、タラポルフィンナトリウムを形成することを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４４】
前記単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせる工程が、アルカリ水溶液中で、前記クロリンｅ６無水物とＬ‐アスパラギン酸またはそのエステルとをカップリングさせて、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の四ナトリウム塩を形成する工程を含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４５】
光活性剤またはその薬学的に許容される塩を調製するためのプロセスであって、
以下の式の化合物：
【化３１】
またはその薬学的に許容される塩、有機溶媒および１つ以上のジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質を含む組成物を塩基性水性アスパラギン酸ナトリウム組成物と合わせて、粗モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６反応混合物を形成する工程であって、該粗反応混合物は、該組成物内の全クロリン種に基づいて約２ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む、工程、
該反応混合物を塩基性にする工程、
実質的な量の該モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６を該反応混合物から沈殿させる工程
を含む、プロセス。
【請求項４６】
前記少なくとも１つのジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質が、前記組成物中の全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満を構成する、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項４７】
前記少なくとも１つのジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質が、前記組成物中の全クロリン種に基づいて約３ｍｏｌ％未満を構成する、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項４８】
前記反応混合物を塩基性にする工程が、十分な量のアルカリ性物質を該反応混合物に提供して約８〜約１２の範囲のｐＨを維持することを含む、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項４９】
実質的な量の前記モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６を前記反応混合物から沈殿させる工程が、十分な量の有機溶媒を提供して、該反応混合物から存在する該モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の５０ｍｏｌ％を超える沈殿物を生じることを含む、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項５０】
クロリンｅ６と脱水剤との化学反応生成物であって、該化学反応生成物が、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【化３２】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含み、該ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が、該化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約５ｍｏｌ％未満を構成する、化学反応生成物。
【請求項５１】
前記脱水剤がカルボジイミドである、請求項５０に記載の化学反応生成物。
【請求項５２】
前記カルボジイミドが、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）‐カルボジイミド塩酸塩またはＮ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミドである、請求項５１に記載の化学反応生成物。
【請求項５３】
以下の式Ｉの化合物：
【化３３】
またはその薬学的に許容される塩を実質的に純粋な形態で含む組成物。
【請求項５４】
前記式Ｉの化合物の全含有量が、前記組成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約８５ｍｏｌ％を超える、請求項５３に記載の組成物。
【請求項５５】
前記式Ｉの化合物の全含有量が、前記組成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約９０ｍｏｌ％を超える、請求項５３に記載の組成物。
【請求項５６】
前記式Ｉの化合物の全含有量が、前記組成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約９５ｍｏｌ％を超える、請求項５３に記載の組成物。
【請求項１】
クロリンｅ６とカルボジイミドの化学反応生成物であって、該化学反応生成物が、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【化２４】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含み、該ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が、該化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約５ｍｏｌ％未満を構成する、化学反応生成物。
【請求項２】
前記ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が、前記化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約３ｍｏｌ％未満を構成する、請求項１に記載の化学反応生成物。
【請求項３】
前記クロリンｅ６無水物が、前記化学反応生成物の少なくとも約８５ｍｏｌ％を構成する、請求項１に記載の化学反応生成物。
【請求項４】
前記カルボジイミドが、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）‐カルボジイミド塩酸塩またはＮ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミドである、請求項１に記載の化学反応生成物。
【請求項５】
以下の式Ｉの化合物：
【化２５】
またはその薬学的に許容される塩を実質的に純粋な形態で含む組成物。
【請求項６】
前記式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量が、前記組成物の約８５重量％を超える、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量が、前記組成物の約９０重量％を超える、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
前記式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の全含有量が、前記組成物の約９５重量％を超える、請求項５に記載の組成物。
【請求項９】
クロリンｅ６無水物またはその薬学的に許容される塩を調製するためのプロセスであって、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて、以下の式を有するクロリンｅ６無水物：
【化２６】
またはその薬学的に許容される塩を含む混合物を得る工程、該クロリンｅ６無水物またはその薬学的に許容される塩を精製する工程を含む、プロセス。
【請求項１０】
前記カルボキシル活性化剤が、Ｎ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミドまたはＮ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩である、請求項９に記載のプロセス。
【請求項１１】
前記クロリンｅ６無水物またはその塩を精製する工程が、１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術を使用して前記混合物から前記クロリンｅ６無水物またはその塩を単離することを含む、請求項９に記載のプロセス。
【請求項１２】
中間体を調製するための方法であって、クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤で活性化して、中間体を含む混合物を得る工程、および該中間体を単離する工程を含み、該中間体は、ｄ６‐アセトン／ｄ６‐ジメチルスルホキシドを溶媒として使用し、５００ＭＨｚでプロトン核磁気共鳴（１Ｈ‐ＮＭＲ）分光法により分析すると、
【化２７】
の付近のｐｐｍの化学シフトを含むスペクトルを示す、方法。
【請求項１３】
前記中間体を単離する工程が、１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術を使用して前記混合物から該中間体を分離することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記１つ以上の抽出技術、分離技術、クロマトグラフィー技術および／または精製技術が、前記混合物を活性シリカと接触させることを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記単離した中間体を真空下で乾燥させる工程をさらに含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
タラポルフィンを調製するための方法であって、請求項９にしたがって調製した中間体をアミン含有試薬と合わせて、モノアミノ酸クロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩を形成する工程を含む、方法。
【請求項１７】
前記アミン含有試薬が、Ｌ‐アスパラギン酸またはそのエステルである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を調製するための方法であって、
有機溶媒の存在下で、約１０〜約１２の範囲のｐＨを有するアスパラギン酸塩組成物を請求項１に記載の化学反応生成物と合わせて反応混合物を形成する工程、
該反応混合物を塩基性にする工程、
該塩基性反応混合物から該タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を沈殿させる工程、
を含む、方法。
【請求項１９】
前記有機溶媒が、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、塩化メチレンまたはそれらの混合物である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記反応混合物を塩基性にする工程が、水酸化物を添加して該反応混合物のｐＨを約８〜約１２の範囲内に維持することを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を沈殿させる工程が、適した沈殿溶媒を前記塩基性反応混合物に添加することを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
ろ過および／またはクロマトグラフィーによって前記塩基性反応混合物から沈殿した前記タラポルフィンまたはその薬学的に許容される塩を分離する工程をさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２３】
タラポルフィンナトリウムを調製する方法であって、精製した中間体反応混合物を反応において利用して、タラポルフィンナトリウムを調製する工程を含み、該精製した中間体反応混合物が、有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が除去されたクロリンｅ６、クロリンｅ６無水物、およびジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む粗反応混合物から得られたものである、方法。
【請求項２４】
前記精製した中間体反応混合物が、該精製した中間体反応混合物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約５ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む、請求項２３の方法。
【請求項２５】
前記精製した中間体反応混合物が、該精製した中間体反応混合物中に存在する全クロリン種に基づいて約３ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記クロリンｅ６環状無水物が、以下の式Ｉのクロリンｅ６環状無水物：
【化２８】
またはその塩である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記精製した中間体反応混合物が、ジメチルスルホキシドをさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
前記精製した中間体反応混合物が、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、Ｎ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミドまたはジメチルホルムアミド、またはそれらの組み合わせをさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
前記有意な割合のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が、活性シリカを使用して除去されている、請求項２３に記載の方法。
【請求項３０】
第１の反応体積と第２の反応体積との間のカップリング反応の生成物を含む反応生成物であって、
該第１の反応体積が、以下の式のクロリンｅ６無水物：
【化２９】
と、該第１反応体積中に存在する全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含み、該第２の反応体積が、Ｌ‐アスパラギン酸またはそのエステルを含み、
該反応生成物が、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩およびジアスパルチルクロリンｅ６を含む、
反応生成物。
【請求項３１】
前記反応生成物が、該反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約２ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む、請求項３０に記載の反応生成物。
【請求項３２】
反応生成物が、該反応生成物中に存在する全クロリン種に基づいて約１ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む、請求項３０に記載の反応生成物。
【請求項３３】
前記第１の反応体積がさらに、ジメチルスルホキシドまたはジメチルホルムアミドを含む、請求項３０に記載の反応生成物。
【請求項３４】
前記第１の反応体積が精製されて、分離プロセスによってジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を除去する、請求項３０に記載の反応生成物。
【請求項３５】
前記分離プロセスが、活性シリカクロマトグラフィーである、請求項３４に記載の反応生成物。
【請求項３６】
モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６またはその薬学的に許容される塩を調製するためのプロセスであって、
クロリンｅ６をカルボキシル活性化剤と合わせて、以下の式Ｉの中間体：
【化３０】
またはその塩を含む混合物を得る工程、
該式Ｉの中間体またはその塩を単離する工程、
該単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせて、タラポルフィンナトリウムまたはその薬学的に許容される塩を形成する工程
を含む、プロセス。
【請求項３７】
前記クロリンｅ６を前記カルボキシル活性化剤と合わせる工程が、該クロリンｅ６をカルボジイミドと反応させることを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項３８】
前記カルボジイミドが、Ｎ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミド、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、Ｎ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミド、またはそれらの混合物である、請求項３７に記載のプロセス。
【請求項３９】
前記クロリンｅ６を前記カルボキシル活性化剤と合わせる工程が、ジメチルスルホキシドまたはジメチルホルムアミドの存在下で、該クロリンｅ６をカルボジイミドと反応させることを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４０】
前記クロリンｅ６を前記カルボキシル活性化剤と反応させる工程が、該クロリンｅ６をＮ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩またはＮ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミドと反応させることを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４１】
前記式Ｉの中間体またはその塩を単離する工程が、活性シリカを使用して該式Ｉの中間体またはその塩を前記混合物から分離して、実質的に純粋な式Ｉの中間体またはその塩を得ることを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４２】
前記単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせる工程が、該単離した式Ｉの中間体またはその塩をアスパラギン酸ナトリウムと反応させて、タラポルフィンナトリウムを形成することを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４３】
前記単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせる工程が、ジメチルスルホキシドの存在下で、該単離した式Ｉの中間体またはその塩をＬ‐アスパラギン酸またはそのエステルと合わせて、タラポルフィンナトリウムを形成することを含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４４】
前記単離した式Ｉの中間体またはその塩をアミン含有試薬と合わせる工程が、アルカリ水溶液中で、前記クロリンｅ６無水物とＬ‐アスパラギン酸またはそのエステルとをカップリングさせて、モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の四ナトリウム塩を形成する工程を含む、請求項３６に記載のプロセス。
【請求項４５】
光活性剤またはその薬学的に許容される塩を調製するためのプロセスであって、
以下の式の化合物：
【化３１】
またはその薬学的に許容される塩、有機溶媒および１つ以上のジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質を含む組成物を塩基性水性アスパラギン酸ナトリウム組成物と合わせて、粗モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６反応混合物を形成する工程であって、該粗反応混合物は、該組成物内の全クロリン種に基づいて約２ｍｏｌ％未満のジアスパルチルクロリンｅ６を含む、工程、
該反応混合物を塩基性にする工程、
実質的な量の該モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６を該反応混合物から沈殿させる工程
を含む、プロセス。
【請求項４６】
前記少なくとも１つのジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質が、前記組成物中の全クロリン種に基づいて約５ｍｏｌ％未満を構成する、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項４７】
前記少なくとも１つのジアスパルチルクロリンｅ６前駆物質が、前記組成物中の全クロリン種に基づいて約３ｍｏｌ％未満を構成する、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項４８】
前記反応混合物を塩基性にする工程が、十分な量のアルカリ性物質を該反応混合物に提供して約８〜約１２の範囲のｐＨを維持することを含む、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項４９】
実質的な量の前記モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６を前記反応混合物から沈殿させる工程が、十分な量の有機溶媒を提供して、該反応混合物から存在する該モノ‐Ｌ‐アスパルチルクロリンｅ６の５０ｍｏｌ％を超える沈殿物を生じることを含む、請求項４５に記載のプロセス。
【請求項５０】
クロリンｅ６と脱水剤との化学反応生成物であって、該化学反応生成物が、以下の形態のクロリンｅ６無水物：
【化３２】
とジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質を含み、該ジアスパルチルクロリンｅ６の前駆物質が、該化学反応生成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約５ｍｏｌ％未満を構成する、化学反応生成物。
【請求項５１】
前記脱水剤がカルボジイミドである、請求項５０に記載の化学反応生成物。
【請求項５２】
前記カルボジイミドが、Ｎ‐エチル‐Ｎ’‐（３‐ジメチルアミノプロピル）‐カルボジイミド塩酸塩またはＮ‐Ｎ’‐ジシクロヘキシル‐カルボジイミドである、請求項５１に記載の化学反応生成物。
【請求項５３】
以下の式Ｉの化合物：
【化３３】
またはその薬学的に許容される塩を実質的に純粋な形態で含む組成物。
【請求項５４】
前記式Ｉの化合物の全含有量が、前記組成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約８５ｍｏｌ％を超える、請求項５３に記載の組成物。
【請求項５５】
前記式Ｉの化合物の全含有量が、前記組成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約９０ｍｏｌ％を超える、請求項５３に記載の組成物。
【請求項５６】
前記式Ｉの化合物の全含有量が、前記組成物中に存在するクロリン種の全量に基づいて約９５ｍｏｌ％を超える、請求項５３に記載の組成物。
【図１】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【公表番号】特表２００９−５４２６７２（Ｐ２００９−５４２６７２Ａ）
【公表日】平成２１年１２月３日（２００９．１２．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５１８２８０（Ｐ２００９−５１８２８０）
【出願日】平成１９年６月２９日（２００７．６．２９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０１５０８７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／００５３０８
【国際公開日】平成２０年１月１０日（２００８．１．１０）
【出願人】（５０７１７７３７５）ライト、サイエンシーズ、オンコロジー、インコーポレイテッド (4)
【氏名又は名称原語表記】ＬＩＧＨＴ ＳＣＩＥＮＣＥＳ ＯＮＣＯＬＯＧＹ， ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年１２月３日（２００９．１２．３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年６月２９日（２００７．６．２９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０１５０８７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／００５３０８
【国際公開日】平成２０年１月１０日（２００８．１．１０）
【出願人】（５０７１７７３７５）ライト、サイエンシーズ、オンコロジー、インコーポレイテッド (4)
【氏名又は名称原語表記】ＬＩＧＨＴ ＳＣＩＥＮＣＥＳ ＯＮＣＯＬＯＧＹ， ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】
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