ガンの症状または感染症状を処置するために、弱毒化された細菌および結合化合物を投与するための試薬ならびに方法が提供される。結合化合物には、抗体、または抗体に由来する抗原結合部位が含まれる。本発明の１つの実施形態において、ガンまたは感染性の症状に対して該症状を有している哺乳動物において免疫応答を刺激する方法が提供され、該方法は、該哺乳動物に有効量のＬｉｓｔｅｒｉａおよび：ａ．該症状の抗原に特異的に結合する抗体；またはｂ．該症状の抗原に特異的に結合し、また抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を媒介する免疫細胞にも特異的に結合する抗体の抗原結合部位に由来する結合化合物を投与する工程を含み、ここで、該Ｌｉｓｔｅｒｉａと該抗体または結合化合物との組み合わせが該応答の刺激に有効である。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ガンまたは感染性の症状に対して該症状を有している哺乳動物において免疫応答を刺激する方法であって、該哺乳動物に有効量のＬｉｓｔｅｒｉａおよび：
ａ．該症状の抗原に特異的に結合する抗体；または
ｂ．該症状の抗原に特異的に結合し、また抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を媒介する免疫細胞にも特異的に結合する抗体の抗原結合部位に由来する結合化合物
を投与する工程を含み、
該Ｌｉｓｔｅｒｉａと該抗体または結合化合物との組み合わせが該応答の刺激に有効である、方法。
【請求項２】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａと前記抗体または結合化合物とを同時に投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａと前記抗体または結合化合物とを同時に投与しない、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａが弱毒化されている、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
抗体の前記抗原結合部位に由来する前記結合化合物にさらにＦｃ領域またはＦｃ領域誘導体が含まれている、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記Ｆｃ領域誘導体が：
ａ．前記ＡＤＣＣを媒介する細胞によって発現される活性化受容体に対する高い親和性；または
ｂ．該ＡＤＣＣを媒介する細胞によって発現される阻害性受容体に対する低い親和性
の一方または両方を有している、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記Ｆｃ領域誘導体に以下の変異：
ａ．Ｓ２９８Ａ；
ｂ．Ｅ３３３Ａ；または
ｃ．Ｋ３３４Ａ
の１つ以上が含まれているＩｇＧ１ Ｆｃ領域が含まれており、該変異は前記ＡＤＣＣを媒介する細胞の活性化の増大を媒介するのに有用である、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記結合化合物には：
ａ．二重特異的抗体であって、該二重特異的抗体の第１の結合部位は前記症状の前記抗原に特異的に結合し、該二重特異的抗体の第２の結合部位は前記ＡＤＣＣを媒介する免疫細胞に特異的に結合する、二重特異的抗体；または
ｂ．前記症状の該抗原に特異的に結合する抗体のペプチド模倣物
が含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａは代謝的に活性であり、本質的に：
ａ．コロニーの形成；
ｂ．複製；または
ｃ．分裂
の１つ以上ができない、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａは本質的には代謝的に不活性である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
弱毒化された前記Ｌｉｓｔｅｒｉａは：
ａ．増殖；
ｂ．細胞から細胞への拡散；
ｃ．細胞への結合もしくは侵入；
ｄ．複製；または
ｄ．ＤＮＡ修復
の１つ以上が弱められている、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａは：
ａ．ａｃｔＡ変異；
ｂ．ｉｎｌＢ変異；
ｃ．ｕｖｒＡ変異；
ｄ．ｕｖｒＢ変異；
ｅ．ｕｖｒＣ変異；
ｆ．核酸標的化化合物；または
ｇ．ｕｖｒＡＢ変異および核酸標的化化合物
の１つ以上によって弱められている、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記核酸標的化化合物はソラレンである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記症状には、腫瘍、ガン、または前ガン状態の障害の１つ以上が含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記症状には感染が含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記症状には：
ａ．Ｂ型肝炎；
ｂ．Ｃ型肝炎；
ｃ．ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）；
ｄ．サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）；
ｅ．エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）；または
ｆ．リーシュマニア
の１つ以上による感染が含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記症状が肝臓の症状である、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記免疫応答が前記症状の細胞に対する免疫応答である、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記免疫応答には先天免疫応答が含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記免疫応答には適応的免疫応答が含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＬｉｓｔｅｒｉａがＬｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓである、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａには異種抗原をコードする核酸が含まれている、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
弱毒化された前記Ｌｉｓｔｅｒｉａが１つの試薬であり、前記抗体または結合化合物が第２の試薬であり、さらに、前記哺乳動物に第３の試薬を投与する工程を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記第３の試薬に：
ａ．サイトカインのアゴニストもしくはアンタゴニスト；
ｂ．Ｔ制御性細胞（Ｔｒｅｇ）の阻害剤；または
ｃ．シクロホスファミド（ＣＴＸ）
の１つ以上が含まれる、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
有効量の前記Ｌｉｓｔｅｒｉａを投与しない場合の免疫応答と比較して、前記免疫応答には：
ａ．ＮＫ細胞；
ｂ．ＮＫＴ細胞；
ｃ．樹状細胞（ＤＣ）；
ｄ．単球もしくはマクロファージ；
ｅ．好中球；
ｆ．ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）；または
ｇ．ヌクレオチド結合オリゴマー化ドメインタンパク質（ＮＯＤタンパク質）
の１つ、または任意の組み合わせの活性化、あるいはそれらによる炎症が含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
有効量のＬｉｓｔｅｒｉａを投与しない場合の発現と比較して、前記免疫応答に：
ａ．ＣＤ６９；
ｂ．インターフェロン−γ（ＩＦＮγ）；
ｃ．インターフェロン−α（ＩＦＮα）もしくはインターフェロンβ（ＩＦＮβ）；
ｄ．インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）；
ｅ．単球走化性タンパク質（ＭＣＰ−１）；または
ｆ．インターロイキン−６（ＩＬ−６）
の１つまたは任意の組み合わせの発現の増大が含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
前記刺激には：
ａ．前記Ｌｉｓｔｅｒｉａを投与しない場合の割合と比較した、前記哺乳動物の肝臓の白血球の集団中のＮＫ細胞の割合の増加；または、
ｂ．前記Ｌｉｓｔｅｒｉａを投与しない場合の発現と比較した、肝臓のＮＫ細胞による活性化マーカーの発現の増大
が含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
ＮＫ細胞の割合の前記増大が、弱毒化された前記Ｌｉｓｔｅｒｉａを投与しない場合の割合よりも、少なくとも：
ａ．５％；
ｂ．１０％；
ｃ．１５％；
ｄ．２０％；または、
ｅ．２５％
大きい、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記投与されるＬｉｓｔｅｒｉａは：
ａ．前記哺乳動物に対して経口では投与しない；または、
ｂ．他のタイプの細菌が少なくとも９９％含まれていない組成物として前記哺乳動物に投与する；
の一方または両方である、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
ガンまたは感染性の症状を有している哺乳動物の該症状を処置する方法であって、該哺乳動物に対して、有効量のＬｉｓｔｅｒｉａを：
ａ．該症状の抗原に特異的に結合する抗体；または
ｂ．該症状の抗原に特異的に結合し、そしてＡＤＣＣを媒介する免疫細胞にも特異的に結合する抗体に由来する結合化合物
とともに投与する工程を含み、該Ｌｉｓｔｅｒｉａと該抗体または結合化合物との組み合わせが、該症状の緩和または軽減に有効である方法。
【請求項３２】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａと前記抗体または結合化合物とを同時に投与する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記Ｌｉｓｔｅｉｒａと前記抗体または結合化合物とを同時には投与しない、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａが弱毒化されている、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
抗体の前記抗原結合部位に由来する前記結合化合物には、さらに、Ｆｃ領域またはＦｃ領域誘導体が含まれている、請求項３１に記載の方法。
【請求項３６】
前記Ｆｃ領域誘導体が：
ａ．前記ＡＤＣＣを媒介する細胞によって発現される活性化受容体に対する高い親和性；または
ｂ．該ＡＤＣＣを媒介する細胞によって発現される阻害性受容体に対する低い親和性
の一方または両方を有している、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記Ｆｃ領域誘導体には、以下の変異：
ａ．Ｓ２９８Ａ；
ｂ．Ｅ３３３Ａ；または
ｃ．Ｋ３３４Ａ
の１つ以上が含まれているＩｇＧ１ Ｆｃ領域が含まれており、該変異は該ＡＤＣＣを媒介する細胞の活性化の増大を媒介するのに有用である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
前記結合化合物に：
ａ．二重特異的抗体であって、該二重特異的抗体の第１の結合部位は前記症状の抗原に特異的に結合し、該二重特異的抗体の第２の結合部位は前記ＡＤＣＣを媒介する免疫細胞に特異的に結合する、二重特異的抗体；または
ｂ．該症状の抗原に特異的に結合する抗体のペプチド模倣物
が含まれる、請求項３１に記載の方法。
【請求項３９】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａは代謝的に活性であり、そして本質的には：
ａ．コロニーの形成；
ｂ．複製；または
ｃ．分裂
の１つ以上ができない、請求項３１に記載の方法。
【請求項４０】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａは本質的には代謝的に不活性である、請求項３１に記載の方法。
【請求項４１】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａは：
ａ．増殖；
ｂ．細胞から細胞への拡散；
ｃ．細胞への結合もしくは侵入；
ｄ．複製；または
ｄ．ＤＮＡ修復
の１つ以上が弱められている、請求項３１に記載の方法。
【請求項４２】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａは：
ａ．ａｃｔＡ変異；
ｂ．ｉｎｌＢ変異；
ｃ．ｕｖｒＡ変異；
ｄ．ｕｖｒＢ変異；
ｅ．ｕｖｒＣ変異；
ｆ．核酸標的化化合物；または
ｇ．ｕｖｒＡＢ変異および核酸標的化化合物
の１つ以上によって弱められている、請求項３１に記載の方法。
【請求項４３】
前記核酸標的化化合物はソラレンである、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記症状には、ガン、腫瘍、または前ガン状態の障害が含まれる、請求項３１に記載の方法。
【請求項４５】
前記症状には感染が含まれる、請求項３１に記載の方法。
【請求項４６】
前記症状には：
ａ．Ｂ型肝炎；
ｂ．Ｃ型肝炎；
ｃ．ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）；
ｄ．サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）；
ｅ．エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）；または
ｆ．リーシュマニア
の１つ以上による感染が含まれる、請求項３１に記載の方法。
【請求項４７】
前記症状が肝臓の症状である、請求項３１に記載の方法。
【請求項４８】
前記免疫応答が前記症状の細胞に対する免疫応答である、請求項３１に記載の方法。
【請求項４９】
前記処置によって先天免疫応答の刺激が生じる、請求項３１に記載の方法。
【請求項５０】
前記処置によって適応的免疫応答の刺激が生じる、請求項３１に記載の方法。
【請求項５１】
前記哺乳動物がヒトである、請求項３１に記載の方法。
【請求項５２】
前記ＬｉｓｔｅｒｉａがＬｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓである、請求項３１に記載の方法。
【請求項５３】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａには、異種抗原をコードする核酸が含まれている、請求項３１に記載の方法。
【請求項５４】
前記Ｌｉｓｔｅｒｉａが第１の試薬であり、前記抗体または結合化合物が第２の試薬であり、さらに、前記哺乳動物に第３の試薬を投与する工程を含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項５５】
前記第３の試薬には：
ａ．サイトカインのアゴニストもしくはアンタゴニスト；
ｂ．Ｔ制御性細胞（Ｔｒｅｇ）の阻害剤；または
ｃ．シクロホスファミド（ＣＴＸ）
の１つ以上が含まれる、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
有効量の前記Ｌｉｓｔｅｒｉａを投与しない場合の免疫応答と比較して、前記処置により：
ａ．ＮＫ細胞；
ｂ．ＮＫＴ細胞；
ｃ．樹状細胞（ＤＣ）；
ｄ．単球もしくはマクロファージ；
ｅ．好中球；
ｆ．ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）；またはヌクレオチド結合オリゴマー化ドメイン（ＮＯＤ）タンパク質
の１つ、または任意の組み合わせの活性化、あるいはそれらによる炎症が生じる、請求項３１に記載の方法。
【請求項５７】
有効量の前記Ｌｉｓｔｅｒｉａを投与しない場合の発現と比較して、前記処置により：
ａ．ＣＤ６９；
ｂ．インターフェロン−γ（ＩＦＮγ）；
ｃ．インターフェロン−α（ＩＦＮα）もしくはインターフェロンβ（ＩＦＮβ）；
ｄ．インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）；
ｅ．単球走化性タンパク質（ＭＣＰ−１）；または
ｆ．インターロイキン−６（ＩＬ−６）
の１つまたは任意の組み合わせの発現の増大が生じる、請求項３１に記載の方法。
【請求項５８】
前記処置により：
ａ．前記Ｌｉｓｔｅｒｉａを投与しない場合の割合と比較した、前記哺乳動物の肝臓の白血球中のＮＫ細胞の割合の増加；または、
ｂ．該Ｌｉｓｔｅｒｉａを投与しない場合の発現と比較した、肝臓のＮＫ細胞による活性化マーカーの発現の増大
が生じる、請求項３１に記載の方法。
【請求項５９】
ＮＫ細胞の割合の前記増大が、前記Ｌｉｓｔｅｒｉａを投与しない場合の割合よりも、少なくとも：
ａ．５％；
ｂ．１０％；
ｃ．１５％；
ｄ．２０％；または、
ｅ．２５％
大きい、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記症状を有しており、前記Ｌｉｓｔｅｒｉａ、抗体、または結合化合物を投与しない適切な対照の哺乳動物との比較によって決定した場合に、前記処置によって前記哺乳動物の生存性が高まる、請求項３１に記載の方法。
【請求項６１】
前記症状には、ガン細胞、腫瘍、または感染性物質の１つ以上が含まれ、前記処置によって、前記哺乳動物において：
ａ．腫瘍またはガン細胞の数；
ｂ．腫瘍の大きさ；または
ｃ．感染性物質の力価
の１つ以上が減少する、請求項３１に記載の方法。
【請求項６２】
前記投与されたＬｉｓｔｅｒｉａは：
ａ．前記哺乳動物に対して経口では投与しない；または、
ｂ．他のタイプの細菌が少なくとも９９％含まれていない組成物として該哺乳動物に投与する；
の一方または両方である、請求項３１に記載の方法。
【請求項６３】
請求項１または請求項３１に記載の方法において使用されるキットであって：
（ａ）Ｌｉｓｔｅｒｉａが含まれている組成物；および
（ｂ）（ｉ）前記症状の抗原に特異的に結合する抗体、もしくは（ｉｉ）該症状の抗原に特異的に結合し、ＡＤＣＣを媒介する免疫細胞にも特異的に結合する抗体の抗原結合部位に由来する結合化合物が含まれている組成物
が含まれており、そして任意選択的に、該組成物の使用についての説明書が含まれており、組成物が適切な容器の中にパッケージされているキット。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図１Ｃ】

【図１Ｄ】

【図２】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図３Ｅ】

【図３Ｆ】

【図３Ｇ】

【図３Ｈ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図４Ｃ】

【図４Ｄ】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図５Ｃ】

【図５Ｄ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図６Ｄ】

【図６Ｅ】

【図６Ｆ】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図７Ｄ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図９Ｃ】

【図９Ｄ】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１２Ｃ】

【図１２Ｄ】

【図１２Ｅ】

【図１２Ｆ】

【図１２Ｇ】

【図１２Ｈ】

【図１２Ｉ】

【図１３Ａ】

【図１３Ｂ】

【図１４】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１５Ｃ】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１Ａ】

【図２１Ｂ】

【図２１Ｃ】

【図２１Ｄ】

【図２１Ｅ】

【図２１Ｆ】

【図２１Ｇ】

【図２２】

【公表番号】特表２００９−５０４７８７（Ｐ２００９−５０４７８７Ａ）
【公表日】平成２１年２月５日（２００９．２．５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５２７２１６（Ｐ２００８−５２７２１６）
【出願日】平成１８年８月２１日（２００６．８．２１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０３２６６４
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０２２５２０
【国際公開日】平成１９年２月２２日（２００７．２．２２）
【出願人】（５０５２９７０２４）シーラス　コーポレイション (10)
【Ｆターム（参考）】