抗疲労作用化合物および持久力増強作用化合物及びそれを含有する飲食品
【課題】本発明は、人間および動物に対して、安全な抗疲労作用および持久力増強作用を有する化合物、医薬品、及び飲食品を提供することを課題とする。
【解決手段】構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物であることを特徴とする抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物及びそれを有する組成物、これを含有する医薬品および飲食品を提供する。
【解決手段】構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物であることを特徴とする抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物及びそれを有する組成物、これを含有する医薬品および飲食品を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、人間および動物の抗疲労作用および持久力増強作用を目的とした抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物、これらを含む飲食品または医薬品に関する。
【背景技術】
【０００２】
健康志向が高まっている現在、スポーツと栄養またはスポーツと生理機能との関係についての認識が深まっている。このような中で、エネルギー補給、疲労回復、さらに瞬発力や持久力の増強、身体作りなど様々な場面でスポーツフーズが利用されている。スポーツフーズの中でも、抗疲労作用および持久力増強作用を目的とするものは、スポーツ選手の成績向上のためのみならず、一般の人が仕事をする上でも持久力維持や、活力あふれる生活を送るためのものとして多く利用されている。
これらの抗疲労剤および持久力増強剤の多くは、ビタミン類と生薬から成り、動物実験等の科学的根拠がないまま、古くからの伝承により効果を謳っているものが多い。また、これらの抗疲労剤等はカフェインやエチルアルコールを含有し、興奮、不眠などを伴うものが多く、真に健康を目的としたものとは言い難いのが実情である。
このような実情において、抗疲労剤および持久力増強剤には、明確な有効性の確認と、科学的根拠が求められている。
【０００３】
また、以上のことは動物においても同様であり、競走馬などのレース用の動物から家畜、動物園などの施設で飼育されている動物、ペットなどの動物においても抗疲労作用および持久力増強作用のある飲食品等が求められている。
また一方、ＤＨＡに代表されるω―３高度不飽和脂肪酸やホスファチジルコリン、ホスファチジルセリンなどの食品成分の各種生理活性効果が各種研究されている。例えば構成脂肪酸基としてω−３高度不飽和脂肪酸基を多く含むリン脂質化合物（以下ＰＤということがある）の製法（特許文献１）、ＤＨＡとホスファチジルコリンの混合物などに学習能力向上の機能があること（特許文献２）、特定のリン脂質に脳卒中予防効果があること（特許文献３）、また視力改善効果があること（特許文献４）などが開示されている。
しかし、構成脂肪酸基としてω−３高度不飽和脂肪酸基を多く含むリン脂質化合物が抗疲労作用および持久力増強作用を有するという報告は全くない。
【特許文献１】特開２００４−２６７６７号公報
【特許文献２】特開平０７−０１７８５５号公報
【特許文献３】特開２０００−２３９１６８号公報
【特許文献４】特開２００４−１１５４２９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、人間および動物に対して、抗疲労作用および持久力増強作用を有する化合物を提供し、ひいては該化合物を含有する医薬品、栄養機能食品、健康食品又は飲食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物が、顕著な抗疲労作用および持久力増強作用を有することを見出した。すなわち、本発明は、以下の構成を有する。
（１） 構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物であることを特徴とする抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（２） 構成脂肪酸基の３０％質量以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物が、魚介類からヘキサンおよびあるいはアセトンを含む抽出液を用いて抽出した物である前記（１）に記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（３） 魚介類がホタテガイである前記（２）に記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（４） 疲労が、運動による肉体疲労である前記（１）〜（３）のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（５） 疲労が、精神作業ストレスによる精神疲労である前記（１）〜（３）のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（６） 疲労が、日常生活による複合的疲労である前記（１）〜（３）のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（７） 構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を有効成分とすることを特徴とする抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（８） 構成脂肪酸基の３０％質量以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物が、魚介類からヘキサンおよびあるいはアセトンを含む抽出液を用いて抽出した物である前記（７）に記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（９） 魚介類が、ホタテガイである前記（８）に記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（１０） 疲労が、運動による肉体疲労である前記（７）〜（９）のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（１１） 疲労が、精神作業ストレスによる精神疲労である前記（７）〜（９）のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（１２） 疲労が、日常生活による複合的疲労である前記（７）〜（９）のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（１３） 構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を含有し、抗疲労作用及び／又は持久力増強作用を有するものであることを特徴とし、抗疲労作用及び/又は持久力増強作用を有するものである旨を表示した飲食品。
【発明の効果】
【０００６】
本発明の構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物は、抗疲労作用および持久力増強作用が確認されたものであり、安全な栄養機能食品、又は健康食品等の飲食品並びに医薬品を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明について、以下に具体的に説明する。
本発明に関わる構成脂肪酸基は、脂質のエステル結合部分を強アルカリで分解することにより得ることができる。本発明に関わるリン脂質化合物は、ホスファチジル基を有し、ω―３高度不飽和脂肪酸基を全構成脂肪酸基の３０質量％以上を含むことを特徴とする。ω―３高度不飽和脂肪酸基とは、ＣＨ３に最も近い２重結合の位置がＣＨ3から３番目のＣにある脂肪酸であって２重結合の多いものをいい、例えば、ドコサヘキサエン酸基（以下ＤＨＡ基ということがある）やエイコサペンタエン酸基（以下ＥＰＡ基ということがある）等が挙げられる。ここで、ω―３高度不飽和脂肪酸基はリン脂質化合物の１位、２位のいずれか一方に、あるいは両方に結合していても構わない。また、いずれか一方に他の飽和脂肪酸あるいは不飽和脂肪酸が結合していても差し支えない。
ホスファチジル基を有する化合物としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロールなどがあげられる。
【０００８】
本発明に関わる、構成脂肪酸基としてω−３高度不飽和脂肪酸基を多く含むリン脂質化合物の一例として、以下の一般式（１）の構造のものがあげられる。ここで、Ｒ1ＣＯＯ基、Ｒ2ＣＯＯ基の少なくともいずれか一方は、ω―３高度不飽和脂肪酸基である。これらの基の高度不飽和度とは、２重結合を２以上有することが好ましく、さらに好ましくは５〜８を有することを言う。Ｒ1、Ｒ2はアルキル基またはアルケニル基の炭化水素であり、炭素数は２〜２８、好ましくは６〜１８である。また、Ｒ1、Ｒ2は上記炭化水素の誘導体でもよい。
【０００９】
【化１】
【００１０】
本発明の構成脂肪酸基としてω−３高度不飽和脂肪酸基を多く含むリン脂質化合物は、魚類やその卵、貝類などの海棲生物や陸棲生物に含まれており、抽出に代表される工程によって得ることができる。更には公知の化学反応、酵素反応により合成することも可能である。また海棲生物や陸棲生物等の生体からの抽出によってＰＤを得る場合にはトリグリセリド型脂肪酸やリゾリン脂質、プラズマローゲンなどが共に得られるが、これらの物質を混在したまま又は混合したＰＤを本発明としても差し支えない。
【００１１】
本発明における「疲労」とは、生体がある機能を発揮した結果、その機能が低下する現象をいう。例えば、「水泳をした後の肉体疲労」「長時間にわたり、知的労働をした後の精神疲労」「毎日の通常生活においても蓄積する肉体的および精神的な複合的疲労」等を挙げることができる。
「抗疲労作用」とは本発明の化合物を含有する組成物等を飲食服用することにより、そのような「疲労」状態を軽減させる作用および「疲労」状態よりの回復を促進する作用、あるいは「疲労」を予防し、疲れにくくする作用などをいう。
「持久力」とは、ある一定の運動状態を継続して行うことができる能力をいい、「持久力増強作用」とは、その継続してできる能力が増強される作用、例えば、具体的には継続時間が延びることにより確認することができる。
【００１２】
本発明における抗疲労作用及び持久力増強作用は、例えば後述する実施例のように、マウスを用いた遊泳疲労試験などにより評価することができる。また、ヒトを用いた日常生活や精神作業負荷による主観的疲労感測定（VAS検査）や機能維持度測定（ATMT反応時間検査）などにより評価することもできる。
上記の方法で得られた構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の抗疲労作用および持久力増強作用を持つ化合物は、それを飲食物に混合して飲食品として、あるいは医薬品として用いることができる。医薬品としては、抗疲労剤又は持久力増強剤がこれに相当する。
【００１３】
医薬品としては、化合物それ自体で、あるいは常法に従って公知の医薬用無毒性担体と組み合わせて組成物とすることもでき、種々の製剤化が可能である。例えば、経口投与剤としては錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、ソフトカプセル剤等の固形剤、溶液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤、凍結乾燥製剤等が挙げられ、非経口投与剤としては、注射剤のほか、坐剤、噴霧剤、経皮吸収剤等が挙げられ、これらの製剤は製剤上の常套手段により調製することができる。上記の医薬用無毒性担体としては、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングリコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミノ酸、アルブミン、水、生理食塩水等が挙げられる。また、必要に応じて、安定化剤、滑沢剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤等の慣用の添加剤を適宜添加することができる。
【００１４】
本発明に関わる抗疲労作用化合物および持久力増強作用化合物において、かかる医薬品の形態におけるＰＤの投与量は、患者の年齢、体重、症状、疾患の程度、投与スケジュール、製剤形態などにより、適宜選択・決定されるが、例えば、一日あたり乾燥粉末等価量として０．０１〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされ、一日数回に分けて投与してもよい。
動物においても人間用と同様に製剤化すればよい。動物の年齢、体重、症状、疾患の程度、投与スケジュール、製剤形態などにより、適宜選択・決定されるが、例えば、一日あたり０．０１〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされ、一日数回に分けて投与してもよい。
本発明に関わる天然のＰＤは、長年、食されてきたことから安全性が高いと考えられ、各種飲食品として用いることができる。飲食品としては、それ自体単独で、あるいは他の飲食品にＰＤを含有させ最終形態にすることができる。
【００１５】
飲食品としては、抗疲労作用および持久力増強を目的とする機能性食品として摂取することもできる。機能性食品は、特定保健用食品、栄養機能性食品、又は健康食品として位置付けることができる。
なお、本発明の機能性食品には、ＰＤを含有し、運動における抗疲労作用を有するものであることを特徴とし、抗疲労作用及び／又は持久力増強作用を有するものである旨の表示を付したものが含まれる。
本発明の食品としては、例えば、ＰＤに適当な助剤を添加した後、慣用の手段を用いて、食用に適した形態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル剤、ペースト状等に形成したものを用いることができる。この機能性食品は、そのまま食用に供してもよく、また種々の食品（例えばハム、ソーセージ、かまぼこ、ちくわ、パン、バター、粉乳、菓子など）に添加して使用したり、水、酒類、果汁、牛乳、清涼飲料水等の飲物に添加して使用してもよい。
【００１６】
かかる食品の形態における本発明のＰＤの摂取量は、対象の年齢、体重、症状、摂取スケジュール、製剤形態などにより、適宜選択、決定されるが、例えば、一日あたり乾燥粉末等価量として０．０１〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされる。
本発明の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤は、同様にＰＤに適当な助剤、例えば成形固化促進剤、溶解剤、栄養剤、等を添加した後、慣用の手段を用いて、食用に適した形態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル剤、ペースト状等に形成したものを用いることができる。また、飼料およびペットフードに添加して使用したり、水などの飲料水に添加してもよい。
かかる食品の形態における本発明のＰＤの摂取量は、動物の年齢、体重、症状、摂取スケジュール、製剤形態などにより、適宜選択、決定されるが、例えば、一日あたり乾燥粉末等価量として０．０１〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされる。
【実施例】
【００１７】
以下に本発明をより詳細に説明するために実施例を挙げる。
（構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の抽出、精製）
ホタテガイのウロ（貝柱以外の軟体部分）をボイル滅菌処理した後、一旦冷凍保存した。これを解凍し家庭用ミキサーにより粉砕した。該ウロ粉砕物１ｋｇ（水分７８％）に２．７ｋｇのヘキサンを加え、室温で１時間攪拌して抽出をおこない、吸引ろ過によりろ別した。得られた液体部分を真空エバポレータを用いて４０℃で溶剤除去し、８ｇの脂質を得た。構成脂肪酸基としてはＤＨＡ基が２４質量％、ＥＰＡ基が１６質量％含まれていた。冷アセトン不純物法によるリン脂質化合物含量は９３質量％であった。リン脂質組成としてはホスファチジルコリン基が２５質量％、その他にホスファチジルエタノールアミン基、ホスファチジルセリン基などが含まれていた。
【００１８】
「実施例１」
構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の抗疲労作用および持久力増強作用の効果を動物を用いて測定した。
５週齢の雄性ｄｄＹマウスを用い、６日間の予備飼育後、１群１０匹で２群に分けた。群構成は、試料の代わりに水を投与する対照群（水投与）と、試料として 構成脂肪酸の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸であるリン脂質化合物乾燥微粉末試料１５０ｍｇ／ｋｇの水への懸濁物を投与する試験投与群とし、週５日間経口投与を行った。投与後２週目からマウスに体重の９．５％の重りを付加して強制水泳させ、疲労困憊し頭部が完全に７秒間水中に沈むまでの時間を測定した。その結果を表１に示す。
表１の数値は、平均値（秒）±標準誤差を示した。表中、＊は、危険率５％で試験投与群が対照群に対して有意差があることを示す（Ｓｔｕｄｅｎｔ Ｔｅｓｔ）。
表１は構成脂肪酸の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸であるリン脂質化合物の遊泳時間延長効果を示す。
【００１９】
［表１］
0週目(n=10) 2週目(n=10) 3週目(n=10)
対照群 171±14 204±41 198±43
試験投与群 168±14 295±41* 271±42*
【００２０】
「比較例１」
ＤＨＡ、リン脂質化合物単独の抗疲労作用および持久力増強作用の比較
ＤＨＡ単独あるいはリン脂質化合物単独の投与の場合と比較するため、構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物と同量の魚脂由来のトリグリセリド型ＤＨＡあるいは脂肪酸基としてＤＨＡを含まない大豆リン脂質化合物１５０ｍｇ／ｋｇを用い、実施例１と同様の方法で、抗疲労作用および持久力増強作用を試験をした。その結果を表２に示す。
【００２１】
表２はＤＨＡおよび大豆リン脂質の遊泳時間延長効果を示す。
［表２］
0週目(n=10) 2週目(n=10) 3週目(n=10)
対照群 172±17 180±27 178±21
トリグリ型ＤＨＡ単独投与群 170±17 235±30 194±22
大豆リン脂質単独投与群 170±16 204±33 178±18
【００２２】
これらの結果より、構成脂肪酸基の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の試験投与群において遊泳時間の顕著な延長効果が認められ、これはトリグリ型ＤＨＡ単独および大豆リン脂質化合物単独の試験投与群をしのぐものであった。この遊泳時間の延長は、動物個体における総合的な反応の変化による抗疲労作用および持久力増強作用を評価するために常用される試験であり、上記結果は本発明における構成脂肪酸の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸であるリン脂質化合物に該作用があることを科学的に立証できた。
【００２３】
「実施例２」
構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を含むソフトカプセルの効果をヒトを用いて測定した。
［１ ソフトカプセル剤の作製］
以下の表３に示す原材料を適宜混合し、試験用ソフトカプセル剤を調製した。比較用ソフトカプセルは、ＤＨＡ含有リン脂質化合物を含まない点を除き、試験ソフトカプセルと同じ組成とした。また、外観からも両者の区別はつかない二重盲験試験とした。カラメル着色した食品用標準ゼラチンを皮膜とするフットボール型ソフトカプセル５号を用い、表３の処方で作製した。
【００２４】
【表３】
【００２５】
上記にて作成したソフトカプセル剤を摂取し、精神作業負荷試験を行い、前記精神作業負荷試験の直前、精神作業負荷２時間後、精神作業負荷４時間後および回復４時間後の３ポイントで主観的疲労感の測定（ＶＡＳ検査）および機能維持度測定（ＡＴＭＴ反応時間検査）を行った。
【００２６】
［２ 被験者］
本試験は、ヘルシンキ宣言に基づく倫理的原則を遵守して実施された。健常男性９名及び健常女性９名（平均年齢３８．８歳）を被験者とし、全例に本試験に対する同意書を取得した。本試験はクロスオーバー試験とし、被験者は、それぞれ表４に示すソフトカプセルを摂取した。
【００２７】
【表４】
［3 実験スケジュール］
被験者は、毎日８錠（朝夕食後に4錠ずつ）のソフトカプセルを試験実施前７日間摂取した。試験実施当日の測定時間、疲労負荷を与える時間、ソフトカプセルの摂取時間、回復時間など、実施例２で行う試験のスケジュールを表５に示す。
【００２８】
【表５】
［4 精神作業負荷方法］
表６に示す方法で精神作業負荷をおこなった。
【００２９】
【表６】
［4−１ 内田クレペリン検査］
内田クレペリン検査とは、簡単な一桁の足し算を一定時間連続して行い、その作業量によって表れた曲線によって「人が作業（行動）するときの能力」、「その能力を発揮するときの特徴」を判定する作業検査であるが、精神疲労負荷作業としても用いられている。本来の検査は１分間×１５回の２セットであるが、本試験では各被験者に連続で３０分間試行させることにより精神作業負荷を与えた。
【００３０】
［4−２ ＡＴＭＴ］
ＡＴＭＴ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｔｒａｉｌ Ｍａｋｉｎｇ Ｔｅｓｔ）とは、本来、加齢現象の評価と初期痴呆のスクリーニングに活用されていたが、最近では疲労測定機器として利用できることが期待されている精神神経学的機器である。タッチパネルディスプレイ上に提示された１〜２５までの数字をすばやく押す視覚探索反応課題であり、従来、Ａ４紙で行っていたＴＭＴ（ランダムに配置された１〜２５の数字を一筆書きの要領で線を引く課題）とは異なり、ＡＴＭＴでは、ｔａｒｇｅｔごとの探索反応時間が測定でき、また、反応ごとに全てのｔａｒｇｅｔを再配置させ、反応ずみｔａｒｇｅｔを消して新規にｔａｒｇｅｔを追加発生させることが可能である。そのことにより、課題遂行中にみられる精神疲労の増大、探索効率を高めるためのワーキングメモリー活用度などの評価が可能である。試行内容は、被験者がパソコンのタッチパネル上に提示された１〜２５までの数字のうちターゲットの数字を押すと、その数字が消えて新たな数字が任意の位置に出現する、というものである（１を押すと１が消えて２６が出現、２を押すと２が消えて２７が出現する）。
【００３１】
本試験では、現行のＡＴＭＴを精神作業負荷に採用するために、一部改良し（通常のノートパソコンを用い、標的としてＡ〜Ｚまでのアルファベットのうち２５文字をディスプレイにランダムに掲示させ、「Ｒ」をマウスでクリックするたびに配置が代わる設定）、連続で３０分間の試行を行った。
【００３２】
［5 評価方法］
［5−１ 主観的疲労感の測定（ＶＡＳ検査）］
ＶＡＳ（Ｖｉｓｕａｌ Ａｎａｌｏｇｕｅ Ｓｃａｌｅ）とは、線分の両端に基準となる表現を記した紙を見せ、被験者は測りたい内容が、その線分のどのあたりに相当するかをチェックする評価方法である。線分の左端からの長さを測定することにより、質問項目に対して定量的に結果が出て、多くの人の結果を平均するなどの処理ができるという利点を持つ方法である。本試験例で使用したＶＡＳ検査用紙の例を縦横の長さ比を維持して図１に示す。線分の長さとしては１０ｃｍが通常である。
【００３３】
［5−２ 機能維持度測定（ＡＴＭＴ反応時間検査）］
ＡＴＭＴ反応時間検査とは、前記ＡＴＭＴを用い、Ａ〜Ｚまでのアルファベットのうち２５文字をディスプレイ上にランダムに掲示させ、「Ｒ」を押すたびに配置が変わる設定とし、「Ｒ」を素早く７０回押すという視覚探索反応課題を評価する検査である。平均反応時間を評価項目とした。
【００３４】
［５−３ 有意差の検定］
統計処理はパラメトリック法を採用し、試験用カプセル投与時と比較カプセル投与時について対応のあるｔ検定を行った。有意確率(両側)が５％以下である場合（値の右肩に**）に有意とし、有意確率(両側)が１０％以下５％以上である場合（値の右肩に*）は有意傾向とした。
【００３５】
［６］結果
［６−１］ＶＡＳ検査
全体的疲労感、精神的疲労感、身体的疲労感、自覚的ストレスの各項目において質問を行い、ＶＡＳの線分長さの測定をしたところ以下のデータを得た。
【００３６】
【表７】
【００３７】
【表８】
【００３８】
【表９】
【００３９】
【表１０】
【００４０】
【表１１】
【００４１】
【表１２】
【００４２】
【表１３】
【００４３】
【表１４】
【００４４】
【表１５】
【００４５】
【表１６】
【００４６】
【表１７】
【００４７】
【表１８】
これらの結果をまとめると、精神作業を負荷する直前に日常生活による疲労感の測定をしたところ、全体疲労感、精神的疲労感及び自覚的ストレスの有意な低下と身体的疲労感の低下傾向がみられた。また、回復期４時間後で精神的疲労感の有意な低下及び自覚的ストレスと身体的疲労感の低下傾向がみられ（表９、表１２、表１５、表１８）、構成脂肪酸基の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の服用による種々の疲労感の改善が顕著であった。
【００４８】
［６−２］ＡＴＭＴ反応時間検査
ＡＴＭＴを用いてその反応時間を測定したところ、以下の結果を得た。
７０回の平均反応時間と後半２０回の反応時間合計のデータを別途、解析した。
【００４９】
【表１９】
【００５０】
【表２０】
【００５１】
【表２１】
【００５２】
【表２２】
【００５３】
【表２３】
【００５４】
【表２４】
これらの結果をまとめると、精神作業を負荷する直前に日常生活による疲労感の測定したところ、平均反応時間の短縮傾向、後半２０回反応時間の有意な短縮がみられた。また、回復期４時間後で平均反応時間の短縮傾向がみられ、構成脂肪酸基の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の服用よるパフォーマンスの改善が顕著に示された。（表２１、表２４）。
【００５５】
以上の結果より、構成脂肪酸基の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物をソフトカプセルに詰めて投与した群において精神作業負荷前で種々の疲労感の低下やATMT反応時間の改善がみられたことにより、日常生活による複合的疲労に有効であることを科学的に立証できた。また、精神疲労負荷後において、疲労感の低下やATMT反応時間の改善がみられたことにより、本発明における構成脂肪酸の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸であるリン脂質化合物が精神疲労に有効であることを科学的に立証できた。
【産業上の利用可能性】
【００５６】
本発明により、構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を有効成分とする抗疲労作用および持久力増強作用を目的とした化合物の提供が可能となった。これに伴い、安全性が高くかつ効果の期待できる医薬品及び栄養機能食品、健康食品、等の飲食品を人間および動物に提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５７】
【図１】実施例［５−１ ＶＡＳ検査］で使用したＶＡＳ試験用紙である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、人間および動物の抗疲労作用および持久力増強作用を目的とした抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物、これらを含む飲食品または医薬品に関する。
【背景技術】
【０００２】
健康志向が高まっている現在、スポーツと栄養またはスポーツと生理機能との関係についての認識が深まっている。このような中で、エネルギー補給、疲労回復、さらに瞬発力や持久力の増強、身体作りなど様々な場面でスポーツフーズが利用されている。スポーツフーズの中でも、抗疲労作用および持久力増強作用を目的とするものは、スポーツ選手の成績向上のためのみならず、一般の人が仕事をする上でも持久力維持や、活力あふれる生活を送るためのものとして多く利用されている。
これらの抗疲労剤および持久力増強剤の多くは、ビタミン類と生薬から成り、動物実験等の科学的根拠がないまま、古くからの伝承により効果を謳っているものが多い。また、これらの抗疲労剤等はカフェインやエチルアルコールを含有し、興奮、不眠などを伴うものが多く、真に健康を目的としたものとは言い難いのが実情である。
このような実情において、抗疲労剤および持久力増強剤には、明確な有効性の確認と、科学的根拠が求められている。
【０００３】
また、以上のことは動物においても同様であり、競走馬などのレース用の動物から家畜、動物園などの施設で飼育されている動物、ペットなどの動物においても抗疲労作用および持久力増強作用のある飲食品等が求められている。
また一方、ＤＨＡに代表されるω―３高度不飽和脂肪酸やホスファチジルコリン、ホスファチジルセリンなどの食品成分の各種生理活性効果が各種研究されている。例えば構成脂肪酸基としてω−３高度不飽和脂肪酸基を多く含むリン脂質化合物（以下ＰＤということがある）の製法（特許文献１）、ＤＨＡとホスファチジルコリンの混合物などに学習能力向上の機能があること（特許文献２）、特定のリン脂質に脳卒中予防効果があること（特許文献３）、また視力改善効果があること（特許文献４）などが開示されている。
しかし、構成脂肪酸基としてω−３高度不飽和脂肪酸基を多く含むリン脂質化合物が抗疲労作用および持久力増強作用を有するという報告は全くない。
【特許文献１】特開２００４−２６７６７号公報
【特許文献２】特開平０７−０１７８５５号公報
【特許文献３】特開２０００−２３９１６８号公報
【特許文献４】特開２００４−１１５４２９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、人間および動物に対して、抗疲労作用および持久力増強作用を有する化合物を提供し、ひいては該化合物を含有する医薬品、栄養機能食品、健康食品又は飲食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物が、顕著な抗疲労作用および持久力増強作用を有することを見出した。すなわち、本発明は、以下の構成を有する。
（１） 構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物であることを特徴とする抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（２） 構成脂肪酸基の３０％質量以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物が、魚介類からヘキサンおよびあるいはアセトンを含む抽出液を用いて抽出した物である前記（１）に記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（３） 魚介類がホタテガイである前記（２）に記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（４） 疲労が、運動による肉体疲労である前記（１）〜（３）のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（５） 疲労が、精神作業ストレスによる精神疲労である前記（１）〜（３）のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（６） 疲労が、日常生活による複合的疲労である前記（１）〜（３）のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
（７） 構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を有効成分とすることを特徴とする抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（８） 構成脂肪酸基の３０％質量以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物が、魚介類からヘキサンおよびあるいはアセトンを含む抽出液を用いて抽出した物である前記（７）に記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（９） 魚介類が、ホタテガイである前記（８）に記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（１０） 疲労が、運動による肉体疲労である前記（７）〜（９）のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（１１） 疲労が、精神作業ストレスによる精神疲労である前記（７）〜（９）のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（１２） 疲労が、日常生活による複合的疲労である前記（７）〜（９）のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
（１３） 構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を含有し、抗疲労作用及び／又は持久力増強作用を有するものであることを特徴とし、抗疲労作用及び/又は持久力増強作用を有するものである旨を表示した飲食品。
【発明の効果】
【０００６】
本発明の構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物は、抗疲労作用および持久力増強作用が確認されたものであり、安全な栄養機能食品、又は健康食品等の飲食品並びに医薬品を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明について、以下に具体的に説明する。
本発明に関わる構成脂肪酸基は、脂質のエステル結合部分を強アルカリで分解することにより得ることができる。本発明に関わるリン脂質化合物は、ホスファチジル基を有し、ω―３高度不飽和脂肪酸基を全構成脂肪酸基の３０質量％以上を含むことを特徴とする。ω―３高度不飽和脂肪酸基とは、ＣＨ３に最も近い２重結合の位置がＣＨ3から３番目のＣにある脂肪酸であって２重結合の多いものをいい、例えば、ドコサヘキサエン酸基（以下ＤＨＡ基ということがある）やエイコサペンタエン酸基（以下ＥＰＡ基ということがある）等が挙げられる。ここで、ω―３高度不飽和脂肪酸基はリン脂質化合物の１位、２位のいずれか一方に、あるいは両方に結合していても構わない。また、いずれか一方に他の飽和脂肪酸あるいは不飽和脂肪酸が結合していても差し支えない。
ホスファチジル基を有する化合物としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロールなどがあげられる。
【０００８】
本発明に関わる、構成脂肪酸基としてω−３高度不飽和脂肪酸基を多く含むリン脂質化合物の一例として、以下の一般式（１）の構造のものがあげられる。ここで、Ｒ1ＣＯＯ基、Ｒ2ＣＯＯ基の少なくともいずれか一方は、ω―３高度不飽和脂肪酸基である。これらの基の高度不飽和度とは、２重結合を２以上有することが好ましく、さらに好ましくは５〜８を有することを言う。Ｒ1、Ｒ2はアルキル基またはアルケニル基の炭化水素であり、炭素数は２〜２８、好ましくは６〜１８である。また、Ｒ1、Ｒ2は上記炭化水素の誘導体でもよい。
【０００９】
【化１】
【００１０】
本発明の構成脂肪酸基としてω−３高度不飽和脂肪酸基を多く含むリン脂質化合物は、魚類やその卵、貝類などの海棲生物や陸棲生物に含まれており、抽出に代表される工程によって得ることができる。更には公知の化学反応、酵素反応により合成することも可能である。また海棲生物や陸棲生物等の生体からの抽出によってＰＤを得る場合にはトリグリセリド型脂肪酸やリゾリン脂質、プラズマローゲンなどが共に得られるが、これらの物質を混在したまま又は混合したＰＤを本発明としても差し支えない。
【００１１】
本発明における「疲労」とは、生体がある機能を発揮した結果、その機能が低下する現象をいう。例えば、「水泳をした後の肉体疲労」「長時間にわたり、知的労働をした後の精神疲労」「毎日の通常生活においても蓄積する肉体的および精神的な複合的疲労」等を挙げることができる。
「抗疲労作用」とは本発明の化合物を含有する組成物等を飲食服用することにより、そのような「疲労」状態を軽減させる作用および「疲労」状態よりの回復を促進する作用、あるいは「疲労」を予防し、疲れにくくする作用などをいう。
「持久力」とは、ある一定の運動状態を継続して行うことができる能力をいい、「持久力増強作用」とは、その継続してできる能力が増強される作用、例えば、具体的には継続時間が延びることにより確認することができる。
【００１２】
本発明における抗疲労作用及び持久力増強作用は、例えば後述する実施例のように、マウスを用いた遊泳疲労試験などにより評価することができる。また、ヒトを用いた日常生活や精神作業負荷による主観的疲労感測定（VAS検査）や機能維持度測定（ATMT反応時間検査）などにより評価することもできる。
上記の方法で得られた構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の抗疲労作用および持久力増強作用を持つ化合物は、それを飲食物に混合して飲食品として、あるいは医薬品として用いることができる。医薬品としては、抗疲労剤又は持久力増強剤がこれに相当する。
【００１３】
医薬品としては、化合物それ自体で、あるいは常法に従って公知の医薬用無毒性担体と組み合わせて組成物とすることもでき、種々の製剤化が可能である。例えば、経口投与剤としては錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、ソフトカプセル剤等の固形剤、溶液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤、凍結乾燥製剤等が挙げられ、非経口投与剤としては、注射剤のほか、坐剤、噴霧剤、経皮吸収剤等が挙げられ、これらの製剤は製剤上の常套手段により調製することができる。上記の医薬用無毒性担体としては、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングリコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミノ酸、アルブミン、水、生理食塩水等が挙げられる。また、必要に応じて、安定化剤、滑沢剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤等の慣用の添加剤を適宜添加することができる。
【００１４】
本発明に関わる抗疲労作用化合物および持久力増強作用化合物において、かかる医薬品の形態におけるＰＤの投与量は、患者の年齢、体重、症状、疾患の程度、投与スケジュール、製剤形態などにより、適宜選択・決定されるが、例えば、一日あたり乾燥粉末等価量として０．０１〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされ、一日数回に分けて投与してもよい。
動物においても人間用と同様に製剤化すればよい。動物の年齢、体重、症状、疾患の程度、投与スケジュール、製剤形態などにより、適宜選択・決定されるが、例えば、一日あたり０．０１〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされ、一日数回に分けて投与してもよい。
本発明に関わる天然のＰＤは、長年、食されてきたことから安全性が高いと考えられ、各種飲食品として用いることができる。飲食品としては、それ自体単独で、あるいは他の飲食品にＰＤを含有させ最終形態にすることができる。
【００１５】
飲食品としては、抗疲労作用および持久力増強を目的とする機能性食品として摂取することもできる。機能性食品は、特定保健用食品、栄養機能性食品、又は健康食品として位置付けることができる。
なお、本発明の機能性食品には、ＰＤを含有し、運動における抗疲労作用を有するものであることを特徴とし、抗疲労作用及び／又は持久力増強作用を有するものである旨の表示を付したものが含まれる。
本発明の食品としては、例えば、ＰＤに適当な助剤を添加した後、慣用の手段を用いて、食用に適した形態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル剤、ペースト状等に形成したものを用いることができる。この機能性食品は、そのまま食用に供してもよく、また種々の食品（例えばハム、ソーセージ、かまぼこ、ちくわ、パン、バター、粉乳、菓子など）に添加して使用したり、水、酒類、果汁、牛乳、清涼飲料水等の飲物に添加して使用してもよい。
【００１６】
かかる食品の形態における本発明のＰＤの摂取量は、対象の年齢、体重、症状、摂取スケジュール、製剤形態などにより、適宜選択、決定されるが、例えば、一日あたり乾燥粉末等価量として０．０１〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされる。
本発明の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤は、同様にＰＤに適当な助剤、例えば成形固化促進剤、溶解剤、栄養剤、等を添加した後、慣用の手段を用いて、食用に適した形態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル剤、ペースト状等に形成したものを用いることができる。また、飼料およびペットフードに添加して使用したり、水などの飲料水に添加してもよい。
かかる食品の形態における本発明のＰＤの摂取量は、動物の年齢、体重、症状、摂取スケジュール、製剤形態などにより、適宜選択、決定されるが、例えば、一日あたり乾燥粉末等価量として０．０１〜１０ｇ／ｋｇ体重程度とされる。
【実施例】
【００１７】
以下に本発明をより詳細に説明するために実施例を挙げる。
（構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の抽出、精製）
ホタテガイのウロ（貝柱以外の軟体部分）をボイル滅菌処理した後、一旦冷凍保存した。これを解凍し家庭用ミキサーにより粉砕した。該ウロ粉砕物１ｋｇ（水分７８％）に２．７ｋｇのヘキサンを加え、室温で１時間攪拌して抽出をおこない、吸引ろ過によりろ別した。得られた液体部分を真空エバポレータを用いて４０℃で溶剤除去し、８ｇの脂質を得た。構成脂肪酸基としてはＤＨＡ基が２４質量％、ＥＰＡ基が１６質量％含まれていた。冷アセトン不純物法によるリン脂質化合物含量は９３質量％であった。リン脂質組成としてはホスファチジルコリン基が２５質量％、その他にホスファチジルエタノールアミン基、ホスファチジルセリン基などが含まれていた。
【００１８】
「実施例１」
構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の抗疲労作用および持久力増強作用の効果を動物を用いて測定した。
５週齢の雄性ｄｄＹマウスを用い、６日間の予備飼育後、１群１０匹で２群に分けた。群構成は、試料の代わりに水を投与する対照群（水投与）と、試料として 構成脂肪酸の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸であるリン脂質化合物乾燥微粉末試料１５０ｍｇ／ｋｇの水への懸濁物を投与する試験投与群とし、週５日間経口投与を行った。投与後２週目からマウスに体重の９．５％の重りを付加して強制水泳させ、疲労困憊し頭部が完全に７秒間水中に沈むまでの時間を測定した。その結果を表１に示す。
表１の数値は、平均値（秒）±標準誤差を示した。表中、＊は、危険率５％で試験投与群が対照群に対して有意差があることを示す（Ｓｔｕｄｅｎｔ Ｔｅｓｔ）。
表１は構成脂肪酸の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸であるリン脂質化合物の遊泳時間延長効果を示す。
【００１９】
［表１］
0週目(n=10) 2週目(n=10) 3週目(n=10)
対照群 171±14 204±41 198±43
試験投与群 168±14 295±41* 271±42*
【００２０】
「比較例１」
ＤＨＡ、リン脂質化合物単独の抗疲労作用および持久力増強作用の比較
ＤＨＡ単独あるいはリン脂質化合物単独の投与の場合と比較するため、構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物と同量の魚脂由来のトリグリセリド型ＤＨＡあるいは脂肪酸基としてＤＨＡを含まない大豆リン脂質化合物１５０ｍｇ／ｋｇを用い、実施例１と同様の方法で、抗疲労作用および持久力増強作用を試験をした。その結果を表２に示す。
【００２１】
表２はＤＨＡおよび大豆リン脂質の遊泳時間延長効果を示す。
［表２］
0週目(n=10) 2週目(n=10) 3週目(n=10)
対照群 172±17 180±27 178±21
トリグリ型ＤＨＡ単独投与群 170±17 235±30 194±22
大豆リン脂質単独投与群 170±16 204±33 178±18
【００２２】
これらの結果より、構成脂肪酸基の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の試験投与群において遊泳時間の顕著な延長効果が認められ、これはトリグリ型ＤＨＡ単独および大豆リン脂質化合物単独の試験投与群をしのぐものであった。この遊泳時間の延長は、動物個体における総合的な反応の変化による抗疲労作用および持久力増強作用を評価するために常用される試験であり、上記結果は本発明における構成脂肪酸の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸であるリン脂質化合物に該作用があることを科学的に立証できた。
【００２３】
「実施例２」
構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を含むソフトカプセルの効果をヒトを用いて測定した。
［１ ソフトカプセル剤の作製］
以下の表３に示す原材料を適宜混合し、試験用ソフトカプセル剤を調製した。比較用ソフトカプセルは、ＤＨＡ含有リン脂質化合物を含まない点を除き、試験ソフトカプセルと同じ組成とした。また、外観からも両者の区別はつかない二重盲験試験とした。カラメル着色した食品用標準ゼラチンを皮膜とするフットボール型ソフトカプセル５号を用い、表３の処方で作製した。
【００２４】
【表３】
【００２５】
上記にて作成したソフトカプセル剤を摂取し、精神作業負荷試験を行い、前記精神作業負荷試験の直前、精神作業負荷２時間後、精神作業負荷４時間後および回復４時間後の３ポイントで主観的疲労感の測定（ＶＡＳ検査）および機能維持度測定（ＡＴＭＴ反応時間検査）を行った。
【００２６】
［２ 被験者］
本試験は、ヘルシンキ宣言に基づく倫理的原則を遵守して実施された。健常男性９名及び健常女性９名（平均年齢３８．８歳）を被験者とし、全例に本試験に対する同意書を取得した。本試験はクロスオーバー試験とし、被験者は、それぞれ表４に示すソフトカプセルを摂取した。
【００２７】
【表４】
［3 実験スケジュール］
被験者は、毎日８錠（朝夕食後に4錠ずつ）のソフトカプセルを試験実施前７日間摂取した。試験実施当日の測定時間、疲労負荷を与える時間、ソフトカプセルの摂取時間、回復時間など、実施例２で行う試験のスケジュールを表５に示す。
【００２８】
【表５】
［4 精神作業負荷方法］
表６に示す方法で精神作業負荷をおこなった。
【００２９】
【表６】
［4−１ 内田クレペリン検査］
内田クレペリン検査とは、簡単な一桁の足し算を一定時間連続して行い、その作業量によって表れた曲線によって「人が作業（行動）するときの能力」、「その能力を発揮するときの特徴」を判定する作業検査であるが、精神疲労負荷作業としても用いられている。本来の検査は１分間×１５回の２セットであるが、本試験では各被験者に連続で３０分間試行させることにより精神作業負荷を与えた。
【００３０】
［4−２ ＡＴＭＴ］
ＡＴＭＴ（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｔｒａｉｌ Ｍａｋｉｎｇ Ｔｅｓｔ）とは、本来、加齢現象の評価と初期痴呆のスクリーニングに活用されていたが、最近では疲労測定機器として利用できることが期待されている精神神経学的機器である。タッチパネルディスプレイ上に提示された１〜２５までの数字をすばやく押す視覚探索反応課題であり、従来、Ａ４紙で行っていたＴＭＴ（ランダムに配置された１〜２５の数字を一筆書きの要領で線を引く課題）とは異なり、ＡＴＭＴでは、ｔａｒｇｅｔごとの探索反応時間が測定でき、また、反応ごとに全てのｔａｒｇｅｔを再配置させ、反応ずみｔａｒｇｅｔを消して新規にｔａｒｇｅｔを追加発生させることが可能である。そのことにより、課題遂行中にみられる精神疲労の増大、探索効率を高めるためのワーキングメモリー活用度などの評価が可能である。試行内容は、被験者がパソコンのタッチパネル上に提示された１〜２５までの数字のうちターゲットの数字を押すと、その数字が消えて新たな数字が任意の位置に出現する、というものである（１を押すと１が消えて２６が出現、２を押すと２が消えて２７が出現する）。
【００３１】
本試験では、現行のＡＴＭＴを精神作業負荷に採用するために、一部改良し（通常のノートパソコンを用い、標的としてＡ〜Ｚまでのアルファベットのうち２５文字をディスプレイにランダムに掲示させ、「Ｒ」をマウスでクリックするたびに配置が代わる設定）、連続で３０分間の試行を行った。
【００３２】
［5 評価方法］
［5−１ 主観的疲労感の測定（ＶＡＳ検査）］
ＶＡＳ（Ｖｉｓｕａｌ Ａｎａｌｏｇｕｅ Ｓｃａｌｅ）とは、線分の両端に基準となる表現を記した紙を見せ、被験者は測りたい内容が、その線分のどのあたりに相当するかをチェックする評価方法である。線分の左端からの長さを測定することにより、質問項目に対して定量的に結果が出て、多くの人の結果を平均するなどの処理ができるという利点を持つ方法である。本試験例で使用したＶＡＳ検査用紙の例を縦横の長さ比を維持して図１に示す。線分の長さとしては１０ｃｍが通常である。
【００３３】
［5−２ 機能維持度測定（ＡＴＭＴ反応時間検査）］
ＡＴＭＴ反応時間検査とは、前記ＡＴＭＴを用い、Ａ〜Ｚまでのアルファベットのうち２５文字をディスプレイ上にランダムに掲示させ、「Ｒ」を押すたびに配置が変わる設定とし、「Ｒ」を素早く７０回押すという視覚探索反応課題を評価する検査である。平均反応時間を評価項目とした。
【００３４】
［５−３ 有意差の検定］
統計処理はパラメトリック法を採用し、試験用カプセル投与時と比較カプセル投与時について対応のあるｔ検定を行った。有意確率(両側)が５％以下である場合（値の右肩に**）に有意とし、有意確率(両側)が１０％以下５％以上である場合（値の右肩に*）は有意傾向とした。
【００３５】
［６］結果
［６−１］ＶＡＳ検査
全体的疲労感、精神的疲労感、身体的疲労感、自覚的ストレスの各項目において質問を行い、ＶＡＳの線分長さの測定をしたところ以下のデータを得た。
【００３６】
【表７】
【００３７】
【表８】
【００３８】
【表９】
【００３９】
【表１０】
【００４０】
【表１１】
【００４１】
【表１２】
【００４２】
【表１３】
【００４３】
【表１４】
【００４４】
【表１５】
【００４５】
【表１６】
【００４６】
【表１７】
【００４７】
【表１８】
これらの結果をまとめると、精神作業を負荷する直前に日常生活による疲労感の測定をしたところ、全体疲労感、精神的疲労感及び自覚的ストレスの有意な低下と身体的疲労感の低下傾向がみられた。また、回復期４時間後で精神的疲労感の有意な低下及び自覚的ストレスと身体的疲労感の低下傾向がみられ（表９、表１２、表１５、表１８）、構成脂肪酸基の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の服用による種々の疲労感の改善が顕著であった。
【００４８】
［６−２］ＡＴＭＴ反応時間検査
ＡＴＭＴを用いてその反応時間を測定したところ、以下の結果を得た。
７０回の平均反応時間と後半２０回の反応時間合計のデータを別途、解析した。
【００４９】
【表１９】
【００５０】
【表２０】
【００５１】
【表２１】
【００５２】
【表２２】
【００５３】
【表２３】
【００５４】
【表２４】
これらの結果をまとめると、精神作業を負荷する直前に日常生活による疲労感の測定したところ、平均反応時間の短縮傾向、後半２０回反応時間の有意な短縮がみられた。また、回復期４時間後で平均反応時間の短縮傾向がみられ、構成脂肪酸基の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物の服用よるパフォーマンスの改善が顕著に示された。（表２１、表２４）。
【００５５】
以上の結果より、構成脂肪酸基の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物をソフトカプセルに詰めて投与した群において精神作業負荷前で種々の疲労感の低下やATMT反応時間の改善がみられたことにより、日常生活による複合的疲労に有効であることを科学的に立証できた。また、精神疲労負荷後において、疲労感の低下やATMT反応時間の改善がみられたことにより、本発明における構成脂肪酸の３０％以上がω−３高度不飽和脂肪酸であるリン脂質化合物が精神疲労に有効であることを科学的に立証できた。
【産業上の利用可能性】
【００５６】
本発明により、構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を有効成分とする抗疲労作用および持久力増強作用を目的とした化合物の提供が可能となった。これに伴い、安全性が高くかつ効果の期待できる医薬品及び栄養機能食品、健康食品、等の飲食品を人間および動物に提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５７】
【図１】実施例［５−１ ＶＡＳ検査］で使用したＶＡＳ試験用紙である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物であることを特徴とする抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項２】
構成脂肪酸基の３０％質量以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物が、魚介類からヘキサンおよびあるいはアセトンを含む抽出液を用いて抽出した化合物である請求項１に記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項３】
魚介類がホタテガイである請求項２に記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項４】
疲労が、運動による肉体疲労である請求項１〜３のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項５】
疲労が、精神作業ストレスによる精神疲労である請求項１〜３のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項６】
疲労が、日常生活による複合的疲労である請求項１〜３のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項７】
構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を有効成分とすることを特徴とする抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項８】
構成脂肪酸基の３０％質量以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物が、魚介類からヘキサンおよびあるいはアセトンを含む抽出液を用いて抽出した物である請求項７に記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項９】
魚介類がホタテガイである請求項８に記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項１０】
疲労が、運動による肉体疲労である請求項７〜９のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項１１】
疲労が、精神作業ストレスによる精神疲労である請求項７〜９のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項１２】
疲労が、日常生活による複合的疲労である請求項７〜９のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項１３】
構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を含有し、抗疲労作用及び／又は持久力増強作用を有するものであることを特徴とし、抗疲労作用及び/又は持久力増強作用を有するものである旨を表示した飲食品。
【請求項１】
構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物であることを特徴とする抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項２】
構成脂肪酸基の３０％質量以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物が、魚介類からヘキサンおよびあるいはアセトンを含む抽出液を用いて抽出した化合物である請求項１に記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項３】
魚介類がホタテガイである請求項２に記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項４】
疲労が、運動による肉体疲労である請求項１〜３のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項５】
疲労が、精神作業ストレスによる精神疲労である請求項１〜３のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項６】
疲労が、日常生活による複合的疲労である請求項１〜３のいずれかに記載の抗疲労作用化合物及び／又は持久力増強作用化合物。
【請求項７】
構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を有効成分とすることを特徴とする抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項８】
構成脂肪酸基の３０％質量以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物が、魚介類からヘキサンおよびあるいはアセトンを含む抽出液を用いて抽出した物である請求項７に記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項９】
魚介類がホタテガイである請求項８に記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項１０】
疲労が、運動による肉体疲労である請求項７〜９のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項１１】
疲労が、精神作業ストレスによる精神疲労である請求項７〜９のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項１２】
疲労が、日常生活による複合的疲労である請求項７〜９のいずれかに記載の抗疲労作用剤及び／又は持久力増強作用剤。
【請求項１３】
構成脂肪酸基の３０質量％以上がω−３高度不飽和脂肪酸基であるリン脂質化合物を含有し、抗疲労作用及び／又は持久力増強作用を有するものであることを特徴とし、抗疲労作用及び/又は持久力増強作用を有するものである旨を表示した飲食品。
【図１】
【公開番号】特開２００７−１６１７０３（Ｐ２００７−１６１７０３Ａ）
【公開日】平成１９年６月２８日（２００７．６．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−２３８６７７（Ｐ２００６−２３８６７７）
【出願日】平成１８年９月４日（２００６．９．４）
【出願人】（０００００００３３）旭化成株式会社 (901)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年６月２８日（２００７．６．２８）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年９月４日（２００６．９．４）
【出願人】（０００００００３３）旭化成株式会社 (901)
【Ｆターム（参考）】
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