改良型細胞組成物およびその作製方法
胎盤幹細胞を含む組成物を製剤化するための改良方法、ならびにそれによって製造される改良型組成物および細胞製剤が本明細書で提供される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞を含む組成物を作製する方法であって、
（ａ）前記細胞を、デキストランおよびヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含む溶液と接触させて細胞含有溶液を形成するステップ、
（ｂ）細胞含有溶液を濾過するステップ、
（ｃ）前記細胞含有溶液が１ミリリットル当たり約１０±３×１０６個を超える細胞を含む場合、前記細胞を、デキストランを含む第１の希釈溶液で１ミリリットル当たり約１０±３×１０６個以下の細胞に希釈するステップ、および
（ｄ）場合によって、細胞含有溶液を、デキストランを含むがＨＳＡを含まない第２の希釈溶液で希釈し、それによって細胞を含む組成物を作製するステップ
を含む方法。
【請求項２】
前記細胞をステップ（ｃ）の後およびステップ（ｄ）の前で凍結保存する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記第１の希釈溶液または第２の希釈溶液中の前記デキストランがデキストラン４０である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記第１の希釈溶液および第２の希釈溶液中の前記デキストランがデキストラン４０である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記第１の希釈溶液中の前記デキストラン４０が５．５％デキストラン４０である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ＨＳＡを含む前記溶液中の前記ＨＳＡが１０％ＨＳＡである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記第１の希釈溶液がＨＳＡを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記第１の希釈溶液中の前記ＨＳＡが１０％ＨＳＡである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記第１の希釈溶液が凍結保護剤をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記凍結保護剤がＤＭＳＯである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記第２の希釈溶液中の前記デキストラン４０が１０％デキストラン４０である、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
ステップ（ａ）の前記溶液が凍結保護剤を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記細胞を含む組成物が約７．５％〜約９％のデキストランを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記細胞を含む組成物が、１ミリリットル当たり約１．０±０．３×１０６個〜約５．０±１．５×１０６個の細胞を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記細胞が胎盤細胞である、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記幹細胞が単離ヒト接着性胎盤細胞である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
細胞を含む組成物を作製する方法であって、
（ａ）複数の単離ヒト接着性胎盤細胞を５．５％デキストラン４０、１０％ＨＳＡ溶液に懸濁して細胞含有溶液を形成するステップ、
（ｂ）細胞含有溶液を７０μＭフィルターで濾過するステップ、
（ｃ）細胞含有溶液を５．５％デキストラン４０、１０％ＨＳＡ、および５％ＤＭＳＯ中に約１０±３×１０６個細胞／ｍＬ以下に希釈するステップ、
（ｄ）細胞を凍結保存するステップ、
（ｅ）細胞を解凍するステップ、および
（ｆ）場合によって、細胞含有溶液を１０％デキストラン４０で１：１〜１：１１に希釈して、前記細胞を含む組成物を生成するステップ
を含む方法。
【請求項１８】
細胞を含む組成物を作製する方法であって、
（ａ）複数の単離ヒト接着性胎盤細胞を遠心分離にかけて細胞を回収するステップ、
（ｂ）細胞を５．５％デキストラン４０に再懸濁するステップ、
（ｃ）細胞を遠心分離にかけて細胞を回収するステップ、
（ｄ）細胞を、１０％ＨＳＡを含む５．５％デキストラン４０溶液に再懸濁して細胞含有溶液を形成するステップ、
（ｅ）細胞含有溶液を７０μＭ〜１００μＭフィルターで濾過するステップ、
（ｆ）細胞含有溶液を５．５％デキストラン４０、１０％ＨＳＡ、および５％ＤＭＳＯ中に約１０±３×１０６個細胞／ｍＬ以下に希釈するステップ、
（ｇ）細胞を凍結保存するステップ、
（ｈ）細胞を解凍するステップ、および
（ｉ）場合によって、細胞含有溶液を１０％デキストラン４０で１：１〜１：１１に希釈して、前記細胞を含む組成物を生成するステップ
を含む方法。
【請求項１９】
単離ヒト接着性胎盤細胞を含む組成物を作製するための方法であって、
（ａ）複数の単離ヒト接着性胎盤細胞を５．５％デキストラン４０および１０％ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含む溶液中に供給して、単離ヒト接着性胎盤細胞を含む溶液を形成するステップ、
（ｂ）前記単離ヒト接着性胎盤細胞を含む溶液を、目に見える細胞塊を除去するフィルターで濾過して濾過済み単離ヒト接着性胎盤細胞を生成するステップ、
（ｃ）前記濾過済み単離ヒト接着性胎盤細胞を１ミリリットル当たり約１０±３×１０６個の細胞にするのに十分な量の、５．５％デキストラン４０、１０％ＨＳＡおよび５％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む溶液で前記濾過済み単離ヒト接着性胎盤細胞を希釈するステップ、および
（ｄ）前記単離ヒト接着性胎盤細胞を１０％デキストラン４０で、約１：１〜約１：１１の単離ヒト接着性胎盤細胞：デキストラン４０の比で希釈して前記組成物を生成するステップ
を含む方法。
【請求項２０】
前記フィルターが７０μＭフィルターである、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記フィルターが１００μＭフィルターである、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記細胞が単離ヒト接着性胎盤細胞である、請求項１、６、７または８のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記単離ヒト接着性胎盤細胞がＣＤ１０＋、ＣＤ３４−およびＣＤ１０５＋である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−およびＣＤ１０５＋細胞がＣＤ２００＋である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−、ＣＤ１０５＋およびＣＤ２００＋細胞がＣＤ４５−またはＣＤ９０＋のいずれかである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−、ＣＤ１０５＋およびＣＤ２００＋細胞がＣＤ４５−およびＣＤ９０＋である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
請求項１、６、７または８のいずれかに記載の方法によって作製される組成物。
【請求項２８】
単離ヒト接着性胎盤細胞を含む組成物を作製する方法であって、前記単離ヒト接着性胎盤細胞を、５．５％デキストランおよび１０％ＨＳＡを含む溶液と接触させるステップ、単離ヒト接着性胎盤細胞を濾過するステップ、および前記単離ヒト接着性胎盤細胞を、１０％デキストラン４０（ｗ／ｖ）を含む溶液で１ミリリットル当たり約１０±３×１０６個の細胞に希釈するステップを含む方法。
【請求項２９】
複数の単離ヒト接着性胎盤細胞を、１０％デキストラン４０を含む溶液中に含む組成物であって、１ミリリットル当たり約１．０±０．３×１０６個〜約５．０±１．５×１０６個の細胞を含み、マクロの細胞塊は含まない組成物。
【請求項３０】
前記胎盤幹細胞が解凍した凍結保存細胞である、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
バッグ内に含有される、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３２】
マクロの細胞塊を含まない、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３３】
１０６個の細胞当たり約２００未満のミクロ細胞塊を含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３４】
１０６個の細胞当たり約１５０未満のミクロ細胞塊を含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３５】
１０６個の細胞当たり約１００未満のミクロ細胞塊を含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３６】
前記単離ヒト接着性胎盤細胞がＣＤ１０＋、ＣＤ３４−およびＣＤ１０５＋である、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３７】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−およびＣＤ１０５＋細胞がＣＤ２００＋である、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−、ＣＤ１０５＋およびＣＤ２００＋細胞がＣＤ４５−またはＣＤ９０＋のいずれかである、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−、ＣＤ１０５＋およびＣＤ２００＋細胞がＣＤ４５−およびＣＤ９０＋である、請求項３７に記載の組成物。
【請求項４０】
医薬組成物である、請求項２７および２９〜３９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４１】
１ミリリットル当たり約５×１０６個〜１×１０８個の細胞を含む組成物を濃縮するステップをさらに含む、請求項１または請求項１４に記載の方法。
【請求項４２】
対象に細胞を含む組成物を皮下投与するステップをさらに含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項１】
細胞を含む組成物を作製する方法であって、
（ａ）前記細胞を、デキストランおよびヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含む溶液と接触させて細胞含有溶液を形成するステップ、
（ｂ）細胞含有溶液を濾過するステップ、
（ｃ）前記細胞含有溶液が１ミリリットル当たり約１０±３×１０６個を超える細胞を含む場合、前記細胞を、デキストランを含む第１の希釈溶液で１ミリリットル当たり約１０±３×１０６個以下の細胞に希釈するステップ、および
（ｄ）場合によって、細胞含有溶液を、デキストランを含むがＨＳＡを含まない第２の希釈溶液で希釈し、それによって細胞を含む組成物を作製するステップ
を含む方法。
【請求項２】
前記細胞をステップ（ｃ）の後およびステップ（ｄ）の前で凍結保存する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記第１の希釈溶液または第２の希釈溶液中の前記デキストランがデキストラン４０である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記第１の希釈溶液および第２の希釈溶液中の前記デキストランがデキストラン４０である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記第１の希釈溶液中の前記デキストラン４０が５．５％デキストラン４０である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ＨＳＡを含む前記溶液中の前記ＨＳＡが１０％ＨＳＡである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記第１の希釈溶液がＨＳＡを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記第１の希釈溶液中の前記ＨＳＡが１０％ＨＳＡである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記第１の希釈溶液が凍結保護剤をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記凍結保護剤がＤＭＳＯである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記第２の希釈溶液中の前記デキストラン４０が１０％デキストラン４０である、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
ステップ（ａ）の前記溶液が凍結保護剤を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記細胞を含む組成物が約７．５％〜約９％のデキストランを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記細胞を含む組成物が、１ミリリットル当たり約１．０±０．３×１０６個〜約５．０±１．５×１０６個の細胞を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記細胞が胎盤細胞である、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記幹細胞が単離ヒト接着性胎盤細胞である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
細胞を含む組成物を作製する方法であって、
（ａ）複数の単離ヒト接着性胎盤細胞を５．５％デキストラン４０、１０％ＨＳＡ溶液に懸濁して細胞含有溶液を形成するステップ、
（ｂ）細胞含有溶液を７０μＭフィルターで濾過するステップ、
（ｃ）細胞含有溶液を５．５％デキストラン４０、１０％ＨＳＡ、および５％ＤＭＳＯ中に約１０±３×１０６個細胞／ｍＬ以下に希釈するステップ、
（ｄ）細胞を凍結保存するステップ、
（ｅ）細胞を解凍するステップ、および
（ｆ）場合によって、細胞含有溶液を１０％デキストラン４０で１：１〜１：１１に希釈して、前記細胞を含む組成物を生成するステップ
を含む方法。
【請求項１８】
細胞を含む組成物を作製する方法であって、
（ａ）複数の単離ヒト接着性胎盤細胞を遠心分離にかけて細胞を回収するステップ、
（ｂ）細胞を５．５％デキストラン４０に再懸濁するステップ、
（ｃ）細胞を遠心分離にかけて細胞を回収するステップ、
（ｄ）細胞を、１０％ＨＳＡを含む５．５％デキストラン４０溶液に再懸濁して細胞含有溶液を形成するステップ、
（ｅ）細胞含有溶液を７０μＭ〜１００μＭフィルターで濾過するステップ、
（ｆ）細胞含有溶液を５．５％デキストラン４０、１０％ＨＳＡ、および５％ＤＭＳＯ中に約１０±３×１０６個細胞／ｍＬ以下に希釈するステップ、
（ｇ）細胞を凍結保存するステップ、
（ｈ）細胞を解凍するステップ、および
（ｉ）場合によって、細胞含有溶液を１０％デキストラン４０で１：１〜１：１１に希釈して、前記細胞を含む組成物を生成するステップ
を含む方法。
【請求項１９】
単離ヒト接着性胎盤細胞を含む組成物を作製するための方法であって、
（ａ）複数の単離ヒト接着性胎盤細胞を５．５％デキストラン４０および１０％ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含む溶液中に供給して、単離ヒト接着性胎盤細胞を含む溶液を形成するステップ、
（ｂ）前記単離ヒト接着性胎盤細胞を含む溶液を、目に見える細胞塊を除去するフィルターで濾過して濾過済み単離ヒト接着性胎盤細胞を生成するステップ、
（ｃ）前記濾過済み単離ヒト接着性胎盤細胞を１ミリリットル当たり約１０±３×１０６個の細胞にするのに十分な量の、５．５％デキストラン４０、１０％ＨＳＡおよび５％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む溶液で前記濾過済み単離ヒト接着性胎盤細胞を希釈するステップ、および
（ｄ）前記単離ヒト接着性胎盤細胞を１０％デキストラン４０で、約１：１〜約１：１１の単離ヒト接着性胎盤細胞：デキストラン４０の比で希釈して前記組成物を生成するステップ
を含む方法。
【請求項２０】
前記フィルターが７０μＭフィルターである、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記フィルターが１００μＭフィルターである、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記細胞が単離ヒト接着性胎盤細胞である、請求項１、６、７または８のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記単離ヒト接着性胎盤細胞がＣＤ１０＋、ＣＤ３４−およびＣＤ１０５＋である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−およびＣＤ１０５＋細胞がＣＤ２００＋である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−、ＣＤ１０５＋およびＣＤ２００＋細胞がＣＤ４５−またはＣＤ９０＋のいずれかである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−、ＣＤ１０５＋およびＣＤ２００＋細胞がＣＤ４５−およびＣＤ９０＋である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
請求項１、６、７または８のいずれかに記載の方法によって作製される組成物。
【請求項２８】
単離ヒト接着性胎盤細胞を含む組成物を作製する方法であって、前記単離ヒト接着性胎盤細胞を、５．５％デキストランおよび１０％ＨＳＡを含む溶液と接触させるステップ、単離ヒト接着性胎盤細胞を濾過するステップ、および前記単離ヒト接着性胎盤細胞を、１０％デキストラン４０（ｗ／ｖ）を含む溶液で１ミリリットル当たり約１０±３×１０６個の細胞に希釈するステップを含む方法。
【請求項２９】
複数の単離ヒト接着性胎盤細胞を、１０％デキストラン４０を含む溶液中に含む組成物であって、１ミリリットル当たり約１．０±０．３×１０６個〜約５．０±１．５×１０６個の細胞を含み、マクロの細胞塊は含まない組成物。
【請求項３０】
前記胎盤幹細胞が解凍した凍結保存細胞である、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
バッグ内に含有される、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３２】
マクロの細胞塊を含まない、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３３】
１０６個の細胞当たり約２００未満のミクロ細胞塊を含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３４】
１０６個の細胞当たり約１５０未満のミクロ細胞塊を含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３５】
１０６個の細胞当たり約１００未満のミクロ細胞塊を含む、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３６】
前記単離ヒト接着性胎盤細胞がＣＤ１０＋、ＣＤ３４−およびＣＤ１０５＋である、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３７】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−およびＣＤ１０５＋細胞がＣＤ２００＋である、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−、ＣＤ１０５＋およびＣＤ２００＋細胞がＣＤ４５−またはＣＤ９０＋のいずれかである、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
前記ＣＤ１０＋、ＣＤ３４−、ＣＤ１０５＋およびＣＤ２００＋細胞がＣＤ４５−およびＣＤ９０＋である、請求項３７に記載の組成物。
【請求項４０】
医薬組成物である、請求項２７および２９〜３９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４１】
１ミリリットル当たり約５×１０６個〜１×１０８個の細胞を含む組成物を濃縮するステップをさらに含む、請求項１または請求項１４に記載の方法。
【請求項４２】
対象に細胞を含む組成物を皮下投与するステップをさらに含む、請求項４１に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【公表番号】特表２０１２−５０００２１（Ｐ２０１２−５０００２１Ａ）
【公表日】平成２４年１月５日（２０１２．１．５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５２３８１５（Ｐ２０１１−５２３８１５）
【出願日】平成２１年８月２０日（２００９．８．２０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／００４７４０
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０２１７１４
【国際公開日】平成２２年２月２５日（２０１０．２．２５）
【出願人】（５０９２２６８７５）アンスロジェネシス コーポレーション (6)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年１月５日（２０１２．１．５）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年８月２０日（２００９．８．２０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／００４７４０
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０２１７１４
【国際公開日】平成２２年２月２５日（２０１０．２．２５）
【出願人】（５０９２２６８７５）アンスロジェネシス コーポレーション (6)
【Ｆターム（参考）】
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