新規化合物
本発明は，新規化合物，これを含む医薬組成物，とりわけショック状態を治療するための医薬品の製造における前記化合物の使用，ならびに前記化合物を投与することにより前記状態を治療する方法に関する。化合物は，本明細書において定義される一般式（Ｉ）：
【化５】
で表される。
【化５】
で表される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物，これを含む医薬組成物，とりわけショック状態の治療用の医薬品の製造における前記化合物の使用、ならびに前記化合物を投与することにより前記状態を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペプチド性バソプレシンＶ１ａレセプターアゴニスト，例えば、テルリプレシン（例えば、Ｏ’Ｂｒｉａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ ３５９（９３１３）：１２０９−１０，Ｊｕｎｅ ４ｔｈ，２００２を参照）は，最近、救急救命疾患および状態、例えば、循環血液量減少性（例えば出血性）または血管拡張性（例えば敗血症性）のショック，食道静脈瘤出血（ＢＥＶ），肝腎症候群（ＨＲＳ），心肺蘇生法および麻酔誘発性低血圧症の治療において臨床で使用するために、ますます興味がもたれている。これらはまた、起立性低血圧症，穿刺誘発性循環機能不全，術中失血および火傷創面切除および鼻血にともなう失血の治療に、および流涙／涙形成を増加させることによる種々の眼科疾患の治療において、臨床的に使用しうることが見いだされている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、救急救命状態の治療においてテルリプレシン等の代替となりうる、特にヒトＶ１ａ（ｈＶ１ａ）レセプターにおいて有効な化合物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
発明の開示
本発明は、一般式（Ｉ）：
【化３】
［式中、
Ｒ１は、Ｈおよび３−８個の炭素原子を含む脂環式構造の一部から選択され；
Ｒ２は、（ＣＨ２）ｍ−Ｘおよび前記脂環式構造の一部から選択され；
ｍは、０，１，２および３から選択され；
ｎは、０，１，２，３および４から選択され；
ｐは、２，３および４から選択され；
Ｒ１がＨであるとき，Ｒ２は（ＣＨ２）ｍ−Ｘであり；
Ｒ１がＨではないとき，Ｒ１およびＲ２は、これらが結合しているα炭素原子と一緒になって、前記脂環式構造を形成し；
ｍが０，２または３であるとき，Ｘは、Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニルおよびＣ５−８−シクロアルキニルから選択され；
ｍが１であるとき，Ｘは、Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニル，Ｃ５−８−シクロアルキニル，イソプロピルおよびｔｅｒｔ−ブチルから選択され；
前記脂環式構造，Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニルおよびＣ５−８−シクロアルキニルは、任意に、少なくとも１つのアルキル，Ｏ−アルキルまたはヒドロキシル置換基を有していてもよく；
Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、Ｈ，アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルおよびＯＣ（Ｏ）−アルキルから選択され；
アルキルは、Ｃ１−６の直鎖アルキルおよびＣ４−８の分枝鎖アルキルから選択され、任意に少なくとも１つのヒドロキシル置換基を有していてもよい］
で表される化合物、およびその溶媒和物および薬学的に許容しうる塩に関する。
【０００５】
Ｃ１−６直鎖アルキルとの表現には、イソプロピルおよび２−ｎ−ブチル基も包含されることに言及すべきである。これは、前記表現は、問題とする直鎖の結合部位とは関係ないからである。
【０００６】
Ｃ１−６とは、１から６個の炭素原子（この間の任意の数も含む）を有することを表し、この用語は本明細書において同様に用いられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本明細書において用いられる略語は以下のとおりである：
ＡｃＢｕｃ １−アミノシクロブタン−１−カルボン酸
Ａｌａ（ｃＰｅ） シクロペンチルアラニン
Ｂｏｃ ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＢＯＰ ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ トリスジメチルアミノホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート
Ｂｕ ブチル
Ｃｈａ シクロヘキシルアラニン
Ｄｂｕ ２，４−ジアミノ酪酸
ＤＣＣ Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＨＡ ジシクロヘキシルアミン
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＡＤ ジイソプロピルジアゾジカルボキシレート
ＤＩＣ Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＥＡ Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−Ｎ−エチルアミン
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
Ｆｍ ９−フルオレニルメチル
Ｆｍｏｃ ９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＨＯＢｔ １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
ｉ イソ
Ｍｍｔ ４−メトキシトリチル
Ｍｏｂ ｐ−メトキシベンジル
ＭＳ 質量分析
Ｏｒｎ オルニチン
Ｐｈ フェニル
Ｐｒ プロピル
ＰｙＢＯＰ ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ トリスピロリジンホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート
ｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ 塩化２−ニトロベンゼンスルホニル
ＯＴ オキシトシン
Ｒｔ 保持時間
ｔ ｔｅｒｔ
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＴＩＳ トリイソプロピルシラン
ＴＭＯＦ オルトギ酸トリメチル
ＴＰＰ トリフェニルホスフィン
Ｔｒｔ トリチル
ＶＴ バソトシン，［Ｉｌｅ３］バソプレシン
Ｚ ベンジルオキシカルボニル
【０００８】
特に記載しないかぎり、Ｌ−アミノ酸が用いられ、慣用的なアミノ酸用語にしたがう。
【０００９】
薬学的に許容しうる塩の例としては、酸付加塩，例えば、塩酸等のハロゲン化水素酸、および硫酸，リン酸および硝酸等の無機酸、ならびに、脂肪族，脂環式，芳香族または複素環スルホン酸またはカルボン酸，例えば、ギ酸，酢酸，プロピオン酸，コハク酸，グリコール酸，乳酸，リンゴ酸，酒石酸，クエン酸，アスコルビン酸，マレイン酸，ヒドロキシマレイン酸，ピルビン酸，ｐ−ヒドロキシ安息香酸，エンボン酸，メタンスルホン酸，エタンスルホン酸，ヒドロキシエタンスルホン酸，ハロベンゼンスルホン酸，トルエンスルホン酸およびナフタレンスルホン酸との反応により形成される塩が挙げられる。
【００１０】
好ましい態様においては、Ｒ７およびＲ８はＨである。Ｒ３およびＲ４がＨであることが特に好ましい。
【００１１】
ｎが１または２であることも好ましい。アルキルは、典型的には、メチル，エチル，ｎ−プロピル，ｉ−プロピル，ｔ−ブチルおよびｉ−アミルから選択される。
【００１２】
Ｘは、好ましくは、シクロペンチルおよびシクロヘキシルから選択される。
【００１３】
前記脂環式構造は、好ましくはシクロブチル構造である。
【００１４】
最も好ましい態様においては、式（Ｉ）を有する前記化合物は、
【化４】
からなる群より選択される。
【００１５】
かっこ内の数字は、下記で参照される化合物を表す。
【００１６】
さらに、本発明は、医薬品として使用するための上述の化合物に関する。
【００１７】
したがって，本発明はまた、活性成分として上述の化合物を、薬学的に許容しうるアジュバント，希釈剤または担体とともに含む医薬組成物に関する。
【００１８】
医薬組成物は、経口，静脈内，局所，腹腔内，鼻腔内，口腔内，舌下または皮下投与用に、または呼吸管を介する投与用に、例えばエアロゾルまたは空気浮遊微粉末の形に適合されている。したがって、組成物は、例えば、錠剤，カプセル，粉末，微小球，顆粒，シロップ，懸濁液，溶液，経皮パッチまたは座剤の形であることができる。
【００１９】
本発明にしたがう組成物は、任意に、上述の化合物の２またはそれ以上を含んでいてもよいことに注意すべきである。
【００２０】
本発明の医薬組成物は、任意に、崩壊剤，結合剤，潤滑剤，香味料，保存料，着色料およびこれらの任意の混合物から選択される少なくとも１つのさらなる添加物を含んでいてもよい。そのような添加物の例は、“Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ”；Ｅｄ．Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ，３ｒｄ Ｅｄ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，ＵＳＡ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ ＵＫ，２０００に見いだすことができる。
【００２１】
本発明の医薬組成物は、最も好ましくは非経口投与用に適合される。これは、本発明の化合物の滅菌水性調製物を含んでいてもよく、好ましくはレシピエントの血液と等張である。この水性調製物は、既知の方法にしたがって、適当な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を用いて製剤することができる。注射可能な水性製剤であるＲｅｍｅｓｔｙｐ（登録商標）（テルリプレシン）は、適当な医薬製剤の一例である。製剤はまた、希釈剤または溶媒中の滅菌注射可能溶液または懸濁液であってもよく、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液であってもよい。許容しうる希釈剤の例は、水，リンゲル溶液，および等張塩化ナトリウム溶液である。滅菌した，固定油もまた溶媒または懸濁媒体として用いることができる。無刺激性の固定油，例えば合成のモノまたはジグリセリド，およびオレイン酸等の脂肪酸を用いてもよい。
【００２２】
さらに、本発明は、循環血液量減少性または血管拡張性のショック，ＢＥＶ，ＨＲＳ，心肺蘇生法，麻酔誘導性低血圧症，起立性低血圧症，穿刺誘導性循環機能不全，術中失血または火傷創面切除および鼻血にともなう失血の治療用の、および流涙／涙形成を増加させることによる眼科疾患の治療用の、医薬品の製造における上述の化合物の使用に関する。
【００２３】
別の態様においては、本発明は、循環血液量減少性または血管拡張性のショック，ＢＥＶ，ＨＲＳ，心肺蘇生法，麻酔誘導性低血圧症，起立性低血圧症，穿刺誘発性循環機能不全，術中失血または火傷創面切除および鼻血にともなう失血，および流涙／涙形成を増加させることにより種々の眼科疾患を治療する方法に関し，ここで、前記方法は、動物，例えばヒトの患者に、治療上有効量の上述の化合物を投与することを含む。
【００２４】
本発明にしたがう化合物の典型的な投与量は、広範な範囲で変更可能であり、それぞれの患者の個別の必要性および投与の経路等の種々の因子によって異なるであろう。注入により投与される投与量は、一般に、１時間あたり０．０１−２００μｇ／ｋｇ体重の範囲内である。当該技術分野の医師は、個別の状況に応じて投与量を最適化することができる。
【実施例】
【００２５】
実験（合成）
アミノ酸誘導体および樹脂は、商業的供給元から購入した（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ，Ｂａｃｈｅｍ，Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ａｎｄ ＰｅｐＴｅｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）。他の化学物質および溶媒は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｆｉｓｈｅｒ ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃおよびＶＷＲから購入した。
【００２６】
本発明の化合物は、標準的な方法論により、ＦｍｏｃおよびＢｏｃ方法論の両方を用いて固相ペプチド化学で合成した。特に記載しないかぎり、すべての反応は室温で行った。一般的実験設定ならびに出発物質および試薬の入手のガイダンスは、上で引用した文献に加えて、以下の標準的な参考書に提供される：
Ｋａｔｅｓ，Ｓ．Ａ．，Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ，Ｆ．，Ｅｄｓ．，Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｂａｓｅｌ，２０００；
Ｓｔｅｗａｒｔ，Ｊ．Ｍ．，Ｙｏｕｎｇ，Ｊ．Ｄ．Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９８４；
Ｂｉｓｅｌｌｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９８，２７３，２２４９８−２２５０５；および
Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９６３，８５，２１４９−２１５４。
【００２７】
合成したペプチドの純度は、分析用逆相ＨＰＬＣにより判定することができる。ペプチドの構造一体性は、アミノ酸分析およびエレクトロスプレー質量分析を用いて確認することができる。
【００２８】
Ｆｍｏｃ方法論で合成したペプチドは、ＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ２Ｏ９６／２／２（ｖ／ｖ／ｖ）溶液で切断し，Ｂｏｃ方法論における切断は９０％ＨＦ／１０％アニソール（ｖ／ｖ）溶液を用いて行った。ジスルフィド架橋（環）形成は、１０％ＴＦＡ（水性）に溶解した直鎖状ペプチドをヨウ素で酸化することにより行った。ペプチドは調製用ＨＰＬＣにより、リン酸トリエチルアンモニウムバッファ（水性）中で精製した。化合物は最後に慣用のＨＰＬＣ方法論を用いて酢酸塩に変換した。９７％を超える純度を有する画分をプールし、凍結乾燥した。
【００２９】
８位にアルキル化側鎖を有するペプチド（例えば化合物４）の合成：
ペプチドはＦｍｏｃ方法論を用いて組み立てた。８位のジアミノ酸残基に酸不安定性の（すなわち、１−２％ＴＦＡを含む溶液を用いて除去可能な）保護基，例えば、メトキシトリチル（Ｍｍｔ；Ｂａｒｌｏｓ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ １９９２，Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ，Ｃ．Ｈ．，Ｅｂｅｒｌｅ，Ａ．Ｎ．，Ｅｄｓ．，ＥＳＣＯＭ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ Ｂ．Ｖ．，１９９３，ｐｐ２８３−２８４を参照）を導入した。樹脂結合ペプチドをＤＣＭ／ＴＩＳ／ＴＦＡ９３／５／２（ｖ／ｖ／ｖ）溶液で処理してＭｍｔ基を除去した。アセトン／ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３を用いる還元的アルキル化によりＮ−イソプロピルペプチドを得た。
【００３０】
上述の方法の還元的アルキル化において、直鎖アルキルアルデヒドを用いるときに生ずる望ましくないＮ，Ｎ−ジアルキル化を回避するために、別の方法を開発した。すなわち、Ｍｍｔを除去した後、まずアミノ基を塩化２−ニトロベンゼンスルホニルで誘導化した（ｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ；Ｆｕｋｕｙａｍａ，Ｔ．；Ｊｏｗ，Ｃ．−Ｋ．；Ｃｈｅｕｎｇ，Ｍ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．１９９５，３６，６３７３−６３７４を参照）。次に、得られたスルホンアミドを、適当なアルコールを用いて、慣用のミツノブ反応条件下で，典型的には１，２−ジメトキシエタン中ＴＰＰ／ＤＩＡＤを用いてアルキル化した（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ，Ｏ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９８１，１−２８）。次にＤＭＦ中５％カリウムチオフェノレートによりｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ基を除去した後、ペプチドを樹脂から切断した。
【００３１】
４位にＮ−アルキル化側鎖を有するペプチドの合成：
ペプチドはＢｏｃ方法論を用いて組み立てた。４位の残基をＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＦｍ）−ＯＨとして配列中に導入した。ペプチドの組み立てが完了した後、ＤＭＦ中３０％ピペリジンを用いて側鎖保護を除去した。得られた遊離カルボキシル基をＰｙＢＯＰまたはＢＯＰ／ＤＩＥＡにより適当なアミンとカップリングさせることにより、所望のアミドに変換した。次にＮ−末端Ｂｏｃ基を除去し、ＨＦ切断，環化およびＨＰＬＣによる精製を行った。
【００３２】
表１は、上述の方法により製造した化合物を、測定した（下記を参照）ＥＣ５０（有効濃度中央値）のナノモル／Ｌの値とともに示す。化合物４以外のすべての化合物において、Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７およびＲ８はＨであり、化合物４ではＲ６はＨではなくイソプロピルである。挙げられた化合物において、Ｒ１およびＲ２が脂環式構造（２位のアミノ酸のα炭素と一緒になって形成）の一部である場合、例えばここでは１，１−シクロブチルである場合を除き、ｍは１である。
【００３３】
【表１】
【００３４】
以下の詳細な例により、合成をさらに説明する。
化合物４；［Ｃｈａ２，Ａｓｎ４，Ｏｒｎ（ｉ−Ｐｒ）８］ＶＴ：
用いたアミノ酸誘導体は、Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｏｒｎ（Ｍｍｔ）−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨであった。分析用ＨＰＬＣはＷａｔｅｒｓ ６００液体クロマトグラフでＶｙｄａｃ Ｃ１８，５μ ４．６ｘ２５０ｍｍのカラムを用い、流速２ｍｌ／ｍｉｎで実施した。調製用ＨＰＬＣは、Ｗａｔｅｒｓ ２０００液体クロマトグラフでＰｒｅｐａｋ ４７ｘ３００ｍｍカートリッジを用い、流速１００ｍｌ／ｍｉｎで実施した。最終的な化合物の分析は、１１００ Ａｇｉｌｅｎｔ液体クロマトグラフで、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８，５μ ２．１ｘ２５０ｍｍのカラムを用い、流速０．３ｍｌ／ｍｉｎで行った。質量スペクトルはＦｉｎｎｉｇａｎ ＭＡＴ分光光度計で記録した。
【００３５】
完全に保護されたペプチド樹脂は、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ９０５０ペプチド合成機で、０．４ｇ（０．１ｍｍｏｌ）のＴｅｎｔａｇｅｌ−Ｓ−ＲＡＭ樹脂（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）から出発して合成した。４倍過剰のアミノ酸誘導体を用いるＤＩＣ／ＨＯＢｔ媒介性１回カップリングを行った。Ｆｍｏｃ基はＤＭＦ中２０％ピペリジンで除去した。自動合成が完了した後、樹脂を手動合成容器に移し、ＤＣＭ／ＴＩＳ／ＴＦＡ９３／５／２（ｖ／ｖ／ｖ）溶液（３０ｍｌ）で２ｘ１．５時間処理して、Ｍｍｔ基を除去した。樹脂をＤＣＭでよく洗浄し、次に１５ｍｌの１，２−ジクロロエタン／ＴＭＯＦ１：１（ｖ／ｖ）に懸濁した。次に、０．２ｍｌのアセトンを加えた後、０．６ｇのＮａＢＨ（ＯＡｃ）３を加えた。懸濁液を一晩撹拌し、樹脂をメタノール，ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄し、真空下で乾燥した。次に樹脂を３０ｍｌのＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ２Ｏ９６／２／２（ｖ／ｖ／ｖ）溶液で１．５時間処理し、濾別した。濾液を蒸発させ、粗直鎖状ペプチドをジエチルエーテルで沈殿させた。沈殿物をただちに５００ｍｌの１０％ＴＦＡ（水性）に溶解し、機械的に撹拌した溶液にメタノール中０．１ＭＩ２を黄色が残るようになるまで加えることにより、ペプチドを酸化した。過剰のヨウ素をアスコルビン酸で還元した。次に反応混合物を砕氷で冷却し、濃アンモニア（水性）を加えてｐＨを約５に調節した。混合物をＨＰＬＣカラムに負荷し、トリエチルアンモニウムリン酸バッファ（ｐＨ５．２）を用いて精製した。化合物をアセトニトリルの勾配で溶出した。９７％を超える純度を有する画分をプールし、得られた溶液を２倍容量の水で希釈した。溶液をカラムに再び負荷し、２ｌの０．１Ｍ酢酸アンモニウム（水性）で洗浄し、２％酢酸（水性）で平衡化した。化合物をアセトニトリルの急勾配（３％／ｍｉｎ）で溶出した。所望の生成物を含む画分をプールし、凍結乾燥した。２０．７ｍｇ（収率２０％）の白色アモルファス粉体を得た。ＨＰＬＣ：Ｒｔ＝８．２ｍｉｎ，勾配：３０→５０％Ｂ／２０分間，流速：０．３ｍｌ／ｍｉｎ，ｔ＝４０℃，溶媒Ａ０．０１％ＴＦＡ（ａｑ），溶媒Ｂ７０％ＣＨ３ＣＮ，０．０１％ＴＦＡ（ａｑ）；純度：１００％；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値１０２６．５，実測値１０２６．５。
【００３６】
化合物３；［ＡｃＢｕｃ２，Ｄｂｕ８］ＶＴ：
用いたアミノ酸誘導体は、Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（Ｍｏｂ）−ＯＨ，Ｂｏｃ−ＡｃＢｕｃ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｓｎ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｄｂｕ（Ｚ）−ＯＨＤＣＨＡ塩およびＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨであり、これらはすべてＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍおよびＢａｃｈｅｍから購入した。ＨＰＬＣおよびＭＳの操作は、化合物４の合成と同様にして行った。
【００３７】
完全に保護されたペプチド樹脂を、０．６ｇ（０．４ｍｍｏｌ）の４−メチル−ベンズヒドリルアミン樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）から出発して手動で合成した。２．５倍過剰のアミノ酸誘導体を用いる、ＤＣＣ，ＰｙＢＯＰまたはＤＩＣ／ＨＯＢｔにより媒介される１回カップリングを利用した。Ｂｏｃ基は１％ｍ−クレゾールを含むＤＣＭ中５０％ＴＦＡで除去した。得られた樹脂をメタノール，ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄し、真空下で乾燥した。３ｍｌのアニソールを含む３０ｍｌの無水ＨＦを用いて、０℃で９０分間でペプチドを樹脂から切断した。ＨＦを留去し、粗直鎖状ペプチドをジエチルエーテルで洗浄した。ペプチドをただちに２００ｍｌの２５％アセトニトリル／１０％ＴＦＡ（ａｑ）に溶解し、上述したようにして酸化した。得られた混合物を直接ＨＰＬＣカラムに負荷し、リン酸トリエチルアンモニウムバッファ（ｐＨ２．３）を用いて精製した。特に記載しない限り、この後の工程は化合物４についての方法と同じである。８０．６ｍｇ（収率２２％）の白色アモルファス粉体を得た。ＨＰＬＣ：Ｒｔ＝７．３ｍｉｎ，勾配：２０→４０％Ｂ／２０分間，流速：０．３ｍｌ／ｍｉｎ，ｔ＝４０℃，溶媒Ａ０．０１％ＴＦＡ（水性），溶媒Ｂ７０％ＣＨ３ＣＮ，０．０１％ＴＦＡ（水性）；純度：９９．６％；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９２８．４，実測値９２８．３。
【００３８】
他の化合物は、これらの合成方法と同様にして製造した。
【００３９】
実験（生物学的試験）
インビトロレセプターアッセイ：
化合物のｈＶ１ａレセプターに対するアゴニスト活性は、転写レポーターアッセイにおいて、レセプター発現ＤＮＡを、蛍ルシフェラーゼの発現を制御する細胞内カルシウム応答プロモーター要素を含有するレポーターＤＮＡとともにＨＥＫ−２９３細胞に過渡的にトランスフェクトすることにより、測定した。このアッセイのさらに詳細な説明については、Ｂｏｓｓ，Ｖ．，Ｔａｌｐａｄｅ，Ｄ．Ｊ．，Ｍｕｒｐｈｙ，Ｔ．Ｊ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９６，Ｍａｙ３；２７１（１８），１０４２９−１０４３２を参照。１回投与量あたり１０倍に希釈した化合物の希釈系列に細胞を５時間暴露し、次に細胞を溶解し、ルシフェラーゼ活性を測定して，非線形回帰により化合物の効力およびＥＣ５０値を求めた。各実験において、アルギニン−バソプレシン（ＡＶＰ）を内部対称として用い（ＥＣ５０＝０．２１ｎＭ），化合物は少なくとも３回の独立した実験で試験した。
【００４０】
インビトロアッセイの結果を、テルリプレシンの結果とともに上述の表１に示す。記載されるＥＣ５０値は、幾何学平均であり、ナノモル／Ｌ（ｎＭ）で表す。
【００４１】
示されるすべての参考文献は本明細書の一体部分と見なすべきである。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物，これを含む医薬組成物，とりわけショック状態の治療用の医薬品の製造における前記化合物の使用、ならびに前記化合物を投与することにより前記状態を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペプチド性バソプレシンＶ１ａレセプターアゴニスト，例えば、テルリプレシン（例えば、Ｏ’Ｂｒｉａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ ３５９（９３１３）：１２０９−１０，Ｊｕｎｅ ４ｔｈ，２００２を参照）は，最近、救急救命疾患および状態、例えば、循環血液量減少性（例えば出血性）または血管拡張性（例えば敗血症性）のショック，食道静脈瘤出血（ＢＥＶ），肝腎症候群（ＨＲＳ），心肺蘇生法および麻酔誘発性低血圧症の治療において臨床で使用するために、ますます興味がもたれている。これらはまた、起立性低血圧症，穿刺誘発性循環機能不全，術中失血および火傷創面切除および鼻血にともなう失血の治療に、および流涙／涙形成を増加させることによる種々の眼科疾患の治療において、臨床的に使用しうることが見いだされている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、救急救命状態の治療においてテルリプレシン等の代替となりうる、特にヒトＶ１ａ（ｈＶ１ａ）レセプターにおいて有効な化合物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
発明の開示
本発明は、一般式（Ｉ）：
【化３】
［式中、
Ｒ１は、Ｈおよび３−８個の炭素原子を含む脂環式構造の一部から選択され；
Ｒ２は、（ＣＨ２）ｍ−Ｘおよび前記脂環式構造の一部から選択され；
ｍは、０，１，２および３から選択され；
ｎは、０，１，２，３および４から選択され；
ｐは、２，３および４から選択され；
Ｒ１がＨであるとき，Ｒ２は（ＣＨ２）ｍ−Ｘであり；
Ｒ１がＨではないとき，Ｒ１およびＲ２は、これらが結合しているα炭素原子と一緒になって、前記脂環式構造を形成し；
ｍが０，２または３であるとき，Ｘは、Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニルおよびＣ５−８−シクロアルキニルから選択され；
ｍが１であるとき，Ｘは、Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニル，Ｃ５−８−シクロアルキニル，イソプロピルおよびｔｅｒｔ−ブチルから選択され；
前記脂環式構造，Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニルおよびＣ５−８−シクロアルキニルは、任意に、少なくとも１つのアルキル，Ｏ−アルキルまたはヒドロキシル置換基を有していてもよく；
Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、Ｈ，アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルおよびＯＣ（Ｏ）−アルキルから選択され；
アルキルは、Ｃ１−６の直鎖アルキルおよびＣ４−８の分枝鎖アルキルから選択され、任意に少なくとも１つのヒドロキシル置換基を有していてもよい］
で表される化合物、およびその溶媒和物および薬学的に許容しうる塩に関する。
【０００５】
Ｃ１−６直鎖アルキルとの表現には、イソプロピルおよび２−ｎ−ブチル基も包含されることに言及すべきである。これは、前記表現は、問題とする直鎖の結合部位とは関係ないからである。
【０００６】
Ｃ１−６とは、１から６個の炭素原子（この間の任意の数も含む）を有することを表し、この用語は本明細書において同様に用いられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本明細書において用いられる略語は以下のとおりである：
ＡｃＢｕｃ １−アミノシクロブタン−１−カルボン酸
Ａｌａ（ｃＰｅ） シクロペンチルアラニン
Ｂｏｃ ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＢＯＰ ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ トリスジメチルアミノホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート
Ｂｕ ブチル
Ｃｈａ シクロヘキシルアラニン
Ｄｂｕ ２，４−ジアミノ酪酸
ＤＣＣ Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＨＡ ジシクロヘキシルアミン
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＡＤ ジイソプロピルジアゾジカルボキシレート
ＤＩＣ Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＥＡ Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル−Ｎ−エチルアミン
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
Ｆｍ ９−フルオレニルメチル
Ｆｍｏｃ ９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＨＯＢｔ １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
ｉ イソ
Ｍｍｔ ４−メトキシトリチル
Ｍｏｂ ｐ−メトキシベンジル
ＭＳ 質量分析
Ｏｒｎ オルニチン
Ｐｈ フェニル
Ｐｒ プロピル
ＰｙＢＯＰ ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ トリスピロリジンホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート
ｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ 塩化２−ニトロベンゼンスルホニル
ＯＴ オキシトシン
Ｒｔ 保持時間
ｔ ｔｅｒｔ
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＴＩＳ トリイソプロピルシラン
ＴＭＯＦ オルトギ酸トリメチル
ＴＰＰ トリフェニルホスフィン
Ｔｒｔ トリチル
ＶＴ バソトシン，［Ｉｌｅ３］バソプレシン
Ｚ ベンジルオキシカルボニル
【０００８】
特に記載しないかぎり、Ｌ−アミノ酸が用いられ、慣用的なアミノ酸用語にしたがう。
【０００９】
薬学的に許容しうる塩の例としては、酸付加塩，例えば、塩酸等のハロゲン化水素酸、および硫酸，リン酸および硝酸等の無機酸、ならびに、脂肪族，脂環式，芳香族または複素環スルホン酸またはカルボン酸，例えば、ギ酸，酢酸，プロピオン酸，コハク酸，グリコール酸，乳酸，リンゴ酸，酒石酸，クエン酸，アスコルビン酸，マレイン酸，ヒドロキシマレイン酸，ピルビン酸，ｐ−ヒドロキシ安息香酸，エンボン酸，メタンスルホン酸，エタンスルホン酸，ヒドロキシエタンスルホン酸，ハロベンゼンスルホン酸，トルエンスルホン酸およびナフタレンスルホン酸との反応により形成される塩が挙げられる。
【００１０】
好ましい態様においては、Ｒ７およびＲ８はＨである。Ｒ３およびＲ４がＨであることが特に好ましい。
【００１１】
ｎが１または２であることも好ましい。アルキルは、典型的には、メチル，エチル，ｎ−プロピル，ｉ−プロピル，ｔ−ブチルおよびｉ−アミルから選択される。
【００１２】
Ｘは、好ましくは、シクロペンチルおよびシクロヘキシルから選択される。
【００１３】
前記脂環式構造は、好ましくはシクロブチル構造である。
【００１４】
最も好ましい態様においては、式（Ｉ）を有する前記化合物は、
【化４】
からなる群より選択される。
【００１５】
かっこ内の数字は、下記で参照される化合物を表す。
【００１６】
さらに、本発明は、医薬品として使用するための上述の化合物に関する。
【００１７】
したがって，本発明はまた、活性成分として上述の化合物を、薬学的に許容しうるアジュバント，希釈剤または担体とともに含む医薬組成物に関する。
【００１８】
医薬組成物は、経口，静脈内，局所，腹腔内，鼻腔内，口腔内，舌下または皮下投与用に、または呼吸管を介する投与用に、例えばエアロゾルまたは空気浮遊微粉末の形に適合されている。したがって、組成物は、例えば、錠剤，カプセル，粉末，微小球，顆粒，シロップ，懸濁液，溶液，経皮パッチまたは座剤の形であることができる。
【００１９】
本発明にしたがう組成物は、任意に、上述の化合物の２またはそれ以上を含んでいてもよいことに注意すべきである。
【００２０】
本発明の医薬組成物は、任意に、崩壊剤，結合剤，潤滑剤，香味料，保存料，着色料およびこれらの任意の混合物から選択される少なくとも１つのさらなる添加物を含んでいてもよい。そのような添加物の例は、“Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ”；Ｅｄ．Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ，３ｒｄ Ｅｄ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，ＵＳＡ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ ＵＫ，２０００に見いだすことができる。
【００２１】
本発明の医薬組成物は、最も好ましくは非経口投与用に適合される。これは、本発明の化合物の滅菌水性調製物を含んでいてもよく、好ましくはレシピエントの血液と等張である。この水性調製物は、既知の方法にしたがって、適当な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を用いて製剤することができる。注射可能な水性製剤であるＲｅｍｅｓｔｙｐ（登録商標）（テルリプレシン）は、適当な医薬製剤の一例である。製剤はまた、希釈剤または溶媒中の滅菌注射可能溶液または懸濁液であってもよく、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液であってもよい。許容しうる希釈剤の例は、水，リンゲル溶液，および等張塩化ナトリウム溶液である。滅菌した，固定油もまた溶媒または懸濁媒体として用いることができる。無刺激性の固定油，例えば合成のモノまたはジグリセリド，およびオレイン酸等の脂肪酸を用いてもよい。
【００２２】
さらに、本発明は、循環血液量減少性または血管拡張性のショック，ＢＥＶ，ＨＲＳ，心肺蘇生法，麻酔誘導性低血圧症，起立性低血圧症，穿刺誘導性循環機能不全，術中失血または火傷創面切除および鼻血にともなう失血の治療用の、および流涙／涙形成を増加させることによる眼科疾患の治療用の、医薬品の製造における上述の化合物の使用に関する。
【００２３】
別の態様においては、本発明は、循環血液量減少性または血管拡張性のショック，ＢＥＶ，ＨＲＳ，心肺蘇生法，麻酔誘導性低血圧症，起立性低血圧症，穿刺誘発性循環機能不全，術中失血または火傷創面切除および鼻血にともなう失血，および流涙／涙形成を増加させることにより種々の眼科疾患を治療する方法に関し，ここで、前記方法は、動物，例えばヒトの患者に、治療上有効量の上述の化合物を投与することを含む。
【００２４】
本発明にしたがう化合物の典型的な投与量は、広範な範囲で変更可能であり、それぞれの患者の個別の必要性および投与の経路等の種々の因子によって異なるであろう。注入により投与される投与量は、一般に、１時間あたり０．０１−２００μｇ／ｋｇ体重の範囲内である。当該技術分野の医師は、個別の状況に応じて投与量を最適化することができる。
【実施例】
【００２５】
実験（合成）
アミノ酸誘導体および樹脂は、商業的供給元から購入した（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ，Ｂａｃｈｅｍ，Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ａｎｄ ＰｅｐＴｅｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）。他の化学物質および溶媒は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｆｉｓｈｅｒ ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃおよびＶＷＲから購入した。
【００２６】
本発明の化合物は、標準的な方法論により、ＦｍｏｃおよびＢｏｃ方法論の両方を用いて固相ペプチド化学で合成した。特に記載しないかぎり、すべての反応は室温で行った。一般的実験設定ならびに出発物質および試薬の入手のガイダンスは、上で引用した文献に加えて、以下の標準的な参考書に提供される：
Ｋａｔｅｓ，Ｓ．Ａ．，Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ，Ｆ．，Ｅｄｓ．，Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｂａｓｅｌ，２０００；
Ｓｔｅｗａｒｔ，Ｊ．Ｍ．，Ｙｏｕｎｇ，Ｊ．Ｄ．Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９８４；
Ｂｉｓｅｌｌｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９８，２７３，２２４９８−２２５０５；および
Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９６３，８５，２１４９−２１５４。
【００２７】
合成したペプチドの純度は、分析用逆相ＨＰＬＣにより判定することができる。ペプチドの構造一体性は、アミノ酸分析およびエレクトロスプレー質量分析を用いて確認することができる。
【００２８】
Ｆｍｏｃ方法論で合成したペプチドは、ＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ２Ｏ９６／２／２（ｖ／ｖ／ｖ）溶液で切断し，Ｂｏｃ方法論における切断は９０％ＨＦ／１０％アニソール（ｖ／ｖ）溶液を用いて行った。ジスルフィド架橋（環）形成は、１０％ＴＦＡ（水性）に溶解した直鎖状ペプチドをヨウ素で酸化することにより行った。ペプチドは調製用ＨＰＬＣにより、リン酸トリエチルアンモニウムバッファ（水性）中で精製した。化合物は最後に慣用のＨＰＬＣ方法論を用いて酢酸塩に変換した。９７％を超える純度を有する画分をプールし、凍結乾燥した。
【００２９】
８位にアルキル化側鎖を有するペプチド（例えば化合物４）の合成：
ペプチドはＦｍｏｃ方法論を用いて組み立てた。８位のジアミノ酸残基に酸不安定性の（すなわち、１−２％ＴＦＡを含む溶液を用いて除去可能な）保護基，例えば、メトキシトリチル（Ｍｍｔ；Ｂａｒｌｏｓ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．Ｐｅｐｔｉｄｅｓ １９９２，Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ，Ｃ．Ｈ．，Ｅｂｅｒｌｅ，Ａ．Ｎ．，Ｅｄｓ．，ＥＳＣＯＭ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ Ｂ．Ｖ．，１９９３，ｐｐ２８３−２８４を参照）を導入した。樹脂結合ペプチドをＤＣＭ／ＴＩＳ／ＴＦＡ９３／５／２（ｖ／ｖ／ｖ）溶液で処理してＭｍｔ基を除去した。アセトン／ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３を用いる還元的アルキル化によりＮ−イソプロピルペプチドを得た。
【００３０】
上述の方法の還元的アルキル化において、直鎖アルキルアルデヒドを用いるときに生ずる望ましくないＮ，Ｎ−ジアルキル化を回避するために、別の方法を開発した。すなわち、Ｍｍｔを除去した後、まずアミノ基を塩化２−ニトロベンゼンスルホニルで誘導化した（ｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ；Ｆｕｋｕｙａｍａ，Ｔ．；Ｊｏｗ，Ｃ．−Ｋ．；Ｃｈｅｕｎｇ，Ｍ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．１９９５，３６，６３７３−６３７４を参照）。次に、得られたスルホンアミドを、適当なアルコールを用いて、慣用のミツノブ反応条件下で，典型的には１，２−ジメトキシエタン中ＴＰＰ／ＤＩＡＤを用いてアルキル化した（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ，Ｏ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９８１，１−２８）。次にＤＭＦ中５％カリウムチオフェノレートによりｏ−ＮＢＳ−Ｃｌ基を除去した後、ペプチドを樹脂から切断した。
【００３１】
４位にＮ−アルキル化側鎖を有するペプチドの合成：
ペプチドはＢｏｃ方法論を用いて組み立てた。４位の残基をＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＦｍ）−ＯＨとして配列中に導入した。ペプチドの組み立てが完了した後、ＤＭＦ中３０％ピペリジンを用いて側鎖保護を除去した。得られた遊離カルボキシル基をＰｙＢＯＰまたはＢＯＰ／ＤＩＥＡにより適当なアミンとカップリングさせることにより、所望のアミドに変換した。次にＮ−末端Ｂｏｃ基を除去し、ＨＦ切断，環化およびＨＰＬＣによる精製を行った。
【００３２】
表１は、上述の方法により製造した化合物を、測定した（下記を参照）ＥＣ５０（有効濃度中央値）のナノモル／Ｌの値とともに示す。化合物４以外のすべての化合物において、Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７およびＲ８はＨであり、化合物４ではＲ６はＨではなくイソプロピルである。挙げられた化合物において、Ｒ１およびＲ２が脂環式構造（２位のアミノ酸のα炭素と一緒になって形成）の一部である場合、例えばここでは１，１−シクロブチルである場合を除き、ｍは１である。
【００３３】
【表１】
【００３４】
以下の詳細な例により、合成をさらに説明する。
化合物４；［Ｃｈａ２，Ａｓｎ４，Ｏｒｎ（ｉ−Ｐｒ）８］ＶＴ：
用いたアミノ酸誘導体は、Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｃｈａ−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ，Ｆｍｏｃ−Ｏｒｎ（Ｍｍｔ）−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨであった。分析用ＨＰＬＣはＷａｔｅｒｓ ６００液体クロマトグラフでＶｙｄａｃ Ｃ１８，５μ ４．６ｘ２５０ｍｍのカラムを用い、流速２ｍｌ／ｍｉｎで実施した。調製用ＨＰＬＣは、Ｗａｔｅｒｓ ２０００液体クロマトグラフでＰｒｅｐａｋ ４７ｘ３００ｍｍカートリッジを用い、流速１００ｍｌ／ｍｉｎで実施した。最終的な化合物の分析は、１１００ Ａｇｉｌｅｎｔ液体クロマトグラフで、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８，５μ ２．１ｘ２５０ｍｍのカラムを用い、流速０．３ｍｌ／ｍｉｎで行った。質量スペクトルはＦｉｎｎｉｇａｎ ＭＡＴ分光光度計で記録した。
【００３５】
完全に保護されたペプチド樹脂は、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ ９０５０ペプチド合成機で、０．４ｇ（０．１ｍｍｏｌ）のＴｅｎｔａｇｅｌ−Ｓ−ＲＡＭ樹脂（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）から出発して合成した。４倍過剰のアミノ酸誘導体を用いるＤＩＣ／ＨＯＢｔ媒介性１回カップリングを行った。Ｆｍｏｃ基はＤＭＦ中２０％ピペリジンで除去した。自動合成が完了した後、樹脂を手動合成容器に移し、ＤＣＭ／ＴＩＳ／ＴＦＡ９３／５／２（ｖ／ｖ／ｖ）溶液（３０ｍｌ）で２ｘ１．５時間処理して、Ｍｍｔ基を除去した。樹脂をＤＣＭでよく洗浄し、次に１５ｍｌの１，２−ジクロロエタン／ＴＭＯＦ１：１（ｖ／ｖ）に懸濁した。次に、０．２ｍｌのアセトンを加えた後、０．６ｇのＮａＢＨ（ＯＡｃ）３を加えた。懸濁液を一晩撹拌し、樹脂をメタノール，ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄し、真空下で乾燥した。次に樹脂を３０ｍｌのＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ２Ｏ９６／２／２（ｖ／ｖ／ｖ）溶液で１．５時間処理し、濾別した。濾液を蒸発させ、粗直鎖状ペプチドをジエチルエーテルで沈殿させた。沈殿物をただちに５００ｍｌの１０％ＴＦＡ（水性）に溶解し、機械的に撹拌した溶液にメタノール中０．１ＭＩ２を黄色が残るようになるまで加えることにより、ペプチドを酸化した。過剰のヨウ素をアスコルビン酸で還元した。次に反応混合物を砕氷で冷却し、濃アンモニア（水性）を加えてｐＨを約５に調節した。混合物をＨＰＬＣカラムに負荷し、トリエチルアンモニウムリン酸バッファ（ｐＨ５．２）を用いて精製した。化合物をアセトニトリルの勾配で溶出した。９７％を超える純度を有する画分をプールし、得られた溶液を２倍容量の水で希釈した。溶液をカラムに再び負荷し、２ｌの０．１Ｍ酢酸アンモニウム（水性）で洗浄し、２％酢酸（水性）で平衡化した。化合物をアセトニトリルの急勾配（３％／ｍｉｎ）で溶出した。所望の生成物を含む画分をプールし、凍結乾燥した。２０．７ｍｇ（収率２０％）の白色アモルファス粉体を得た。ＨＰＬＣ：Ｒｔ＝８．２ｍｉｎ，勾配：３０→５０％Ｂ／２０分間，流速：０．３ｍｌ／ｍｉｎ，ｔ＝４０℃，溶媒Ａ０．０１％ＴＦＡ（ａｑ），溶媒Ｂ７０％ＣＨ３ＣＮ，０．０１％ＴＦＡ（ａｑ）；純度：１００％；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値１０２６．５，実測値１０２６．５。
【００３６】
化合物３；［ＡｃＢｕｃ２，Ｄｂｕ８］ＶＴ：
用いたアミノ酸誘導体は、Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（Ｍｏｂ）−ＯＨ，Ｂｏｃ−ＡｃＢｕｃ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｇｌｎ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｓｎ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ｄｂｕ（Ｚ）−ＯＨＤＣＨＡ塩およびＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨであり、これらはすべてＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍおよびＢａｃｈｅｍから購入した。ＨＰＬＣおよびＭＳの操作は、化合物４の合成と同様にして行った。
【００３７】
完全に保護されたペプチド樹脂を、０．６ｇ（０．４ｍｍｏｌ）の４−メチル−ベンズヒドリルアミン樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）から出発して手動で合成した。２．５倍過剰のアミノ酸誘導体を用いる、ＤＣＣ，ＰｙＢＯＰまたはＤＩＣ／ＨＯＢｔにより媒介される１回カップリングを利用した。Ｂｏｃ基は１％ｍ−クレゾールを含むＤＣＭ中５０％ＴＦＡで除去した。得られた樹脂をメタノール，ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄し、真空下で乾燥した。３ｍｌのアニソールを含む３０ｍｌの無水ＨＦを用いて、０℃で９０分間でペプチドを樹脂から切断した。ＨＦを留去し、粗直鎖状ペプチドをジエチルエーテルで洗浄した。ペプチドをただちに２００ｍｌの２５％アセトニトリル／１０％ＴＦＡ（ａｑ）に溶解し、上述したようにして酸化した。得られた混合物を直接ＨＰＬＣカラムに負荷し、リン酸トリエチルアンモニウムバッファ（ｐＨ２．３）を用いて精製した。特に記載しない限り、この後の工程は化合物４についての方法と同じである。８０．６ｍｇ（収率２２％）の白色アモルファス粉体を得た。ＨＰＬＣ：Ｒｔ＝７．３ｍｉｎ，勾配：２０→４０％Ｂ／２０分間，流速：０．３ｍｌ／ｍｉｎ，ｔ＝４０℃，溶媒Ａ０．０１％ＴＦＡ（水性），溶媒Ｂ７０％ＣＨ３ＣＮ，０．０１％ＴＦＡ（水性）；純度：９９．６％；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ＋）：予測値９２８．４，実測値９２８．３。
【００３８】
他の化合物は、これらの合成方法と同様にして製造した。
【００３９】
実験（生物学的試験）
インビトロレセプターアッセイ：
化合物のｈＶ１ａレセプターに対するアゴニスト活性は、転写レポーターアッセイにおいて、レセプター発現ＤＮＡを、蛍ルシフェラーゼの発現を制御する細胞内カルシウム応答プロモーター要素を含有するレポーターＤＮＡとともにＨＥＫ−２９３細胞に過渡的にトランスフェクトすることにより、測定した。このアッセイのさらに詳細な説明については、Ｂｏｓｓ，Ｖ．，Ｔａｌｐａｄｅ，Ｄ．Ｊ．，Ｍｕｒｐｈｙ，Ｔ．Ｊ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９６，Ｍａｙ３；２７１（１８），１０４２９−１０４３２を参照。１回投与量あたり１０倍に希釈した化合物の希釈系列に細胞を５時間暴露し、次に細胞を溶解し、ルシフェラーゼ活性を測定して，非線形回帰により化合物の効力およびＥＣ５０値を求めた。各実験において、アルギニン−バソプレシン（ＡＶＰ）を内部対称として用い（ＥＣ５０＝０．２１ｎＭ），化合物は少なくとも３回の独立した実験で試験した。
【００４０】
インビトロアッセイの結果を、テルリプレシンの結果とともに上述の表１に示す。記載されるＥＣ５０値は、幾何学平均であり、ナノモル／Ｌ（ｎＭ）で表す。
【００４１】
示されるすべての参考文献は本明細書の一体部分と見なすべきである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
［式中、
Ｒ１は、Ｈおよび３−８個の炭素原子を含む脂環式構造の一部から選択され；
Ｒ２は、（ＣＨ２）ｍ−Ｘおよび前記脂環式構造の一部から選択され；
ｍは、０，１，２および３から選択され；
ｎは、０，１，２，３および４から選択され；
ｐは、２，３および４から選択され；
Ｒ１がＨであるとき，Ｒ２は（ＣＨ２）ｍ−Ｘであり；
Ｒ１がＨではないとき，Ｒ１およびＲ２は、これらが結合しているα炭素原子と一緒になって前記脂環式構造を形成し；
ｍが０，２または３であるとき，Ｘは、Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニルおよびＣ５−８−シクロアルキニルから選択され；
ｍが１であるとき，Ｘは、Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニル，Ｃ５−８−シクロアルキニル，イソプロピルおよびｔｅｒｔ−ブチルから選択され；
前記脂環式構造，Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニルおよびＣ５−８−シクロアルキニルは、任意に、少なくとも１つのアルキル，Ｏ−アルキルまたはヒドロキシル置換基を有していてもよく；
Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、Ｈ，アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルおよびＯＣ（Ｏ）−アルキルから選択され；
アルキルは、Ｃ１−６の直鎖アルキルおよびＣ４−８の分枝鎖アルキルから選択され、および任意に少なくとも１つのヒドロキシル置換基を有していてもよい］
を有する化合物およびその溶媒和物および薬学的に許容しうる塩。
【請求項２】
Ｒ７およびＲ８はＨである、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ３およびＲ４はＨである、請求項１−２のいずれかに記載の化合物。
【請求項４】
ｎは１または２である、請求項１−３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
アルキルは、メチル，エチル，ｎ−プロピル，ｉ−プロピル，ｔ−ブチルおよびｉ−アミルから選択される、請求項１−４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ｘはシクロペンチルまたはシクロヘキシルである、請求項１−５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
前記脂環式構造はシクロブチル構造である、請求項１−５のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
化合物は、
【化２】
からなる群より選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項９】
医薬品として用いるための、請求項１−８のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
請求項１−８のいずれかに記載の化合物を活性成分として、薬学的に許容しうるアジュバント，希釈剤または担体とともに含む医薬組成物。
【請求項１１】
循環血液量減少性または血管拡張性のショック，食道静脈瘤出血，肝腎症候群，心肺蘇生法，麻酔誘導性低血圧症，起立性低血圧症，穿刺誘導性循環機能不全，術中失血または火傷創面切除および鼻血にともなう失血を治療するための，および流涙／涙形成を増加させることにより種々の眼科疾患を治療するための医薬品の製造における、請求項１−８のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１２】
循環血液量減少性または血管拡張性のショック，食道静脈瘤出血，肝腎症候群，心肺蘇生法，麻酔誘導性低血圧症，起立性低血圧症，穿刺誘導性循環機能不全，術中失血または火傷創面切除および鼻血にともなう失血，および流涙／涙形成を増加させることにより種々の眼科疾患を治療する方法であって、ヒト等の動物の患者に、治療上有効量の請求項１−８のいずれかに記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
［式中、
Ｒ１は、Ｈおよび３−８個の炭素原子を含む脂環式構造の一部から選択され；
Ｒ２は、（ＣＨ２）ｍ−Ｘおよび前記脂環式構造の一部から選択され；
ｍは、０，１，２および３から選択され；
ｎは、０，１，２，３および４から選択され；
ｐは、２，３および４から選択され；
Ｒ１がＨであるとき，Ｒ２は（ＣＨ２）ｍ−Ｘであり；
Ｒ１がＨではないとき，Ｒ１およびＲ２は、これらが結合しているα炭素原子と一緒になって前記脂環式構造を形成し；
ｍが０，２または３であるとき，Ｘは、Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニルおよびＣ５−８−シクロアルキニルから選択され；
ｍが１であるとき，Ｘは、Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニル，Ｃ５−８−シクロアルキニル，イソプロピルおよびｔｅｒｔ−ブチルから選択され；
前記脂環式構造，Ｃ３−８−シクロアルキル，Ｃ５−８−シクロアルケニルおよびＣ５−８−シクロアルキニルは、任意に、少なくとも１つのアルキル，Ｏ−アルキルまたはヒドロキシル置換基を有していてもよく；
Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、Ｈ，アルキル，ＯＨ，Ｏ−アルキルおよびＯＣ（Ｏ）−アルキルから選択され；
アルキルは、Ｃ１−６の直鎖アルキルおよびＣ４−８の分枝鎖アルキルから選択され、および任意に少なくとも１つのヒドロキシル置換基を有していてもよい］
を有する化合物およびその溶媒和物および薬学的に許容しうる塩。
【請求項２】
Ｒ７およびＲ８はＨである、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ３およびＲ４はＨである、請求項１−２のいずれかに記載の化合物。
【請求項４】
ｎは１または２である、請求項１−３のいずれかに記載の化合物。
【請求項５】
アルキルは、メチル，エチル，ｎ−プロピル，ｉ−プロピル，ｔ−ブチルおよびｉ−アミルから選択される、請求項１−４のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
Ｘはシクロペンチルまたはシクロヘキシルである、請求項１−５のいずれかに記載の化合物。
【請求項７】
前記脂環式構造はシクロブチル構造である、請求項１−５のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
化合物は、
【化２】
からなる群より選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項９】
医薬品として用いるための、請求項１−８のいずれかに記載の化合物。
【請求項１０】
請求項１−８のいずれかに記載の化合物を活性成分として、薬学的に許容しうるアジュバント，希釈剤または担体とともに含む医薬組成物。
【請求項１１】
循環血液量減少性または血管拡張性のショック，食道静脈瘤出血，肝腎症候群，心肺蘇生法，麻酔誘導性低血圧症，起立性低血圧症，穿刺誘導性循環機能不全，術中失血または火傷創面切除および鼻血にともなう失血を治療するための，および流涙／涙形成を増加させることにより種々の眼科疾患を治療するための医薬品の製造における、請求項１−８のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１２】
循環血液量減少性または血管拡張性のショック，食道静脈瘤出血，肝腎症候群，心肺蘇生法，麻酔誘導性低血圧症，起立性低血圧症，穿刺誘導性循環機能不全，術中失血または火傷創面切除および鼻血にともなう失血，および流涙／涙形成を増加させることにより種々の眼科疾患を治療する方法であって、ヒト等の動物の患者に、治療上有効量の請求項１−８のいずれかに記載の化合物を投与することを含む方法。
【公表番号】特表２００９−５２６０６１（Ｐ２００９−５２６０６１Ａ）
【公表日】平成２１年７月１６日（２００９．７．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５５４３０７（Ｐ２００８−５５４３０７）
【出願日】平成１９年２月５日（２００７．２．５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／００３２１３
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０９５０２１
【国際公開日】平成１９年８月２３日（２００７．８．２３）
【出願人】（５００２９７５３５）フェリング ベスローテン フェンノートシャップ (36)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年７月１６日（２００９．７．１６）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年２月５日（２００７．２．５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／００３２１３
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０９５０２１
【国際公開日】平成１９年８月２３日（２００７．８．２３）
【出願人】（５００２９７５３５）フェリング ベスローテン フェンノートシャップ (36)
【Ｆターム（参考）】
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