消化管障害の治療のための１−［（４−［ベンゾイル（メチル）アミノ］−３−（フェニル）ブチル］アゼチジン誘導体１
本発明は、新規な式（Ｉ）（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＸは、明細書に記載の通りである）の化合物、並びにその塩及びエナンチオマーに関する。本発明はまた、前記化合物を含む医薬組成物、及び治療、例えば消化管障害の治療における前記化合物の使用にも関する。本発明はさらに、この化合物の調製方法に関する。この化合物は、ニューロキニン（ＮＫ）受容体アンタゴニストである。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［発明の分野］
本発明は、新規な式Ｉの化合物、上記化合物を含む医薬組成物、及び治療における上記化合物の使用に関する。本発明はさらに、式Ｉの化合物の調製方法に関する。
【０００２】
［発明の背景］
タキキニンとしても知られているニューロキニンは、末梢及び中枢神経系に見出されるペプチド神経伝達物質の部類を含む。３種の主要なタキキニンは、サブスタンスＰ（ＳＰ）、ニューロキニンＡ（ＮＫＡ）及びニューロキニンＢ（ＮＫＢ）である。少なくとも３種の受容体タイプが、これら３種の主要なタキキニンについて知られている。アゴニストＳＰ、ＮＫＡ及びＮＫＢを好むそれらの相対的選択性に基づいて、これら受容体は各々、ニューロキニン１（ＮＫ１）、ニューロキニン２（ＮＫ２）及びニューロキニン３（ＮＫ３）受容体として分類される。
【０００３】
例えば、呼吸器、心臓血管、神経、疼痛、腫瘍、炎症性及び／又は消化管障害の治療のための経口活性ＮＫ受容体アンタゴニストが必要である。このような治療の治療係数を高めるために、毒性がない又は最小であり、且つ上記ＮＫ受容体に選択的である化合物を得ることが望ましい。さらに、上記医薬が好ましい薬物動態及び代謝特性を有し、より低い肝臓酵素阻害特性などの改善された治療及び安全プロファイルを提供することが必要であると考えられる。
【０００４】
特定の化合物は、ヒトの心臓の再分極に望ましくない作用をもたらす場合があることは周知であり、これは心電図（ＥＣＧ）のＱＴ間隔の延長として観察される。極端な場合、薬物が誘発するＱＴ間隔のこの延長は、多形性心室頻拍（ＴｄＰ；Ｖａｎｄｅｎｂｅｒｇら、ｈＥＲＧ Ｋ＋ ｃｈａｎｎｅｌｓ：ｆｒｉｅｎｄ ａｎｄ ｆｏｅ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ ２００１；２２：２４０〜２４６）と称されるタイプの心不整脈に至り、最終的に心室細動及び突然死がもたらされる場合がある。この症候群の主要イベントは、これらの化合物による遅延整流性カリウム電流の速い成分（ＩＫｒ）の阻害である。この化合物は、この電流を伝えるチャネルタンパク質の孔形成αサブユニットに結合する。孔形成αサブユニットは、ヒト遅延整流性カリウムイオンチャネル遺伝子（ｈＥＲＧ）によってコードされる。ＩＫｒは心筋活動電位の再分極において重要な役割を果たしているので、それを阻害することによって再分極を遅延させ、これはＱＴ間隔の延長として現れる。ＱＴ間隔延長それ自体は安全上懸念されないが、心臓血管への有害な作用の危険性を有し、少数のヒトにおいてＴｄＰ及び心室細動への悪化をもたらす可能性がある。
【０００５】
特に、ＮＫ受容体アンタゴニストが、薬力学的及び薬物動態的特性の適切なバランスを有し、治療上有用であることが望ましい。ＮＫ受容体アンタゴニストは、十分で選択的な効力を有することに加えて、関連する薬物動態的性質に関してバランスがとれている必要がある。したがって、ＮＫアンタゴニストが、ａ）異なるＮＫ受容体における十分に高い親和性、ｂ）薬物が、主に末梢部において標的とするＮＫ受容体において作用することを可能にする薬物動態的性質（吸収、分布及び排出特性）（例えば、ＮＫ受容体アンタゴニストは、十分に高い代謝安定性を有する必要がある）、ｃ）許容できる安全プロファイルを得るための、ｈＥＲＧがコードするカリウムチャネルなどの異なるイオンチャネルに対する十分に低い親和性、及びｄ）薬物間相互作用を防止するための低レベルの（ＣＹＰ３Ａ４などの）肝臓酵素阻害特性を有することが必要である。
【０００６】
さらに、ＮＫ受容体アンタゴニストの有効性を高めるために、受容体において持続性のある競合的作用機序を有するＮＫアンタゴニストを有することが有益である。
【０００７】
欧州特許第０６２５５０９号明細書、欧州特許第０６３０８８７号明細書、国際公開第９５／０５３７７号パンフレット、国際公開第９５／１２５７７号パンフレット、国際公開第９５／１５９６１号パンフレット、国際公開第９６／２４５８２号パンフレット、国際公開第００／０２８５９号パンフレット、国際公開第００／２０００３号パンフレット、国際公開第００／２０３８９号パンフレット、国際公開第００／２５７６６号パンフレット、国際公開第００／３４２４３号パンフレット、国際公開第０２／５１８０７号パンフレット及び国際公開第０３／０３７８８９号パンフレットには、タキキニンアンタゴニストであるピペリジニルブチルアミド誘導体が開示されている。
【０００８】
「４−Ａｍｉｎｏ−２−（ａｒｙｌ）−ｂｕｔｙｌｂｅｎｚａｍｉｄｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌｌｙ Ｃｏｎｓｔｒａｉｎｅｄ Ａｎａｌｏｇｕｅｓ． Ｐｏｔｅｎｔ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ Ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎ−２（ＮＫ２）Ｒｅｃｅｐｔｏｒ」、Ｒｏｄｅｒｉｃｋ ＭａｃＫｅｎｚｉｅ，Ａ．ら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ（２００３）、１３、２２１１〜２２１５には、機能的ＮＫ２受容体アンタゴニスト特性を有することが見出された化合物Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−４−（３−モルホリン−４−イルアゼチジン−１−イル）ブチル］−Ｎ−メチルベンズアミドが開示されている。
【０００９】
国際公開第９６／０５１９３号パンフレット、国際公開第９７／２７１８５号パンフレット及び欧州特許第０９６２４５７号明細書には、タキキニンアンタゴニスト活性を有するアゼチジニルアルキルラクタム誘導体が開示されている。
【００１０】
欧州特許第０７９０２４８号明細書には、タキキニンアンタゴニストであると述べられているアゼチジニルアルキルアザピペリドン及びアゼチジニルアルキルオキサピペリドンが開示されている。
【００１１】
国際公開第９９／０１４５１号パンフレット及び国際公開第９７／２５３２２号パンフレットには、タキキニンアンタゴニストであると主張されているアゼチジニルアルキルピペリジン誘導体が開示されている。
【００１２】
欧州特許第０７９１５９２号明細書には、タキキニンアンタゴニスト特性を有するアゼチジニルアルキルグルタルイミドが開示されている。
【００１３】
国際公開第２００４／１１０３４４（Ａ２）号パンフレットには、ＮＫ１、２の二重アンタゴニスト及びその使用が開示されている。
【００１４】
本発明の１つの目的は、治療に有用である新規なニューロキニンアンタゴニストを提供することであった。他の目的は、バランスのとれた薬物動態的及び薬力学的特性を有する新規な化合物を提供することであった。
【００１５】
［発明の概要］
本発明は、一般式（Ｉ）の化合物、薬学的及び薬理学的に許容されるその塩、並びに、式Ｉの化合物のエナンチオマー及びその塩を提供する。
【化１】
（式中、
Ｒ１及びＲ２は、各々独立に、水素、メチル、エチルから選択され、又はＲ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になって４員、５員又は６員環を形成し、前記環は任意選択で酸素原子を含有し、
Ｘは、ブロモ又はクロロである）
【００１６】
一実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になってモルホリン環を形成する。
【００１７】
一実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になってアゼチジン環を形成する。
【００１８】
一実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になってピロリジン環を形成する。
【００１９】
一実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になってイソオキサゾリジン環を形成する。
【００２０】
一実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になってオキサゾリジン環を形成する。
【００２１】
本発明は、上記定義のような式Ｉの化合物、並びにその塩に関する。医薬組成物中に使用するための塩は、薬学的に許容される塩であろうが、他の塩は式Ｉの化合物の作製に有用な場合がある。
【００２２】
本発明の化合物は、様々な無機酸及び有機酸と共に塩を形成することができ、このような塩もまた本発明の範囲内である。このような酸付加塩の例には、酢酸塩、アジピン酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルタミン酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、２−ヒドロキシエチルスルホン酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パルモ酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、キナ酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、スルファミン酸塩、スルファニル酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩（ｐ−トルエンスルホン酸塩）、及びウンデカン酸塩が挙げられる。
【００２３】
薬学的に許容される塩は、従来の方法で対応する酸から調製することができる。薬学的に許容されない塩は、中間体として有用である場合があり、これも本発明の他の態様である。
【００２４】
酸付加塩は、高分子スルホン酸塩などの高分子塩の形態でもよい。
【００２５】
塩は、その中で塩が難溶性である溶媒若しくは媒体中で又は水などの溶媒中（真空中で除去する）で、生成物の遊離塩基の形態と、１当量以上の適切な酸とを反応させることによって、或いは凍結乾燥によって、或いは適切なイオン交換樹脂上で既存の塩の陰イオンを他の陰イオンと交換することによるなどの従来の手段によって形成することができる。
【００２６】
式Ｉの化合物は、１つのキラル中心を有し、本発明はすべての光学異性体及びエナンチオマーを包含することを理解すべきである。式（Ｉ）による化合物は、単一の立体異性体、即ち単一のエナンチオマー（Ｒ−エナンチオマー又はＳ−エナンチオマー）の形態の場合がある。式（Ｉ）による化合物はまた、ラセミ混合物、即ちエナンチオマーの等モル混合物の形態の場合がある。
【００２７】
化合物は、配座異性体の混合物として存在することができる。本発明の化合物は、配座異性体の混合物及び個々の配座異性体の両方を含む。
【００２８】
［製剤］
本発明の一態様では、呼吸器、心臓血管、神経、疼痛、腫瘍、炎症性及び／又は消化管障害の予防及び／又は治療において使用するための、単一のエナンチオマー、ラセミ体としての式Ｉの化合物、又は遊離塩基としてのこれらの混合物、又は薬学的に許容されるその塩を含む製剤を提供する。
【００２９】
本発明の医薬組成物は、治療することが望ましい疾患状態について標準的方法、例えば、経口、局所、非経口、口腔、経鼻、膣又は直腸投与によって、或いは吸入又は吹送によって投与することができる。これらの目的のために、本発明の化合物は、当技術分野において公知の手段によって、例えば、錠剤、ペレット剤、カプセル剤、水溶液剤又は油性溶液剤、懸濁剤、乳剤、クリーム剤、軟膏、ゲル剤、スプレー式点鼻薬、坐薬、吸入のための微粉化した散剤又はエアロゾル又はネブライザー、及び（静脈内、筋内又は注入を含めた）非経口使用のための無菌の水溶液剤若しくは油性溶液剤又は懸濁剤、或いは無菌の乳剤の形態に製剤することができる。
【００３０】
本発明の化合物に加えて、本発明の医薬組成物はまた、本明細書において示される１種又は複数の疾患状態の治療において価値のある１種若しくは複数の薬物を含有すること、又は（同時若しくは順次に）一緒に投与することができる。
【００３１】
本発明の医薬組成物は通常、０．０１〜２５ｍｇ／ｋｇ体重の式Ｉの化合物の１日用量でヒトに投与される。或いは、０．１〜５ｍｇ／ｋｇ体重の式Ｉの化合物の１日用量で投与される。この１日用量は、必要に応じて分割用量で与えてもよく、投与する化合物の正確な量及び投与経路は、治療を受ける患者の体重、年齢及び性別、並びに当技術分野において公知の方式によって治療を受ける特定の疾患状態に依存する。
【００３２】
典型的には、単位剤形は、約１ｍｇ〜５００ｍｇの本発明の化合物を含むであろう。例えば、経口投与用の錠剤又はカプセル剤は好都合には、２５０ｍｇまで（典型的には、５〜１００ｍｇ）の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を含有することができる。他の例では、吸入による投与のために、式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩は、単回用量又は２〜４回の１日用量に分割して、５〜１００ｍｇの範囲の１日投与量で投与することができる。さらなる例では、静脈内又は筋内の注射又は注入による投与のために、１０％ｗ／ｗまで（典型的には５％ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を含有する滅菌溶液又は懸濁剤を使用することができる。
【００３３】
［医療用途及び製薬学的用途］
本発明は、ＮＫ受容体で作用するタキキニン拮抗作用が有益である疾患状態を治療又は予防する方法を提供し、これは、有効量の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を対象に投与するステップを含む。本発明はまた、ＮＫ受容体で作用するタキキニン拮抗作用が有益である疾患状態において使用するための医薬の調製における式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩の使用も提供する。
【００３４】
式（Ｉ）の化合物或いは薬学的に許容されるその塩又は溶媒和物は、呼吸器、心臓血管、神経、疼痛、腫瘍及び／又は消化管障害の予防又は治療において使用するための医薬の製造に使用することができる。
【００３５】
このような障害の例は、喘息、アレルギー性鼻炎、肺疾患、咳、風邪、炎症、慢性閉塞性肺疾患、気道反応性、じんま疹、高血圧、慢性関節リウマチ、浮腫、血管新生、疼痛、片頭痛、緊張性頭痛、精神病、うつ病、不安、アルツハイマー病、統合失調症、ハンチントン舞踏病、膀胱運動亢進、尿失禁、摂食障害、躁うつ病、物質依存症、運動障害、認識力障害、肥満症、ストレス障害、排尿障害、躁病、軽躁病及び攻撃性、双極性障害、癌、癌腫、線維筋痛、非心臓性胸痛、胃腸運動亢進、胃喘息、クローン病、胃内容排出障害、潰瘍性大腸炎、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、嘔吐、胃喘息、胃運動性障害、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）又は機能性消化不良である。
【００３６】
［調製方法］
他の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその塩を調製するための方法を提供し、この方法は、
ａ）式（ＩＩ）の化合物を式（ＩＩＩ）の化合物と反応させるステップ
【化２】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＸは、本明細書の上記に定義されている通りであり、反応条件は、式（ＩＩ）の化合物の還元的アルキル化によって、式（ＩＩ）の化合物のアゼチジン基の窒素原子と、式（ＩＩＩ）の化合物のアルデヒド基の炭素原子との間のＮ−Ｃ結合が形成されるような条件である。）、
ｂ）式（ＩＩ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物と反応させるステップ
【化３】
（式中、Ｘは、本明細書の上記に定義されている通りであり、Ｌは、式（ＩＩ）の化合物のアルキル化によって、式（ＩＩ）の化合物のアゼチジン基の窒素原子と、式（ＩＶ）の化合物のＬ基に隣接した炭素原子との間のＮ−Ｃ結合が形成されるような基である。）、
ｃ）式（Ｖ）の化合物を式（ＶＩ）の化合物と反応させるステップ
【化４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＸは、本明細書の上記に定義されている通りであり、Ｌ’は脱離基である。）、
又は、薬学的に許容される塩を任意選択で形成するステップとを含む。
【００３７】
式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物は、還元的アルキル化条件下で反応する。反応は典型的には、極端ではない温度、例えば０〜１０℃で、実質的に不活性な溶媒、例えばジクロロメタン中で行われる。典型的な還元剤には、シアノホウ水素化ナトリウムなどのホウ化水素が挙げられる。
【００３８】
式（ＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は、アルキル化条件下で反応する。典型的には式（ＩＶ）の化合物において、Ｌはハロゲン又はアルキルスルホニルオキシなどの脱離基である。反応は典型的には、温度を上げた状態、例えば３０〜１３０℃で、実質的に不活性な溶媒、例えばＤＭＦ中で行われる。
【００３９】
式（ＩＩ）の化合物は、従来の方法で、例えば、式（ＶＩＩ）の化合物を、式（ＶＩＩＩ）の化合物と反応させることによって、次いで例えば接触水素化反応により保護基（−ＣＨ（Ｐｈ）２）を除去することによって調製することができる。
【化５】
【化６】
（式中、Ｒ１及びＲ２は、本明細書の上記に定義されている通りであり、Ｌ”は、式（ＶＩＩ）の化合物のアルキル化によって、式（ＶＩＩ）の化合物のピペリジン基の窒素原子と、式（ＶＩＩ）の化合物のＬ”基に隣接した炭素原子との間のＮ−Ｃ結合が形成されるような基である。）
【００４０】
式（ＩＩＩ）の化合物は、例えば、従来のアシル化条件下で、式（ＩＸ）の化合物を式（ＶＩ）の化合物と反応させることによって調製することができる。
【化７】
（式中、Ｒ１は、本明細書の上記に定義されている通りである。）
【００４１】
式（ＩＶ）の化合物は、例えば、従来のアシル化条件下で、式（ＶＩ）の化合物を式（Ｘ）の化合物と反応させることによって調製することができる。
【化８】
（式中、Ｌは、本明細書の上記に定義されている通りである。）
【００４２】
式（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物は、従来のアシル化条件下で反応させることができ、ここで、
【化９】
は、酸又は活性化酸誘導体である。このような活性化酸誘導体は、文献において周知である。それらは、酸からｉｎ ｓｉｔｕで形成することができ、又はそれらを調製し、単離し、その後反応させることができる。典型的には、Ｌ’はクロロであり、したがって酸塩化物を形成する。典型的には、アシル化反応は、ジクロロメタンなどの実質的に不活性な溶媒中で、非求核塩基、例えばＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下で極端ではない温度で行われる。
【００４３】
式（ＶＩＩ）及び（ＶＩＩＩ）の化合物は公知であり、又は従来の方法で調製することができる。
【実施例】
【００４４】
本発明の化合物は、ほとんどの場合、配座異性体の存在によって非常に複雑なＮＭＲスペクトルを示すことを強調すべきである。これは、アミド及び／又はアリール結合を中心とした遅い回転の結果であると考えられている。化合物のＮＭＲデータの説明において下記の略語を使用する。ｓ−単重線；ｄ−２重線；ｔ−３重線；ｑｔ−４重線；ｑｎ−５重線；ｍ−多重線；ｂ−広範；ｃｍ−幅の広いピークを含む場合もある複雑な多重線。
【００４５】
下記の実施例は、本発明を説明するが、限定するものではない。
【００４６】
下記の略語を実験において使用する。ＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）、ＴＢＴＵ（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムテトラフルオロボラート）、ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）及びＲＴ（室温）。
【００４７】
実施例１
Ｎ−［（２Ｓ）−４−｛３−［４｛アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−イル］アゼチジン−１−イル｝２−（４−フルオロフェニル）ブチル］−３−ブロモ−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
【化１０】
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（方法１を参照されたい；０．１６ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及び１−アゼチジン−３−イル−４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン（方法２を参照されたい；０．１０ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を、少量の乾燥メタノール（０．２ｍＬ）と共に塩化メチレン（１０ｍＬ）に溶解した。このようにして得た溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．１４ｇ、１．０８ｍｍｏｌ）及びトリアセトキシホウ水素化ナトリウム（０．１５ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、窒素下でＲＴにて４時間攪拌した。混合物を塩化メチレンで希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ３で２度、次いでブラインで洗浄した。有機相を相分離器で濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。生成物を、シリカゲル（メタノール−塩化メチレン、１０：１）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．１４ｇ（５９％）の表題化合物を白色の泡として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．４〜１．８（ｃｍ，６Ｈ）、２．１（ｍ，１Ｈ）２．２（ｑｎ，２Ｈ）、２．３〜２．４（ｃｍ，２Ｈ）、２．５〜３．５（ｃｍ，１４Ｈ）、３．６（ｄ，１Ｈ）、３．９（ｔ，２Ｈ）、４．１（ｔ，２Ｈ）、６．８〜７．４（ｃｍ，６Ｈ）、７．７（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ６５４（Ｍ＋１）＋。
【００４８】
実施例２
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミドジホルマート
【化１１】
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（方法１を参照されたい；０．１７８ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、１−アゼチジン−３−イル−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド（方法３を参照されたい；０．０８４ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、酢酸（０．３ｍＬ）、（ポリスチリルメチル）トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（０．０９８ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びメタノールの混合物を、ＲＴで６時間攪拌した。樹脂を濾過し、メタノールで洗浄した。濾液の溶媒を蒸発によって除去し、生成物を、アセトニトリル及びギ酸アンモニウム／ギ酸水溶液（０．１ＭのＮＨ４ＣＯ２Ｈ、０．１ＭのＨＣＯ２Ｈ、ｐＨ４）を溶離液として使用して逆相クロマトグラフィー（Ｃ８）によって精製した。０．２３ｇ（７７％）の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．６〜２．０（ｃｍ，６Ｈ）、２．６〜４．２（ｃｍ，２４Ｈ）、７．０〜８．０（ｃｍ，６Ｈ）、８．４（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ６４２（Ｍ＋１）＋。
【００４９】
実施例３
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミド
【化１２】
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（方法１を参照されたい；１．００ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）及び１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−カルボキサミド（方法４を参照されたい；０．４９ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１．２４ｍＬ、９．０ｍｍｏｌ）を、メタノール（５ｍＬ）と共に塩化メチレン（３０ｍＬ）に溶解した。このようにして得た溶液に、シアノホウ水素化ナトリウム（０．２１ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＲＴで２０分間攪拌した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣を、塩化メチレン及び飽和水性ＮａＨＣＯ３に分配した。有機相を相分離器で濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。生成物を、シリカゲル（アンモニア飽和メタノール／塩化メチレン、１〜２０％メタノール）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．２４ｇ（１７％）の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．４〜３．８（ｃｍ，２３Ｈ）、５．７（ｂ，１Ｈ）、５．８（ｂ，１Ｈ）、６．８〜７．４（ｃｍ，６Ｈ）、７．７（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ６１４（Ｍ＋１）＋。
【００５０】
実施例３ａ
存在する固形に関するさらなる情報を得るため、懸濁結晶化を異なる溶媒中で室温にて行った。約２週間後に、固形をＸＲＰＤで検査した。メタノール、エタノール、ｉ−プロパノール、アセトン及びクロロホルム中で懸濁させた試料は、ＸＲＰＤにおいて非常に類似したパターンを示し、それは最初の試料のパターンと異なる。結晶化度は、新しい形態については著しく良好である。エチルメチルケトンに懸濁させた材料は、完全に特有のパターンを示す。ｉ−プロパノールに懸濁させた試料で行った高温ステージＸＲＰＤは、Ｘ線粉末パターンが１２０℃超で変化することを示す。この新しいパターンもまた、最初の試料のパターンと異なる。
【００５１】
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドのマレイン酸塩
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミド（２．０ｇ、３．２６ｍｍｏｌ）を、熱いアセトン（２０ｍＬ）に溶解した。マレイン酸（０．７４ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を、熱いメタノール（４ｍＬ）に溶解し、次いでこの溶液を最初の溶液に加えた。合わせた溶液を室温で一晩放置したが、有用な沈殿物は単離できなかった。混合物を、メタノールで希釈し、溶媒を蒸発によって除去した。残渣をトルエン（１７ｍＬ）と２−プロパノール（５０ｍＬ）との混合物に加えた。メタノール（２０ｍＬ）を加え、混合物を澄明な溶液が得られるまで加熱した。溶液を室温に冷却し、次いで冷凍庫内で一晩保存した。白色の沈殿物が濾過によって単離され、次いで減圧下で４８時間乾燥した。２．４ｇの表題化合物を白色粉末として得た。生成物の１Ｈ ＮＭＲ分析によって、試料が、１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミド１モル当たり約１．５〜２ｍｏｌのマレイン酸からなることを示す。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ １．２（ｄ，１．６Ｈ）、１．８〜２．２（ｃｍ，５．８Ｈ）、２．６〜２．７（ｍ，１Ｈ）、２．７（ｓ，１Ｈ）、２．８〜３．２（ｃｍ，５．１Ｈ）、３．２〜３．３（ｍ，１Ｈ）、３．３〜３．５（ｃｍ，２．３Ｈ）、３．５〜３．８（ｍ，１．４Ｈ）、３．９〜４．１（ｍ，０．６Ｈ）、４．２〜４．７（ｃｍ，４．６Ｈ）、６．３（ｓ，２．９Ｈ）、６．９〜７．３（ｍ，４．２Ｈ）、７．４（ｍ，１Ｈ）、８．０（ｓ，０．６Ｈ）。
【００５２】
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドのマレイン酸塩を、実質的に下記のｄ値を有する主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することにおいて特徴付ける（ｄ値：結晶格子における連続した平行のｈｋｌ面の間の間隔）。
【００５３】
【表１】
【００５４】
Ｂｒａｇｇ式及び強度から計算したｄ値によって同定されるピークは、１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル）ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートのディフラクトグラムから得た。相対強度は信頼性がより少なく、数値の代わりに下記の定義を使用する。
【００５５】
【表２】
【００５６】
最初の形態はまた、水、ｎ−ヘプタン、アセトニトリル、イソオクタン、ＴＨＦ及びメチルイソブチルケトン中で室温にて懸濁させた後に得られた。
【００５７】
スラリー化後の１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドのマレイン酸塩の形態
メタノール、エタノール、ｉ−プロパノール、アセトン及びクロロホルム中で懸濁させた試料は、ＸＲＰＤにおいて最初の試料とは異なる非常に類似したパターンを示す。この形態を、実質的に下記のｄ値を有する主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することにおいて特徴付ける（ｄ値：結晶格子における連続した平行のｈｋｌ面の間の間隔）。
【００５８】
【表３】
【００５９】
Ｂｒａｇｇ式及び強度から計算したｄ値によって同定されるピークは、１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチルメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートの得られた形態のディフラクトグラムから得た。相対強度は信頼性がより少なく、数値の代わりに下記の定義を使用する。
【００６０】
【表４】
【００６１】
高温ステージＸＲＰＤ後の１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル）ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートの形態
ｉ−プロパノール中で懸濁させた試料で行ったＸＲＰＤは、Ｘ線粉末パターンが１２０℃超で変化することを示す。新しいパターンもまた、最初の試料のパターンとは異なる。
【００６２】
この形態を、実質的に下記のｄ値を有する主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することにおいて特徴付ける（ｄ値：結晶格子における連続した平行のｈｋｌ面の間の間隔）。
【００６３】
【表５】
【００６４】
Ｂｒａｇｇ式及び強度から計算したｄ値によって同定されるピークは、高温ステージＸＲＰＤ後の１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートの得られた形態のディフラクトグラムから得た。相対強度は信頼性がより少なく、数値の代わりに下記の定義を使用する。
【００６５】
【表６】
【００６６】
メチルエチルケトン中での懸濁後の１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートの形態
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドのさらなる形態を、メチルエチルケトン中での懸濁後に得た。この形態を、実質的に下記のｄ値を有する主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することにおいて特徴付ける（ｄ値：結晶格子における連続した平行のｈｋｌ面の間の間隔）。
【００６７】
【表７】
【００６８】
Ｂｒａｇｇ式及び強度から計算したｄ値によって同定されるピークは、メチルエチルケトン中での懸濁後の１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートの得られた形態のディフラクトグラムから得た。相対強度は信頼性がより少なく、数値の代わりに下記の定義を使用する。
【００６９】
【表８】
【００７０】
Ｘ線粉末回折法（ＸＲＰＤ）
ＶÅＮＴＥＣ−１位置敏感検出器（ＰＳＤ）を備えたＢｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ型の形態のＤ８Ａｄｖａｎｃｅ回折計（Ｂｒｕｘｅｒ ＡＸＳ ＧｍｂＨ、Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ、Ｇｅｒｍａｎｙ）でＸＲＰＤ実験を行った。ニッケルフィルターを通したＣｕ Ｋα線を使用した。試料約１０ｍｇを、ゼロバックグラウンドホルダー（シリコン結晶）上に置いた。１〜５０°２θの範囲で、０．０１７°のステップサイズ及び０．５秒のステップ時間の連続走査モードを使用してデータを収集した。３．４７°幅の検出窓に対応する可変（Ｖ２０）発散スリット及び１２ｍｍの検出スリットを適用した。
【００７１】
高温ステージＸＲＰＤを、Ａｎｓｙｃｏ温度調節器に接続した付随するＭＲＩチャンバー（Ｂｒｕｘｅｒ ＡＸＳ ＧｍｂＨ、Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を伴う同様の設定を使用して上記の機器で行った。
【００７２】
実施例４
３−ブロモ−Ｎ−（（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−｛３−［４（モルホリン−４−イルカルボニル）ピペリジン−１−イル］アゼチジン−１−イル｝ブチル）−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
【化１３】
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（方法１を参照されたい；０．１４ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）及び４−［（１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−イル）カルボニル］モルホリン（方法５を参照されたい；０．１１ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を、乾燥メタノール（０．２ｍＬ）と共に塩化メチレン（１０ｍＬ）に溶解した。このようにして得た溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．１２ｇ、０．９４ｍｍｏｌ）及びトリアセトキシホウ水素化ナトリウム（０．１３ｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素下で４時間ＲＴにて攪拌した。混合物を塩化メチレンで希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ３で２度、次いでブラインで洗浄した。有機相を相分離器で濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。生成物を、シリカゲル（メタノール−塩化メチレン、１０：１）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．１１ｇ（５３％）の表題化合物を白色の泡として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．４〜３．８（ｃｍ，３２Ｈ）、６．８〜７．４（ｃｍ，６Ｈ）、７．７（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ６８４（Ｍ＋１）＋。
【００７３】
［出発物質の調製］
上記の実施例のための出発物質は、市販であるか、又は標準的方法によって公知の材料から容易に調製される。例えば、下記の反応は、出発物質のいくつかの例示であるが、限定するものではない。
【００７４】
方法１
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
【化１４】
【００７５】
（ａ）３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）ペント−４−エン−１−イル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）ペント−４−エン−１−イル］メチルアミン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ；２００１；２６５〜２７０を参照されたい；０．５４ｇ、２．８ｍｍｏｌ）及び３−ブロモ−５−トリフルオロメチル安息香酸（０．８１ｇ、３．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７ｍＬ）溶液に、ＴＢＴＵ（０．９６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１．４１ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、窒素下で一晩ＲＴにて攪拌し、次いで酢酸エチル及びＮａＨＣＯ３水溶液に分配した。水相を酢酸エチルで２度抽出した。合わせた有機溶液を水で２度洗浄し、次いで相分離カラムで乾燥した。溶媒を蒸発によって除去し、生成物を、シリカゲル（酢酸エチル−ヘプタン、１０％〜１７％）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．８６ｇ（６８％）の３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）ペント−４−エン−１−イル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミドを得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：２．１〜３．８（ｃｍ，８Ｈ）、４．９〜５．１（ｍ，２Ｈ）、５．５〜５．８（ｍ，１Ｈ）、６．８〜７．４（ｃｍ，６Ｈ）、７．８（ｓ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ４４５（Ｍ＋１）＋。
【００７６】
（ｂ）３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）ペント−４−エン−１−イル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（０．８６ｇ、１．９ｍｍｏｌ）のアセトン（４５ｍＬ）溶液に、ＯｓＯ４（ｔ−ブチルアルコール中２．５％、０．４９ｍｌ、０．０３９ｍｍｏｌ）及び４−メチルモルヒネ−４−オキシド（０．４１ｇ、３．５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を窒素下でＲＴにて一晩攪拌し、次いでＮａＨＳＯ３の水溶液（３９％、４５ｍＬ）を加えた。混合物を２時間攪拌し、水で希釈し、次いで塩化メチレンで２度抽出した。合わせた有機溶液を相分離カラムによって分離し、溶媒を蒸発によって除去した。残渣（１．０８ｇ）をＴＨＦ（１８ｍＬ）及び水（４．５ｍＬ）に溶解し、このようにして得た溶液に、ＮａＩＯ４（０．７３ｇ、３．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素下で一晩ＲＴにて攪拌した。混合物を塩化メチレン及び水に分配した。水相を塩化メチレンで抽出し、次いで合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、相分離カラムで分離した。溶媒を蒸発によって除去した。０．７８ｇ（９０％）の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：２．４〜４．４（ｃｍ，８Ｈ）、６．２〜８．２（ｃｍ，７Ｈ）、９．８（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ４４７（Ｍ＋１）＋。
【００７７】
方法２
１−アゼチジン−３−イル−４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン
【化１５】
【００７８】
（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−カルボキシレート
１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−カルボン酸（０．４０ｇ、１．７５ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、溶液にＤＩＰＥＡ（１．２２ｍＬ、７．０ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ（０．６７ｇ、２．１ｍｍｏｌ）及びアゼチジン（０．１２ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴにて１２時間攪拌した。混合物を塩化メチレンで希釈し、次いでＨＣｌの水溶液（２Ｍ）で、次いでＮａＨＣＯ３（飽和）の水溶液で洗浄した。相を相分離カラムによって分離し、溶媒を蒸発によって除去した。０．５０ｇ（１００％）のｔｅｒｔ−ブチル４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−カルボキシレートを粗製固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．４〜１．５（ｓ，９Ｈ）、１．６〜１．９（ｍ，５Ｈ）、２．２〜２．４（ｍ，３Ｈ）、２．６〜２．８（ｍ，２Ｈ）、３．９〜４．２（ｍ，５Ｈ）。
【００７９】
（ｂ）４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン
ｔｅｒｔ−ブチル４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（０．５０ｇ、１．８６ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（１０ｍＬ）に溶解し、溶液にトリフルオロ酢酸（２．１２ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＲＴにて一晩攪拌し、次いで溶媒を蒸発によって除去した。残渣を少量のメタノール及びＴＨＦに溶解し、次いで溶液を、陽イオン交換収着剤（Ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ−２；１０ｇ）に入れた。カラムをＴＨＦで洗浄し、次いで生成物をアンモニア飽和メタノールで溶出した。溶媒を蒸発によって除去した。０．３２ｇ（１００％）の４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．４〜４．５（ｍ，４Ｈ）、２．０〜２．２（ｍ，３Ｈ）、２．４〜２．５（ｍ，２Ｈ）、２．９〜３．０（ｄ，２Ｈ）、３．７〜３．８（ｔ，２Ｈ）、３．９（ｓ，１Ｈ）、４．０（ｔ，２Ｈ）。
【００８０】
（ｃ）４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン
４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン（０．３４ｇ、２．０ｍｍｏｌ）及び１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−オン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ；１３；２００３；２１９１〜２１９４を参照されたい、０．３７ｇ、１．６ｍｍｏｌ）、メタノール（５ｍＬ）及び酢酸（０．１ｍＬ）の混合物に、（ポリスチリルメチル）トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（４．１ｍｍｏｌ／ｇ、０．６１ｇ）を加えた。反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で１０分間加熱し、次いで相分離器で濾過した。溶媒を蒸発によって除去し、生成物を、シリカゲル（メタノール−塩化メチレン、５：９５）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．４２ｇ（７０％）の４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジンを無色の泡として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．６〜１．７（ｍ，２Ｈ）、１．７〜１．８（ｍ，４Ｈ）、２．０〜２．１（ｍ，１Ｈ）、２．２（ｑｎ，２Ｈ）、２．７〜２．８（ｍ，２Ｈ）、２．８〜３．０（ｍ，３Ｈ）、３．４（ｔ，２Ｈ）、４．０（ｔ，２Ｈ）、４．１（ｔ，２Ｈ）、４．４（ｓ，１Ｈ）、７．１〜７．２（ｔ，２Ｈ）、７．２〜７．３（ｔ，４Ｈ）、７．４（ｄ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ３９０（Ｍ＋１）＋。
【００８１】
（ｄ）１−アゼチジン−３−イル−４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン
４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン（０．４２ｇ、１．１ｍｍｏｌ）をエタノールに溶解し、このようにして得た溶液に、水酸化パラジウムオンカーボン（０．１５ｇ）及びギ酸アンモニウム（０．２８ｇ、４．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で４分間加熱した。触媒を相分離器で濾過し、濾過ケーキをエタノールで洗浄した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣をメタノール（１ｍＬ）及びＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した。溶液を、陽イオン交換収着剤（Ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ−２；１０ｇ）に入れた。カラムをＴＨＦで洗浄し、次いで生成物をアンモニア飽和メタノールで溶出した。溶媒を蒸発によって除去し、０．２５ｇの表題化合物を無色の油として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：２．０〜２．２（ｍ，４Ｈ）、２．３〜２．４（ｍ，２Ｈ）、２．６〜２．８（ｍ，３Ｈ）、３．２〜３．３（ｄ，２Ｈ）、３．８（ｑｎ，１Ｈ）、４．３（ｔ，２Ｈ）、４．４（ｍ，２Ｈ）、４．５（ｍ，２Ｈ）、４．６（ｔ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ２２４（Ｍ＋１）＋。
【００８２】
方法３
１−アゼチジン−３−イル−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド
【化１６】
【００８３】
（ａ）１−１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボン酸
ピペリジン−４−カルボン酸（０．１３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及び１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−オン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．；１３；２００３；２１９１〜２１９４を参照されたい、０．２４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、メタノール（３ｍＬ）及び酢酸（０．３ｍＬ）の混合物に、（ポリスチリルメチル）トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（４．１ｍｍｏｌ／ｇ、０．２５ｇ）を加えた。反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で５分間加熱した。メタノールを加え、次いで樹脂を濾過した。溶媒を蒸発によって除去した。０．３５ｇ（１００％）の１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボン酸を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．６〜１．８（ｍ，２Ｈ）、１．９〜２．０（ｍ，４Ｈ）、２．３〜２．４（ｍ，１Ｈ）、２．７〜２．８（ｍ，２Ｈ）、２．９〜３．０（ｍ，３Ｈ）、３．４（ｔ，２Ｈ）、４．４（ｓ，１Ｈ）、７．２（ｔ，２Ｈ）、７．２〜７．３（ｔ，４Ｈ）、７．４（ｄ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ３５１（Ｍ＋１）＋。
【００８４】
（ｂ）１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド
１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボン酸（０．３５ｇ、０．９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（８ｍＬ）に溶解し、溶液に、ＴＢＴＵ（０．３９ｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．２１ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）及びジメチルアミンの溶液（３．０ｍＬ、ＴＨＦ中２Ｍ、６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＲＴにて１４時間攪拌した。ＮａＨＣＯ３の水溶液を加え、混合物を塩化メチレンで３度抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥した。溶媒を蒸発によって除去し、生成物を、アセトニトリル及び酢酸アンモニウム水溶液（０．１Ｍ）を溶離液として使用することによって逆相クロマトグラフィー（Ｃ８）によって精製した。０．２０ｇ（５９％）の１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミドを得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．６〜２．０（ｃｍ，６Ｈ）、２．４〜２．５（ｍ，１Ｈ）、２．８（ｍ，２Ｈ）、２．９〜３．０（ｍ，５Ｈ）、３．１（ｓ，３Ｈ）、３．４（ｔ，２Ｈ）、４．４（ｓ，１Ｈ）、７．２（ｔ，２Ｈ）、７．３（ｔ，４Ｈ）、７．４（ｄ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ３７８（Ｍ＋１）＋。
【００８５】
（ｃ）１−アゼチジン−３−イル−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド
水酸化パラジウムオンカーボン（０．１０ｇ）を、マイクロ波合成用の５ｍＬバイアル中に入れた。１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド（０．２０ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）に溶解し、酢酸（０．３ｍＬ）を加えた。混合物を水素下（１．６バール）、ＲＴにて４日間攪拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）プラグで濾過した。溶媒を蒸発によって除去し、０．１１ｇ（５３％）の表題化合物を得た。
【００８６】
方法４
１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−カルボキサミド
【化１７】
【００８７】
（ａ）１［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボキサミド
ピペリジン−４−カルボキサミド（１．０５ｇ、８．２ｍｍｏｌ）、１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−オン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．；１３；２００３；２１９１〜２１９４を参照されたい、１．９４ｇ、８．２ｍｍｏｌ）、メタノール（３０ｍＬ）及び酢酸（３ｍＬ）の混合物に、（ポリスチリルメチル）トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（４．１ｍｍｏｌ／ｇ、１．９ｇ）を加えた。反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で５分間加熱した。樹脂を濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。２．８５ｇ（９９％）の１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４カルボキサミドを得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．６〜１．９（ｍ，６Ｈ）、２．１〜２．２（ｍ，１Ｈ）、２．７〜２．８（ｄ，２Ｈ）、２．９〜３．０（ｍ，３Ｈ）、３．４（ｔ，２Ｈ）、４．４（ｓ，１Ｈ）、５．７〜５．８（ｂ，１Ｈ）、６．２（ｂ，１Ｈ）、７．２（ｔ，２Ｈ）、７．２〜７．３（ｔ，４Ｈ）、７．４（ｄ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ３５０（Ｍ＋１）＋。
【００８８】
（ｂ）１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−カルボキサミドジヒドロクロリド
１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボキサミド（１．４ｇ、４．１ｍｍｏｌ）、ギ酸アンモニウム（０．７７ｇ、１２ｍｍｏｌ）及びエタノール（１５ｍＬ）を、マイクロ波合成用の２５ｍＬバイアルに充填した。水酸化パラジウムオンカーボン（０．５５ｇ）を加え、反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で２分間加熱した。出発物質を依然として含有している混合物を濾過し、濾液に、酢酸及びエタノールの混合物（１：１０）と共に水酸化パラジウムオンカーボンの他の部分を加えた。反応混合物を水素下（５バール）、ＲＴにて４時間攪拌し、次いでＣｅｌｉｔｅ（登録商標）プラグで濾過した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣をトルエン及び希釈した塩酸に分配した。水相を凍結乾燥し、次いで粘着性の残渣をトルエンと共に蒸発させて、水に再溶解し、次いで冷凍乾燥した。１．３５ｇ（６５％）の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．６〜２．０（ｃｍ，６Ｈ）、２．２〜２．３（ｍ，１Ｈ）、２．８（ｍ，２Ｈ）、３．４（ｍ，１Ｈ）、３．９〜４．１（ｍ，４Ｈ）。
【００８９】
方法５
４−［（１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−イル）カルボニル］モルホリン
【化１８】
【００９０】
（ａ）４−（｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−イル）カルボニル）モルホリン
４−（ピペリジン−４−イルカルボニル）モルホリン（０．３０ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）及び１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−オン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．；１３；２００３；２１９１〜２１９４を参照されたい、０．３０ｇ、１．５ｍｍｏｌ）を、メタノール（５ｍＬ）及び酢酸（０．１ｍＬ）の混合物に溶解した。（ポリスチリルメチル）トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（４．１ｍｍｏｌ／ｇ、０．３８ｇ）を加え、反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で１０分間加熱した。混合物を相分離器で濾過し、樹脂をメタノールで洗浄した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣を塩化メチレンに溶解した。溶液をＮａＨＣＯ３の飽和溶液で２度洗浄した。有機相を相分離器で濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。生成物を、シリカゲル（メタノール／塩化メチレン、５％メタノール）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．４４ｇ（８３％）の４−（｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−イル｝カルボニル）モルホリンを無色の油として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．６〜１．７（ｍ，２Ｈ）、１．７〜１．９（ｍ，４Ｈ）、２．２（ｍ，１Ｈ）、２．７〜２．８（ｍ，２Ｈ）、２．８〜３．０（ｍ，４Ｈ）、３．３〜３．５（ｍ，３Ｈ）、３．５〜３．７（ｍ，６Ｈ）、４．４（ｓ，１Ｈ）、７．１〜７２（ｔ，２Ｈ）、７．２〜７．３（ｔ，４Ｈ）、７．４（ｄ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ４２０（Ｍ＋１）＋。
【００９１】
（ｂ）４−［（１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−イル）カルボニル］モルホリン
４−（｛１−［１−ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−イル｝カルボニル）モルホリン（０．４４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を、エタノールに溶解し、このようにして得た溶液に、水酸化パラジウムオンカーボン（０．１５ｇ）及びギ酸アンモニウム（０．２７ｇ、４．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で２分間加熱した。触媒を相分離器によって濾過し、濾過ケーキをエタノールで洗浄した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣をメタノール（１ｍＬ）及びＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した。溶液を、陽イオン交換収着剤（Ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ−２；１０ｇ）に入れた。カラムをＴＨＦで洗浄し、次いで生成物をアンモニア飽和メタノールで溶出した。回収した画分の溶媒を蒸発によって除去し、０．１１ｇの表題化合物を無色の油として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：１．７〜１．８（ｍ，４Ｈ）、１．９〜２．０（ｍ，２Ｈ）、２．６〜２．９（ｍ，４Ｈ）、３．３〜３．４（ｍ，１Ｈ）、３．５〜３．７（ｍ，８Ｈ）、３．８〜４．０（ｍ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ２５４（Ｍ＋１）＋。
【００９２】
［薬理学］
（ＦＬＩＰＲ及び結合アッセイに使用する細胞のトランスフェクション及び培養）
チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）Ｋ１細胞（ＡＴＣＣから得た）を、ヒトＮＫ２受容体（ｐＲｃ／ＣＭＶ中のｈＮＫ２Ｒ ｃＤＮＡ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）又はヒトＮＫ３受容体（ｐｃＤＮＡ３．１／Ｈｙｇｒｏ（＋）／ＩＲＥＳ／ＣＤ８中のｈＮＫ３Ｒ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ ＥＳＴ−Ｂｉｏ ＵＫ、Ａｌｄｅｒｌｅｙ Ｐａｒｋで修飾されたＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎベクター）で安定的にトランスフェクトした。細胞をカチオン性脂質試薬ＬＩＰＯＦＥＣＴＡＭＩＮＥ（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いてトランスフェクトし、ｈＮＫ２Ｒをトランスフェクトされた細胞については１ｍｇ／１ｍｌのジェネテシン（Ｇ４１８、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で、ｈＮＫ３Ｒをトランスフェクトされた細胞については５００μｇ／ｍｌのハイグロマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で選別を行った。蛍光活性化細胞選別機（ＦＡＣＳ）を用いて単細胞クローンを回収し、ＦＬＩＰＲアッセイ（下記を参照されたい）において機能性を試験し、培養液中で増殖し、将来使用するため凍結保存した。ヒトＮＫ１受容体を安定的にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞は、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｒ＆Ｄ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ ＵＳＡから得る。（肺組織からのＲＮＡ−ＰＣＲから得た）ヒトＮＫ１受容体ｃＤＮＡを、ｐＲｃＣＭＶ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にサブクローニングした。リン酸カルシウム及び１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８による選択によってトランスフェクションを行った。
【００９３】
ｈＮＫ１Ｒ、ｈＮＫ２Ｒ及びｈＮＫ３Ｒを安定的にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞を、加湿したインキュベーター中でＧｌｕｔａｍａｘ Ｉ、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＥＳＴ）を含有するＮｕｔ Ｍｉｘ Ｆ１２（ＨＡＭ）（ｈＮＫ１Ｒ及びｈＮＫ２Ｒ発現細胞のために２００μｇ／ｍｌジェネテシン、並びにｈＮＫ３Ｒ発現細胞のために５００μｇ／ｍｌハイグロマイシンを添加）中で５％ＣＯ２下培養した。Ｔ１７５フラスコ中で細胞を増殖させ、２０〜２５継代まで７０〜８０％コンフルエントに常法に従い継代した。
【００９４】
（ヒトＮＫ１／ＮＫ２／ＮＫ３受容体活性化を阻害する選択された試験化合物の活性の評価（ＦＬＩＰＲアッセイ））
ＮＫｌ／ＮＫ２／ＮＫ３受容体介在性の細胞内Ｃａ２＋増加として測定されるＮＫ１／ＮＫ２／ＮＫ３受容体活性化を阻害する本発明の化合物の活性を、下記の手順によって評価した。
【００９５】
ヒトＮＫ１、ＮＫ２又はＮＫ３受容体を安定的にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞を、ブラックウォール／クリアボトム９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ３９０４）中に３．５×１０４細胞／ウェルで播き、３７℃のＣＯ２インキュベーター中で通常の増殖培地中で約２４時間増殖させた。
【００９６】
ＦＬＩＰＲアッセイの前に、各９６ウェルプレートの細胞に、３７℃のＣＯ２インキュベーター中暗くした状態で１時間、Ｇｌｕｔａｍａｘ Ｉ、２２ｍＭのＨＥＰＥＳ、２．５ｍＭのプロベニシド（Ｓｉｇｍａ Ｐ−８７６１）及び０．０４％プルロニックＦ−１２７（Ｓｉｇｍａ Ｐ−２４４３）を有するＮｕｔ Ｍｉｘ Ｆ１２（ＨＡＭ）からなる充填培地中で、Ｃａ２＋感受性色素Ｆｌｕｏ−３（ＴＥＦＬＡＢＳ０１１６）４μＭを充填した。次いで、マルチチャネルピペットを使用して、アッセイ緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、２．５ｍＭのプロベニシド及び０．１％ＢＳＡを含有するＨａｎｋｓ平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ））中で細胞を３度洗浄し、最後の洗浄の終わりに１５０μｌとした。アッセイ緩衝液中の試験化合物の段階希釈（最終的ＤＭＳＯ濃度は１％未満に保つ）を、ＦＬＩＰＲ（蛍光イメージングプレートリーダー）によって各試験ウェルに自動的にピペットで移し、２分間のプレインキュベーション期間にＦＬＩＰＲ ＣＣＤカメラによって蛍光強度を記録した（励起４８８ｎｍ及び蛍光５３０ｎｍ）。次いで、サブスタンスＰ（ＮＫ１特異的）、ＮＫＡ（ＮＫ２特異的）、又はＰｒｏ−７−ＮＫＢ（ＮＫ３特異的）アゴニスト溶液（おおよそＥＣ６０濃度と同等の最終濃度）５０μ１を、ＦＬＩＰＲによってアッセイ緩衝液（試験化合物又はビヒクルを含有する）２００μｌをすでに含有する各ウェルに加え、蛍光をさらに２分間連続してモニターした。アゴニスト添加の後にピーク相対蛍光として反応を測定し、各化合物について１０時点での濃度反応曲線からＩＣ５０を計算した。次いで、ＩＣ５０を、下記の式によってｐＫＢ値に変換した。
Ｋｂ＝ＩＣ５０／１＋（アッセイ中で使用するアゴニストのＥＣ６０濃度／ＥＣ５０アゴニスト）
ｐＫＢ＝−ｌｏｇ ＫＢ
【００９７】
（ヒトＮＫ１／ＮＫ２／ＮＫ３受容体について化合物の解離定数（Ｋｉ）の決定（結合アッセイ））
膜は、下記の方法によってヒトＮＫ１、ＮＫ２又はＮＫ３受容体を安定的にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞から調製した。
【００９８】
細胞をＡｃｃｕｔａｓｅ（登録商標）溶液で剥離させ、５％ＦＢＳを含有するＰＢＳ中で遠心分離によって収集し、ＰＢＳで２度洗浄し、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ５０ｍＭ、ＫＣｌ３００ｍＭ、ＥＤＴＡ−Ｎ２１０ｍＭ（ｐＨ７．４）（４℃）中に１×１０８細胞／ｍｌの濃度まで再懸濁させた。細胞懸濁液をＵｌｔｒａＴｕｒｒａｘでホモジナイズした（３０秒、１２，０００ｒｐｍ）。ホモジネートを、３８，０００×ｇで遠心分離し（４℃）、ペレットをＴｒｉｓ−ＨＣｌ５０ｍＭ（ｐＨ７．４）中で再懸濁した。１度ホモジナイズを繰り返し、ホモジネートを氷上で４５分間インキュベートした。ホモジネートを再び上記のように遠心分離し、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ５０ｍＭ（ｐＨ７．４）中で再懸濁させた。この遠心分離ステップを全部で３度繰り返した。最後の遠心分離ステップの後に、ペレットをＴｒｉｓ−ＨＣｌ５０ｍＭ中で再懸濁させ、Ｄｕａｌ Ｐｏｔｔｅｒでホモジナイズし、均一溶液となるまで１０ストロークし、一定分量をタンパク質決定のために取り出した。膜を分注し、使用するまで−８０℃で冷凍した。
【００９９】
放射性リガンド結合アッセイを、９６ウェルのマイクロタイタープレート（非結合表面プレート、Ｃｏｒｎｉｎｇ３６００）中で、インキュベーション緩衝液（０．１％ＢＳＡ、４０ｍｇ／Ｌバシトラシン、ＥＤＴＡ完全非含有プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤２０丸剤／Ｌ（Ｒｏｃｈｅ）及び３ｍＭのＭｎＣｌ２）を含有する５０ｍＭのトリス緩衝液（ｐＨ７．４、ＲＴ））中で室温にて行う（２００μｌ／ウェルの最終的なアッセイ容量）。逓増する量の試験化合物を加えることによって競合的結合曲線を作製した。試験化合物を溶解し、ＤＭＳＯに連続希釈した（アッセイ中に最終的ＤＭＳＯ濃度１．５％）。非特異的結合を測定するために非標識ＺＤ６０２１（非選択的ＮＫ−アンタゴニスト、１０μＭの最終濃度）５０μｌを加えた。全結合については、インキュベーション緩衝液中の１．５％ＤＭＳＯ（最終濃度）５０μｌを使用した。ｈＮＫ１ｒについての結合実験において、［３Ｈ−Ｓａｒ，Ｍｅｔ（Ｏ２）−サブスタンスＰ］（４ｎＭの最終濃度）を使用した。ｈＮＫ２ｒについては［３Ｈ−ＳＲ４８９６８］（３ｎＭの最終濃度）、及びｈＮＫ３ｒについての結合実験では［３Ｈ−ＳＲ１４２８０１］（３ｎＭの最終濃度）であった。放射性リガンド５０μｌ、ＤＭＳＯで希釈した試験化合物３μｌ、及びインキュベーション緩衝液４７μｌを、インキュベーション緩衝液１００μｌ中で細胞膜５〜１０μｇと混合し、マイクロプレートシェーカーで室温にて３０分間インキュベートした。
【０１００】
次いで、膜を急速濾過によってＦｉｌｔｅｒｍａｔ Ｂ（Ｗａｌｌａｃ）上に回収し、Ｍｉｃｒｏ９６Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ（Ｓｋａｔｒｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｎｏｒｗａｙ）を使用して０．１％ＢＳＡ及び０．３％ポリエチレンイミン（Ｓｉｇｍａ Ｐ−３１４３）中に予浸した。ハーベスターによって氷冷の洗浄緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、４℃、３ｍＭのＭｎＣｌ２を含有）でフィルターを洗浄し、５０℃で３０〜６０分間乾燥した。Ｍｅｌｔｉｌｅｘシンチレーターシートを、Ｍｉｃｒｏｓｅａｌｅｒ（Ｗａｌｌａｃ、Ｆｉｎｌａｎｄ）を使用してフィルター上で融解し、フィルターをβ−液体シンチレーションカウンター（１４５０Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ、Ｗａｌｌａｃ、Ｆｉｎｌａｎｄ）中で計数した。
【０１０１】
Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式（ＢｉｏＣｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２：３０９９〜３１０８、１９７３）を使用して非標識リガンドのＫｉ値を計算した。式中、Ｌは、使用した放射性リガンドの濃度であり、Ｋｄは、飽和結合によって決定される受容体についての放射性リガンドの親和性である。
Ｅｘｃｅｌ Ｆｉｔを使用して、データを４パラメータの式に当てはめた。
Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋（Ｌ／Ｋｄ））
【０１０２】
（結果）
一般に、試験を行った本発明の化合物は、ＮＫ１受容体においてｐＫＢについて７〜８の範囲の統計的に有意なアンタゴニスト活性を示した。ＮＫ２受容体では、ｐＫＢについてのその範囲は７〜９であった。一般に、ＮＫ３受容体でのアンタゴニスト活性は、ｐＫＢについて７〜９であった。
【０１０３】
一般に、試験を行った本発明の化合物は、低レベルで統計的に有意なＣＹＰ３Ａ４阻害を示した。Ｂａｐｉｒｏら；Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．２９、３０〜３５（２００１）によって試験したＩＣ５０値は、一般に１０μＭ超であった。
【０１０４】
（ｈＥＲＧに対する活性）
ｈＥＲＧがコードするカリウムチャネルに対する式Ｉによる化合物の活性は、Ｋｉｓｓ Ｌら、Ａｓｓａｙ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ Ｔｅｃｈｎｏｌ．１（２００３）、１２７〜３５：「Ｈｉｇｈ ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｉｏｎ−ｃｈａｎｎｅｌ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ：ｐｌａｎａｒ−ａｒｒａｙ−ｂａｓｅｄ ｖｏｌｔａｇｅ ｃｌａｍｐ」によって決定することができる。
【０１０５】
一般に、試験を行った本発明の化合物は、低レベルで統計的に有意なｈＥＲＧ活性を示した。上記のように試験したＩＣ５０値は、一般に８μＭ超であった。
【０１０６】
（代謝安定性）
式Ｉによる化合物の代謝安定性を、下記で説明するように決定することができる。
【０１０７】
生体内変化率は、親化合物の代謝物形成又は消失率として測定することができる。実験計画は、低濃度の基質（通常１．０μＭ）の肝ミクロソーム（通常０．５ｍｇ／ｍｌ）とのインキュベーション、及び様々な時点（通常０分、５分、１０分、１５分、２０分、３０分、４０分）での一定分量の取り出しを伴う。試験化合物を通常ＤＭＳＯに溶解する。インキュベーション混合物中のＤＭＳＯ濃度は、通常０．１％以下であり、これはより多い溶媒は、いくつかのＣＹＰ４５０の活性を大幅に減少させる場合があるためである。インキュベーションは、１００ｍＭのリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４）中で３７℃にて行う。アセトニトリル又はメタノールを使用して反応を停止する。親化合物をＨＰＬＣ−ＭＳによって分析する。計算した半減期ｔ１／２から、固有クリアランス（Ｃｌｉｎｔ）を、ミクロソームタンパク質濃度及び肝臓の重量を考慮することによって推定する。
【０１０８】
一般に、本発明の化合物は、ｉｎ ｖｉｔｒｏの代謝安定性を高いレベルで有した。上記のように試験した固有クリアランス値は、２５μｌ／分／ｍｇタンパク質より一般に低かった。
【０１０９】
下記の表は、本発明の化合物の特性を例示する。
【０１１０】
【表９】
【０１１１】
［生物学的評価］
（スナネズミの足のタップ（ＮＫ１特異的試験モデル））
雄スナネズミ（６０〜８０ｇ）をＣｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ、Ｇｅｒｍａｎｙから購入する。到着後、温度及び湿度を制御した収容室内に１０匹の群で収容し、飼料及び水は自由に与える。動物を実験前に少なくとも７日間収容条件に順応させる。各動物は一度のみ使用し、実験後直ちに心臓穿刺又は致死量のペントバルビタールナトリウムによって安楽死させる。
【０１１２】
スナネズミをイソフルランで麻酔する。可能性があるＣＮＳ透過性ＮＫ１受容体アンタゴニストを、腹腔内、静脈内又は皮下に投与する。化合物を、アゴニストによる刺激の（典型的には３０〜１２０分）前に様々な時点で投与する。
【０１１３】
イソフルオランを使用してスナネズミを軽く麻酔し、ブレグマ上の皮膚を少し切開する。１０ｐｍｏｌのＡＳＭＳＰ、選択的ＮＫ１受容体アゴニストを、４ｍｍの針を有するハミルトンシリンジを使用して脳室内投与する（５μｌの量）。傷を閉じ、動物を小さいプラスチックケージに入れ、目覚めさせておく。ケージを１本の水を満たしたプラスチックチューブ上に置き、圧力トランスデューサーを介してコンピュータに接続する。後足のタップ数を記録する。
【０１１４】
（色素涙モデル（ＮＫ１特異的試験モデル））
いわゆる色素涙モデルを使用して、スナネズミにおいてｉｎ ｖｉｖｏで末梢のＮＫ１受容体でのアンタゴニスト活性を評価することができる（Ｂｒｉｓｔｏｗ ＬＪ、Ｙｏｕｎｇ Ｌ．Ｃｈｒｏｍｏｄａｃｒｙｏｒｒｈｅａ ａｎｄ ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅ ｈｉｎｄ ｐａｗ ｔａｐｐｉｎｇ：ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ａｎｄ ｃｅｎｔｒａｌ ｔａｃｈｙｋｉｎｉｎ ＮＫ１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｇｅｒｂｉｌｓ．Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ １９９４；２５３：２４５〜２５２）。簡単に言えば、麻酔されたスナネズミへのＮＫ１受容体アゴニストの全身（静脈内）投与は、ハーダー腺からのポルフィリン分泌による目からの赤／茶色の涙の豊富な分泌をもたらす。ＮＫ１受容体アンタゴニストは、ＮＫ１−アゴニストが引き起こす色素涙を遮断する。
【０１１５】
（糞便ペレット排出（ＮＫ２特異的試験モデル））
例えばＴｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（２００１）、５５９〜５６４頁に記載されているように、式Ｉの化合物のｉｎ ｖｉｖｏ活性（ＮＫ２）を、スナネズミを使用してＮＫ２受容体アゴニストが誘発する糞便ペレット排出を測定することによって決定することができる。
【０１１６】
（結腸直腸膨張モデル）
ラット及びマウスにおいて従前記載した通り、わずかに修正してスナネズミで結腸直腸膨張（ＣＲＤ）を行う（Ｔａｍｍｐｅｒｅ Ａ、Ｂｒｕｓｂｅｒｇ Ｍ、Ａｘｅｎｂｏｒｇ Ｊ、Ｈｉｒｓｃｈ Ｉ、Ｌａｒｓｓｏｎ Ｈ、Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ Ｅ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｓｅｕｄｏ−ａｆｆｅｃｔｉｖｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ｎｏｘｉｏｕｓ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｄｉｓｔｅｎｓｉｏｎ ｉｎ ｒａｔｓ ｂｙ ｍａｎｏｍｅｔｒｉｃ ｒｅｃｏｒｄｉｎｇｓ．Ｐａｉｎ ２００５；１１６：２２０〜２２６；Ａｒｖｉｄｓｓｏｎ Ｓ、Ｌａｒｓｓｏｎ Ｍ、Ｌａｒｓｓｏｎ Ｈ、Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ Ｅ、Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｖ．Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｖｉｓｃｅｒａｌ ｐａｉｎ−ｒｅｌａｔｅｄ ｐｓｅｕｄｏ−ａｆｆｅｃｔｉｖｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｄｉｓｔｅｎｓｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ ｂｙ ｉｎｔｒａｃｏｌｏｎｉｃ ｍａｎｏｍｅｔｒｉｃ ｒｅｃｏｒｄｉｎｇｓ．Ｊ Ｐａｉｎ ２００６；７：１０８〜１１８）。簡単に言えば、実験前にスナネズミをＢｏｌｌｍａｎｎケージに３日連続で１日３０〜６０分間慣らし、拘束ストレスによるモーションアーチファクトを減少させた。軽いイソフルラン麻酔（Ｆｏｒｅｎｅ（登録商標）、Ａｂｂｏｔｔ Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａ ＡＢ、Ｓｏｌｎａ、Ｓｗｅｄｅｎ）の間に、接続カテーテルを有する２ｃｍポリエチレンバルーン（自家製）を、バルーンの底から２ｃｍを肛門へ遠位結腸に挿入する。カテーテルをテープで尾に固定する。バルーンを圧力トランスデューサー（Ｐ−６０２、ＣＦＭ−ｋ３３、１００ｍｍＨｇ、Ｂｒｏｎｋｈｏｒｓｔ ＨＩ−ＴＥＣ、Ｖｅｅｎｅｎｄａｌ、Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）に接続する。スナネズミをＢｏｌｌｍａｎｎケージ内で実験の開始前少なくとも１５分間鎮静状態から回復させる。
【０１１７】
カスタマイズされたバロスタット（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ、Ｍｏｌｎｄａｌ、Ｓｗｅｄｅｎ）を使用して、空気圧膨張及びバルーン圧力制御を管理する。標準的コンピュータ上で作動するカスタマイズされたコンピュータソフトウェア（ＰｈａｒｍＬａｂ ｏｎ−ｌｉｎｅ４．０）を使用し、バロスタットを制御し、データ収集を行う。使用する膨張パラダイムは、５分間隔で３０秒パルス幅の１２回の繰り返される８０ｍｍＨｇの一過性膨張からなる。化合物又はそれらの各々のビヒクルを、ＣＲＤパラダイムの前に腹腔内（ｉ．ｐ．）注射として投与する。各々のスナネズミは、実験の間に少なくとも２日を開けて異なる時点でビヒクル及び化合物の両方を与えられる。したがって、各スナネズミは、それ自身のビヒクル対照の役割を果たす。
【０１１８】
アナログ入力チャネルを、個々の抽出率でサンプリングし、シグナルにデジタルフィルタリングを行う。バルーン圧力シグナルを、５０試料／ｓでサンプリングする。１Ｈｚの高域フィルターを使用して、収縮によってもたらされる圧力変化とバロスタットによって生じる徐々に変動する圧力とを区別する。圧力発生装置及び圧力トランスデューサーの間の空気流の抵抗は、動物の腹部収縮によって引き起こされる圧力変動をさらに増大する。カスタマイズされたコンピュータソフトウェア（ＰｈａｒｍＬａｂ ｏｎ−ｌｉｎｅ４．０）を使用して、高域フィルター処理したバルーン圧力シグナルの大きさを定量化する。高域フィルター処理したバルーン圧力シグナルの平均整流値（ＡＲＶ）を、パルス前（即ち、ベースライン反応）及びパルス中に３０秒間計算する。高域フィルター処理したバルーン圧力シグナルの大きさを計算する場合、各パルスの最初及び最後の秒を、これらが膨張及び収縮の間にバロスタットによって生じたアーチファクトシグナルを反映し、動物によって生じたものではないために除外する。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［発明の分野］
本発明は、新規な式Ｉの化合物、上記化合物を含む医薬組成物、及び治療における上記化合物の使用に関する。本発明はさらに、式Ｉの化合物の調製方法に関する。
【０００２】
［発明の背景］
タキキニンとしても知られているニューロキニンは、末梢及び中枢神経系に見出されるペプチド神経伝達物質の部類を含む。３種の主要なタキキニンは、サブスタンスＰ（ＳＰ）、ニューロキニンＡ（ＮＫＡ）及びニューロキニンＢ（ＮＫＢ）である。少なくとも３種の受容体タイプが、これら３種の主要なタキキニンについて知られている。アゴニストＳＰ、ＮＫＡ及びＮＫＢを好むそれらの相対的選択性に基づいて、これら受容体は各々、ニューロキニン１（ＮＫ１）、ニューロキニン２（ＮＫ２）及びニューロキニン３（ＮＫ３）受容体として分類される。
【０００３】
例えば、呼吸器、心臓血管、神経、疼痛、腫瘍、炎症性及び／又は消化管障害の治療のための経口活性ＮＫ受容体アンタゴニストが必要である。このような治療の治療係数を高めるために、毒性がない又は最小であり、且つ上記ＮＫ受容体に選択的である化合物を得ることが望ましい。さらに、上記医薬が好ましい薬物動態及び代謝特性を有し、より低い肝臓酵素阻害特性などの改善された治療及び安全プロファイルを提供することが必要であると考えられる。
【０００４】
特定の化合物は、ヒトの心臓の再分極に望ましくない作用をもたらす場合があることは周知であり、これは心電図（ＥＣＧ）のＱＴ間隔の延長として観察される。極端な場合、薬物が誘発するＱＴ間隔のこの延長は、多形性心室頻拍（ＴｄＰ；Ｖａｎｄｅｎｂｅｒｇら、ｈＥＲＧ Ｋ＋ ｃｈａｎｎｅｌｓ：ｆｒｉｅｎｄ ａｎｄ ｆｏｅ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ ２００１；２２：２４０〜２４６）と称されるタイプの心不整脈に至り、最終的に心室細動及び突然死がもたらされる場合がある。この症候群の主要イベントは、これらの化合物による遅延整流性カリウム電流の速い成分（ＩＫｒ）の阻害である。この化合物は、この電流を伝えるチャネルタンパク質の孔形成αサブユニットに結合する。孔形成αサブユニットは、ヒト遅延整流性カリウムイオンチャネル遺伝子（ｈＥＲＧ）によってコードされる。ＩＫｒは心筋活動電位の再分極において重要な役割を果たしているので、それを阻害することによって再分極を遅延させ、これはＱＴ間隔の延長として現れる。ＱＴ間隔延長それ自体は安全上懸念されないが、心臓血管への有害な作用の危険性を有し、少数のヒトにおいてＴｄＰ及び心室細動への悪化をもたらす可能性がある。
【０００５】
特に、ＮＫ受容体アンタゴニストが、薬力学的及び薬物動態的特性の適切なバランスを有し、治療上有用であることが望ましい。ＮＫ受容体アンタゴニストは、十分で選択的な効力を有することに加えて、関連する薬物動態的性質に関してバランスがとれている必要がある。したがって、ＮＫアンタゴニストが、ａ）異なるＮＫ受容体における十分に高い親和性、ｂ）薬物が、主に末梢部において標的とするＮＫ受容体において作用することを可能にする薬物動態的性質（吸収、分布及び排出特性）（例えば、ＮＫ受容体アンタゴニストは、十分に高い代謝安定性を有する必要がある）、ｃ）許容できる安全プロファイルを得るための、ｈＥＲＧがコードするカリウムチャネルなどの異なるイオンチャネルに対する十分に低い親和性、及びｄ）薬物間相互作用を防止するための低レベルの（ＣＹＰ３Ａ４などの）肝臓酵素阻害特性を有することが必要である。
【０００６】
さらに、ＮＫ受容体アンタゴニストの有効性を高めるために、受容体において持続性のある競合的作用機序を有するＮＫアンタゴニストを有することが有益である。
【０００７】
欧州特許第０６２５５０９号明細書、欧州特許第０６３０８８７号明細書、国際公開第９５／０５３７７号パンフレット、国際公開第９５／１２５７７号パンフレット、国際公開第９５／１５９６１号パンフレット、国際公開第９６／２４５８２号パンフレット、国際公開第００／０２８５９号パンフレット、国際公開第００／２０００３号パンフレット、国際公開第００／２０３８９号パンフレット、国際公開第００／２５７６６号パンフレット、国際公開第００／３４２４３号パンフレット、国際公開第０２／５１８０７号パンフレット及び国際公開第０３／０３７８８９号パンフレットには、タキキニンアンタゴニストであるピペリジニルブチルアミド誘導体が開示されている。
【０００８】
「４−Ａｍｉｎｏ−２−（ａｒｙｌ）−ｂｕｔｙｌｂｅｎｚａｍｉｄｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌｌｙ Ｃｏｎｓｔｒａｉｎｅｄ Ａｎａｌｏｇｕｅｓ． Ｐｏｔｅｎｔ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ Ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎ−２（ＮＫ２）Ｒｅｃｅｐｔｏｒ」、Ｒｏｄｅｒｉｃｋ ＭａｃＫｅｎｚｉｅ，Ａ．ら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ（２００３）、１３、２２１１〜２２１５には、機能的ＮＫ２受容体アンタゴニスト特性を有することが見出された化合物Ｎ−［２−（３，４−ジクロロフェニル）−４−（３−モルホリン−４−イルアゼチジン−１−イル）ブチル］−Ｎ−メチルベンズアミドが開示されている。
【０００９】
国際公開第９６／０５１９３号パンフレット、国際公開第９７／２７１８５号パンフレット及び欧州特許第０９６２４５７号明細書には、タキキニンアンタゴニスト活性を有するアゼチジニルアルキルラクタム誘導体が開示されている。
【００１０】
欧州特許第０７９０２４８号明細書には、タキキニンアンタゴニストであると述べられているアゼチジニルアルキルアザピペリドン及びアゼチジニルアルキルオキサピペリドンが開示されている。
【００１１】
国際公開第９９／０１４５１号パンフレット及び国際公開第９７／２５３２２号パンフレットには、タキキニンアンタゴニストであると主張されているアゼチジニルアルキルピペリジン誘導体が開示されている。
【００１２】
欧州特許第０７９１５９２号明細書には、タキキニンアンタゴニスト特性を有するアゼチジニルアルキルグルタルイミドが開示されている。
【００１３】
国際公開第２００４／１１０３４４（Ａ２）号パンフレットには、ＮＫ１、２の二重アンタゴニスト及びその使用が開示されている。
【００１４】
本発明の１つの目的は、治療に有用である新規なニューロキニンアンタゴニストを提供することであった。他の目的は、バランスのとれた薬物動態的及び薬力学的特性を有する新規な化合物を提供することであった。
【００１５】
［発明の概要］
本発明は、一般式（Ｉ）の化合物、薬学的及び薬理学的に許容されるその塩、並びに、式Ｉの化合物のエナンチオマー及びその塩を提供する。
【化１】
（式中、
Ｒ１及びＲ２は、各々独立に、水素、メチル、エチルから選択され、又はＲ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になって４員、５員又は６員環を形成し、前記環は任意選択で酸素原子を含有し、
Ｘは、ブロモ又はクロロである）
【００１６】
一実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になってモルホリン環を形成する。
【００１７】
一実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になってアゼチジン環を形成する。
【００１８】
一実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になってピロリジン環を形成する。
【００１９】
一実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になってイソオキサゾリジン環を形成する。
【００２０】
一実施形態では、Ｒ１及びＲ２は、アミド窒素と一緒になってオキサゾリジン環を形成する。
【００２１】
本発明は、上記定義のような式Ｉの化合物、並びにその塩に関する。医薬組成物中に使用するための塩は、薬学的に許容される塩であろうが、他の塩は式Ｉの化合物の作製に有用な場合がある。
【００２２】
本発明の化合物は、様々な無機酸及び有機酸と共に塩を形成することができ、このような塩もまた本発明の範囲内である。このような酸付加塩の例には、酢酸塩、アジピン酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルタミン酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、２−ヒドロキシエチルスルホン酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パルモ酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、キナ酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、スルファミン酸塩、スルファニル酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩（ｐ−トルエンスルホン酸塩）、及びウンデカン酸塩が挙げられる。
【００２３】
薬学的に許容される塩は、従来の方法で対応する酸から調製することができる。薬学的に許容されない塩は、中間体として有用である場合があり、これも本発明の他の態様である。
【００２４】
酸付加塩は、高分子スルホン酸塩などの高分子塩の形態でもよい。
【００２５】
塩は、その中で塩が難溶性である溶媒若しくは媒体中で又は水などの溶媒中（真空中で除去する）で、生成物の遊離塩基の形態と、１当量以上の適切な酸とを反応させることによって、或いは凍結乾燥によって、或いは適切なイオン交換樹脂上で既存の塩の陰イオンを他の陰イオンと交換することによるなどの従来の手段によって形成することができる。
【００２６】
式Ｉの化合物は、１つのキラル中心を有し、本発明はすべての光学異性体及びエナンチオマーを包含することを理解すべきである。式（Ｉ）による化合物は、単一の立体異性体、即ち単一のエナンチオマー（Ｒ−エナンチオマー又はＳ−エナンチオマー）の形態の場合がある。式（Ｉ）による化合物はまた、ラセミ混合物、即ちエナンチオマーの等モル混合物の形態の場合がある。
【００２７】
化合物は、配座異性体の混合物として存在することができる。本発明の化合物は、配座異性体の混合物及び個々の配座異性体の両方を含む。
【００２８】
［製剤］
本発明の一態様では、呼吸器、心臓血管、神経、疼痛、腫瘍、炎症性及び／又は消化管障害の予防及び／又は治療において使用するための、単一のエナンチオマー、ラセミ体としての式Ｉの化合物、又は遊離塩基としてのこれらの混合物、又は薬学的に許容されるその塩を含む製剤を提供する。
【００２９】
本発明の医薬組成物は、治療することが望ましい疾患状態について標準的方法、例えば、経口、局所、非経口、口腔、経鼻、膣又は直腸投与によって、或いは吸入又は吹送によって投与することができる。これらの目的のために、本発明の化合物は、当技術分野において公知の手段によって、例えば、錠剤、ペレット剤、カプセル剤、水溶液剤又は油性溶液剤、懸濁剤、乳剤、クリーム剤、軟膏、ゲル剤、スプレー式点鼻薬、坐薬、吸入のための微粉化した散剤又はエアロゾル又はネブライザー、及び（静脈内、筋内又は注入を含めた）非経口使用のための無菌の水溶液剤若しくは油性溶液剤又は懸濁剤、或いは無菌の乳剤の形態に製剤することができる。
【００３０】
本発明の化合物に加えて、本発明の医薬組成物はまた、本明細書において示される１種又は複数の疾患状態の治療において価値のある１種若しくは複数の薬物を含有すること、又は（同時若しくは順次に）一緒に投与することができる。
【００３１】
本発明の医薬組成物は通常、０．０１〜２５ｍｇ／ｋｇ体重の式Ｉの化合物の１日用量でヒトに投与される。或いは、０．１〜５ｍｇ／ｋｇ体重の式Ｉの化合物の１日用量で投与される。この１日用量は、必要に応じて分割用量で与えてもよく、投与する化合物の正確な量及び投与経路は、治療を受ける患者の体重、年齢及び性別、並びに当技術分野において公知の方式によって治療を受ける特定の疾患状態に依存する。
【００３２】
典型的には、単位剤形は、約１ｍｇ〜５００ｍｇの本発明の化合物を含むであろう。例えば、経口投与用の錠剤又はカプセル剤は好都合には、２５０ｍｇまで（典型的には、５〜１００ｍｇ）の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を含有することができる。他の例では、吸入による投与のために、式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩は、単回用量又は２〜４回の１日用量に分割して、５〜１００ｍｇの範囲の１日投与量で投与することができる。さらなる例では、静脈内又は筋内の注射又は注入による投与のために、１０％ｗ／ｗまで（典型的には５％ｗ／ｗ）の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を含有する滅菌溶液又は懸濁剤を使用することができる。
【００３３】
［医療用途及び製薬学的用途］
本発明は、ＮＫ受容体で作用するタキキニン拮抗作用が有益である疾患状態を治療又は予防する方法を提供し、これは、有効量の式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩を対象に投与するステップを含む。本発明はまた、ＮＫ受容体で作用するタキキニン拮抗作用が有益である疾患状態において使用するための医薬の調製における式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩の使用も提供する。
【００３４】
式（Ｉ）の化合物或いは薬学的に許容されるその塩又は溶媒和物は、呼吸器、心臓血管、神経、疼痛、腫瘍及び／又は消化管障害の予防又は治療において使用するための医薬の製造に使用することができる。
【００３５】
このような障害の例は、喘息、アレルギー性鼻炎、肺疾患、咳、風邪、炎症、慢性閉塞性肺疾患、気道反応性、じんま疹、高血圧、慢性関節リウマチ、浮腫、血管新生、疼痛、片頭痛、緊張性頭痛、精神病、うつ病、不安、アルツハイマー病、統合失調症、ハンチントン舞踏病、膀胱運動亢進、尿失禁、摂食障害、躁うつ病、物質依存症、運動障害、認識力障害、肥満症、ストレス障害、排尿障害、躁病、軽躁病及び攻撃性、双極性障害、癌、癌腫、線維筋痛、非心臓性胸痛、胃腸運動亢進、胃喘息、クローン病、胃内容排出障害、潰瘍性大腸炎、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、嘔吐、胃喘息、胃運動性障害、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）又は機能性消化不良である。
【００３６】
［調製方法］
他の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその塩を調製するための方法を提供し、この方法は、
ａ）式（ＩＩ）の化合物を式（ＩＩＩ）の化合物と反応させるステップ
【化２】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＸは、本明細書の上記に定義されている通りであり、反応条件は、式（ＩＩ）の化合物の還元的アルキル化によって、式（ＩＩ）の化合物のアゼチジン基の窒素原子と、式（ＩＩＩ）の化合物のアルデヒド基の炭素原子との間のＮ−Ｃ結合が形成されるような条件である。）、
ｂ）式（ＩＩ）の化合物を式（ＩＶ）の化合物と反応させるステップ
【化３】
（式中、Ｘは、本明細書の上記に定義されている通りであり、Ｌは、式（ＩＩ）の化合物のアルキル化によって、式（ＩＩ）の化合物のアゼチジン基の窒素原子と、式（ＩＶ）の化合物のＬ基に隣接した炭素原子との間のＮ−Ｃ結合が形成されるような基である。）、
ｃ）式（Ｖ）の化合物を式（ＶＩ）の化合物と反応させるステップ
【化４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＸは、本明細書の上記に定義されている通りであり、Ｌ’は脱離基である。）、
又は、薬学的に許容される塩を任意選択で形成するステップとを含む。
【００３７】
式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物は、還元的アルキル化条件下で反応する。反応は典型的には、極端ではない温度、例えば０〜１０℃で、実質的に不活性な溶媒、例えばジクロロメタン中で行われる。典型的な還元剤には、シアノホウ水素化ナトリウムなどのホウ化水素が挙げられる。
【００３８】
式（ＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は、アルキル化条件下で反応する。典型的には式（ＩＶ）の化合物において、Ｌはハロゲン又はアルキルスルホニルオキシなどの脱離基である。反応は典型的には、温度を上げた状態、例えば３０〜１３０℃で、実質的に不活性な溶媒、例えばＤＭＦ中で行われる。
【００３９】
式（ＩＩ）の化合物は、従来の方法で、例えば、式（ＶＩＩ）の化合物を、式（ＶＩＩＩ）の化合物と反応させることによって、次いで例えば接触水素化反応により保護基（−ＣＨ（Ｐｈ）２）を除去することによって調製することができる。
【化５】
【化６】
（式中、Ｒ１及びＲ２は、本明細書の上記に定義されている通りであり、Ｌ”は、式（ＶＩＩ）の化合物のアルキル化によって、式（ＶＩＩ）の化合物のピペリジン基の窒素原子と、式（ＶＩＩ）の化合物のＬ”基に隣接した炭素原子との間のＮ−Ｃ結合が形成されるような基である。）
【００４０】
式（ＩＩＩ）の化合物は、例えば、従来のアシル化条件下で、式（ＩＸ）の化合物を式（ＶＩ）の化合物と反応させることによって調製することができる。
【化７】
（式中、Ｒ１は、本明細書の上記に定義されている通りである。）
【００４１】
式（ＩＶ）の化合物は、例えば、従来のアシル化条件下で、式（ＶＩ）の化合物を式（Ｘ）の化合物と反応させることによって調製することができる。
【化８】
（式中、Ｌは、本明細書の上記に定義されている通りである。）
【００４２】
式（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物は、従来のアシル化条件下で反応させることができ、ここで、
【化９】
は、酸又は活性化酸誘導体である。このような活性化酸誘導体は、文献において周知である。それらは、酸からｉｎ ｓｉｔｕで形成することができ、又はそれらを調製し、単離し、その後反応させることができる。典型的には、Ｌ’はクロロであり、したがって酸塩化物を形成する。典型的には、アシル化反応は、ジクロロメタンなどの実質的に不活性な溶媒中で、非求核塩基、例えばＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下で極端ではない温度で行われる。
【００４３】
式（ＶＩＩ）及び（ＶＩＩＩ）の化合物は公知であり、又は従来の方法で調製することができる。
【実施例】
【００４４】
本発明の化合物は、ほとんどの場合、配座異性体の存在によって非常に複雑なＮＭＲスペクトルを示すことを強調すべきである。これは、アミド及び／又はアリール結合を中心とした遅い回転の結果であると考えられている。化合物のＮＭＲデータの説明において下記の略語を使用する。ｓ−単重線；ｄ−２重線；ｔ−３重線；ｑｔ−４重線；ｑｎ−５重線；ｍ−多重線；ｂ−広範；ｃｍ−幅の広いピークを含む場合もある複雑な多重線。
【００４５】
下記の実施例は、本発明を説明するが、限定するものではない。
【００４６】
下記の略語を実験において使用する。ＤＩＰＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）、ＴＢＴＵ（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）ウロニウムテトラフルオロボラート）、ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）及びＲＴ（室温）。
【００４７】
実施例１
Ｎ−［（２Ｓ）−４−｛３−［４｛アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−イル］アゼチジン−１−イル｝２−（４−フルオロフェニル）ブチル］−３−ブロモ−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
【化１０】
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（方法１を参照されたい；０．１６ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及び１−アゼチジン−３−イル−４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン（方法２を参照されたい；０．１０ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を、少量の乾燥メタノール（０．２ｍＬ）と共に塩化メチレン（１０ｍＬ）に溶解した。このようにして得た溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．１４ｇ、１．０８ｍｍｏｌ）及びトリアセトキシホウ水素化ナトリウム（０．１５ｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を、窒素下でＲＴにて４時間攪拌した。混合物を塩化メチレンで希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ３で２度、次いでブラインで洗浄した。有機相を相分離器で濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。生成物を、シリカゲル（メタノール−塩化メチレン、１０：１）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．１４ｇ（５９％）の表題化合物を白色の泡として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．４〜１．８（ｃｍ，６Ｈ）、２．１（ｍ，１Ｈ）２．２（ｑｎ，２Ｈ）、２．３〜２．４（ｃｍ，２Ｈ）、２．５〜３．５（ｃｍ，１４Ｈ）、３．６（ｄ，１Ｈ）、３．９（ｔ，２Ｈ）、４．１（ｔ，２Ｈ）、６．８〜７．４（ｃｍ，６Ｈ）、７．７（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ６５４（Ｍ＋１）＋。
【００４８】
実施例２
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミドジホルマート
【化１１】
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（方法１を参照されたい；０．１７８ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、１−アゼチジン−３−イル−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド（方法３を参照されたい；０．０８４ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、酢酸（０．３ｍＬ）、（ポリスチリルメチル）トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（０．０９８ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）及びメタノールの混合物を、ＲＴで６時間攪拌した。樹脂を濾過し、メタノールで洗浄した。濾液の溶媒を蒸発によって除去し、生成物を、アセトニトリル及びギ酸アンモニウム／ギ酸水溶液（０．１ＭのＮＨ４ＣＯ２Ｈ、０．１ＭのＨＣＯ２Ｈ、ｐＨ４）を溶離液として使用して逆相クロマトグラフィー（Ｃ８）によって精製した。０．２３ｇ（７７％）の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．６〜２．０（ｃｍ，６Ｈ）、２．６〜４．２（ｃｍ，２４Ｈ）、７．０〜８．０（ｃｍ，６Ｈ）、８．４（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ６４２（Ｍ＋１）＋。
【００４９】
実施例３
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミド
【化１２】
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（方法１を参照されたい；１．００ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）及び１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−カルボキサミド（方法４を参照されたい；０．４９ｇ、２．６９ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１．２４ｍＬ、９．０ｍｍｏｌ）を、メタノール（５ｍＬ）と共に塩化メチレン（３０ｍＬ）に溶解した。このようにして得た溶液に、シアノホウ水素化ナトリウム（０．２１ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＲＴで２０分間攪拌した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣を、塩化メチレン及び飽和水性ＮａＨＣＯ３に分配した。有機相を相分離器で濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。生成物を、シリカゲル（アンモニア飽和メタノール／塩化メチレン、１〜２０％メタノール）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．２４ｇ（１７％）の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．４〜３．８（ｃｍ，２３Ｈ）、５．７（ｂ，１Ｈ）、５．８（ｂ，１Ｈ）、６．８〜７．４（ｃｍ，６Ｈ）、７．７（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ６１４（Ｍ＋１）＋。
【００５０】
実施例３ａ
存在する固形に関するさらなる情報を得るため、懸濁結晶化を異なる溶媒中で室温にて行った。約２週間後に、固形をＸＲＰＤで検査した。メタノール、エタノール、ｉ−プロパノール、アセトン及びクロロホルム中で懸濁させた試料は、ＸＲＰＤにおいて非常に類似したパターンを示し、それは最初の試料のパターンと異なる。結晶化度は、新しい形態については著しく良好である。エチルメチルケトンに懸濁させた材料は、完全に特有のパターンを示す。ｉ−プロパノールに懸濁させた試料で行った高温ステージＸＲＰＤは、Ｘ線粉末パターンが１２０℃超で変化することを示す。この新しいパターンもまた、最初の試料のパターンと異なる。
【００５１】
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドのマレイン酸塩
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミド（２．０ｇ、３．２６ｍｍｏｌ）を、熱いアセトン（２０ｍＬ）に溶解した。マレイン酸（０．７４ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を、熱いメタノール（４ｍＬ）に溶解し、次いでこの溶液を最初の溶液に加えた。合わせた溶液を室温で一晩放置したが、有用な沈殿物は単離できなかった。混合物を、メタノールで希釈し、溶媒を蒸発によって除去した。残渣をトルエン（１７ｍＬ）と２−プロパノール（５０ｍＬ）との混合物に加えた。メタノール（２０ｍＬ）を加え、混合物を澄明な溶液が得られるまで加熱した。溶液を室温に冷却し、次いで冷凍庫内で一晩保存した。白色の沈殿物が濾過によって単離され、次いで減圧下で４８時間乾燥した。２．４ｇの表題化合物を白色粉末として得た。生成物の１Ｈ ＮＭＲ分析によって、試料が、１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミド１モル当たり約１．５〜２ｍｏｌのマレイン酸からなることを示す。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ １．２（ｄ，１．６Ｈ）、１．８〜２．２（ｃｍ，５．８Ｈ）、２．６〜２．７（ｍ，１Ｈ）、２．７（ｓ，１Ｈ）、２．８〜３．２（ｃｍ，５．１Ｈ）、３．２〜３．３（ｍ，１Ｈ）、３．３〜３．５（ｃｍ，２．３Ｈ）、３．５〜３．８（ｍ，１．４Ｈ）、３．９〜４．１（ｍ，０．６Ｈ）、４．２〜４．７（ｃｍ，４．６Ｈ）、６．３（ｓ，２．９Ｈ）、６．９〜７．３（ｍ，４．２Ｈ）、７．４（ｍ，１Ｈ）、８．０（ｓ，０．６Ｈ）。
【００５２】
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドのマレイン酸塩を、実質的に下記のｄ値を有する主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することにおいて特徴付ける（ｄ値：結晶格子における連続した平行のｈｋｌ面の間の間隔）。
【００５３】
【表１】
【００５４】
Ｂｒａｇｇ式及び強度から計算したｄ値によって同定されるピークは、１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル）ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートのディフラクトグラムから得た。相対強度は信頼性がより少なく、数値の代わりに下記の定義を使用する。
【００５５】
【表２】
【００５６】
最初の形態はまた、水、ｎ−ヘプタン、アセトニトリル、イソオクタン、ＴＨＦ及びメチルイソブチルケトン中で室温にて懸濁させた後に得られた。
【００５７】
スラリー化後の１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドのマレイン酸塩の形態
メタノール、エタノール、ｉ−プロパノール、アセトン及びクロロホルム中で懸濁させた試料は、ＸＲＰＤにおいて最初の試料とは異なる非常に類似したパターンを示す。この形態を、実質的に下記のｄ値を有する主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することにおいて特徴付ける（ｄ値：結晶格子における連続した平行のｈｋｌ面の間の間隔）。
【００５８】
【表３】
【００５９】
Ｂｒａｇｇ式及び強度から計算したｄ値によって同定されるピークは、１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチルメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートの得られた形態のディフラクトグラムから得た。相対強度は信頼性がより少なく、数値の代わりに下記の定義を使用する。
【００６０】
【表４】
【００６１】
高温ステージＸＲＰＤ後の１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル）ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートの形態
ｉ−プロパノール中で懸濁させた試料で行ったＸＲＰＤは、Ｘ線粉末パターンが１２０℃超で変化することを示す。新しいパターンもまた、最初の試料のパターンとは異なる。
【００６２】
この形態を、実質的に下記のｄ値を有する主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することにおいて特徴付ける（ｄ値：結晶格子における連続した平行のｈｋｌ面の間の間隔）。
【００６３】
【表５】
【００６４】
Ｂｒａｇｇ式及び強度から計算したｄ値によって同定されるピークは、高温ステージＸＲＰＤ後の１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートの得られた形態のディフラクトグラムから得た。相対強度は信頼性がより少なく、数値の代わりに下記の定義を使用する。
【００６５】
【表６】
【００６６】
メチルエチルケトン中での懸濁後の１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートの形態
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドのさらなる形態を、メチルエチルケトン中での懸濁後に得た。この形態を、実質的に下記のｄ値を有する主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することにおいて特徴付ける（ｄ値：結晶格子における連続した平行のｈｋｌ面の間の間隔）。
【００６７】
【表７】
【００６８】
Ｂｒａｇｇ式及び強度から計算したｄ値によって同定されるピークは、メチルエチルケトン中での懸濁後の１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートの得られた形態のディフラクトグラムから得た。相対強度は信頼性がより少なく、数値の代わりに下記の定義を使用する。
【００６９】
【表８】
【００７０】
Ｘ線粉末回折法（ＸＲＰＤ）
ＶÅＮＴＥＣ−１位置敏感検出器（ＰＳＤ）を備えたＢｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ型の形態のＤ８Ａｄｖａｎｃｅ回折計（Ｂｒｕｘｅｒ ＡＸＳ ＧｍｂＨ、Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ、Ｇｅｒｍａｎｙ）でＸＲＰＤ実験を行った。ニッケルフィルターを通したＣｕ Ｋα線を使用した。試料約１０ｍｇを、ゼロバックグラウンドホルダー（シリコン結晶）上に置いた。１〜５０°２θの範囲で、０．０１７°のステップサイズ及び０．５秒のステップ時間の連続走査モードを使用してデータを収集した。３．４７°幅の検出窓に対応する可変（Ｖ２０）発散スリット及び１２ｍｍの検出スリットを適用した。
【００７１】
高温ステージＸＲＰＤを、Ａｎｓｙｃｏ温度調節器に接続した付随するＭＲＩチャンバー（Ｂｒｕｘｅｒ ＡＸＳ ＧｍｂＨ、Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を伴う同様の設定を使用して上記の機器で行った。
【００７２】
実施例４
３−ブロモ−Ｎ−（（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−｛３−［４（モルホリン−４−イルカルボニル）ピペリジン−１−イル］アゼチジン−１−イル｝ブチル）−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
【化１３】
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（方法１を参照されたい；０．１４ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）及び４−［（１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−イル）カルボニル］モルホリン（方法５を参照されたい；０．１１ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を、乾燥メタノール（０．２ｍＬ）と共に塩化メチレン（１０ｍＬ）に溶解した。このようにして得た溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．１２ｇ、０．９４ｍｍｏｌ）及びトリアセトキシホウ水素化ナトリウム（０．１３ｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素下で４時間ＲＴにて攪拌した。混合物を塩化メチレンで希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ３で２度、次いでブラインで洗浄した。有機相を相分離器で濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。生成物を、シリカゲル（メタノール−塩化メチレン、１０：１）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．１１ｇ（５３％）の表題化合物を白色の泡として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．４〜３．８（ｃｍ，３２Ｈ）、６．８〜７．４（ｃｍ，６Ｈ）、７．７（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ６８４（Ｍ＋１）＋。
【００７３】
［出発物質の調製］
上記の実施例のための出発物質は、市販であるか、又は標準的方法によって公知の材料から容易に調製される。例えば、下記の反応は、出発物質のいくつかの例示であるが、限定するものではない。
【００７４】
方法１
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
【化１４】
【００７５】
（ａ）３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）ペント−４−エン−１−イル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）ペント−４−エン−１−イル］メチルアミン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ；２００１；２６５〜２７０を参照されたい；０．５４ｇ、２．８ｍｍｏｌ）及び３−ブロモ−５−トリフルオロメチル安息香酸（０．８１ｇ、３．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７ｍＬ）溶液に、ＴＢＴＵ（０．９６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１．４１ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、窒素下で一晩ＲＴにて攪拌し、次いで酢酸エチル及びＮａＨＣＯ３水溶液に分配した。水相を酢酸エチルで２度抽出した。合わせた有機溶液を水で２度洗浄し、次いで相分離カラムで乾燥した。溶媒を蒸発によって除去し、生成物を、シリカゲル（酢酸エチル−ヘプタン、１０％〜１７％）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．８６ｇ（６８％）の３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）ペント−４−エン−１−イル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミドを得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：２．１〜３．８（ｃｍ，８Ｈ）、４．９〜５．１（ｍ，２Ｈ）、５．５〜５．８（ｍ，１Ｈ）、６．８〜７．４（ｃｍ，６Ｈ）、７．８（ｓ，１Ｈ）。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ４４５（Ｍ＋１）＋。
【００７６】
（ｂ）３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
３−ブロモ−Ｎ−［（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）ペント−４−エン−１−イル］−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド（０．８６ｇ、１．９ｍｍｏｌ）のアセトン（４５ｍＬ）溶液に、ＯｓＯ４（ｔ−ブチルアルコール中２．５％、０．４９ｍｌ、０．０３９ｍｍｏｌ）及び４−メチルモルヒネ−４−オキシド（０．４１ｇ、３．５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を窒素下でＲＴにて一晩攪拌し、次いでＮａＨＳＯ３の水溶液（３９％、４５ｍＬ）を加えた。混合物を２時間攪拌し、水で希釈し、次いで塩化メチレンで２度抽出した。合わせた有機溶液を相分離カラムによって分離し、溶媒を蒸発によって除去した。残渣（１．０８ｇ）をＴＨＦ（１８ｍＬ）及び水（４．５ｍＬ）に溶解し、このようにして得た溶液に、ＮａＩＯ４（０．７３ｇ、３．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素下で一晩ＲＴにて攪拌した。混合物を塩化メチレン及び水に分配した。水相を塩化メチレンで抽出し、次いで合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、相分離カラムで分離した。溶媒を蒸発によって除去した。０．７８ｇ（９０％）の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：２．４〜４．４（ｃｍ，８Ｈ）、６．２〜８．２（ｃｍ，７Ｈ）、９．８（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ４４７（Ｍ＋１）＋。
【００７７】
方法２
１−アゼチジン−３−イル−４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン
【化１５】
【００７８】
（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−カルボキシレート
１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−カルボン酸（０．４０ｇ、１．７５ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、溶液にＤＩＰＥＡ（１．２２ｍＬ、７．０ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ（０．６７ｇ、２．１ｍｍｏｌ）及びアゼチジン（０．１２ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＲＴにて１２時間攪拌した。混合物を塩化メチレンで希釈し、次いでＨＣｌの水溶液（２Ｍ）で、次いでＮａＨＣＯ３（飽和）の水溶液で洗浄した。相を相分離カラムによって分離し、溶媒を蒸発によって除去した。０．５０ｇ（１００％）のｔｅｒｔ−ブチル４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−カルボキシレートを粗製固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．４〜１．５（ｓ，９Ｈ）、１．６〜１．９（ｍ，５Ｈ）、２．２〜２．４（ｍ，３Ｈ）、２．６〜２．８（ｍ，２Ｈ）、３．９〜４．２（ｍ，５Ｈ）。
【００７９】
（ｂ）４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン
ｔｅｒｔ−ブチル４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（０．５０ｇ、１．８６ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（１０ｍＬ）に溶解し、溶液にトリフルオロ酢酸（２．１２ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＲＴにて一晩攪拌し、次いで溶媒を蒸発によって除去した。残渣を少量のメタノール及びＴＨＦに溶解し、次いで溶液を、陽イオン交換収着剤（Ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ−２；１０ｇ）に入れた。カラムをＴＨＦで洗浄し、次いで生成物をアンモニア飽和メタノールで溶出した。溶媒を蒸発によって除去した。０．３２ｇ（１００％）の４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．４〜４．５（ｍ，４Ｈ）、２．０〜２．２（ｍ，３Ｈ）、２．４〜２．５（ｍ，２Ｈ）、２．９〜３．０（ｄ，２Ｈ）、３．７〜３．８（ｔ，２Ｈ）、３．９（ｓ，１Ｈ）、４．０（ｔ，２Ｈ）。
【００８０】
（ｃ）４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン
４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン（０．３４ｇ、２．０ｍｍｏｌ）及び１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−オン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ；１３；２００３；２１９１〜２１９４を参照されたい、０．３７ｇ、１．６ｍｍｏｌ）、メタノール（５ｍＬ）及び酢酸（０．１ｍＬ）の混合物に、（ポリスチリルメチル）トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（４．１ｍｍｏｌ／ｇ、０．６１ｇ）を加えた。反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で１０分間加熱し、次いで相分離器で濾過した。溶媒を蒸発によって除去し、生成物を、シリカゲル（メタノール−塩化メチレン、５：９５）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．４２ｇ（７０％）の４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジンを無色の泡として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．６〜１．７（ｍ，２Ｈ）、１．７〜１．８（ｍ，４Ｈ）、２．０〜２．１（ｍ，１Ｈ）、２．２（ｑｎ，２Ｈ）、２．７〜２．８（ｍ，２Ｈ）、２．８〜３．０（ｍ，３Ｈ）、３．４（ｔ，２Ｈ）、４．０（ｔ，２Ｈ）、４．１（ｔ，２Ｈ）、４．４（ｓ，１Ｈ）、７．１〜７．２（ｔ，２Ｈ）、７．２〜７．３（ｔ，４Ｈ）、７．４（ｄ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ３９０（Ｍ＋１）＋。
【００８１】
（ｄ）１−アゼチジン−３−イル−４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン
４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン（０．４２ｇ、１．１ｍｍｏｌ）をエタノールに溶解し、このようにして得た溶液に、水酸化パラジウムオンカーボン（０．１５ｇ）及びギ酸アンモニウム（０．２８ｇ、４．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で４分間加熱した。触媒を相分離器で濾過し、濾過ケーキをエタノールで洗浄した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣をメタノール（１ｍＬ）及びＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した。溶液を、陽イオン交換収着剤（Ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ−２；１０ｇ）に入れた。カラムをＴＨＦで洗浄し、次いで生成物をアンモニア飽和メタノールで溶出した。溶媒を蒸発によって除去し、０．２５ｇの表題化合物を無色の油として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：２．０〜２．２（ｍ，４Ｈ）、２．３〜２．４（ｍ，２Ｈ）、２．６〜２．８（ｍ，３Ｈ）、３．２〜３．３（ｄ，２Ｈ）、３．８（ｑｎ，１Ｈ）、４．３（ｔ，２Ｈ）、４．４（ｍ，２Ｈ）、４．５（ｍ，２Ｈ）、４．６（ｔ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ２２４（Ｍ＋１）＋。
【００８２】
方法３
１−アゼチジン−３−イル−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド
【化１６】
【００８３】
（ａ）１−１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボン酸
ピペリジン−４−カルボン酸（０．１３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及び１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−オン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．；１３；２００３；２１９１〜２１９４を参照されたい、０．２４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、メタノール（３ｍＬ）及び酢酸（０．３ｍＬ）の混合物に、（ポリスチリルメチル）トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（４．１ｍｍｏｌ／ｇ、０．２５ｇ）を加えた。反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で５分間加熱した。メタノールを加え、次いで樹脂を濾過した。溶媒を蒸発によって除去した。０．３５ｇ（１００％）の１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボン酸を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．６〜１．８（ｍ，２Ｈ）、１．９〜２．０（ｍ，４Ｈ）、２．３〜２．４（ｍ，１Ｈ）、２．７〜２．８（ｍ，２Ｈ）、２．９〜３．０（ｍ，３Ｈ）、３．４（ｔ，２Ｈ）、４．４（ｓ，１Ｈ）、７．２（ｔ，２Ｈ）、７．２〜７．３（ｔ，４Ｈ）、７．４（ｄ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ３５１（Ｍ＋１）＋。
【００８４】
（ｂ）１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド
１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボン酸（０．３５ｇ、０．９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（８ｍＬ）に溶解し、溶液に、ＴＢＴＵ（０．３９ｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．２１ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）及びジメチルアミンの溶液（３．０ｍＬ、ＴＨＦ中２Ｍ、６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＲＴにて１４時間攪拌した。ＮａＨＣＯ３の水溶液を加え、混合物を塩化メチレンで３度抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥した。溶媒を蒸発によって除去し、生成物を、アセトニトリル及び酢酸アンモニウム水溶液（０．１Ｍ）を溶離液として使用することによって逆相クロマトグラフィー（Ｃ８）によって精製した。０．２０ｇ（５９％）の１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミドを得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ １．６〜２．０（ｃｍ，６Ｈ）、２．４〜２．５（ｍ，１Ｈ）、２．８（ｍ，２Ｈ）、２．９〜３．０（ｍ，５Ｈ）、３．１（ｓ，３Ｈ）、３．４（ｔ，２Ｈ）、４．４（ｓ，１Ｈ）、７．２（ｔ，２Ｈ）、７．３（ｔ，４Ｈ）、７．４（ｄ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ３７８（Ｍ＋１）＋。
【００８５】
（ｃ）１−アゼチジン−３−イル−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド
水酸化パラジウムオンカーボン（０．１０ｇ）を、マイクロ波合成用の５ｍＬバイアル中に入れた。１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド（０．２０ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）に溶解し、酢酸（０．３ｍＬ）を加えた。混合物を水素下（１．６バール）、ＲＴにて４日間攪拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）プラグで濾過した。溶媒を蒸発によって除去し、０．１１ｇ（５３％）の表題化合物を得た。
【００８６】
方法４
１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−カルボキサミド
【化１７】
【００８７】
（ａ）１［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボキサミド
ピペリジン−４−カルボキサミド（１．０５ｇ、８．２ｍｍｏｌ）、１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−オン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．；１３；２００３；２１９１〜２１９４を参照されたい、１．９４ｇ、８．２ｍｍｏｌ）、メタノール（３０ｍＬ）及び酢酸（３ｍＬ）の混合物に、（ポリスチリルメチル）トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（４．１ｍｍｏｌ／ｇ、１．９ｇ）を加えた。反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で５分間加熱した。樹脂を濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。２．８５ｇ（９９％）の１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４カルボキサミドを得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．６〜１．９（ｍ，６Ｈ）、２．１〜２．２（ｍ，１Ｈ）、２．７〜２．８（ｄ，２Ｈ）、２．９〜３．０（ｍ，３Ｈ）、３．４（ｔ，２Ｈ）、４．４（ｓ，１Ｈ）、５．７〜５．８（ｂ，１Ｈ）、６．２（ｂ，１Ｈ）、７．２（ｔ，２Ｈ）、７．２〜７．３（ｔ，４Ｈ）、７．４（ｄ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ３５０（Ｍ＋１）＋。
【００８８】
（ｂ）１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−カルボキサミドジヒドロクロリド
１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボキサミド（１．４ｇ、４．１ｍｍｏｌ）、ギ酸アンモニウム（０．７７ｇ、１２ｍｍｏｌ）及びエタノール（１５ｍＬ）を、マイクロ波合成用の２５ｍＬバイアルに充填した。水酸化パラジウムオンカーボン（０．５５ｇ）を加え、反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で２分間加熱した。出発物質を依然として含有している混合物を濾過し、濾液に、酢酸及びエタノールの混合物（１：１０）と共に水酸化パラジウムオンカーボンの他の部分を加えた。反応混合物を水素下（５バール）、ＲＴにて４時間攪拌し、次いでＣｅｌｉｔｅ（登録商標）プラグで濾過した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣をトルエン及び希釈した塩酸に分配した。水相を凍結乾燥し、次いで粘着性の残渣をトルエンと共に蒸発させて、水に再溶解し、次いで冷凍乾燥した。１．３５ｇ（６５％）の表題化合物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ １．６〜２．０（ｃｍ，６Ｈ）、２．２〜２．３（ｍ，１Ｈ）、２．８（ｍ，２Ｈ）、３．４（ｍ，１Ｈ）、３．９〜４．１（ｍ，４Ｈ）。
【００８９】
方法５
４−［（１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−イル）カルボニル］モルホリン
【化１８】
【００９０】
（ａ）４−（｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−イル）カルボニル）モルホリン
４−（ピペリジン−４−イルカルボニル）モルホリン（０．３０ｇ、１．２６ｍｍｏｌ）及び１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−オン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．；１３；２００３；２１９１〜２１９４を参照されたい、０．３０ｇ、１．５ｍｍｏｌ）を、メタノール（５ｍＬ）及び酢酸（０．１ｍＬ）の混合物に溶解した。（ポリスチリルメチル）トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（４．１ｍｍｏｌ／ｇ、０．３８ｇ）を加え、反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で１０分間加熱した。混合物を相分離器で濾過し、樹脂をメタノールで洗浄した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣を塩化メチレンに溶解した。溶液をＮａＨＣＯ３の飽和溶液で２度洗浄した。有機相を相分離器で濾過し、溶媒を蒸発によって除去した。生成物を、シリカゲル（メタノール／塩化メチレン、５％メタノール）上でクロマトグラフィーによって精製した。０．４４ｇ（８３％）の４−（｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−イル｝カルボニル）モルホリンを無色の油として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１．６〜１．７（ｍ，２Ｈ）、１．７〜１．９（ｍ，４Ｈ）、２．２（ｍ，１Ｈ）、２．７〜２．８（ｍ，２Ｈ）、２．８〜３．０（ｍ，４Ｈ）、３．３〜３．５（ｍ，３Ｈ）、３．５〜３．７（ｍ，６Ｈ）、４．４（ｓ，１Ｈ）、７．１〜７２（ｔ，２Ｈ）、７．２〜７．３（ｔ，４Ｈ）、７．４（ｄ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ４２０（Ｍ＋１）＋。
【００９１】
（ｂ）４−［（１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−イル）カルボニル］モルホリン
４−（｛１−［１−ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−イル｝カルボニル）モルホリン（０．４４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を、エタノールに溶解し、このようにして得た溶液に、水酸化パラジウムオンカーボン（０．１５ｇ）及びギ酸アンモニウム（０．２７ｇ、４．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、マイクロ波シングルノード加熱を使用して１２０℃で２分間加熱した。触媒を相分離器によって濾過し、濾過ケーキをエタノールで洗浄した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣をメタノール（１ｍＬ）及びＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解した。溶液を、陽イオン交換収着剤（Ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ−２；１０ｇ）に入れた。カラムをＴＨＦで洗浄し、次いで生成物をアンモニア飽和メタノールで溶出した。回収した画分の溶媒を蒸発によって除去し、０．１１ｇの表題化合物を無色の油として得た。１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：１．７〜１．８（ｍ，４Ｈ）、１．９〜２．０（ｍ，２Ｈ）、２．６〜２．９（ｍ，４Ｈ）、３．３〜３．４（ｍ，１Ｈ）、３．５〜３．７（ｍ，８Ｈ）、３．８〜４．０（ｍ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ ２５４（Ｍ＋１）＋。
【００９２】
［薬理学］
（ＦＬＩＰＲ及び結合アッセイに使用する細胞のトランスフェクション及び培養）
チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）Ｋ１細胞（ＡＴＣＣから得た）を、ヒトＮＫ２受容体（ｐＲｃ／ＣＭＶ中のｈＮＫ２Ｒ ｃＤＮＡ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）又はヒトＮＫ３受容体（ｐｃＤＮＡ３．１／Ｈｙｇｒｏ（＋）／ＩＲＥＳ／ＣＤ８中のｈＮＫ３Ｒ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ ＥＳＴ−Ｂｉｏ ＵＫ、Ａｌｄｅｒｌｅｙ Ｐａｒｋで修飾されたＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎベクター）で安定的にトランスフェクトした。細胞をカチオン性脂質試薬ＬＩＰＯＦＥＣＴＡＭＩＮＥ（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いてトランスフェクトし、ｈＮＫ２Ｒをトランスフェクトされた細胞については１ｍｇ／１ｍｌのジェネテシン（Ｇ４１８、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で、ｈＮＫ３Ｒをトランスフェクトされた細胞については５００μｇ／ｍｌのハイグロマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で選別を行った。蛍光活性化細胞選別機（ＦＡＣＳ）を用いて単細胞クローンを回収し、ＦＬＩＰＲアッセイ（下記を参照されたい）において機能性を試験し、培養液中で増殖し、将来使用するため凍結保存した。ヒトＮＫ１受容体を安定的にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞は、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｒ＆Ｄ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ ＵＳＡから得る。（肺組織からのＲＮＡ−ＰＣＲから得た）ヒトＮＫ１受容体ｃＤＮＡを、ｐＲｃＣＭＶ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にサブクローニングした。リン酸カルシウム及び１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８による選択によってトランスフェクションを行った。
【００９３】
ｈＮＫ１Ｒ、ｈＮＫ２Ｒ及びｈＮＫ３Ｒを安定的にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞を、加湿したインキュベーター中でＧｌｕｔａｍａｘ Ｉ、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＥＳＴ）を含有するＮｕｔ Ｍｉｘ Ｆ１２（ＨＡＭ）（ｈＮＫ１Ｒ及びｈＮＫ２Ｒ発現細胞のために２００μｇ／ｍｌジェネテシン、並びにｈＮＫ３Ｒ発現細胞のために５００μｇ／ｍｌハイグロマイシンを添加）中で５％ＣＯ２下培養した。Ｔ１７５フラスコ中で細胞を増殖させ、２０〜２５継代まで７０〜８０％コンフルエントに常法に従い継代した。
【００９４】
（ヒトＮＫ１／ＮＫ２／ＮＫ３受容体活性化を阻害する選択された試験化合物の活性の評価（ＦＬＩＰＲアッセイ））
ＮＫｌ／ＮＫ２／ＮＫ３受容体介在性の細胞内Ｃａ２＋増加として測定されるＮＫ１／ＮＫ２／ＮＫ３受容体活性化を阻害する本発明の化合物の活性を、下記の手順によって評価した。
【００９５】
ヒトＮＫ１、ＮＫ２又はＮＫ３受容体を安定的にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞を、ブラックウォール／クリアボトム９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ３９０４）中に３．５×１０４細胞／ウェルで播き、３７℃のＣＯ２インキュベーター中で通常の増殖培地中で約２４時間増殖させた。
【００９６】
ＦＬＩＰＲアッセイの前に、各９６ウェルプレートの細胞に、３７℃のＣＯ２インキュベーター中暗くした状態で１時間、Ｇｌｕｔａｍａｘ Ｉ、２２ｍＭのＨＥＰＥＳ、２．５ｍＭのプロベニシド（Ｓｉｇｍａ Ｐ−８７６１）及び０．０４％プルロニックＦ−１２７（Ｓｉｇｍａ Ｐ−２４４３）を有するＮｕｔ Ｍｉｘ Ｆ１２（ＨＡＭ）からなる充填培地中で、Ｃａ２＋感受性色素Ｆｌｕｏ−３（ＴＥＦＬＡＢＳ０１１６）４μＭを充填した。次いで、マルチチャネルピペットを使用して、アッセイ緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、２．５ｍＭのプロベニシド及び０．１％ＢＳＡを含有するＨａｎｋｓ平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ））中で細胞を３度洗浄し、最後の洗浄の終わりに１５０μｌとした。アッセイ緩衝液中の試験化合物の段階希釈（最終的ＤＭＳＯ濃度は１％未満に保つ）を、ＦＬＩＰＲ（蛍光イメージングプレートリーダー）によって各試験ウェルに自動的にピペットで移し、２分間のプレインキュベーション期間にＦＬＩＰＲ ＣＣＤカメラによって蛍光強度を記録した（励起４８８ｎｍ及び蛍光５３０ｎｍ）。次いで、サブスタンスＰ（ＮＫ１特異的）、ＮＫＡ（ＮＫ２特異的）、又はＰｒｏ−７−ＮＫＢ（ＮＫ３特異的）アゴニスト溶液（おおよそＥＣ６０濃度と同等の最終濃度）５０μ１を、ＦＬＩＰＲによってアッセイ緩衝液（試験化合物又はビヒクルを含有する）２００μｌをすでに含有する各ウェルに加え、蛍光をさらに２分間連続してモニターした。アゴニスト添加の後にピーク相対蛍光として反応を測定し、各化合物について１０時点での濃度反応曲線からＩＣ５０を計算した。次いで、ＩＣ５０を、下記の式によってｐＫＢ値に変換した。
Ｋｂ＝ＩＣ５０／１＋（アッセイ中で使用するアゴニストのＥＣ６０濃度／ＥＣ５０アゴニスト）
ｐＫＢ＝−ｌｏｇ ＫＢ
【００９７】
（ヒトＮＫ１／ＮＫ２／ＮＫ３受容体について化合物の解離定数（Ｋｉ）の決定（結合アッセイ））
膜は、下記の方法によってヒトＮＫ１、ＮＫ２又はＮＫ３受容体を安定的にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞から調製した。
【００９８】
細胞をＡｃｃｕｔａｓｅ（登録商標）溶液で剥離させ、５％ＦＢＳを含有するＰＢＳ中で遠心分離によって収集し、ＰＢＳで２度洗浄し、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ５０ｍＭ、ＫＣｌ３００ｍＭ、ＥＤＴＡ−Ｎ２１０ｍＭ（ｐＨ７．４）（４℃）中に１×１０８細胞／ｍｌの濃度まで再懸濁させた。細胞懸濁液をＵｌｔｒａＴｕｒｒａｘでホモジナイズした（３０秒、１２，０００ｒｐｍ）。ホモジネートを、３８，０００×ｇで遠心分離し（４℃）、ペレットをＴｒｉｓ−ＨＣｌ５０ｍＭ（ｐＨ７．４）中で再懸濁した。１度ホモジナイズを繰り返し、ホモジネートを氷上で４５分間インキュベートした。ホモジネートを再び上記のように遠心分離し、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ５０ｍＭ（ｐＨ７．４）中で再懸濁させた。この遠心分離ステップを全部で３度繰り返した。最後の遠心分離ステップの後に、ペレットをＴｒｉｓ−ＨＣｌ５０ｍＭ中で再懸濁させ、Ｄｕａｌ Ｐｏｔｔｅｒでホモジナイズし、均一溶液となるまで１０ストロークし、一定分量をタンパク質決定のために取り出した。膜を分注し、使用するまで−８０℃で冷凍した。
【００９９】
放射性リガンド結合アッセイを、９６ウェルのマイクロタイタープレート（非結合表面プレート、Ｃｏｒｎｉｎｇ３６００）中で、インキュベーション緩衝液（０．１％ＢＳＡ、４０ｍｇ／Ｌバシトラシン、ＥＤＴＡ完全非含有プロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤２０丸剤／Ｌ（Ｒｏｃｈｅ）及び３ｍＭのＭｎＣｌ２）を含有する５０ｍＭのトリス緩衝液（ｐＨ７．４、ＲＴ））中で室温にて行う（２００μｌ／ウェルの最終的なアッセイ容量）。逓増する量の試験化合物を加えることによって競合的結合曲線を作製した。試験化合物を溶解し、ＤＭＳＯに連続希釈した（アッセイ中に最終的ＤＭＳＯ濃度１．５％）。非特異的結合を測定するために非標識ＺＤ６０２１（非選択的ＮＫ−アンタゴニスト、１０μＭの最終濃度）５０μｌを加えた。全結合については、インキュベーション緩衝液中の１．５％ＤＭＳＯ（最終濃度）５０μｌを使用した。ｈＮＫ１ｒについての結合実験において、［３Ｈ−Ｓａｒ，Ｍｅｔ（Ｏ２）−サブスタンスＰ］（４ｎＭの最終濃度）を使用した。ｈＮＫ２ｒについては［３Ｈ−ＳＲ４８９６８］（３ｎＭの最終濃度）、及びｈＮＫ３ｒについての結合実験では［３Ｈ−ＳＲ１４２８０１］（３ｎＭの最終濃度）であった。放射性リガンド５０μｌ、ＤＭＳＯで希釈した試験化合物３μｌ、及びインキュベーション緩衝液４７μｌを、インキュベーション緩衝液１００μｌ中で細胞膜５〜１０μｇと混合し、マイクロプレートシェーカーで室温にて３０分間インキュベートした。
【０１００】
次いで、膜を急速濾過によってＦｉｌｔｅｒｍａｔ Ｂ（Ｗａｌｌａｃ）上に回収し、Ｍｉｃｒｏ９６Ｈａｒｖｅｓｔｅｒ（Ｓｋａｔｒｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｎｏｒｗａｙ）を使用して０．１％ＢＳＡ及び０．３％ポリエチレンイミン（Ｓｉｇｍａ Ｐ−３１４３）中に予浸した。ハーベスターによって氷冷の洗浄緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、４℃、３ｍＭのＭｎＣｌ２を含有）でフィルターを洗浄し、５０℃で３０〜６０分間乾燥した。Ｍｅｌｔｉｌｅｘシンチレーターシートを、Ｍｉｃｒｏｓｅａｌｅｒ（Ｗａｌｌａｃ、Ｆｉｎｌａｎｄ）を使用してフィルター上で融解し、フィルターをβ−液体シンチレーションカウンター（１４５０Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ、Ｗａｌｌａｃ、Ｆｉｎｌａｎｄ）中で計数した。
【０１０１】
Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式（ＢｉｏＣｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２：３０９９〜３１０８、１９７３）を使用して非標識リガンドのＫｉ値を計算した。式中、Ｌは、使用した放射性リガンドの濃度であり、Ｋｄは、飽和結合によって決定される受容体についての放射性リガンドの親和性である。
Ｅｘｃｅｌ Ｆｉｔを使用して、データを４パラメータの式に当てはめた。
Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋（Ｌ／Ｋｄ））
【０１０２】
（結果）
一般に、試験を行った本発明の化合物は、ＮＫ１受容体においてｐＫＢについて７〜８の範囲の統計的に有意なアンタゴニスト活性を示した。ＮＫ２受容体では、ｐＫＢについてのその範囲は７〜９であった。一般に、ＮＫ３受容体でのアンタゴニスト活性は、ｐＫＢについて７〜９であった。
【０１０３】
一般に、試験を行った本発明の化合物は、低レベルで統計的に有意なＣＹＰ３Ａ４阻害を示した。Ｂａｐｉｒｏら；Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．２９、３０〜３５（２００１）によって試験したＩＣ５０値は、一般に１０μＭ超であった。
【０１０４】
（ｈＥＲＧに対する活性）
ｈＥＲＧがコードするカリウムチャネルに対する式Ｉによる化合物の活性は、Ｋｉｓｓ Ｌら、Ａｓｓａｙ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ Ｔｅｃｈｎｏｌ．１（２００３）、１２７〜３５：「Ｈｉｇｈ ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｉｏｎ−ｃｈａｎｎｅｌ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ：ｐｌａｎａｒ−ａｒｒａｙ−ｂａｓｅｄ ｖｏｌｔａｇｅ ｃｌａｍｐ」によって決定することができる。
【０１０５】
一般に、試験を行った本発明の化合物は、低レベルで統計的に有意なｈＥＲＧ活性を示した。上記のように試験したＩＣ５０値は、一般に８μＭ超であった。
【０１０６】
（代謝安定性）
式Ｉによる化合物の代謝安定性を、下記で説明するように決定することができる。
【０１０７】
生体内変化率は、親化合物の代謝物形成又は消失率として測定することができる。実験計画は、低濃度の基質（通常１．０μＭ）の肝ミクロソーム（通常０．５ｍｇ／ｍｌ）とのインキュベーション、及び様々な時点（通常０分、５分、１０分、１５分、２０分、３０分、４０分）での一定分量の取り出しを伴う。試験化合物を通常ＤＭＳＯに溶解する。インキュベーション混合物中のＤＭＳＯ濃度は、通常０．１％以下であり、これはより多い溶媒は、いくつかのＣＹＰ４５０の活性を大幅に減少させる場合があるためである。インキュベーションは、１００ｍＭのリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４）中で３７℃にて行う。アセトニトリル又はメタノールを使用して反応を停止する。親化合物をＨＰＬＣ−ＭＳによって分析する。計算した半減期ｔ１／２から、固有クリアランス（Ｃｌｉｎｔ）を、ミクロソームタンパク質濃度及び肝臓の重量を考慮することによって推定する。
【０１０８】
一般に、本発明の化合物は、ｉｎ ｖｉｔｒｏの代謝安定性を高いレベルで有した。上記のように試験した固有クリアランス値は、２５μｌ／分／ｍｇタンパク質より一般に低かった。
【０１０９】
下記の表は、本発明の化合物の特性を例示する。
【０１１０】
【表９】
【０１１１】
［生物学的評価］
（スナネズミの足のタップ（ＮＫ１特異的試験モデル））
雄スナネズミ（６０〜８０ｇ）をＣｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ、Ｇｅｒｍａｎｙから購入する。到着後、温度及び湿度を制御した収容室内に１０匹の群で収容し、飼料及び水は自由に与える。動物を実験前に少なくとも７日間収容条件に順応させる。各動物は一度のみ使用し、実験後直ちに心臓穿刺又は致死量のペントバルビタールナトリウムによって安楽死させる。
【０１１２】
スナネズミをイソフルランで麻酔する。可能性があるＣＮＳ透過性ＮＫ１受容体アンタゴニストを、腹腔内、静脈内又は皮下に投与する。化合物を、アゴニストによる刺激の（典型的には３０〜１２０分）前に様々な時点で投与する。
【０１１３】
イソフルオランを使用してスナネズミを軽く麻酔し、ブレグマ上の皮膚を少し切開する。１０ｐｍｏｌのＡＳＭＳＰ、選択的ＮＫ１受容体アゴニストを、４ｍｍの針を有するハミルトンシリンジを使用して脳室内投与する（５μｌの量）。傷を閉じ、動物を小さいプラスチックケージに入れ、目覚めさせておく。ケージを１本の水を満たしたプラスチックチューブ上に置き、圧力トランスデューサーを介してコンピュータに接続する。後足のタップ数を記録する。
【０１１４】
（色素涙モデル（ＮＫ１特異的試験モデル））
いわゆる色素涙モデルを使用して、スナネズミにおいてｉｎ ｖｉｖｏで末梢のＮＫ１受容体でのアンタゴニスト活性を評価することができる（Ｂｒｉｓｔｏｗ ＬＪ、Ｙｏｕｎｇ Ｌ．Ｃｈｒｏｍｏｄａｃｒｙｏｒｒｈｅａ ａｎｄ ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅ ｈｉｎｄ ｐａｗ ｔａｐｐｉｎｇ：ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ａｎｄ ｃｅｎｔｒａｌ ｔａｃｈｙｋｉｎｉｎ ＮＫ１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｇｅｒｂｉｌｓ．Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ １９９４；２５３：２４５〜２５２）。簡単に言えば、麻酔されたスナネズミへのＮＫ１受容体アゴニストの全身（静脈内）投与は、ハーダー腺からのポルフィリン分泌による目からの赤／茶色の涙の豊富な分泌をもたらす。ＮＫ１受容体アンタゴニストは、ＮＫ１−アゴニストが引き起こす色素涙を遮断する。
【０１１５】
（糞便ペレット排出（ＮＫ２特異的試験モデル））
例えばＴｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（２００１）、５５９〜５６４頁に記載されているように、式Ｉの化合物のｉｎ ｖｉｖｏ活性（ＮＫ２）を、スナネズミを使用してＮＫ２受容体アゴニストが誘発する糞便ペレット排出を測定することによって決定することができる。
【０１１６】
（結腸直腸膨張モデル）
ラット及びマウスにおいて従前記載した通り、わずかに修正してスナネズミで結腸直腸膨張（ＣＲＤ）を行う（Ｔａｍｍｐｅｒｅ Ａ、Ｂｒｕｓｂｅｒｇ Ｍ、Ａｘｅｎｂｏｒｇ Ｊ、Ｈｉｒｓｃｈ Ｉ、Ｌａｒｓｓｏｎ Ｈ、Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ Ｅ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｓｅｕｄｏ−ａｆｆｅｃｔｉｖｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ｎｏｘｉｏｕｓ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｄｉｓｔｅｎｓｉｏｎ ｉｎ ｒａｔｓ ｂｙ ｍａｎｏｍｅｔｒｉｃ ｒｅｃｏｒｄｉｎｇｓ．Ｐａｉｎ ２００５；１１６：２２０〜２２６；Ａｒｖｉｄｓｓｏｎ Ｓ、Ｌａｒｓｓｏｎ Ｍ、Ｌａｒｓｓｏｎ Ｈ、Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ Ｅ、Ｍａｒｔｉｎｅｚ Ｖ．Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｖｉｓｃｅｒａｌ ｐａｉｎ−ｒｅｌａｔｅｄ ｐｓｅｕｄｏ−ａｆｆｅｃｔｉｖｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｄｉｓｔｅｎｓｉｏｎ ｉｎ ｍｉｃｅ ｂｙ ｉｎｔｒａｃｏｌｏｎｉｃ ｍａｎｏｍｅｔｒｉｃ ｒｅｃｏｒｄｉｎｇｓ．Ｊ Ｐａｉｎ ２００６；７：１０８〜１１８）。簡単に言えば、実験前にスナネズミをＢｏｌｌｍａｎｎケージに３日連続で１日３０〜６０分間慣らし、拘束ストレスによるモーションアーチファクトを減少させた。軽いイソフルラン麻酔（Ｆｏｒｅｎｅ（登録商標）、Ａｂｂｏｔｔ Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａ ＡＢ、Ｓｏｌｎａ、Ｓｗｅｄｅｎ）の間に、接続カテーテルを有する２ｃｍポリエチレンバルーン（自家製）を、バルーンの底から２ｃｍを肛門へ遠位結腸に挿入する。カテーテルをテープで尾に固定する。バルーンを圧力トランスデューサー（Ｐ−６０２、ＣＦＭ−ｋ３３、１００ｍｍＨｇ、Ｂｒｏｎｋｈｏｒｓｔ ＨＩ−ＴＥＣ、Ｖｅｅｎｅｎｄａｌ、Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）に接続する。スナネズミをＢｏｌｌｍａｎｎケージ内で実験の開始前少なくとも１５分間鎮静状態から回復させる。
【０１１７】
カスタマイズされたバロスタット（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ、Ｍｏｌｎｄａｌ、Ｓｗｅｄｅｎ）を使用して、空気圧膨張及びバルーン圧力制御を管理する。標準的コンピュータ上で作動するカスタマイズされたコンピュータソフトウェア（ＰｈａｒｍＬａｂ ｏｎ−ｌｉｎｅ４．０）を使用し、バロスタットを制御し、データ収集を行う。使用する膨張パラダイムは、５分間隔で３０秒パルス幅の１２回の繰り返される８０ｍｍＨｇの一過性膨張からなる。化合物又はそれらの各々のビヒクルを、ＣＲＤパラダイムの前に腹腔内（ｉ．ｐ．）注射として投与する。各々のスナネズミは、実験の間に少なくとも２日を開けて異なる時点でビヒクル及び化合物の両方を与えられる。したがって、各スナネズミは、それ自身のビヒクル対照の役割を果たす。
【０１１８】
アナログ入力チャネルを、個々の抽出率でサンプリングし、シグナルにデジタルフィルタリングを行う。バルーン圧力シグナルを、５０試料／ｓでサンプリングする。１Ｈｚの高域フィルターを使用して、収縮によってもたらされる圧力変化とバロスタットによって生じる徐々に変動する圧力とを区別する。圧力発生装置及び圧力トランスデューサーの間の空気流の抵抗は、動物の腹部収縮によって引き起こされる圧力変動をさらに増大する。カスタマイズされたコンピュータソフトウェア（ＰｈａｒｍＬａｂ ｏｎ−ｌｉｎｅ４．０）を使用して、高域フィルター処理したバルーン圧力シグナルの大きさを定量化する。高域フィルター処理したバルーン圧力シグナルの平均整流値（ＡＲＶ）を、パルス前（即ち、ベースライン反応）及びパルス中に３０秒間計算する。高域フィルター処理したバルーン圧力シグナルの大きさを計算する場合、各パルスの最初及び最後の秒を、これらが膨張及び収縮の間にバロスタットによって生じたアーチファクトシグナルを反映し、動物によって生じたものではないために除外する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物、薬学的及び薬理学的に許容されるその塩、並びに、式（Ｉ）の化合物のエナンチオマー及びその塩。
【化１】
（式中、
Ｒ１及びＲ２は、各々独立に、水素、メチル基又はエチル基を示し、Ｒ１及びＲ２はアミド窒素と一緒になって４員、５員若しくは６員環を形成しても良く、前記環は酸素原子を任意選択で含有しても良い。
Ｘは、ブロモ又はクロロである。）
【請求項２】
Ｒ１が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がエチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が水素である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２がメチルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２がエチルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１及びＲ２が、アミド窒素と一緒になってモルホリン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１及びＲ２が、アミド窒素と一緒になってアゼチジン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１及びＲ２が、アミド窒素と一緒になってピロリジン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１及びＲ２が、アミド窒素と一緒になってイソオキサゾリジン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ１及びＲ２が、アミド窒素と一緒になってオキサゾリジン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
（Ｓ）−エナンチオマーである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル｝（メチル）アミノ）−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
実質的に下記のｄ値で主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することを特徴とする、請求項１４に記載の化合物。
【表１】
【請求項１６】
イソプロパノール溶媒和物である、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１７】
実質的に下記のｄ値で主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することを特徴とする、請求項１６に記載の化合物。
【表２】
【請求項１８】
実質的に下記のｄ値で主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することを特徴とする、請求項１４に記載の化合物。
【表３】
【請求項１９】
メチルエチルケトン溶媒和物である、請求項１４に記載の化合物。
【請求項２０】
実質的に下記のｄ値で主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することを特徴とする、請求項１９に記載の化合物。
【表４】
【請求項２１】
Ｎ−［（２Ｓ）−４−｛３−［４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２−（４−フルオロフェニル）ブチル］−３−ブロモ−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド；
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド；
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミド；及び
３−ブロモ−Ｎ−（（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−｛３−［４−（モルホリン−４−イルカルボニル）ピペリジン−１−イル］アゼチジン−１−イル｝ブチル）−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
治療に使用するための、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３】
機能性消化管障害の治療用医薬の製造のための、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２４】
ＩＢＳの治療用医薬の製造のための、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２５】
機能性消化不良の治療用医薬の製造のための、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２６】
活性成分として請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体又は希釈剤とを含む製剤。
【請求項２７】
１−アゼチジン−３−イル−４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン；
４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン；
１−アゼチジン−３−イル−４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン；
１−アゼチジン−３−イル−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド；
１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボン酸；
１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド；
１−アゼチジン−３−イル−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド；
１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−カルボキサミド；
１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボキサミド；
１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−カルボキサミドジヒドロクロリド；
４−［（１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−イル）カルボニル］モルホリン；
４−（｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−イル｝カルボニル）モルホリン；及び
４−［（１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−イル）カルボニル］モルホリン
から選択される化合物。
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物、薬学的及び薬理学的に許容されるその塩、並びに、式（Ｉ）の化合物のエナンチオマー及びその塩。
【化１】
（式中、
Ｒ１及びＲ２は、各々独立に、水素、メチル基又はエチル基を示し、Ｒ１及びＲ２はアミド窒素と一緒になって４員、５員若しくは６員環を形成しても良く、前記環は酸素原子を任意選択で含有しても良い。
Ｘは、ブロモ又はクロロである。）
【請求項２】
Ｒ１が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がエチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が水素である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２がメチルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２がエチルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１及びＲ２が、アミド窒素と一緒になってモルホリン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１及びＲ２が、アミド窒素と一緒になってアゼチジン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１及びＲ２が、アミド窒素と一緒になってピロリジン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１及びＲ２が、アミド窒素と一緒になってイソオキサゾリジン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ１及びＲ２が、アミド窒素と一緒になってオキサゾリジン環を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
（Ｓ）−エナンチオマーである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル｝（メチル）アミノ）−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミドマレアートである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
実質的に下記のｄ値で主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することを特徴とする、請求項１４に記載の化合物。
【表１】
【請求項１６】
イソプロパノール溶媒和物である、請求項１４に記載の化合物。
【請求項１７】
実質的に下記のｄ値で主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することを特徴とする、請求項１６に記載の化合物。
【表２】
【請求項１８】
実質的に下記のｄ値で主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することを特徴とする、請求項１４に記載の化合物。
【表３】
【請求項１９】
メチルエチルケトン溶媒和物である、請求項１４に記載の化合物。
【請求項２０】
実質的に下記のｄ値で主要ピークを示すＸ線粉末回折パターンを提供することを特徴とする、請求項１９に記載の化合物。
【表４】
【請求項２１】
Ｎ−［（２Ｓ）−４−｛３−［４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−イル］アゼチジン−１−イル｝−２−（４−フルオロフェニル）ブチル］−３−ブロモ−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド；
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド；
１−｛１−［（３Ｓ）−４−［［３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］（メチル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）ブチル］アゼチジン−３−イル｝ピペリジン−４−カルボキサミド；及び
３−ブロモ−Ｎ−（（２Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−｛３−［４−（モルホリン−４−イルカルボニル）ピペリジン−１−イル］アゼチジン−１−イル｝ブチル）−Ｎ−メチル−５−（トリフルオロメチル）ベンズアミド
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
治療に使用するための、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２３】
機能性消化管障害の治療用医薬の製造のための、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２４】
ＩＢＳの治療用医薬の製造のための、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２５】
機能性消化不良の治療用医薬の製造のための、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項２６】
活性成分として請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体又は希釈剤とを含む製剤。
【請求項２７】
１−アゼチジン−３−イル−４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン−１−カルボキシレート；
４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン；
４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）−１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン；
１−アゼチジン−３−イル−４−（アゼチジン−１−イルカルボニル）ピペリジン；
１−アゼチジン−３−イル−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド；
１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボン酸；
１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド；
１−アゼチジン−３−イル−Ｎ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−カルボキサミド；
１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−カルボキサミド；
１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−カルボキサミド；
１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−カルボキサミドジヒドロクロリド；
４−［（１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−イル）カルボニル］モルホリン；
４−（｛１−［１−（ジフェニルメチル）アゼチジン−３−イル］ピペリジン−４−イル｝カルボニル）モルホリン；及び
４−［（１−アゼチジン−３−イルピペリジン−４−イル）カルボニル］モルホリン
から選択される化合物。
【公表番号】特表２００９−５３７５１６（Ｐ２００９−５３７５１６Ａ）
【公表日】平成２１年１０月２９日（２００９．１０．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５１０９２２（Ｐ２００９−５１０９２２）
【出願日】平成１９年５月１６日（２００７．５．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＳＥ２００７／０００４８２
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１３６３２４
【国際公開日】平成１９年１１月２９日（２００７．１１．２９）
【出願人】（５０８３３８８８７）アルビレオ アーベー (2)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年１０月２９日（２００９．１０．２９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年５月１６日（２００７．５．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＳＥ２００７／０００４８２
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１３６３２４
【国際公開日】平成１９年１１月２９日（２００７．１１．２９）
【出願人】（５０８３３８８８７）アルビレオ アーベー (2)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]