本発明は、肺癌および／または食道癌の発癌においてＯＩＰ５遺伝子が担う役割に関し、ＯＩＰ５遺伝子に対する二本鎖分子または、そのような二本鎖分子および抗体を含む組成物、ベクター、もしくは細胞を投与することによって、肺癌および／または食道癌を治療および／または予防するための方法を特徴とする。本発明はまた、ＯＩＰ５の検出によって、肺癌および／または食道癌を検出および／または診断するための方法、あるいは、肺癌および／または食道癌を有する患者の予後を評価／判定し、かつ／またはそのような患者における癌治療の有効性をモニターするための方法も特徴とする。さらに、ＯＩＰ５に関連する癌を治療および予防するための化合物を同定する方法も開示する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
肺癌および／または食道癌を診断するための方法であって、
（ａ）（ｉ）ＯＩＰ５遺伝子のｍＲＮＡの検出、
（ｉｉ）ＯＩＰ５遺伝子によってコードされるタンパク質の検出、および
（ｉｉｉ）ＯＩＰ５遺伝子によってコードされるタンパク質の生物活性の検出
からなる群より選択される方法のいずれか１つにより、対象由来の生物学的試料中のＯＩＰ５遺伝子の発現レベルを測定する工程；ならびに
（ｂ）該遺伝子の正常対照レベルと比較した、工程（ａ）で測定した発現レベルの上昇を、肺癌および／または食道癌の存在と関連付ける工程
を含む、方法。
【請求項２】
工程（ａ）で測定した発現レベルが正常対照レベルよりも少なくとも１０％高い、請求項１記載の方法。
【請求項３】
工程（ａ）で測定した発現レベルが、ＯＩＰ５タンパク質に対する抗体の結合を検出することによって測定される、請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記対象由来の生物学的試料が生検材料を含む、請求項１記載の方法。
【請求項５】
肺癌および／または食道癌を有する患者の予後を評価または判定する方法であって、
（ａ）患者由来の生物学的試料中のＯＩＰ５遺伝子の発現レベルを検出する工程；
（ｂ）検出された発現レベルを対照レベルと比較する工程；および
（ｃ）（ｂ）の比較に基づいて該患者の予後を判定する工程
を含む、方法。
【請求項６】
前記対照レベルが予後良好な対照レベルであり、該対照レベルと比較した発現レベルの上昇が予後不良と判定される、請求項５記載の方法。
【請求項７】
前記上昇が対照レベルよりも少なくとも１０％高い、請求項６記載の方法。
【請求項８】
（ａ）ＯＩＰ５遺伝子のｍＲＮＡの検出；
（ｂ）ＯＩＰ５遺伝子によってコードされるタンパク質の検出；および
（ｃ）ＯＩＰ５遺伝子によってコードされるタンパク質の生物活性の検出
からなる群より選択されるいずれか１つの方法によって発現レベルを測定する、請求項５記載の方法。
【請求項９】
前記患者由来の生物学的試料が生検材料を含む、請求項５記載の方法。
【請求項１０】
肺癌および／もしくは食道癌を診断するため、または肺癌および／もしくは食道癌に罹患している患者の予後を評価もしくは判定するためのキットであって、
（ａ）ＯＩＰ５遺伝子のｍＲＮＡを検出するための試薬；
（ｂ）ＯＩＰ５遺伝子によってコードされるタンパク質を検出するための試薬；および
（ｃ）ＯＩＰ５遺伝子によってコードされるタンパク質の生物活性を検出するための試薬
からなる群より選択される試薬を含む、キット。
【請求項１１】
前記試薬が前記遺伝子の遺伝子転写産物に対するプローブである、請求項１０記載のキット。
【請求項１２】
前記試薬が前記遺伝子によってコードされるタンパク質に対する抗体である、請求項１０記載のキット。
【請求項１３】
細胞に導入されるとＯＩＰ５遺伝子のインビボ発現および細胞増殖を阻害する単離された二本鎖分子であって、該分子がセンス鎖およびそれに相補的なアンチセンス鎖を含み、該鎖が互いにハイブリダイズして二本鎖分子を形成し、該センス鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ ：１３由来の連続した配列に相当するヌクレオチド配列を含む、単離された二本鎖分子。
【請求項１４】
前記センス鎖が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１および１２からなる群より選択される標的配列に相当する配列を含む、請求項１３記載の二本鎖分子。
【請求項１５】
約１９〜約２５ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドである、請求項１４記載の二本鎖分子。
【請求項１６】
介在一本鎖によって連結されたセンス鎖およびアンチセンス鎖の両方を含む単一ポリヌクレオチドからなる、請求項１３記載の二本鎖分子。
【請求項１７】
一般式
５’−［Ａ］−［Ｂ］−［Ａ’］−３’
を有し、式中、［Ａ］はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１および１２からなる群より選択される標的配列に相当する配列を含むセンス鎖であり、［Ｂ］は３〜２３ヌクレオチドからなる介在一本鎖であり、かつ［Ａ’］は［Ａ］に相補的な配列を含むアンチセンス鎖である、請求項１６記載の二本鎖分子。
【請求項１８】
請求項１３〜１７のいずれか一項記載の二本鎖分子をコードする、ベクター。
【請求項１９】
ＯＩＰ５遺伝子を発現する癌を治療または予防するための方法であって、請求項１３〜１７のいずれか一項記載の単離された二本鎖分子の少なくとも１つ、または請求項１８記載のベクターを投与する工程を含む、方法。
【請求項２０】
前記治療される癌が肺癌および／または食道癌である、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
ＯＩＰ５遺伝子を発現する癌を治療または予防するための組成物であって、請求項１３〜１７のいずれか一項記載の単離された二本鎖分子の少なくとも１つ、または請求項１８記載のベクターを含む、組成物。
【請求項２２】
前記治療される癌が肺癌および／または食道癌である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２３】
ＯＩＰ５遺伝子の過剰発現と関連した癌を治療もしくは予防するため、または該癌の細胞増殖を阻害するための候補化合物をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験化合物を、ＯＩＰ５遺伝子のポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチドと接触させる工程；
（ｂ）該ポリペプチドと該試験化合物との間の結合活性を検出する工程；および
（ｃ）該ポリペプチドに結合する試験化合物を選択する工程
を含む、方法。
【請求項２４】
ＯＩＰ５遺伝子の過剰発現と関連した癌を治療もしくは予防するため、または該癌の細胞増殖を阻害するための候補化合物をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験化合物を、ＯＩＰ５遺伝子のポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチドと接触させる工程；
（ｂ）工程（ａ）の該ポリペプチドの生物活性を検出する工程；および
（ｃ）試験化合物の非存在下で検出された、ＯＩＰ５遺伝子のポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチドの生物活性と比較して、該ポリペプチドの生物活性を抑制する該試験化合物を選択する工程
を含む、方法。
【請求項２５】
前記生物活性が前記細胞増殖の促進である、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
ＯＩＰ５遺伝子の過剰発現と関連した癌を治療もしくは予防するため、または該癌の細胞増殖を阻害するための候補化合物をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験化合物を、ＯＩＰ５遺伝子を発現している細胞と接触させる工程；および
（ｂ）試験化合物の非存在下で検出されたＯＩＰ５遺伝子の発現レベルと比較して、該発現レベルを低下させる該試験化合物を選択する工程
を含む、方法。
【請求項２７】
ＯＩＰ５遺伝子の過剰発現と関連した癌を治療もしくは予防するため、または該癌の細胞増殖を阻害するための候補化合物をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験化合物を、ＯＩＰ５遺伝子の転写調節領域および該転写調節領域の制御下で発現するレポーター遺伝子を含むベクターが導入された細胞と接触させる工程；
（ｂ）該レポーター遺伝子の発現または活性を測定する工程；ならびに
（ｃ）対照と比較して、該レポーター遺伝子の発現または活性のレベルを低下させる試験化合物を選択する工程
を含む、方法。
【請求項２８】
ＯＩＰ５遺伝子の過剰発現と関連した癌を治療もしくは予防するため、または該癌の細胞増殖を阻害するための候補化合物をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験化合物の存在下で、ＯＩＰ５ポリペプチドまたはその機能的同等物をＲａｆ１ポリペプチドまたはその機能的同等物と接触させる工程；
（ｂ）該ポリペプチド間の結合レベルを検出する工程；
（ｃ）工程（ｂ）で検出された結合レベルを、該試験化合物の非存在下で検出された結合レベルと比較する工程；および
（ｄ）工程（ｃ）において、試験化合物の非存在下で検出された結合レベルと比較して、結合レベルを低下させる該試験化合物を選択する工程
を含む、方法。
【請求項２９】
ＯＩＰ５の前記機能的同等物がＲａｆ１結合ドメインを含む、請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
ＯＩＰ遺伝子の過剰発現と関連した癌を治療もしくは予防するため、または該癌の細胞増殖を阻害するための候補化合物をスクリーニングする方法であって、
（ａ）リン酸化に適した条件下で、試験化合物の存在下において、ＯＩＰ５ポリペプチドまたはその機能的同等物をＲａｆ１ポリペプチドまたはその機能的同等物と接触させる工程；
（ｂ）ＯＩＰ５ポリペプチドのリン酸化レベルを検出する工程；および
（ｃ）試験化合物の非存在下で検出されたＯＩＰ５ポリペプチドのリン酸化レベルと比較して、該リン酸化レベルを低下させる該試験化合物を選択する工程
を含む、方法。
【請求項３１】
前記癌が肺癌および食道癌より選択される、請求項２３、２４、２６、２７、２８、または２９のいずれか一項記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図７Ｄ】

【図８】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図９Ｃ】

【図９Ｄ】

【公表番号】特表２０１２−５０１１６２（Ｐ２０１２−５０１１６２Ａ）
【公表日】平成２４年１月１９日（２０１２．１．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５０９３２７（Ｐ２０１１−５０９３２７）
【出願日】平成２１年８月２４日（２００９．８．２４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００９／００４０５６
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０２３８６４
【国際公開日】平成２２年３月４日（２０１０．３．４）
【出願人】（５０２２４０１１３）オンコセラピー・サイエンス株式会社 (142)
【Ｆターム（参考）】