皮膚角化促進剤
【課題】皮膚のバリア機能の改善、皮膚の老化防止に有用な新たな皮膚角化促進剤の提供。
【解決手段】真珠層由来ミネラルを含有する皮膚角化促進剤。真珠層由来のミネラル成分は、真珠から脱核した真珠層又は貝殻の真珠層を焼成後、酸又は精製水でミネラルを溶解させ、濾過、中和することにより得ることができる。真珠層由来のミネラルは、カルシウム、ナトリウム、マグネシウム、鉄、亜鉛および微量なミネラルを含有する。乾燥物あたりの主なミネラルの組成比は、カルシウムを５０〜９９質量％、より好ましくは７０〜９５質量％含有する。ナトリウムは０〜４０質量％、より好ましくは１〜１５質量％含有する。マグネシウムは０〜５質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％含有する。鉄は０〜１０質量％、より好ましくは０．５〜５質量％含有する。亜鉛は０〜５質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％含有する。
【解決手段】真珠層由来ミネラルを含有する皮膚角化促進剤。真珠層由来のミネラル成分は、真珠から脱核した真珠層又は貝殻の真珠層を焼成後、酸又は精製水でミネラルを溶解させ、濾過、中和することにより得ることができる。真珠層由来のミネラルは、カルシウム、ナトリウム、マグネシウム、鉄、亜鉛および微量なミネラルを含有する。乾燥物あたりの主なミネラルの組成比は、カルシウムを５０〜９９質量％、より好ましくは７０〜９５質量％含有する。ナトリウムは０〜４０質量％、より好ましくは１〜１５質量％含有する。マグネシウムは０〜５質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％含有する。鉄は０〜１０質量％、より好ましくは０．５〜５質量％含有する。亜鉛は０〜５質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％含有する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚の角化を促進し、皮膚の老化防止、皮膚のトラブル改善に有用な組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は体の最も外側に存在しており、細菌などの外界からの刺激に対するバリアとしての役割を有している。皮膚においては、表皮細胞が基底細胞から有棘細胞、顆粒細胞、さらには角層細胞へと約４週間かけて変化（角化）し、これらの細胞中で細胞間脂質やＮＭＦ（天然保湿因子）、さらにはコーニファイドエンベローブを形成することによってバリア機能を成し遂げている。
しかし、皮膚の老化等によってこの角化の速度は低下することが知られており、角化の速度が低下すると皮膚のくすみや肌荒れなどを引き起こすといわれている。この皮膚の角化を促進する物質としては、タイソウ抽出物やハス胚芽抽出物などの生薬抽出物などが報告されている（特許文献１，２を参照）。
【特許文献１】特開２００６−３１６０２８号公報
【特許文献２】特開２００２−６８９９３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかしながら、これら従来の角化促進成分の作用は十分ではなく、より優れた皮膚角化促進剤の開発が望まれている。
従って、本発明の目的は、皮膚のバリア機能の改善、皮膚の老化防止に有用な皮膚角化促進剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
そこで本発明者らは、皮膚の角化とともにコーニファイドエンベローブの成分として生成される蛋白質の遺伝子発現量を指標として皮膚角化促進剤を探索してきたところ、真珠層由来のミネラルにロリクリンの遺伝子発現量を増強する作用があり、角化促進剤として有用であることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は真珠層由来のミネラルを含有する皮膚角化促進剤を提供するものである。
【発明の効果】
【０００５】
本発明の皮膚角化促進剤は、皮膚の角化とともにコーニファイドエンベローブの成分として生成されるロリクリンの発現を強く促進し、かつ皮膚の角化を促進する。従って、本発明の皮膚角化促進剤を用いれば、皮膚の老化防止、皮膚のトラブル改善効果が得られる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
本発明に用いられる真珠層由来のミネラル成分は、真珠から脱核した真珠層又は貝殻の真珠層を焼成後、酸又は精製水でミネラルを溶解させ、濾過、中和することにより得ることができる。真珠層由来のミネラルは、カルシウム、ナトリウム、マグネシウム、鉄、亜鉛および微量なミネラルを含有する。乾燥物あたりの主なミネラルの組成比は、カルシウムを５０〜９９質量％、より好ましくは７０〜９５質量％含有する。ナトリウムは０〜４０質量％、より好ましくは１〜１５質量％含有する。マグネシウムは０〜５質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％含有する。鉄は０〜１０質量％、より好ましくは０．５〜５質量％含有する。亜鉛は０〜５質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％含有する。
【０００７】
後記実施例に示すように、真珠層由来のミネラルを添加すると、皮膚由来細胞はロリクリン遺伝子発現量を増大する。ここでロリクリンは、角質細胞の細胞膜を裏打ちするきわめて強靭で巨大な不溶性構造物である周辺帯の構成成分である。また、真珠層由来のミネラルには、３Ｄ皮膚モデルにおける角層形成を促進する作用を有する。従って、真珠層由来のミネラルは皮膚の角化促進剤として有用である。
【０００８】
本発明の皮膚角化促進剤は、経口、注射、外用のいずれでも薬効を発現するが、皮膚外用剤として用いるのが好ましい。皮膚外用剤には、皮膚化粧料、外用医薬部外品、医療用皮膚外用剤が含まれる。
【０００９】
また、本発明の皮膚角化促進剤には、上記成分の他に医薬品や化粧品の各種製剤において使用されている界面活性剤、油性成分、保湿剤、高分子化合物、紫外線吸収剤、抗炎症剤、殺菌剤、酸化防止剤、金属イオン封鎖剤、防腐剤、ビタミン類、色素、香料、水等を配合することができる。
【００１０】
上記界面活性剤としては、アニオン性、カチオン性、非イオン性、天然、合成のいずれの界面活性剤も使用できるが、皮膚に対する刺激性を考慮すると非イオン性のものを使用することが好ましい。非イオン性界面活性剤としては、例えばグリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、アルキルグリコシド等が挙げられる。
【００１１】
油性成分としては、油脂類、ロウ類、炭化水素類、高級脂肪酸類、高級アルコール類、エステル類、精油類、シリコーン油類などを挙げることができる。油脂類としては、例えば大豆油、ヌカ油、ホホバ油、アボガド油、アーモンド油、オリーブ油、カカオ油、ゴマ油、パーシック油、ヒマシ油、ヤシ油、ミンク油、牛脂、豚脂等の天然油脂、これらの天然油脂を水素添加して得られる硬化油及びミリスチン酸グリセリド、２−エチルヘキサン酸トリグリセリド等の合成トリグリセリド等が；ロウ類としては、例えばカルナバロウ、鯨ロウ、ミツロウ、ラノリン等が；炭化水素類としては、例えば流動パラフィン、ワセリン、パラフィンマイクロクリスタリンワックス、セレシン、スクワラン、ブリスタン等が；高級脂肪酸類としては、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ラノリン酸、イソステアリン酸等が；高級アルコール類としては、例えばラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ラノリンアルコール、コレステロール、２−ヘキシルデカノール等が；エステル類としては、例えばオクタン酸セチル、オクタン酸トリグリセライド、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、アジピン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、オレイン酸デシル、イソステアリン酸コレステロール、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル等が；精油類としては、例えばハッカ油、ジャスミン油、ショウ脳油、ヒノキ油、トウヒ油、リュウ油、テレピン油、ケイ皮油、ベルガモット油、ミカン油、ショウブ油、パイン油、ラベンダー油、ベイ油、クローブ油、ヒバ油、バラ油、ユーカリ油、レモン油、タイム油、ペパーミント油、ローズ油、セージ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ボルネオール、リナロール、ゲラニオール、カンファー、チモール、スピラントール、ピネン、リモネン、テルペン系化合物等が；シリコーン油類としては、例えばジメチルポリシロキサン等が挙げられる。これら上述の油性成分は一種又は二種以上を組み合わせて使用することができる。本発明においては、このうち特にミリスチン酸グリセリド、２−エチルヘキサン酸トリグリセリド、ラノリン、流動パラフィン、ワセリン、パラフィンマイクロクリスタリンワックス、スクワラン、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、リノール酸、リノレン酸、イソステアリン酸、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、コレステロール、オクタン酸セチル、オクタン酸トリグリセライド、ミリスチレン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸コレステロール、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル、ハッカ油、トウヒ油、ケイ皮油、ローズ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ゲラニオール、ピネン、リモネン、ジメチルポリシロキサンを使用することが好ましい。
【００１２】
本発明の皮膚角化促進剤には、さらに下記のような成分を配合することができるが、その成分もこれらに限定されるものではない。
（ａ）色素類；黄色４号、青色１号、黄色２０２号等の厚生省令に定められたタール色素別表Ｉ及びIIの色素、クロロフィル、リボフラビン、クロシン、紅花、アントラキノン等の食品添加物として認められている天然色素等。
（ｂ）ビタミン類；ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ等。
（ｃ）その他；殺菌剤、防腐剤、その他製剤上必要な成分等。
【００１３】
本発明の皮膚角化促進剤は、前記必須成分に必要に応じて前記任意成分を加え、常法に従って製造することができ、クリーム、乳液、化粧水等の形態とすることができる。
【００１４】
本発明の皮膚角化促進剤中には、真珠層由来ミネラルを成分1日投与量（乾燥物換算）として１μｇ〜１g、特に１０μｇ〜１００mg配合するのが好ましい。また、本発明の皮膚角化促進剤中に、真珠層由来ミネラルは１０μｇ〜１０ｇ／１００ｇ、特に４０μｇ〜１g／１００ｇ含有するのが好ましい。
【実施例】
【００１５】
次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明する。
【００１６】
実施例１
（真珠層由来ミネラルの製造）
アコヤ貝真珠を脱核して、真珠層を取り出す。次に真珠層を破砕して粉末化し、真珠層を焼成する（１０５０℃、２時間）。水０．８５kgに対して、焼成物２ｇを加え、室温で６時間撹拌する。濾過して不溶分を除去し、濾液に希塩酸を加え中和することにより、アコヤ貝のミネラル溶液を得た。
得られたミネラル溶液には８０ｍｇ／１００ｍＬのカルシウムが含有されており、ミネラルの組成比は、カルシウム：ナトリウム：マグネシウム：鉄：亜鉛＝８９：８：０．２：３：０．１であった。
【００１７】
実施例２
＜試験方法＞
４系代目の人包皮由来ケラチノサイトを６ウェルのプレート１ウェルあたり２．２５×１０5個播種し、３日間培養（３７℃、９５％Ａｉｒ、５％ＣＯ2）して７０〜８０％コンフルエントにする。真珠層由来ミネラルを加えて２４時間インキュベートし、その後、上清を捨てて、細胞を完全に溶解する。全ＲＮＡを抽出し、ＲＮＡを逆転写してｃＤＮＡを作成し、定量リアルタイムＰＣＲを用いて角化に関連するタンパク質の遺伝子発現量を検出する。
【００１８】
＜結果＞
結果を図１に示す。その結果、真珠ミネラルはロリクリンの遺伝子発現量を増加させることが明らかとなった。
【００１９】
実施例３
＜試験方法＞
ケラチノサイトを１２ウェルのプレートに播種し、アスコルビン酸を添加した培地で３日間培養（３７℃、９５％Ａｉｒ、５％ＣＯ2）する。真珠層由来ミネラル及び塩化カルシウムを不織布に馴染ませた後、１２ウェルの細胞培養表面に乗せて培養する。播種１０日後に表皮組織をサンプリングし、固定後パラフィン切片を作成し、ＨＥ染色して標本を作製した。
＜結果＞
結果を図２に示す。その結果、塩化カルシウムを添加したものと比較し、真珠層由来ミネラルを添加した皮膚は、すでに角層下層の形成が始まっていることが確認できた。このことより真珠層由来ミネラルに角化促進効果のあることがわかる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】真珠層由来ミネラルによるロリクリンの遺伝子発現量変化を示す図である。
【図２】３Ｄ皮膚モデルを用いた角化促進結果（Ａ：真珠ミネラル、Ｂ：塩化カルシウム）を示す図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚の角化を促進し、皮膚の老化防止、皮膚のトラブル改善に有用な組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は体の最も外側に存在しており、細菌などの外界からの刺激に対するバリアとしての役割を有している。皮膚においては、表皮細胞が基底細胞から有棘細胞、顆粒細胞、さらには角層細胞へと約４週間かけて変化（角化）し、これらの細胞中で細胞間脂質やＮＭＦ（天然保湿因子）、さらにはコーニファイドエンベローブを形成することによってバリア機能を成し遂げている。
しかし、皮膚の老化等によってこの角化の速度は低下することが知られており、角化の速度が低下すると皮膚のくすみや肌荒れなどを引き起こすといわれている。この皮膚の角化を促進する物質としては、タイソウ抽出物やハス胚芽抽出物などの生薬抽出物などが報告されている（特許文献１，２を参照）。
【特許文献１】特開２００６−３１６０２８号公報
【特許文献２】特開２００２−６８９９３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかしながら、これら従来の角化促進成分の作用は十分ではなく、より優れた皮膚角化促進剤の開発が望まれている。
従って、本発明の目的は、皮膚のバリア機能の改善、皮膚の老化防止に有用な皮膚角化促進剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
そこで本発明者らは、皮膚の角化とともにコーニファイドエンベローブの成分として生成される蛋白質の遺伝子発現量を指標として皮膚角化促進剤を探索してきたところ、真珠層由来のミネラルにロリクリンの遺伝子発現量を増強する作用があり、角化促進剤として有用であることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は真珠層由来のミネラルを含有する皮膚角化促進剤を提供するものである。
【発明の効果】
【０００５】
本発明の皮膚角化促進剤は、皮膚の角化とともにコーニファイドエンベローブの成分として生成されるロリクリンの発現を強く促進し、かつ皮膚の角化を促進する。従って、本発明の皮膚角化促進剤を用いれば、皮膚の老化防止、皮膚のトラブル改善効果が得られる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
本発明に用いられる真珠層由来のミネラル成分は、真珠から脱核した真珠層又は貝殻の真珠層を焼成後、酸又は精製水でミネラルを溶解させ、濾過、中和することにより得ることができる。真珠層由来のミネラルは、カルシウム、ナトリウム、マグネシウム、鉄、亜鉛および微量なミネラルを含有する。乾燥物あたりの主なミネラルの組成比は、カルシウムを５０〜９９質量％、より好ましくは７０〜９５質量％含有する。ナトリウムは０〜４０質量％、より好ましくは１〜１５質量％含有する。マグネシウムは０〜５質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％含有する。鉄は０〜１０質量％、より好ましくは０．５〜５質量％含有する。亜鉛は０〜５質量％、より好ましくは０．０１〜１質量％含有する。
【０００７】
後記実施例に示すように、真珠層由来のミネラルを添加すると、皮膚由来細胞はロリクリン遺伝子発現量を増大する。ここでロリクリンは、角質細胞の細胞膜を裏打ちするきわめて強靭で巨大な不溶性構造物である周辺帯の構成成分である。また、真珠層由来のミネラルには、３Ｄ皮膚モデルにおける角層形成を促進する作用を有する。従って、真珠層由来のミネラルは皮膚の角化促進剤として有用である。
【０００８】
本発明の皮膚角化促進剤は、経口、注射、外用のいずれでも薬効を発現するが、皮膚外用剤として用いるのが好ましい。皮膚外用剤には、皮膚化粧料、外用医薬部外品、医療用皮膚外用剤が含まれる。
【０００９】
また、本発明の皮膚角化促進剤には、上記成分の他に医薬品や化粧品の各種製剤において使用されている界面活性剤、油性成分、保湿剤、高分子化合物、紫外線吸収剤、抗炎症剤、殺菌剤、酸化防止剤、金属イオン封鎖剤、防腐剤、ビタミン類、色素、香料、水等を配合することができる。
【００１０】
上記界面活性剤としては、アニオン性、カチオン性、非イオン性、天然、合成のいずれの界面活性剤も使用できるが、皮膚に対する刺激性を考慮すると非イオン性のものを使用することが好ましい。非イオン性界面活性剤としては、例えばグリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、アルキルグリコシド等が挙げられる。
【００１１】
油性成分としては、油脂類、ロウ類、炭化水素類、高級脂肪酸類、高級アルコール類、エステル類、精油類、シリコーン油類などを挙げることができる。油脂類としては、例えば大豆油、ヌカ油、ホホバ油、アボガド油、アーモンド油、オリーブ油、カカオ油、ゴマ油、パーシック油、ヒマシ油、ヤシ油、ミンク油、牛脂、豚脂等の天然油脂、これらの天然油脂を水素添加して得られる硬化油及びミリスチン酸グリセリド、２−エチルヘキサン酸トリグリセリド等の合成トリグリセリド等が；ロウ類としては、例えばカルナバロウ、鯨ロウ、ミツロウ、ラノリン等が；炭化水素類としては、例えば流動パラフィン、ワセリン、パラフィンマイクロクリスタリンワックス、セレシン、スクワラン、ブリスタン等が；高級脂肪酸類としては、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ラノリン酸、イソステアリン酸等が；高級アルコール類としては、例えばラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ラノリンアルコール、コレステロール、２−ヘキシルデカノール等が；エステル類としては、例えばオクタン酸セチル、オクタン酸トリグリセライド、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、アジピン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、オレイン酸デシル、イソステアリン酸コレステロール、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル等が；精油類としては、例えばハッカ油、ジャスミン油、ショウ脳油、ヒノキ油、トウヒ油、リュウ油、テレピン油、ケイ皮油、ベルガモット油、ミカン油、ショウブ油、パイン油、ラベンダー油、ベイ油、クローブ油、ヒバ油、バラ油、ユーカリ油、レモン油、タイム油、ペパーミント油、ローズ油、セージ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ボルネオール、リナロール、ゲラニオール、カンファー、チモール、スピラントール、ピネン、リモネン、テルペン系化合物等が；シリコーン油類としては、例えばジメチルポリシロキサン等が挙げられる。これら上述の油性成分は一種又は二種以上を組み合わせて使用することができる。本発明においては、このうち特にミリスチン酸グリセリド、２−エチルヘキサン酸トリグリセリド、ラノリン、流動パラフィン、ワセリン、パラフィンマイクロクリスタリンワックス、スクワラン、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、リノール酸、リノレン酸、イソステアリン酸、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、コレステロール、オクタン酸セチル、オクタン酸トリグリセライド、ミリスチレン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸コレステロール、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル、ハッカ油、トウヒ油、ケイ皮油、ローズ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ゲラニオール、ピネン、リモネン、ジメチルポリシロキサンを使用することが好ましい。
【００１２】
本発明の皮膚角化促進剤には、さらに下記のような成分を配合することができるが、その成分もこれらに限定されるものではない。
（ａ）色素類；黄色４号、青色１号、黄色２０２号等の厚生省令に定められたタール色素別表Ｉ及びIIの色素、クロロフィル、リボフラビン、クロシン、紅花、アントラキノン等の食品添加物として認められている天然色素等。
（ｂ）ビタミン類；ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ等。
（ｃ）その他；殺菌剤、防腐剤、その他製剤上必要な成分等。
【００１３】
本発明の皮膚角化促進剤は、前記必須成分に必要に応じて前記任意成分を加え、常法に従って製造することができ、クリーム、乳液、化粧水等の形態とすることができる。
【００１４】
本発明の皮膚角化促進剤中には、真珠層由来ミネラルを成分1日投与量（乾燥物換算）として１μｇ〜１g、特に１０μｇ〜１００mg配合するのが好ましい。また、本発明の皮膚角化促進剤中に、真珠層由来ミネラルは１０μｇ〜１０ｇ／１００ｇ、特に４０μｇ〜１g／１００ｇ含有するのが好ましい。
【実施例】
【００１５】
次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明する。
【００１６】
実施例１
（真珠層由来ミネラルの製造）
アコヤ貝真珠を脱核して、真珠層を取り出す。次に真珠層を破砕して粉末化し、真珠層を焼成する（１０５０℃、２時間）。水０．８５kgに対して、焼成物２ｇを加え、室温で６時間撹拌する。濾過して不溶分を除去し、濾液に希塩酸を加え中和することにより、アコヤ貝のミネラル溶液を得た。
得られたミネラル溶液には８０ｍｇ／１００ｍＬのカルシウムが含有されており、ミネラルの組成比は、カルシウム：ナトリウム：マグネシウム：鉄：亜鉛＝８９：８：０．２：３：０．１であった。
【００１７】
実施例２
＜試験方法＞
４系代目の人包皮由来ケラチノサイトを６ウェルのプレート１ウェルあたり２．２５×１０5個播種し、３日間培養（３７℃、９５％Ａｉｒ、５％ＣＯ2）して７０〜８０％コンフルエントにする。真珠層由来ミネラルを加えて２４時間インキュベートし、その後、上清を捨てて、細胞を完全に溶解する。全ＲＮＡを抽出し、ＲＮＡを逆転写してｃＤＮＡを作成し、定量リアルタイムＰＣＲを用いて角化に関連するタンパク質の遺伝子発現量を検出する。
【００１８】
＜結果＞
結果を図１に示す。その結果、真珠ミネラルはロリクリンの遺伝子発現量を増加させることが明らかとなった。
【００１９】
実施例３
＜試験方法＞
ケラチノサイトを１２ウェルのプレートに播種し、アスコルビン酸を添加した培地で３日間培養（３７℃、９５％Ａｉｒ、５％ＣＯ2）する。真珠層由来ミネラル及び塩化カルシウムを不織布に馴染ませた後、１２ウェルの細胞培養表面に乗せて培養する。播種１０日後に表皮組織をサンプリングし、固定後パラフィン切片を作成し、ＨＥ染色して標本を作製した。
＜結果＞
結果を図２に示す。その結果、塩化カルシウムを添加したものと比較し、真珠層由来ミネラルを添加した皮膚は、すでに角層下層の形成が始まっていることが確認できた。このことより真珠層由来ミネラルに角化促進効果のあることがわかる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】真珠層由来ミネラルによるロリクリンの遺伝子発現量変化を示す図である。
【図２】３Ｄ皮膚モデルを用いた角化促進結果（Ａ：真珠ミネラル、Ｂ：塩化カルシウム）を示す図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
真珠層由来のミネラルを含有する皮膚角化促進剤。
【請求項２】
真珠層由来のミネラルを含有するロリクリン発現促進剤。
【請求項１】
真珠層由来のミネラルを含有する皮膚角化促進剤。
【請求項２】
真珠層由来のミネラルを含有するロリクリン発現促進剤。
【図１】
【図２】
【図２】
【公開番号】特開２０１０−１０５９２４（Ｐ２０１０−１０５９２４Ａ）
【公開日】平成２２年５月１３日（２０１０．５．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−２７６９８９（Ｐ２００８−２７６９８９）
【出願日】平成２０年１０月２８日（２００８．１０．２８）
【出願人】（５０２２８５４５７）学校法人順天堂 (64)
【出願人】（０００１６６９５９）御木本製薬株式会社 (66)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年５月１３日（２０１０．５．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１０月２８日（２００８．１０．２８）
【出願人】（５０２２８５４５７）学校法人順天堂 (64)
【出願人】（０００１６６９５９）御木本製薬株式会社 (66)
【Ｆターム（参考）】
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