肝細胞成長因子イントロン融合蛋白
イントロンコード部分を含有する肝細胞成長因子（ＨＧＦ）のアイソフォームを包含するリガンドのアイソフォーム、及び、ＨＧＦアイソフォームを含有する医薬組成物を提供する。ＨＧＦリガンドアイソフォーム及びそれを含有する組成物は癌及び他の血管形成性の疾患のような疾患の治療方法において使用できる。本発明のアイソフォームは、ＨＧＦリガンドのＫ４ドメインの全て又は一部分を含有する単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォームである。一部分はＫ４ドメインにより呈される活性を付与するために十分であり、或いは、そこに由来する少なくとも１０、１５、２０、２５、３０以上のアミノ酸を含有する。これ等に包含されるものはイントロン融合蛋白であるＨＧＦアイソフォームポリペプチドである。単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォームはまたＳｅｒＰドメインの全て又は部分を包含できる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＨＧＦリガンドのＫ４ドメインの全て又は一部分を含む単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォームであって、該ＨＧＦポリペプチドがイントロン融合蛋白である、アイソフォーム。
【請求項２】
前記ＨＧＦポリペプチドが同種のＨＧＦ遺伝子のイントロン１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６及び１７から選択されるイントロンの全て又は一部分を包含するヌクレオチドの配列によりコードされる請求項１記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項３】
前記同種のＨＧＦ遺伝子の配列が配列番号１に示されるか；又はその対立遺伝子又は種変異体である請求項１又は請求項２記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項４】
前記ＨＧＦポリペプチドが、配列番号１の相当する部分によりコードされるアミノ酸の配列とその完全長にわたって少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する請求項３記載の単離されたＨＧＦポリペプチド。
【請求項５】
前記同種のＨＧＦポリペプチドが、配列番号１によりコードされるアミノ酸の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する請求項３記載の単離されたＨＧＦポリペプチド。
【請求項６】
Ｎ末端ドメインの全て又は部分、Ｋ１ドメインの全て又は部分、Ｋ２ドメインの全て又は部分又はＫ３ドメインの全て又は部分、あるいはその組合せを更に含有する請求項１〜５の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項７】
前記イントロンがイントロン１１の全て又は一部分である請求項２〜６の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項８】
前記ポリペプチドがイントロン１１によりコードされるアミノ酸少なくとも１つに作動可能に連結している請求項１〜７の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項９】
前記ポリペプチドがイントロン１１によりコードされるアミノ酸３つを含む請求項８記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１０】
前記ＨＧＦポリペプチドが配列番号１０、１２、１８又は２０の何れかに記載のアミノ酸の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する請求項９記載の単離されたＨＧＦポリペプチド。
【請求項１１】
配列番号１０、１２、１８又は２０の何れかに記載のアミノ酸の配列を含むか、又はその対立遺伝子変異体である請求項９又は１０記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１２】
前記対立遺伝子変異体が配列番号１６に記載の対立遺伝子変異のアミノ酸１つ以上を含む請求項１１記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１３】
前記ポリペプチドが配列番号１０、１２、１８又は２０の何れかに記載のアミノ酸と同数のアミノ酸を含有する請求項９〜１２の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１３】
Ｓｅｐドメインの全てまたは一部をさらに含む、請求項１〜６の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１４】
前記イントロンがイントロン１３の全て又は部分である請求項１３記載の単離されたＨＧＦポリペプチド。
【請求項１５】
前記ＨＧＦポリペプチドが配列番号１４に記載のアミノ酸の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する請求項１４記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１６】
配列番号１４に記載のアミノ酸の配列を含むか、又はその対立遺伝子又は種変異体である請求項１４又は１５記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１７】
前記変異体が配列番号１６に記載の対立遺伝子変異のアミノ酸１つ以上を含む請求項１６記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１８】
前記ポリペプチドが配列番号１４に記載するアミノ酸と同数のアミノ酸を含有する請求項１５〜１７の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１９】
前記ポリペプチドが同種のＨＧＦポリペプチドの拮抗剤である請求項１〜１８の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２０】
前記ポリペプチドがＭＥＴ受容体に結合する請求項１９記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２１】
前記ポリペプチドが有糸分裂誘発、形態形成及び遊走誘発の１つ以上から選択されるＭＥＴ媒介活性を抑制する請求項２０記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２２】
前記ポリペプチドが血管形成を抑制する請求項１〜１８の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２３】
前記ポリペプチドがグリコサミノグリカンに結合する請求項２２記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２４】
前記グリコサミノグリカンがヘパリンスルフェートである請求項２３記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２５】
前記ポリペプチドが血管形成分子に結合する請求項２２記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２６】
前記血管形成分子がＡＴＰシンターゼ、アンジオモチン、αｖβ３インテグリン、アネキシンＩＩ、ＭＥＴ、ＶＥＧＦＲ及びＦＧＦＲから選択される請求項２５記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２７】
前記ポリペプチドが同種のＨＧＦ、ＦＧＦ−２又はＶＥＧＦにより誘導される血管形成を抑制する請求項２２〜２６の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２８】
前記ポリペプチドが拮抗性であり、そして血管形成を抑制する請求項１〜２７の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２９】
請求項１〜２８の何れかに記載のＨＧＦポリペプチドアイソフォームを含む医薬組成物。
【請求項３０】
同種のＨＧＦポリペプチドに拮抗するために有効なポリペプチドの量を含む請求項２９記載の組成物。
【請求項３１】
同種のＨＧＦと拮抗することが、有糸分裂誘発、遊走誘発及び形態形成の何れかの１つ以上から選択されるＭＥＴ媒介活性１つ以上を抑制する請求項３０記載の組成物。
【請求項３２】
血管形成を抑制するために有効な前記ポリペプチドの量を含む請求項２９記載の組成物。
【請求項３３】
前記ポリペプチドが同種のＨＧＦ、ＦＧＦ−２又はＶＥＧＦにより誘導される血管形成を抑制する請求項３２記載の組成物。
【請求項３４】
抗癌剤及び／又は抗血管形成剤を更に含む請求項２９〜３３の何れかに記載の組成物。
【請求項３５】
請求項１〜２８の何れかのＨＧＦポリペプチドをコードする核酸分子。
【請求項３６】
同種のＨＧＦ遺伝子のイントロン１つの少なくともすべて又は部分及びエクソンを含むがイントロン５は含有しない核酸分子。
【請求項３７】
請求項３６記載の核酸分子であって、下記特徴：
前記イントロンが終止コドンを含有し；
前記核酸分子がエクソンイントロン接合部にわたるオープンリーディングフレームをコードし；そして、
該オープンリーディングフレームが該イントロン内の終止コドンにおいて終了する、
核酸分子。
【請求項３８】
前記イントロンが、コードされたポリペプチドのアミノ酸１つ以上をコードする請求項３７記載の核酸分子。
【請求項３９】
前記イントロンがイントロン１１の全て又は一部分である請求項３８記載の核酸分子。
【請求項４０】
配列番号９、１１、１７及び１９の何れか１つに記載のヌクレオチドの配列又はその対立遺伝子又は種変異体を含む請求項３９記載の核酸分子。
【請求項４１】
前記対立遺伝子変異体が配列番号１５に記載の対立遺伝子変異の何れか１つである請求項４０記載の核酸分子。
【請求項４２】
前記終止コドンが前記イントロン中の第１のコドンである請求項３７記載の核酸分子。
【請求項４３】
前記イントロンがイントロン１３の全て又は一部分である請求項４２記載の核酸分子。
【請求項４４】
配列番号１３に記載のヌクレオチドの配列又はその対立遺伝子変異体を含む請求項４３記載の核酸分子。
【請求項４５】
前記対立遺伝子変異体が配列番号１５に記載の対立遺伝子変異の何れか１つである請求項４４記載の核酸分子。
【請求項４６】
核酸分子であって、該核酸分子が以下：
ａ）配列番号９、１１、１３、１７、１９の何れか１つに記載のヌクレオチドの配列およびその対立遺伝子変異体又は種を含む核酸分子；
ｂ）請求項１記載のポリペプチドをコードし、そして、配列番号９、１１、１３、１７又は１９の何れかと少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する核酸分子；
ｃ）配列番号９、１１、１３、１７又は１９の何れかに記載のヌクレオチドの配列を含む核酸分子に対して、自身の完全長の少なくとも７０％にわたって中又は高ストリンジェンシーの条件下にハイブリダイズする核酸であって、ここでコードされるポリペプチドはＫ４ドメインを含有し、そして、イントロン由来のコドン少なくとも１つを含有する、核酸；
ｄ）上記ａ）、ｂ）又はｃ）の縮重コドンを含む核酸分子；及び、
ｅ）ＨＧＦ遺伝子のスプライシング変異体である核酸分子であって、該核酸分子がイントロン５以外のイントロンの全て又は一部分を包含する、核酸分子；
から選択される、核酸分子。
【請求項４７】
請求項３５〜４６の何れか１項に記載の核酸分子によりコードされるポリペプチド。
【請求項４８】
請求項３５〜４６の何れか１項に記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項４９】
哺乳類発現ベクターである請求項４８記載のベクター。
【請求項５０】
アデノウィルスベクター、アデノ関連ウィルスベクター、ＥＢＶ、ＳＶ４０、サイトメガロウィルスベクター、ワクシニアウィルスベクター、ヘルペスウィルスベクター、レトロウィルスベクター、レンチウィルスベクター又は人工染色体から選択される請求項４８記載のベクター。
【請求項５１】
エピソーム性であるか、又は、自身が導入される細胞の染色体内に組み込まれる請求項５０記載のベクター。
【請求項５２】
請求項４８〜５１の何れかに記載のベクターを含む細胞。
【請求項５３】
請求項３５〜４６の何れかに記載の核酸分子を対象に投与することを含むＨＧＦ媒介疾患の治療方法。
【請求項５４】
前記核酸分子が投与のためのベクターに導入される請求項５３記載の治療方法。
【請求項５５】
前記ベクターが発現ベクターである請求項５４記載の治療方法。
【請求項５６】
前記ベクターがエピソーム性である請求項５５記載の治療方法。
【請求項５７】
前記発現ベクターがアデノウィルスベクター、アデノ関連ウィルスベクター、ＥＢＶ、ＳＶ４０、サイトメガロウィルスベクター、ワクシニアウィルスベクター、ヘルペスウィルスベクター、レトロウィルスベクター、レンチウィルスベクター又は人工染色体から選択される請求項５４〜５６記載の治療方法。
【請求項５８】
前記核酸がインビボ又はエクスビボで投与される請求項５３〜５７の何れかに記載の治療方法。
【請求項５９】
エクスビボの治療がインビトロで細胞内に前記核酸を投与すること、及びその後の前記対象内への該細胞の投与を含む、請求項５８記載の治療方法。
【請求項６０】
前記細胞が適当なドナーに由来するか、又は、治療すべき対象に由来する請求項５９記載の治療方法。
【請求項６１】
前記対象がヒトである請求項５３〜６０に記載の治療方法。
【請求項６２】
請求項３５〜４６の何れかに記載の核酸分子、又は、請求項４８〜５１の何れかに記載のベクターを含む医薬組成物。
【請求項６３】
請求項２９〜３４及び６２の何れかに記載の医薬組成物を投与することを含むＨＧＦ媒介疾患又は状態を治療する方法。
【請求項６４】
前記医薬組成物が、血管形成、細胞増殖、細胞遊走、腫瘍細胞成育又は腫瘍細胞転移を抑制するポリペプチドを含有する請求項６３記載の方法。
【請求項６５】
前記疾患又は状態が癌、血管形成性の疾患又はマラリアからなる群より選択される請求項６３又は６４記載の方法。
【請求項６６】
前記血管形成性の疾患が眼科疾患、子宮内膜症、関節炎又は他の慢性炎症性疾患から選択される請求項６５記載の方法。
【請求項６７】
前記血管形成性の疾患が慢性関節リューマチ、変形性関節症、乾癬、オスラー・ウェバー症候群、子宮内膜症、スティル病、心筋の血管形成、末梢血管拡張症、血友病性関節炎、加齢関連の黄斑変性、未熟児網膜症、角膜移植に対する拒絶、全身エリテマトーデス、アテローム性動脈硬化症、血管新生緑内障、脈絡膜血管新生、水晶体後線維増症、腱麻痺、神経線維腫、血管腫、聴神経腫、神経線維腫、トラコーマ、化膿性肉芽腫及び糖尿病関連疾患、例えば増殖性糖尿病性網膜症及び血管疾患、炎症性肺疾患、クローン病及び乾癬から選択される請求項６６記載の方法。
【請求項６８】
前記癌が癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫及び白血病又はリンパ様悪性疾患、扁平上皮細胞癌、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、肺の扁平上皮癌、腹膜の癌、肝細胞癌、胃及び腹部の癌、胃腸の癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝癌、膀胱癌、ヘパトーム、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌又は腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌腫、肛門癌、陰茎癌並びに頭頚部癌からなる群より選択される請求項６６記載の方法。
【請求項６９】
ＨＧＦアイソフォームを含む結合体。
【請求項７０】
前記結合体がＨＧＦアイソフォーム又はそのドメイン又はその機能的部分、及び異なるＨＧＦアイソフォーム由来か、又は別の細胞表面受容体（ＣＳＲ）アイソフォームに由来する第２の一部分を含み；そして、
該部分が直接又はリンカーを介して連結している、請求項６９記載の結合体。
【請求項７１】
細胞表面受容体アイソフォーム由来の前記第２の部分が、該細胞表面受容体アイソフォームの細胞外ドメインの全て又は部分である請求項７０記載の結合体。
【請求項７２】
前記細胞表面受容体アイソフォームが受容体チロシンキナーゼである請求項７０又は７１記載の結合体。
【請求項７３】
前記第２の部分がヘルスタチンポリペプチドの全て又は部分である請求項７０〜７２の何れかに記載の結合体。
【請求項７４】
前記ヘルスタチンポリペプチドが配列番号１８６〜２００の何れか１つに記載のアミノ酸の配列を含む請求項７３記載の結合体。
【請求項７５】
あるＨＧＦアイソフォームの全て又は少なくとも１つのドメイン、及び、異なるＨＧＦアイソフォーム又は他の細胞表面受容体アイソフォームの全て又は少なくとも１つのドメインを含むキメラポリペプチド。
【請求項７６】
前記細胞表面受容体アイソフォームがイントロン融合蛋白である請求項７５記載のポリペプチド。
【請求項７７】
あるＨＧＦアイソフォームの全て又は少なくとも１つのドメイン、及び、細胞表面受容体アイソフォームのイントロンコード部分を含む請求項７６記載のポリペプチド。
【請求項７８】
下記成分：
ＨＧＦアイソフォーム１つ以上；
他の細胞表面受容体アイソフォーム１つ以上；及び／又は、
治療薬；
を含む、組み合わせ。
【請求項７９】
前記アイソフォーム及び／又は薬品が別個の組成物中、又は、単一の組成物中にある請求項７８記載の組み合わせ。
【請求項８０】
前記細胞表面受容体アイソフォームがＶＥＧＦＲ、ＦＧＦＲ、ＤＤＲ、ＴＮＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＭＥＴ、ＴＩＥ、ＲＡＧＥ、ＥＰＨ又はＨＥＲのアイソフォームである請求項７８又は７９記載の組み合わせ。
【請求項８１】
前記細胞表面受容体アイソフォームがＭＥＴアイソフォームである請求項８０記載の組み合わせ。
【請求項８２】
前記アイソフォームがイントロン融合蛋白である請求項７８〜８１の何れかに記載の組み合わせ。
【請求項８３】
前記ＭＥＴアイソフォームが配列番号８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５、１０７、１０９、１１１、１１３及び１１４の何れか１つから選択されるアミノ酸の配列を含む請求項８１又は８２に記載の組み合わせ。
【請求項８４】
請求項７８〜８３の何れかに記載の組み合わせの成分を投与することを含み、各成分は別個、同時、間歇的に、単一の組成物中、又は、その組み合わせにおいて投与される、ＨＧＦ媒介疾患の治療方法。
【請求項８５】
請求項２９〜３４及び６２の何れかに記載の組成物を投与することを含む腫瘍の侵襲又は腫瘍の転移を抑制する方法。
【請求項８６】
請求項２９〜３４及び６２の何れかに記載の組成物を投与することを含む血管形成を抑制する方法。
【請求項８７】
蛋白に直接又はリンカーを介して連結されたＣＤ４５ポリペプチドのフラグメントを含み、ここで該ＣＤ４５のフラグメントは炭水化物又はグリコシル化部位を付加するために選択される、融合蛋白又は結合体。
【請求項８８】
前記蛋白が治療用蛋白である請求項８７記載の融合蛋白。
【請求項８９】
前記融合蛋白が細胞表面受容体（ＣＳＲ）又はリガンドのアイソフォームであるか、又は、サイトカイン又はＣＳＲ又はリガンド又は成長因子又はホルモン又は末端に追加のアミノ酸を含む形態である請求項８７又は８８に記載の融合蛋白。
【請求項９０】
前記ＣＤ４５ポリペプチドがグリコシル化部位又は炭水化物の十分な数を含み、これにより、該蛋白の血清中半減期が１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上増大する請求項８７〜８９の何れかに記載の融合蛋白。
【請求項９１】
前記連結が場合により化学的リンカーを包含する化学的連結である請求項８７〜９０の何れかに記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９２】
前記リンカーがヘテロ２官能性リンカーから製造されるか、及び／又は光切断可能なリンカーである請求項９１記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９３】
場合によりポリペプチド又はペプチド又はアミノ酸のリンカーを包含する融合蛋白である請求項８７〜９０の何れかに記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９４】
前記リンカーが１〜３０、１〜１０、２〜１０又は２〜１５アミノ酸残基を含有する請求項９３記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９５】
前記ＣＤ４５ポリペプチド又はそのフラグメントが配列番号２７２、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８１、２８３、２８５、２８７、２８９、２９１、２９３及び２９５の何れかに記載のアミノ酸の配列及びそのフラグメント及びその変異体を含む請求項８７〜９４の何れかに記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９６】
前記蛋白がリガンド又はＣＳＲアイソフォーム又は追加のアミノ酸を含有する形態である請求項８７〜９５の何れかに記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９７】
前記蛋白が
【化１】
の何れかに記載のアミノ酸の配列及びその対立遺伝子変異体を含む請求項９６記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９８】
前記蛋白がＨＧＦ又はそのアイソフォームである請求項９７記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９９】
請求項７８記載の組み合わせ；及び、場合により、
該組み合わせの使用のための説明書及びその使用のための説明書の１つ以上；
を含む、キット。
【請求項１００】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための医薬の製剤のための請求項３５〜４６の何れかに記載の核酸分子の使用。
【請求項１０１】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための請求項３５〜４６の何れかに記載の核酸分子の使用。
【請求項１０２】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための医薬の製剤のための請求項２９〜３４の何れかに記載の医薬組成物の使用。
【請求項１０３】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための請求項２９〜３４の何れかに記載の医薬組成物の使用。
【請求項１０４】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための医薬の製剤のための請求項７８〜８３の何れかに記載の組み合わせの使用。
【請求項１０５】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための請求項７８〜８３の何れかに記載の組み合わせの使用。
【請求項１０６】
前記ＨＧＦ媒介疾患が、癌ならびに望ましくない細胞増殖の関与する他の疾患、ならびに望ましくない血管形成性および炎症性の反応又は応答の関与する疾患である請求項１００〜１０５の何れかに記載の使用。
【請求項１】
ＨＧＦリガンドのＫ４ドメインの全て又は一部分を含む単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォームであって、該ＨＧＦポリペプチドがイントロン融合蛋白である、アイソフォーム。
【請求項２】
前記ＨＧＦポリペプチドが同種のＨＧＦ遺伝子のイントロン１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６及び１７から選択されるイントロンの全て又は一部分を包含するヌクレオチドの配列によりコードされる請求項１記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項３】
前記同種のＨＧＦ遺伝子の配列が配列番号１に示されるか；又はその対立遺伝子又は種変異体である請求項１又は請求項２記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項４】
前記ＨＧＦポリペプチドが、配列番号１の相当する部分によりコードされるアミノ酸の配列とその完全長にわたって少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する請求項３記載の単離されたＨＧＦポリペプチド。
【請求項５】
前記同種のＨＧＦポリペプチドが、配列番号１によりコードされるアミノ酸の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する請求項３記載の単離されたＨＧＦポリペプチド。
【請求項６】
Ｎ末端ドメインの全て又は部分、Ｋ１ドメインの全て又は部分、Ｋ２ドメインの全て又は部分又はＫ３ドメインの全て又は部分、あるいはその組合せを更に含有する請求項１〜５の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項７】
前記イントロンがイントロン１１の全て又は一部分である請求項２〜６の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項８】
前記ポリペプチドがイントロン１１によりコードされるアミノ酸少なくとも１つに作動可能に連結している請求項１〜７の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項９】
前記ポリペプチドがイントロン１１によりコードされるアミノ酸３つを含む請求項８記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１０】
前記ＨＧＦポリペプチドが配列番号１０、１２、１８又は２０の何れかに記載のアミノ酸の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する請求項９記載の単離されたＨＧＦポリペプチド。
【請求項１１】
配列番号１０、１２、１８又は２０の何れかに記載のアミノ酸の配列を含むか、又はその対立遺伝子変異体である請求項９又は１０記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１２】
前記対立遺伝子変異体が配列番号１６に記載の対立遺伝子変異のアミノ酸１つ以上を含む請求項１１記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１３】
前記ポリペプチドが配列番号１０、１２、１８又は２０の何れかに記載のアミノ酸と同数のアミノ酸を含有する請求項９〜１２の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１３】
Ｓｅｐドメインの全てまたは一部をさらに含む、請求項１〜６の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１４】
前記イントロンがイントロン１３の全て又は部分である請求項１３記載の単離されたＨＧＦポリペプチド。
【請求項１５】
前記ＨＧＦポリペプチドが配列番号１４に記載のアミノ酸の配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する請求項１４記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１６】
配列番号１４に記載のアミノ酸の配列を含むか、又はその対立遺伝子又は種変異体である請求項１４又は１５記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１７】
前記変異体が配列番号１６に記載の対立遺伝子変異のアミノ酸１つ以上を含む請求項１６記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１８】
前記ポリペプチドが配列番号１４に記載するアミノ酸と同数のアミノ酸を含有する請求項１５〜１７の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項１９】
前記ポリペプチドが同種のＨＧＦポリペプチドの拮抗剤である請求項１〜１８の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２０】
前記ポリペプチドがＭＥＴ受容体に結合する請求項１９記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２１】
前記ポリペプチドが有糸分裂誘発、形態形成及び遊走誘発の１つ以上から選択されるＭＥＴ媒介活性を抑制する請求項２０記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２２】
前記ポリペプチドが血管形成を抑制する請求項１〜１８の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２３】
前記ポリペプチドがグリコサミノグリカンに結合する請求項２２記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２４】
前記グリコサミノグリカンがヘパリンスルフェートである請求項２３記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２５】
前記ポリペプチドが血管形成分子に結合する請求項２２記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２６】
前記血管形成分子がＡＴＰシンターゼ、アンジオモチン、αｖβ３インテグリン、アネキシンＩＩ、ＭＥＴ、ＶＥＧＦＲ及びＦＧＦＲから選択される請求項２５記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２７】
前記ポリペプチドが同種のＨＧＦ、ＦＧＦ−２又はＶＥＧＦにより誘導される血管形成を抑制する請求項２２〜２６の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２８】
前記ポリペプチドが拮抗性であり、そして血管形成を抑制する請求項１〜２７の何れかに記載の単離されたＨＧＦポリペプチドアイソフォーム。
【請求項２９】
請求項１〜２８の何れかに記載のＨＧＦポリペプチドアイソフォームを含む医薬組成物。
【請求項３０】
同種のＨＧＦポリペプチドに拮抗するために有効なポリペプチドの量を含む請求項２９記載の組成物。
【請求項３１】
同種のＨＧＦと拮抗することが、有糸分裂誘発、遊走誘発及び形態形成の何れかの１つ以上から選択されるＭＥＴ媒介活性１つ以上を抑制する請求項３０記載の組成物。
【請求項３２】
血管形成を抑制するために有効な前記ポリペプチドの量を含む請求項２９記載の組成物。
【請求項３３】
前記ポリペプチドが同種のＨＧＦ、ＦＧＦ−２又はＶＥＧＦにより誘導される血管形成を抑制する請求項３２記載の組成物。
【請求項３４】
抗癌剤及び／又は抗血管形成剤を更に含む請求項２９〜３３の何れかに記載の組成物。
【請求項３５】
請求項１〜２８の何れかのＨＧＦポリペプチドをコードする核酸分子。
【請求項３６】
同種のＨＧＦ遺伝子のイントロン１つの少なくともすべて又は部分及びエクソンを含むがイントロン５は含有しない核酸分子。
【請求項３７】
請求項３６記載の核酸分子であって、下記特徴：
前記イントロンが終止コドンを含有し；
前記核酸分子がエクソンイントロン接合部にわたるオープンリーディングフレームをコードし；そして、
該オープンリーディングフレームが該イントロン内の終止コドンにおいて終了する、
核酸分子。
【請求項３８】
前記イントロンが、コードされたポリペプチドのアミノ酸１つ以上をコードする請求項３７記載の核酸分子。
【請求項３９】
前記イントロンがイントロン１１の全て又は一部分である請求項３８記載の核酸分子。
【請求項４０】
配列番号９、１１、１７及び１９の何れか１つに記載のヌクレオチドの配列又はその対立遺伝子又は種変異体を含む請求項３９記載の核酸分子。
【請求項４１】
前記対立遺伝子変異体が配列番号１５に記載の対立遺伝子変異の何れか１つである請求項４０記載の核酸分子。
【請求項４２】
前記終止コドンが前記イントロン中の第１のコドンである請求項３７記載の核酸分子。
【請求項４３】
前記イントロンがイントロン１３の全て又は一部分である請求項４２記載の核酸分子。
【請求項４４】
配列番号１３に記載のヌクレオチドの配列又はその対立遺伝子変異体を含む請求項４３記載の核酸分子。
【請求項４５】
前記対立遺伝子変異体が配列番号１５に記載の対立遺伝子変異の何れか１つである請求項４４記載の核酸分子。
【請求項４６】
核酸分子であって、該核酸分子が以下：
ａ）配列番号９、１１、１３、１７、１９の何れか１つに記載のヌクレオチドの配列およびその対立遺伝子変異体又は種を含む核酸分子；
ｂ）請求項１記載のポリペプチドをコードし、そして、配列番号９、１１、１３、１７又は１９の何れかと少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する核酸分子；
ｃ）配列番号９、１１、１３、１７又は１９の何れかに記載のヌクレオチドの配列を含む核酸分子に対して、自身の完全長の少なくとも７０％にわたって中又は高ストリンジェンシーの条件下にハイブリダイズする核酸であって、ここでコードされるポリペプチドはＫ４ドメインを含有し、そして、イントロン由来のコドン少なくとも１つを含有する、核酸；
ｄ）上記ａ）、ｂ）又はｃ）の縮重コドンを含む核酸分子；及び、
ｅ）ＨＧＦ遺伝子のスプライシング変異体である核酸分子であって、該核酸分子がイントロン５以外のイントロンの全て又は一部分を包含する、核酸分子；
から選択される、核酸分子。
【請求項４７】
請求項３５〜４６の何れか１項に記載の核酸分子によりコードされるポリペプチド。
【請求項４８】
請求項３５〜４６の何れか１項に記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項４９】
哺乳類発現ベクターである請求項４８記載のベクター。
【請求項５０】
アデノウィルスベクター、アデノ関連ウィルスベクター、ＥＢＶ、ＳＶ４０、サイトメガロウィルスベクター、ワクシニアウィルスベクター、ヘルペスウィルスベクター、レトロウィルスベクター、レンチウィルスベクター又は人工染色体から選択される請求項４８記載のベクター。
【請求項５１】
エピソーム性であるか、又は、自身が導入される細胞の染色体内に組み込まれる請求項５０記載のベクター。
【請求項５２】
請求項４８〜５１の何れかに記載のベクターを含む細胞。
【請求項５３】
請求項３５〜４６の何れかに記載の核酸分子を対象に投与することを含むＨＧＦ媒介疾患の治療方法。
【請求項５４】
前記核酸分子が投与のためのベクターに導入される請求項５３記載の治療方法。
【請求項５５】
前記ベクターが発現ベクターである請求項５４記載の治療方法。
【請求項５６】
前記ベクターがエピソーム性である請求項５５記載の治療方法。
【請求項５７】
前記発現ベクターがアデノウィルスベクター、アデノ関連ウィルスベクター、ＥＢＶ、ＳＶ４０、サイトメガロウィルスベクター、ワクシニアウィルスベクター、ヘルペスウィルスベクター、レトロウィルスベクター、レンチウィルスベクター又は人工染色体から選択される請求項５４〜５６記載の治療方法。
【請求項５８】
前記核酸がインビボ又はエクスビボで投与される請求項５３〜５７の何れかに記載の治療方法。
【請求項５９】
エクスビボの治療がインビトロで細胞内に前記核酸を投与すること、及びその後の前記対象内への該細胞の投与を含む、請求項５８記載の治療方法。
【請求項６０】
前記細胞が適当なドナーに由来するか、又は、治療すべき対象に由来する請求項５９記載の治療方法。
【請求項６１】
前記対象がヒトである請求項５３〜６０に記載の治療方法。
【請求項６２】
請求項３５〜４６の何れかに記載の核酸分子、又は、請求項４８〜５１の何れかに記載のベクターを含む医薬組成物。
【請求項６３】
請求項２９〜３４及び６２の何れかに記載の医薬組成物を投与することを含むＨＧＦ媒介疾患又は状態を治療する方法。
【請求項６４】
前記医薬組成物が、血管形成、細胞増殖、細胞遊走、腫瘍細胞成育又は腫瘍細胞転移を抑制するポリペプチドを含有する請求項６３記載の方法。
【請求項６５】
前記疾患又は状態が癌、血管形成性の疾患又はマラリアからなる群より選択される請求項６３又は６４記載の方法。
【請求項６６】
前記血管形成性の疾患が眼科疾患、子宮内膜症、関節炎又は他の慢性炎症性疾患から選択される請求項６５記載の方法。
【請求項６７】
前記血管形成性の疾患が慢性関節リューマチ、変形性関節症、乾癬、オスラー・ウェバー症候群、子宮内膜症、スティル病、心筋の血管形成、末梢血管拡張症、血友病性関節炎、加齢関連の黄斑変性、未熟児網膜症、角膜移植に対する拒絶、全身エリテマトーデス、アテローム性動脈硬化症、血管新生緑内障、脈絡膜血管新生、水晶体後線維増症、腱麻痺、神経線維腫、血管腫、聴神経腫、神経線維腫、トラコーマ、化膿性肉芽腫及び糖尿病関連疾患、例えば増殖性糖尿病性網膜症及び血管疾患、炎症性肺疾患、クローン病及び乾癬から選択される請求項６６記載の方法。
【請求項６８】
前記癌が癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫及び白血病又はリンパ様悪性疾患、扁平上皮細胞癌、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、肺の扁平上皮癌、腹膜の癌、肝細胞癌、胃及び腹部の癌、胃腸の癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝癌、膀胱癌、ヘパトーム、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜又は子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌又は腎癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌腫、肛門癌、陰茎癌並びに頭頚部癌からなる群より選択される請求項６６記載の方法。
【請求項６９】
ＨＧＦアイソフォームを含む結合体。
【請求項７０】
前記結合体がＨＧＦアイソフォーム又はそのドメイン又はその機能的部分、及び異なるＨＧＦアイソフォーム由来か、又は別の細胞表面受容体（ＣＳＲ）アイソフォームに由来する第２の一部分を含み；そして、
該部分が直接又はリンカーを介して連結している、請求項６９記載の結合体。
【請求項７１】
細胞表面受容体アイソフォーム由来の前記第２の部分が、該細胞表面受容体アイソフォームの細胞外ドメインの全て又は部分である請求項７０記載の結合体。
【請求項７２】
前記細胞表面受容体アイソフォームが受容体チロシンキナーゼである請求項７０又は７１記載の結合体。
【請求項７３】
前記第２の部分がヘルスタチンポリペプチドの全て又は部分である請求項７０〜７２の何れかに記載の結合体。
【請求項７４】
前記ヘルスタチンポリペプチドが配列番号１８６〜２００の何れか１つに記載のアミノ酸の配列を含む請求項７３記載の結合体。
【請求項７５】
あるＨＧＦアイソフォームの全て又は少なくとも１つのドメイン、及び、異なるＨＧＦアイソフォーム又は他の細胞表面受容体アイソフォームの全て又は少なくとも１つのドメインを含むキメラポリペプチド。
【請求項７６】
前記細胞表面受容体アイソフォームがイントロン融合蛋白である請求項７５記載のポリペプチド。
【請求項７７】
あるＨＧＦアイソフォームの全て又は少なくとも１つのドメイン、及び、細胞表面受容体アイソフォームのイントロンコード部分を含む請求項７６記載のポリペプチド。
【請求項７８】
下記成分：
ＨＧＦアイソフォーム１つ以上；
他の細胞表面受容体アイソフォーム１つ以上；及び／又は、
治療薬；
を含む、組み合わせ。
【請求項７９】
前記アイソフォーム及び／又は薬品が別個の組成物中、又は、単一の組成物中にある請求項７８記載の組み合わせ。
【請求項８０】
前記細胞表面受容体アイソフォームがＶＥＧＦＲ、ＦＧＦＲ、ＤＤＲ、ＴＮＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＭＥＴ、ＴＩＥ、ＲＡＧＥ、ＥＰＨ又はＨＥＲのアイソフォームである請求項７８又は７９記載の組み合わせ。
【請求項８１】
前記細胞表面受容体アイソフォームがＭＥＴアイソフォームである請求項８０記載の組み合わせ。
【請求項８２】
前記アイソフォームがイントロン融合蛋白である請求項７８〜８１の何れかに記載の組み合わせ。
【請求項８３】
前記ＭＥＴアイソフォームが配列番号８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５、１０７、１０９、１１１、１１３及び１１４の何れか１つから選択されるアミノ酸の配列を含む請求項８１又は８２に記載の組み合わせ。
【請求項８４】
請求項７８〜８３の何れかに記載の組み合わせの成分を投与することを含み、各成分は別個、同時、間歇的に、単一の組成物中、又は、その組み合わせにおいて投与される、ＨＧＦ媒介疾患の治療方法。
【請求項８５】
請求項２９〜３４及び６２の何れかに記載の組成物を投与することを含む腫瘍の侵襲又は腫瘍の転移を抑制する方法。
【請求項８６】
請求項２９〜３４及び６２の何れかに記載の組成物を投与することを含む血管形成を抑制する方法。
【請求項８７】
蛋白に直接又はリンカーを介して連結されたＣＤ４５ポリペプチドのフラグメントを含み、ここで該ＣＤ４５のフラグメントは炭水化物又はグリコシル化部位を付加するために選択される、融合蛋白又は結合体。
【請求項８８】
前記蛋白が治療用蛋白である請求項８７記載の融合蛋白。
【請求項８９】
前記融合蛋白が細胞表面受容体（ＣＳＲ）又はリガンドのアイソフォームであるか、又は、サイトカイン又はＣＳＲ又はリガンド又は成長因子又はホルモン又は末端に追加のアミノ酸を含む形態である請求項８７又は８８に記載の融合蛋白。
【請求項９０】
前記ＣＤ４５ポリペプチドがグリコシル化部位又は炭水化物の十分な数を含み、これにより、該蛋白の血清中半減期が１％、５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上増大する請求項８７〜８９の何れかに記載の融合蛋白。
【請求項９１】
前記連結が場合により化学的リンカーを包含する化学的連結である請求項８７〜９０の何れかに記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９２】
前記リンカーがヘテロ２官能性リンカーから製造されるか、及び／又は光切断可能なリンカーである請求項９１記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９３】
場合によりポリペプチド又はペプチド又はアミノ酸のリンカーを包含する融合蛋白である請求項８７〜９０の何れかに記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９４】
前記リンカーが１〜３０、１〜１０、２〜１０又は２〜１５アミノ酸残基を含有する請求項９３記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９５】
前記ＣＤ４５ポリペプチド又はそのフラグメントが配列番号２７２、２７４、２７５、２７６、２７７、２７８、２７９、２８１、２８３、２８５、２８７、２８９、２９１、２９３及び２９５の何れかに記載のアミノ酸の配列及びそのフラグメント及びその変異体を含む請求項８７〜９４の何れかに記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９６】
前記蛋白がリガンド又はＣＳＲアイソフォーム又は追加のアミノ酸を含有する形態である請求項８７〜９５の何れかに記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９７】
前記蛋白が
【化１】
の何れかに記載のアミノ酸の配列及びその対立遺伝子変異体を含む請求項９６記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９８】
前記蛋白がＨＧＦ又はそのアイソフォームである請求項９７記載の融合蛋白又は結合体。
【請求項９９】
請求項７８記載の組み合わせ；及び、場合により、
該組み合わせの使用のための説明書及びその使用のための説明書の１つ以上；
を含む、キット。
【請求項１００】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための医薬の製剤のための請求項３５〜４６の何れかに記載の核酸分子の使用。
【請求項１０１】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための請求項３５〜４６の何れかに記載の核酸分子の使用。
【請求項１０２】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための医薬の製剤のための請求項２９〜３４の何れかに記載の医薬組成物の使用。
【請求項１０３】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための請求項２９〜３４の何れかに記載の医薬組成物の使用。
【請求項１０４】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための医薬の製剤のための請求項７８〜８３の何れかに記載の組み合わせの使用。
【請求項１０５】
ＨＧＦ媒介疾患に関して対象を治療するための請求項７８〜８３の何れかに記載の組み合わせの使用。
【請求項１０６】
前記ＨＧＦ媒介疾患が、癌ならびに望ましくない細胞増殖の関与する他の疾患、ならびに望ましくない血管形成性および炎症性の反応又は応答の関与する疾患である請求項１００〜１０５の何れかに記載の使用。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公表番号】特表２００９−５１５５２０（Ｐ２００９−５１５５２０Ａ）
【公表日】平成２１年４月１６日（２００９．４．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５４００５９（Ｐ２００８−５４００５９）
【出願日】平成１８年１０月３１日（２００６．１０．３１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４２６０７
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０５８７７６
【国際公開日】平成１９年５月２４日（２００７．５．２４）
【出願人】（５０８１３９５９４）レセプター バイオロジックス， インコーポレイテッド (3)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年４月１６日（２００９．４．１６）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１０月３１日（２００６．１０．３１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４２６０７
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０５８７７６
【国際公開日】平成１９年５月２４日（２００７．５．２４）
【出願人】（５０８１３９５９４）レセプター バイオロジックス， インコーポレイテッド (3)
【Ｆターム（参考）】
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